Sample records for tissue cultures
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1

Estudo do ciclo evolutivo do "Schizotrypanum Cruzi" em cultura de tecidos de embrião de galinha

Romaña, C.; Meyer, H.
1942-01-01

Resumo em português Culturas de tecido de embrião de galinha foram contaminadas com Schizotrypanum de diversas procedências. Serviram como material de contaminação, culturas em tubos de agar-sangue e em um caso sangue parasitado de cobaia. Os transplantes de tecidos foram mantidos em cultura de acordo com a técnica de Carrel, ligeiramente modificada. Os tecidos usados foram baço, miocárdio, fígado, epitélio da iris, gânglio espinhal e monócitos do sangue de galinha adulta. Em todo (mais) s estes tecidos o Schizotrypanum foi facilmente cultivado, parasitando os diferentes tipos de células existentes: fibroblastos, histiocitos, macrófagos, células epiteliais, células nervosas, etc. Os autores puderam seguir o ciclo completo do parasito, confirmando os conhecimentos clássicos da sua evolução no tecido: transformação em leishmânia, multiplicação por divisão binária, transformação em critídia e finalmente em tripanosoma adulto. Também observaram formas parasitárias que aparentemente evoluiram diretamente da forma de leishmânia à de tripanosoma, sem passar por critídia. Conseguiu-se a infecção de um camondongo inoculado com S. cruzi de origem humana passado por cultura de tecidos. Os autores também estudam diferentes fenômenos observados nas relações entre as células e os parasitos. Resumo em inglês Chick embryo tissue cultures were smeared with Schizotrypanum from different sources. The cultures were inoculated with flagellates from blood-agar cultures and in one instance from blood of an infected guinea-pig. Carrel’s technique of tissue culture, with slight modifications, was employed. The tissue used were spleen, myocardium, liver, epithelium of the iris, spinal ganglion and monocytes from chicken blood. In all these tissues the flagellate developed easily, para (mais) sitizing different types of cells: fibroblasts, histiocytes, macrophages, epithelial cells, cells of the nervous system, etc. The authors were able to follow the complete cycle of the parasite, observing its classic evolution: transformation into leishmania, multiplication by binary division, transformation into crithidia and finally into trypanosome. They also observed forms of the parasite which possibly developed directly from leishmania to trypanosome without apparently going through the crithidia stage. They succeeded in infecting a white mouse with a human strain of S. cruzi after passage through tissue culture. The authors also pointed out different phenomena observed in the relations between the cells and the parasites.

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Produção de metabólitos secundários em cultura de células e tecidos de plantas: o exemplo dos gêneros Tabernaemontana e Aspidosperma/ Production of plant secondary metabolites in plant cell and tissue culture: the example of Tabernaemontana and Aspidosperma genera

Fumagali, Elisângela; Gonçalves, Regina Aparecida Correia; Machado, Maria de Fátima Pires Silva; Vidoti, Gentil José; Oliveira, Arildo José Braz de
2008-12-01

Resumo em português Os estudos dos metabólitos secundários de plantas se desenvolveram aceleradamente nos últimos 50 anos. Estes compostos são conhecidos por desempenharem um papel importante na adaptação das plantas aos seus ambientes e também representam uma fonte importante de substâncias farmacologicamente ativas. As técnicas de cultura de células de plantas iniciaramse na década de 1960 como uma possível ferramenta para estudar e produzir os metabólitos secundários de plan (mais) tas. O uso de cultura de células de planta para a produção de substâncias de interesse contribuiu grandemente para avanços em diversas áreas da fisiologia e bioquímica vegetal. Diferentes estratégias, usando sistemas de cultura in vitro, foram estudadas com o objetivo de aumentar a produção de metabólitos secundários. As plantas dos gêneros Aspidosperma e Tabernaemontana são importantes fontes de alcalóides indólicos biologicamente ativos, sendo que no Brasil existe um número considerável de espécies destes gêneros. As culturas de células de Aspidosperma e Tabernaemontana foram iniciadas há pelo menos 16 anos, as quais produzem um grande número de alcalóides, o que estimulou o desenvolvimento de diversas técnicas para sua produção, extração e identificação. Resumo em inglês Studies on plant secondary metabolites have been increasing over the last 50 years. These compounds are known to play a major role in the adaptation of plants to their environment and an important source of active pharmaceuticals. Plant cell culture technologies were introduced at the end of the 1960s as a possible tool for both studying and producing plant secondary metabolites. Different strategies, using in vitro systems, have been extensively studied with the objectiv (mais) e of improving the production of secondary plant compounds. The Aspidosperma and Tabernaemontana genera are an important source of biologically active alkaloids and in Brazil there is a considerable number of species of these genera. About 16 years ago cell cultures of Tabernemontana and Aspidosperma were initiated. These cell cultures did produce a number of alkaloids of pharmaceutical interest that stimulated the development of several techniques to production, extraction and identification.

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Conservação in vitro de mangabeira da região nordeste do Brasil/ In vitro conservation of mangaba tree in Northeast Brazil

Sá, Aline de Jesus; Lédo, Ana da Silva; Lédo, Carlos Alberto da Silva
2011-01-01

Resumo em português A mangabeira (Hancornia speciosa Gomes) é uma espécie cujas regiões de ocorrência natural vêm sofrendo grande pressão antrópica, a qual está provocando erosão genética em muitas populações nativas, principalmente da região Nordeste. Em virtude da existência de poucas coleções de mangabeira conservadas ex situ, evidencia-se a importância do desenvolvimento de um método alternativo e complementar para a conservação de germoplasma dessa espécie. A utiliz (mais) ação de técnicas de cultura de tecidos de plantas para a conservação de recursos genéticos apresenta diversas vantagens sobre a conservação de germoplasma no campo, destacando-se a economia de recursos financeiros para a manutenção das coleções, redução de riscos fitossanitários e intempéries climáticas. Por esse motivo, o presente trabalho teve como objetivo avaliar a eficiência de regulador osmótico (manitol) e inibidor de crescimento (ácido abscísico) na conservação in vitro de microestacas de mangabeira por crescimento lento. As culturas foram mantidas em meio MS com 3% de sacarose e 0,6% de agar. Os experimentos foram conduzidos em delineamento inteiramente casualizado, em sala de crescimento com temperatura variando de 26±2°C, umidade relativa do ar média em torno de 70% e fotoperíodo de 12 horas de luz branca fria (52µmol m-2 s-1 de irradiância). Foram avaliadas cinco concentrações de manitol (0, 10, 15 e 20g L-1). Na presença de manitol, o comprimento da parte aérea apresentou valores numéricos inferiores à testemunha, mas, aos 90 dias de cultivo in vitro, foi observado efeito deletério do manitol nas microestacas. Em relação ao ácido abscísico, foram testadas cinco concentrações (0; 0,5; 1; 2 e 4mg L-1) em interação com dois tipos de vedação de frascos (tampa plástica rosqueada e papel alumínio) e dois tipos de explantes (microestacas apicais e basais). O ácido abscísico (0,5mg L 1) apresentou melhores resultados para a conservação in vitro de microestacas de plântulas de mangabeira cultivadas em frascos vedados com papel alumínio. Não houve efeito significativo do tipo de explante. Resumo em inglês The mangaba tree (Hancornia speciosa Gomes) is a species whose natural occurrence has suffered great human pressure, which is causing genetic erosion in many populations, especially in the Northeast Brazil. Due to the existence of few collections of mangaba tree preserved ex situ, it's important to develop a complementary and alternative method to germplasm conservation of this species. The use of techniques of plant tissue culture for conservation of plant genetic resour (mais) ces presents several advantages over germplasm conservation in the field, especially when focusing cost reduction for the maintenance of collections, sanitary risk and weather problems. The present research aimed to evaluate the effectiveness of regulators osmotic mannitol and the growth inhibitor abscisic acid on the in vitro conservation of mangaba microcutting under slow growth. The cultures were maintained in MS medium with 3% sucrose and 0.6% of agar. The experiments were conducted in a randomized blocks design in a growth room with temperature ranging from 26±2°C, average relative humidity around 70% and photoperiod of 12 hours of cold white light (52µmol m-2 s-1 irradiance). It was evaluated five concentrations of mannitol (0, 10, 15 and 20g L-1). Mannitol in the presence of the length of shoots showed values below the control, but after 90 days of in vitro culture was observed deleterious effect of mannitol in microcutting. It was tested five concentrations of abscisic acid (0; 0.5; 1; 2 and 4mg L-1) in interaction with two types of sealing bottles (plastic cover and threaded aluminum foil ) and two types of explants (apical and basal microcutting). Abscisic acid (0.5mg L-1) showed better results for in vitro conservation of seedling of mangaba microcutting grown in flasks sealed with aluminum foil. There was no significant effect of explant type.

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Embriogênese somática a partir de embriões imaturos em genótipos de milho/ Somatic embryogenesis from immature embryos in maize genotypes

Fernandes, Eloise Helena; Prioli, Alberto José; Scapim, Carlos Alberto; Schuster, Ivan; Vieira, Elisa Serra Negra; Amaral Júnior, Antônio Teixeira do; Moterle, Lia Mara
2008-12-01

Resumo em português A primeira etapa de um programa de transformação genética de plantas é o estabelecimento de um protocolo de regeneração de plantas, a partir de cultura de tecidos. A regeneração de plantas pode ser conseguida por meio de organogênese ou embriogênese. A embriogênese somática é dependente do genótipo das plantas utilizadas e a identificação de genótipos mais responsivos a este método de regeneração resulta em maior eficiência da técnica. O trabalho tev (mais) e como objetivo identificar genótipos de milho com maior capacidade de produção de embriões somáticos e regeneração de plantas. Foram investigados 11 genótipos (linhagens e híbridos). As culturas foram obtidas a partir de embriões imaturos, inoculados em meio N6, suplementado com 690mg L-1 de prolina e 10mM de 2,4-D, com subcultivos quinzenais. Nos genótipos LD82025, CD308 e CML314, foram observados calos do tipo II, friáveis e embriogênicos. Esses genótipos foram submetidos ao processo de regeneração, destacando-se a linhagem LD82025. Os genótipos CD307, CD304, OC-705, 105-B e o GU04328 não apresentaram indução de calos embriogênicos. Os resultados indicam que a linhagem LD82025 é a mais promissora para utilização em um programa de transformação genética de plantas. Resumo em inglês The establishment of a protocol for regenerating plants by tissue culture is the first step in breeding programs which have the objective of using genetic transformation on plants. The plant regeneration can be achieved either by organogenesis or embryogenesis. In the second case, the somatic embryogenesis depends on the identification of responsive genotypes which enhance the efficiency of the program. The aim of the present study was to identify maize genotypes with hig (mais) h capacity to produce somatic embryos and consequently regenerate maize plants. Eleven genotypes (inbreds and hybrids) were investigated in the present experiment. Under two-week periods, the cultures were obtained from immature embryos which were inoculated into growing medium N6 with 690mg L-1 of proline and 10mM of 2,4-D. Callis of type II, friable and embryogenic, were observed in the LD82025, CD308, and CML314 genotypes. After, they were submitted to the regeneration process and the best performance was achieved by the LD82025. No embryogenic callus was developed from CD307, CD304, OC-705, 105-B, and GU04328. In the present case, the inbred LD82025 is the most promising maize genotype for participating in a breeding program that will use the genetic transformation of maize plants.

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Avaliação de porta-enxertos de videira in vitro em condições de estresse por alumínio/ Evaluation of rootstock grapevine in vitro in conditions of stress peraluminium

Burkhardt, S. L.; Villa, F.; Silva, A. Lima da; Comim, J. J.; Pasqual, M.
2008-01-01

Resumo em português O alumínio é o metal mais abundante e o terceiro elemento mais comum na crosta terrestre, compreendendo aproximadamente 7% da sua massa total, e em solos ácidos, sua toxidez é o fator limitante de maior importância para a produtividade das culturas no mundo. Neste sentido, este trabalho busca determinar um método de avaliação do comportamento de porta-enxertos de videira, Paulsen 1103 e Gravesac, em condições estressantes de alumínio in vitro. As plantas matriz (mais) es foram mantidas em casa de vegetação, em condições controladas contra patógenos, e submetidas a fertirrigação com solução nutritiva para videira. Para seleção dos explantes, desinfestação, introdução e manutenção in vitro foram utilizadas metodologias de cultura de tecidos para a videira. Após a desinfestação, os explantes foram inoculados em tubos de ensaio contendo 15 mL de meio de cultura DSD1. As culturas in vitro foram transferidas para salas de crescimento e mantidas sob condições de temperatura de 25°C, fotoperíodo de 16 horas e intensidade luminosa de 40-45 μmol.m-2.s-1. A sustentação dos explantes no meio líquido foi obtida por intermédio de discos de cortiça previamente preparados e esterilizados. Os experimentos foram conduzidos com pH da solução igual a 4,0 e concentrações de Al, adicionadas na forma de AlCl3, variando de 0 a 1,375 mM. Após a autoclavagem do meio de cultivo, as doses de alumínio foram adicionadas ao meio de cultura em câmara de fluxo laminar e os valores de pH corrigidos para 4,0. Foram implantados dois experimentos. No primeiro, os explantes das duas variedades de porta-enxertos foram colocados diretamente no meio de cultura DSD1 líquido com diferentes concentrações de Al, onde ficaram por um período de 60 dias até a avaliação. No segundo experimento, os explantes foram introduzidos em mesmo meio, na ausência de alumínio. Após 30 dias em crescimento, as plantas in vitro foram selecionadas por tamanho e submetidas aos diversos tratamentos até a avaliação. O método para a avaliação dos efeitos fitotóxicos do alumínio sobre a cultura da videira em condições in vitro foi elaborado com base em estudos que tratam da toxidez por alumínio em solução nutritiva e da seleção de videiras in vitro. Avaliaram-se os efeitos dos tratamentos sobre o sistema radicular (número de raízes e massa seca), matéria fresca e seca total e matéria seca das folhas. O delineamento experimental utilizado foi inteiramente casualizado composto por seis vidros, contendo três plantas cada um, num total de sete tratamentos. Os porta-enxertos de videira Gravesac e Paulsen 1103, apresentam mecanismos de exclusão do alumínio via elevação do pH do meio de cultura. A variedade Gravesac apresentou respostas de variação de pH mais rápidas que a variedade Paulsen 1103. Ocorreu variabilidade nas respostas de crescimento de plantas in vitro em condições estressantes de H+ e Al+3. O desenvolvimento in vitro do porta-enxerto Paulsen 1103 foi superior ao do Gravesac para número de folhas, comprimento das raízes, área foliar, peso seco total. Resumo em inglês The aluminum is the most abundant metal and the third more common element in the terrestrial crust, with approximately 7% of your total mass and in acid soils, your toxicity is the limiting factor of larger importance for the productivity of cultures in the world. In this sense, this work search to determine a method of evaluation of the behavior of rootstock grapevine ‘Paulsen 1103’ and ‘Gravesac’, in stress conditions of aluminum in vitro. The plants were maintained (mais) in a greenhouse, in controlled conditions against diseases, and submitted the irrigation with nutritious solution for grapevine. For selection of the explants, disinfestations, introduction and in vitro maintenance were used methodologies of tissue culture for the grapevine. After the disinfestations, the explants were inoculated in tubes containing 15 mL of culture medium DSD1. The cultures in vitro were transferred for growth rooms and maintained under temperature conditions of 25°C, photoperiod of 16 hours and luminous intensity of 40-45 mol.m-2.s-1. The sustentation of the explants in the liquid culture medium was previously obtained through cork disks prepared and sterilized. The experiments were maintained with pH of the solution same to 4.0 and concentrations of Al, added in the AlCl³ form, varying from 0 to 1.375 mM. After the sterilization of the culture medium, the concentrations of aluminum were added to the culture medium in a laminar camera and the pH values corrected for 4.0. Two experiments were implanted. In the first, the explants of the two varieties of grapevine rootstock were placed directly in the liquid culture medium DSD1 with different concentrations of Al, where were maintained per 60 days until the evaluation. In the second experiment, the explants were introduced in the same culture medium, in the absence of aluminum. After 30 days in growth, the plants in vitro were selected by size and submitted to the several treatments until the evaluation. The method for the evaluation of aluminum fitotoxicity effects on the grapevine culture in vitro was elaborated with base in studies about the toxicity for aluminum in nutrition solution and the selection in vitro of grapevine. The effects of the treatments were evaluated on the radicular system (number of roots and sec mass), fresh mass and sec mass of leaves. The experimental delineate used was randomized composed by six glasses, containing three plants each one, in a total of seven treatments. The rootstock grapevine ‘Gravesac’ and ‘Paulsen 1103’, present mechanisms of aluminum exclusion through elevation of pH in the culture medium. The cv. ‘Gravesac’ presented answers variation of faster pH than ‘Paulsen 1103’. Its happened variability in the answers growth of plants in vitro in stress conditions of H+ and Al+3. The development in vitro of rootstock grapevine Paulsen 1103 was superior to Gravesac for number of leaves, length of roots, foliar area and total dry weight.

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Expansão de células-tronco da medula óssea e do sangue de cordão umbilical humano/ Expansion of stem cells from bone marrow and human umbilical cord blood

Senegaglia, Alexandra C.; Rebelatto, Carmen L. K.; Suss, Paula H.; Brofman, Paulo R. S.
2009-05-01

Resumo em português Células-tronco/progenitoras frequentemente não estão disponíveis em quantidade suficiente para restauração de órgãos e tecidos danificados, sendo necessária sua expansão in vitro. Instalações físicas adequadas, pessoal técnico qualificado, reagentes de grau clínico e protocolos bem definidos de acordo com as condições de boas práticas de fabricação são imprescindíveis para assegurar a qualidade e segurança das células infundidas no paciente. A medu (mais) la óssea e o sangue de cordão umbilical ainda são as fontes de células mais utilizadas em terapias. Protocolos bem sucedidos de expansão utilizando células-tronco hematopoéticas, células-tronco mesenquimais e células progenitoras endoteliais já têm sido empregados em estudos pré-clínicos e clínicos. A escolha do tipo celular adequado deve ser direcionada pelo tamanho da lesão ou natureza do tecido tratado e pelo efeito terapêutico desejado. Estudos recentes têm demonstrado que propriedades de diferentes células expandidas in vitro podem ser combinadas para obtenção de um resultado melhor no tratamento de algumas doenças. Células em culturas de longo termo precisam ser acompanhadas por meio de diversas técnicas de citogenética clássica e molecular para demonstrar que não há evidências de transformação espontânea ou sinais de imortalização. Ensaios utilizando a infusão de células expandidas através da barreira alogeneica e xenogeneica, apresentaram melhora funcional e foram alcançados sem imunossupressão e sem evidências de infiltrados celulares que indicariam resposta imune. Porém, mais estudos precisam ser realizados para avaliar a imunogenicidade destas células e garantir a segurança da terapia celular alogênica permitindo sua consolidação no uso clínico. Aqui apresentamos uma atualização sobre expansão celular associada com seu uso clínico. Resumo em inglês Stem/progenitor cells are not frequently available in large enough amounts to repair damaged tissues and organs and so in vitro expansion is necessary. Appropriate facilities, qualified technicians, clinical-grade reagents and well defined protocols relating to good manufacturing products are essential to assure the quality and security of the cells injected in the patient. Bone marrow and human umbilical cord blood are still the best sources of cells for therapies. Succe (mais) ssful expansion protocols using hematopoietic stem cells, mesenchymal stem cells and endothelial progenitor cells have already been used in clinical and pre-clinical trials. Adequate cell choice should consider the extent of injury or nature of the damaged tissue and the desired therapeutic effect. Recent studies have demonstrated that properties of different in vitro expanded cells can be combined aiming to improve the outcome of the treatment of some diseases. Long-term cell cultures need to be followed up by classical and molecular cytogenetic techniques to demonstrate that there is no evidence of spontaneous transformation or signs of immortalization. Assays using expanded cell infusions across both xenogeneic and allogeneic transplant barriers showed functional improvement and were achieved without immunosuppression and without evidence of a cellular infiltrate that would indicate an immune response. However, more research needs to be performed to evaluate the immunogenicity of these cells and to guarantee the safety of allogeneic cell therapy, allowing consolidation of their clinical use. Here, we present an update regarding cellular expansion associated with their clinical use.

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Aplicação de técnicas de biotecnologia à cultura e melhoramento do maracujazeiro/ Application of biotechnological processes to passion fruit culture

Lima, Daniela Macedo de; Golombieski, Evelise Rejane; Ayub, Ricardo Antonio
2000-04-01

Resumo em português A tecnologia da cultura de protoplastos, células e tecidos de plantas in vitro constitui-se em uma das áreas de maior êxito na biotecnologia. No gênero Passiflora, poucas espécies têm sido utilizadas com fins biotecnológicos nos estudos de cultura de tecido. Do pouco já realizado, obteve-se sucesso na regeneração de brotos, por via indireta, a partir de calos, ou por via direta, a partir dos explantes cotiledonares, hipocotiledonares ou foliares. A regeneração (mais) in vitro é facilmente induzida em entrenós e segmentos de gavinha, com a adição de citocinina ao meio de cultivo. Recentes avanços na regeneração de protoplastos de outras frutíferas permitiram a aplicação da hibridização somática no maracujá. O uso da engenharia genética, aproveitando-se a habilidade de regeneração das plantas de P. edulis f. flavicarpa, torna-se relevante na tentativa de reduzir a devastação imposta por certas doenças e pragas, e também na adição de outras características de importância agronômica. Resumo em inglês The technology of cells, protoplast and tissue culture of plants is one of the most successful biotechnological areas. In the genus Passiflora, a few species have been used with biotechnological ends on the studies concerning tissue cultures. Regeneration of shoots can be indirect, from callus, or direct, by cotiledonary, hipocotiledonary and leaf explants. It is easy to induce in vitro regeneration of internodes and axillary tendrils if cytokinin is added to the culture (mais) medium. Early advances in the regeneration of other fruit tree protoplasts have allowed the use of the somatic hybridization process in the passion fruit. Since P. edulis f. flavicarpa has a natural regeneration ability, the application of genetic engineering techniques becomes necessary in order to reduce the infestation by some diseases or insects, and to add relevant agricultural properties to this species.

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Embriogênese somática a partir de calos de cultivares de laranja doce/ Somatic embryogenesis from calli of sweet orange cultivars

Castro, Lívia Mendes de; Mourão Filho, Francisco de Assis Alves; Mendes, Beatriz Madalena Januzzi; Miyata, Luzia Yuriko
2010-08-01

Resumo em português A regeneração de plantas, por organogênese ou embriogênese somática, a partir do cultivo de células e tecidos vegetais in vitro, é a base para a utilização da biotecnologia no melhoramento. O objetivo deste trabalho foi avaliar a embriogênese somática a partir de calos embriogênicos das cultivares de laranjeiras doces 'Hamlin', 'Pêra', 'Natal', 'Lima Verde' e 'Westin', em função da composição dos meios de cultura relacionada à fonte e concentração de d (mais) iferentes carboidratos, utilizando-se meio de cultura MT modificado com 500mg L-1 de extrato de malte, acrescido de sacarose, galactose, glicose, sorbitol, lactose ou maltose, nas concentrações de 18, 37, 75, 110 ou 150mM à 27°C. O delineamento experimental utilizado foi inteiramente casualizado, em esquema fatorial cinco (cultivares) x seis (fontes de carboidratos) x cinco (concentrações das fontes de carboidratos no meio de cultura), com cinco repetições. A formação de embriões somáticos variou conforme a cultivar, e as laranjeiras 'Hamlin' e 'Natal' registraram o maior número de embriões, enquanto 'Lima Verde' e 'Westin' apresentaram menores números. A melhor fonte de carboidratos para indução de embriogênese somática foi a maltose, seguida pela lactose, nas concentrações de 37 e 75mM. Embriogênese somática não foi observada nos meios de cultura contendo galactose, glicose ou sorbitol para nenhuma cultivar estudada. Resumo em inglês Plant regeneration, by organogenesis or somatic embryogenesis, from cell cultures and in vitro plant tissue culture is the basis for biotechnology usage in plant breeding. This research aimed to evaluate somatic embryogenesis from embryogenic calli of 'Hamlin', 'Pêra', 'Natal', 'Lima Verde', and 'Westin' sweet orange cultivars related to culture medium composition as source and concentration of carbohydrates with the use of MT culture medium modified with 500mg L-1 of ma (mais) lt extract, supplemented with sucrose, galactose, glucose, maltose, lactose, or sorbitol at concentrations of 18, 37, 75, 110 or 150mM at 27°C. Statistical design were complete randomized, in a factorial five (cultivars) x six (carbohydrate source) x six (carbohydrate concentration in culture medium) with five replicates. The production of somatic embryos varied with the genotype, as 'Hamlin' and 'Natal' cultivars registered higher number of embryos, whereas 'Lima Verde' and 'Westin' showed lower numbers. The best carbohydrate source was maltose, followed by lactose at concentrations of 37 and 75mM. Somatic embryogenesis was not observed on culture media supplemented with galatose, glucose or sorbitol in any studied cultivar.

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Plantas de cana-de-açúcar cultivadas in vitro com antibióticos/ Sugar cane plants cultivated in vitro with antibiotics

Donato, Virgínia Maria Tenório Sabino; Andrade, Arnóbio Gonçalves de; Takaki, Galba Maria de Campos; Mariano, Rosa de Lima Ramos; Maciel, Gabriel Alves
2005-02-01

Resumo em português A contaminação por microrganismos é conhecida como um dos mais sérios problemas da cultura de tecidos de plantas, especialmente, em espécies tropicais. Com o objetivo de eliminar bactérias endofíticas, propágulos das cultivares de cana-de-açúcar Co 997, SP 70-1143 e ápices caulinares isolados de plantas, provenientes de semente botânica biparental (RB 818004 x SP 71-6949), foram cultivados in vitro, em meios de cultivo com antibióticos. No primeiro experiment (mais) o, propágulos das cultivares Co 997 e SP 70-1143 foram cultivados em meio de cultivo contendo 200 e 300 mg.L-1 de amoxicilina e cefatoxima sódica durante 30 dias. Num segundo experimento, utilizou-se apenas a amoxicilina em concentrações mais elevadas ( 300, 600 e 1000 mg.L-1), com as mesmas plantas utilizadas no primeiro experimento, permanecendo em cultivo por mais 30 dias. No terceiro experimento foram utilizados ápices caulinares isolados de plantas provenientes de semente botânica biparental (RB 818004 x SP 71-6949), cultivados em meio de cultivo contendo 1000 mg.L-1 de amoxicilina, por um período de 120 dias. Após estes períodos de cultivo, testes de infecção e observações histológicas revelaram que o isolamento do ápice caulinar associado ao uso de antibiótico no meio de cultivo não foi suficiente para eliminar as bactérias endofíticas. Resumo em inglês Contamination by microrganism is known as one of the most serious problems in plant tissue cultures, especially, of tropical species. Most of the time, this contamination is derived from endophytic bacteria. With the objective of eliminating the endophytic bacteria Acetobacter diazotrophicus and Herbaspirillum spp., propagules of the cultivars Co 997, SP 70-1143 and shoot tips of sugarcane plants, from botanical biparental seed (RB 818004 x SP 71-6949) were cultivated in (mais) vitro in culture media with antibiotic. In the first experiment, propagules of the cultivars Co 997 and SP 70-1143 were cultivated in culture media with 200 and 300 mg.L-1 of amoxicilin and sodic cephatoxin for 30 days. In the second experiment, plants from the first one were transferred to culture media containing amoxicilin in concentrations of 300, 600 and 1000 mg.L-1 for more 30 days. In the third experiment, shoot tips were cultivated in culture media with 1000 mg.L-1 of amoxicilin during 120 days. After these cultivation periods, infection tests and histological observations revealed that bacteria were not eliminated from sugarcane tissues.

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Tuberculose em profissionais de saúde de um serviço hospitalar/ Tuberculosis in hospital department health care workers

Saleiro, Sandra; Santos, Ana Rosa; Vidal, Otília; Carvalho, Teresa; Costa, José Torres; Marques, José Agostinho
2007-12-01

Resumo em português Introdução: A tuberculose é considerada uma doença ocupacional nos profissionais de saúde e a sua transmissão, nas instituições de saúde, constitui um problema importante. Alguns serviços hospitalares estão particularmente expostos a risco de infecção. Objectivo: Caracterizar os casos de tuberculose detectados na sequência de um rastreio efectuado aos profissionais de saúde de um serviço hospitalar (otorrinolaringologia) que contactaram com casos de tuberc (mais) ulose activa. Material e métodos: Procedeu-se à realização de rastreio de tuberculose a todos os funcionários (73) do serviço de Otorrinolaringologia do Hospital de São João que contactaram com dois doentes internados com tuberculose activa. A todos aqueles que referiram sintomas foi realizada radiografia torácica e exame micobacteriológico de expectoração. Resultados: Dos 73 profissionais de saúde submetidos ao rastreio, foi estabelecido o diagnóstico de tuberculose em 9 (8 do sexo feminino; idade mediana: 30 anos; uma médica, seis enfermeiros e dois auxiliares de acção médica). Em 8 profissionais de saúde foi diagnosticada tuberculose pulmonar, tratando-se o outro caso de tuberculose extra-pulmonar. O diagnóstico microbiológico foi obtido em 7 casos pelos seguintes métodos: exame micobacteriológico directo de expectoração, n=2; exame cultural de lavado brônquico, n=4; exame histológico de tecido pleural, n=1. Em 4 casos, o DNA do Mycobacterium tuberculosis foi extraído das culturas, tendo sido efectuada tipagem molecular. Todos estes casos apresentaram tipagem idêntica, o que permite a identificação de uma ligação epidemiológica. Conclusão: A tuberculose nosocomial é relevante, sendo necessário efectuar um esforço para implementar, com sucesso, medidas de controlo de infecção nas instituições de saúde, assim como um programa eficaz de rastreio de tuberculose entre os profissionais de saúde. A tipagem molecular do Mycobacterium tuberculosis facilita a identificação de clusters de infecção. Resumo em inglês Introduction: Tuberculosis (TB) is considered an occupational disease in health care workers (HCW) and its transmission in health care facilities is an important concern. Some hospital departments are at higher risk of infection. Objective: To describe TB cases detected after TB screening in HCW from a hospital department (Ear, Nose and Throat - ENT) who had had contact with active TB cases. Material and methods: All HCW (73) from Hospital São João’s ENT Unit who had b (mais) een in contact with two in-patients with active TB underwent TB screening. Those who had symptoms underwent chest X-ray and mycobacteriological sputum exam. Results: Of 73 HCW who underwent TB screening, TB diagnosis was established in 9 (8 female; median age: 30 years; 1 doctor, 6 nurses, 2 nursing auxiliaries). Pulmonary TB was found in 8 and extra-pulmonary TB in 1. Microbiology diagnosis was obtained in 7 cases by sputum smear, n=2; culture exam in bronchial lavage, n=4 and histological exam of pleural tissue, n=1. In 4 cases, Mycobacterium tuberculosisgenomic DNA was extracted from cultures and molecular typing was done. All cases had identical MIRU types, which allowed identification of the epidemiological link. Conclusion: Nosocomial TB is prominent and efforts should be made to implement successful infection control measures in health care facilities and an effective TB screening program in HCW. Molecular typing of Mycobacterium tuberculosis facilitates cluster identification.

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Enraizamento in vitro do morangueiro (Fragaria x ananassa Duchesne) em diferentes concentrações do meio MS/ In vitro strawberry (Fragaria x ananassa Duchesne) rooting in different MS medium concentrations

Pereira, Jonny Everson Scherwinski; Bianchi, Valmor João; Dutra, Leonardo Ferreira; Fortes, Gerson Renan de Luces
1999-03-01

Resumo em português O presente trabalho foi realizado no Laboratório de Cultura de Tecidos da EMBRAPA/CPACT, Pelotas-RS, com o objetivo de verificar o comportamento in vitro de duas cultivares de morangueiro em diferentes concentrações do meio MS. Explantes de morangueiro, cultivares Hofla e Tangi provenientes do cultivo in vitro foram cultivados em meio MS, na concentração plena, 3/4 e 1/2 adicionado de sacarose a 30g/l, mio-inositol a 100mg/l e benzilaminopurina (BAP) a 0,005mg/l. Uti (mais) lizaram-se frascos com capacidade de 250ml, que continham 40ml de meio de cultura, nos quais inocularam-se cinco explantes. O cultivo foi mantido em sala de cultura, onde permaneceu por 32 dias sob fotoperíodo de 16 horas, luminância de 1500 lux e temperatura de 25°C. Os resultados indicaram que a redução na concentração dos sais MS incrementa o percentual de explantes enraizados, aumentando o número de raízes da cultivar Tangi. O maior comprimento médio de raízes foi obtido com a cultivar Hofla na concentração 3/4 e 1/2 do meio MS. Não se observaram diferenças no desenvolvimento das plântulas, entre as cultivares, com a redução das concentrações do meio MS. Resumo em inglês The present work was carried out in the Tissue Culture Laboratory EMBRAPA/CPACT, Pelotas-RS, with the objective of verifying the behaviour in vitro of two cultivars of strawberry on different MS medium concentration. Strawberry explants, Hofla and Tangi cultivars coming from in vitro culture were tested on MS medium in the full, 3/4 and 1/2 strength suplemented with 30g/l sucrose, 100mg/l myo-inositol and 0.005mg/l benzylanimopurine (BA). Flasks (250ml) containing 40ml of (mais) medium culture with five explants per flasks were used. Cultures were maintained in a growth room at 25°C with a photoperiod of 16 h at 1.5 Klux for 32 days. Results indicated that the reduction in MS salts improved rooting explant by increasing the number of roots of the Tangi cultivar. A large root length was obtained with the Hofla cultivar in the 3/4 and 1/2 MS concentration. It was not observed any difference in the development of the plantlets among the cultivars due to the reduction in MS salts.

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Células fúngicas permanecem viáveis por até doze dias em lesões de cromomicose tratadas pela criocirurgia com nitrogênio líquido/ Fungal cells remain viable for up to 12 days in chromomycosis lesions treated by cryosurgery with liquid nitrogen

Castro, Luiz G. M.; Salebian, Alberto; Lacaz, Carlos da Silva
2003-06-01

Resumo em português FUNDAMENTOS: A criocirurgia com nitrogênio líquido (C-N2L) é um método terapêutico que vem sendo usado com freqüência crescente no tratamento da cromomicose. Acreditava-se anteriormente que as temperaturas baixas poderiam destruir o agente infectante, mas foi demonstrado que as culturas fúngicas em temperaturas tão baixas como -196°C não causaria a morte do mesmo. Apesar da comprovada eficácia, ainda não se conhece o exato mecanismo de cura. OBJETIVO: Avaliar (mais) o período de persistência de fungos viáveis em lesões de cromomicose tratadas pela C-N2L. PACIENTES E MÉTODOS: Cinco pacientes com cromomicose tiveram suas lesões tratadas pela C-N2L. Foram colhidos, em diferentes intervalos de tempo após a criocirurgia, fragmentos do tecido tratado. A coleta, realizada com punch de 4mm, foi feita em três períodos diferentes: de 0 a 48h, de cinco a sete dias e de 10 a 14 dias após a realização da criocirurgia. Os fragmentos obtidos foram inoculados em Agar Sabouraud para verificação de crescimento de colônias fúngicas. Cada paciente teve um total de três amostras colhidas, uma em cada um dos três períodos mencionados. RESULTADOS: O crescimento de colônias foi maior nas coletas mais precoces, enquanto nas amostras colhidas entre o pós-operatório imediato e o quinto dia de pós-operatório o índice de viabilidade foi de 7/8 (87,5%), e naquelas colhidas a partir do sexto dia de pós-operatório foi de apenas 2/7 (28,5%). O maior período de pós-operatório que demonstrou positividade foi de 12 dias. CONCLUSÃO: Os resultados confirmam os achados anteriores, os quais demonstraram que as baixas temperaturas alcançadas pela C-N2L não são responsáveis pela destruição dos fungos nas lesões de cromomicose. Os autores acreditam que fenômenos biológicos tardios, como necrose ou imunoestimulação sejam os verdadeiros responsáveis pela erradicação dos fungos nas lesões de cromomicose. Resumo em inglês BACKGROUND: Several authors have reported on cryosurgery with liquid nitrogen (C-LN2) as an efficacious method to treat chromomycosis (CM). At first it was believed that low temperatures would destroy the infecting agents, but it was demonstrated that exposing fungal cultures to temperatures as low as -196° C did not cause fungal death. Cure mechanism has yet to be entirely understood. OBJECTIVE: To study fungal cell viability in CM lesions treated with C-LN2. METHOD: Sp (mais) ecimens of CM lesions treated with C-LN2 were obtained by punch biopsy and seeded in Sabouraud agar. Three specimens were obtained from each of the 5 patients at 3 different occasions: 0 to 48 h after C-LN2, 5 to 7 days and 10 to 14 days. RESULTS: Colony growth was obtained with greater frequency when specimens were collected at earlier time intervals. While specimens obtained during the first 5 days after cryosurgery provided 7/8 colonies (87,5%), those obtained after the 6th post-op day were positive only in 2/7 cases (28,5%). The longest post-op time interval giving rise to a colony was 12 days. CONCLUSION: The present study suggests that tissue changes induced by C-LN2 are responsible for fungal eradication rather than low temperatures themselves. Fungal cells may be found in a viable state for up to 12 days after C-LN2.

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Derrame pleural por micobactéria não tuberculosa/ Pleural effusion caused by nontuberculous mycobacteria

Seiscento, Márcia; Bombarda, Sidney; Carvalho, Adriana Castro de; Campos, José Ribas Milanez de; Teixeira, Lisete
2005-10-01

Resumo em português O Mycobacterium kansasii, micobactéria não tuberculosa, pode causar doença pulmonar com manifestação clínico-radiológica semelhante à tuberculose. Estão associados fatores de risco: bronquiectasias, doença pulmonar obstrutiva crônica, seqüela de tuberculose, pneumoconiose e imunossupressão. Relata-se um caso de derrame pleural, em paciente de 67 anos, com doença pulmonar obstrutiva crônica e antecedente de tuberculose. O diagnóstico de tuberculose pleuropu (mais) lmonar foi sugerido pelo exame anatomopatológico de pleura, que demonstrou processo crônico granulomatoso e presença de bacilo álcool-ácido resistente. Nas culturas de líquido e tecido pleurais foi detectado Mycobacterium kansasii. Discute-se o diagnóstico diferencial com outros agentes infecciosos na doença granulomatosa pleural e tratamento. Resumo em inglês Mycobacterium kansasii, a nontuberculous mycobacterium, can cause pulmonary disease presenting clinical and radiological similarities to tuberculosis. M. kansasii infection has been associated with risk factors such as bronchiectasis, chronic obstructive pulmonary disease, tuberculosis sequelae, pneumoconiosis and immunosuppression. Herein, we describe a case of pleural effusion in a 67-year-old patient with chronic obstructive pulmonary disease and a history of pulmonary (mais) tuberculosis. The histological analysis demonstrated a granulomatous chronic process and acid-fast bacilli positivity, suggesting a diagnosis of pleural tuberculosis. M. kansasii was detected both in pleural fluid cultures and in cultures of tissue samples. We discuss the differential etiologic diagnosis with other infectious agents of granulomatous diseases, and we address treatment options.

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Correlação entre a capacidade proliferativa in vitro e a dominância apical in vivo da bananeira cvs. Grand naine e Nanicão/ In vitro proliferative capacity and in vivo apical dominance in banana cvs. Grand naine and Nanicão

Debiasi, Clayton; Zaffari, Gilmar Roberto; Salerno, Airton Rodrigues; Guerra, Miguel Pedro
2002-12-01

Resumo em português No presente trabalho, buscou-se correlacionar diferentes graus de dominância apical in vivo com a capacidade proliferativa in vitro da bananeira, através da relação existente entre a fonte de explante e o seu posterior comportamento in vitro. Brotos laterais de Musa acuminata Colla: Nanicão (AAA) e Grand Naine (AAA), oriundos de plantas-matrizes mostrando diferentes graus de dominância apical in vivo (elevada, média e baixa) foram cultivados in vitro, no Laboratór (mais) io de Cultura de Tecidos Vegetais da EEI/ EPAGRI-SC, por cinco subcultivos, em intervalos de 30 dias, em meio MS suplementado com BAP (11,1 mmol/l), sacarose (30 g/l), ágar (7 g/l), vitaminas MS e pH 5,8. O grau de dominância apical in vivo influenciou diretamente o comportamento in vitro dos explantes, no que diz respeito à capacidade proliferativa. Brotos laterais oriundos de plantas-matrizes, com grau de dominância apical in vivo baixa, proporcionaram a maior taxa média proliferativa (7,5 brotos/explante) para a cv. Grand Naine, enquanto brotos laterais oriundos de plantas-matrizes com grau de dominância apical média proporcionaram a maior taxa média proliferativa (10,96 brotos/explante) para a cv. Nanicão. Resumo em inglês In the present work aimed to study the correlation between the in vivo apical dominance and the in vitro regenerative capacity in banana (Musa acuminata Colla) cvs. Nanicão (AAA) and Grand Naine (AAA). Lateral buds explanted from mother plants showing different apical dominace levels (low, medium and high) were cultivated in the Laboratory of Tissue Culture of EEI/EPAGRI-SC, during five subcultures with 30 days interval in MS culture medium supplemented with BAP (11,1 mm (mais) ol/l), sucrose (30 g/l), agar (7 g/l) and MS vitamins. The pH was adjusted to 5.8 prior autoclaving. Cultures derived from lateral buds of mother plants showing low level of apical dominace resulted in the highest proliferation rate, with 7.5 shoots per explant for 'Grand Naine'. As for cv Nanicão the highest proliferation rate (10.9 shoots/explants) resulted from mother plants showing medium level of apical dominance.

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Contribuição da biópsia pulmonar a céu aberto na avaliação de pneumopatias difusas e agudas em unidade de terapia intensiva pediátrica/ Role of the open lung biopsy in the evaluation of undiagnosed acute lung disease in a pediatric intensive care unit

BOUSSO, ALBERT; BALDACCI, EVANDRO ROBERTO; FERNANDES, JOSÉ CARLOS; FERNANDES, IRACEMA DE CÁSSIA OLIVEIRA; CORDEIRO, ANDRÉA MARIA GOMES; OTOCH, JOSÉ PINHATA; EJZENBERG, BERNARDO; OKAY, YASSUHIKO
2002-01-01

Resumo em português Introdução: Os dados clínico-laboratoriais convencionais raramente fornecem o diagnóstico em pneumopatias difusas. O objetivo deste estudo foi avaliar o papel da biópsia pulmonar a céu aberto no que se refere ao seu potencial diagnóstico, ao impacto dos resultados sobre a conduta clínica e à incidência de complicações do procedimento. Material e métodos: No período de janeiro/1987 a janeiro/1997, 29 biópsias pulmonares foram realizadas em crianças com pneu (mais) mopatias difusas, em insuficiência respiratória aguda, sem etiologia e sem resposta à terapêutica empírica prévia. Foram excluídos os recém-nascidos, crianças com pneumopatias crônicas prévias e crianças com coagulopatia ou choque intratáveis. Todas as biópsias foram realizadas através de microtoracotomia no pulmão mais acometido ao exame radiológico. O fragmento de tecido pulmonar foi analisado por meio de culturas e de exames de microscopia ótica, eletrônica e imunofluorescência. Resultados: O processamento do material da biópsia forneceu pelo menos um diagnóstico histopatológico em todas as crianças estudadas (100%) e em 20 (68,9%) obteve-se um diagnóstico etiológico. Os principais diagnósticos histopatológicos foram: pneumonite intersticial não específica com fibrose variável em 18 casos; bronquiolite em oito casos e hipertensão pulmonar em três casos. Nos diagnósticos etiológicos, os principais agentes foram: citomegalovírus em seis crianças; Pneumocystis carinii em três; adenovírus em três e infecção pelo vírus respiratório sincicial em três casos. Os resultados geraram mudanças no tratamento em 20 casos (68,9%). As principais alterações de conduta foram a introdução de corticoterapia em 14 pacientes e a revisão da antibioticoterapia em seis. Sete casos (24,1%) apresentaram complicações, que foram resolvidas, e nenhum óbito foi relacionado ao procedimento. Conclusão: Conclui-se que a biópsia pulmonar a céu aberto é um procedimento que, mesmo invasivo, deve ser considerado na avaliação de crianças com pneumopatias difusas graves, sem etiologia definida, sem resposta à terapêutica previamente instituída e em insuficiência respiratória. Resumo em inglês Introduction: The diagnosis of diffuse lung disease is still a challenge for the pediatric intensive care physician. Routine clinical examinations and laboratory tests are frequently negative. The objective of this study was to evaluate the diagnostic potential, the impact on therapy and the rate of complications of open lung biopsy in children with undiagnosed diffuse lung disease, respiratory failure and inappropriate response to initial therapy. Methods: From January 1 (mais) 987 to January 1997, 29 children with diffuse pulmonary disease of unknown etiology, respiratory failure (PaO2/FiO2

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O surto de peste suína africana ocorrido em 1978 no município de Paracambi, Rio de Janeiro/ The outbreak of African swine fever which ocurred in 1978 in the county of Paracambi, Rio de Janeiro, Brazil

Tokarnia, Carlos Hubinger; Peixoto, Paulo Vargas; Döbereiner, Jürgen; Barros, Severo Sales de; Riet-Correa, Franklin
2004-12-01

Resumo em português Em função das dúvidas que ainda perduram 25 anos após a ocorrência do surto de peste suína africana (PSA), em Paracambi, Estado do Rio de Janeiro, Brasil, em 1978, são apresentados os resultados, relativos a este foco, obtidos pelos estudos epidemiológico, clínico-patológico, virológico, bacteriológico e ultra-estrutural dos casos naturais, bem como os relativos à reprodução experimental da doença no Brasil e sua confirmação por isolamento e determinaç� (mais) �o de patogenicidade realizada no Plum Island Animal Disease Center, New York, EUA. Os animais se infectaram pela ingestão de restos de comida de aviões procedentes de Portugal e da Espanha, países nos quais a doença existia. De acordo com publicação do Ministério da Agricultura, após o diagnóstico do surto de PSA descrito neste trabalho, 223 novos focos foram relatados, entre 1978 e 1979, em todas Regiões do país (Norte, Nordeste, Centro-Oeste, Sudeste e Sul) e focos adicionais em 1981, sem informações exatas referentes ao seu número. O último caso foi relatado em 15 de novembro de 1981, e em 5 de dezembro 1984 o Brasil foi declarado livre da PSA. Para o diagnóstico da PSA foram processadas 54.002 amostras no Departamento de Virologia do Instituto de Microbiologia da Universidade Federal do Rio de Janeiro, no período de 1978 a 1981. No processamento das amostras foram usadas as técnicas de hemadsorção em cultura de leucócitos (HAd), imunoflorescência em cortes de tecido (FATS), imunoflorescência em cultivo celular (FATCC), imuno-eletrosmoforese (IEOP) e imunoflorescência indireta (IIF). Somente 4 amostras foram positivas pela técnica de FATCC, a única das provas que inclui o isolamento viral; não é mencionada a procedência dessas amostras, mas provavelmente trata-se das amostras oriundas de Paracambi. Com base na análise de todos os dados publicados sobre o tema, na possível ocorrência de falso-positivos, na falta de informações sobre isolamento e caracterização do virus, bem como na ausência de dados sobre epidemiologia, sinais clínicos e patologia nesses outros supostos focos, pode-se concluir que o surto de Paracambi constitui a única ocorrência de PSA no Brasil, comprovada por isolamento, identificação do vírus e determinação de sua patogenicidade, e que a doença manteve-se confinada a esse local, provavelmente em função do diagnóstico precoce e da rápida adoção de eficientes medidas de controle pelas autoridades sanitárias; o abate dos suínos desse rebanho iniciou-se 10 dias depois da primeira morte e 3 dias após o diagnóstico presuntivo. Resumo em inglês Due to doubts which still persist 25 years after the outbreak of African swine fever (ASF) which ocurred in the county of Paracambi, Rio de Janeiro, Brazil, in 1978, the results obtained through the studies to establish and confirm the diagnosis are presented. These include data on the epidemiology, clinic-pathological aspects, bacteriological, virological and ultramicroscopic examinations, the experimental reproduction of the disease and cross immunity tests with classic (mais) al swine fever virus performed in Brazil, and on the confirmation with isolation of the virus and determination of its identity at the Plum Island Animal Disease Center, New York, USA. The pigs of the affected herd had been fed untreated remains of meals from airplanes of international lines flying to Brazil from Portugal and Spain where ASF was occurring at the time. According to publication by the Ministry of Agriculture, after the diagnosis of the outbreak of ASF described in this paper, 223 additional outbreaks were reported in Brazil between 1978 and 1979, in all the Brazilian regions (North, Northeast, Central-West, Southeast and South). Further outbreaks were reported in 1981, but their number is not known. The last case was reported to have occurred on November 15, 1981, and on December 5, 1984, Brazil was declared free of ASF. For the diagnosis of ASF 54,002 samples were examined by the Department of Virology of the Institute of Microbiology, Federal University of Rio de Janeiro, from 1978 to 1981, by the techniques of haemadsorption in leucocyte cultures (HAd), direct immunoflorescence in tissue sections (FATS), direct immunoflorescence in cell cultures (FATCC), immuno-electro-osmophoresis (IEOP) and indirect immunoflorescence assay (IIF). Only 4 samples were positive with the FATCC procedure. This is the only technique which includes virus isolation; the origin of these positive samples was not reported, but probably they were from the Paracambi outbreak. From other suspected outbreaks of ASF in Brazil there is no information on the isolation and characterization of the virus isolates. Likewise there is no information available about the epidemiology, clinical signs, and pathology of suspected ASF in other outbreaks. The analysis of all published data on this matter in Brazil, the possibility of false-positive results, the lack of information about isolation and characterization of the virus, as well as the lack of epidemiological, clinical and pathological data of these other supposed outbreacs of ASF strongly suggest that the outbreak of Paracambi was the only occurrence of ASF in Brazil, confirmed by the isolation, identification of the virus, and the determination of its pathogenicity, and that ASF occurred and maintained itself confined to this area probably due to the early diagnosis and the rapid application of efficient control measures by the Brazilian authorities; the slaughter of the animals in the outbreak of Paracambi started as soon as 10 days after the first death, 3 days after the presumptive diagnosis.

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Legionelose associada a pneumopatias em São Paulo: estudo da comprovação etiológica por isolamento e sorologia/ Legionellosis associated to pneumopaties in São Paulo: etiological confirmation by means of isolations and sorology

Mazieri, Neusa Augusta de Oliveira; Godoy, Cid Viera Franco de
1993-02-01

Resumo em português A presença de Legionella sp como patógeno atuante em nosso país não fora bem documentada, embora a literatura refira a importância deste agente em grande número de países. O presente trabalho teve como objetivo a detecção do microrganismo ou evidenciar sua resposta imunológica em pacientes portadores de pneumopatias infecciosas na cidade de São Paulo. Para tanto foi introduzida metodologia laboratorial específica para o cultivo e identificação do agente e ap (mais) licada reação sorológica para verificação de níveis de anticorpos correspondentes. Foram estudados pacientes de 2 centros universitários em São Paulo, correspondentes a 100 do Hospital Universitário U.S.P. com pneumopatias infecciosas em geral e 100 do Hospital das Clínicas F.M.U.S.P. com pneumopatias infecciosas previamente selecionados para afastar outras etíologias bacterianas e dentre estes 30 pertencentes a Unidade de Transplante Renal. O material biológico destinado ao cultivo de Legionella sp foi constituído por: escarro, secreção traqueal, líquido pleural, lavado brônquico ou biópsia de tecido pulmonar. As tentativas de isolamento do agente foram realizadas em meio de BCYE com e sem antibióticos, a identificação das colônias, foram realizadas através de provas de crescimento em placas de BCYE sem cisteína, provas bioquímicas, imunofluorescência direta e soroaglutinação em lâmina. A pesquisa do agente em material biológico foi realizado pelo método de imunofluorescência direta. A pesquisa de anticorpos específicos para Legionella pneumophila sorogrupo 1 foi efetuada pela reação de imunofluorescência indireta. Procedeu-se ainda a estudo sorológico) nos comunicantes de pacientes com legionelose para evidenciar possível transmissão do agente. Em 2 casos obteve-se isolamento em cultura e em 4 casos, somente reação de imunofluorescência direta positiva para L. pneumophila sorogrupo 1, à partir do material biológico, representando um total de 6% entre pacientes da comunidade e hospitalares, comprovando desta forma a existência do agente entre nós. A reação sorológica de imunofluorescência indireta permitiu estabelecer infecção atual ou pregressa por Legionella pneumophila sorogrupo 1, em 16 dos 100 pacientes estudados no Hospital das Clínicas e em apenas 1 dos 100 pertencentes ao Hospital Universitário. Pacientes considerados como grupo de risco do Hospital das Clínicas correspondentes a transplantados renais mostraram evidências sorológicas de legionelose atual ou pregressa em 10 dos 30 estudados, isto é 33%, ficando com 8,5% para pacientes da comunidade, 6 dos 70 estudados, sendo 3 destes debilitados por doença sistêmica severa (4,28%). Nos profissionais de saúde comunicantes dos pacientes com legionelose internados no Hospital das Clínicas, apenas 1 em 28 revelou sorologia compatível com infecção pregressa, confirmando dados da literatura de não ser usual a transmissão de pessoa a pessoa Resumo em inglês The role of Legionella sp as an important pathogen, although reported in many countries, had not been well documented in Brazil. The main objetive of the present study is to detect this organism or it's immunological response in patients with pulmonary infections in the city of São Paulo. For this purpose, specific laboratory methodology was introduced to cultivate the agent and demonstrate specific antibodies by serology. Patients from two University centers in São Pau (mais) lo were studied: 100 from the Hospital Universitario, University of São Paulo with general pulmonary infections and 100 from Hospital das Clínicas, Faculdade de Medicina, University of São Paulo. The latter woe selected to exclude pulmonary infections of other bacterial aetiology, and 30 of these were selected from the Renal Transplant Unit. Clinical specimens for cultures included sputum tracheal secretion, pleural, fluid, bronchial washing or lung tissue biopsy. Isolation of Legionella sp was attempted in BCYE medium with and without antibiotics, presumptive diagnosis by biochemical methods and identification through direct immunofluorescence staining and slide agglutination test. Direct evidence of the organism in tissue was attempted by direct immunofluorescence staining. Specific antibodies for Legionella pneumophila serogroup 1 were tested by the indirect immunofluorescence assay. Serology was also carried out in specimens from human contacts with Legionnaires' Disease. Legionella pneumophila serogroup 1 was isolated from two patients, demonstrating the presence of the pathogen in this country. Serology was able to estabilish present or past infection with the agent in 16 of the 100 patients from Hospital das Clinicas and in only one from Hospital Universitário. In patients considered as high risk groups from Hospital das Clínicas with renal transplantation, serology for present or past Legionellosis was positive in 33% and in 8.5% for community acquired infections. Serology in specimens from Medical personnel in contact with patients of Legionnaires' disease was positive for past infection in one single subject, confirming information already published that direct transmission from person to person is unusual. The introduction of specific methods for laboratorial evidence of Legionella sp infections at the Hospital das Clínicas - Faculdade de Medicina USP community has permited diagnosis in able time to allow use of specific anti-microbial therapy, with good results

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Resistência genética dos acessos do banco de germoplasma de macieira da epagri à mancha foliar de glomerella (Colletotrichum gloeosporioides)/ Studies of the genetic resistance of the accesses of the bank of germoplasma of apple tree of epagri to the stain to foliate of glomerella (Colletotrichum gloeosporioides)

Furlan, Carla Regina Costa; Dantas, Adriana Cibele de Mesquita; Denardi, Frederico; Becker, Walter Ferreira; Mantovani, Adelar
2010-06-01

Resumo em português Uma das prioridades do Programa de Melhoramento Genético de Macieira da Epagri é a obtenção de cultivares resistentes à mancha foliar de glomerella - MFG, doença essa causada principalmente pela espécie Colletotrichum gloeosporioides, que tem causado elevadas perdas na produção. Os resultados obtidos neste estudo têm, dentre outras, a finalidade de subsidiar os programas de melhoramento genético da macieira na seleção de parentais, objetivando a incorporaçã (mais) o de resistência genética à MFG nas futuras novas cultivares. Para tanto, o primeiro passo é a identificação de germoplasma portador dos genes de resistência. No presente trabalho, foram utilizados 3 isolados de C. gloeosporioides provenientes de diferentes regiões produtoras de maçã. Estes isolados foram inoculados em 245 acessos pertencentes ao Banco de Germoplasma de Macieira - BGM, da Epagri / Estação Experimental de Caçador - EECd, SC. Para a inoculação em tecido foliar, a concentração de conídios foi ajustada para 10³ esporos/mL. Após 72h de incubação, sob temperatura de 25ºC, foi realizada a avaliação da incidência para presença ou ausência de sintomas e para a severidade da doença. O delineamento experimental foi o inteiramente casualizado, com três repetições. As diferenças de severidade entre os acessos foram testadas através da Anova não paramétrica Kruskal Wallis. Entre os acessos testados, 187 (76,3%) manifestaram resistência e 58 (23,7%) suscetibilidade à MFG. Entre as cultivares suscetíveis, não houve diferença no grau de severidade de ataque da MFG. Resumo em inglês One of the priorities at this moment of the apple tree genetic breeding program in the south of Brazil is the obtainment of resistant cultures to the Gala Leaf Spot (MFG) disease. This illness is caused mainly by the fungus Colletotrichum gloeosporioides, what has been causing great loss in the apple production. To solve this problem, the first step is to select the resistant germoplasm, that will supply the resistant genes. In this research we used 3 isolates of C. gloeo (mais) sporioides from different apple producer locations, and 245 samples belonging to the Active Germoplasm Bank Apple Tree from the Experimental station of EPAGRI in Caçador, Santa Catarina. For the inoculation of the leaf tissue, the concentration of the conidia was adjusted to 10³ spore/ml. After 72 hours of incubation at 25ºC, were evaluated for the presence and absence of the symptom and its severity, through the diagrammatic scale. The experimental delineation was completely by randomized with 3 repetitions. The severity differences among the samples were tested through the Anova non-parametric Kruskal Wallis test. Among the tested samples, 185 were resistant and 32 susceptible. From those susceptible, there was not a difference in the severity degree of the MFG attack. The data obtained in this study can help in the choice of resistant samples, that could be used as a parentage in the genetic breeding programs of the apple tree, to obtain the resistance to this disease.

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Possibilidades de transmissão e vias de inoculação da lepra murina em ratos e outros animais

Linhares, Herminio
1943-06-01

Resumo em português 1) O A. revê as vias de infecção naturais e os processos de inoculações empregados em ratos, no estudo da lepra murina. 2) Na natureza, o contacto prolongado de animal sadio com doente e a infecção por via gástrica devem ser os modos comuns de contaminação. 3) Foram encontrados dentro do Polyplax spinulosa (Burmeister) capturados em ratos leprosos, bacilos ácido álcool resistentes. Tentativas de cultura com êste material, foram infrutíferas. 4) O A. infectou (mais) ratos colocando no estômago, por meio de sondas de vidro, material leproso. Em cinco animais, todos se infectaram. 5) Por via subcutânea e por via intraperitoneal, a infecção se processa em quase 100% dos casos. 6) Foi possível infectar gambás (Didelphis aurita) com lepra murina. Êsses animais provavelmente são mais suscetíveis à lepra dos ratos que à humana. 7) Conseguiu-se infectar pinto por inoculação de emulsão de lepra murina no músculo do peito, por via intraperitoneal e por via gástrica. 8) Pombos também se infectaram após inoculação no músculo do peito e por via venosa. Resumo em inglês 1) The A. reviews the routes of natural transmission of rat leprosy and the experimentally induced disease. 2) The infection in the natural disease must be made by contact with an infected rat or through the gastro-intestinal route by eating infected tissue. 3) They were found acid-fast bacilli in lice (Polyplax spinulosa) caught on rats dying of leprosy; but it was impossible to obtain cultures in Löwenstein medium, from these lice. 4) Rat leprosy emulsion introduced in (mais) to the stomach, may infect rats. Five rats fed with infected material became infected. 5) After subcutaneous or intraperitoneal inoculation there were obtained infection in almost 100% of cases. 6) It was possible to infect Didelphis aurita after inoculation of infected rat material. These animals most likely are more susceptible to rat leprosy than to human leprosy. 7) It was possible to infect chicks by inoculation in chest muscle, by intraperitoneal injection and by gastrointestinal route. 8) It was possible to infect pigeon by inoculation in chest muscle and by intravenous inoculation.

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O polietilenoglicol aumenta a penetração do vírus da diarréia viral bovina, do vírus da estomatite vesicular e do vírus sincicial respiratório bovino em células de cultivo/ Polyethylene glycol increases the penetration of bovine viral diarrhea virus, vesicular stomatitis virus and bovine respiratory syncytial virus in cultured cells

Dezengrini, Renata; Cargnelutti, Juliana Felipetto; Weiblen, Rudi; Flores, Eduardo Furtado
2009-06-01

Resumo em português A baixa eficiência de penetração de alguns vírus em células de cultivo pode representar uma dificuldade para o isolamento e a multiplicação viral in vitro. No presente estudo investigou-se o efeito do polietilenoglicol (PEG) na replicação de sete vírus bovinos em células de linhagem de rim bovino (MDBK). A eficiência de penetração e replicação foi mensurada pela contagem do número de placas virais produzidas em tapetes celulares, após adsorção do inóc (mais) ulo viral (100 DICC50 mL-1) com ou sem a adição de PEG a 5% (peso molecular 6.000). A adição de PEG ao inóculo resultou em aumentos significativos do número de placas para o vírus da diarréia viral bovina (BVDV) (aumento de 3,4 vezes), vírus da estomatite vesicular (VSV) (2,2 vezes) e vírus respiratório sincicial bovino (BRSV) (1,5 vezes). A adição de PEG não produziu aumento significativo no número de placas dos herpesvírus bovinos 1, 2 e 5 (BoHV-1, BoHV-2 e BoHV-5). Por outro lado, o PEG produziu uma redução do número de placas (1,4 vezes) produzidas pelo vírus da parainfluenza bovina (bPI-3V). A adição de PEG a 5% também aumentou a sensibilidade de detecção (entre 10 e 100 vezes) do BVDV no soro de três bezerros persistentemente infectados. Para o BRSV, a adição de PEG aumentou em duas vezes a sensibilidade do isolamento viral de secreções nasais de duas ovelhas infectadas experimentalmente. Esses resultados demonstram que o PEG aumenta a eficiência de infecção do BVDV, VSV e BRSV em células de cultivo, podendo ser utilizado para aumentar a sensibilidade de detecção desses vírus em amostras clínicas (isolamento viral) e/ou, para aumentar os títulos de vírus produzidos em cultivo celular. Resumo em inglês The low efficiency of penetration of some viruses in cultured cells may represent an obstacle for viral isolation and/or viral multiplication in tissue culture. This study investigated the effect of polyethylene glycol (PEG) on the penetration and replication of seven bovine enveloped viruses in culture cells. Penetration efficiency was measured by counting the number of viral plaques produced in bovine kidney cells (MDBK). The addition of 5% PEG (molecular weight 6.000) (mais) to the viral inoculum containing 100 TCID50 mL-1 (tissue culture median infectious dosis) of each virus, during adsorption for 2h at 37°C, resulted in a significant increase in the number of plaques for bovine viral diarrhea virus (BVDV) (increase of 3.4-fold), vesicular stomatitis virus (VSV) (2.2-fold) and bovine respiratory syncytial virus (BRSV) (1.5-fold). The addition of 5% PEG to the inoculum of bovine herpesviruses 1, 2 and 5 (BoHV-1, BoHV-2 and BoHV-5) did not increase the number of viral plaques. On the other hand, PEG produced a reduction in the number of plaques by bovine parainfluenza virus (bPI-3V) (1.4-fold). Furthermore, the addition of 5% PEG produced a 10- to 1000-fold increase in the sensitivity of BVDV detection in the serum of three persistently infected calves; and doubled the sensitivity of detection of BRSV in nasal secretions of two experimentally infected sheep. These results demonstrate that PEG enhances the efficiency of infection by BVDV, VSV and BRSV in cultured bovine cells and therefore may be used to increase the sensitivity of virus detection in clinical samples (viral isolation), and/or to increase virus titers in cell cultures.

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Microbiota bacteriana da conjuntiva de doadores de córnea/ Bacterial microbiota of the conjunctiva of donor corneas

Araújo, Maria Emília Xavier dos Santos; Scarpi, Marinho Jorge
2004-12-01

Resumo em português OBJETIVOS: Quantificar e qualificar a microbiota aeróbia da conjuntiva de doadores de córnea segundo a interferência do intervalo de tempo entre o óbito e a colheita do espécime conjuntival, a causa do óbito e a idade do doador e avaliar a atividade biocida de determinados antibióticos aos microrganismos isolados. MÉTODOS: Entre janeiro e março de 1994 foram colhidos espécimes da conjuntiva de 242 olhos de doadores de córnea. O material transportado em meio de (mais) Stuart foi semeado em ágares sangue, chocolate, sangue azida, MacConkey e caldo tioglicolato. Foi registrada a idade do doador, hora e causa do óbito. A atividade biocida dos antibióticos foi avaliada pela metodologia de Kirby e Bauer. A análise estatística utilizou os testes do qui-quadrado, exato de Fisher e Mann-Whitney. RESULTADOS: A freqüência de cultura positiva da conjuntiva de doadores de córnea foi de 91,7%. A mediana da idade dos doadores foi de 62 anos e do intervalo de tempo entre o óbito e a colheita do espécime foi de 4,2 horas. A causa mais freqüente de óbito foi doença cardiovascular (26,4%). Não houve diferença significante entre a cultura positiva e as variáveis estudadas. A vancomicina inibiu 100% das cepas de bactérias Gram-positivas e a sensibilidade dos bacilos Gram-negativos à gentamicina variou de 36,7% a 92,3%. CONCLUSÕES: O estudo revelou freqüência elevada de cultura positiva da conjuntiva de doadores de córneas. Staphylococcus coagulase negativo foi a espécie com maior número de isolamentos positivos. Não foi encontrada associação entre os fatores de risco avaliados e cultura positiva. Os antibióticos tiveram atividade biocida variável sobre os Gram-negativos e 100% dos Gram-positivos foram sensíveis à vancomicina. Resumo em inglês PURPOSE: To identify and qualify bacterial organisms in conjunctival tissue of donor corneas. To correlate the frequency of positive cultures with donor age, cause of death, and time from death to collection of conjunctival samples. To investigate bacterial susceptibility to specific antibiotics. METHODS: Conjunctival samples obtained from the inferior conjunctival fornix of 242 eyes of cornea donors were collected between January and March, 1994. The samples were transfe (mais) rred to Stuart´s medium and then inoculated into blood, acid blood, chocolate, McConkey agars, and thioglycolate broth. Donor age, time and cause of death were recorded. Bacterial susceptibility to antibiotics was tested using the diffusion method on agar modified by Kirby and Bauer. Statistical analysis was done using the chi-square, Fisher's exact and Mann-Whitney tests. RESULTS: Microorganisms were identified in 91.7% of the samples. The most frequently isolated microorganism was coagulase-negative Staphylococcus (27.3%). Time from death to collection of the conjunctival sample was on the average 4.2 hours. The most frequent cause of death was cardiovascular disease (26.4%). The median donor age was 62 years. No significant correlation between positive cultures and the investigated variables was found. Vancomycin inhibited bacterial growth in 100% of Gram-positive microorganisms. The sensitivity of Gram-negative bacteria to gentamicin ranged from 36.7 to 92.3%. CONCLUSION: The frequency of positive conjunctival cultures of donor corneas was 91.7%. No significant statistical difference was found between positive cultures and the investigated parameters. Vancomycin inhibited the growth of Gram-positive bacteria in 100% of the cases and the sensitivity of Gram-negative bacteria to gentamicin varied.

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Infecções experimentaes na Leishmaniose visceral americana/ Experimental infections in american visceral leishmaniasis

Cunha, Aristides Marques da
1938-01-01

Resumo em português Passando em revista as experiencias de infecção que effectuamos e que acabamos de relatar, vemos que, as culturas isoladas de casos de Leishmaniose visceral americana quer do homem quer do cão, são capazes de infectar hamsters, rhesus e cães de maneira identica ao que acontece com as outras formas de Kala-Azar. Notamos ainda que a evolução da doença e as lesões observadas nos animaes assim infectados, se assemelham ao que tem sido observado nessa enfermidade apro (mais) ximando-a de maneira singular do Kala-Azar mediterraneo. É sobretudo no cão que a semelhança se torna mais patente. A infecção da pelle e as lesões por ella provocadas que observamos, não differem em nada das que tem sido descriptas na infecção natural do cão e já assignaladas tambem na infecção experimental desse animal, embora de maneira menos completa do que fazemos agora aqui. As lesões oculares com formação de placas de keratite, a infeccção massiça do intestino nos casos fataes de infecção e até mesmo as lesões do figado descriptas por Adler como peculiares á infecção experimental, (infiltração em torno da veia central do lobulo) constituem outros tantos caracteres que mostram a completa analogia entre as infecções do cão que obtivemos e as já observadas no Kala-Azar mediterraneo. Além disso, a presença de Leishmanias na pelle, as vezes em grande numero e a constancia dessa localisação parasitaria, vem mostrar que o cão apresenta as condições necessarias para desempenhar o papel de depositario de virus tal como acontece no Kala-Azar mediterraneo, tanto mais que é elle encontrado naturalmente infectado, nas regiões em que grassa a doença. Mas não é só a infecção do cão que mostra essa semelhança; nos outros animaes tambem se verifica o mesmo facto e até pequenos signaes, taes como a tumefacção das patas assignalada nos hamsters infectados com Leishmania infantum, foram tambem observados aqui. Por outro lado, a reacção de sôro-agglutinação, conforme mostramos em trabalho anterior, não permite a separação das especies do genero Leishmania, pois todas ellas, quando recentemente isoladas, possuem identica constituição antigenica, que se modifica depois, pela conservação longo tempo em cultura. É esse facto, que deu logar ás conclusões contradictorias a que chegaram os autores que se ocuparam do assumpto bem como os primeiros resultados que obtivemos. Deante de todos esses factos, nos julgamos autorizados a concluir como já fizemos anteriormente, que o agente da Leishmaniose visceral americana é identico á Leishmania infantum. Ao terminar, queremos deixar consignados nossos agradecimentos ao Dr. E. chagas, por ter posto a nossa disposição as culturas de Leishmania por elle isoladas, tornando possivel deste modo, a execução do presente trabalho. Resumo em inglês With cultures isolated from cases of american visceral leishmaniasis we succeeded in obtaining experimental infections in hamsters (Cricetus cricetus), rhesus monkeys (Macaca mullata) and dogs. Hamsters were infected with strains obtained from man and dogs, the intraperitoneal way having been always employed. When cultures recently isolated are used, infection is obtained practically in 100% of the animals inoculated. The first negative results obtained by us may be expla (mais) ined by the use of cultures isolated some time before (about 7 months 0 and which had lost already their virulence. In some cases external lesions are observed represented by alterations of the skin and swelling of the paws. The skin lesions are observed on the ventral surface and consist in depilation, erythema and exudation. The skin thus affected shows to be extremely friable, rupturing at the movements of the animal when hold. On post-mortem examination, besides the lesions pointed out, the animals present enlargement of the spleen. The parasites are very numerous in the spleen, liver, bone marrow, etc. The changed skin shows considerable hypertrophy of the epithelium with degeneration of the cells of the superficial layers, intensive infiltration of the derm by mononucleate cells full of parasites, and strong hyperemia. In rhesus monkey, we obtained until now, only one case of infection. The inoculation was made by the intraperitoneal way with cultures in Noeller's medium, isolated from a human case of visceral leishmaniasis, found in Chaco Argentino. About 8 months after the inoculation, the monkey was found in agony and was sacrified; the post-mortem examination showed that it was intensely infected. For infecting dogs, we employed young animals, 1 to 2 months old. The cultures were recently isolated (1 to 3 months) from man or dog. For the inoculation we used thick suspensions of flagellates from plate cultures by Mayer and Ray's method. The inoculations were carried out through the intraperitoneal way and renewed 3 to 4 times with intervals from 4 to 8 days. We observed an incubation period of 3 to 4 months when we used cultures obtained from dogs, and a period of 5 to 7 months, when employed human strains. Formerly, in order to verify the infection it, was used the liver puncture; later on we also examined the bone marrow removed by trepanation. We wish to emphasize the advantages derived from the examination of the bone marrow, as there the parasites are much more numerous than in the liver, thus making the examination easier. The infection shows itself in the animal by fever, anemia and emaciation at times attaining cachexia. Apart from this, skin lesions are observed represented by depilation, seborrhea, and even ulceration. In the dog A. we observed keratitis on both eyes, and in the dog C, diminution of vision nearly attaining complete blindness. What called our particular attention, was the infection of the skin. In this, parasites are always found in any region o fthe body, although presenting some elective sites such as the paws where the parasites first appear and where they generally are more numerous. At the beginning of the skin infection we see in the derm macrophages, containing parasites, generally 3 to 4, and arranged along the vascular tracts. With the exception of these macrophages, the skin looks nomral. The number of parasited macrophages increases gradually and then appear the changes of the skin here described. The main change observed is represented by infiltration of the derm by mononucleate cells. Such infiltration is mainly located around the pilo-sebaceous folliches. In other cases, the infiltation is located in the chorion. Finally, in certain cases of intense infiltration, it extends uniformly over the whole derm. The infiltration is sometimes constituted chiefly by parasited macrophages and this occurs mainly when the infiltration is not very intensive. When the infiltration becomes more intensive, the number of not parasited macrophages increases, and in cases of ulceration the parasited macrophages become very rare or entirely disappear. The four dogs experimentally infected which died either from the infection or from an intercurrent disease were all examined post-mortem. On the post-mortem examination, the macroscopical changes observed in a constant manner are not important and only consist in an enlargement of the spleen. In the dogA, we found keratitis already observed in the same living animal, and the intestine intensely congested with sanguinolent contents and the axillary and inguinal lymphatic glands enlarged and congested. Smears from the organs showed very numerous parasites, chiefly in the spleen, liver, bone marrow and lymphatic glands. In liver sections we observed the infiltration mainly located around or near by the intralobar vein a feature which already has been pointed out by Adler in the experimental infection of dog. Parasites were also found in Kupffer's cells, and a few parasited macrophages were observed in the porta-spaces as well as in the tissue of the lobule. The intestine of the same animal was intensely parasited, the Leishmaniae being located mainly in the mucous membrane, in infiltration cells located amongst Lieberkuehn's glands and some parasited macrophages could also be observed in the sub-mucosa. Mice as well as the rodents Dasyprocta agouti and Proechymis oris when inoculated, did not become infeced. From the exposed we may conclude that the experimental infections obtained, present a complete analogy with those described in the Mediterrean Kala-azar. On the other hand, the sero-agglutination test, as shown by us in a previous paper, allows no distinction of the species of Leishmania, as all the strains when recently isolated, have the same antigenic constitution which later on undergoes modifications when the Leishmaniae are preserved in culture for a long time. Thus, we feel authorized to conclude that the agent of the visceral american leishmaniasis is identical with L. infantum.

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Indução de Metabólitos Bioativos em Culturas de Células de Maytenus Ilicifolia/ Induction of bioactive metabolites in plant cell tissue culture of Maytenus ilicifolia

Buffa Filho, Waldemar; Pereira, Ana Maria Soares; França, Suzelei de Castro; Furlan, Maysa
2002-01-01

Resumo em português Visando a obtenção de triterpenos quinonametídeos em concentração apreciável protocolo para o desenvolvimento de culturas de células de M. ilicifolia foi estabelecido. Estudos visando observar a influência da luminosidade sobre o crescimento das culturas mantidas nas mesmas condições de temperatura e umidade, além da avaliação da influência de diferentes tipos de frascos, que variavam em altura, sobre o crescimento e acúmulo desses metabólitos, foram reali (mais) zados. O acúmulo desses metabólitos com comprovada atividade biológica se mostrou 100 e 3 vezes maior para a 22beta-hidroximaitenina e maitenina, respectivamente, no sistema in vitro quando comparada à planta in natura. Isto demonstra que o sistema in vitro pode se constituir em uma excelente ferramenta para a produção, em maior escala, destes metabólitos bioativos. Resumo em inglês Maytenus ilicifolia (Celastraceae) showed the accumulation of quinonamethide triterpenes, which constitute a class of secondary metabolites with comproved biological activity. Dealing on the obtention of these metabolites in a large concentration, protocol to establish cell tissue culture of Maytenus ilicifolia was developed. In order to evaluate the lightly influence under cell tissue cultures growing in the same conditions of temperature and humidity, besides the influe (mais) nce of different types of flasks over the accumulation of these metabolites were done. The accumulation of these metabolites with comproved biological activity showed 100 and 3 times higher to 20alpha-hidroxymaytenin and maytenin, respectively, and showed that the in vitro system should be an excellent tool to the production, in large scale, of these bioactive metabolites.

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Importância do co-cultivo com fibroblastos de camundongo 3T3 para estabelecer cultura de suspensão de células epiteliais do limbo humano/ Importance of 3T3 feeder layer to establish epithelial cultures from cell suspension obtained from corneo-scleral rims

Cristovam, Priscila Cardoso; Glória, Maria Aparecida da; Melo, Gustavo Barreto; Gomes, José Álvaro Pereira
2008-10-01

Resumo em português OBJETIVO: Avaliar a importância da presença de células 3T3 para estabelecer cultura de suspensão de células epiteliais do limbo obtido de rimas córneo-esclerais. MÉTODOS: Rimas de diferentes doadores tiveram seus estroma posterior e endotélio removidos (n=6). Cada rima foi dividida em três segmentos iguais, que foram colocados em cultura em três diferentes condições: um segmento foi colocado na placa de cultura com o lado epitelial para cima (Grupo A). Os dois (mais) segmentos restantes foram tripsinizados e a suspensão de células obtida foi cultivada com (Grupo B) ou sem (Grupo C) células 3T3 irradiadas. As células foram mantidas em meio de cultura "supplemental hormonal epithelial médium" (SHEM), a migração epitelial e a formação de clones nos grupos A, B e C foram avaliadas pela microscopia de contraste de fase e por coloração pela rodamina B. Os resultados foram comparados estatisticamente. RESULTADOS: O crescimento de células epiteliais foi observado em 4/6 rimas (Grupo A). Todas as suspensões de células epiteliais que foram cultivadas com células 3T3 (Grupo B) formaram clones. Nenhuma adesão ou formação de clones verdadeiros (holo ou meroclones) foi observada na cultura de células que foi cultivada sem 3T3 (Grupo C) (p=0,009). CONCLUSÕES: Suspensão de células epiteliais límbicas obtidas de rimas córneo-esclerais no modelo utilizado precisa ser cultivada com células 3T3 para formar clones e estabelecer colônias epiteliais com perspectivas para uso terapêutico na reconstrução da superfície ocular. Resumo em inglês PURPOSE: To evaluate the importance of the presence of 3T3 fibroblasts for establishing limbal epithelial cultures from cell suspension obtained from corneo-scleral rims (CSR). METHODS: Corneo-scleral rims from different donors (n=6) had their posterior stroma and endothelium stripped away. Each corneo-scleral rim was divided into three equal segments that were set up in tissue culture in three different conditions: one of the segments was placed with the epithelial side (mais) up on the bottom of a 6-well culture plate (Group A). The other two fragments were trypsinized and the obtained cell suspension was cultured with (Group B) or without (Group C) irradiaded 3T3 cells. The cells were cultured in supplemental hormonal epithelial medium (SHEM), the epithelial migration and clone formation in groups A, B and C were evaluated with phase contrast microscopy and rodamine B staining. RESULTS: Epithelial cell growth was observed in 4/6 rims (Group A). All epithelial cell suspensions that were cultured with 3T3 cells (Group B) formed clones. No adhesion or true clone formation (holo- or meroclones) was observed in the cell suspensions that were cultivated without 3T3 (Group C) (p=0.009). CONCLUSIONS: Epithelial cell suspension obtained from corneo-scleral rims in this model needs to be cultivated with 3T3 cells in order to form clones and establish limbal epithelial cell colonies with the potential to be used for ocular surface reconstruction.

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Genótipos de milho com alta capacidade para embriogênese somática e regeneração de plantas obtidos a partir de calos/ Genotypes with high somatic embryogenesis and plant regeneration capacity obtained from tissue culture

Santos-Serejo, Janay Almeida dos; Aguiar-Perecin, Margarida L. R. de
2000-12-01

Resumo em português Como parte de um programa que visa a seleção de linhagens adaptadas a regiões tropicais, com a capacidade para regenerar plantas a partir de calos embriogênicos de curta duração, foram investigadas três linhagens obtidas a partir de uma variedade de milho tipo flint, e seus respectivos híbridos. As culturas foram obtidas a partir de embriões imaturos inoculados em meio N6 suplementado com 1,5 mg L-1 de 2,4-D e prolina 12 mM. A frequência de calos embriogênicos (mais) 45 dias após o início da cultura foi semelhante aos melhores genótipos descritos na literatura (83-99%), refletindo a alta qualidade dos genótipos testados para o estabelecimento de culturas de curta duração. O número médio de plantas férteis regeneradas em culturas com 2-3 meses de idade variou de 2 a 8,15 por calo, destacando-se os híbridos 13342/5 x 13342/2 e 132331/1 x 13342/5. Os resultados mostram que estes genótipos são promissores para utilização em programas envolvendo transformação de plantas e propagação de genótipos. Resumo em inglês As part of a breeding program to select tropical maize lines which are able to regenerate plants from embryogenic calli, three lines obtained from a flint maize variety, and their respective hybrids, have been investigated. Short-term tissue cultures were obtained from immature embryos inoculated on N6 medium suplemented with 1.5 mg L-1 2,4-D and 12 mM L-proline. The frequency of 45 day-old embryogenic calli was similar to those of the best genotypes described in the lite (mais) rature (83-99%), reflecting the high quality of the genotypes evaluated to estabilish short-term tissue cultures. The average number of fertile regenerated plants in 2-3 month-old cultures ranged from 2 to 8.15 per callus, and the hybrids 13342/5 x 13342/2 and 132331/1 x 13342/5 showed the bestg performance. The results show that these genotypes may be used in programs involving plant transformation and genotype propagation.

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Fisiopatologia da osteoporose involutiva

Ramalho, Ana Claudia; Lazaretti-Castro, Marise
1999-12-01

Resumo em português A diminuição da densidade mineral óssea (DMO) com a idade é um fenômeno universal, atingindo todas as raças e culturas, não patológico em si, mas que se constitui um substrato para o desenvolvimento da osteoporose (OP). Em 1941, Albright descreveu pela primeira vez a OP, e chamou atenção para deficiência de estrógeno (E2) como causa principal desta patologia. Isso foi confirmado em trabalhos posteriores, onde a reposição hormonal preveniu a perda óssea. Pos (mais) teriormente, Riggs e Melton classificaram a OP involutiva em tipo I e tipo II. A OP tipo I, ou pós-menopáusica, ocorre nos 10 anos que se seguem à menopausa, sendo uma conseqüência da deficiência de E2. Porém, o mecanismo de ação do E2 no osso ainda é desconhecido. Vários trabalhos não evidenciaram receptores de E2 em osteoclastos, sugerindo que o efeito do E2 se faz de forma indireta via osteoblastos ou pelas células do estroma da medula óssea, através da liberação de mediadores. Dados recentes são controversos sobre o papel da interleucina 6 como mediadora do efeito estrogênico. A OP tipo II, ou senil, ocorreria após 65 anos. À partir dessa idade, outros fatores também seriam determinantes da OP, dentre eles o hiperparatiroidismo secundário. Recentemente, Riggs e Melton retornaram a teoria unitária do modelo de OP involutiva, colocando o E2 como fator etiológico central para ambas as fases de perda óssea. As discussões sobre as classificações da OP têm objetivos didáticos, mas demonstram também o caráter heterogêneo e multifatorial da doença. Resumo em inglês The decrease in bone mineral density (BMD) with age is a universal phenomenon that affects all races and cultures; non-pathological by itself but it is the background to development of osteoporosis (OP). In 1941, Albright described the postmenopausal OP, and discussed the special role of the estrogen (E2) lack. Others that prevented the OP with hormonal therapy confirmed this hypothesis. Later, Riggs and Melton proposed a classification of involutional OP on type I and ty (mais) pe II. The type I OP appears in the first 10 years after menopause and is secondary to the deficit of E2. However, it is not clear the mechanisms of action of E2 on bone tissue: which are the mediators and also the target cells. There is no E2 receptors identified on osteoclast. Probably, the E2 effects are indirectly through osteoblast or by bone marrow stromal cells. The citokines, specially the interleucine 6 are candidate to be the mediators of E2 actions, but the data are still controversy in the literature. Type II or senile OP is defined to occur after 65 years old. In this age, others factors further than E2 deficiency determine the OP, and the secondary hyperparathyroidism play a special role. Recently, Riggs and Melton proposed a return to Albright's idea suggesting a unitary model of the involutional OP and placing the E2 as the central ethiological factor of bone loss. This distinction in OP type I or type II is theoretical, but shows the heterogeneous and multifactorial aspects of this disease.

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Estudos Sobre Leishmaniose: I. Primeiros Casos de Leishmaniose Espontânea Observados em Cobáios

Medina, Heitor
2001-12-01

Resumo em inglês The author describes the first cases of spontaneous leishmaniasis in guinea-pigs, as verified for the first time, in Curitiba, at the Institute of Biology and Technological Research. Studying the inoculability of Paracoccidioide brasiliensis in guinea-pigs, he found animals which presented tumoral lesions in the ears and peritesticular skin. The examination of these tumors, mixed with a small drop of Giemsa's original solution, plus the exam of the rubbings of the same ma (mais) terial, coloured by the May-Grunwald Giemsa after fixation by Heidenhein's solution and the histological exams of the cuts in the tumoral lesions revealed the presence of elements which possessed the same morphology and aspect of the LEISHMAN-DONOVANI corpuscles. In the meanwhile, a parasitosis by protozoarians of the Leishmania variety might have been suspected, because large macrophagi could be seen in the histological cuts, all parazitized, identical with those which are found in other cutaneous leishmaniosis. The author then proceeds to the experimental study of the sickness, first by endeavouring to obtain material for the inoculation and cultures, by means of punctures in the tumors. Part of the product of the punctures was sown in N. N. N. medium and part inoculated in other guinea-pigs. After the third day the cultures presented the flagellated forms of the parasite, free or grouped in rosettes in the culture liquid. All the guinea-pigs inoculated with part of the material obtained by puncturing and with the liquids of the cultures, reproduced the tumors found in the animals spontaneously infected. With a view to reproducing the same features of generalization which were observed in other experimental animals, with other strains of leishmania, new animals were inoculated after having been tarred and blocked in order to attempt the breaking down of possible natural resistences, which proved unnecessary, however, for the generalization went on of itself naturally and without artifice. Inoculations were made by the subcutaneous, intraperitonial, intrasplenic, intramedular, intracerebral and endovenous channels and by instillation in the conjunctive, in those guinea-pigs which received subcutaneous inoculations, the incubation period varied between 11 and 15 days, this period being longer when the internal channels were used, when it was generally one or two months before the lesions appeared. When the lesions are on the skin or when the inoculation is done there, the first manifestations of lesions are characterized by a slight thickening of the subcutaneous tissue, which, little by little, becomes more consistent, giving place to a tumoral growth which attains great volume and characterizes the most developed phase. The lesions, when metastatic, are localized mostly in the tegumentary extremities and periarticular zones, having the same appearance as the lesions observed by other researchers who have studied the infection of hamsters, mice and dogs infected by L. donovani, L. infantum and L. tropica. The experiments carried out in all the tumoral lesions in guinea-pigs, were positive for leishmania, where they were found free in the tissues or parasitizing large macrophagi. At times the tumors ulcerate and become covered with a crusty layer, easily detachable, covering a rosy surface of granulomatosis aspect. The spleen and lymphatic ganglia are the internal organs which most react, hypertrophy always being present, and it has been possible to re-isolate the parasite of these organs as well as those of the liver, suprarenal, testicle, medulla of the bones and cardiac blood. A series of sixty guinea-pigs were inoculated in the skin of the nose and sacrificed within anything from a few minutes' up to twenty-four hours' interval. The material obtained from these animals was fixed in Bouin-Hollande, included in paraffin and coloured by hematoxilin-eosine and Maxinow's hematoxilin-azur II-eosine. The study of the histological cuts in the different periods of evolution showed that the inflammatory process passes through a series of modifications which start by an acute inflammatory phase followed by a simple granulomatosis phase, finally followed by another characterized exclusively by large parasitized macrophagi - the macrophagi phase. During the period of evolution of the inflammatory lesion, the infiltrative phenomena are constant and are at first constituted of granulocited neutrophils, eosinophils and mononuclear cells, followed by a preponderance of monocytes and lastly by the sole presence of large parasitized macrophagi. The author compares his findings in the guinea-pigs with those in other animals inoculated with different strain of Leishmania, calling attention to a real dermatropism of the parasite under study to its dissemination through the lymphatic channels and to the histologycal lesions identical to those other leishmaniosis, principally by those produced by L. tropica.

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Estudo comparativo da susceptibilidade de linhagens de células diplóides humanas ao vírus da citomegalia (VCM)/ Comparative study of the susceptibility of human diploid cell strains to the cytomegalovirus

Stewien, Klaus Eberhard
1971-06-01

Resumo em português São apresentados os resultados de um estudo comparativo da susceptibilidade de diversas linhagens de células diplóides humanas (FH1, FH3, FH4, FH11 , FH13, FH14, FH16) ao vírus da citomegalia (VCM). Das linhagens referidas, tôdas se mostraram sensíveis aos vírus estudados, com exceção das linhagens FH3 e FH16; estas vieram mostrar o mesmo grau de susceptibilidade depois de várias sub-culturas, no momento em que o aspecto morfológico da camada celular passou de heterogêneo - células fibroblásticas e epiteliais - a homogêneo - células fibroblásticas. Resumo em inglês A comparative study of the susceptibility of different strains of human diploid cells (FH1, FH3, FH4, FH11, FH13, FH14, FH15) to cytomegalovirus disclosed a relation between the capacity of growing and producing a consistent cytophatic effect of human cytomegalovirus strains and the homogeneous characteristics of the tissue cultures. The cell strains FH3 and FH16 were insusceptible when fibroblasts and epithelial cells were present in the same culture. After a certain num (mais) ber of passages, when the fibroblastic characteristics of cells in the cultures was established, the cytophatic effect could be consistently observed.

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Estudo comparativo da susceptibilidade de linhagens de células diplóides humanas ao vírus da citomegalia (VCM)/ Comparative study of the susceptibility of human diploid cell strains to the cytomegalovirus

Stewien, Klaus Eberhard
1971-06-01

Resumo em português São apresentados os resultados de um estudo comparativo da susceptibilidade de diversas linhagens de células diplóides humanas (FH1, FH3, FH4, FH11 , FH13, FH14, FH16) ao vírus da citomegalia (VCM). Das linhagens referidas, tôdas se mostraram sensíveis aos vírus estudados, com exceção das linhagens FH3 e FH16; estas vieram mostrar o mesmo grau de susceptibilidade depois de várias sub-culturas, no momento em que o aspecto morfológico da camada celular passou de heterogêneo - células fibroblásticas e epiteliais - a homogêneo - células fibroblásticas. Resumo em inglês A comparative study of the susceptibility of different strains of human diploid cells (FH1, FH3, FH4, FH11, FH13, FH14, FH15) to cytomegalovirus disclosed a relation between the capacity of growing and producing a consistent cytophatic effect of human cytomegalovirus strains and the homogeneous characteristics of the tissue cultures. The cell strains FH3 and FH16 were insusceptible when fibroblasts and epithelial cells were present in the same culture. After a certain num (mais) ber of passages, when the fibroblastic characteristics of cells in the cultures was established, the cytophatic effect could be consistently observed.

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Calogênese in vitro em anteras de coffea arabica L./ In vitro callogenesis in anthers of Coffea arabica L.

Palú, Ednamar Gabriela; Silva, Adriano Bortolotti da; Pasqual, Moacir
2004-08-01

Resumo em português O café é um dos mais importantes produtos do mercado internacional; porém, o tempo gasto e os recursos despendidos são fatores limitantes para o melhoramento do cafeeiro por meio de métodos convencionais. Contudo, a cultura de anteras surge como uma alternativa viável e de curto prazo para solução desses problemas. Com o presente trabalho, objetivou-se a produção de dihaplóides com a cultura de anteras do cafeeiro (androgênese indireta), buscando um protocolo (mais) para a fase de indução de calos. Para tanto, foi efetuada a assepsia dos botões florais e das anteras, que, em seguida, foram inoculadas em meio IC e mantidas no escuro por 8 semanas, sob temperatura de 25ºC ± 1. Para induzir a calogênese em anteras da cv. Acaiá Cerrado, foram testadas as concentrações de 2,4-D (0, 1, 2 e 4 mg.L-1) x cinetina (0, 2, 4 e 8 mg.L-1) e 2,4-D (0; 0,5; 1 e 2 mg.L-1) x AIB (0; 0,5; 1 e 2 mg.L-1) mais 2iP (2 mg.L-1) e, para a cv. Rubi, as concentrações de 2,4-D (0, 1, 2 e 4 mg.L-1) x cinetina (0, 2, 4 e 8 mg.L-1). Foi observado que a maior porcentagem de indução de calogênese em anteras na cv. Acaiá Cerrado ocorre com as combinações de 2,4-D (2 mg.L-1) + cinetina (1,9 mg.L-1) e 2,4-D (0,86 mg.L-1) + AIB (1 mg.L-1)+ 2iP (2 mg.L-1); para cv. Rubi, a combinação de 2,4-D (1,9 mg.L-1) e cinetina (4 mg.L-1). Resumo em inglês The coffee is one of the most important products of the international market, however the time and money wasted in breeding programs are limiting factors for its improvement. However, the anther culture appears as a viable alternative for a short time period solution for this problem. This work aimed to obtain the double haploids production from anther cultures of the coffee plant (indirect androgenesis) aiming to optimize a protocol calluse induction. For this purpose, a (mais) sseptic conditions of the flower budsand anthers were accomplished, folowed by inoculationin IC medium and the tissue were kept for eight weeks at 25ºC ± 1 in the dark. To induce callogenesis in anthers of the 'Acaiá Cerrado' there were tested 2,4-D (0, 1, 2 and 4 mg.L-1) x kinetin (0, 2, 4 and 8 mg.L-1) and 2,4-D (0; 0,5; 1 and 2mg.L-1) x AIB (0; 0,5; 1 and 2mg.-1) plus 2 iP (2 mg.L-1) concentrations and for the 'Rubi' 2,4-D (0, 1, 2 and 4 mg.L-1) x kinetin (0, 2, 4 and 8 mg.L-1) concentrations. It was observed that the highest percentage of callogenesis induction in anthers of the 'Acaiá Cerrado' was provenient from 2,4-D (2 mg.L-1) + kinetin (1,9 mg.L-1) and 2,4-D (0,86 mg.L-1) + AIB (1 mg.L-1)+ 2iP (2mg.L-1) combinations for 'Rubi' 2,4-D (1,9 mg.L-1) and kinetin (4 mg.L-1).

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Avaliação de biossólido de águas servidas domiciliares como adubo em couve/ Evaluation of biosolid fed by municipal waste-water sludge as a fertilizer in kale

Rocha, Ricardo Eiras Moreira da; Pimentel, Márcio Sampaio; Zago, Valéria Cristina Palmeira; Rumjanek, Norma Gouvêa; De-Polli, Helvécio
2003-12-01

Resumo em português O objetivo deste trabalho foi avaliar o biossólido e proveniente da estação de tratamento de águas servidas domiciliares, como adubo no cultivo da couve (Brassica oleraceae var. acephala, grupo Georgia). O trabalho foi em delineamento de blocos ao acaso, com três tratamentos de adubação, esterco bovino, biossólido e uréia, com quatro repetições. Amostras de solo de cada tratamento foram analisadas quanto a parâmetros químicos, microbiológicos e parasitológi (mais) cos. Os níveis de metais pesados encontravam-se abaixo dos permitidos pela legislação internacional. Após 54 dias da incorporação do biossólido ao solo, os coliformes fecais eram praticamente nulos e, a partir dos 60 dias, não foram mais encontradas amostras positivas com ovos de helmintos, apesar do alto grau de contaminação inicial. As plantas adubadas com biossólido, na maior dose, comparadas ao esterco, apresentaram maior produtividade e menores teores de N total nas folhas. O biossólido foi classificado como B, pela concentração de coliformes fecais apresentada, tornando-o impróprio para aplicação em culturas de contato primário como as hortaliças. Os resultados indicam a importância de selecionar indicadores de sanidade que permitam o uso seguro deste adubo. Resumo em inglês This work aimed to evaluate the biosolid from the municipal waste-water treatment, as fetilizer in kale (Brassica oleraceae var. acephala, group Georgia). The experiment was in a randomized complete block design with three fertilization treatments, cattle manure, biosolid and urea, and four replications. Soil samples from each treatment were chemically, microbiologically and parasitologically analyzed. The heavy metal levels were below those recommended by the internation (mais) al legislation. After 45 days of incorporation of the biosolid into the soil, the fecal coliforms were almost undetectable. After 60 days, none of the samples showed the presence of eggs of parasitic worms, despite the high initial number. The plants fertilized with biosolid, at the higher level, showed greater productivity and lower N content in leaf tissue than those fertilized with cattle manure. The biosolid was classified as Class B, according to concentration of fecal coliforms, and is not appropriate for cultures with primary contact, as vegetables. The results show the importance to select indicators of sanity which provide biosolid safety use.

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Avaliação de antígenos do trypanosoma cruzi para a reação de hemaglutinação indireta: II. Antígenos de diferentes amostras e formas evolutivas/ Evaluation of Trypanosoma cruzi antigens for the indirect hemagglutination test: II. Different stocks and evolutive forms

Vítor, Ricardo Wagner de Almeida; Chiari, Egler
1987-06-01

Resumo em português Para aprimorar a sensibilidade e a especificidade da reação de hemaglutina-ção indireta no diagnóstico da doença de Chagas, foram utilizados eritrocitos sensibilizados com antígeno de epimastigotas de diferentes amostras (clones Al.7, B12, Cl e cepas D150 e Y), de tripomastigotas metacíclicos de cultura (TMC) e de tri-pomastigotas de cultura de células (TCC) do Trypanosoma cruzi. Foram titulados 132 soros de indivíduos chagásicos e 161 soros de não chagásicos (mais) , diagnosticados pela reação de imunofluorescência indireta (RIFI), considerada como reação de referência no cálculo dos índices de co-positividade (i.c.p.), co-negatividade (i.c.n.) e concordância. Utilizando o título discriminante (T.D.) de 1:40, os antígenos da cepa Y e do clone B12 apresentaram valores elevados para os três índices calculados, indicando boa sensibilidade e especificidade em relação à RIFI. Os antígenos dos clones Al .7 e Cl apresentaram baixa especificidade considerando o T.D. de 1:40, mas ocorreu um aumento acentuado para o i.c.n. considerando o T.D. de 1:80, indicando um aumento de especificidade relativa sem alteração significativa da sensibilidade relativa. Com os antígenos T.M.C, e T.C.C, foram observados títulos mais baixos e valores menores para o i.c.p., indicando pouca sensibilidade em relação à RIFI. Resumo em inglês To improve sensitivity and specificity of the indirect hemagglutination test (IHA) for Chagas' disease serodiagnosis, different antigens of Trypanosoma cruzi extracts from epimastigotes (A1.7, B12 and CI clones; Y and D150 strains) and from trypomastigotes (metacyclics and tissue cell cultures) -were tested. Sera of 132 individuals with chronic Chagas' disease, demonstrated by immunofluorescence test (IFT) and sera of 161 non chagasic individuals were assayed. The IFT was (mais) the reference test to evaluate the co-positivity index (c.p.i.) and co-negativity index (c.ni.). The antigens of Y strain and B12 clone presented high values for the calculated index with a cut off of 1:40, suggesting sensitivity, specificity and agreement of IHA in relation to IFT. Antigens of A1.7 and CI clones presented high values for the calculated index only with a cut off of 1:80. Titers presented by sera from chagasics tested by IHA with trypomastigote antigens were lower than those with epimastigote antigens. Trypomastigote antigens gave lower values for co-positivity index, suggesting little sensitivity in relation to IFT.

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Aborto ovino associado com infecção por Sarcocystis sp/ Ovine abortion associated with Sarcocystis sp. infection

Pescador, Caroline A.; Corbellini, Luís G.; Oliveira, Eduardo C. de; Bandarra, Paulo M.; Leal, Juliano S.; Pedroso, Pedro M.O.; Driemeier, David
2007-10-01

Resumo em português Infecções por protozoários têm distribuição mundial e podem causar aborto, nascimentos prematuros e ou morte fetal em diversas espécies animais. Em julho de 2004, oito ovinos Corriedale apresentaram problemas reprodutivos caracterizados por aborto e natimortalidade no terço final da gestação. Dessas oito perdas, um natimorto macho foi enviado ao Setor de Patologia Veterinária para necropsia. Alterações macroscópicas não foram observadas durante a necropsia. (mais) Lesões histológicas foram observadas principalmente no cérebro e coração e se caracterizaram por encefalite não-supurativa multifocal acentuada associada à presença de protozoários no interior de células endoteliais e vasos sanguíneos e miocardite não-supurativa focal leve. Alguns desses organismos apresentaram formato de roseta. O teste de imunoistoquímica anti-Toxoplasma gondii foi negativo, mas houve reação cruzada com anticorpo anti-Neospora caninum. O exame de imunofluorescência direta para Leptospira sp. foi negativo. A bacteriologia aeróbica e micro-aeróbica não revelou crescimento significativo. Esses achados foram compatíveis com o diagnóstico de Sarcocystis sp. Resumo em inglês Protozoal infection has worldwide distribution and may cause abortion, premature parturition or fetal death in almost all domestic animals. In July 2004, eight Corriedale sheep showed abortion and stillbirth in the third trimester of gestation. Of these reproductive losses, one stillborn male was submitted to the Laboratory of Veterinary Pathology for necropsy investigation. The direct immunofluorescence test for Leptospira sp. was negative. No significant bacteria was is (mais) olated from lung and liver by aerobic and microaerobic cultures. Macroscopic lesions were not found in any fetal tissue. The histological lesions were observed mainly in the brain and heart and consisted primarily of severe multifocal nonsupurative encephalitis and nonsuppurative myocarditis. Schizonts of a protozoan parasite consistent with Sarcocystis sp. were found in the endothelial cells and vascular endothelium in several organs. Many schizonts with merozoites arranged in a rosette-like pattern were observed in brain and kidney tissues. In sections stained with periodic acid-Schiff (PAS), the limiting membrane of some schizonts appeared to be weakly PAS-positive. Merozoites and nuclei were PAS-negative. Protozoa did not react immunohistochemically to the antibody anti-Toxoplasma gondii; however, cross-reactivity was observed with Neospora caninum antibody. These findings were consistent with the diagnosis of Sarcocystis sp.

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