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Sample records for durissus terrificus isolamento

  1. Isolation and characterization of delta toxin from the venom of Crotalus durissus terrificus; Isolamento e caracterizacao da delta toxina do veneno de Crotalus durissus terrificus

    Energy Technology Data Exchange (ETDEWEB)

    Campos, Lucelia de Almeida

    2006-07-01

    The Crotalus durissus terrificus venom has been so far described as being of low complexity, with four major components described: convulxin, gyroxin, crotoxin and crotamine. In recent studies, other components of this venom were characterized as, for example, an analgesic factor. In 1980, Vital Brazil predicted the existence of a toxin which could be involved in platelet aggregation, and named it delta toxin. However, this toxin has never been isolated or characterized. The aim of the present work was to purify and characterize this toxin. After FPLC size exclusion chromatography followed by reverse phase HPLC, an homogeneous fraction was obtained, with a molecular weight of 14,074.92 Da. When analyzed by SOS-PAGE, this toxin presented an anomalous behavior, with a molecular weight of 14 kDa, while in 2D gels, spots around 40 kDa and with an isoelectrical point between 4 and 5 were observed suggesting isoforms with glicosilation microheterogeneity. After trypsin digestion, the fragments were submitted to the swissprot databank showing high homology (43% coverage, 15 matching peptides) with trocarin, a prothrombin activator from Tropidechis carinatus. These data were further confirmed by aminoacid analysis. The toxin was tested for its ability to activate factor II and X using synthetic substrates. Our data indicate a direct activation of factor X. The same toxin also behaved as a potent direct platelet aggregation activator on washed platelets. Assays with specific inhibitors indicate that neither metalloproteinase, nor serinoproteinase or t lectin domains are involved in the aggregating activity, since EDTA, benzamidin and D-galactose did not inhibit the toxin. In the present work, we were able to identify, purify and characterize a new toxin from the brazilian rattlesnake. It behaved as predicted by Vital-Brazil and displayed direct factor X activating properties, also inducing platelet aggregation, even at low concentrations. Our data also indicate that it is

  2. Afibrinogenemia following snake bite (Crotalus durissus terrificus

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    C. F. S. Amaral

    1988-08-01

    Full Text Available This paper reports two cases of afibrinogenemia with normal platelet count following Crotalus durissus terrificus, snake bite Both patients presented high output acute renal failure and case two also had increased blood levels of CPK and LDH compatible with the diagnosis of rhabdomyolysis. Case one was given an unknown amount of antivenom and was treated with epsilonaminocaproic acid and a fresh whole blood transfusion and showed recovery of the coagulation disturbance 40 hours following these measures. Case two was given an adequate amount of crotalide antivenom and the coagulation tests performed 12 hours later showed a normal partial thromboplastin time and fibrinogen 86 mg/100ml. Case one presented no haemorrhagic disturbances. Case two presented persistent bleeding following venopuncture and after removal of impetigo crust in the legs. Acute renal failure was treated conservatively and both patients were discharged from the hospital with recovery of the renal function.

  3. Compartment syndrome after South American rattlesnake (Crotalus durissus terrificus) envenomation.

    Science.gov (United States)

    Bucaretchi, F; De Capitani, E M; Hyslop, S; Mello, S M; Fernandes, C B; Bergo, F; Nascimento, F B P

    2014-07-01

    In order to report the outcome of a patient who developed compartment syndrome after South American rattlesnake (Crotalus durissus terrificus) envenomation, confirmed by subfascial pressure measurement and magnetic resonance imaging (MRI). A 63-year-old male was admitted 1 h after being bitten on the right elbow by a "large" snake, which was not brought for identification. Physical and laboratory features upon admission revealed two fang marks, local tense swelling, paresthesia, intense local pain, hypertension, coagulopathy, and CK = 1530 U/L (RV bite revealed generalized myalgia, muscle weakness, palpebral ptosis, and severe rhabdomyolysis (CK = 126,160 U/L) compatible with envenoming by C. d. terrificus. The patient was then treated with crotalic antivenom (200 mL, intravenously), fluid replacement, and urine alkalinization. Twenty-four-hour post-bite MRI showed marked muscular edema in the anterior compartment of the right forearm, with a high subfascial pressure (40 mmHg) being detected 1 h later. ELISA of a blood sample obtained upon admission, before antivenom infusion, revealed a high serum concentration of C. d. terrificus venom. No fasciotomy was performed and the patient was discharged seven days later without sequelae. Snakebite by C. d. terrificus with subfascial venom injection may lead to increased intracompartmental pressure.

  4. Crotalus durissus terrificus venom as a source of antitumoral agents

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    MA Soares

    2010-01-01

    Full Text Available The basic knowledge on neoplasms is increasing quickly; however, few advances have been achieved in clinical therapy against tumors. For this reason, the development of alternative drugs is relevant in the attempt to improve prognosis and to increase patients' survival. Snake venoms are natural sources of bioactive substances with therapeutic potential. The objective of this work was to identify and characterize the antitumoral effect of Crotalus durissus terrificus venom (CV and its polypeptide, crotoxin, on benign and malignant tumors, respectively, pituitary adenoma and glioblastoma. The results demonstrated that CV possess a powerful antitumoral effect on benign (pituitary adenoma and malignant (glioblastoma multiforme tumors with IC50 values of 0.96 ± 0.11 µg/mL and 2.15 ± 0.2 µg/mL, respectively. This antitumoral effect is cell-cycle-specific and dependent on extracellular calcium, an important factor for crotoxin phospholipase A2 activity. The CV antitumoral effect can be ascribed, at least partially, to the polypeptide crotoxin that also induced brain tumor cell death. In spite of the known CV nephrotoxicity and neurotoxicity, acute treatment with its antitumoral dose established in vitro was not found to be toxic to the analyzed animals. These results indicate the biotechnological potential of CV as a source of pharmaceutical templates for cancer therapy.

  5. DSC analysis of irradiated proteins from Crotalus durissus terrificus

    Energy Technology Data Exchange (ETDEWEB)

    Oliveira, Karina Corleto de; Silva, Monica Nascimento da; Goncalves, Karina de Oliveira; Spencer, Patrick Jack; Nascimento, Nanci do [Instituto de Pesquisas Energeticas e Nucleares (IPEN/CNEN-SP), Sao Paulo, SP (Brazil)

    2011-07-01

    Full text: Snake bites are a serious public health problem, especially in subtropical countries. In Brazil, the serum, the only effective treatment in case of snake bites, is produced in horses which, despite the large size, have a reduced lifespan due to the high toxicity of the antigen. It is known that ionizing radiation effects - direct and indirect - can modify the molecular structure, affecting the biological properties of proteins. Ionizing radiation has been employed to attenuate the toxicity of snake venoms, aiming to generate an improved antigen with low toxicity. Two proteins, purified from Crotalus durissus terrificus (Cdt) venom were tested in this work: crotoxin and crotamine. Crotoxin, the main toxic compound of Cdt venom, is a heterodimeric protein composed of two subunits: crotapotin and phospholipase A2. Crotamine is a highly basic polypeptide (pI - 10.3), with myotoxic activity and molecular weight of 4882 Da. It is composed of 42 amino acids residues and reticulated by three disulfide bonds. This study aimed to investigate the effects of radiation on crotoxin and crotamine using Differential Scanning Calorimetry (DSC). After isolation of the toxins by chromatographic techniques, they were irradiated with 2.0 kGy from {sup 60}Co source. The thermodynamics analysis, carried out in a METTLER TOLEDO, DSC 822e calorimeter, showed that irradiation promoted changes of the calorimetric profile. These changes suggest that, although radiation induced structural modifications of the protein, denaturation was only partial, since transition states could still be detected, suggesting that some structural elements were still present after irradiation. Taken together, our data suggest that following irradiation, the molecules underwent conformational changes, and that the remaining structural elements displayed a lower enthalpy, clearly indicating that the previously described loss of toxicity of irradiated toxins can be mostly ascribed to structural changes

  6. Histopathological evaluation in experimental envenomation of dogs with Crotalus durissus terrificus venom

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    F. Sangiorgio

    2008-01-01

    Full Text Available The present work evaluated histopathological aspects in experimental envenomation of dogs with Crotalus durissus terrificus venom. Twenty-eight mixed breed adult dogs were divided into three groups of seven animals each: Group I - only venom; Group II - venom + 50ml antiophidic serum + fluid therapy; Group III - venom + 50ml antiophidic serum + fluid therapy + urine alkalization. Lyophilized venom of Crotalus durissus terrificus was reconstituted in saline solution and inoculated subcutaneously at the dose of 1mg/kg body weight. Three animals of each group were subjected to euthanasia, and their muscular tissue, brain, spleen, kidneys, heart, lungs, stomach, small and large intestines, and popliteal lymph node fragments were collected for histopathological evaluation. There was myonecrosis in the inoculated limb, renal tubular degeneration, lymphoid hyperplasia of spleen, and unspecific reactive hepatitis. These results show the antigenicity and action of the venom on the immune system.

  7. Purification and radiodination of gyroxin, toxin like trombin, of crotalus durissus terrificus venom; Purificacao e radioiodacao da giroxina (toxina semelhante a trombina) do veneno de crotalus durissus terrificus

    Energy Technology Data Exchange (ETDEWEB)

    Camillo, Maria A.P.; Paes, Paulo C.A.; Ribela, Maria T.C.P.; Rogero, Jose R. [Instituto de Pesquisas Energeticas e Nucleares (IPEN), Sao Paulo, SP (Brazil)

    1997-12-01

    Snake`s venoms have attracted special interest in research because they are rich in bioactive compounds, which are scientific tools to study many physiological processes and are also important source of new therapeutic agents. Some thrombin-like enzymes are used as a reagent in laboratorial assays as well as in medical drugs. However, a neurotoxic syndrome called gyroxin syndrome or barrel rotation seems to be related to those enzymes. Pharmacokinetics and biodistribution studies of these toxins can contribute to clarifly this mechanisms and consequently, it will help to elaborate safer clinical prescriptions giving more information about possible nocive effects. This paper describes the first step of these studies with the thrombin-like enzyme (or gyroxin) from Crotalus durissus terrificus`s venom. The purification and radioiodination methods as well as electrophoretic analysis and biological assay are presented. (author). 9 refs., 5 figs., 1 tab.

  8. Evaluation of contraction in isolated corpus cavernosum from Crotalus durissus terrificus

    OpenAIRE

    Renata Lopes Rodrigues

    2013-01-01

    Resumo: O fato da cópula em serpentes ser muito prolongada, chegando a mais de 20 horas, sem que os mecanismos farmacológicos estejam conhecidos, motivou o nosso grupo a estudar o hemipênis de Crotalus durissus terrificus (cascavel). Diferentemente do observado em corpo cavernoso de outros mamíferos, o relaxamento induzido pela estimulação elétrica foi mais duradouro, além de resistente a ação da neurotoxina tetrodotoxina (TTX) em hemipênis de Crotalus. Uma hipótese inicial aventada foi que e...

  9. Pulmonary mechanic and lung histology injury induced by Crotalus durissus terrificus snake venom.

    Science.gov (United States)

    Nonaka, Paula Naomi; Amorim, César Ferreira; Paneque Peres, Ana Claudia; E Silva, César Augusto Melo; Zamuner, Stella R; Ribeiro, Wellington; Cogo, José Carlos; Vieira, Rodolfo P; Dolhnikoff, Marisa; de Oliveira, Luis Vicente Franco

    2008-06-01

    In the present work we investigated the effects of Crotalus durissus terrificus venom (CdtV) on the pulmonary mechanic events [static and dynamic elastance, resistive (DeltaP1) and viscoelastic pressures (DeltaP2)] and histology after intramuscular injection of saline solution (control) or venom (0.6 microg/g). The static and dynamic elastance values were increased significantly after 3 h of venom inoculation, but were reduced at control values in the other periods studied. The DeltaP1 values that correspond to the resistive properties of lung tissue presented a significant increase after 6h of CdtV injection, reducing to basal levels 12h after the venom injection. In DeltaP2 analysis, correspondent to viscoelastic components, an increase occurred 12 h after the venom injection, returning to control values at 24 h. CdtV also caused an increase of leukocytes recruitment (3-24 h) to the airways wall as well as to the lung parenchyma. In conclusion, C. durissus terrificus rattlesnake venom leads to lung injury which is reverted, after 24 h of inoculation.

  10. The Evolutionary Implications of Hemipenial Morphology of Rattlesnake Crotalus durissus terrificus (Laurent, 1768 (Serpentes: Viperidae: Crotalinae.

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Marcovan Porto

    Full Text Available Most amniotes vertebrates have an intromittent organ to deliver semen. The reptile Sphenodon and most birds lost the ancestral penis and developed a cloaca-cloaca mating. Known as hemipenises, the copulatory organ of Squamata shows unique features between the amniotes intromittent organ. They are the only paired intromittent organs across amniotes and are fully inverted and encapsulated in the tail when not in use. The histology and ultrastructure of the hemipenes of Crotalus durissus rattlesnake is described as the evolutionary implications of the main features discussed. The organization of hemipenis of Crotalus durissus terrificus in two concentric corpora cavernosa is similar to other Squamata but differ markedly from the organization of the penis found in crocodilians, testudinata, birds and mammals. Based on the available data, the penis of the ancestral amniotes was made of connective tissue and the incorporation of smooth muscle in the framework of the sinusoids occurred independently in mammals and Crotalus durissus. The propulsor action of the muscle retractor penis basalis was confirmed and therefore the named should be changed to musculus hemipenis propulsor.The retractor penis magnus found in Squamata has no homology to the retractor penis of mammals, although both are responsible for the retraction of the copulatory organ.

  11. Kinetic characterization of gyroxin, a serine protease from Crotalus durissus terrificus venom.

    Science.gov (United States)

    Yonamine, Camila M; Kondo, Marcia Y; Juliano, Maria A; Icimoto, Marcelo Y; Baptista, Gandhi R; Yamane, Tetsuo; Oliveira, Vitor; Juliano, Luis; Lapa, Antônio J; Lima-Landman, Maria Teresa R; Hayashi, Mirian A F

    2012-12-01

    This work describes for the first time the characterization of the enzymatic features of gyroxin, a serine protease from Crotalus durissus terrificus venom, capable to induce barrel rotation syndrome in rodents. Measuring the hydrolysis of the substrate ZFR-MCA, the optimal pH for proteolytic cleavage of gyroxin was found to be at pH 8.4. Increases in the hydrolytic activity were observed at temperatures from 25 °C to 45 °C, and increases of NaCl concentration up to 1 M led to activity decreases. The preference of gyroxin for Arg residues at the substrate P1 position was also demonstrated. Taken together, this work describes the characterization of substrate specificity of gyroxin, as well as the effects of salt and pH on its enzymatic activity.

  12. Effects of the Crotalus durissus terrificus snake venom on hepatic metabolism and oxidative stress.

    Science.gov (United States)

    da Silva, Jonas Golart; da Silva Soley, Bruna; Gris, Vanessa; do Rocio Andrade Pires, Amanda; Caderia, Silvia Maria Suter Correia; Eler, Gabrielle Jackin; Hermoso, Aparecida Pinto Munhos; Bracht, Adelar; Dalsenter, Paulo Roberto; Acco, Alexandra

    2011-01-01

    Snake venoms present different action mechanisms because of their complex composition, represented mainly by toxins and enzymes. This work aimed to investigate the effects of the Crotalus durissus terrificus(Cdt) venom in the liver. Wistar rats were inoculated intraperitoneally with saline (control) or Cdt venom. After 3, 4, or 6 h, the following parameters were analyzed: (a) hepatic function, (b) oxidative stress parameters, and (c) the metabolism of alanine in the isolated perfused liver. Plasma activities of alanine aminotransferase and aspartate aminotransferase and hepatic glutathione S-transferase and catalase presented significant elevation in rats inoculated with 300 μg ⋅ kg(-1) Cdt venom. Liver lipoperoxidation was enormously increased by venom doses of 100, 200, and 300 μg ⋅kg(-1) , whereas glutathione S-transferase was not changed. Perfused livers from rats inoculated with 1500 μg ⋅kg(-1) venom showed increased production of lactate, pyruvate, and ammonia when alanine was the metabolic substrate. These results demonstrate that the Cdt venom can produce several changes in hepatocytes. The causes of the changes are possibly related to the disequilibrium in the redox homeostasis but also to specific needs of the poisoned organism, for example, an increased supply of lactate and pyruvate in response to an increased activity of the Cori cycle. Copyright © 2010 Wiley Periodicals, Inc.

  13. American rattlesnake (Crotalus durissus terrificus bite accidents in dogs in Argentina

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Koscinczuk P.

    2000-01-01

    Full Text Available The symptomatology and treatment of two dogs bitten by Crotalus durissus terrificus are described. Neurological signs were present few minutes after the accident with local anesthesia and ataxia of the affected limb and neurotoxic fascia. Alanine aminotransferase (ALT, aspartate aminotransferase (AST, creatinine kinase (CK, lactate dehydrogenase (LDH and calcium were evaluated in an attempt to investigate muscle damage. Renal failure was not observed but some alterations were detected in urine. Urine density was low and the urinary sediment contained granular clumps and small round cells. Muscle samples were obtained from both legs for histopathological study, showing edema and isolated necrotic fibers. Both dogs received treatment within four hours after the accident by intravenous route. The antivenom was administered diluted in 250ml of Ringer solution in a dose enough to inactivate more than 8mg of venom. Dexamethasone was applied previously to the antivenom. Clinical evolution was good and both patients were in good health condition on the second day after the accident.

  14. Pro- and Anti-Inflammatory Cytokines Release in Mice Injected with Crotalus durissus terrificus Venom

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    A. Hernández Cruz

    2008-01-01

    Full Text Available The effects of Crotalus durissus terrificus venom (Cdt were analyzed with respect to the susceptibility and the inflammatory mediators in an experimental model of severe envenomation. BALB/c female mice injected intraperitoneally presented sensibility to Cdt, with changes in specific signs, blood biochemical and inflammatory mediators. The venom induced reduction of glucose and urea levels and an increment of creatinine levels in serum from mice. Significant differences were observed in the time-course of mediator levels in sera from mice injected with Cdt. The maximum levels of IL-6, NO, IL-5, TNF, IL-4 and IL-10 were observed 15 min, 30 min, 1, 2 and 4 hours post-injection, respectively. No difference was observed for levels of IFN-γ. Taken together, these data indicate that the envenomation by Cdt is regulated both pro- and anti-inflammatory cytokine responses at time-dependent manner. In serum from mice injected with Cdt at the two first hours revealed of pro-inflammatory dominance. However, with an increment of time an increase of anti-inflammatory cytokines was observed and the balance toward to anti-inflammatory dominance. In conclusion, the observation that Cdt affects the production of pro- and anti-inflammatory cytokines provides further evidence for the role played by Cdt in modulating pro/anti-inflammatory cytokine balance.

  15. Thermolability of 28S ribosomal ribonucleic acid from the liver of Crotalus durissus terrificus (Ophidia, Reptilia).

    Science.gov (United States)

    Giorgini, J F; De Lucca, F L

    1973-09-01

    Instability of 28S rRNA of Crotalus durissus terrificus liver was observed during hotphenol extraction: purified 28S rRNA is converted into an 18S RNA component by heat treatment. It was also found that ;6S' and ;8S' low-molecular-weight RNA species were released during the thermal conversion. This conversion and the release of the low-molecular-weight species were also induced by 8m-urea and 80% (v/v) dimethyl sulphoxide at 0 degrees C. Evidence is presented that this phenomenon is an irreversible process and results from the rupture of hydrogen bonds. The 18S RNA product was shown to be homogeneous by polyacrylamide-gel electrophoresis and by sucrose-density-gradient centrifugation. The base composition of the 18S RNA products obtained by heat, urea or dimethyl sulphoxide treatments was similar. The C+G content of the 18S RNA product was different from that of the native 18S rRNA, but similar to that of 28S rRNA.

  16. Occurrence of Cryptosporidium (Apicomplexa, Cryptosporidiidae in Crotalus durissus terrificus (Serpentes, Viperidae in Brazil

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Karasawa Andréa Satie Matsubara

    2002-01-01

    Full Text Available The objective of the present study was to investigate the prevalence of Cryptosporidium (Apicomplexa, Cryptosporidiidae in the snake Crotalus durissus terrificus (Serpentes, Viperidae. Fifty animals were evaluated for the presence of oocysts of Cryptosporidium sp. at the time of arrival and 30 and 60 days later. Intestinal washings with saline solution (1% body weight, fecal samples, and organ scrapings were collected during the study. Oocysts were concentrated by an ether-phosphate-buffered saline sedimentation technique and then separated by a density gradient centrifugation technique. Smears were made with the sediment and submitted to modified acid-fast and auramine-rhodamine staining. Cryptosporidium-positive smears were used as controls for the experimental findings. The overall prevalence of Cryptosporidium sp. oocysts was 14%. Among the positive snakes, oocysts were detected only in the intestinal washing in two specimens, only in the feces in four specimens, and in both materials at least once in one specimen. The positive snakes were predominantly from Santa Maria da Serra city State of São Paulo (57.1%. We also observed that all of the examinations that presented positive results were obtained at least 27 days after the capture of the animals.

  17. Biochemical and biological evaluation of gyroxin isolated from Crotalus durissus terrificus venom

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    LC Barros

    2011-01-01

    Full Text Available Gyroxin, a thrombin-like enzyme isolated from Crotalus durissus terrificus venom and capable of converting fibrinogen into fibrin, presents coagulant and neurotoxic activities. The aim of the present study was to evaluate such coagulant and toxic properties. Gyroxin was isolated using only two chromatographic steps - namely gel filtration (Sephadex G-75 and affinity (Benzamidine Sepharose 6B - resulting in a sample of high purity, as evaluated by RP-HPLC C2/C18 and electrophoretic analysis that showed a molecular mass of 30 kDa. Gyroxin hydrolyzed specific chromogenic substrates, which caused it to be classified as a serine proteinase and thrombin-like enzyme. It was stable from pH 5.5 to 8.5 and inhibited by Mn²+, Cu²+, PMSF and benzamidine. Human plasma coagulation was more efficient at pH 6.0. An in vivo toxicity test showed that only behavioral alterations occurred, with no barrel rotation. Gyroxin was not able to block neuromuscular contraction in vitro, which suggests that its action, at the studied concentrations, has no effect on the peripheral nervous system.

  18. Functional and structural analysis of two fibrinogen-activating enzymes isolated from the venoms of Crotalus durissus terrificus and Crotalus durissus collilineatus

    Institute of Scientific and Technical Information of China (English)

    Daniela G.L.de Oliveira; Mário T.Murakami; Adelia C.O.Cintra; Jo(a)o J.Franco; Suely V.Sampaio; Raghuvir K.Arni

    2009-01-01

    Fibrinogen-activating enzymes,widely distributed in Crotalidae and Viperidae venoms,are single-chain glycosylated serine proteases that display high macromolecular selectivity and are often referred to as thrombin-like enzymes(TLEs).TLEs serve as structural models to extend our understanding of the structure-function relationships of blood coagulation factors,have been clinically used for the treatment of thrombotic diseases,and are used as tools in clinical assays.The combination of gel filtration and ion-exchange chromatography proved to be successful in obtaining milligram quantities of pure samples of TLEs from the venoms of Crotalus durissus terrificus(white venom)and Crotalus durissus collilineatus(yellow venom).Functional characterization indicates that both enzymes preferentially degrade the Bβ chain of bovine fibrinogen and possess edema-inducing and coagulant activities.However,the TLE from C.d.collilineatus venom shows twofold higher coagulant activity with a minimum coagulant dose(MCD)of 0.6 μg/μl,whereas the enzyme isolated from C.d terrificus indicated an MCD of 1.5μg/μl.Molecular modeling of gyroxin and structural comparisons with other highly conserved snake venom serine proteases,underlines the key role played by the surface charge distribution and the double insertion in the 174-surface loop in macromolecular substrate recognition by TLEs.

  19. Seeing beyond the tip of the iceberg: A deep analysis of the venome of the Brazilian Rattlesnake, Crotalus durissus terrificus

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Rafael D. Melani

    2015-09-01

    Full Text Available The complete characterization of the snake venom protein components is a requirement for a systems-wide understanding of their biological context. In this work, we provide a deep proteomic characterization of Crotalus durissus terrificus venom using different bottom-up approaches. We identified more than five times more protein families than the sum of all identifications previously reported. For the first time in this sub-species, we report the identification of three new toxin families: CRISP, phospholipase-B, and SVVEGF. This work also describes proteins involved in regulation of toxin synthesis and processing that are present in venom.

  20. Intrahippocampal Infusion of Crotamine Isolated from Crotalus durissus terrificus Alters Plasma and Brain Biochemical Parameters

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Rithiele Gonçalves

    2014-11-01

    Full Text Available Crotamine is one of the main constituents of the venom of the South American rattlesnake Crotalus durissus terrificus. Here we sought to investigate the inflammatory and toxicological effects induced by the intrahippocampal administration of crotamine isolated from Crotalus whole venom. Adult rats received an intrahippocampal infusion of crotamine or vehicle and were euthanized 24 h or 21 days after infusion. Plasma and brain tissue were collected for biochemical analysis. Complete blood count, creatinine, urea, glutamic oxaloacetic transaminase (GOT, glutamic pyruvic transaminase (GPT, creatine-kinase (CK, creatine kinase-muscle B (CK-MB and oxidative parameters (assessed by DNA damage and micronucleus frequency in leukocytes, lipid peroxidation and protein carbonyls in plasma and brain were quantified. Unpaired and paired t-tests were used for comparisons between saline and crotamine groups, and within groups (24 h vs. 21 days, respectively. After 24 h crotamine infusion promoted an increase of urea, GOT, GPT, CK, and platelets values (p ≤ 0.01, while red blood cells, hematocrit and leukocytes values decreased (p ≤ 0.01. Additionally, 21 days after infusion crotamine group showed increased creatinine, leukocytes, TBARS (plasma and brain, carbonyl (plasma and brain and micronucleus compared to the saline-group (p ≤ 0.01. Our findings show that crotamine infusion alter hematological parameters and cardiac markers, as well as oxidative parameters, not only in the brain, but also in the blood, indicating a systemic pro-inflammatory and toxicological activity. A further scientific attempt in terms of preserving the beneficial activity over toxicity is required.

  1. Tetrodotoxin-insensitive electrical field stimulation-induced contractions on Crotalus durissus terrificus corpus cavernosum.

    Science.gov (United States)

    Campos, Rafael; Mónica, Fabíola Z; Rodrigues, Renata Lopes; Rojas-Moscoso, Julio Alejandro; Moreno, Ronilson Agnaldo; Cogo, José Carlos; de Oliveira, Marco Antonio; Antunes, Edson; De Nucci, Gilberto

    2017-01-01

    Reptiles are the first amniotes to develop an intromitent penis, however until now the mechanisms involved in the electrical field stimulation-induced contraction on corpora cavernosa isolated from Crotalus durissus terrificus were not investigated. Crotalus and rabbit corpora cavernosa were mounted in 10 mL organ baths for isometric tension recording. Electrical field stimulation (EFS)-induced contractions were performed in presence/absence of phentolamine (10 μM), guanethidine (30 μM), tetrodotoxin (1 μM and 1mM), A-803467 (10 μM), 3-iodo-L-Tyrosine (1 mM), salsolinol (3 μM) and a modified Krebs solution (equimolar substitution of NaCl by N-methyl-D-glucamine). Immuno-histochemistry for tyrosine hydroxylase was also performed. Electrical field stimulation (EFS; 8 Hz and 16 Hz) caused contractions in both Crotalus and rabbit corpora cavernosa. The contractions were abolished by previous incubation with either phentolamine or guanethidine. Tetrodotoxin (1 μM) also abolished the EFS-induced contractions of rabbit CC, but did not affect EFS-induced contractions of Crotalus CC. Addition of A-803467 (10 μM) did not change the EFS-induced contractions of Crotalus CC but abolished rabbit CC contractions. 3-iodo-L-Tyrosine and salsolinol had no effect on EFS-induced contractions of Crotalus CC and Rabbit CC. Replacement of NaCl by N- Methyl-D-glucamine (NMDG) abolished EFS-induced contractions of rabbit CC, but did not affect Crotalus CC. The presence of tyrosine hydroxylase was identified in endothelial cells only of Crotalus CC. Since the EFS-induced contractions of Crotalus CC is dependent on catecholamine release, insensitive to TTX, insensitive to A803467 and to NaCl replacement, it indicates that the source of cathecolamine is unlikely to be from adrenergic terminals. The finding that tyrosine hydroxylase is present in endothelial cells suggests that these cells can modulate Crotalus CC tone.

  2. Interaction study of water radiolysis products with Crotalus durissus terrificus miotoxin; Estudo das interacoes dos produtos de radiolise da agua com a miotoxina do veneno de Crotalus durissus terrificus

    Energy Technology Data Exchange (ETDEWEB)

    Silva, Murilo Casare da

    2008-07-01

    Ionizing radiation has been satisfactorily employed for venoms detoxification. In this report, the radiation was employed to verify the effects caused by the radiolysis products of water on the Crotamine, toxin purified from Crotalus durissus terrificus venom. These effects were analyzed using some substances called 'scavengers', those substances competes for specific reactive species hindering them to act on the toxins molecules. In order to study the possible structural damages caused on the toxins, circular dichroism, fluorescence, nuclear magnetic resonance, amino acids analysis and intravital microscopy were employed. Our results indicate that ionizing radiation caused structure alterations, mainly, in secondary and tertiary structure of crotamine. In the irradiated crotamine, was not possible to determine tridimensional structure. And the crotamine toxic effect was removed by ionizing radiation. (author)

  3. Clinical and hematological alterations in dogs during experimental envenomation with Crotalus durissus terrificus venom and treated with antiophidic serum

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    R. M. B. Nogueira

    2006-04-01

    Full Text Available The present work aimed to evaluate the clinical and hematological aspects during experimental envenomation by Crotalus durissus terrificus in dogs treated with different antiophidic serum doses. Sixteen dogs were divided into two groups of eight animals each. Group I received 1mg/kg venom subcutaneously and 30mg antiophidic serum intravenously; Group II received 1mg/kg venom subcutaneously and 60mg antiophidic serum intravenously. In the clinical evaluation, we observed ataxia, moderate sedation, dilated pupils, sialorrhea, flaccid paralysis of mandibular muscles, and discreet edema at the site of venom inoculation. Evaluating red and white blood cells, we observed a decrease of hemoglobins, globular volume and erythrocytes, and an increase of plasmatic proteins, leukocytes, neutrophils, monocytes and lymphocytes. Clotting time increased and there was blood incoagulability with return to normal clotting time six hours after antiophidic serum administration. Animals treated with six antiophidic serum flasks had a faster recovery than the animals that received three serum flasks.

  4. Transferência do Hepatozoon tupinambis, parasita do lagarto Tupinambis teguixin, para a serpente cascavel (Crotalus durissus terrificus, por intermédio do mosquito Culex fatigans

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Samuel B. Pessôa

    1974-01-01

    Full Text Available Os autores obtiveram a transferência do Hepatozoon tupinambis (Laveran e Salibeni, 1909 parasita do lagarto Teiidae, Tupinambis teguixin, L., para a serpente cascavel, Crotalus durissus terrificus (Laur., alimentando-a com mosquitos experimentalmente infectados. o parasita mantém os seus caracteres morfológicos no animal receptor, nos limites do tempo observado (cerca de 100 dias. O ofídio receptor apresentou cistos esquizogônicos do fígado.The authors achieved a transfer of the Hepatozoon tupinambis (Laveran and Salibeni, 1909, a parasite of the Sauria: Tupinambis teguixin, L., to a rattlesnake of the species Crotalus durissus terrificus, feeding the latter with experimentally infected mosquitoes. The parasite maintained its morphological characteristics in the recepting animal throughout the whole observation period (about 100 days. Schizogonic cysts were found in the liver of the rattlesnake.

  5. Comparison of wildlife and captivity rattlesnakes (Crotalus durissus terrificus microbiota Comparação da microbiota de cascavéis (Crotalus durissus terrificus de vida-livre e cativeiro

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Rui S. Ferreira Junior

    2009-12-01

    Full Text Available The study evaluated and compared the aerobic microbiota from the oral cavity, cloaca and venom of Crotalus durissus terrificus snakes, recently caught from the wild and kept under quarantine (WQ, individual captivity (IC and collective captivity (CC. Antimicrobial drug effectiveness on isolated agents also was assayed. From group I, II and III were isolated, respectively, 29 (63.04%, 38 (90.48% and 21 (42.86% microorganisms from the cloaca; 15 (32.61%, 3 (7.14% and 25 (51.02% microorganisms from the oral cavity; and, 2 (4.35%, 1 (2.38% and 3 (6.12% microorganisms from venom. The most frequent bacteria were Pseudomonas aeruginosa, Proteus vulgaris and Morganella morganii, with sensitivity to amikacin, gentamicin, norfloxacin, sulfazotrin and tobramycin. Snakes kept in semi-open captivity exhibited the fewest microorganisms in oral cavities, perhaps due to the environment in captivity, with different temperature gradients, running water, absence of daily handling, circulating air, possibility of moving around, daily cleaning, and sunlight access.Este estudo avaliou e comparou a microflora aeróbica da cavidade oral, cloaca e veneno de serpentes Crotalus durissus terrificus recém-capturadas da natureza e mantidas sob quarentena (WQ, mantidas em cativeiro coletivo (CC e em cativeiro individual (IC. A eficácia de drogas antimicrobianas de agentes isolados foi também avaliada. Foram isolados microorganismos dos grupos I, II e III respectivamente: 29 (63.04%, 38 (90.48% e 21 (42.86% da cloaca; 15 (32.61%, 3 (7.14% e 25 (51.02% da cavidade oral, e finalmente 2 (4.35%, 1 (2.38% e 3 (6.12% do veneno. As bactérias mais frequentes foram Pseudomonas aeruginosa, Proteus vulgaris e Morganella morganii, com sensibilidade para amikacina, gentamicina, norfloxacina, sulfazotrina e tobramicina. Serpentes mantidas no cativeiro semi-aberto mostraram menor número de agentes infecciosos em cavidade oral, talvez devido ao ambiente de cativeiro com diferentes

  6. Preliminary X-ray crystallographic studies of a tetrameric phospholipase A{sub 2} formed by two isoforms of crotoxin B from Crotalus durissus terrificus venom

    Energy Technology Data Exchange (ETDEWEB)

    Marchi-Salvador, D. P.; Corrêa, L. C.; Salvador, G. H. M.; Magro, A. J. [Departamento de Física e Biofísica, Instituto de Biociências, UNESP, CP 510, 18618-000 Botucatu-SP (Brazil); Oliveira, C. Z. [Departamento de Análises Clínicas, Toxicológicas e Bromatológicas, FCFRP, USP, Ribeirão Preto-SP (Brazil); Iulek, J. [Departamento de Química, UEPG, Ponta Grossa-PR (Brazil); Soares, A. M. [Departamento de Análises Clínicas, Toxicológicas e Bromatológicas, FCFRP, USP, Ribeirão Preto-SP (Brazil); Fontes, M. R. M., E-mail: fontes@ibb.unesp.br [Departamento de Física e Biofísica, Instituto de Biociências, UNESP, CP 510, 18618-000 Botucatu-SP (Brazil)

    2007-12-01

    Crotoxin B is a basic phospholipase A{sub 2} found in the venom of C. durissus terrificus and is one of the subunits that constitute crotoxin. Here, the crystallization, X-ray diffraction data collection and molecular-replacement solution of a novel tetrameric complex formed by two dimers of crotoxin B isoforms are presented. Crotoxin B is a basic phospholipase A{sub 2} found in the venom of Crotalus durissus terrificus and is one of the subunits that constitute crotoxin. This heterodimeric toxin, which is the main component of C. d. terrificus venom, is completed by an acidic, nontoxic and non-enzymatic component (crotoxin A) and is involved in important envenomation effects, such as neurological disorders, myotoxicity and renal failure. Although crotoxin was first crystallized in 1938, no crystal structure is currently available for crotoxin, crotoxin A or crotoxin B. In this work, the crystallization, X-ray diffraction data collection to 2.28 Å resolution and molecular-replacement solution of a novel tetrameric complex formed by two dimers of crotoxin B isoforms (CB1 and CB2) is presented.

  7. Single-step purification of crotapotin and crotactine from Crotalus durissus terrificus venom using preparative isoelectric focusing

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Aguiar A.S.

    1997-01-01

    Full Text Available We describe the isolation of crotoxin, a presynaptic B-neurotoxin, as well as its subunits B (crotactine and A (crotapotin from lyophilized Crotalus durissus terrificus venom by a single-step preparative isoelectric focusing procedure. From 98 mg of dried venom protein 20.1 mg of crotactine and 13.1 mg of crotapotin were recovered in the first step of focalization and 4.2 mg in a second run. These values correspond to 35.7% of the total venom protein applied. Crotactine separated in the 9.3-7.0 pH range (tubes 1-6 and crotapotin in the 1.8-2.8 pH range (tubes 15-19 and both were homogeneous by SDS-PAGE and N-terminal amino acid analysis. Crotactine, a 12-kDa protein, presented hemolytic and phospholipase A2 activity. Thus, using isoelectric focusing we simultaneously purified both toxins in high yields. This method can be used as an alternative for the purification and characterization of proteins from other snake venoms under conditions in which biological activity is retained

  8. Crotoxin, the major toxin from the rattlesnake Crotalus durissus terrificus, inhibits ³H-choline uptake in guinea pig ileum

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    L.S. Kattah

    2000-09-01

    Full Text Available We examined the effect of crotoxin, the neurotoxic complex from the venom of the South American rattlesnake Crotalus durissus terrificus, on the uptake of ³H-choline in minces of smooth muscle myenteric plexus from guinea pig ileum. In the concentration range used (0.03-1 µM and up to 10 min of treatment, crotoxin decreased ³H-choline uptake by 50-75% compared to control. This inhibition was time dependent and did not seem to be associated with the disruption of the neuronal membrane, because at least for the first 20 min of tissue exposure to the toxin (up to 1 µM the levels of lactate dehydrogenase (LDH released into the supernatant were similar to those of controls. Higher concentrations of crotoxin or more extensive incubation times with this toxin resulted in elevation of LDH activity detected in the assay supernatant. The inhibitory effect of crotoxin on ³H-choline uptake seems to be associated with its phospholipase activity since the equimolar substitution of Sr2+ for Ca2+ in the incubation medium or the modification of the toxin with p-bromophenacyl bromide substantially decreased this effect. Our results show that crotoxin inhibits ³H-choline uptake with high affinity (EC25 = 10 ± 5 nM. We suggest that this inhibition could explain, at least in part, the blocking effect of crotoxin on neurotransmission.

  9. Cytoskeleton, endoplasmic reticulum and nucleus alterations in CHO-K1 cell line after Crotalus durissus terrificus (South American rattlesnake venom treatment

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    B. P. Tamieti

    2007-01-01

    Full Text Available Snake venoms are toxic to a variety of cell types. However, the intracellular damages and the cell death fate induced by venom are unclear. In the present work, the action of the South American rattlesnake Crotalus durissus terrificus venom on CHO-K1 cell line was analyzed. The cells CHO-K1 were incubated with C. d. terrificus venom (10, 50 and 100g/ml for 1 and 24 hours, and structural alterations of actin filaments, endoplasmic reticulum and nucleus were assessed using specific fluorescent probes and agarose gel electrophoresis for DNA fragmentation. Significant structural changes were observed in all analyzed structures. DNA fragmentation was detected suggesting that, at the concentrations used, the venom induced apoptosis.

  10. An Evaluation of 3-Rhamnosylquercetin, a Glycosylated Form of Quercetin, against the Myotoxic and Edematogenic Effects of sPLA2 from Crotalus durissus terrificus

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Daniela de Oliveira Toyama

    2014-01-01

    Full Text Available This paper shows the results of quercitrin effects on the structure and biological activity of secretory phospholipase (sPLA2 from Crotalus durissus terrificus, which is the main toxin involved in the pharmacological effects of this snake venom. According to our mass spectrometry and circular dichroism results, quercetin was able to promote a chemical modification of some amino acid residues and modify the secondary structure of C. d. terrificus sPLA2. Moreover, molecular docking studies showed that quercitrin can establish chemical interactions with some of the crucial amino acid residues involved in the enzymatic activity of the sPLA2, indicating that this flavonoid could also physically impair substrate molecule access to the catalytic site of the toxin. Additionally, in vitro and in vivo assays showed that the quercitrin strongly diminished the catalytic activity of the protein, altered its Vmax and Km values, and presented a more potent inhibition of essential pharmacological activities in the C. d. terrificus sPLA2, such as its myotoxicity and edematogenic effect, in comparison to quercetin. Thus, we concluded that the rhamnose group found in quercitrin is most likely essential to the antivenom activities of this flavonoid against C. d. terrificus sPLA2.

  11. Dosimetria interna de radiofármacos derivados de polipeptídeos antitumorais isolados dos venenos de: Crotalus durissus terrificus e Scorpaena plumieri

    OpenAIRE

    Henrique Martins de Andrade

    2009-01-01

    A identificação de novos agentes terapêuticos e diagnósticos capazes de inibir o crescimento tumoral é essencial para melhoria no prognóstico de pacientes acometidos por tumores malignos (glioma, mama dentre outros). Nesse contexto, produtos naturais (vegetais e animais) constituem-se numa rica fonte de substâncias com potencial antitumoral. Polipeptídeos isolados dos venenos da serpente Crotalus durissus terrificus (Crtx) e do peixe Scorpaena plumieri (SPGP), apresentam atividade...

  12. Perfil eletroforético das proteínas séricas de serpentes Crotalus durissus terrificus (cascavel criadas em cativeiro Serum protein electrophoresis profile of the rattlesnake Crotalus durissus terrificus kept in captivity

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Joandes Henrique Fonteque

    2009-06-01

    Full Text Available As serpentes peçonhentas dos gêneros Bothrops e Crotalus têm sido mantidas em cativeiro visando à extração de venenos para a produção de imunobiológicos. O conhecimento da fisiologia desses animais e as alterações na concentração de proteínas e suas frações séricas são importantes para a identificação precoce de importantes enfermidades que cursam com estados de hipoproteinemia e hiperproteinemia. O objetivo do trabalho foi determinar a concentração de proteína total e o perfil eletroforético das proteínas séricas de serpentes Crotalus durissus terrificus (cascavel criadas em cativeiro. Foram colhidas amostras de sangue da veia coccígea ventral de 21 serpentes adultas e sadias, divididas em dois grupos: Grupo 1 de 12 machos com peso médio de 588,89±193,55g, e Grupo 2 de nove fêmeas com peso médio de 708,33±194,04g. A proteína total sérica foi determinada pelo método de refratometria e a eletroforese em gel de agarose. Obtiveram-se valores da proteína total sérica (g/dL de 4,51±0,50 para machos e de 4,82±0,72 para fêmeas, e para machos e fêmeas de 4,64±0,61. Foram identificadas pela eletroforese quatro frações protéicas (g/dL: albumina, a, b, g-globulinas e calculada a relação albumina:globulina. As serpentes fêmeas apresentaram maiores valores para as variáveis, albumina e para a relação albumina/globulina (AG diferindo significativamente (PThe poisonous snakes of the genera Crotalus and Bothrops have been kept in captivity with the purpose of extracting poison for the production of immunobiological. Knowledge of the physiology of these animals and serum proteins concentration changes are important for early identification of major diseases which lead to states of hypoproteinemia and hyperproteinemia. The objective was to determine the concentration of total protein and serum protein electrophoresis profile of Crotalus durissus terrificus (rattlesnake in captivity. Blood samples were taken from

  13. Mitochondrial dysfunction induced by pancreatic and crotalic (Crotalus durissus terrificus) phospholipases A2 on rabbit proximal tubules suspensions.

    Science.gov (United States)

    Amora, Daniela N; Costa Martins, Alice M; Roeser, Nancy; Senter, Ruth; Ostrowsky, Tiffany; Weinberg, Joel M; Monteiro, Helena S A

    2008-12-15

    In the present study we show that phospholipases A2 isolated from porcine pancreas (PP-PLA2) and Crotalus durissus terrificus snake venom (SV-PLA2) induced dose-dependent increases of LDH release from rabbit proximal tubules in suspension. Both porcine and crotalic PLA(2)s induced increases in non-esterified fatty acid (NEFA) levels (microg of NEFA/mg of tubule protein). It was observed that the NEFA levels in the pellets were higher than in the supernatant for both PLA2, and were dose-dependent for the crotalic PLA2 group. Furthermore, snake venom PLA2 induced a decrease in mitochondrial membrane potential (DeltaPsi(m)) assessed by both JC-1 uptake and safranin O uptake. Porcine PLA2 produced no effects on JC-1 uptake with the highest concentrations and an unexpected increase in the group treated with the lowest concentration. In contrast, the safranin O method revealed decreases of energization with both phospholipases, so it had higher sensitivity to the presence of the increased NEFA levels. Addition of delipidated bovine serum albumin (dBSA) completely reversed the effects induced by phospholipases on DeltaPsi(m) measured with safranin O. Incubation with pancreatic and crotalic phospholipases A2 produced no changes on cell ATP levels. We conclude that the treatment of proximal tubule suspensions with porcine or crotalic phospholipases disturbed membrane integrity as well as mitochondrial function. Specific early NEFA-mediated mitochondrial effects of the phospholipases used in the present study are indicated by the benefit provided by dBSA.

  14. Hematological changes in sheep inoculated with natural and Cobalt60-irradiated Crotalus durissus terrificus venom (Laurenti, 1768

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    D. P. Netto

    2004-01-01

    Full Text Available Natural (NV and Cobalto60-irradiated (IrV Crotalus durissus terrificus venom were used to evaluate serum production capacity of sheep and possible hematological and biochemical effects. Freeze-dried venom aliquots were diluted in acidified saline solution (NaCl 150 mM, pH 3.0 and irradiated by a Cobalt 60 source at a dose of 5.54 x 102 Gy/h and a concentration of 2.000 Gy. Twelve sheep were divided into two groups of six animals. One group received irradiated venom (IrV and the other natural venom (NV. Three antigen doses (venom were administered at monthly intervals. Blood samples were collected weekly for analysis of serum neutralization potency and capacity, complete blood count (CBC, total plasma protein, fibrinogen, albumin, and globulin. At the end of the experiment, the animals were challenged with a LD50 for sheep and showed no signs of envenoming. The two groups did not present clinical alterations. Results of the total leukocyte count did not present interaction or time factor effect for both groups, but there was a different action between them, with the NV group presenting more cells than the IrV group. The leukocyte increase to 13,000/ml indicates that slight leukocytosis occurred in the week after the first inoculation in the NV group. There was no statistically significant difference between groups in the absolute count of segmented neutrophils, eosinophils, and lymphocytes but there were statistically significant oscillations in values at the different collecting times. The NV group presented an increase in the absolute neutrophil count after the first inoculation that persisted for 5 weeks. In the IrV group, the increase in neutrophils occurred only in the first week returning to normal in the following weeks. The alterations in the neutrophil count are indicative of systemic inflammatory response related to cytokine release; response was more marked in the NV group, showing its greater toxicity.

  15. Aspectos morfológicos e ultraestruturais de células sanguíneas de Crotalus durissus terrificus

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Lívia M. Kindlovits

    Full Text Available RESUMO: A avaliação hematológica, de importância comprovada como um meio auxiliar de diagnóstico ao clínico de pequenos animais domésticos, vem se tornando comum em animais selvagens não apenas para a clínica, mas para a avaliação do manejo e como estudo auxiliar para a fisiologia das várias espécies. Tendo em vista o aumento da demanda para a produção de várias drogas de importância farmacêutica, a criação de serpentes peçonhentas vem se tornando comum a ponto destes animais já serem reconhecidos como sendo de produção. O conhecimento do manejo e da clínica destes animais ainda é escasso e a mortalidade é elevada nos criatórios, tornando urgente a ampliação destes. Embora alguns estudos hematológicos já tenham sido realizados em cascavéis (Crotalus durissus os dados analisados ainda são insipientes, notadamente em relação à caracterização das células do sangue e poucos estudos em microscopia eletrônica foram realizados em serpentes. Com o objetivo de caracterizar as células sanguíneas morfologicamente, sob microscopia óptica e ultraestrutural, foram coletadas amostras de sangue de 52 de indivíduos da subespécie Crotalus durissus terrificus para a realização de esfregaços sanguíneos e avaliação ultraestrutural. Concluiu-se que a coloração hematológica de Giemsa permite a avaliação morfológica e a diferenciação das células sanguíneas em serpentes assim como a visualização de hemoparasitos. A avaliação ultraestrutural permite evidenciar as organelas celulares e a diferenciação entre as células, inclusive entre os tipos leucocitários, porém ainda são necessários outros estudos para que seja elucidada a hipótese da existência dos eosinófilos na espécie estudada assim como é necessária melhor caracterização dos grânulos dos azurófilos para que se confirme uma possível diferença entre os monócitos típicos e os azurófilos.

  16. Hematological changes in sheep inoculated with natural and Cobalt{sub 60}-irradiated Crotalus durissus terrificus venom (Laurenti, 1768)

    Energy Technology Data Exchange (ETDEWEB)

    Netto, D.P.; Alfieri, A.A.; Balarim, M.R.S. [Universidade Estadual de Londrina, PR (Brazil). Faculdade de Medicina Veterinaria e Zootecnia. Dept. de Medicina Veterinaria Preventiva]. E-mail: rnetto@uel.br; Chiacchio, S.B.; Bicudo, P.L. [UNESP, Botucatu, SP (Brazil). Faculdade de Medicina Veterinaria e Zootecnia; Nascimento, N. [Instituto de Pesquisas Energeticas e Nucleares (IPEN), Sao Paulo, SP (Brazil). Supervisao de Radiobiologia

    2004-07-01

    Natural (NV) and Cobalt{sub 60}-irradiated (IrV) Crotalus durissus terrificus venom were used to evaluate serum production capacity of sheep and possible hematological and biochemical effects. Freeze-dried venom aliquots were diluted in acidified saline solution (NaCl 150 m M, p H 3.0) and irradiated by a Cobalt 60 source at a dose of 5.54 x 102 Gy/h and a concentration of 2.000 Gy. Twelve sheep were divided into two groups of six animals. One group received irradiated venom (IrV) and the other natural venom (NV). Three antigen doses (venom) were administered at monthly intervals. Blood samples were collected weekly for analysis of serum neutralization potency and capacity, complete blood count, total plasma protein, fibrinogen, albumin, and globulin. At the end of the experiment, the animals were challenged with a LD{sub 50} for sheep and showed no signs of envenoming. The two groups did not present clinical alterations. Results of the total leukocyte count did not present interaction or time factor effect for both groups, but there was a different action between them, with the NV group presenting more cells than the IrV group. The leukocyte increase to 13,000/{mu}l indicates that slight leucocytosis occurred in the week after the first inoculation in the NV group. There was no statistically significant difference between groups in the absolute count of segmented neutrophils, eosinophils, and lymphocytes but there were statistically significant oscillations in values at the different collecting times. The NV group presented an increase in the absolute neutrophil count after the first inoculation that persisted for 5 weeks. In the IrV group, the increase in neutrophils occurred only in the first week returning to normal in the following weeks. The alterations in the neutrophil count are indicative of systemic inflammatory response related to cytokine release; response was more marked in the N V group, showing its greater toxicity. (author)

  17. Crotoxin from Crotalus durissus terrificus is able to down-modulate the acute intestinal inflammation in mice.

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Caroline de Souza Almeida

    Full Text Available Inflammatory bowel diseases (IBD is the result of dysregulation of mucosal innate and adaptive immune responses. Factors such as genetic, microbial and environmental are involved in the development of these disorders. Accordingly, animal models that mimic human diseases are tools for the understanding the immunological processes of the IBD as well as to evaluate new therapeutic strategies. Crotoxin (CTX is the main component of Crotalus durissus terrificus snake venom and has an immunomodulatory effect. Thus, we aimed to evaluate the modulatory effect of CTX in a murine model of colitis induced by 2,4,6- trinitrobenzene sulfonic acid (TNBS. The CTX was administered intraperitoneally 18 hours after the TNBS intrarectal instillation in BALB/c mice. The CTX administration resulted in decreased weight loss, disease activity index (DAI, macroscopic tissue damage, histopathological score and myeloperoxidase (MPO activity analyzed after 4 days of acute TNBS colitis. Furthermore, the levels of TNF-α, IL-1β and IL-6 were lower in colon tissue homogenates of TNBS-mice that received the CTX when compared with untreated TNBS mice. The analysis of distinct cell populations obtained from the intestinal lamina propria showed that CTX reduced the number of group 3 innate lymphoid cells (ILC3 and Th17 population; CTX decreased IL-17 secretion but did not alter the frequency of CD4+Tbet+ T cells induced by TNBS instillation in mice. In contrast, increased CD4+FoxP3+ cell population as well as secretion of TGF-β, prostaglandin E2 (PGE2 and lipoxin A4 (LXA4 was observed in TNBS-colitis mice treated with CTX compared with untreated TNBS-colitis mice. In conclusion, the CTX is able to modulate the intestinal acute inflammatory response induced by TNBS, resulting in the improvement of clinical status of the mice. This effect of CTX is complex and involves the suppression of the pro-inflammatory environment elicited by intrarectal instillation of TNBS due to the

  18. Inhibition of proteases and phospholipases A2 from Bothrops atrox and Crotalus durissus terrificus snake venoms by ascorbic acid, vitamin E, and B-complex vitamins

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    CARLOS H.M. OLIVEIRA

    Full Text Available ABSTRACT The enzyme inhibition by natural and/ or low-cost compounds may represent a valuable adjunct to traditional serotherapy performed in cases of snakebite, mainly with a view to mitigate the local effects of envenoming. The objective of this study was to evaluate possible interactions between vitamins and enzymes that comprise Bothrops atrox and Crotalus durissus terrificus venoms, in vitro. Proteolysis inhibition assays (substrates: azocasein, collagen, gelatin and fibrinogen, hemolysis, coagulation, hemagglutination were carried out using different proportions of vitamins in face of to inhibit minimum effective dose of each venom. The vitamins were responsible for reducing 100% of breaking azocasein by C.d.t. venom, thrombolysis induced by B. atrox and fibrinogenolysis induced by both venoms. It is suggested the presence of interactions between vitamin and the active site of enzymes, for example the interactions between hydrophobic regions present in the enzymes and vitamin E, as well as the inhibitions exercised by antioxidant mechanism.

  19. Clonagem, identificação e análise de genes de peptídeos tóxicos da cascavel sul americana, Crotalus durissus terrificus. Implicações evolutivas e funcionais

    OpenAIRE

    Gandhi Rádis Baptista

    2002-01-01

    O veneno de animais contém um arsenal de toxinas que desencadeia respostas fisiológicas e bioquímicas específicas. A crotamina, um peptídio catiônico (4,4 kDa, pI 9,5), é um dos componentes mais abundantes do veneno de cascavel Sul Arrericana (Crotalus durissus terrificus). No Brasil, há populações de C. d. terrificus que expressam ou não a crotamina no veneno. Em um único espécime de C. d. terrificus crotamina-positivo, foram isolados cDNAs precursores de duas isoformas de crotamina, dentre ...

  20. Pulmonary, microbiological and hematological changes in Crotalus durissus terrificus (Serpentes, Viperidae parasitized by nematodes of the genus Rhabdias (Nematoda, Rhabdiasidae Alterações Pulmonares, microbiológicas e hematológicas em Crotalus durissus terrificus (Serpentes, Viperidae parasitadas pelos nematódeos do gênero Rhabdias (Nematoda, Rhabdiasidae

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    K.R. Santos

    2008-06-01

    Full Text Available This study reported the pulmonary, microbiological, and hematological alterations in Crotalus durissus terrificus parasitized by nematodes of the genus Rhabdias. Histological, microbiological, and hematological analysis were performed on parasitized (n=6 and non-parasitized (n=6 snakes. Granulocytic and mononuclear cell infiltrates in the pulmonary parenchyma and epithelium were also observed during the histological analysis of parasitized snakes. Microbiological analysis of parasitized animals revealed the following Gram-negative bacteria: Citrobacter divergens, Burkholderia cepacia, Stenotrophomonas maltophilia, Proteus vulgaris, Enterobacter sakazakii, Enterobacter ammnigenus, Pseudomonas aeruginosa, Pantoea sp. and Providencia rettgeri. In non-parasitized snakes, the following species were identified: B. cepacia, Pseudomonas fluorescens, and Acinetobacter baumanii. Increased levels of plasmatic protein, decreased lymphocyte counts, and normal red blood cell values were observed in parasitized animals.Este trabalho relata as alterações pulmonares, microbiológicas e hematológicas em Crotalus durissus terrificus parasitadas pelo nematódeo do gênero Rhabdias. As análises histológicas, microbiológicas e hematológicas foram realizadas em serpentes parasitadas (n=6 e não parasitadas (n=6. Foram observados infiltrados de células granulocíticas e mononucleares no parênquima pulmonar durante a análise histopatológica das serpentes parasitadas. A análise microbiológica revelou as seguintes bactérias Gram-negativas; Citrobacter divergens, Burkholderia cepacia, Stenotrophomonas maltophilia, Proteus vulgaris, Enterobacter sakazakii, Enterobacter ammnigenus, Pseudomonas aeruginosa, Pantoea sp. e Providencia rettgeri. Nas serpentes não parasitadas foram identificadas: B. cepacia, Pseudomonas fluorescens e Acinetobacter baumanii. Nos animais parasitados observaram-se: aumento da concentração de proteína plasmática, diminuição da

  1. Humoral response and neutralization capacity of sheep serum inoculated with natural and Cobalt 60-irradiated Crotalus durissus terrificus venom (Laurenti, 1768)

    Energy Technology Data Exchange (ETDEWEB)

    Netto, D.P.; Alfieri, A.A. [Universidade Estadual de Londrina, PR (Brazil). Centro de Ciencias Agrarias, Dept. de Medicina Veterinaria Preventiva; Chiacchio, S.B.; Bicudo, P.L. [UNESP, SP (Brazil). Faculdade de Medicina Veterinaria e Zootecnia; Nascimento, N. [Instituto de Pesquisas Energeticas e Nucleares (IPEN), Sao Paulo, SP (Brazil). Supervisao de Radiobiologia]. E-mail: rnetto@uel.br

    2002-07-01

    The aim of this work was to investigate antigen irradiation on crotalic antivenom and the capacity of sheep as serum producers. Twelve sheep in two groups of six were inoculated with Crotalus durissus terrificus venom. One group was inoculated with natural venom (N V) and the other with Cobalt 60 gamma-irradiated venom (Ir V). Three antigen doses were given to the animals at monthly intervals for immunization. The toxic activity of the venom was assessed by LD 50 determination in mice. Blood samples were collected weekly analyses of serum neutralization capacity and potency. At the end of the experiment, the animals were challenged with a LD 50 for sheep showed no signs of envenoming. These results showed that toxicity of the irradiated venom was 4.4 times less than the natural venom. The sera from the irradiated group neutralized LD 50 14.6 times, and the sera from the natural group 4.4 times. Sera from the irradiated group were five times more potent. The two groups did not present clinical alterations. The results of this study show the potential for using sheep in crotalic antivenom production. The use of irradiated venom in sheep immunization induces a powerful and lasting humoral immune response shown by both the in vitro neutralization and potency tests and by the indirect ELISA antibody level detection technique. (author)

  2. Characterization of ribonucleic acids from the venom glands of Crotalus durissus terrificus (Ophidia, Reptilia) after manual extraction of the venom. Studies on template activity and base composition

    Science.gov (United States)

    De Lucca, F. L.; Imaizumi, M. T.; Haddad, A.

    1974-01-01

    RNA synthesis in the venom glands of Crotalus durissus terrificus was stimulated by the manual extraction of the venom (milking). RNA was extracted from venom glands activated by milking and fractionated by centrifugation through sucrose density gradients. Template activity for protein synthesis and base composition of the RNA fractions were studied. RNA fractions that sediment between 18S and 4S had the highest template activity. The base composition analysis indicated that the 28S and 18S rRNA have a C+G content of 65.4 and 58% respectively. The `melting' temperature (Tm) of DNA in 0.15m-NaCl–0.015m-trisodium citrate, pH7.0, was 85°C, corresponding to a C+G content of 38%. The base ratio of the RNA fractions that showed a high template activity was intermediate between that of rRNA and homologous DNA. The possible role of these fractions in the synthesis of the two main toxins (crotoxin and crotamine) of the South American rattlesnake's venom is discussed. ImagesPLATE 1 PMID:4463939

  3. Rabdomióilise secundária a acidente ofídico crotálico (Crotalus durissus terrificus

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Renato Almeida Magalhães

    1986-08-01

    Full Text Available Relatam-se dois casos de rabdomiólise secundária a envenenamento produzido por Crotalus durissus terrificus. O diagnóstico da rabdomiólise baseou-se na mialgia intensa e generalizada apresentada pelos pacientes e na constatação de níveis séricos elevados de CPK, TGO e DHL. A confirmação do diagnóstico foi obtida no caso n.° 2 pela detecção de mioglobina no soro através de imunoeletroforese contra soro antimioglobina humana e por biópsia muscular. Esse paciente desenvolveu também, como complicação do envenenamento ofídico, quadro clínico e laboratorial de insuficiência renal aguda. Essa complicação foi atribuída à ação nefrotóxica e hemolítica do veneno crotálico e à hipotensão arterial apresentada pelo paciente, não se afastando a possibilidade de que a rabdomiólise tenha sido um fator contribuinte para a sua instalação. Foram constatadas hipocalcemla, hiperuricemia e hiperfosfatemia grave na fase oligúria da insuficiência renal aguda, alterações peculiares quando essa condição está associada à rabdomiólise.

  4. Effects of N-acetyl-L-cysteine on redox status and markers of renal function in mice inoculated with Bothrops jararaca and Crotalus durissus terrificus venoms.

    Science.gov (United States)

    Barone, Juliana Marton; Frezzatti, Rodrigo; Silveira, Paulo Flavio

    2014-03-01

    Renal dysfunction is an important aggravating factor in accidents caused by Crotalus durissus terrificus (Cdt) and Bothrops jararaca (Bj) bites. N-acetyl-l-cysteine (NAC) is well known as a nephroprotective antioxidant with low toxicity. The present study investigated the effects of NAC on redox status and markers of renal function in mice that received vehicle (controls) or venoms (v) of Cdt and Bj. In controls NAC promoted hypercreatinemia, hypouremia, hyperosmolality with decreased urea in urine, hyperproteinuria, decreased protein and increased dipeptidyl peptidase IV (DPPIV) in membrane-bound fraction (MF) from renal cortex (RC) and medulla (RM). NAC ameliorated or normalized altered creatinuria, proteinemia and aminopeptidase (AP) acid in MF, AP basic (APB) in soluble fraction (SF), and neutral AP in SF and MF from RC and RM in vBj envenomation. NAC ameliorated or normalized altered neutral AP in SF from RC and RM, and DPPIV and protein in MF from RC in vCdt envenomation. NAC ameliorated or restored renal redox status respectively in vCdt and vBj, and normalized uricemia in both envenomations. These data are promising perspectives that recommend the clinical evaluation of NAC as potential coadjuvant in the anti venom serotherapy for accidents with these snake's genera.

  5. Sulfated polysaccharide extracted of the green algae Caulerpa racemosa increase the enzymatic activity and paw edema induced by sPLA2 from Crotalus durissus terrificus venom

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Camila L. Pires

    2013-08-01

    Full Text Available Sulfated polysaccharides derived from seaweed have shown great potential for use in the development of new drugs. In this study, we observed that a low-molecular-weight sulfated polysaccharide from Caulerpa racemosa, termed CrSP, could interact with secretory phospholipase A2 (sPLA2 isolated from Crotalus durissus terrificus venom. When native sPLA2 (14 kDa was incubated with CrSP, they formed a molecular complex (sPLA2:CrSP with a molecular mass of 32 kDa, approximately. Size exclusion chromatography experiments suggested that CrSP formed a stable complex with sPLA2. We belived that sPLA2 and SPCr are involved an ionic interaction between negatively charged CrSP and the positively charged basic amino acid residues of sPLA2, because this interaction induced significant changes in sPLA2 enzymatic and pharmacological activities. CrSP caused a significant increase in sPLA2 enzymatic and bactericidal activity and increased its edematogenic effect. A pharmacological assay showed that the myotoxic activity of sPLA2:CrSP is unrelated to its enzymatic activity and that sPLA2:CrSP may have a practical application as a natural antibacterial agent for use in humans and commercially raised animals.

  6. Phospholipase A2 isolated from the venom of Crotalus durissus terrificus inactivates dengue virus and other enveloped viruses by disrupting the viral envelope.

    Science.gov (United States)

    Muller, Vanessa Danielle; Soares, Ricardo Oliveira; dos Santos, Nilton Nascimento; Trabuco, Amanda Cristina; Cintra, Adelia Cristina; Figueiredo, Luiz Tadeu; Caliri, Antonio; Sampaio, Suely Vilela; Aquino, Victor Hugo

    2014-01-01

    The Flaviviridae family includes several virus pathogens associated with human diseases worldwide. Within this family, Dengue virus is the most serious threat to public health, especially in tropical and sub-tropical regions of the world. Currently, there are no vaccines or specific antiviral drugs against Dengue virus or against most of the viruses of this family. Therefore, the development of vaccines and the discovery of therapeutic compounds against the medically most important flaviviruses remain a global public health priority. We previously showed that phospholipase A2 isolated from the venom of Crotalus durissus terrificus was able to inhibit Dengue virus and Yellow fever virus infection in Vero cells. Here, we present evidence that phospholipase A2 has a direct effect on Dengue virus particles, inducing a partial exposure of genomic RNA, which strongly suggests inhibition via the cleavage of glycerophospholipids at the virus lipid bilayer envelope. This cleavage might induce a disruption of the lipid bilayer that causes a destabilization of the E proteins on the virus surface, resulting in inactivation. We show by computational analysis that phospholipase A2 might gain access to the Dengue virus lipid bilayer through the pores found on each of the twenty 3-fold vertices of the E protein shell on the virus surface. In addition, phospholipase A2 is able to inactivate other enveloped viruses, highlighting its potential as a natural product lead for developing broad-spectrum antiviral drugs.

  7. Phospholipase A2 isolated from the venom of Crotalus durissus terrificus inactivates dengue virus and other enveloped viruses by disrupting the viral envelope.

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Vanessa Danielle Muller

    Full Text Available The Flaviviridae family includes several virus pathogens associated with human diseases worldwide. Within this family, Dengue virus is the most serious threat to public health, especially in tropical and sub-tropical regions of the world. Currently, there are no vaccines or specific antiviral drugs against Dengue virus or against most of the viruses of this family. Therefore, the development of vaccines and the discovery of therapeutic compounds against the medically most important flaviviruses remain a global public health priority. We previously showed that phospholipase A2 isolated from the venom of Crotalus durissus terrificus was able to inhibit Dengue virus and Yellow fever virus infection in Vero cells. Here, we present evidence that phospholipase A2 has a direct effect on Dengue virus particles, inducing a partial exposure of genomic RNA, which strongly suggests inhibition via the cleavage of glycerophospholipids at the virus lipid bilayer envelope. This cleavage might induce a disruption of the lipid bilayer that causes a destabilization of the E proteins on the virus surface, resulting in inactivation. We show by computational analysis that phospholipase A2 might gain access to the Dengue virus lipid bilayer through the pores found on each of the twenty 3-fold vertices of the E protein shell on the virus surface. In addition, phospholipase A2 is able to inactivate other enveloped viruses, highlighting its potential as a natural product lead for developing broad-spectrum antiviral drugs.

  8. Evidence for a respiratory component, similar to mammalian respiratory sinus arrhythmia, in the heart rate variability signal from the rattlesnake, Crotalus durissus terrificus.

    Science.gov (United States)

    Campbell, Hamish A; Leite, Cleo A C; Wang, Tobias; Skals, Marianne; Abe, Augusto S; Egginton, Stuart; Rantin, F Tadeu; Bishop, Charles M; Taylor, Edwin W

    2006-07-01

    Autonomic control of heart rate variability and the central location of vagal preganglionic neurones (VPN) were examined in the rattlesnake (Crotalus durissus terrificus), in order to determine whether respiratory sinus arrhythmia (RSA) occurred in a similar manner to that described for mammals. Resting ECG signals were recorded in undisturbed snakes using miniature datalogging devices, and the presence of oscillations in heart rate (fh) was assessed by power spectral analysis (PSA). This mathematical technique provides a graphical output that enables the estimation of cardiac autonomic control by measuring periodic changes in the heart beat interval. At fh above 19 min(-1) spectra were mainly characterised by low frequency components, reflecting mainly adrenergic tonus on the heart. By contrast, at fh below 19 min(-1) spectra typically contained high frequency components, demonstrated to be cholinergic in origin. Snakes with a fh >19 min(-1) may therefore have insufficient cholinergic tonus and/or too high an adrenergic tonus acting upon the heart for respiratory sinus arrhythmia (RSA) to develop. A parallel study monitored fh simultaneously with the intraperitoneal pressures associated with lung inflation. Snakes with a fhrate (fv). Adrenergic blockade by propranolol infusion increased the variability of the ventilation cycle, and the oscillatory component of the fh spectrum broadened accordingly. Infusion of atropine to effect cholinergic blockade abolished this HF component, confirming a role for vagal control of the heart in matching fh and fv in the rattlesnake. A neuroanatomical study of the brainstem revealed two locations for vagal preganglionic neurones (VPN). This is consistent with the suggestion that generation of ventilatory components in the heart rate variability (HRV) signal are dependent on spatially distinct loci for cardiac VPN. Therefore, this study has demonstrated the presence of RSA in the HRV signal and a dual location for VPN in the

  9. Comparación entre las técnicas de neutralización en ratón y E.L.I.S.A para determinar la potencia del anti-veneno crotalus durissus terrificus

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    María Cristina Forero CH.

    1984-12-01

    Full Text Available Las técnicas de neutralización en ratón y ELISA se compararon como métodos para determinar la potencia del antiveneno Crotalus durissus terrificus. lnformes en la literatura(3, (12, (13, sugerían la posibilidad de cambiar la técnica in vivo muy costosa por la técnica in vitro. Se utilizaron antivenenos procesados (Gamma-globulinas purificadas y no procesados. No se encontró correlación entre los títulos de neutralización y las lecturas de absorvancia obtenidas por ELISA para ninguna de las muestras. La falta de correlación se debe probablemente a que las técnicas miden dos poblaciones de anticuerpos diferentes. Mientras que con ELlSA se miden anticuerpos contra todos los antígenos del veneno, con la técnica de neutralización solo se miden anticuerpos contra la fracción letal. Se sugiere verificar nuevamente la correlación entre las dos técnicas usando como antígeno para ELISA la neurotoxina purificada. No se recomienda, en contra a lo afirmado por otros autores (3, el empleo de la técnica de ELlSA usando veneno total como antígeno, para determinar la potencia del antiveneno Crotalus durissus terrificus.

  10. Resposta imune e capacidade de neutralização de anticorpos produzidos em ovinos jovens imunizados com veneno de Crotalus durissus terrificus nativo e irradiado com Cobalto 60

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Rui Seabra Ferreira Junior

    2009-06-01

    Full Text Available A técnica de Elisa foi utilizada para avaliar e comparar a resposta imune humoral de ovinos jovens para a produção de soro anticrotálico. Durante o processo de soroprodução, foi realizada a avaliação clínica dos animais. A capacidade de neutralização do soro produzido a partir de veneno de serpente Crotalus durissus terrificus, nativo (VN e irradiado (VIr com Cobalto-60 foi verificada por meio de desafios in vitro. Um grupo de seis animais recebeu veneno nativo, o segundo grupo recebeu veneno irradiado e o terceiro grupo foi o controle. Os animais receberam seis imunizações durante 84 dias com intervalo de 14 dias. Houve diferença significativa (p<5% no teste de ELISA do perfil de anticorpos produzidos pelos grupos experimentais (VN < VIr. O grupo imunizado com veneno irradiado apresentou perfil de anticorpos maior que o grupo imunizado com veneno nativo. A capacidade de neutralização do soro produzido a partir do VIr foi cinco vezes maior quando comparado ao soro produzido com VN. Estes resultados justificam o uso da radiação gama na destoxicação do veneno de Crotalus durissus terrificus como alternativa na produção de antiveneno.

  11. Rabbit IgG antibodies against Phospholipase A2 from Crotalus durissus terrificus neutralize the lethal activity of the venom Los anticuerpos IgG de conejos anti-fosfolipasa A2 de Crotalus durissus terrificus neutralizan la actividad letal del veneno

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Juan P. Rodríguez

    2006-12-01

    Full Text Available Crotalus durissus terrificus (C.d.t. (South American rattlesnake venom possesses myotoxic and neurotoxic activities, both of which are also expressed by crotoxin, the principal toxin of this venom. Crotoxin contains a basic phospholipase A2 (PLA2 and a non toxic acidic protein, crotapotin. We have produced and investigated the ability of IgG antibodies raised in rabbits against PLA2 to neutralize the lethality of the whole venom. PLA2 was isolated by gel filtration chromatography (Sephadex G-75. Specific antibodies were obtained by subcutaneous and intramuscular inoculation of PLA2 (700 µg with Freund adjuvant. Groups of six mice (20 + 2 g were inoculated with 0.5 ml i.p. of C. d. t. venom (4 µg or a mixture of venom that had been preincubated with the desired volume of IgG antibodies. Mortality, recorded 24 and 48 h after inoculation, showed that IgG anti-PLA2 were more effective than anticrotalic serum in neutralizing the lethal activity. These results demonstrate that it could be possible to obtain an anti-venom made by specific antibodies with a high level of protection against the lethal component of C.d.t. venom, and/or the inclusion of these antibodies as a supplement in heterologous anti-venoms.El veneno de Crotalus durissus terrificus (C.d.t. (Cascabel de Sud América posee actividad miotóxica y neurotóxica, actividades que también exhibe el complejo crotoxina, principal componente tóxico de este veneno. El complejo crotoxina está constituido por una fosfolipasa A2 básica (PLA2 y una proteína acídica no tóxica, el crotapotín. En este trabajo se estudió la capacidad neutralizante de anticuerpos IgG anti-PLA2 sobre la letalidad inducida por el veneno entero. El antígeno PLA2, fue aislado por cromatografía de filtración en gel (Sephadex G-75. Se inocularon conejos machos por vía subcutánea e intramuscular, con 700 µg de PLA2 y adyuvante para la obtención de anticuerpos específicos. La capacidad neutralizante del

  12. The comparison between the humoral response and the neutralizing capacity of sheep serum inoculated with natural venom and Co{sup 60} irradiated venom from Crotalus durissus terrificus (Laurenti, 1768)

    Energy Technology Data Exchange (ETDEWEB)

    Netto, D.P. [Universidade Estadual de Londrina, PR (Brazil). Centro de Ciencias Agrarias. Dept. de Medicina Veterinaria Preventiva]. E-mail: mnetto@uel.br

    2000-07-01

    Crotalus durissus terrificus venom was irradiated with Co{sup 60} to investigate the effects of antigen-irradiation on antivenom production in sheep. Twelve sheep were divided in two groups of 6. One group received irradiated, while the other received natural venom. Three doses of antigen were given at monthly intervals. The toxic activity of the venom was assessed by LD{sub 50} in mice. Weekly blood samples were obtained to evaluate anti-crotalic serum titers by indirect ELISA, neutralization capacity, and serum potency. A complete blood count, plasma protein and fibrinogen concentration, and serum albumin and globulin were also determined. At end of the experiment, the animals were challenged with ovine LD{sub 50}, without clinical abnormalities. (author)

  13. Quadros clínico-patológicos do envenenamento ofídico por Crotalus durissus terrificus e Bothrops spp. em animais de produção

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Carlos Hubinger Tokarnia

    2014-04-01

    Full Text Available Foi realizada uma revisão dos quadros clínico-patológicos causados pelos venenos de Crotalus durissus terrificus e Bothrops spp. em bovinos, búfalos, ovinos equinos e suínos. Foram compilados os dados obtidos pela experimentação em animais de produção encontrados na literatura e os obtidos através de experimentação realizada por nossa equipe. Também foram revisados os casos naturais de envenenamento ofídico comunicados. Em dois Quadros foram lançados os mais importantes dados dessas revisões, que revelou diversos aspectos interessantes: 1 em nossos experimentos, o veneno de Crotalus durissus terrificus, quando injetado por via subcutânea em cavalos, causou um edema acentuado no local da aplicação, ao contrário do que tem sido observado em todas as outras espécies animais, aspecto não relatado na literatura; 2 em nossos experimentos, o veneno de diversas espécies de Bothrops, quando injetado por via subcutânea em bovinos, ovinos e equinos, não causou edema como em geral é relatado na literatura, e sim hemorragias subcutâneas acentuadas no local da aplicação. Nos casos não fatais este sangue era reabsorvido em poucos dias sem deixar sequelas. Exceção foi a reação ao veneno de Bothrops jararacussu, que causou edema nos ovinos experimentais, e tumefação acentuada que resultou em fístula com eliminação de líquido seroso nos equinos experimentais. O objetivo do presente estudo visa contribuir para o aperfeiçoamento do diagnóstico de acidentes ofídicos em animais de produção.

  14. Internal dosimetry of radiopharmaceuticals derived of antitumor polypeptide isolated from venoms: Crotalus durissus terrifucus and Scorpaena plumieri;Dosimetria interna de radiofarmacos derivados de polipeptideos antitumorais isolados dos venenos de: Crotalus durissus terrificus e Scorpaena plumieri

    Energy Technology Data Exchange (ETDEWEB)

    Andrade, Henrique Martins de

    2009-07-01

    The identification of new diagnostic and therapeutic agents capable of inhibiting tumor growth is essential for improving the prognosis of patients suffering from malignant tumors (glioma, breast and others). In this context, natural products (plants and animals) are a rich source of substances with potential antitumor. Despite knowledge of the etiology and pathology of tumors little progress has been observed in the area of diagnosis. Molecules of snake venoms have been shown to play an important role not only in the survival and proliferation of tumor cells but also in the process of tumor cell adhesion, migration and angiogenesis. Polypeptides isolated from the venom of the snake, Crotalus durissus terrificus, Crtx, and Scorpaena plumieri fish, SPGP, have antitumor activity against malignant tumors. It was shown that similar radio iodines Crtx and SPGP, {sup 125}I-Crtx and {sup 125}I-SPGP, can interact specifically with malignant tumors and induce cell death. Prototype-based radiopharmaceuticals Crtx and SPGP containing radioiodine 1311 were able to produce diagnostic images to accumulate specifically in the tumor site. The present study aimed at evaluating the potential radiological safety and diagnostic/therapeutic efficacy of {sup 131}I-Crtx {sup l31}I-SPGP and (evaluated from the biokinetic data in mice bearing Ehrlich tumor) were treated by the MIRD formalism to carry out internal dosimetry studies. Absorbed doses due to the uptake of {sup 131}I-Crtx and {sup 131}I-SPGP were determined in various organs of mice and implanted into the tumor. The results obtained for the animal model were extrapolated to humans by assuming a similar concentration ratio among the various tissues between mice and humans. In extrapolation, we used the masses of human organs of the phantom of Cristy/Eckerman. Both radiation penetrating and non penetrating of {sup 131}I on the tissue were considered in dose calculations. The absorbed dose in the bone marrow due to the

  15. Comparison of humoral immune response, neutralization capacity of anticrotalic serum in young ovines, clinical and weight evaluation between animals inoculated with Crotalus durissus terrificus venom, natural or Cobalt-60-irradiated

    Energy Technology Data Exchange (ETDEWEB)

    Ferreira Junior, R.S. E-mail: rseabra@cevap.org.br

    2005-07-01

    The Elisa technique was used to evaluate and compare the humoral immune response of young ovine to anticrotalic serum production. During serum production, the clinical and weight evaluation of the animals was performed. The parameters utilized were complete blood count, and dosage of urea, creatinine, aspartate aminotransferase, total proteins, albumin and globulin. The animals weight was verified fortnightly during the experiment. The neutralization capacity of the serum produced from the snake Crotalus durissus terrificus natural (NV) and Cobalt-60-irradiated venom (IrV) was evaluated by in vitro challenges. One group of six animals received natural venom, the second group received irradiated venom, and the third was the control group. The animals received six immunizations during 84 days with an interval of 14 days. There was a significant difference (p<5%) in the ELISA test for the profile of the antibodies produced by the experimental groups (NV

  16. Effect of Mikania glomerata (Asteraceae) leaf extract combined with anti-venom serum on experimental Crotalus durissus (Squamata: Viperidae) envenomation in rats

    OpenAIRE

    Rafael Stuani Floriano; Rosa Maria Barilli Nogueira; Michiko Sakate; Cecília Braga Laposy; Yudney Pereira da Motta; Fabíola Sangiorgio; Heloísa Costa David; João Marcelo Nabas

    2009-01-01

    Crotalic envenomation represents the highest number of deaths when compared to other snakebite envenomations of medical interest. Crotalic venom has important characteristics such as neurotoxicity, myotoxicity, nephrotoxicity, and clotting and hemolytic action. We evaluated the clinical and laboratory aspects of Crotalus durissus terrificus experimental envenomation in Wistar rats treated with antivenom and the aqueous extract of the plant Mikania glomerata. The animals were divided into thre...

  17. Snake venomics of the Central American rattlesnake Crotalus simus and the South American Crotalus durissus complex points to neurotoxicity as an adaptive paedomorphic trend along Crotalus dispersal in South America.

    Science.gov (United States)

    Calvete, Juan J; Sanz, Libia; Cid, Pedro; de la Torre, Pilar; Flores-Díaz, Marietta; Dos Santos, M Cristina; Borges, Adolfo; Bremo, Adolfo; Angulo, Yamileth; Lomonte, Bruno; Alape-Girón, Alberto; Gutiérrez, José María

    2010-01-01

    We report a comparative venomic and antivenomic characterization of the venoms of newborn and adult specimens of the Central American rattlesnake, Crotalus simus, and of the subspecies cumanensis, durissus, ruruima, and terrificus of South American Crotalus durissus. Neonate and adult C. simus share about 50% of their venom proteome. The venom proteome of 6-week-old C. simus is predominantly made of the neurotoxic heterodimeric phospholipase A(2) (PLA(2) crotoxin) (55.9%) and serine proteinases (36%), whereas snake venom Zn(2+)-metalloproteinases (SVMPs), exclusively of class PIII, represent only 2% of the total venom proteins. In marked contrast, venom from adult C. simus comprises toxins from 7 protein families. A large proportion (71.7%) of these toxins are SVMPs, two-thirds of which belong to the PIII class. These toxin profiles correlate well with the overall biochemical and pharmacological features of venoms from adult (hemorrhagic) and newborn (neurotoxic) C. simus specimens. The venoms of the South American Crotalus subspecies belong to one of two distinct phenotypes. C. d. cumanensis exhibits high levels of SVMPs and low lethal potency (LD(50)), whereas C. d. subspecies terrificus, ruruima, and durissus have low SVMP activity and high neurotoxicity to mice. Their overall toxin compositions explain the outcome of envenomation by these species. Further, in all C. simus and C. durissus venoms, the concentration of neurotoxins (crotoxin and crotamine) is directly related with lethal activity, whereas lethality and metalloproteinase activity show an inverse relationship. The similar venom toxin profiles of newborn C. simus and adult C. durissus terrificus, ruruima, and durissus subspecies strongly suggests that the South American taxa have retained juvenile venom characteristics in the adult form (paedomorphism) along their North-South stepping-stone dispersal. The driving force behind paedomorphism is often competition or predation pressure. The increased

  18. Epidemiologia e quadro clínico do acidente por cascavel sul-americana (Crotalus durissus Epidemiology and clinical features of South American rattlesnakes (Crotalus durissus envenomation

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Miguel Tanús Jorge

    1992-08-01

    Full Text Available Foram estudados 249 casos de acidentes por cascavel sul-americana (Crotalus durissus atendidos no HVB-IB, São Paulo, Brasil, de 1974 a 1990. Os acidentes foram mais comuns no período da tarde, nos meses de janeiro a abril e de outubro a dezembro. Dentre cem serpentes classificadas quanto à subespécie 99 eram C. d. terrificus. Pertenciam ao sexo masculino 80,7% dos pacientes. Os membros inferiores e superiores foram picados em, respectivamente, 66,4% e 29,2% dos casos. As manifestações clínicas mais freqüentes foram dor (61,0% e edema (55,0% no local da picada, ptose palpebral (75,9%, escurecimento da urina atribuível à mioglobinúria (38,6% e mialgia (36,1%. Nove pacientes foram submetidos a diálise devido a insuficiência renal aguda (3,6%, três apresentavam insuficiência respiratória que motivou intubação e/ou traqueostomia e um apresentou acidente vascular cerebral isquêmico. A alteração da coagulação sanguínea ocorreu em 48,1% dos pacientes. Oito amostras de sangue colhidas horas após a picada mostraram leucocitose sendo 6 com desvio a esquerda e, nos dias subseqüentes, tendência à normalização do número de leucócitos e aparecimento de eosinofilia. Atividade sérica da creatinoquinase apresentou-se aumentada em 20 dentre 21 pacientes, sendo maior no final das primeiras 24 horas após a picada, chegando a 2.377 vezes o valor de referência. A letalidade foi de 0,8%.Under study were two hundred and forty nine cases of accidents caused by South American rattlesnakes (Crotalus durissus admitted to the Vital Brasil Hospital, São Paulo, Brasil, from 1974 to 1990. The accidents were more common in the afternoon, from January to April and from October to December. Ninety nine out of 100 snakes classified as subspecies were C. d. terrificus. Most of the patients were males (80.7%. The inferior and superior limbs were bitten in 66.4% and 29.2% of the cases, respectively. The more frequent clinical manifestations were

  19. Effect of Mikania glomerata (Asteraceae) leaf extract combined with anti-venom serum on experimental Crotalus durissus (Squamata: Viperidae) envenomation in rats.

    Science.gov (United States)

    Floriano, Rafael Stuani; Nogueira, Rosa Maria Barilli; Sakate, Michiko; Laposy, Cecília Braga; da Motta, Yudney Pereira; Sangiorgio, Fabíola; David, Heloísa Costa; Nabas, João Marcelo

    2009-12-01

    Crotalic envenomation represents the highest number of deaths when compared to other snakebite envenomations of medical interest. Crotalic venom has important characteristics such as neurotoxicity, myotoxicity, nephrotoxicity, and clotting and hemolytic action. We evaluated the clinical and laboratory aspects of Crotalus durissus terrificus experimental envenomation in Wistar rats treated with antivenom and the aqueous extract of the plant Mikania glomerata. The animals were divided into three groups: Group C (control); Group VS-venom and antivenom; Group VSM-venom, antivenom and aqueous extract of M. glomerata. Crotalic poison caused clinical and laboratory alterations in Wistar mice. Significant clinical alterations were: temperature decrease, edema in the venom inoculated member, sedation and a locomotion decrease in groups VS and VSM when compared with group C. A faster recovery from sedation was observed only for animals of group VSM when compared to VS. There was an increase in the number of leukocytes, neutrophils and creatine kinase in the VS and VSM groups, compared to group C. Wistar rats showed a high resistance to crotalic venom. Additional studies with different doses, time of treatment, different administration methods and histopathological and immunological studies are necessary to understand the action of M. glomerata in crotalic accidents.

  20. O isolamento existencial e a psicopatologia

    OpenAIRE

    Henriques, Gabriel

    2010-01-01

    São apresentados, de forma sucinta, alguns dos temas principais da filosofia fenomenológica e existencialista que Irvin D. Yalom refere como base da sua interpretação das características da existência. Com foco no isolamento existencial, são depois descritos os confrontos com essas características e a psicopatologia que de uma forma compreensiva decorre do enviesamento desses confrontos, assim como os principais eixos de uma psicoterapia de base fenomenológica e exi...

  1. Effect of Mikania glomerata (Asteraceae leaf extract combined with anti-venom serum on experimental Crotalus durissus (Squamata: Viperidae envenomation in rats

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Rafael Stuani Floriano

    2009-12-01

    Full Text Available Crotalic envenomation represents the highest number of deaths when compared to other snakebite envenomations of medical interest. Crotalic venom has important characteristics such as neurotoxicity, myotoxicity, nephrotoxicity, and clotting and hemolytic action. We evaluated the clinical and laboratory aspects of Crotalus durissus terrificus experimental envenomation in Wistar rats treated with antivenom and the aqueous extract of the plant Mikania glomerata. The animals were divided into three groups: Group C (control; Group VS-venom and antivenom; Group VSM-venom, antivenom and aqueous extract of M. glomerata. Crotalic poison caused clinical and laboratory alterations in Wistar mice. Significant linical alterations were: temperature decrease, edema in the venom inoculated member, sedation and a locomotion decrease in groups VS and VSM when compared with group C. A faster recovery from sedation was observed only for animals of group VSM when compared to VS. There was an increase in the number of leukocytes, neutrophils and creatine kinase in the VS and VSM groups, compared to group C. Wistar rats showed a high resistance to crotalic venom. Additional studies with different doses, time of treatment, different administration methods and histopathological and immunological studies are necessary to understand the action of M. glomerata in crotalic accidents. Rev. Biol. Trop. 57 (4: 929-937. Epub 2009 December 01.El envenamiento crotálico representa el número más alto de muertes cuando es comparado con envenenamientos por mordeduras de otras serpientes de interés médico. El veneno crotálico tiene importantes características de acción neurotóxica, miotoxicidad, nefrotoxicidad, coagulación y acción hemolítica. Este trabajo evaluó los aspectos clínicos y de laboratorio del envenenamiento experimental con el veneno de la serpiente Crotalus durissus terrificus en las ratas Wistar tratadas con suero antiofídico y extracto acuoso de M

  2. Produção e caracterização parcial de nanocorpos ativos contra Crotoxina: uma neurotoxina da serpente Crotalus durissus terrificus.

    OpenAIRE

    Luiz, Marcos Barros

    2014-01-01

    Dissertação apresentada ao Programa de Pós- Graduação: Mestrado em Biologia Experimental (PGBIOEXP) da Fundação Universidade Federal de Rondônia (UNIR) como requisito final para a obtenção do título de Mestre em Biologia Experimental. Orientadora: Prof. Dra. Carla Freire Celedônio Fernandes. No Brasil cerca de 7,5 % dos casos de envenenamento ofídico são causados por serpentes do gênero Crotalus, os quais originam uma taxa de mortalidade de 1,8 %. Os efeitos neurotóxicos, miotóxicos e nefr...

  3. Is the population of Crotalus durissus (Serpentes, Viperidae) expanding in Brazil?

    Science.gov (United States)

    Duarte, Marcelo Ribeiro; Menezes, Frederico Alcântara

    2013-12-05

    Crotalus durissus are found from Mexico to northern Argentina in a highly disjunct distribution. According to some studies, this species is prone to occupy areas disturbed by human activities and floods comprise a plausible method of dispersal as inferred for some North American rattlesnakes. Based on the literature, it seems plausible that Crotalus durissus expanded their natural distribution in Brazil due to floods, but only in a few municipalities in Rio de Janeiro State. Data entries of Butantan Institute, in São Paulo, Brazil, from 1998 to 2012 show a declining tendency of snakes brought by donors. In addition, research shows no evidence of Crotalus durissus being an expanding species in the Brazilian territory.

  4. Isolamento do vírus Parainfluenza bovino tipo 3 no Rio Grande do Sul, Brasil

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Gonçalves Diocela Andrade

    2003-01-01

    Full Text Available É descrito o isolamento do vírus Parainfluenza bovino tipo 3 (bPI-3 a partir de secreções nasais coletadas de um bovino com infecção respiratória. A identificação do agente foi realizada através de isolamento em cultivo celular e confirmada por testes de hemaglutinação, inibição da hemaglutinação, hemadsorção e imunofluorescência direta. Este é o primeiro registro do isolamento do vírus no Rio Grande do Sul.

  5. Eficiência de isolamento e de plaqueamento de protoplastos de laranja-doce

    OpenAIRE

    Lívia Mendes de Castro; Francisco de Assis Alves Mourão Filho; Beatriz Madalena Januzzi Mendes

    2011-01-01

    O isolamento e plaqueamento de protoplastos são fatores fundamentais para o sucesso no cultivo in vitro deste tipo de explante visando a manipulações genéticas. A composição da solução enzimática no isolamento, a densidade de cultivo, bem como o próprio genótipo utilizado são variáveis importantes nestas etapas. Desta forma, o objetivo do trabalho foi avaliar a eficiência de isolamento de protoplastos em função de três soluções enzimáticas e a eficiência de plaqueamento em função de cinco den...

  6. The adrenergic retulation of the cardiovascular system in the South American rattlesnake, Crotalus durissus

    DEFF Research Database (Denmark)

    Galli, G.L.J.; Jensen, Nini Skovgaard; Abe, A.S.

    2007-01-01

    The present study investigates adrenergic regulation of the systemic and pulmonary circulations of the anaesthetised South American rattlesnake, Crotalus durissus. Haemodynamic measurements were made following bolus injections of adrenaline and adrenergic antagonists administered through a systemic...... arterial catheter. Adrenaline caused a marked systemic vasoconstriction that was abolished by phentolamine, indicating this response was mediated through α-adrenergic receptors. Injection of phentolamine gave rise to a pronounced vasodilatation (systemic conductance (Gsys) more than doubled), while...... injection of propranolol caused a systemic vasoconstriction, pointing to a potent α-adrenergic, and a weaker β-adrenergic tone in the systemic vasculature of Crotalus. Overall, the pulmonary vasculature was far less responsive to adrenergic stimulation than the systemic circulation. Adrenaline caused...

  7. Daily and seasonal activity patterns of free range South-American rattlesnake (Crotalus durissus

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    ALEXANDRO M. TOZETTI

    2013-09-01

    Full Text Available This study aimed at describing daily and seasonal variation in the activity of a population of South-American rattlesnakes (Crotalus durissus in a savanna like habitat (Cerrado in Southeastern Brazil. Seasonal and daily activities of snakes were evaluated by the number of captures of snakes during road surveys, accidental encounters, and relocations by radio-tracking. Our results show that climatic variables such as air temperature and rainfall have little influence on the activity pattern of rattlesnakes. Our findings indicate that rattlesnakes spend most of the day resting and most of the night in ambush posture. The South-American rattlesnake is active throughout the year with a discrete peak in activity of males during the matting season. The possibility of maintaining activity levels even during the coldest and driest season can facilitate the colonization of several habitats in South America. This possibility currently facilitates the colonization of deforested areas by rattlesnakes.

  8. Strategy for subduing prey in the predatory behavior of Crotalus durissus collilineatus Amaral, 1926, in captivity

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Vera Lucia de Campos Brites

    2006-12-01

    Full Text Available Studies of the predatory behavior of six specimens of hatchlings from the same clutch of Crotalus durissus collilineatus, born and raised in captivity, were conducted. The animal focal technique (observing the snakes through a glass visor was used in studying the snakes in order to minimize stress. The snakes were fed mice sequentially and were observed until they no longer sought the prey. Different capture strategies were adopted by this subspecies after the first occasion on which prey was caught. Percentages of the total number of capture strategies observed indicate that 20% (n = 4 made use of seizure, and 80% (n = 16 made use of poisoning, as a mean of subduing prey. The strategy of seizing prey manifested itself on the third or fourth occasion that prey was offered and appeared to be linked to the small size of the prey. It was observed that in 95% (n = 20 of the cases, ingestion began with the cranium of the prey. Regardless of the body part that was ingested first by the serpent, all serpents displayed adjustment behavior of the cranium/head and the jaws (“yawning”.

  9. Gross and histologic features of gastritis due to Ophidascaris arndti in tropical rattlesnakes ( Crotalus durissus

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    É.M. Mello

    Full Text Available ABSTRACT The tropical rattlesnake (Crotalus durissus is a snake of great importance for biomedical industry since its poison is used for the production of antiophidic serum and researches. Several conditions related to animal health, such as diseases and parasites, which can promote the reduction of poison production by these snakes should be investigated. Accordingly, the aim of this study was to characterize the gross and microscopic lesions related to the presence of Ophidascaris arndti in stomachs of tropical rattlesnakes. The gastrointestinal tract of thirty-five South American rattlesnakes captured in Southeastern region of Brazil were analyzed and nineteen animals showed infestation by the parasites, found in the small intestine and, especially, in the stomach of the hosts. Grossly, lesions were characterized by mucosal ulcers occasionally associated with hemorrhage. Microscopic alterations included histiocytic granulomas, fibrosis, necrosis, and hemorrhage. Based on these findings, the diagnosis of a parasitic granulomatous disease was made. The lesions may be related to the cause of death in captivity snakes, since the lesions can promote secondary infections by opportunistic bacteria. Moreover, the intense inflammatory response accompanied by fibrosis may be related to poor functioning of the gastric snakes, which it may exhibit frequent regurgitation of the food.

  10. ISOLAMENTO VERTICAL DO MULTI-NESTED PENDULA PARA DETECTORES INTERFEROMÉTRICOS DE ONDAS GRAVITACIONAIS

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Elvis Camilo Ferreira

    2016-08-01

    Full Text Available Neste trabalho apresentamos os primeiros resultados do estudo do isolamento vertical em um sistema de pêndulos multi-aninhados, para aplicação como isoladores vibracionais passivos dos espelhos da próxima geração de detectores interferométricos de ondas gravitacionais, como o LIGO Voyager. As funções de transferência teórica dos modos verticais indicam um fator de isolamento de até seis ordens de grandeza em 10 Hz. As medições dessas oscilações apresentam frequências de ressonância indesejáveis e indicam que o sistema necessita de melhorias. Aqui propomos algumas soluções para isso, que já estão sendo estudadas.

  11. Comprometimento respiratório secundário a acidente ofídico crotálico (Crotalus durissus Respiratory abnormalities following Crotalus durissus snakebite

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Carlos Faria Santos Amaral

    1991-08-01

    Full Text Available São analisados três pacientes que apresentaram comprometimento da função respiratória após acidente por Crotalus durissus. As manifestações respiratórias surgiram nas primeiras 48 horas após a picada do ofídio e consistiram de dispnéia, taquipnéia, uso da musculatura acessória da respiração (casos 1 e 2 e batimento das aletas nasais (caso 2. Dois pacientes (casos 1 e 2 apresentaram insuficiência respiratória aguda. O diagnóstico desta complicação no caso 1 foi clínico pois o paciente apresentou apnéia. O paciente do caso 2, 24 horas após o acidente ofídico apresentou dificuldade respiratória intensa e períodos de apnéia sendo intubado, permanecendo em respiração espontânea. Houve agravamento dos sinais clínicos de insuficiência respiratória e a determinação de pH e gases do sangue arterial mostrou em relação ao exame inicial elevação da pressão parcial de gás carbônico (40 mmHg para 50,3 mm Hg caracterizando insuficiência ventilatória aguda. Ambos foram tratados com emprego de ventilação artificial mecânica, tendo o paciente do caso 1 permanecido no ventilador durante 33 dias e o do caso 2 durante 15 dias. Ambos desenvolveram insuficiência renal aguda, necessitaram de diálise peritoneal e recuperaram a função renal. A paciente do caso 3, apesar dos sintomas e sinais de comprometimento respiratório não apresentou alterações do pH e gases arteriais. Espirometria realizada 58 horas após o acidente mostrou capacidade vital forçada (CVF e volume espirado no primeiro segundo (VEF1 abaixo do previsto (60 e 67% respectivamente. As espirometrias realizadas nos dias subseqüentes evidenciaram melhora progressiva destes parâmetros. No 10º dia após o acidente constatou-se aumento de 20% da CVF e de 17% do VEF1 comparativamente ao exame inicial. A relação entre VEF1 e a CVF manteve-se praticamente inalterada e em valores próximos ao previsto, caracterizando distúrbio ventilatório do tipo

  12. Eficiência de isolamento e de plaqueamento de protoplastos de laranja-doce

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Lívia Mendes de Castro

    2011-06-01

    Full Text Available O isolamento e plaqueamento de protoplastos são fatores fundamentais para o sucesso no cultivo in vitro deste tipo de explante visando a manipulações genéticas. A composição da solução enzimática no isolamento, a densidade de cultivo, bem como o próprio genótipo utilizado são variáveis importantes nestas etapas. Desta forma, o objetivo do trabalho foi avaliar a eficiência de isolamento de protoplastos em função de três soluções enzimáticas e a eficiência de plaqueamento em função de cinco densidades de protoplastos e diferentes composições de meio de cultura em cultivares de laranja-doce. As soluções enzimáticas avaliadas para o isolamento de protoplastos foram: 1. celulase Onozuka RS 1%, macerase R-10 1% e pectoliase 0,2%; 2. celulase Onozuka RS 1%, macerase R-10 1% ; 3. celulase Onozuka R-10 4%, macerase R-10 1%. O plaqueamento dos protoplastos foi realizado nas densidades de 2 x 10(4; 5 x 10(4; 10(5; 2x 10(5 e 3 x 10(5 protoplastos.mL-1, nos meios de cultura EME 0,7M, BH3 0,7M e BH3 + EME 0,7M em ausência de luz, a 25 ± 1 ºC. A solução enzimática 2 proporcionou maior rendimento no isolamento de protoplastos das cultivares 'Hamlin', 'Natal' e 'Pera', e a solução enzimática 1 foi a mais adequada para a laranja 'Westin'. Para a cultivar 'Lima-Verde', a solução enzimática 3 foi a mais eficiente. A eficiência final de plaqueamento, avaliada aos 90 dias de cultivo, foi superior nas densidades de 3 x 10(5 e 2 x 10(5 protoplastos.mL-1 para as cultivares 'Hamlin', 'Natal' e 'Lima-Verde', e nas densidades de 2 x 10(5 e 10(5 protoplastos.mL-1 para a laranja 'Westin'.

  13. Tracing an invasion: landbridges, refugia, and the phylogeography of the Neotropical rattlesnake (Serpentes: Viperidae: Crotalus durissus).

    Science.gov (United States)

    Wüster, Wolfgang; Ferguson, Julia E; Quijada-Mascareñas, J Adrian; Pook, Catharine E; Salomão, Maria da Graça; Thorpe, Roger S

    2005-04-01

    Abstract Pleistocene fragmentation of the Amazonian rainforest has been hypothesized to be a major cause of Neotropical speciation and diversity. However, the role and even the reality of Pleistocene forest refugia have attracted much scepticism. In Amazonia, previous phylogeographical studies have focused mostly on organisms found in the forests themselves, and generally found speciation events to have predated the Pleistocene. However, molecular studies of open-formation taxa found both north and south of the Amazonian forests, probably because of vicariance resulting from expansion of the rainforests, may provide novel insights into the age of continuous forest cover across the Amazon basin. Here, we analyse three mitochondrial genes to infer the phylogeography of one such trans-Amazonian vicariant, the Neotropical rattlesnake (Crotalus durissus), which occupies primarily seasonal formations from Mexico to Argentina, but avoids the rainforests of Central and tropical South America. The phylogeographical pattern is consistent with gradual dispersal along the Central American Isthmus, followed by more rapid dispersal into and across South America after the uplift of the Isthmus of Panama. Low sequence divergence between populations from north and south of the Amazon rainforest is consistent with mid-Pleistocene divergence, approximately 1.1 million years ago (Ma). This suggests that the Amazonian rainforests must have become fragmented or at least shrunk considerably during that period, lending support to the Pleistocene refugia theory as an important cause of distribution patterns, if not necessarily speciation, in Amazonian forest organisms. These results highlight the potential of nonforest species to contribute to an understanding of the history of the Amazonian rainforests themselves.

  14. Meio semi-seletivo para isolamento de Xanthomonas campestris pv. viticola

    OpenAIRE

    2006-01-01

    O cancro bacteriano causado por Xanthomonas campestris pv. viticola é a fitobacteriose mais importante da videira no Submédio São Francisco. O isolamento de X. campestris pv. viticola de tecidos vegetais infectados é dificultado pela presença de contaminantes bacterianos, entre os quais Microbacterium barkeri. Objetivando-se a formulação de meio de cultura semi-seletivo, 22 isolados de X. campestris pv. viticola foram testados com relação a 30 antibióticos. O meio semi-seletivo NYDAM (extrato...

  15. Antibioterapia de largo espectro como factor de risco para o isolamento de acinetobacter baumanni multiresistente

    OpenAIRE

    2014-01-01

    Antibioterapia de largo espectro é reconhecida como um factor de risco para a infecções multiresistentes. O objectivo é avaliar a associaçao entre antibioterapia de largo espectro com Meropenem (MP) e Piperacilina/Tazobactam (PT) com o isolamento de Acinetobacter baumanni multiresistente (ABMR). Estudo caso-controlo retrospectivo. Incluidos os individuos com ABMR+ no nosso hospital em 2010. Calculamos a incidenca nos Serviços Cirúrgicos, Serviços Médicos e Unidades de Cuidados Intensi...

  16. A capacidade do bebê para estar só e o isolamento autista

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Maria Izabel Tafuri

    Full Text Available O tratamento preventivo das perturbações precoces com o risco de evolução Autista é discutido nesse texto como uma ação paradoxal do ponto de vista psicanalítico. A prevenção implica na perpetuação do pensamento psiquiátrico kraepeliano sobre a evolução obrigatória de um conjunto de sintomas de uma referida doença. Ao mesmo tempo enfatiza-se a necessidade do tratamento precoce de bebês com isolamento patológico.

  17. Técnicas modernas em espectrometria de massas aplicadas no isolamento de bioherbicidas produzidos por microrganismos

    OpenAIRE

    Tânia Petta

    2008-01-01

    Neste trabalho foi empregada uma metodologia rápida e eficiente para a identificação de metabólitos fitotóxicos produzidos por microrganismos. O isolamento do composto bioativo foi guiado através de bioensaio com Lemna minor. A espectrometria de massas, em especial o LC-MS, foi utilizada para acelerar o processo de identificação do composto ativo. As bactérias estudadas eram simbióticas do fungo fitopatogênico Sclerotium rolfsii. Seus respectivos extratos orgânicos obtidos de culturas em meio...

  18. Isolamento e regeneração de protoplastos de Magnaporthe grisea

    OpenAIRE

    Marchi,Carlos Eduardo; Brommonschenkel,Sérgio Hermínio; Queiroz,Marisa Vieira de; Mizubuti,Eduardo Seiti Gomide

    2006-01-01

    Protoplastos são ferramentas biológicas importantes para pesquisas em fungos filamentosos, sendo empregados intensamente em transformação genética. O isolamento de protoplastos de Magnaporthe grisea foi facilitado com Novozym 234, contudo, este complexo enzimático encontra-se indisponível no mercado. Assim, objetivou-se comparar a eficiência de enzimas líticas disponíveis comercialmente na obtenção de protoplastos de M. grisea. Paralelamente, analisaram-se estabilizadores osmóticos, tempos de...

  19. Effects of Crotalus durissus collilineatus venom in the isolated rat kidney.

    Science.gov (United States)

    Amora, Daniela N; Sousa, Ticiana M; Martins, Alice M C; Barbosa, Paulo S F; Magalhães, Marta R; Toyama, Marcus H; Fonteles, Manassés C; de Menezes, Dalgimar B; Monteiro, Helena S A

    2006-03-01

    Ophidian accidents caused by the subspecies Crotalus durissus are responsible for high morbity and mortality rates. Acute renal failure is a common complication observed in these accidents. The aim of the present study was to investigate the renal effects promoted by the venom of C. d. collilineatus and its fractions, crotoxin and phospholipase A2. C. d. collilineatus (Cdc; 30 microg mL(-1)), crotoxin (CTX; 10 microg mL(-1)) and phospholipase A2 (PLA2; 10 microg mL(-1)) were tested in isolated rat kidney. The first 30 min of each experiment were used as an internal control and Cdc or its fractions, CTX and PLA2 were added to the system after this period. All experiments lasted 120 min. The venom of Cdc decreased perfusion pressure (PP; control120 = 110.3 +/- 3.69 mmHg; Cdc120 = 96.7+/-8.1 mmHg), renal vascular resistance (RVR; control120 = 6.42+/-0.78 mmHg mL g(-1) min(-1); Cdc120 = 4.8+/-0.56 mmHg/mL g(-1) min(-1)), urinary flow (UF; control120 = 0.19+/-0.03 mL g(-1) min(-1); Cdc120 = 0.12 +/- 0.01 mL g(-1) min(-1)), and glomerular filtration rate (GFR; control120 = 0.79 +/- 0.07 mL g(-1) min(-1); Cdc120 = 0.53 +/- 0.09 mL g(-1) min(-1)), but had no effect on the percent of sodium tubular transport (%TNa+), percent of chloride tubular transport (%TK+) and percent of potassium tubular transport (%TCl-). CTX and PLA2 reduced the GFR, while UF, PP and RVR remained stable during the full 120 min of perfusion. Crotoxin administration also diminished the %TK+ (control120 = 69.94 +/- 6.49; CTX120 = 33.28 +/- 4.78) and %TCl- (control120 = 79.53 +/- 2.67; CTX120 = 64.62 +/- 6.93). PLA2 reduced the %TK+, but exerted no effect on the %TNa+ or on that of TCl-. In conclusion, the C. d. collilineatus venom altered the renal functional parameters evaluated. We suggest that crotoxin and phospholipase A2 were involved in this process, since the renal effects observed would be due to the synergistic action of the components of the venom.

  20. Renal and vascular effects of Crotalus durissus cumanensis venom and its crotoxin fraction

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    TP Pereira

    2011-01-01

    Full Text Available In this study, we evaluated the actions of Crotalus durissus cumanensis venom (CDCmV, and its crotoxin (Crtx fraction, on renal and vascular functions in Wistar rats. In isolated perfused kidneys, CDCmV (10 µg/mL significantly increased the perfusion pressure (PP from 110.7 ± 2.4 to 125.3 ± 2.8 mmHg after 30 minutes. This effect was accompanied by an increased renal vascular resistance (RVR from 5.4 ± 0.1 to 6.2 ± 0.2 mmHg/mL.g-1.min-1. We observed decreases in urinary flow (UF from 0.13 ± 0.01 to 0.05 ± 001 mL.g-1.min-1 and glomerular filtration rate (GFR from 0.66 ± 0.06 to 0.18 ± 0.02 mL.g-1.min-1. Crtx did not change PP or RVR, but diminished GFR (from 0.65 ± 0.05 to 0.26 ± 003 mL.g-1.min-1 and UF (from 0.11 ± 0.008 to 0.09 ± 0.008 mL.g-1.min-1. Both CDCmV and Crtx reduced the percentage of tubular transport of sodium, chloride and potassium. The cytotoxicity of these substances against MDCK cells was tested by the MTT method: only CDCmV caused a decrease in the cell viability with an IC50 of 5.4 µg/mL. In endothelium-intact isolated aortic rings, CDCmV (0.1 to 30 µg/mL increased the sustained phenylephrine-induced contraction to a value of 130.0 ± 6.6% of its corresponding control, but showed a relaxant effect in endothelium-denuded preparations. Similar results were observed in aortic rings contracted with potassium (40 mM. Crtx was ineffective in aortic ring assays. Thus, it is reasonable to suggest that the renal effects induced by the CDCmV may be due to its influence on the endothelium's ability to release factors that can alter the contractile behavior of vascular smooth muscle. In conclusion, CDCmV is toxic to kidney cells. It changes parameters of the renal function including the glomerular filtration rate, renal vascular resistance and tubular transport. The actions induced by CDCmV also involve endothelium-dependent vasoactive properties. Their effects may be only partially attributed to Crtx.

  1. Biochemical and biological characterization of two serine proteinases from Colombian Crotalus durissus cumanensis snake venom.

    Science.gov (United States)

    Patiño, Arley Camilo; Pereañez, Jaime Andrés; Gutiérrez, José María; Rucavado, Alexandra

    2013-03-01

    Two clotting serine proteinases, named Cdc SI and Cdc SII, were isolated and characterized for the first time from Colombian Crotalus durissus cumanensis snake venom. The enzymes were purified using two chromatographic steps: molecular exclusion on Sephacryl S-200 and RP-HPLC on C8 Column. The molecular masses of the proteins, determined by MALDI-TOF mass spectrometry, were 28,561.4 and 28,799.2 Da for Cdc SI and Cdc SII, respectively. The aim of the present study was to evaluate enzymatic, coagulant and toxic properties of the two enzymes. The serine proteinases hydrolyzed specific chromogenic substrate (BaPNA) and exhibited a Michaelis-Menten behavior. Cdc SI had V(max) of 0.038 ± 0.003 nmol/min and K(M) of 0.034 ± 0.017 mM, while Cdc SII displayed values of V(max) of 0.267 ± 0.011 nmol/min and K(M) of 0.145 ± 0.023 mM. N-terminal sequences were VIGGDEXNIN and VIGGDICNINEHNFLVALYE for Cdc SI and Cdc SII, respectively. Molecular masses, N-terminal sequences, inhibition assays, and enzymatic profile suggest that Cdc SI and Cdc SII belong to the family of snake venom thrombin-like enzymes. These serine proteinases differed in their clotting activity on human plasma, showing a minimum coagulant dose of 25 μg and 0.571 μg for Cdc SI and Cdc SII, respectively. Enzymes also showed coagulant activity on bovine fibrinogen and degraded chain α of this protein. Toxins lack hemorrhagic and myotoxic activities, but are capable to induce defibrin(ogen)ation, moderate edema, and an increase in vascular permeability. These serine proteinases may contribute indirectly to the local hemorrhage induced by metalloproteinases, by causing blood clotting disturbances, and might also contribute to cardiovascular alterations characteristic of patients envenomed by C. d. cumanensis in Colombia.

  2. Assessing the influence of mechanical ventilation on blood gases and blood pressure in rattlesnakes

    DEFF Research Database (Denmark)

    Bertelsen, Mads F.; Buchanan, Rasmus; Jensen, Heidi M.

    2015-01-01

    , randomized trial. ANIMALS: Twenty one fasted adult South American rattlesnakes (Crotalus durissus terrificus). METHODS: Snakes were anesthetized with propofol (15 mg kg(-1) ) intravenously, endotracheally intubated and assigned to one of four ventilation regimens: Spontaneous ventilation, or mechanical...

  3. Device for craniocervical isolation in rabbits Dispositivo para isolamento crânio-cervical em coelhos

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Cláudio Santana Ivo

    2009-08-01

    Full Text Available PURPOSE: To evaluate the craniocervical isolation collar, for use in rabbits, with regard to the following aspects: effectiveness of the craniocervical attachment for up to 120 hours; ease of handling; freedom of the animal to move about and ingest food; and the physical integrity of the animal during and after use of the device. METHODS: Starting from an Elizabethan collar, a craniocervical collar was prepared for use in rabbits with the following modifications: a wide cut in the device in the shape of a half-moon, coinciding with the animal's mouth; inner division of the device into two compartments to individually isolate and immobilize the ears; multiple perforations in the upper compartment for better ventilation; adaptation of the cervical-thoracic band to attach the collar to the cervical region, keeping the fasteners on the animal's back. The device was used on 18 male New Zealand rabbits for up to 120 consecutive hours. RESULTS: The device was effective in the craniocervical isolation and separation of ears in rabbits without interfering with the animals' respiration, ability to swallow food, or causing physical trauma, while allowing the animals to move about freely and rest comfortably. Attaching and removing the device was easy and quick and it remained in place for up to 120 hours without the need to reposition it. CONCLUSION: The modified craniocervical isolation collar made it possible to conduct the experiment with isolation of the rabbits' ears, ease of handling, and without causing limitations in relation to the animals' ability to eat and move about freely.OBJETIVO: Avaliar um colar de isolamento crânio-cervical, para uso em coelhos, quanto aos seguintes aspectos: eficácia da fixação crânio-cervical em até 120 h; facilidade de manuseio; liberdade do animal para deambular e ingerir alimentos; integridade física do animal durante e depois do uso do dispositivo. MÉTODOS: A partir do colar elizabetano confeccionou-se um

  4. Isolamento reprodutivo entre Australorbis glabratus e A. nigricans Reproductive isolation between Australorbis glabratus and A. nigricans

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    W. Lobato Paraense

    1955-12-01

    Full Text Available Foram feitas provas de cruzamento entre espécimes de uma população de A. glabratus e de outra de A. nigricans, utilizando o fator de albinismo como mercador genético. O resultado dessas provas revelou completo isolamento reprodutivo entre ambas, permitindo separá-las como boas espécies de acôrdo com o critério biológico.Crossing experiments were made between specimens from one population of A. glabratus and another of A. nigricans, the factor of albinism having been used as genetic marker. The results of those experiments revealed a complete reproductive isolation between both population, thus indicating their specific distinctness according to the biological criterion.

  5. Isolamento de Arcanobacterium pyogenes de granuloma actinomicóide em bovino

    OpenAIRE

    Curcio Bruna da Rosa; Gomes Fabiane Resende; Melo Dário Milanez; Raffi Margarida Buss; Riet-Correa Franklin; Ladeira Sílvia Regina Leal

    2002-01-01

    Foi observada em um bovino com suspeita de lechiguana, uma lesão arredondada de consistência dura na região sub-mandibular que media 12x11x7cm. Foram realizadas biópsias cirúrgicas para estudos bacteriológico e histológico, teste de tuberculinização intra-dérmico e coleta de sangue, a fim de realizar o teste de imunodifusão radial para o diagnóstico de lechiguana. Posteriormente, foi realizada eutanásia e necropsia do animal. No resultado das biópsias, não se obteve isolamento bacteriano e o ...

  6. Meio semi-seletivo para isolamento de Xanthomonas campestris pv. viticola

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Peixoto Ana Rosa

    2006-01-01

    Full Text Available O cancro bacteriano causado por Xanthomonas campestris pv. viticola é a fitobacteriose mais importante da videira no Submédio São Francisco. O isolamento de X. campestris pv. viticola de tecidos vegetais infectados é dificultado pela presença de contaminantes bacterianos, entre os quais Microbacterium barkeri. Objetivando-se a formulação de meio de cultura semi-seletivo, 22 isolados de X. campestris pv. viticola foram testados com relação a 30 antibióticos. O meio semi-seletivo NYDAM (extrato de carne 3, peptona 5, glicose 10, extrato de levedura 5, ágar 18 e ampicilina 0,1 em g L-1 inibiu M. barkeri e bactérias fitopatogênicas podendo ser utilizado para isolar X. campestris pv. viticola de hospedeiros com infecção natural em campo.

  7. Isolamento e eficiência de plaqueamento de protoplastos de citros

    OpenAIRE

    COSTA MARIA ANGÉLICA PEREIRA DE CARVALHO; MOURÃO FILHO FRANCISCO DE ASSIS ALVES; MENDES BEATRIZ MADALENA JANUZZI

    2002-01-01

    As recentes ferramentas biotecnológicas para o melhoramento in vitro de citros incluem a hibridação somática por fusão de protoplastos. A otimização dos protocolos de isolamento, plaqueamento e cultura de protoplastos, fundamental para maior eficiência na produção de híbridos somáticos, foi avaliada em 11 variedades cítricas. As soluções enzimáticas testadas foram: 1. celulase Onozuka RS, 1%; macerase R-10, 1%, pectoliase Y-23, 0,2%; 2. celulase Onozuka R-10, 0,2 %; macerase R-10, 0,3%; drise...

  8. Isolamento e eficiência de plaqueamento de protoplastos de citros

    OpenAIRE

    COSTA MARIA ANGÉLICA PEREIRA DE CARVALHO; MOURÃO FILHO FRANCISCO DE ASSIS ALVES; MENDES BEATRIZ MADALENA JANUZZI

    2002-01-01

    As recentes ferramentas biotecnológicas para o melhoramento in vitro de citros incluem a hibridação somática por fusão de protoplastos. A otimização dos protocolos de isolamento, plaqueamento e cultura de protoplastos, fundamental para maior eficiência na produção de híbridos somáticos, foi avaliada em 11 variedades cítricas. As soluções enzimáticas testadas foram: 1. celulase Onozuka RS, 1%; macerase R-10, 1%, pectoliase Y-23, 0,2%; 2. celulase Onozuka R-10, 0,2 %; macerase R-10, 0,3%; drise...

  9. Isolamento di Brucella suis biovariante 2 da un cinghiale in Abruzzo, Italia

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Fabrizio De Massis

    2012-12-01

    Full Text Available Un cinghiale selvatico femmina, di circa due anni di età, è stato trovato morto dai Servizi Veterinari a Pianola di Roio a L'Aquila, Provincia situata nella Regione Abruzzo nell'Italia centrale. La carcassa è stata conferita all'Istituto Zooprofilattico Sperimentale dell'Abruzzo e del Molise "G. Caporale" di Teramo per l'esecuzione dell'esame autoptico. Dai linfonodi sotto-mandibolari di questo esemplare è stato isolato un ceppo di Brucella suis biovariante 2. Questa è la prima segnalazione d'isolamento di B. suis nella Regione Abruzzo. Diversi autori hanno accettato, in passato, l'ipotesi che B. suis biovariante 2 sia stata introdotta in Italia attraverso l'importazione di lepri provenienti dai paesi europei in cui l'infezione è endemica nelle popolazioni selvatiche. Questa considerazione ha portato le autorità italiane a rafforzare i controlli esistenti sulle lepri selvatiche importate a scopo di ripopolamento. Tuttavia, attualmente, non è in vigore alcuna disposizione (né lo è stata in passato per il controllo della brucellosi nei cinghiali movimentati, sia a livello nazionale che europeo. L'isolamento di B. suis biovariante 2 da cinghiali in altre Regioni italiane geograficamente distanti potrebbe suggerire che questa specie, piuttosto che le lepri importate, possa essere stata la fonte d'introduzione dell'infezione in tali aree. Le norme nazionali ed europee di gestione della brucellosi nella fauna selvatica dovrebbero essere indirizzate al controllo dello stato di salute dei cinghiali negli allevamenti prima delle movimentazioni o del rilascio, con l'obiettivo di prevenire la diffusione di questo patogeno in territori indenni.

  10. Isolamento e eficiência de plaqueamento de protoplastos de citros

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    COSTA MARIA ANGÉLICA PEREIRA DE CARVALHO

    2002-01-01

    Full Text Available As recentes ferramentas biotecnológicas para o melhoramento in vitro de citros incluem a hibridação somática por fusão de protoplastos. A otimização dos protocolos de isolamento, plaqueamento e cultura de protoplastos, fundamental para maior eficiência na produção de híbridos somáticos, foi avaliada em 11 variedades cítricas. As soluções enzimáticas testadas foram: 1. celulase Onozuka RS, 1%; macerase R-10, 1%, pectoliase Y-23, 0,2%; 2. celulase Onozuka R-10, 0,2 %; macerase R-10, 0,3%; driselase, 0,1%; 3. celulase Onozuka R-10, 1%; macerase R-10, 0,2%; driselase, 0,1%. O plaqueamento dos protoplastos foi realizado em meio de cultura EME 0,7 M, nas densidades de 2 x 10(4; 5 x 10(4; 10(5; 2 x 10(5 e 3 x 10(5 protoplastos.mL-1, no escuro, a 25 ± 1degreesC. A solução enzimática 1 possibilitou melhor rendimento no isolamento de protoplastos para a maioria das variedades, exceto para o limão-'Cravo', onde o melhor rendimento foi obtido na solução enzimática 3, e para as laranjas-doces 'Valência' e 'Succari', que apresentaram maiores rendimentos na solução enzimática 2. A eficiência final de plaqueamento, avaliada aos 90 dias de cultivo, foi superior nas densidades de 10(5 e 2 x 10(5 protoplastos.mL-1, para todas as variedades. O desenvolvimento de embriões somáticos foi observado em todas as variedades, exceto para tangor 'Murcote'.

  11. Influência da temperatura corporal de cascavéis (Crotalus durissus submetidas à anestesia com cetamina Influence of body temperature on rattlesnakes (Crotalus durissus anesthetized with ketamine

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Adriano B. Carregaro

    2009-12-01

    Full Text Available O estudo objetivou verificar a influência da temperatura corporal nos parâmetros fisiológicos e nos períodos de indução e recuperação anestésicos de cascavéis (Crotalus durissus anestesiadas com cetamina. Os animais foram previamente submetidos à hipotermia (HIPO (The aim of the study was to verify the influence of the body temperature under physiological values and latency and recovery times on rattlesnakes anesthetized with ketamine. The animals were previously submitted to hypothermia (HYPO (<22°C and normothermia (30°C (NORMO and then, anesthetized with 80 mg/kg IM of ketamine. Latency and recovery times were evaluated by head tonus, muscular tonus and righting reflex. Heart rate (HR, time of apnea and body temperature were measured before and 5, 10, 15, 30, 60, 90 and 120 minutes after ketamine administration. Blood gases parameters were measured before, 30 and 60 minutes. It was not observed difference on latency time in both groups. The recovery time was higher on HYPO (5,5 hours compared to NORMO (3,5 hours. HR was higher on NORMO compared to HYPO. Time of apnea was the same pattern on both groups. Compared to basal levels, time of apnea was shorter between 5 to 30 min on both groups. Respiratory acidosis was observed only at 0 min in NORMO. SvO2 was higher after 30 min, the same as with PvO2 in both groups. PvCO2 reduced after 30 min in both groups. It was evident that body temperature exerts intense influence on the recovery time on rattlesnakes anesthetized with ketamine.

  12. EFECTO DEL AZUL DE METILENO EN LA HIPOTENSIÓN Y BRADICARDIA ASOCIADAS A LA ADMINISTRACIÓN DE UNA DOSIS LETAL DEL VENENO TOTAL DE CASCABEL VENEZOLANA (Crotalus durissus cumanensis) EN RATAS

    DEFF Research Database (Denmark)

    Briceno, Elena; Zerpa, Hector; Ascanio, Elias

    2010-01-01

    The effects of pre treatment with methylene blue (MB) on the cardiovascular effect caused by the administration of total venom (TV) of Crotalus durissus cumanensis was studied in adult rats, allocated into two groups: group I, six rats treated with TV (single dose: 1.5 mg/kg, IV) and group II, si...

  13. EFECTO DEL AZUL DE METILENO EN LA HIPOTENSIÓN Y BRADICARDIA ASOCIADAS A LA ADMINISTRACIÓN DE UNA DOSIS LETAL DEL VENENO TOTAL DE CASCABEL VENEZOLANA (Crotalus durissus cumanensis) EN RATAS

    DEFF Research Database (Denmark)

    Briceno, Elena; Zerpa, Hector; Ascanio, Elias

    2010-01-01

    The effects of pre treatment with methylene blue (MB) on the cardiovascular effect caused by the administration of total venom (TV) of Crotalus durissus cumanensis was studied in adult rats, allocated into two groups: group I, six rats treated with TV (single dose: 1.5 mg/kg, IV) and group II, si...

  14. Isolamento de Arcanobacterium pyogenes de granuloma actinomicóide em bovino

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Curcio Bruna da Rosa

    2002-01-01

    Full Text Available Foi observada em um bovino com suspeita de lechiguana, uma lesão arredondada de consistência dura na região sub-mandibular que media 12x11x7cm. Foram realizadas biópsias cirúrgicas para estudos bacteriológico e histológico, teste de tuberculinização intra-dérmico e coleta de sangue, a fim de realizar o teste de imunodifusão radial para o diagnóstico de lechiguana. Posteriormente, foi realizada eutanásia e necropsia do animal. No resultado das biópsias, não se obteve isolamento bacteriano e o estudo histológico não foi conclusivo. Os testes de tuberculinização e de imunodifusão apresentaram resultado negativo. Na necropsia, constatou-se que a lesão consistia de um nódulo, formado por uma cápsula de tecido conjuntivo envolvendo uma massa esbranquiçada com grânulos amarelados de até 3mm de diâmetro. Através de histologia, constataram-se piogranulomas multifocais, com um infiltrado de neutrófilos circundando rosetas formadas por colônias bacterianas no centro e corpúsculos de Splendore-Hoeppli na periferia; ao redor desse infiltrado purulento observaram-se células epitelióides e tecido fibroso infiltrado por linfócitos. Arcanobacterium pyogenes foi isolado em cultura pura do material obtido na necropsia. Conclui-se que A. pyogenes poderia ter participação na etiologia de granuloma com características clínicas e patológicas semelhantes à lechiguana, tuberculose e actinobacilose.

  15. Isolamento de amebas de vida livre potencialmente patogênicas em poeira de hospitais

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Silva Maria Aparecida da

    2003-01-01

    Full Text Available OBJETIVO: Observar a ocorrência de amebas de vida livre dos gêneros Acanthamoeba e Naegleria em amostras de poeira coletadas em hospitais. MÉTODOS: Foram coletadas 132 amostras de poeira em dois hospitais do município de Presidente Prudente, São Paulo. Os locais da coleta foram: Unidade de Terapia Intensiva, Centro Cirúrgico, Isolamento de Moléstias Infecciosas, Berçário, Emergência e Cozinha. As amostras foram semeadas em três meios de cultura: meio de ágar não nutriente com Escherichia coli, meio de ágar infusão de soja e microcultivo em meio de Pavlova modificado por Giazzi. As amebas isoladas foram identificadas segundo critérios morfológicos. RESULTADOS: O índice geral de positividade para amebas de vida livre, potencialmente patogênicas, dos gêneros Acanthamoeba e Naegleria, foi de 45,5%, sendo positivas 41,6% das amostras de poeira coletadas no hospital universitário e 50% no hospital estadual. Obtiveram-se 45,5% de positividade do gênero Acanthamoeba e 3,8% para amebas do gênero Naegleria. CONCLUSÕES: As amebas de vida livre, potencialmente patogênicas, estavam presentes em todos os ambientes estudados dos dois hospitais, sendo que as espécies do gênero Acanthamoeba foram as isoladas com maior freqüência.

  16. Isolamento de amebas de vida livre potencialmente patogênicas em poeira de hospitais

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Maria Aparecida da Silva

    2003-04-01

    Full Text Available OBJETIVO: Observar a ocorrência de amebas de vida livre dos gêneros Acanthamoeba e Naegleria em amostras de poeira coletadas em hospitais. MÉTODOS: Foram coletadas 132 amostras de poeira em dois hospitais do município de Presidente Prudente, São Paulo. Os locais da coleta foram: Unidade de Terapia Intensiva, Centro Cirúrgico, Isolamento de Moléstias Infecciosas, Berçário, Emergência e Cozinha. As amostras foram semeadas em três meios de cultura: meio de ágar não nutriente com Escherichia coli, meio de ágar infusão de soja e microcultivo em meio de Pavlova modificado por Giazzi. As amebas isoladas foram identificadas segundo critérios morfológicos. RESULTADOS: O índice geral de positividade para amebas de vida livre, potencialmente patogênicas, dos gêneros Acanthamoeba e Naegleria, foi de 45,5%, sendo positivas 41,6% das amostras de poeira coletadas no hospital universitário e 50% no hospital estadual. Obtiveram-se 45,5% de positividade do gênero Acanthamoeba e 3,8% para amebas do gênero Naegleria. CONCLUSÕES: As amebas de vida livre, potencialmente patogênicas, estavam presentes em todos os ambientes estudados dos dois hospitais, sendo que as espécies do gênero Acanthamoeba foram as isoladas com maior freqüência.

  17. Isolamento de Gluconacetobacter spp. em diferentes tipos de solos Isolation of Gluconacetobacter spp. in different soil types

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Carla Cristiane Rocha dos Santos

    2006-01-01

    Full Text Available O objetivo deste trabalho foi o aprimoramento da técnica de imunocaptura para utilização em amostras de solo contendo altos teores de argila e sua aplicação no isolamento de estirpes de Gluconacetobacter diazotrophicus a partir de amostras de solo cultivado com cana-de-açúcar e café. A técnica de imunocaptura foi aplicada com sucesso no isolamento de bactérias de amostras de solo. A modificação do método de imunocaptura com Al2(SO43 permitiu a sua aplicação em amostras de solo argiloso pela floculação da argila em suspensão. Este método mostrou-se efetivo no isolamento de G. diazotrophicus inoculada em amostras de solo arenoso e argiloso aos cinco dias após a inoculação. A sensibilidade máxima do método em isolar células de G. diazotrophicus mediante cultura pura foi de 10³ células mL-1 . A modificação da técnica permitiu o isolamento de Gluconacetobacter spp. de amostras de solo colhidas a 50 cm das raízes de plantas de café, mas não de amostras de solo colhidas à mesma distância de plantas de cana-de-açúcar.The objective of this work was to improve the immunocapture method for the application to soil samples containing high levels of clay particles and to utilize it for the isolation of Gluconacetobacter diazotrophicus strains from soil cultivated with sugarcane and coffee. The immunocapture technique was applied successfully for isolation of bacterium from soil samples. The modified immunocapture technique with Al2(SO43 allowed the application of the method using clayed soil samples by the flocculation of the suspended clay. It proved to be effective for isolation of G. diazotrophicus inoculated in sterile sandy and clay soils five days after inoculation. The maximum sensitivity of the method to isolate G. diazotrophicus cells, using pure culture, was 10³ cells mL-1. The modification of the technique allows the capture of Gluconacetobacter spp. from soil samples near the coffee plants but not from

  18. Isolamento de bactérias produtoras de enzimas de interesse em processos biotecnológicos

    OpenAIRE

    Sacco, Laís Postai [UNESP

    2013-01-01

    Os micro-organismos representam uma importante fonte de produtos naturais bioativos diversos. Esses organismos produzem enzimas que exercem papel importante em processos industriais com alto valor econômico agregado ou ambientalmente desejado. Apresentam uma série de vantagens em seu uso e produção. No presente trabalho foram utilizados consórcios degradadores de resíduos da biomassa lignocelulolítica, visando o isolamento e identificação de micro-organismos de interesse biotecnológico. De ac...

  19. Isolamento da Yersinia pestis nos focos pestosos do Nordeste do Brasil no período de 1966 a 1982

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Alzira Maria Paiva de Almeida

    1985-08-01

    Full Text Available No período de 1966 a 1982 foram isoladas 861 cepas de Yersinia pestis sendo 471 originadas de material de roedores e outros pequenos mamíferos, 236 de lotes de pulgas, 2 de lotes de Ornithodorus e 152 de seres humanos dos focos pestosos do Nordeste do Brasil. Entre os roedores, a espécie que concorreu para o maior número de isolamentos foi o Zygodontomys lasiurus pixuna que, também, forneceu o maior número de lotes de pulgas naturalmente infectados, principalmente do gênero Polygenis. O isolamento da Yersinia pestis de material proveniente de 13 Municípios do Estado de Pernambuco, 7 do Ceará, 3 da Paraíba, 1 do Piauí e 1 da Bahia, evidencia que o problema da peste nos focos brasileiros é bastante atual e merecedor de atenção. O maior número de cepas isoladas e de localidades afetadas, registradas no Estado de Pernambuco não significa maior incidência da peste no mesmo, mas é conseqüência da pesquisa mais intensa da Yersinia pestis e da existência de laboratórios melhor preparados para o seu diagnóstico neste Estado.

  20. Avaliação da resposta inflamatória hematológica em cascavéis (Crotalus durissus Linnaeus, 1758 inoculadas com BCG Assessment of blood inflammatory response in BCG stimulated rattlesnakes (Crotalus durissus Linnaeus, 1758

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Wellington Bandeira da Silva

    2009-12-01

    Full Text Available A criação de serpentes peçonhentas em cativeiro para produção de soros antipeçonhas possui crescente importância para a saúde pública devido ao aumento do número de notificações de acidentes ofídicos a cada ano no Brasil. Iniciado no século XX, ainda hoje essa atividade apresenta alguns desafios como a instalação de doenças no plantel. O hemograma é um exame de triagem clínica que auxilia no diagnóstico de diversas moléstias que acometem diferentes espécies de animais, no entanto ainda pouco estudado em serpentes. A caracterização das alterações hematológicas em cascavéis inoculadas experimentalmente com BCG pode servir de base na utilização deste exame no auxílio ao diagnóstico de infecções bacterianas na espécie. Dessa forma, foram realizados exames hematológicos em 10 serpentes da espécie Crotalus durissus pertencentes ao plantel da Divisão de Herpetologia do Instituto Vital Brazil. Os animais foram divididos em dois grupos (Grupos 1 e 2, homogêneos entre si em relação ao peso e proporção sexual. Os dois grupos foram inoculados com BCG e submetidos à coleta de sangue antes da inoculação e em três momentos pós-inoculação (3º, 5º, e 7º dias para o Grupo 1 e 11º, 17º e 21º dias para o Grupo 2. O hemograma foi realizado por método semidireto pela utilização de líquido de Natt e Herrick e as lâminas foram coradas pelo Giemsa. Observou-se anemia discreta, com redução dos valores de concentração de hemoglobina corpuscular média e da hemoglobina globular média no Grupo 1 que foi relacionada à doença inflamatória. A trombocitopenia observada no Grupo 2 sugeriu a atuação deste tipo celular em processos inflamatórios. Um único animal do Grupo 1 apresentou granulocitose e alguns animais apresentaram discreta azurofilia. Observaram-se alterações morfológicas nos leucócitos. Os granulócitos apresentaram granulações grosseiras e os azurófilos apresentaram aumento de tamanho e

  1. Intraspecies differences in hemostatic venom activities of the South American rattlesnakes, Crotalus durissus cumanensis, as revealed by a range of protease inhibitors.

    Science.gov (United States)

    Salazar, Ana M; Aguilar, Irma; Guerrero, Belsy; Girón, María E; Lucena, Sara; Sánchez, Elda E; Rodríguez-Acosta, Alexis

    2008-09-01

    Crotalus durissus cumanensis is an endemic rattlesnake found in Venezuela and Colombia. In this study, a comparative analysis of hemorrhagic, coagulation and fibrino(geno)lytic activities in the presence or absence of protease inhibitors was performed with venoms of the same species Crotalus durissus cumanensis, from seven geographical regions of Venezuela (Lagunetica, Santa Teresa, Carrizales, Guarenas, Anzoátegui, Margarita and Maracay). Lagunetica, Carrizales and Anzoátegui venoms induced hemorrhagic activity. All venoms, except that of snakes from the Carrizales region presented thrombin-like activity, which was inhibited completely by phenylmethanesulfonyl fluoride and ethylene glycol-bis-N, N,N',N'-tetraacetic acid. This effect of the latter could be explained by the high chelant calcium effect, which is a cofactor for the fibrin polymerization process. Soybean trypsin inhibitor was effective on Santa Teresa venom. Antithrombin III/Hep complex and phenantroline partially inhibited this activity in all venoms except Margarita and Anzoátegui, respectively, which were not inhibited. Serine protease inhibitors were more effective against thrombin, kallikrein and plasmin-like amidolytic activities. Additionally, metalloprotease inhibitors significantly inhibited the t-PA-like amidolytic activity and completely the hemorrhagic and fibrino(geno)lytic activities. In conclusion, the thrombin-like activity observed in these venoms was partially reduced by serine protease inhibitors, indicating the possible presence of catalytic domains in those enzymes that do not interact with these inhibitors. Using protease inhibitors on venom hemostatic activities could contribute to our understanding of the active components of snake venom on the hemostatic system, and further reveal the intraspecies variation of venoms, which is important in the treatment of envenomation, and in addition represents an interesting model for the study of venom in hemostasis.

  2. Thalidomide and pentoxifylline block the renal effects of supernatants of macrophages activated with Crotalus durissus cascavella venom

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    A.M.C. Martins

    2004-10-01

    Full Text Available Because thalidomide and pentoxifylline inhibit the synthesis and release of tumor necrosis factor-alpha (TNF-alpha, we determined the effect of these drugs on the renal damage induced by supernatants of macrophages activated with Crotalus durissus cascavella venom in order to identify the role of TNF-alpha in the process. Rat peritoneal macrophages were collected with RPMI medium and stimulated in vitro with C.d. cascavella venom (10 µg/ml in the absence and presence of thalidomide (15 µM or pentoxifylline (500 µM for 1 h and washed and kept in culture for 2 h. Supernatant (1 ml was tested on an isolated perfused rat kidney (N = 6 for each group. The first 30 min of each experiment were used as control. The supernatant was added to the perfusion system. All experiments lasted 120 min. The toxic effect of the preparation of venom-stimulated macrophages on renal parameters was determined. At 120 min, thalidomide (Thalid and pentoxifylline (Ptx inhibited (P < 0.05 the increase in perfusion pressure caused by the venom (control = 114.0 ± 1.3; venom = 137.1 ± 1.5; Thalid = 121.0 ± 2.5; Ptx = 121.4 ± 4.0 mmHg, renal vascular resistance (control = 4.5 ± 0.2; venom = 7.3 ± 0.6; Thalid = 4.5 ± 0.9; Ptx = 4.8 ± 0.6 mmHg/ml g-1 min-1, urinary flow (control = 0.23 ± 0.001; venom = 0.44 ± 0.01; Thalid = 0.22 ± 0.007; Ptx = 0.21 ± 0.009 ml g-1 min-1, glomerular filtration rate (control = 0.72 ± 0.06; venom = 1.91 ± 0.11; Thalid = 0.75 ± 0.04; Ptx = 0.77 ± 0.05 ml g-1 min-1 and the decrease in percent tubular sodium transport (control = 77.0 ± 0.9; venom = 73.9 ± 0.66; Thalid = 76.6 ± 1.1; Ptx = 81.8 ± 2.0%, percent tubular chloride transport (control = 77.1 ± 1.2; venom = 71.4 ± 1.1; Thalid = 77.6 ± 1.7; Ptx = 76.8 ± 1.2%, and percent tubular potassium transport (control = 72.7 ± 1.1; venom = 63.0 ± 1.1; Thalid = 72.6 ± 1.0; Ptx = 74.8 ± 1.0%, 30 min before and during the stimulation of macrophages with C.d. cascavella venom

  3. Em prol do sacrifício do isolamento: lepra e filantropia na Argentina e no Brasil, 1930-1946

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    José Augusto Leandro

    2013-09-01

    Full Text Available O Patronato de Leprosos, na Argentina, e a Federação das Sociedades de Assistência aos Lázaros e Defesa Contra a Lepra, no Brasil, foram instituições criadas com o objetivo de auxiliar doentes do mal de lázaro e suas famílias. Capitaneadas por mulheres da elite, as entidades, a despeito das singularidades dos seus contextos nacionais, agiram de maneira similar, ambas complementando as políticas de saúde direcionadas à lepra em seus respectivos países. Este artigo pretende demonstrar as semelhanças nas estratégias de atuação das duas instituições filantrópicas que, durante as décadas de 1930 e 1940, agiram em consonância com os médicos defensores do isolamento compulsório.

  4. Isolation of Sporothrix schenkii from the nails of healthy cats Isolamento de Sporothrix schenckii de unhas de gatos sadios

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Lorena Leonardo de Souza

    2006-09-01

    Full Text Available Many cases of sporotrichosis in cats were diagnosed in the town of Rio Grande, RS, Brazil, caused mainly by inoculation due to scratches. In this work, we evaluated the frequency of Sporothrix schenckii in the nails of healthy cats living together with cats showing clinical sporotrichosis. The isolation of the fungus was carried out pressing unwashed nails of the forelimbs of 24 cats (48 paws directly onto the surface of Mycobiotic Agar in Petri dishes. S. schenckii was isolated from seven (29.1% cats. The procedure for isolation of the fungus was simpler than methods that require sedation and cuts of the nails.Um número elevado de casos de esporotricose em gatos foi diagnosticado na cidade de Rio Grande/RS/Brasil, e na maioria dos animais, a doença ocorreu após inoculação do fungo a partir de arranhões. Nesse estudo, avaliou-se a freqüência de Sporothrix schenckii nas unhas de gatos saudáveis que conviviam com gatos com esporotricose. O isolamento do fungo foi realizado a partir da impressão das unhas dos membros torácico direito e esquerdo, de 24 gatos (48 patas, diretamente em placas de Petri com Agar Mycobiotic sem lavagem prévia das unhas. S. schenckii foi isolado de sete gatos (29,1%. O procedimento adotado para o isolamento do fungo foi mais simples que os procedimentos que requerem sedação e corte das unhas do animal.

  5. Avaliação da interação de compostos ativos hidratantes com modelo de biomembrana de Crotalus durissus por meio de calorimetria exploratória diferencial e espectroscopia RAMAN

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    MICHELE TAKAOKA

    2010-06-01

    Full Text Available O objetivo foi verificar as alterações no estrato córneo em modelos alternativos de membrana após a aplicação de ativos hidratantes envolvendo métodos biofísicos. O modelo de biomembrana utilizado foi a muda de pele de Crotalus durissus e os ativos hidratantes foram: uréia, silício orgânico, extrato vegetal de Imperata cylindrica, reação de xilitol e glicose e componentes de NMF. Os resultados da avaliação das alterações do modelo por meio de Espectroscopia Raman com Transformada de Fourier sugerem que os ativos hidratantes confirmam segurança necessária, pois não alteraram de forma acentuada a estrutura do estrato córneo. Utilizando-se Calorimetria Exploratória Diferencial pode-se indicar que a solução de silício orgânico e o gel hidrofílico com uréia apresentaram melhor poder hidratante. Palavras-chave: Estrato córneo. Hidratação. Métodos biofísicos. Crotalus durissus. FT-Raman, DSC. ABSTRACT Study of the interaction of moisturizers with a Crotalus durissus biomembrane by differential scanning calorimetry and RAMAN spectroscopy The objective of this research was to use biophysical techniques to investigate the alterations induced in a biomembrane model of the stratum corneum by the application of moisturizers. The biomembrane was obtained from the skin shed by the rattlesnake Crotalus durissus and the active moisturizing compounds were: urea, dimethylsilanol hyaluronate, Imperata cylindrical plant extract, carbohydrates and natural moisturizing factors (NMF components. Results from FT-Raman spectroscopy suggested that the moisturizers were safe, since they did not promote modifications in the structure of the stratum corneum. Differential scanning calorimetry results indicated that the solution containing the organic silicon compound and the gel with urea showed the best hydrating effects on the stratum corneum. Keywords: Stratum corneum. Hydration. Biophysical techniques. Crotalus durissus

  6. Isolamento do vírus rábico em morcego insetívoro, Nyctinomops macrotis, no Município de Diadema, SP (Brasil

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Passos Estevão C.

    1998-01-01

    Full Text Available Foi realizado o isolamento do vírus rábico em morcego insetívoro Nyctinomops macrotis capturado próximo à represa Billings e à mata Atlântica, no Município de Diadema, SP (Brasil. A pesquisa do antígeno rábico no tecido cerebral do morcego apresentou resultado positivo na reação de imunofluorescência direta. O isolamento do vírus rábico no tecido cerebral e nas glândulas salivares do morcego foi obtido através da inoculação intracerebral em camundongos. O Município de Diadema não apresentava casos de raiva animal desde 1982, sendo este o primeiro relato da presença do vírus rábico em morcego insetívoro.

  7. Isolamento de Aerobacter (Campylobacter cryaerophila de fetos suínos abortados Isolation of Aerobacter (Campylobacter cryaerophila from aborted pig fetuses

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Sérgio José de Oliveira

    1995-01-01

    Full Text Available Foram examinados 6 fetos suínos abortados no terço final da gestação, provenientes de duas granjas do Rio Grande do Sul, Brasil. Os órgãos internos (rim e fígado de cada feto foram inoculados em meio semi-sólido de Tween 80/40 LH, visando o isolamento de leptospiras. Os tubos foram incubados a 30°C. Foi isolado de todos os materiais um microorganismo, classificado como Arcobacter cryaerophila. Estes foram os primeiros isolamentos desta bactéria no Brasil.Samples of liver and kidney from aborted pig fetuses from two different farms were examined. Samples were cultured in semi-solid leptospira isolation media and incubated at 30°C. Arcobacter cryaerophila was isolated from all the specimens. These were the first reports on the isolation of the microorganism from pigs in Brazil.

  8. Metodologia para expressão da incerteza na medição de isolamento sonoro

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Daiana Paula Freitas Ferreira

    2014-08-01

    Full Text Available 10.12957/cadest.2009.15748Recentemente, a ABNT publicou um conjunto de normas nacionais a serem utilizadas na avaliação do desempenho de edificações de até cinco pavimentos ABNT NBR 15755. Dentre os vários critérios de avaliação, está o desempenho acústico das edificações, que deve atender a requisitos mínimos, considerando uma série de tópicos, entre eles: isolamento de ruídos aéreo. A partir do momento que essas normas entrarem em vigor, profissionais deverão estar capacitados para realizar medições nas edificações e surgirá uma nova discussão: Como os consumidores, potenciais proprietários de um imóvel, poderão comparar os resultados do desempenho de diferentes edificações fornecidos por diferentes profissionais? Quais são as incertezas destas medições? Esse artigo tem como objetivo estabelecer critérios para calcular, avaliar e comparar os valores de incerteza do resultado de medição do parâmetro de isolamento sonoro aéreo, Diferença padronizada de nível (DnT, obtidos através das metodologias propostas no Guia para Expressão da Incerteza de Medição (ISO/IEC GUIDE 98 . Precedendo a estimativa da incerteza de medição, foi estabelecida uma metodologia de validação do conjunto de medições, a fim de evidenciar sua confiabilidade metrológica. Esta metodologia de medição é composta por testes estatísticos, objetivando avaliar a homogeneidade entre médias e entre desvios padrão dos conjuntos de repetições das medições que originaram o resultado da medição.

  9. cDNA and deduced primary structure of basic phospholipase A2 with neurotoxic activity from the venom secretion of the Crotalus durissus collilineatus rattlesnake

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    F.H.R. Fagundes

    2010-03-01

    Full Text Available To illustrate the construction of precursor complementary DNAs, we isolated mRNAs from whole venom samples. After reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR, we amplified the cDNA coding for a neurotoxic protein, phospholipase A2 D49 (PLA2 D49, from the venom of Crotalus durissus collilineatus (Cdc PLA2. The cDNA encoding Cdc PLA2 from whole venom was sequenced. The deduced amino acid sequence of this cDNA has high overall sequence identity with the group II PLA2 protein family. Cdc PLA2 has 14 cysteine residues capable of forming seven disulfide bonds that characterize this group of PLA2 enzymes. Cdc PLA2 was isolated using conventional Sephadex G75 column chromatography and reverse-phase high performance liquid chromatography (RP-HPLC. The molecular mass was estimated using matrix-assisted laser desorption ionization-time-of-flight (MALDI-TOF mass spectrometry. We tested the neuromuscular blocking activities on chick biventer cervicis neuromuscular tissue. Phylogenetic analysis of Cdc PLA2 showed the existence of two lines of N6-PLA2, denominated F24 and S24. Apparently, the sequences of the New World’s N6-F24-PLA2 are similar to those of the agkistrodotoxin from the Asian genus Gloydius. The sequences of N6-S24-PLA2 are similar to the sequence of trimucrotoxin from the genus Protobothrops, found in the Old World.

  10. Isolamento de espécies enterobacterianas em Stomoxys calcitrans Isolation of enterobacterial species in Stomoxys calcitrans

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Bruno Gomes de Castro

    2008-12-01

    Full Text Available Este estudo teve por objetivo relatar o isolamento de espécies enterobacterianas em segmentos de Stomoxys calcitrans coletadas, em propriedades rurais de dois municípios do Estado do Rio de Janeiro, Brasil. Nove das 28 espécies isoladas e identificadas ainda não haviam sido descritas na mosca dos estábulos. Algumas dessas espécies possuem destacado potencial patogênico ao homem e aos animais ou são oportunistas e outras não foram descritas como causadoras de enfermidades de importância médica ou veterinária.This study aimed to report enterobacterial species recovered from body segments of Stomoxys calcitrans collected in dairy farms from counties of Rio de Janeiro State, Brazil. Nine of the isolated and identified species were not yet described in stable flies, according to the worldwide literature. Some of them are known to present pathogenical potential to man and other animals, while others were not described causing diseases of medical or veterinary importance.

  11. First isolation of leptospires from dairy goats in Brazil Primeiro isolamento de leptospiras em caprinos no Brasil

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Walter Lilenbaum

    2007-09-01

    Full Text Available Leptospires have never been recovered from goats in Brazil. Serum samples were obtained from 248 goats from Rio de Janeiro and from the seroreactive animals, urine samples were collected and processed for Leptospira isolation. A total of 52 positive reactions were observed, corresponding to 20.9% of the samples. The most prevalent reactions were to serovars Hardjo (36.5%, Shermani (30.8%, Icterohaemorrhagiae (9.6%, Grippotyphosa (9.6%, Autumnalis (5.8%, Castellonis (3.8% and Bratislava (3.8%. Two strains of Leptospira sp. were isolated, both in the same region, but from different flocks. Presumptive identification based on serologic methods suggests those strains to be from Grippotyphosa serogroup.Leptospiras nunca foram isolados de caprinos no Brasil. Amostras de soros foram obtidas de 248 caprinos no Rio de Janeiro, e, dos animais sororeativos, amostras de urina foram coletadas e processadas para isolamento de leptospiras. Um total de 52 (20,9% reações positivas foi observado. Os serovares mais prevalentes foram Hardjo (36,5%, Shermani (30,8%, Icterohaemorrhagiae (9,6%, Grippotyphosa (9,6%, Autumnalis (5,8%, Castellonis (3,8% e Bratislava (3,8%. Duas estirpes de Leptospira sp. foram isoladas, ambas na mesma região, mas de diferentes rebanhos. A identificação sorológica presuntiva sugere trataram-se de amostras do sorogrupo Grippotyphosa.

  12. Isolamento de Corynebacterium diphtheriae de líquido espermático Isolation of Corynebacterium diphtheriae from sperm

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Thaís Lisbôa Machado

    1989-06-01

    Full Text Available Descrevemos o isolamento de Corynebacterium diphtheriae toxígeno de espermocultura. O microrganismo foi identificado pelo teste de fluorescência sob luz ultravioleta, pesquisa da enzima pirazina-carboxilamidase (Pyz, testes de virulência in vitro e in vivo (imunodifusão radial simples, cultura de células e teste intradérmico em cobaio. A amostra foi inicialmente considerada atoxígena pelo teste de imunodifusão radial simples, mas sua virulência foi observada posteriormente quando os testes acima foram aplicados. Sem adecuada especificação, a amostra poderia ter sido considerada como um "difteróide".The isolation of tosigenic Corynebacterum diphtheriae from sperm is reported. The organism was identified through the investigation of fluorescence under the UV light, the presence of pirazinecarboxilamidase enzyme (Pyz, in vitro and in vivo and virulence methods (single radial immunodiffusion, cell culture, guiena pig intradermic test. The strain was initially cosnsidered montoxinogenic by single radial immunodiffusion, but its virulence was observed afterwards, when we applied the tests already mentioned. The strain could be considered a "Diphtheroid" without adequate specification.

  13. Isolamento e cultivo de protoplastos de porta-enxertos de citros Isolation and growth of citrus rootstock protoplants

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    R.P. de Oliveira

    1995-08-01

    Full Text Available Realizou-se o isolamento e cultivo de protolastos de porta-enxertos de citros das variedades limoeiro Cravo e tangerina Cleópatra. Utilizou-se solução enzimática para a digestão da parede celular de células em suspensão (7 a 10 subcultivos em meio de cultura MT e procedeu-se a purificação criteriosa. O plaqueamento dos protoplastos foi realizado em meio de cultivo KM8p e na molaridade de 0.6 M, sob condições de escuro a 28 ± 1°C, após ajuste para a densidade de 2 x 10s ppts/mL A redução da pressão osmótica do meio de cultivo foi realizada a cada 10 dias na seguinte proporção de meio de cultura KM8p 0.6 M e KM8 (2:1, 1:1, 1:2, 0:3. Com relação aos resultados, obteve-se em média o isolamento de 0.7 x 10(6 ppts / ml de suspensões celulares de tangerina Cleópatra e 0.5 x 1O6 ppts / ml de suspensões de limoeiro Cravo, com uma porcentagem de viabilidade de 86 a 92% para a variedade Cleópatra e de 73 a 80% para o limoeiro Cravo. As divisões celulares começaram a ocorrer por volta do 8° dia após o plaqueamento, sendo obtida uma eficiência inicial de plaqueamento de 9% para a variedade Cleópatra e de 5% para o limoeiro Cravo. Aos 50 dias de cultivo, as colônias foram transferidas para meio semi-sólido MT, onde apresentaram ritmo acelerado de crescimento formando calos.Protoplast isolation and growth of Citrus rootstock v. Cravo lime and Cleópatra mandarin were carried out Enzyme mixture was used to digest cell suspensions 7-10 times, following criterious purification. Protoplast culture was carried out in doplets of semi-solid (agarose 0.6% p/v KM8p medium, in the dark, at 28 ± 1°C following density adjustment to 2 x 10(5 ppts/ml. Osmotic pressure reduction was acomplished for each growth every 10 days with a mixture in equal volumes of KM8p and KM8 medium in ratios of 2:1; 1:1; 1:2 e 0:3. Isolation produced 0.7 x 10(6 ppts/ml for Cleópatra mandarin and 0.5 x 10(6 ppts/ml for Cravo lime, with a viability between 86

  14. Isolamento e regeneração de protoplastos de Magnaporthe grisea Isolation and regeneration of Magnaporthe grisea protoplasts

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Carlos Eduardo Marchi

    2006-09-01

    Full Text Available Protoplastos são ferramentas biológicas importantes para pesquisas em fungos filamentosos, sendo empregados intensamente em transformação genética. O isolamento de protoplastos de Magnaporthe grisea foi facilitado com Novozym 234, contudo, este complexo enzimático encontra-se indisponível no mercado. Assim, objetivou-se comparar a eficiência de enzimas líticas disponíveis comercialmente na obtenção de protoplastos de M. grisea. Paralelamente, analisaram-se estabilizadores osmóticos, tempos de digestão e freqüência de regeneração. Maior produção de protoplastos foi obtida com o uso simultâneo de Lysing Enzymes e Cellulase Onozuka R-10. O uso de 10 ou 15 mg de cada complexo enzimático, em 3 mL de estabilizador osmótico, resultou em maior liberação de protoplastos. O melhor estabilizador osmótico foi MgSO4 1,2 M / NaH2PO4 0,01 M, pH 5,8, seguido por MgSO4 0,8 M / NaH2PO4 0,01 M, pH 5,8. O isolamento de protoplastos foi monitorado a cada 60 minutos, atingindo o máximo após incubação por 3 a 6 horas. No entanto, maior freqüência de regeneração (19,4% foi registrada para protoplastos obtidos após 3 horas de hidrólise enzimática.Protoplasts are important biological tools in filamentous fungi research. Fungal protoplasts have been extensively used in experiments with genetic transformation. Protoplastization of Magnaporthe grisea was accomplished with Novozym 234, however, this enzymatic complex is no commercially available for purchase. Thus, the efficiency of several other commercial enzymes in M. grisea protoplasts preparation was investigated. At the same time, osmotic buffer, digestion time and regeneration rate were also analyzed. The highest protoplasts production was obtained with Lysing Enzymes plus Cellulase Onozuka R-10. The use of 10 or 15 mg of each enzymatic complex in 3 mL of osmotic buffer was most effective for the protoplasts yields. The best osmotic buffer was MgSO4 1.2 M / NaH2PO4 0.01 M, pH 5

  15. Isolamento e atividade antimicrobiana de actinomicetos Endofíticos e da Rizosfera de melão-de-são caetano (Momordica charantia L.)

    OpenAIRE

    Teixeira Lima, Vânia

    2006-01-01

    As plantas medicinais constituem uma fonte valiosa para o isolamento de microrganismos capazes de produzir diversas moléculas bioativas. Momordica charantia L., conhecida popularmente como Melão-de-São Caetano, pertence à família das Cucurbitáceas e é uma planta muito utilizada na medicina popular para o tratamento de várias afecções de origem microbiana. Folhas e raízes de Melão-de- São Caetano foram coletadas e, após a desinfecção, foram fragmentadas e plaqueadas nos meios...

  16. Isolamento e Caracterização de Marcadores Microssatélites para análise de Parentesco no Boto-vermelho (Inia geoffrensis)

    OpenAIRE

    Gravena, Waleska

    2006-01-01

    O presente trabalho foi dividido em dois capítulos: no capítulo I foi realizado tanto o isolamento e caracterização de marcadores microssatélites específicos para o boto-vermelho (Inia geoffrensis), como caracterização de marcadores desenvolvidos para outras espécies de cetáceos. Estes marcadores também foram caracterizados para a franciscana (Pontoporia blainvillei) e para o boto-cinza (Sotalia guianensis). No capítulo II foram feitas análises para determinação de relacionamentos dentro e en...

  17. Isolamento, caracterização parcial e imobilização da lectina de pericarpo de Punica granatum L. em dracon magnetizado

    OpenAIRE

    ALVES, Cláudia Zeneida Gomes Parente

    2002-01-01

    A Natureza é uma fonte de substâncias bioativas e pericarpo de Punica granatum Linn. (romã) tem sido usado em medicina popular. Proteínas hemaglutinantes (lectinas) interagem seletivamente e reversivelmente com carboidratos e glicoconjugados. O objetivo deste trabalho foi o isolamento da lectina de pericarpo de P. granatum (PgPeL) e sua imobilização para produzir uma matriz de afinidade. Extrato de pericarpo de Punica granatum foi submetido a precipitação com sulfato de amôn...

  18. Comparison of the effect of Crotalus simus and Crotalus durissus ruruima venoms on the equine antibody response towards Bothrops asper venom: implications for the production of polyspecific snake antivenoms.

    Science.gov (United States)

    Dos-Santos, Maria Cristina; Arroyo, Cynthia; Solano, Sergio; Herrera, María; Villalta, Mauren; Segura, Alvaro; Estrada, Ricardo; Gutiérrez, José María; León, Guillermo

    2011-02-01

    Antivenoms are preparations of immunoglobulins purified from the plasma of animals immunized with snake venoms. Depending on the number of venoms used during the immunization, antivenoms can be monospecific (if venom from a single species is used) or polyspecific (if venoms from several species are used). In turn, polyspecific antivenoms can be prepared by purifying antibodies from the plasma of animals immunized with a mixture of venoms, or by mixing antibodies purified from the plasma of animals immunized separately with single venom. The suitability of these strategies to produce polyspecific antibothropic-crotalic antivenoms was assessed using as models the venoms of Bothrops asper, Crotalus simus and Crotalus durissus ruruima. It was demonstrated that, when used as co-immunogen, C. simus and C. durissus ruruima venoms exert a deleterious effect on the antibody response towards different components of B. asper venom and in the neutralization of hemorrhagic and coagulant effect of this venom when compared with a monospecific B. asper antivenom. Polyspecific antivenoms produced by purifying immunoglobulins from the plasma of animals immunized with venom mixtures showed higher antibody titers and neutralizing capacity than those produced by mixing antibodies purified from the plasma of animals immunized separately with single venom. Thus, despite the deleterious effect of Crotalus sp venoms on the immune response against B. asper venom, the use of venom mixtures is more effective than the immunization with separate venoms for the preparation of polyspecific bothropic-crotalic antivenoms. Copyright © 2010 Elsevier Ltd. All rights reserved.

  19. Vírus da artrite encefalite caprina: isolamento e caracterização de parte do gene gag

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    P.P. Lima

    2004-04-01

    Full Text Available Amostras de sangue de 12 animais soropositivos pelo teste de imunodifusão em gel de agarose e que não apresentavam sinais clínicos sugestivos de infecção pelo vírus da artrite-encefalite caprina (CAEV foram coletadas para isolamento viral. Mácrofagos derivados de monócitos foram co-cultivados com células de membrana sinovial caprina (MSC, resultando em cinco amostras que apresentaram efeito citopático característico do tipo persistente, semelhante ao observado para o CAEV. Uma técnica de reação em cadeia de polimerase (PCR foi padronizada para amplificar parte do gene gag do genoma pró-viral, codificante para a proteína do capsídeo viral (p25. As cinco amostras foram amplificadas pela PCR e três delas, BR-UFMG/PL1, BR-UFMG/PL2 e BR-UFMG/PL3, foram seqüenciadas diretamente dos seus produtos de PCR. O alinhamento múltiplo das seqüências obtidas com outras de lentivírus de pequenos ruminantes (LVPR, obtidas no GenBank, e o dendrograma revelaram que as novas amostras de CAEV são únicas e distintas das demais amostras de LVPR, possuindo maior identidade de nucleotídeos e aminoácidos entre si e com as amostras de CAEV do que com a do vírus maedi-visna.Blood samples from 12 seropositive animals by agar gel immunodifusion test (AGID showing no evident clinical signs of disease were taken to attempt caprine arthritis-encephalitis virus (CAEV isolation. Monocyte-derived macrophages were co-cultured with goat synovial membrane cells (GSM resulting in five virus isolations, which presented cytophatic effects of the persistent type, resembling those observed for CAEV. A polymerase chain reaction (PCR assay was designed to amplify a portion of the gag proviral gene coding for the major core protein (p25. All of the five isolates were amplified by this PCR and three of them named BR-UFMG/PL1, BR-UFMG/PL2 and BR-UFMG/PL3, were sequenced directly from their PCR products. Multiple sequence analysis and a dendrogram including other

  20. Isolamento e cultivo de neurônios e neuroesferas de córtex cerebral aviar

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Carla Rossini Crepaldi

    2013-12-01

    Full Text Available Métodos de cultivo celular são convenientes na realização de análises funcionais de alterações/interações protéicas das células neuronais, auxiliando a decifrar o interactoma de proteínas chaves na neurogênese de doenças do Sistema Nervoso Central. Por esse motivo, culturas de neurônios e neuroesferas isolados do córtex cerebral aviar representam um modelo acessível para o estudo de diversas doenças neurológicas, tal como a epilepsia. A espécie aviar apresenta peculiaridades em seu proteoma neuronal, visto a presença de uma expressão diferenciada de proteínas chaves no metabolismo energético cerebral, algumas destas (VDAC1 e VDAC2 desempenham papel importante na compreensão do mecanismo da epilepsia refratária. A metodologia estabelecida no presente estudo obteve cultivo de neuroeferas, onde as células cresceram tipicamente em aglomerados atingindo, dentro de 7 dias, o diâmetro ideal de 100-200 µm. A diferenciação celular das neuroesferas foi obtida após a aderência destas às placas tratadas com poli-D-lisina, evidenciada pela migração de fibras do interior da neuroesfera. Ao contrário das neuroesferas, os neurônios em cultivo extenderam seus neuritos após 11 dias de isolamento. Tal modelo in vitro pode ser utilizado com sucesso na identificação das variáveis neuroproteômicas, propiciando uma avaliação global das alterações dinâmicas e suas interações protéicas. Tal modelo pode ter aplicações em estudos dos efeitos de indutores da morte celular e bloqueadores de canais de membrana mitocondriais em proteínas chaves do metabolismo energético cerebral.

  1. Arterial acid-base status during digestion and following vascular infusion of NaHCO(3) and HCl in the South American rattlesnake, Crotalus durissus.

    Science.gov (United States)

    Arvedsen, Sine K; Andersen, Johnnie B; Zaar, Morten; Andrade, Denis; Abe, Augusto S; Wang, Tobias

    2005-12-01

    Digestion is associated with gastric secretion that leads to an alkalinisation of the blood, termed the "alkaline tide". Numerous studies on different reptiles and amphibians show that while plasma bicarbonate concentration ([HCO(3)(-)](pl)) increases substantially during digestion, arterial pH (pHa) remains virtually unchanged, due to a concurrent rise in arterial PCO(2) (PaCO(2)) caused by a relative hypoventilation. This has led to the suggestion that postprandial amphibians and reptiles regulate pHa rather than PaCO(2). Here we characterize blood gases in the South American rattlesnake (Crotalus durissus) during digestion and following systemic infusions of NaHCO(3) and HCl in fasting animals to induce a metabolic alkalosis or acidosis in fasting animals. The magnitude of these acid-base disturbances were similar in magnitude to that mediated by digestion and exercise. Plasma [HCO(3)(-)] increased from 18.4+/-1.5 to 23.7+/-1.0 mmol L(-1) during digestion and was accompanied by a respiratory compensation where PaCO(2) increased from 13.0+/-0.7 to 19.1+/-1.4 mm Hg at 24 h. As a result, pHa decreased slightly, but were significantly below fasting levels 36 h into digestion. Infusion of NaHCO(3) (7 mmol kg(-1)) resulted in a 10 mmol L(-1) increase in plasma [HCO(3)(-)] within 1 h and was accompanied by a rapid elevation of pHa (from 7.58+/-0.01 to 7.78+/-0.02). PaCO(2), however, did not change following HCO(3)(-) infusion, which indicates a lack of respiratory compensation. Following infusion of HCl (4 mmol kg(-1)), plasma pHa decreased by 0.07 units and [HCO(3)(-)](pl) was reduced by 4.6 mmol L(-1) within the first 3 h. PaCO(2), however, was not affected and there was no evidence for respiratory compensation. Our data show that digesting rattlesnakes exhibit respiratory compensations to the alkaline tide, whereas artificially induced metabolic acid-base disturbances of same magnitude remain uncompensated. It seems difficult to envision that the central and

  2. Protoplast production and isolation from Etlingera elatior=Produção e isolamento de protoplasto de Etlingera elatior

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Milene Alves de Figueiredo Carvalho

    2012-01-01

    Full Text Available The technique of hybridization using plant protoplasts is widely used in plant breeding programs. The purpose of our study is to further characterize the process of protoplast isolation from the ornamental species Etlingera elatior (Jack R. M. Smith. Protoplasts were isolated from different tissues: in vitro leaves, in vitro pseudostem, and leaves from plants cultivated hydroponically. We tested six enzymatic combinations, four incubation time periods, the rotary system (40 rpm or steady in the dark, and three concentrations of mannitol (0.5, 0.6 and 0.7 M. The diameter and viability of obtained protoplasts were evaluated. The best source of explants used for protoplast isolation was the in vitro leaves, which yielded 22x105 protoplasts g-1 of fresh matter. The optimal incubation period was 15 hours. The in vitro leaves presented a greater viability (96% and larger protoplasts (36.7 µm diameter. Greater yields were obtained using a rotatory system with protoplasts incubated in the dark. The best enzymatic combination was 3% Cellulase “Onozuca” R-10 + 2% Meicelase + 1% Driselase + 1% Dextran + 5 mM MES, followed by the addition of 0.6 M mannitol.Com o objetivo de realizar hibridações que auxiliam em programas de melhoramento genético de flores ornamentais, protoplastos foram isolados a partir de diferentes tecidos (folhas in vitro, pseudocaules in vitro e folhas em sistema hidropônico de Etlnigera elatior (Jack R. M. Smith. Foram testados seis diferentes combinações enzimáticas, quatro períodos de incubação, sistema rotatório (40 rpm ou estacionário no escuro, concentrações de manitol (0,5; 0,6 e 0,7 M, o diâmetro e a viabilidade dos protoplastos isolados. A melhor fonte de explante utilizado no isolamento de protoplastos foi folha in vitro, com rendimento de 22 x105 protoplastos g-1 MF. O melhor tempo de incubação foi 15 horas, pois períodos superiores a este causavam diminuição no rendimento e viabilidade dos

  3. Pitiríase versicolor circinada: isolamento de Malassezia sympodialis - Relato de caso Pityriasis versicolor circinata: isolation of Malassezia sympodialis - Case report

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Valéria Maria de Souza Framil

    2010-04-01

    Full Text Available Os autores descrevem caso de pitiríase versicolor circinada, cujo agente etiológico isolado foi Malassezia sympodialis em uma mulher de 34 anos. O isolamento e identificação da Malassezia sympodialis foi em ágar Dixon modificado e o método molecular para confirmação da espécie foi PCR-RFLP (polymerase chain reaction and restriction fragment length polymorphism analysis.The authors report a case of pityriasis versicolor circinata whose isolated etiologic agent was Malassezia sympodialis in a 34-year-old woman. The isolation and identification of Malassezia sympodialis were accomplished with modified Dixon's agar, and the molecular method used to confirm the species was polymerase chain reaction and restriction fragment length polymorphism analysis (PCR-RFLP.

  4. Caracterização Higrotérmica de Isolamentos Térmicos - Certificação e Manual Exigencial

    OpenAIRE

    Pinto, Manuel; Freitas, Vasco

    1997-01-01

    A entrada em vigor do Regulamento das Características de Comportamento Térmico dos Edifícios (RCCTE) conduziu a uma maior utilização de materiais leves para isolamento térmico da envolvente dos edifícios. No entanto, é difícil a selecção destes materiais, dada a sua diversidade. Afigura-se-nos de grande importância um conhecimento preciso das características físicas e higrotérmicas dos diferentes materiais disponíveis no mercado de modo a poder fazer-se uma escolha criteriosa em função das so...

  5. Eficiência de isolamento e de plaqueamento de protoplastos de laranja-doce Isolation and platting efficiency of sweet orange protoplasts

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Lívia Mendes de Castro

    2011-06-01

    Full Text Available O isolamento e plaqueamento de protoplastos são fatores fundamentais para o sucesso no cultivo in vitro deste tipo de explante visando a manipulações genéticas. A composição da solução enzimática no isolamento, a densidade de cultivo, bem como o próprio genótipo utilizado são variáveis importantes nestas etapas. Desta forma, o objetivo do trabalho foi avaliar a eficiência de isolamento de protoplastos em função de três soluções enzimáticas e a eficiência de plaqueamento em função de cinco densidades de protoplastos e diferentes composições de meio de cultura em cultivares de laranja-doce. As soluções enzimáticas avaliadas para o isolamento de protoplastos foram: 1. celulase Onozuka RS 1%, macerase R-10 1% e pectoliase 0,2%; 2. celulase Onozuka RS 1%, macerase R-10 1% ; 3. celulase Onozuka R-10 4%, macerase R-10 1%. O plaqueamento dos protoplastos foi realizado nas densidades de 2 x 10(4; 5 x 10(4; 10(5; 2x 10(5 e 3 x 10(5 protoplastos.mL-1, nos meios de cultura EME 0,7M, BH3 0,7M e BH3 + EME 0,7M em ausência de luz, a 25 ± 1 ºC. A solução enzimática 2 proporcionou maior rendimento no isolamento de protoplastos das cultivares 'Hamlin', 'Natal' e 'Pera', e a solução enzimática 1 foi a mais adequada para a laranja 'Westin'. Para a cultivar 'Lima-Verde', a solução enzimática 3 foi a mais eficiente. A eficiência final de plaqueamento, avaliada aos 90 dias de cultivo, foi superior nas densidades de 3 x 10(5 e 2 x 10(5 protoplastos.mL-1 para as cultivares 'Hamlin', 'Natal' e 'Lima-Verde', e nas densidades de 2 x 10(5 e 10(5 protoplastos.mL-1 para a laranja 'Westin'.Protoplast isolation and culture are important factors for adequate in vitro culture of this type of explant to further genetic manipulations. The composition of the enzymatic solution, protoplast platting density, and plant genotype are important variables in these steps. Therefore, this work aimed to evaluate the isolation efficiency of protoplasts

  6. Fungos associados a invertebrados marinhos: isolamento, seleção e avaliação da produção de enzimas celulolíticas.

    OpenAIRE

    Carlos Henrique Domingues da Silva

    2010-01-01

    A micologia marinha é uma ciência relativamente recente e pouco se conhece sobre a diversidade das suas comunidades. Assim, o isolamento, triagem e preservação de fungos derivados do mar podem levar à descoberta de novas tecnologias. O objetivo deste estudo foi conhecer a diversidade de fungos filamentosos derivados marinhos e selecionar isolados capazes de produzir enzimas celulolíticas. Para tanto, foram isolados seletivamente fungos filamentosos a partir de amostras de macro-organismos mar...

  7. Estimativa de validade de um novo método de isolamento de vírus rábico

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Yeda L Nogueira

    2004-04-01

    Full Text Available OBJETIVOS: Nenhum estudo de base populacional foi realizado para mostrar o uso potencial de diagnóstico virológico do vírus rábico. O estudo realizado teve por objetivo estimar parâmetros de acurácia para o isolamento de vírus rábico em célula McCoy, como um método alternativo, e comparar com o uso da célula N2A, considerada método de referência. MÉTODOS: Foi realizado um inquérito em 120 morcegos coletados aleatoriamente, na Mata Atlântica, no Estado de São Paulo. Utilizou-se a reação de imunofluorescência para a detecção do vírus rábico isolado no cérebro desses morcegos, avaliado nos dois sistemas de cultivos celulares. Dois bancos de dados foram formados com os resultados. A análise foi feita com o programa Computer Methods for Diagnosis Tests (CMDT, utilizando a técnica de two-graph-receiver operating characteristic (TG-ROC para obter os parâmetros de sensibilidade e especificidade, além de outros indicadores, tais como eficácia, valor preditivo positivo, valor preditivo negativo e razão de verossimilhança. RESULTADOS: A célula N2A apresentou 90% de sensibilidade e especificidade, enquanto que a célula McCoy obteve 95% para os mesmos parâmetros. Os valores foram baseados em pontos de cortes otimizados para cada uma das células. CONCLUSÕES: Observou-se que a célula McCoy permite obter estimativas de acurácia superiores aos resultados observados com a célula de N2A, representando um método alternativo eficaz no isolamento do vírus rábico.

  8. Isolamento de bactérias do gênero Bordetella e provas sorológicas, a partir de crianças com sintomas de coqueluche, atendidas no Hospital de Isolamento Emílio Ribas de São Paulo Isolation of bacteria of genus Bordetella and serological studies in Brazilian children with symptoms of whoping-cough

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Sebastião Timo Iaria

    1973-12-01

    Full Text Available A partir de 255 crianças com sintomas de coqueluche atendidas no Hospital de Isolamento Emílio Ribas de São Paulo, procedeu-se a pesquisa de bactérias do gênero Bordetella. Em 46 delas, determinou-se, também, a elevação dos níveis de anticorpos circulantes aglutinantes e fixadores de complemento contra a B. pertussis, aglutinantes contra a B. parapertussis e fixadores de complemento contra adenovirus. Por outro lado, relacionaram-se os resultados do exame bacteriológico com o período da doença, em semanas, e com alguns sintomas principais apresentados. Foram também relacionados os resultados das provas bacteriológica e sorológica com a confirmação clínica do diagnóstico. Foram discutidos, por outro lado, o valor e as limitações das provas bacteriológica e sorológica no diagnóstico laboratorial da coqueluche.Cultures from cough plates and swabs were performed in 255 children with whooping-cough symptoms, hospitalized at "Hospital de Isolamento Emilio Ribas" in S. Paulo. Complement fixation and agglutination tests for Bordetella pertussis, agglutination tests for B. parapertussis and complement fixation test for adenovirus were performed in 46 children, using two blood samples taken one month apart; the isolation results for bacteria of genus Bordetella were correlated to the, period of illness, some of the major symptoms and the clinical diagnosis. A discussion of the efficiency and limitations of both bacteriological and serological tests in the laboratory diagnosis is presented.

  9. OTIMIZAÇÃO DA ETAPA DE ISOLAMENTO DOS COMPOSTOS VOLÁTEIS DE MEL PARA ANÁLISE POR CROMATOGRAFIA GASOSA

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Deborah H. M. BASTOS

    2009-07-01

    Full Text Available

    O presente trabalho teve por objetivo desenvolver e detalhar uma metodologia de isolamento de compostos voláteis de mel de laranja, utilizando técnica de concentração do headspace e processo de otimização do tempo de captura e do solvente utilizado por meio de métodos sensoriais e instrumentais. Os voláteis foram capturados em polimero Porapak-Q, com tempos de captura variando entre 2 e 4 horas, utilizando-se acetona e hexano para sua desorção. Uma equipe sensorial treinada, composta por oito julgadores selecionados com base em poder discriminativo, repetibilidade e consenso nos julgamentos, avaliou a intensidade de aroma característico de mel em cada um dos isolados obtidos. Realizou-se análise cromatográfica em cada uma das fiações isoladas e o número de picos obtidos foi computado. Análise de variância univariada (ANOVA dos dados sensoriais indicou a acetona como o melhor solvente para eluição dos compostos capturados no polímero poroso e o tempo de captura de 3 horas suficiente para se obter um isolado, apresentando intensidade moderada de aroma característico de mel. Os dados instrumentais confirmaram os resultados obtidos pela análise sensorial dos isolados.

  10. Estabilidad de la actividad neutralizante del antiveneno ofídico conservado a 4°C y a 16°C contra el veneno de Cascabel (Crotalus durissus cumanensis de Colombia

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Jaime Ramírez

    1995-12-01

    Full Text Available Se determinó la actividad neutralizante de la letalidad de varios lotes de antiveneno polivalente (no liofilizado, producidos por el Instituto Nacional de Salud, los cuales fueron retados contra una mezcla de venenos de cascabel (Crotalus durissus cumanensis de Colombia. Se compara la actividad de los diferentes lotes almacenados en oscuridad a las temperaturas de 4°C y 16°C. Se estableció el porcentaje remanente de la potencia de cada lote para cada temperatura en los diferentes años a lo largo del período del estudio. Se concluye que el antiveneno almacenando en las condiciones recomendadas, mantiene casi la totalidad de la capacidad de neutralización (97.9% luego de tres años de almacenamiento, lo quecorresponde a lafechade expiración del producto. En cambio, el antiveneno almacenado a 16°C y oscuridad, luego de dos años de almacenamiento, mantiene el 87.9% de su capacidad protectora contra veneno de cascabel, protección similara la encontrada bajo las mismas condiciones de almacenamiento, paraveneno de Taya X, pasados dos años de almacenamiento (l, sustentando la recomendación de descartar el producto, transcurridos dos años de almacenamiento en estas condiciones.

  11. Protocols for obtainment and isolation of two mesenchymal stem cell sources in sheep Protocolos para obtenção e isolamento de células tronco mesenquimais de duas fontes em ovinos

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Leandro Fadel

    2011-08-01

    Full Text Available PURPOSE: To evaluate different protocols to isolate stem cells from ovine umbilical cord blood and adipose tissue. METHODS: There were used 5 samples of umbilical blood and 5 samples of perirenal adipose tissue from 10 female sheep. All the samples were obtained through surgery, to harvest aseptic samples. There were used 3 protocols for obtainment and culture of umbilical cord blood stem cells and 4 protocols for ovine adipose tissue stem cells. RESULTS: It was possible to observe only one successful protocol for the obtainment of umbilical cord blood stem cells. When analyzing the techniques used to obtain adipose tissue stem cells, only one of the methods was effective as well. Through colony forming unit assay, there were obtained 58 colonies of cells after seven days in culture. Flow citometry tests revealed the cells were positive to CD44 and exhibited negative reaction to CD38, CD45, CD41/61. These cells showed a growth curve with very well defined phases LOG, LAG and PLATEAU. This phases are typically seem in mesenchymal stem cells growth curves. CONCLUSIONS: The isolation and culture of mesenchymal stem cells from ovine umbilical cord blood are complex and request more detailed assays. Stem cells from fat tissue sheep showed mesenchymal characteristics, according to their cell growth curve, ability to origin colonies of fibroblastoid cells and positive reactivity with the antibody CD44 by flow citometry.OBJETIVO: Testar diferentes protocolos para o isolamento de células tronco a partir de sangue de cordão umbilical e tecido adiposo de ovinos. MÉTODOS: Foram utilizadas cinco amostras de sangue de cordão umbilical e cinco amostras de tecido adiposo perirrenal de 10 fêmeas de ovelha. A coleta das amostras foi realizada através de procedimento cirúrgico para coleta do material de forma mais asséptica possível. Foram realizados três protocolos de isolamento e cultivo das células-tronco do cordão umbilical e quatro protocolos para

  12. Legionella pneumophila associada a insuficiência respiratória aguda: primeiro isolamento no Brasil Legionella pneumophila associated to acute respiratory insufficiency: first isolation in Brazil

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    João Carlos Pereira Gomes

    1989-12-01

    Full Text Available Relatam os autores isolamento de Legionella pneumophila sorogrupo 1, acompanhado de evidências sorológicas de infecção atual, em homem de 40 anos com infecção respiratória grave que evoluiu para insuficiência respiratória aguda. Esta foi caracterizada por hipoxemia severa refratária a altas concentrações de oxigênio e radiograficamente por infiltrados difusos em ambos pulmões. Com introdução de clindamicina, amicacina, ceftriaxone e ventilação à volume com Pressão Expiratória Positiva Final (PEEP de 14 cm de H(20, houve estabilização do quadro e gradual recuperação. Suspeitando-se de legionelose, foi colhido sangue e secreção traqueal para exames específicos. A secreção traqueal foi semeada em meio BCYE com isolamento de bacilo gram-negativo, identificado como Legionella pneumophila sorogrupo 1 por características culturais, bioquímicas e reações de imunofluorescência direta e de aglutinação em lâmina. O estudo sorológico revelou títulos de anticorpos 128, 1024, 4096 e 8192 para amostras coletadas na 1ª, 3ª, 4ª e 6ª semanas após o início do quadro. Os resultados definitivos foram obtidos com o paciente em recuperação. É realçada a comprovação da presença de Legionella sp. como agente patológico em nosso meio; a importância das medidas de suporte na evolução do paciente; a necessidade de se pensar neste agente no diagnóstico diferencial de pneumonias e de se pesquisar mais esta etiologia com metodologia laboratorial específica.Isolation of Legionella pneumophila sero group 1 with serological evidence of present infection is reported from a 40 year-old male with serious respiratory infection which developed into acute respiratory failure. It was characterized by severe hypoxemia resistant to high inspired oxygen concentrations and radiographycally by diffuse infiltrates in both lungs suggesting the clinical aspect of ARDS. Following the introduction of clindamycin, amikacin, ceftriaxone

  13. Isolation and screening of d-limonene-resistant microorganisms Isolamento e seleção de microrganismos resistentes ao d-Limoneno

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Juliano Lemos Bicas

    2007-09-01

    Full Text Available This study reports the isolation of microorganisms that are resistant to environment containing limonene, the most important residue in the citrus industry. For the isolation, samples collected from strategic places of a citrus processing plant (yellow water, entrance and exit of the bagasse tank, effluent and deteriorated fruits found in bins, machine straps, fruit washers and plant floor, some citrus fruit and mint from local market were used. The samples were incubated in rotary shaker at 30ºC/150rpm for 48h or 7 days in YM medium containing 0.1% limonene. Great part of the 112 strains recovered after 48h and the 126 strains recovered after 7 days were identified as Gram positive bacilli, followed by Gram negative bacilli, yeasts and Gram positive cocci, besides five fungi. About half of the Gram positive and Gram negative bacilli and yeasts and some Gram positive Cocci were resistant to limonene concentrations up to 2% in the medium broth. Amongst them seventy were able to grow in mineral medium containing limonene as sole carbon source. The research described in this paper is the initial step for the exploration of flavor compounds production via biotransformation of limonene, a non-expensive by-product of citrus industry.Este estudo relata o isolamento de microrganismos resistentes a ambientes contendo limoneno, o mais importante resíduo da indústria citrícola. Para o isolamento, foram utilizadas amostras colhidas de pontos estratégicos de uma indústria processadora de laranja (água amarela, entrada e saída do tanque de bagaço, efluente e frutas deterioradas encontradas nos bins, nas correias dos equipamentos, nos lavadores e espalhadas pelo chão, além de frutas cítricas e hortelã adquiridas em mercado local. Cada amostra permaneceu incubada a 30ºC/150 rpm por 48h ou 7 dias em meio YM contendo 0,1% de limoneno. Dentre as 112 linhagens obtidas com 48h e as 126 com 7 dias, a grande maioria dos microorganismos isolados foram

  14. Comparação de métodos de isolamento de bactérias NAD-dependentes do trato respiratório superior de suínos sadios

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Kich J.D.

    2000-01-01

    Full Text Available Secreções nasais, tonsilares e tecido tonsilar foram coletados de 67 leitões de 9 a 15 semanas de idade, provenientes de três rebanhos positivos para Actinobacillus pleuropneumoniae (App, e de 50 leitões provenientes de dois rebanhos negativos. Foram classificados como positivos aqueles rebanhos com isolamento prévio de sorotipos 3, 5 e 7 e rebanhos negativos aqueles submetidos a controle veterinário, sem notificação de sintomas clínicos, lesões de pleuropneumonia suína e sem isolamento do agente. O material coletado foi submetido a três diferentes métodos de cultivo: 1- semeadura direta em meio de cultivo sólido seletivo; 2- diluição em caldo seletivo seguido de subsemeadura em meio de cultivo sólido seletivo; 3- diluição em caldo seletivo seguido de subsemeadura em ágar sangue. Entre as amostras NAD-dependentes recuperadas 86 foram classificadas como App, 13 como grupo minor e 21 como grupo taxon (C, D, E e F. Dos rebanhos positivos foram recuperadas quatro amostras de App (sorotipos 3, 7 e 12 e 51 não sorotipificáveis. Dos rebanhos negativos foram recuperadas 31 amostras de App não sorotipificáveis, indicando que o App faz parte da flora normal do trato respiratório superior dos suínos. O melhor método de isolamento de amostras NAD-dependentes de leitões portadores foi da biópsia de tecido tonsilar semeado diretamente em meio sólido seletivo (PPLO ágar adicionado de 2mi g de cristal violeta, 10mi g NAD, 1mi g de lincomicina, 1,4mi g de bacitracina por ml.

  15. A selective medium for the isolation of the acinetobacter genus bacteria Um Meio Seletivo para o Isolamento de Bactérias do Gênero Acinetobacter

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Altair A. Zebral

    1980-12-01

    Full Text Available A selective and differencial medium was developed for the isolation of Acinetobacter genus bacteria. This Acinobacter Agar Medium (p.H + 7.4 contains in grams per litre: thiotone, 10; yeast extract, 3; naC1, 5; saccharose, 10; mannitol, 10; sodium citrate, 0.5; sodium desoxycholate, 0.1; crystal violet, 0.00025; phenol red, 0.04 and agar-agar 15. This medium has the advantage of inhibiting the growth of cocci and Gram-positive bacilli, by the use of sodium citrate and sodium desoxycholate associated with the crystal violet; and of differentiating the Gram-negative bacilli from the Enterobacteriaceae, through the fermentative activity upon the saccharose and/or mannitol, contrasting with the complete inactivity of the Acinetobacter genus bacteria over those substances.Um meio seletivo e diferenciador foi desenvolvido para facilitar o isolamento das bactérias do gênero Acinetobacter. Este meio (Agar Acinetobacter contém em gramas por litro: Tiotone (BBL, 10; extrato de levedura (BBL, 3; NaC1, 5; sacarose, 10; manitol, 10; citrato de sódio, 0,5; desoxicolato de sódio, 0,1; cristal violeta, 0,00025; vermelho de fenol, 0,04 e pH 7,4. Apresenta a vantagem de impedir o crescimento dos cocos e bacilos Gram positivos, pelo emprego do citrato de sódio e do desoxicolato de sódio, associados ao cristal violeta e de diferenciar os bacilos Gram negativos da família Enterobacteriaceae, pela sua atividade fermentativa sobre a sacarose e/ou manitol, em contraste com a completa inatividade das bactérias do gênero Acinetobacter sobre os mesmos substratos.

  16. Sobre o isolamento de Salmonellas de gânglios linfáticos de suínos abatidos no matadouro da cidade de Salavador - Bahia

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Gobert Araujo Costa

    1972-01-01

    Full Text Available Numa pesquisa efetuada em gânglios linfáticos de 3.674 suínos, aparentemente normais, e abatidos no Matadouro Municipal de Salvador e no Frigorífico Frimisa, isolaram-se 503 amostras de Salmonellas, sendo 461 ou 91,65% provenientes de gânglios crurais e pré-crurais e 42 culturas restantes, ou sejam 8,35% obtidas de outros gânglios. o estudo das 503 amostras, representando 13,69% de isolamentos no total dos suínos examinados, mostrou a existência de 52 sorotipos diferentes com dominância do grupo sorológico somático E1 em 48,70% das salmonellas seguindo-se o grupo B com 27,43%, C1 com 6,16%, L com 4,97%, C2 com 4,77% e D1 com 3,38%. Em menor percentagem registraram-se os grupos G1, N1, J, E2, e3 e E4.The crural and pré-crural lymph nodes of 3.674 slaughtered pigs at the abattoir of Salvador - Bahia were examined for the presence of Salmonella. Fity hundred and three (503 strains belonging to fity two (52 serotypes were isolated from the pigs in a percentage of 13,69%. The serotypes E1 were most frequently in 48,70%, group E in 27,43% group C1 in 6,16%, group L in 4,97%, C2 in 4,77% and group D1 in 3,37%. Others serotypes were found: G1, N, J, E2, E3 and E. The significance of the pig inhuman salmonellosis is discussed particularly the presence of Salmonella in pré-crural and crural lymph nodes in the carcases of the animal passed fit for human consumption.

  17. Isolamento e caracterização de células mesenquimais do tecido adiposo de cães

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    L.F.L. Patricio

    2013-08-01

    Full Text Available As células-tronco mesenquimais (CTMs diferenciam-se em várias linhagens e têm potencial de utilização na medicina regenerativa. As CTMs podem ser isoladas de vários tecidos de animais adultos. O objetivo deste estudo foi o isolamento das CTMs do tecido adiposo de cães, seu cultivo e diferenciação. Foram coletadas amostras de tecido adiposo subcutâneo de cinco cães. As CTMs foram isoladas, obtendo-se 146.803 (±49.533 células/g, cultivadas e diferenciadas em osteoblastos, adipócitos e condrócitos. Avaliaram-se a cinética do crescimento, a morfologia e a viabilidade celular. A caracterização citoquímica comprovou a natureza mesenquimal das células isoladas. O cultivo foi iniciado com 20.000 células/mL, verificando-se crescimento rápido até 72 horas (220.000 células/mL, fase exponencial entre 72 e 192 horas (455.000 células/mL, seguida de platô por saturação da densidade com 240 horas (355.000 células/mL. A viabilidade celular variou entre 96 e 100%. As CTMs em cultivo são fibroblásticas, fusiformes, com citoplasma basofílico e núcleo esférico. O comprimento médio das células variou entre 80,85 e 98,36µm, a largura média entre 17,40 e 28,79µm e o diâmetro médio do núcleo entre 15,46 e 17,74µm.

  18. Isolation of Arcobacter spp from the milk of dairy cows in Brazil Isolamento de Arcobacter spp do leite de vacas leiteiras no Brasil

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Celso Pianta

    2007-02-01

    Full Text Available Bacteriologic examinations were performed on 188 milk samples collected from cows from 11 farms for diagnosis of mastitis in three cities of Rio Grande do Sul, Brazil. Among the common causes of mastitis, the most frequent isolates were Staphylococcus aureus, followed by Corynebacterium sp, Streptococcus uberis, Streptococcus dysgalactiae and Streptococcus agalactiae. Bacteriologic examination of 32 milk samples from one farm didn't show bacteria known as common etiologic agent of mastitis. Six samples of Arcobacter spp typed by genotypic tests as Arcobacter cryaerophilus (five strains and Arcobacter butzleri (one strain were isolated from cows' milk of that farm. It is reported the isolation of Arcobacter species from the milk of cows in absence of clinical signs of mastitis. This is the first report of the detection of the microorganisms in the milk of dairy cows in Brazil. No previous reports are known from other countries.Foram realizados exames bacteriológicos em 188 amostras de leite colhidas de vacas de 11 propriedades leiteiras para diagnóstico de mastite, em três municípios no Rio Grande do Sul, Brasil. Entre as causas comuns de mastite, os isolados mais freqüentes foram Staphylococcus aureus, seguido de Corynebacterium sp, Streptococcus uberis, Streptococcus dysgalactiae e Streptococcus agalactiae. O exame bacteriológico realizado em 32 amostras de leite de vacas de uma propriedade não demonstrou a presença de bactérias conhecidas como causadoras de mastite. Foram isoladas do leite de vacas desta propriedade seis amostras de Arcobacter spp, classificadas por testes moleculares como Arcobacter cryaerophilus (cinco amostras e Arcobacter butzleri (uma amostra. É relatado o isolamento de espécies de Arcobacter do leite de vacas na ausência de sinais clínicos de mastite. Este é o primeiro relato da detecção dos microorganismos no leite de vacas leiteiras no Brasil.

  19. ISOLAMENTO E IDENTIFICAÇÃO DE Mycobacterium sp.EM SUÍNOS ABATIDOS NO MUNICÍPIO DE UBERLÂNDIA (MG) ISOLATION AND IDENTIFICATION OF Mycobacterium sp. FROM SWINE SLAUGHTERED IN UBERLÂNDIA (MG)

    OpenAIRE

    Lilian de Souza; Albenones José de Mesquita; Cleusely Matias de Souza

    2007-01-01

    No presente trabalho foram analisadas bacteriologicamente 103 amostras de suínos, provenientes da região de Uberlândia (MG), sendo 12 de tecidos com abcessos, 20 de linfonodos sem lesões e 71 de linfonodos com lesões tuberculóides. O exame bacteriológico das 103 amostras permitiu o isolamento de 12 cepas de micobactérias, sendo todas oriundas dos 71 linfonodos com lesões (12/71). As 12 cepas de micobactérias foram i...

  20. Ligninas acetosolv e formacell de eucalipto e de bagaço de cana : isolamento, fracionamento, caracterização e uso como componente de resinas fenolicas do tipo resol

    OpenAIRE

    Priscila Benar

    1996-01-01

    Resumo: Ligninas são polifenóis naturais de estrutura reticulada. Suas propriedades e a presença de grupos funcionais dependem tanto do vegetal como do processo de isolamento. A caracterização das ligninas de eucalipto e bagaço obtidas pelos processos Acetosolv (EAc e BAc) e Formacell (EFo e BFo) mostra que EAc e BAc contêm mais grupos acetila e que EAc e EFo possuem mais metoxila. Resultados de pirólise analítica-CG comprovam que EAc e EFo possuem mais unidades S (3,5-dimetoxi-4-hidroxipropa...

  1. Isolamento de Chaetomium spp. em lesões subcutâneas de um cão: relato de caso Isolation of Chaetomium spp. on subcutaneous lesions of a dog: case report

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    C.A.S.B. Braga

    2013-02-01

    Full Text Available Caracterizou-se clinicamente a infecção pelo Chaetomium spp. em um cão, e descreveu-se seu isolamento e identificação. Ao exame dermatológico foram observadas pápulas nas orelhas, no tronco lateral e nos membros pélvicos. Ao rompimento de uma dessas pápulas, fluiu um líquido serosanguinolento com consequente úlcera no local. Foi colhido material para isolamento micológico, por meio de raspado das pápulas da orelha e da cauda. O diagnóstico foi micose subcutânea por Chaetomium spp.This work aimed to clinically characterize the infection by Chaetomium spp. in a dog, as well as describe its isolation and identification. Upon dermatological exam, papules on ears, lateral trunk and pelvic members were noticed. After the disruption of these papules there was serosanguineous secretion flowed by consequent ulcer in the region. Material for mycological isolation was picked, and a scraping of papules from ear and tail was done. The diagnosis was subcutaneous mycosis caused by Chaetomium spp.

  2. Isolamento e seleção de rizobactérias promotoras do crescimento de Pinus taeda Isolation and selection of Pinus taeda growth promoting rhizobacteria

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Juliana Margarido Fonseca Couto Brunetta

    2010-06-01

    Full Text Available Este trabalho teve como objetivos isolar e selecionar rizobactérias promotoras do crescimento de P. taeda. O isolamento foi realizado a partir de mudas com 150 dias de idade, realizando-se a seleção por meio da inoculação dos isolados (10(8 u.f.c mL-1 na proporção de 0,1 mL de inóculo.cm-3 de substrato. Aos 150 dias de semeadura, avaliaram-se as seguintes variáveis: altura da parte aérea, diâmetro do coleto e pesos de matéria seca de raízes e da parte aérea. Entre 99 isolados testados em P. taeda, apenas seis (UFV-AL9, UFV-AM5, UFV-AM2, UFV-F3, UFV-G2 e UFV-G4 destacaram-se quanto à indução de crescimento e ao melhor índice de qualidade de muda. Não se observaram diferenças significativas entre a testemunha e os demais isolados testados.The objectives of this research were to isolate and select P. taeda growth promoting rhizobacteria. The bacteria were isolated from 150 day-old pine seedlings and the selection was carried out with the strains inoculation (10(8 u.f.c/mL in the proportion of 0.1 mL/cm³. After 150 days of sowing, aerial part height, stem diameter and roots and aerial part dry matter weight were evaluated. From the 99 tested strains, six (UFV AL9, UFV-AM5, UFV-AM2, UFV-F3, UFV-G2 and UFV-G4 stood out due to their capacity of stimulating the growth and quality improvement of P. taeda seedlings. Significant differences were not observed between the control and the other tested strains.

  3. Prospecção e isolamento de actinomicetos com potencial para promoção de crescimento em rúcula (Eruca sativa L.

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Ana Lígia Silva de Melo

    2015-12-01

    Full Text Available Actinomicetos são bactérias Gram negativas, encontradas em compostagens, e ambientes extremos. Objetivou-se por meio deste estudo, a bioprospecção de actinomicetos isolados de compostagem e inoculados em sementes de rúcula. O isolamento foi feito em três composteiras, sendo: Cana, Resíduo doméstico e Fibra de coco. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado, constituído de sete tratamentos. Os resultados obtidos foram submetidos à análise estatística pelo teste de Scott Knott a 0,05% de probabilidade. Para altura de planta, os tratamentos diferiram estatisticamente entre si, sendo T7 com os menores valores. Para o número de folhas, as médias diferiram entre si, sendo a T7 com o menor valor. O diâmetro do coleto diferiu apenas para T7 e T2. O comprimento radicular diferiu apenas para o T3 e T7, com os menores valores. Para a fitomassa, o T3, apresentou os melhores resultados. Para a matéria seca, houve diferença apenas para T6 e T7. Os actinomicetos apresentaram um bom potencial de promoção de crescimento.Prospecting and isolation of actinomycetes with potential to growth promotion in arugula (Eruca sativa L.Abstract: Actinomycetes are Gram negative bacteria found in compost, and extreme environments. The objective of bioprospecting of actinomycetes isolated from compost and inoculated seeds of arugula. The isolation was done in three composters, being: cane, household waste and coir. The experimental design was completely randomized, consisting of seven treatments. The results were subjected to statistical analysis by the Scott Knott test at 0.05% probability. For plant height, the treatments were statistically different, with T7 with the lowest values. For the number of sheets, the mean differ from each other, with T7 being the smallest value. The stem diameter differed only for T2 and T7. The root length differed only for the T3 and T7, with the lowest values. For biomass, T3, showed the best results. For dry

  4. Isolamento de amebas de vida livre potencialmente patogênicas em poeira de hospitais Isolation of potencially pathogenic free-living amoebas in hospital dust

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Maria Aparecida da Silva

    2003-04-01

    Full Text Available OBJETIVO: Observar a ocorrência de amebas de vida livre dos gêneros Acanthamoeba e Naegleria em amostras de poeira coletadas em hospitais. MÉTODOS: Foram coletadas 132 amostras de poeira em dois hospitais do município de Presidente Prudente, São Paulo. Os locais da coleta foram: Unidade de Terapia Intensiva, Centro Cirúrgico, Isolamento de Moléstias Infecciosas, Berçário, Emergência e Cozinha. As amostras foram semeadas em três meios de cultura: meio de ágar não nutriente com Escherichia coli, meio de ágar infusão de soja e microcultivo em meio de Pavlova modificado por Giazzi. As amebas isoladas foram identificadas segundo critérios morfológicos. RESULTADOS: O índice geral de positividade para amebas de vida livre, potencialmente patogênicas, dos gêneros Acanthamoeba e Naegleria, foi de 45,5%, sendo positivas 41,6% das amostras de poeira coletadas no hospital universitário e 50% no hospital estadual. Obtiveram-se 45,5% de positividade do gênero Acanthamoeba e 3,8% para amebas do gênero Naegleria. CONCLUSÕES: As amebas de vida livre, potencialmente patogênicas, estavam presentes em todos os ambientes estudados dos dois hospitais, sendo que as espécies do gênero Acanthamoeba foram as isoladas com maior freqüência.OBJECTIVE: To evaluate the occurrence of free-living amoebas of the genera Acanthamoeba and Naegleria is dust samples colleted in two hospitals. METHODS: One-hundred and thirty-two dust samples were collected in two hospitals in Brazil. Hospital collection sites were the following: intensive care unit, operation rooms, nursery, kitchen, emergency and infectious diseases isolation room . The isolation of the amoebas was performed in three culture media: non-nutrient agar inoculated with Escherichia coli, soy agar, and microculture in Giazzi-modified Pavlova's medium. The amoebas were identified according to morphological criteria. RESULTS: Amoebas of the genera Acanthamoeba and Naegleria were found in 45.5% of

  5. Isolation of bovine coronavirus (BCoV in monolayers of HmLu-1 cells Isolamento de coronavírus bovino (BCoV em monocamada de cultura de células da linhagem HmLu-1

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    José Antonio Jerez

    2005-09-01

    Full Text Available Isolation of BCoV was performed in monolayers of HmLu-1 cells, using 20 fecal samples from clinical cases of diarrhea in calves. Samples were positive for BCoV by means of hemagglutination / hemagglutination inhibition (HA/HI. Up to the fifth serial passage, 13 of these isolates presented syncytial cytopathic effect, similar to Kakegawa standard strain. When isolates were submitted to seroneutralization with gammaglobulin anti-bovine coronavirus, 8 of them were considered to be positive, once cytopathic effect was neutralized. After titration and seroneutralization in microplates, only three of them were confirmed as positive. The lineage HmLu-1 showed higher permissivity to BCoV isolation, but the low intensity of viral replication demonstrated that new methodologies should be developed for this purpose and then submitted to confirmation of isolation by means of seroneutralization.A partir de 20 amostras fecais de bezerros, com quadro clínico de diarréia, positivas para BCoV por hemaglutinação/inibição da hemaglutinação (HA/HI, procedeu-se o isolamento viral em monocamadas de células da linhagem HmLu-1. Até a quinta passagem seriada, 13 apresentaram efeito citopático do tipo sincicial, semelhante à amostra padrão Kakegawa de BCoV. Ao serem submetidas a uma reação de soroneutralização com gamaglobulina anti-coronavírus bovino, 8 delas foram consideradas positivas, uma vez que o efeito citopático foi neutralizado. Ao serem tituladas e submetidas à reação de soroneutralização em microplacas, apenas 3 delas puderam ser confirmadas como positivas. As células da linhagem HmLu-1 mostraram-se permissivas para o isolamento de BCoV, todavia a baixa intensidade na replicação viral demonstrou ser necessário o desenvolvimento de novas metodologias para se poder alcançar esse intuito e a confirmação do isolamento por soroneutralização.

  6. Isolamento de myxovirus parainfluenza 3 de gado bovino no Estado de São Paulo, Brasil Isolation of Myxovirus parainfluenza type 3 from cattle in S. Paulo State, Brazil

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    José Alberto N. Candeias

    1971-12-01

    Full Text Available Faz-se referência ao isolamento, em São Paulo, de 4 cêpas de Myxovirus parainfluenza do tipo 3, do tecido pulmonar de gado bovino com lesões de pneumonia, que se mostraram antigenicamente semelhantes à cêpa bovina SF-4. Uma das cêpas isoladas mostrou certa relação antigênica com a cêpa humana HA-1.The isolation of Myxovirus parainfluenza type 3 from cattle with pneumonia, in S. Paulo, Brazil, is reported. All the strains isolated appeared to be antigenically related to the bovine strain SF-4. It was possible to establish a certain degree of antigenic relationship between the human strain HA-1 and one of the bovine strains isolated.

  7. Isolamento, identificação e avaliação da atividade antileucêmica de alcaloides indólicos monoterpênicos de Tabernaemontana salzmannii (A. DC., Apocynaceae

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Elaine R. Figueiredo

    2010-11-01

    Full Text Available O presente trabalho descreve o isolamento e a identificação de nove alcaloides indólicos monoterpênicos das cascas das raízes e folhas de Tabernaemontana salzmannii (Apocynaceae. As estruturas dos alcaloides foram identificadas através de métodos espectroscópicos uni (RMN ¹H, 13C, APT e bidimensionais (¹H-¹H-COSY, ¹H-¹H-NOESY, HMQC e HMBC e espectrometria de massas (EM, além da comparação com dados de literatura. Um screening in vitro da atividade antileucêmica foi feito com os alcaloides majoritários isolados. Dentre os nove alcaloides isolados, a isovoacangina e voacangina mostraram-se capazes de induzir morte celular por apoptose em células leucêmicas humanas THP-1.

  8. Isolation and preliminary characterization of a o-nitrobenzaldehyde-degrading Alcaligenes sp. ND1 Isolamento e caracterização preliminar de lcaligenes SP ND1 degradador de o-nitrobenzaldeido

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Yu Fang-Bo

    2008-12-01

    Full Text Available This paper reports the isolation and characterization of a new o-nitrobenzaldehyde (ONBA-degrading bacterium, Alcaligenes sp. ND1. ND1 degraded almost all ONBA (100 mg L-1 in M9 medium within 36 hours. The key enzyme(s involved in the initial biodegradation was a constitutively intracellular enzyme(s. This bacterium has great potential utility for bioremediation.Esse trabalho relata o isolamento e a caracterização de uma nova bactéria degradadora de o-nitrobenzaldeido (ONBA, Alcaligenes sp ND1. A bactéria ND1 decompôs todo o ONBA (100 mg.L-1 do meio M9 em 36 horas. A enzima-chave envolvida na biodegradação inicial foi uma enzima constitutiva intracelular. Esta bactéria apresenta um potencial de aplicação para bioremediação.

  9. Isolamento microbiológico do canal auditivo de cães saudáveis e com otite externa na região metropolitana de Recife, Pernambuco

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Maína de S. Almeida

    2016-01-01

    Full Text Available Resumo: Otite externa (OE é o termo utilizado para definir a inflamação do conduto auditivo externo; esta doença possui diversas etiologias, ocorre em várias espécies e é particularmente frequente em cães. Os microrganismos da microbiota residente comumente estão envolvidos na etiopatogenia da OE, sendo apontados como agentes perpetuadores da doença. O objetivo deste estudo foi investigar o perfil microbiológico de cães com conduto auditivo saudável e com otite na região metropolitana do Recife. Com o auxílio de suabes estéreis foram coletadas amostras das orelhas direita e esquerda de 41 cães, sendo 11 com OE e 30 sem OE. Foi realizado o isolamento bacteriano e fúngico das amostras cultivadas; observou-se positividade em 80% dos cães com orelhas saudáveis e presença de mais de um microrganismo em 38 amostras (63,3%; já nos cães com OE, a positividade foi 95,3%, com infecção polimicrobiana em 77,3% das amostras. No que se refere aos gêneros bacterianos, o perfil de isolamento microbiológico foi idêntico entre os cães otopatas e sadios. Os microrganismos isolados foram Staphylococcus sp., Micrococcus, Bacillus sp., Streptococcus sp. e Malassezia sp.

  10. Isolamento químico e validação analítica por cromatografia líquida de alta eficiência de quercitrina em Solidago chilensis Meyen (Asteraceae

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    C.A.D. VECHIA

    2016-01-01

    Full Text Available RESUMO A espécie Solidago chilensis Meyen, Asteraceae é conhecida como erva-lanceta ou arnica-brasileira, sendo utilizada popularmente como antimicrobiana e para o tratamento de inflamações tópicas. No entanto, estudos fitoquímicos e farmacológicos para as partes aéreas são escassos. Neste trabalho, realizou-se a determinação de flavonoides por espectrofotometria de UV/Vis, prospecção fitoquímica da fração acetato de etila visando o isolamento do constituinte químico majoritário e validação analítica por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE. O teor de flavonoides totais foi de 5,42%, representados como hiperosídeo. O fracionamento químico utilizando métodos cromatográficos (cromatografia líquida em coluna gel de sílica; CHCl3:EtOH; 8:2 v/v e espectroscópicos (1H RMN,13C RMN e ESI-MS revelou o isolamento de quercetina-3-O-α-L-ramnosídeo(quercitrina. A sensibilidade e a linearidade (r = 0,999 da validação analítica, utilizando a quercitrina isolada do extrato hidroalcoólico da planta, revelaram um rendimento de 5,29% do analito em relação à droga vegetal. Precisão, recuperação e robustez, além dos valores estabelecidos para os limites de detecção (LOD e de quantificação (LOQ, poderão ser utilizados como parâmetros de qualidade para extratos à base de S. chilensis.

  11. Organogênese de ápices meristemáticos de batata em meios de isolamento e multiplicação in vitro Organogenesis of potato meristem tips on the in vitro isolation and multiplication media

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    Jonny Everson Scherwinski Pereira

    2004-06-01

    Full Text Available Estudou-se a influência da consistência do meio de cultura sobre a organogênese de ápices meristemáticos de batata nas etapas de isolamento e multiplicação in vitro, das cultivares Baronesa, Eliza e Pérola. Para o cultivo utilizaram-se tubos de ensaio (20 x 150 mm contendo 5 ml de meio de cultura de isolamento (sais de MS, 30g.L-1 sacarose, 1,0 mg.L-1 BAP, 0,01mg.L-1 ANA, 0,1 mg.L-1 AG3 de consistência semi-sólida (6g.L-1 de ágar ou líquida. Ao meio de cultura semi-sólido acrescentou-se ainda 300 mg.L-1 de carvão ativado. Como suporte dos meristemas em meio líquido, foram introduzidas fitas de papel filtro em forma de "U" invertido. Após 30 dias em meio de isolamento, os meristemas diferenciados foram transferidos para meio de multiplicação (sais de MS, 1,0 mg.L-1 de tiamina, 5,0 mg.L-1 de ácido pantotênico, 0,25 mg.L-1 de AG3 e 20 g.L-1 de sacarose semi-sólido e líquido, onde permaneceram por mais 21 dias. O desenvolvimento dos meristemas em meio de multiplicação de consistência líquida proporcionou brotações com altura, pelo menos, quatro vezes superior àquelas desenvolvidas em meio semi-sólido. A taxa de multiplicação obtida em meio líquido foi 1,6 e 3,6 vezes superior ao meio semi-sólido quando os meristemas diferenciaram-se em meio de isolamento líquido e semi-sólido, respectivamente. Houve formação indesejável de calo na base dos meristemas desenvolvidos em meio de isolamento líquido, o que proporcionou maior número de brotações regeneradas nestes meristemas. A diferenciação de meristemas de batata em meio de isolamento semi-sólido por 30 dias, seguida do cultivo em meio líquido sob agitação por mais 21 dias, promove melhoria nas taxas de crescimento e multiplicação dos meristemas.The effect of the culture media consistency on the organogenesis of potato meristem tips was evaluated on the in vitro isolation and multiplication stages from cultivars Baronesa, Eliza and Perola. The meristems

  12. Snakebites by Crotalus durissus ssp in children in Campinas, São Paulo, Brazil Acidentes por serpentes Crotalus durisssus ssp em crianças em Campinas, São Paulo, Brasil

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    Fábio BUCARETCHI

    2002-01-01

    Full Text Available From January, 1984 to March, 1999, 31 children under 15 y old (ages 1-14 y, median 8 y were admitted after being bitten by rattlesnakes (Crotalus durissus ssp. One patient was classified as "dry-bite", 3 as mild envenoming, 9 as moderate envenoming and 18 as severe envenoming. Most patients had neuromuscular manifestations, such as palpebral ptosis (27/31, myalgia (23/31 and weakness (20/31. Laboratory tests suggesting rhabdomyolysis included an increase in total blood creatine kinase (CK, 28/29 and lactate dehydrogenase (LDH, 25/25 levels and myoglobinuria (14/15. The main local signs and symptoms were slight edema (20/31 and erythema (19/31. Before antivenom (AV administration, blood coagulation disorders were observed in 20/25 children that received AV only at our hospital (incoagulable blood in 17/25. AV early reactions were observed in 20 of these 25 cases (9/9 patients not pretreated and 11/16 patients pretreated with hydrocortisone and histamine H1 and H2 antagonists. There were no significant differences in the frequency of patients with AV early reactions between the groups that were and were not pretreated (Fisher's exact test, p = 0.12. Patients admitted less than and more than 6 h after the bite showed the same risk of developing severe envenoming (Fisher's exact test, p = 1. No children of the first group (De janeiro de 1984 a março de 1999, 31 crianças com menos de 15 anos de idade (1 a 14 anos, mediana = 8 anos foram admitidas após terem sido picadas por Crotalus durissus ssp. Uma criança não apresentou manifestações clínicas de envenenamento, enquanto 3 foram classificadas como acidente leve, 9 como moderado e 18 como grave. A maioria das crianças apresentou envolvimento neuromuscular, tais como ptose palpebral (27/31, mialgia (23/31 e fraqueza (20/31. Alterações laboratoriais sugerindo rabdomiólise também foram observadas, como aumento das enzimas séricas CK (28/29 e LDH (25/25 e mioglobinúria (14/15. As

  13. Impactos do isolamento conjugal sobre a rotina da mulher do emigrado Los impactos del matrimonio en el aislamiento de rutina de la mujer del inmigrado Impacts of conjugal isolation on the routine of the emigrant’s wife

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    Clarisse Sousa Boechat

    2010-12-01

    Full Text Available Segundo a literatura, o isolamento social tende a favorecer o surgimento de problemas relacionados à saúde física e emocional, independentemente de gênero, idade e estado civil. O presente estudo procura conhecer as implicações do processo emigratório sobre o cotidiano de mulheres residentes em Governador Valadares - MG cujos parceiros se encontram no exterior como imigrantes. Trata-se de uma pesquisa exploratória na qual realizadas 247 entrevistas domiciliares com mulheres residentes na cidade de Governador Valadares cujos parceiros residem no exterior na condição de imigrantes há pelo menos três meses. Os dados revelaram que a partir deste isolamento as mulheres tornaram-se menos sociáveis, deixaram de participar de atividades usuais de lazer e distanciaram-se de amigos, enfraquecendo sua rede de apoio social. O isolamento conjugal, além de provocar significativas mudanças na rotina da mulher, produz mudanças em sua autopercepção e no modo de avaliação de seu relacionamento conjugal.Según la literatura, el aislamiento social tiende a favorecer el surgimiento de problemas relacionados a la salud física y emocional, independientemente del género, edad y estado civil. El presente estudio busca conocer las implicaciones del proceso emigratorio sobre el cotidiano de mujeres residentes en Governador Valadares - MG cuyos parceros se encuentran en el exterior como inmigrantes. Se trata de una pesquisa exploratoria en la cual realizadas 247 entrevistas domiciliares con mujeres residentes en la ciudad de Governador Valadares cuyos parceros residen en el exterior en la condición de inmigrantes hace por lo menos tres meses. Los datos revelaron que a partir de este aislamiento las mujeres se conviertieron en menos sociables, dejaron de participar de actividades usuales de lazer y se distanciaron de amigos, enfraqueciendo su red de apoyo social. El aislamiento conjugal, además de provocar significativas mudanzas en la rutina de la

  14. Influência do tempo e do meio de transporte no isolamento de fungos patogênicos de biópsias de pele Effects of time delay and transportation on isolation of pathogenic fungi from skin biopsies

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    Rafael Taglialegna

    2008-04-01

    Full Text Available FUNDAMENTOS: Não está definido como o meio de transporte e o intervalo de tempo até o processamento final interferem no isolamento de fungos patogênicos em material obtido de biópsias de pele. OBJETIVOS: Determinar o efeito da inoculação tardia de biópsias de pele, transportadas em diferentes meios líquidos, na taxa de isolamento de fungos patogênicos. MÉTODOS: De 47 pacientes com lesões cutâneas suspeitas de micoses invasivas obtiveram-se 278 biópsias das lesões. Cada biópsia foi transportada em frascos com caldo Sabouraud com cloranfenicol ou solução salina de cloreto de sódio e inoculada em ágar Sabouraud após 48-72 horas (precoce ou após 72 horas até sete dias (tardio, constituindo-se quatro grupos de estudo. RESULTADOS: As medianas das taxas de isolamento dos quatro grupos de esporotricose foram 100% e de paracoccidioidomicose foram 84% e 50% nos grupos precoces/solução salina ou caldo Sabouraud e 64% e 84% nos grupos tardios/solução salina ou caldo Sabouraud, respectivamente (p=0,88. Baixas taxas de contaminação resultaram em especificidade diagnóstica de 82% para doenças não fúngicas. CONCLUSÕES: Biópsias de pele podem ser transportadas em caldo Sabouraud ou solução salina por períodos de até sete dias, à temperatura ambiente, sem afetar a viabilidade dos fungos.BACKGROUND: It is not clear how culture media used during transport and the interval between the biopsy procedure and final processing can affect the successful isolation of fungi. OBJECTIVE: The aim of this study was to investigate the effects of late inoculation of skin biopsies, transported in different sterile fluids, on the isolation rate of pathogenic fungi. METHODS: A total of 278 punch biopsy specimens were collected from 47 patients with suspected lesions of invasive mycoses. Each biopsy was transported in vials with Sabouraud medium with chloramphenicol or saline solution and finally inoculated on Sabouraud agar and 2

  15. Natural crossing and isolation distance between cotton genotypes in turkey Cruzamento natural e distância de isolamento entre genótipos de algodão na turquia

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    Taner Bozbek

    2008-01-01

    Full Text Available The purposes of this study were to determine the percentage of out-crossing, isolation distance and pollinator insect species for cotton (Gossypium hirsutum L. seed production in the Aydin region in Turkey. The glandless and red-leaf traits in G. hirsutum were used as genetic markers. Two experiments were conducted over two years that monitored out-crossing in adjacent rows and adjacent plants and established that the percentage of out-crossing varied. The percentage of out-crossing varied between 0% and 13.3% depending on the genetic marker. In the experiment to determine isolation distance, natural crossing percentage was not observed in 2002, while this percentage was 0.8% in the first rows in 2003. In this study, cotton fields were also visited once a week during flowering periods for seven weeks in order to determine the numbers of pollinator insect species, where the only detected species was the honey bee. The numbers of pollinator insects were 2.14% (2002 and 1.30% (2003 for adjacent rows; 1.71% (2002 and 2.00% (2003 for adjacent plants in glandless parcels. It is recommended that the isolation distance between genotypes should be approximately 1 m.Os objetivos deste estudo foram determinar a percentagem de cruzamentos livres, a distância de isolamento e as espécies de insetos polinizadores na produção de sementes de algodão (Gossypium hirsutum L. na região de Aydin, na Turquia. Foram utilizadas as características ausência de glândulas e folhas vermelhas como marcadores de G. hirsutum. Dois experimentos foram conduzidos durante dois anos, nos quais os cruzamentos livres em linhas e plantas adjacentes foram monitorados, tendo sido comprovada uma variação na percentagem de cruzamentos livres que variou entre 0 e 13,3% dependendo do marcador genético. No experimento de determinação da distância de isolamento, não se observou cruzamento natural em 2002, mas em 2003 sua percentagem foi de 0,8%, apenas nas primeiras linhas

  16. Variabilidade sazonal do teor de saponinas de Baccharis trimera (Less. DC (Carqueja e isolamento de flavona Seasonal variability in the content of saponins from Baccharis trimera (Less. DC (Carqueja and isolation of flavone

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Júlio C. Borella

    2006-12-01

    Full Text Available O objetivo deste trabalho foi avaliar a sazonalidade sobre o teor de saponinas e o isolamento e elucidação estrutural de constituinte químico (flavona de Baccharis trimera (Less. DC (Carqueja. O cultivo de indivíduos estaminados de B. trimera foi realizado no Campo Experimental da Universidade de Ribeirão Preto - Unaerp, em Ribeirão Preto, no período de janeiro a dezembro de 1998 e foi conduzido em três blocos, sendo que cada um deles era constituído de 48 mudas. As amostras foram colhidas após seis meses do plantio (durante o inverno, três meses após a primeira colheita (durante a primavera e três meses após a segunda colheita (durante o verão. Após processo de secagem e moagem, as drogas foram submetidas ao ensaio para obtenção do índice de espuma. Os resultados mostraram que não há variabilidade neste índice em função da época de colheita. Parte da droga colhida no verão sofreu análise química para isolamento e elucidação estrutural de componente químico. O isolamento a partir do extrato metanólico de partes aéreas de B. trimera foi realizado através de métodos cromatográficos (CC e CLAE e a identificação estrutural da substância isolada, através de métodos espectrométricos (UV, RMN ¹H e 13C. Foi identificada a flavona denominada 5,6-diidroxi-7,3’,4’-trimetoxiflavona.The aim of this study was to evaluate the seasonal effect on the foam index and the isolation and structural identification of a chemical constituent (flavone of Baccharis trimera. The culture staminate samples of B. trimera were realized in the experimental cultivation area of the Universidade de Ribeirão Preto - Unaerp, in Ribeirão Preto, state of São Paulo, Brazil from January to December/1998 and were conduced in three blocks, which received 48 seedlings. The samples were harvested six months after installation (during the winter, three months after the first harvest (during the spring and three months after the second harvest

  17. Isolamento das veias pulmonares em pacientes com fibrilação atrial permanente secundária a valvopatia mitral Isolation of the pulmonary veins in patients with permanent atrial fibrillation secondary to mitral valve disease

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Gustavo G. Lima

    2004-04-01

    Full Text Available OBJETIVO: Analisar a eficácia do isolamento cirúrgico das veias pulmonares para restabelecer ritmo sinusal em pacientes com fibrilação atrial secundária à doença mitral. MÉTODOS: 33 pacientes com indicação de correção cirúrgica da valva mitral e com fibrilação atrial permanente, foram submetidos ao isolamento cirúrgico das veias pulmonares, sendo 67% mulheres. Média de idade de 56,3±10 anos, classe funcional NYHA pré-operatória de 3,2±0,6, tamanho de átrio esquerdo de 5,5± 0,9 cm, fração de ejeção de 61,3±13%. A técnica cirúrgica consistiu de incisão circunferencial ao redor das 4 veias pulmonares, excisão do apêndice atrial esquerdo e de incisão perpendicular desde a borda inferior da incisão, isolando as veias pulmonares, até o ânulo da valva mitral. Arritmias precoces foram tratadas, agressivamente, com cardioversão. RESULTADOS: O seguimento médio foi de 23,9±17 meses e ocorreram 3 óbitos no pós-operatório. Dez pacientes necessitaram de cardioversão elétrica no pós-operatório; 87% apresentavam ritmo sinusal na última consulta e 33% estavam em uso de amiodarona. CONCLUSÃO: Isolamento das veias pulmonares associado à cirurgia da valva mitral é uma técnica efetiva e segura na manutenção de ritmo sinusal em pacientes com fribilação atrial permanente.OBJECTIVE: To assess the efficacy of surgical isolation of the pulmonary veins for re-establishing sinus rhythm in patients with atrial fibrillation secondary to mitral valve disease. METHODS: Thirty-three (67% were women patients with permanent atrial fibrillation and indication for surgical correction of the mitral valve underwent surgical isolation of the pulmonary veins. Their mean age was 56.3±10 years, preoperative NYHA functional class was 3.2±0.6, left atrial size was 5.5±0.9 cm, and ejection fraction was 61.3±13%. The surgical technique consisted of a circumferential incision surrounding the 4 pulmonary veins, excision of the left

  18. Leishmania spp. parasite isolation through inoculation of patient biopsy macerates in interferon gamma knockout mice Leishmania spp.: isolamento de parasitos pela inoculação de macerados de biopsias de pacientes em camundongos deficientes em interferon gama

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Milton Adriano Pelli de Oliveira

    2010-04-01

    Full Text Available Isolation of Leishmania parasite and species identification are important for confirmation and to help define the epidemiology of the leishmaniasis. Mice are often used to isolate pathogens, but the most common mouse strains are resistant to infection with parasites from the Leishmania (Viannia subgenus. In this study we tested the inoculation of interferon gamma knockout (IFNγ KO mice with biopsy macerates from Leishmania-infected patients to increase the possibility of isolating parasites. Biopsies from twenty five patients with clinical signs of leishmaniasis were taken and tested for the presence of parasites. Immunohistochemical assay (IHC and conventional histopathology detected the parasite in 88% and 83% of the patients, respectively. Leishmania sp. were isolated in biopsy macerates from 52% of the patients by culture in Grace's insect medium, but 13% of isolates were lost due to contamination. Inoculation of macerates in IFNγ KO mice provides isolation of parasites in 31.8% of the biopsies. Most isolates belong to L. (Viannia subgenus, as confirmed by PCR, except one that belongs to L. (Leishmania subgenus. Our preliminary results support the use of IFNγ KO mice to improve the possibility to isolate New World Leishmania species.O isolamento e a identificação da espécie de parasito do gênero Leishmania são importantes para a confirmação e auxiliam na epidemiologia da leishmaniose. Os camundongos são freqüentemente utilizados para isolar patógenos, porém, as linhagens mais comuns de camundongos são resistentes à infecção por parasitos do subgênero Leishmania (Viannia. Neste estudo, avaliamos a inoculação de macerados de biópsias de pacientes infectados em camundongos deficientes do gene do interferon gama (IFNγ KO como um método para aumentar a possibilidade de isolar Leishmania spp. Biópsias de 25 pacientes infectados com Leishmania sp. foram avaliadas para a presença de parasitos pelos métodos de imunohistoqu

  19. Calogênese, embriogênese somática e isolamento de protoplastos em variedades de laranja doce Callus induction, somatic embryogenesis and protoplast isolation from sweet orange varieties

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Vagner Augusto Benedito

    2000-03-01

    Full Text Available Com o objetivo de produzir calos embriogênicos de citros, óvulos abortados de frutos maduros de 6 variedades de laranja doce (Citrus sinensis L. Osbeck, ‘Bahia Cabula’, ‘Baianinha’, ‘Hamlin’, ‘Orvalho de Mel’, ‘Rubi’ e ‘Valência’ foram introduzidos em meio de cultivo MT modificado com adição de extrato de malte, com e sem adição de 5 mg L-1 benziladenina (BA. Os calos obtidos das variedades ‘Bahia Cabula’, ‘Orvalho de Mel’, ‘Rubi’ e ‘Valência’ foram cultivados em meio basal MT, contendo os carboidratos maltose, galactose, lactose, glicose ou sacarose nas concentrações de 18; 37; 75; 110 e 150 mM para a indução da embriogênese somática. Os calos destas mesmas variedades foram submetidos ao isolamento de protoplastos, com o uso de 3 soluções enzimáticas. Os resultados revelaram que há influência do genótipo sobre a calogênese. A embriogênese somática foi estimulada na presença de galactose, para a maioria das variedades. A solução enzimática composta de 1% de celulase, 1% de macerase e 0,2% de pectoliase foi a mais adequada para o isolamento de protoplastos a partir de calos das variedades de laranja doce estudadas.Intending to produce embryogenic citrus calli (Citrus sinensis L. Osbeck, aborted ovules of ripe fruits from six sweet orange varieties (‘Bahia Cabula’, ‘Baianinha’, ‘Hamlin’, ‘Orvalho de Mel’, ‘Rubi’ and ‘Valencia’ were introduced onto modified MT medium with and without benzyladenine (BA. Calli obtained from ‘Bahia Cabula’, ‘Orvalho de Mel’, ‘Rubi’ and ‘Valencia’ varieties were grown on MT basal medium modified with the carbohydrates maltose, galactose, lactose, glucose and sucrose at 18; 37; 75; 110 and 150 mM. The effect on somatic embryogenesis was studied. Calli from the same genotypes were submitted to protoplast isolation, using three different enzymatic solutions. Results revealed the genotype effect in the callus

  20. Isolamento das veias pulmonares para tratamento da fibrilação atrial paroxística: resultados clínicos após um único procedimento

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    Scanavacca Mauricio

    2004-01-01

    Full Text Available OBJETIVO: Avaliar a evolução clínica dos pacientes com fibrilação atrial paroxística submetidos a um único procedimento de isolamento das veias pulmonares. MÉTODOS: Estudados 49 pacientes consecutivos (36 homens; idade média de 53±10 anos com episódios freqüentes e sintomáticos de fibrilação atrial paroxística de difícil controle clínico. Para mapeamento da junção do átrio esquerdo com as veias pulmonares, foi utilizado o cateter decapolar circular Lasso e para ablação 30 watts e 50ºC, um cateter com ponta deflectível e eletrodo distal de 4mm. RESULTADOS: Em seguimento médio de 12±5 meses, 25 (51% pacientes não apresentaram recorrência de fibrilação atrial e 24 (49% apresentaram pelo menos uma recorrência. Em 20 (83%, a 1ª crise ocorreu antes do 1º mês e em 4, após 2 a 9 meses. Após a introdução de drogas antiarrítmicas, 15 (63% pacientes apresentaram melhora importante, 10 tornaram-se assintomáticos, 5 referiam crises raras, auto-limitadas e de curta duração e 9 (37% permaneceram com as manifestações clínicas inalteradas, apesar das drogas antiarrítmicas e foram encaminhados à nova intervenção. No final do seguimento, 35 (71% pacientes permaneciam em ritmo sinusal estável sem recorrência de fibrilação atrial, após um único procedimento, 50% dos quais sem drogas antiarrítmicas. CONCLUSÃO: A maioria dos pacientes com fibrilação atrial paroxística sintomática, não controlados com medicação antiarrítmica, obtém controle clínico após um único procedimento de isolamento das veias pulmonares.

  1. Isolamento de Haemophiliis aegyptius associado à Febre Purpúrica Brasileira, de cloropídeos (Diptera dos gêneros Hippelates e Liohippelates Isolation of Haemophilus aegyptius associated to Brazilian purpuric fever from Hippelates and Liohippelates flies (Diptera: Chloropidae

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    M. L. C. Tondella

    1994-04-01

    Full Text Available O reconhecimento da Febre Purpúrica Brasileira (FPB, em 1984, originou uma série de estudos que revelaram uma correlação desta doença com conjuntivites causadas por Haemophiliis aegyptius. A associação do aumento de conjuntivites em crianças e a maior densidade populacional de cloropídeos do gênero Hippelates já havia sido verificada desde o século passado. Este fenômeno está relacionado ao tropismo que estes insetos apresentam pelos olhos, secreções e feridas de onde se alimentam. Embora haja evidências do papel destes cloropídeos na transmissão mecânica de conjuntivites bacterianas, o isolamento de Haemophilus aegyptius a partir dos mesmos, no seu habitat natural, ainda não havia sido verificado. No presente trabalho obtivemos o isolamento de cepas invasivas de Haemophilus aegyptius, associadas à FPB, de duas coleções de cloropídeos, classificados como Liohippelates peruanus e uma espécie nova, Hippelates neoproboscideus, coletados ao redor dos olhos de crianças com conjuntivite.The recognition of the Brazilian purpuric fever (BPF in 1984 led to a number of studies which showed a relation between this disease and conjunctivitis caused by Haemophilus aegyptius. The increase in cases of conjunctivitis in children associated with higher population density of eye gnats (Chloropidae: Hippelates has been reported since last century. This phenomenon is related to the attraction that those flies show for the eyes, secretions and wounds, from where they feed on. Although there are evidences on the role of these flies in the mechanical transmission of seasonal bacterial conjunctivitis, the isolation of Haemophilus aegyptius from them in their natural habitat had not been demonstrated yet. In this study Haemophilus aegyptius associated to BPF was isolated from two pools of chloropids collected around the eyes of children with conjuntivitis which were identified as Liohippelates peruanus (Becker and a new species Hippelates

  2. Isolation of Fonsecaea pedrosoi from thorns of Mimosa pudica, a probable natural source of chromoblastomycosis Isolamento de Fonsecaea pedrosoi a partir de espinhos da planta Mimosa pudica, uma provável fonte natural de cromoblastomicose

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    Claudio Guedes Salgado

    2004-02-01

    Full Text Available We report the isolation of Fonsecaea pedrosoi from thorns of the plant Mimosa pudica L. at the place of infection identified by one of our patients. Clinical diagnosis of chromoblastomycosis was established by direct microscopic examination and cultures from the patient's lesion. The same species was isolated from the patient and from the plant. Scanning electron microscopy of the surface of the thorns showed the characteristic conidial arrangement of F. pedrosoi. These data indicate that M. pudica could be a natural source of infection for the fungus F. pedrosoi.Este trabalho demonstra o isolamento de Fonsecaea pedrosoi de espinhos da planta Mimosa pudica L., a partir do local de suposta infecção identificado pela paciente infectada. O diagnóstico clínico de cromoblastomicose foi estabelecido pelo achado de corpos fumagóides no exame microscópico direto e pelas culturas de F. pedrosoi do material obtido da lesão da paciente. A mesma espécie foi isolada da paciente e da planta. A microscopia eletrônica de transmissão da superfície dos espinhos evidenciou a disposição conidial característica de F. pedrosoi. Estes dados indicam que a planta M. pudica deve ser uma fonte natural de infecção do fungo F. pedrosoi.

  3. Comparison of methods for mycobacteria isolation from swine feces Comparação de métodos para isolamento de micobactérias a partir de fezes suínas

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Eugenia Márcia de Deus Oliveira

    2007-12-01

    Full Text Available Swine mycobacteriosis is an important cause of carcass condemnation at abattoirs. One of the best ways to recognize the etiologic agent involved, in live animals, is the fecal isolation, as 94% of the lesions are located in the digestive tract. Therefore, the goal of the present study was to compare the performance of four decontamination methods followed by inoculation in three different culture media, totalizing twelve procedures of mycobacteria search from swine fecal samples experimentally contaminated. The swine feces were artificially contaminated with 0.02 g of Mycobacterium avium, PIG-B strain, and subjected to mycobacteria isolation trial. The protocols used were: 1 modified Petroff or basic method; 2 modified Lowenstein-Jensen or acidic method; 3 modified Petroff or basic method with re-suspension in Amphotericin B; 4 modified Lowenstein-Jensen or acid method with re-suspension in Amphotericin B, followed by inoculation in Petragnani, Lowenstein-Jensen and Lowenstein-Jensen medium with antibiotics (Penicillin G and Nalidixic acid. There was a difference (pAs micobacterioses suínas são responsáveis por condenações de carcaças em abatedouro e uma das melhores formas de se conhecer os agentes envolvidos nos animais vivos é o isolamento a partir das fezes, pois em 94% das vezes, as lesões localizam-se no trato digestivo. Assim sendo, o presente estudo teve por objetivo comparar o desempenho de quatro métodos de descontaminação com semeadura em três diferentes meios de cultura, totalizando doze procedimentos na pesquisa de micobactérias a partir de amostras de fezes de suínos contaminadas experimentalmente. Amostras de fezes de suínos foram contaminadas artificialmente com 0,02g de Mycobacterium avium, estirpe de PIG-B, e submetidas à tentativa de isolamento de micobactérias, utilizando-se os seguintes protocolos de descontaminação: 1 Petroff modificado ou método básico; 2 Lowenstein-Jensen modificado ou método

  4. Isolation of Prototheca spp. from cows with mastitis, bulk tanks milk and in the environment of the animals/ Isolamento de Prototheca spp. de vacas com mastite, de leite de tanques de expansão e do ambiente dos animais

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    Agda de Godoy

    2007-07-01

    homem. Nos últimos anos tem-se dado ênfase às infecções intramamárias por algas do gênero Prototheca, agentes de infecções persistentes e refratárias à terapêutica tradicional além do caráter zoonótico. Este trabalho teve como objetivo o isolamento e identificação de Prototheca spp. De amostras de leite coletadas em tanques de expansão e latões, de vacas com mastite e do ambiente dos animais. Foram coletadas 81 amostras de leite de tanques e latões de 81 propriedades. Prototheca zopfii foi identificada em amostras de tanques de 10 propriedades. Dessas propriedades foram estudadas oito quanto à ocorrência de Prototheca spp. no ambiente do rebanho e em casos de mastite, além da identificação dos principais agentes bacterianos causadores de mastite. Foram isoladas bactérias, algas e leveduras em 324 amostras de leite provenientes de 197 vacas. Em três propriedades foi isolada P. zopfii de onze amostras de leite obtidas de cinco vacas com mastite clínica e subclínica. Nestas propriedades o agente foi isolado do meio ambiente das vacas, fezes de bezerros e teteiras. Os resultados deste trabalho mostram a importância do isolamento no tanque como indicativo da presença de Prototheca spp. Em propriedades leiteiras.

  5. Um novo modelo de isolamento do tumor de Walker utilizando o gradiente de Ficoll-Hypaque A novel model for isolation of Walker's tumoral cells using the Ficoll-Hypaque gradient

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Sônia Leite Silva

    2006-04-01

    Full Text Available OBJETIVO: Analisar uma nova técnica de isolamento das células do tumor de Walker, utilizando o gradiente de ficoll-hypaque. MÉTODOS: Vinte ratos Wistar machos foram divididos em 2 grupos (G1, G2. O tumor do animal doador foi dissecado, triturado em solução de ringer lactato e filtrado. A suspensão celular obtida foi dividida em duas alíquotas (A1 e A2 e a alíquota A2 foi centrifugada em gradiente de ficoll-hypaque. As duas alíquotas foram ajustadas para uma concentração de 1X10(6 células/ml. Um ml da suspensão A1 ou A2 foi injetado por via subcutânea na axila direita dos ratos dos seus respectivos grupos. Os diâmetros tumorais, peso tumoral e análise histológica foram avaliados. RESULTADOS: Não houve diferença no volume tumoral (G1=17,9±3,8cm³; G2=17,2±4,4cm³; p=0,190 e no peso tumoral (G1=7,0±1,8g; G2=7,3±2,8g; p=0,569. A análise histológica evidenciou padrões semelhantes de infiltração de células pequenas indiferenciadas e de necrose nos dois grupos. Entretanto, exsudato granulocítico leve a moderado foi mais acentuado no G2 do que no grupo G1 e hemorragia leve a moderada foi observada somente no grupo com ficoll. CONCLUSÃO: O gradiente de ficoll-hypaque é uma técnica adequada de isolamento das células do tumor de Walker e fornece uma suspensão celular menos contaminada com outros tipos celulares.PURPOSE: The purpose was to evaluate a novel technique for isolation of Walker's tumoral cells using a Ficoll-Hypaque gradient and its further influence on tumor development. METHODS: Twenty male Wistar rats have been divided in 2 groups: G1= without ficoll, G2= with ficoll. Tumor was excised, homogenized and suspended in lactate ringer. A sample of the cell suspension was adjusted at a concentration of 1X10(6 cells/ml (G1. A second sample was centrifuged on a Ficoll-Hypaque gradient and the cell concentration was then adjusted (G2. Tumor was implanted by subcutaneous injection of 1.0 ml in the right armpit of rats

  6. Universal isolation precautions for patients at an academic hospital Precauciones universales en el aislamiento de pacientes en un hospital universitario Precauções universais em isolamentos de pacientes em hospital universitário

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    Vanessa Gomes Maziero

    2012-01-01

    .OBJETIVO: Utilizar as precauções universais pela equipe de Enfermagem em isolamento de pacientes em Hospital Universitário. MÉTODOS: Estudo descritivo, prospectivo. Foram utilizados dados da Assessoria de Controle de Qualidade da Assistência de Enfermagem, correspondentes aos relatórios das observações das precauções universais em isolamento de pacientes em duas unidades de internação Médica - Cirúrgica, no período entre 2008 e 2010. RESULTADOS: As duas unidades da instituição apresentaram média geral de classificação, da análise observacional de precaução universal, entre desejável e adequada, sendo limítrofe apenas em novembro de 2008 na unidade Médica-Cirúrgica Masculina. As unidades avaliadas, quanto à adesão às precauções universais, apresentaram comprometimento com biossegurança, e os dados exibidos mostraram-se melhores a cada ano descrito. CONCLUSÃO: A participação ativa do enfermeiro responsável pela unidade é importante na prevenção e controle de infecções hospitalares.

  7. Estimativa de validade de um novo método de isolamento de vírus rábico Estimate of the validity of a new method for the isolation of rabies virus

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    Yeda L Nogueira

    2004-04-01

    Full Text Available OBJETIVOS: Nenhum estudo de base populacional foi realizado para mostrar o uso potencial de diagnóstico virológico do vírus rábico. O estudo realizado teve por objetivo estimar parâmetros de acurácia para o isolamento de vírus rábico em célula McCoy, como um método alternativo, e comparar com o uso da célula N2A, considerada método de referência. MÉTODOS: Foi realizado um inquérito em 120 morcegos coletados aleatoriamente, na Mata Atlântica, no Estado de São Paulo. Utilizou-se a reação de imunofluorescência para a detecção do vírus rábico isolado no cérebro desses morcegos, avaliado nos dois sistemas de cultivos celulares. Dois bancos de dados foram formados com os resultados. A análise foi feita com o programa Computer Methods for Diagnosis Tests (CMDT, utilizando a técnica de two-graph-receiver operating characteristic (TG-ROC para obter os parâmetros de sensibilidade e especificidade, além de outros indicadores, tais como eficácia, valor preditivo positivo, valor preditivo negativo e razão de verossimilhança. RESULTADOS: A célula N2A apresentou 90% de sensibilidade e especificidade, enquanto que a célula McCoy obteve 95% para os mesmos parâmetros. Os valores foram baseados em pontos de cortes otimizados para cada uma das células. CONCLUSÕES: Observou-se que a célula McCoy permite obter estimativas de acurácia superiores aos resultados observados com a célula de N2A, representando um método alternativo eficaz no isolamento do vírus rábico.OBJECTIVES: No population-based studies have been conducted to show the potential for the use of virological diagnosis of the rabies virus. The objective of the present study was to estimate accuracy parameters for the isolation of the rabies virus in McCoy cells as an alternative method and to compare this with the use of murine neuroblastoma (N2A cells, which is considered to be a reference method. METHODS: An evaluation was performed on 120 bats collected at

  8. Isolation of Candida spp from vaginal microbiota of healthy canine females during estrous cycle Isolamento de Candida spp da microbiota vaginal de fêmeas caninas hígidas durante o ciclo estral

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Marlete Brum Cleff

    2005-06-01

    Full Text Available Yeasts are commensal organisms found in the skin, genital and gastrointestinal tracts, and other mucosa in mammalians. Candida spp has been frequently isolated from domestic and sylvan animals. Yeast isolation from vaginal mucus is frequent in women, especially of Candida genus. In canine females, however, studies about vaginal fungal microbiota are rare and the connection with estrous cycle is unknown. The purpose of this study was to isolate yeast 5 of Candida genus from healthy canine females and identify the isolated species, establishing their connection with estrous cycle phases. Two hundred twenty-four samples taken from vaginal mucus of 14 canine females were analyzed in this study. Candida spp was observed in 83 (37% from these samples; nine samples were taken in proestrus, 14 in oestrus, 31 in dioestrus, 24 in anoestrus and five samples were obtained during pregnancy. Candida parapsilosis the most frequently isolated specie (21.7%, followed by C. guillermondii (8.4%, C. kefir (6% and C. albicans (4.8%. We concluded that Candida spp is a commion component of healthy canine females' vaginal microbiota, and isolation varies according to the estrous cycle phase.As leveduras são organismos comensais da pele, trato genital e gastrointestinal, e de outras mucosas de mamíferos. O gênero Candida vem sendo isolado freqüentemente de animais domésticos e silvestres. O isolamento de Candida spp da mucosa vaginal de mulheres é freqüente, porém na espécie canina são escassos os estudos referentes à microbiota fúngica vaginal, especialmente do gênero candida, não se tendo conhecimento de sua relação com o ciclo reprodutivo. O presente trabalho teve como objetivo isolar leveduras do gênero Candida em fêmeas caninas hígidas e identificar as espécies isoladas, relacionando-as com as diferentes fases do ciclo estral. Foram analisadas 224 amostras obtidas da mucosa vaginal de 14 fêmeas caninas. Candida spp foi observada em 83 (37

  9. Perfil de isolamento microbiano em cães com otite média e externa associadas Profile of microorganisms isolated from dogs with associated media and extern otitis

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    L.C. Oliveira

    2006-12-01

    Full Text Available Comparou-se o perfil de isolamento microbiano de amostras coletadas de cães com otite média (OM e externa (OE associadas. Sessenta e quatro cães com otite média e externa foram avaliados durante 10 meses. Amostras dos condutos auditivos externos foram coletadas com auxílio de swabs estéreis e aquelas do ouvido médio pela técnica cirúrgica da osteotomia da bula timpânica. Os microrganismos foram cultivados e identificados de acordo com os métodos previamente descritos, e a susceptibilidade a antimicrobianos avaliada pelo método de difusão em ágar estabelecido pelo National Committee for Clinical Laboratory Standards. Bactérias anaeróbias estritas não foram isoladas em qualquer amostra. Todas as amostras de OE mostraram crescimento bacteriano e/ou fúngico. Na OM, a positividade nas culturas foi de 48%. Os microrganismos mais isolados na OE foram: Bacillus sp. (26,9%, M. pachydermatis (22,2% e S. intermedius (21,7%; na OM foram: S. intermedius (32,5%, S. aureus subsp. aureus (22,5% e bacilos Gram-negativos não fermentadores (10,0%. Observou-se alguma diferença no perfil de isolamento entre os quadros de OM e OE em 96,7% dos animais. Verificou-se elevada resistência de cepas de S. intermedius à penicilina G, ampicilina, eritromicina, tetraciclina e clindamicina.The isolation pattern of samples collected from dogs with both media (OM and extern otitis (OE was compared. Sixty-four dogs suffering from those conditions were studied over a 10-month period. Samples from the external ear were collected with sterile swabs while those from the middle ear were collected by osteotomy of the tympanic bulla. The microorganisms were cultured and identified according to methods previously described and to the susceptibility of antimicrobials according to the National Committee for Clinical Laboratory Standards agar diffusion test. Anaerobic bacteria were not isolated in any sample. All samples from OE showed bacterial and/or fungal growth

  10. Isolation and characterization of Leptospira interrogans from pigs slaughtered in São Paulo State, Brazil Isolamento e caracterização de Leptospira interrogans de suínos abatidos no Estado de São Paulo, Brasil

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    Fabiana Miraglia

    2008-09-01

    Full Text Available With the aim of isolating Leptospira spp., blood serum, kidney, liver and genital tract of 137 female swine (40 sows and 97 gilts and also urine samples from 22 sows were collected in a slaughterhouse in the State of São Paulo, from April 2003 to August 2004. Four isolates were obtained from animals that presented microagglutination test (MAT titers > 100 for the serovar Pomona and one was obtained from an animal negative by MAT in which Leptospira was isolated from the liver and reproductive tract. The presence of leptospiral DNA was investigated by PCR, and positive results were found in kidneys of 11 females, liver of two, genital tract of two and urine of one of them. Nephrosis, interstitial multifocal nephritis, moderate to severe changing, hyalines cylinders and hemorrhagic focuses, hepatic and uterine horns congestion were histological lesions observed in higher frequency in animals positive for leptospira. The silver impregnation (Warthin Starry confirmed the presence of spirochetes in renal tubules of four females with positive leptospira cultures from kidneys. The serogroup of the five isolates was identified as Pomona by cross agglutination with reference polyclonal antibodies. Molecular characterization of the isolates was carried out by variable-number tandem-repeats analysis. All the isolates revealed a pattern distinct from the L. interrogans Pomona type strain, but identical to a previously identified pattern from strains isolated in Argentina belonging to serovar Pomona.Amostras de soro sanguíneo, rim, fígado e trato genital de 137 fêmeas suínas (40 matrizes e 97 marrãs e de urina de 22 matrizes foram colhidas em abatedouro no Estado de São Paulo, no período de abril de 2003 a agosto de 2004 tendo como objetivo o isolamento de Leptospira spp. Quatro estirpes foram isoladas de animais que apresentaram títulos, no teste de soroaglutinação microscópica (SAM > 100, para o sorovar Pomona e de um animal, não reagente na

  11. Isolation and characterization of canine parvovirus type 2c circulating in Uruguay Isolamento e caracterização da cepa tipo 2c do parvovirus canino circulante no Uruguai

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Andrea Blanc Pintos

    2011-08-01

    Full Text Available This research reports the first CPV-2c isolation in cell culture (canine fibroma cell line A-72 in Uruguay. The isolates were obtained from 13 rectal swabs of Uruguayan dogs with parvovirosis. Samples were submitted to PCR with two sets of primers, restriction fragment length polymorphism (RFLP, partial sequencing of the gene encoding for VP2 capsid protein and phylogenetic characterization. The strain isolated was confirmed as CPV-2c. These results contribute to a better knowledge of CPV strains circulating in Uruguay and promote an evaluation of the efficacy of heterologous vaccines used to protect against the circulating strains.Este trabalho relata o primeiro isolamento do CPV-2c em cultura de células (linhagem celular de fibroma canino A-72, no Uruguai. Os isolados foram obtidos a partir de 13 suabes retais de cães uruguaios com parvovirose. As amostras foram submetidas à reação em cadeia da polimerase (PCR com dois pares de primers, polimorfismo de comprimento de fragmentos de restrição (RFLP, sequenciamento parcial do gene que codifica a proteína capsidial VP2 e caracterização filogenética. A cepa isolada foi confirmada como CPV-2c. Os resultados contribuem para um melhor conhecimento das cepas do CPV circulantes no Uruguai e incitam uma maior investigação sobre a eficácia das vacinas produzidas com cepas heterólogas utilizadas atualmente para proteger contra cepas circulantes.

  12. Caracterização da comunidade bacteriana endofítica de citros por isolamento, PCR específico e DGGE Characterization of the endophytic bacterial community from citrus by isolation, specific PCR and DGGE

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Paulo Teixeira Lacava

    2006-04-01

    Full Text Available O objetivo deste trabalho foi caracterizar a comunidade bacteriana endofítica de plantas assintomáticas (escapes e afetadas pela clorose variegada dos citros (CVC por meio de isolamento em meio de cultura, técnica de gradiente desnaturante em gel de eletroforese (DGGE e detecção de Methylobacterium mesophilicum e Xyllela fastidiosa por meio de PCR específico, para estudar esta comunidade e sua relação com a ocorrência da CVC. A análise da comunidade bacteriana via DGGE permitiu a detecção de X. fastidiosa, bem como Klebsiella sp. e Acinetobacter sp. como endófitos de citros. Foram observados também Curtobacterium sp., Pseudomonas sp., Enterobacter sp. e Bacillus spp. Utilizando primers específicos, Methylobacterium mesophilicum e X. fastidiosa também foram observadas, reforçando hipóteses de que estas bactérias podem estar interagindo no interior da planta hospedeira.The aim of this work was to characterize endophytic bacterial community of assintomatic (escape and Citrus Variegated Chlorosis (CVC-affected citrus plants using isolation in culture medium, denaturing gradient gel electrophoresis (DGGE technique and Methylobacterium mesophilicum as well as Xylella fastidiosa specific PCR, allowing to assess this community and its interactions with CVC. The study of bacterial community by DGGE analysis allowed the detection of X. fastidiosa, as well as Klebsiella sp. e Acinetobacter sp., which were not detected previously. Curtobacterium sp., Pseudomonas sp., Enterobacter sp. and Bacillus spp. were also observed as endophyte in citrus plants. Using specific primers Methylobacterium mesophilicum and X. fastidiosa were observed, reinforcing that these bacteria could interact inside the host plant.

  13. Maternidade e hanseníase: as vivências de separação devido ao isolamento compulsório Being a mother with leprosy: the experiences of separation due to compulsory isolation

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Suellen Santos Lima de Almeida

    2012-08-01

    Full Text Available As mulheres portadoras de hanseníase, durante grande parte do século XX, não puderam exercer a maternidade devido à política de isolamento compulsório dos doentes adotada para controlar a doença. Os filhos ao nascerem eram levados para os preventórios e o contato com estes era realizado pelo olhar. Visando compreender a experiência da maternidade no hospital colônia foi realizada pesquisa narrativa com três mães que viveram o período de internação compulsória. Os discursos revelam dois momentos distintos da vivência de maternidade: a separação dos filhos com sua posterior volta para casa e a adoção de crianças para realizar a maternidade. Considera-se que a adoção promoveu o encontro com o sentido da existência que havia sido rompido e possibilitou a experiência de ser-mãe.In the twentieth century, women with leprosy could not carry on their maternity because of the statement of compulsory isolation of patients, adopted to control the disease. Their children were taken at birth to prevention centers and the contact of mothers with their babies was only visual. In order to understand the experience of maternity in the leprosaria it was carried out an investigated narrative research with three mothers who lived through the period of compulsory internment. The speeches reveal two distinct moments in the experience of motherhood: the separation of the children with their subsequent return to home and the adoption of other children to achieve motherhood. It is considered that the adoption has promoted the meeting with the meaning of existence that had been broken and allowed the experience of being a parent.

  14. A study on the venom yield of venomous snake species from Argentina.

    Science.gov (United States)

    de Roodt, A R; Dolab, J A; Galarce, P P; Gould, E; Litwin, S; Dokmetjian, J C; Segre, L; Vidal, J C

    1998-12-01

    A study on the venom yield of snakes from Argentina over a three year period was carried out on adult specimens of Bothrops alternatus (n = 74); Bothrops neuwiedii (n = 127); Bothrops ammodytoides (n = 30); Bothrops moojeni (n = 14); Bothrops jararaca (n = 14); B. jararacussu (n = 6); Crotalus durissus terrificus (n = 120) and Micrurus spp. (n = 6) as well as with 12 specimens of newborn C. d. terrificus kept in captivity. While for each species there was a positive correlation between venom yield and number of snakes milked, the correlation with the snake's body weights after individual milkings was even better, suggesting that the size of the snakes is more important in determining the venom yield than the number of snakes milked or the specimen's sex. Individual milkings indicated that, in addition to the snake size, when the amount of venom is normalized per 100 g body weight there is a species specific difference in venom yield. It follows the order B. jararacussu > B. moojeni approximately = B. jararaca approximately = B. alternatus > B. neuwiedii> Micrurus spp approximately = B. ammodytoides> C. d. terrificus. Although the venom yield per 100 g body weight of newborn C. d. terrificus specimens is 2-fold higher than that of adults, no correlation was observed between venom yield and body weight.

  15. Índices de onda P na predição de recorrência de fibrilação atrial após isolamento da veia pulmonar

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Ahmed Salah

    2013-12-01

    Full Text Available FUNDAMENTO: Índices de ondas P são marcadores interessantes para prever recorrências de fibrilação atrial (FA pós ablação. OBJETIVO: Esse estudo avalia o valor dos índices de onda P para prever recorrências após isolamento da veia pulmonar (IVP em pacientes com fibrilação atrial paroxística. MÉTODOS: Foram selecionados 198 pacientes (57 ± 8 anos, 150 homens com FA paroxística sintomática refratária a medicamentos submetidos ao IVP em nosso hospital. Um eletrocardiograma de 12 derivações foi utilizado para medir a duração da onda P na derivação II, a força terminal de P (FTP na derivação V1, o eixo e a dispersão da onda P. RESULTADOS: No acompanhamento de 9 ± 3 meses, as recorrências ocorreram em 60 (30,3% pacientes. Os pacientes que apresentaram recorrência de FA tiveram maior duração média de onda P (122,9 ± 10,3 versus 104,3 ± 14,2 ms, p 125 ms apresenta 60% de sensibilidade, especificidade de 90%, valor preditivo positivo (VPP de 72% e valor preditivo negativo (VPN de 83,7%, enquanto a dispersão da onda P > 40 ms tem 78% de sensibilidade, 67% de especificidade, PPV 51% e VPN de 87,6%. 48/66 (72,7% dos pacientes com FTP -0,04 mm/segundo tiveram recorrência de FA (p 125 ms, a dispersão da onda P > 40 ms e FTP em V1 < -0,04 mm/sec são bons preditores clínicos das recorrências de FA pós IVP em pacientes com fibrilação atrial paroxística; contudo, eles não foram independentes do tamanho do átrio esquerdo e da idade.

  16. Crotacetin, a novel snake venom C-type lectin, is homolog of convulxin

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    G. Rádis-Baptista

    2005-12-01

    Full Text Available Snake venom (sv C-type lectins encompass a group of hemorrhagic toxins, which are able to interfere with hemostasis. They share significant similarity in their primary structures with C-type lectins of other animals, and also present a conserved carbohydrate recognition domain (CRD. A very well studied sv C-type lectin is the heterodimeric toxin, convulxin (CVX, from the venoms of South American rattlesnakes, Crotalus durissus terrificus and C. d. cascavella. It consists of two subunits, alfa (CVXalpha , 13.9 kDa and beta (CVXbeta , 12.6 kDa, joined by inter and intra-chain disulfide bounds, and is arranged in a tetrameric alpha4beta4 conformation. Convulxin is able to activate platelet and induce their aggregation by acting via p62/GPVI collagen receptor. Several cDNA precursors, homolog of CVX subunits, were cloned by PCR homology screening. As determined by computational analysis, one of them, named crotacetin beta subunit, was predicted as a polypeptide with a tridimensional conformation very similar to other subunits of convulxin-like snake toxins. Crotacetin was purified from C. durissus venoms by gel permeation and reverse phase high performance liquid chromatography. The heterodimeric crotacetin is expressed in the venoms of several C. durissus subspecies, but it is prevalent in the venom of C. durissus cascavella. As inferred from homology modeling, crotacetin induces platelet aggregation but noticeably exhibits antimicrobial activity against Gram-positive and Gram-negative bacteria.

  17. Isolamento de fungos degradadores de carbendazim

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Célia Maria Maganhotto de Souza Silva

    1999-07-01

    Full Text Available Os fungicidas sistêmicos do grupo dos benzimidazóis são amplamente utilizados no controle de muitas doenças de plantas, tanto no solo como na parte aérea, e isso tem sido causa de contaminação ambiental. A ação de alguns microorganismos contribui para degradação e perda da atividade biológica desses fungicidas, podendo reduzir, dessa forma, o risco de impactos negativos. O objetivo deste trabalho foi selecionar fungos com potencial para degradar benomil e seu produto de hidrólise, carbendazim, e quantificar o potencial de degradação. Fungos foram isolados de três diferentes solos da região de agricultura irrigada do município de Guaíra, SP, com histórico de aplicação intensiva de fungicidas benzimidazóis. Dentre os fungos isolados, Alternaria alternata foi a linhagem menos afetada pelo aumento na concentração de benomil no meio de cultura. Na concentração máxima (100 mig mL-1 a inibição da taxa de crescimento de A. alternata foi 22%, enquanto nas demais linhagens foi superior a 45%. Em meio de cultura líquido suplementado com carbendazim, a taxa de crescimento em biomassa de A. alternata foi 43% maior do que a no meio sem carbendazim, o que indica o consumo do fungicida como fonte de carbono. A. alternata degradou rapidamente o fungicida, chegando a 66,21% de desaparecimento do produto em dois dias. A meia-vida de carbendazim nessas condições foi de 1,16 dias.

  18. Isolamento, armazenamento e determinação da colonização por fungos “dark septate” a partir de plantas de arroz. = Isolation, storage and determination of fungal colonization “dark septate” from rice plants.

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    Karen Gonçalves Ribeiro

    2011-08-01

    Full Text Available Endophyte fungi known as DSEF can be plant-growth-promoting. Aiming to improve a methodology for the isolation, storage and determine the rice roots colonization by “dark septate”, a study was developed based on the achievement of these microorganisms in Oryza glumaepatula plants collected in Amazon region. The plant roots of twelve O. glumaepatula samples were sectioned, disinfected, and placed in plates with agar-malte medium added of chloramphenicol, sulphametazole and trimetropin. The isolates were evaluated in relation of dark septate characteristics and stored in distilled water, and in distilled water added of glycerol. Five isolates considered dark septate were re-inoculated in O. glumaepatula and O. sativa, and also analyzed through amplification and sequencing of ITS1-5.8S-ITS2 region. The agar-malte medium was efficient to isolate dark septate, and more than 50 isolates were obtained. The distilled water and also distilled water added of glycerol were efficient to maintain the fungus culture at least 12 months. The five isolates re-inoculated were able to colonize both O. glumaepatula and O. sativa, without pathogenic symptoms observed. The molecular approach reveled that these fungus are not similar to each other and also to others dark septate already described. These results show that the proposed methodology was efficient to obtain distinct fungus species and O. glumaepatula is a host to high diversity of this fungus group.=Os fungos endofíticos conhecidos como DSEF ou “dark septate” podem ser promotores de crescimento vegetal. Com o objetivo de aperfeiçoar uma metodologia para o isolamento, armazenamento e determinação da colonização de raízes de arroz por fungos “dark septate” desenvolveu-se um estudo a partir da obtenção destes microrganismos em plantas de Oryza glumaepatula coletadas em ambientes amazônicos. As raízes das plantas de doze amostras de O. glumaepatula foram seccionadas, desinfestadas e

  19. St. Louis encephalitis vírus: first isolation from a human in São Paulo state, Brasil Vírus da encefalite São Luis: primeiro isolamento de humano no Estado de São Paulo, Brasil

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    Iray M. Rocco

    2005-10-01

    Full Text Available This paper reports the isolation of St. Louis encephalitis virus (SLEV from a febrile human case suspected to be dengue, in São Pedro, São Paulo State. A MAC-ELISA done on the patient's acute and convalescent sera was inconclusive and hemagglutination inhibition test detected IgG antibody for flaviviruses. An indirect immunofluorescent assay done on the C6/36 cell culture inoculated with the acute serum was positive for flaviviruses but negative when tested with dengue monoclonal antibodies. RNA extracted from the infected cell culture supernatant was amplified by RT-PCR in the presence of NS5 universal flavivirus primers and directly sequenced. Results of BLAST search indicated that this sequence shares 93% nucleotide similarity with the sequence of SLEV (strain-MSI.7, confirmed by RT-PCR performed with SLEV specific primers. Since SLEV was identified as the cause of human disease, it is necessary to improve surveillance in order to achieve early detection of this agent in the state of São Paulo and in Brazil. This finding is also an alert to health professionals about the need for more complete clinical and epidemiological investigations of febrile illnesses as in the reported case. SLEV infections can be unrecognized or confused with other ones caused by an arbovirus, such as dengue.O presente estudo relata o isolamento do vírus da encefalite São Luis (SLEV de um caso febril humano suspeito de dengue, em São Pedro, Estado de São Paulo. MAC-ELISA realizado com soros das fases aguda e convalescente foi inconclusivo e anticorpos IgG foram detectados por inibição da hemaglutinação para flavivirus. Imunofluorescência indireta com cultura de células C6/36 inoculadas com soro da fase aguda foi positivo para flavivirus mas negativo quando testado com anticorpos monoclonais para dengue. O RNA extraído de cultura de células infectadas foi amplificado na presença de primers universais para o gênero Flavivirus, deduzidos de uma regi

  20. Isolation and recovery of glycomacropeptide from milk whey by means of thermal treatment Isolamento e recuperação do glycomacropeptido do soro de leite mediante tratamento térmico

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    Evelin Rojas

    2013-03-01

    Full Text Available During enzymatic process of cheese manufacturing, rennin cleaves κ-casein releasing two fractions: para-κ-casein and glycomacropeptide (GMP, which remains soluble in milk whey. GMP is a peptide with structural particularities such as chain carbohydrates linked to specific threonine residues, to which a great variety of biological activities is attributed. Worldwide cheese production has increased generating high volumes of milk whey that could be efficiently used as an alternative source of high quality peptide or protein in foodstuff formulations. In order to evaluate isolation and recovery on whey GMP by means of thermal treatment (90 °C, 18 samples (2 L each of sweet whey, resuspended commercial whey (positive control and acid whey (negative control were processed. Indirect presence of GMP was verified using chemical tests and PAGE-SDS 15%. At 90 °C treated sweet whey, 14, 20 and 41 kDa bands were observed. These bands may correspond to olygomers of GMP. Peptide recovery showed an average of 1.5 g/L (34.08%. The results indicate that industrial scale GMP production is feasible; however, further research must be carried out for the biological and nutritional evaluation of GMP's incorporation to foodstuff as a supplement.No processo enzimático da elaboração do queijo, a renina hidrolisa a κ-caseína gerando duas frações: a para-κ-caseína e o glycomacropeptido (GMP que se faz solúvel no lactossoro. O GMP é um péptido com particularidades estruturais como a presença de carbo-hidratos colados a resíduos específicos da treonina, ao qual se atribui uma enorme variedade de atividades biológicas. A produção mundial de queijo aumentou, gerando um grande volume de soro de leite que pode ser utilizado de forma eficiente como fonte alternativa de peptídeo ou proteína de alta qualidade, na formulação de alimentos. Para fazer uma avaliação do isolamento e recuperação do GMP mediante tratamento térmico do lactossoro a 90

  1. Isolation and serological identification of enteropathogenic Escherichia coli in pasteurized milk in Brazil Isolamento e identificação sorológica de Escherichia coli enteropatogênica em leite pasteurizado

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Zoraide N da Silva

    2001-08-01

    úricos foi determinada pela técnica da contagem padrão em placa. A identificação fisiológica de E. coli foi realizada por metodologia convencional e a identificação sorológica de EPEC, com a utilização de soros comerciais. RESULTADOS: As três marcas de leite pasteurizado apresentaram contagens bacterianas acima do padrão permitido pela legislação brasileira. Foram isoladas 208 cepas de E. coli, entre as quais 46 (22,1% foram sorogrupadas como EPEC. O sorogrupo mais freqüente foi o O55 (15,2%. CONCLUSÕES: Apesar de estudos recentes sobre fatores de virulência indicarem que nem todas as cepas sorogrupadas como EPEC são capazes de causar a lesão A/E (attaching/ effacing, considerou-se que o isolamento de sorogrupos de EPEC, nesse alimento, representa risco potencial para crianças e, também, possível meio de veiculação de outros enteropatógenos.

  2. Crotamine and crotoxin interact with tumor cells and trigger cell death

    Energy Technology Data Exchange (ETDEWEB)

    Soares, Marcella Araugio; Pujatti, Priscilla Brunelli; Santos, Raquel Gouvea dos [Centro de Desenvolvimento da Tecnologia Nuclear CDTN/CNEN-MG, Belo Horizonte, MG (Brazil)]. E-mails: maso@cdtn.br; santosr@cdtn.br; Dias, Consuelo Latorre Fortes [Fundacao Ezequiel Dias FUNED, Belo Horizonte, MG (Brazil); Chavez Olortegui, Carlos Delfin [Universidade Federal de Minas Gerais UFMG, Belo Horizonte, MG (Brazil). Inst. de Ciencias Biologicas; Santos, Wagner Gouvea dos [Medical College of Virginia, Richmond, VA (United States). Neurosurgery Dept.

    2007-07-01

    Crotoxin (Crtx) and Crotamine (Crota) are polypeptides isolated from Crotalus durissus terrificus snake venom (CV). Previous reports have been shown therapeutic effects of Crotalus durissus terrificus venom and Crtx on skin, breast and lung tumours, although, the mechanisms of this antitumoral effect are still unknown. The aim of this work was to investigate the antitumoral effect of Crtx and Crota on brain tumours cells (GH3 and RT2) in vitro and their capacity of interaction with these tumour cells membranes. Cell survival after Crtx and Crota treatment was evaluated by MTT assay in different times post-treatment and apoptosis was evaluated by DAPI staining. In order to evaluate the specific interaction of Crtx and Crota, these polypeptides were radiolabelled, using {sup 125}I as radiotracer and binding assays were performed. The results were compared with the binding in nontumoral brain tissue. Crtx and Crota induced apoptosis on both tumour cells lineages but, Crota was more powerful than Crtx 90% and 20% cell death for RT2 cells; 80% and 20% cell death for GH3 cells, respectively). Both {sup 125}I-Crtx and {sup 125}I-Crota bound specifically in glioblastoma membranes. Nonetheless, CV polypeptides recognised glioblastoma cells with higher specificity than normal brain tissue. These results suggest that the Crtx and Crota interactions with the plasmatic membrane of tumour cells may be the first step of the cascade of signalling that trigger their antitumoral effect. (author)

  3. Prevalence of Hepatozoon spp. (Apicomplexa, Hepatozoidae among recently captured Brazilian snakes

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    O'Dwyer L.H.

    2003-01-01

    Full Text Available The goal of this study was to determine the prevalence of Hepatozoon spp. infection in recently captured snakes from Botucatu, São Paulo State, Brazil. Blood was collected from all snakes by ventral tail venipuncture. Blood smears were air dried, fixed with methanol, and stained with 10% Giemsa solution. The slides were microscopically examined for detection of hemoparasites by light microscopy at 250x magnification. A total of 238 snakes from 23 species were examined, of which 135 (56.7% were venomous and 103 (43.3% non-venomous snakes. The more numerous venomous species sampled were Crotalus durissus terrificus (n=108 and Bothrops jararaca (n=17 and non-venomous snakes were Oxyrhopus guibei (n=35, Boa constrictor amarali (n=18, and Waglerophis merremi (n=13. Hepatozoon spp. infection was detected in 39 (16.4% snakes. The prevalence in venomous and non-venomous snakes was 20.0% and 11.7%, respectively. The highest prevalences observed were 38.9% for Boa constrictor amarali, 35.3% for Bothrops jararaca, and 19.4% for Crotalus durissus terrificus.

  4. Isolamento de Arcobacter butzleri de músculos de carcaças de suínos de terminação e de matrizes descartadas abatidos em um matadouro no Estado do Rio Grande do Sul, Brasil Isolation of Arcobacter butzleri from muscles of the carcasses of fattening pigs and culled sows slaughtered in abattoir in the State of Rio Grande do Sul, Brazil

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Sérgio José de Oliveira

    2003-10-01

    Full Text Available Foram colhidos fragmentos de músculos da carcaça de 74 suínos de abate e de 150 porcas descartadas de granjas de ciclo completo, abatidos em frigorífico no Rio Grande do Sul. Os materiais foram inoculados em meio EMJH (Ellinghausen, MacCullough, Johnson & Harris, incubados a 30ºC e o cultivo foi passado a placas de agar sangue através de membrana de 0,45µm. Foram obtidas 69 amostras de Arcobacter sp, classificadas por PCR como A. butzleri, respectivamente de suínos de abate (21 isolamentos, 29,3% e matrizes descartadas (48 isolamentos, 32%.Portions of muscle from carcasses of 74 fattening pigs and 150 culled sows were collected from abattoir in the State of Rio Grande do Sul, Brazil. The samples were inoculated into EMJH (Ellinghausen, MacCullough, Johnson & Harris medium and the culture filtered through 0.45µm membrane on blood agar. Arcobacter sp were isolated, 69 isolates, typed by PCR as Arcobater butzleri, respectively from fattening pigs (21 isolates, 29.3% and culled sows (48 isolates, 32%.

  5. Comparação de duas técnicas de isolamento do Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis em amostras de fezes de ovinos com suspeita clínica de paratuberculose Comparison of two techniques of isolation of Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis in faecal samples of ovine with clinical suspicion of paratuberculosis

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Ana Cláudia Coelho

    2009-05-01

    Full Text Available A paratuberculose é uma enterite crônica granulomatosa causada por Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis que afeta principalmente os ruminantes. A cultura de bactérias a partir de amostras de fezes e tecidos constitui um dos métodos mais eficazes de diagnóstico, sendo ainda o único método disponível para obtenção de isolamentos e estirpes de micobactérias. Contudo, este método apresenta baixa sensibilidade e requer meses de incubação antes do crescimento de colônias. Neste estudo, utilizou-se a cultura fecal como método de diagnóstico em ovinos de diferentes raças portuguesas, com sinais compatíveis com a doença. Fez-se ainda a comparação entre os meios de cultura Löwenstein Jensen® com micobactina® J e o de Middlebrook® 7H11 com OADC®, utilizados no isolamento da bactéria. As percentagens de isolamento em cada um os meios foram de 2,0% (6/300 para Löwenstein Jensen® com micobactina J e 1,0% (3/300 para Middlebrook® 7H11/OADC. As três amostras positivas no meio de Middlebrook® 7H11/OADC também foram positivas no meio de Löwenstein Jensen® com micobactina J e nenhuma foi somente positiva no meio de Middlebrook® 7H11/OADC. Os resultados deste estudo sugerem que o meio de Löwenstein-Jensen® com micobactina® J é mais efetivo para a obtenção de estirpes ovinas em Portugal.Paratuberculosis is a chronic enteric disease of ruminants caused by Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis. Culture of bacteria from faeces and tissues samples constitutes one of the most effective methods of confirming the diagnosis of para-tuberculosis and the only method available to obtain strains of mycobacteria. However, this method is less sensitive and requires months of incubation before colony growth occurs. In this study, culture method was used on sheep faeces to diagnose paratuber-culosis in animals with compatible signs of the disease. A comparison of two culture media used to isolation was also investigated

  6. Bovine herpesvirus 5 detection by virus isolation in cell culture and multiplex-PCR in central nervous system from cattle with neurological disease in Brazilian herds Detecção do herpesvírus bovino 5 por isolamento viral e multiplex-PCR em SNC de bovinos com doença neurológica em rebanhos brasileiros

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Marlise Pompeo Claus

    2007-09-01

    fragmentos estocados de sistema nervoso central (SNC de bovinos com sinais clínicos neurológicos. Foram avaliadas 47 amostras congeladas de fragmentos de SNC de bovinos jovens e adultos pertencentes a 31 rebanhos de três regiões geográficas brasileiras (Sul, Sudeste e Centro-oeste. Por meio do isolamento viral em cultivo celular foi possível o isolamento do BoHV em 18 (38,3% amostras. Pela técnica de multiplex-PCR 30 (63,8% amostras de SNC foram positivas para o BoHV-5. Todas as 18 amostras positivas no isolamento viral foram confirmadas como BoHV-5 pela multiplex-PCR, proporcionando um incremento na taxa de diagnóstico do BoHV-5 de 25,5% (12/47. Em nenhuma das amostras avaliadas foi possível a identificação do BoHV-1 pela multiplex-PCR. Esse estudo retrospectivo demonstrou a ampla distribuição da infecção pelo BoHV-5 nos rebanhos bovinos brasileiros uma vez que resultados positivos foram obtidos em amostras de SNC colhidas de bovinos com doença neurológica, provenientes dos estados do Paraná, São Paulo, Minas Gerais, Mato Grosso e Mato Grosso do Sul.

  7. Comparison of different selective enrichment steps to isolate Salmonella sp. from feces of finishing swine Comparação de diferentes etapas de enriquecimento seletivo no isolamento de Salmonella sp. de fezes de suínos de terminação

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Geovana Brenner Michael

    2003-06-01

    -Lisina-Tergitol 4 (XLT4, e ágar Verde-brilhante Vermelho-neutro Lactose Sacarose (VB. Na segunda fase os caldos RV, TMK37, and TMK42, semeados nos meios XLT4 and VB, foram testados com amostras naturalmente contaminadas. No isolamento de Salmonella sp. em amostras artificialmente contaminadas o RV, TMK42 e TMK37 foram superiores ao SC. Na segunda fase o TMK42 e RV foram mais eficientes que o TMK37. O desempenho destas etapas de enriquecimento seletivo influenciou diretamente a capacidade seletiva e indicadora dos meios sólidos seletivos utilizados. No presente estudo, a associação TMK42/XLT4 demonstrou ser a mais sensível, e a RV/XLT4 a mais específica. O uso do meio VB também é recomendado para aumentar a probabilidade do isolamento de colônias atípicas de Salmonella - produtoras tardias ou não produtoras de H2S. No presente estudo, RV e TMK42 foram as etapas de enriquecimento seletivo mais eficientes para o isolamento de Salmonella de fezes de suínos.

  8. Avaliação da sensibilidade da cultura de leite do tanque para isolamento de agentes contagiosos da mastite bovina Evaluation of the sensitivity of bulk tank milk cultures for the isolation of contagious bovine mastitis pathogens

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Maria Aparecida V. P. Brito

    1998-01-01

    Full Text Available Amostras de leite total (leite do tanque de 33 rebanhos foram coletadas na plataforma de recepção da indústria laticinista e cultivadas para detectar patógenos específicos (contagiosos da mastite. Foi feita a contagem de células somáticas (CCS das amostras utilizando o equipamento Fossomatic 90. Em 13 e 12 rebanhos avaliaram-se duas e três amostras semanais consecutivas, respectivamente, e em oito avaliou-se apenas uma. Foram também examinadas três amostras diárias consecutivas do leite do tanque e amostras dos quartos mamários individuais, coletadas na própria fazenda, de todas as vacas em lactação de quatro rebanhos (A, B, C e D. As amostras de leite dos quartos mamários individuais foram cultivadas em ágar sangue e as amostras do tanque, em placas de TKT, Sal Manitol, MacConkey e Sabouraud contendo cloranfenicol. Dos 33 rebanhos cujas amostras foram obtidas na plataforma de recepção da indústria, isolou-se Staphylococcus aureus de 26, nove desses em associação com Streptococcus agalactiae e em três rebanhos isolou-se somente S. agalactiae. Nove rebanhos tiveram CCS acima de 500.000 ml-1 e 21, abaixo de 400.000 ml-1. Em cinco dos nove rebanhos com CCS acima de 500.000 ml-1 foram isolados S. aureus e S. agalactiae, em três, apenas S. aureus e em um, apenas S. agalactiae. Seis rebanhos apresentaram CCS abaixo de 200.000 ml-1; de um deles foram isolados S. aureus e S. agalactiae, de três, S. aureus e os outros dois foram negativos para estes dois patógenos. Os resultados encontrados nos quatro rebanhos cujas amostras foram coletadas na própria fazenda mostraram que S. aureus foi isolado nas seguintes porcentagens dos animais: 1,8%, 19,2%, 17,0% e 8,4% e dos quartos mamários: 0,9%, 5,9%, 5,4% e 2,2%, respectivamente, para os rebanhos A, B, C e D. S. agalactiae foi isolado dos rebanhos A, C e D. Nestes três rebanhos, as porcentagens de isolamento foram, respectivamente, 1,8%, 10,6% e 8,4% para as vacas e 0,46%, 3,8% e 3

  9. Evolução dos isolamentos em doenças transmissíveis: os saberes na prática contemporânea Evolución del aislamiento en las enfermedades transmisibles: los saberes en la práctica contemporánea Evolution of the isolation of contagious diseases: knowledge in contemporary practice

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Lúcia Yasuko Izumi Nichiata

    2004-03-01

    Full Text Available A identificação de novos agentes infecciosos, a crescente expansão de infecções e doenças já conhecidas têm estimulado a revisão das medidas de biossegurança nas atividades profissionais dos trabalhadores da saúde. No presente artigo recuperou-se a evolução dos saberes e práticas dos isolamentos/precauções, o que permitiu resgatar os conceitos e as intervenções que vieram sendo formuladas e implementadas. Desde o início da enfermagem moderna, no século XIX, mantém-se basicamente os mesmos elementos da prática dos isolamentos em doenças transmissíveis, ou seja, destaque à utilização de barreiras mecânicas, químicas e ambientais, fundamentadas nas especificidades inerentes aos elementos da cadeia do processo infeccioso.La identificación de nuevos agentes infecciosos, la creciente expansión de infecciones y enfermedades ya conocidas, han estimulado la revisión de las medidas de bioseguridad en las actividades profesionales de los trabajadores de la salud. En el presente artículo, se recuperó la evolución de los saberes y de las prácticas de aislamiento/precauciones, lo que permitió rescatar los conceptos y las intervenciones que vienen siendo formuladas e implementadas. Desde el nacimiento de la enfermería moderna en el siglo XIX, se mantienen básicamente los mismos elementos de las prácticas de aislamiento en enfermedades transmisibles, es decir, predomina la utilización de barreras mecánicas, químicas y ambientales, fundamentadas en las especificidades inherentes a los elementos de la cadena del proceso infeccioso.The identification of new infectious agents and the ever increasing expansion of known infections and diseases have been stimulating the revision of biosafety measures in the activities of professional health care workers. In the present article, the evolution of knowledge and practices of isolation and precautions were reviewed, which allowed us to recover the concepts and the interventions

  10. Isolamento e regeneração de protoplastos de Penicillium brevicompactum - DOI: 10.4025/actascibiolsci.v26i4.1529 Isolation and regeneration of Penicillium brevicompactum protoplasts - DOI: 10.4025/actascibiolsci.v26i4.1529

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Jorge Fernando Pereira

    2004-04-01

    Full Text Available O isolamento e regeneração de protoplastos de fungos é um passo fundamental para o estabelecimento de sistemas de transformação, análise do cariótipo molecular e fusão entre linhagens, que são técnicas de ampla aplicação em programas de melhoramento para fungos filamentosos. Neste trabalho foram testados diferentes preparações enzimáticas e estabilizadores osmóticos para estabelecer condições otimizadas de isolamento e regeneração de protoplastos de Penicillium brevicompactum, que é um excelente produtor de pectinases. Protoplastos de P. brevicompactum foram obtidos em maior quantidade quando o micélio foi digerido com 15mg.mL-1 de Glucanex (Novo Nordisk em NaCl 0,8 mol.L-1 como estabilizador osmótico. O melhor estabilizador osmótico para a regeneração dos protoplastos foi KCl 0.8 mol.L–1 apresentando uma freqüência de regeneração de 36,58%. Esse protocolo pode ser utilizado em análises genéticas para essa espécie de Penicillium cujos estudos têm sido pouco reportadosThe isolation and regeneration of fungal protoplasts is a key step for the establishment of transformation systems, electrophoretic karyotype analysis and fusion between strains, all techniques of broad application on improvement programs of filamentous fungi. To establish conditions for the isolation and regeneration of ,em>Penicillium brevicompactum protoplasts, that is an excellent pectinase producer, different lytic enzymes and osmotic stabilizers were tested. P. brevicompactum protoplasts were obtained at a larger scale when their mycelium was digested with 15mg.mL-1 of Glucanex (Novo Nordisk and 0.8 mol.L–1 NaCl as osmotic stabilizer. The best osmotic stabilizer for the regeneration of P. brevicompactum protoplasts was 0.8 mol.L–1 KCl, with a regeneration frequency of 36.58%. This protocol can be applied in genetic analysis of this Penicillium species which, to date has been poorly characterized

  11. Envenomations by Bothrops and Crotalus snakes induce the release of mitochondrial alarmins.

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Irene Zornetta

    Full Text Available Skeletal muscle necrosis is a common manifestation of viperid snakebite envenomations. Venoms from snakes of the genus Bothrops, such as that of B. asper, induce muscle tissue damage at the site of venom injection, provoking severe local pathology which often results in permanent sequelae. In contrast, the venom of the South American rattlesnake Crotalus durissus terrificus, induces a clinical picture of systemic myotoxicity, i.e., rhabdomyolysis, together with neurotoxicity. It is known that molecules released from damaged muscle might act as 'danger' signals. These are known as 'alarmins', and contribute to the inflammatory reaction by activating the innate immune system. Here we show that the venoms of B. asper and C. d. terrificus release the mitochondrial markers mtDNA (from the matrix and cytochrome c (Cyt c from the intermembrane space, from ex vivo mouse tibialis anterior muscles. Cyt c was released to a similar extent by the two venoms whereas B. asper venom induced the release of higher amounts of mtDNA, thus reflecting hitherto some differences in their pathological action on muscle mitochondria. At variance, injection of these venoms in mice resulted in a different time-course of mtDNA release, with B. asper venom inducing an early onset increment in plasma levels and C. d. terrificus venom provoking a delayed release. We suggest that the release of mitochondrial 'alarmins' might contribute to the local and systemic inflammatory events characteristic of snakebite envenomations.

  12. [Pharmacologic and enzymatic effects of snake venoms from Antioquia and Choco (Colombia)].

    Science.gov (United States)

    Otero, R; Guillermo Osorio, R; Valderrama, R; Augusto Giraldo, C

    1992-01-01

    We compared several pharmacological and enzymatic effects induced by 11 snake venoms from seven species, six of them from different geographic areas of Antioquia and Choco, north-west of Colombia, South America (Bothrops atrox, B. nasutus, B. schlegelii, B. punctatus, Lachesis muta, Micrurus mipartitus), and Crotalus durissus terrificus venom, from specimens captured in other provinces of the country (Tolima, Huila, Meta and Atlantico). Differences were observed in edema-forming, hemorrhage, defibrination, indirect hemolysis, myonecrosis, proteolysis and lethal activity between venoms from different genera or species, as well as according to the geographic area of origin in B. atrox and B. nasutus snake venoms. Bothrops venoms, in particular B. atrox and L. muta, produced major local effects. All of the venoms, including M. mipartitus, had myotoxic effects. The most defibrinating venoms were B. atrox, L. muta, B. punctatus and C. d. terrificus. All of the venoms had indirect hemolytic activity; the venom of M. mipartitus being greatest. The most lethal venoms were those of C. d. terrificus and M. mipartitus. Within Bothrops species, the venom of B. schlegelii was the least active in terms of local and systemic pathologic effects.

  13. Cirurgia do arco aórtico com perfusão cerebral bilateral pelo isolamento do tronco braquiocefálico e da artéria carótida esquerda Aortic arch surgery with bilateral cerebral perfusion by isolation of brachiocephalic trunk and left carotid artery

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Valdo José Carreira

    2008-03-01

    Full Text Available OBJETIVO: Estudar os resultados da técnica descrita por Carreira et al. com utilização de perfusão cerebral seletiva bilateral (PCSAB pelo isolamento do tronco braquiocefálico e artéria carótida esquerda. MÉTODOS: Quinze pacientes foram operados consecutivamente entre de junho de 2005 e setembro de 2007. Os dados foram analisados por programa informatizado Epi Info e significância estatística com p0,05. CONCLUSÃO: A técnica de PCSAB é reprodutível e apresenta resultados semelhantes aos da literatura mundial. A excelente evolução neurológica e o fácil controle de sangramentos nas linhas de sutura podem ter contribuído com os resultados obtidos.OBJECTIVE: To evaluate the results of a technique described by Carreira et al. using bilateral antegrade selective cerebral perfusion by isolating the brachiocephalic trunk and the left carotid artery. METHODS: Fifteen patients were operated between June 2005 and September 2007. Data analysis were performed using Epi Info and statistical significance was set at p0.05. CONCLUSION: The technique of bilateral selective cerebral perfusion described by Carreira et al. can be performed by others and presents similar results to the international literature. The excellent neurological outcome and easy bleeding control on surgical sutures lines are the major advantages of this new procedure.

  14. Pesquisa de antigenos aglutinantes "major" 1, 2 e 3 em cepas de Bordetella pertussis, isoladas de crianças com coqueluche atendidas no Hospital de Isolamento Emílio Ribas de São Paulo, Brasil Determination of 1, 2 and 3 major antigens in Bordetella pertussis strains isolated from Brazilian children with whooping-cough

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Sebastião Timo Iaria

    1977-09-01

    Full Text Available Em 30 cepas de Bordetella pertussis isoladas de crianças com coqueluche, atendidas no Hospital de Isolamento Emílio Ribas de São Paulo, foram pesquisados os antígenos aglutinantes ''major" 1, 2 e 3. Levando-se em conta a presença combinada dos três antígenos, as provas de soro-aglutinação rápida em lamina revelaram que 25 (83,3% cepas possuiam os fatores 1, 2 e 3, enquanto que 3 (10,0% e 2 (6,7% foram positivas, somente, para 1, 2 e 1, 3, respectivamente. Os resultados foram discutidos, considerando-se a importância deste antígeno no preparo de vacinas.The presence of major antigens, 1, 2 and 3 were determined in 30 strains of B. pertussis isolated from children with whooping-cough hospitalized at the Hospital Emílio Ribas, São Paulo Brazil. The method used was the slide-agglutination test. Tests showed that 25(83.3% of strains were positives for factors 1, 2 and 3. Factores 1 and 3 alone were present in 3 (10% of strains and 1 and 2 alone in 2 (6.7%.

  15. Virus isolation and molecular characterization of canine distemper virus by RT-PCR from a mature dog with multifocal encephalomyelit Isolamento e caracterização molecular do vírus da cinomose canina por RT-PCR a partir de um cão adulto com encefalomielite multifocal

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Alexandre Mendes Amude

    2007-06-01

    Full Text Available A case of multifocal distemper encephalomyelitis in a mature dog is described. In the presented case the ante mortem clinical diagnosis of canine distemper virus (CDV infection could not be ideally performed due to the absence of typical signs of distemper, such as myoclonus and systemic signs accompanying the nervous signs. The definitive diagnosis of distemper encephalomyelitis was only carried out at post mortem through virus isolation in cell culture from fresh central nervous system (CNS fragments and CDV nucleoprotein gene detection in the CNS by RT-PCR.Descreve-se um caso de encefalomielite multifocal pela cinomose em um cão adulto. No caso apresentado o diagnóstico clínico da infecção pelo vírus da cinomose canina (CDV não pode ser adequadamente realizado devido à ausência de sinais típicos da enfermidade, tais como mioclonia e sinais sistêmicos. O diagnóstico definitivo somente foi possível post mortem pelo isolamento do CDV em cultivo celular a partir dos fragmentos frescos do sistema nervoso central (SNC e pela detecção do gene da nucleoproteína do CDV em fragmentos do SNC por meio da RT-PCR.

  16. Isolamento e identificação intratípica de cêpas de poliovirus associadas com a administração de vacina Sabin Isolation and intratypical identification on poliovirus strains following the administration of Sabin vaccine

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    José Alberto Neves Candeias

    1969-12-01

    Full Text Available Estudou-se a taxa de excreção de enterovírus em dois grupos de crianças de 1 a 4 anos de idade, que receberam várias doses de vacina Sabin. No primeiro grupo a colheita de fezes foi feita 60 dias após a administração da última dose de vacina e no segundo grupo, passados somente 15 dias. No primeiro grupo as porcentagens de isolamento de poliovírus e outros enterovírus foram, respectivamente, de 12,12% e 13,63%. já no segundo, estas porcentagens foram de 37,61% e 9,17%. Em ambos os grupos foram isolados os três tipos sorológicos de poliovírus. As taxas de isolamentos de poliovírus e outros enterovírus não se mostraram estatìsticamente diferentes, em ambos os grupos, quando relacionadas com o número de doses de vacina recebidas - duas ou menos doses e três ou mais doses. A identificação intratípica das cêpas de poliovirus isoladas foi feita pelos "marcadores" RCT40 e ds. Das 8 cêpas isoladas do primeiro grupo, 6 foram identificadas como intermediárias e 2 como cêpas naturais. Estas 2 cêpas foram isoladas das duas únicas crianças que não tinham sido vacinadas contra a poliomielite. Das 41 cêpas isoladas do segundo grupo, 8 foram caracterizadas como intermediárias e 33 como ceêpas tipicamente vacinais.The author studied the incidence of enterovirus excretion in 2 groups of children aged between 1 and 4 years, who had been given varying doses of Sabin polio vaccine. In the first group faeces were collected 60 days and in the second group 15 days after the last dose of vaccine had been given. In the first group 12,12% yielded poliovirus and 13,63% yielded "other enteroviruses"; in the second group the percentages were 37,61% and 9,17%. In both groups all three serological types of poliovirus were isolated. The previous vaccination status of the children in both groups, whether vaccinated with two or less or three or more doses, did not have a statistically significant effect on the subsequent virus isolations. The

  17. Isolation and expeditious morphological, biochemical and kinetic characterization of propolis-tolerant ruminal bacteria Isolamento e caracterização expedita morfológica, bioquímica e cinética de bactérias ruminais tolerantes a própolis

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Odimári Pricila Pires do Prado

    2010-09-01

    Full Text Available It was aimed in this work to evaluate bacterial strains tolerant to products based on propolis (LLOS through the isolation, morphological and biochemical characterization techniques in diets with roughage:concentrate ratio 100:0 and 50:50. For roughage diets, the products LLOSC1 and LLOSB3 were evaluated, and for 50:50% diets, the products LLOSC1, LLOSD1, LLOSA2, and LLOSC3, which differed in alcoholic concentrations (1, 2 and 3 and propolis (A, B, C and D concentrations. The ruminal liquid was anaerobically incubated at 39°C for 6 days in medium containing LLOS. After isolation, the strains were submitted to Gram staining and the bacterial growth was monitored by photospectrometer. It was evaluated the strain growth in the presence of the following subtracts: arabinose, cellulose, glucose, cellobiose, xylose, fructose, and lactose. In roughage diets, strains tolerant to LLOSC1 and LLOSB3 were similar to carbohydrates degradation, except lactose in which LLOSC1 was superior to strains tolerant to LLOSB3. For diets with 50:50 roughage:concentrate ratio, the products LLOSC3 and LLOSA2 stood out because they selected the highest number of strains able to degrade most of the tested carbohydrates. The results suggest that tolerance to propolis is higher in Gram-positive strains with several growth metabolic levels.Objetivou-se avaliar cepas bacterianas tolerantes a produtos à base de própolis pelas técnicas de isolamento, caracterização morfológica e bioquímica, em dietas com relação volumoso: concentrado de 100:0 e 50:50. Para dietas volumosas foram avaliados os produtos LLOSC1 e LLOSB3 e, para dietas 50:50% os produtos LLOSC1, LLOSD1, LLOSA2 e LLOSC3, diferentes quanto aos teores alcoólicos (1, 2 e 3 e as concentrações de própolis (A, B, C e D. O líquido ruminal foi incubado anaerobiamente a 39°C durante 6 dias em meio contendo LLOS. Após o isolamento, as cepas foram submetidas à coloração de Gram e o crescimento bacteriano foi

  18. Anthocyanins standards (cyanidin-3-O-glucoside and cyanidin-3-O-rutinoside isolation from freeze-dried açaí (Euterpe oleraceae Mart. by HPLC Isolamento de padrões de antocianinas (cianidina-3-O-glucosídeo e cianidina -3-O-rutinosídeo de açaí liofilizado (Euterpe oleraceae Mart. por CLAE

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Ana Cristina Miranda Senna Gouvêa

    2012-03-01

    Full Text Available Availability of analytical standards is a critical aspect in developing methods for quantitative analysis of anthocyanins. The anthocyanins cyanidin-3-O-glucoside and cyanidin-3-O-rutinoside were isolated from samples of freeze-dried açaí (Euterpe oleraceae Mart., which is a round and purple well-known palm fruit in Brazil, and then used as standards. The isolation of the anthocyanins was performed by High Performance Liquid Chromatography (HPLC, using an adapted six-channel selection valve. The identification of anthocyanin pigments in açaí was based on mass spectrometric data for molecular ions and MS-MS product ions and on previous published data. After the collection procedure, standards with a high purity grade were obtained and an external standard curve of each anthocyanin was plotted.Disponibilidade de padrões analíticos é um aspecto crítico no desenvolvimento de métodos de análises quantitativas de antocianinas. Para a obtenção dos padrões isolados de antocianinas cianidina-3-O-glicosídeo e cianidina-3-O-rutinosídeo foram utilizadas amostras liofilizadas de açaí (Euterpe oleraceae Mart., que é um conhecido fruto de palmeiras no Brasil de forma arredondada e roxo. O isolamento das antocianinas foi realizado por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE, utilizando uma válvula seletora de seis canais. A identificação de antocianinas no açaí foi baseada em dados publicados na literatura e por espectrometria de massas. Após a coleta, padrões com um alto grau de pureza foram obtidos e uma curva para padronização externa de cada antocianina foi feita.

  19. Efeitos da temperatura e da movimentação do ar sobre o isolamento térmico do velo de ovinos em câmara climática Effect of temperature and air velocity on the thermal insulation of the fleece of sheep in climatic chamber

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    Alex Sandro Campos Maia

    2009-01-01

    Full Text Available Foram utilizados dez ovinos da raça Corriedale - cinco machos e cinco fêmeas com pesos entre 52,2 e 87,6 kg - com o objetivo de avaliar o efeito da combinação da movimentação do ar (0 e 5,0 m/s com a temperatura do ar (25, 30 e 40ºC sobre a temperatura retal (T R, ºC, da epiderme (T E, ºC, da superfície do velo (T V, ºC e do interior do velo (T I, ºC e a espessura do velo (E V, cm e suas relações com o isolamento térmico do velo. A presença de vento não teve efeito sobre as variáveis estudadas, o que sugere que fluxo de ar (40ºC o fluxo de calor sensível não foi significativa.Ten Corriedale sheep were evaluated, five males and five females with 52.2 to 87.6 kg of body weight, to evaluate the effect of air velocity (0 and 5 m/s and temperature (25, 30 and 40ºC on rectal temperature (T R, ºC, skin temperature (T E, ºC, fleece surface temperature (T V, ºC, temperature inside the fleece (T I, ºC, and fleece thickness (E V, cm and their relationship with fleece thermal insulation. The results showed that air velocity did not affect the studied traits, suggesting that airflow 40°C, the sensible heat flow was not significant.

  20. Isolados 'como nós' ou isolados 'entre nós'?: a polêmica na Academia Nacional de Medicina sobre o isolamento compulsório dos doentes de lepra Isolated 'like us' or isolated 'among us'?: the controversy within the National Academy of Medicine over compulsory isolation of leprosy sufferers

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Vivian da Silva Cunha

    2010-12-01

    Full Text Available Da forma como a lepra era percebida na sociedade brasileira do início do século XX, a segregação dos doentes era vista como o único modo de proteger os sãos. A política praticada pela Inspetoria de Profilaxia da Lepra e das Doenças Venéreas privilegiava o isolamento em leprosários. Belisário Penna, crítico à atuação desta Inspetoria, defendia que a melhor forma de isolar os doentes seria através da criação de municípios geograficamente distantes dos centros urbanos. Em 1926, instaurou-se uma polêmica entre Penna e Eduardo Rabello, ex-chefe da Inspetoria, sobre esse tema. Essa polêmica se configurou como parte de um debate mais geral sobre a melhor forma de se controlar a lepra, e nos permite entender as mudanças ocorridas na década de 1930 acerca das políticas implementadas contra a doença.Given Brazilian society's view of leprosy in the early twentieth century, patient segregation was considered the only way to protect the healthy. The policy enforced by the Inspectorship for the Prevention of Leprosy and Venereal Diseases deemed isolation in leprosaria the preferred approach. Belisário Penna criticized the work of the Inspectorship, arguing that the best way to isolate patients would be to create municipalities located a good distance from urban centers. In 1926, Penna came head to head over the subject with Eduardo Rabello, the Inspectorship's former chief. Part of a broader debate on the best way to control leprosy, this controversy sheds light on the changes to leprosy policies introduced in the 1930s.

  1. Utilidade do Ultrassom intracardíaco no isolamento de veias pulmonares usando cateter-balão a laser Utilidad del ultrasonido intracardíaco en el aislamiento de venas pulmonares usando catéter-balón láser Utility of intracardiac ultrasound imaging to guide pulmonary vein ablation using laser balloon catheter

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    Luiz Leite

    2009-12-01

    Full Text Available FUNDAMENTO: O isolamento das veias pulmonares (IVP tem sido usado como endpoint para a ablação da fibrilação atrial (FA com cateter balão. OBJETIVO: Determinar a utilidade do ultrassom intracardíaco (USIC para guiar o IVP, usando cateter balão a laser. MÉTODOS: 59 VP foram ablacionadas em 27 cães. Imagens de Doppler foram usadas para identificar os vazamentos do fluxo sanguíneo entre a VP e o balão. Após cada liberação de energia, o cateter de mapeamento circular foi reposicionado para verificar se o isolamento tinha sido obtido. A posição de vazamento foi então correlacionada com a posição do gap no estudo patológico. A análise de regressão logística multivariada foi realizada. RESULTADOS: Cinquenta e nove VP foram submetidas à ablação. O tempo médio de energia liberada foi de 279±177 seg., o diâmetro médio do balão era de 23±3 mm, e o comprimento médio do balão era 25±4 mm. O isolamento completo foi obtido em 38/59 (64%, e foi significantemente mais comum sem vazamento: [30/38 (79% versus 8/23 (35%, pFUNDAMENTO: Se usó el aislamiento de las venas pulmonares (AVP como endpoint para la ablación de la fibrilación atrial (FA con catéter-balón. OBJETIVO: Determinar la utilidad del ultrasonido intracardíaco (USIC para guiar el AVP, usando catéter-balón láser. MÉTODOS: Se ablacionaron 59 VP en 27 perros. Se usaron imágenes de Doppler para identificar los derrames del flujo sanguíneo entre la VP y el balón. Tras cada liberación de energía, se reposicionó el catéter de mapeamiento circular para verificar si se obtuvo el aislamiento. Se correlaccionó, entonces, la posición del derrame con la posición del gap en el estudio patológico. Se realizó el análisis de regresión logística multivariada. RESULTADOS: Se sometieron 59 VP a la ablación. El tiempo promedio de energía liberada fue de 279±177 seg., el diámetro promedio del balón era de 23±3 mm, y la largura promedio del balón era 25±4 mm

  2. Molecular characterization of vancomycin-resistant Enterococci strains eight years apart from its first isolation in São Paulo, Brazil Caracterização molecular de espécies de Enterococci resistentes à vancomicina oito anos após seu primeiro isolamento em São Paulo, Brasil

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Pedro Alves d'Azevedo

    2008-08-01

    Full Text Available E. faecium was the first reported VRE species, carrying the vanA gene in Brazil. In spite of this, vancomycin-resistant E. faecalis has become the predominant species in Brazilian hospitals. The aim of this study was to evaluate the genetic relatedness of VREs isolated in a Brazilian teaching hospital eight years apart from its first isolation. We analyzed 38 VRE strains obtained from 81 surveillance cultures of patients admitted to the four largest intensive care units in Hospital São Paulo in February, 2006. Presence of the vanA gene was assayed by PCR and PFGE analysis was used for molecular characterization. All VRE strains carried the vanA gene. Two distinct clonal groups were observed among vancomycin-resistant E. faecalis. Vancomycin-resistant E. faecium belonged to five distinct clones were demonstrated by molecular typing. All of these clones were different from the first vancomycin-resistant enterococci clone isolated eight years ago in our hospital.E. faecium contendo o gene vanA foi a primeira espécie de VRE descrita, no Brasil. Apesar disto, E. faecalis resistente a vancomicina tem se tornado a espécie predominante nos hospitais brasileiros.O objetivo desse estudo foi avaliar a relação genética de VREs isolados em um hospital de ensino brasileiro após oito anos de seu primeiro isolamento. Analisamos 37 isolados de VRE obtidos de 81 culturas de vigilância de pacientes admitidos nas quatro maiores Unidades de Tratamento Intensivo em Fevereiro de 2006. A presença do gene vanA foi analisada por PCR e a caracterização molecular por PFGE. Todas as amostras VRE carreavam o gene vanA. Entre os E. faecalis vancomicina-resistentes, dois distintos grupos clonais foram observados. E. faecium resistente a vancomicina pertencentes a cinco clones distintos foram demonstrados por tipagem molecular. Todos esses clones foram diferentes do primeiro clone de enterococo resistente a vancomicina isolado oito anos atrás em nosso hospital.

  3. OPTIMIZACIÓN DEL AISLAMIENTO TÉRMICO DE UNA CUBIERTA TRANSPARENTE DE UN SECADOR HÍBRIDO DE Guadua angustifolia OTIMIZAÇÃO DE ISOLAMENTO TÉRMICO DE UMA TAMPA TRANSPARENTE DE SECADOR HÍBRIDO DE Guadua angustifolia THERMAL INSULATION OPTIMIZATION OF A TRANSPARENT COVER FROM HYBRID DRYER OF Guadua angustifolia

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Carlos Alberto Orozco

    2011-12-01

    Full Text Available El principal problema que tiene un secador solar híbrido (solar asistido con gas o electricidad son sus costos de operación por consumo de energía. Para ello se determinó el espesor óptimo de aire confinado en la cubierta plástica el cual actúa como aislamiento térmico, se calculó el coeficiente global de transferencia de calor 'U', se estimó la potencia de la fuente externa la cual fue de 1,8 kW y se encontró que el consumo de energía es aproximadamente 5,35 veces menos que la potencia del secador híbrido con cubierta sencilla. El concepto es aplicable a cualquier tipo de secador solar, solar-asistido o cualquier invernadero para el sector agroindustrial.0 principal problema con um secador solar híbrido (solar-gás assistido ou com electricidade são os custos operacionais para o consumo de energia. Para este fim a pesquisa determinou a espessura ideal de ar confinado na tampa de plástico (duas carnadas que atua como isolamento térmico, foi calculada a taxa global de transferencia de calor 'U' e estimada pela alimentação externa de 1,8 kW e descobriu que o consumo de energía é de cerca de 5,35 vezes menor do que a potência do secador revestido híbrido simples. 0 conceito é aplicável a qualquer tipo de secador solar, solar assistida ou qualquer tampa plástica no seitor agrícola.In a solar hybrid dryer (solar assisted gas or electricity its main problem is to minimize its operational costs due to energy consumption. For this, was determined the optimum thickness of air confined in the plastic cover as thermal isolation, was calculated overall coefficient of heat transfer 'U', and was estimated the power of the external source which was of 1,8 kW and found that energy consumption is approximately 5,35 times less than the power of the hybrid dryer with single plastic deck. The concept is applicable to any type of solar dryer, solar-assisted or any greenhouse in agroindustrial area.

  4. Evidência do cão como reservatório da leptospirose humana: isolamento de um sorovar, caracterização molecular e utilização em inquérito sorológico Evidence of dog as a reservoir for human leptospirosis: a serovar isolation, molecular characterization and its use in a serological survey

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Claudiomar Soares Brod

    2005-08-01

    Full Text Available A leptospirose canina é conhecida como enfermidade de Stuttgard desde 1898, sendo os cães, depois dos roedores, considerados como a segunda principal fonte de infecção para o homem. O isolamento de um sorovar patogênico da urina de um cão, laboratorial e clinicamente identificado como tendo leptospirose, e sua utilização para testar amostras de soro de casos de leptospirose humana e canina, evidenciou a sua importância no ecossistema da região sul do Brasil. Os resultados do teste de soroaglutinação microscópica indicaram que 100% das amostras de soro humano de 12 pacientes do banco de soro de 2001 do Centro de Controle de Zoonoses, que haviam reagido com títulos que variaram de 25 a 3.200 para o sorovar canicola, e 72% das amostras de 105 soros caninos do mesmo banco de soro, também reagiram contra o novo isolado. O título médio e mediana dos soros humanos testados com a bateria de antígenos recomendada pela OMS, foi respectivamente 630 e 100, ao passo que os testados com o isolado foi de 1.823 e 400. Nos soros caninos, os títulos foram respectivamente de 347 e 100 para a bateria e de 1.088 e 200 para o isolado.Canine leptospirosis has been known as Stuttgart disease since 1898, and dogs are considered to be the second principal source of infection in man. The isolation of a pathogenic serovar from dog urine that was diagnosed clinically and laboratorial as having leptospirosis and its utilization to test serological samples of human and canine cases of leptospirosis, has demonstrated its importance to the ecosystem of the southern region of Brazil. The results of the serological microscopic agglutination test indicated that 100% of human serum samples from 12 patients from the serum bank of 2001 at the Center for Control of Zoonoses, that had titers between 25 and 3,200 with the canicola serovar, and 72% of 105 canine serum samples from the same serum bank, also reacted with the new isolate. The mean and median titers of the

  5. Evaluation of snake venom phospholipase A{sub 2}: hydrolysis of non-natural esters

    Energy Technology Data Exchange (ETDEWEB)

    Pirolla, Renan A.S.; Baldasso, Paulo A.; Marangoni, Sergio; Moran, Paulo J.S.; Rodrigues, Jose Augusto R., E-mail: jaugusto@iqm.unicamp.b [University of Campinas (UNICAMP), SP (Brazil). Inst. of Chemistry. Dept. of Organic Chemistry

    2011-07-01

    Phospholipase A2 from the rattlesnake Crotalus durissus terrificus was employed for the first time to test its enantioselectivity on the hydrolysis of different non-natural esters. It was observed that the structure of this small enzyme is restrictive in the choice of its lipase action with non-natural substrates. Two forms of the enzyme were used; free and as its cross-linked enzyme aggregate (CLEA). With all substrates, the free enzyme showed activity similar to the CLEA preparation. The advantage of the CLEA phospholipase is the possibility to reuse it in several consecutive reactions without a decrease of activity and selectivity with good but higher yields and ee than with the free enzyme. (author)

  6. {sup 131}I-CRTX internal dosimetry: animal model and human extrapolation

    Energy Technology Data Exchange (ETDEWEB)

    Andrade, Henrique Martins de; Ferreira, Andrea Vidal; Soares, Marcella Araugio; Silveira, Marina Bicalho; Santos, Raquel Gouvea dos [Centro de Desenvolvimento da Tecnologia Nuclear (CDTN-CNEN-MG), Belo Horizonte, MG (Brazil)], e-mail: hma@cdtn.br

    2009-07-01

    Snake venoms molecules have been shown to play a role not only in the survival and proliferation of tumor cells but also in the processes of tumor cell adhesion, migration and angiogenesis. {sup 125}I-Crtx, a radiolabeled version of a peptide derived from Crotalus durissus terrificus snake venom, specifically binds to tumor and triggers apoptotic signalling. At the present work, {sup 125}I-Crtx biokinetic data (evaluated in mice bearing Erlich tumor) were treated by MIRD formalism to perform Internal Dosimetry studies. Doses in several organs of mice were determinate, as well as in implanted tumor, for {sup 131}I-Crtx. Doses results obtained for animal model were extrapolated to humans assuming a similar concentration ratio among various tissues between mouse and human. In the extrapolation, it was used human organ masses from Cristy/Eckerman phantom. Both penetrating and non-penetrating radiation from {sup 131}I in the tissue were considered in dose calculations. (author)

  7. Effects of gamma radiation on snake venoms

    Energy Technology Data Exchange (ETDEWEB)

    Nascimento, N.; Spencer, P.J.; Andrade, H.F.; Guarnieri, M.C.; Rogero, J.R

    1998-06-01

    Ionizing radiation is able to detoxify several venoms, including snake venoms, without affecting significantly their immunogenic properties. In order to elucidate this phenomena, we conceived a comparative pharmacological study between native and irradiated (2,000 Gy) crotoxin, the main toxin of the South American rattlesnake Crotalus durissus terrificus. Crotoxin was isolated and purified by molecular exclusion chromatography, pI precipitation and, subsequently submitted to irradiation. Gel filtration of the irradiated toxin resulted in some high molecular weight aggregates formation. Crotoxin toxicity decreased two folds after irradiation, as determined by LD{sub 50} in mice. Native and irradiated crotoxin biodistribution ocurred in the same general manner, with renal elimination. However, in contrast to irradiated crotoxin, the native form was initially retained in kidneys. A later concentration (2-3 hr) appeared in phagocytic mononuclear cells rich organs (liver and spleen) and neural junction rich organs (muscle and brain)

  8. Comparative morphocytologic study of native and irradiated crotoxin on CBA/J mice tissues and cells; Estudo morfocitologico comparativo de crotoxina nativa e irradiada em tecidos e celulas de camundongos CBA/J

    Energy Technology Data Exchange (ETDEWEB)

    Cardi, Bruno A.

    1995-12-31

    Snake venoms submitted to gamma radiation are better immunogens, have less toxic activity and maintain immunogenic and antigenic properties, favoring its use in anti-sera production which is the main therapy in human accidents. Severe human accidents attributed to neurotoxicity, are caused by Crotalus durissus terrificus, which main toxin - crotoxin - acts on neuro muscular junctions, as detected by electrophysiological studies and could be detoxified by gamma radiation. In order to evaluate the biological effects of this irradiated protein, we analyzed, at morphological and immunohistochemical levels, organs and cells from CBA/J mice challenged with crude venom or purified crotoxin, in an acute intoxication model. Both toxins were submitted to 2 kGy irradiation with a Co-60 source, in water solution. (author). 140 refs., 10 figs., 1 tab.

  9. Effects of gamma radiation on snake venoms

    Science.gov (United States)

    Nascimento, N.; Spencer, P. J.; Andrade, H. F.; Guarnieri, M. C.; Rogero, J. R.

    1998-06-01

    Ionizing radiation is able to detoxify several venoms, including snake venoms, without affecting significantly their immunogenic properties. Inn order to elucidate this phenomena, we conceived a comparative pharmacological study between native and irradiated (2,000 Gy) crotoxin, the main toxin of the South American rattlesnake Crotalus durissus terrificus. Crotoxin was isolated and purified by molecular exclusion chromatography, pI precipitation and, susbequentely submitted to irradiaiton. Gel filtration of the irradiated toxin resulted in some high molecular weight aggregates formation. Crotoxin toxicity decreased two folds after irradiation, as determined by LD 50 in mice. Native and irradiated crotoxin biodistribution ocured in the same general manner, with renal elimination. However, in contrast to irradiated crotoxin, the native form was initially retained in kidneys. A later concentration (2-3 hr) appeared in phagocytic mononuclear cells rich organs (liver and spleen) and neural junction rich organs (muscle and brain).

  10. Legionelose associada a pneumopatias em São Paulo: estudo da comprovação etiológica por isolamento e sorologia Legionellosis associated to pneumopaties in São Paulo: etiological confirmation by means of isolations and sorology

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Neusa Augusta de Oliveira Mazieri

    1993-02-01

    Full Text Available A presença de Legionella sp como patógeno atuante em nosso país não fora bem documentada, embora a literatura refira a importância deste agente em grande número de países. O presente trabalho teve como objetivo a detecção do microrganismo ou evidenciar sua resposta imunológica em pacientes portadores de pneumopatias infecciosas na cidade de São Paulo. Para tanto foi introduzida metodologia laboratorial específica para o cultivo e identificação do agente e aplicada reação sorológica para verificação de níveis de anticorpos correspondentes. Foram estudados pacientes de 2 centros universitários em São Paulo, correspondentes a 100 do Hospital Universitário U.S.P. com pneumopatias infecciosas em geral e 100 do Hospital das Clínicas F.M.U.S.P. com pneumopatias infecciosas previamente selecionados para afastar outras etíologias bacterianas e dentre estes 30 pertencentes a Unidade de Transplante Renal. O material biológico destinado ao cultivo de Legionella sp foi constituído por: escarro, secreção traqueal, líquido pleural, lavado brônquico ou biópsia de tecido pulmonar. As tentativas de isolamento do agente foram realizadas em meio de BCYE com e sem antibióticos, a identificação das colônias, foram realizadas através de provas de crescimento em placas de BCYE sem cisteína, provas bioquímicas, imunofluorescência direta e soroaglutinação em lâmina. A pesquisa do agente em material biológico foi realizado pelo método de imunofluorescência direta. A pesquisa de anticorpos específicos para Legionella pneumophila sorogrupo 1 foi efetuada pela reação de imunofluorescência indireta. Procedeu-se ainda a estudo sorológico nos comunicantes de pacientes com legionelose para evidenciar possível transmissão do agente. Em 2 casos obteve-se isolamento em cultura e em 4 casos, somente reação de imunofluorescência direta positiva para L. pneumophila sorogrupo 1, à partir do material biológico, representando um

  11. ISOLATION OF SHIGATOXIGENIC ESCHERICHIA COLI SEROGROUPS O157 AND O111 BY ISOLAMENTO DE CEPAS DE ESCHERICHIA COLI SHIGATOXIGÊNICAS SOROGRUPOS O157 E O111 POR SEPARAÇÃO IMUNOMAGNÉTICA APÓS DETECÇÃO POR PCR (NOTA DE PESQUISA

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Luciano Menezes Ferreira

    2008-10-01

    Full Text Available

    The objective of this study was to verify the isolation tax by immunomagnetic separation (IMS of strains of Shigatoxin producing Escherichia coli serogroups O157 and O111 in dairy farms in Jaboticabal-SP, Brazil, starting from positive samples, detected by the polimerase chain reaction (PCR. Initially feces, water and milk samples were submitted to a selection process, through a PCR multiplex, in order to detect the presence of sequences stx1, stx2 and eae. All of the positive samples in this first phase were submitted to a new PCR reaction targeting the sequences rfb O157 and rfb O111, what resulted in, respectively, 14.8% and 0.2% of positive feces samples for those serogroups and 2.4% and 10.0%, respectively, of water and milk positive samples for the serogroup O157. Those PCR positive samples were submitted to IMS, isolated strains of E. coli O157, were obtained of only 53.6% of the feces samples. There were no isolated strains of E. coli O157 from water and milk samples, they were not also isolated strains of E. coli O111 from any sample type. In conclusion, IMS, although more sensitive than other techniques, still doesn’t allow the isolation of E. coli O157 and O111 strains, of 100% of the PCR positive samples.

    KEY WORDS: E coli O111, E. coli O157, immunomagnetic separation, PCR, shigatoxin.

    Este trabalho teve como objetivo verificar a taxa de isolamento por separação imunomagnética (IMS de cepas de Escherichia coli produtoras de shigatoxinas dos sorogrupos O157 e O111 em rebanhos leiteiros do Município de Jaboticabal, SP, a partir de amostras positivas, detectadas pela reação em cadeia da polimerase (PCR. Inicialmente, amostras de fezes, água e leite foram submetidas a um processo de triagem, por meio de uma PCR multiplex, a

  12. Acidente crotálico na infância: aspectos clínicos, laboratoriais, epidemiológicos e abordagem terapêutica

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Palmira Cupo

    1991-06-01

    Full Text Available Foram atendidas no Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto/USP, durante os anos de 1980 a 1989, 21 crianças vítimas de acidente crotálico, 16 das quais apresentaram sinais clínicos de envenenamento grave à admissão e 5, de envenenamento moderado. Quatro pacientes (20% desenvolveram necrose tubular aguda, dois dos quais necessitaram métodos dialíticos. Um paciente (5% foi a óbito no 13.° dia do acidente, após intercorrências graves, como hemorragia digestiva e insuficiência respiratória aguda. São apresentadas as características clínicas, laboratoriais e epidemiológicas do acidente crotálico nesses pacientes, enfatizando os conhecimentos atuais sobre a fisiopatologia do envenenamento por Crotalus durissus terrificus. Ao mesmo tempo, pretendeu-se contribuir para a correta abordagem terapêutica, no que diz respeito ao emprego adequado do soro antiveneno e à prevenção da necrose tubular aguda, a mais séria e grave complicação do acidente crotálico.At the Hospital of Clinics of the Faculty of Medicine of Ribeirão Preto/USP during the years 1980-1989 21 children have been attended after rattlesnake bite: 16 severe and 5 with moderate envenomation. Four (20% developed acute tubular necrosis 2 necessitating dialysis. One patient died 13 days after the bite and grave complications including digestive hemorrhage and acute respiratory insuficiency. All patients preserved clinical laboratory and epidemiological characteristics of Crotalus durissus terrificus envenomation. We also comment on the correct management of such patients specially related to antivenin dosage and the prevention ofacute tubular the most serious complication of such an accident.

  13. A new heterologous fibrin sealant as a scaffold to cartilage repair-Experimental study and preliminary results.

    Science.gov (United States)

    de Barros, Caio Nunes; Miluzzi Yamada, Ana Lúcia; Junior, Rui Seabra F; Barraviera, Benedito; Hussni, Carlos Alberto; de Souza, Jaqueline Brandão; Watanabe, Marcos Jun; Rodrigues, Celso Antônio; Garcia Alves, Ana Liz

    2016-07-01

    Autologous fibrin gel is commonly used as a scaffold for filling defects in articular cartilage. This biomaterial can also be used as a sealant to control small hemorrhages and is especially helpful in situations where tissue reparation capacity is limited. In particular, fibrin can act as a scaffold for various cell types because it can accommodate cell migration, differentiation, and proliferation. Despite knowledge of the advantages of this biomaterial and mastery of the techniques required for its application, the durability of several types of sealant at the site of injury remains questionable. Due to the importance of such data for evaluating the quality and efficiency of fibrin gel formulations on its use as a scaffold, this study sought to analyze the heterologous fibrin sealant developed from the venom of Crotalus durissus terrificus using studies in ovine experimental models. The fibrin gel developed from the venom of this snake was shown to act as a safe, stable, and durable scaffold for up to seven days, without causing adverse side effects. Fibrin gel produced from the venom of the Crotalus durissus terrificus snake possesses many clinical and surgical uses. It presents the potential to be used as a biomaterial to help repair skin lesions or control bleeding, and it may also be used as a scaffold when applied together with various cell types. The intralesional use of the fibrin gel from the venom of this snake may improve surgical and clinical treatments in addition to being inexpensive and adequately consistent, durable, and stable. The new heterologous fibrin sealant is a scaffold candidate to cartilage repair in this study.

  14. A new heterologous fibrin sealant as a scaffold to cartilage repair—Experimental study and preliminary results

    Science.gov (United States)

    de Barros, Caio Nunes; Miluzzi Yamada, Ana Lúcia; Junior, Rui Seabra F; Barraviera, Benedito; Hussni, Carlos Alberto; de Souza, Jaqueline Brandão; Watanabe, Marcos Jun; Rodrigues, Celso Antônio

    2015-01-01

    Autologous fibrin gel is commonly used as a scaffold for filling defects in articular cartilage. This biomaterial can also be used as a sealant to control small hemorrhages and is especially helpful in situations where tissue reparation capacity is limited. In particular, fibrin can act as a scaffold for various cell types because it can accommodate cell migration, differentiation, and proliferation. Despite knowledge of the advantages of this biomaterial and mastery of the techniques required for its application, the durability of several types of sealant at the site of injury remains questionable. Due to the importance of such data for evaluating the quality and efficiency of fibrin gel formulations on its use as a scaffold, this study sought to analyze the heterologous fibrin sealant developed from the venom of Crotalus durissus terrificus using studies in ovine experimental models. The fibrin gel developed from the venom of this snake was shown to act as a safe, stable, and durable scaffold for up to seven days, without causing adverse side effects. Fibrin gel produced from the venom of the Crotalus durissus terrificus snake possesses many clinical and surgical uses. It presents the potential to be used as a biomaterial to help repair skin lesions or control bleeding, and it may also be used as a scaffold when applied together with various cell types. The intralesional use of the fibrin gel from the venom of this snake may improve surgical and clinical treatments in addition to being inexpensive and adequately consistent, durable, and stable. The new heterologous fibrin sealant is a scaffold candidate to cartilage repair in this study. PMID:26264444

  15. Isolamento e seleção de fungos causadores da podridão-branca da madeira em florestas de Eucalyptus spp. com potencial de degradação de cepas e raízes Isolation and screening of wood white rot fungi from Eucalyptus spp. forests with potential for use in degradation of stumps and roots

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Sandra Kunieda de Alonso

    2007-02-01

    Full Text Available Este trabalho objetivou isolar fungos causadores da podridão-branca da madeira, a partir de basidiocarpos e de fragmentos de madeira de eucalipto coletados em várias regiões do país, bem como testar seu potencial de degradação de cepas e raízes mortas em plantios comerciais de eucalipto, após o corte raso. Para o isolamento dos fungos foi desenvolvido um meio de cultura de serragem de eucalipto-ágar. Dentre 292 isolados obtidos e submetidos ao teste de Bavendamm, 144 foram classificados como causadores de podridão-branca, capazes de produzir fenoloxidases. Dentre as nove relações C/N testadas, observou-se uma tendência de ocorrer maior degradação de cavacos naquelas iguais a 60 : 1, 200 : 1 e 300 : 1. Utilizando a relação C/N igual a 60 : 1, realizaram-se dois experimentos para avaliar a degradação de cavacos de Eucalyptus saligna por isolados fúngicos de podridão-branca. No primeiro experimento, avaliado aos 90 dias de incubação, foram selecionados sete isolados, que causaram perda de peso em cavacos superior ou igual à causada por Trametes versicolor, usado para comparação. No segundo experimento foram testados 46 isolados fúngicos. Dentre os mais eficientes estavam os sete isolados selecionados no primeiro teste, além de outros quatro isolados. Baseado na análise de DNA, seis isolados foram identificados, sendo três pertencentes à espécie Pycnoporus sanguineus, um ao gênero Peniophora sp., um ao gênero Pestalotiopsis sp. e um ao gênero Ganoderma sp.The aim of this work was to isolate native wood white-rot fungi from fungal fruit-bodies and eucalyptus wood fragments from different regions of Brazil and to test their potential for degrading dead stumps and roots in Eucalyptus plantings after harvest. Fungi isolates were obtained in a culture medium composed by Eucalyptus sawdust and agar. Among 292 isolates submitted to the Banvedamm test, 144 were classified as phenoloxidases producing isolates. Among nine C

  16. Detection of Salmonella sp. from porcine origin: a comparison between a PCR method and standard microbiological techniques Detecção de Salmonella sp. em amostras de origem suína: comparação entre a técnica da Reação em Cadeia da Polimerase e o isolamento bacteriano convencional

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Sandra Maria Ferraz Castagna

    2005-12-01

    Full Text Available The aim of this study was to compare a polymerase chain reaction (PCR method combined with selective enrichment in Rappaport-Vassiliadis broth (PCR-RVB with standard microbiological techniques (SMT for the generic detection of Salmonella in samples of porcine origin. Two hundred sixty eight field samples consisting of 42 sets of pooled porcine mandibular lymph nodes and tonsils, 44 samples of intestinal content, 38 pork sausage meat samples and 144 samples of feed collected from swine farms were submitted to the PCR-RVB and SMT protocols. Salmonella was detected in 54 samples using the PCR-RVB assay and in 42 samples by SMT, three of the SMT Salmonella-positive samples (one each of S. Derby, S. Panama and S. Typhimurium being Salmonella-negative by PCR-RVB. For the PCR-RVB method 15 Salmonella-positive samples were negative by SMT, a significant difference according to the Mac Nemar's chi-squared test (p=0.0153. Subsequent serological typing of the SMT isolates showed the following Salmonella serovars, the number of positive samples being given in parentheses: Typhimurium (12; Bredeney (10; Panama (5; Saint-paul (5; Minnesota (3; Mbandaka (2; Derby (1; Enteritidis (1; Orion (1 and Salmonella sp. (2. We concluded that, although the use of both PCR-RVB and SMT increased the number of positive samples, the PCR-RVB, due to its higher sensitivity and greater speed in giving results, can be implemented to detect Salmonella in samples of porcine origin.O objetivo desse estudo foi comparar um método de Reação em Cadeia da Polimerase (PCR combinado com enriquecimento seletivo em caldo Rappaport-Vassiliadis (PCR-RVB com as técnicas de isolamento bacteriano convencional (SMT para a detecção do gênero Salmonella em amostras de origem suína. Duzentas e sessenta e oito amostras de campo, compostas por: 42 "pools" de linfonodos mandibulares e tonsilas, 44 amostras de conteúdo intestinal, 38 amostras de massa de embutidos e 144 amostras de ra

  17. Isolamento de micobactérias não-tuberculosas em São José do Rio Preto entre 1996 e 2005 Nontuberculous mycobacteria isolated in São José do Rio Preto, Brazil between 1996 and 2005

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    Heloisa da Silveira Paro Pedro

    2008-11-01

    Full Text Available OBJETIVO: Estudar a ocorrência de micobactérias não-tuberculosas e a variabilidade das espécies isoladas na região atendida pelo Instituto Adolfo Lutz-Regional de São José do Rio Preto-no período entre 1996 e 2005, assim como mostrar a importância do diagnóstico laboratorial. MÉTODOS: A partir de amostras pulmonares e extrapulmonares, foi realizado o isolamento de micobactérias, e estas foram identificadas por métodos fenotípicos e pelo método molecular polymerase chain reaction-restriction enzyme analysis. RESULTADOS: Foram isoladas 317 cepas de micobactérias não-tuberculosas: complexo Mycobacterium avium, 182 (57,4%; M. gordonae, 33 (10,4%; M. fortuitum, 25(7,9%; M. chelonae, 8 (2,5%; complexo M. terrae, 8 (2,5%; M. kansasii, 7 (2,2%; e espécies menos freqüentes, 54 (17%. No período, foram caracterizados 72 casos (33,3% de micobacterioses, de acordo com os critérios bacteriológicos estabelecidos pela American Thoracic Society (2007.Desses, complexo M. avium foi responsável por 56 casos, sendo que 29 (51,8% foram caracterizados como doença disseminada. M. fortuitum foi responsável por 6 casos; M. gordonae, 3; M. chelonae, 2; M. abscessus, 1; M. kansasii, 1; M. intracellulare, 1; M. malmoense, 1; e Mycobacterium ssp., 1. CONCLUSÕES: Os resultados obtidos mostraram a importância do diagnóstico bacteriológico das micobacterioses, pois a identificação das espécies possibilita a introdução de um tratamento adequado precocemente.OBJECTIVE: To study the incidence of nontuberculous mycobacteria and the range of species isolated between 1996 and 2005 at a regional branch of the Adolfo Lutz Institute-located in the city of São José do Rio Preto, Brazil-and to show the importance of laboratory testing. METHODS: Mycobacteria were isolated from pulmonary and extrapulmonary specimens and identified through phenotyping and molecular methods (polymerase chain reaction-restriction enzyme analysis. RESULTS: We isolated 317

  18. Escherichia coli verotoxigênica: isolamento e prevalência em 60 propriedades de bovinos de leite da região de Pelotas, RS, Brasil Verotoxin-producing Escherichia coli: isolation and prevalence in 60 dairy cattle farms from Pelotas-RS, Brazil

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    Cecília Nunes Moreira Sandrini

    2007-02-01

    Full Text Available A produção de verotoxinas foi investigada em 1.127 isolamentos de Escherichia coli feitos a partir de 243 bovinos de leite, de água de consumo humano e animal e de amostras de leite de 60 propriedades da bacia leiteira de Pelotas, no período de dezembro de 1999 a dezembro de 2000, com o objetivo de determinar a prevalência de E. coli verotoxigênicas (VTEC nas propriedades e no rebanho, de detectar a presença de sorotipos ligados a infecções humanas e de identificar, nas propriedades e na região de Pelotas, potenciais fatores de risco de infecção para os animais. A detecção das toxinas em sobrenadante de culturas de E. coli isoladas foi realizada através do ensaio de citotoxicidade em células Vero. VTEC foi isolada em 95% (57/60 das propriedades estudadas, em 49% (119/243 dos animais testados, em 5% (3/60 das amostras de água de consumo humano, em 8,35% (5/60 das amostras de água de consumo animal e em 5% (3/60 das amostras de leite. A prevalência de bovinos infectados em cada propriedade variou de 0 a 100%. Em 2,9% (7/243 dos animais testados, foram isoladas VTEC pertencentes aos sorogrupos O157, O91 e O112, que incluem cepas responsáveis por casos de colite hemorrágica e síndrome urêmica hemolítica em humanos. Fatores de risco de contaminação, como a precipitação pluviométrica, a temperatura, o tamanho da propriedade e a concentração de animais, apresentaram evidências de influenciarem a prevalência de VTEC nos animais. Estes resultados sugerem que o grupo VTEC está amplamente distribuído na bacia leiteira de Pelotas e inclui organismos pertencentes a sorogrupos patogênicos para humanos.The production of verotoxin was investigated in 1127 Escherichia coli isolated from 243 dairy cattle, water for human and animal consumption, and milk samples from 60 dairy farms from Pelotas-Brazil, from December of 1999 to December of 2000, to determine the prevalence of verotoxigenic E. coli (VTEC in farms, to detect the

  19. Isolamento e identificação de fungos micorrízicos rizoctonióides associados a três espécies de orquídeas epífitas neotropicais no Brasil Isolation and identification of rhizoctonia-like mycorrhizal fungi associated to three neotropical epiphytic orchid species in Brazil

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    Olinto Liparini Pereira

    2005-04-01

    Full Text Available Distúrbios causados pelo homem têm resultado no aumento do risco de extinção de diversos táxons de orquídeas nativas da Mata Atlântica no Brasil. Na natureza, orquídeas utilizam obrigatoriamente fungos endomicorrízicos para a germinação de sementes e desenvolvimento da plântula, ao menos nos primeiros estádios do seu ciclo de vida. Assim, fungos micorrízicos associados ao sistema radicular de orquídeas nativas vêm sendo isolados, caracterizados e armazenados para uso em futuros programas de conservação de espécies de orquídeas, por meio da germinação simbiótica. Três isolados de fungos micorrízicos rizoctonióides foram obtidos do sistema radicular de três espécies de orquídeas neotropicais, Gomesa crispa, Campylocentrum organense e Bulbophyllum sp., de três diferentes fragmentos de Mata Atlântica no Brasil. Estudos taxonômicos, baseados na condição nuclear, morfologia da hifa vegetativa e ultra-estrutura do septo dolipórico, revelaram que os isolados pertencem aos gêneros Ceratorhiza e Rhizoctonia. Esse é o primeiro relato do isolamento de fungos micorrízicos associados ao sistema radicular dessas espécies de orquídeas neotropicais. Aspectos relativos à taxonomia e ao uso desses isolados no contexto de um programa de conservação de orquídeas nativas são discutidos.Anthropogenic disturbances have resulted in an increased threat of extinction of many native orchid taxa in Brazil's Atlantic rain forest. In nature, orchids utilize mycorrhizal fungi to initiate seed germination and seedling development, at least in the early stages of their life cycle. Mycorrhizal fungi associated with the roots of orchids have thus been isolated, characterized and stored as important resources for a future conservation program of orchid species through symbiotic seed germination. Three mycorrhizal Rhizoctonia-like fungi were isolated from roots of three neotropical orchid species Gomesa crispa, Campylocentrum organense

  20. Antivenomics as a tool to improve the neutralizing capacity of the crotalic antivenom: a study with crotamine.

    Science.gov (United States)

    Teixeira-Araújo, Ricardo; Castanheira, Patrícia; Brazil-Más, Leonora; Pontes, Francisco; Leitão de Araújo, Moema; Machado Alves, Maria Lucia; Zingali, Russolina Benedeta; Correa-Netto, Carlos

    2017-01-01

    Snakebite treatment requires administration of an appropriate antivenom that should contain antibodies capable of neutralizing the venom. To achieve this goal, antivenom production must start from a suitable immunization protocol and proper venom mixtures. In Brazil, antivenom against South American rattlesnake (Crotalus durissus terrificus) bites is produced by public institutions based on the guidelines defined by the regulatory agency of the Brazilian Ministry of Health, ANVISA. However, each institution uses its own mixture of rattlesnake venom antigens. Previous works have shown that crotamine, a toxin found in Crolatus durissus venom, shows marked individual and populational variation. In addition, serum produced from crotamine-negative venoms fails to recognize this molecule. In this work, we used an antivenomics approach to assess the cross-reactivity of crotalic antivenom manufactured by IVB towards crotamine-negative venom and a mixture of crotamine-negative/crotamine-positive venoms. We show that the venom mixture containing 20% crotamine and 57% crotoxin produced a strong immunogenic response in horses. Antivenom raised against this venom mixture reacted with most venom components including crotamine and crotoxin, in contrast to the antivenom raised against crotamine-negative venom. These results indicate that venomic databases and antivenomics analysis provide a useful approach for choosing the better venom mixture for antibody production and for the subsequent screening of antivenom cross-reactivity with relevant snake venom components.

  1. Identificação da Leptospira interrogans sorovar pomona em camundongos geneticamente selecionados, para a alta e baixa produção de anticorpos, através da técnica de imunoperoxidase em tecido renal e isolamento bacteriano em meio de Fletcher Identification of Leptospira interrogans serovar pomona in mice genetically selected for high and low antibody production, by means of the immunoperoxidase technique in renal tissue and bacterial isolation in Fletcher medium

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    Maria Cristina Santos Haanwinckel

    2007-12-01

    Full Text Available O presente trabalho teve por objetivo identificar a presença da Leptospira interrogans sorovar pomona em camundongos geneticamente selecionados para a alta e baixa resposta a anticorpos. Todos os animais foram submetidos ao isolamento bacteriano, imunohistoquímica (imunoperoxidase em cortes de tecido renal e coloração através da hematoxilina-eosina. A técnica de imunoperoxidase apresentou-se pouco mais sensível em relação ao cultivo, entretanto, ambas foram bons parâmetros de identificação do agente. Presença de lesões renais mais intensas ocorreram em períodos em que houve maior número de bactérias isoladas em meio de cultivo. Camundongos da linhagem HIV-A conseguiram eliminar as leptospiras com maior eficiência e rapidez em relação as linhagem LIV-A, entretanto o estudo demonstrou que ambas linhagens da seleção IV-A foram eficientes em controlar o processo infeccioso.The present work had the objective of identifying the presence of Leptospira interrogans serovar pomona in mice that had been genetically selected for high and low response to antibodies. All the animals were subjected to bacterial isolation, immunohistochemical analysis (immunoperoxidase in renal tissue sections and hematoxylin-eosin staining. The immunoperoxidase technique was little more sensitive than culturing, but both were good parameters for agent identification. More severe renal lesions were present at times when there were greater numbers of bacteria isolated in culture medium. Mice of the lineage HIV-A were able to eliminate the Leptospira more efficiently and faster than the lineage LIV-A could. However, the study demonstrated that both lineages of the IV-A selection were efficient in controlling the infectious process.

  2. PERFIL SOROLÓGICO E DE ISOLAMENTO DE Salmonella sp. EM SUÍNOS NO INÍCIO DA TERMINAÇÃO E AO ABATE SEROLOGY AND ISOLATION OF SALMONELLA SP. IN PIGS AT THE FINISHING SITE AND AT SLAUGHTER

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    Monika Müller

    2009-09-01

    Full Text Available Estudos que elucidem a cadeia de transmissão de Salmonella enterica nos sistemas de produção de suínos são importantes para que seja possível implementar programas de controle da infecção. O objetivo deste estudo foi comparar o índice de animais positivos para Salmonella sp. no início da fase de terminação e ao abate e identificar possíveis fontes de contaminação no período. Em três granjas terminadoras, coletaram-se: suabes de superfície nas baias e nos silos durante o vazio sanitário; amostras de fezes e sangue dos animais no dia do alojamento; alíquotas de todos os lotes de ração e amostras de sangue, linfonodos mesentéricos (LM e conteúdo intestinal (CI ao abate. As amostras de sangue foram submetidas a teste de ELISA-LPS para Salmonella Typhimurium. Nas demais amostras, pesquisou-se a presença de Salmonella sp. As amostras de ração foram adicionalmente submetidas à técnica da Reação em Cadeia da Polimerase (PCR amplificando o gene invA. Todos os animais foram negativos para presença de Salmonella sp. nas fezes no início da terminação; entretanto, em duas granjas havia animais soropositivos (12% e 28%, respectivamente. Em duas granjas havia contaminação residual no ambiente e na terceira granja, em um dos lotes de ração, detectou-se a presença de Salmonella sp. pela PCR. Ao abate, acima de 90% dos animais foram positivos no teste de ELISA-LPS, sendo que em todos os lotes encontrou-se um número variável (12-92% de portadores em LM e CI. A partir disso, concluiu-se que a terminação foi a fase crítica para a amplificação da infecção por Salmonella sp., sendo a presença residual do microrganismo na granja e o fornecimento de ração contaminada fontes prováveis de infecção.

    PALAVRAS-CHAVES: Abate, isolamento, Salmonella, sorologia, suíno, terminação.
    Studies assessing the Salmonella transmission chain in pig herds are the first step to start a control program.  The aims

  3. AISLAMIENTO Y CONTROL MICROBIOLÓGICO DE Leuconostoc mesenteroides, EN UN INGENIO PARA OPTIMIZAR EL RENDIMIENTO DE AZÚCAR Y ETANOL ISOLAMENTO E Leuconostoc Mesenteroides CONTROLE MICROBIOLÓGICO EM UM TALENTO PARA OTIMIZAR O DESEMPENHO DE AÇÚCAR E ETANOL ISOLATION AND MICROBIOLOGICAL CONTROL OF Leuconostoc mesenteroides, IN TO SUGAR REFINERY TO OPTIMIZE THE PERFORMANCE OF SUGAR AND ETHANOL

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    RAÚL A CUERVO MULET

    2010-12-01

    (sacarose destruição causada pela ação de microorganismos companheiros da cana, urna das mais importantes Leuconostoc mesenteroides. Neste trabalho, determinou a inibição das bacterias do ácido lático L. mesenteroides isolada de uma usina de açúcar em Valle del Cauca utilização de microrganismos antagonistas. Para isso, isolados, e as culturas de L. mesenteroides de caldo de cana e bioquímicos realizados vários exames microbiológicos no laboratório para isolamento e identificação de cepas de Leuconostoc mesenteroides como as estirpes de bactérias antagônicas a ele. Apurou-se que as cepas do fungo Metharhizium sp, Trichoderma sp, foram mais eficientes no controle do crescimento de L. mesenteroides, mostrando porcentagem significativamente maior de inibição em relação ao fungos filamentosos Colletotrichum sp, Thichoderma viridae, Rhizoctonia sp; bacterias Bacillus subtilis y Serratia marcenses e leveduras Rhodothorula Rubra e Kloeckera japonic, não apresentou inibição do crescimento L. mesenteroides. Além disso, eles identificaram os fungos Aspergillus sp, Botrytis sp e Streptomyces sp usual antagonistas naturais presentes no caldo de cana de usina.Sugarcane (Saccharum officinarum L is squeezed to obtain juice after being purified and neutralized, allowed to crystallize the sugar. Considering the importance of sugar cane accounts for the sugar industry, it is necessary to increase the content of dextran-free sucrose (sucrose destruction caused by the action of microorganisms accompanying the cañe, one of the most important Leuconostoc mesenteroides. In this research we determined the inhibition of lactic acid bacteria L mesenteroides isolated from a sugar mill in Valle del Cauca using antagonist microorganisms. For this, isolates, and cultures of L. mesenteroides from cane juice and performed various bio-chemical and microbiological tests in the laboratory for isolation and identification of both strains of Leuconostoc mesenteroides as the

  4. EFFICIENCY OF THE ENRICHMENT BROTHES (LEB1 AND LEB2 AND SELECTIVE AGARS (LPM AND LSAB-CAN TO ISOLATE BACTERIA OF THE GENUS Listeria IN MEAT AND RESIDUAL WATER OF WASHING CARCASS EFICIÊNCIA DOS CALDOS DE ENRIQUECIMENTO (LEB1 E LEB2 E DOS ÁGARES SELETIVOS (LPM E LSAB-CAN NO ISOLAMENTO DE BACTÉRIAS DO GÊNERO Listeria EM CARNE BOVINA E ÁGUA RESIDUÁRIA DE LAVAGEM DE CARCAÇA

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    Albenones José de Mesquita

    2007-09-01

    Full Text Available

    In this paper it was observed the efficiency of enrichment brothes for Listeria (LEB1 and LEB2, associated to the passage of the culture through a 0.25% potassium hidroxide solution, verifying that the secondary enrichment broth (LEB2 and LEB2KOH was better than the primary enrichment broth (LEB1KOH for this purpose. On the other hand, lithium chloride-phenylethanol-moxalactam agar and the selective Listeria agar base, supplemented with cicloheximide, acriflavine and nalidixic acid (LSAIB-CAN showed equivalency, at the statistic point of view (p=0.l442, in relation to the number of positive samples for Listeria spp., although the LSAB-CAN agar had given the greatest number of bacteria isolated from this genus.

    KEY-WORDS: Listeria; enrichment broth; selective agar.

    No presente trabalho verificou-se a eficiência dos caldos de enriquecimento para Listeria (LEB1 e LEB 2 associados à passagem da cultura por uma solução de hidróxido de potássio a 0,25%, constatando-se que o caldo de enriquecimento secundário (LEB2 e LEB2KOH foi superior ao caldo de enriquecimento primário (LEB1KOH. Por outro lado, o ágar cloreto de lítio-feniletanol-moxalactam (LPM e o ágar base seletivo para Listeria, suplementado com cicloheximida, acriflavina e ácido nalidíxico (LSAB-CAN equivaleram-se estatisticamente (p= 0,l442 em relação ao número de amostras positivas para Listeria, embora o ágar LSAB-CAN tenha proporcionado um maior número de isolamentos da bactéria.

    PALAVRAS-CHAVE: Caldo de enriquecimento; ágar seletivo; Listeria.

  5. Pancreatic islet isolation by mechanical-enzymatic separation, stationary collagenase digestion and dextran discontinuous density gradient purification: experimental study in dogs Isolamento das ilhotas pancreáticas pela separação mecânica-enzimática digestão estacionária com colagenase e purificação com gradiente de densidade descontínua de dextran: estudo experimental em cães

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    Jaques Waisberg

    2002-04-01

    Full Text Available The prospects for allotransplantation of pancreatic islets in man depend on the development of methods that provide sufficient quantities of pancreatic islets from a single donor, which are capable, when transplanted, of achieve the normalization of carbohydrate metabolism. Objective: Evaluate the efficacy of the isolation of Langerhans islets from dogs, by means of mechanical-enzymatic separation technique with stationary digestion using collagenase, and purification with a discontinuous dextran density gradient. Methods: The counting of islet numbers and evaluation of their sizes was accomplished by staining with diphenylthiocarbazone and using stereoscopic microscopes equipped with eyepiece reticule for the measurement of average diameters of stained islets. Results: The results disclosed that the average number of islets isolated was 81032.20 ± 24736.79 and the average number of islets isolated per kg of body weight was 6938.70 ± 1392.43. The average number of islets isolated per kg of body weight showed significant correlation with body weight and weight of the pancreas resected. Conclusion: The number of islets isolated, of a single donor, by mechanical-enzymatic separation, stationary collagenase digestion and discontinuous dextran density gradient purification can be sufficient to success of pancreatic islets transplant in dogs.A perspectiva do alotransplante de ilhotas pancreáticas no homem está na dependência do desenvolvimento de métodos que propiciem quantidades suficientes de ilhotas pancreáticas, originadas de doador único, capazes de, quando transplantadas, levarem à normalização do metabolismo dos hidratos de carbono. Objetivo: Avaliar, em cães, a eficácia do isolamento das ilhotas de Langerhans por meio da técnica de separação mecânica-enzimática, digestão estacionária com colagenase e purificação pelo gradiente de densidade descontínua de dextran. Métodos: A contagem do número e avaliação do tamanho

  6. Isolamento de coliformes, estafilococos e enterococos de leite cru provenientes de tanques de refrigeração por expansão comunitários: identificação, ação lipolítica e proteolítica Isolation of coliforms, staphylococci, and enterococci in raw milk from communitarian expansion refrigeration tanks: identification, lipolytic and proteolytic action

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    Victor Maximiliano Reis Tebaldi

    2008-09-01

    Full Text Available O isolamento e a identificação de microrganismos em leite cru se tornam interessantes do ponto de vista de saúde pública, pois dependendo das espécies isoladas, ações direcionadas podem ser tomadas visando a melhoria de sua qualidade. A deterioração do leite é conseqüência sobretudo do crescimento de microrganismos psicrotróficos, que produzem lipases e proteases termoestáveis que não são desnaturadas durante o processo de pasteurização, conferindo sabores e odores rançoso e amargo, respectivamente. Assim, o objetivo deste trabalho foi isolar e identificar os principais gêneros de bactérias pertencentes à família Enterobacteriaceae, Gram-negativas oxidase positiva, gêneros Staphylococcus e Enterococcus, bem como atividade de lipases e proteases de 16 propriedades rurais do município de Boa Esperança-MG. As bactérias Gram-negativas foram isoladas em ágar eosina azul de metileno (EMB e ágar Entérico Hektoen. Estafilococos foram isolados em ágar Baird-Parker e Enterococcus em ágar KF. Colônias de interesse foram coletadas e submetidas à coloração de Gram, e às provas de catalase e oxidase. Após esses procedimentos, os isolados selecionados foram identificados utilizando-se Bactray I, II e III; Api 20 Strep; e provas sugeridas pelo Bergey's Manual of Determinative Bacteriology. A identificação sorológica de Enterococcus foi realizada utilizando-se Prolex. O leite oriundo das 16 propriedades continha cepas de microrganismos fecais como Escherichia coli e Enterococcus do grupo D de Lancefield. Bactérias Gram-negativas oxidase positiva foram identificadas em cinco propriedades. Staphylococcus foram encontrados em 10 propriedades. O leite coletado nas fazendas investigadas possui microrganismos que comprometem sua qualidade. Todos os grupos de microrganismos testados revelaram atividades de lipase e protease.Isolation and identification of microorganisms in raw milk is interesting from the viewpoint of public

  7. A taxonomic bibliography of the South American snakes of the Crotalus durissus complex (Serpentes, Viperidae

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    VANZOLINI PAULO E.

    2002-01-01

    Full Text Available A survey is made of the taxonomic literature on South American rattlesnakes (genus Crotalus, family Viperidae. Two main areas are emphasized: the attribution of the names proposed in the eighteenth century by Linnaeus and Laurenti, and the current scheme of division in subspecies. The attribution of names is examined based on the original descriptions and on relevant previous and contemporary literature. The presently adopted scheme, proposed by Klauber (1941, 1972 is found not entirely satisfactory, but reasonable enough - besides being hallowed by use. The scheme of geographical differentiation, intrinsically important and with broad practical implications (differentiation of the venom is found to be the culmination of a long series of deficient analyses, and in urgent need of proper investigation.

  8. Reactividad inmunoquímica de sueros anti- Caiman yacare y Caiman latirostris frente a sueros de diferentes especies

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    de Roodt, Adolfo Rafael

    2010-06-01

    Full Text Available Se estudió la reactividad inmunoquímica entre los sueros de distintas especies de reptiles frente a sueros hiperinmunes experimentales anti-suero de Caiman yacare y anti-suero de Caiman latirostris. Los sueros que se probaron fueron los homólogos de Caiman yacare, Caiman latirostris y los heterólogos de Alligator missisipiensis, Tupinambis merinae, Tupinambis rufescens, Chelonoidis chilensis, Clelia rustica, Waglerophis merremii, Lystrophys dorbignyi, Phyton molurus, Boa constrictor occidentalis, Eunectes notaeus, Crotalus durissus terrificus, Bothrops alternatus, Bothrops diporus, Bothrops jararaca, Bothrops jararacussu, Bothrops moojeni, Pitangus sulphuratus y Gallus gallus. La reactividad inmunoquímica se determinó mediante las técnicas de doble inmunodifusión y ELISA, mostrándose importante entre los sueros de los crocodrílidos y baja entre estos y los de las otras especies de reptiles estudiadas. Se observó mayor reactividad entre los antisueros anti-Caiman respecto a los sueros de Caiman latirostris y Caiman yacare que frente al suero de Alligator missisipiensis. Además, se encontró una fuerte reactividad entre ambos sueros anti-Caiman y el de Gallus gallus poniendo en evidencia la fuerte reactividad entre los sueros de arcosaurios. In order to study the immunochemical reactivity among sera from different species of reptiles regarding sera from Caiman, the immunoreactivity of sera from reptiles against antisera to Caiman yacare or anti-Caiman latirostris sera was studied. These hiperimmune sera were tested against sera from Alligator missisipiensis, Tupinambis merinae, Tupinambis rufescens, Chelonoidis chilensis, Clelia rustica, Waglerophis merremii, Lystrophys dorbignyi, Phyton molurus, Boa constrictor occidentalis, Eunectes notaeus, Crotalus durissus terrificus, Bothrops alternatus, Bothrops neuwiedii, Bothrops jararaca, Bothrops jararacussu, Bothrops moojeni, Pitangus sulphuratus and Gallus gallus. The immunochemical

  9. Neither genotype nor the gastric colonization site of Helicobacter pylori are predictive factors for the development of erosive esophagitis in patients with peptic ulcer disease, 1 year after eradication O genótipo e o local no estômago de isolamento do Helicobacter pylori em pacientes com úlcera péptica não são fatores preditivos para o desenvolvimento de esofagite erosiva 1 ano após a erradicação da bactéria

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Carlos Alexandre Gonçalves Batista

    2009-09-01

    estômago de infecção pela bactéria, podem estar correlacionados com a prevenção ou desenvolvimento de esofagite. OBJETIVOS: Determinar a incidência de esofagite erosiva após a erradicação do H. pylori em pacientes com úlcera péptica e a sua associação com a virulência das cepas da bactéria e o local no estômago de seu isolamento. MÉTODOS: Um tratamento tríplice com lansoprazol, amoxicilina e claritromicina foi administrado a 159 pacientes com úlcera péptica. Endoscopia digestiva alta, exame histológico, teste rápido da urease e o teste respiratório de uréia com carbono-14 foram realizados antes, 3 meses e 1 ano após o tratamento. A genotipagem das cepas do H. pylori por meio de PCR foi realizada separadamente em amostras obtidas da mucosa do corpo e do antro gástricos. RESULTADOS: Um ano após o tratamento, 148 pacientes curados da infecção foram avaliados: 28 (19% apresentavam esofagite erosiva, 24 com grau A da classificação de Los Angeles e 4 com grau B. Nas amostras obtidas da mucosa do corpo gástrico, a citotoxina CagA foi positiva em 18 (64% pacientes com esofagite erosiva, enquanto que nas amostras obtidas do antro gástrico, a citotoxina CagA foi positiva em 21 (75%. CONCLUSÕES: A incidência de esofagite erosiva em pacientes com doença péptico-ulcerosa foi de 19%. Não houve correlação entre o local de isolamento no estômago ou as cepas CagA-positivas do H. pylori e a proteção ou o desenvolvimento de esofagite erosiva, em pacientes com úlcera péptica, 1 ano depois da erradicação da bactéria.

  10. The complementarity-determining region sequences in IgY antivenom hypervariable regions

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    David Gitirana da Rocha

    2017-08-01

    Full Text Available The data presented in this article are related to the research article entitled "Development of IgY antibodies against anti-snake toxins endowed with highly lethal neutralizing activity" (da Rocha et al., 2017 [1]. Complementarity-determining region (CDR sequences are variable antibody (Ab sequences that respond with specificity, duration and strength to identify and bind to antigen (Ag epitopes. B lymphocytes isolated from hens immunized with Bitis arietans (Ba and anti-Crotalus durissus terrificus (Cdt venoms and expressing high specificity, affinity and toxicity neutralizing antibody titers were used as DNA sources. The VLF1, CDR1, CDR2, VLR1 and CDR3 sequences were validated by BLASTp, and values corresponding to IgY VL and VH anti-Ba or anti-Cdt venoms were identified, registered [Gallus gallus IgY Fv Light chain (GU815099/Gallus gallus IgY Fv Heavy chain (GU815098] and used for molecular modeling of IgY scFv anti-Ba. The resulting CDR1, CDR2 and CDR3 sequences were combined to construct the three - dimensional structure of the Ab paratope.

  11. Protease activated receptors (PARS) mediation in gyroxin biological activity; Mediacao dos receptores ativados por proteases (PARs) em atividades biologicas da giroxina

    Energy Technology Data Exchange (ETDEWEB)

    Silva, Jose Alberto Alves da

    2009-07-01

    Gyroxin is a serine protease enzyme from the South American rattlesnake (Crotalus durissus terrificus) venom; it is only partially characterized and has multiple activities. Gyroxin induces blood coagulation, blood pressure decrease and a neurotoxic behavior named barrel rotation. The mechanisms involved in this neurotoxic activity are not known. Whereas gyroxin is a member of enzymes with high potential to become a new drug with clinical applications such as thrombin, batroxobin, ancrod, tripsyn and kalicrein, it is important to find out how gyroxin works. The analysis on agarose gel electrophoresis and circular dichroism confirmed the molecules' integrity and purity. The gyroxin intravenous administration in mice proved its neurotoxicity (barrel rotation). In vivo studies employing intravital microscopy proved that gyroxin induces vasodilation with the participation of protease activated receptors (PARs), nitric oxide and Na+K+ATPase. The leukocytes' adherence and rolling counting indicated that gyroxin has no pro inflammatory activity. Gyroxin induced platelet aggregation, which was blocked by inhibitors of PAR1 and PAR4 receptors (SCH 79797 and tcY-NH{sub 2}, respectively). Finally, it was proved that the gyroxin temporarily alter the permeability of the blood brain barrier (BBB). Our study has shown that both the protease-activated receptors and nitric oxide are mediators involved in the biological activities of gyroxin. (author)

  12. Amino acid sequence and disulfide bond assignment of myotoxin a isolated from the venom of prairie rattlesnake (Crotalus viridis viridis)

    Energy Technology Data Exchange (ETDEWEB)

    Fox, J.W.; Elzinga, M.; Tu, A.T.

    1979-02-20

    The primary structure of myotoxin a, a myotoxin protein from the venom of the North American rattlesnake Crotalus viridis viridis, was determined and the position of the disulfide bonds assigned. The toxin was isolated, carboxymethylated, and cleaved by cyanogen bromide, and the resultant peptides were isolated. The cyanogen bromide peptides were subjected to amino acid sequence analysis. In order to assign the positions of the three disulfide bonds, the native toxin was cleaved sequentially with cyanogen bromide and trypsin. A two peptide unit connected by one disulfide bond was isolated and characterized, and a three-peptide unit connected by two disulfide bonds was isolated. One peptide in the three-peptide unit was identified as Cys-Cys-Lys. In order to establish the linkages between the peptides and Cys-Cys-Lys, one cycle of Edman degradation was carried out such that the Cys-Cys bond was cleaved. Upon isolation and analysis of the cleavage products, the disulfide bonds connecting the three peptides were determined. The positions of the disulfide bridges of myotoxin a were determined to be totally different from those of neurotoxins isolated from snake venoms. The sequence of myotoxin a was compared with the sequences of other snake venom toxins using the computer program RELATE to determine whether myotoxin a is similar to any other types of toxins. From the computer analysis, myotoxin a did not show any close relationship to other toxins except crotamine from the South American rattlesnake Crotalus durissus terrificus.

  13. Structural aspects of crotoxin modified by ionizing radiation; Aspectos estruturais da crotoxina modificada pela radiacao ionizante

    Energy Technology Data Exchange (ETDEWEB)

    Oliveira, Karina Corleto de; Albero, Felipe Guimaraes; Zezell, Denise Maria; Spencer, Patrick Jack; Nascimento, Nanci do, E-mail: kcorleto@usp.b [Instituto de Pesquisas Energeticas e Nucleares (IPEN/CNEN-SP), Sao Paulo, SP (Brazil)

    2010-03-15

    Ionizing radiation has proven to be an excellent tool for reducing the toxicity of venoms and isolated toxins, resulting in better immunogens for serum production, the only effective treatment in case of snake bites, and contributing to the welfare of serum-producing animals. Since the action of gamma radiation of venoms and toxins has not been yet fully clarified from the structural point of view, we proposed in this paper, to characterize the crotoxin, a venom protein of the species Crotalus durissus terrificus by Circular Dichroism (CD) and Infrared Spectroscopy (FTIR) techniques. After chromatographic techniques, crotoxin was irradiated with 2.0 kGy ({sup 60}Co source). The CD spectra obtained of native and irradiated crotoxin solutions showed changes between the samples in characteristic regions of -sheet and-helix . The Infrared analyse showed expressive changes in the spectra of the native and irradiated crotoxin (amide I band region). These tests showed that crotoxin when subjected to gamma radiation, showed changes in their structural conformation compared with the samples in the native state. Such changes probably occur in the secondary structure and may explain its neurotoxic activity loss. (author)

  14. Walker 256 Tumor Growth Suppression by Crotoxin Involves Formyl Peptide Receptors and Lipoxin A4

    Science.gov (United States)

    Brigatte, Patrícia; Faiad, Odair Jorge; Ferreira Nocelli, Roberta Cornélio; Landgraf, Richardt G.; Palma, Mario Sergio; Cury, Yara; Curi, Rui; Sampaio, Sandra Coccuzzo

    2016-01-01

    We investigated the effects of Crotoxin (CTX), the main toxin of South American rattlesnake (Crotalus durissus terrificus) venom, on Walker 256 tumor growth, the pain symptoms associated (hyperalgesia and allodynia), and participation of endogenous lipoxin A4. Treatment with CTX (s.c.), daily, for 5 days reduced tumor growth at the 5th day after injection of Walker 256 carcinoma cells into the plantar surface of adult rat hind paw. This observation was associated with inhibition of new blood vessel formation and decrease in blood vessel diameter. The treatment with CTX raised plasma concentrations of lipoxin A4 and its natural analogue 15-epi-LXA4, an effect mediated by formyl peptide receptors (FPRs). In fact, the treatment with Boc-2, an inhibitor of FPRs, abolished the increase in plasma levels of these mediators triggered by CTX. The blockage of these receptors also abolished the inhibitory action of CTX on tumor growth and blood vessel formation and the decrease in blood vessel diameter. Together, the results herein presented demonstrate that CTX increases plasma concentrations of lipoxin A4 and 15-epi-LXA4, which might inhibit both tumor growth and formation of new vessels via FPRs. PMID:27190493

  15. Structural aspects of crotalic venom proteins modified by ionizing radiation; Aspectos estruturais de proteinas do veneno crotalico modificadas por radiacao ionizante

    Energy Technology Data Exchange (ETDEWEB)

    Oliveira, Karina Corleto de

    2010-07-01

    Snake bites are a serious public health problem, especially in subtropical countries. In Brazil, the Ministry of Health notified around 26 000 accidents in 2008. The genus Crotalus (rattlesnakes) accounts for approximately 7% of the total, with a high mortality rate of 72% when untreated with the specific serum, the only effective treatment in case of snake bites. In Brazil, the serum is produced in horses which, despite the large size, have a reduced lifespan due to the high toxicity of the antigen. Ionizing radiation has proven to be an excellent tool for reducing the toxicity of venoms and isolated toxins, resulting in better immunogens for serum production, and contributing to the welfare of serum producing animals. Since the action of gamma radiation on venoms and toxins has not been yet fully clarified from the structural point of view, we proposed in this paper, to characterize two toxins of the species Crotalus durissus terrificus: crotoxin and crotamine. After isolation of the toxins of interest by chromatographic techniques, they were subjected to structural analysis with the application of the following methods: Fluorescence, Circular Dichroism, Differential Calorimetry and Infrared Spectroscopy. These tests showed that both crotamine as crotoxin when subjected to gamma radiation, showed changes in their structural conformation compared with the samples in the native state. Such changes probably occur in the secondary and tertiary structure and may explain the changes on the biological activity of these toxins. (author)

  16. Mutagenicity induced by the hydroalcoholic extract of the medicinal plant Plathymenia reticulata Benth

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    A Della Torre

    2011-01-01

    Full Text Available Plathymenia reticulata Benth has an anti-inflammatory effect and is capable of neutralizing the neuromuscular blockade induced by Bothrops jararacussu or Crotalus durissus terrificus venoms, probably by precipitating venom proteins (an effect caused by plant tannins. The present study aimed to evaluate the mutagenic activity of P. reticulata by using the Salmonella mutagenicity assay (Ames test and the micronucleus test in CHO-K1 cells. P. reticulata extract concentrations of 2.84, 5.68, 11.37, and 19.90 mg/plate were assayed by the Ames test using TA97a, TA98, TA100 and TA102 bacterial strains, with (+S9 and without (-S9 metabolic activation. Concentrations of 5, 1.6 and 0.5 μg/mL of P. reticulata extract were used for the micronucleus test. P. reticulata extract was mutagenic to TA98 (-S9 and showed signs of mutagenic activity in TA97a and TA102 (both -S9 strains. Micronucleus test CBPI values showed that the endogenous metabolic system increased the number of viable cells when compared to the non-activated samples and the micronucleus frequency increased when the cells were treated in the absence of S9. We concluded that P. reticulata extract may present direct mutagenic properties.

  17. Morphologic and morphometric analysis of Hepatozoon spp. (Apicomplexa, Hepatozoidae of snakes

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Moço Tatiana Cristina

    2002-01-01

    Full Text Available Hepatozoon species are the most abundant hemoparasites of snakes. Its identification has been based mainly on the morphologic characterization of the gamonts in the peripheral blood of the vertebrate host and also of the cysts found in the internal organs of the vertebrate and invertebrate hosts. Using a computerized image analysis system, we studied five species of Hepatozoon from recently captured snakes in Botucatu, State of São Paulo, Brazil, to evaluate the importance of the morphology and morphometry of the gamonts for the characterization of Hepatozoon species and to analyze the morphologic changes induced in the erythrocytes by the parasite. The studied species were H. terzii of Boa constrictor amarali, Hepatozoon sp. of Crotalus durissusterrificus, H. philodryasi of Philodryas patagoniensis, and H. migonei and H. cyclagrasi of Hydrodynastes gigas. We observed three different groups, one of them including the species H. terzii, H. philodryasi and Hepatozoon sp. of C. durissus terrificus; and the other two consisting of H. migonei and H. cyclagrasi. Degree of alterations in the erythrocytes was variable and it may be useful for characterization of Hepatozoon species.

  18. Physico-chemical characterization of gamma rays irradiated crotamine

    Energy Technology Data Exchange (ETDEWEB)

    Oliveira, Karina Corleto de; Spencer, Patrick Jack; Nascimento, Nanci do [Instituto de Pesquisas Energeticas e Nucleares (IPEN-CNEN/SP), Sao Paulo, SP (Brazil)], e-mail: kcorleto@usp.br

    2009-07-01

    Ionizing radiation can change the molecular structure and affect the biological properties of biomolecules. It has been employed to attenuate animal toxins. Crotamine, a toxin from Crotalus durissus terrificus (Cdt), is a highly basic polypeptide (pI - 10.3), with myotoxic activity and molecular weight of 4882 Da. It is composed of 42 amino acids residues and reticulated by three disulfide bonds. This study aimed the characterization of irradiated crotamine using Circular Dichroism (CD), Fluorescence Spectroscopy and Differential Scanning Calorimetry (DSC) techniques. We used size exclusion and ion-exchange chromatography to purify it from Cdt crude venom. The pure crotamine was irradiated with 2.0 kGy from a {sup 60}Co source. Native and irradiated crotamine were analyzed in a fluorescence spectrophotometer (Hitachi F-4500), under excitation wavelength at 275 nm and the emission was scanned from 300 to 500 nm. The analysis of fluorescence quenching showed that the irradiated form displayed a lower quantum yield when compared to the native form. CD spectra, obtained from a Jasco, J-180 spectropolarimeter, of native and irradiated crotamine solutions, showed a discrete change between the samples, from apparently ordered conformation to a random coil. Finally, the thermodynamics analysis, realized in a calorimeter METTLER TOLEDO, DSC 822e, showed that irradiation promoted changes in the calorimetric profile. Our results indicate that irradiation leads to progressive changes in the structure of the toxin, which could explain the decrease in myotoxic activity. (author)

  19. Physical and functional association of the Src family kinases Fyn and Lyn with the collagen receptor glycoprotein VI-Fc receptor gamma chain complex on human platelets.

    Science.gov (United States)

    Ezumi, Y; Shindoh, K; Tsuji, M; Takayama, H

    1998-07-20

    We have previously shown that uncharacterized glycoprotein VI (GPVI), which is constitutively associated and coexpressed with Fc receptor gamma chain (FcRgamma) in human platelets, is essential for collagen-stimulated tyrosine phosphorylation of FcRgamma, Syk, and phospholipase Cgamma2 (PLCgamma2), leading to platelet activation. Here we investigated involvement of the Src family in the proximal signals through the GPVI-FcRgamma complex, using the snake venom convulxin from Crotalus durissus terrificus, which specifically recognizes GPVI and activates platelets through cross-linking GPVI. Convulxin-coupled beads precipitated the GPVI-FcRgamma complex from platelet lysates. Collagen and convulxin induced tyrosine phosphorylation of FcRgamma, Syk, and PLCgamma2 and recruited tyrosine-phosphorylated Syk to the GPVI-FcRgamma complex. Using coprecipitation methods with convulxin-coupled beads and antibodies against FcRgamma and the Src family, we showed that Fyn and Lyn, but not Yes, Src, Fgr, Hck, and Lck, were physically associated with the GPVI-FcRgamma complex irrespective of stimulation. Furthermore, Fyn was rapidly activated by collagen or cross-linking GPVI. The Src family-specific inhibitor PP1 dose-dependently inhibited collagen- or convulxin-induced tyrosine phosphorylation of proteins including FcRgamma, Syk, and PLCgamma2, accompanied by a loss of aggregation and ATP release reaction. These results indicate that the Src family plays a critical role in platelet activation via the collagen receptor GPVI-FcRgamma complex.

  20. Physical and Functional Association of the Src Family Kinases Fyn and Lyn with the Collagen Receptor Glycoprotein VI-Fc Receptor γ Chain Complex on Human Platelets

    Science.gov (United States)

    Ezumi, Yasuharu; Shindoh, Keisuke; Tsuji, Masaaki; Takayama, Hiroshi

    1998-01-01

    We have previously shown that uncharacterized glycoprotein VI (GPVI), which is constitutively associated and coexpressed with Fc receptor γ chain (FcRγ) in human platelets, is essential for collagen-stimulated tyrosine phosphorylation of FcRγ, Syk, and phospholipase Cγ2 (PLCγ2), leading to platelet activation. Here we investigated involvement of the Src family in the proximal signals through the GPVI–FcRγ complex, using the snake venom convulxin from Crotalus durissus terrificus, which specifically recognizes GPVI and activates platelets through cross-linking GPVI. Convulxin-coupled beads precipitated the GPVI–FcRγ complex from platelet lysates. Collagen and convulxin induced tyrosine phosphorylation of FcRγ, Syk, and PLCγ2 and recruited tyrosine-phosphorylated Syk to the GPVI–FcRγ complex. Using coprecipitation methods with convulxin-coupled beads and antibodies against FcRγ and the Src family, we showed that Fyn and Lyn, but not Yes, Src, Fgr, Hck, and Lck, were physically associated with the GPVI–FcRγ complex irrespective of stimulation. Furthermore, Fyn was rapidly activated by collagen or cross-linking GPVI. The Src family–specific inhibitor PP1 dose-dependently inhibited collagen- or convulxin-induced tyrosine phosphorylation of proteins including FcRγ, Syk, and PLCγ2, accompanied by a loss of aggregation and ATP release reaction. These results indicate that the Src family plays a critical role in platelet activation via the collagen receptor GPVI–FcRγ complex. PMID:9670039

  1. Biodistribution and SPECT imaging of {sup 125/131}I-crotoxin on mice bearing Ehrlich solid tumour

    Energy Technology Data Exchange (ETDEWEB)

    Soares, Marcella Araugio; Santos, Raquel Gouvea dos [Centro de Desenvolvimento da Tecnologia Nuclear (CDTN/CNEN-MG), Belo Horizonte, MG (Brazil)], e-mail: marcellaaraugio@yahoo.com.br, e-mail: santosr@cdtn.br; Silveira, Marina B.; Simal, Carlos [Universidade Federal de Minas Gerais (UFMG), Belo Horizonte, MG (Brazil). Faculdade de Medicina; Dias, Consuelo L. Fortes [Fundacao Ezequiel Dias (FUNED), Belo Horizonte, MG (Brazil)

    2009-07-01

    The search of specific radiopharmaceuticals to be used in breast tumour diagnosis is relevant to complement the techniques applied in conventional medicine. Crotalus durissus terrificus venom (CV) and its main polypeptide, Crotoxin (Crtx), are natural source of several bioactive substances with therapeutical potential. The aim of this work was to evaluate the binding of Crtx with tumour targets in vivo, as well as, evaluate its applicability for breast tumours diagnosis. Crtx was labelled with {sup 125/131}I using lactoperoxidase method and radiochemical analysis was performed by chromatography. {sup 125}I-Crtx was used for biodistribution and pharmacokinetics studies on swiss mice bearing Ehrlich solid tumour, while {sup 131}I-Crtx was used for single photon emission computed tomography (SPECT) imaging. Crtx presented specific binding sites on Ehrlich tumour cells and had a rapid blood clearance (T{sub 1/2}= 201.1 min.). Intratumoral administration increased significantly the activity delivered into the tumour site (128-fold higher) and reduced the kidney burden (7.2-fold lower). {sup 131}I-Crxt demonstrated to interact with tumour cells for until 72 hours allowing good quality images of tumour. Our results indicate the biotechnological potential of Crtx as template for radiopharmaceutical design for cancer diagnosis. (author)

  2. Isolamento de Lactobacillusacidophilus a partir de fezes de bezerros Isolation of Lactobacillusacidophilus from calves feces

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Antônio Hamilton Chaves

    1999-01-01

    Full Text Available Este experimento foi realizado para isolar, caracterizar e identificar estirpes de Lactobacillusacidophilus, a partir de fezes de bezerros com 1 - 3 dias de idade, coletadas diretamente no reto. Os seguintes testes para caracterização dos isolados foram feitos: morfologia celular, teste de gram, catalase, produção de gás a partir da glicose, crescimento a 15 e 45ºC, redução do "Litmus milk", crescimento no meio com 4 e 8% de cloreto de sódio, hidrólise de arginina, redução do nitrato e fermentação de diferentes "carboidratos". De um total de 526 "isolados" iniciais, 12 (2,28% estirpes de Lactobacillusacidophlilus foram identificadas.This work was carried out to isolate, characterize and identify Lactobacillusacidophilus strain from calves feces with 1- 3 days of age, collected directly from the rectum. The following tests for the characterization of the isolates were done: cellular morphology, gran test, catalase, gas production from glucose, growth at 15 and 45ºC, Litmus milk reduction, growth in culture medium with 4 and 8% sodium chloride, arginine hydrolysis, nitrate reduction and fermentation of several "carbohydrates". From a total of 526 initial isolates, 12 (2.28% strain of Lactobacillusacidophillus were identified.

  3. Isolamento de agentes bacterianos envolvidos em mastite subclinica bovina no Estado de Pernambuco.

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    T. C. F. Barbalho

    2005-03-01

    Full Text Available RESUMO: Foram examinadas 43 vacas em lactação totalizando 104 quartos mamários os quais foram positivos ao California Mastitis Test (CMT. Antes da ordenha realizava-se a antisepsia dos quartos mamários e em seguida colhia-se amostras de cinco mL de leite; estas eram homogeneizadas e uma alíquota de 0,01 mL era semeada na superfície de ágar sangue bovino a 5% e incubados em estufa bacteriológica a 37º C ,sendo as leituras efetuadas após 24 e 48 horas de incubação. Staphylococcus sp. foi o agente mais freqüente neste tipo de mastite e na região estudada. PALAVRAS CHAVE: Mastite subclínica, Bovinos, Staphylococcus sp. SUMMARY: In this study were investigated 43 milking cows including 104 quarters of the udder that were positive for California Mastitis Teste (CMT. For that purpose the antisepsis before the milking was performed in the quarters and five ml of milk were colected asseptically and homogenized. Samples of 10 ml were inoculated at surface of Bovine Blood Agar and incubated at 37°C for 24-48 h. Isolates were identifed by Standart Bacteriological Techniques. The results showed that Stapylococcus sp were the microorganism most frequently isolated. KEYWORDS: Subclinical mastitis, Bovine, Staphylococcus sp.

  4. ISOLAMENTO DA β-LACTOGLOBULINA DO SORO DO LEITE POR CROMATOGRAFIA IÔNICA

    OpenAIRE

    Susana Berleze de Pelegrini

    2013-01-01

    A alergia à proteína do leite de vaca atinge 2 a 5% dos lactentes e desencadeia sintomas que podem variar de leve a risco de vida. A β-lactoglobulina é a fração protéica mais alergênica do soro do leite. Vários processos foram desenvolvidos para a separação e purificação protéica, dentre eles a cromatografia de troca iônica. O objetivo deste trabalho foi realizar a separação da β-lactoglobulina do concentrado protéico do soro do leite através de cromatografia de troca...

  5. À frente do computador: a Internet enquanto produtora de dependência e isolamento

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Gustavo Malafaya Sá

    2012-01-01

    Full Text Available Few years after the advent of the Internet, began the first studies on dependence of the web. Episodes of isolation and self-exclusion from social life have been worrying scholars around the world, and the fact that the Internet promotes dependence has generated discussion. But it is possible that the online that encourages dependency and isolation of individuals? This is the central question that will guide the discussion of this paper. To answer, this study presents a cross between a requirement that users have to have contact with the Internet and attractive promotion of dependency on virtual spaces.

  6. Isolamento de fungos degradadores de carbendazim Isolation of carbendazim degrading fungi

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Célia Maria Maganhotto de Souza Silva

    1999-07-01

    Full Text Available Os fungicidas sistêmicos do grupo dos benzimidazóis são amplamente utilizados no controle de muitas doenças de plantas, tanto no solo como na parte aérea, e isso tem sido causa de contaminação ambiental. A ação de alguns microorganismos contribui para degradação e perda da atividade biológica desses fungicidas, podendo reduzir, dessa forma, o risco de impactos negativos. O objetivo deste trabalho foi selecionar fungos com potencial para degradar benomil e seu produto de hidrólise, carbendazim, e quantificar o potencial de degradação. Fungos foram isolados de três diferentes solos da região de agricultura irrigada do município de Guaíra, SP, com histórico de aplicação intensiva de fungicidas benzimidazóis. Dentre os fungos isolados, Alternaria alternata foi a linhagem menos afetada pelo aumento na concentração de benomil no meio de cultura. Na concentração máxima (100 mig mL-1 a inibição da taxa de crescimento de A. alternata foi 22%, enquanto nas demais linhagens foi superior a 45%. Em meio de cultura líquido suplementado com carbendazim, a taxa de crescimento em biomassa de A. alternata foi 43% maior do que a no meio sem carbendazim, o que indica o consumo do fungicida como fonte de carbono. A. alternata degradou rapidamente o fungicida, chegando a 66,21% de desaparecimento do produto em dois dias. A meia-vida de carbendazim nessas condições foi de 1,16 dias.The systemic fungicides belonging to the benzimidazoles group are widely used in agricultural practice and its indiscriminate use has been cause of environmental contamination. The dissipation and the loss of the pesticide biological activity depends, most of the time, on the microorganisms action. The present research was carried out with the objective to select fungi with potential to degrades benomyl and its hydrolysis product, carbendazim, and to quantify its degradation potential. The fungi were isolated from three different kinds of soils collected in the region of the irrigated agriculture of Guaíra, SP, Brazil, with intensive use of fungicides. Among the analyzed fungi, Alternaria alternata had the growth rate less affected by increasing the benomyl concentration. Under the maximum concentration, the inhibition for A. alternata was 22%; for the other ones it was superior to 45%. In a liquid culture medium, enriched with carbendazim, the biomass growth rate for A. alternata was 43% superior to growth rate observed in the culture media without carbendazim. A. alternata soon degraded the fungicide, reaching 66.21% of the disappearance of the product in two days. The half-life of carbendazim in this study was of 1.16 days.

  7. Isolamento, variabilità ed espressione del gene PIMT in Girasole

    OpenAIRE

    Scacchi, Silvia

    2012-01-01

    Il vigore è un aspetto rilevante della qualità delle sementi, strettamente connesso al loro status fisiologico, al genotipo e alle condizioni di stoccaggio. Stress ossidativi e danni alle macromolecole sono alla base del deterioramento del seme, che è equipaggiato con sistemi protettivi e di riparazione. Uno di questi coinvolge l’L-isoaspartil metiltransferasi (PIMT) che ripara i misfolding proteici catalizzando la riconversione in aspartato dell’isoaspartile anomalo accumulato. Scopo di ques...

  8. Isolation of herpotrichiellacious fungi from the environment Isolamento de fungos herpotriquieláceos do ambiente

    OpenAIRE

    Vânia Aparecida Vicente; Derlene Attili de Angelis; Flávio Queiróz-Telles Filho; Aline Aparecida Pizzirani-Kleiner

    2001-01-01

    Herpotrichiellaceous fungi, common agents of chromoblastomycosis and phaeohyphomycosis, were searched in samples of rotten wood, leaf littler, bark and soil of the rhizosphere, collected in the Centro Nacional de Pesquisas de Florestas/EMBRAPA, Colombo, PR, Brazil. Morphological analyses of macro, optic and scanning electron microscopy, as well as the determination of the nutritional pattern of the isolated strains were carried out for a taxonomical study. In a total of 17 colonies, 3 isolate...

  9. Isolamento de Mycobacterium bovis em cão Mycobacterium bovis isolation in a dog

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    P.M.P.C. Mota

    2001-08-01

    Full Text Available This report describes the isolation of Mycobacterium bovis from a dog with a history of co-habitation with bufallos infected with Mycobacterium bovis. After necropsy, the microrganism was isolated from a mesenteric lymphatic node in Stonebrink media and bacterial identification was confirmed by biochemical tests.

  10. ISOLAMENTO DA β-LACTOGLOBULINA DO SORO DO LEITE POR CROMATOGRAFIA IÔNICA

    OpenAIRE

    Susana Berleze de Pelegrini

    2013-01-01

    A alergia à proteína do leite de vaca atinge 2 a 5% dos lactentes e desencadeia sintomas que podem variar de leve a risco de vida. A β-lactoglobulina é a fração protéica mais alergênica do soro do leite. Vários processos foram desenvolvidos para a separação e purificação protéica, dentre eles a cromatografia de troca iônica. O objetivo deste trabalho foi realizar a separação da β-lactoglobulina do concentrado protéico do soro do leite através de cromatografia de troca...

  11. Cuba e a eterna guerra fria: isolamento ou reinserção?

    OpenAIRE

    2006-01-01

    O presente trabalho analisa a política externa cubana nos anos 90, depois da queda do bloco soviético. Para tanto, aponta os principais aspectos que caracterizaram a revolução cubana, marco fundamental na política latino-americana na segunda metade do século, analisando a natureza e o processo de construção do socialismo nesta ilha caribenha e a utilização da política externa para garantir a sobrevivência e a consolidação do regime. Neste sentido, ressalta que Cuba atuava, devido ao apoio sov...

  12. Isolamento de cepas de Mycobacterium avium em búfalos abatidos para consumo

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Freitas José de Arimatéa

    2001-01-01

    Full Text Available Duas cepas micobacterianas, isoladas no parênquima pulmonar e linfonodo apical de búfalos abatidos para consumo, procedentes de criatórios localizados na Ilha de Marajó (PA e submetidas à identificação segundo ensaios recomendados para o gênero Mycobacterium, foram identificadas como pertencentes ao complexo Mycobacterium avium. Apresentaram-se considerações relativas à associação desses organismos com a Aids -- e o papel dos alimentos nessa associação --, discutindo-se o impacto que a condição de germes oportunistas das espécies desse complexo têm na pandemia do HIV, assim como o risco potencial representado pelas infecções produzidas nos animais.

  13. Isolamento colturale e molecolare di Chlamydophila pneumoniae da pazienti con artropatie. Prospettive patogenetiche e diagnostiche

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Margherita Giuliodori

    2007-06-01

    Full Text Available Chlamydophila pneumoniae is an ubiquitous intracellular pathogen which causes acute respiratory diseases and may be associated with chronic inflammatory diseases including atherosclerosis, multiple sclerosis and arthritis. C. pneumoniae is rarely cultured from the synovial fluid or blood, and serology is seldom useful. So far most of the studies concerning the possible association between C. pneumoniae and arthritis have been made by molecular methods. Recent advances in the standardization of polymerase chain reaction techniques have shown to confirm a role of C. pneumoniae not only in reactive arthritis (ReA but also in chronic arthritis. In this study, we investigated whether C. pneumoniae could be isolated in synovial fluid and PBMC specimens of patients with different forms of arthritis including ReA.Advanced PCR and Reverse transcriptase PCR techniques targeting different chlamydial genes associated to a novel culture method based on combination of additional centrifugation and extension of culture time, were applied to detect C. pneumoniae in 6 patients with chronic synovitis including one with Anchylosing Spondylitis and relapsing joint swelling. For this patient, serological, coltural as well as molecular assays did detect C. pneumoniae only. Particularly, a high expression of Heat shock protein 60 and 70 of C. pneumoniae was found in the PBMC and the synovial compartments, thus confirming the ability of C. pneumoniae to survive inside blood ad synovia in vital and metabolically active forms. By contrast, the selective decrease of MOMP and 16sRNA, leads to hypotesize a different expression of Chlamydophyla genes during the different phases of infection.

  14. Cryptococcus: isolamento ambiental e caracterização bioquímica

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    E.C. Araújo Júnior

    2015-08-01

    Full Text Available O gênero Cryptococcus caracteriza-se por ser uma levedura responsável por infecção sistêmica, causada pelas espécies Cryptococcus neoformans e Cryptococcus gattii. O fungo é encontrado em substratos de origem animal e vegetal, e a infecção ocorre com a inalação de basidiósporos ou leveduras desidratadas infectantes presentes no ambiente. O presente trabalho teve por objetivo pesquisar a existência de microfocos de Cryptococcussp.em amostras ambientais da cidade de Araçatuba, São Paulo, com a finalidade de minimizar os riscos de contaminação do homem e dos animais, buscando o conhecimento da ecoepidemiologia do Cryptococcus. Foram colhidas 50 amostras oriundas de ocos e troncos de árvores (Cassiasp., Ficussp., Caesalpinea peltophorides de 10 locais representativos do perímetro urbano, as quais foram encaminhadas ao Laboratório de Bacteriologia e Micologia da Faculdade de Medicina Veterinária de Araçatuba-Unesp, onde foram processadas e semeadas em placas de Petri contendo ágar semente de Níger e Sabouraud dextrose com clorafenicol e incubadas à temperatura de 30ºC, por um período não inferior a cinco dias. Posteriormente, foram submetidas às provas bioquímicas: produção de urease, termotolerância a 37ºC e quimiotipagem em ágar CGB (L-canavanina-glicina-azul de bromotimol. A análise dos resultados revelaram que 17 (34% dos cultivos foram positivos para o gênero Cryptococcus, sendo nove (18% para Cryptococcus gattiie oito (16% para Cryptococcus neoformans. Outras leveduras correlacionadas, como Rhodotorula sp. e Candida sp., também foram isoladas. Conclui-se que os basidiósporos de Cryptococcusencontram-se dispersos na natureza, constituindo microfocos ambientais, não vinculados necessariamente a um único hospedeiro.

  15. Cianobactérias em ecossistemas de manguezais: isolamento, morfologia e diversidade genética

    OpenAIRE

    Diego Bonaldo Genuario

    2010-01-01

    Manguezais são ecossistemas de transição entre ambientes terrestres e marinhos encontrados em regiões tropicais e subtropicais. A ampla faixa de variações de salinidade e teor oxigênio, típica desses ambientes, está entre os principais fatores condicionantes da colonização e desenvolvimento da biota. Apesar disso, são ambientes com elevada produção primária. Entre os nutrientes, o nitrogênio é um dos principais fatores limitantes que afetam o desenvolvimento da vegetação do manguezal e soment...

  16. Novo método de dosagem de soros antipeçonhentos em camundongos lactentes: I - dosagem do soro anticrotálico New method for dosage of antivenoms sera in baby mice: I-Anticrotalic serum's dosage

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Bruno Soerensen

    1984-08-01

    Full Text Available A atividade biológica dos soros antipeçonhentos pode ser determinada "in vivo" em pombos, coelhos, cobaios e camundongos adultos, não existindo, entretanto, nenhum método que possa ser recomendado internacionalmente. Estudou-se comparativamente aos métodos tradicionais de dosagem de soros em pombos e camundongos adultos, a validade do uso de camundongos lactentes de 6 a 7 dias, pesando 4 a 5g, inoculados pela via subcutânea. Inicialmente foi determinada a toxidez do veneno de Crotalus durissus terríficus através do estudo da sintomatologia do envenenamento e da atividade letal. O estudo comparativo dos três métodos forneceu maior concordância de resultados em DE100 entre as dosagens realizadas com camundongos lactentes e adultos. A DE100 e DL50 determinadas em camundongos lactentes forneceu resultados mais constantes que os dos métodos de camundongos adultos e pombos. O uso deste novo método permite eliminar a dificuldade de obtenção do atual animal de prova; a utilização de um maior número de animais por ponto de avaliação biológica, possibilitando uma maior precisão e conseguindo-se uma uniformidade nas características exigidas neste tipo de dosagem como peso, idade e linhagem, visando a reprodução sistemática dos resultados.The biological activity of antiserum against venoms can be assessed by "in vivo" tests using pigeons, rabbits, guinea-pigs and adult mice although there is no International standardized reaction for it. The traditional methods using pigeons and adult mice were comparatively studied with those using mice of 4-5 g (6-7 days of age, inoculated by subcutaneous injection. The toxicity of the Crotalus durissus terrificus venom was initially determined by studying the symptomatology after administration of venom and lethal activity. The comparative study of these three methods showed that the best concordance in the results of the ED100 was obtained using adult and baby mice. The most homogeneous ED100

  17. Alterações hematológicas em bovinos submetidos ao envenenamento crotálico

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    P. M. Ferreira

    2005-03-01

    Full Text Available RESUMO: O quadro clínico observado ao exame do animal acidentado pela cascavél sul americana (Crotalus durissus terrificus , portadora de veneno contendo quantidades significativas da toxina crotamina, é de difícil diferenciação clínica com outras doenças. Com o objetivo de se estabelecer alterações hematológicas que auxiliem o diagnóstico desta condição mórbida, cinco fêmeas bovinas mestiças, com idade variando entre dois e três anos, foram inoculadas com veneno crotálico do tipo crotamina positivo, utilizando a dose de 0,03 mg por quilo de pêso vivo, na região glútea, por via intramuscular. Colheu-se amostras de sangue para realizar os exames laboratoriais antes e a cada duas horas após a inoculação, até a morte dos animais. Verificou-se que: o número de hemácias, o volume corpuscular médio ( VCM , a hemoglobina corpuscular média ( HCM , os números de leucócitos totais, de linfócitos, de neutrófilos e de monócitos, tiveram aumentos significativos e que os números de leucócitos totais apresentaram comportamento atípico, caracterizado por leucocitoses com valores atingindo até 60.000 celulas/mm,3 a cada seis horas, alternadas por quedas para em torno de 13.000 células/mm3. Pelo exposto, concluiu-se que a observação destas alterações poderá auxiliar o estabelecimento do diagnóstico desta afecção nos bovinos. PALAVRAS CHAVE: Envenenamento crotálico; hemograma; bovinos. SUMMARY: The clinical findings observed at examination of an animal attacked by South American rattle snake (Crotalus durissus terrificus , that has poison containing significative crotamine toxin quantites are difficult to distinguish from other diseases. With the aim of establishing haematological parameters of diagnostic value for this condition diagnosis, five crossbred female cattle, from two to three years old, were inoculated with

  18. In Vitro Antiophidian Mechanisms of Hypericum brasiliense Choisy Standardized Extract: Quercetin-Dependent Neuroprotection

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Cháriston André Dal Belo

    2013-01-01

    Full Text Available The neuroprotection induced by Hypericum brasiliense Choisy extract (HBE and its main active polyphenol compound quercetin, against Crotalus durissus terrificus (Cdt venom and crotoxin and crotamine, was enquired at both central and peripheral mammal nervous system. Cdt venom (10 μg/mL or crotoxin (1 μg/mL incubated at mouse phrenic nerve-diaphragm preparation (PND induced an irreversible and complete neuromuscular blockade, respectively. Crotamine (1 μg/mL only induced an increase of muscle strength at PND preparations. At mouse brain slices, Cdt venom (1, 5, and 10 μg/mL decreased cell viability. HBE (100 μg/mL inhibited significantly the facilitatory action of crotamine (1 μg/mL and was partially active against the neuromuscular blockade of crotoxin (1 μg/mL (data not shown. Quercetin (10 μg/mL mimicked the neuromuscular protection of HBE (100 μg/mL, by inhibiting almost completely the neurotoxic effect induced by crotoxin (1 μg/mL and crotamine (1 μg/mL. HBE (100 μg/mL and quercetin (10 μg/mL also increased cell viability in mice brain slices. Quercetin (10 μg/mL was more effective than HBE (100 μg/mL in counteracting the cell lysis induced by Cdt venom (1 and 10 μg/mL, resp.. These results and a further phytochemical and toxicological investigations could open new perspectives towards therapeutic use of Hypericum brasiliense standardized extract and quercetin, especially to counteract the neurotoxic effect induced by snake neurotoxic venoms.

  19. Ação neuro-muscular do veneno crotálico: dados preliminares Neuromuscular action of crotalid venom: preliminar data

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Maria Dorvalina Silva

    1996-03-01

    Full Text Available Estudamos 6 pacientes, 2 cães e um coelho com intoxicação crotálica. Avaliamos a condução nervosa periférica sensitiva e motora, a transmissão neuromuscular e eletromiografias. As biópsias de músculo foram processadas por histoquímica. Os 6 pacientes apresentaram mononeuropatia sensitiva no nervo periférico adjacente ao local da inoculação do veneno e encontramos evidências histoquímicas de miopatia mitocondrial. Os defeitos da transmissão neuromuscular foram mínimos. A maioria dos autores admite que veneno crotálico determina síndrome miastênica. Nossos achados indicam que ptose palpebral, facies miastênico e fraqueza muscular observados após acidente crotálico, correspondem provavelmente a miopatia mitocondrial, muitas vezes transitória e reversível.We studied 6 patients and 2 dogs that have been bitten by South American rattlesnake Crotalus durissus terrificus and one rabbit inoculated with crotalid venom. We analized sensory and motor peripheral nerve conduction, repetitive stimulation for studying neuromuscular transmission and electromyographies. Muscle biopsies were processed by histochemistry. All patients had peripheral mononeuropathy of the closest sensitive nerve to the area of snakebite. The neuromuscular transmission alterations were minimal. Muscle histochemistry of 4 patients, 2 dogs and 1 rabbit showed findings of mitochondrial myopathy. The majority of authors admit that crotalid venom causes myastenic syndrome. Our findings suggest that palpebral ptosis, myastenic facies and muscular weakness observed after crotalid poisoning are, probably, due to transient and reversible mitochondrial myopathy. As far as we know, this is the first report on the ability of the venom of this rattlesnake to cause local sensitive mononeuropathy and the first muscle histochemistry showing mitochondrial myopathy in humans poisoned by crotalid venom.

  20. Crotoxin in humans: analysis of the effects on extraocular and facial muscles

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Geraldo de Barros Ribeiro

    2012-12-01

    Full Text Available PURPOSE: Crotoxin is the main neurotoxin of South American rattlesnake Crotalus durissus terrificus. The neurotoxic action is characterized by a presynaptic blockade. The purpose of this research is to assess the ability of crotoxin to induce temporary paralysis of extraocular and facial muscles in humans. METHODS: Doses of crotoxin used ranged from 2 to 5 units (U, each unit corresponding to one LD50. We first applied 2U of crotoxin in one of the extraocular muscles of 3 amaurotic individuals to be submitted to ocular evisceration. In the second stage, we applied crotoxin in 12 extraocular muscles of 9 patients with strabismic amblyopia. In the last stage, crotoxin was used in the treatment of blepharospasm in another 3 patients. RESULTS: No patient showed any systemic side effect or change in vision or any eye structure problem after the procedure. The only local side effects observed were slight conjunctival hyperemia, which recovered spontaneously. In 2 patients there was no change in ocular deviation after 2U crotoxin application. Limitation of the muscle action was observed in 8 of the 12 applications. The change in ocular deviation after application of 2U of crotoxin (9 injections was in average 15.7 prism diopters (PD. When the dose was 4U (2 applications the change was in average 37.5 PD and a single application of 5U produced a change of 16 PD in ocular deviation. This effect lasted from 1 to 3 months. Two of the 3 patients with blepharospasm had the hemifacial spasm improved with crotoxin, which returned after 2 months. CONCLUSIONS: This study provides data suggesting that crotoxin may be a useful new therapeutic option for the treatment of strabismus and blepharospasm. We expect that with further studies crotoxin could be an option for many other medical areas.

  1. Anti-tumor activity of CrTX in human lung adenocarcinoma cell line A549

    Institute of Scientific and Technical Information of China (English)

    Bin YE; Yan XIE; Zheng-hong QIN; Jun-chao WU; Rong HAN; Jing-kang HE

    2011-01-01

    Aim:To assess the cytotoxic effect of crotoxin (CrTX),a potent neurotoxin extracted from the venom of the pit viper Crotalus durissus terrificus,in human lung adenocarcinoma A549 cells and investigated the underlying mechanisms.Methods:A549 cells were treated with gradient concentrations of CrTX,and the cell cycle and apoptosis were analyzed using a flow cytometric assay.The changes of cellular effectors p53,caspase-3 and cleaved caspase-3,total P38MAPK and pP38MAPK were investigated using Western blot assays.A549 xenograft model was used to examine the inhibition of CrTX on tumor growth in vivo.Results:Treatment of A549 cells with CrTX (25-200 μg/mL) for 48 h significantly inhibited the cell growth in a dose-dependent manner (IC50=78 μg/mL).Treatment with CrTX (25 iJg/mL) for 24 h caused G1 arrest and induced cell apoptosis.CrTX (25 μg/mL) significantly increased the expression of wt p53,cleaved caspase-3 and phospho-P38MAPK.Pretreatment with the specific P38MAPK inhibitor SB203580 (5 μmol/L) significantly reduced CrTX-induced apoptosis and cleaved caspase-3 level,but G1 arrest remained unchanged and highly expressed p53 sustained.Intraperitoneal injection of CrTX (10 μg/kg,twice a week for 4 weeks) significantly inhibited A549 tumor xenograft growth,and decreased MVD and VEGF levels.Conclusion:CrTX produced significant anti-tumor effects by inducing cell apoptosis probably due to activation of P38MAPK and caspase-3,and by cell cycle arrest mediated by increased wt p53 expression.In addition,CrTX displayed anti-angiogenic effects in vivo.

  2. Autophagy is involved in cytotoxic effects of crotoxin in human breast cancer cell line MCF-7 cells

    Institute of Scientific and Technical Information of China (English)

    Ci-hui YAN; Ya-ping YANG; Zheng-hong QIN; Zhen-lun GU; Paul REID; Zhong-qin LIANG

    2007-01-01

    Aim: To investigate the role of crotoxin (CrTX)-induced autophagy in the death of MCF-7 cells, a caspase-3-deficient, human breast cancer cell line. Methods: Cul-tured MCF-7 cells were treated with various doses of CrTX, a phospholipase A2(PLA2) isolated from the venom of the South American rattlesnake, Crotalus durissus terrificus. The cytotoxicity of CrTX in the presence and absence of caspase inhibitors was measured with methyl thiazolyl tetrazolium (MTT) and lactate dehydrogenase (LDH) leakage assays. The activation of autophagy was determined with transmission electron microscope and monodansylcadaverin(MDC) labeling. The upregulation of lysosomal enzymes, the release of cyto-chrome c (cyto-c), and the nuclear translocation of the apoptosis inducing factor(AIF) were examined by immunoblotting and immunofluorescence. Results: CrTX inhibited the viability of MCF-7 cells in a dose- and time-dependent manner. CrTX-activated autophagy was revealed by punctuate MDC labeling, and an increase in the formation of autophagosomes as well as apoptosis, as evidenced by nuclear condensation and fragmentation. The activation of cathepsin B, D, and L, in addition to the release of cytochrome c and the relocation of AIF into nuclei, were observed after CrTX treatment. Autophagy inhibitors 3-methyladenine (3-MA),NH4Cl, and the pan-caspase inhibitor, Z-Val-Ala-Asp-fluoromethylketone (Z-Vad-fmk), attenuated CrTX-induced cell death. Conclusion: An autophagic mecha-nism contributes to the apoptosis of MCF-7 cells induced by CrTX.

  3. Structural analysis of irradiated crotoxin by spectroscopic techniques

    Energy Technology Data Exchange (ETDEWEB)

    Oliveira, Karina C. de; Fucase, Tamara M.; Silva, Ed Carlos S. e; Chagas, Bruno B.; Buchi, Alisson T.; Viala, Vincent L.; Spencer, Patrick J.; Nascimento, Nanci do, E-mail: kcorleto@usp.br [Instituto de Pesquisas Energeticas e Nucleares (IPEN/CNEN-SP), Sao Paulo, SP (Brazil). Centro de Biotecnologia

    2013-07-01

    Snake bites are a serious public health problem, especially in subtropical countries. In Brazil, the serum, the only effective treatment in case of snake bites, is produced in horses which, despite of their large size, have a reduced lifespan due to the high toxicity of the antigen. Ionizing radiation has been successfully employed to attenuate the biological activity of animal toxins. Crotoxin, the main toxic compound from Crotalus durissus terrificus (Cdt), is a heterodimeric protein composed of two subunits: crotapotin and phospholipase A{sub 2}. Previous data indicated that this protein, following irradiation process, undergoes unfolding and/or aggregation, resulting in a much lower toxic antigen. The exact mechanisms and structural modifications involved in aggregation process are not clear yet. This work investigates the effects of ionizing radiation on crotoxin employing Infrared Spectroscopy, Circular Dichroism and Dynamic Light Scattering techniques. The infrared spectrum of lyophilized crotoxin showed peaks corresponding to the vibrational spectra of the secondary structure of crotoxin, including β-sheet, random coil, α-helix and β-turns. We calculated the area of these spectral regions after adjusting for baseline and normalization using the amide I band (1590-1700 cm{sup -1}), obtaining the variation of secondary structures of the toxin following irradiation. The Circular Dichroism spectra of native and irradiated crotoxin suggests a conformational change within the molecule after the irradiation process. This data indicates structural changes between the samples, apparently from ordered conformation towards a random coil. The analyses by light scattering indicated that the irradiated crotoxin formed multimers with an average molecular radius 100 folds higher than the native toxin. (author)

  4. Binding studies of the antitumoral radiopharmaceutical 125I-Crotoxin to Ehrlich ascites tumor cells

    Energy Technology Data Exchange (ETDEWEB)

    Silveira, Marina B.; Santos, Raquel G. dos [Centro de Desenvolvimento da Tecnologia Nuclear (CDTN/CNEN-MG), Belo Horizonte, MG (Brazil); Dias, Consuelo L. Fortes [Fundacao Ezequiel Dias (FUNED), Belo Horizonte, MG (Brazil)], e-mail: consuelo@pq.cnpq.br; Cassali, Geovanni D. [Universidade Federal de Minas Gerais (UFMG), Belo Horizonte, MG (Brazil). Lab. de Patologia Comparada], e-mail: cassalig@icb.ufmg.br

    2009-07-01

    The development of tools for functional diagnostic imaging is mainly based on radiopharmaceuticals that specifically target membrane receptors. Crotoxin (Crtx), a polypeptide isolated from Crotalus durissus terrificus venom, has been shown to have an antitumoral activity and is a promising bioactive tracer for tumor detection. More specific radiopharmaceuticals are being studied to complement the techniques applied in the conventional medicine against breast cancer, the most frequent cause of death from malignant disease in women. Crtx's effect has been shown to be related with the overexpression of epidermal growth factor receptor (EGFR), present in high levels in 30 to 60% of breast tumor cells. Our objective was to evaluate Crtx as a tracer for cancer diagnosis, investigating its properties as an EGFR-targeting agent. Ehrlich ascites tumor cells (EAT cells) were used due to its origin and similar characteristics to breast tumor cells, specially the presence of EGFR. Crtx was labeled with 125I and binding experiments were performed. To evaluate the specific binding in vitro of Crtx, competition binding assay was carried out in the presence of increasing concentrations of non-labelled crotoxin and epidermal growth factor (EGF). Specific binding of 125I-Crtx to EAT cells was determined and the binding was considered saturable, with approximately 70% of specificity, high affinity (Kd = 19.7 nM) and IC50 = 1.6 x 10-11 M. Our results indicate that Crtx's interaction with EAT cells is partially related with EGFR and increases the biotechnological potential of Crtx as a template for radiopharmaceutical design for cancer diagnosis. (author)

  5. Microbiological evaluation of different strategies for management of snakes in captivity.

    Science.gov (United States)

    Campagner, M V; Bosco, S M G; Bagagli, E; Cunha, M L R S; Jeronimo, B C; Saad, E; Biscola, N P; Ferreira, R S; Barraviera, B

    2012-01-01

    Keeping snakes in captivity to produce venom for scientific research and production of inputs is now a worldwide practice. Maintaining snakes in captivity involves capture, infrastructure investments, management techniques, and appropriate qualified personnel. Further, the success of the project requires knowledge of habitat, nutrition, and reproduction, and control of opportunistic infections. This study evaluated the management of snakes in three types of captivity (quarantine, intensive, and semiextensive) and diagnosed bacterial and fungal contaminants. A bacteriological profile was obtained by swabbing the oral and cloacal cavities, scales, and venoms of healthy adult snakes from Bothrops jararaca (Bj) and Crotalus durissus terrificus (Cdt). There was predominance of Enterobacteriaceae, especially non-fermenting Gram-negative bacilli excluding Pseudomonas spp and Gram- positive bacteria. Statistically, intensive captivity resulted in the highest number of bacterial isolates, followed by recent capture (quarantine) and by semiextensive captivity. No statistical difference was found between Bj and Cdt bacterial frequency. In vitro bacterial susceptibility testing found the highest resistance against the semisynthetic penicillins (amoxicillin and ampicillin) and highest sensitivity to amicacin and tobramycin aminoglycosides. To evaluate mycological profile of snakes from intensive captivity, samples were obtained from two healthy Bj and one B. moojeni, one B. pauloensis, and one Cdt showing whitish lesions on the scales suggestive of ringworm. Using conventional methods and DNA-based molecular procedures, five samples of Trichosporon asahii were identified. Despite the traditional role of intense captivity in ophidian venom production, semiextensive captivity was more effective in the present study by virtue of presenting superior control of bacterial and fungal transmission, easier management, lowest cost, and decreased rate of mortality; therefore, it should be

  6. Study of crotoxin on the induction of paralysis in extraocular muscle in animal model

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Geraldo de Barros Ribeiro

    2012-10-01

    Full Text Available PURPOSE: Crotoxin is the major toxin of the venom of the South American rattlesnake Crotalus durissus terrificus, capable of causing a blockade of the neurotransmitters at the neuromuscular junction. The objective of this study was to appraise the action and effectiveness of the crotoxin induced paralysis of the extraocular muscle and to compare its effects with the botulinum toxin type A (BT-A. METHODS: The crotoxin, with LD50 of 1.5 µg, was injected into the superior rectus muscle in ten New Zealand rabbits. The concentration variance was 0.015 up to 150 µg. Two rabbits received 2 units of botulinum toxin type A for comparative analysis. The evaluation of the paralysis was performed using serial electromyography. After the functional recovery of the muscles, which occurred after two months, six rabbits were sacrificed for anatomopathology study. RESULTS: The animals did not show any evidence of systemic toxicity. Transitory ptosis was observed in almost every animal and remained up to fourteen days. These toxins caused immediate blockade of the electrical potentials. The recovery was gradual in the average of one month with regeneration signs evident on the electromyography. The paralysis effect of the crotoxin on the muscle was proportional to its concentration. The changes with 1.5 µg crotoxin were similar to those produced by the botulinum toxin type A. The histopathology findings were localized to the site of the injection. No signs of muscle fiber's necrosis were seen in any sample. The alterations induced by crotoxin were also proportional to the concentration and similar to botulinum toxin type A in concentration of 1.5 µg. CONCLUSION: Crotoxin was able to induce transitory paralysis of the superior rectus muscle. This effect was characterized by reduction of action potentials and non-specific signs of fibrillation. Crotoxin, in concentration of 1.5 µg was able to induce similar effects as botulinum toxin type A.

  7. Rattlesnake Phospholipase A2 Increases CFTR-Chloride Channel Current and Corrects ∆F508CFTR Dysfunction: Impact in Cystic Fibrosis.

    Science.gov (United States)

    Faure, Grazyna; Bakouh, Naziha; Lourdel, Stéphane; Odolczyk, Norbert; Premchandar, Aiswarya; Servel, Nathalie; Hatton, Aurélie; Ostrowski, Maciej K; Xu, Haijin; Saul, Frederick A; Moquereau, Christelle; Bitam, Sara; Pranke, Iwona; Planelles, Gabrielle; Teulon, Jacques; Herrmann, Harald; Roldan, Ariel; Zielenkiewicz, Piotr; Dadlez, Michal; Lukacs, Gergely L; Sermet-Gaudelus, Isabelle; Ollero, Mario; Corringer, Pierre-Jean; Edelman, Aleksander

    2016-07-17

    Deletion of Phe508 in the nucleotide binding domain (∆F508-NBD1) of the cystic fibrosis transmembrane regulator (CFTR; a cyclic AMP-regulated chloride channel) is the most frequent mutation associated with cystic fibrosis. This mutation affects the maturation and gating of CFTR protein. The search for new high-affinity ligands of CFTR acting as dual modulators (correctors/activators) presents a major challenge in the pharmacology of cystic fibrosis. Snake venoms are a rich source of natural multifunctional proteins, potential binders of ion channels. In this study, we identified the CB subunit of crotoxin from Crotalus durissus terrificus as a new ligand and allosteric modulator of CFTR. We showed that CB interacts with NBD1 of both wild type and ∆F508CFTR and increases their chloride channel currents. The potentiating effect of CB on CFTR activity was demonstrated using electrophysiological techniques in Xenopus laevis oocytes, in CFTR-HeLa cells, and ex vivo in mouse colon tissue. The correcting effect of CB was shown by functional rescue of CFTR activity after 24-h ΔF508CFTR treatments with CB. Moreover, the presence of fully glycosylated CFTR was observed. Molecular docking allowed us to propose a model of the complex involving of the ABCβ and F1-like ATP-binding subdomains of ΔF508-NBD1. Hydrogen-deuterium exchange analysis confirmed stabilization in these regions, also showing allosteric stabilization in two other distal regions. Surface plasmon resonance competition studies showed that CB disrupts the ∆F508CFTR-cytokeratin 8 complex, allowing for the escape of ∆F508CFTR from degradation. Therefore CB, as a dual modulator of ΔF508CFTR, constitutes a template for the development of new anti-CF agents.

  8. Biochemical and pharmacological characterization of irradiated crotamine by gamma rays of {sup 60}Co; Caracterizacao bioquimica e farmacologica da crotamina irradiada por raios gama de {sup 60}Co

    Energy Technology Data Exchange (ETDEWEB)

    Oliveira, Karina Corleto

    2014-07-01

    The serum production in Brazil, the only effective treatment in cases of snakebites, uses horses that although large size, have reduced l lifespan compared with horses not immunized. Ionizing radiation has been shown as an excellent tool in reducing the toxicity of venoms and toxins isolated, and promote the achievement of better immunogens for serum production, and contributing to the welfare of serum-producing animals. It is known, however, that the effects of ionizing radiation on protein are characterized by various chemical modifications, such as fragmentation, cross-linking due to aggregation and oxidation products generated by water radiolysis. However, the action of gamma radiation on toxins is not yet fully understood structurally and pharmacologically, a fact that prevents the application of this methodology in the serum production process. So we proposed in this paper the characterization of crotamine, an important protein from the venom of Crotalus durissus terrificus species, irradiated with {sup 60}Co gamma rays. After isolating the toxin by chromatographic techniques and testing to prove the obtaining of pure crotamine, it was irradiated with gamma rays and subjected to structural analysis, Fluorescence and Circular Dichroism. Using high hydrostatic pressure tests were also conducted in order to verify that the conformational changes caused by radiation suffer modifications under high pressures. From the pharmacological point of view, muscle contraction tests were conducted with the objective of limiting the action of crotamine in smooth muscle as well as the change in the action of toxin caused structural changes to the front. Analysis of Circular Dichroism and Fluorescence showed changes in structural conformation of crotamine when subjected to gamma radiation and that such changes possibly occurring in the secondary and tertiary structure of the protein. The observed in pharmacological tests showed that the irradiated crotamine was less effective

  9. Vipericidins: a novel family of cathelicidin-related peptides from the venom gland of South American pit vipers.

    Science.gov (United States)

    Falcao, C B; de La Torre, B G; Pérez-Peinado, C; Barron, A E; Andreu, D; Rádis-Baptista, G

    2014-11-01

    Cathelicidins are phylogenetically ancient, pleiotropic host defense peptides-also called antimicrobial peptides (AMPs)-expressed in numerous life forms for innate immunity. Since even the jawless hagfish expresses cathelicidins, these genetically encoded host defense peptides are at least 400 million years old. More recently, cathelicidins with varying antipathogenic activities and cytotoxicities were discovered in the venoms of poisonous snakes; for these creatures, cathelicidins may also serve as weapons against prey and predators, as well as for innate immunity. We report herein the expression of orthologous cathelicidin genes in the venoms of four different South American pit vipers (Bothrops atrox, Bothrops lutzi, Crotalus durissus terrificus, and Lachesis muta rhombeata)-distant relatives of Asian cobras and kraits, previously shown to express cathelicidins-and an elapid, Pseudonaja textilis. We identified six novel, genetically encoded peptides: four from pit vipers, collectively named vipericidins, and two from the elapid. These new venom-derived cathelicidins exhibited potent killing activity against a number of bacterial strains (S. pyogenes, A. baumannii, E. faecalis, S. aureus, E. coli, K. pneumoniae, and P. aeruginosa), mostly with relatively less potent hemolysis, indicating their possible usefulness as lead structures for the development of new anti-infective agents. It is worth noting that these South American snake venom peptides are comparable in cytotoxicity (e.g., hemolysis) to human cathelicidin LL-37, and much lower than other membrane-active peptides such as mastoparan 7 and melittin from bee venom. Overall, the excellent bactericidal profile of vipericidins suggests they are a promising template for the development of broad-spectrum peptide antibiotics.

  10. Isolamento e estudo experimental de duas novas culturas de bacilos ácido-alcool resistentes de muco nasal de leprosos

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    H. C. de Souza-Araujo

    1954-03-01

    Full Text Available The A. described on December 14, 1951, his first culture of acid-fast bacillus isolated from nasal mucus of a leprous girl. in this paper the A. describes two new strains of acid-fast bacilli gotten also from nasal mucus of other two leprous girls, L3 cases. The first patient (layse S had her mucus treated by petroff's method on December 16, 1952 and sown onto three tubes of loewenstein medium and in glycerin broth. After two weeks incubation at 37°C all three tubes of Loewenstein showed many punctiforme and pin-head yellowish colonies, whose microscopic examination proved to be of a pure acid-fast bacillus culture. This sample inoculated in rats and mice produced, after 55 days incubation, small tumors from which the culture was easily recovered. On April, 9, 1953 a new sample of nasal mucus of the same patient was sown in three tubes of Loewenstein. After two weeks incubation at 37°C all 3 tubes showed germination of small yellowish colonies of acid-fast bacilli. Within four months being gotten two samples of identical cultures in all smeared tubes of Loewenstein medium sown, proved that such cultures were not an ordinary ambient contamination. Second patient: - Maria N. After various sowing of different kinds of material from her, february 26, 1953 her nasal mucus treated by soda and sown onto Loewenstein medium, after 25 days incubation showed in only one tube, one small round colony, at first white, becoming creamy after three months. Transplants in various media grew at first slowly and after 2 or 3 generations grew faster. The "Layse" strain produced pellicle in glycerin broth and Dubos medium; the "Maria N." strain did not produce as yet. Both strains (Layse I and II, and Maria N. gave weak positive Dubos test in half-an-hour and negative after 24 hours reading. Both were strongly positive when stained by Gram, Ziehl-Neelsen and Fontes methods. Both strains gave also positive fluoroscopy. These cultures are being studied. The A. concludes that, according to his experience, the slower growing cultures of acid-fast bacilli isolated from leprosy material, are the more suitable for experimental work. Aknowledgement. The A. thanks to Miss MARIA DE LOURDES SANTANA for her valuable collaboration in the studies of the described cultures.

  11. A method for obtaining isolation in production cementing; Sistematica para obtencao de isolamentos nas cimentacoes de producao

    Energy Technology Data Exchange (ETDEWEB)

    Lepeleire, Rubens de; Miletto, Antonio Luis Pires [PETROBRAS, XX (Brazil). Distrito de Perfuracao do Sudeste. Div. Tecnica

    1989-12-31

    This paper presents the procedure used to identify the factors that influenced the appearance of low isolation indexes, 59,1% in production cementing operations in Sao Mateus, during the year of 1987, bringing about a cost increase of over US$200,000.00 in primary cementing corrections. The various stages for the obtainment of such an index are analysed and the modifications that were considered necessary are presented. These modifications raised the index to 91,3% thus reducing correction costs to less than US$150,000.00 in 1988. From January to July, 1989, we able to obtain 98,9% of the isolations and an accumulated cementing correction cost of less than US$20,000.00. (author) 3 refs., 6 figs., 4 tabs.

  12. Comparação da eficiência dos caldos de enriquecimento seletivo no isolamento de Salmonella Dublin

    OpenAIRE

    Silva, D. G. [UNESP; Fagliari, J. J. [UNESP; GARCIA, T. B.

    2008-01-01

    The aim of this study was to compare three different selective enrichment broths: Rappaport-Vassiliadis (RV), selenite cystine (SC) and Muller-Kauffmann tetrathionate (MKT) for Salmonella Dublin isolation from faecal samples of calf experimentally infected. The bacteriological procedure involved pre-enrichment stages in Hajna-GN broth (only for the samples inoculated in RV broth), selective enrichment, culture in modified brilliant green agar (BGA), presumptive biochemistry tests (using tripl...

  13. Isolamento, identificação e sorotipagem de candida albicans a partir de secreção vaginal

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Antonio Luengo Garcia

    1988-08-01

    Full Text Available Foram estudadas 104 amostras de secreção vaginal de mulheres com suspeita de candidiase segundo observações clinicas, na cidade de Alfenas-MG. Encontrou-se 55,7% de positividade para Candida albicans .prevalecendo maior índice na raça negra (64% de 25 amostras, sendo de 53,1% (79 amostras, a positividade na raça branca. Em 14 gestantes, a pesquisa da levedura mostrou-se positiva na totalidade dos casos. A maioria das amostras positivas (93,1% procedia de mulheres com idade compreendida entre 20 40 anos. O uso de anticoncepcionais, antibióticos e presença de displasias cervicais mostraram-se como fatores que contribuiram para maior incidência do fungo. Das 58 amostras de C. albicans isoladas, 50 (86,2% pertenciam ao sorotipo "A", sendo 37 (74% isoladas de mulheres da raça branca e 13 (26% da raça negra. Apenas 08 amostras (13,8% pertenciam ao sorotipo "B", sendo 05 (11,9% isoladas a partir de mulheres da raça branca e 03 (18,75% da raça negra.

  14. Visões de brasileiros sobre América Latina: do isolamento à integração

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Regina Crespo

    2006-01-01

    Full Text Available The political and cultural distance that still prevails between Brazil and the Hispanic American countries is being gradually diminished in the political plane, mainly with the conformation of regional blocks and cooperation agreements. In the specific plane of social thought, this distance also prevails, but it is possible to observe that the Latin American intellectuals have shared historically a preoccupation about reflecting on continental themes and defining a place for Latin America in a worldwide context. In the beginning there existed a weak bond between Brazilians and their Hispanic American equals. Nevertheless, in the fifties, with the CEPAL movement, and in the seventies, with the Dependency theory, began a greater exchange. Since the late eighties, the insertion of Latin America in the globalized world and the relation between culture and modernity in the subcontinent were themes that stimulated the dialogue between Brazilian and Hispanic American intellectuals, such as Renato Ortiz, Octavio Ianni and Martin Barbero, who are analyzed in this article.

  15. Isolamento, caracterização e atividade fermentativa de bactérias deterioradoras de polpa de manga

    OpenAIRE

    Costa, Esther Dantas

    2006-01-01

    A manga (Mangifera indica Linn.) é uma das mais importantes frutas tropicais, muito apreciada pelo sabor, aroma e por suas propriedades nutricionais. Os frutos são perecíveis em razão dos fatores intrínsecos, dificultando a sua comercialização in natura. Uma alternativa para reduzir as perdas é a conservação da manga na forma de polpa, suco ou néctar. O tratamento térmico é o processo mais empregado para a conservação desses produtos. Entretanto, a inativação completa de microrganismos durant...

  16. Isolamento de células-tronco mesenquimais da medula óssea Isolation of bone marrow mesenchymal stem cells

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Renata Aparecida de Camargo Bittencourt

    2006-01-01

    Full Text Available As Células-Tronco Mesenquimais (CTMs têm alta capacidade de se renovar e diferenciar em várias linhagens de tecido conjuntivo. Este trabalho teve como objetivo isolar as CTMs da medula óssea de camundongos utilizando dois diferentes meios de cultura e caracterizá-las através de imuno-marcação com anti-vimentina. Foram utilizados 6 camundongos BALB/c com 15 dias de idade. A medula óssea foi coletada do canal medular das tíbias e fêmures dos camundongos e ressuspensas em uma concentração final 6x10(5, em meio Knockout- DMEM e DMEM alta concentração de glicose, suplementados com 10% SBF, mantidas em estufa a 37° C em uma atmosfera úmida a 5% de CO2 e 95% de ar por 72 horas, quando as células não aderentes foram removidas durante a troca do meio. O número e densidade de células com morfologia fibroblastóide foram maior no meio Knockout- DMEM em cinco dias de cultura versus 10-20 dias para conseguir a mesma concentração celular com o DMEM alta concentração de glicose. As células de ambos grupos apresentaram intensa marcação com anticorpo anti-vimentina, caracterizando-as como CTMs. A obtenção mais rápida das CTMs é fundamental para o campo da terapia celular, principalmente quando se deseja utilizar estas células no reparo de tecidos de origem mesenquimal.Mesenchymal Stem Cells (MSCs have a high ability to renew and differentiate themselves into various lineages of conjunctive tissues. This study aimed to isolate the MSCs from murine bone marrow by using two different growth media and to characterize them with immunostaining with antivimentin antibody. We used six 2-week old BALB/c mice. Bone marrow was collected from mice's tibial and femoral channels and re-suspended in a final strength of 6x105 in Knockout-DMEM and high-glucose-DMEM media, supplemented by 10% FBS, and kept in a humidified 5% CO2 incubator at 37º C for 72 h, when non-adherent cells were removed during the change of medium. The number and density of adherent fibroblast-like colonies was greater with the Knockout-DMEM medium (within 5 days of culture versus 10-20 days in DMEM-high glucose to get the same cellular concentration. The cells in both groups were highly positive for antivimentin antibody, characterizing them as MSCs. Obtaining MSCs as quickly as possible is essential for cell therapy field, especially when those cells are intended to be used for the repair of tissues from mesenchymal sources.

  17. Isolamento de glicoproteínas através de cromatografia de afinidade em colunas contendo lectinas imobilizadas

    OpenAIRE

    Gomes dos Santos Filho, Teodomiro

    2001-01-01

    A lectina de folha de Bauhinia monandra (BmoLL) e as isolectinas de sementes de Cratylia mollis (Cra Iso 1,2,3), isoladas no Laboratório de Glicoproteínas da UFPE, foram imobilizadas em álcool polivinílico-glutaraldeído (PVA-glutaraldeído) e Sepharose-4B, respectivamente. Os suportes Cra Iso 1,2,3-Sepharose, SpiL-Sepharose (lectina de semente de Swartzia pickellii imobilizada em Sepharose-4B) e BmoLL-PVA-glutaraldeído foram avaliados quanto à eficiência de ligação de ovoalbu...

  18. Isolamento de esporos de Paenibacillus larvae subsp. larvae no Brasil Detectionof Paenibacillus larvae subsp. larvae spores in Brazil

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Dulce Maria Tocchetto Schuch

    2003-03-01

    Full Text Available Este trabalho objetivou detectar presença de esporos de Paenibacillus larvae subsp. larvae em produtos de um entreposto do interior do Estado do Rio Grande do Sul, a identificação de possíveis fontes de contaminação e a avaliação da possibilidade da transferência de esporos para colméias de apiários adjacentes a partir de produtos importados contaminados. Foram analisados mel e pólen importados disponíveis no entreposto, favo do ninho (crias, pólen e mel colhido de uma colméia sadia, mel estocado em um dos apiários e abelhas adultas. Os resultados foram positivosem relação ao mel e pólen importados, a três grupos de abelhas adultas e ao mel do favo.The objective of this work was to detect the presence of Paenibacillus larvae subsp. larvae spores in products from a warehouse located in Rio Grande do Sul State, Brazil, the identification of possible contamination sources, and the assessment of spores transference possibility from contaminated imported products from the warehouse to apiaries located in the surrounding area. Samples of imported pollen and bulk honey stocked in the warehouse, and honeycomb (brood, honey and pollen from a healthy hive, honey from one apiary and adult bees were analyzed. Imported honey and pollen, and three groups of adult bees and the honey collected from the honeycomb resulted positive.

  19. Estudo das biomoléculas encontradas na cifomedusa Phyllorhiza punctata : isolamento e caracterizaçăo estrutural /

    OpenAIRE

    de Souza, Lauro Mera

    2005-01-01

    Orientador : Guilherme L. Sassaki Dissertaçăo (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Cięncias Biológicas, Programa de Pós-Graduaçăo em Bioquímica. Defesa: Curitiba, 2005 Inclui bibliografia

  20. Perfil de isolamento e resistência a antimicrobianos de Fusobacterium spp. isolados do sulco gengival eqüino

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Silva I.N.G.

    1999-01-01

    Full Text Available A total of 30 strains of Fusobacterium sp. isolated from gengival sulcus of 28 equines was studied in the period between January/1997 and April/1998. Bacterial isolation and antimicrobial resistance were determined by biochemical analyses and by the disk elution method. The species most frequently isolated was Fusobacterium nucleatum. The following resistance rates were observed: 10% for penicillin G, 87% for eritromycin, and 97% for sulfonamide. Theses results emphasize the need for monitoring the susceptibility patterns of this important bacterial group frequently isolated from normal sites in equines.

  1. Isolamento ed analisi di molecole bioattive da estratti di Pistacia Terebinthus L. vegetante in Sardegna

    OpenAIRE

    Usai, Marianna; Foddai, Marzia; Secci, Roberto; Delogu, Francesco; Azara, Emanuela

    2004-01-01

    Il genere Pistacia (Anacardiacee) include P. Terebinthus, piccolo albero a foglie decidue presente in Sardegna solo in una ristretta area calcarea della costa est, Cala Gonone (NU). Le specie del genere Pistacia hanno un largo uso in etnobotanica; venivano usati come antiinfiammatori, antibatterici, nel trattamento dell’eczema. Questo ci ha portato a pensare, anche in base alla letteratura presente, che nelle piante appartenenti a questo genere ci siano delle molecole particola...

  2. Isolation of Enterobacter cowanii in tomatoes after gamma irradiation; Isolamento de Enterobacter cowanii em tomates apos irradiacao gama

    Energy Technology Data Exchange (ETDEWEB)

    Vicalvi, M.C.V.; Solidonio, E.G.; Silva, M.A.; Colaco, W., E-mail: claudiavicalvi@hotmail.com [Universidade Federal de Pernambuco (UFPE), Recife, PE (Brazil). Programa de Pos Graduacao em Tecnologias Energeticas e Nucleares; Silva, G.R. da; Sena, K.X.F.R de [Universidade Federal de Pernambuco (UFPE), Recife, PE (Brazil). Lab. de Antibioticos

    2013-08-15

    The tomato is one of the most consumed fruit in the world. Bacteria of the family Enterobacteriaceae are responsible for large outbreaks of gastroenteritis. Irradiation is a physical method which reduces waste by eliminating spoilage organisms in foods. The objective of this study was to identify and determine the resistance profile of micro-organisms of the family Enterobacteriaceae from irradiated tomatoes. Were used three batches each containing 80 tomatoes, and divided in control and irradiated. The samples were individually properly identified as the irradiation dose applied. The material was subjected to irradiation with gamma rays, for irradiating with a cobalt-60 source, using doses: 1.0, 1.5 and 2 kGy (6,060 kGy/h). For microbiological analysis tomatoes were cut out, and removing the shells to obtain samples weighing 25g. Each sample was transferred to an Erlenmeyer containing sterilized water, stirring the assembly mechanically. Aliquots of the wash waters were sown in differential and selective media. After reisolation, the colonies were subjected to Gram staining then performed biochemical tests for identification. The antibiotic susceptibility tests were performed according to CLSI (Clinical Laboratory Standard Institute). It was isolated three strains of Enterobacter cowanii in tomato samples irradiated with a dose of 1.0 kGy, without isolating the other doses. As for the resistance profile, the strains were resistant to Ampicillin identified. Gamma irradiation at a dose of 1.5 and 2 kGy was effective in tomatoes as well as the micro-organism isolated after irradiation showed no profile of multidrug resistance. (author)

  3. ISOLAMENTO TÉRMICO DE RESIDÊNCIAS ATRAVÉS DA REUTILIZAÇÃO DE EMBALAGENS TETRA PAK

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Jaquiel Salvi Fernandes

    2014-09-01

    Full Text Available A reciclagem está presente na atualidade, não apenas pelo aspecto econômico, mas também pela questão ambiental. Não faz sentido jogar junto com o lixo orgânico materiais que possam ser reaproveitados ou transformados. Neste contexto também se encontram as embalagens de leite e/ou suco longa vida (Tetra Pak®, amplamente utilizadas pela população. Tais embalagens têm baixo valor comercial, e sua reciclagem é difícil e de custo muito elevado. Este trabalho de extensão universitária reutilizou estas embalagens, montando painéis com as dimensões do forro de residências selecionadas na cidade de Videira-SC, com o intuito de isolá-las termicamente. As caixinhas Tetra Pak possuem uma face aluminizada, a qual impede que o calor seja transmitido para o interior (ou exterior no caso do inverno da residência pelo processo de radiação, refletindo mais de 95% do calor. Com esta característica a caixa de leite se mostra perfeita para exercer a função de manta térmica, como uma alternativa às mantas convencionais, com a vantagem de ser uma solução ecológica e barata. Após a instalação, as casas que antes não possuíam forro passaram a registrar temperaturas internas menores no verão e maiores no inverno, além da prevenção contra goteiras e respingos. As famílias atendidas expressaram unanimidade de opinião, mostrando-se muito satisfeitas com o ambiente após a instalação, relatando o aumento da temperatura em dias mais frios e sua diminuição em dias mais quentes. Palavras-chave: painéis térmicos, reutilização, embalagens longa vida, extensão universitária. Thermal isolation of residences through reuse of Tetra Pak packaging Abstract: Nowadays recycling is present not only in economic but also in environmental issues. It makes no sense mixing together with organic waste the materials that can be reused or processed. Milk and long life juice cartons (Tetra Pak®, widely used by the population, are also included in this context. Such packages have low commercial value, and recycling is difficult and very costly. This work of university extension reused these packaging, mounting panels with the dimensions of the lining of selected residences in the city of Videira, Santa Catarina State, Brazil, in order to thermally isolate them. The Tetra Pak packagings have an aluminized face, which prevents heat transmission to the inside of the house by radiation process, reflecting more than 95% of the heat. With this characteristic, milk carton is the ideal material to act as a thermal mantle, as an alternative to conventional coverings, with the advantage of being an ecologically oriented and inexpensive solution. After installation, the houses that previously had no lining started registering lower internal temperature in the summer and higher in the winter, besides prevention against leaking and dripping. The assisted families expressed unanimous opinions, showing satisfaction with the environment after installation, reporting the temperature rise on colder days and a decrease in warmer weather. Keywords: thermal panels, reuse, long life packaging, university extension. Aislamiento térmico de residencias a través de la reutilización de los envases Tetra Pak Resumen: El reciclaje está presente hoy, no apenas en el aspecto económico, sino también en relación  al ecológico. No tiene sentido descartar en la basura orgánica materiales que puedan ser reaprovechados o transformados.  Dentro de este contexto, también se encuentran los envases de leche y/o jugo de larga vida (Tetra Pak® ampliamente utilizados por la población. Tales envases tienen bajo valor comercial y su reciclaje es difícil y de costo muy elevado. Este trabajo de extensión universitaria reutilizó estos envases, montando paneles que fueron dimensionados al tamaño del forro interno de residencias seleccionadas en la ciudad de Videira-SC, con el objetivo de aislarla térmicamente. Las cajas Tetra Pak® tienen un lado de aluminio, el cual impide que el calor sea transmitido para el interior (o exterior,

  4. Isolamento do vírus rábico de morcego insetívoro Myotis nigricans

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Luzia F. A. Martorelli

    1995-04-01

    Full Text Available Relata-se um caso de infecção natural de raiva em morcego insetívoro Myotis nigricans, no Município de Ribeirão Pires, Grande São Paulo (Brasil. O diagnóstico realizou-se através das técnicas de imunofluorescência e inoculação intracerebral em camundongos, do tecido nervoso e da musculatura da região interescapular do morcego.

  5. Isolamento do vírus rábico de morcego insetívoro Myotis nigricans

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Martorelli Luzia F. A.

    1995-01-01

    Full Text Available Relata-se um caso de infecção natural de raiva em morcego insetívoro Myotis nigricans, no Município de Ribeirão Pires, Grande São Paulo (Brasil. O diagnóstico realizou-se através das técnicas de imunofluorescência e inoculação intracerebral em camundongos, do tecido nervoso e da musculatura da região interescapular do morcego.

  6. The unequal influences of the left and right vagi on the control of the heart and pulmonary artery in the rattlesnake, Crotalus durissus

    DEFF Research Database (Denmark)

    Taylor, E.W.; Andrade, Denis V.; Abe, Augusto A.

    2009-01-01

    Autonomic control of the cardiovascular system in reptiles includes sympathetic components but heart rate (fH), pulmonary blood flow ( pul) and cardiac shunt patterns are primarily controlled by the parasympathetic nervous system. The vagus innervates both the heart and a sphincter on the pulmonary...

  7. Anatomia descritiva e comparativa do sistema urinário de Crotalus durissus Linnaeus, 1758, Bothrops neuwiedi Wagler, 1824 e B. moojeni Hoge, 1965 (Ophidia, Viperidae)

    OpenAIRE

    Silva, Luisa Helena Rocha da

    2008-01-01

    As serpentes desenvolveram uma imensa variedade de especializações quanto ao uso do habitat e nicho ocupados ao longo de sua evolução. As diferenças mais notáveis estão na forma, no tamanho do corpo e na textura superficial, o que reflete na diversidade de comportamentos e adaptações ecológicas e fisiológicas. Apesar do número de espécies e por isso mesmo, das diversas possibilidades de estudos que poderiam ser realizados, poucos são os trabalhos abordando a anatomia e fisiologia das serpente...

  8. Aspectos clínico-patológicos e laboratoriais do envenenamento crotálico experimental em equinos

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Cinthia Távora A. Lopes

    2012-09-01

    Full Text Available Descrevem-se os quadros clínico-patológicos e laboratoriais de equinos inoculados experimentalmente com a peçonha de Caudisona durissa terrificus (Crotalus durissus terrificus na antiga nomenclatura, com a finalidade de fornecer subsídios que favoreçam a compreensão desse tipo de acidente ofídico em equinos. O veneno liofilizado foi diluído em 1ml de solução salina a 0,9% e inoculado por via subcutânea em cinco equinos, nas doses de 0,12mg/kg (um animal, 0,066mg/kg (dois animais e 0,03mg/kg (dois animais. O veneno causou a morte do equino que recebeu a dose de 0,12mg/kg e de um dos dois que receberam a dose de 0,066mg/kg, com evolução de 27h27min e 52h29min, respectivamente. O segundo animal que recebeu a dose de 0,066mg/kg também adoeceu, mas recuperou-se após 12 dias da inoculação. A dose de 0,03mg/kg determinou quadros não fatais do envenenamento, com período de evolução que variou entre 6 e 10 dias. O quadro clínico caracterizou-se por considerável aumento de volume no local de inoculação (escápula que se estendeu por todo o membro, apatia e cabeça baixa, alterações locomotoras evidenciadas pelo arrastar das pinças no solo, decúbito e dificuldade para levantar, redução dos reflexos auricular, palatal, do lábio superior e de ameaça, e aumento das frequências cardíaca e respiratória. Os exames laboratoriais revelaram leucocitose por neutrofilia e linfocitose em apenas dois animais. Houve aumento das enzimas creatina quinase (CK, dehidrogenase láctica (DHL e da ureia, e também redução nos níveis séricos de cálcio, fósforo e magnésio. O tempo de tromboplastina parcial ativada (TTPA aumentou nos equinos que morreram. Os achados de necropsia foram edema do tecido subcutâneo em todo o membro em que foi aplicado o veneno, sufusões no epicárdio dos ventrículos cardíacos esquerdo e direito, e bexiga com áreas hemorrágicas em grande parte da mucosa. Ao exame histopatológico observaram-se f

  9. Use of I-131- CRTX for targeting malignant adenocarcinoma in mice: biodistribution and radiation dosimetry

    Energy Technology Data Exchange (ETDEWEB)

    Santos, Raquel Gouvea dos; Soares, Marcella Araugio; Andrade, Henrique Martins de, E-mail: santosr@cdtn.br [Centro de Desenvolvimento da Tecnologia Nuclear (CDTN/CNEN-MG), Belo Horizonte, MG (Brazil); Santos, Marcos Antonio da Cunha [Universidade Federal de Minas Gerais (UFMG), Belo Horizonte, MG (Brazil). Departamento de Estatistica

    2008-07-01

    Snake venoms molecules have been shown to play a role not only in the survival and proliferation of tumour cells but also in the processes of tumour cell adhesion, migration and angiogenesis. We have shown that {sup 125}I-Crtx, a radiolabeled version of a protein derived from Crotalus durissus terrificus snake venom (Cdt), specifically binds to tumor and triggers apoptotic death. This study reports the biokinetic profile of {sup 99m}Tc-Cdt and {sup 125/131}I-Crtx in Swiss mice bearing Ehrlich solid tumor and MIRD formulation was applied to calculate the absorbed radiation doses for various organs and tumor site. Biokinetic evaluations were performed up to 24 h after intravenous (i.v) or intratumor (i.tu.) injection of {sup 99m}Tc-Cdt or {sup 125/131}I-Crtx. Time-activity curves were generated for the main organs by fitting the organ specific mass mean counts. The radiation dose from {sup 131}I-Crtx was calculated based on non penetrating radiation in the mouse model. Biokinetics data from {sup 99m}Tc-Cdt after i.v. injection in mice tumor model showed rapid blood clearance (T{sub 1/2}= 36.1 ± 2.4 min.), slow tumor clearance (T{sub 1/2}: 108.3 ± 19.5 min.) and indicated the kidneys as the main excretion pathway. Interaction studies in vitro demonstrated that {sup 125}I-Crtx recognize specific sites on Erlich tumor cell membrane. Upon intravenous and intratumor administration of {sup 131}I-Crtx in mice bearing Erlich tumor, it was observed high uptake in tumor site in vivo (Ã =72kBq x h/g) resulting in a high absorbed dose radiation to tumor site. Distributions of {sup 125/131}I-Crtx i.v. were only significant in tumor, stomach, liver and kidneys, reflecting non-specific uptake of Crtx in normal excretion tissues in vivo. Intratumoral administration reduced significantly the radiation dose to the kidneys (42-fold lower) and increased the uptake by the tumor site (128- fold higher). {sup 131}I control was run in a parallel experiment and showed no significant tumor

  10. Obtainment of crotoxin/phema-g-LDPE and crotoxin/PCL systems;Obtencao dos sistemas bioconjugados crotoxina/PEBD-g-phema e crotoxina/PCL

    Energy Technology Data Exchange (ETDEWEB)

    Lorenzetti, Solange Gubbelini

    2006-07-01

    The aim of the work was the obtainment of polymeric matrices immobilized with crotoxin purified from crude venom of rattle snake. A matrix was processed by gamma irradiation by the grafting of a hydrogel onto a polymeric film which resulted in a copolymer for the chemical immobilization of crotoxin. The second matrix was attained by the entrapment of crotoxin in microspheres of epsilon-polycaprolactone. After the purification, the crotoxin proceeding from the snake Crotalus durissus terrificus was evaluated biochemical and biologically. The lethal dose (LD50%) of the toxin was 0.09/kg animal. The test of cytotoxicity not revealed any significant difference between the tumoral cells and the respective normal control cells in culture. Grafting copolymers were used as scaffold for the chemical immobilization of the purified crotoxin. For this purpose the low density polyethylene (LDPE) and the hydrophilic monomer 2-hydroxy-ethyl-methacrylate (HEMA) were copolymerized in a {sup 60}Co source. The copolymers (LDPE-g-PHEMA) showed grafting levels in the range of 2 and 50 %. In the infrared spectroscopy analysis (FTIR-ATR) it was observed in the copolymer, carbonyl groups (C=O) and hydroxyl groups -OH due to the grafting of PHEMA. The MEV micrographs showed a smooth surface for the virgin LDPE and a rough surface for the LDPE-g-PHEMA, owing to the presence of grafted PHEMA. The hydrophilicity was observed by the determination of water content in the copolymer after immersion in water. By the diffusion coefficient it was noted that from 30 % grafting degree, the copolymers become less hydrophilic due to the crosslinking increase among the chains in PHEMA. The biocompatibility of the LDPE-g-PHEMA was proved by the cytotoxicity test. At the end, the immobilized copolymer, the entrapped crotoxin and the free crotoxin was tested 'in vivo'. During 20 days, C3H strain mice were observed in their weight, behavior and motor changes. The results demonstrated that the group

  11. Biochemical and pharmacological studies of native and irradiated crotamine with gamma radiation of {sup 60}Co; Estudo bioquimico e farmacologico das crotaminas nativa e irradiada com radiacao gama de {sup 60}Co

    Energy Technology Data Exchange (ETDEWEB)

    Mitake, Malvina Boni

    2000-07-01

    Ionizing radiation can change the molecular structure and affect the biological properties of biomolecules. This has been employed to attenuate animal toxins. Crotamine is a strongly basic polypeptide from the South American rattlesnake venom, composed of 42 amino acid residues. It induces skeletal muscle spasms leading to a spastic paralysis of hind limbs in mice. The objective of this thesis was carry out biochemical and pharmacological studies of native and irradiated crotamine with {sup 60} Co. Crotamine was purified from Crotalus durissus terrificus venom by Sephadex G-100 gel filtration followed by ion exchange chromatography, using a Fast Performance Liquid Chromatography (FPLC) system. It was irradiated at 2 mg/ml in 0.15 M Na Cl with 2.0 kGy gamma radiation emitted by a {sup 60} Co source. The native and irradiated crotamine were evaluated by biochemical characterization, toxic activity (LD{sub 50} and biodistribution. The native and irradiated crotamine were labelled with 29.6 MBq of {sup 125} I using chloramine T method, and separated in a Sephadex G-50 column. Male Swiss mice (35{+-} 5 g), were injected i.p. with o.1 mL (2.4 x 10{sup 6} cpm/mouse) of {sup 125} I native crotamine or with 0.4 mL (1.3 x 10{sup 6} cpm/mouse) of {sup 125} I irradiated crotamine. At 0.08; 0.25; 0.5; 1; 2; 4; 8; 12 and 24 hours the animal were killed by ether inhalation. Blood, spleen, liver, kidneys, brain, lungs, heart, and skeletal muscle were collected in order to determine radioactivity content. The results showed that gamma radiation did not change the protein concentration, the electroforetic profile or the primary structure of the protein, although differences were shown by spectroscopic techniques. The gamma radiation diminished the toxicity of crotamine, but it did not abolish bioactivity. Biodistribution studies showed that native and irradiated crotamine have hepatic metabolism and renal elimination. The native and irradiated crotamine have affinity by skeletal

  12. Involvement of formyl peptide receptors in the stimulatory effect of crotoxin on macrophages co-cultivated with tumour cells.

    Science.gov (United States)

    Costa, E S; Faiad, O J; Landgraf, R G; Ferreira, A K; Brigatte, P; Curi, R; Cury, Y; Sampaio, S C

    2013-11-01

    Crotoxin (CTX) is the main neurotoxic component of Crotalus durissus terrificus snake venom. It inhibits tumour growth and modulates the function of macrophages, which are essential cells in the tumour microenvironment. The present study investigated the effect of CTX on the secretory activity of monocultured macrophages and macrophages co-cultivated with LLC-WRC 256 cells. The effect of the macrophage secretory activities on tumour cell proliferation was also evaluated. Macrophages pre-treated with CTX (0.3 μg/mL) for 2 h were co-cultivated with LLC-WRC 256 cells, and the secretory activity of the macrophages was determined after 12, 24 and 48 h. The co-cultivation of CTX-treated macrophages with the tumour cells caused a 20% reduction in tumour cell proliferation. The production of both H2O2 and NO was increased by 41% and 29% after 24 or 48 h of co-cultivation, respectively, compared to the values for the co-cultures of macrophages of control. The level of secreted IL-1β increased by 3.7- and 3.2-fold after 12 h and 24 h of co-cultivation, respectively. Moreover, an increased level of LXA4 (25%) was observed after 24 h of co-cultivation, and a 2.3- and 2.1-fold increased level of 15-epi-LXA4 was observed after 24 h and 48 h, respectively. Boc-2, a selective antagonist of formyl peptide receptors, blocked both the stimulatory effect of CTX on the macrophage secretory activity and the inhibitory effect of these cells on tumour cell proliferation. Taken together, these results indicate that CTX enhanced the secretory activity of macrophages, which may contribute to the antitumour activity of these cells, and that activation of formyl peptide receptors appears to play a major role in this effect.

  13. Isolation and identification of yeasts and filamentous fungi from yoghurts in Brazil Isolamento e identificação de leveduras e fungos filamentosos em iogurtes

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Silvia Regina Moreira

    2001-06-01

    Full Text Available Seventy-two cartons of yoghurt were sampled three times at monthly intervals from four different local manufacturers. Total counts were close to 6 x 10(7 cells g-1 of yoghurt. Yeast counts varied from 1 to 2,700 g-1. There was no evidence of systematic contamination at source but this longitudinal study revealed that ad hoc contamination and improper storage led to the higher yeast counts. Contamination was generally higher in the hotter months but was lower overall than reported from other countries. A total of 577 yeast isolates were identified belonging to ten species. The most abundant yeasts were, in order, Debaryomyces hansenii, Saccharomyces cerevisiae, Mrakia frigida, Hansenula spp., Candida parapsilosis, Debaryomyces castellii and Candida maltosa. The psychrophilic yeast Mrakia frigida is reported for the first time in yoghurts. Low level contamination with Monilia and Penicillium species was found in a few samples. Growth tests suggested that ability to ferment sucrose, growth at 5° C and in the presence of 300 µg g-1 sorbate preservative, were the three most significant physiological properties to account for these yeasts in yoghurts. The data also suggest that warmer weather and inadequate refrigeration are the principal causes of higher levels of contamination, increased diversity and change in microbial flora.Setenta e duas embalagens de iogurtes de quatro indústrias diferentes foram analisadas durante três épocas diferentes com intervalo mensal. A população microbiana total encontrada foi em torno de 6 x 10(7 células g-1 de iogurte. A contagem de leveduras variou entre 1 a 2.700 células g-1. Não foi possível observar uma sistemática contaminação, mas este estudo longitudinal revelou que contaminação ad hoc e armazenamento impróprio pode levar a elevadas populações de leveduras. De modo geral foi detectada uma contaminação maior nos meses mais quentes do ano mas em valores inferiores aos encontrados em outros países. Um total de 577 isolados de leveduras foram identificados como pertencentes a 10 espécies. As leveduras mais abundantes foram, em ordem, Debaryomyces hansenii, Saccharomyces cerevisiae, Mrakia frigida, Hansenula spp., Candida parapsilosis, Debaryomyces castellii e Candida maltosa. A levedura psicrófila, Mrakia frigida foi pela primeira vez mencionada como isolada a partir de iogurtes. Foi encontrada em algumas amostras uma pequena contaminação por espécies de Monilia e Penicillium. Os testes utilizados para crescimento sugeriram que habilidade para fermentar sacarose, crescimento a 5ºC e na presença de 300 µg g-1 de sorbato foram as três propriedades fisiológicas mais importantes para a presença destas leveduras em iogurtes. Os dados também sugerem que clima mais quente e refrigeração inadequada são as principais causas de alta nível de contaminação, aumento da diversidade e mudança na microbiota presente.

  14. Isolamento e caracterização do vírus da influenza pandêmico H1N1 em suínos no Brasil

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Rejane Schaefer

    2011-09-01

    Full Text Available A infecção causada pelo vírus Influenza A (IAV é endêmica em suínos no mundo inteiro. O surgimento da pandemia de influenza humana pelo vírus A/H1N1 (pH1N1 em 2009 levantou dúvidas sobre a ocorrência deste vírus em suínos no Brasil. Durante o desenvolvimento de um projeto de pesquisa do vírus de influenza suína em 2009-2010, na Embrapa Suínos e Aves (CNPSA, foi detectado em um rebanho de suínos em Santa Catarina, Brasil, um surto de influenza altamente transmissível causado pelo subtipo viral H1N1. Este vírus causou uma doença leve em suínos em crescimento e em fêmeas adultas, sem mortalidade. Tres leitões clinicamente afetados foram eutanasiados. As lesões macroscópicas incluiam consolidação leve a moderada das áreas cranioventrais do pulmão. Microscopicamente, as lesões foram caracterizadas por bronquiolite necrosante obliterativa e pneumonia broncointersticial. A imunohistoquímica, utilizando um anticorpo monoclonal contra a nucleoproteína do vírus influenza A, revelou marcação positiva no núcleo das células epiteliais bronquiolares. O tecido pulmonar de três leitões e os suabes nasais de cinco fêmeas e quatro leitões foram positivos para influenza A pela RT-PCR. O vírus influenza foi isolado de um pulmão, mais tarde sendo confirmado pelo teste de hemaglutinação (título HA 1:128 e por RT-PCR. A análise das seqüências de nucleotídeos dos genes da hemaglutinina (HA e proteína da matriz (M revelou que o vírus isolado foi consistente com o vírus pandêmico A/H1N1/2009 que circulou em humanos no mesmo período. Este é o primeiro relato de um surto de influenza causado pelo vírus pandêmico A/H1N1 em suínos no Brasil.

  15. Isolamento de cepas de Mycobacterium avium em búfalos abatidos para consumo Mycobacterium avium complex in water buffaloes slaughtered for consumption

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    José de Arimatéa Freitas

    2001-06-01

    Full Text Available Duas cepas micobacterianas, isoladas no parênquima pulmonar e linfonodo apical de búfalos abatidos para consumo, procedentes de criatórios localizados na Ilha de Marajó (PA e submetidas à identificação segundo ensaios recomendados para o gênero Mycobacterium, foram identificadas como pertencentes ao complexo Mycobacterium avium. Apresentaram-se considerações relativas à associação desses organismos com a Aids -- e o papel dos alimentos nessa associação --, discutindo-se o impacto que a condição de germes oportunistas das espécies desse complexo têm na pandemia do HIV, assim como o risco potencial representado pelas infecções produzidas nos animais.Two mycobacterium strains isolated from lung tissue and apical lymph nodes of slaughtered water buffaloes were biochemically analyzed and identified as Mycobacterium avium complex strains. Association between these microorganisms and the acquired immunodeficiency syndrome, and the potential risk posed by eating infected animals and their products, was discussed.

  16. Isolamento, fracionamento e atividade anticoagulante de iota-carragenanas da Solieria filiformis Isolation, fractionation and anticoagulant activity of iota-carrageenans from Solieria filiformis

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    José Ariévilo Gurgel Rodrigues

    2010-11-01

    Full Text Available Este estudo teve como objetivo isolar, fracionar e avaliar o potencial anticoagulante de iota-carragenanas (i-CARs da rodofícea Solieria filiformis, quando obtidas por dois métodos de extração (M I e M II. As i-CARs foram isoladas com papaína bruta em tampão acetato de sódio 0,1M (pH 5,0, contendo cisteína 5mM e EDTA 5mM (M I ou água (80°C (M II e, em seguida, determinada sua composição química de carboidratos totais, sulfato livre (SL e proteínas contaminantes. As i-CARs foram submetidas à cromatografia de troca iônica (DEAE-celulose usando um gradiente de cloreto de sódio, sendo avaliado o tempo de tromboplastina parcial ativada (TTPA e tempo de protrombina das frações obtidas e comparadas à heparina (193UI mg-1. Uma fração anticoagulante também foi submetida ao procedimento de eletroforese em gel de agarose a 0,5%. A diferença no rendimento de i-CARs entre os métodos foi 10,14%. A composição química de SL (29,40% e o fracionamento, por DEAE-celulose, indicaram o M I mais eficiente na obtenção de i-CARs, comparado ao M II. O TTPA também foi somente alterado para as i-CARs do M I. Contudo, a atividade anticoagulante in vitro de uma fração rica (8,52UI mg-1 foi inferior à da heparina.This study aimed to isolate, fractionate and evaluate the anticoagulant potential of iota-carrageenans (i-CARs from Solieria filiformis when two extraction methods (M I and M II were used. i-CARs were isolated with papain in 0.1M sodium acetate (pH 5.0 containing 5mM cystein and 5mM EDTA (M I or water (80°C (M II, and then their chemical composition of total carbohydrates, free sulfate (FS and contaminant proteins were determined. i-CARs were submitted to anion-exchange chromatography (DEAE-cellulose using a sodium chloride gradient,being evaluated the activated partial thromboplastin time (APTT and prothrombin time of obtained fractions and compared to heparin (193IU mg-1. A rich fraction of anticoagulant was also submitted to 0.5% agarose gel electrophoresis procedure. The difference of yield between methods was 10.14%. The chemical composition of FS (29.40% and the fractionation by DEAE-cellulose showed M I more effectiveness in the obtaining of i-CARs compared to M II. The APTT was also modified for i-CARs from M I. However, the in vitro anticoagulant activity of a rich fraction (8.52IU mg-1 was inferior to heparin.

  17. Avaliação de atividade fungitóxica e isolamento de aloaromadendrano - 4α, 10 β - diol em Hypericum cordatum

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    N. Scalco

    2014-01-01

    Full Text Available Hypericum cordatum é uma espécie do cerrado que foi selecionada em triagem de plantas com atividade fungitóxica. O objetivo do presente trabalho foi isolar e identificar compostos com atividade antifúngica em extratos de folhas em diclorometano. O pó das folhas das plantas foi submetido à extração exaustiva com éter de petróleo e diclorometano. O extrato em diclorometano, e as frações ativas, foram submetidos à fracionamentos biomonitorados em coluna de Sephadex LH-20, respectivamente, com os eluentes clorofórmio:metanol (1:1 e com um gradiente de hexano:diclorometano (1:4; diclorometano:acetona (3:2 e 1:4, metanol, e água. As frações que mostraram atividade foram submetidas à cromatografia em camada delgada preparativa de sílica gel GF254, sendo que o material de maior massa foi analisado em CLAE semipreparativa. A fração ativa foi analisada por RMN de ¹H, tendo sido identificado o aloaromadendrano - 4α -10β - diol como componente principal da fração. Conclui-se, portanto, que este é um dos compostos responsáveis pela atividade fungitóxica de Hypericum cordatum.

  18. Isolation and evaluation of cytotoxic potential of phenolic derivatives from Schinus terebinthifolius Raddi (Anacardiaceae); Isolamento e avaliacao do potencial citotoxico de derivados fenolicos de Schinus terebinthifolius Raddi (Anacardiaceae)

    Energy Technology Data Exchange (ETDEWEB)

    Santana, Jeferson S.; Sartorelli, Patricia; Lago, Joao Henrique G. [Universidade Federal de Sao Paulo (UNIFESP), Diadema, SP (Brazil). Inst. de Ciencias Ambientais, Quimicas e Farmaceuticas; Matsuo, Alisson L., E-mail: joao.lago@unifesp.br [Universidade Federal de Sao Paulo (UNIFESP), Sao Paulo, SP (Brazil). Dept. de Micro, Imuno e Parasitologia

    2012-07-01

    The EtOH extract from leaves of S. terebinthifolius was subjected to partition between EtOH:H{sub 2}O and hexane, CH{sub 2}Cl{sub 2}, and EtOAc. The phases obtained were evaluated in vitro against human tumoral cell lines and the EtOAc phase exhibited activity. Chromatographic procedures afforded gallic acid (1), methyl (2) and ethyl (3) gallates, trans-catechin (4), quercitrin (5), and afzelin (6), being the first occurrence of 1, 4 and 6 in S. terebinthifolius. In vitro cytotoxic evaluation of 1 - 6 indicated that gallic acid (1) displayed higher activity than ethyl gallate (3) against HL-60 and HeLa cells, while compounds 2, 4 - 6 were inactive. (author)

  19. Comparação dos caldos selenito cistina, tetrationato Muller-Kauffmann e Rappaport-Vassiliadis no isolamento de Salmonella Typhimurium

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    L.G. Ávila

    2012-06-01

    Full Text Available Three selective enrichment broths - selenite cystine (SC, Muller-Kauffmann tetrathionate (MKT and Rappaport-Vassiliadis (RV - were compared, for Salmonella Typhimurium isolation from rectal swabs of a calf experimentally infected. The bacteriological procedure involved pre-enrichment in Hajna-GN broth (only for the samples inoculated in RV broth, selective enrichment (SC, MKT and RV broths, culture in modified brilliant green agar (BGA, presumptive biochemistry tests (using triple-sugar-iron agar and lysine-agar and slide agglutination test with poli-O and poli-H Salmonella antisera. SC and MKT broths were more efficient in the isolation of Salmonella Typhimurium (12 positive samples, whereas RV broth had a lower efficiency in the microbiological isolation (ten positive samples.

  20. Avaliação de diferentes meios de enriquecimento para o isolamento de Salmonella, ocorentes em água de esgoto

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Ernesto Hofer

    1972-01-01

    Full Text Available Examinando-se 158 amostras de águas cloacais, provenientes de uma estação de tratamento e de uma elevatória de esgotos, localizadas na cidade do Rio de Janeiro, fêz-se uma avaliação da eficiência de quatro meios de enriquecimento para Salmonella. Os meios empregados foram o caldo tetrationato, segundo Kauffmann, o meio de Rappaport e duas modificações deste meio, previamente descritas. Os resultados encontrados, evidenciaram a superioridade de um dos meios modificados da Rappaport, em que se fez a substituição do verde malaquiata por outro corante bacteriostático (Metachromgelb II RD e com a inclusão de tetrationato, à fórmula original. A maior eficiência assinalada para este meio se baseou nos resultados obtidos do enriquecimento dos diferentes grupos sorológicos e particularmente dos quinze sorotipos mais incidentes de Salmonella enteritidis, na presente investigação.Four enrichment broths (Kauffmann's tetrathionate broth Rappaport's medium an two modifications introduced in original formula of Rappaport broth's previously described, were compared for efficiency of detection of Salmonella from 158 sewage samples, obtained from two treatment sewage stations. In comparative trials, the modified Rappaport medium with tetrathionate and metachromgelb II RD, was highly effective for the recovery of a wide range of Salmonella enteritidis serotypes.

  1. ESTREPTOCOCOS DO GRUPO MUTANS: ISOLAMENTO, IDENTIFICAÇÃO E PREVALÊNCIA DAS ESPÉCIES NA SALIVADE PARES MÃE/FILHO

    OpenAIRE

    Azevedo,Rosa Vitória Palamin; Nelson Filho, Paulo; Assed,Sada; Ito, Izabel Yoko

    1998-01-01

    Amostras de saliva não estimulada de 50 crianças e de suas mães foram analisadas, objetivando-se determinar a prevalência das espécies do grupo mutans. Alíquotas de saliva, pura e após diluição decimal seriada, foram semeadas no meio SB20 modificado, com bastão angulado em L, e incubadas em microaerofilia durante 72 horas a 37ºC. Após a contagem do número de ufc do grupo mutans, colônias características foram transferidas para o meio tioglicolato, incubado a 37ºC - 24 horas, e submetidas à id...

  2. Isolamento de Candida parapsilosis em paciente com diagnóstico clínico de candidíase atrófica crônica

    OpenAIRE

    Moreira, Ana Cristina Azevedo; Falcão, Antônio Fernando P.; Andrade, Ana Paula [UNESP; SOUZA, ELISABETE RIBEIRO DE

    2002-01-01

    p.124-128 Espécies do gênero Candida fazem parte da microbiota indígena bucal. Podem causar diferentes tipos de candidoses, quando fatores locais ou sistêmicos interrompem o equilíbrio ecológico, tornando o fungo um patógeno oportunista. A candidíase atrófica crônica ou estomatite por dentadura é freqüente em nosso meio, sendo o principal agente etiológico a Candida albicans. Outras espécies como a Candida parapsilosis, C. tropicalis e C. stellatoidea também podem ser iso...

  3. ISOLAMENTO DE CANDIDA PARAPSILOSIS EM PACIENTE COM DIAGNÓSTICO CLÍNICO DE CANDIDÍASE ATRÓFICA CRÔNICA

    OpenAIRE

    Moreira, Ana Cristina Azevedo; Falcão, Antônio Fernando P.; Andrade, Ana Paula [UNESP; SOUZA, ELISABETE RIBEIRO DE

    2002-01-01

    p. 124 - 128 Espécies do gênero Candida fazem parte da microbiota indígena bucal. Podem causar diferentes tipos de candidoses, quando fatores locais ou sistêmicos interrompem o equilíbrio ecológico, tornando o fungo um patógeno oportunista. A candidíase atrófica crônica ou estomatite por dentadura é freqüente em nosso meio, sendo o principal agente etiológico a Candida albicans. Outras espécies como a Candida parapsilosis, C. tropicalis e C. stellatoidea também podem ser isoladas da infecç...

  4. Isolamento de vírus de copos de bares e cafés da cidade de São Paulo

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    José Alberto N. Candeias

    1968-12-01

    Full Text Available De 8,75% dos 80 lotes de copos, prontos para uso, de 40 «bares e cafés» do centro da cidade de São Paulo, foram isoladas 7 cêpas de vírus, sendo três de adenovírus do tipo 3, duas de vírus ECHO 11, urna de adenovírus do tipo 4 e uma de vírus do herpes simples. Cada lote era constituído de 5 copos. Os 7 lotes positivos provinham de 7 «bares e cafés» diferentes. Estes achados comprovam a má situação sanitária dos utensílios de uso comum nos estabelecimentos públicos de distribuição de alimentos e bebidas da cidade de São Paulo, já evidenciada através de investigações bacteriológicas anteriores, e resultam da falta total de aplicação das medidas de saneamento de tal material, nesses locais. As condições existentes são conseqüência das disposições inoperantes e até impraticáveis da atual legislação sanitária estadual concernente à matéria.Seven strains of viruses were isolated from 8.75% of the 80 lots of drinking glasses, ready for use, in 40 coffee shops and bars in the business district of São Paulo. Three strains were identified as adenovirus type 3, two as echo type 11, one as adenovirus type 4 and one as herpesvirus. Each lot consisted of 5 drinking glasses. The positive lots belonged to 7 different coffee shops and bars. These findings confirm the poor sanitary conditions already observed of the common use utensils in the eating and drinking places of the city of São Paulo. These conditions are the result of the total lack of adoption of sanitation measures regarding such material. The existing conditions are the consequence of the inefficient and even infeasible regulations of the present sanitary laws of the State, concerning the matter.

  5. Isolation, properties and kinetics of growth of a thermophilic Bacillus Isolamento, propriedades e cinética de crescimento de um Bacillus termofílico

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Adriane Nunes de Souza

    2001-12-01

    Full Text Available A strictly aerobic, thermophilic, spore-forming bacteria was isolated from a soil sample collected in Campos dos Goytacazes City, Rio de Janeiro, Brazil. The cells of this organism were Gram-positive, catalase positive, actively motile, 1.2 µm wide and 5.3 µm long. Growth occurred at pH values ranging from 6.5 to 9.0, and optimum growth occurred at about pH 7.0. The optimum temperature for growth was around 55ºC, and the upper temperature limit for growth was around 70ºC. Yeast extract stimulated growth on glucose and was obligately required at supraoptimal temperatures (65ºC. The results of 16S rRNA sequence comparisons indicated that the isolate was closely related to Bacillus caldoxylolyticus and Bacillus sp strain AK1, and these three organisms exhibited levels of ribossomal DNA sequence homology of 94%.Uma bactéria formadora de esporos, termofílica e aeróbica estrita foi isolada de amostras de solo coletadas na cidade de Campos dos Goytacazes, Rio de Janeiro, Brasil. As células deste organismo foram Gram-positivas, móveis e mediram 1,2 µm de largura e 5,3 µm de comprimento. O crescimento ocorreu a valores de pH variando de 6,5 a 9,0 e o crescimento ótimo ocorreu em torno de pH 7,0. A temperatura ótima de crescimento foi em torno de 55ºC e a máxima de 70ºC. O extrato de levedura estimulou o crescimento do organismo em glicose e foi obrigatoriamente requerido a supra-ótimas temperaturas (65ºC. Os resultados da comparação de seqüências de 16SrRNA indicaram que o isolado foi proximamente relacionado com o Bacillus caldoxylolyticus and Bacillus sp AK1 e estes três organismos exibiram níveis de homologia de 94% nas seqüências de DNA ribossomal

  6. Os impactos econômicos da atuação do sistema penal: vida virtual, isolamento e encarceramento em massa

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Sergio Francisco Carlos Graziano Sobrinho

    2014-12-01

    Full Text Available http://dx.doi.org/10.5007/2177-7055.2014v35n69p133 Este artigo objetiva compreender a atuação do sistema penal brasileiro a partir dos índices de encarceramento dos últimos 20 anos, interagindo o conceito econômico da maximização dos lucros com o discurso criminológico da seletividade do sistema penal. As transformações discursivas no campo das políticas criminais, caracterizadas por uma constante e forte repressão penal, passando do “previdenciarismo penal” (correção ao aumento das punições, sofrem importante interferência do modelo econômico, em especial modulando as práticas de encarceramento com interesses privados e produzindo significativo aumento dos índices de encarceramento, permanente seletividade da atuação do sistema penal e transformações, tanto no modo de vida contemporâneo como na atuação e nas estruturas dos órgãos de controle e de justiça criminais.

  7. Isolation of pectin from pumpkin (Cucurbita moschata, L.) by acid hydrolysis;Isolamento de pectina de abobora (Cucurbita moschata, L.) por hidrolise acida

    Energy Technology Data Exchange (ETDEWEB)

    Souza, Jose R.R.; Ricardo, Nagila M.P.S.; Paula, Regina C.M. de; Feitosa, Judith P.A., E-mail: judith@dqoi.ufc.b [Universidade Federal do Ceara (UFC), Fortaleza, CE (Brazil). Dept. de Quimica Organica e Inorganica. Lab. de Polimeros; Brito, Edy S. [EMBRAPA Agroindustria Tropical, Fortaleza, CE (Brazil)

    2009-07-01

    Pumpkin (Cucurbita moschata, L.) constitutes an excellent source of carotenoids, precursors of vitamin A. Besides, it also that constitutes also a great natural source of low-cost pectin. Pectin is a heterogeneous complex polysaccharide found in the primary cell wall of most plants and its effect on health is receiving increasing interest from the scientific community. In this work, high-methoxy pectin was obtained from pumpkin (Cucurbita moschata, L.) through the acid hydrolysis methodology. The pectin obtained was characterized by FTIR, NMR {sup 1}H, GPC and rheology. (author)

  8. Isolamento, caracterização e diferenciação de células tronco embrionárias e mesenquimais de equinos

    OpenAIRE

    2010-01-01

    A célula-tronco (CT) é definida como uma célula com capacidade de gerar diferentes tipos celulares e reconstituir diversos tecidos. Além disso, a CT apresenta propriedades de auto-renovação, gerando cópias idênticas a si mesma. De acordo com sua origem, as células-tronco podem ser chamadas de adultas e embrionárias. As células-tronco adultas (CTA) mais utilizadas nas clínicas de terapia celular são as células-tronco hematopoiéticas e as células tronco mesenquimais, encontradas principalmente ...

  9. EXTRAÇÃO, ISOLAMENTO E FRACIONAMENTO DA PROTEÍNA DE TREMOÇO (LUPINUS ALBUS VAR. MULTOLUPA

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    VALDIR AUGUSTO NEVES

    2009-07-01

    Full Text Available

    O objetivo deste trabalho foi determinar as características de solubilidade da proteína de tremoço (Lupinus albus, var. Multolupa. Extração protéica de 84,6% foi obtida com o aumento da relação massa de farinha/ volume de extrator. A solubilidade protéica com o pH mostrou uma curva típica de globulinas com um mínimo entre os pHs 4 e 6. O efeito do aumento da concentração de NaCI até 1,0 M elevou a solubilidade na faixa do pH, no entanto reduziu na faixa de pHs ácidos. O tipo e a concentração de sais e pHs da solução afetaram a solubilidade protéica. O fracionamento com diferentes solventes solubilizou até 87,82% do nitrogênio da farinha de tremoço, e o nitrogênio solúvel em sal correspondeu a até 69% do total. A fração globulina representou 43,42% do total de proteínas, enquanto albumínas, prolaminas, glutelinas e resíduo insolúvel corresponderam a 10,77%, 0,49%, 16,29% e 8,59%, respectivamente. A cromatografia em Sepharose CL-6B mostrou a presença de um pico majoritário e dois componentes menores para a globulina total; e na cromatografia em Sephacryl S-300 HR, três componentes foram observados. A eletroforese em gel de poliacrilamida, da fração do tubo pico do componente majoritário eluído na coluna de Sephacryl, mostrou uma única banda de proteína. O conteúdo de açúcares das proteínas foi distinto para fração albumina e globulma

  10. ESTREPTOCOCOS DO GRUPO MUTANS: ISOLAMENTO, IDENTIFICAÇÃO E PREVALÊNCIA DAS ESPÉCIES NA SALIVADE PARES MÃE/FILHO

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    AZEVEDO Rosa Vitória Palamin

    1998-01-01

    Full Text Available Amostras de saliva não estimulada de 50 crianças e de suas mães foram analisadas, objetivando-se determinar a prevalência das espécies do grupo mutans. Alíquotas de saliva, pura e após diluição decimal seriada, foram semeadas no meio SB20 modificado, com bastão angulado em L, e incubadas em microaerofilia durante 72 horas a 37ºC. Após a contagem do número de ufc do grupo mutans, colônias características foram transferidas para o meio tioglicolato, incubado a 37ºC - 24 horas, e submetidas à identificação bioquímica. Estreptococos do grupo mutans foram detectados na saliva de 47 (94,0% crianças e de 50 (100,0% mães. Verificou-se que 31 (62,0% pares mãe/filho albergavam a(s mesma(s espécie(s, sendo que 15 (30,0% crianças e 24 (48,0% mães estavam multicolonizadas (S. mutans + S. sobrinus, com uma média de ufc/ml correspondente a 1,28 x 106 e 3,57 x 106, respectivamente.

  11. Multi-Nested Pendula: Um novo conceito em isolamento vibracional para a terceira e quarta geração do LIGO

    OpenAIRE

    Márcio Constâncio Junior

    2013-01-01

    Ondas gravitacionais (OG) são perturbações no espaço-tempo que viajam pelo próprio espaço-tempo à velocidade da luz. A predição teórica de sua existência existe desde a publicação da teoria da Relatividade Geral de Einstein (RG), no início do século XX, contudo, evidências indiretas de sua existência foram anunciadas somente em 1975 em um trabalho publicado por Russell Hulse e Joseph Taylor. Uma das formas de caracterizá-las é por meio da sua amplitude adimensional dada por $h \\approx \\frac{...

  12. Extração e isolamento de alfa-solanina de brotos de batata Extraction and isolation of alpha-solanine from potato sprouts

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Dayse Soave Spoladore

    1983-01-01

    Full Text Available Fresh potato sprouts were extracted with 2% aqueous acetic acid for 48 hours. The crude alkaloidal extract was purified by repeating the operation. Precipitation by concentrated ammonium hydroxide, centrifugation, dissolution of the resulting precipitate in 2% acetic acid, till a clear alkaline supernatant was obtained. The alpha-solanine, obtained by this procedure was purified by successive recristalizations with ethyl alcohol. The total yield was about 0.02% of the fresh material, with purity greater than 99%. IR, ¹H and 13C NMR spectra are shown.

  13. Isolation and characterization of partially purified leptospiral antigens Isolamento e caracterização de antígenos parcialmente purificados de Leptospira

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    M.C. Koury

    1991-10-01

    Full Text Available The methanol extract of Leptospira interrogans serovar canicola was purified by precipitation with acetone or acetone and chloroform. The antigenicity of the antigen was not altered by heating or treatment with pepsin and pronase. However the antigenicity was lost when the antigen was treated with periodic acid. Chemical analysis revealed the presence of 40% carbohydrate (22% methylpentose, 28%; hexoses,4% protein, 20% lipid and 2,7% phosphate. The complement fixation test with sera from patients with leptospirosis agreed with the microscopic agglutination reaction.Extrato metílico de Leptospira interrogans sorovar canicola foi purificado por precipitação com acetona ou acetona e clorofórmio. A antigenicidade não foi alterada por aquecimento ou tratamento com pepsina e pronase, entretanto foi perdida quando o antígeno foi tratado com ácido periódico. Análise química revelou a presença de 40% de carboidrato (22% de metilpentose, 28% de hexose, 4% de proteína, 20% de lípide e 2,7% de fosfato. Reação de fixação de complemento realizada com soros de pacientes com leptospirose apresentou concordância com a reação de aglutinação microscópica.

  14. Isolamento de amebas de vida livre a partir de água mineral engarrafada Isolation of free-living amoebae from bottled mineral water

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Homero Coutinho Salazar

    1982-10-01

    Full Text Available Foram isoladas amebas dos gêneros Vahlkampfia, Glaeseria, Acanthamoeba, Filamoeba, Amoeba, Platyamoeba e Hartmanella de dez diferentes marcas de água mineral engarrafadas, servidas no Rio de Janeiro, RJ (Brasil. Somente uma das marcas foi negativa para protozoários, enquanto que de todas as outras foram isoladas amebas de vida livre. O significado desses resultados é discutido como um indicador de qualidade da água mineral usada comercialmente, destacando-se o fato de que alguns desses microorganismos são potencialmente patogênicos.Amoebae of the genera Vahlkampfia, Glaeseria, Acanthamoeba, Filamoeba, Amoeba, Platyamoeba and Hartmanella were isolated from ten different brands of bottled mineral water used in Rio de Janeiro. Of these brands, only one was negative after an incubation period of twenty days, while the others were all positive for free living amoebae. The results are discussed as an indicator of the quality of commercially used mineral water and it is stressed that some of these microorganisms are potentially pathogenic.

  15. Isolamento e avaliação do potencial citotóxico de derivados fenólicos de Schinus terebinthifolius Raddi (Anacardiaceae

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Jeferson S. Santana

    2012-01-01

    Full Text Available The EtOH extract from leaves of S. terebinthifolius was subjected to partition between EtOH:H2O and hexane, CH2Cl2, and EtOAc. The phases obtained were evaluated in vitro against human tumoral cell lines and the EtOAc phase exhibited activity. Chromatographic procedures afforded gallic acid (1, methyl (2 and ethyl (3 gallates, trans-catechin (4, quercitrin (5, and afzelin (6, being the first occurrence of 1, 4 and 6 in S. terebinthifolius.In vitro cytotoxic evaluation of 1 - 6 indicated that gallic acid (1 displayed higher activity than ethyl gallate (3 against HL-60 and HeLa cells, while compounds 2, 4 - 6 were inactive.

  16. Isolation and cytotoxicity evaluation of some oxoaporphine alkaloids from Annonaceae; Isolamento e avaliacao da atividade citotoxica de alguns alcaloides oxaporfinicos obtidos de annonaceae

    Energy Technology Data Exchange (ETDEWEB)

    Silva, Denise Brentan da; Matos, Maria de Fatima Cepa; Nakashita, Simone T.; Misu, Carina K.; Yoshida, Nidia Cristiane; Carollo, Carlos Alexandre; Fabri, Joao Roberto; Miglio, Hercules da Silva; Siqueira, Joao Maximo de [Universidade Federal de Mato Grosso do Sul (UFMS), Campo Grande, MS (Brazil). Centro de Ciencias Biologicas e da Saude. Dept. de Farmacia]. E-mail: jmaximo@nin.ufms.br

    2007-07-01

    A different methodology was used to isolate and purify oxoaporphine alkaloids, as they are difficult to separate by the usual workup when in mixture. Alkaloid extracts from Annonaceae species were obtained by base/acid extraction. The extracts were concentrated and submitted to partition in solutions of acids of different pKa values, followed by separation by preparative TLC using 1 mm thick silica gel impregnated with oxalic acid (11.2% w/w). Liriodenine, lisycamine, lanuginosine, and O-methylmoschatoline were obtained and tested against tumoral cells (line Hep{sub 2}, ATCC-CCL 23, larynx carcinoma). Only O-methylmoschatoline (IC{sub 50} 12.4 muM) was more active than cisplatin (18.0 muM). (author)

  17. Isolation and characterization of soluble sulfated polysaccharide from the red seaweed Glucaric cornea; Isolamento e caracterizacao do polissacarideo sulfatado soluvel extraido da alga vermelha Gracilaria cornea

    Energy Technology Data Exchange (ETDEWEB)

    Melo, Marcia R.S.; Freitas, Ana L.P. [Ceara Univ., Fortaleza, CE (Brazil). Dept. de Bioquimica e Biologia Molecular]. E-mail: rubiamelo@yahoo.com; Feitosa, Judith P.A.; Paula, Regina C.M. de [Ceara Univ., Fortaleza, CE (Brazil). Dept. de Quimica Organica e Inorganica]. E-mail: judith@dqoi.ufc.br

    2001-07-01

    The composition, structure and rheological properties of soluble sulphated polysaccharide Glucaric cornea from Brazilian red seaweeds were investigated. The main components of polysaccharide were 3,6-anhydrogalactose (24.7%) and galactose (64.6%). In addition, minor components as 6-O-methyl-galactose (8.5%), glucose (1.5%), xylose (0.7%) and sulfated groups (4.8%) were detected. Comparison between sulphates content determined by Ft-IR spectroscopy and micro elemental analysis was made. Data from {sup 13}C NMR and FT-IR provided evidence of sulphation in C-4 and C-6 of galactose. No gelation with 1.5, 2.0 and 3.0 % (w/v) aqueous solution was observed, even cooled up to 4 deg C. GPC indicated two majors polysaccharide fractions of M{sub pk} 7.4 x 10{sup 4} and 1.8 x 10{sup 4} g/mol and a minor fraction of M{sub pk} 2.1 x 10{sup 6} g/mol. (author)

  18. Número mais provável miniaturizado e microbiologia convencional para isolamento de Salmonella spp. em abatedouros de frangos de corte

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Lilian Andriva dos Santos

    2015-03-01

    Full Text Available Os produtos de origem avícola podem ser importantes veículos de transmissão de Salmonella spp. para humanos e, dentre os vários parâmetros que determinam a qualidade de um alimento, destacam-se os que definem suas características microbiológicas. Objetivou-se detectar e quantificar Salmonella spp. na tecnologia de abate de frangos de corte por microbiologia convencional (MC e número mais provável miniaturizado (mNMP. As coletas foram realizadas em duas visitas a três abatedouros sob Inspeção Federal e em seis pontos de coleta em triplicata, definidos como: recepção das aves (swabs de cloaca e esponjas de gaiolas de transporte antes e após a higienização e carcaças (após pré resfriamento em chiller, após o gotejamento e antes da embalagem primária e congeladas a -12oC por 24 horas, totalizando 108 amostras. Identificou-se Salmonella spp. em três dos seis pontos do fluxograma de abate e em dois dos três estabelecimentos amostrados, independentemente do método utilizado, perfazendo 5,5% de positividade, onde destaca-se a contaminação nas gaiolas de transporte das aves após a higienização. Não foi possível correlacionar os resultados da microbiologia convencional e do mNMP ou mesmo quantificar a contaminação ao longo da tecnologia de abate, o que indica a necessidade de se utilizar um método qualitativo aliado ao método de quantificação quando Salmonella estiver presente em quantidades inferiores ao limite de detecção do mNMP proposto (0,13 NMP/mL. Os sorovares identificados foram Typhimurium, Panama, Lexington e Rissen, consideradas paratíficos e, portanto, potencialmente capazes de causar infecções em humanos, embora estes sorovares não tenham sido isolados em produtos finais e sim na chegada dos frangos aos abatedouros (swabs de cloaca e gaiolas de transporte. A identificação de Salmonella spp. nas gaiolas de transporte após a higienização é um indicativo da necessidade de revisão e adequação dos métodos automatizados de lavagem atualmente utilizados nos abatedouros.

  19. ISOLAMENTO E IDENTIFICAÇÃO DE MICOBACTÉRIAS EM ÁGUAS TRATADAS PROVENIENTES DO SISTEMA DE ABASTECIMENTO DE ARARAQUARA-SP

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Josiane Aparecida GASPAR-GRILLO

    2012-01-01

    Full Text Available A qualidade da água é muito importante para a saúde e bem-estar do ser humano e o sistema de abastecimento público deve fornecer água de qualidade e em quantidade suficiente para toda a população. As estações de tratamento de água constituem o principal caminho para obtenção de água de qualidade. Quando isso não ocorre vários problemas podem afetar a população que passa a consumir água com qualidade inadequada e com o risco constante de surgimento de várias doenças. A eliminação de micro-organismos em água tratada reduz a competição, favorecendo a multiplicação de bactérias resistentes ao cloro como as do gênero Mycobacterium frequentemente isoladas de águas tratadas e cloradas. Considerando a não indicação da pesquisa de micobactérias nos exames laboratoriais de rotina para controle de qualidade de água para consumo humano e outros usos, o objetivo deste trabalho foi verificar a presença, isolar e identificar as micobactérias ambientais no sistema de abastecimento de água de origem superficial da cidade de Araraquara – SP. Foram analisadas 40 amostras de águas, assim distribuídas: dez de água bruta colhidas na Estação de Tratamento de Água (ETA, dez colhidas após filtração, dez colhidas no reservatório após cloração e dez na rede de distribuição. Foram recuperados 43 isolados de micobactérias. Todos os isolados foram submetidos ao PCR-PRA. As espécies de micobactérias identificadas foram M. lentiflavum, M. parafortuitum, M. genavense, M. gordonae, M. fortuitum, M. confluentis, M. duvalii, M. avium subespécie paratuberculose e M. szulgai. Com esses resultados, concluiu-se que a água é importante fonte de micobactérias ambientais provavelmente relacionadas a várias doenças humanas, sugerindo-se a realização de acompanhamento contínuo desses micro-organismos no sistema de água potável.

  20. Benefits of using natural ester fluids in insulation systems; Beneficios do uso de fluidos de esteres naturais nos sistemas de isolamento

    Energy Technology Data Exchange (ETDEWEB)

    Bingenheimer, David; Fiacco, Eugene Del; Rapp, Kevin [Cooper Power Systems (United States); Mak, Jose [B e M Pesquisa e Desenvolvimento, Campinas, SP (Brazil); Franchini, Luiz [Itaipu Transformadores, Itapolis, SP (Brazil); Vasconcellos, Vagner [Companhia Paulista de Forca e Luz (CPFL), Campinas, SP (Brazil)

    2011-10-15

    For use as dielectric fluids, the natural esters have, compared with mineral oils, longer life and better thermal characteristics, which allows the fabrication of smaller transformers, more profitable and fire safety. Furthermore, are extracted from seeds, renewable raw materials, recyclable, biodegradable and nontoxic produced locally, which translates into environmental, economic and social benefits.

  1. Methodology for characterization of corrosive agents of thermal insulating foams; Desenvolvimento de metodologia para caracterizacao de agentes corrosivos de espumas de isolamento termico

    Energy Technology Data Exchange (ETDEWEB)

    Sousa, Flavio V. Vasques de [Universidade Federal, Rio de Janeiro, RJ (Brazil). Coordenacao dos Programas de Pos-graduacao de Engenharia. Fundacao Coordenacao de Projetos, Pesquisas e Estudos Tecnologicos - COPPETEC; Mattos, Oscar R.; Mota, Rafael O. da [Universidade Federal, Rio de Janeiro, RJ (Brazil). Coordenacao dos Programas de Pos-graduacao de Engenharia. Programa de Engenharia Metalurgica e de Materiais; Margarit-Mattos, Isabel C.P. [Universidade Federal, Rio de Janeiro, RJ (Brazil). Escola de Quimica. Dept. de Processos Organicos; Quintela, Joaquim P. [PETROBRAS, Rio de Janeiro, RJ (Brazil); Vieira, Magda M. [PETROBRAS, Rio de Janeiro, RJ (Brazil). Centro de Pesquisas

    2005-07-01

    Warming up oil and derivatives is a required procedure to make their transportation more efficient due to the increase in fluidity. Therefore, the use of thermally insulated pipeline becomes essential. The commonly practice has been the use of pipelines covered with an optional anticorrosive coating, followed by a polyurethane foam layer, as thermal insulator, and a polyethylene top coating for mechanical protection. During the life time of the pipeline, local ruptures of the polyethylene coating frequently occur, allowing the water permeation throughout the thermal insulator. This water may cause foam leaching that would release corrosive agents on the external wall pipe. The objective of the present work was to investigate the effects of the blowing agents, the addition of flame retardant to the foam as well as operating temperatures on the generation of corrosive solutions on the external wall of thermally insulated pipes. In this sense, polyurethane foams expanded with HCFC-141b, CFC-11 and CO{sub 2}, with and without flame retardant, were evaluated at the temperatures of 80 and 120 deg C. (author)

  2. The Protium heptaphyllum resin: isolation, structural characterization and evaluation of thermal properties; Resina de Protium heptaphyllum: isolamento, caracterizacao estrutural e avaliacao das propriedades termicas

    Energy Technology Data Exchange (ETDEWEB)

    Vieira Junior, Gerardo Magela; Souza, Cleide Maria Leite de; Chaves, Mariana Helena [Piaui Univ., Teresina, PI (Brazil). Dept. de Quimica]. E-mail: mariana@ufpi.br

    2005-04-01

    Three mixtures of triterpenes (maniladiol and breine; {alpha} and {beta}-amyrin; lupenone, {alpha} and {beta}-amyrinone) were isolated from Protium heptaphyllum March resin. The structural identification was based on NMR and mass spectrometry data. Lupenone, and {alpha} and {beta}-amyrinone were not reported before as constituents of this resin. The resin was submitted to methylation and acetylation reactions. The pure and derivatized resins and the mixtures (maniladiol and breine; {alpha} and {beta}-amyrin) were analyzed by TG and DSC. The TG curves revealed that the derivatization decreases the thermal stability of the resin. The DSC curves showed peaks that can be assigned to evaporation and phase transitions processes. (author)

  3. Isolamento de micro-organismos endofíticos do Ipê Roxo (Tabebuia avellanedae) e avaliação da atividade antimicrobiana

    OpenAIRE

    FERREIRA, Luana Miguel dos Anjos

    2012-01-01

    A ocorrência e o potencial farmacológico de metabólitos secundários de micro-organismos endofíticos de plantas, têm sido amplamente investigados. Tabebuia avellanedae, (ipê-roxo) é utilizada como analgésico, antiinflamatório, antibióticos e anti-mutagênico. Diante do potencial biotecnológico desta planta, o presente trabalho teve como objetivo isolar endofíticos de folhas de T. avellanedae e avaliar a atividade antimicrobiana. Foram isolados 166 endofíticos dos quais aproximadamente 74% (123)...

  4. Isolamento do vírus rábico de morcego insetívoro , Lasyurus borealis Rabies virus isolation in insectivorous bat Lasyurus borealis

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Luzia Fatima Alves Martorelli

    1996-02-01

    Full Text Available Relata-se um caso de raiva em morcego insetívoro, Lasyurus borealis, na região urbana, em bairro residencial, no Município de Jundiaí, SP (Brasil.A case of rabies in an insectivorous bat, Lasyurus borealis , in a residential suburb in an urban area in the southern region of Brazil, is reported.

  5. Utilidade do coágulo sangüíneo para o isolamento de Sporothrix schenckii de gatos naturalmente infectados

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Tânia Maria Pacheco Schubach

    2004-11-01

    Full Text Available The diagnosis of disseminated sporotrichosis is usually obtained by necropsy and the isolation of Sporothrix schenckii from blood is rare. Fungemia was shown in vivo through the isolation of S. schenckii from peripheral blood of 13 (n=38, 34.2% cats with naturally acquired sporotrichosis. The coinfection with FIV and with FeLV found, respectively, in 6 (n=34, 17.6% cases and 1 (n=34, 2.9%, apparently did not alter the frequency of the isolation of S. schenckii from peripheral blood. There was agreement of 84.2% comparing these results to the blood culture results simultaneously achieved. In this way, we propose the clot culture as a practical alternative method, efficient and cheap for the diagnosis of disseminated sporotrichosis in cats in vivo.

  6. Isolamento e avaliação da atividade nematicida de constituintes químicos de Mucuna cinerea contra Meloidogyne incognita e Heterodera glycines

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Demuner Antonio Jacinto

    2003-01-01

    Full Text Available Phytochemical investigation of the aerial parts and roots of Mucuna cinerea led to the isolation of a mixture of fatty acids, triacylglicerols, beta-sitosterol, stigmasterol, stigmasterol glucoside, daucosterol, asperglaucide (4 and the isoflavonoids prunetin (1, genistein (2, medicarpin (3, daidzein (5, 7-O-alpha-glycopiranosyl daidzein (6. An in vitro bioassay was carried out with compounds 1-4, at the concentration of 50 and 5 mug mL-1 against the phytonematodes M. incognita and H. glycines. Although the four compounds showed some nematocidal property, the most active was (1, causing 70% mortality of M. incognita at the concentration of 50 mug mL-1.

  7. Crotoxin in humans: analysis of the effects on extraocular and facial muscles Crotoxina em humanos: estudo da ação em músculos extraoculares e faciais

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Geraldo de Barros Ribeiro

    2012-12-01

    Full Text Available PURPOSE: Crotoxin is the main neurotoxin of South American rattlesnake Crotalus durissus terrificus. The neurotoxic action is characterized by a presynaptic blockade. The purpose of this research is to assess the ability of crotoxin to induce temporary paralysis of extraocular and facial muscles in humans. METHODS: Doses of crotoxin used ranged from 2 to 5 units (U, each unit corresponding to one LD50. We first applied 2U of crotoxin in one of the extraocular muscles of 3 amaurotic individuals to be submitted to ocular evisceration. In the second stage, we applied crotoxin in 12 extraocular muscles of 9 patients with strabismic amblyopia. In the last stage, crotoxin was used in the treatment of blepharospasm in another 3 patients. RESULTS: No patient showed any systemic side effect or change in vision or any eye structure problem after the procedure. The only local side effects observed were slight conjunctival hyperemia, which recovered spontaneously. In 2 patients there was no change in ocular deviation after 2U crotoxin application. Limitation of the muscle action was observed in 8 of the 12 applications. The change in ocular deviation after application of 2U of crotoxin (9 injections was in average 15.7 prism diopters (PD. When the dose was 4U (2 applications the change was in average 37.5 PD and a single application of 5U produced a change of 16 PD in ocular deviation. This effect lasted from 1 to 3 months. Two of the 3 patients with blepharospasm had the hemifacial spasm improved with crotoxin, which returned after 2 months. CONCLUSIONS: This study provides data suggesting that crotoxin may be a useful new therapeutic option for the treatment of strabismus and blepharospasm. We expect that with further studies crotoxin could be an option for many other medical areas.OBJETIVO: A crotoxina é a principal neurotoxina da cascavel sul-americana Crotalus durissus terrificus e sua ação neurotóxica caracteriza-se por um bloqueio pr

  8. Aspectos clínico-patológicos e laboratoriais do envenenamento crotálico experimental em bovinos Clinical and pathological aspects of experimental Crotalus poisoning in cattle

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Flávio A.S. Graça

    2008-06-01

    Full Text Available Reproduziu-se experimentalmente o envenenamento crotálico, através da inoculação, por via subcutânea, do veneno de Crotalus durissus terrificus (cascavel sul-americana em dez bovinos mestiços. Dois animais foram utilizados como controle. O bovino que recebeu dose de 0,03mg/kg de peso corporal, morreu 7h40min após a inoculação. A dose de 0,015mg/kg causou a morte em quatro de sete bovinos inoculados, enquanto os dois animais que receberam 0,0075mg/kg adoeceram discretamente e se recuperaram. Os sintomas tiveram início entre 1h30min e 13h45min após a inoculação. A evolução oscilou entre 5h25min e 45h para os animais que morreram e entre 33h15min e 17 dias entre os animais que se recuperaram. Os principais sinais nervosos observados foram diminuição da resposta aos estímulos externos, reflexos hipotônicos, arrastar dos cascos no solo, aparente apatia, paralisia do globo ocular e da língua, decúbito esternal e lateral. Verificaram-se também adipsia e, por vezes, petéquias nas mucosas vaginal e conjuntival. Houve discreto a moderado aumento do tempo de sangramento e moderado aumento do tempo de tromboplastina parcial ativada. Houve moderada leucocitose com neutrofilia, linfopenia relativa, eosinopenia, monocitose e discreto aumento do número de bastões. Foi evidenciado significativo aumento dos níveis séricos de creatinaquinase, contudo, não foram observadas alterações significativas através da urinálise. À necropsia constataram-se edema quase imperceptível no local da inoculação, discretas petéquias e sufusões no epicárdio, omento, vesícula biliar e mucosa da bexiga em alguns dos animais envenenados experimentalmente. Os exames histopatológicos revelaram necrose (hialinização de grupos de miócitos ou em miócitos isolados em dez diferentes músculos esqueléticos examinados, próximos ou distantes do local de inoculação em todos os animais necropsiados. Concluí-se que o envenenamento por Crotalus Sul

  9. Mice plasma fibrinogen consumption by thrombin-like enzyme present in rattlesnake venom from the North-East region of Argentina Consumo de fibrinógeno plasmático en ratones por acción de enzima con actividad trombínica presente en el veneno de cascabel del nordeste argentino

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Silvana L. Maruñak

    2004-12-01

    Full Text Available Due to variability of venom components from the same species of snakes that inhabit different regions, particular properties of the venom of Crotalus durissus terrificus that inhabits the North-East of Argentina were studied. Gyroxin, a thrombin-like enzyme, was isolated from this venom by gel filtration and affinity chromatography, it was found to be homogeneous according to SDS-PAGE, with a molecular weight of 33 kDa. "Gyroxin syndrome" in mice was tested and it showed changes in the animal behavior, confirming that the isolated thrombin-like enzyme is gyroxin. Effects of this enzyme and the crude venom on mice plasmatic fibrinogen levels were determined. The mice plasma fibrinogen decreased rapidly until incoagulability during the first hour after thrombin-Iike enzyme injection, then reaching its normal level 10 hours after injection; whereas crude venom resulted in a 60% decrease of the mice plasma fibrinogen, reaching its normal level after the same period of time. After 1 hour of gyroxin inoculation, intravascular coagulation was observed in histological cuttings of lung, cardiac muscle and liver. The isolated enzyme showed strong hydrolyzing activity on fibrinogen and fibrin in vitro, whereas the crude venom exhibited weak hydrolyzing activity on both substrates. It is probable that this very low activity is due to the low percentage of the enzyme in the crude venom. Decreasing of plasmatic fibrinogen levels may be due to either the coagulant or hydrolyzing actions of the enzyme.Teniendo en cuenta la variabilidad de los componentes del veneno de serpientes de una misma especie que habitan regiones diferentes, se decidió estudiar las propiedades particulares del veneno de Crotalus durissus terrificus que habita el nordeste de Argentina, Giroxina, una enzima con actividad trombínica, fue aislada del veneno por cromatografía de filtración por gel y de afinidad; se comprobó su homogeneidad y se determinó su peso molecular, 33 kDa, por

  10. Study of crotoxin on the induction of paralysis in extraocular muscle in animal model Estudo da crotoxina na indução de paralisia da musculatura extraocular em modelo animal

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Geraldo de Barros Ribeiro

    2012-10-01

    Full Text Available PURPOSE: Crotoxin is the major toxin of the venom of the South American rattlesnake Crotalus durissus terrificus, capable of causing a blockade of the neurotransmitters at the neuromuscular junction. The objective of this study was to appraise the action and effectiveness of the crotoxin induced paralysis of the extraocular muscle and to compare its effects with the botulinum toxin type A (BT-A. METHODS: The crotoxin, with LD50 of 1.5 µg, was injected into the superior rectus muscle in ten New Zealand rabbits. The concentration variance was 0.015 up to 150 µg. Two rabbits received 2 units of botulinum toxin type A for comparative analysis. The evaluation of the paralysis was performed using serial electromyography. After the functional recovery of the muscles, which occurred after two months, six rabbits were sacrificed for anatomopathology study. RESULTS: The animals did not show any evidence of systemic toxicity. Transitory ptosis was observed in almost every animal and remained up to fourteen days. These toxins caused immediate blockade of the electrical potentials. The recovery was gradual in the average of one month with regeneration signs evident on the electromyography. The paralysis effect of the crotoxin on the muscle was proportional to its concentration. The changes with 1.5 µg crotoxin were similar to those produced by the botulinum toxin type A. The histopathology findings were localized to the site of the injection. No signs of muscle fiber's necrosis were seen in any sample. The alterations induced by crotoxin were also proportional to the concentration and similar to botulinum toxin type A in concentration of 1.5 µg. CONCLUSION: Crotoxin was able to induce transitory paralysis of the superior rectus muscle. This effect was characterized by reduction of action potentials and non-specific signs of fibrillation. Crotoxin, in concentration of 1.5 µg was able to induce similar effects as botulinum toxin type A.OBJETIVO: A

  11. Health Data Concerning Ecuador

    Science.gov (United States)

    1960-01-27

    publishes the Bolletin de Miedicina y Cirugia - The Ecuadorian Society of Pediatrics sponsors extension courses and lectures for physicians. The MedicaI...serum terrificus snake) cascabel Lachesis rnuta Bushmaster Hernatoxin + Antilaquetic serum proteolysin . oral snakes Ylicrurus (Elaps) Coralilla

  12. Study of crotoxin mechanism of action to mammary carcinomas and evaluation of its potential as a radiopharmaceutical; Estudo do mecanismo de acao da crotoxina em tumores mamarios e avaliacao do seu potenctial radiofarmaceutico

    Energy Technology Data Exchange (ETDEWEB)

    Silveira, Marina Bicalho

    2010-07-01

    Crotoxin, the main component of Crotalus durissus terrificus snake venom, has been studied since 1938. It is a natural polypeptidic complex with pharmacological potential because of its antitumoral properties which has attracted great interest for diagnosis and therapy of oncological diseases. However, Crotoxin mechanism of action and sites of specific interaction on tumor cells are still misunderstood. Breast cancer is the second most frequent type in the world and the most common cancer in women. About 30 to 60% of mammary tumors overexpress epidermal growth factor receptor (EGFR), a transmembrane protein related to cell proliferation. Since literature has reported that Crotoxin antitumoral effect is more potent on cells with EGFR overexpression the objectives of this work were to evaluate Crotoxin cytotoxic effects on mammary tumor cells human breast carcinoma (MCF-7) and Ehrlich tumor cells (murine ascitics carcinoma), and to investigate the specific molecular interaction of Crotoxin on Ehrlich tumor cells. Initially, Crotoxin was radiolabelled with iodine-125 ({sup 125}I-Crotoxin) and iodine-131 ({sup 131}I-Crotoxin). Saturation and competition assay were carried out to characterize Crotoxin in vitro interaction; Crotoxin biodistribution studies and singlephoton emission computed tomography (SPECT) of mice bearing Ehrlich tumor have been evaluated to describe in vivo interaction. Our results showed that Crotoxin presented cytotoxic effect against Ehrlich with DL{sub 50} in vitro (concentration of compound which is lethal for 50% of cells) of about one micromolar, but did not present significant effect against MCF-7. Morphological alterations characteristic of apoptosis suggests programmed cell death. {sup 125}I-Crotoxin interaction with Ehrlich tumor cells was saturable with approximately 70% specificity, and presented K{sub d}=24.98 nmol/L and B{sub max}=16,570 sites/cell for low affinity binding sites and K{sub d}=0.06 nmol/L and B{sub max}=210 sites

  13. Isolation and characterization of Caulobacter mutants impaired in adaptation to stationary phase Isolamento e caracterização de mutantes de Caulobacter deficientes na adaptação à fase estacionária

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Valéria C. S. Italiani

    2003-04-01

    Full Text Available The entry into stationary phase causes a change in the pattern of gene expression of bacteria, when the cells must express a whole set of genes involved mainly with resistance to starvation and to environmental stresses. As an attempt to identify genes important for the survival of Caulobacter crescentus in stationary phase, we have screened a library of 5,000 clones generated by random transposon mutagenesis for mutants that showed reduced viability after prolonged growth. Four clones were selected, which displayed either lower viability or a longer time of recovery from stationary phase. The genes disrupted were identified, and the gene products were found to be mainly involved with amino acid metabolism (glutamate N-acetyltransferase, 4-hydroxyphenylpyruvate dioxygenase and L-aspartate oxidase or with recombination (exonuclease RecJ. Each mutant was tested for resistance to stresses, such as oxidative, saline, acidic, heat and UV exposure, showing different responses. Although the mutations obtained were not in genes involved specifically in stationary phase, our results suggest that amino acids metabolism may play an important role in keeping viability during this growth phase.A entrada em fase estacionária causa uma mudança no padrão de expressão gênica de bactérias, quando as células devem expressar um novo conjunto de genes envolvidos principalmente com resistência à carência alimentar e a estresses ambientais. Em uma tentativa de identificar genes importantes para a sobrevivência de Caulobacter crescentus em fase estacionária, nós varremos uma biblioteca de 5.000 clones gerados por transposição aleatória em busca de mutantes que mostrassem viabilidade reduzida após crescimento prolongado. Quatro clones foram selecionados, que mostraram menor viabilidade ou um maior tempo de recuperação da fase estacionária. Os genes interrompidos foram identificados, e os produtos gênicos mostraram-se estar envolvidos principalmente com o metabolismo de aminoácidos (glutamato N-acetiltransferase, 4-hidroxifenilpiruvato dioxigenase e L-aspartato oxidase ou com recombinação (exonuclease RecJ. Cada mutante foi testado para resistência a estresses, como oxidativo, salino, ácido, calor e exposição à luz UV, mostrando respostas diferentes. Embora as mutações obtidas não tenham sido em genes envolvidos especificamente com fase estacionária, nossos resultados sugerem que o metabolismo de aminoácidos tem papel importante na manutenção da viabilidade durante esta fase do crescimento.

  14. Diagnosis and isolation of Toxoplasma gondii in horses from Brazilian slaughterhouses Diagnóstico e isolamento de Toxoplasma gondii em equídeos de frigoríficos brasileiros

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Fernanda Evers

    Full Text Available This study aimed to investigate anti-Toxoplasma gondii antibodies and to isolate the parasite from the brains of horses processed at slaughterhouses in Brazil. We collected brain and blood samples from 398 horses of various ages, from six Brazilian states. Serum samples were evaluated by indirect fluorescent antibody test (IFAT cut-off titre ≥ 1:64, and brains were submitted to mouse bioassay. Among the 398 horses, positivity for T. gondii was identified in 46 (11.6% by IFAT and in 14 (3.5% by mouse bioassay. In 12 of those 14 bioassays, mice were positive only by IFAT (cut-off titre ≥ 1:16, T. gondii being isolated in the remaining two. Using polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism (PCR-RFLP analysis of 18S rDNA to differentiate among T. gondii, Neospora caninum, and Sarcocystis neurona, we found that two of the 14 brains were positive for T. gondii only. For genotyping of the two isolates and the PCR-positive brain, we performed PCR-RFLP based on 13 markers, and SAG2 all samples were Toxoplasma gondii type I. Collectively, IFAT of horse sera and mouse bioassay identified positivity in 60 (15% of the samples. Our results show that some horses sent to slaughter in Brazil have been exposed to T. gondii.O objetivo do estudo foi investigar anticorpos anti-Toxoplasma gondii e isolar o parasita do cérebro de equídeos abatidos em matadouros-frigoríficos no Brasil. Colheram-se amostras de 398 cérebros e sangue de equídeos machos e fêmeas de idades variadas, provenientes de seis estados brasileiros. As amostras de soro foram avaliadas pelo teste de imunofluorescência indireta (IFI para T. gondii (ponto de corte ≥ 64, e os fragmentos de cérebros foram submetidos ao bioensaio em camundongos. Por meio da IFI, 46 (11,6% equídeos foram soropositivos. Pelo bioensaio em camundongos, 14 (3,5% cérebros de equídeos testados foram positivos. Em doze dos bioensaios, os camundongos foram positivos somente pela IFI (ponto de corte ≥ 16 e T. gondii foi isolado nos outros dois bioensaios. A PCR-RFLP com base em 18S rDNA para diferenciar entre T. gondii, Neospora caninum, e Sarcocystis neurona foram feitas em todos os 14 cérebros e dois foram positivos apenas para T. gondii. De dois isolados positivos para T. gondii e do cérebro positivo à PCR em que realizou-se a PCR-RFLP, com base em 13 marcadores e SAG2, a genotipagem mostrou ser o T. gondii tipo I para todas as amostras. A IFI de soros de equídeos e do bioensaio em camundongos identificaram positividade em 60 (15% amostras testadas. Os resultados mostram que alguns cavalos enviados para abate foram expostos ao T. gondii.

  15. Isolamento de Haemophiliis aegyptius associado à Febre Purpúrica Brasileira, de cloropídeos (Diptera) dos gêneros Hippelates e Liohippelates Isolation of Haemophilus aegyptius associated to Brazilian purpuric fever from Hippelates and Liohippelates flies (Diptera: Chloropidae)

    OpenAIRE

    M.L.C. Tondella; Paganelli,C. H.; Bortolotto,I. M.; O. A. Takano; K. Irino; Brandileone,M. C. C.; Mezzacapa Neto,B.; Vieira,V. S. D.; Perkins, B. A.

    1994-01-01

    O reconhecimento da Febre Purpúrica Brasileira (FPB), em 1984, originou uma série de estudos que revelaram uma correlação desta doença com conjuntivites causadas por Haemophiliis aegyptius. A associação do aumento de conjuntivites em crianças e a maior densidade populacional de cloropídeos do gênero Hippelates já havia sido verificada desde o século passado. Este fenômeno está relacionado ao tropismo que estes insetos apresentam pelos olhos, secreções e feridas de onde se alimentam. Embora ha...

  16. Isolamento de gene de defensina em Euphorbia hyssopifolia L., caracterização in silico, propriedades químicas e função putativa da proteína codificada

    OpenAIRE

    Santana, Karla Camila Barbosa

    2012-01-01

    Plantas possuem complexos e eficientes mecanismos de defesa contra diversos agentes patogênicos, dentre eles a ativação transcricional de numerosos genes, como os responsáveis pela produção de peptídeos antimicrobianos, incluindo as defensinas. Tratamse de proteínas pequenas (ca. 5 kDa), básicas e ricas em cisteína, que fazem parte do sistema de defesa desses organismos. Euphorbia hyssopifolia L. é uma erva daninha amplamente empregada na medicina popular brasileira, indiana e ...

  17. Prophylaxis and exclusion: compulsory isolation of Hansen's disease patients in São Paulo Profilaxia e exclusão: o isolamento compulsório dos hansenianos em São Paulo

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Yara Nogueira Monteiro

    2003-01-01

    Full Text Available This article aims to retrieve the history of Hansen's disease in Brazil, analyzing the medical thinking of the time and the shaping of health policies that permitted the implementation, in São Paulo, of a prophylactic policy of compulsory exclusion for all Hansen's disease patients. It also analyzes how the structuring and implementation of this policy led to a 'São Paulo model' that strongly influenced the rest of the country. It addresses the creation of the state's network of leper colonies, their characteristics and the emergence of a veritable 'parallel state' that endured until 1967, with complete disregard of all the changes taking place in both national and international prophylactic policymaking.Este artigo busca resgatar a história da hanseníase no Brasil, analisando o pensamento médico e o direcionamento das políticas de saúde que possibilitaram a implantação, em São Paulo, de uma política profilática centrada na exclusão compulsória de todos os portadores de hanseníase. Analisa ainda como a estruturação e implantação dessa política resultou no 'modelo paulista', que exerceu forte influência no país. Estuda a formação da rede asilar, as suas características e o surgimento de um verdadeiro 'Estado paralelo', que subsistiu até 1967, à revelia das descobertas terapêuticas e das modificações havidas no direcionamento das formas de tratamento e prevenção nacional e internacional.

  18. Isolamento compulsório de portadores de hanseníase: memória de idosos The compulsory isolation of Hansen's disease patients: memories of the elderly

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Selma Munhoz Sanches de Castro

    2009-06-01

    Full Text Available De 1924 a 1962 o Brasil utilizou a internação compulsória de pacientes de hanseníase como controle da doença na comunidade. Com o final dessa política, muitos pacientes continuaram a viver nessas unidades. O Asilo Pirapitingui, hoje Hospital Dr. Francisco Ribeiro Arantes, é a única retaguarda asilar para internação de portadores de hanseníase por indicação social. Obtivemos o relato da história de vida de oito de seus remanescentes, que foram gravados e transcritos. A análise temática desses relatos permitiu a identificação das seguintes categorias: hanseníase; internação; vida cotidiana; a instituição; condições atuais de saúde; e permanência na instituição após a extinção da internação compulsória.From 1924 to 1962, Brazil used compulsory internment of Hansen's disease patients as one of the ways of controlling the disease in the community. After this policy ended, many patients continued to live in these units. The former Asilo Pirapitingui, now the Hospital Dr. Francisco Ribeiro Arantes, is the only old-style asylum for the socially determined internment of those suffering from Hansen's disease. Through recorded and transcribed interviews of eight of those remaining, we sought to learn their history and the meaning of this isolation in their lives. The thematic analysis of the discourse enabled identification of the following analysis categories: Hansen's disease; internment; day-to-day life; the institution; current health conditions; and staying in the institution after the end of compulsory internment.

  19. Isolation and partial chemical analysis of exopolysaccharides from cultivated marine diatom Coscinodiscus wailesii (Coscinodiscales, Bacillariophyta); Isolamento e analise quimica parcial de exopolissacarideos da diatomacea marinha cultivada Coscinodiscus wailesii (Coscinodiscales, Bacillariophyta)

    Energy Technology Data Exchange (ETDEWEB)

    Marson-Ascencio, Poliana G.; Ascencio, Sergio Donizeti [Universidade Federal do Tocantins, Palmas, TO (Brazil); Baggio, Selma Faria Zawadzki, E-mail: polianamarson@uft.edu.br [Universidade Federal do Parana, Curitiba, PR (Brazil). Centro Politecnico. Dept. de Bioquimica e Biologia Molecular

    2012-07-01

    The marine diatom Coscinodiscus wailesii has attracted ecological interest because their blooms affect fishing areas. The aim of this work was the isolation, extraction and partial chemical characterization of soluble exopolysaccharide and bound exopolysaccharide from C. wailesii. Cultures were grown in Guillards f/2 medium under controlled conditions of temperature, aeration, photo period and light intensity. Percentage of carbohydrate, uronic acids, sulfates groups and cellular lipids was determined. Ion exchange chromatography of exopolysaccharides produced three fractions whose partial chemical structures were disclosed using {sup 13}C NMR and methylation techniques. (author)

  20. Isolation and partial characterization of a mutant of Bacillus thuringiensis producing melanin Isolamento e caracterização parcial de um mutante de Bacillus thuringiensis produtor de melanina

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Gislayne T. Vilas-Bôas

    2005-09-01

    Full Text Available A mutant (407-P of Bacillus thuringiensis subsp. thuringiensis strain 407 producing a melanin was obtained after treatment with the mutagenic agent ethyl-methane-sulfonate. Several microbiological and biochemical properties of the two strains were analyzed and the results were similar. The mutant 407-P was also incorporated into non-sterilized soil samples, recovered, easily identified, and quantified, what enables its use in ecology of B. thuringiensis.Um mutante (407-P da linhagem Bacillus thuringiensis subsp. thuringiensis 407 produtor de melanina foi obtido após tratamento com o agente mutagênico etil-metano-sulfonato. Diversas propriedades microbiológicas e bioquímicas das duas linhagens foram analisadas e os resultados foram similares. O mutante 407-P foi incorporado em amostras de solo não esterilizado, recuperado, facilmente identificado e quantificado, possibilitando seu uso em estudos de ecologia de B. thuringiensis.

  1. Isolamento e teste de susceptibilidade a antimicrobianos de bactérias em infecções uterinas de éguas Isolation and antimicrobial susceptibility of bacteria in uterine infections in mares

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    N. Silva

    1999-06-01

    Full Text Available Foram examinados 206 "swabs" cervicais e uterinos de éguas de várias raças, de diversas regiões do Estado de Minas Gerais, durante o período de 1986 a 1996. Cerca de 164 "swabs" foram positivos para a presença de microrganismos causadores de endometrites. Streptococcus equi subsp. zooepidemicus (25,7% e Escherichia coli (15,1% foram os principais agentes infecciosos isolados. Outros microrganismos presentes foram: Staphylococcus aureus (9,2%, Streptococcus alfa-hemolítico (9,2%, Pseudomonas aeruginosa (3,9%, Staphylococcus coagulase negativo (6,3%, Bacillus spp. (1,9%, Rhodococcus equi (3,4% e Proteus mirabilis (1,5%. As provas de susceptibilidade aos antimicrobianos revelaram que amicacina e gentamicina (70,2%, ampicilina (59,5% e cloranfenicol (59,5% foram os antibióticos de maior ação in vitro contra os microrganismos isolados.This study examined 206 cervical and uterine swabs collected from infected mares from herds in the Minas Gerais State, Brazil, from 1986 to 1996. Amongst 164 successful isolations, 25.7% were identified as Streptococcus equi, subsp. zooepidemicus, and 15.1% as Escherichia coli, both considered the most important isolates. Other bacteria found included Staphylococcus aureus (9.2%, Streptococcus alpha-hemolytic (9.2%, Pseudomonas aeruginosa (3.9%, coagulase negative Staphylococcus (6.3%, Bacillus spp. (1.9%, Rhodococcus equi (3.4% and Proteus mirabilis (1.5%. The antibiotic susceptibility tests revealed amikacin and gentamicin (70.2%, ampicillin and chloramphenicol (59.5% as the most effective in vitro antibiotics against these microorganisms.

  2. Isolamento do Toxoplasma gondii de exsudato peritoneal e órgãos de camundongos com infecção experimental Isolation of Toxoplasma gondii from peritoneal exsudates and organs of experimentally infected mice

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Ligia M. Ferreira Jamra

    1991-12-01

    Full Text Available Foram examinados exsudatos peritoneais e órgãos (cérebro, coração, pulmão e músculo estriado de 53 camundongos infectados experimentalmente pelo Toxoplasma gondii, sendo 21 na fase aguda e 32 na crônica. Camundongos albinos, machos, de cerca de 25 g e 2 meses de idade foram inoculados, por via intraperitoneal, com 0,5 ml de exsudato peritoneal (taquizoitas ou macerado de cérebro (cistos de camundongos previamente infectados. O exame a fresco foi feito no exsudato peritoneal, entre 3 e 12 dias após inoculação e no cérebro, após 10 dias. Foram realizadas inoculações de macerados de órgãos em novos camundongos (repiques para a recuperação do parasita no exsudato ou no cérebro. Na infecção aguda as positividades foram, ao exame a fresco: exsudato peritoneal 19/19, pulmão 12/14, músculo 6/9, coração 4/9 e cérebro 1/3. Após inoculação: exsudato peritoneal 5/5, cérebro 2/2, coração 19/19, pulmão 13/13 e músculo 14/17. Após estes últimos resultados foram registrados 9 novos órgãos positivos. A positividade final (igual à recuperação do parasita foi: exsudato peritoneal 19/19 (100%, coração 15/17 (88,5%, músculo 12/14 (85,7%, pulmão 14/14 (100% e cérebro 2/3 (66,6%. Na infecção crônica, que transcorreu entre 10 e 495 dias, as positividades foram, ao exame a fresco: cérebro 28/32, coração 0/4 e músculo 0/4. Após repique: cérebro 6/6, coração 14/29 e músculo 16/26. Neste exame foi revelado um novo camundongo positivo elevando para 29 o total de camundongos positivos ou 90,6%. O resultado final foi: cérebro 28/32 (87,5%, músculo 16/28 (57,15% e coração 14/31 (45,1%. No fim da pesquisa, aos 495 dias, o cérebro apresentava grandes cistos ao exame a fresco e coração e músculo mostravam-se positivos através da inoculação. Conclusões: 1º nos camundongos o toxoplasma persistiu por 495 dias no cérebro, coração e músculo estriado; 2º o exame a fresco do pulmão pode substituir ou confirmar o do exsudato peritoneal; 3º a inoculação de órgãos é necessária pois pode revelar novos casos positivos; 4º a atividade dos cistos foi demonstrada pelo aumento gradual do seu tamanho e pela recuperação do toxoplasma no cérebro, coração e músculo, após o longo tempo de infecção.Peritoneal exsudates and organs from 53 male albino mice, experimentally infected by Toxoplasma gondii were studied, 21 at the acute phase of infection, and 32 at the chronic phase. Peritoneal inoculations were made with 0,5 ml of peritoneal exsudates (tachyzoites, or brain macerates (cysts of previously infected mice. Direct examinations of peritoneal exsudates (tachyzoites were realized between 3 to 12 days post-inoculation, and in brain (cysts after 10 days post-inoculation. Organs macerates were inoculated in new mice, for the parasite recovering, from exsudates or from brains. At the acute infection (3 to 12 days the positivity at the direct examination was: peritoneal exsudate 19/19, lung 12/14, muscle 6/9, heart 4/9 and brain 1/3. After inoculation: peritoneal exsudate 5/5, heart 9/9, lung 13/13, muscles 14/17 and brain 2/2. Then, there were 9 new positive organs. At the chronic infection, between 10 and 495 days, the positivity was, at direct examination: brain 28/32, heart 0/4 and muscle 0/4. After inoculation: brain 6/6, heart 14/29 and muscle 16/26. After that a new positive mouse was detected, which leads to 29 the positivity for all mice, or 90,6%. Finally the positivity for the acute phase was: peritoneal exsudate 19/19 (100%, heart 15/17 (88,5%, muscle 12/14 (85,7%, lung 14/14 (100% and brain 2/3 (66,6%. For the chronic phase: brain 28/32 (87,5%, muscle 16/28 (57,1% and heart 14/31 (45,1%. At the end of experience, at the 495th day, the brain still presented large cysts by direct examination and also the heart and muscle were positives after inoculation. Conclusions: 1st on mice the Toxoplasma gondii remained for 495 days, mainly on the brain, but also on heart and muscle; 2nd the lungs direct examination could be useful as substitute of the peritoneal exsudate examination; 3th organs inoculations are necessary for the discovery of new infected mice; 4th the cyst activity was demonstrated by its gradative increase during the chronic infection, and by its recovery in tissues after a long time.

  3. ISOLATION AND IDENTIFICATION OF Mycobacterium sp. FROM SWINE SLAUGHTERED IN UBERLÂNDIA (MG) ISOLAMENTO E IDENTIFICAÇÃO DE Mycobacterium sp.EM SUÍNOS ABATIDOS NO MUNICÍPIO DE UBERLÂNDIA (MG)

    OpenAIRE

    Cleusely Matias de Souza; Albenones José de Mesquita; Lilian de Souza

    2007-01-01

    In this present study 103 samples of pigs from the Uberlândia area were submitted to bacteriological analyses. Tissues with abscess were present in 12 samples; lymphonodes without lesions in 20 samples and 71 of them were lymphonodes with lesions “tuberculosis-like infection”. The bacteriological analyses of the 103 samples have permitted the isolation of 12 mycobacterias strains, all of them from the 71 lymphonode...

  4. Isolamento e identificação pela imunofluorescência direta e reação em cadeia de polimerase do vírus da artrite-encefalite caprina

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Castro R.S.

    1999-01-01

    Full Text Available Amostras do vírus da artrite-encefalite caprina (CAEV de animais dos estados de Minas Gerais e Pernambuco foram isoladas a partir de explantes de membrana sinovial (MS (amostras BrMg 1-01, BrMg 2-01, BrMg 2-02, BrMg 2-03 e BrPe 1-01 ou de co-cultivo de leucócitos com MS (BrMg 1-02. As amostras foram identificadas pelo efeito citopático-ECP (formação de sincícios, imunofluorescência direta (IFD e reação em cadeia de polimerase (PCR aperfeiçoada para amplificação de parte do gene gag da amostra CAEV Cork. O estudo do ECP revelou a presença de amostras pouco (BrMg 1-01 e BrMg 1-02 ou fortemente indutoras de ECP (BrMg 2-01, BrMg 2-02, BrMg 2-03 e BrPe 1-01. A IFD mostrou resultado positivo em células de todas as monocamadas infectadas pelas amostras isoladas e em células de referência (CAEV Cork e visna/maedi K 1514. A PCR do DNA de células infectadas resultou na amplificação específica de um fragmento de DNA de 286pb da amostras testadas, exceto do visna/maedi K 1514.

  5. Isolamento, caracterização de locos microssatélites e estimativa da variabilidade genética de Brycon amazonicus (Spix & Agassiz, 1829) (Characidae: Bryconinae) em ambiente natural e cativeiro

    OpenAIRE

    Araujo , Gisele Torres Clímaco de

    2012-01-01

    A pesca e aquicultura são atividades econômicas de grande importância para a Região Amazônica, tanto para fins de subsistência como para fins comerciais. Dentre as espécies nativas de exploração na aquicultura, o matrinxã (Brycon amazonicus) destaca-se por apresentar bom ganho de peso e boa taxa de crescimento em cativeiro, aceitar as rações comerciais com facilidade e conseguir bons resultados na reprodução induzida. Entretanto, é importante saber como se encontra o perfil genético desse pei...

  6. Isolamento e identificação da microbiota periodontal de cães da raça Pastor Alemão Isolate and identify of periodontal microbiota of German Shepherd dogs

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Carla Afonso da Silva Bitencourt Braga

    2005-04-01

    Full Text Available A microbiota indígena gengival de cães não está totalmente descrita, sendo sua identificação uma etapa importante no estabelecimento da etiopatogenia e terapia da doença periodontal. O objetivo deste trabalho foi isolar e identificar a microbiota periodontal de cães da raça Pastor Alemão, considerando sítios saudáveis e com doença periodontal. Foram utilizados 29 cães, com idade variando de três a seis anos, sendo analisados espécimes clínicos de sítios periodontais saudáveis de 12 cães e sítios com periodontite de outros 17. Foram isoladas 672 amostras microbianas, com predomínio dos gêneros Pasteurella, Staphylococcus, Porphyromonas e Fusobacterium. A microbiota dos sítios saudáveis equiparou-se à dos sítios doentes, tratando-se de uma microbiota indígena. A microbiota dos sítios doentes apresentou-se aumentada em relação a dos sítios saudáveis, indicando mudança do ambiente do sítio periodontal.The indigenous gingival microbiota of dogs is not totally described, although such identification is an important step to establish the etiopathogenesis and adequate therapy for the periodontal disease. The aims of this study were to isolate and identify the periodontal microbiota of German Shepherd dogs from healthy and with periodontal desease sites. Twenty nine German Shepherd dogs from three to six years of age were used in this study. Clinical specimens were analysed from healthy periodontal sites of 12 dogs and sites presenting gingivitis of 17 dogs. A total amount of 672 microbial samples, were isolated where the predominant genera were Pasteurella spp., Staphylococcus spp., Porphyromonas spp. and Fusobacterium spp. The microbiological population of the affected sites was similar to the healthy sites, consisting on an indigenous microbiota. The microbiota on the affecteded sites was higher in number than on the healthy sites, showing change in the environment of the periodontal sites.

  7. Comparação da eficiência dos caldos de enriquecimento seletivo no isolamento de Salmonella Dublin Comparison of the efficiency of selective enrichment broths for Salmonella Dublin isolation

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    D.G. Silva

    2008-06-01

    Full Text Available The aim of this study was to compare three different selective enrichment broths: Rappaport-Vassiliadis (RV, selenite cystine (SC and Muller-Kauffmann tetrathionate (MKT for Salmonella Dublin isolation from faecal samples of calf experimentally infected. The bacteriological procedure involved pre-enrichment stages in Hajna-GN broth (only for the samples inoculated in RV broth, selective enrichment, culture in modified brilliant green agar (BGA, presumptive biochemistry tests (using triple-sugar-iron agar and lysine-agar and slide agglutination test with poli-O and poli-H Salmonella antiserum. The effects of enrichment temperatures using RV broth were also evaluated (37ºC and 42ºC. SC broth was significantly more efficient in the isolation of Salmonella Dublin (P<0,05, whereas RV broth incubated at 42ºC had a lower efficiency in the microbiological isolation.

  8. Isolamento do gene ALS e investigação do mecanismo de resistência a herbicidas em Sagittaria montevidensis Isolation of the ALS gene and investigation of the mechanism of herbicide resistance in Sagittaria montevidensis

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Aldo Merotto Junior

    2010-11-01

    Full Text Available Diversos biótipos de sagitária (Sagittaria montevidensis Cham. & Schlecht foram constatados como resistentes a herbicidas inibidores da enzima ALS no Brasil e em outros locais do mundo. Os objetivos deste trabalho foram isolar e sequenciar o gene ALS de sagitária de forma a identificar a ocorrência de mutações relacionadas ao mecanismo de resistência de insensibilidade do local da ação de herbicidas. O material vegetal consistiu de sementes de sagitária coletadas em lavouras de arroz irrigado localizadas na região Sul do Estado de Santa Catarina. Nove pares de sequências nucleotídicas iniciadoras foram desenhadas para a amplificação dos domínios C, A e D do gene ALS. As sequências nucleotídicas dos fragmentos amplificados com quatro pares de oligonucleotídeos inciadores resultaram em amplicons com 360 a 393 nucleotídeos. Essas sequências apresentaram homologia com o gene ALS padrão de Arabdopsis thaliana e arroz, possuindo apenas três mutações de ponto. Uma dessas alterações foi a mutação Pro197Phe, que é relacionada à ocorrência de resistência à herbicida em diversas espécies vegetais. As sequências obtidas evidenciaram que o gene ALS avaliado encontrava-se em heterozigose. Esses resultados sugerem a ocorrência de insensibilidade do local de ação como mecanismo de resistência a herbicidas inibidores de ALS em sagitária. A prevenção e o controle da resistência a herbicidas inibidores da ALS em sagitária devem ser fundamentados na rotação de herbicidas com diferentes mecanismos de ação.California arrowhead (Sagittaria montevidensis Cham. & Schlecht is an aquatic weed often found in rice paddy fields. Several biotypes of California arrowhead resistant to ALS-inhibiting herbicides were found in Brazil and in several rice fields worldwide. The objective of this study was to sequence the ALS gene of California arrowhead and to identify the occurrence of mutations related to target site insensitivity as the mechanism of herbicide resistance. The plant material consisted of seeds collected in rice paddy fields located in the state of Santa Catarina, Brazil. Nine pairs of primers were designed for the amplification of the domains C, A and D of the ALS gene. PCR reactions with four pairs of primers resulted in amplification of fragments with size close to expected, ranging from 360 to 393 nucleotides. These sequences showed high homology to the standard ALS gene Arabdopsis thaliana and rice having only three point mutations. One of these mutations was Pro197Phe that is related with herbicide resistance in several weeds. The sequences obtained indicated that the ALS gene evaluated was heterozygous. These results suggest the occurrence of insensitivity of the site of action as the mechanism of resistance to ALS-inhibitors herbicides in California arrowhead. The prevention and control of resistance to ALS-inhibitors in California arrowhead should be based on the rotation of herbicides with different mechanisms of action.

  9. Pitiríase versicolor: isolamento e identificação das principais espécies de Malassezia Pityriasis versicolor: isolation and identification of the main species

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Valéria Maria de Souza Framil

    2010-02-01

    Full Text Available As espécies do gênero Malassezia isoladas foram: Malassezia sympodialis (16,66%, Malassezia furfur (12,50%, Malassezia globosa (11,45% e Malassezia slooffiae (2,10%. A Malassezia sympodialis foi a espécie que predominou em nosso estudo. As espécies de Malassezia identificadas não mostraram correlação com as variantes clínicas e com a distribuição das lesões de pitiríase versicolor quanto às regiões do corpo.Species of the genus Malassezia isolated were: Malassezia sympodialis (16.66%, Malassezia furfur (12.50%, Malassezia globosa (11.45%, and Malassezia slooffiae (2.10%. Malassezia sympodialis predominated in the study. The species of Malassezia identified did not show correlation with clinical variants and with the distribution of pityriasis versicolor lesions in relation to areas of the body.

  10. Considerações sôbre caso humano de leptospirose canícola, com isolamento e identificação do agente etiológico pela primeira vez no Brasil

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Marcelo O. A. Corrêa

    1971-02-01

    Full Text Available São efetuadas pelos autores consideração sôbre caso humano de leptospirose motivada pela Leptospira canicola, tendo o agente etiológico sido isolado através de hemocultura realizada no quinto dia de evolução da doença. Como manifestações fundamentais, ocorreram febre e cefaléia acentuadas, além de mialgia e vômitos repetidos. Foi abrupto o início dos sintomas; evidências de comprometimento meníngeo estiveram ausentes, ao contrário puderam ser coletadas informações tradutoras de presença de agressão renal. No decurso do processo mórbido não houve icterícia. A cura teve lugar de maneira razoavelmente rápida. Basicamente, salientaram os autores que, no Brasil, êsse acometimento correspondeu ao primeiro em relação ao qual pôde ser isolado e devidamente identificado o espiroquetídeo responsável e, mais precisamente, a Leptospira canicola.

  11. As práticas de precauções/isolamento a partir do diagnóstico de internação em unidade de moléstias infecciosas

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Rosely Moralez de Figueiredo

    2006-12-01

    Full Text Available Objetivando analisar a utilização de uma unidade de internação para doenças infecciosas em um hospital geral de médio porte, foram avaliados 95 prontuários sendo 72,6% dos pacientes do sexo masculino, a média de idade de 41 anos e a média de internação de 15,7 dias. A taxa de óbito foi de 12,6%. Os principais diagnósticos médicos foram AIDS em 52,4% dos pacientes e tuberculose em 6,3% dos pacientes. A especialidade infectologia internou 35,8% dos pacientes. Quanto às precauções para transmissão 14,7% necessitaram de precauções aérea, 8,5% de contato, 1,1% gotículas e os demais 75,7% precauções padrão. Evidencia-se grande diversidade de critérios para internação na unidade e não apenas o caráter infeccioso da doença, além da manutenção de registros do termo genérico “isolamento”. Sugere-se a uniformização da prática adotada, programas de educação em serviço que visem à apropriação e aplicação do conhecimento técnico, sobre as precauções, por toda equipe de saúde.

  12. Isolamento e caracterização de microrganismos em leite cru refrigerado e leite UHT no estado de Goiás e desenvolvimento de filme ativo antimicrobiano para inibição de Bacillus sporothermodurans

    OpenAIRE

    2010-01-01

    O leite por ser um alimento rico, constituí-se em um meio natural para o desenvolvimento de vários microrganismos, principalmente bactérias; desta forma, muito perecível. É necessário tratamento térmico o mais rápido possível, a fim de manter a qualidade. Uma nova tecnologia vem sendo utilizada na melhoria dos alimentos, denominada de embalagem ativa, como os filmes antimicrobianos, na intenção de controlar o desenvolvimento microbiano no produto. O objetivo deste trabalho foi de avaliar a qu...

  13. ISOLAMENTO, IDENTIFICAÇÃO E CARACTERIZAÇÃO QUANTO À RESISTÊNCIA AO PH ÁCIDO E PRESENÇA DE SAIS BILIARES DE CEPAS PROBIÓTICAS DE LEITES FERMENTADOS COMERCIAIS

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Diala Urnau

    2012-02-01

    Full Text Available O objetivo deste trabalho foi isolar e caracterizar cepas de Lactobacillus e Bifidobactérias a partir de leites fermentados comerciais e analisar sua resistência ao pH ácido e sais biliares. Os microrganismos foram isolados de leites fermentados comerciais através da técnica 'spreadplate' em meio seletivo MRS suplementado com neomicina, paromomicina, ácido nalidíxico e cloreto de lítio. Posteriormente, as cepas foram caracterizadas conforme a coloração de Gram e a prova da catalase. Foi possível identificar através do kit comercial Api 20A os microrganismos Actinomyces israelli, Actinomyces haeslundii, Lactobacillus acidophilus/ jensenii e Bifidobacterium spp 2 e através do kit comercial Api 50CHL Medium foi possível identificar os microrganismos Lactococcus lactis ssp lactis 2 e Lactobacillus paracasei ssp paracasei 1. Foram realizados testes de resistência em pH de 3,0; 2,5 e 2,0 durante 3 e 6 horas e resistência aos sais biliares na concentração de 0,3%. Ambas as cepas foram resistentes ao pH de 3,0 durante 3 horas e 6 horas e aos sais biliares.

  14. Isolamento, fracionamento e caracterização de paredes celulares de raízes de mandioca (Manihot esculenta, Crantz Isolation, fractionation and characterization of cassava (Manihot esculenta, Crantz root cell walls

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Lara Tschopoko Pedroso Pereira

    2004-03-01

    Full Text Available Durante a cocção de mandiocas o amido é gelatinizado e as paredes celulares sofrem alterações físicas e químicas que modificam a coesão das células e causam o amaciamento dos tecidos. Isolar, fracionar e caracterizar paredes celulares durante o envelhecimento de raízes, de duas cultivares, foram os objetivos deste trabalho. O amido foi eliminado por tamização e hidrólise enzimática e o material de paredes celulares foi fracionado em celulose, hemicelulose e pectina. Quantitativamente celulose foi a maior fração constituindo entre 57,2 e 70% do material inicial de paredes celulares isoladas, seguido por pectina e hemicelulose. O material isolado como paredes celulares diminuiu com o tempo de plantio das raízes e a concentração de celulose foi menor no material isolado de raízes mais velhas. A fração pectina diferiu em concentração de açúcares entre raízes de idades diferentes, sendo mais alta em raízes mais velhas enquanto a concentração de ácidos urônicos diferiu entre idades e cultivares.During cooking of cassava tubers starch gelatinizes and there are physical-chemical alterations in cell wall material, reducing intercellular cohesion and softening the tissue, playing an important role in cooking time. Cell wall material from tubers at two harvesting ages of two cultivars were isolated, fractionated and evaluated. Starch was eliminated by wet sieving and enzymatic hydrolysis and the cell wall material was fractionated into cellulose, hemicellulose and pectin. Quantitatively cellulose had the highest concentration varying from 57.2 to 70% of the initial isolated cell wall material, followed by pectin and hemicellulose. Cell wall material isolated decreased with the age of the roots and cellulose concentration decreased in the older roots. Pectin fraction differed in sugar concentration between roots of different ages, higher in older roots while for uronic acid content there were differences for age of roots and cultivars.

  15. Isolamento, armazenamento e determinação da colonização por fungos “dark septate” a partir de plantas de arroz. = Isolation, storage and determination of fungal colonization “dark septate” from rice plants.

    OpenAIRE

    Karen Gonçalves Ribeiro; Gilmara Maria Duarte Pereira; Cátia Aparecida Mosqueira; Alexandre Cardoso Baraúna; Marcos José Salgado Vital; Krisle da Silva; Jerri Édson Zilli

    2011-01-01

    Endophyte fungi known as DSEF can be plant-growth-promoting. Aiming to improve a methodology for the isolation, storage and determine the rice roots colonization by “dark septate”, a study was developed based on the achievement of these microorganisms in Oryza glumaepatula plants collected in Amazon region. The plant roots of twelve O. glumaepatula samples were sectioned, disinfected, and placed in plates with agar-malte medium added of chloramphenicol, sulphametazole and trimetropin. The iso...

  16. Isolation of leptospira Serovars Canicola and Copenhageni from cattle urine in the state of Paraná, Brazil Isolamento de leptospiras dos Sorovares Canicola e Copenhageni em amostras de urina de bovinos no estado do Paraná, Brasil

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Francielle Gibson da Silva Zacarias

    2008-12-01

    Full Text Available In 2001, 698 urine samples were randomly collected from cattle at a slaughterhouse in the State of Paraná, Brazil. Direct examination using dark field microscopy was carried out immediately after collection. Five putative positive samples were cultured in modified EMJH medium, yielding two positive cultures (LO-14 and LO-10. Typing with monoclonal antibodies revealed that the two isolates were similar to Canicola (LO-14 and Copenhageni (LO-10. Microscopic agglutination test results show that Hardjo is the most common serovar in cattle in Brazil. Rats and dogs are the common maintenance hosts of serovars Copenhageni and Canicola. The excretion of highly pathogenic serovars such as Copenhageni and Canicola by cattle can represent an increasing risk for severe leptospirosis is large populations, mainly living in rural areas.No ano de 2001, 698 amostras de urina foram colhidas aleatoriamente, durante o abate em um frigorífico do Estado do Paraná, Brasil. O exame direto em microscópio de campo escuro foi realizado imediatamente após a colheita. As cinco amostras de urina positivas neste exame foram semeadas em meio EMJH modificado, sendo possível o crescimento de leptospiras em duas (LO-14 e LO-10. As estirpes isoladas foram tipificadas, por painel de anticorpos monoclonais, como mais similares ao perfil das amostras de referência dos sorovares Canicola (LO-14 e Copenhageni (LO-10. No Brasil, inquéritos sorológicos utilizando a prova de soroaglutinação microscópica mostram o predomínio de reações para o sorovar Hardjo em bovinos. Roedores e cães são os reservatórios mais comuns dos sorovares Copenhageni e Canicola, respectivamente. A eliminação dos sorovares Canicola e Copenhageni pela espécie bovina pode resultar em um aumento na ocorrência de casos graves de leptospirose humana, principalmente na população rural.

  17. Comparação do isolamento microbiológico e da reação em cadeia da polimerase no diagnóstico de salmonelose em bezerros infectados experimentalmente com Salmonella Typhimurium

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    D.G Silva

    2011-10-01

    Full Text Available The efficiency of microbiological culture and polymerase chain reaction (PCR for detection of Salmonella Typhimurium is compared in fecal samples of Holstein calves experimentally infected with 10(9 CFU of Salmonella Typhimurium. Seventy-two fecal samples were analyzed by microbiological culture and PCR associated with selenite cystine (SC and Muller-Kauffmann tethrationate (TMK selective enrichment broths. Regardless of the selective enrichment broth, the microbiological culture was significantly better than PCR for detection of positive samples of Salmonella Typhimurium. The selective enrichment broths SC and TMK had no effect on the efficiency of the microbiological culture. The SC broth was the best option as selective enrichment associated to PCR.

  18. Recovery of tungsten from wolframite from the Igarape Manteiga mine (Rondonia - Brazil) via acidic leaching; Isolamento do tungstenio da volframita da mina de Igarape Manteiga (Rondonia - Brasil) por lixiviacao acida

    Energy Technology Data Exchange (ETDEWEB)

    Paulino, Jessica Frontino; Afonso, Julio Carlos [Departamento de Quimica Analitica, Instituto de Quimica, Universidade Federal do Rio de Janeiro, RJ (Brazil); Mantovano, Jose Luiz; Vianna, Claudio Augusto; Cunha, Jose Waldemar Silva Dias da [Instituto de Engenharia Nuclear (IEN/CNEN-RJ), Rio de Janeiro - RJ (Brazil)

    2012-07-01

    We report results of the efficiency of tungsten extraction from wolframite concentrate (containing 61.5 wt % WO{sub 3}) from the Igarape Manteiga mine (state of Rondonia, Brazil) through acid leaching with strong mineral acids at 100 deg C and 400 rpm for 2-4 h. HCl yielded insoluble matter containing the highest WO{sub 3} content (90 wt %). This solid was dissolved in concentrated NH{sub 3(aq)} at 25 deg C and the insoluble matter filtrated. The filtrate was slowly evaporated. 70 wt % of the tungsten present in the starting concentrate material was recovered as ammonium paratungstate (APT). (author)

  19. Isolamento do alcalóide ricinina das folhas de Ricinus communis (Euphorbiaceae através de cromatografias em contracorrente Isolation of the alkaloid ricinine from the leaves of Ricinus communis (Euphorbiaceae through counter-current chromatography

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Ana Cristina Leite

    2005-12-01

    Full Text Available Droplet counter-current chromatography, rotation locular counter-current chromatography and high-speed counter-current chromatography were applied to the preparative separation of the alkaloid ricinine from the dichloromethane extracts of Ricinus communis leaves. The solvent system used was composed of dichloromethane-methanol-water (93:35:72 v/v/v and all techniques led to the isolation of large amounts of the alkaloid. The best result was obtained through HSCCC, since the ricinine yield was respectively 50% and 30% higher than when using RLCCC or DCCC.

  20. Isolation, characterisation and antibacterial activity studies of coumarins from Rhododendron lepidotum Wall. ex G. Don, Ericaceae Estudos de isolamento, caracterização e atividade antibacteriana de cumarinas de Rhododendron lepidotum Wall. ex G. Don, Ericaceae

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Shakeel-U-Rehman

    2010-12-01

    Full Text Available Six coumarins daphnin (1, daphnetin (2, daphnetin glucoside (3, rhodonetin (4, rhodonin (5 and umbelliferone (6 were isolated from the methanolic extract of Rhododendron lepidotum Wall. ex G. Don, Ericaceae (aerial part. The compounds and their acetyl derivatives were screened for antibacterial activity against Staphylococcus aureus ATCC-29213, methicillin resistant Staphylococcus aureus ATCC-15187, Escherichia coli ATCC-8739, Pseudomonas aeruginosa ATCC-9027 by microdilution method as compared to the reference ciprofloxacin. Compound 2 displayed the best antibacterial activity with MIC 125 μg/mL against S. aureus ATCC-29213 and MRSA ATCC-15187 followed by 4 which exhibited the MIC value of 250 μg/mL against all the four tested strains. All molecules showed better antibacterial activity than their acyl derivatives.Seis cumarinas dafinina (1, dafinetina (2, dafinetina glicosídeo (3, rodonetina (4, rodonina (5 e umbeliferona (6 foram isoladas do extrato metanólico das partes aéreas de Rhododendron lepidotum Wall. ex G. Don, Ericaceae. Os compostos e seus derivados acetilados foram testados para verificar sua atividade antibacteriana contra Staphylococcus aureus ATCC-29213, Escherichia coli resistente à meticilina, Staphylococcus aureus ATCC-15187, ATCC-8739, Pseudomonas aeruginosa ATCC-9027, pelo método de microdiluição, usando ciprofloxacina como referência. A substância 2 apresentou a melhor atividade antibacteriana com o MIC 125 μg/mL contra S. aureus ATCC-29213 e MRSA ATCC-15187 seguido pela substância 4, que apresentou o valor de CIM de 250 μg/mL contra as quatro cepas testadas. Todas as moléculas apresentaram melhor atividade antibacteriana do que seus derivados acetilados.

  1. Contribuições da terapia comunitária integrativa para usuários dos Centros de Atenção Psicossocial (CAPS: do isolamento à sociabilidade libertadora

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Mariana Albernaz Pinheiro de Carvalho

    2013-10-01

    Full Text Available O objetivo deste estudo foi analisar as contribuições da terapia comunitária integrativa considerando as mudanças de comportamentos de usuários de um Centros de Atenção Psicossocial (CAPS. Trata-se de uma pesquisa compreensivo-interpretativa de abordagem qualitativa, onde se utilizou a história oral temática. O cenário da investigação foi o CAPS Caminhar, localizado na cidade de João Pessoa, Paraíba, Brasil. O material empírico foi produzido a partir de entrevistas realizadas com seis colaboradores, e o produto desse material foi discutido com base na análise temática proposta por Minayo, que subsidiou a construção de dois grandes eixos temáticos: A terapia comunitária integrativa como práxis libertadora e mudanças que fazem a diferença. As histórias dos colaboradores revelaram que ocorreram mudanças significativas nos campos pessoal, profissional e comunitário, a partir da inserção deles nas rodas de terapia comunitária integrativa, pois se verificou que tal estratégia promoveu a recuperação dos processos de socialização natural que constituem a vida humana. Ficou claro que o uso da terapia comunitária integrativa está relacionado a propostas de inclusão e reabilitação psicossocial de seus participantes.

  2. Individual genomic DNA isolation of Entomogenous nematodes: the Deladenus study case Isolamento de DNA genômico de indivíduo de nematoide parasita de insetos: estudo de caso de Deladenus

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Guilherme Schnell e Schuhli

    2012-12-01

    Full Text Available Populational studies involve single individual DNA extraction in order to grant further genotyping data. In the case of some parasitic nematodes, the reduced dimensions and high individual number per infestation makes individual genotyping a difficult task. Aiming the development of a protocol we performed adjustments in available methods in order to acquire the best gain in purity and concentration of genomic DNA. Single specimens were digested in Worm Lysis Buffer and submitted to PCR amplification as a concept test. It was possible to obtain good amount and concentration of DNA from individuals. Quality was sufficient to grant subsequent ITS1 sequencing. Estudos populacionais envolvem a extração de DNA de um único indivíduo para permitir a genotipagem. No caso de alguns nematoides parasíticos, suas dimensões reduzidas e o grande número de indivíduos por infestação tornam a genotipagem difícil. Com o objetivo de desenvolver um protocolo, foram feitos ajustes em métodos já disponíveis, visando melhor ganho em pureza e concentração de DNA genômico. Espécimes foram digeridos em tampão de digestão de verme e submetidos à amplificação por PCR, como prova de conceito. Foi possível a obtenção de boa quantidade e concentração de DNA de indivíduos. A qualidade foi suficiente para garantir o sequenciamento da região ITS1.

  3. Isolation and characterization of a chitinase gene from entomopathogenic fungus Verticillium lecanii Isolamento e caracterização de um gene de quitinase do fungo entomopatogênico Verticillium lecanii

    OpenAIRE

    Yanping Zhu; Jieru Pan; Junzhi Qiu; Xiong Guan

    2008-01-01

    Entomopathogenic fungus Verticillium lecanii is a promising whitefly and aphid control agent. Chitinases secreted by this insect pathogen have considerable importance in the biological control of some insect pests. An endochitinase gene Vlchit1 from the fungus was cloned and overexpressed in Escherichia coli. The Vlchit1 gene not only contains an open reading frame (ORF) which encodes a protein of 423 amino acids (aa), but also is interrupted by three short introns. A homology modelling of Vl...

  4. Isolamento de Campylobacter jejuni em leite cru, água de estábulo e fezes de crianças portadoras de diarréira, Juiz de Fora - MG, 1985

    OpenAIRE

    Marcia Cristina de Sena Oliveira

    1988-01-01

    Com o objetivo de se verificar a prevalência da contaminação pelo Campylobacter jejuni foram analisadas 83 amostras de água de abastecimento e de bebedouro de animais, 169 amostras de água residual de latões e 192 amostras de leite cru, provenientes de propriedades rurais da bacia leiteira de Juiz de Fora - MG, no período de agosto a dezembro de 1985. Concomitantemente, foram analisadas amostras de fezes de 50 crianças com idades variando entre zero e 13 anos, portadores de diarréia, internad...

  5. Isolamento, seleção de bactérias e efeito de Bacillus spp. na produção de mudas orgânicas de alface

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Gomes Andréa M.A.

    2003-01-01

    Full Text Available Isolados bacterianos epifíticos e endofíticos, obtidos de plantas sadias de alface, foram avaliados para promoção de crescimento de mudas e plantas, respectivamente em estufa e campo de cultivo orgânico (Chã Grande-PE. Nos experimentos em estufa, foi utilizada a cultivar Verônica e em campo, as cultivares Verdinha e Verônica. Os isolados foram aplicados por bacterização simultânea nas sementes e substrato. Em campo, foram utilizados os isolados mais eficientes, C25 (Bacillus thuringiensis subvar. kenyae e C116 (Bacillus pumilus, separadamente e em mistura, após teste de compatibilidade. Em estufa, foram avaliadas a matéria fresca de raízes (MFR, da parte aérea (MFPA e total (MFT, 21 dias após a bacterização. Em campo, foi determinado o peso da matéria fresca total de plantas comercializáveis 21 e 28 dias após o transplante, respectivamente para as cultivares Verdinha e Verônica. Os mecanismos de ação de BPCP analisados foram produção de ácido indol acético, ácido cianídrico, solubilização de fosfatos e alterações dos teores foliares dos macronutrientes, N, P, K, Ca e Mg. Em estufa, as mudas apresentaram aumento significativo em relação à testemunha para MFR, MFPA e MFT quando foi utilizado o isolado C116 e para MFR e MFT utilizando-se o C25. No campo, não houve promoção significativa no crescimento nas plantas das cultivares Verdinha e Verônica, tratadas com C25 e C116 separadamente ou em mistura. Dos mecanismos de ação analisados verificou-se apenas elevação significativa (P=0,05 do teor foliar de N pelo isolado C25.

  6. Chemical constituents of Parmotrema lichexanthonicum Eliasaro and Alder: isolation, structure modification and evaluation of antibiotic and cytotoxic activities; Constituintes quimicos de Parmotrema lichexanthonicum Eliasaro and Adler: isolamento, modificacoes estruturais e avaliacao das atividades antibiotica e citotoxica

    Energy Technology Data Exchange (ETDEWEB)

    Micheletti, Ana C.; Beatriz, Adilson; Lima, Denis Pires de; Honda, Neli K. [Universidade Federal de Mato Grosso do Sul (UFMS), Campo Grande, MS (Brazil). Dept. de Quimica]. E-mail: nkhonda@nin.ufms.br; Pessoa, Claudia do O; Moraes, Manoel Odorico de; Lotufo, Leticia Veras; Magalhaes, Hemerson Iury Ferreira [Universidade Federal do Ceara (UFC), Fortaleza, CE (Brazil). Dept. de Fisiologia e Farmacologia; Carvalho, Nadia C.P. [Universidade Federal de Mato Grosso do Sul (UFMS), Campo Grande, MS (Brazil). Hospital Universitario. Lab. de Microbiologia

    2009-07-01

    From the lichen Parmotrema lichexantonicum were isolated the depsidone salazinic acid, the xanthone lichexanthone, and the depside atranorin. The two major compounds, salazinic acid and lichexanthone, were selected for structure modifications. Salazinic acid afforded O-alkyl salazinic acids, some of them potentially cytotoxic against tumor cell lines (HCT-8, SF-295 and MDA/ MB - 435). From lichexanthone were obtained norlichexanthone, 3-O-methylnorlichexanthone, 3-O-methyl-6-O-prenylnorlichexanthone, 3,6-di-O-prenyl-norlichexanthone, 3,6-bis[(3,3-dimethyloxyran-2-il)methoxy] -1-hydroxy-8-methyl-9H-xanten-9-one and 3,6-bis[3-(dimethylamine)propoxy]-1-hydroxy-8-methyl- 9H-xanten-9-one. The last compound was the most active against S. aureus. (author)

  7. Isolation of microorganisms of cheese whey with lipolytic activity for removal of COD Isolamento de microrganismos do soro de queijo com atividade lipásica para remoção de DQO

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Eliane Hermes

    2013-04-01

    Full Text Available The aim of this study was to isolate microorganisms that produce lipase and to assess the efficiency of COD removal intreatment of cheese whey under different operating conditions. The microorganisms were isolated from cheese whey and a commercial product; it was selectedthreemicroorganisms that obtained the best response to the lipolytic activity test through the enzyme index. Then, the microorganisms were inoculated in sterilized cheese whey samples, for two pH values (6.2 and 7.0, incubated at 35 °C and 150 rpm in shaker and the lipolityc activity and the efficiency of COD removal were measured in two time periods (24 and 48h. After incubation, it was observed that the treatments showed a good removal efficiency of COD for the pre-treatment and the isolated microorganism (S1 from the cheese whey showed the highest lipase production. Regarding the pH and time variables, there was not significant effect between the two evaluated factors. Among all treatments, T2 (S1, pH 7.0 and 24h obtained more enzyme production (4.87 U mL-1.O objetivo deste estudo foi isolar microrganismos produtores de lipase e avaliar a eficiência de remoção de DQO no tratamento de soro de leite sob diferentes condições operacionais. Os microrganismos foram isolados a partir do soro de queijo e de um produto comercial,e foram selecionados os três microrganismos que obtiveram a melhor resposta no teste da atividade lipolítica, através do índice enzimático. Em seguida, inocularam-se os micro-organismos em amostras de soro de queijo esterilizado, para dois valores de pH (6,2 e 7,0, incubaram-se a 35 ºC e 150 rpm em shaker e mensuram-se em dois períodos de tempo (24 e 48 h a atividade lipásica e a eficiência de remoção de DQO.Após a incubação, observou-se que os tratamentos apresentaram boa eficiência de remoção de DQO para o pré-tratamento,e o microrganismo (S1 isolado a partir do soro de queijo apresentou a maior produção de lipase. Com relação às variáveis pH e tempo, não houve efeito significativo entre os dois fatores avaliados. Entre todos os tratamentos aplicados, T2 (S1, pH 7,0 e 24 h foi o que obteve maior produção enzimática (4,87 U mL-1.

  8. Isolamento de Pasteurella spp. e Vibrio spp. em robalos (Dicentrarchus labrax: susceptibilidade a diferentes grupos de antibióticos Isolation of Pasteurella spp. and Vibrio spp. in European sea bass (Dicentrarchus labrax: susceptibility to different antibiotic groups

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    M.J. Saavedra

    2004-04-01

    Full Text Available The most frequent infectious diseases that affect fish are those of bacterial origin. In European sea bass fish farms (Dicentrarchus labrax are included Vibrio spp., Pasteurella piscicida and Myxobacter spp. In addition to these, it is also possible to find, although lesser frequently, other pathogenic agents such as Pseudomonas spp., Aeromonas spp., Staphylococcus epidermis, Streptococcus spp. and Enterobacter spp. The presence of these micro-organisms in fish farms contributes for a significant decrease in fish production and subsequent loss of profitability in these aquaculture units. The use of antibiotics may therefore be necessary as a prophylactic measure although their systematic utilization leads to the development of strains of antibiotic resistant bacteria. Bearing that in mind, a survey was conducted on the susceptibility of isolated strains of bacteria found in juvenile European sea bass. It was concluded that chloranphenicol and tetracycline are two important antibiotic alternatives for therapy against isolated bacterial agents.

  9. Contagem de células somáticas e isolamento de agentes causadores de mastite em búfalas (Bubalus bubalis Somatic cell count and mastitis causing pathogens isolation in water buffaloes (Bubalus bubalis

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    L.B. Carvalho

    2007-02-01

    Full Text Available The research was accomplished in eight dairy water buffalo herds, randomically choosen in Região do Alto São Francisco, State of Minas Gerais, Brazil. Information was collected from March to November, 2003 during 270 days of observation. In order to determine the somatic cell count (SCC in presence or absence of microbial isolation, 1,393 samples were collected from 285 lactating females and microbiological exams and SCC were done. Samples obtained from udders without evidence of clinical or subclinical inflammation showed infection for a great variety of microbial mastitis pathogens. The low SCC did not necessarily indicate the absence of intramammary infection, suggesting that SCC patterns used for bovine cannot be appropriate in order to control mastitis in buffalo herds.

  10. Isolamento e sensibilidade a quimioterápicos de streptococcus spp envolvidos na mastite clínica e subclínica de bovinos da microrregião de Araguaína, Tocantins

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Bruna Alexandrino

    2015-11-01

    Full Text Available The bovine mastites is the main dairy cattle’s disease due to its prevalence, causing a severe economic impact in the world. Its etiology is complex, but the main agente is the Staphylococcus aureus, followed by the Streptococcus spp. The present study aims at isolating the micro-organismes belonged to the gender Streptococcus and presented in the cow’s milk of the Araguaina’s micro-region, and test its sensitivity to several drugs available at the market. A total of 148 animals were used, totaling 544 mammary quarters available. Into these quarters, 294 milk’s samples were asseptically recolted among five properties designed from A to E, in which 121 samples are from A’s property, 36 from B, 20 from C, 74 from D and 43 from E. The properties A and C employ the mechanic milking, while the properties D and E employ hand milking. There were observed an overall prevalence of 30,51% (166/544 for the disease, in which 4,78% (26/544 and 25,74% (140/544 were detected clinical and subclinical mastitis, respectively. The laboratorial analysis of the samples (arrangement and catalase didn’t shown any evidence of Streptococcus’ microorganisms, thus being an evidence of the involving of Staphylococcus and rod bacteria. Consequently, it is concluded that the gender Streptococcus isn’t significant into the prevalence in both of mastitis – clinical and subclinical’s one – in the micro-region of Araguaina, Tocantins.

  11. Isolamento e caracterização de espécies de Pythium de ambientes aquáticos no Estado do Rio Grande do Sul e avaliação da patogenicidade em modelo experimental

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Cristina G. Zambrano

    Full Text Available RESUMO: Foram coletadas 186 amostras de água de ambientes pantanosos em 13 municípios das regiões Sul, Central e Oeste do Rio Grande do Sul, Brasil, com o objetivo de isolar e caracterizar espécies de Pythium e avaliar a sua patogenicidade empregando coelhos como modelo experimental. Em 11,8% (n=22 das águas coletadas foram isoladas diferentes espécies de Pythium incluindo: P. insidiosum (n=1, P. catenulatum (n=3, P. pachycaule voucher (n=1, P. rhizo-oryzae (n=3, P. torulosum (n=4 e Pythium spp. (n=10. Zoósporos desses micro-organismos foram produzidos in vitro e inoculados por via subcutânea em coelhos, os quais foram avaliados durante 45 dias. Dentre os oomicetos testados, apenas P. insidiosum evidenciou patogenicidade, causando pitiose no modelo experimental, evidenciando que, em nossas condições, apenas esta espécie de Pythium é patógena para mamíferos.

  12. Solar distiller of pyramidal covering and isolation in composite material the Plaster base and EPS; Destilador solar de cobertura piramidal e isolamento em material composito a base de Gesso e EPS

    Energy Technology Data Exchange (ETDEWEB)

    Santos, R. D.; Ribeiro, F. A.; Mendes, J. U.; Lima, R. S.; Souza, L. G.; Abreu, R. F.

    2008-07-01

    To demonstrate then term viability calorific and economic of the material, compared to the others conventional distiller, here is presented a solar distiller os simple stage, with has as main differential characteristics the geometry of the covering and the material used to make its coating. the model built has an area of 0,25 m{sup 2} and pyramidal covering, witch allows the collection of the distillate water in the four faces, different of just two like is found in the conventional distiller, besides promote the absorption of the radiation because of its versatility about the positioning of the sun. Not despite, its built is favored for the low cost associated and the agility in the process because it is made with a mix of gypsum, EPS ground and water, witch also attributes to the distiller thermal properties more favorable to the process of distillation. (Author)

  13. Otimização das condições de cultivo de \\'Humicola grisea\\' var. \\'thermoidea\\', visando produção e isolamento de metabólitos secundários biológicamente ativos

    OpenAIRE

    Willian Jonis Andrioli

    2008-01-01

    O fungo Humicola grisea var. thermoidea foi submetido a diferentes condições de cultivo com o intuito de determinarem-se as melhores condições para produção de conídios, crescimento e produção de metabólitos secundários com atividade biológica. Para tal foram desenvolvidos experimentos avaliando dois parâmetros: meio fermentativo e tempo de incubação. Os meios fermentativos líquidos utilizados foram Czapek, Jackson e Vogel em condições de agitação (120 rpm), e os tempos avaliados foram 72, 96...

  14. Caracterização da espuma rígida de poliuretano (PU) derivada de óleo de mamona para isolamento térmico na construção civil

    OpenAIRE

    Grace Tiberio Cardoso

    2010-01-01

    Este trabalho teve como objetivo o estudo da espuma rígida de poliuretano (PU) derivada de óleo de mamona para aplicação como forro na isolação térmica de sistemas de cobertura. Dentro deste objetivo foram caracterizadas as suas propriedades termomecânicas e avaliado o seu comportamento térmico quando aplicada como forro em células de teste em quatro situa-ções diferentes. As caracterizações termomecânicas da espuma rígida de poliuretano derivada de óleo de mamona foram realizadas utilizando ...

  15. Avaliação da reação em cadeia da polimerase e do isolamento bacteriológico convencional na detecção de Salmonella Dublin em amostras de fezes de bezerros infectados experimentalmente

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    D.G. Silva

    2010-06-01

    Full Text Available The efficiency of the Polymerase Chain Reaction (PCR combined with selective enrichment broth was compared with the standard microbiological techniques for detection of Salmonella Dublin in fecal samples of 10 to 15-days-old Holstein calves, experimentally infected with 10(8 CFU of Salmonella Dublin. Seventy-six fecal samples were analyzed using PCR associated with selenite cystine (SC and Muller-Kauffmann tetrathionate (TMK broths and standard microbiological techniques. Regardless of the selective enrichment broth used, the standard microbiological techniques were significantly better than PCR in detection of positive samples of Salmonella Dublin. However, the simultaneous use of both techniques provided detection of a larger number of positive samples. The SC broth was the best option as selective enrichment in both techniques.

  16. Isolamento de bactérias aeróbias e sua sensibilidade a antimicrobianos em processos de osteomielite canina Aerobic bacterial isolates and susceptibility to antimicrobial agents in canine osteomyelitis

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    A.C. Simionato

    2003-04-01

    Full Text Available O objetivo deste trabalho foi estudar a presença de bactérias aeróbias em 20 cães com osteomielite, decorrente de exposição óssea. Na identificação das bactérias utilizou-se o sistema API-Bio Mérieux e testou-se a sensibilidade dos microrganismos in vitro, pelo método de difusão em ágar, frente a 14 diferentes antibacterianos. O osso mais acometido pela infecção foi a tíbia (35%. Isolaram-se 68,3% de bactérias Gram positivas e 31,7% de Gram negativas. Staphylococcus spp, Streptococcus spp e Enterococcus spp foram os gêneros mais freqüentes, representando respectivamente 34,1%, 14,6% e 14,6% do total de bactérias (41 cepas. Enterobactérias foram isoladas em 26,8% das amostras. Os cocos Gram positivos apresentaram maior sensibilidade à amoxicilina associada ao ácido clavulânico. Os microrganismos Gram negativos, tanto as bactérias da família Enterobacteriaceae como as do gênero Pseudomonas, apresentaram altos índices de resistência.The aim of this work was to detect aerobic bacteria in osteomyelitis process in dogs with bone exposure. The API-Bio Mérieux Identification System was used to identify the bacteria. Susceptibility in vitro was verified by the agar diffusion method, to 14 different antibiotics. The most frequent bone involved was tibia (35%. Gram positive cocci represented 68.3% from isolates and the Gram negative bacteria 31.7%. Staphylococcus spp, Streptococcus spp and Enterococcus spp were the most frequent genus, representing, respectively, 34.1%, 14.6%, and 14.6% of the total bacteria strains (41 strains. Enterobacteria were isolated in 26.8%. Cocci Gram positive presented good susceptibility to amoxicillin associated with clavulanic acid. Gram negative microorganisms, the enterobacteria and Pseudomonas sp, showed high resistance profile.

  17. Isolation and characterization of hemolytic bacteria Fish disc and Neon RainbowIsolamento e caracterização de bactérias hemolíticas de Acará Disco e Neon Arco-Íris

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    José Luiz Pedreira Mouriño

    2012-05-01

    Full Text Available The aim of this study was to isolate, identify and determine the ability of potential pathogenic bacteria hemolytic mite Disco (Symphysodon discus and Neon Rainbow (Melanotaenia praecox, and define which of the antibiotic Trimethoprim, Florfenicol, Chloramphenicol, Norfloxacin, Erythromycin, Bacitracin, Enrofloxacin, Tetracycline, and Furazolidone Clindamycin has better inhibitory effect in vitro, and determine the minimum inhibitory concentration (MIC for Chloramphenicol, Norfloxacin, Erythromycin and Enrofloxacin. In an outbreak of ornamental fish deaths were isolated nine strains of Gram negative, hemolytic where 3 were identified, two as Vibrio cholerae and one as Citrobacter braakii. With these strains were performed antibiogram and was determined the minimum inhibitory concentration at two different temperatures (22 and 30 ° C. Antibiotics Enrofloxacin, Norfloxacin, florfenicol, chloramphenicol and trimethoprim showed the best results in vitro inhibition against the Vibrio cholerae, and Citrobacter braakii. The MIC increased in 30 ° C for erythromycin and enrofloxacin against pathogens, while for Florfenicol and norfloxacin the MIC was not influenced by temperature.O objetivo deste estudo foi isolar, identificar e determinar a capacidade hemolítica de possíveis bactérias patogênicas do Acará Disco (Symphysodon discus e Neon Arco-íris (Melanotaenia praecox, e definir qual o antibiótico entre Trimetoprim, Florfenicol, Cloranfenicol, Norfloxacina, Eritromicina, Bacitracina, Enrofloxacina, Tetraciclina, Furazolidona e Clindamicina possui melhor efeito inibitório in vitro, e determinar a concentração inibitória mínima (MIC para Cloranfenicol, Norfloxacina, Eritromicina e Enrofloxacina. Em um surto de mortalidade de peixes ornamentais foram isoladas nove cepas de bactérias Gram negativas, onde três hemolíticas foram identificadas, duas como Vibrio cholerae e uma como Citrobacter braakii. Com estas foram realizados antibiogramas e determinada a concentração inibitória mínima em duas diferentes temperaturas (22 e 30°C. Os antibióticos Enrofloxacina, Norfloxacina, Florfenicol, Cloranfenicol e Trimetoprim apresentaram os melhores resultados de inibição in vitro frente ao Vibrio cholerae e Citrobacter braakii. O MIC da Eritromicina e Enrofloxacina frente aos patógenos aumentou a 30°C, enquanto que para o Florfenicol e a Norfloxacina o MIC não foi influenciado pela temperatura.

  18. Isolamento das bactérias causadoras de infecções urinárias e seu perfil de resistência aos antimicrobianos Isolation of bacteria causing urinary tract infection and their antibiotic resistance profile

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Leandro Antonio Soares

    2010-11-01

    Full Text Available A infecção do trato urinário (ITU é uma das causas que frequentemente leva homens e mulheres a procurarem tratamento nas unidades municipais de saúde. O presente trabalho tem por objetivo identificar quais os microorganismos responsáveis por esta infecção e seu perfil de resistência aos antimicrobianos mais utilizados na rede municipal. Foram coletadas 120 amostras de urina de pacientes com suspeita clínica de ITU e processados pelo sistema de laminocultura nos meios CLED, MacConkey e EC cromogênico, no laboratório de microbiologia I do Centro Universitário Positivo (UNICENP. As amostras positivas foram identificadas e submetidas ao antibiograma, sendo 63,64% das infecções presentes causadas por Escherichia coli e 18,18% por Staphylococcus aureus. A faixa etária de 12 aos 33 anos é responsável por mais de 60% das infecções. Foi encontrado um alto índice de amostras contaminadas, mostrando uma dificuldade no entendimento das orientações para a coleta. Outro dado relevante é que dentro do total das amostras analisadas, 35,8% foram de gestantes. Os antimicrobianos de maior sensibilidade para os microorganismos responsáveis pelo ITU foram, em sua maioria, aqueles não disponibilizados pelo SUS. A maioria das bactérias E. coli e 100% dos S. aureus isoladas, porém, apresentaram sensibilidade aos medicamentos Nitrofurantoína e Sulfametoxazol-trimetropim, disponíveis gratuitamente nas unidades de saúde. Com um quadro clínico compatível, o tratamento empírico com as drogas referidas seria adequado, sendo o ideal que se faça um exame de controle pós tratamento para evitar o surgimento de cepas resistentes na comunidade.Urinary tract infection (UTI is among the most frequent causes bringing male and female patients to the municipal health units in search of treatment. This paper aims at identifying the microorganisms responsible for this infection and at establishing their resistance profile against the antibiotics most commonly used in the municipal network. One hundred and twenty samples from patients clinically suspect to have UTI were collected and differentiated in CLED, MacConkey e chromogenic EC culture media in the Microbiology Laboratory I of the “Centro Universitário Positivo-UNICEP”. Positive samples were identified and characterized by antibiogram. 63,64% of the infections were caused by Escherichia coli and 18,18% by Staphylococcus aureus. More than 60% of the infections occurred in the age range from 12 to 33 years. The high number of samples found contaminated is an indicator for a certain difficulty in following the instructions for sample collection. Another relevant data is that 35,8% of the analyzed samples came from pregnant women. The antibiotics to which the bacteria responsible for UTI are sensitive are in great part not available at the Unified Health System but most of the isolated E.coli bacteria and 100% of Saureus showed sensitivity to the drugs Nitrofurantoin and Sulfametoxazole-trimetropim, which are available in the health units. With a compatible clinical picture, an empirical treatment with the referred drugs can be considered adequate, however post-therapy control examinations would be ideal for avoiding the appearance of resistant strains in the community.

  19. Isolation and characterization of a chitinase gene from entomopathogenic fungus Verticillium lecanii Isolamento e caracterização de um gene de quitinase do fungo entomopatogênico Verticillium lecanii

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Yanping Zhu

    2008-06-01

    Full Text Available Entomopathogenic fungus Verticillium lecanii is a promising whitefly and aphid control agent. Chitinases secreted by this insect pathogen have considerable importance in the biological control of some insect pests. An endochitinase gene Vlchit1 from the fungus was cloned and overexpressed in Escherichia coli. The Vlchit1 gene not only contains an open reading frame (ORF which encodes a protein of 423 amino acids (aa, but also is interrupted by three short introns. A homology modelling of Vlchit1 protein showed that the chitinase Vlchit1 has a (α/β8 TIM barrel structure. Overexpression test and Enzymatic activity assay indicated that the Vlchit1 is a functional enzyme that can hydrolyze the chitin substrate, so the Vlchit1 gene can service as a useful gene source for genetic manipulation leading to strain improvement of entomopathogenic fungi or constructing new transgenic plants with resistance to various fungal and insects pests.O fungo entomopatogênico Verticillium lecanii é um agente promissor no controle da mosca-branca e do pulgão. As quitinases secretadas por esse patógeno de insetos têm uma grande importância no controle biológico de doenças causadas por insetos. Um gene de endoquitinase Vlchit1 desse fungo foi clonado e expresso em Escherichia coli. O gene Vlchit contém não apenas um ORF que codifica uma proteína de 423 aminoácidos, mas também é interrompido por três pequenos introns. A modelagem de homologia da proteína Vlchit1indicou que a quitinase Vlchit1 tem uma estrutura (α/β 8 TIM barrel. Testes de expressão e de atividade enzimática indicaram que Vlchit1 é uma enzima funcional que hidroliza quitina, portanto o gene Vlchit pode ser um gene útil para manipulação genética para melhoramento de cepas de fungos entomopatogênicos ou para a construção de novas plantas transgênicas com resistência a várias doenças causadas por fungos e insetos.

  20. Study of bacteria Gluconobacter sp.: isolation, purification, phenotypic and molecular identification Estudo de bactérias do gênero Gluconobacter: isolamento, purificação, identificação fenotípica e molecular

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    André Luiz Dorini de Oliveira

    2010-03-01

    Full Text Available The importance of the study of acetic bacteria, on species of the Gluconobacter genus is based on its industrial application, as these possess the capacity of bioconversion of sorbitol to sorbose, enabling the process of vitamin C production. The study involved samples collected in industries of soft drinks, flowers, fruits and honey, followed by purification, phenotypic identification, molecular identification with the use of primer defined from Nucleotide Sequence Database consultation. Strains preserved were identified as members of the Acetobacteraceae family, Gluconobacter genus. 110 strains had been isolated of substrate: Pyrostegia venusta (ker-gawler, honey, Vitis vinifera (grape, Pyrus communis (pear, Malus sp. (apple and in two samples of soft drinks. Of this total 57 strains had been recovered in manitol medium (manitol, yeast extract, peptone, 12 in YMG medium (glucose, manitol, yeast extract, ethanol, acetic acid, 41 in enrichment medium (De Ley and Swings and later in the GYC medium (glucose, yeast extract and calcium carbonate. 68 strains were identified as Gram negative bacilli rods. Of these, 31 were characterized biochemically as belonging to the Acetobacteriaceae family as they were catalase positive, oxidase negative and producers of acid from glucose. The characterization of these strains was complemented with the biochemistry tests: gelatin liquefaction, nitrate reduction, indole and H2S production, oxidation of ethanol to acetic acid and molecular tests for genus identification. Only eight strains were characterized as pertaining to the Gluconobacter genus. The strains are maintained in collection cultures at the Microbiology Laboratory of the Biology Department at the São Paulo State University (UNESP in Assis, stored in malt extract at -196 ºC.A importância do estudo de bactérias acéticas, em especial as do gênero Gluconobacter, está baseada em suas aplicações industriais, pois estas possuem a capacidade de bioconversão de sorbitol a sorbose, viabilizando o processo de produção de vitamina C. O estudo envolveu coletas de amostras em indústrias de refrigerante, flores, frutos e mel, seguidas de purificação, identificação fenotípica e identificação molecular, com a utilização de iniciador definido a partir de consulta ao Nucleotide Sequence Database. Preservaram-se as linhagens identificadas como membros da família Acetobacteriaceae, gênero Gluconobacter. Foi isolado um total de 110 linhagens dos substratos: Pyrostegia venusta (Cipó de São João, mel, Vitis vinifera (uva, Pyrus communis (pêra, Malus sp. (maçã e de duas amostras de refrigerantes envasados em embalagens de PET de 2 L. Deste total, 57 linhagens foram recuperadas em meio MYP (manitol, extrato de levedura, peptona, 12 em meio YGM (glicose, manitol, extrato de levedura, etanol, ácido acético, 41 em meio de enriquecimento e, posteriormente, em meio GYC (glicose, extrato de levedura e carbonato de cálcio. Obtiveram-se 68 linhagens identificadas como bastonetes Gram negativos. Destas, 31 foram caracterizadas bioquimicamente como pertencentes à família Acetobacteriaceae por serem catalase positivas, oxidase negativas e produtoras de ácido a partir de glicose. A caracterização dessas linhagens foi complementada com os testes bioquímicos: liquefação da gelatina, redução de nitrato, formação de indol e H2S e oxidação de etanol a ácido acético. Métodos moleculares foram aplicados para identificação do gênero Gluconobacter. Finalmente, oito linhagens foram caracterizadas como pertencentes ao gênero Gluconobacter. As linhagens encontram-se depositadas em coleção de cultura do laboratório de Microbiologia do Departamento de Biologia da UNESP, campus de Assis, estocadas em extrato de malte 20 a -196 ºC.

  1. Isolamento e seleção de fungos para biorremediação a partir de solo contaminado com herbicidas triazínicos Isolation and screening of fungi to bioremediation from triazine herbicide contaminated soil

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Luciane Maria Colla

    2008-06-01

    Full Text Available A biorremediação é uma tecnologia que utiliza o metabolismo de microrganismos para eliminação ou redução, a níveis aceitáveis, de poluentes presentes no ambiente. Os herbicidas triazínicos são usados intensivamente no controle de ervas daninhas, principalmente na cultura de milho. Objetivou-se, neste trabalho, isolar fungos filamentosos de solos contaminados com herbicidas triazínicos (atrazine e simazine e selecionar os microrganismos isolados quanto à capacidade de crescimento em meio adicionado de atrazine. Os microrganismos foram isolados, cultivados em meio Ágar-Batata-Dextrose (BDA acidificado com ácido tartárico 10%, adicionado de 50 mg.Kg-1 de atrazine e incubados por 5 dias a 25ºC. Foi realizada a medida diária do crescimento fúngico e calculada a velocidade de crescimento radial através de regressão linear dos raios das colônias utilizando-se a equação r(t = a + VCR .t (r:raio; t: tempo; VCR: velocidade de crescimento radial. Os resultados de VCR foram analisados através de Anova simples e do teste de Tukey, para comparação de médias. Foram isolados 15 fungos, pertencentes aos gêneros Aspergillus, Penicillium e Trichoderma. As maiores VCRs foram obtidas com fungos Aspergillus (A1 e Penicillium (AS1, isolados de solo contaminado com atrazine e atrazine adicionado de simazine, respectivamente, que apresentaram VCRs de 1,57 mm.d-1 e 1,28 mm.d-1. O crescimento dos fungos em meio contaminado com a atrazine indica a possibilidade de utilização desses fungos em estudos de biorremediação de solos contaminados com herbicidas triazínicos.Bioremediation is a technology that uses microrganism metabolism to quickly eliminate or reduce pollutants to acceptable levels into the environment. The triazine herbicides are intensively used to control harmful grass in the culture of maize. The aim of this work was to isolate filamentous fungi from soil contaminated with triazine herbicides and screening these fungi due to their ability of growth in a medium added by atrazine. The fungi were isolated, cultivated in potato-dextrose-agar plus 50 mg.Kg-1 of atrazine and incubated for 5 days at 25ºC. The measure of the rays of the colonies was carried out daily and the radial growth rate (RGR through linear regression of colonies rays using the equation: r(t = a + RGR .t (r:ray; t: time; RGR: radial growth rate. The RGR results were analyzed through analysis of variance and Tukey test for comparison of averages. Fifteen filamentous fungi from genus Aspergillus, Penicillium and Trichoderma were isolated. The highest RGRs were obtained with the fungi Aspergillus and Penicillium, when isolated from contaminated soil with atrazine and atrazine + simazine, respectively, showing RGR of 1.57 mm.d-1 and 1.28 mm.d-1. The growth of these fungi in atrazine contaminated meas indicates a possible of use of them in bioremediation experiments with contaminated soil containing triazine herbicides.

  2. Contagem, isolamento e caracterização de bactérias psicrotróficas contaminantes de leite cru refrigerado Counting, isolation and characterization of psychrotrophic bacteria from refrigerated raw milk

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Edna Froeder Arcuri

    2008-11-01

    Full Text Available Com os objetivos de quantificar, isolar e caracterizar bactérias psicrotróficas contaminantes de leite cru refrigerado, produzido na região da Zona da Mata de Minas Gerais e Sudeste do Rio de Janeiro, foram analisadas amostras de leite coletadas de 20 tanques coletivos e 23 tanques individuais. As contagens de bactérias psicrotróficas nas amostras de leite para os dois tipos de tanques de refrigeração variaram entre 10² e 10(7 Unidades Formadoras de Colônias (UFC ml-1, porém, um maior número de tanques coletivos apresentou contagens acima de 1 x 10(5 UFC ml-1. Foi verificada a predominância de bactérias psicrotróficas gram-negativas (81,2%, que foram identificadas pelos sistemas API 20E e API 20NE nos gêneros: Aeromonas, Alcaligenes, Acinetobacter, Burkholderia,Chryseomonas, Enterobacter, Ewingella, Klebsiella, Hafnia, Methylobacterium, Moraxella, Pantoea, Pseudomonas, Serratia, Sphingomonas e Yersinia. As bactérias gram-positivas (18,8% foram identificadas com API 50 CH, API Coryne e API Staph, nos gêneros: Bacillus, Brevibacterium, Cellum/Microbacterium, Kurthia e Staphylococcus. Os sistemas API utilizados não identificaram todos os isolados bacterianos. Pseudomonas foi o gênero mais isolado e P. fluorescens foi a espécie predominante. A maioria dos isolados bacterianos apresentou atividade proteolítica e/ou lipolítica a temperaturas de refrigeração de 4°C, 7°C e 10°C, evidenciando seu alto potencial de deterioração do leite e dos produtos lácteos. Os resultados ressaltam que maior atenção deve ser dada aos procedimentos que impeçam a contaminação do leite por esses microrganismos.This study aimed to quantify, isolate and characterize psychrotrophic bacteria from refrigerated raw milk produced at the ‘Mata’ Region of Minas Gerais State and Southeast of Rio de Janeiro State, Brazil. Raw milk samples, were collected at the farms, from 20 collective refrigerated tanks and 23 individual refrigerated tanks. The psychrotrophic bacteria counting ranged from 10² to 10(7 Colony Forming Units (CFU ml-1 for both types of refrigerated tanks, but most of the collective tanks showed counts higher than 1 x 10(5 CFU ml-1. Predominance of psychrotrophic gram-negative bacteria (81.2%, that were identified by API 20E and API 20NE as belonging to genera: Aeromonas, Alcaligenes, Acinetobacter, Burkholderia, Chryseomonas, Enterobacter, Ewingella, Klebsiella, Hafnia, Methylobacterium, Moraxella, Pantoea, Pseudomonas, Serratia, Sphingomonas e Yersinia were oserved. The gram-positive bacteria (18.8%, were identified by API 50 CH, API Coryne and API Staph, to genera: Bacillus, Brevibacterium, Cellum/Microbacterium, Kurthia e Staphylococcus. The API systems utilized could not identify all the bacterial isolates. Pseudomonas was the genus most isolated with P. fluorescens as the predominant species. Most of the isolates presented proteolytic and/or lipolytic activity at 4°C, 7°C and 10°C showing high potential for milk and milk products spoilage. The results indicated that more attention must be taken to the procedures necessaries to reduce milk contamination with psychrotrophic bacteria.

  3. Isolamento do vírus rábico de morcego insetívoro Myotis nigricans Isolation of the rabies virus in a specimen of the insectiverous bat Myotis nigricans

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Luzia F. A. Martorelli

    1995-04-01

    Full Text Available Relata-se um caso de infecção natural de raiva em morcego insetívoro Myotis nigricans, no Município de Ribeirão Pires, Grande São Paulo (Brasil. O diagnóstico realizou-se através das técnicas de imunofluorescência e inoculação intracerebral em camundongos, do tecido nervoso e da musculatura da região interescapular do morcego.The following is a case study of the natural infection by the rabies virus of an insectiverous bat belonging to the species Myotis nigricans in the municipality of Ribeirão Pires, Greater S. Paulo. Diagnosis was made by means of immunofluorescence and intracerebral innoculation of mice with nervous and intrascapular muscular tissues.

  4. Isolamento, fracionamento e avaliação toxicológica in vivo de polissacarídeos sulfatados de Hypnea musciformis Isolation, fractionation and in vivo toxicological evaluation of sulfated polysaccharides from Hypnea musciformis

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    José Ariévilo Gurgel Rodrigues

    2011-07-01

    Full Text Available Objetivou-se isolar, fracionar e avaliar a toxicidade in vivo dos polissacarídeos sulfatados (PSs da rodofícea Hypnea musciformis, quando obtidos por três métodos de extração (M I; M II e M III. Os PSs foram extraídos com papaína em tampão acetato de sódio 100mM (pH 5,0, contendo cisteína e EDTA (5mM (M I ou água (25-80°C (M II; 80°C (M III e, em seguida, determinados sua composição química de carboidratos totais, sulfato livre (SL e proteínas contaminantes (PCs. Os PSs foram submetidos à cromatografia de troca iônica (DEAE-celulose usando um gradiente de cloreto de sódio, sendo avaliado o grau de homogeneidade e densidade de carga por eletroforese em gel de agarose das frações obtidas e comparadas à heparina. O ensaio in vivo foi realizado em grupos (n=6 de camundongos Swiss machos e fêmeas (24-33g, os quais receberam: PSs (9mg kg-1; i.p. isentos do PCs (M I e salina 0,9% (0,1mL 10g-1; i.p., durante 14 dias consecutivos. No 15o dia, os animais foram anestesiados e sacrificados para coletas de sangue e órgãos, os quais foram utilizados para dosagens bioquímicas e correlações com suas massas corpóreas, respectivamente. O teor de SL (31,05±0,53% (P0,05.This study aimed to isolate, fractionate and evaluate the in vivo toxicity of sulfated polysaccharides (SPs from Hypnea musciformis (Rhodophyta, when obtained by three extraction methods (M I, M II and M III. SPs were extracted with papain in 100mM sodium acetate (pH 5.0 containing cysteine and EDTA (5mM (M I or water (25-80°C (M II, 80°C (M III, and then their chemical composition of total carbohydrates, free sulfate (FS and contaminant proteins (CPs was determined. SPs were submitted to ion-exchange chromatography (DEAE-celulose using a sodium chloride gradient, being the degree of homogeneity and charge density evaluated by agarose gel electrophoresis of the fractions obtained and compared to heparin. The in vivo assay was performed using groups (n=6 of male and female Swiss mice (24-33g, which received: SPs (9mg kg-1, i.p. absence of CPs (M I and 0.9% saline (0.1mL 10g-1, i.p., for 14 consecutive days. On the 15th day, collect blood and organs for biochemical dosages and corporal mass correlation, respectively, from the animals anesthetized and sacrificed were performed. The sulfate content of FS (31.05±0.53% (P0.05

  5. Isolamento e Caracterização de Bactérias do Lodo de Esgoto com Potencial Antagonismo a Nematóides / Isolation and Characterization of Bacteria from Sewage Sludge, with Potential Antagonism to Nematodes

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    Cacilda Márcia Duarte Rios Faria

    2006-08-01

    Full Text Available Foram isoladas e caracterizadas bactérias presentes no lodo de esgoto visando à realização de estudos futuros de interação desses organismos com fitonematóides. Os lodos utilizados são provenientes das estações de tratamento de Franca e Barueri, no Estado de São Paulo. Foram obtidos 77 isolados do lodo de Franca e 143 do de Barueri. Desses isolados de Franca testados, 77% foram Gram-positivos e 23% Gram-negativos. Para os 143 isolados obtidos do lodo de esgoto de Barueri, 61% foram Gram-positivos e o restante Gram-negativo. Os isolados Gram-positivos podem, estar relacionados com espécies do gênero Bacillus dos quais várias espécies têm grande importância como agentes de controle de fitopatógenos, inclusive nematóides. Observou-se que 39% e 40% dos microrganismos Gram positivos, isolados dos lodos coletados na ETE de Franca e de Barueri, produziram pigmento fluorescente em meio King B, sendo indicativo de Pseudomonas fluorescens. Dos 77 isolados de Franca, 13% apresentaram como característica morfológica bordo lobado, característica de culturas de Bacillus. Comparando-os com os testes bioquímicos, concluiu-se que 80% deles foram Grampositivos, característica de espécies de Bacillus. Dos isolados, 10% apresentaram bordo inteiro, colônia brilhante e arredondada, as quais são características de Pseudomonas. Desses, 37% foram Gram-negativos, sendo que 67% desses isolados eram também produtores de pigmento fluorescente em meio King B, características da P. fluorescens. Dos 143 isolados de Barueri, 17% apresentaram bordo lobado como característica morfológica, podendo-se suspeitar de serem espécies de Bacillus e 5% apresentaram as características de espécies de Pseudomonas. Para os isolados do lodo de Barueri, na comparação com os testes bioquímicos constatou-se que 64% dos isolados foram Gram-positivo. Dos isolados com características de Pseudomonas, 17% apresentaram-se como Gramnegativas e desses, 17% mostraram-se como produtores de pigmento fluorescente em meio King B, que são características de espécies de Pseudomonas do grupo fluorescente.

  6. Leishmania braziliensis: isolation of carbohydrate-containing antigen and possibility of its use in the immunodiagnosis of American Cutaneous Leishmaniasis Leishmania braziliensis: isolamento de antígeno contendo carboidrato e a possibilidade de sua aplicação no imunodiagnóstico da Leishmaniose Tegumentar Americana

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    T. G. V. Silveira

    1995-06-01

    Full Text Available Leishmania braziliensis is a causative agent of American Cutaneous Leishmaniasis (ACL. The 034-JCG strain, isolated from a patient from the northern region of Paraná State, Brazil, was cultivated in Blood Agar Base medium, lyophilized and submitted to phenol-water extraction. The extract was treated with RNase I. The carbohydrate containing-antigen (Ag-CHO was immunogenic to rabbits and showed at least a fraction with some negative charge at pH 8.2. This antigen showed cross-reactivity with the phenol-water extract of the growth medium used for the culture of promastigotes and with the surface antigens of promastigotes. Its composition is: 24.3% of total sugars, from which 11.2% of galactose, 7.5% of mannose and 5.6% of ribose. Protein content was 5.4% and phosphate 18.5%. The antigenic activity was maintained after: repeated freezing-thawing; lyophilization; heating at 100ºC for 30 minutes; treatment with RNase, trichloroacetic acid and sodium metaperiodate. The precipitin line obtained is Periodic Acid Schiff positive. The application of the Ag-CHO in counterimmunoelectrophoresis reaction for the immunodiagnosis of ACL showed 60% sensitivity, and no cross-reaction with the five sera of Chagas' disease patients tested. The use of this antigen in a more sensitive technique, with more samples of sera, may improve these results.A Leishmania braziliensis é um dos agentes causadores da Leishmaniose Tegumentar Americana (LTA. A cepa 034-JCG, isolada de paciente da região norte do estado do Paraná, Brasil, foi cultivada em meio Blood Agar Base, liofilizada e submetida a extração com fenol-água e o extrato obtido foi tratado com RNase I. O antígeno contendo carboidrato (Ag-CHO mostrou-se imunogênico para coelhos e apresentou pelo menos uma fração com poucas cargas negativas em pH 8,2. Este antígeno apresenta reação cruzada com extrato fenólico do meio de cultura usado para o cultivo de promastigotas e com antígenos de superfície de promastigotas. É composto por 24,3% de açúcares totais, dos quais 11,2% de galactose, 7,5% de manose e 5,6% de ribose. As proteínas foram estimadas em 5,4% e fosfato em 18,5%. A atividade antigênica foi mantida após: congelamentos e descongelamentos repetidos; liofilização; aquecimento a 100ºC durante 30 minutos; tratamento com RNase, ácido tricloroacético e periodato de sódio. As linhas obtidas nas reações de precipitação coram-se pelo Ácido Periódico de Schiff. A utilização do Ag-CHO na reação de contraimunoeletroforese para o imunodiagnóstico de LTA mostrou 60% de sensibilidade, e nenhuma reação cruzada com os 5 soros de pacientes com Doença de Chagas testados. O uso deste antígeno com técnicas mais sensíveis, e com um maior número de amostras poderá melhorar estes resultados.

  7. Isolamento e caracterização de fibroblastos gengivais positivos para fosfatase alcalina de pacientes portadores de periodontite crônica e hiperplasia gengival medicamentosa = Isolation and characterization of gingival fibroblasts positive for alkaline phosphatase in patients with chronic periodontitis and drug-induced gingival hyperplasia

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Santos, Vagner Rodrigues

    2010-01-01

    Full Text Available Objetivo: Investigar a expressão da atividade de fosfatase alcalina (ALP em fibroblastos gengivais de sujeitos com periodontite crônica (PC e hiperplasia gengival medicamentosa (HGM induzida por difenilhidantoína. Metodologia: Os fragmentos gengivais foram obtidos de 13 pacientes (8 mulheres e 5 homens, 22 a 74 anos, sendo 4 fragmentos procedentes de gengiva clinicamente normal (GN, 5 de biópsias de bolsas periodontais com PC e 4 de HGM induzida pela difenilhidantoína. Através de digestão enzimática, suspensões de células gengivais foram preparadas contendo fibroblastos ALP-positivos sem afetar a atividade da enzima ALP. Análises citoquímica e histoquímica foram realizadas. Resultados: Fibroblastos de GN apresentaram fraca positividade para ALP quando comparados com PC e HGM. PC e HGM exibiram níveis elevados e intermediários, respectivamente, de ALP. Observou-se menor proliferação celular na cultura de células em PC e HGM que em GN. Entretanto, a quantidade de células recuperadas das sub-culturas foi similar à quantidade recuperada na cultura inicial para as três linhagens. Conclusões: A expressão de ALP na PC e na HGM encontra-se aumentada e ocorre baixa proliferação de fibroblastos na PC e na HGM. Isto sugere que a inflamação periodontal e a difenilhidantoína podem influenciar a expressão de ALP e a multiplicação de fibroblastos gengivais humanos. Outros estudos são necessários para melhor avaliar a importância de ALP no desenvolvimento e na progressão de PC e HGM

  8. Anthocyanins standards (cyanidin-3-O-glucoside and cyanidin-3-O-rutinoside) isolation from freeze-dried açaí (Euterpe oleraceae Mart.) by HPLC Isolamento de padrões de antocianinas (cianidina-3-O-glucosídeo e cianidina -3-O-rutinosídeo) de açaí liofilizado (Euterpe oleraceae Mart.) por CLAE

    OpenAIRE

    Ana Cristina Miranda Senna Gouvêa; Manuela Cristina Pessanha de Araujo; Daniel Filisberto Schulz; Sidney Pacheco; Ronoel Luis de Oliveira Godoy; Lourdes Maria Corrêa Cabral

    2012-01-01

    Availability of analytical standards is a critical aspect in developing methods for quantitative analysis of anthocyanins. The anthocyanins cyanidin-3-O-glucoside and cyanidin-3-O-rutinoside were isolated from samples of freeze-dried açaí (Euterpe oleraceae Mart.), which is a round and purple well-known palm fruit in Brazil, and then used as standards. The isolation of the anthocyanins was performed by High Performance Liquid Chromatography (HPLC), using an adapted six-channel selection valve...

  9. AISLAMIENTO E IDENTIFICACIÓN DE BACTERIAS SOLUBILIZADORAS DE FOSFATOS, HABITANTES DE LA RIZÓSFERA DE CHONTADURO (B. gassipaes Kunth) ISOLAMENTO E IDENTIFICAÇÃO DE BACTÉRIAS SOLUBILIZADORAS DA FOSFATO, HABITANTES DA RIZÓSFERA DE CHONTADURO (B. gassipaes Kunth) ISOLATION AND IDENTIFICATION OF PHOSPHATE-SOLUBILIZING BACTERIA INHABITING THE RIZHOSPHERE OF PEACH PALM (B. gassipaes Kunth)

    OpenAIRE

    CARLOS PATIÑO TORRES; MARINA SÁNCHEZ DE PRAGER

    2012-01-01

    El chontaduro o pejiyabe (Bactris gasipaes Kunth) esuna especie nativa de las selvas húmedas del pacífico colombiano, adaptada a condiciones de alta acidez y deficiencia de nutrientes, especialmente fósforo (P), características dominantes en los suelos de esta zona tropical. Los microorganismos rizosféricos solubilizadores de P, entre ellos las bacterias (BSP), contribuyen a mejorar la disponibilidad de este nutriente, por ello, la necesidad de aislarlos, reconocerlos e identificarlos en la r...

  10. Isolamento e caracterização parcial de sequências homólogas a genes ribossomais (rDNA em Blastocladiella emersonii - DOI: 10.4025/actascibiolsci.v25i2.2037 Isolation and partial characterization of homologous sequences of ribosomal genes (rDNA in Blastocladiella emersonii

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Luiz Carlos Correa

    2003-04-01

    Full Text Available A definição e a caracterização de regiões de origens de replicação nos eucariotos superiores são ainda controversas. A iniciação da replicação é sítio-específica em alguns sistemas e, em outros, parece estar contida em regiões extensas. Regiões rDNA são modelos atrativos para o estudo de origens de replicação pela sua organização in tandem, reduzindo a área de estudo para o espaço restrito que codifica uma unidade de transcrição. Neste trabalho nós isolamos e caracterizamos parcialmente um clone que contém uma sequência ribossomal do fungo aquático Blastocladiella emersonii, Be97M20. Southern blots mostraram diversos sítios para enzimas de restrição Eco RI, HindIII e SalI. Northern blot de RNA total hibridado contra uma sonda feita com Be97M20 confirmou a sua homologia com o gene ribossomal 18S. A caracterização detalhada, incluindo o mapeamento de restrição completo, subclonagem, sequenciamento e análise em géis bidimensionais proverão informações adicionais importantes sobre a estrutura e dinâmica desta regiãoThe definition and the characterization of replication origins regions in higher eukaryotes are still controversial. The initiation of the replication is site-specific in some systems but seems to occur in large regions in others. Because of its in tandem organization, reducing the area to the restricted space that codifies an unit of transcription, rDNA regions are attractive models to study replication origins. In this work we isolated and started to characterize a clone that contains a ribosomal sequence from the aquatic fungus B. emersonii, Be97M20. Southern blots showed several sites for the restrition enzymes Eco RI, HindIII and SalI. A northern blot of total RNA, hybridized against a probe made from Be97M20, confirmed its homology with the ribosomal 18S gene. The detailed characterization, including complete restriction map, subcloning, sequence and analysis on bidimensional gels will provide important information about the structure and dynamics of this region

  11. Isolation and screening for plant growth-promoting (PGP actinobacteria from Araucaria angustifolia rhizosphere soil Isolamento e seleção de actinobactérias promotoras do crescimento de plantas de solo rizosférico de Araucaria angustifolia

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Rafael Leandro Figueiredo de Vasconcellos

    2010-12-01

    Full Text Available Actinobacteria are capable of playing several different roles in soil ecosystems. These microorganisms affect other organisms by producing secondary metabolites and are responsible for the degradation of different complex and relatively recalcitrant organic compounds. In our survey of actinobacteria isolated from the rhizosphere of Araucaria angustifolia, five culture media (AI, WYE, YCED, MSSC and LNMS were compared for their effectiveness in isolating these microorganisms. When summing up all the isolates randomly obtained, we got 103 isolates. After isolation, the phosphate-solubilizing ability and the "in vitro" production of indole-acetic acid and chitinases were evaluated. The AI medium was ineffective for actinobacteria isolation, when it was compared with the other four culture media. Indole-acetic acid and chitinase were produced by respectively 36% and 24% of the strains tested. However, only 2% of the 103 strains presented some phosphate-solubilizing ability. These results demonstrate the biotechnological potential of these microorganisms.Actinobactérias são capazes de desenvolver diferentes funções no ecossistema edáfico. Esses microrganismos, além de interagir com outros grupos de microrganismos e plantas, ao produzir metabólitos secundários, são responsáveis pela degradação de diferentes compostos orgânicos. Com intuito de facilitar os estudos envolvendo actinobactérias encontradas em sistemas florestais, cinco meios de cultura (AI, WYE, YCED, MSSC e LNMS foram avaliados quanto à eficiência em isolar estes microrganismos. Além disso, foi analisada a capacidade dos diferentes isolados em solubilizar fosfato de cálcio, produzir ácido indol-acético e quitinases. Dos cinco meios de cultura testados, somente o AI foi ineficiente em isolar actinobactérias. A produção de ácido indol-acético e quitinases foi observada em 36% e 24% dos isolados analisados, respectivamente. Contudo, apenas 2% dos 103 isolados foram capazes de solubilizar fosfato de cálcio. Estes resultados comprovam o potencial biotecnológico desses microrganismos.

  12. Detection of Vibrio parahaemolyticus and Vibrio cholerae in oyster, Crassostrea rhizophorae, collected from a natural nursery in the Cocó river estuary, Fortaleza, Ceará, Brazil Isolamento de Vibrio parahaemolyticus e Vibrio cholerae em ostras, Crassostrea rhizophorae, coletadas em um criadouro natural no estuário do rio Cocó, Fortaleza, Ceará, Brasil

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Oscarina Viana de Sousa

    2004-04-01

    Full Text Available Oysters are edible organisms that are often ingested partially cooked or even raw, presenting therefore a very high risk to the consumers' health, especially in tropical regions. The presence of Vibrio cholerae and Vibrio parahaemolyticus in oysters sampled at an estuary in the Brazilian northeastern region was studied, with 300 oysters tested through an 8-months period. The salinity of the water at the sampling point varied between 3% and 27‰. V. cholerae was the most frequently detected species (33.3% of the samples, and of the 22 V. cholerae isolates, 20 were identified as non-O1/non-O139, with two of the colonies presenting a rough surface and most of remaining ones belonging to the Heiberg II fermentation group. V. parahaemolyticus was isolated from just one of the samples. Other bacteria such as Providencia spp., Klebsiella spp. and Morganella morganii were also isolated.As ostras são alimentos marinhos freqüentemente ingeridos crus ou parcialmente cozidos. Por esta razão, o risco para a saúde dos consumidores desses produtos é muito elevado, principalmente, quando são de regiões tropicais. Foi estudada a presença de Vibrio cholerae e Vibrio parahaemolyticus em ostras de um estuário na região Nordeste do Brasil. Trezentas ostras foram analisadas, em um período de 8 meses. A salinidade da água, no local de coleta, variou de 3 a 27‰. V. cholerae foi o vibrio mais freqüentemente detectado (33,3% das amostras. Dos 22 isolados, 20 foram identificados como V. cholerae não-O1/não-O139, duas delas apresentando forma rugosa sendo a maioria das demais pertencente ao tipo fermentativo Heiberg II. V. parahaemolyticus foi isolado em apenas umas das coletas. Foram, também, identificadas nas amostras isolados de Providencia spp., Klebsiella spp., Proteus spp. e Morganella morganii.

  13. Isolamento de esporos de equipamentos de abatedouros avícolas e avaliação de sua resistência a sanificantes químicos Isolament of aerobic mesofilic and thermofilic spores in equipaments of poultry slaughter and their resistance against the chemists disinfectants

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    M.S.V. MORAES

    1997-12-01

    Full Text Available Com o objetivo de fornecer subsídios para o controle de microrganismos em abatedouro de aves, avaliou-se a ação dos agentes químicos sanificantes comprovadamente mais eficientes (hipoclorito de sódio, ácido peracético, e dicloroisocianurato de sódio em suspensões de esporos de bactérias aeróbias mesófilas e termófilas, isoladas de equipamentos de abatedouro de aves. Pelo teste de Duncan, constatou-se que dentre os esporos isolados o mais resistente obteve 1,5 e 1,2 RD quando em contato com o hipoclorito de sódio e ao ácido peracético com 30 minutos de tempo de contato, que foram os sanificantes mais eficientes (P > 0,05. O dicloroisocianurato de sódio proporcionou 0,1 RD em 30 minutos de tempo de contato com a mesma suspensão de esporos. Os esporos isolados apresentaram diferentes resistências aos sanificantes avaliados, indicando a necessidade de uma seleção criteriosa de agentes químicos para o procedimento de sanificação, sendo importante um rodízio entre os sanificantes mais eficientes testados, que foram o hipoclorito de sódio e o ácido peracético.With the objective of providing subsidies for the control of microorganisms at poultry slaughter, evaluated the action of agents disinfectants chemists, provably more efficient (sodium hypochlorite, peracetic acid, and sodium dicloroisocyanurate in suspensions of bacterium spores morphologicly different, isolated of equipaments of poultry slaughter. Through Duncan test, we verified that the most resistant, isolate, got 1,5 and 1,2 RD when in contact with the sodium hypochlorite and peracetic acid, respectively, with contact time of 30 minutes (P > 0,05. The sodium dicloroisocyanurate got 0,1 RD in 30 minutes of contact time with this suspension. The isolated spores show different resistances in relationship to disinfectants evatuaded, indicating the necessity of the standard selection of chemists agents for the proceeding of sanitation, being important a selection between the most efficient testified disinfectants,that were sodium hypochlorite and peracetic acid.

  14. Estudo de vigilância bacteriológica: isolamento, fatores de virulência e resistência antimicrobiana de cepas de Escherichia coli isoladas de gatos domésticos na região de Ribeirão Preto

    OpenAIRE

    Caliman, Marly Cristina Wanderley [UNESP

    2010-01-01

    A resistência antimicrobiana em bactérias de origem animal tem se caracterizado como importante problema de saúde pública. No Brasil, muitos trabalhos têm verificado a presença de fatores de virulência e resistência em cepas de Escherichia coli isoladas de animais de produção, porém há poucos estudos avaliando estes aspectos em animais de companhia. O presente trabalho verificou o perfil de sensibilidade microbiana e a presença dos genes codificadores de adesinas (pap, sfa, afa), de intimina ...

  15. AISLAMIENTO E IDENTIFICACIÓN DE BACTERIAS SOLUBILIZADORAS DE FOSFATOS, HABITANTES DE LA RIZÓSFERA DE CHONTADURO (B. gassipaes Kunth ISOLAMENTO E IDENTIFICAÇÃO DE BACTÉRIAS SOLUBILIZADORAS DA FOSFATO, HABITANTES DA RIZÓSFERA DE CHONTADURO (B. gassipaes Kunth ISOLATION AND IDENTIFICATION OF PHOSPHATE-SOLUBILIZING BACTERIA INHABITING THE RIZHOSPHERE OF PEACH PALM (B. gassipaes Kunth

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    CARLOS PATIÑO TORRES

    2012-12-01

    Full Text Available El chontaduro o pejiyabe (Bactris gasipaes Kunth esuna especie nativa de las selvas húmedas del pacífico colombiano, adaptada a condiciones de alta acidez y deficiencia de nutrientes, especialmente fósforo (P, características dominantes en los suelos de esta zona tropical. Los microorganismos rizosféricos solubilizadores de P, entre ellos las bacterias (BSP, contribuyen a mejorar la disponibilidad de este nutriente, por ello, la necesidad de aislarlos, reconocerlos e identificarlos en la rizosfera, como uno de los mecanismos de adaptación de esta especie. Una vez aisladas y purificadas en medio libre de fuentes de fósforo orgánico e inorgánico solubles, las poblaciones bacterianas se identificaron mediante la utilizacióndel análisis de las secuencias DNAr 16S y la técnica BOX-PCR, estableciendo que en el sitio de estudio, las poblaciones dominantes fueron Burkholderia ambifaria y Burkholderia sp. 383, seguidas por Pseudomonas putida, especies reconocidas globalmente por su actividad solubilizadora, y como rizobacterias promotoras del crecimiento vegetal (PGPR.Do chontaduro oupejiyabe (Bactris gasipaes Kunth é uma espécie nativa da florestas úmidas do pacífico colombiano, adaptados às condições de alta acidez e deficiência de nutrientes, especialmente fósforo (P, características dominantes no solo de esta zona tropical. Microrganismos do solo comcapacidade de solubilizar fosfatos naturais, incluindo as bactérias, contribuir para melhorar a disponibilidade de nutrientes presente, por conseguinte, não existe necessidade de isolar as, reconhecer e identificar-los na rizosfera, como um dos mecanismos de adaptação do presente espécies. Uma vez que tenham sido isoladas e purificadas emmeiolivre de fontes de P orgânicos e inorgânicos solúveis, populações bacterianas foram identificadas pela utilização da análise das sequências do extrachromosome DNAr 16S e a técnica BOX-PCR, que estabelece que a área de estudo, a populações dominante foram: Burkholderia ambifaria e B. sp. 383, seguido por Pseudomonas putida, espécies reconhecidas mundialmente para suaatividade solubilizadora, e como rizobactérias promotoras de crescimento de plantas (RPCP.The chontaduro or pejiyabe (Bactris gasipaes Kunth, is a species native of rainforest of Colombian's Pacific Coast, adapted to soils with high acidity and depleted in nutrients, especially phosphorus.The phosphate solubilizing microorganisms, including bacteria (BSP, improve the availability of this nutrient, therefore, the need to isolate, recognize and identify those in the rhizosphere, as one of the mechanisms of adaptation of this species. Once isolated and purified in medium free of sources of soluble phosphorus, bacterial populations were identified using sequence analysis of 16S rDNA and molecular genotyping by BOX-PCR, stating that in the study site, the dominant populations were Burkholderia ambifaria and B. sp. 383, followed by Pseudomonas putida, species recognized globally for its solubilizing activity, and as plant growth promoting rhizobacteria (PGPR.

  16. ESTREPTOCOCOS DO GRUPO MUTANS: ISOLAMENTO, IDENTIFICAÇÃO E PREVALÊNCIA DAS ESPÉCIES NA SALIVADE PARES MÃE/FILHO STREPTOCOCCI OF THE MUTANS GROUP: ISOLATION, IDENTIFICATION, AND PREVALENCE OF SPECIES IN THE SALIVA OF MOTHER-CHILD PAIRS

    OpenAIRE

    Azevedo,Rosa Vitória Palamin; Nelson Filho, Paulo; Assed,Sada; Ito, Izabel Yoko

    1998-01-01

    Amostras de saliva não estimulada de 50 crianças e de suas mães foram analisadas, objetivando-se determinar a prevalência das espécies do grupo mutans. Alíquotas de saliva, pura e após diluição decimal seriada, foram semeadas no meio SB20 modificado, com bastão angulado em L, e incubadas em microaerofilia durante 72 horas a 37ºC. Após a contagem do número de ufc do grupo mutans, colônias características foram transferidas para o meio tioglicolato, incubado a 37ºC - 24 horas, e submetidas à id...

  17. Isolamento e identificação de amebas de vida livre potencialmente patogênicas em amostras de ambientes de hospital público da cidade de Porto Alegre, RS Isolation and identification of potentially pathogenic free-living amoebae in samples from environments in a public hospital in the city of Porto Alegre, Rio Grande do Sul

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Ana Maris Carlesso

    2007-06-01

    Full Text Available Um estudo sobre a presença de amebas de vida livre em um hospital público foi desenvolvido na Cidade de Porto Alegre, RS. Poeira e biofilmes de 15 ambientes hospitalares, incluindo CTI, UTI pediátrica, cozinha, emergência, centro cirúrgico ambulatorial e centro cirúrgico, reservatórios de água, torneira e 6 bebedouros coletivos foram coletados mensalmente, de julho de 2004 a março de 2005, usando-se suabes estéreis, preparados para a pesquisa. As AVL foram isoladas em cultivo, utilizando-se meio de ágar não nutriente adicionado de Escherichia coli, mortas pelo calor. A identificação dos protozoários foi feita pela observação morfológica de cistos e trofozoítos, segundo critérios morfológicos de Page (1988. Das 135 amostras coletadas dos 15 ambientes estudados, 47 (35% foram positivas para AVL. Destas, 34% apresentaram características morfológicas próprias do gênero Acanthamoeba.A study on the presence of free-living amoebae in a public hospital was developed in the city of Porto Alegre, State of Rio Grande do Sul. Dust and biofilms were collected using sterile swabs that had been prepared for this study, from 15 hospital environments, including the intensive care center, pediatric intensive care unit, kitchen, emergency room, outpatient surgical center, clinical surgical center, water storage tanks, taps and six drinking fountains for general use, every month from July 2004 to March 2005. The FLAs were isolated by culturing, using non-nutrient agar medium with the addition of heat-killed Escherichia coli. The protozoa were identified by morphological observation of cysts and trophozoites, in accordance with Page's morphological criteria (1988. Among the 135 samples collected from the 15 environments, 47 (35% were positive for FLAs. Of these, thirty-four percent presented morphological characteristics particular to the genus Acanthamoeba.

  18. Isolamento e seleção de fungos produtores de lipases com base na atividade lipásica e no potencial hidrolítico sobre óleo comestível de soja e escuma de caixa de gordura

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Celson Rodrigues

    Full Text Available RESUMO: O uso de biomassa fúngica como biocatalisadora lipásica representa uma atraente abordagem para o tratamento de águas residuais oleosas e produção de biodiesel, a partir de óleos e graxas residuais, devido à sua maior estabilidade, possibilidade de reuso e baixo custo. Neste trabalho foram obtidos cem isolados de fungos, a partir de escumas de caixa de gordura e esgoto, solo e tecidos necrosados de plantas e insetos, que foram avaliados quanto ao crescimento e à atividade lipásica, no meio de cultura básico, para atividade lipásica extracelular, e meio mineral mínimo + óleo de soja + rodamina, para atividade lipásica intracelular, com resposta positiva e diferenciada de 66 deles, inclusos como pertencentes aos gêneros Aspergillus , Beauveria , Botrytis , Cladosporium , Colletotrichum , Fusarium , Geotrichum , Penicillium , Rhizomucor e Verticillium . Na sequência, o potencial hidrolítico dos isolados Penicillium sp. F002 e Rhizomucor sp. F018 foi avaliado sobre óleo de soja comestível e escuma de caixa de gordura, em fermentação em estado sólido, através da quantificação das variáveis: produção de CO2, remoção do teor de óleos e graxas e crescimento da biomassa. Os resultados confirmaram a elevada atividade lipásica extracelular de Penicillium sp. F002 e a elevada atividade lipásica intracelular de Rhizomucor sp. F018. Portanto, o isolado Rhizomucor sp. F018 mostrou potencial para utilização em pesquisas futuras, na forma de células integrais lipásicas, para o tratamento de águas residuais oleosas e como biocatalisador na produção de biodiesel a partir de resíduos oleosos.

  19. Isolation of bacteriocin-producing lactic acid bacteria from meat and meat products and its spectrum of inhibitory activity Isolamento de bactérias lácticas produtoras de bacteriocinas a partir de carnes e produtos cárneos e seu espectro de atividade inibitória

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Renata Bromberg

    2004-06-01

    Full Text Available A total of 285 samples of meat and meat products were evaluated for the presence of bacteriocin-producing lactic acid bacteria by the "sandwich" test. From 174 of these samples, 813 strains of lactic acid bacteria were isolated. They were able to inhibit the growth of Staphylococcus aureus CTC 33 and/or Listeria innocua Lin 11. When evaluated by the well-diffusion assay, 128 of these strains inhibited the growth of the indicator strains. The inhibitory spectra of activity of the isolates were evaluated against a range of Gram-positive and Gram-negative test organisms. S. aureus was the most sensitive indicator tested, whereas Enterococcus faecalis and Lactobacillus plantarum were the most resistant ones. All the compounds produced by the lactic acid bacteria were fully or partially inactivated by some of the proteolytic enzymes, which indicates their proteinaceous nature. The antimicrobial activity of the bacteriocins produced by the lactic acid bacteria isolated in this work could act as a potential barrier to inhibit the growth of spoilage bacteria and foodborne pathogens.Um total de 285 amostras de carnes e produtos cárneos foi avaliado para detecção de culturas produtoras de bacteriocinas pelo método do "sanduíche". A partir de 174 destas amostras, 813 linhagens de bactérias lácticas com atividade inibitória sobre Staphylococcus aureus CTC 033 e/ou Listeria innocua Lin 11 foram isoladas. Quando examinadas pelo método de antagonismo simultâneo em poços, 128 destas linhagens inibiram o crescimento dos microrganismos indicadores. O espectro de atividade das linhagens isoladas foi avaliado com diversos microrganismos Gram-positivos e Gram-negativos. De um modo geral, S. aureus foi o microrganismo indicador mais sensível, enquanto Enterococcus faecalis e Lactobacillus plantarum foram os mais resistentes. Todos os compostos antimicrobianos produzidos pelas bactérias lácticas testadas foram completa ou parcialmente inativados por enzimas proteolíticas, o que indica sua natureza protéica. A atividade antimicrobiana das bacteriocinas produzidas pelas linhagens de bactérias lácticas isoladas neste trabalho pode atuar como uma barreira potencial para inibir o crescimento de bactérias deterioradoras e patogênicas de origem alimentar.

  20. Isolation of verbascoside and validation of method to standardize the crude extract of the aerial parts of Buddleja stachyoides Cham. and Schltdl. (Scrophulariaceae); Isolamento do verbacosideo e validacao de metodo analitico para padronizacao do extrato bruto das partes aereas de Buddleja stachyoides Cham. and Schltdl. (Scrophulariaceae)

    Energy Technology Data Exchange (ETDEWEB)

    Oliveira, Daniella M.S. de; Miguel, Marilis D.; Kalegari, Milena; Miguel, Obdulio G.; Moreira, Thais F., E-mail: dani_mso@yahoo.com.br [Universidade Federal do Parana (UFPR), Curitiba, PR (Brazil). Departamento de Farmacia

    2014-04-15

    Phenylpropanoid glycoside verbascoside was isolated and identified from the ethyl acetate fraction of the aerial parts of Buddleja stachyoides Cham. and Schltdl. by {sup 1}H-NMR. A method using high-performance liquid chromatography has been developed and validated for determination of verbascoside in alcoholic crude extract of the aerial parts of B. stachyoides. Analysis was performed on a Phenomenex® Gemini-NX C18 analytical column (250 mm × 4.6 mm; 5 μm) using a mobile phase (pump A - aqueous solution containing H{sub 2}SO{sub 4} (0.01 M), H{sub 3}PO{sub 4} (0.4%), and (C{sub 2}H{sub 5}){sub 2}NH (0.4%); pump B - methanol:aqueous (95:5) solution containing H{sub 2}SO{sub 4} (0.05 M), H{sub 3}PO{sub 4} (2%), and (C{sub 2}H{sub 5}){sub 2}NH (0.2%); pump C - acetonitrile:aqueous (90:10) solution containing H{sub 2}SO{sub 4} (0.05 M) and H{sub 3}PO{sub 4} (2%)) and a diode array detector at 325 nm. The method was validated in accordance with ANVISA guidelines and may be applied to quality control of herbal medicine with aerial parts of B. stachyoides. (author)

  1. Isolation and biological activities of secondary metabolites from the sponges monanchora aff. arbuscula, aplysina sp. petromica ciocalyptoides and topsentia ophiraphidies, from the ascidian didemnum ligulum and from the octocoral carijoa riisei; Isolamento e atividades biologicas de produtos naturais das esponjas monanchora arbuscula, aplysina sp., petromica ciocalyptoides e topsentia ophiraphidites, da ascidia didemnum ligulum e do octocoral carijoa riisei

    Energy Technology Data Exchange (ETDEWEB)

    Kossuga, Miriam H.; Lira, Simone P. de; Nascimento, Andrea M.; Gambardella, Maria Teresa P.; Berlinck, Roberto G.S. [Universidade de Sao Paulo (USP), Sao Carlos, SP (Brazil). Inst. de Quimica]. E-mail: rgsberlinck@iqsc.usp.br; Torres, Yohandra R. [Universidade Estadual do Centro-Oeste, Guarapuava, PR (Brazil). Dept. de Quimica; Nascimento, Gislene G.F. [Universidade Metodista de Piracicaba (UNIMEP), SP (Brazil). Faculdade de Ciencias da Saude; Pimenta, Eli F.; Silva, Marcio; Thiemann, Otavio H.; Oliva, Glaucius [Universidade de Sao Paulo (USP), Sao Carlos, SP (Brazil). Inst. de Fisica; Tempone, Andre G.; Melhem, Marcia S.C. [Instituto Adolfo Lutz, Sao Paulo, SP (Brazil). Div. de Biologia Medica; Souza, Ana O. de; Galetti, Fabio C.S.; Silva, Celio L. [Universidade de Sao Paulo (USP), Ribeirao Preto, SP (Brazil). Faculdade de Medicina. Dept. de Bioquimica e Imunologia; Cavalcanti, Bruno; Pessoa, Claudia O.; Moraes, Manoel O. [Universidade Federal do Ceara (UFC), Fortaleza, CE (Brazil). Faculdade de Medicina. Dept. de Fisiologia e Farmacologia; Hajdu, Eduardo [Universidade Federal do Rio de Janeiro (UFRJ), RJ (Brazil). Museu Nacional; Peixinho, Solange [Universidade Federal da Bahia (UFBA), Salvador, BA (Brazil). Dept. de Biologia; Rocha, Rosana M. [Universidade Federal do Parana (UFPR), Curitiba, PR (Brazil). Setor de Ciencias Biologicas. Dept. de Zoologia

    2007-09-15

    The investigation of extracts from six species of marine invertebrates yielded one new and several known natural products. Isoptilocaulin from the sponge Monanchora aff. arbuscula displayed antimicrobial activity at 1.3 mg/mL against an oxacillin-resistant strain of Staphylococcus aureus. Five inactive known dibromotyrosine derivatives, 2 6, were isolated from a new species of marine sponge, Aplysina sp. The sponges Petromica ciocalyptoides and Topsentia ophiraphidites yielded the known halistanol sulfate A (7) as an inhibitor of the antileishmanial target adenosine phosphoribosyl transferase. The ascidian Didemnum ligulum yielded asterubin (10) and the new N,N-dimethyl-O-methylethanolamine (11). The octocoral Carijoa riisei yielded the known 18-acetoxypregna-1,4,20-trien-3-one (12), which displayed cytotoxic activity against the cancer cell lines SF295, MDA-MB435, HCT8 and HL60. (author)

  2. Isolamento de Salmonella sp e Staphylococcus aureus no processo do abate suíno como subsídio ao sistema de Análise de Perigos e Pontos Críticos de Controle - APPCC Isolation of Salmonella sp and Staphylococcus aureus at swine slaughtering as subsidy for HACCP, the Hazard Analysis and Critical Control Point system

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Emilia do Socorro C. de Lima

    2004-12-01

    Full Text Available O presente estudo foi realizado para avaliar a presença de Salmonella sp e o número de Staphylococcus aureus na superfície de carcaças suínas e caracterizar os perigos microbiológicos em diferentes etapas do abate e pontos críticos de controle (PCCs, através da quantificação de riscos (odds ratio. Um total de 120 esfregaços superficiais de carcaça suína foi coletado em um matadouro-frigorífico, após o escaldamento/depilação (ponto A, antes da evisceração (B, após evisceração e serragem da carcaça (C e após 24 horas de refrigeração (D. Salmonella sp foi encontrada com uma freqüência média de 11,7% (14 nas carcaças, enquanto o número de S. aureus variou entre 1,2 e 1,5 log UFC/cm² em 11,7% das carcaças amostradas, sem evidenciar diferença estatística entre os pontos A, B, C e D. Pode-se concluir que os riscos de contaminação por Salmonella sp e S. aureus foram os mesmos nas etapas do abate de suínos consideradas neste estudo.This study was done to evaluate the superficial contamination of swine carcasses by Salmonella sp and Staphylococcus aureus, the identification of microbiological hazards in different segments of the processing line, and critical control points (CCPs, through the quantification of risks. A total of 120 surface swabbing carcasses were collected in a slaughterhouse: after the scalding/dehairing (point A, before evisceration (B, after evisceration and splitting (C, and after 24 hours of refrigeration (D. Salmonella sp and S. aureus were isolated from 14 (11.7% carcasses. No statistical difference between the points studied was observed. The number of S. aureus isolated was between 1.2 and 1.5 log UFC/cm². It was concluded that the risks observed were the same for both microorganisms.

  3. Detection of enterotoxin A and cytotoxin B, and isolation of Clostridium difficile in piglets in Minas Gerais, Brazil Detecção da enterotoxina A e citotoxina B e isolamento de Clostridium difficile em leitões em Minas Gerais, Brasil

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    Rodrigo Otávio Silveira Silva

    2011-08-01

    Full Text Available Clostridium difficile has emerged as a major cause of neonatal colitis in piglets, displacing classic bacterial pathogens. However, there is no information regarding the distribution of this microorganism in pig farms in Brazil. In the present study, the presence of toxins A/B and of C. difficile strains in stool samples from 60 diarrheic or non-diarrheic newborn piglets (one to seven days old, from 15 different farms, was studied. The presence of toxins A/B was detected by ELISA and PCR was used to identify toxin A, toxin B and binary toxin gene in each isolated strain. C. difficile A/B toxins were detected in ten samples (16.7%. Of these, seven were from diarrheic and three were from non-diarrheic piglets. C. difficile was recovered from 12 out of 60 (20% fecal samples. Of those, three strains were non-toxigenic (A-B- and nine were toxigenic. Of the nine toxigenic strains, four were A+B+ strains and five were A-B+ strains. The presence of binary toxin observed in the present study was much higher (50% than in previously reported studies. All three non-toxigenic strains were isolated from otherwise healthy piglets. The results suggest the occurrence of neonatal diarrhea by C. difficile in farms in Brazil.Clostridium difficile tem sido relatado como o principal causador de colite neonatal em suínos. Apesar da crescente importância deste agente, não há dados sobre infecções causadas por C. difficile em suínos no Brasil. O objetivo do presente estudo foi detectar as toxinas A/B e isolar C. difficile a partir de 60 amostras de fezes de leitões diarreicos ou apararentemente saudáveis, com no máximo sete dias de vida, e oriundos de 15 granjas diferentes. As toxinas A/B foram detectadas por ELISA e uma PCR multiplex foi utilizada para detecção dos genes responsáveis pela codificação das toxinas A, B e toxina binária. As toxinas A/B de C. difficile foram detectadas em dez amostras de fezes (16.7%. Dessas, sete eram de animais diarreicos e três de leitões aparentemente saudáveis. Foi possível isolar C. difficile em 12 das 60 (20% amostras trabalhadas. Dessas, três estirpes eram não-toxigênicas (A-B- e nove eram toxigênicas, sendo quatro caracterizadas como A+B+ e cinco como A-B+. O gene responsável pela codificação da toxina binária foi encontrado em 50% das estirpes isoladas, proporção superior ao relatado em estudos anteriores. Todas as estirpes não toxigênicas foram isoladas de animais não diarreicos. Os resultados encontrados sugerem a ocorrência de diarreia por C. difficile em granjas no Brasil.

  4. Isolation of recombinant strains with enhanced pectinase production by protoplast fusion between Penicillium expansum and Penicillium griseoroseum Isolamento de linhagens recombinantes com maior produção de pectinases por meio de fusão de protoplastos entre Penicillium expansum e Penicillium griseoroseum

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    Maurilio Antonio Varavallo

    2007-03-01

    Full Text Available Protoplast fusion between complementary auxotrophic and morphological mutant strains of Penicillium griseoroseum and P. expansum was induced by polyethylene glycol and calcium ions (Ca2+. Fusant strains were obtained in minimal medium and a prototrophic strain, possibly diploid, was chosen for haplodization with the fungicide benomyl. Different recombinant strains were isolated and characterized for occurrence of auxotrophic mutations and pectinolytic enzyme production. The fusant prototrophic did not present higher pectinase production than the parental strains, but among 29 recombinants analyzed, four presented enhanced enzyme activities. The recombinant RGE27, which possesses the same auxotrophic and morphologic mutations as the P. griseoroseum parental strain, presented a considerable increase in polygalacturonase (3-fold and pectin lyase production (1.2-fold.Fusões de protoplastos entre linhagens mutantes auxotróficas e morfológicas complementares de Penicillium griseoroseum e P. expansum foram induzidas por polietilenoglicol e íons cálcio (Ca2+. Fusionantes foram obtidos em meio mínimo e uma linhagem prototrófica, possivelmente diplóide, foi selecionada para a haploidização com o fungicida benomil. Diferentes linhagens recombinantes foram isoladas e caracterizadas quanto à presença de mutações auxotróficas e a produção de enzimas pectinolíticas. O fusionante prototrófico não apresentou maior atividade de pectinases em relação às linhagens parentais, entretanto, entre 29 recombinantes analisados, quatro apresentaram maiores atividades enzimáticas. O recombinante RGE27, o qual possui as mesmas mutações auxotróficas e morfológicas que a linhagem parental de P. griseoroseum, apresentou um aumento considerável na produção de poligalacturonase (3 vezes e de pectina liase (1,2 vezes.

  5. Isolamento da globulina majoritária, digestibilidade in vivo e in vitro das proteínas do tremoço-doce (Lupinus albus L., var. Multolupa Isolation of major globulin, in vivo and in vitro digestibility of proteins from sweet lupin (Lupinus albus L. var. Multolupa

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    Valdir Augusto Neves

    2006-12-01

    Full Text Available Os objetivos do trabalho foram isolar, purificar e estudar algumas propriedades da fração globulina majoritária de tremoço-doce, var. Multolupa; assim como avaliar as características de digestibilidade da farinha e frações isoladas. As frações protéicas foram separadas por fracionamento diferencial com uso de diferentes solventes. A globulina majoritária de tremoço-doce foi isolada, purificada por cromatografia em Q-Sepharose, revelando um único pico de proteína. Apresentou um peso molecular de 162,5 ± 10,0 kDa, determinado por cromatografia em Sephacryl S-300, e subunidades entre 20-70 kDa em PAGE-SDS. A solubilidade em função do pH e concentrações de NaCl revelaram curva típica dessa fração. A digestibilidade da proteína da farinha e das frações albumina, globulina e glutelina foi avaliada por experimentos in vitro e in vivo e se revelou alta para a fração globulina, seguida pela glutelina, albumina e farinha. A digestibilidade in vivo da fração globulina, tanto aparente quanto verdadeira, não diferiu significativamente daquela determinada para a caseína. Apesar da alta digestibilidade da fração majoritária e frações protéicas, a utilização como única fonte de proteína nas dietas revelou valores baixos de RPLR (razão protéica líquida relativa, indicando ser insuficiente para sustentar o crescimento dos animais, comparativamente à caseína.The aim of the present work was to isolate, purify and study some properties of the major globulin fraction from sweet lupin, var. Multolupa; as well as to evaluate the digestibility features of flour and isolated fractions. The protein fractions were separated by differential fractionation with different solvents. The lupin major globulin was isolated, purified by Q-Sepharose chromatography when it showed only one protein peak. The major protein presented a molecular weight of 162.5 ± 10.0 kDa, determined on Sephacryl S-300 chromatography; and subunits between 20 to 70 kDa on SDS-PAGE. The protein solubility in relation to pH and NaCl concentrations showed a typical S-like curve for globulins. The flour and the isolated protein fractions, albumins, globulins and glutelins were evaluated by in vitro and in vivo experiments. The in vitro and in vivo digestibility assays revealed a high digestibility for the globulin, followed by glutelin, albumin and the flour. The globulin in vivo digestibility did not differ significantly from that obtained to casein. Despite the high digestibility encountered for the major protein fraction and protein fractions, the use as the only protein source in the diets revealed low values for RNPR (relative net protein ratio, showing it to be insufficient in terms of sustaining the growth of animals, comparatively to casein.

  6. Isolation of a lipase-producing Trichosporon spp and enzyme extraction by two-phase aqueous system Isolamento de Trichosporon spp produtor de lipase e extração enzimática pelo sistema bifásico aquoso

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    Juliana A. Santos

    2007-03-01

    Full Text Available A lipase-producing yeast strain isolated from crude cheese and identified as Trichosporon spp produced 7.3 U/mL (59.3 U/µg after 72h of cultivation. Lipase showed optimum activity at pH 7.0-8.0 and 45-50ºC. Extraction by the two-phase aqueous system (PEG-phosphate salts showed an elevated recuperation (99.8% of enzymatic activity in the PEG phase.Uma levedura produtora de lipase isolada de queijo coalho e identificada como Trichosporon spp produziu 7,3 U/mL (59,3 U/µg após 72h de cultivo. A lipase mostrou atividade ótima em pH 7,0-8,0 e temperatura ótima entre 45-50ºC. Extração pelo sistema PEG - sais de fosfato apresentou 99,8% de recuperação da atividade enzimática na fase PEG.

  7. Isolamento e PCR para detecção de Mollicutes em muco vaginal e sua associação com problemas reprodutivos em ovinos criados na região de Piedade, São Paulo, Brasil Mollicutes isolation and PCR on ovine vaginal mucous and its association with reproductive problems in Piedade, SP, Brazil

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    Huber Rizzo

    2011-02-01

    Full Text Available Pesquisou-se Mycoplasma spp, Ureaplasma spp e Acholeplasma laidlawiii em amostras de muco vaginal de 60 ovinos, criados na região de Piedade no Estado de São Paulo, Brasil, que apresentavam ou não vulvovaginite no exame específico do sistema genital. A caracterização desses microrganismos baseou-se no cultivo e detecção do respectivo DNA pela Reação da Polimerase em Cadeia (PCR com os primers para classe Mollicutes (GPO e MGSO, para o gênero Ureaplasma (UGPF e UGPS e a espécie Acholeplasma laidlawii (UNI e ACH3. A presença de micoplasmas não foi associada com distúrbios do trato reprodutivo dos animais, entretanto todos os isolados obtidos de Ureaplasma spp foram provenientes de animais com distúrbios reprodutivos, sugerindo o possível envolvimento desse agente nas enfermidades da reprodução. A PCR para a espécie Acholeplasma laidlawii detectou somente uma amostra positiva.It was evaluated the presence of Mycoplasma spp, Ureaplasma spp and Acholeplasma laidlawiii in 60 samples of ovine vaginal mucous with the presence or absence of vulvovaginitis in the specific exam of the reproductive tract. The microorganisms were characterized based on bacteriological culture and DNA detection by Polymerase Chain Reaction (PCR with specific primers to Mollicutes (GPO and MGSO, Ureaplasma (UGPF and UGPS and Acholeplasma laidlawii (UNI and ACH3. The presence of mycoplasmas could not be associated with reproductive disorders in animals. The PCR to Acholeplasma laidlawii detected only one positive sample. However, all isolations of Ureaplasma spp were from animals presenting reproductive disorders, suggesting a possible involvement of this agent in reproductive diseases.

  8. Isolamento e seleção de microrganismos pectinolíticos a partir de resíduos provenientes de agroindústrias para produção de aromas frutais Screening of fruit flavors producing pectinolitic microorganisms isolated from agroindustrial residues

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    Mariana Uenojo

    2006-09-01

    Full Text Available As pectinases são enzimas produzidas naturalmente por plantas, fungos, leveduras e bactérias. Estes microrganismos podem ser inoculados em meios contendo resíduos agroindustriais utilizados como fonte de carbono para a produção de compostos de maior valor agregado, como enzimas, etanol, proteínas, aminoácidos e compostos de aroma. Vários microrganismos foram isolados e selecionados quanto à produção de enzimas pectinolíticas pelo método da placa, através de zonas claras de degradação de pectina ao redor da colônia. De 104 linhagens testadas, 18 foram selecionadas para fermentarem em meio líquido, contendo pectina para a determinação de atividade de poligalacturonase (PG e de pectina liase (PMGL, e em meio frutose/extrato de levedura para produção de aromas. As linhagens 2, 9, 20, 39, 70, 74 e 99 apresentaram unidades de atividade de PG superiores a 80 µmol de ácido galacturônico/mL/min, as linhagens 17, 18, 31, 37, 73, 74 e 125 apresentaram unidades de atividade de PMGL superiores a 1000 etamol de produtos insaturados/mL/min e as linhagens 13, 70, 73, 74, 125 e 144 apresentaram os melhores descritores e as maiores intensidades de aromas percebidos por um painel não treinado de provadores.Pectinases are enzymes used in food industries, produced by plants, fungi, yeasts and bacteria. These microorganisms can be inoculated in a medium containing agro-industrial residues from processing agricultural products, used as a carbon source to produce value-added products such as enzymes, ethanol, proteins, amino acids and flavor compounds. Several microorganisms were isolated and selected due to their capacity to produce pectinolytic enzymes in clear halos around colonies by plate assay. From 104 strains, 18 were inoculated in a medium containing pectin as a carbon source and the pectinolytic activities of polygalacturonase (PG and pectin lyase (PMGL were determined. Strains 2, 9, 20, 39, 70, 74, and 99 showed activity units of PG higher than 80 µmol galacturonic acid/mL/minute. Strains 17, 18, 31, 37, 73, 74 and 125 showed activity units of PMGL higher than 1000 etamol unsaturated products/mL/minute. Strains 13, 70, 73, 74, 125 and 144 showed good signs of flavor noticed in the fructose and yeast extract medium and the most intense flavor according to a non-trained board of tasters.

  9. Flavonoids from Lonchocarpus araripensis (Leguminoseae): isolation, unequivocal assignment of NMR signals {sup 1}H and {sup 13}C and conformational analysis; Flavonoides de Lonchocarpus araripensis (Leguminoseae): isolamento, atribuicao inequivoca dos sinais de RMN {sup 1}H e {sup 13}C e analise conformacional

    Energy Technology Data Exchange (ETDEWEB)

    Lima, Almi F.; Ferreira, Daniele A.; Monte, Francisco Jose Q., E-mail: fmonte@dqoi.ufc.br [Universidade Federal do Ceara (UFC), Fortaleza, CE (Brazil). Centro de Ciencias. Departamento de Quimica Organica e Inorganica; Braz-Filho, Raimundo [Universidade Estadual do Norte Fluminense (UENF), Campo dos Goytacazes, RJ (Brazil). Centro de Ciencias Tecnologicas. Laboratorio de Ciencias Quimicas

    2014-07-01

    In a continuing investigation for potentially bioactive natural products, flavonoids were isolated from Lonchocarpus araripensis (Leguminoseae) and identified as 3-methoxy-6-O-prenyl-6'',6''-dimethylchromene-[7,8,2'',3'']-flavone (1), 3,6-dimethoxy-6'',6''-dimethylchromene-[7,8,2'',3'']-flavone (2) and 3,5,8-trimethoxy-[6,7,2{sup ,}3{sup ]}-furanoflavone (3). This is the first time compound 3 has been described. Compound 2 has been previously isolated from roots while this is the first time 1 is reported in this species. Complete NMR assignments are given for 1 ,2 and 3 together with the determination of conformation for 1. (author)

  10. Otimização do processo de extração e isolamento do antimalárico artemisinina a partir de Artemisia annua L. Optimization of the extraction and isolation of the antimalarial drug artemisinin from Artemisia annua L.

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    Rodney Alexandre Ferreira Rodrigues

    2006-04-01

    Full Text Available Malaria is still one of the major diseases in the world, causing physical and economic problems in tropical regions. Artemisinin (Qinghaosu, a natural compound identified in Artemisia annua L. , is an effective drug mainly against cerebral malaria. The action of this drug is immediate and parasitaemia in the treatment of drug-resistant malaria is rapidily reduced, justifying the industrial production of artemisinin. This article focuses on the industrial production of this potent antimalarial drug, including strategies for enhancing yield using inexpensive and easy steps.

  11. Constituintes químicos de Parmotrema lichexanthonicum Eliasaro & Adler: isolamento, modificações estruturais e avaliação das atividades antibiótica e citotóxica Chemical constituents of parmotrema lichexanthonicum Eliasaro & Adler: isolation, structure modification and evaluation of antibiotic and cytotoxic activities

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Ana C. Micheletti

    2009-01-01

    Full Text Available From the lichen Parmotrema lichexantonicum were isolated the depsidone salazinic acid, the xanthone lichexanthone, and the depside atranorin. The two major compounds, salazinic acid and lichexanthone, were selected for structure modifications. Salazinic acid afforded O-alkyl salazinic acids, some of them potentially cytotoxic against tumor cell lines (HCT-8, SF-295 and MDA/ MB - 435. From lichexanthone were obtained norlichexanthone, 3-O-methylnorlichexanthone, 3-O-methyl-6-O-prenylnorlichexanthone, 3,6-di-O-prenyl-norlichexanthone, 3,6-bis[(3,3-dimethyloxyran-2-ilmethoxy]-1-hydroxy-8-methyl-9H-xanten-9-one and 3,6-bis[3-(dimethylaminepropoxy]-1-hydroxy-8-methyl-9H-xanten-9-one. The last compound was the most active against S. aureus.

  12. Isolation of Pseudomonas aeruginosa strains from dental office environments and units in Barretos, state of São Paulo, Brazil, and analysis of their susceptibility to antimicrobial drugs Isolamento de cepas de Pseudomonas aeruginosa provenientes do meio ambiente e de equipos dentarios em clinicas dentarias em Barretos, São Paulo, Brasil; analises da susceptibilidade das cepas a drogas antimicrobianas

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    Ana Claudia de Oliveira

    2008-09-01

    Full Text Available A wide variety of opportunistic pathogens has been detected in the tubing supplying water to odontological equipment, in special in the biofilm lining of these tubes. Among these pathogens, Pseudomonas aeruginosa, one of the leading causes of nosocomial infections, is frequently found in water lines supplying dental units. In the present work, 160 samples of water, and 200 fomite samples from forty dental units were collected in the city of Barretos, State of São Paulo, Brazil and evaluated between January and July, 2005. Seventy-six P. aeruginosa strains, isolated from the dental environment (5 strains and water system (71 strains, were tested for susceptibility to six antimicrobial drugs most frequently used against P. aeruginosa infections. Susceptibility to ciprofloxacin, followed by meropenem was the predominant profile. The need for effective means of reducing the microbial burden within dental unit water lines is emphasized, and the risk of exposure and cross-infection in dental practice, in special when caused by opportunistic pathogens like P. aeruginosa, are highlighted.Uma ampla variedade de patógenos oportunistas tem sido detectadas nos tubos de alimentação de água dos equipos odontológicos, particularmente no biofilme formado na superfície do tubo. Entre os patógenos oportunistas encontrados nos tubos de água, Pseudomonas aeruginosa é reconhecida como uma das principais causadoras de infecções nosocomiais. Foram coletadas 160 amostras de água e 200 amostras de fomites em quarenta clinicas odontológicas na cidade de Barretos, São Paulo, Brasil, durante o período de Janeiro a Julho de 2005. Setenta e seis cepas de P. aeruginosa, isoladas a partir dos fomites (5 cepas e das amostras de água (71 cepas, foram analisadas quanto à susceptibilidade à seis drogas antimicrobianas freqüentemente utilizadas para o tratamento de infecções provocadas por P. aeruginosa. As principais suscetibilidades observadas foram para a ciprofloxacina, seguida pelo meropenem. A necessidade de um mecanismo efetivo para reduzir a contaminação bacteriana dentro dos tubos de alimentação de água dos equipos odontológicos foi enfatizada, e o risco da exposição ocupacional e infecção cruzada na prática odontológica, em especial quando causada por patógenos oportunistas como a P. aeruginosa foi realçado.

  13. Contaminação fecal da ostra Crassostrea rhizophorae e da água de cultivo do estuário do Rio Pacoti (Eusébio, Estado do Ceará: Isolamento e identificação de Escherichia coli e sua susceptibilidade a diferentes antimicrobianos

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    Regine Helena Silva dos Fernandes Vieira

    2008-06-01

    Full Text Available This study has been designed to assess the microbiological quality of oyster Crassostrea rhizophorae and of the water used in farms located at the Pacoti River estuary, Ceará State, by means of the MPN of total coliforms (Ct and thermtolerant coliforms (CT. The database consisted of 15 samples collected from June to November, 2006. The water was kept within the limits set up by the current legislation. MPN values were in the ranges of <1.8 18,000 Ct per 100 ml and <1.8 2,000 CT per 100 ml, for the water, and <1.8 3,500 Ct per gram and <1.8 2,800 CT per gram for the oyster itself. Twenty-five strains isolated from the cultivation water and identified as Escherichia coli were tested for susceptibility to a few antimicrobians and proved resistant to ampicillin, nitrofurantoin, tetracycline, sulfazotrin, nalidixic acid, ciprofloxacin and imipenem. From the oysters, four strains were identified as E. coli and proved resistant to tetracycline and imipenem. From the afore-mentioned results, it can be concluded that: Pacoti River waters have received a clean bill of health according to the national legislation; the majority of water-isolated E.coli strains (59.43% were sensitive to the currently used antimicrobians, except for imipenem to which 80% of the identified E. coli strains proved resistant; sensitivity of the oyster-isolated E. coli strains was found to be high to most of the tested antimicrobians. In all, it is suggested that more clear management measures be made available so as to allow for microbiological quality evaluation of raw-consumed mollusks.

  14. Fungos endofíticos em Annona spp.: isolamento, caracterização enzimática e promoção do crescimento em mudas de pinha (Annona squamosa L. Endophytic fungi of Annona spp.: isolation, enzymatic characterization of isolates and plant growth promotion in Annona squamosa L. seedlings

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    Roberta Lane de Oliveira Silva

    2006-09-01

    Full Text Available A partir de folhas, caules e raízes de plantas de pinha e graviola coletadas em Pernambuco foram obtidos 110 e 90 isolados fúngicos endofíticos, respectivamente. Vinte e nove isolados foram selecionados e avaliados quanto à produção de enzimas extracelulares, através do método qualitativo em placas com meios sólidos específicos, e à capacidade de estimular o crescimento de mudas de pinha. Esses isolados foram identificados como pertencentes aos gêneros Acremonium (10,34%, Aspergillus (3,45%, Chaetomium (3,45%, Colletotrichum (10,34%, Cylindrocladium (13,8%, Fusarium (31,03%, Glomerella (3,45%, Nigrospora (6,9%, Penicillium (6,9% e Phomopsis (10,34%. Dezenove isolados apresentaram atividade lipolítica, cinco atividade proteolítica e nenhum deles atividades celulolítica ou amilolítica. Onze isolados dos gêneros Acremonium (GFR6 e GRR1, Colletotrichum (GFR4 e PFR4, Phomopsis (PFR3 e GCR4, Cylindrocladium (GRR4, Chaetomium (GRR7 e Fusarium (GRR5, PRR1 e PRR6 promoveram eficientemente o crescimento vegetal. Os índices de aumento da biomassa seca da parte aérea de mudas de pinha variou de 23,2 a 32,7%, sendo que nenhum isolado promoveu a biomassa seca da raiz. Destaca-se também que 20 isolados apresentaram efeito deletério significativo (P = 0,05 na biomassa seca da raiz das mudas de pinha. Em tecidos aparentemente sadios de plantas de pinha e graviola são encontrados alguns fungos que podem promover o crescimento da parte aérea, como também reduzir o crescimento da raiz e outros sem efeito no crescimento de mudas de pinha.Endophytic isolates of fungi were obtained from leaves, stems and roots of 110 sweetsop and 90 soursop plants from Pernambuco. Twenty-nine isolates were analyzed for production of extracellular enzymes by qualitative assay in Petri dishes containing specific solid media, and for the capacity to promote growth of sweetsop seedlings. These isolates were identified as Acremonium (10.34%, Aspergillus (3.45%, Chaetomium (3.45%, Colletotrichum (10.34%, Cylindrocladium (13.8%, Fusarium (31.03%, Glomerella (3.45%, Nigrospora (6.9%, Penicillium (6.9% and Phomopsis (10.34%. Nineteen isolates showed lypolytic activity while five showed proteolytic activity; cellulolytic and amylolytic activity were not detected. Eleven isolates of the genera Acremonium (GFR6 and GRR1, Colletotrichum (GFR4 and PFR4, Phomopsis (PFR3 and GCR4, Cylindrocladium (GRR4, Chaetomium (GRR7 and Fusarium (GRR5, PRR1 and PRR6 efficiently improved plant growth. Increase in shoot dry matter of sweetsop seedlings ranged from 23.2 to 32.7%; there was no increase in root dry matter. It is worthy of note that 20 isolates caused significant (P = 0.05 reduction in root dry matter of sweetsop seedlings. In apparently healthy tissues of sweetsop and soursop plants, some fungi promote shoot growth or reduce root growth, while others have no effect on growth of sweetsop seedlings.

  15. Do Reino de Axum ao Reino da Etiópia (Século I D.C. ao século XVII: A Força e o Isolamento do Cristianismo na África do Norte e Nordeste

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    Alberto Manuel Vara Branco

    2016-02-01

    Full Text Available O reino da Etiópia é produto da presença do Cristianismo no Norte e Nordeste de África. Perante o avanço do Islamismo, no século VII depois de Cristo, o Reino da Etiópia isolou-se do mundo exterior, nomeadamente dos Centros Religiosos de Constantinopla e Roma.

  16. Ácido clavulânico e cefamicina c: uma perspectiva da biossíntese, processos de isolamento e mecanismo de ação Clavulanic acid and cephamicin c: a perspective of the biosynthesis, isolation and action mechanism

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    Jaine H. H. Luiz de Oliveira

    2009-01-01

    Full Text Available The present article reviews different aspects of the chemistry of two widely used β-lactam antibiotics Clavulanic Acid and Cephamycin C. The article discusses important details of the biosynthesis of these compounds, their action mechanism and, principally, the methods employed in their isolation and purification, in accordance with the available literature. Despite the large quantity of available articles and patents concerning β-lactam antibiotics, those which describe the isolation and purification of Clavulanic Acid and Cephamycin C are rare. Overall, the intention of this article is to discuss the up-to-date scientific research related to the compounds under review.

  17. Processos de eliminação de contaminantes microbianos durante o isolamento e a manutenção de linhagens fúngicas de referência Proceedings to avoid contaminants during isolation and storage of standard fungal strains

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    Elisa Yoko Hirooka

    2000-05-01

    Full Text Available Linhagens fúngicas destinadas a pesquisa científica são provenientes de material orgânico, onde ocorre intensa interação entre os mais variados grupos taxonômicos de microrganismos. O desenvolvimento de uma metodologia capaz de remover totalmente esses contaminantes indesejáveis é fundamental para garantir a característica original da linhagem em estudo. Empregando-se isolados de Fusarium spp., obtidos de milho e rações animais, analisou-se a interferência de bactérias resistentes a antibióticos e leveduras na manutenção de linhagens fúngicas. O ensaio demonstrou contaminação freqüente de microrganismos resistentes a tetraciclina, estreptomicina e cloranfenicol na microbiota natural de milho e de rações animais. O melhor controle dos interferentes foi obtido com tetraciclina, segundo avaliação por replica-plate e crescimento em meio líquido. Na análise de 168 linhagens de Fusarium spp. mantidos por seis meses a 4ºC, 36 cepas apresentaram contaminantes. A técnica de esgotamento em BDA mais antibiótico repurificou 21 cepas. As 15 cepas restantes só foram repurificadas pela técnica de diluição/plaqueamento, desenvolvida neste trabalho e recomendada para ser utilizada como último recurso na recuperação de linhagens de referências contaminadasThe fungal strains for scientific purposes are isolated from environments, where interaction of extensive taxonomical groups is a common phenomenon, requiring development of a method that assures elimination of microbial interference and preserves original characteristic of strains. In this study, using Fusarium strains isolated from corn and animal food, the interference of antibiotic resistant bacteria and yeast contamination in the fungal strains storage was evaluated. Although frequent contamination by tetracycline, streptomycine and chloramphenicol resistant microorganisms was detected in both corn and animal food, tetracycline showed the best antibacterial effect. Following 6 months storage at 4ºC, 36 cultures of 168 single spored Fusarium strains developed atypical colonies, indicating some contamination. By plating these cultures in BDA medium added with antibiotic, 21 strains were purified, but the technique was unable to reisolate the remaining ones. The purity of these 15 strains was recuperated using dilution/plate technique proposed here, which used combination of dilution process followed by plating in BDA medium surface. The procedure is recommended as the final step for fungal strains recuperation, which allows elimination of fast growing undesirable organisms

  18. Isolamento e caracterização de Pseudomonas maltophilia (Hugh & Ryschenkow, 1960 de material clínico humano, na cidade do Rio de Janeiro Isolating and characterization of Pseudomonas maltophilia (Hugh & Ryschenkow, 1960 from human clinical specimens, in Rio de Janeiro, Guanabara, Brazil

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    Altair A. Zebral

    1973-01-01

    Full Text Available Os autores estudaram as propriedades morfo-bioquímicas e a sensibilidade às substâncias antimicrobianas, de uma nova e rara espécie de Pseudomonas, a Pseudomonas maltophilia (Hugh & Ryschenkow, 1960, isolada de secração vaginal. Como características marcantes, dentre mais de 65 testadas, as amostras estudadas mostraram ser: oxidase negativa e lisina descarboxilase positiva; produziram desoxiribonuclease e um pigmento escuro que se difunde no meio; atacaram oxidativamente a maltose tanto em meio complexo nitrogenado como em meio de Hugh & Leifson e hidrolisaram a esculina. As amostras foram sensíveis ao cloranfenicol, gentamicina, kanamicina, colistin e gabromicina.The authors have studied the morpho-biochemical properties and the sensibility at antimicrobial drugs, of specie of Pseudomonas, the Pseudomonas maltophilia, (Hugh & Ryschenkow, 1960, isolated from vaginal secretion. Since important characteristics among more of sixty-five tested, the strains studied show to be: oxidase negative and lysine decarboxylase positive; to present deoxyrononuclease activity and produced a diffusible brown pigment: acid was produced by oxidation of maltose as much in nitrogenous complex medium as in Hugh & Leifson medium and they hydrolise the esculin. the strains was sensible, for the colistin chloranfenicol, gabromycin, gentamycin and nalidix acid.

  19. Isolamento, caracterização e diferenciação de células-tronco mesenquimais do líquido amniótico equino obtido em diferentes idades gestacionais Isolation, characterization and differentiation of mesenchymal stem cells derived from equine amniotic fluid obtained from different gestacional ages

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Bruna De Vita

    2013-04-01

    Full Text Available O interesse nas pesquisas com células-tronco derivadas de anexos fetais de diversas espécies cresceu exponencialmente nas últimas décadas em virtude de serem fontes de células-tronco adultas com potencial de diferenciação em diversas linhagens celulares que apresentam pouca ou nenhuma imunogenicidade, apresentando-se assim como alternativa de grande importância para a formação de bancos celulares. Apesar do crescente interesse, os estudos para espécie equina ainda são escassos. O objetivo deste trabalho foi isolar, caracterizar e diferenciar células-tronco mesenquimais (CTMs derivadas do líquido amniótico equino obtidas do terço inicial, médio e final da gestação (LA-CTMs, comparando suas características. Foram colhidas 23 amostras de líquido amniótico as quais foram submetidas às análises morfológica, imunocitoquímica, imunofenotípica por citometria de fluxo e às diferenciações osteogênica, adipogênica e condrogênica in vitro. Todas as amostras demonstraram adesão ao plástico e morfologia fibroblastóide. No ensaio imunocitoquímico as células de todos os grupos foram imunomarcadas para CD44, PCNA e vimentina com ausência de marcação para citoqueratina e Oct-4. Na citometria de fluxo observou-se a expressão de CD44 e CD90 e ausência de expressão de CD34, sendo que os marcadores CD44 e CD90 mostraram padrão de expressão decrescente em relação ao desenvolvimento gestacional. As amostras obtidas de todas as fases da gestação foram capazes de diferenciação nas linhagens osteogênica, condrogênica e adipogênica. Portanto, as células obtidas do líquido amniótico apresentaram características morfológicas, imunofenotípicas e potencial de diferenciação típicos das CTMs, demonstrando que a colheita pode ser realizada em qualquer fase gestacional. No entanto, mais pesquisas devem ser realizadas principalmente quanto à expressão de marcadores de pluripotencialidade (como o Oct-4 e ao seu potencial de diferenciação em linhagens extra mesodermais já relatados na literatura.The interest in stem cells derived from fetal annexes of many species has exponentially increased during the last decades, because they are adult stem cell sources with potential of differentiation in several cell lineages; which present little or no immunogenicity and are an alternative with great importance for storage cell banks. Despite the rising interest, studies for the equine species are still rare. The aim of this study was to isolate, characterize and differentiate mesenchymal stem cells derived from equine amniotic fluid obtained from initial, middle and late third of gestation (AF-MSCs, and compare their results. Twenty three samples from equine amniotic fluid were evaluated by morphological, immunocytochemical and immunophenotypical (Flow cytometer assays and osteogenic, adipogenic and chondrogenic in vitro differentiation. All samples demonstrated plastic adhesion and fibroblastoid morphology. The immunocytochemical assay demonstrated cells from all the studied groups were positive for CD44, PCNA and vimentin and negative for cytokeratin and Oct-4. Flow cytometry demonstrated expression of CD44 and CD90 and no expression of CD34, where CD44 and CD90 markers presented decreasing pattern of expression in relation to the gestational development. All samples collected from all gestational phases were capable to differentiate in osteogenic, chondrogenic and adipogenic lineages. Thus, cells obtained from equine amniotic fluid presented morphological and immunophenotypical characteristics and potential of differentiation typical of MSCs showing that the collection can be performed at any stage of pregnancy. However, more studies should be performed about the expression of pluripotent markers as Oct-4 and the differentiation potential for extra mesodermal lineages prior demonstrated in the literature.

  20. Reevaluation of the insulating levels to lightning impulse of the transformers of the 500 kV substations of the Itaipu trunk; Reavaliacao dos niveis de isolamento a impulso atmosferico dos transformadores das substacoes de 500 kV do tronco de Itaipu

    Energy Technology Data Exchange (ETDEWEB)

    Carvalho, F.M.S.; Vaisman, R.; Fonseca, C.S. [FURNAS, Rio de Janeiro, RJ (Brazil)

    1987-12-31

    This work shows a study made to reduce the insulating levels of the transformers in the 500 kV substations of the Itaipu trunk utilizing lightning-arresters of zinc oxide near this equipment 15 refs., 3 figs., 1 tab.

  1. Isolation and survival of Yersinia enterocolitica in ice cream at different pH values, stored at -18°c Isolamento e sobrevivência de Yersinia enterocolitica em sorvetes de distintos pH, armazenados a -18°C

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Norma B. Barbini de Pederiva

    2000-09-01

    Full Text Available The presence of Yersinia enterocolitica was investigated in 203 samples of industrial (123 and non-industrial ice cream (80. Two Y. enterocolitica strains were isolated from non-industrial ice cream, which suggests the possibility of post-manufacturing contamination. One strain was typed as B:1A, O: 3,50,51; lis Xz, while the other one was biotyped as: B:1A but not serologically typed. Survival of Y. enterocolitica was investigated by inoculating nine samples of industrially manufactured ice cream to contain 20 CFU/ml of Y. enterocolitica and stored at -18°C for 480 days. The inoculated samples were classified into three different groups according to their pH (Group 1: pH 4-5; Group 2: pH 5-6 and Group 3: pH 6-7. Viability was determined by a combination of direct plating and enrichment. In Group 1, Y. enterocolitica was not detected after 150 days of storage, while in Groups 2 and 3, this microorganism was isolated until day 480 of storage. These findings suggest that the survival time of Y. enterocolitica in ice cream stored at -18°C is significantly (p Neste estudo pesquisou-se a presença de Yersinia enterocolitica em 203 amostras de sorvetes, sendo 123 de fabricação industrial e 80 de fabricação artesanal. Isolaram-se 2 cepas a partir de sorvetes artesanais, uma das quais foi caracterizada como B:1A, O:3,50, 51; lis Xz e a outra se tipificou como Y. enterocolitica B:1A mas não se tipificou sorologicamente, o que sugere uma contaminação pós processo. Em 9 dos sorvetes de fabricação industrial de distintos pH, estudou-se a sobrevivência desse microrganismo, inoculando-os com 20 UFC/ml de Y. enterocolitica, quando armazenados durante 480 dias a -18°C. Esses sorvetes, segundo seu pH, agruparam-se em: Grupo 1: pH: 4-5, Grupo 2: pH 5-6 e Grupo 3: pH: 6-7. Determinou-se a viabilidade pelas curvas de morte usando semeadura direta e enriquecimento. Nos sorvetes do grupo 1, Y. enterocolitica só foi detectada até o 150° dia de armazenagem, enquanto que nas amostras dos grupos 2 e 3, pelo menos até o 480° dia da experiência. Nossos resultados mostram que a sobrevivência de Y. enterocolitica em sorvetes armazenados a - 18°C foi significativamente menor (p <= 0.05 em amostras com pH < 5.

  2. Bacillus cereus produtor de substâncias semelhantes a bacteriocinas (BLIS): isolamento, caracterização preliminar e aplicação de extrato semi-purificado contendo BLIS para inibição de Listeria monocytogenes em polpa de fruta

    OpenAIRE

    Juliana Abigail Leite

    2012-01-01

    Mudanças nos hábitos alimentares dos consumidores têm aumentado a demanda por frutas frescas e polpas de frutas. Com isso, a busca por novos compostos com atividade antimicrobiana é de grande interesse, já que a aplicação de aditivos químicos convencionais em alimentos tem sido reavaliada devido à potencial toxicidade de alguns desses compostos. As bacteriocinas ou BLIS, produzidas por diferentes gêneros bacterianos, têm despertado grande interesse industrial para aplicação em alimentos em pr...

  3. Isolation, morphological identification and pathogenicity of Cylindrocladium scoparium and C. clavatum isolates obtained from plants rhizosphere cultivated in Pernambuco State Isolamento, identificação morfológica e patogenicidade de isolados de Cylindrocladium scoparium e C. clavatum da rizosfera de plantas cultivadas no Estado de Pernambuco

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Vitorina Nerivânia Covello Rehn

    2004-12-01

    Full Text Available Twelve isolates of Cylindrocladium scoparium and 4 isolates of C. clavatum were obtained from the rhizosphere of various species of plants by baiting with Ricinus communis leaves. The isolates of C. scoparium developed conidia of 32-(45-60 x 3 -(4-5 µm, and pyriform to ellipsoidal vesicles. C. clavatum showed conidia of 36-(44-49 x 2-(4-6 µm and clavate vesicles. All isolates induced necrosis on leaves and hypocotyls of eucalypt seedlings, with varying expression of symptoms.Doze isolados de Cylindrocladium scoparium e 4 isolados de C. clavatum foram obtidos da rizosfera de diversas plantas usando folhas de Ricinus communis como isca. A primeira espécie mostrou conídios com dimensões de 32-(45-60 x 3 -(4-5 µm e vesícula piriforme a elipsoidal. Os conídios de C. clavatum apresentaram dimensões entre 36-(44-49 x 2-(4-6 µm e vesícula clavada. Em plântulas de eucalipto todos os isolados induziram necrose em folhas e hipocótilos, variando apenas na expressão dos sintomas.

  4. Comparação de períodos de observação no teste de inoculação em camundongos para o isolamento do vírus da raiva | Comparison of observation periods in mouse inoculation test for the isolation of rabies virus

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Ana Carolina Nunes de Morais

    2015-08-01

    Full Text Available O teste de inoculação intracerebral em camundongos (IC é rotineiramente utilizado no diagnóstico da raiva para ratificar o teste de imunofluorescência direta (IFD; no entanto não existe concordância sobre o tempo mínimo de observação dos animais. O objetivo do presente estudo foi avaliar a IC com confirmação por IFD, comparando o desempenho do diagnóstico em sete dias com aquele realizado em 21 dias de observação em camundongos lactentes e desmamados. Foram utilizadas 2.953 amostras de animais suspeitos, recebidas para diagnóstico de raiva no período de 2005 a 2011 na Secretaria Municipal de Saúde da Prefeitura da Cidade do Rio de Janeiro. A análise estatística demonstrou elevada sensibilidade do diagnóstico (97,43%; 95,45%; 100% e excelente concordância (99,76%; 99,29%; 98,71% ao comparar os resultados na IFD com os obtidos em camundongos lactentes observados por sete e 21 dias e desmamados, respectivamente. Estes resultados inferem que a IC realizada em sete dias em camundongos lactentes possibilita a precocidade do diagnóstico de raiva, o que pode antecipar a tomada de decisões dos serviços de saúde envolvidos com o tratamento profilático antirrábico humano, bem como as ações dos serviços de vigilância epidemiológica da doença. ----------------------------------------------------------------------------------------------- Mouse inoculation test (MIT is routinely used in rabies diagnosis to attest the direct fluorescent antibody test (DFA, however there is no agreement on the minimum observation period. The aim of this study was to evaluate MIT with confirmation by DFA, comparing the diagnostic performance between seven and 21 days held in suckling and weaned mice. For this, 2,953 samples received for rabies diagnosis in the period of 2005- 2011 by Secretaria Municipal de Saúde da Prefeitura da Cidade do Rio de Janeiro were analyzed. Statistical analysis showed high diagnostic sensitivity (97.43%; 95.45%; 100%, and excellent agreement (99.76%; 99.29%; 98.71% when comparing the results obtained in DFA with the results obtained from suckling mice observed along seven and 21 days and weaned mice respectively. These results infer that MIT performed in seven days using suckling mice enables early diagnosis of rabies, which can anticipate the decisions of health services involved with human prophylactic treatment services, as well as the epidemiological monitoring of rabies.

  5. Isolamento do verbacosídeo e validação de método analítico para padronização do extrato bruto das partes aéreas de Buddleja stachyoides Cham. & Schltdl. (Scrophulariaceae

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Daniella M. S. de Oliveira

    2014-04-01

    Full Text Available Phenylpropanoid glycoside verbascoside was isolated and identified from the ethyl acetate fraction of the aerial parts of Buddleja stachyoides Cham. & Schltdl. by 1H-NMR. A method using high-performance liquid chromatography has been developed and validated for determination of verbascoside in alcoholic crude extract of the aerial parts of B. stachyoides. Analysis was performed on a Phenomenex® Gemini-NX C18 analytical column (250 mm × 4.6 mm; 5 µm using a mobile phase (pump A - aqueous solution containing H2SO4 (0.01 M, H3PO4 (0.4%, and (C2H52NH (0.4%; pump B - methanol:aqueous (95:5 solution containing H2SO4 (0.05 M, H3PO4 (2%, and (C2H52NH (0.2%; pump C - acetonitrile:aqueous (90:10 solution containing H2SO4 (0.05 M and H3PO4 (2% and a diode array detector at 325 nm. The method was validated in accordance with ANVISA guidelines and may be applied to quality control of herbal medicine with aerial parts of B. stachyoides.

  6. Human vaccinia-like virus outbreaks in São Paulo and Goiás States, Brazil: virus detection, isolation and identification Surtos de vírus Vaccinia-like nos Estados de São Paulo e Goiás, Brasil: detecção, isolamento e identificação viral

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Teresa Keico Nagasse-Sugahara

    2004-04-01

    Full Text Available Since October 2001, the Adolfo Lutz Institute has been receiving vesicular fluids and scab specimens of patients from Paraíba Valley region in the São Paulo and Minas Gerais States and from São Patricio Valley, in the Goiás State. Epidemiological data suggested that the outbreaks were caused by Cowpox virus or Vaccinia virus. Most of the patients are dairy milkers that had vesiculo-pustular lesions on the hands, arms, forearms, and some of them, on the face. Virus particles with orthopoxvirus morphology were detected by direct electron microscopy (DEM in samples of 49 (66.21% patients of a total of 74 analyzed. Viruses were isolated in Vero cell culture and on chorioallantoic membrane (CAM of embryonated chicken eggs. Among 21 samples submitted to PCR using primers for hemagglutinin (HA gene, 19 were positive. Restriction digestion with TaqI resulted in four characteristic Vaccinia virus fragments. HA nucleotide sequences showed 99.9% similarity with Cantagalo virus, described as a strain of Vaccinia virus. The only difference observed was the substitution of one nucleotide in the position 616 leading to change in one amino acid of the protein in the position 206. The phylogenetic analysis showed that the isolates clustered together with Cantagalo virus, other Vaccinia strains and Rabbitpox virus.A partir de outubro de 2001, o Instituto Adolfo Lutz tem recebido amostras de líquido vesicular e crostas de lesões de pele de pacientes das regiões do Vale do Paraíba, Estado de São Paulo e do Vale do São Patricio, Estado de Goiás. Os dados clínicos e epidemiológicos sugeriam que os surtos poderiam ser causados por Cowpox virus ou Vaccinia virus. A maioria dos pacientes era ordenhadores que tinham lesões vesicopustulares nas mãos, braços, antebraços e alguns na face. A análise por microscopia eletrônica direta (MED detectou partículas com morfologia de vírus do gênero Orthopoxvirus em amostras de 49 (66,21% pacientes dos 74 analisados. Os vírus foram isolados em membrana corioalantóide (MCA de ovo embrionado de galinha e em linhagem celular Vero com confirmação por MED e PCR. Das 21 amostras de lesões submetidas ao PCR utilizando iniciadores para o gene da hemaglutinina (HA, 19 foram positivas. A digestão por enzima de restrição TaqI resultou em quatro fragmentos característicos de Vaccinia virus. A análise nucleotídica do seqüenciamento revelou que esses vírus apresentam 99,9% de similaridade com o Cantagalo virus, descrito como uma cepa de Vaccinia virus, havendo apenas alteração de um nucleotídeo na posição 616 com mudança de um aminoácido na proteína na posição 206. A análise filogenética mostrou que os isolados se agruparam junto aos Cantagalo virus, outras cepas de Vaccinia virus e Rabbitpox virus.

  7. Morfologia de Osteodermos de Crocodilomorfos do Sítio Paleontológico de Peirópolis (Bacia Bauru, Cretáceo Superior.

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Thiago da Silva Marinho

    2006-07-01

    Full Text Available Osteoderms are dermal bony plates situated over the epiderm andcovered by queratin layer. Until now are recognized at the Paleontological Site of Peirópolis three distinct crocodylomorph species, the Peirosauridae Peirosaurus termini Price, 1955 and Uberabasuchus terrificus Carvalho; Ribeiro & Ávilla, 2004 and the Trematochampsidae Itasuchus jesuinoi Price, 1955. The peirosaurids have nostrils frontally positioned within the skull and are regarded as terrestrial crocodylomorphs. The trematochampsids differentlyfrom the peirosaurids have the nostrils positioned at the dorsal portion of the skull, similar to the extant crocodiles with aquatic habits. The osteoderms morphological analysis of P. tormini, U. terrificus and I. jesuinoi corroborate, with the cranial evidences, for the terrestrial or aquatic lifestyle of these animals.

  8. Isolamento e perfil de suscetibilidade de bactérias de pé diabético e úlcera de estase venosa de pacientes admitidos no pronto-socorro do principal hospital universitário do estado de Goiás, Brasil Isolation and susceptibility profile of bacteria in diabetic foot and venous stasis ulcer of patients admitted to the emergency room of the main university hospital in the state of Goiás, Brazil

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Ly de Freitas Fernandes

    2007-09-01

    Full Text Available CONTEXTO: Lesões infectadas de membros inferiores (úlceras diabéticas e úlceras de estase venosa são causa de grande sofrimento e incapacitação funcional com impacto social, econômico e aumento do risco de complicações severas. OBJETIVO: Caracterizar a microbiota e determinar o perfil de suscetibilidade antimicrobiana das bactérias isoladas de lesões de membros inferiores secundárias a úlcera de estase venosa e pé diabético. MÉTODOS: Foram incluídos no estudo pacientes portadores de lesões de membros inferiores, sendo diabéticos, e pacientes com úlcera de estase venosa, atendidos em um serviço de urgência de um hospital universitário de Goiânia (GO, no período de fevereiro de 2005 a agosto de 2006. A coleta de material foi realizada com swab de algodão para realização de cultura e teste de sensibilidade antimicrobiana, empregando-se técnicas preconizadas. RESULTADOS: Das amostras analisadas, foi detectada a presença de bactérias em 88,46%. Os cocos gram-positivos foram caracterizados como Staphylococcus aureus e Staphylococcus epidermidis. Dentre os bastonetes gram-negativos, detectou-se Pseudomonas aeruginosa,Escherichia coli,Proteus mirabilis e Enterobacter sp. CONCLUSÕES: Os microrganismos isolados das lesões de membros inferiores (pé diabético e úlcera de estase venosa incluíram bactérias gram-positivas e negativas, sendo Staphylococcus aureus,Pseudomonas aeruginosa e Escherichia coli as mais freqüentes, com elevada resistência a diversos antimicrobianos.BACKGROUND: Infected lower limb injuries (diabetic ulcers and venous stasis ulcers cause great suffering and functional disability with social and economic impact and increase in risk of severe complications. OBJECTIVE: To characterize the microbiota and determine the antimicrobial susceptibility profile of isolated bacteria in lower limb injuries secondary to the venous stasis ulcer and diabetic foot. METHODS: Patients with lower limb lesions were included in the study, both diabetics and patients with venous stasis ulcer, receiving care at the emergency service of a university hospital in Goiânia (Brazil from February 2005 to August 2006. Samples were collected with cotton swab to perform culture and antimicrobial sensitivity test applying standardized techniques. RESULTS: Presence of bacteria was detected in 88.46% of the samples. Gram-positive cocci were characterized as Staphylococcus aureus and Staphylococcus epidermidis. Among Gram-negative rods, Pseudomonas aeruginosa,Escherichia coli,Proteus mirabilis and Enterobacter sp. were detected. CONCLUSIONS: Isolated microorganisms of lower limb injuries (diabetic foot and venous stasis ulcer included Gram-positive and Gram-negative bacteria, such as Staphylococcus aureus,Pseudomonas aeruginosa and Escherichia coli, which werethemost frequent and highly resistant to several kinds of antimicrobial agents.

  9. Enumeração e isolamento de bactérias anaeróbias facultativas num reator de fluxo ascendente e manta de lodo tratando efluente de uma indústria de gelatina - DOI: 10.4025/actascibiolsci.v25i2.1977 Enumeration and isolation of facultative anaerobic bacteria in an upflow anaerobic sludge blanket reactor treating wastewater from a gelatine industry- DOI: 10.4025/actascibiolsci.v25i2.1977

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Celso Vataru Nakamura

    2003-04-01

    Full Text Available Neste trabalho foram determinados os níveis de bactérias anaeróbias facultativas em Reator de Fluxo Ascendente e Manta de Lodo (UASB utilizado no tratamento de efluente de industria de gelatina. A quantificação dos microrganismos apresentou similar valor na manta de lodo granular e na zona de fluidização. No compartimento de sedimentação do reator as bactérias foram dois logs menores. Estas comunidades são compostas principalmente de bacilos Gram-negativos. Os mais abundantes gêneros foram Acinetobacter, Aeromonas, Citrobacter, Escherichia, Klebsiella e Stenotrophomonas. O significado para a saúde pública das bactérias isoladas no reator UASB é desconhecido. Algumas espécies são residentes permanentes, outras são encontradas em somente uma parte da população, e ainda outras espécies são patógenos oportunistas que causam infecção humana. No presente estudo, nenhuma das bactérias predominantes pertence ao grupo dos patógenos estritosThis experiment measured levels of facultative anaerobic bacteria in an Upflow Anaerobic Sludge Blanket (UASB reactor treating wastewater from a gelatin industry. The microorganism quantification showed similar values in granular sludge bed and fluidized zone. In the settling compartment of reactor, the bacteria were two logs lower. These communities are composed mainly of Gram-negative rods. The most abundant genera isolated were Acinetobacter, Aeromonas, Citrobacter, Escherichia, Klebsiella and Stenotrophomonas. The significance of the bacteria isolated from UASB reactor for public health is unknown. Some species are permanent residents; other are found only in a fraction of the population, and still other species are opportunistic pathogens that cause human infections. In the present study, none of the predominant bacteria belonged to the group of strict pathogens

  10. Determinação de metodologia para oisolamento de protoplastos de tangerina Cleópatra (Citrus reshni Hort.)

    OpenAIRE

    OLIVEIRA, R.P. de; Mendes,B.M.J.; Tulmann Neto,A.

    1995-01-01

    A hibridação somática via fusão de protoplastos vem sendo utilizada no melhoramento de porta-enxertos de citros em diversos países. Nos Estados Unidos, vários estudos demonstram a eficiência de procedimentos no isolamento e cultivo de protoplastos dessa frutífera. O presente trabalho foi realizado com o objetivo de avaliar o efeito do meio de cultivo de calos embriogênicos do porta-enxerto tangerina Cleópatra (Citrus reshni Hort.) sobre o isolamento de protoplastos, bem como sugerir alteraçõe...

  11. Effect of suramin on myotoxicity of some crotalid snake venoms

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    E.Z. Arruda

    2002-06-01

    Full Text Available We investigated the protective effect of suramin, an enzyme inhibitor and an uncoupler of G protein from receptors, on the myotoxic activity in mice of different crotalid snake venoms (A.c. laticinctus, C.v. viridis, C.d. terrificus, B. jararacussu, B. moojeni, B. alternatus, B. jararaca, L. muta. Myotoxicity was evaluated in vivo by injecting im the venoms (0.5 or 1.0 mg/kg dissolved in physiological saline solution (0.1 ml and measuring plasma creatine kinase (CK activity. Two experimental approaches were used in mice (N = 5 for each group. In protocol A, 1 mg of each venom was incubated with 1.0 mg suramin (15 min, 37ºC, in vitro, and then injected im into the mice at a dose of 1.0 mg/kg (in vivo. In protocol B, venoms, 1.0 mg/kg, were injected im 15 min prior to suramin (1.0 mg/kg, iv. Before and 2 h after the im injection blood was collected by orbital puncture. Plasma was separated and stored at 4ºC for determination of CK activity using a diagnostic kit from Sigma. Preincubation of some venoms (C.v. viridis, A.c. laticinctus, C.d. terrificus and B. jararacussu with suramin reduced (37-76% the increase in plasma CK, except for B. alternatus, B. jararaca or L. muta venoms. Injection of suramin after the venom partially protected (34-51% against the myotoxicity of B. jararacussu, A.c. laticinctus and C.d. terrificus venom, and did not protect against C.v. viridis, L. muta, B. moojeni, B. alternatus or B. jararaca venoms. These results show that suramin has an antimyotoxic effect against some, but not all the North and South American crotalid snake venoms studied here.

  12. Úlcera de córnea por Pseudomonas stutzeri

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Fellipe Berno Mattos

    2012-04-01

    Full Text Available Este relato aborda um caso atípico de úlcera de córnea em uma criança de 09 anos, causado pela bactéria Pseudomonas stutzeri, um micro-organismo oportunista cujo isolamento em olhos é extremamente raro.

  13. Interpretazione assiologica, principio di bilateralità pattizia e (ineguale libertà di accedere alle intese ex art. 8, terzo comma, Cost.

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Jlia Pasquali Cerioli

    2016-07-01

    SOMMARIO: 1. La sentenza n. 52 del 2016 della Corte costituzionale – 2. La portata assiologica (e non meramente procedimentale del principio di bilateralità pattizia – 3. Valenza assiologica e profili attuativi nell’esercizio della bilateralità pattizia – 4. L’isolamento della dinamica bilaterale dalla promozione di un effettivo pluralismo confessionale – 5. Brevi annotazioni finali- 6. Appendice.

  14. The Late Cretaceous fauna and flora of the Uberaba area (Minas Gerais State, Brazil)

    Science.gov (United States)

    Candeiro, Carlos Roberto A.; Santos, Adriano R.; Bergqvist, Lílian P.; Ribeiro, Luiz Carlos B.; Apesteguía, Sebastián

    2008-03-01

    The Uberaba area, in Minas Gerais State, Brazil, yields a rich continental fauna and flora from the Late Cretaceous Uberaba and Marília formations. This paper reviews the diversity of the biota recorded from these formations. The most significant taxa from Peirópolis are the frog Baurubatrachus pricei, the turtle Cambaremys langertoni, the lizard Pristiguana brasiliensis, the crocodyliforms Itasuchus jesuinoi, Peirosaurus tormini and Uberabasuchus terrificus, the titanosaurian Baurutitan britoi, Trigonosaurus pricei, Aeolosaurus sp., indeterminate titanosaurians, and abelisaurid, carcharodontosaurid and maniraptoran theropods. Together with faunas of a similar age in Argentina and Madagascar, the assemblages contribute to a better understanding of Late Cretaceous Gondwanan faunas as a whole.

  15. Role of adipose-derived stem cells in chronic cutaneous wound healing.

    Science.gov (United States)

    Caruana, Giorgia; Bertozzi, Nicolò; Boschi, Elena; Pio Grieco, Michele; Grignaffini, Eugenio; Raposio, Edoardo

    2015-01-01

    Le ulcere cutanee croniche colpiscono circa l’1% della popolazione adulta e il 3.6% della popolazione con più di sessantacinque anni di età. Per quanto riguarda l’impegno finanziario per la terapia delle ulcere cutanee, questo è pari a sette miliardi di euro annui a livello mondiale. Le cellule staminali mesenchimali prelevate da lipoaspirato (ASCs) rappresentano una delle frontiere più promettenti della medicina rigenerativa. Diversi studi hanno, infatti, dimostrato l’efficacia terapeutica di questa popolazione di cellule staminali nel trattamento delle ulcere cutanee croniche. Le ASCs hanno caratteristiche morfologiche e funzionali paragonabili alle cellule staminali del midollo osseo (BMSCs), tuttavia se ne differenziano per la maggiore facilità di prelievo e isolamento, e per il loro più cospicuo numero. È, infatti, sufficiente eseguire una liposuzione tradizionale e in seguito utilizzare metodiche d’isolamento appropriate per ottenere un pellet di ASCs pronte per essere innestate nel fondo e nel margine dell’ulcera cutanea, al fine di promuoverne la guarigione. Diversi sono i protocolli d’isolamento; i più diffusi prevedono complicati e lunghi procedimenti, caratterizzati dal susseguirsi di differenti prodotti sia chimici sia biologici, i quali sono non solo costosi ma anche potenzialmente pericolosi. Il nostro protocollo d’isolamento richiede solo 15’ e prevede che il lipoaspirato sia prima sistemato in uno shaker cellulare e successivamente in una centrifuga così da ottenere le ASCs richieste per la terapia. L’uso delle ASCs si è rivelato una risorsa preziosa per la terapia delle ulcere cutanee croniche, accelerando significativamente il processo di guarigione e la rigenerazione dei tessuti; con protocolli d’isolamento efficaci e semplificati, il loro utilizzo routinario risulta essere facilitato.

  16. Contribuição à biologia de serpentes da Bahia, Brasil: I. vivíparas Contribution to reproductive biology of snakes in Bahia, Brazil: I. viviparous

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Rejane Maria Lira-da-Silva

    1994-01-01

    Full Text Available Great part of lhe avaiable data about snakes reprodution refers to species coming from subtropical and temperate regions. In Brazil, the data is rather rare and can be found in various works where information is restricted. Results from studies developed with five viviparous snakes - Crotalus durissus cascavella (Wagler, 1824. Bothrops erythromelas(Amaral, 1923, B. leucurus (Wagler, 1824, Helicops leopardinus (Schlegel, 1873 and Thamnodynastes strigilis (Thiinberg, 1787 - which come from the Northeast of Brazil (Bahia are described. Data about pregnancy and birth, number, sex ratio, length and weight of neonates is given and discussed.

  17. Structural studies of the oligomeric formation crotoxin and their complexes; Estudos estruturais da formacao oligomerica da crotoxina e seus complexos

    Energy Technology Data Exchange (ETDEWEB)

    Morelli, Humberto A.S.; Fernandes, Carlos A.H.; Magro, Angelo J.; Fontes, Marcos R.M.; Fernandez, Roberto M., E-mail: rmorato@ibb.unesp.br [Universidade Estadual Paulista Julio de Mesquita Filho (UNESP), Botucatu, SP (Brazil). Inst. de Biociencias. Dept. de Fisica e Biofisica; Bicev, Renata N.; Oliveira, Cristiano L.P. de [Universidade de Sao Paulo (USP), Sao Paulo, SP (Brazil). Inst. de Fisica. Dept. de Fisica Experimental; Barioni, Marina B.; Ito, Amando S. [Universidade de Sao Paulo (USP), Ribeirao Preto, SP (Brazil). Fac. de Filosofia, Ciencias e Letras. Dept. de Fisica

    2013-08-15

    The crotoxin is a phospholipase A{sub 2} that is the mainly responsible for the neurotoxic effect of the snakes' venom of the species Crotalus durissus, popularly known as rattlesnakes. In the crotoxin there are two subunits: an acidic, non-toxic and devoid of enzymatic action, (called crotoxin A or CA); and a basic, toxic with enzymatic activity (called crotoxin B or CB). The main objective of this work is to study the CA, CB and the complex CA + CB using the Small-Angle X-ray Scattering (SAXS), Optical absorption spectrometry and static fluorescence techniques. (author)

  18. Ação de venenos de serpentes brasileiras sôbre a alexina ou complemento

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    F. da Rocha Lagôa

    1947-06-01

    Full Text Available O autor estudou a ação inativante, sôbre o complemento de cobaia, alguns venenos de serpentes brasileiras pertencentes às famílias dos Elapideos e Crotalideos. Da primeira, foi utilizado veneno de Micrurus frontalis, da segunda, foram usados venenos de espécies pertencentes aos gêneros Crotalus (C. terrificus e Bothrops (B. atrox, B. neuwiedii, B. jararaca, B. ja-raracussú, B. cotiara e B. alternata. O venenos de M. frontalis e C. terri¬ficus se revelaram incapazes de inativar o complemento, ao passo que os diversos de Bothrops empregados se mostraram altamente inativantes, destruindo sempre o 4.° componente do complemento (C4, fração idêntica à afetada pela ação da amônea.The author shows in this paper the results of the inactivation of com¬plement or alexin by some Brazilian snakes venoms of the Elapideae and Cro¬talideae families. The venom of Micrurus frontalis (Elapideae family and of Crotalus terrificus (Crotalideae family did not destroy the complement; but the venoms of Bothrops generus (B. atrox, B. neuwiedii, B. jararaca, B. jararacussú, B. cotiara e B. alternata, (Crotalideae family are highly active in the inactivation complement, always destroing the fourth component, whichis exactly the same component that is detroyed by ammonia.

  19. [Toxicity of venoms from snakes of medical importance in México].

    Science.gov (United States)

    de Roodt, Adolfo R; Estévez-Ramírez, Judith; Paniagua-Solís, Jorge F; Litwin, Silvana; Carvajal-Saucedo, Alejandro; Dolab, Jorge A; Robles-Ortiz, Luis E; Alagón, Alejandro

    2005-01-01

    The characterization of the toxic activities of snake venoms is necessary to understand the physiopathology of the envenomation and to test the potency of the antivenoms used to treat this pathology. Because of the lack of data on the toxic activities of venoms from Mexican snakes of medical importance, we studied the venoms from Bothrops asper, Athropoides nummifrr, Agkistrodon billineatus, Crotalus durissus durissus, Crotalus basiliscus, Crotalus scutulatus, Crotalus atrox and Micrurus nigrocinctus. The studies performed were: SDS-PAOE, determination of lethal potency, hemorrhagic, necrotizing, coagulation on plasma and fibrinogen, phospholipasic and fibri(noge)nolytic activities. In addition we studied the neutralizing capacity of the toxic activities of an antivenom currently used for the treatment of snakebites in Mexico. The venom from viperids showed important hemorrhagic, necrotizing, coagulative on plasma, prothrombinic, fibrinogenolytic and phospholipase activities. The venoms with the highest lethal potency were those of Micrurus nigrocinctus and Crotalus scutulatus; however, the viperine venom that globally displayed the most potent toxic activities was from Bothrops asper. All the venoms showed toxic activities of similar range to those described for other American venomous snakes. The activity on plasma or fibrinogen varied widely among the different venoms but all displayed capacity to act on the coagulation system. The antivenom tested not only neutralized the lethality B. asper venom but also its other toxic activities.

  20. Estudo fitoquímico da espécie Pterocaulon interruptum DC. (Asteraceae Phytochemical study of Pterocaulon interruptum Dc., Asteraceae

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Ana Carolina Winkler Heemann

    2006-12-01

    Full Text Available A análise fitoquímica das partes aéreas de Pterocaulon interruptum DC. (Asteraceae resultou no isolamento de cinco compostos: uma cumarina, sabandinol, dois esteróides, estigmasterol e 3-O-acetil-taraxasterol e dois flavonóides, quercetina e taxifolina 7-O-prenilada. As estruturas destas substâncias foram estabelecidas por análises espectroscópicas, sendo que este é o primeiro trabalho sobre o isolamento destes compostos em Pterocaulon interruptum DC.Chemical investigation of the aerial parts of Pterocaulon interruptum DC., Asteraceae, resulted in the isolation of five compounds: one coumarin, sabandinol, two steroids, stigmasterol and 3-O-acetyl taraxasterol and two flavonoids, quercetin (flavonol and 7-O-prenyl taxifolin (dihydroxyflavonol. The structures of these compounds were established by spectroscopic analysis. This paper deals with the first report of these compounds in Pterocaulon interruptum DC.

  1. Controle ativo de ruído aplicado a venezianas acústicas

    OpenAIRE

    MACIEL, MARCELA ALVARES

    2014-01-01

    O desenvolvimento de novas tecnologias para esquadrias acústicas ventiladas insere-se no contexto da promoção da eficiência energética de edificações, que inclui a compatibilização da dicotomia climatização natural e isolamento acústico de edificações. Tradicionalmente, a utilização de métodos passivos para controle de ruído em esquadrias apresenta limitação de isolamento acústico em baixas frequências, com perda por transmissão inferior a 10 dB. Alternativamente, técnicas para...

  2. Ocorrência de microrganismos anaeróbios estritos no escarro de pacientes com bronquite crônica

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Jorge R. Spitz

    1974-06-01

    Full Text Available No escarro de pacientes hospitalizados com bronquite crônica foram isolados microrganismos anaeróbios estritos - Fusobacterium, Veillonella, Bacteroides melaninogenicus, Peptrostreptococcus, Actinomyces ou difteróides anaeróbios. Como o isolamento de anaeróbios estritos foi realizado em alíquotas da diluição 1O-³ do escarro fluidificado e em 83% dos casos não houve isolamento simultâneo no material do orofaringe, considera-se como de origem brônquica os anaeróbios isolados e não como contaminação do escarro no orofaringe e cavidade oral.

  3. Cervical celullitis in broiler chickens for Escherichia coli/ Celulite cervical em frangos de corte causada por Escherichia coli

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Ivens Gomes Guimarães

    2002-05-01

    Full Text Available In this paper was report the isolation of Escherichia coli in broiler chickens with cellulitis in the cervical region. It was carried through the isolation of E. coli of the lesion of cellulitis from broilers and carried through histopathological examination of skin that had characterized the lesion. Focal ulcerations of epidermis, fibrin in dermis and difuse infiltrated by lymphocytes and heterophils on subcutaneous tissues.Neste trabalho, relata-se o isolamento de Escherichia coli em frangos de corte apresentando lesão de celulite na região cervical. Foi realizado o isolamento de E. coli da lesão de celulite e realizado exames histopatológicos que caracterizaram a lesão. Na epiderme foram verificadas lesões ulcerativas, presença de fibrina na derme e infiltração difusa de linfócitos e heterófilos no tecido subcutâneo.

  4. Substâncias isoladas das folhas de Bauhinia microstachya (Raddi Macbr. (Caesalpiniaceae

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    E.M. Bianco

    2003-12-01

    Full Text Available Neste trabalho é relatado o isolamento de três substâncias das folhas de Bauhinia microstachya (Raddi Macbr., Caesalpiniaceae, incluindo dois constituintes isolados pela primeira vez nesta espécie, a vitexina e o hidrocarboneto hexatriacontano. As estruturas desses compostos foram estabelecidas através de estudos de RMN- 1H 1D, 2D e EM.

  5. Aspectos sorológicos e epidemiológicos da leishmaniose tegumentar americana canina em Maricá, Rio de Janeiro, Brasil

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Uchôa Claudia Maria Antunes

    2001-01-01

    Full Text Available Foram estudados 261 cães (134 moradias do Município de Maricá, RJ, Brasil, visando avaliar a resposta sorológica e infecção ativa para leishmaniose tegumentar americana (LTA. Oito cães apresentaram lesões sugestivas, sendo o isolamento positivo em 3. Pelo ELISA, 24,5% (64/261 apresentaram reatividade (sensibilidade = 66% e especificidade = 76%, estando associado ao isolamento em 2 e 0,4% (1/261 pela imunofluorescência indireta (RIFI sem associação com isolamento. Para a redução de reações inespecíficas no ELISA, utilizou-se um segundo critério para obtenção do cutoff (sensibilidade = 33% e especificidade = 93%, obtendo positividade de 6,9% (18/261 associando-se ao isolamento em um animal. Sete pessoas apresentaram cicatrizes de LTA e uma lesão ativa em tratamento. A não associação da infecção ativa dos cães à sorologia pela IFI e o grande número de resultados inespecíficos encontrado pelo ELISA, restringe o uso isolado destas no diagnóstico precoce da LTA. O encontro de lesões ativas confirma a circulação recente da Leishmania em Maricá, indicando a necessidade de estudos nesta região.

  6. Geografia, marxismo e subdesenvolvimento

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Milton Santos

    2015-04-01

    Full Text Available As categorias do pensamento marxista não são inovações em Geografia. As razões pelas quais são raramente discutidas pertencem a dois tipos: 1 o relativo isolamento das chamadas "escolas nacionais" que ignoram frequentemente os avanços em outras línguas e 2 as ideias marxistas nunca alcançaram a marca de uma aprovação oficial.

  7. Constituintes químicos voláteis e não-voláteis de Moringa oleifera Lam., Moringaceae Volatile and non-volatile chemical constituents of Moringa oleifera Lam., Moringaceae

    OpenAIRE

    2009-01-01

    O estudo fitoquímico do extrato etanólico das folhas de Moringa oleifera Lam., Moringaceae, resultou no isolamento dos derivados benzilnitrilas niazirina, niazirinina e 4-hidroxifenil-acetonitrila, enquanto que das cascas dos frutos somente o octacosano foi obtido. Os óleos essenciais das folhas, flores e frutos foram analisados por cromatografia gasosa acoplada a espectrometria de massa. Os constituintes principais identificados foram: fitol (21,6%) e timol (9,6%) nas folhas, octadecano (27,...

  8. Proteomica degli exosomi urinari per la ricerca di biomarcatori nella nefropatia diabetica e nelle tubulopatie ereditarie

    OpenAIRE

    Corbetta,

    2015-01-01

    Le urine costituiscono il fluido biologico di elezione nella ricerca di biomarcatori per le patologie renali in quanto possono essere raccolte in modo semplice e non invasivo; una strategia per la semplificazione del proteoma urinario è rappresentata dall’isolamento degli exosomi urinari (UE), nanovescicole di membrana (30-100 nm) rilasciate dalle cellule epiteliali nello spazio urinario. In questo lavoro abbiamo focalizzato l’attenzione sulla nefropatia diabetica (DN), una comune complicazio...

  9. Ingegneria del tessuto cardiaco: strategie sperimentali per la riparazione del danno miocardico irreversibile in un modello animale

    OpenAIRE

    Alfano, Antonia

    2011-01-01

    La ricerca nel campo dell'ingegneria tissutale applicata alla patologia cardiaca ha compiuto notevoli progressi negli ultimi anni,numerosi studi in vivo ed in vitro ne attestano le notevoli potenzialità terapeutiche. In questo studio abbiamo esaminato l’efficacia di scaffold a base di collagene di tipo I per il trapianto di cellule cardiache in un modello animale di infarto miocardico. Il disegno sperimentale ha previsto l’isolamento di cardiomiociti neonatali di ratto, i quali sono stati suc...

  10. La riqualificazione energetica e architettonica del patrimonio edilizio recente. Il caso dei quartieri di edilizia residenziale pubblica

    OpenAIRE

    Annarita Ferrante; Elena Cattani; Nicola Bartolini; Giovanni Semprini

    2012-01-01

    Nell’ambito dell’attuale riflessione sulla fattibilità degli interventi di riqualificazione energetica, l’esperienza condotta nel quartiere Corticella a Bologna propone una revisione aggiornata dei metodi e delle tecnologie finalizzate al contenimento energetico degli edifici. In particolare, a partire da ipotesi di intervento standard, come isolamento e sostituzione degli infissi, nella riqualificazione degli edifici sono state ipotizzate soluzioni di incremento volumetrico; tali soluzioni s...

  11. Attivismo, farmaci antiretrovirali e riplasmazione del sé come forme di cittadinanza biopolitica

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Vinh-Kim Nguyen

    2013-07-01

    Full Text Available Nel 1994, due anni dopo aver scoperto di essere sieropositivo, Dominique Esmel, un giovane studente di legge di Abidjan, fondò uno dei primi gruppi per persone sieropositive in Africa, Lumière-Action, “Abbiamo scelto questo nome perché sentivamo di vivere nelle tenebre”, Dominique mi disse; “Volevamo uscire dall’ombra del nostro isolamento e vivere alla luce della solidarietà”.

  12. Pesquisa de bactérias patogênicas em leite pasteurizado tipo C comercializado na cidade do Recife, Pernambuco, Brasil

    Directory of Open Access Journals (Sweden)

    Padilha Maria do Rosário de Fátima

    2001-01-01

    Full Text Available Visando complementar as informações sobre a qualidade microbiológica do leite comercializado na cidade do Recife, foram analisadas 250 amostras de leite pasteurizado tipo C e 50 amostras de leite cru para a pesquisa de Yersinia enterocolitica e Listeria monocytogenes, bactérias patogênicas capazes de se desenvolverem em temperatura de refrigeração. Y. enterocolitica não foi encontrada em nenhuma das amostras analisadas, entretanto foi detectada a presença de Y. intermedia e Y. frederiksenii, espécies ambientais que se comportam como patógenos oportunistas. L. monocytogenes também não foi encontrada, mas, através da metodologia empregada para seu