Sample records for tyrosinase
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Pesquisa de células malignas circulantes em pacientes com melanoma maligno de coróide/ Detection of circulating malignant cells in patients with uveal melanoma

Fernandes, Bruno F.; Antecka, Emilia; Passos, Gilberto dos; Burnier Jr., Miguel N.
2007-08-01

Resumo em português OBJETIVO: Avaliar a possibilidade de identificação de células malignas circulantes nas amostras de sangue periférico de pacientes brasileiros com melanoma maligno de coróide enviadas para análise no exterior. MÉTODOS: Os marcadores melan-A e tirosinase foram usados para detectar a presença de células malignas circulantes, pela transcrição reversa seguida de reação em cadeia da polimerase e análise seqüencial de DNA (RT-nested-PCR), em seis pacientes com mel (mais) anoma maligno de coróide, diagnosticados no Brasil. RESULTADOS: Cinco pacientes deste grupo (83,33%) foram considerados positivos. A reação de RT-nested-PCR foi positiva para melan-A em quatro (66,7%) e positiva para tirosinase em quatro (66,7%) dos seis pacientes testados. Três (50%) pacientes foram positivos para os dois marcadores. Um (16,7%) paciente foi negativo para ambos marcadores. CONCLUSÃO: A pesquisa de células malignas circulantes usando RT-nested-PCR, foi positiva na maioria dos pacientes estudados. A qualidade das amostras de sangue periférico dos pacientes brasileiros foi mantida no material preservado mesmo após ter sido enviado ao exterior. Resumo em inglês PURPOSE: The purpose of our study was to detect circulating malignant cells (CMCs) in oversea-shipped blood samples of patients with uveal melanoma diagnosed in Brazil. METHODOS: Melan-A and tyrosinase were the two markers used for the detection of CMCs, using reverse transcriptase nested polymerase chain reaction (RT-nested-PCR) in 6 patients with uveal melanoma. The expression of beta-actin and GAPDH were used to assess the quality of the material. RESULTS: Five patient (mais) s (83.33%) tested positive for the presence of CMCs. The RT-nested-PCR was positive for melan-A in 4 patients (66.7%) and positive for tyrosinase in 4 (66.7%) of the 6 patients. Three (50%) patients were positive for both markers. One (16.7%) patient was negative for both markers. All negative controls were negative. CONCLUSION: The quality of the blood samples shipped overseas, from patients with uveal melanoma, was preserved. The detection of CMCs using RT-nested-PCR was positive in the majority of the patients.

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Aspectos imunológicos do sistema enzimático fenoloxidase de Schistosoma mansoni/ Immunological aspects of the phenol oxidase enzymatic system of Schistosoma mansoni

Ribeiro-Paes, João Tadeu; Costa, Paulo Inácio da; Silva, Duarte da; Barth, Léo Roberto; Rodrigues, Vanderlei
1994-10-01

Resumo em português O sistema enzimático fenoloxidase (EC 1.10.3.1, EC 1.10.3.2) está amplamente distribuido entre os seres vivos, tendo sido descrito em diferentes espécies do reino animal e vegetal. Apesar de desempenhar um papel fundamental na formação da cápsula ou parede dos ovos de trematódeos, o sistema enzimático fenoloxidase (PO) tem sido pouco estudado nesses organismos. No presente trabalho são apresentados os resultados iniciais de imunizações de coelhos contra PO de f (mais) êmeas adultas de S. mansoni e tirosinase de cogumelo (Sigma). As análises imunológicas, realizadas através de imunodifusão dupla (teste de Ouchterlony) e imunoeletroforese, revelaram identidade imunitária parcial entre a PO de machos e fêmeas. Não se observou reação cruzada entre os antissoros de coelhos imunizados contra PO e aqueles com tirosinase, indicando que, embora os sítios catalíticos de ambas as enzimas devam ser semelhantes, já que atuam sobre os mesmos substratos, os determinantes antigênicos devem ser diferentes. Os resultados descritos no presente trabalho representam um primeiro passo no sentido da purificação das isoenzimas da fenoloxidase e sua posterior utilização ao estudo dos mecanismos moleculares envolvidos na esclerotização da parede dos ovos de S. mansoni. Resumo em inglês The phenol oxidase enzymatic system (EC 1.10.3.1, EC 1.10.3.2) is widespread in different species of the animal and vegetal kingdom. Despite its importance in the eggshell formation of the trematodes phenol oxidase (PO) has been little studied in these organisms, mainly in S. mansoni. This report presents the initial results concerning the immunization of rabbits with PO of S. mansoni and mushroom tyrosinase. The immunological analysis done by means of double immu-nodifus (mais) ion (Ouchterlony) and immunoelectrophoresis techniques revealed some immunological identity between the PO of males and females. It was not seen cross reaction between the antisera against PO and tyrosinase, what suggests that the antigenic determinants of both enzymes are different in spite of their catalytic sites being similar, since they act over the same substrate. The results reported here represent a first step in way to obtain the PO isoenzymes in their pure form and should open new insights for further studies on the molecular mechanisms involved in the sclerotization process of the S. mansoni eggshell.

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Linfonodo sentinela em melanoma de criança: relato de caso/ Sentinel lymph node in children with melanoma: case report

Oliveira Filho, Renato Santos de; Paiva, Geruza Rezende; Ferreira, Lydia M.; Alves, Marcos Chaves de Arruda; Santos, Ivan Dunshee A.O.; Enokihara, Milvia M.S.S.
2002-10-01

Resumo em português Objetivo: apresentar um caso de melanoma cutâneo na infância, submetido à biópsia de linfonodo sentinela. Descrição: criança de 12 anos de idade, portadora da síndrome do nevo displásico, desenvolveu melanoma em dorso. A biópsia excisional revelou melanoma (Breslow = 1,5 mm), sendo submetida a tratamento cirúrgico da lesão, com ampliação de margem de 2cm e biópsia de linfonodo sentinela. O exame anatomopatológico não mostrou doença residual. O exame do l (mais) infonodo sentinela não mostrou metástases ao exame histopatológico por hematoxilina eosina, nem à imunohistoquímica (S100 e HMB45). No entanto, a pesquisa de RNA mensageiro da tirosinase por RT-PCR se mostrou positiva. A paciente não mostrou sinais de metástase ou recidiva local nestes doze meses iniciais de seguimento. Comentários: o melanoma é raro em crianças, corresponde a menos de 1% dos tumores da infância. Inúmeros trabalhos mostram o aumento da incidência mundial do melanoma. Em cerca de 70%, se originam de nevos melanocíticos pré-existentes, e nos 30% restantes, eles surgem de novo. Dada a agressividade do melanoma, a sobrevida depende do diagnóstico precoce. A biópsia do linfonodo sentinela tem contribuído na decisão de se realizar ou não a linfadenectomia completa, e alguns autores já estão utilizando a mesma em crianças. Resumo em inglês Objective: to present a case of a child who was subjected to sentinel lymph node biopsy for cutaneous melanoma. Description: a 12 year-old child with Dysplastic Nevus Syndrome developed melanoma on the lumbar region. The excision biopsy revealed a melanoma with depth of 1.5 mm. The patient was submitted to amplification of the margins 2 cm in all directions and the sentinel node was also excised. The histopathological exam did not show residual disease. Sentinel on exam d (mais) id not show metastases either under hematoxylin-eosin stain or immunohistochemistry (S-100 and HMB45). Therefore, RT-PCR for tyrosinase mRNA was positive. The patient has been followed for twelve months without evidence of recurrence. Comments: childhood melanoma is rare, corresponding to less than 1% of malignant tumors in children. Data point to a worldwide increase in its incidence. Melanoma occurs in melanocytic lesions in 70% and in the remaining 30% it occurs de novo. Melanoma is very aggressive, so the survival depends on an early diagnosis. Sentinel lymph node biopsy has selected patients to complete lymphadenectomy. Some authors have been using this technique in childhood melanoma.

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