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Purificação de amilases de malte de Zea mays/ Purification of amylases from Zea mays malt

Biazus, Joana Paula Menezes; Santana, José Carlos Curvelo; Souza, Roberto Rodrigues de; Tambourgi, Elias Basile
2010-03-01

Resumo em português Neste trabalho realizou-se a purificação das enzimas α e β-amilases de malte de milho combinando os processos de adsorção em leito expandido com o fracionamento por etanol. Alimentaram-se 5 mL de uma solução a 2% de malte de milho em tampão fosfato 0,05 M a pH 5 em uma coluna contendo as resinas de troca iônica Amberlite IRA 410, em leito fixo de 4 cm fluidizado para 8 cm. A eluição foi promovida com NaCl 0,25M com 14 mL/minuto de vazão descendente e (mais) o material eluído foi fracionado com álcool etílico nas concentrações de 40-70%, 50-80% e 60-90% (v/v) a 20 e 30 ºC. A recuperação da atividade e o fator de purificação foram de 95% e 23 vezes, respectivamente, na primeira etapa. A melhor condição de fracionamento das enzimas foi apresentada a 50-80% de álcool e 20 ºC, e o fator de purificação ficou acima de 100 vezes. Resumo em inglês In the present work the purification of α and β-amylase enzymes of maize malt was carried out by expanded bed adsorption and ethanol fractionation downstream processes. 5 mL of 2% maize malt solution in 0.05 M phosphate buffer at pH was injected into a chromatographic column containing Amberlite 410 ion-exchange resin, on a 4 cm fixed bed fluidized to 8 cm. 0.25 M NaCl solution at 14 mL/ minuto of descending flux was used for promotion of the elution, the eluted (mais) matter was fractioned by 40-70, 50-80 and 60-90% ethyl alcohol concentration at 20 and 30 ºC. Activity recovery and purification factor were of 95% and 23 times, respectively, in the first step. 50-80% alcohol concentration at 20ºC was the best condition, in which a purification factor of more than 100 times was achieved.

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Purificação e caracterização de quitosana comercial/ Purification and characterization of commercial chitosan

Signini, Roberta; Campana Filho, Sérgio P.
1998-12-01

Resumo em português RESUMO: Procedimentos adequados para as purificações de quitosana comercial como cloridrato e na forma neutralizada são descritos. As amostras obtidas apresentam elevado grau de pureza e baixo teor de cinzas conforme verificado através de termogravimetria. As determinações de graus de acetilação por espectroscopia de ressonância magnética nuclear ( ou = 23,6%) e por titulações ((mais) img width=32 height=32 src="http://img/fbpe/po/v8n4/8292s1.gif" align=absmiddle > ou = 23,0%) apresentam muito boa concordância. O cloridrato de quitosana é solúvel em água, o que permite determinações de viscosidade intrínseca em solventes aquosos na ausência de excesso de ácido e facilita a comparação de quitosana com outros polieletrólitos quanto a estimativas de rigidez/flexibilidade. Resumo em inglês ABSTRACT: The procedures for the purification of a commercial chitosan as a hydrochloride and in the neutralized form are described. By applying these procedures, pure chitosans of low ash contents are obtained as determined by thermogravimetry. The agreement between the values of degrees of acetylation determined by conductimetric titrations ( or = 23,0%) and by ¹H nmr spectroscopy ((mais) width=32 height=32 src="http://img/fbpe/po/v8n4/8292s4.gif" align=absmiddle > or = 23,6%) is very good. Chitosan hydrochloride being soluble in pure water allows the determination of intrinsic viscosity in dilute acid-free aqueous solutions and makes easier the comparison of chitosan and other polyelectrolytes with respect to their chain rigidity/flexibility.

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Purificação do subproduto do processo de extração de esteviosídeo/ Purification of the by-product of the stevioside extraction process

Miotto, Denise Maria Malachini; Machado, Nádia Regina Camargo Fernandes
2004-03-01

Resumo em português O caramelo consiste no subproduto do processo de extração dos edulcorantes das folhas de Stevia rebaudiana Bertoni. Esse subproduto apresenta teores significativos dos edulcorantes esteviosídeo e rebaudiosídeo A não extraídos no processo e grande quantidade de compostos das folhas que lhe conferem, respectivamente, sabor doce e coloração escura. Desta forma, a retirada dos compostos das folhas presentes no caramelo torna possível seu reaproveitamento como edulcor (mais) ante. Portanto, o caramelo foi purificado por meio de adsorção em zeólitas modificadas, CaX e MgX. Foram realizados dois experimentos: um teste de saturação dos adsorventes para avaliar sua capacidade adsortiva e um teste de máxima clarificação para determinar a máxima purificação alcançada por adsorção em zeólitas. Os resultados mostraram que CaX é o adsorvente mais eficaz. As zeólitas podem ser reutilizadas por até duas vezes, necessitando regeneração em seguida. O teste de máxima clarificação apresentou soluções quase límpidas, com altos níveis de clarificação (80-90% dos compostos com maior afinidade), mas elevadas retenções dos edulcorantes (~70%), pois as zeólitas conseguem reter grande parte dos pigmentos da solução de caramelo, arrastando também esteviosídeo e rebaudiosídeo A, com baixo rendimento de recuperação dos edulcorantes, mas considerado satisfatório tendo em vista que o caramelo, apesar de rico em edulcorantes, não tem aplicação atualmente. Resumo em inglês Caramel is the by-product of the sweeteners extraction process of Stevia rebaudiana Bertoni leaves. This by-product shows significant contents of the sweeteners stevioside and rebaudioside A not extracted in the process and large quantity of leaf components, that give it, respectively, sweet flavor and dark color. Like this, the retreat of the leaf components of the caramel makes possible its reuse as a sweetener. Therefore, the caramel was purified by adsorption in modif (mais) ied zeolites, CaX and MgX. Two experiments were accomplished: a test of saturation of the adsorbents to evaluate its adsorption capacity and a test for maximum clarification to determine the maximum purification reached by adsorption in zeolites. Starting from the results, it was verified that CaX is a more effective adsorbent. Zeolites can be reused up to twice, needing regeneration soon after. The test for maximum clarification showed almost clear solutions, with high clarification levels (80-90% of the compounds with larger likeness), but with high retentions of the sweeteners (~70%), because zeolites retain most of the pigments of the caramel solution, but they also drag stevioside and rebaudioside A, resulting in a process with low yield in relation to the recovery of the sweeteners, but considered satisfactory, in view that caramel, in spite of being rich in sweeteners, has no use at present.

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Purificação de metabólitos fúngicos com efeitos tóxicos sobre Meloidogyne incognita/ Purification of fungal metabolites with toxic effects on Meloidogyne incognita

SILVA, GERALDO H.; OLIVEIRA, DENILSON F.; CAMPOS, VICENTE P.
2002-11-01

Resumo em português Objetivando o desenvolvimento de novas metodologias de controle de fitonematóides, este trabalho buscou purificar as substâncias nematicidas produzidas por Cunninghamella elegans, Fusarium sp., Paecilomyces lilacinus eP. variotii. Esses fungos foram cultivados em meio líquido Czapek-Dox durante 15 dias, a 25 ºC, em agitador orbital. Em seguida, filtraram-se as misturas, o que permitiu a obtenção de soluções que foram concentradas sob vácuo e submetidas à purific (mais) ação direcionada por testes in vitro com Meloidogyne incognita. Observou-se que os filtrados de P. lilacinus e P. variotii perdiam suas atividades nematicidas após a concentração sob vácuo, sugerindo que as substâncias ativas produzidas por esses fungos são consideravelmente voláteis. Para o filtrado de Fusarium sp., observou-se perda total da atividade contra M. incognita após fracionamento em coluna de sílica gel, indicando instabilidade da substância nematicida frente às condições empregadas.Do filtrado de C. elegans isolou-se uma substância que, em solução aquosa na concentração de 250 ppm, imobilizou 94% dos juvenis do segundo estádio de M. incognita expostos a tal solução durante 48 h. Resumo em inglês In a search for new molecules toxic to plant parasitic nematodes, procedures were set up to purify nematode toxic molecules produced by Cunninghamella elegans, Fusarium sp., Paecilomyces lilacinus and P. variotii. Those fungi were grown in Czapek-Dox liquid medium during 15 days, at 25 ºC, in an orbital shaker. After fungus mycelium removal by filtration, the solutions were concentrated under vacuum and submitted to purification, guided by in vitro assays with Meloidogyn (mais) e incognita juveniles. As a result, it was observed that P. lilacinus and P.variotii filtrates lost their activity after vacuum concentration, which suggests that the nematocides produced by those fungi are considerably volatile. In the case of Fusarium sp. filtrate, the active substance seems to be unstable, as the activity against M. incognita juveniles completely disappeared after chromatography in a silica gel column. The C. elegans filtrate rendered one isolated substance that immobilized 94% of the M. incognita juveniles exposed during 48 h to an aqueous solution of the substance at 250 ppm.

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Purificação parcial, por dois diferentes métodos cromatográficos, da lipase produzida por Rhizopus sp./ Partial purification of the lipase from Rhizopus sp by two different chromatographic methods

Koblitz, Maria Gabriela Bello; Pastore, Gláucia Maria
2004-06-01

Resumo em português Lipases, especialmente as de origem microbiana, são largamente utilizadas em processos e na obtenção de produtos para as indústrias química, cosmética, farmacêutica e alimentícia. A produção de enzimas de elevada pureza é importante, principalmente, do ponto de vista do controle dos processos (ausência de interferentes), porém as etapas necessárias à purificação, em geral, provocam perdas na atividade das enzimas e aumentam seu custo final. O objetivo des (mais) te trabalho foi propor a melhor metodologia de purificação para a lipase de Rhizopus sp. através do teste de dois diferentes métodos cromatográficos (troca iônica e interação hidrofóbica) e, ainda verificar o melhor planejamento estatístico para caracterização bioquímica da mesma. Foi possível purificar parcialmente a lipase de Rhizopus sp. com o uso de coluna de DEAE Sepharose (troca aniônica) e de FENIL Sepharose (interação hidrofóbica). A primeira, embora mais seletiva para a enzima em questão, parece provocar redução de sua atividade. A presença de maiores concentrações de íons Na+1 na fração purificada por FENIL Sepharose parece contribuir para o aumento de atividade da lipase. Embora os resultados obtidos por análise multivariável para determinação das características bioquímicas da lipase sejam compatíveis com a análise univariável, aquele planejamento não foi considerado indicado no presente caso. Resumo em inglês Lipases, especially of microbial origin, are widely applied in processes and in the production of insumesfor the chemical, cosmetic, pharmaceutical and food industries. To produce highly pure enzyme is important to process control (absence of interferentes). However the necessary stages to the purification, in general, cause losses of activity and increases enzyme final cost. The aim of this work was to consider the best methodology of purification for the Rhizopus sp. li (mais) pase through the test of two different chromatographic methods (ion exchange and hydrophobic interaction) and also to verify the best statistical design for the biochemical characterization of the enzyme. It was possible to partially purify the Rhizopus sp lipase applying a DEAE Sepharose (anionic exchange) column and a PHENYL Sepharose (hydrophobic interaction) column. The first, although more selective for the enzyme in study, seems to cause reduction of its activity. The presence of higher concentrations of Sodium ions in the PHENYL Sepharose fraction seems to contribute for an increased activity of the lipase. Although the results obtained through the factorial design for the biochemical characteristics of the lipase were compatible with the single variable analysis, that statistical approach should not be indicated in the present case.

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Purificação e caracterização de uma gentioexaose obtida de botriosferana por hidrólise ácida parcial/ Purification and characterization of a gentiohexaose obtained from botryosphaeran by partial acid hydrolysis

Silva, Iara Ribeiro; Monteiro, Nilson Kobori; Martinez, Paula Felippe; Izeli, Nataly Lino; Vasconcelos, Ana Flora Dalberto; Cardoso, Marilsa de Stefani; Silva, Maria de Lourdes Corradi da; Barbosa, Aneli de Melo; Dekker, Robert F. H.; Silva, Gil Valdo José da; Moraes, Luís Alberto Beraldo de
2008-01-01

Resumo em inglês A hexa-oligosaccharide was obtained by partial acid hydrolysis from botryosphaeran, an exopolysaccharide (EPS) β(1→3; 1→6)-D-glucan type, produced by the ascomyceteous fungus Botryosphaeria rhodina. The oligosaccharide was purified by gel filtration and charcoal-Celite column chromatography and the analysis was followed by HPAEC/PAD. The structure was determined by NMR spectroscopy and mass spectrometry, which showed that the oligosaccharide consists of six β-D-glucopiranosyl units O-6 substituted (gentiohexaose).

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Purificação parcial e caracterização bioquímica de lipase extracelular produzida por nova linhagem de Rhizopus sp./ Production, partial purification and biochemical characterization of a novell Rhizopus sp. strain lipase

Pastore, Gláucia M.; Costa, Vinicius dos Santos R. da; Koblitz, Maria Gabriela B.
2003-08-01

Resumo em português Lipases são enzimas capazes de catalizar uma grande gama de reações de interesse para as indústrias alimentícia, farmacêutica, química, entre outras. Esta versatilidade se deve também às diversas possibilidades de especificidade quanto ao substrato que lipases de diferentes fontes apresentam. Por este motivo, microrganismos produtores desta enzima vêm sendo procurados por grupos de pesquisa no mundo todo. Este trabalho apresenta as propriedades de uma lipase pro (mais) duzida por nova linhagem fúngica de Rhizopus sp. A enzima bruta apresentou condições ótimas de atividade a 40ºC em valores de pH entre 6,0 e 6,5. e manteve 50% ou mais de sua atividade quando aquecida por 60 minutos à temperaturas entre 40ºC e 55ºC. A atividade hidrolítica da lipase bruta foi maior quando o substrato testado foi a gordura de coco, demonstrando afinidade por ácidos graxos saturados de cadeia média. As frações I e II obtidas após purificação parcial da enzima apresentaram características bioquímicas semelhantes as do extrato bruto. Resumo em inglês Lipases are enzymes capable of catalyzing a great variety of reactions that are interesting to food, pharmaceutical, chemical, and other industries. This versatility is also due to the different substrate specificity possibilities that lipases from various sources. For this reason, lipase producing microorganisms are being searched by research groups around the world. This paper presents the properties of a extracellular lipase produced by a newly isolated strain of Rhizo (mais) pus sp. The crude enzyme showed optimal activity at 40ºC, between 6.0 and 6.5 pH values and kept 50% of it´s activity after treatment between 40ºC and 55ºC for 60 minutes. The hydrolytic activity of the crude extract was greater when coconut fat was used as substrate. This shows the affinity of the lipase to saturated medium chain fatty acids. The fractions I and II, that were obtained after the partial purification of the lipase, showed biochemical characteristics similar to the crude extract.

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Purificação e caracterização da beta-lapachona e estudo de estabilidade dos cristais em diferentes condições de armazenamento/ Purification and characterization of beta-lapachone and stability study of the crystals under different storing conditions

Alves, Geisiane Maria Cavalcante; Rolim, Larissa Araújo; Rolim Neto, Pedro José; Leite, Ana Cristina Lima; Brondani, Dalci José; Medeiros, Flávia Patrícia Morais de; Bieber, Lothar W.; Mendonça Junior, Francisco Jaime Bezerra
2008-01-01

Resumo em inglês The beta-lapachone is a product obtained from the Ipê Roxo tree [Tabebuia avellandae], which has proved its excellent antineoplasic potential acting through a particular mechanism of apoptosis against various cancer types. This study aims at determining the identity card of beta-lapachone by means of physico-chemical and pharmaco-technical characterization. A purifying process has been performed, as well as the isolation of a contaminant, its isomer alpha-lapachone. A st (mais) ability study was also performed, determining the ideal storing conditions for beta-lapachone, essential for the ongoing pre-formulation studies for obtaining the different classic pharmaceutical forms and modified release systems.

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Purificação e caracterização da quitinase de uva (Vitis vinífera L. cv Red Globe) para a produção de quitosana a partir de quitina de camarão/ Purification and characterization of grape (Vitis vinífera L. cv Red Globe) chitinases for production of chitosan from shrimp chitin

Gomes, Laidson Paes; Oliveira, Carlos Ivan Ribeiro de; Silva, Márcia Cristina da; Andrade, Cristina Tristão de; Del Aguila, Eduardo Mere; Silva, Joab Trajano; Paschoalin, Vânia M. Flosi
2010-01-01

Resumo em inglês Chitinase is produced by a wide variety of plants as a defense against peste attacks. In this study, grape chitinases were purified 16 times by fractionation in 80% ammonium sulfate followed by dialysis and filtration. Purified chitinases exhibited enzymatic activity toward chitin azure. The yield of purified chitinase was 229 mg/L with chitinase activity of 563 U/g. Chitinases had molecular masses of 24 and 30 kDa, as evaluated by SDS-PAGE 12.5%. Two pH optima were deter (mais) mined 3.0 and 6.0. The optimal temperature was 42 °C. Pre hydrolysis of crystalline shrimp chitin by chitinases caused in an increase in the deacetylation ratio triggered by chitin deacetylase producing chitooligosaccharides with DA (degree acetylation) of 58.8%.

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Purificação do flavonóide trans-tilirosídeo do extrato metanólico das folhas de Gochnatia barrosii Cabrera (asteraceae) e avaliação da sua atividade nematicida/ Purification of the flavonoid trans-tiliroside from the methanolic extract of Gochnatia barrosii Cabrera (Asteraceae) leaves and evaluation of the nematicidal activity

Santos Júnior, Helvécio Martins dos; Tirelli, Aline Auxiliadora; Carvalho, Hudson Wallace Pereira; Oliveira, Denilson Ferreira; Prado, Robson Taironi do; Campos, Vicente Paulo
2010-10-01

Resumo em português O fracionamento do extrato metanólico das folhas de Gochnatia barrosii Cabrera (Asteraceae) resultou no isolamento do flavonol glicosídico trans-tilirosídeo [kaempferol 3-O- -D-(6''-O-E-p-cumaroil)-glicopiranosídeo], que nunca tinha sido identificado na referida espécie vegetal. Em teste realizado in vitro, observou-se que tal substância a 500 μg/mL, não tem efeito sobre a mortalidade de juvenis do segundo estágio do nematóide Meloidogyne exigua Goeldi. Resumo em inglês Fractionation of the methanolic extract from Gochnatia barrosii Cabrera (Asteraceae) leaves resulted in the isolation of the flavonol glycoside trans-tiliroside [kaempferol 3-O- -D-(6''-O-E-p-coumaroyl)-glucopyranoside], which had never been found in such plant species. Such substance at 500 μg/mL caused no in vitro effect on the mortality of second-stage juveniles of the nematode Meloidogyne exigua Goeldi.

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Produção, purificação, clonagem e aplicação de enzimas líticas/ Production, purification, cloning and application of lytic enzymes

Fleuri, Luciana Francisco; Sato, Hélia Harumi
2005-10-01

Resumo em inglês Lytic enzymes such as beta-1,3 glucanases, proteases and chitinases are able to hydrolyse, respectively, beta-1,3 glucans, mannoproteins and chitin, as well as the cell walls of many yeast species. Lytic enzymes are useful in a great variety of applications including the preparation of protoplasts; the extraction of proteins, enzymes, pigments and functional carbohydrates; pre-treatment for the mechanical rupture of cells; degradation of residual yeast cell mass for the p (mais) reparation of animal feed; analysis of the yeast cell wall structure and composition; study of the yeast cell wall synthesis and the control of pathogenic fungi. This review presents the most important aspects with respect to lytic enzymes, especially their production, purification, cloning and application.

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Clonagem e purificação de fragmento da proteína capsidial de Banana streak OL virus/ Cloning and purification of Banana streak OL virus coat protein fragment

Lombardi, Ricardo; Harakava, Ricardo; Colariccio, Addolorata
2010-08-01

Resumo em português O objetivo deste trabalho foi clonar e induzir a expressão de fragmento da proteína capsidial de Banana streak OL virus (BSOLV-CP) em Escherichia coli, bem como purificar a proteína recombinante obtida. Empregou-se um par de iniciadores específicos para amplificar, em PCR, um fragmento de aproximadamente 390 pb, da região codificadora da porção central da BSOLV-CP. O fragmento obtido foi clonado em vetor pGEM-T Easy, subclonado em vetor pQE-30 e transformado em cé (mais) lulas de E. coli M15 (pREP4) por choque térmico. A expressão da proteína foi induzida por tiogalactopiranosídeo de isopropila (IPTG), e a proteína recombinante BSOLV-rcCP de 14 kDa foi detectada em Western blot e Dot blot. A expressão da proteína BSOLV-rcCP abre novas possibilidades para a obtenção de antígenos para a produção de antissoros contra o BSOLV. Resumo em inglês The objective of this work was to clone and to induce the expression of a fragment of Banana streak OL virus coat protein (BSOLV-CP) in Escherichia coli, as well as to purify the obtained recombinant protein. Two specific primers were used for the PCR-amplification of approximately 390-bp fragment of the codifying region of the BSOLV-CP central portion. The obtained fragment was cloned in pGEM-T Easy vector, subcloned in pQE-30 expression vector and transformed into compe (mais) tent E. coli M15 (pREP4) cells by heat shock. The protein expression was induced by isopropyl thiogalactopyranoside (IPTG) and the 14-kDa BSOLV-rcCP recombinant protein was detected in Western and Dot blotting. The expression of the BSOLV-rcCP protein enables new approaches to the obtention of antigens for the antisera production against BSOLV.

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Produção, purificação e aumento da performance de ciclodextrina glicosiltransferases para produção de ciclodextrinas/ Production, purification and performance improve of cyclodextrin glycosyl transferases to cyclodextrins production

Moriwaki, Cristiane; Mazzer, Cassiana; Pazzetto, Rúbia; Matioli, Graciette
2009-01-01

Resumo em inglês Biospecific affinity chromatography was used to purify three cyclodextrin glycosyl transferases (CGTases) obtained from microorganisms isolated of soil. The cyclodextrins (CDs) production by CGTases was evaluated using starches from different sources. CDs were measured through the Complexation Theory and by HPLC. CGTase from Bacillus firmus strain 7B showed the best production (30 mmol/L of β-CD and 4.3 mmol/L of γ-CD), and its cultivation conditions were optimi (mais) zed. The maximum enzymatic activity was achieved using lung peptone, soluble starch and agitation speed of 160 rpm. Studied CGTases were shown quite interesting for the industrial production of CDs.

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Extração, purificação e caracterização físico-química da proteína verde fluorescente recombinante (GFPuv) expressa em Escherichia coli/ Extraction, purification and physical-chemical characterization of recombinant green fluorescent protein (GFPuv) expressed in Escherichia coli cells

Chiarini, Eb; Penna, Thereza Christina Vessoni
2003-12-01

Resumo em português O aumento do uso da proteína verde fluorescente (GFPuv) como ferramenta de pesquisas biotecnológicas requer um estudo mais cuidadoso das propriedades bioquímicas e físicas da molécula de GFPuv. Este trabalho teve como objetivo a aplicação de métodos físicos e químicos para o isolamento, a extração da GFPuv de células de Escherichia coli DH5-±, purificação da proteína, e o estudo da estabilidade desta em diferentes valores de pH. Células de E. coli expres (mais) sando GFPuv foram submetidas a quatro ciclos sucessivos de congelamento e descongelamento intercalados por sonicação (CDS), para promover a permeação seletiva da GFPuv. Os permeados foram submetidos à extração por partição em três fases (TPP) e posterior purificação por eluição da proteína em coluna cromatográfica de interação hidrofóbica (HIC).Obteve-se rendimento semelhante em GFPuv no 1º ciclo de permeação seletiva (CDS) e por extração (TPP) associada à purificação (HIC) para os quais impurezas não foram visualizadas por eletroforese. As estruturas moleculares da GFPuv extraída e purificada mostraram-se inalteradas em valores de pH entre 6,0 e 9,8, e foram confirmadas nos espectros de emissão e de excitação. Resumo em inglês The recombinant green fluorescent protein (GFPuv) has been used as a marker in several research fields. The purpose of the present work was to evaluate the influence of the selective physical permeation procedure applied to the cells of Escherichia coli for the extraction of GFPuv in relation to the chemical procedures of extraction and purification. Transformed cells (0.92-1.44 mg/mL) of E. coli DH5-a expressing GFPuv were submitted to four cycles (1º, 2º, 3º, 4º) of (mais) freezing (-20 ºC/ 0.83 ºC/ min/thawing interlaid by sonication (3 pulses/6 s/25 vibrations). The intracellular permeate with GFPuv in buffer solution (Tris-HCl 25 mM pH 8.0 + b-mercaptoethanol (1 mM) + PMSF (0.1 mM)) was submitted to the three-phase partitioning (TPP) method and subsequent purification through hydrophobic interaction chromatography column (HIC). The results showed that the first selective permeation cycle applied to the cells was more efficient in the release of the protein from the cell fragments without subsequent extraction and purification in relation to the second, third and fourth permeation procedures. The permeated, extracted and purified GFPuv showed similarity to the standard GFPuv characteristics of fluorescence, stability and solubility.

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Extração e purificação de clorofila a, da alga Spirulina maxima: um experimento para os cursos de química/ Extraction and purification of chlorophyll a isolated from Spirulina maxima: an experiment for the chemistry courses

Maestrin, Ana Paula Jecks; Neri, Cláudio Roberto; Oliveira, Kleber Thiago de; Serra, Osvaldo Antonio; Iamamoto, Yassuko
2009-01-01

Resumo em inglês This work describes a simple and economical experiment for the extraction and purification of chlorophyll a from Spirulina maxima. Extraction and purification of natural compounds can be considered one of the most illustrative experiments that can be performed in Organic Chemistry courses. Particularly, the chromatography of dyes and pigments allows students to have a better comprehension of the chromatography separations. These compounds represent an important class of o (mais) rganic pigments applied in pharmaceutical, cosmetic, detergent compositions, and various other fields and can be extracted from plants and algae. To extract, separate and purify chlorophyll a from associated pigments such as xanthophylls, carotenes, and pheophytins, very costly processes are reported. The present approach is perfectly adequate for use in Chemistry experiments for undergraduate students.

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Extração e purificação de fármacos anti-inflamatórios não esteroidais ciclo-oxigenase-2 seletivos/ Extraction and purification of selectives ciclooxigenase-2 nonsteroidal antiinflammatory drugs

Moreira, Tailane Sant'Anna; Cid, Yara Peluso; Pierre, Maria Bernadete Riemma; Sousa, Valeria Pereira de; Kummerle, Arthur Eugen; Fraga, Carlos Alberto Manssour
2009-01-01

Resumo em inglês Celecoxib (CB) and lumiracoxib (LM) are potent COX-2 inhibitors widely marketed for the treatment of rheumatoid arthritis and osteoarthritis. Nevertheless, it is difficult to obtain because it are protected under patents. The aim of this work was to develop an extraction method of drugs, CB and LM, in order to obtain the drug with a purity degree appropriated for use in research projects. The developed method showed to be effective of both drugs, becoming interesting due (mais) to its low cost, easy and speed of execution, application to different dosage forms (capsules and tablets) and drugs with different physicochemical properties.

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Análise da influência do tratamento de purificação no comportamento de inchamento de argilas organofílicas em meios não aquosos/ Analysis of the influence of the purification treatment on the swelling behavior in non-aqueous media of organophilic clays

Ferreira, H. S.; Menezes, R. R.; Ferreira, H. S.; Martins, A. B.; Neves, G. A.; Ferreira, H. C.
2008-03-01

Resumo em português As argilas bentonitas possuem importantes funções em fluidos de perfuração não aquosos. No entanto, impurezas presentes na argila e a escolha inadequada do sal quaternário utilizado no seu processo de organofilização podem comprometer a compatibilidade do sistema argila-fluido. Assim, este trabalho tem por objetivo analisar a influência do tratamento de purificação e dos sais quaternários de amônio no comportamento de inchamento de argilas organofílicas em m (mais) eios não aquosos. A argila bentonita foi purificada através de procedimento de sedimentação e as argilas organofílicas foram preparadas utilizando-se cloreto de alquil benzil amônio (Dodigen), cloreto de diestearil dimetil amônio (Praepagen), cloreto de cetil trimetil amônio (Genamim) e brometo de cetil trimetil amônio (Cetremide). As argilas organofilizadas foram caracterizadas por difração de raios X e determinação da distribuição do tamanho de partículas e, em seguida, submetidas ao ensaio de inchamento de Foster em éster, parafina e óleo diesel. Os resultados mostram que o processo de purificação foi eficiente na redução de impurezas presentes na bentonita e que a argila organofílica purificada tratada com Praepagen e Genamim apresenta valores de inchamento de Foster em éster, óleo diesel e parafina superiores aos obtidos com argilas organofílicas sem purificação (natural) e comercial. Resumo em inglês Bentonite clays play important roles in oil based drilling fluids. However, clay impurities and the wrong choose of the quaternary ammonium salt used in the organophilization process can lead to organoclay-fluid low interactions. Thus, this work has as aim study the influence of the purification process and quaternary ammonium salts on the swelling behavior in oil media of organophilic clays. The bentonite clay was purified using a sedimentation process and organoclay wer (mais) e prepared using alkyl dimethyl benzyl ammonium chloride (Dodigen), distearyl dimethyl ammonium chloride (Praepagen), cetyl trimethyl ammonium chloride (Genamin) and cetyl trimethyl ammonium bromide (Cetremide). The organoclays were characterized by X-ray diffraction and particle size distribution determination. The Foster swelling tests were conducted using ester, parafine and diesel oil. The results showed that the purification process reduced the amount of bentonite clay impurities. The purified organoclay treated with Praepagen and Genamim have Foster swelling values in ester, diesel oil and parafine higher than that of the natural organoclay and commercial clay.

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Utilização de argilas para purificação de biodiesel/ Use of clays for purification of biodiesel

Paula, Andréia Juliana Almeida de; Krügel, Marlus; Miranda, João Paulo; Rossi, Luciano Fernando dos Santos; Costa Neto, Pedro Ramos da
2011-01-01

Resumo em inglês This work describes the results of the purification of methyl biodiesel, obtained by oxidized soybean oil, using different methods. After the ester separation from the glycerin by decanting, the ester was purified each time with distillation, washing with water and adsorption with bauxite, bentonite and attapulgite. The removal of total contamination, unsaponifiable material, concentrations of free glycerin and soap were analyzed in the purified ester phase. The best resu (mais) lt of purification was observed with the use of bentonite and bauxite, in the removal of soap and free glycerin respectively.

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Avaliação de filtros domésticos comerciais para purificação de águas e retenção de contaminantes inorgânicos/ Evaluation of domestic commercial filters to waters purification and retention of inorganic contaminates

Pedro, Nilva Aparecida Ressinetti; Brígido, Berenice Mandel; Badolato, Maria Irene Cibela; Antunes, José Leopoldo Ferreira; Oliveira, Elisabeth de
1997-04-01

Resumo em inglês Twenty domestic commercial filters, in order to determine the percentual retention of color, turbidity, dry residue, bicarbonates, carbonates, total hardness, nitrogens, iron, chlorides, fluorides, and residual chlorine (parameters of food legislation) and sulphides in thirteen water samples proceeding from springs, wells, rivers, lakes, drinking patterns and standards, before and after purification were evaluated. The results showed that purifiers presented adequate rete (mais) ntion for nitrates (74.8 ± 16.2 %) and residual chlorine (74.0 ± 11.2) and medium retention for sulphides (61.7 ± 11.3); while porcelain plus activated carbon filters presented adequate retention for color (90.0 ± 19.7), turbidity (76.4 ± 18.4) and iron (83.5 ± 15.1). Therefore the retention of carbonates, bicarbonates, total hardness, chlorides, dry residue, fluorides, ammonium nitrogens and nitrites was less than 10%, and the values of pH didn't show significant variation, for all the filters studied.

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Extratos vegetais com propriedades nematicidas e purificação do princípio ativo do extrato de Leucaena leucocephala/ Nematocidal plant extracts and purification of active ingredients of Leucaena leucocephala extract

Cunha, Flávia R.; Oliveira, Denilson F.; Campos, Vicente P.
2003-08-01

Resumo em português Inicialmente buscou-se identificar plantas com extratos metanólicos ativos in vitro contra o nematóide Panagrellus redivivus. Das 24 espécies vegetais estudadas, constatou-se que os melhores resultados foram obtidos com Leucaena leucocephala, que causou mortalidade de 93% dos indivíduos expostos ao seu extrato por 24 h. Em seguida, submeteu-se o referido extrato a fracionamento direcionado pelos testes in vitro com P. redivivus, o que possibilitou isolar uma substância nematicida que, segundo análises preliminares, correspondia a um alcalóide. Resumo em inglês Initially this work was aimed to identify plant methanolic extracts toxic in vitro to the nematode Panagrellus redivivus. Among 24 plant species studied, Leucaena leucocephala afforded the best results, as 93% of the nematodes were dead after exposure to its extract during 24 h. Thus, such extract was submitted to a purification process guided by in vitro assays with P. redivivus. As a result, one substance active against such nematode was isolated. According to preliminary analysis, that seems to be an alkaloid.

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Utilização de diferentes tipos de policloretos de alumínio para purificação de hidrolisado de bagaço de cana através da técnica de coagulação e floculação/ Use of different kinds of aluminum polychloride in the sugarcane bagasse hydrolyzate purification through coagulation and flocculation technics

Noronha, Leonardo de Lima; Fonseca, Christiane Reis; Silva, Cássia Cavalcanti da; Silva, Messias Borges; Faria, Luís Fernando Figueiredo
2010-01-01

Resumo em inglês In order to investigate the action of the flocculating agents Panfloc and Panclar a full factorial design 2³ and a Central Composite design 2² were carried out. The control variables were the flocculant concentration, pH and temperature. The response variables were phenolic compounds reduction and spectral area reduction. The best conditions of treatment was hydrolyzate at pH 9 for both coagulants, but the use of Panfloc was more effective in the phenolic compounds reduction (73.9%) and spectral area reduction (65.8%).

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Aplicação de cromatografia centrífuga de contra-corrente na purificação de ácido ursólico das folhas de Eugenia brasiliensis Lam./ Aplication of counter-current chromatography in the purification of ursolic acid from leavesof Eugenia brasiliensis Lam.

Frighetto, N.; Welendorf, R.M.; Silva, A.M.P.; Nakamura, M.J.; Siani, A.C.
2005-12-01

Resumo em português Os ácidos triterpênicos são metabólitos comuns na família Myrtaceae, especialmente no gênero Eugenia. O ácido ursólico foi descrito como um dos principais constituintes, nas folhas de Eugenia brasiliensis, coletada no Sudoeste do Brasil. Uma partição prévia, por solventes, do extrato etanólico ou do extrato clorofórmico de E. brasiliensis, seguida por uma purificação por cromatografia de contra-corrente de alta velocidade (CCCAV), conduziu ao isolamento do (mais) ácido ursólico com alto grau de pureza (> 97%). Esta substância, também foi isolada por cromatografia convencional de coluna aberta (rendimento de 0.22% a partir do extrato etanólico), e caracterizada por 13C-RMN, GC-EM e co-injeção com padrão comercial em CG-DIC, na forma do éster metílico. A técnica de CCCAV, usualmente usada para triterpenos glicosilados, foi aqui aplicada para a aglicona. As fases móvel e estacionária, no experimento de CCCAV, foram geradas pela mistura de n-hexano : acetato de etila : metanol : água, na proporção 10:5:2,5:1. A seleção do sistema de solventes (fases estacionária e móvel) foi determinada pela máxima distribuição eqüitativa do ácido ursólico em ambas as fases, medida por densitometria e monitorada por cromatografia em camada delgada, CCD, usando-se ácido ursólico comercial como referência. Resumo em inglês Triterpene acids are common metabolites in the Myrtaceae family, especially in the genus Eugenia. Ursolic acid was found in Eugenia brasiliensis collected in Southeastern Brazil. A previous solvent partition of the ethanol or chloroform extracts of the leavesof E. brasiliensis, followed by rapid high-speed counter-current chromatography (HSCCC) afforded ursolic acid in high purity (> 97%). This compound was also purified apart by conventional column chromatography (yield (mais) of 0.22% from the ethanolic extract) and characterized by 13C-NMR, GC-MS and co-injection of its methyl ester with standards in GC-FID. The HSCCC technique, usually applied to triterpene glycosides, was here applied successfully to an aglycone, to which examples are rarely described. The mobile and stationary phase for the HSCCC experiment were derived from the two-phase solvent system composed by n-hexane : ethyl acetate : methanol : water in the proportion of 10:5:2.5:1. The choice of the developing solvent system for optimum HSCCC separation was determined by TLC coupled to densitometric measurements of ursolic acid in both stationary and mobile phase, generated by the upper and lower layer of the system above. Commercial ursolic acid was used as standard.

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Hemaglutinina de folhas de mandioca (Manihot esculenta Crantz): purificação parcial e toxicidade/ Hemaglutinin of cassava leaves (Manihot esculenta Crantz): partial purification and toxicity

Pereira, Chrystian Araujo; Corrêa, Angelita Duarte; Santos, Custódio Donizete dos; Abreu, Celeste Maria Patto de; Sousa, Raimundo Vicente de; Magalhães, Marcelo Murad
2008-06-01

Resumo em português Um dos componentes da multimistura para suplementação alimentar de populações carentes é a farinha de folhas de mandioca (FFM) que possui elevado conteúdo em proteínas, vitaminas e minerais. Todavia, as folhas de mandioca também apresentam substâncias antinutritivas e/ou tóxicas, como cianeto, polifenóis, nitrato, ácido oxálico, hemaglutinina, saponinas e inibidores de tripsina. Objetivou-se neste trabalho extrair as proteínas da FFM, purificando-as em colun (mais) a cromatográfica e determinar sua atividade hemaglutinante e toxicidade. Foram testadas várias estratégias de extração e precipitação das proteínas, sendo que o maior teor protéico e atividade hemaglutinante foi obtido na extração com água destilada na proporção 1:20 (p/v) seguida da precipitação com sulfato de amônio a 80% de saturação. As proteínas precipitadas foram purificadas em coluna Q-Sepharose. Das quatro frações obtidas na purificação (I, II, III e IV), a I e a II apresentaram maiores atividades hemaglutinantes. As mesmas frações foram injetadas via intraperitoneal em camundongos com doses de 2mg (fração I), 3mg (fração II), 54mg (fração III) e 52mg (fração IV) para cada animal com 20g de peso médio, não sendo observadas mortes ou quaisquer efeitos adversos após 120h. Resumo em inglês One of the components of the multimixture to the feed supplementation of low-income populations is cassava leaf flour (FFM), with high content of proteins, vitamins and minerals. However, cassava leaves also present substance regarded as antinutritive and/or toxic, such as cyanide, polyphenols, nitrate, oxalic acid, hemagglutinin, saponins and trypsin inhibitors. The aim of this work was to extract proteins from FFM, purifying them in chromatographic column and determine (mais) their hemagglutinating activity and toxicity. A number of strategies of extraction and precipitation of proteins were tested; the highest protein content and hemagglutinating activity were obtained in the extraction with distilled water at the 1:20 ratio (p/v) followed by the precipitation with ammonium sulfate at 80% of saturation. The precipitated proteins were purified in Q-Sepharose Fast Flow column. Out of the four purification fractions (I, II, III e IV), the I and II activities presented higher specific activity. The same fractions were injected intraperitoneal via in mice of 20g weight with doses of 2mg (fraction I), 3mg (fraction II), 54mg (fraction III) and 52mg (fraction IV). No deaths or any adverse effects was observed after 120h.

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Sistemas aquosos bifásicos: fundamentos e aplicações para partição/purificação de proteínas/ Aqueous two-phase systems: fundamentals and applications for partitioning/purification of proteins

Silva, Luis Henrique Mendes da; Loh, Watson
2006-12-01

Resumo em inglês By the year 2005 the world biochemical market will reach an estimated $ 100 billion and separation processes are a vital link between lab discoveries and the fulfillment of this commercialization potential. The practical application of aqueous two-phase systems (ATPS) to extraction processes has been exploited for several years for the recovery of biological products. Unfortunately, this has not resulted in an extensive presence of the technique in commercial processes. I (mais) n this paper a critical overview of the fundamental thermodynamic properties related to formation of aqueous two-phase systems and their application to extraction and purification of bioparticules is presented.

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Micelas reversas de lecitina de soja: uma alternativa para purificação de proteínas/ Soybean lecithin reversed micelles: an alternative for protein purification

Hasmann, Francislene Andréia; Cortez, Daniela Vieira; Gurpilhares, Daniela de Borba; Roberto, Inês Conceição; Pessoa Júnior, Adalberto
2007-09-01

Resumo em português No presente trabalho, estudaram-se os efeitos de diversos parâmetros sobre a extração das proteínas caseína e albumina de soro bovino empregando micelas reversas de lecitina de soja. Independentemente da condição empregada, a extração da albumina apresentou baixo rendimento (variando de 0% a 4%, aproximadamente), resultado de um significativo efeito de exclusão por tamanho. Com relação à caseína, o rendimento da extração aumentou 23 vezes com o aumento do (mais) tempo de agitação, ou seja, com o maior tempo de contato entre a proteína e o sistema de micelas reversas. A adição de 1-hexanol ao sistema, usado como co-solvente, foi efetiva, aumentando a solubilização da caseína em 36%, sendo os rendimentos da extração desta proteína muito influenciados pelo pH. Os valores máximos de eficiência obtidos foram de 20% em pH 7,9, 80% em pH 5,4 e 100% em pH 5,0 (pH próximo ao pI da proteína). Resumo em inglês In this work, the effect of different parameters for extraction of casein and bovine serum albumin (BSA) were studied. Such proteins were extracted by soybean lecithin reversed micelles. BSA extraction was not effective, independent of the extraction conditions employed. Owing to its molar mass, the effect of exclusion by size was clearly observed. The casein extraction yield increased about 23-fold as a function of agitation time. In other words, the increase occurred by (mais) using higher contact time between protein and reversed micelles. The use of hexanol as a co-solvent was effective, and increased casein extraction to 36%. The extraction values were strongly influenced by pH, and the high extraction yield was obtained under the following conditions: 20% at pH 7.9, 80% at pH 5.4 e 100% at pH 5.0 (close to casein isoelectrical point).

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Uma rota alternativa para a síntese de PPh2Si(CH3)3 segundo Appel; preparação e purificação dePPh2H (Ph = fenila)/ An alternative way to the Appel's synthesis of PPh2Si(CH3)3; preparation and purification of PPh2H (Ph = phenyl)

Oliveira, Gelson Manzoni de
2001-02-01

Resumo em inglês The unexpected low yield in the Appel's synthesis of PPh2Si(CH3)3 can be attributed to the presence of phenyllithium and its interfering reactions. The method was carried out with hydrolysis of the products formed by the reaction of PPh3 with metallic lithium, phenyllithium and lithiumdiphenylphosphide. PPh2Si(CH3)3 was obtained by subsequent reaction of the resulting diphenylphosphin with elemental lithium and ClSi(CH3)3.

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Transplante isogênico de ilhotas de Langerhans no fígado de ratos: metodologia para separação e purificação das ilhotas de Langerhans/ Isogenic islet transplantation on the rat liver: Method for isolation and purification of the rat islets

CHAIB, Eleazar; PAPALOIS, Apostolos; BRONS, Ingrid G. M.; CALNE, Roy Y.
2000-01-01

Resumo em português A maior indicação do transplante de pâncreas ou de ilhotas de Langerhans é o diabetes mellitus do tipo I. O processo deve suprir as necessidades de insulina mantendo os níveis glicêmicos dentro da normalidade. Estudou-se o transplante isogênico de ilhotas de Langerhans no fígado de ratos WAG-RT1u. Com o método de separação e purificação das ilhotas de Langerhans obteve-se 2.834 ± 551,64 ilhotas com pureza de 83 ± 2,45%. O transplante de 2.834 ± 551,64 ilho (mais) tas de Langerhans no fígado destes animais, normalizou a glicemia que chegou a 35 mmol/L após indução do diabetes pela estreptozotocina, ficando em 9,62 ± 2,65 mmol/L nos primeiros 10 dias após o enxerto e 7,43 ± 0,27 mmol/L nos dias subseqüentes (P Resumo em inglês The major indication for pancreas or islet transplantation is diabetes mellitus type I. This process has to supply the insulin necessity keeping glucose under control. We have studied isogenic islet transplantation on the rat (WAG-RT1u) liver. The method of isolation and purification of the islets obtained 2.834 ± 551,64 islets with purity of 83 ± 2,45%. Diabetes was induced by streptozotocin and seric glucose prior transplantation was 35 mmol/L. The islet transplantati (mais) on of 2.834 ± 551,64 islets in the rat liver has normalized glucose test from 9,62 ± 2,65 mmol/L 10 days after transplantation to 7,43 ± 0,27 mmol/L later in the follow-up (P

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Desenvolvimento de um spot test para o monitoramento da atividade da peroxidase em um procedimento de purificação/ Development of a spot test for peroxidase activity monitoring during a purification procedure

Zeraik, Ana Eliza; Souza, Fernanda Sant'Ana de; Fatibello-Filho, Orlando; Leite, Oldair D.
2008-01-01

Resumo em inglês In this work we describe both a chromatographic purification procedure and a spot test for the enzyme peroxidase (POD: EC 1.11.1.7). The enzyme was obtained from crude extracts of sweet potatoes and the chromatographic enzyme purification procedure resulted in several fractions. Therefore a simple, fast and economic spot test for monitoring peroxidase during the purification procedure was developed. The spot test is based on the reaction of hydrogen peroxide and guaiacol, which is catalyzed by the presence of peroxidase yielding the colored tetraguaiacol.

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Purification and partial characterisation of a lectin from the red marine alga Vidalia obtusiloba C. Agardh/ Purificação e caracterização parcial de uma lectina da alga marinha vermelha Vidalia obtusiloba C. Agardh

Melo, Fábio R.; Benevides, Norma M.B.; Pereira, Maria G.; Holanda, Márjory L.; Mendes, Francisca N.P.; Oliveira, Stélio R.M.; Freitas, Ana L.P.; Silva, Luana M.C.M.
2004-06-01

Resumo em português A lectina da alga marinha vermelha Vidalia obtusiloba foi purificada através da combinação de precipitação com sulfato de amônio, cromatografia de troca iônica em DEAE-celulose e cromatografia de afinidade em goma de guar reticulada. A lectina preferencialmente aglutinou eritrócitos do grupo humano O, nativos e tratados com bromelaina. A atividade hemaglutinante revelou que a lectina era dependente de cátions divalentes (Ca++ ou Mn++) e inibida por N-acetil-galac (mais) tosamina, D-galactosamina, alfa-lactose and D-galactose e pela glicoproteína mucina de estômago de porco. A massa molecular da lectina, estimada por filtração em gel, foi de 78,9 kDa, enquanto por SDS-PAGE, em presença de beta-mercaptoetanol, a lectina exibiu duas subunidades protéicas diferentes com Mr de 59,6 e 15,2 kDa, sugerindo que a lectina é uma proteína dimérica. Focalização isoelétrica revelou a presença de uma proteína ácida simples, com um ponto isoelétrico entre 4 e 5. A lectina purificada exibiu um conteúdo de carboidrato de 43,2% e uma predominância dos aminoácidos Asp/Asn, Glu/Gln e Leu. A energia de ativação (deltaG') para a desnaturação da lectina foi calculada como sendo 25,4 kcalm.mol-1 a 90 ºC. Ensaios imunoquímicos usando um anti-soro de coelho produzido contra a lectina purificada de V. obtusiloba mostraram que foi possível detectar a presença da lectina em diferentes etapas do processo de purificação. Western blotting de géis de SDS-PAGE mostraram imunocoramento apenas da maior das subunidades da lectina. Resumo em inglês The lectin of the red marine alga Vidalia obtusiloba was purified by a combination of ammonium sulphate precipitation, ion-exchange chromatography on DEAE-cellulose and affinity chromatography on cross-linked guar gum. The lectin preferentially agglutinated native and bromelain-treated human group O erythrocytes. The haemagglutinating activity revealed that the lectin was dependent on divalent cations (Ca++ or Mn++) and was shown to be inhibited by N-acetyl-galactosamine, (mais) D-galactosamine, alpha-lactose and D-galactose and by the glycoprotein porcine stomach mucin. The molecular mass of the lectin, estimated by gel filtration, was 78.9 kDa while by SDS-PAGE, in the presence of beta-mercaptoethanol, the lectin exhibited two different protein subunits with Mr of 59.6 and 15.2 kDa, suggesting that the lectin is a dimeric protein. Isoelectric focusing revealed the presence of a simple acidic protein with an isoelectric point between 4 and 5. The purified lectin showed a carbohydrate content of 43.2% and a predominance of the amino acids Asp/Asn, Glu/Gln and Leu. The energy of activation (deltaG') for the denaturation of the lectin was estimated to be 25.4 kcal.mol-1 at 90 ºC. Immunochemical assays using a rabbit antiserum raised against the purified lectin of V. obtusiloba showed that it was possible to detect the presence of the lectin at different steps of the purification process. Western blotting of SDS-PAGE gels showed immunostaining of only the larger of the lectin subunits.

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A união da alma e do intelecto na filosofia de Plotino

Brandão, Bernardo G. S. L.
2007-12-01

Resumo em português Um dos aspectos mais importantes do sistema ético de Plotino é sua doutrina da união da alma e do Intelecto: essa união é o objetivo das práticas de purificação, o topo da prática dialética e a base da experiência mística. Mas, sendo inferior ao Intelecto, como é possível à alma alcançar essa união? Este artigo é uma tentativa de buscar a explicação plotiniana desse problema. Resumo em inglês One of the most important features of Plotinus' ethical system is his doctrine of the union between soul and Intellect: this union is the goal of purification procedures, the summit of dialectic practice and the basis of mystical experience. But, being inferior to Intellect, how is it possible for the soul to achieve this union? This paper is an attempt at searching for the plotinian explanation for this problem.

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Isolamento de oligossacarídeos de xiloglucano de dicotiledôneas através de hidrólise enzimática e cromatografia de exclusão molecular/ Isolation of xyloglucan oligossacharides from dicots using enzymatic hydrolyses and gel permeation chromatography

Oliveira Junior, Clovis José Fernandes de; Braga, Marcia Regina; Buckeridge, Marcos Silveira
2006-09-01

Resumo em português Oligossacarídeos derivados do xiloglucano, um polissacarídeo constituinte da parede celular vegetal, vêm sendo considerados como moléculas capazes de sinalizar e/ou regular eventos relacionados ao crescimento e à expansão celular. A purificação desses oligossacarídeos é imprescindível para a realização de ensaios relativos à sua atividade biológica. Neste trabalho, xiloglucanos foram extraídos a partir de sementes de copaíba (Copaifera langsdorffii Desf.) (mais) e suspensões celulares de feijão (Phaseolus vulgaris L.) e hidrolisados com celulase (endo-glucanase) para obtenção dos oligossacarídeos de xiloglucano, os OXGs. Os resultados obtidos mostram que a técnica de cromatografia dupla em gel de exclusão molecular foi eficiente para purificação dos oligossacarídeos, apresentando OXGs dos tipos XLLG e XXXG com grau de pureza próximo a 90%, e do tipo XXFG próximo de 80%. Resumo em inglês Oligosaccharides from xyloglucan, a plant cell wall polysaccharide, have been considered as signaling molecules capable of regulating cell growth and expansion. The purification of such oligosaccharides is an essential requirement to evaluate their biological activity. In the present work, xyloglucans extracted from seeds of copaiba (Copaifera langsdorffii Desf.) and bean cell suspension cultures (Phaseolus vulgaris L.) were hydrolyzed with cellulase (endo-glucanase) to o (mais) btain xyloglucan oligosaccharides (OXGs). The OXGs were separated by gel permeation chromatography and analysed by high performance anion exchange chromatography with pulse amperometric detector (HPAEC/PAD). The results indicate that these procedures were suitable for purification of OXGs since XLLG and XXXG were 90% and XXFG 80% pure, showing the expected biological activity.

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Estudo de alguns esfeitos na precipitação de partículas esféricas de sílica via microemulsão inversa/ Studies of some effects on the preparation of spherical silica particles from reverse microemulsion

Flor, Juliana; Davolos, Marian Rosaly; Jafelicci Júnior, Miguel
2002-01-01

Resumo em português Partículas esféricas de sílica foram obtidas via microemulsão inversa em sistema AOT / Heptano / H2O, utilizando-se soluções de silicato de sódio como precursor. Variações de condições experimentais durante a precipitação levam à mudanças no tamanho e na forma das partículas. O objetivo deste trabalho é otimizar a obtenção de partículas de sílica com homogeneidade de forma e tamanho, variando-se a ordem de adição dos reagentes, a concentração da s (mais) olução de silicato de sódio, a razão água/surfactante (W), a ordem de mistura dos reagentes e a purificação do produto obtido. As micrografias evidenciaram que para se obter partículas esféricas, com faixa estreita de tamanho, utiliza-se duas microemulsões inversas a partir das soluções de ácido nítrico e de silicato de sódio, sendo que a mistura destas deve ser feita adicionando-se a microemulsão contendo o silicato de sódio sobre a microemulsão contendo o ácido nítrico. A relação silicato de sódio:água mais adequada de para os objetivos do trabalho é de 1:10. A purificação mais eficiente é aquela feita em duas etapas, com etanol e com água quentes. A partir dos resultados obtidos, pode-se verificar também que quanto maior o W maior será o tamanho médio de partícula. Resumo em inglês Silica spherical particles were prepared in reverse microemulsion from sodium silicate solution precursor. Particle shape and size changes were investigated in function of reactants addition order, sodium silicate solution concentration and water to surfactant ratio (W) and product separation and purification. This paper reports on the uniform spherical silica particles preparation in function of the mentioned different experimental conditions. Scanning electron micrograp (mais) hs show uniform spherical silica particle obtained from the mixture of two reverse microemulsion: microemulsion A with soluble sodium silicate was added to a microemulsion B with nitric acid solution. Concentrated sodium silicate solution was diluted to 1:10 (silicate:water) ratio. Separation and purification was carried out in two steps with hot ethanol and water. The average particle size increases as W increases.

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Isolamento biomonitorado de alcalóides tóxicos de Prosopis juliflora (algaroba)

Tabosa, I.M.; Quintans-Júnior, L.J.; Pamplona, F.V.; Almeida, R.N.; Cunha, E.V.L. da; Silva, M.S. da; Souza, J.C. de A.; Barbosa Filho, J.M.
2000-01-01

Resumo em português Uma investigação fitoquímica das vagens de Prosopis juliflora cultivada na região semi-árida do Estado da Paraíba e monitorada através de testes farmacológicos levou ao isolamento, purificação e identificação do alcalóide principal juliprosopina. A presença de outros constituintes químicos em mistura, tais como juliprosina e juliprosineno, foi verificada na fração dos alcalóides totais através de uma análise do espectro de RMN de 13C. Este trabalho sug (mais) ere que a toxicidade, observada em animais de laboratório, está quimicamente relacionada com os alcalóides piperidínicos presentes nas vagens desta leguminosa. Resumo em inglês A phytochemical investigation of the pods of Prosopis juliflora cultivated in the semi arid region of the State of Paraiba, monitored by pharmacological tests, led to the isolation, purification and identification of its main alkaloid - juliprosopine. The presence of other compounds such as juliprosine and juliprosinene, was observed through analysis of 13C NMR. This work suggests that the toxic activity, observed in laboratory animals, is chemicaly related with the piperidine alkaloids present in the pods of this Leguminosae.

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Métodos e estratégias em proteômica e suas aplicações na área vegetal/ Methods and strategies in proteomics and their applications in plants

Salvato, Fernanda; Carvalho, Mayra Costa da Cruz Gallo de
2010-03-01

Resumo em português A implementação da espectrometria de massa (MS) para as análises de peptídeos (MS) e de aminoácidos (MS em tandem ou MS/MS) tornou possível a identificação de centenas de proteínas em experimentos únicos. Uma grande variedade de estratégias está disponível atualmente para o fracionamento e a purificação de amostras, a identificação de proteínas, a quantificação, a análise de modificações pós-traducionais (MPT's) e os estudos de interação. Dessa f (mais) orma, a proteômica abre novas perspectivas na biologia de plantas com ênfase nos estudos de variabilidade genética, estresses fisiológicos e desenvolvimento de plantas. Resumo em inglês The implementation of mass spectrometry (MS) for peptides (MS) and amino acids (tandem MS or MS/MS) analysis allowed the identification of hundreds of proteins in single experiments. A number of different strategies are current available for sample fractioning and purification, proteins identification, quantification, post-translational modifications (PTM) and interaction analyses. In this way, the proteomics open up new perspectives in plant biology with emphasis on studies of genetic variability, physiological stresses and plant development.

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Obtenção e caracterização de anticorpo monoclonal murino anti-fator VIII da coagulação sangüínea/ Attainment and characterization of murine monoclonal anti-factor VIII antibodies

Rossi-Ferreira, Rosana; Deffune, Elenice; Thomazini-Santos, Izolete; Machado, Paulo E. A.
2006-06-01

Resumo em português Entre os avanços da engenharia celular e biotecnologia nas últimas décadas, destaca-se a produção de anticorpos monoclonais murinos (AcMm) utilizados no aprimoramento diagnóstico nas rotinas laboratoriais. A produção de fator VIII de alta pureza sempre foi o desejo e a preocupação das indústrias de hemoderivados para tratamento de pacientes portadores de hemofilia A, porém este produto inexiste no Brasil, sendo necessária sua obtenção no mercado internacion (mais) al a custos elevados. O trabalho tem por objetivo a produção de AcMm anti-fator VIII humano (FVIII H) através da expansão dos clones e caracterização imunoquímica do anticorpo. Camundongos Balb/c foram imunizados com FVIII H purificado como também proveniente de crioprecipitado e as células esplênicas dos animais foram fusionadas com células mielomatosas murinas segundo o método descrito por Kohler e Milstein para produção de híbridos em cultura. Foram testados 1.983 híbridos dos quais 105 foram submetidos à clonagem. Destes, 39 obtiveram monoclonalidade e 7 destes clones foram caracterizados através de técnicas de immunoblotting. Foram submetidas à purificação por cromatografia três imunoglobulinas de diferentes classes pertencentes aos clones LAMB1-10A1A4, LAMB1-17A1A1 e LAMB1-24A2A1. A imunoglobulina purificada pertencente ao clone LAMB1-10A1A4 foi adsorvida em coluna de imunoafinidade para purificação de concentrado de FVIII proveniente de crioprecipitado plasmático. Resumo em inglês Among the advances in cellular engineering and biotechnology over the last decades, the production of murine monoclonal antibodies (AcMm), used to improve laboratory diagnoses, stands out. The production of very pure factor VIII has always been a concern of suppliers of blood products to treat patients with hemophilia A and this product is still not produced in Brazil. Hence, it can only be attained on the international market at a high cost. The aim of this work was to p (mais) roduce AcMm anti-factor VIII human (FVIIIh) by expanding clones and characterizing the antibodies by immunochemistry. Balb/c mice were immunized with FVIII both purified and from cryoprecipitation and the splenic cells of the animals were fused with myelomatous murine cells according to the method described by Kohler and Milstein to produce hybrids in a culture. A total of 1983 hybrids were tested and 105 were selected for cloning. Of these, 39 developed monoclonality and 7 of these clones were characterized through immunoblotting techniques. Three immunoglobulins from different classes, LAMB1-10A1A4, LAMB1-17A1A1 and LAMB1-24A2A1, were submitted to chromatography for purification. The purified immunoglobulin from the LAMB1-10A1A4 clone was adsorbed in the immunoaffinity column to purify the factor VIII concentrate coming from the plasmatic cryoprecipitate.

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EXTRAÇÃO DE DNA GENÔMICO DE Passiflora spp. PARA ANÁLISES PCR-RAPD/ GENOMIC DNA EXTRACTION FROM Passiflora spp. FOR PCR-RAPD ANALYSES

MOLINARI, HUGO BRUNO; CROCHEMORE, MARIA LÚCIA
2001-08-01

Resumo em português A identificação e caracterização da diversidade genética de plantas por meio de técnicas moleculares envolvem a avaliação de vários indivíduos, necessitando-se, portanto, de métodos rápidos e precisos de extração do DNA. O co-isolamento de polissacarídeos, fenóis e compostos secundários é o principal problema encontrado no isolamento e purificação de DNA vegetal. Folhas das diversas espécies de Passiflora possuem níveis variados desses compostos que (mais) podem comprometer este procedimento. O presente estudo foi realizado com o objetivo de avaliar a qualidade e quantidade de DNA de folhas de variedades de Passiflora spp., utilizando-se de três métodos de extração. Os três métodos forneceram DNA em qualidade e quantidade suficientes para a realização da técnica PCR-RAPD. Resumo em inglês The identification and characterization of the genetic diversity of plants by molecular techniques involve the evaluation of several individuals, therefore requiring fast and precise extraction methods of DNA. Co-isolation of polysaccharides, phenols and secondary products is the main problem during isolation and purification of plant DNA. The leaves of several species of Passiflora have different levels of those compounds that can compromise this procedure. The objective (mais) of this study was to evaluate the quality and amount of DNA extracted from Passiflora spp. varieties using three extraction methods. The three methods supplied DNA in quality and quantity sufficient amount for PCR-RAPD analyses.

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Ocorrência do fungo entomopatogênico Isaria javanica (Frieder. & Bally) Samson & Hywell-Jones (Fungi, Sordariomycetes) em lagartas de Lonomia obliqua Walker (Lepidoptera, Saturniidae, Hemileucinae)/ Occurrence of the entomopathogenic fungus Isaria javanica (Frieder. & Bally) Samson & Hywell-Jones (Fungi, Sordariomycetes) infecting Lonomia obliqua Walker (Lepidoptera, Saturniidae, Hemileucinae) caterpillars

Specht, Alexandre; Azevedo, João Lúcio; Lima, Elza Áurea de Luna Alves; Boldo, Juliano Tomazzoni; Martins, Mayra Kassawara; Lorini, Lisete Maria; Barros, Neiva Monteiro
2009-01-01

Resumo em português Este fungo foi isolado pela primeira vez de lagartas de L. obliqua de uma agregação em plátano (Platanus acerifolia (Aiton) Wild - Platanaceae), em Bento Gonçalves, RS, Brasil. Após isolamento, purificação e caracterização, realizou-se um teste de patogenicidade com lagartas sadias de L. obliqua para corroborar, sua infectividade pelo postulado de Koch. Constatou-se correspondência morfológica e molecular entre o inóculo e o reisolado, comprovando sua patogenicidade a L. obliqua. Resumo em inglês It is recorded for the first time the occurrence of the entomopathogenic fungus Isaria javanica (Frieder. & Bally) Samson & Hywell-Jones (Fungi: Sordariomycetes) infecting Lonomia obliqua Walker (Lepidoptera: Saturniidae: Hemileucinae) caterpillars. This fungus was isolated from L. obliqua individuals collected from Platanus acerifolia (Aiton) Wild- Platanaceae in Rio Grande do Sul state, Brazil. After isolation, purification and characterization, fungal conidia were inoc (mais) ulated on healthy L. obliqua caterpillars and from dead caterpillars the fungal isolates were again obtained. New isolates and the original isolate did not differ when compared by morphological and molecular tests.

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Desenvolvimento de nanocompósitos polipropileno/argila bentonita brasileira: I tratamento da argila e influência de compatibilizantes polares nas propriedades mecânicas/ Development of polypropylene/brazilian bentonite clay nanocomposites: I treatment of clay and the influence of the compatibilizers on the mechanical properties

Rodrigues, André W.; Brasileiro, Maria I.; Araújo, Williane D.; Araújo, Edcleide M.; Neves, Gelmires A.; Melo, Tomás J. A. de
2007-09-01

Resumo em português Os nanocompósitos de polipropileno/ bentonita e polipropileno/compatibilizante/bentonita foram preparados empregando uma extrusora dupla rosca acoplada a um Reômetro de Torque Haake. A argila bentonita natural proveniente do Município de Boa Vista - PB passou por um processo de purificação para em seguida ser aditivada com carbonato de sódio e posteriormente tratadas com o sal quaternário de amônia, visando a obter argila organofílica. As argilas foram caracteriz (mais) adas por granulometria por difração de laser, análise química, espectroscopia de infravermelho e DR-X. Os resultados de granulometria e análise química mostraram que o processo de purificação foi eficiente em retirar as frações mais grosseiras mantendo as frações finas bem como na eliminação de minerais acessórios. Os resultados de FTIR e DR-X mostraram que o sal quaternário de amônio foi incorporado à argila confirmando a organofilização. Posteriormente a argila bentonita organofílica foi incorporada ao polipropileno (PP) e PP/compatibilizante (PP-g-AA e PP-g-MA são polipropilenos enxertados com ácido acrílico e anidrido maleico, respectivamente). A formação dos nanocompósitos bem como as propriedades das misturas PP/ORG (ORG - argila organofílica) e PP/compatibilizante/ORG foram verificadas por DR-X, MET e propriedades mecânicas. As análises de DR-X, MET mostraram que pode ter ocorrido a formação de nanocompósitos intercalado devido aos deslocamentos dos picos para ângulos de 2q inferiores. Os resultados das propriedades mecânicas mostraram que houve uma melhoria em algumas propriedades mecânicas. Resumo em inglês In this work, polypropylene/bentonite and polypropylene/compatibilizer/bentonite nanocomposites were prepared by the melt intercalation method, using a counter-rotating intermeshing twin-screw extruder attached to a Haake System 90 Rheometer. Initially the natural bentonite clay, from Boa Vista - PB, was subjected to a purification process and then treated with sodium carbonate. Further, it was treated with ammonium quaternary salt to obtain an organoclay. The clays were (mais) characterized, according to granulometric, by laser diffraction, chemical analysis, infrared spectroscopy - FTIR, and X ray diffraction - XRD. The granulometric and chemical analysis results showed that the purification process was effective for removing the coarse fractions and eliminating some accessory minerals. FTIR and XRD results showed that the ammonium quaternary salt was incorporated to the clay, confirming the organophilization. In the subsequent stage of this work, the bentonite organoclay was incorporated to both polypropylene (PP) and PP/compatibilizer (PPgAA and PPgMA are polypropylenes grafting acrylic acid and maleic anhydride, respectively). The formation of nanocomposites as well as the properties of PP/ORG (ORG - organoclay) and PP/compatibilizer/ORG mixtures were analyzed by XRD, MET and mechanical properties. XRD and MET results showed that the formation of interlayer/flocculated nanocomposites has occurred for PP/compatibilizer/ORG systems. The mechanical properties results showed that some mechanical properties (final elongation and toughness) have been considerably improved.

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Alotransplante de ilhotas de Langerhans no fígado de ratos submetidos a manipulação tímica com células dendríticas/ Alogenic islet transplantation on the rat liver after alogenic dendritic cells injection in the thymus

Chaib, Eleazar; Papalois, Apostolos; Brons, Ingrid G. M.; Calne, Roy Y.
2005-03-01

Resumo em português RACIONAL: A maior indicação do transplante de pâncreas ou de ilhotas de Langerhans é o diabetes mellitus do tipo I. O processo deve suprir as necessidades de insulina, mantendo os níveis glicêmicos dentro da normalidade. OBJETIVOS: Estudou-se o alotransplante de ilhotas de Langerhans no fígado de ratos Lewis, tendo como doadores de ilhotas ratos Wistar. No grupo controle (n = 8) injetava-se, no timo, solução de Hanks e no grupo de estudo (n = 9), células dendrí (mais) ticas. MATERIAL E MÉTODOS: No grupo controle com o método de separação e purificação das ilhotas de Langerhans obteve-se 3637 ± 783,3 ilhotas com pureza de 85% ± 3,52%. No grupo de estudo obteve-se 3268 ± 378 ilhotas de Langerhans com pureza de 87% ± 4,47% e com o método de isolamento e purificação das células dendríticas do baço obteve-se 3,34 x 105 ± 1,16 células. RESULTADOS: No grupo controle, o transplante de 3637 ± 783,3 ilhotas de Langerhans no fígado, normalizou a glicemia que chegou a 7,21 ± 0,57 mmol/L no segundo pós-operatório (diferença significativa com relação ao pré-operatório). Do pós-operatório imediato até o 8º pós-operatório a glicemia não se elevou significativamente, porém a partir do 10º pós-operatório houve aumento significativo deste parâmetro, o que pode ser compatível com rejeição aguda do enxerto. No grupo de estudo, o transplante de 3258 ± 378 ilhotas de Langerhans no fígado, normalizou a glicemia, que chegou a 9,3 ± 2,85 mmol/L no segundo pós-operatório (diferença significativa com relação ao pré-operatório). Do 4º ao 10º pós-operatório, a glicemia elevou-se significativamente, o que pode ser compatível com quadro de rejeição aguda do enxerto e certamente precoce. CONCLUSÃO: A inoculação de células alogênicas apresentadoras de antígenos (células dendríticas) no timo de ratos imunossuprimidos e diabéticos, antes do alotransplante de ilhotas de Langerhans no fígado, ao contrário de inibir a reação do receptor contra o enxerto, prolongando a sobrevida média das ilhotas e, possivelmente, levando ao estado de tolerância imunológica, induziu ao processo de rejeição aguda precoce. Resumo em inglês BACKGROUND: The major indication for pancreas or islet transplantation is diabetes mellitus tipe I. This process has to suply the insulin necessity keeping glucose under control. AIM: We studied alogenic islet transplantation on the rat liver, Wistar (RT1u) to Lewis (RT1¹) as a recipient. Control group (n = 8) and dendritic cell group (n = 9) respectively with injection of Hanks solution and dendritic cells in the thymus before islet transplantation. MATERIAL AND METHODS (mais) : With the method of isolation and purification of the islets we obtained both in the control group 3637 ± 783,3 islets with purity of 85 ± 3,52% and dendritic cell group 3268 ± 378 islets with purity of 87 ± 4,47%. The dendritic cells were retrieved from the spleen and we obtained 3,34 x 105±1,16 cells. Diabetes was induced by i.v. streptozotocin. RESULTS: Control group the transplantation of 3637 ± 783,3 islets in the rat liver normalized glucose test, 7,21 ± 0,57 mmol/L in the second post-operative day. Acute rejection came in the 10 postoperative day with significantly increase of glucose test. Dendritic cell group, the transplantation of 3258 ± 378 islets in the rat liver, normalized the glucose test was 9,3 ± 2,85 mmoL/L in the second postoperative day. From the 4th postoperative day to 10th postoperative day the glucose test increase significantly showing an early acute rejection. CONCLUSION: The injection of dendritic cells in the thymus before alogenic islet transplantation in the rat liver lead to an early acute rejection.

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Alotransplante de ilhotas de Langerhans no fígado de ratos submetidos a manipulação tímica com células não-parenquimatosas/ Allogenic islet transplantation on the rat liver after allogenic nonparenchymal cells injection in the thymus

Chaib, Eleazar; Papalois, Apostolos; Brons, Ingrid G. M.; Calne, Roy Y.
2006-12-01

Resumo em português RACIONAL: A maior indicação do transplante de pâncreas ou de ilhotas de Langerhans é o diabetes mellitus do tipo I. O processo deve suprir as necessidades de insulina, mantendo os níveis glicêmicos dentro da normalidade OBJETIVOS: Estudar o alotransplante de ilhotas de Langerhans no fígado de ratos Lewis (RT1¹), tendo como doadores de ilhotas ratos Wistar (RT1u). No grupo controle (n = 8) injetava-se, no timo, solução de Hanks e no grupo de estudo(n = 8), célul (mais) as não-parenquimatosas hepáticas MATERIAL E MÉTODOS: No grupo controle com o método de separação e purificação das ilhotas de Langerhans obteve-se 3.637 ± 783,3 ilhotas com pureza de 85 ± 3,52%. No grupo de estudo obteve-se 3.270 ± 770 ilhotas de Langerhans com pureza de 84,25 ± 2,76% e com o método de isolamento e purificação das células não-parenquimatosas hepáticas obteve-se 2 x 10(6) células RESULTADOS: No grupo controle, o transplante de 3.637 ± 783,3 ilhotas de Langerhans no fígado, quase normalizou a glicemia que chegou a 17,95 ± 5,33 mmol/L no 2º dia do pós-operatório (diferença significante com relação ao pré-operatório). Do pós-operatório imediato até o 8º dia do pós-operatório a glicemia não se elevou significativamente, porém a partir do 10º dia do pós-operatório houve aumento significativo deste parâmetro, o que pode ser compatível com rejeição aguda do enxerto. No grupo de estudo, o transplante de 3.270 ± 770 ilhotas de Langerhans no fígado, quase normalizou a glicemia que chegou a 17,95 ± 5,33 mmol/L no 2º dias do pós-operatório (diferença significante com relação ao pré-operatório). Do 4º ao 10º pós-operatório a glicemia elevou-se significativamente, o que pode ser compatível com quadro de rejeição aguda do enxerto e certamente precoce CONCLUSÃO: A inoculação de células alogênicas apresentadoras de antígenos (células não-parenquimatosas hepáticas) no timo de ratos imunossuprimidos e diabéticos, antes do alotransplante de ilhotas de Langerhans no fígado, ao contrário de inibir a reação do receptor contra o enxerto, prolongando a sobrevida média das ilhotas e, possivelmente, levando ao estado de tolerância imunológica, induziu ao processo de rejeição aguda precoce. Resumo em inglês BACKGROUD: The major indication for pancreas or islet transplantation is diabetes mellitus type I. This process has to supply the insulin necessity keeping glucose under control AIM: We studied allogenic islet transplantation on the rat liver, Wistar (RT1u) to Lewis (RT1¹) as a recipient. Control group (n = 8) and nonparenchymal cell group (n = 8) respectively with injection of Hanks solution and nonparenchymal cells in the thymus before islet transplantation. MATERIAL A (mais) ND METHODS: With the method of isolation and purification of the islets we obtained both in the control group 3.637 ± 783,3 islets with purity of 85 ± 3,52% and nonparenchymal cell group 3.270 ± 770 islets with purity of 84,25 ± 2,76%. The nonparenchymal cells were retrieved from the liver and we obtained 2 x 106 cells. Diabetes was induced by i.v. streptozotocin RESULTS: Control group the transplantation of 3.637 ± 783,3 islets in the rat liver normalized glucose test, 7,21 ± 0,57 mmol/L in the 2nd postoperative day. Acute rejection came in the 6th postoperative day with significantly increase of glucose test in nonparenchymal cell group, the transplantation of 3.270 ± 770 islets in the rat liver, almost normalized the glucose test was 17,95 ± 5,33 mmol/L in the 2nd postoperative day. From the 4th postoperative day to 10th postoperative day. The glucose test increase significantly showing an early acute rejection CONCLUSION: The injection of nonparenchymal cells in the thymus before allogenic islet transplantation in the rat liver lead to an early acute rejection.

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Conjugação e validação de controle isotípico IgG1-FITC para uso em citometria de fluxo/ Conjugation and validation of IgG1-FITC isotype control to be used in flow cytometry

Golim, Márjorie A.; Deffune, Elenice; Rossi-Ferreira, Rosana; Oliveira, Ana Paula E.; Padovani, Carlos Roberto; Machado, Paulo Eduardo A.
2007-12-01

Resumo em português Em meados da década de 50 iniciou-se o desenvolvimento da citometria de fluxo, tecnologia que permite verificar características físico-químicas de células ou partículas suspensas em meio fluido. Esta tecnologia utiliza anticorpos monoclonais marcados com fluorocromos como ferramenta de investigação em diversas análises e necessita de controles isotípicos para definição da região negativa (background). Estes controles são constituídos por imunoglobulinas de (mais) mesmo isotipo e fluorocromo dos anticorpos testes, sendo o isotiocianato de fluoresceína (FITC) o marcador fluorescente mais utilizado na conjugação de anticorpos. Os controles isotípicos têm como função definir a fluorescência inespecífica (células negativas) e as regiões fluorescentes (células positivas). No presente estudo foi selecionado anticorpo monoclonal murino (AcMm) dirigido contra antígeno eritrocitário canino, produzido no Laboratório de Anticorpos Monoclonais do Hemocentro de Botucatu, o qual reage positivamente com hemácias de cães, mas nunca com leucócitos humanos, tendo, portanto, potencial utilidade como controle negativo em citometria de fluxo. A purificação do AcMm da subclasse IgG1 foi feita por cromatografia de afinidade em Proteína-A Sepharose, e o controle da purificação realizado por eletroforese em géis de ágarose e poliacrilamida (SDS-PAGE). A imunoglobulina purificada foi conjugada ao FITC e filtrado em coluna de Sephadex G-25 para separação das proteínas marcadas e não-marcadas. O AcMm conjugado foi testado contra hemácias de cães, e o êxito da conjugação comprovado por testes de fluorescência, sendo a mediana de positividade de 94,70. Frente a leucócitos humanos a mediana de positividade foi 0,03 contra 0,50 dos reagentes comerciais. Os testes estatísticos não-paramétricos de Wilcoxon e correlação de Spearman comprovaram a eficiência e validam o controle isotípico produzido em comparação aos reagentes comerciais testados. Resumo em inglês It was during the 1950's that the development of flow cytometry started, technology that allow to measure physiochemical characteristics of cells or suspended particles in fluid. This technology uses monoclonal antibodies labeled by fluorochromes as investigation tool in several analysis and needs isotype controls to define the negative region (background). These controls are constituted by immunoglobulins of the same isotype and fluorochrome from test antibodies, being f (mais) luorescein isothiocyanate (FITC) the most fluorescent marker used in antibody conjugations. The isotype controls have the function to define the unspecific fluorescence (negative cells) and the fluorescent regions (positive cells). In this study was selected monoclonal antibody (mAb) against canine erythrocyte antigen, produced in the Monoclonal Antibodies Laboratory - Blood Center of Botucatu, which reacts positively with dog red blood cells, but never with human leukocytes, having therefore, utility potential as negative control in flow cytometry. The purification mAb of IgG1 subclass was made by affinity chromatography in Sepharose Protein-A and the purification control was performed by electrophoresis in ágarose and polyacrylamide gels (SDS-PAGE). The purified immunoglobulin was conjugated to FITC and after was filtered in Sephadex G25 column to separation of labeled and unlabeled proteins. The conjugated mAb was tested against dog red blood cells and the conjugation success was verified by fluorescence tests, being the median positivity of 94.70. To the human leucocytes the positivity median was 0.03 against 0.50 of the commercial reagents. The nonparametric statistical tests of Wilcoxon and the correlation Spearman showed the efficiency and validate the isotype control produced in relation to the tested commercial reagents.

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Aplicação de técnicas cromatográficas e espectrométricas como ferramentas de auxílio na identificação de componentes de óleos voláteis/ Use of chromatographic and spectrometric techniques to help the identification of volatile compounds

Brochini, Claudia B.; Lago, João Henrique G.
2007-06-01

Resumo em português A metodologia usual aplicada para análise de óleos voláteis, tais como CG, CG-EM, Índice de Kovats e, em alguns casos, sistemas computacionais especialistas, não permitem a identificação de compostos desconhecidos os quais devem ser isolados para que tenham suas estruturas moleculares elucidadas. Essa limitação é ainda maior quando tais óleos apresentam potencial biológico uma vez que existe grande dificuldade no isolamento das substâncias ativas, as quais de (mais) vem ser obtidas em seu estado puro para avaliação da atividade. Assim, este trabalho descreve uma metodologia de separação não usual (cromatografia rápida em sílica e sílica impregnada com AgNO3) associada a técnicas espectrométricas (EM, RMN de ¹H e RMN de 13C) as quais permitiram a purificação e caracterização de compostos de óleos voláteis contendo estruturas ainda não conhecidas e/ou biologicamente ativas. Resumo em inglês The usual techniques applied for analyzing the chemical constitution of volatile oils, such as GC, GC-MS, Kovats Index and, in some cases, specialist computational systems, do not allow the identification of the unknown or biologically active compounds which must be isolated in order to have their molecular structures elucidated. This problem is higher if the oils present biological potential, which will induce in the isolation of active substances, once these substances (mais) must be obtained in their pure state to activity evaluation. Thus, this paper describes an unusual chromatographic separation (flash chromatography on SiO2 and SiO2/AgNO3) associated to spectrometric techniques (MS, ¹H NMR and 13C NMR), which lead to the purification and structural elucidation of the unpublished and/or biologically active constituents from volatile oils.

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A memória na mistagogia joãocruciana/ The memory on mistagogy of John of the Cross

Barreira, Marcelo Martins
2007-01-01

Resumo em português A importância da memória na Subida do Monte Carmelo advém de sua capacidade de manter as experiências agradáveis ou desagradáveis, permitindo-lhes que se aprofundem e se ramifiquem na alma, com graves repercussões na vida espiritual. A memória busca, no arquivo de imagens e vivências, dados que alimentem a agressividade, a cobiça, a paixão, soberba e vingança; com o agravante de que não tem limites de duração, o que lhe permite realizar continuamente esta s (mais) ua ação. A alma, quando retém e apreende preferencialmente a lembrança de amarguras passadas, acaba não se abrindo para a ação divina que ora se lhe manifesta. Por isso, para que participe diretamente da comunhão divina, da mesma forma que as demais potências espirituais, a memória deve esvaziar-se. A purificação e o esvaziamento da memória não prescrevem o esquecimento do que se conhece ou se lembra, apenas manifestam a necessidade de ela ficar livre de considerações particulares numa esperança que a purifica a fim de deixá-la livre para receber a comunicação divina. Resumo em inglês The importance of the memory in the Ascent of Mount Carmel come of its capacity to keep the pleasant or disagreeable experiences, allowing them that they are gone deep and if ramifies in the soul, with serious repercussions in the spiritual life. The memory searchs, in the archive of images and experiences, data that feeds the aggressiveness, covet it, the passion, magnificent and revenge; with the aggravating one of that it does not have duration limits, what it allows i (mais) t to carry through this continuously its action. The soul, when it retain and it apprehends in preferential way the souvenir of passed a bitterness, finishes if not opening for the divine action that however manifest in it.Therefore, so that it participates directly of the divine communion, as the others spirituals powers, the memory must be emptied. The purification and the empty of the memory not to prescribe the forgetfulness of what it is known or remember, it only shows the necessity of it to be free of particular deliberation in a hope that the purify in order to leave it free to receive the divine communication.

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Avaliação agronômica de linhagens selecionadas de guandu (Cajanus cajan (L.) Millsp)/ Agronomic evaluation of selected pigeon-pea lines (Cajanus cajan (L.) Millsp)

Godoy, Rodolfo; Batista, Luiz Alberto Rocha; Santos, Patrícia Menezes; Souza, Francisco Humberto Dübbern de
2005-02-01

Resumo em português Com o objetivo de reavaliar agronomicamente 17 linhagens de guandu, originárias de acessos anteriormente selecionados por diversas características de interesse agronômico, foram instalados experimentos em cinco locais do Estado de São Paulo. A confirmação dessas características foi necessária, uma vez que as amostras de sementes dos acessos originais apresentavam mistura mecânica e segregação, razão pela qual, após serem selecionados, os acessos passaram por (mais) processo de purificação em condições controladas de polinização. Nesses experimentos, as linhagens foram submetidas a cortes para avaliação da produção de forragem, ocasião em que foram determinados o número de plantas na área útil da parcela e a altura média dessas plantas. Foi também determinado o teor de proteína bruta e de taninos de amostras da forragem produzida. Entre as linhagens testadas, g58-95 e g127-97 confirmaram ter plantas de baixa estatura, g3-94, g167-97 e g29b-94 confirmaram oferecer boas produções de forragem e g146-97 destacou-se quanto à produção inicial de matéria seca. Resumo em inglês With the purpose of re-evaluating seventeen pigeon-pea lines originated from accessions previously selected for favorable agronomic characteristics, experiments were installed in five locations of the State of São Paulo. The confirmation of those characteristics was necessary because the original accessions presented various degrees of mechanical mixtures and segregation and were submitted to purification process in pollination controlled conditions. In those trials, the (mais) lines were cut in several occasions to evaluate forage yield. Each time, it was determined the number of plants in each parcel and its average height. Also it was determined their crude protein and tannins contents. Among the tested lines, g58-95 e g127-97 confirmed to have low plants, g94, g167-97 and g29b-94, confirmed to offer good forage yields, while line g146-97 presented good initial forage yields.

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Atividade antileishmania do extrato hidroalcoólico e de frações obtidas de folhas de Piper regnellii (Miq.) C. DC. var. pallescens (C. DC.) Yunck/ Antileishmanial activity of hydroalcoholic extract and fractions obtained from leaves of Piper regnellii (Miq.) C. DC. var. pallescens (C. DC.)

Nakamura, Celso V.; Santos, Adriana O.; Vendrametto, Michele C.; Luize, Patrícia S.; Dias Filho, Benedito P.; Cortez, Diógenes A.G.; Ueda-Nakamura, Tânia
2006-03-01

Resumo em português A atividade biológica do extrato bruto e as várias frações obtidas de folhas de Piper regnellii (Miq.) C. DC. var. pallescens (C. DC.) Yunck foi avaliada em Leishmania amazonensis. Este estudo incluiu o processo de extração e o fracionamento biomonitorado pelo método de cromatografia de adsorção. Um aumento progressivo no efeito antileishmania foi observado durante o processo de purificação. O extrato hidroalcoólico solúvel em água (EBA) apresentou concentra (mais) ção inibitória 50% (IC50) igual a 167 µg/mL enquanto o extrato hidroalcoólico solúvel em acetato de etila (EBAcOEt) mostrou um IC50 de 30 mg/mL sobre o crescimento de formas promastigotas após 48 h de cultivo. A fração hexano (FHex) apresentou uma atividade antileishmania maior que o EBAcOEt com IC50 de 21,5 µg/mL. Análises de citotoxicidade indicaram que as concentrações tóxicas do EBA, EBAcOEt e das frações foram maiores para macrófagos J774G8 do que para os protozoários. Resumo em inglês Biological activity of the crude extract and several fractions obtained from Piper regnellii var. pallescens was assessed on Leishmania amazonensis. This study included the extraction process and bioassay-guided fractionation by the adsorption chromatography method. A progressive increase in the antileishmanial effect was observed in the course of the purification process. The hydroalcoholic extract water soluble (EBA) had a 50% inhibitory concentration (IC50) at 167 µg/ (mais) mL whereas the hydroalcoholic extract acetate soluble (EBAcOEt) showed an IC50 of 30 µg/mL against the growth of promastigote forms after 48 h of culturing. The hexan fraction (FHex) showed an antileishmanial activity greater than EBAcOEt with IC50 at 21.5 µg/mL. Analysis of cytotoxicity indicated that the toxic concentrations of the EBA, EBAcOEt, and fractions were higher for J774G8 macrophages than for the protozoans.

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A deficiência mental na concepção da liga brasileira de higiene mental/ Mental disability in the conception of brazilian league of mental hygiene

Souza, Milena Luckesi de; Boarini, Maria Lucia
2008-08-01

Resumo em português O objetivo deste texto é investigar a concepção e as propostas de atendimento escolar destinado aos deficientes mentais segundo o ideário higienista e eugenista difundido pela Liga Brasileira de Higiene Mental (LBHM). Para tanto, utilizamos como fonte primária de estudo os Arquivos Brasileiros de Higiene Mental (ABHM), periódico publicado entre 1925 e 1947. Verificamos que a LBHM expressa diferentes opiniões quanto à concepção e às medidas de intervenção prop (mais) ostas para os deficientes mentais. De um lado, propõe a higienização da população, a ser alcançada com a formação de hábitos sadios através da educação escolar e especificamente da educação higiênica, com a possível adaptação do deficiente ao meio social. De outro, defende uma posição eugênica radical, que apregoa a purificação da raça, a esterilização e exclusão dos ditos degenerados (leprosos, loucos, idiotas, epilépticos, cancerosos, nefrolíticos, tuberculosos, prostitutas, vagabundos e deficientes mentais). Resumo em inglês The aim of this study is to investigate the conception and proposals of schooling for individuals with mental disability according to the hygienic and eugenic ideology divulged by the Brazilian League for Mental Hygiene (Liga Brasileira de Higiene Mental, LBHM). To this end, we used as a primary source the Brazilian Archives of Mental Hygiene (Arquivos Brasileiros de Higiene Mental, ABHM), a newspaper published from 1925 to 1947. We concluded that there were various opini (mais) ons in the LBHM about the conception and proposed intervention methods for individuals with mental disability. On one side, there were proposals of population cleansing to be achieved through healthy habits taught in schools, mainly hygienic education, with possible adaptation of the disabled individual to society. On the other hand, there was an extreme eugenic proposal that emphasized race purification, sterilization and exclusion of so-called degenerate individuals (lepers, lunatics, idiots, epileptics, cancer patients, nephrolytics, tuberculosis patients, prostitutes, vagrants and individuals with mental retardation).

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Atividade antiproliferativa dos extratos e da fração orgânica obtidos das folhas de Virola sebifera Aubl. (Myristicaceae)/ Antiproliferative activity of extracts and fractions from Virola sebifera Aubl. leaves (Myristicaceae)

Denny, Carina; Zacharias, Marcela E.; Kohn, Luciana K.; Foglio, Mary Ann; Carvalho, João Ernesto de
2007-12-01

Resumo em português As cascas de Virola sebifera (Myristicaceae) são utilizadas por populações indígenas amazônicas em preparações alucinógenas, nas quais foram encontrados alcalóides como a dimetiltriptamina e seus derivados. Considerando a enorme importância dos alcalóides isolados de plantas na terapêutica do câncer e a presença desses compostos em espécies de Virola, o presente trabalho teve por objetivo o estudo da atividade antiproliferativa em cultura de células tumora (mais) is humanas de extratos e da fração orgânica, obtidos das folhas de Virola sebifera. O extrato bruto diclorometânico (EBD) foi considerado o mais ativo, com seletividade principalmente para a linhagem de pulmão (NCI-460) - IC50: 4,46 µg/mL e para a fração orgânica (FO) obtida por extração ácido-base - IC50; 6,91 µg/mL. A atividade observada possivelmente pode ser atribuída a alcalóides ou compostos nitrogenados que foram evidenciados pelo corante Dragendorff. Assim, a purificação da FO será necessária a fim de comprovar a presença de compostos nitrogenados, através de isolamento e determinação estrutural, bem como a participação desses compostos na atividade antiproliferativa observada. Resumo em inglês Barks of Virola sebifera (Myristicaceae) used by Amazonian Indian communities in hallucinogenic snuff preparations have yielded dimethyltryptamine and derivatives. Considering the importance of the alkaloids isolated from plants for the development of chemotherapy, and the presence of these compounds in several Virola species, the scope of this work was to evaluate the antiproliferative activity of the extracts and the organic fraction from Virola sebifera leaves. The cru (mais) de dichloromethane extract was the most active with selectivity for lung line (NCI-460) - IC50: 4.46 µg/mL, as well as the organic fraction (OF) - IC50: 6.91 µg/mL. The observed activity could probably be attributed to alkaloids or nitrogen compounds that were evidenced by the Dragendorff reagent. However, the future purification of OF will be necessary to prove the presence of alkaloids and their role in the antiproliferative activity in human cells as well as isolating and identifying these compounds.

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Materiais poliméricos para tratamento de água oleosa: utilização, saturação e regeneração/ Oily water treatment using polymeric material: use, saturation and regeneration

Queiros, Yure G. C.; Clarisse, Márcia D.; Oliveira, Roberto S.; Reis, Breno D.; Lucas, Elizabete F.; Louvisse, Ana M. T.
2006-01-01

Resumo em português Resinas poliméricas vêm sendo usadas como materiais alternativos para tratamento de águas oleosas, provenientes da indústria de petróleo, as quais já tenham sido tratadas por métodos convencionais. O objetivo deste trabalho é avaliar o grau de purificação de águas oleosas sintéticas, quando tratadas em colunas de leito fixo empacotadas com resinas poliméricas constituídas por segmentos hidrofílicos e lipofílicos. Foram preparadas águas oleosas sintéticas (mais) e a fluorimetria foi utilizada para determinar o teor total de óleos e graxas (TOG) nas amostras de água recém-preparada e após eluição pela coluna. Os resultados mostraram que amostras de água tratadas com a coluna apresentaram valor de TOG não superior a 1% do valor de TOG da água oleosa preparada. Um estudo cinético mostrou que a eficiência de remoção dos contaminantes depende ligeiramente da vazão de eluição do sistema, sendo que valores de desempenho ótimos foram alcançados a uma vazão de 7,0 mL/min. A passagem de um volume de água oleosa de 11.087 vezes o volume do leito da coluna não foi suficiente para atingir a completa saturação do sistema. Ensaios preliminares de regeneração e reutilização da coluna mostraram seu potencial de uso em mais de 1 ciclo de tratamento de água oleosa. Resumo em inglês Polymeric resins have been used as alternative materials for treating oily waters from the petroleum industry, which have already been treated by conventional methods. The objective of this work was to evaluate the purification degree of synthetic oily waters when treated in fixed bed columns packed with hydrophilic/lipophilic resins. Synthetic oily waters were prepared and fluorimetry was used to determine the total grease and oil content (TGOC) of the fresh oily water a (mais) nd the oily water eluted by the column. The results showed that the treated oily water presented a TGOC close to zero ppm. The kinetic study showed that the contaminant removal efficiency slightly depends on the system elution flow rate; optimum removal values were reached at a 7.0 mL/min flow rate. The passage of a water volume 11,087 times the volume of the column bed was not sufficient to observe its complete saturation. Preliminary tests of column regeneration and re-use showed its potential to be used for more than 1 cycle of oily water treatment.

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Obtenção de cristais de licopeno a partir de descarte de tomate/ Production of lycopene crystals from tomato waste

Nunes, Itaciara L.; Mercadante, Adriana Z.
2004-09-01

Resumo em português As pesquisas com licopeno têm sido intensificadas uma vez que o consumo de alimentos ricos neste caroteno, como tomate e seus produtos, tem sido associado com o menor risco de desenvolvimento de câncer de próstata. Os objetivos deste trabalho foram (1) desenvolver e otimizar um método para extração de licopeno a partir de descarte de tomate, (2) utilizar este método na obtenção de licopeno a partir de diferentes coletas de tomate, (3) obter cristais de licopeno p (mais) uro e (4) acompanhar o processo de purificação de licopeno por cromatografia líquida de alta eficiência em coluna C30. O método desenvolvido e otimizado através de planejamento experimental fatorial para a obtenção de licopeno consistiu de uma etapa preliminar para retirada de água do tomate, com 4 extrações de 30 minutos, cada uma com 30mL de etanol, seguido por 4 extrações de 120 minutos com acetato de etila e relação massa/volume de 1:0,7. O teor de carotenóides médio (calculado como licopeno) obtido de 6 lotes de tomate foi de 59,2 ± 21,8µg/g. Através de duas cristalizações sucessivas obteve-se licopeno com 98% de pureza. A análise por CLAE mostrou a presença de traços dos isômeros 5-cis, 5-cis, 5'-cis- e 13-cis-licopeno no cristal de licopeno. Resumo em inglês Over the past few years, research regarding lycopene has intensified since the consumption of lycopene rich foods such as tomato and tomato products has been associated with reduced risks of developing prostrate cancer. Thus the objectives of this research were (1) develop and optimise methodology for the extraction of lycopene from tomato waste, (2) use the methodology to obtain lycopene from different tomato batches, (3) produce high purity lycopene crystals and (4) fol (mais) low the purification process of lycopene using high performance liquid chromatography on a C30 column. The method developed to obtain lycopene from tomato residue, and optimised using a factorial experimental design, consisted of a preliminary water removal step with four 30-minute extractions, each with 30mL ethanol, followed by four 120-minute extractions with ethyl acetate, each extraction with a mass/volume ratio of 1:0.7. The mean carotenoid content (calculated as lycopene), obtained from 6 tomato pickings, was 59.2 ± 21.8µg/g. Lycopene with 98% purity was obtained from two successive crystallisation processes. HPLC analysis showed the presence of traces of the 5-cis-, 5-cis,5'-cis- and 13-cis-lycopene isomers in the lycopene crystal.

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Extração de DNA de materiais de arquivo e fontes escassas para utilização em reação de polimerização em cadeia (PCR)/ Methods of DNA extraction from archived materials and rare sources for utilization in polymer chain reaction

Barea, Jaqueline A.; Pardini, Maria Inês M. C.; Gushiken, Tsieko
2004-12-01

Resumo em português Este trabalho visou a comparação de cinco métodos diferentes de extração de DNA de materiais de arquivo (tecidos incluídos em parafina, esfregaços de sangue periférico - corados e não corados com Leishman, lâminas com mielogramas, gotas de sangue em Guthrie Card) e de fontes escassas (células bucais, um e três bulbos capilares e 2 mL de urina), para que fossem avaliadas a facilidade de aplicação e a facilidade de amplificação deste DNA pela técnica da rea (mais) ção de polimerização em cadeia (PCR). Os métodos incluíram digestão por proteinase K, seguida ou não por purificação com fenol/clorofórmio; Chelex 100® (BioRad); Insta Gene® (BioRad) e fervura em água estéril. O DNA obtido foi testado para amplificação de três fragmentos gênicos: Brain-derived neutrophic factor (764 pb), Factor V Leiden (220 pb) e Abelson (106 pb). De acordo com o comprimento do fragmento gênico estudado, da fonte potencial de DNA e do método de extração utilizado, os resultados caracterizaram o melhor caminho para padronização de procedimentos técnicos a serem incluídos no manual de Procedimentos Operacionais Padrão do Laboratório de Biologia Molecular do Hemocentro - HC - Unesp - Botucatu. Resumo em inglês The present work aimed at comparing five different methods of DNA extraction of samples from archived materials (paraffin-embedded tissues, peripheral blood smears - stained or not with Leishman, aspired bone marrow smears and Guthrie card bloodspots) and from rare sources (oral cells, one and three capillary bulbs, 2 mL of urine), to evaluate the ease of application and the possibility of amplification of this DNA by the polymerization chain reaction (PCR) technique. The (mais) methods included proteinase K digestion - followed or not by phenol/chloroform purification, Chelex 100® (BioRad), InstaGene® (BioRad) and boiling in the sterile water. The DNA obtained was tested for amplification of three genic fragments: the brain-derived neutrophic factor gene (764 bp), the Factor V Leiden gene (220 bp) and the Abelson gene (106 bp). According to the gene fragment length studied, the DNA potential source and the extraction method used, the results characterized the best way to standardize technical procedures to be included in the Standard Operational Procedure Manual of the Molecular Biology Laboratory of the Blood Center in the Medicine School of Unesp, Botucatu, Brazil.

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Proposta de escala para mensurar o valor percebido no varejo bancário brasileiro/ The customer value structure in the brazilian personal retail banking market: a specific summated rating scale

Paiva, João Carlos Neves de; Barbosa, Francisco Vidal; Ribeiro, Áurea Helena Puga
2009-06-01

Resumo em português O objetivo deste estudo foi desenvolver uma escala para identificar e classificar os atributos mais valorizados pelos clientes no relacionamento com bancos de varejo. Há carência de estudos sobre a percepção de valor que considerem variáveis como setores da economia, segmentos de consumidores ou regiões geográficas, possibilitando maior precisão nas estratégias para conquistar, de forma duradoura, a preferência de consumo do cliente, focando seus negócios atuai (mais) s e futuros. A metodologia utilizada reuniu procedimentos sugeridos por diversos autores que são referências na área, com ênfase no processo de triangulação, em que a abordagem qualitativa funciona como suporte consistente para análises quantitativas. A escala passou por processos de purificação, diversos testes qualitativos e quantitativos, apresentando confiabilidade e validade. Os resultados indicaram que escalas específicas são mais eficazes para explicar fenômenos de marketing relacionados a valor para o cliente, bem como a relevância da metodologia utilizada para novas pesquisas nesse campo de estudos. Contudo são recomendáveis novos estudos empíricos para confirmar a validade da escala proposta. Resumo em inglês The aim of this study is to develop a scale in order to identify and classify the most valued attributes of retail banks by their customers. There is a shortage of studies about customer value that take into account variables such as economic sectors, customer segments or geographic regions, thereby allowing greater precision on developing strategies to conquer customer loyalty in present and future transactions. The methodology applied relies on solid conceptual and theo (mais) retical thinking and gathered procedures recommended by recognized authors, including the triangulation process, which emphasizes the qualitative approach as a support for quantitative analysis. Purification processes and several qualitative and quantitative tests provide reliability and validity to the scale. The results also show that specific scales are more precise when it comes to explaining marketing phenomena related to customer value in addition to the relevance of the methodology for further studies in that field. This notwithstanding, further studies are recommended in order to confirm the validity of the proposed scale.

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Obtenção de oligossacarídeos N-ligados às glicoproteínas dos líquens Sticta tomentosa e Sticta damaecornis/ N-linked oligosaccharides obtained from glycoproteins of the lichens Sticta tomentosa and Sticta damaecornis

Oliveira, Patrícia Fidelis de; Doná, Flávia; Marcelli, Marcelo; Cardoso, Marilsa; Silva, Maria de Lourdes Corradi da
2002-01-01

Resumo em português As glicoproteínas dos líquens Sticta tomentosa e Sticta damaecornis foram extraídas utilizando-se tampão específico e fracionadas pela adição crescente de sulfato de amônio. Dentre os diferentes cortes de saturação obtidos, as frações 30-80% de ambos os líquens foram eleitas objeto de estudo desta pesquisa. Métodos químicos e enzimáticos foram aplicados para a obtenção de oligossacarídeos N-ligados, que em seguida, foram derivatizados resultando em tiro (mais) sinamida-oligossacarídeos. Após inserção do grupo cromóforo nas estruturas oligossacarídicas, os mesmos foram purificados por HPLC com detecção em 280 nm. Em relação ao líquen Sticta tomentosa, os cromatogramas revelaram a presença de dois picos com tempos de retenção de aproximadamente 11 e 18 minutos sugerindo a presença de dois diferentes oligossacarídeos N-ligados. O líquen Sticta damaecornis, seguindo as mesmas condições de purificação, apresentou em cromatografia quatro picos distintos com tempos de 11, 13, 18,2 e 18,4 minutos, respectivamente, sugerindo por sua vez a presença de quatro oligossacarídeos N-ligados diferentes. Resumo em inglês The lichens Sticta tomentosa and Sticta damaecornis were extracted to obtain glycoproteins. The extracts were fractionated with 30-80% saturation (NH4)2SO4. The fractions were reduced, alkylated and after dialysis the material were digested with trypsin. The digests were dialyzed, freeze-dried and analyzed in reverse-phase high performance chromatography (RP-HPLC) based on the peptide hydrophobicity.N-linked oligosaccharides were removed from glycopeptides with PNGase A a (mais) nd analyzed by HPAEC-PAD that indicated the presence of several peaks between 12 to 17 min. The reducing oligosaccharides were reacted with NH4HCO3 to form oligosaccharides-glycosylamines and then derivatized with N-hydroxysuccinimidyl ester of Boc-tyrosine, resulting in tyrosinamide-oligosaccharides with sufficient hydrophobicity to facilitate RP-HPLC separation. RP-HPLC purification of asialyl tyrosinamide oligosaccharides from S. tomentosa showed two peaks eluted at 11 and 18 min. The asialyl tyrosinamide oligosaccharides from S. damaecornis eluted as four peaks at 11, 13, 18,2 and 18,4 min. The components that eluted at 11 min for both lichens showed the same monosaccharide composition.

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Contaminação por compostos organoclorados em salsichas hot-dog comercializadas na cidade de Santa Maria (RS), Brasil/ Contamination for organochlorine compounds in hot-dog sausages, commercialized in the city of Santa Maria (RS), Brazil

Bogusz Junior, Stanislau; Santos, Joice Sifuentes Dos; Xavier, Ana Augusta Odorissi; Weber, Jucieli; Leães, Fernanda Leal; Costabeber, Ijoni
2004-10-01

Resumo em português Com o objetivo de monitorar os resíduos de compostos tóxicos em alimentos, verificou-se a freqüência e os níveis de praguicidas organoclorados (OC) e bifenilas policloradas (PCBs) em amostras de salsichas Hot-Dog, comercializadas na Cidade de Santa Maria, Estado do Rio Grande do Sul (RS) e, compararam-se os valores com aqueles estabelecidos pela Legislação. Para as análises, procedeu-se a extração da gordura das amostras. A partir da purificação desta, obteve- (mais) se um extrato do qual se determinaram os resíduos organoclorados por cromatografia gasosa com detector de captura eletrônica (CG - µECD63Ni). Verificou-se que o lindano e o HCB foram os pesticidas que apresentaram as maiores concentrações médias (0,001798ppm e 0,001652ppm, respectivamente). O somatório dos níveis médios dos pesticidas organoclorados detectados foi de 0,015783ppm, sendo que deste total 0,011165ppm pertencia aos metabólitos do DDT. Quanto as bifenilas policloradas, as maiores concentrações médias corresponderam às PCBs 10 (0,001817ppm) e 28 (0,000317ppm). O somatório das PCBs foi de 0,002172ppm. As concentrações de praguicidas organoclorados e PCBs encontradas nas amostras analisadas estavam abaixo dos limites máximos permitidos pela legislação. Resumo em inglês With the objective of monitoring toxic compounds residues in food, the frequency and levels of organochlorine pesticides and polychlorinated biphenyls were verified in sausage samples, hot dog type, commercialized in the city of Santa Maria (RS), Brazil. Values were compared with the ones established by Brazilian legislation. For the analyses the extraction of fat from the samples was done. From the purification of the fat, there was acquisition of an extract in which was (mais) determined the organochlorine contaminants residues by gas chromatography with electronic capture detector (CG - µECD63Ni). It was learned that the lindane and HCB were the pesticides that presented the biggest concentration averages (0.001798ppm and 0.001652ppm, respectively). The detected sum of organochlorine pesticides average levels was 0.015783ppm; and from this sum 0.011165ppm belonged to DDT metabolites. The largest average concentration of polychlorinated biphenyls corresponded to the PCBs 10 (0.001817ppm) and 28 (0.002172ppm). Concentrations of organochlorine pesticides and PCBs found in the samples were below the maximum allowed by legislation.

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Optimização da detecção do polimorfismo Ala 677 - Val do gene que codifica a metilenotetrahidrofolato redutase (MTHFR)/ Optimization of Methylenetetrahydrofolate Reductase C677T polimorphism detection

Persuhn, Darlene Camati; Soares Melo, Sandra; Maccagnan, Carlos Leonardo; Besen, Pinheiro; Sansão, Fabiano; Mangrich, Iriane Eger
2006-03-01

Resumo em português A mutação (C677T) no gene que codifica a enzima metilenotetrahidrofolato redutase (MTHFR) tem sido associada a hiperhomocisteinemia e possivelmente ao risco elevado para doenças vasculares. O objetivo deste trabalho foi otimizar sua detecção por PCR para faciliar estudos populacionais. Foram testadas metodologias alternativas de purificação do DNA genômico humano e os resultados obtidos permitiram padronizar uma técnica com redução de reagentes para extração (mais) de DNA por precipitação com NaCl. Foram realizados experimentos variando a concentração dos componentes da reação de PCR que permitiram definir que reações contendo metade do volume inicial de deoxinucleotídeos e iniciadores (primers), assim como 0,5U de Taq DNA polimerase produzem essencialmente a mesma quantidade de amplificado que a reação anteriormente utilizada. Testou-se ainda, a redução do volume da reação de PCR com objetivo de utilizar o produto de amplificação diretamente para digestão com a enzima HinfI, evitando assim, etapas de pipetagem que acarretam em risco de contaminação. Obteve-se sucesso com 15 mL de volume final; que permitiu a utilização do sistema de PCR completo para digestão do produto amplificado. A importância deste estudo pode ser justificada pela significância que as doenças vasculares apresentam em termos populacionais e por este polimorfismo estar potencialmente relacionado com o risco de DAC (doença artério-coronariana) precoce. Resumo em inglês A common mutation C677T in methylenetetrahydrofolate reductase (MTHFR) gene, involved in the metabolism of homocysteine, has been suggested to play a role in increasing cardiovascular disease risk. In order to facilitate the obtainment of population data, the objective of this work was improve its PCR detection. Leucocytes DNA purification alternative protocols were tested and a new low cost method of NaCl precipitation was developed. The composition of PCR mixture was al (mais) so tested and it defined that the concentration of deoxynucleotides, primers and Taq DNA polimerase could be reduced in a half. The final volume of PCR mixture was reduced to 15 µL, enabling the utilization of the same tube to amplification and HinfI digestion processes, avoiding extra steps. The significance of cardiovascular disease in populational data and the possibility of involvement of this mutation as risk factor of precocious ACD (arterial cardiovascular disease) justify this work.

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Revegetação de cava de extração de argila com Acacia mangium: II - caracterização química da humina/ Revegetation of clay extraction sites with Acacia mangium: II - chemical aspects of humins

Schiavo, Jolimar Antonio; Canellas, Luciano Pasqualoto; Martins, Marco Antonio; Matos, Carlos Roberto Ribeiro
2007-10-01

Resumo em português Este trabalho foi realizado com o objetivo de caracterizar a natureza química dos compostos da humina extraída em solo de área degradada pela extração de argila, com vegetação espontânea de Brachiaria mutica (Forsk.) Stapf e revegetada com Acacia mangium Willd. Após extração e purificação, a humina foi submetida à transesterificação com metanol trifluorato de B (BF3-MeOH), obtendo-se as subfrações alifáticas e aromáticas. Essas subfrações foram subme (mais) tidas à cromatografia gasosa (Shimadzu GC-17A) combinada com a espectrometria de massa (Shimadzu GC/MS-qp5050A). Na subfração alifática obtida da cobertura com A. mangium, os compostos identificados foram: hexadecanoato de metila, octadecanoato de metila, heptadecano e 2-hidroxidodecanoato de metila; já na área com B. mutica os compostos foram: 14-metilpentadecanoato de metila e nonadecanoato de metila. Na subfração aromática, os compostos identificados na cobertura com A. mangium foram os mesmos obtidos naquela com B. mutica, sendo eles: 14-metilpentadecanoato de metila, 1,2 benzenodioato de 2 etilexila e butila. A leguminosa arbórea A. mangium proporcionou mudanças na fração mais recalcitrante das substâncias húmicas (humina), extraída da cava de extração de argila, preservando maior diversidade de compostos alifáticos. Resumo em inglês This study aimed at characterizing the chemical aspects of the humin compounds of a degraded clay extraction area covered with spontaneous vegetation of Brachiaria mutica (Forsk) Stapf or afforested with Acacia mangium Willd. After extraction and purification, humin was subjected to transesterification using BF3-MeOH (boron trifluorate methanol) to obtain the aliphatic and aromatic sub-fractions. These sub-fractions were analyzed by gas chromatography-mass spectrometry. T (mais) he following compounds were identified in the aliphatic sub-fraction of the A. mangium site: methyl hexadecanoate, methyl octadecanoate, methyl 2-hydroxidodecanoate and heptadecano, on the other hand, in B. mutica site the compounds were: methyl 14-methylpentadecanoate and methyl nonadecanoate. In the aromatic sub-fractions the compounds identified in soil samples colleted in A. mangium site were the same as those identified in B. mutica: methyl 14-methylpentadecanoate, 2-ethylexila 1.2 benzenodioate and buthyl. The re-vegetation of degraded area with the leguminous tree A. mangium inmduced changes in the recalcitrant fraction of humic substances (humin), preserving the diversity of the aliphatic compounds.

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Caracterização de um isolado de Bidens mosaic virus proveniente de alface/ Characterization of an isolate of Bidens mosaic virus (BiMV) from lettuce

Suzuki, Gerson Shinia; Rosa, Renan Augusto Cardoso; Sanches, Márcio Martinello; Nozaki, Denise Nakada; Pavan, Marcelo Agenor; Krause-Sakate, Renate
2009-09-01

Resumo em português Em 2004, plantas de alface com sintomas de mosaico coletadas em São Manuel - SP foram analisadas por microscopia eletrônica, constatando-se presença de partículas típicas de potyvirus com 730 nm de comprimento. Após purificação biológica por monolesionais em Chenopodium quinoa, o extrato vegetal foi inoculado em uma série de plantas diferenciadoras, verificando-se que o isolado testado foi capaz de infectar C. quinoa e C. amaranticolor induzindo lesões locais s (mais) eguidas de mosaico sistêmico. Ervilha (Pisum sativum) mostrou-se assintomática, e em diferentes cultivares de alface como Trocadero, White Boston, Regina, Verônica, Lucy Brown, Rafaela, Tainá, Vera e Laurel foi observado o mosaico. A cultivar Gizele foi tolerante ao vírus. O sequenciamento da região codificadora da proteína capsidial revelou maior identidade de aminoácidos (97%) deste isolado com o Bidens mosaic virus - BiMV (nº de acesso AY960151). Diferentemente dos isolados de BiMV já descritos, este proveniente de alface não foi capaz de infectar Bidens pilosa, Helianthus annuus, Nicotiana tabacum TNN e N. glutinosa. A ocorrência natural do BiMV em alface, causando sintomas semelhantes aos do LMV e a suscetibilidade de várias das cultivares hoje plantadas, servem como um alerta para a correta diagnose do vírus a campo. Resumo em inglês In 2004 lettuce plants showing mosaic symptoms collected in São Manuel, SP were analyzed by electron microscopy, and particles with 730 nm typically from potyvirus were observed. After biological purification by monolesionals on Chenopodium quinoa, this isolate was sap inoculated on a host range assay. The virus infected C. quinoa and C. amaranticolor, causing local lesions and systemic mosaic. The virus did not induce symptoms on pea (Pisum sativum), but induced mosaic (mais) on the leaves of some lettuce cultivars such as Trocadero, White Boston, Regina, Verônica, Lucy Brown, Rafaela, Tainá, Vera and Laurel. The lettuce cultivar Gizele was tolerant to the virus. The coat protein gene was sequenced, and 97% aminoacids identity was observed with Bidens mosaic virus - BiMV (GenBank accession number AY960151). Differently of others previously BiMV isolates described, this isolate from lettuce was not able to infect Bidens pilosa, Helianthus annuus, Nicotiana tabacum TNN and N. glutinosa. The natural occurrence of BiMV infecting lettuce and causing mosaic symptoms similar to LMV, also the susceptibility of many lettuce cultivars to BiMV, could be an alert to the correct diagnosis of the viruses infecting this plant .

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Sorologia e sobrevivência do vírus do amarelo letal do mamoeiro/ Serology and surviving characteristics of Papaya lethal yellowing virus

Nascimento, Ana Lúcia Lopes do; Lima, José Albersio de Araujo; Nascimento, Aline Kelly Queiroz do; Gonçalves, Maria de Fátima Barros
2010-09-01

Resumo em português O vírus do amarelo letal do mamoeiro (Papaya lethal yellowing virus, PLYV) é responsável por uma das principais doenças do mamoeiro (Carica papaya) no Nordeste brasileiro. O PLYV pode ser transmitido através do solo, água, instrumento de corte e mãos contaminadas. A presente pesquisa teve como objetivo estudar as características biológicas, sorológicas e físicas de um isolado do vírus e avaliar sua sobrevivência em tecido seco infetado. O PLYV foi detectado p (mais) or "Enzyme linked immunosorbent assay" (ELISA) indireto e isolado em mudas de mamoeiro, através da inoculação mecânica. A sobrevivência do PLYV em folhas e raízes secas de mamoeiro infetado foi avaliada por sorologia e inoculação em plantas sadias. A presença do vírus foi detectada em folhas e raízes de mamoeiro secas, indicando que o vírus pode permanecer ativo em restos de cultura por até 120 dias. A purificação do PLYV permitiu a obtenção de 309.5 mg de vírus/kg de folha e o anti-soro obtido mostrou-se altamente específico, com títulos de 1:128 em dupla difusão em Agar e 1:1.024.000 em Elisa indireto. Estudos das propriedades físicas do PLYV em mamoeiro revelaram um ponto de inativação térmica (PIT) em torno de 80 ºC, um ponto máximo de diluição (PMD) de ac. 10-6 e uma longevidade in vitro (LIV) acima de 50 dias. Resumo em inglês The Papaya lethal yellowing virus (PLYV) is responsible for one of the most important disease of papaya (Carica papaya) in the Northeast of Brazil. The PLYV can be transmitted through the soil, irrigation water, agriculture tools and contaminated hands. The present research had the objective to characterize biologically, serologically and physically a PLYV isolate and evaluates how long it survives in infected dried tissues. The PLYV was identified by indirect enzyme link (mais) ed immunoabsorbent assay (ELISA), isolated in young papaya plants by mechanical inoculations and maintained at green house conditions for virus purification. Approximately 309.5 mg of virus was purified per kg of infected papaya leaves and a polyclonal antiserum was obtained from an immunized rabbit. The antiserum obtained was shown to be highly specific to PLYV with a titer of 1:128 in double immune-diffusion and a titer of 1:1.024.000 in indirect ELISA. The virus was detected in dried roots and leaves maintained at room temperature up to 120 days, confirming its high stability within nonliving plant tissues, which could explain its dissemination by contaminated hands, tools, water and soil. The physical properties determined for the virus revealed a thermal inactivation point of 80 ºC, longevity in vitro over 50 days and dilution end point ac. of 10-6.

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Redução de crômio hexavalente por substâncias húmicas aquáticas imobilizadas em aminopropil sílica/ Reduction of hexavalent chromium by aquatic humic substances immobilized on aminopropyl silica

Romão, Luciane Pimenta Cruz; Araújo, Adriana Barbosa; Rosa, André Henrique; Rocha, Julio Cesar
2002-01-01

Resumo em português Estudou-se a redução de Cr(VI) à Cr(III) utilizando-se um novo suporte preparado pela ativação de aminopropil sílica com substâncias húmicas aquáticas (ATPS-SiO2-SHA). Coletaram-se amostras de água no Corrégo Itapitangui localizado no município de Cananéia-SP e extraíram-se as SHA utilizando-se procedimento recomendado pela Sociedade Internacional de Substâncias Húmicas. Após purificação por diálise, fez-se a imobilização das SHA na aminopropil síli (mais) ca (APTS-SiO2) em pH 7,0, sob agitação mecânica por 48 horas à temperatura ambiente. Adicionaram-se 150 mg de APTS-SiO2-SHA à 150 mL de soluções 9,5 mimol L-1 de Cr(VI), fixou-se o pH em 2,5, 4,5 e 6,0 e mantiveram-se as misturas sob agitação mecânica à temperatura ambiente. Coletaram-se alíquotas em função do tempo (0-72 horas) e as concentrações de Cr(VI) foram determinadas por espectrofotometria baseada na reação com 1,5-difenilcarbazida. A porcentagem de redução de Cr(VI) por APTS-SiO2-SHA foi de 50, 4 e 0 % em pH 2,5, 4,5 e 6,0, respectivamente. Dobrando a massa do suporte APTS-SiO2-SHA verificou-se em pH 2,5, a redução de 70 % de Cr(VI). Esses resultados preliminares mostram forte influência do pH e da quantidade de APTS-SiO2-SHA no processo de redução do Cr(VI). Após outros estudos, a utilização do suporte APTS-SiO2-SHA pode ser uma alternativa viável a ser aplicada para o tratamento de resíduos e/ou estudos de especiação de crômio. Resumo em inglês This paper describes the reduction of Cr(VI) to Cr(III) using a new support prepared by activation of aminopropyl silica with aquatic humic substances (ATPS-SiO2-AHS). It were collected water samples from Córrego Itapitangui, Iguape, São Paulo State, Brazil according to the procedure recommended by the International Humic Substances Society. After purification by dialysis, aquatic humic substances were immobilized on aminopropyl silica (ATPS-SiO2) at pH 7.0, under mecha (mais) nical stirring for 48 hours at room temperature. It were added 150 mg of ATPS-SiO2-AHS in 150 mL of 9.5 mumol L-1 chromium solutions at pH 2.5, 4.5 and 6.0 under mechanical stirring at room temperature. Aliquots were collected in different times (0-72 hours) and Cr(VI) was determined by spectrophotometric method using the reaction with 1-5 diphenylcarbazide. The reduction per cent of Cr(VI) to Cr(III) by ATPS-SiO2-AHS were 50; 4 and 0 % at pH 2.5, 4.5 and 6.0, respectively. At pH 2.5 using 300 mg of the support (ATPS-SiO2-AHS) the chromium(VI) reduction increased to 70 %. This preliminary results shows strong influence of the pH and ATPS-SiO2-AHS concentration on Cr(VI) reduction process. The utilization of the support (ATPS-SiO2-AHS) could be a future alternative for industrial effluents treatment and chromium speciation studies.

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Síntese, caracterização e estudos de transferencia de energia do complexo dimérico constituído por Zn e Mn porfirina/ Dimer derivative of Zn and Mn Porfirin: Synthesis, caracterization and energy transfer studies

NERI, Cláudio Roberto; SERRA, Osvaldo Antonio; VINHADO, Fábio da Silva; MAESTRIN, Ana Paula Jecks; IAMAMOTO, Yassuko; FERREIRA, Antonio Gilberto
2002-01-01

Resumo em português Muitos compostos modelo contendo porfirinas têm sido preparados num esforço para entender o sistema de fotossíntese e os processos de aproveitamento de energia solar. Sistemas doadores-receptores contendo porfirinas têm sido freqüentemente estudados para testar várias descrições teóricas sobre transferência de elétrons. O estudo de parâmetros fotoquímicos e fotofísicos como a distância para transferência de energia, geometria molecular e a diferença de po (mais) tencial eletrônico, tem se mostrado importante para a definição da transferência eletrônica em porfirinas. Neste trabalho apresentamos a síntese, purificação e caracterização por espectroscopia UV/Vis, ¹H e 19F RMN, luminescência e tempos de vida de novos modelos moleculares de porfirinas, que permitam investigar esses parâmetros. Utilizou-se o dímero Zn,Mn(TPPF4)2pip e seus monômeros ZnTPPF4pipH e MnF5TPP. A caracterização do ZnMn(TPPF4)2pip, foi dificultada devido a presença de Mn+3, devido ao forte acoplamento dos orbitais dpi do manganês e o sistema pi da porfirina, que aumenta a interação manganês-porfirina mudando o espectro eletrônico UV/Vis e distorcendo os sinais de ¹H e 19F RMN do dímero. A presença de Mn+3 desloca E1/2 do anel porfirínico para valores mais negativos, o que resulta em reduções mais difíceis, impedindo a transferência de energia da Znporfirina para a Mnporfirina. Resumo em inglês Porphyrins have revealed that factors as the energy transfer distance, molecular geometry and the difference of electronic potential, are important in a well defined electronic transfer. Porphyrin- containing donor-acceptor systems have been usefully employed to test various theoretical descriptions of electron transfer. The objective of this paper consists on the synthesis, purification and characterization by UV/Vis spectroscopy, ¹H and 19F NMR, luminescence and lifeti (mais) me of new molecular models, allowing the investigation of energy transfer parameters. This study was accomplished using the dimer Zn,Mn(TPPF4)2pip and its monomers ZnTPPF4pipH and MnF5TPP. The dimer characterization, Zn,Mn(TPPF4)2pip, was difficult due to the presence of Mn3+. The strong overlap between dpi orbitals of manganese and the porphyrin pi system increases the interaction manganese-porphyrin in changing the UV/Vis electronic spectrum and distorting the ¹H and 19F NMR signals of dimer. The presence of Mn3+ shifts the reduction potential of E1/2 of the porphyrin ring to more negatives values, what results in more difficult reductions, disabling the transfer of energy from Zincporphyrin to Manganeseporphyrin.

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Métodos analíticos no controle microbiológico da água para consumo humano/ Analithical methods for water microbiological control for human consumtion

Bettega, Janine Maria Pereira Ramos; Machado, Maria Rosa; Presibella, Mayra; Baniski, Grazielle; Barbosa, Carlos de Almeida
2006-10-01

Resumo em português A fim de realizar a quantificação de coliformes totais e fecais no decorrer das etapas de tratamento da água captada pela Companhia de Saneamento do Paraná (SANEPAR) Curitiba-PR, foram utilizadas três técnicas de análise microbiológica: (1) a técnica oficial preconizada pela Vigilância Sanitária, (2) Kit "A", (3) Kit "B". As metodologias foram validadas através de controles positivos e negativos. Os métodos utilizados apresentaram resultados extremamente homo (mais) gêneos nas amostras pré-tratadas e também quando as amostras haviam passado pelos processos de purificação, porém, algumas discrepâncias entre os métodos avaliados foram detectadas em etapas intermediárias do tratamento da água. A utilização de Kits no controle microbiológico da água é muito prática porque elimina as etapas de preparação e esterilização dos meios de cultura em laboratório, porém deve-se analisar cuidadosamente o custo-benefício, bem como a sensibilidade e especificidade dos produtos disponíveis no mercado. O Kit "B" emprega um método enzimático, ao invés do método tradicional e Kit "A", que utilizam ambos: a turvação e formação de gás para a detecção o crescimento bacteriano. O kit " B" apresentou resultados similares aos outros dois métodos, mas com as vantagens de apresentar resultados extremamente claros e levar a metade do tempo para a obtenção dos resultados. Resumo em inglês In order to carry out the quantification of total and fecal coliforms in elapsing of the stages of water treatment by SANEPAR, Paraná State, three different techniques of microbiological analysis had been used: (1) the official technique praised by the Sanitary Monitoring; (2) Kit "A" and (3) Kit "B". The three methodologies of the water microbiological analysis had been validated through positive and negative controls. The used methods had presented extremely homogeneou (mais) s results when the samples were contaminated and also when the samples had passed through the purification processes, however, some discrepancies among the evaluated methods had been detected in intermediate stages of the water treatment. The use of commercial Kits in water microbiological control is very practical because it eliminates the preparation and sterilization stages of the culture media in laboratory, however, it is necessary to analise carefully the cost-bennefit, sensibility and specifity of disposable products in market. The Kit "B" utilizes an enzymatic method, instead the tradicional technique and Kit "A" use both: the dim and gas formation to detect bacterial growth. The Kit "B" had showed similar results to the other two techniques, but with the advantages of presenting extreme clear results and take a half of time in the results obtention.

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Recuperação da solução de soda cáustica usada no tratamento do couro bovino na produção de gelatina/ Recovery of the sodium hydroxide aqueous solution used in the treatment of bovine leather for the production of gelatin

Lima, Eduardo Rodrigues de; Oliveira, Ricardo Araújo; Ambrosio-Ugri, Miriam Carla Bonicontro; Barros, Sueli Teresa Davantel de; Barros Júnior, Carlos de
2008-03-01

Resumo em português No tratamento de couro bovino para a produção de gelatina utiliza-se uma solução de soda cáustica com função de dissolver substâncias orgânicas indesejáveis, como proteínas e gorduras. Para evitar seu descarte como efluente, procurou-se viabilizar um processo de purificação da soda cáustica, evitando seu desperdício e ainda tornando-o adequado para reutilização no processo. A microfiltração, a ultrafiltração e a nanofiltração são técnicas potencia (mais) is para esta separação, dependendo do tipo e tamanho dos sólidos existentes. Experimentos de ultrafiltração foram realizados na unidade de micro/ultrafiltração Koch Membrane System Model Protosep modified IV, nas pressões transmembrana de 2,5; 3,5 e 4,5 kgf/cm² e temperaturas de 25 e 50 °C. Utilizaram-se membranas cerâmicas (material TiO2/alfa-Al2O3) tubulares com diâmetro médio de corte de 0,01, 0,05 e 0,10 µm. O trabalho foi dividido em duas etapas: na primeira selecionou-se a melhor pressão para cada membrana, e na segunda adotou-se a pressão de 3,5 kgf/cm², usou-se uma alimentação centrifugada e outra peneirada para então definir a membrana. As melhores condições operacionais foram determinadas em termos de fluxo de permeado e qualidade de produto. Com os resultados obtidos, observaram-se as melhores condições operacionais: pressão de 3,5 kgf/cm², temperatura de 25 °C e membrana com diâmetro médio de poros de 0,01 µm. Resumo em inglês The sodium hydroxide solution used in the treatment of bovine leather in the production of gelatin has the function of dissolving undesirable organic substances, such as proteins and fats. To avoid the discard of this solution as an effluent to the environment, the intention of this project was to develop a process of sodium hydroxide purification, avoiding the waste of the solution and making it appropriate to be re-utilised in the process. Ultrafiltration experiments we (mais) re carried out in a micro/ultrafiltration unit, Koch Membrane System, model Protosep, modified IV, with transmembrane pressures of 2.5; 3.5 and 4.5 kgf/cm² and temperatures of 25 and 50 °C. The membranes used were tubular ceramic (material: TiO2/alpha - Al2O3) with an average diameter of 0.01, 0.05 and 0.10 µm. The study was divided in two steps: in the first, the best pressure for each membrane was selected, and in the second, a pressure of 3.5 kgf/cm² was adopted and two different forms of feeding were used to define the membrane. The best operational conditions were determined in terms of permeate flow and product quality. With the results, the following operational conditions were selected: pressure of 3.5 kgf/cm², temperature of 25 °C and membrane with average pore diameter of 0.01 µm.

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Expressão protéica diferencial entre plântulas apomíticas e zigóticas de citros/ Differencial protein expression among zygotic and apomitic seedlings of citrus

Silva, Cristina Lacerda Soares Petrarolha; Machado, Marcos Antônio; Lemos, Eliana Gertrudes Macedo
2004-04-01

Resumo em português Existem evidências do envolvimento de um ou poucos genes controlando o processo apomítico em citros; entretanto, a identidade destes genes, seus produtos e suas formas de atuação ainda não foram elucidados. Sendo as proteínas o produto final da expressão gênica, o processo apomítico pode ser investigado através do estudo da expressão protéica. A técnica da eletroforese bidimensional de proteínas foi empregada nesta pesquisa, objetivando a comparação de per (mais) fis protéicos de plântulas apomíticas e zigóticas de citros obtidas a partir de cruzamento entre Citrus sinensis L. Osb. cv. Pêra e Poncirus trifoliata cv. Rubidoux. Observou-se, nestes perfis bidimensionais, a ocorrência de três classes de proteínas: a primeira presente em ambos os perfis, a segunda exclusiva do perfil apomítico e a terceira exclusiva do perfil zigótico. Dentro da classe de proteínas compartilhada por ambos os perfis, observaram-se diferenças no nível de expressão entre zigóticos e apomíticos. A classe protéica exclusiva do perfil zigótico, provavelmente, está relacionada à expressão de genes herdados do parental masculino. Já dentre as proteínas exclusivas do perfil apomítico, podem estar proteínas relacionadas ao processo apomítico. O peso molecular e o ponto isoelétrico destas proteínas de expressão diferencial foram estimados e constituem, então, um banco de dados para futuros trabalhos de purificação e seqüenciamento das mesmas. Resumo em inglês There are evidences that one or a few genes only regulate the apomictic process in citrus. However, the genes identities, their products and mode of action were not elucidated yet. As proteins are the final products of gene expression, the investigation of protein expression can lead to a better understanding of the apomictic process. In this research, the bidimensional protein electrophoresis technique was used to compare protein profiles from apomictic and zygotic seedl (mais) ings of citrus. Three classes of proteins were observed based on bidimensional profiles: a) those observed in either one of the profiles, b) those exclusive to the apomictic profile, and c) those exclusive to the zygotic profile within that class of proteins shared by both profiles. Differences in the expression level were observed for apomitic or zygotic seedlings. The class of protein exclusive to the zygotic profile is probably related to the expression of genes inherited from the male parental. The proteins detected in the apomictic profile could be related to the apomictic process itself. The molecular weight and the isoelectric point of these differentially expressed proteins were also estimated and probably constitute an important data base for future work on purification and sequencing of these proteins.

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Validação de métodos para determinação dos ácidos fítico e oxálico em multimistura/ Validation methods to determine phytic and oxalic acids in "multimisturas"

Nappi, Giancarlo Ubaldo; Ribeiro-Cunha, Mariem Rodrigues; Coelho, José Virgílio; Jokl, Lieselotte
2006-12-01

Resumo em português Considerando a composição da multimistura distribuída em Belo Horizonte/MG (trigo, fubá, casca de ovo e folha de mandioca), as metodologias de detecção e/ou quantificação dos fitatos e oxalatos foram validadas. A purificação em coluna de troca aniônica forte do ácido fítico e seus derivados desfosforilados extraídos da multimistura apresentou baixos valores de recuperação (49%) nas concentrações menores do fitato adicionado, em relação às mais elevada (mais) s (101%), sugerindo a interferência de minerais presentes em altas concentrações, principalmente cálcio. Dos métodos avaliados para a determinação do ácido oxálico, a cromatografia de exclusão iônica foi a que apresentou os melhores resultados, com boas recuperações nos níveis mais altos de adição (88%), apresentando, contudo, recuperação mais baixa nos níveis inferiores de adição (61%). Os teores de ácido fítico nas amostras variaram de 1,61 g/100 g a 2,25 g/100 g e, para o ácido oxálico, de 0,044 g/100 g a 0,057 g/100 g. Os critérios de validação dos métodos analíticos por cromatografia líquida de alta eficiência foram considerados satisfatórios quanto a seletividade e especificidade, linearidade, repetitividade e limites de detecção e quantificação. Contudo, o de recuperação não foi atendido satisfatoriamente, visto que as porcentagens obtidas foram inferiores ao esperado, levando-se em conta a concentração adicionada nas amostras. Resumo em inglês Taking into account the composition of the "multimistura" distributed in Belo Horizonte/MG (wheat, corn meal, egg shell and cassava leave), the methods of detection and/or quantitation of phytates and oxalates were validated. The purification of phytic acid and its dephosphorylated derivatives extracted from the "multimistura" using a strong anionic exchange column presented low values of recovery (49%) at low concentrations of the added phytate, when related to the highe (mais) r ones (101%), which suggests interference of minerals present in high levels, mainly calcium. From the methods evaluated for the determination of oxalic acid, the ionic exclusion chromatography was the one that presented the best results, with good recoveries at the highest addition levels (88%); presenting, however, decreased recovery in the lower levels of addition (61%). The levels of phytic acid in the samples varied from 1.61 g/100 g to 2.25 g/100 g and for the oxalic acid, from 0.044 g/100 g to 0.057 g/100 g. The validation criteria for the analytical methods by high performance liquid chromatography were considered satisfactory for selectivity and specificity, linearity, repetitivity and limits of detection and quantitation. However, the recovery was not satisfactory since the obtained percentages were lower than the expected one, taking into account the quantities added to the samples.

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Processamento e avaliação das propriedades de tubos cerâmicos porosos para microfiltração de emulsões/ Processing and evaluation of porous ceramics for micro filtration of emulsions

Rosa, D. S.; Salvini, V. R.; Pandolfelli, V. C.
2006-06-01

Resumo em português Cerâmicas porosas têm sido utilizadas em diversas aplicações tecnológicas como coletores de partículas sólidas, isolantes térmicos e acústicos. As áreas de biotecnologia e biomedicina utilizam cerâmicas porosas como reatores em processos de fermentação e em implantes, respectivamente. Adicionalmente, estes materiais apresentam grande aplicação na área de microfiltração de líquidos e emulsões, como a purificação de combustíveis através da separaçã (mais) o da água e óleo, e na separação das proteínas do leite. O objetivo deste trabalho é o de produzir tubos de cerâmicas porosas para microfiltração de combustíveis. A primeira etapa compreendeu a produção de tubos cerâmicos porosos por colagem de suspensões e avaliação de suas propriedades físicas, fluidodinâmicas e mecânicas finais. Já a segunda etapa consistiu na análise do desempenho destes tubos durante a microfiltração de combustíveis. As propriedades finais das cerâmicas porosas foram avaliadas em função das variações na composição da suspensão e nas condições de queima. Após queima, os tubos cerâmicos apresentaram porosidade na faixa de 48 a 65%, distribuição estreita de diâmetro de poros menores que 1 µm, e constantes de permeabilidade Darciana (k1) e não Darciana (k2) da ordem de 10-15 m² e 10-11 m, respectivamente. Essas propriedades são similares aos tubos comerciais importados e, portanto, essas cerâmicas porosas desenvolvidas têm um grande potencial de aplicação em processos de microfiltração. Resumo em inglês Porous ceramics have been applied in a broad range of technological purposes, such as dust collectors, thermo-acoustic insulators and burners. In the biotechnology and biomedicine areas, porous ceramics have been applied as reactors in fermentation processes and as implants, respectively. Besides that, they can also be used in the micro filtration process of liquids and emulsions, such as fuel purification through separation of water from oil, and in the separation of pro (mais) teins of the milk. The objective of this work is the production of porous ceramics tubes for fuel micro filtration. The first stage of the research was the production of porous ceramics by colloidal processing and evaluation of its final physical, fluid dynamic and mechanical properties. In a second stage the performance of these ceramic tubes during the micro filtration of fuel was analysed. The final properties of porous ceramics were evaluated according to the changes in the composition and sintering conditions. After firing, the ceramic tubes had their porosity in the range of 48 to 65%-vol, narrow distribution with pore diameters bellow than 1 µm and constants of Darcian (k1) and nonDarcian (k2) permeability of 10-15 m² and 10-11 m, respectively. These properties are similar to the commercial imported products and therefore these ceramics have a great potential of application in micro filtration processes.

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Desenvolvimento e avaliação de novas estratégias de imunização contra colibacilose suína/ Development and evaluation of new strategies for immunization against swine colibacillosis

Simionatto, Simone; Vaz, Eliana K.; Michelon, André; Seixas, Fabiana K.; Dellagostin, Odir Antônio
2005-06-01

Resumo em português Colibacilose suína causada por Escherichia coli enterotoxigênica continua sendo um dos principais problemas sanitários na criação de suínos. A tecnologia do DNA recombinante proporciona a possibilidade de desenvolvimento de novas estratégias de imunização. Neste trabalho é descrito o desenvolvimento de uma vacina de subunidade através da produção e purificação da proteína FaeC da fímbria de E. coli K88. O gene que codifica este antígeno foi amplificado p (mais) or PCR e clonado em um vetor de expressão em E. coli, fusionado a uma cauda de histidinas. A proteína recombinante expressa por esta bactéria foi purificada, e depois de quantificada foi utilizada para imunizar camundongos. Paralelamente a isso, o mesmo gene foi clonado no vetor de expressão em célula eucariótica, introduzindo a seqüência de Kozak para favorecer a tradução deste gene em células musculares. O plasmídio resultante, denominado pUP310, foi produzido em larga escala e também utilizado na imunização de camundongos. A resposta imune induzida por ambas formas de imunizações foi monitorada por ELISA, onde o antígeno utilizado foi a proteína FaeC purificada. Houve indução de resposta imune nos camundongos inoculados com pUP310 e FaeC purificada. Foi possível detectar anticorpos anti-FaeC 42 dias após a primeira inoculação e este título foi aumentando, sendo ainda detectável 7 meses após a primeira inoculação. Conclui-se que pUP310 e FaeC recombinante são candidatos potenciais para imunização de suínos contra E. coli K88. Resumo em inglês Swine colibacillosis caused by enterotoxigenic Escherichia coli remains one of the main sanitary problems in pig farms. The recombinant DNA technology offers the possibility of developing new immunization strategies. This paper describes the development of a subunit vaccine through the expression and purification of the E. coli K88 FaeC fimbrial protein. The gene that codes for this antigen was amplified by PCR and cloned into an E. coli expression vector fused to a 6X hi (mais) stidine tag. The recombinant protein was purified by affinity chromatography and used for mice immunization. In parallel, the same gene was cloned into an eucariotic expression vector with the addition of the Kozak sequence for improving translation of this gene in muscle cells. The resulting plasmid named pUP310 was purified in large scale and used to immunize mice. The immune response afforded by both forms of immunization was monitored by ELISA. There was an immune response in mice inoculated with pUP310 and purified FaeC. It was possible to detect anti-FaeC antibodies 42 days after the first inoculation. The antibody titer increased with time, being still detectable 7 months after the first inoculation. It is concluded that recombinant FaeC and pUP310 are potential tools for immunization of swine against E. coli K88.

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Caracterização de um isolado do Bean rugose mosaic virus (BRMV) de Minas Gerais e estimativa de perdas em feijoeiro em infecção simples ou em conjunto com o BCMV/ Characterization of a Bean rugose mosaic virus (BRMV) isolate from Minas Gerais, and yield loss estimate in beans upon single infection and double infection with BCMV

Castillo-Urquiza, Gloria P.; Maia, Felipe G.M.; Carvalho, Murilo G.; Pinto, Cleide M.F.; Zerbini, F. Murilo
2006-10-01

Resumo em português Plantas de feijão-vagem do cultivar Novirex apresentando mosaico e enrolamento de vagens, sem deformação foliar evidente, foram coletadas em 2002 em Cordisburgo, MG. Estudos preliminares identificaram o vírus como um isolado do Bean rugose mosaic virus (BRMV). Este trabalho relata a caracterização do isolado, por meio de produção e avaliação de anti-soro, determinação da gama de hospedeiros, estudo da transmissão do vírus por besouros crisomelídeos e estima (mais) tiva de perdas em feijoeiro como resultado de infecção isolada ou em conjunto com o Bean common mosaic virus (BCMV). O roteiro adotado para purificação possibilitou a obtenção de vírus purificado em rendimento satisfatório para a produção de anti-soro. A titulação dos anti-soros foi realizada por ELISA indireto, obtendo-se reações positivas com a diluição máxima testada (1:70.000). Das 22 espécies vegetais utilizadas na gama de hospedeiros, foram infectadas plantas de Chenopodium quinoa e alguns cultivares de feijão e soja, conforme esperado para o BRMV. O isolado de BRMV foi transmitido pelo besouro crisomelídeo Cerotoma arcuata a uma taxa de 33,3%. A infecção simples de feijão 'Ouro Negro' e de feijão-vagem 'Novirex' levou a uma redução do peso das vagens por planta de 3,4% e 84,9%, respectivamente. Infecção mista do BRMV com o BCMV levou a uma redução do peso de vagens por planta de até 70,1% para 'Novirex' e de até 90,8% para 'Ouro Negro'. Resumo em inglês Bean plants of the cultivar Novirex, showing an atypical pod curling symptom without mosaic or leaf distortion, were collected in 2002 at Cordisburgo, MG. Previous studies identified the virus as an isolate of Bean rugose mosaic virus (BRMV). This work reports on the characterization of the isolate, including its purification and production of a polyclonal antiserum, determination of a partial host range, vector transmission, and an estimate of yield losses due to single (mais) or mixed infection with Bean common mosaic virus (BCMV). The protocol adopted for virus purification led to purified preparations with high yield, and the antisera obtained reacted with the maximum dilution tested (1:70.000) in indirect ELISA. From the 22 plant species tested as hosts, Chenopodium quinoa reacted with chlorotic local lesions, which evolved to mosaic and leaf distortion in non-inoculated leaves. Bean and soybean cultivars reacted with mosaic and leaf distortion of varying intensity, as expected for BRMV. The isolate was transmitted by Cerotoma arcuata to 33.3% of the inoculated plants. Single infection of 'Ouro Negro' and 'Novirex' beans caused a reduction in the total weight of pods per plant of 3.4% and 84.9%, respectively. Mixed infection with BCMV caused a reduction of pod weight per plant of up to 70.1% in 'Novirex' and up to 90.8% in 'Ouro Negro'.

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Proposta de um novo modelo experimental de indução de doença inflamatória intestinal/ Proposal of a new experimental model of inflammatory bowel disease induction

Repka, João Carlos Domingues; Caron, Pedro Ernesto; Belila, Rodrigo Theodoro; Antunes, Michel Wentz; Campos Filho, José Tárcio de; Bortolletto, Juliano Valério
2004-10-01

Resumo em português OBJETIVO: Avaliar as lesões intestinais em ratos imunizados com proteínas intestinais murinas. MÉTODOS: Preparou-se suspensão a 40% de cólon de ratos normais em PBS pH7,4, seguida de maceração, purificação, inativação e eletrofocalização de proteínas. Com esta suspensão 20 ratos Wistar foram imunizados conforme as seguintes fases: sensibilização via SC e IM com antígeno emulsificado em adjuvante completo de Freund. Reforços via IM com suspensão antigê (mais) nica pura. Nesta fase foram pesquisados anticorpos séricos anti-tecido colônico por imunodifusão e face à positividade, dez ratos foram submetidos à avaliação histológica do cólon e em outros dez, inoculação via IP com suspensão antigênica pura. Após seis dias apresentaram: blefarite, diarréia, apatia, hematoquesia e então submetidos à coleta de amostras do cólon para avaliação histológica. RESULTADOS: A suspensão antigênica apresentou oito bandas de proteínas, entre 100 a 420 kD. Nas amostras de cólon observaram-se histologicamente perda de criptas, edema da camada sub-mucosa e inflamação aguda. CONCLUSÃO: Foi possível reproduzir doença inflamatória intestinal em ratos a partir de imunização com antígenos protéicos intestinais da própria espécie. A presença de anticorpos séricos anti-intestino foi relacionada com as alterações histológicas encontradas no cólon de ratos imunizados. Resumo em inglês PURPOSE: To evaluate the bowel lesions of rats after immunization against self intestinal proteins. METHODS: A 40% colonic solution was made in pH 7,4 PBS, followed by maceration, purification, inactivation and SDS-PAGE electrophoresis. Twenty Wistar rats were submitted to the following immunization schedule: Subcutaneous and intramuscular sensibilization with antigen solution emulsified in Freund's complete adjuvant. Intramuscular booster with pure antigen suspension. In (mais) this phase, were investigated anti-intestinal antibodies by single radial immunodiffusion and histologic evaluation of colon samples. Challenge by intraperitoneal route with antigenic solution and clinical observation. The animals were sacrificed and had collected colon samples for histologic evaluation. RESULTS: The antigenic suspension presented eight protein with molecular weight between 80 and 420 kD. After six days of the intraperitoneal challenge they had presented: blepharitis, diarrhea, alopecia, apathy and hematochezia. Histological evaluation of this immunological IBD animal model showed ulceration of distal colon, mucosa leucocyte infiltration, edema in submucosa layer and significant crypts degeneration. Anti-intestinal antibodies were present in all of animals. CONCLUSION: It was concluded that was possible to reproduce IBD in rats, as well as the presence of anti-intestinal antibodies was related to histologic features of colon in immunizated rats.

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Inibição da tripsina de bicho-mineiro do cafeeiro por um fator não-protéico presente em extratos de folhas de mamona/ Coffee leaf miner trypsin inhibition with castor bean leaf extracts mediated by a non-protein agent

Rossi, Guilherme Duarte; Santos, Custódio Donizete dos; Cardoso, Maria das Graças; Corrêa, Angelita Duarte; Abreu, Celeste Maria Patto de; Paiva, Luciano Vilela
2010-04-01

Resumo em português Inibidores de tripsina representam uma estratégia de controle de insetos e, por isso, a identificação e caracterização desses inibidores são etapas muito importantes para que novas formas de controle de pragas sejam desenvolvidas. Os inibidores de tripsina atuam na digestão primária de proteínas e comprometem o processo digestivo por completo, reduzindo a disponibilidade de aminoácidos ao inseto. A incorporação de inibidores de tripsina na dieta de insetos-pra (mais) ga é uma forma de controle cuja eficácia foi verificada por diferentes autores. Este projeto foi conduzido a fim de se observar a eficiência de extratos de folhas de mamona na inibição "in vitro" de proteinases do tipo tripsina do bicho-mineiro do cafeeiro. Após testes realizados com os extratos de folhas de mamona não-fervidos e fervidos com e sem a adição de β-mercaptoetanol 0,2% (v/v) e mediante precipitações com acetona, verificou-se que o inibidor é uma molécula termoresistente e não-protéica. Desta forma, iniciou-se um processo de purificação da molécula inibidora por meio de cromatografia de adsorção com posterior análise em espectrômetro de massas. Os resultados dos testes de inibição indicaram a presença de um inibidor de tripsina eficaz contra o bicho-mineiro do cafeeiro nos extratos de folhas de mamona capaz de inibir 2,48 + 0,15 UTI, o que representa aproximadamente 40% de inibição. Em testes realizados com tripsina bovina observou-se que o extrato de folhas de mamona não apresenta poder de inibição sobre essa enzima. Resumo em inglês Trypsin inhibitors stand for a strategy of insect control and, therefore, the identification and characterization of these inhibitors are very important steps for new forms of pest control to be developed. Trypsin inhibitors act in the primary digestion of proteins and endanger the digestive process wholly, reducing the availability of aminoacids to the insect. The incorporation of trypsin inhibitors in the diet of pest insects is a control form whose efficacy was verifie (mais) d by different authors. In order to observe the efficiency of castor bean leaf extracts in inhibiting trypsin-like enzymes of the coffee leaf miner, an experiment was carried out with the purpose of observing an "in vitro" inhibition phenomenon. The results of the trypsin inhibition tests with normal and boiled with and without β-mercaptoethanol 0.2% (v/v) castor bean leaf extracts and the results of the acetone precipitation process indicated that the inhibitor is a heat-resistant molecule and it is not a protein. This way, the purification process was made by adsorption chromatography with later analysis in mass spectrometer. The reached results indicated that the presence of a trypsin inhibitor of the coffee leaf miner in the castor bean leaf extracts is capable of inhibiting 2.48 + 0.15 UTI, which stands for about 40% of inhibition. Tests performed with bovine trypsin indicated that the castor bean leaf extract have no inhibiting power on this enzyme.

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Diagnóstico e genotipagem do vírus da pseudoraiva por nested-PCR e análise de restrição enzimática/ Diagnosis and genotyping of pseudorabies virus by nested-PCR and restriction enzyme analysis

Fonseca Júnior, Antônio Augusto; Carmagos, Marcelo Fernandes; D'Ambros, Régia Maria Feltrin; Braga, Alexandre Carvalho; Ciacci-Zanella, Janice; Heinemann, Marcos Bryana; Leite, Rômulo Cerqueira; Reis, Jenner Karlisson Pimenta dos
2010-04-01

Resumo em português A pseudoraiva (PR) é uma enfermidade viral responsável por consideráveis perdas econômicas na indústria de suínos. O vírus da pseudoraiva (PrV) apresenta apenas um sorotipo, mas, por análise de restrição enzimática, foi classificado em quatro genótipos denominados I, II, III e IV. Os métodos usados para genotipagem dependem do isolamento do vírus, da purificação do DNA viral, da restrição enzimática do genoma completo e da visualização após eletrofor (mais) ese. O objetivo deste trabalho foi estabelecer um método mais rápido e sensível para detectar e genotipar o PrV por nested-PCR e análise de restrição enzimática. Vinte isolados do PrV das regiões Sul e Sudeste do Brasil e a estirpe padrão Shope foram replicadas em células PK-15 e submetidas à nested-PCR para o gene da glicoproteína E. Além desses vírus previamente isolados, foram avaliadas 75 amostras clínicas de cérebro de suíno em um total de 25 animais positivos para a PR no isolamento e na soroneutralização viral e 50 amostras negativas provenientes de animais negativos na soroneutralização viral e de granjas sem histórico de PR. Todas as amostras clínicas tiveram resultados compatíveis com o isolamento e a soroneutralização, e a totalidade das amostras positivas foi classificada como genótipo II. A sensibilidade analítica da nested-PCR foi de 10-1,3 TCID50 mL-1. A combinação da nested-PCR e da restrição enzimática foi capaz de detectar e genotipar o vírus com resultados em um a dois dias, sendo mais rápida que os métodos convencionais de restrição do genoma completo que podem demorar até sete dias. Resumo em inglês Pseudorabies is a disease caused by Suid herpesvirus 1 (PrV) and is responsible for considerable economic losses in the swine industry. The PrV has only one serotype, but based on RFLP (restriction fragment length polymorphism) the virus was divided into four genotypes named I, II, III, IV. The classical methods for PrV genotyping usually require virus isolation, DNA purification enzyme restriction analysis and a long electrophoresis. The aim of this research was to descr (mais) ibe a faster and more sensitive method to detect and genotype PrV based on nested-PCR and restriction enzyme analysis. Twenty PrV isolates from south and southeast regions of Brazil, and the standard strain Shope were grown in PK-15 cells and submitted to PCR for glycoprotein E gene amplification. Additionally were tested 75 clinical samples (swine brain), with 25 positives for virus isolation and seroneutralization, and 50 negatives from a flock free PR with negative results in seroneutralization test. There was 100% of agreement between results of nested-PCR and virus isolation and seroneutralization and all samples detected were classified as genotype II. The nested-PCR, combined with restriction enzyme analysis, was able to detect and genotype PrV in 1-2 days with a sensitivity of 10-1,3 TCID50 mL-1. It was faster than classical methods described in the literature that require at least 7 days to be completed.

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Avaliação de dois métodos de extração de DNA de material parafinado para amplificação em PCR/ Evaluation of two methods of DNA extraction from paraffin-embedded material for PCR amplification

Simonato, Luciana Estevam; Garcia, José Fernando; Nunes, Cáris Maroni; Miyahara, Glauco Issamu
2007-04-01

Resumo em português INTRODUÇÃO: Diversos métodos para extração de DNA a partir de tecidos biológicos inclusos em parafina encontram-se descritos na literatura, sendo o sucesso desse procedimento de grande importância para a realização de métodos moleculares de diagnóstico empregando a reação em cadeia da polimerase (PCR). OBJETIVO: Este estudo avaliou dois métodos de extração de DNA de material parafinado, visando à amplificação do DNA genômico pela técnica da PCR. MATER (mais) IAL E MÉTODO: Foram utilizadas 35 amostras de casos de carcinoma epidermóide de assoalho bucal diagnosticados e tratados no Centro de Oncologia Bucal da Universidade Estadual Paulista (Unesp). Os métodos de extração de DNA avaliados incluíram: 1. digestão com proteinase K seguida por purificação com Chelex 100® (BioRad); e 2. sistema QIAamp DNA minikit® (Qiagen). O DNA obtido foi quantificado por espectrofotometria e amplificado pela técnica da PCR, utilizando-se oligonucleotídeos iniciadores para betaglobina. RESULTADOS: A concentração de DNA obtido do material extraído com o primeiro método apresentou média de 120,62 ng/µl com razão entre as leituras das absorbâncias 260/280 variando de 0,8 a 1,41. Para as amostras extraídas com o segundo procedimento, o rendimento médio foi de 67,38 ng/µl, no entanto a razão 260/280 variou entre 1,11 e 2,53. O material foi submetido à PCR e, das 35 amostras extraídas com cada método, respectivamente, 29 e 30 apresentaram sinal positivo. CONCLUSÃO: Os dois métodos utilizados para obtenção de DNA de material parafinado apresentaram desempenho semelhante, revelando que ambos têm potencial para auxiliar na prática da biologia molecular diagnóstica, assim como no estudo diagnóstico retrospectivo em material parafinizado. Resumo em inglês BACKGROUND: There are several methods for DNA extraction from formalin-fixed paraffin-embedded tissues reported in the literature. High success rate on this procedure is important for the use of molecular diagnostic methods based on the polymerase chain reaction (PCR). OBJECTIVE: Two methods of DNA extraction from paraffin-embedded samples were tested aiming at PCR amplification of genomic DNA. MATERIAL AND METHOD: Thirty-five samples were obtained from patients with squa (mais) mous cell carcinoma of mouth floor treated at the Oral Oncology Center in Universidade Estadual Paulista. The DNA extraction methods included: 1. proteinase K digestion followed by Chelex 100® (BioRad) purification and 2. QIAamp DNA minikit® system (Qiagen). Purified DNA was quantified by spectrophometry and a beta-globin gene fragment was amplified using PCR. RESULTS: The DNA concentration from samples applied to the first method presented an average of 120.62 ng/µl and absorbance ratio 260/280 varying between 0.8 and 1.41. From the samples extracted using the second procedure, the mean DNA concentration was 67.38 ng/µl, with absorbance ratio varying between 1.11 and 2.53. DNA samples were submitted to PCR and from 35 samples extracted with both methods, respectively, 29 and 30 were successfully amplified for the beta-globin gene. CONCLUSION: Both methods used to obtain genomic DNA from formalin-fixed paraffin-embedded tissues presented similar performance, revealing their potential to be included in diagnosis of molecular biology, as well as in retrospective studies using archived paraffin-embedded samples.

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Distribuição de Cr, Ni, Cu, Cd e Pb em frações húmicas de diferentes tamanhos moleculares extraídas de amostras de água e de sedimentos do reservatório de captação de água superficial Anhumas - Araraquara-SP/ Distribution of Cr, Ni, Cu, Cd and Pb in different molecular size of humic fractions extracted from water and sediment samples collected at Anhumas reservoir

SANTOS, Ademir dos; REZENDE, Maria Olímpia de Oliveira; ROSA, André Henrique; ZARA, Luiz Fabrício; ROCHA, Julio Cesar
2002-01-01

Resumo em português Estudou-se a distribuição de Cr, Ni, Cu, Cd e Pb em frações de substâncias húmicas (SH) de diferentes tamanhos moleculares. As SH foram extraídas de amostras de água (SHA) e de sedimentos de superfície (SHSS), interface/água (SHSI) e fundo (SHSF) coletados no reservatório de captação de água superficial Anhumas, localizado no município de Araraquara-SP. Para a extração das SH utilizaram-se os procedimentos recomendados pela Sociedade Internacional de Subs (mais) tâncias Húmicas. Após purificação por diálise, as SH foram fracionadas com base no tamanho molecular utilizando-se sistema de fracionamento seqüencial por ultrafiltração e fluxo tangencial. O fracionamento das amostras de SHA permitiu caracterizar uma distribuição de massa relativamente uniforme dentre as frações de diferentes tamanhos moleculares, com valores maiores nas frações F2 (20,8%) e F4 (23,8%). Exceto para os íons Pb(II) e Cu(II) os quais apresentaram concentrações relativamente mais altas nas frações F2 e F4, respectivamente, de maneira geral, crômio, níquel, cádmio e chumbo têm distribuições similares nas cinco frações com tamanhos moleculares maiores e médios (F1 a F5). Quanto às distribuições de massa nas diferentes frações de substâncias húmicas extraídas de amostras de sedimento de superfície (SHSS), sedimento interface/água (SHSI) e sedimento de fundo (SHSF), as três amostras apresentaram 42-48% das SH nas frações com maiores tamanhos moleculares (F1 e F2), 29-31% nas frações intermediárias (F3 e F4) e 13-20% nas frações com menores tamanhos moleculares (F5 e F6). De modo geral, caracterizaram-se para os íons metálicos, distribuições similares dentre as respectivas frações F1 a F6. Exceções para Pb(II) e Ni(II) em sedimento de superfície com concentrações relativamente menores nas frações F2 e F4, respectivamente. Resumo em inglês In this work was studied the distribution of Cr, Ni, Cu, Cd and Pb in humic fractions with different molecular size. The HS were extracted from waters (AHS), surface sediments (HSSS), interface water sediment (HSIS) and bottom sediment (HSBS) collected in the Anhumas surface water collection reservoir, located in the district of Araraquara - São Paulo/State - Brazil. The humic substances were extracted by procedures recommended by International Humic Substances Society ( (mais) IHSS). After purification by dialysis, the humic substances were fractionated using a multistage tangential flow ultrafiltration system. The fractionation patterns of HS characterized a mass distribution relatively uniform among the fractions with different molecular sizes, with larger values in the fractions F2 (20,8%) and F4 (23,8%). Except for the ions Pb(II) and Cu(II), which presented relatively higher concentrations in the fractions F2 and F4, respectively. In general, chromium, nickel, cadmium and lead have similar distributions in the five fractions with larger and medium molecular sizes (F1 to F5). With relation to the mass distributions in the different humic substances fractions extracted from sediment samples collected at three depth, they presented 42-48% of HS in the fractions with larger molecular sizes (F1 and F2), 29-31% in the middle fractions (F3 and F4) and 13-20% in the fractions with smaller molecular sizes (F5 and F6). In general, the metallic ions presented distributions similar among the respective fractions F1 to F6. Exceptions for Pb(II) and Ni(II) in surface sediment with concentrations relatively smaller in the fractions F2 and F4, respectively.

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Ácido clavulânico e cefamicina c: uma perspectiva da biossíntese, processos de isolamento e mecanismo de ação/ Clavulanic acid and cephamicin c: a perspective of the biosynthesis, isolation and action mechanism

Oliveira, Jaine H. H. Luiz de; Granato, Ana Claudia; Hirata, Daniela B.; Hokka, Carlos O.; Barboza, Marlei; Trsic, Milan
2009-01-01

Resumo em inglês The present article reviews different aspects of the chemistry of two widely used β-lactam antibiotics Clavulanic Acid and Cephamycin C. The article discusses important details of the biosynthesis of these compounds, their action mechanism and, principally, the methods employed in their isolation and purification, in accordance with the available literature. Despite the large quantity of available articles and patents concerning β-lactam antibiotics, those which (mais) describe the isolation and purification of Clavulanic Acid and Cephamycin C are rare. Overall, the intention of this article is to discuss the up-to-date scientific research related to the compounds under review.

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Xerogel p-anisidinapropilsílica: estudo da estabilidade térmica e da resistência à lixiviação com solventes/ p-anisidinepropylsilica xerogel: thermal stability and resistance to leaching by solvents

Franken, Leonardo; Santos, Lisiane S. dos; Caramão, Elina B.; Costa, Tania M. H.; Benvenutti, Edilson V.
2002-07-01

Resumo em inglês The xerogel p-anisidinepropylsilica was obtained. This solid presents some residual paraffin and also a small fraction of high organofunctionalized material that was leached in polar solvent. The xerogel purification could be achieved by exhaustively washing with hexane and dichloromethane solvents, or submitting the xerogel to thermal treatment up to 300 ºC, in vacuum. The resulting purified xerogel material present an appreciable thermal stability and resistance to leaching by solvents.

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Utilização de zeólitas sintetizadas a partir de xisto retortado na remoção de arsênio em águas contaminadas/ Use of zeolites synthesized from oil shale ash for arsenic removal from polluted water

Fernandes-Machado, Nádia Regina Camargo; Miotto-Bigatão, Denise Maria Malachini
2007-10-01

Resumo em inglês The solid by-product of the oil shale processing (PETROBRAS - Brazil) was used as raw material to synthesize zeolites A and faujasite. Alkaline fusion followed by hydrothermal treatment was the synthesis procedure used, and five different starting material compositions were obtained. The more crystalline zeolite-type materials synthesized, the pretreated oil shale ash and commercial zeolites were used as adsorbents in the purification of pollutant solutions with arsenic. (mais) The zeolite-type material composed of a mixture of zeolite A (42.6%) and faujasite (52.9%) presented an ion exchange capacity comparable to the pure zeolites A and faujasite, much better than the pretreated ash.

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Uso de sementes de Moringa oleifera para tratamento de águas superficiais/ The use of Moringa oleifera seeds for treatment of surface water

Paterniani, José E. S.; Mantovani, Marcia C.; Sant'Anna, Marcia R.
2009-12-01

Resumo em português Visou-se, no presente trabalho, estudar o uso de sementes de Moringa oleifera para tratamento de água superficiais por filtração lenta direta em mantas sintéticas não tecidas e por sedimentação simples. Nos países em desenvolvimento, como o Brasil, as tecnologias para tratamento de água devem proporcionar às pessoas que habitam em regiões carentes de água potável, a possibilidade de sua clarificação, de maneira fácil, auto-sustentável e a baixo custo. Os (mais) estudos referidos no presente trabalho sugerem haver potencial de aplicação da Moringa oleifera. Utilizaram-se, no tratamento da água com Filtração Lenta Direta, um floculador constituído de garrafa Pet e três filtros, do mesmo material, com mantas sintéticas não tecidas, empregadas na filtração lenta, com vazão de água afluente aos filtros de aproximadamente 4 m³ m-2 d-1. No processo de tratamento de água em que se avaliou a eficiência da operação de sedimentação, o floculador era de garrafas pet e um tanque de sedimentação. A água bruta empregada na realização dos experimentos foi a água sintética obtida por Bentonita, a qual apresenta características qualitativas adequadas aos ensaios. Resumo em inglês This research had as its main purpose the evaluation of the use of natural coagulate, obtained from Moringa oleifera seeds and their efficiency in the slow direct filtration and sedimentation processes for the treatment of highly turbid water. In developing countries such as Brazil, technologies for water treatment must provide the possibility of water purification in an easy, self-maintainable and low cost process, for people who live in regions characterized by shortage (mais) of drinking water. Studies so far suggest that there is a potential application of Moringa oleifera in the water treatment with slow direct filtration. A flocker composed of a PET bottle and three filters composed of similar bottles with non-woven synthetic blanket were used in the slow filtration, with a discharge of affluent water to the filters of approximately 4 m³ m-2 d-1. In the water treatment process evaluation of the sedimentation efficiency, a flocker composed of PET bottles and a sedimentation tank was used. The water used for these experiments was the synthetic water obtained by bentonite, which presents adequate qualitative characteristics for the analysis.

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Recuperação de 241Am de para-raios e detectores de fumaça/ Recovery of 241Am from lightning-conductors and smoke detectors

Clain, Almir Faria; Aquino, Josilto Oliveira de; Domingues, Maria de Lourdes Freitas
1999-09-01

Resumo em inglês A method is described for recovering and purifying 241Am from lightning-conductors and smoke detectors. The method is based on the precipitation of silver, as AgCl, the main impurity, and extraction of americium with TBP. Further purification with ion-exchange resin is also used. The results have shown that by this method the americium is obtained with high purity.

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Reator de membrana enzimático e fluidos supercríticos: associação de processos/ Enzymatic membrane reactor and supercritical fluids: process association

Moura, Juliana Maria Leite Nóbrega de; Ribeiro, Ana Paula Badan; Grimaldi, Renato; Gonçalves, Lireny Aparecida Guaraldo
2007-08-01

Resumo em inglês The aim of this work is to present the new applications of membrane technology in fat and oil processing, with emphasis on development and applications of the enzymatic membrane reactor and its association with extraction and purification technology by supercritical fluids (SCF). Combining the extraction by SCFs and the separation by membranes allows the integration of extractions reactions with selective separation by membranes through filtration of the supercritical mix (mais) ture (SCF + extracted solutes). This association provides important energy savings regarding the SCF recompression costs.

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Purification of plasmid DNA vectors by aqueous two-phase extraction and hydrophobic interaction chromatography

Trindade, Inês P.; Diogo, Maria M.; Prazeres, Duarte M. F.; Marcos, João Carlos

The current study explores the possibility of using a polyethyleneglycol(PEG)/ammonium sulphate aqueous two-phase system (ATPS) as an early step in a process for the purification of a model 6.1 kbp plasmid DNA (pDNA) vector. Neutralised alkaline lysates were fed directly to ATPS. Conditions were sel...

DRIVER (Portuguese)

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Optimization of the mobile phase composition for preparative chiral separation of flurbiprofen enantiomers

Ribeiro, A.E.; Graça, N.S.; Pais, L.S.; Rodrigues, A.E.

This work presents the experimental and simulation results obtained for the optimization of the mobile phase composition for the preparative separation of flurbiprofen enantiomers by liquid chromatography using an amylose-based chiral stationary phase (Chiralpak AD). The experimental work carried ou...

DRIVER (Portuguese)

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Obtenção do 2-etóxi-2-metilpropano grau analítico a partir do produto comercial/ Production of analytical grade 2-ethoxy-2-methylpropane from a commercial product

Venturi, Vanessa; Cataluña, Renato
2010-01-01

Resumo em inglês Ethyl tert-butyl ether (ETBE) is produced by commercial processes to a purity of up to 96%. In recent years, several companies have started to produce ETBE, increasing the demand for standards with higher grades of purity in the area of production control and final product certification. The present work involved the development of a purification protocol for obtaining high purity ETBE from the commercial product used in the formulation of automotive gasolines, using a sp (mais) inning band distillation column. The ETBE thus produced showed a purity of over 99.5%, its main contaminant being its isomer, ethyl-sec-butyl ether (ESBE).

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Níveis e origem da acidificação das chuvas na região do Rio Grande, RS/ Sources and levels of rain acidity in the region of the Rio Grande city, RS, Brazil

Mirlean, Nicolai; Vanz, Argeu; Baisch, Paulo
2000-10-01

Resumo em inglês The current article presents the first data on physical-chemical parameters of wet precipitation collected at single collection point in the city of Rio Grande, during the period of 12 months in 1997-1998. The employed technique of rainwater separation into several portions made clear the process of the atmosphere self-purification during a precipitation event. The pH of rainwater depends on the extent of industrial emissions and increases during a precipitation event. Th (mais) e first portion of rainwater shows an obvious neutralizing effect of soil and ocean-derived components, whose intensity depends on the duration of the preceding dry period.

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Moderna visão da evolução da virulência/ A modern view of the evolution of virulence

Giorgio, Selma
1995-10-01

Resumo em português Atualmente considera-se que parasitas devem evoluir em direção à virulência reduzida, pois patógenos virulentos apresentam maiores probabilidades de levarem seus hospedeiros e eles próprios à extinção. A virulência é assim considerada estágio primitivo da associação parasita-hospedeiro. A validade dessas idéias tem sido questionada. Portanto, fez-se revisão dos estudos recentes que sugerem que parasitas não evoluem necessariamente em direção à reduzida (mais) virulência. Do ponto de vista da medicina darwinista, na evolução da virulência podem haver muitas trajetórias coevolutivas possíveis, que dependerão da história natural do parasita, do comportamento do hospedeiro e da via de transmissão. Resumo em inglês According to the prevailing, traditional view parasites should develop reduced virulence towards their hosts, because more virulent pathogens are more likelyto drive the hosts, and thus themselves to extinction. Virulence is considered to be a primitive stage of a parasitive-host association. However the usefulness and validity of this view have been questioned. Recent studies suggest that parasites need not necessarily evolve towards reduced virulence. The points of view (mais) of Darwinian medicine in the direction of the evolution of virulence there may be many possible revolutionary trajectories, depending on the details of the parasite's life-history, the host's behavior and the transmissibility of the parasite. Theoretical and epidemiological evidences indicate that pathogens transmitted by arthropod vectors are significantly more lethal to humans than those transmitted by personal contac. Water borne enteric pathogens are less virulent after purification of water supplies. Recent experiments also support the emerging theory that parasitism can evolve to be either more or less virulent in a long-term host, depending on the way the parasite is transmitted to the host and on the environment in which they live.

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Moderna visão da evolução da virulência/ A modern view of the evolution of virulence

Giorgio, Selma
1995-10-01

Resumo em português Atualmente considera-se que parasitas devem evoluir em direção à virulência reduzida, pois patógenos virulentos apresentam maiores probabilidades de levarem seus hospedeiros e eles próprios à extinção. A virulência é assim considerada estágio primitivo da associação parasita-hospedeiro. A validade dessas idéias tem sido questionada. Portanto, fez-se revisão dos estudos recentes que sugerem que parasitas não evoluem necessariamente em direção à reduzida (mais) virulência. Do ponto de vista da medicina darwinista, na evolução da virulência podem haver muitas trajetórias coevolutivas possíveis, que dependerão da história natural do parasita, do comportamento do hospedeiro e da via de transmissão. Resumo em inglês According to the prevailing, traditional view parasites should develop reduced virulence towards their hosts, because more virulent pathogens are more likelyto drive the hosts, and thus themselves to extinction. Virulence is considered to be a primitive stage of a parasitive-host association. However the usefulness and validity of this view have been questioned. Recent studies suggest that parasites need not necessarily evolve towards reduced virulence. The points of view (mais) of Darwinian medicine in the direction of the evolution of virulence there may be many possible revolutionary trajectories, depending on the details of the parasite's life-history, the host's behavior and the transmissibility of the parasite. Theoretical and epidemiological evidences indicate that pathogens transmitted by arthropod vectors are significantly more lethal to humans than those transmitted by personal contac. Water borne enteric pathogens are less virulent after purification of water supplies. Recent experiments also support the emerging theory that parasitism can evolve to be either more or less virulent in a long-term host, depending on the way the parasite is transmitted to the host and on the environment in which they live.

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Implantação de um programa de gerenciamento de resíduos químicos e águas servidas nos laboratórios de ensino e pesquisa no CENA/USP/ Establishment of a management program for chemical residues and waste water, generated in laboratories of the centro de energia nuclear na agricultura (CENA/USP)

Tavares, Glauco Arnold; Bendassolli, José Albertino
2005-08-01

Resumo em inglês The aim of this work is to establish a program for the treatment of chemical residues and waste waters at the Centro de Energia Nuclear na Agricultura (CENA/USP), for environmental preservation and training of staff. Five tons of stored residues and the ones currently generated in the laboratories have to be treated. Rational use of water is also part of the program. The traditional purification by distillation has been replaced by purification with ion exchange resins. Lower energy consumption and better water quality were achieved.

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Hidrogéis superabsorventes a base de acetato de celulose modificado por dianidrido 3,3', 4,4' benzofenona tetracarboxílico (BTDA): síntese, caracterização e estudos físico-químicos de absorção/ Synthesis of hydrogels of cellulose acetate (AC) cross-linked with 3,3', 4,4' benzophenonetetracarboxylic dianhydride (BTDA): characterization and adsorption physicochemical study

Botaro, Vagner R.; Santos, Cláudio G.; Oliveira, Victor A.
2009-01-01

Resumo em português Este trabalho descreve as sínteses de hidrogéis superabsorventes a base de acetato de celulose (AC), com grau de substituição 2.5, reticulado com dianidrido 3, 3', 4, 4' benzofenona tetracarboxílico (BTDA). As caracterizações das matérias primas foram realizadas por análises térmicas (TG/DTG) e espectroscopia na região do infravermelho (FTIR). O grau de substituição do acetato de celulose foi determinado por via úmida. A confirmação da reação de esterifi (mais) cação foi possível a partir da técnica de FTIR, espectroscopia UV-vis e análises térmicas (TG/DTG). A presença de poros no novo material foi analisada por microscopia eletrônica de varredura (MEV) e porosimetria (BET). A influência da concentração de dianidrido no meio reacional foi investigada, bem como a influência do aumento no grau de reticulação no comportamento térmico do material. Foram obtidas isotermas de absorção de água em diferentes temperaturas para os hidrogéis com diferentes graus de reticulação. Os coeficientes de difusão dos géis foram determinados, juntamente com a energia de ativação para o processo de inchamento usando a equação de Arrhenius. A entalpia de mistura do sistema gel-água foi determinada pela medida da quantidade máxima de água absorvida no equilíbrio a diferentes temperaturas, empregando a equação de Gibbs/Helmholtz. Resumo em inglês This work describes the synthesis of hydrogels of cellulose acetate (AC), with a nominal degree of substitution DS = 2.5, cross-linked with 3,3',4,4' benzophenonetetracarboxylic dianhydride (BTDA). The raw materials were characterized by thermal analysis (TG/DTG) and by Fourier transform infrared spectroscopy (FTIR). DS of cellulose acetate was determined by titration with a known amount of standard NaOH solution. Hydrogels of BTDA were synthesized with 0.5, 0.75 and 1.0 (mais) mol of BTDA/mol of AC. FTIR proved to be a suitable method to monitor the course of reactions and the progress of purification. UV-vis spectroscopy and analysis confirmed the esterification of the free hydroxyl groups. Surface modification of AC structure after the cross-linking reaction was analyzed by Scanning Electron Microscope (SEM) and density and porosity of the hydrogels were determined by BET. The influence of the concentration of dianhydride on the time necessary for formation of the gel was investigated. The influence from the increase in the degree of cross-linking on the thermal behavior of the material was also documented. Water absorption isotherms were obtained for hydrogels with different reticulating agents and reticulation degrees at different temperatures. The Arrhenius equation was used to determine the diffusion coefficient of the different hydrogels at distinct temperatures and the threshold energy for the swelling process. The enthalpy of mixture was determined through the measurement of the maximum quantity of water absorbed at equilibrium at different temperatures, with the Gibbs/Helmholtz equation.

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Extração e isolamento de diosgenina de barbasco/ Extraction and isolation of diosgenin from yams

Zullo, Marco Antonio Teixeira; Ramos, Maria Tereza Baraldi; Monteiro, Domingos Antonio; Godoy Jr., Gentil
1987-01-01

Resumo em português Dioscorea composita Hemsl. e D. floribunda Mart. & Gal., introduzidas no Brasil, mostraram teores de diosgenina de 3,15 ± 1,41% e 4,72 ± 0,24% na matéria seca dos tubérculos, com pureza mínima de 54,7 e 39,2% respectivamente. lamogenina também ocorre nos tubérculos de ambas as espécies. O teor de diosgenina em D. composita é crescente com a idade da planta, mostrando um máximo pronunciado em torno do terceiro ano de cultivo e estabilizando-se ao redor do sexto ano. Resumo em inglês Dioscorea composita Hemsl. and D. floribunda Mart. & Gal., introduced in Brazil, showed diosgenin contents of 3.15 ± 1.41% and 4.72 ± 0.24% on dried tubers, and minimum purities of 54.7% and 39.2%, respectively. Yamogenin co-occurs in the tubers of both species. The diosgenin content in D. composita increases according to the age of the plant, showing a pronounced maximum around the third year and stabilizing around the sixth year of cultivation. Methods for extraction, isolation and purification are also described.

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Extração de esterase de fígado suíno (PLE)/ Pig liver esterase (PLE) extraction

Trevisan, Henrique Celso; Medeiros, João Batista de; Lisboa, Helen Cristina Fávero
2006-07-01

Resumo em inglês A simple, fast and low-cost methodology was optimized, seeking preparation of a crude pig liver esterase (PLE) concentrate. Basically, the method consisted of the following steps: liver homogenization, acetone washing, enzyme extraction and purification/concentration. Starting from 1 kg of fresh liver more than 200 kU of PLE suspension were obtained after 8 hours, at an estimated cost of US$0.21/kU. The PLE concentrate thus obtained was stable, showing 96-100% of the initial activity after 7 months in refrigerator at 4°C.

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Enriquecimento de compostos fenólicos de folhas de Inga edulis por extração em fase sólida: quantificação de seus compostos majoritários e avaliação da capacidade antioxidante/ Purification of phenolic compounds from Inga edulis leaves using solid-phase extraction: major compounds quantification and antioxidant capacity evaluation

Dias, Aécio Luís de Sousa; Souza, Jesus Nazareno Silva de; Rogez, Hervé
2010-01-01

Resumo em inglês A phenolic fraction was obtained from of the acetone-water-acetic acid extract of Inga edulis leaves, by liquid-liquid partition and SPE-C18 cartridges. This method provided an increase of 108, 66, 51, 50 and 36% of flavonols, proanthocyanidins, total polyphenols, gallotannins and flavanols, respectively. The major phenolics in purified fraction were procyanidin B2, catechin and myricetin-3-O-α-L-rhamnopyranoside, which achieved increases of 111, 47 and 45%, respecti (mais) vely, after SPE. Acid hydrolysis confirmed the presence of procyanidins, prodelphinidins and glycosylated flavonoids.

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ELISA indireto para detecção de IgG antivírus da doença de Newcastle em soro de codorna/ Indirect ELISA for the detection of IgG specific to Newcastle disease virus in quail serum

Oliveira, D.D.; Folgueras-Flatschart, A.V.; Flatschart, R.B.; Resende, J.S.; Abreu, J.T.; Martins, N.R.S.
2007-10-01

Resumo em inglês An indirect ELISA for the detection of japanese quail IgG specific to Newcastle disease virus (NDV) was developed. The secondary anti-quail IgG was produced in Balb/c mice, by inoculating Freund's complete adjuvant emulsified japanese quail-IgG extract. The purification of IgG was achieved using the caprilic acid method. The ELISA was compared to the haemagglutination-inhibition (HI) test for antibodies to NDV. ELISA cut-off point was established through TG-ROC analysis. (mais) Total correlation was observed between the ELISA and the HI, being the ELISA efficient in the identification of positive and negative sera, with high sensitivity and specificity (100%). These results validate the use of the indirect ELISA as an alternative for the detection of NDV-specific IgG in japanese quail sera, with the advantage of high sensitivity and automation.

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Determinação eletroanalítica de corante reativo presente como contaminante em proteínas purificadas por cromatografia de afinidade/ Electroanalytical determination of a reactive dye currently used in affinity chromatography for protein purificaton

Osugi, Marly E.; Guaratini, Claudia C. I.; Stradiotto, Nelson R.; Zanoni, Maria Valnice Boldrin
2004-06-01

Resumo em inglês Procion Green HE-4BD is a reactive dye currently used in affinity purification, and commonly present as a contaminant in the final biological preparation. An assay method is described to determine trace amounts of the dye in the presence of human serum albumin(HSA) and leakage from agarose as affinity sorbent by cathodic stripping voltammetry. The proposed method is based on the reductive peak at -0.55V in B-R buffer pH 3 (E=0V and t= 240s), obtained when samples of HSA 2 (mais) % (m/v) containing dye concentrations in sodium hydroxide pH 12 are submitted to a heating time of 330 min at 80 ºC. Linear calibration curves can be obtained for RG19 dye concentrations from 5x10-9 mol L-1 to 8 x10-8 mol L-1. The detection limit (3sigma) is 1x10-9 mol L-1.

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Detecção de contaminantes em espécie bioindicadora (Corbicula fluminea) - Rio Ribeira de Iguape - SP/ Dectection of contaminants in a bioindicator species (Corbicula fluminea) - Ribeira de Iguape River, Sao Paulo State

Guimarães, Valéria; Sígolo, Joel Barbujiani
2008-01-01

Resumo em inglês The study assessed heavy metal concentrations in the tissue samples of Corbiculafluminea, by ICP-OES. In the tissues, average levels of 23.99 µg/g of Cu, 144.21 µg/g of Zn, 0.71 µg/g of Cd, 7.10 µg/g of Cr and 2.41 µg/g of Pb were detected ahowing that this last value is high and above the ANVISA reference (2.00 µg/g) for fish and other products. The results suggest that natural processes occuring in the Ribeira de Iguape River are not sufficient for purification so that metals remain in the water and can accumulate in the trophic chain.

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Desenvolvimento de metodologia para determinação de piretroides em manteiga/ Development of a metodology for analysis of pyrethroids in butter

Marthe, Deyse de Brito; Bittencourt, Leila Moreira; Queiroz, Maria Eliana Lopes Ribeiro de; Neves, Antônio Augusto
2010-01-01

Resumo em inglês The objective of this study was to evaluate the use of the matrix solid-phase dispersion technique associated with purification at low temperature for the determination of pyrethroids in butter. Evaluated parameters included: sample/adsorbent ratio, type of adsorbent and extractor solvent. The optimized method was validated based on predetermined requirements. The detection limits of the pyrethroids cypermethrin and deltamethrin were 0.082 and 0.11 μg g-1, and quanti (mais) fication limit were 0.28 and 0.32 μg g-1, respectively, with extraction percentages near 90% and coefficients of variation less than of 10%..

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Descrições de técnicas da química na produção de bens de acordo com os relatos dos naturalistas viajantes no Brasil colonial e imperial/ Early chemistry techniques as described in the chronicles written by travelling naturalists who explored colonial and imperial Brazil

Vita, Soraya; Luna, Fernando J.; Teixeira, Simonne
2007-10-01

Resumo em inglês European naturalists explored Brazil in long scientific expeditions and published accounts that make up a rich and still largely untapped historiographic source for the understanding of the history of chemistry. The production of indigo dye, the manufacture of limestone, extraction and purification of saltpeter and the production of salt are discussed. Lime was used to whitewash walls and, mixed with whale oil, as cement to glue stones in buildings of the colonial period. (mais) It was prepared by burning seashells in specifically designed ovens. Saltpeter was produced by reacting naturally occurring calcium and magnesium nitrate with potassium-rich wood ashes to yield KNO3. NaCl was obtained by evaporating seawater under the sun. Indigo, a native plant, was cultivated and processed to produce the renowned dye, which was exported to Europe.

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Cromatografia de afinidade por íons metálicos imobilizados (IMAC) de biomoléculas: aspectos fundamentais e aplicações tecnológicas/ Immobilized metal-ion affinity chromatography (IMAC) of biomolecules: fundamental aspects and technological applications

Bresolin, Igor Tadeu Lazzarotto; Miranda, Everson Alves; Bueno, Sônia Maria Alves
2009-01-01

Resumo em inglês Immobilized Metal Ion Affinity Cromatography - IMAC - is a group-specific based adsorption applied to the purification and structure-function studies of proteins and nucleic acids. The adsorption is based on coordination between a metal ion chelated on the surface of a solid matrix and electron donor groups at the surface of the biomolecule. IMAC is a highly selective, low cost, and easily scaled-up technique being used in research and commercial operations. A separation (mais) process can be designed for a specific molecule by just selecting an appropriate metal ion, chelating agent, and operational conditions such as pH, ionic strength, and buffer type.

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Caracterização da pureza de fosfatidilcolina da soja através de RMN de ¹H e de 31P/ Characterization of soybean phosphatidylcholine purity by ¹H and 31P NMR

Mertins, Omar; Sebben, Marcelo; Henrique Schneider, Paulo; Pohlmann, Adriana Raffin; Silveira, Nádya Pesce da
2008-01-01

Resumo em inglês A strategy is proposed to evaluate the purity of phosphatidylcholine from soybean lecithin, obtained by extraction or column chromatography, using the integrals ratio of ¹H NMR spectra. Integrals of methylene signals, around 1.3 and 1.6 ppm, are added and divided by the integral of the choline methyl groups, around 3.3 ppm. Before purification, a ratio of 19.68±1.37 was determined. Using extraction, a ratio of 10.70±0.61 was found, while from column chromatography, a v (mais) alue of 2.99±0.25 was detected. 31P NMR of standard phosphatidylcholine showed signals at -0.2 and -0.9 ppm, whereas the purified one showed a single signal at -0.9 ppm.

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Capacidade da lagoa de estabilização, integrante de um sistema piloto, na remoção da carga orgânica da água residuária do processamento do café por via úmida/ Capability of a stabilization pond, part of a pilot system, of removing the organic load of wet coffee processing wastewater

Silva, Júlia Ferreira da; Campos, Cláudio Milton Montenegro
2010-12-01

Resumo em português O processamento do café por via úmida, além de aumentar a eficiência para se obter cafés de melhor qualidade, diminui consideravelmente os custos de secagem e ainda, reduz o espaço ocupado no terreiro. Porém, esse tipo de processamento gera grandes quantidades de águas residuárias, que devem sofrer algum tipo de tratamento antes de serem lançadas em corpos hídricos. Nesta pesquisa, objetivou-se monitorar a Lagoa de Estabilização integrante desse sistema, aval (mais) iar a sua eficiência na remoção da carga orgânica afluente e desenvolver um modelo de ajuste para descrever a autodepuração ocorrida. Para esta pesquisa, foram considerados 300,200 litros de frutos do cafeeiro, da espécie Coffea arabica L., processados, por via úmida. A carga média diária foi de 136 kgDQO d-1, encaminhada para um sistema piloto de tratamento de água residuária do processamento do café. O monitoramento foi realizado por meio de análises químicas e físico-químicas e o modelo de ajuste foi desenvolvido a partir do cálculo do balanço hídrico, das equações de estimativa teórica de remoção de DQO e das análises de DQO realizadas. O efluente da lagoa de estabilização apresentou concentração inicial de DQO de 7,100 mg L-1 e final de 100 mg L-1. Ficou constatado que a lagoa foi a unidade de tratamento que reduziu em cerca de 80% a concentração de matéria orgânica afluente. O modelo de ajuste desenvolvido apresentou coeficiente de ajuste satisfatório (r² = 0,8015). Resumo em inglês Wet coffee processing, besides its efficiency in getting better coffee quality, also minimizes considerably drying costs, and moreover reduces the space due to the ground-flour spreading seeds. However, this type of processing produces large quantities of wastewater, which must be treated before being discharged into the sewage system. The main objective of this research was to monitor the stabilization pond, as part of a pilot system, and therefore, to evaluate its effic (mais) iency concerning the organic loading removal and also to develop a model that can describe the auto-purification. In this research it was used 300.200 liters of coffee fruits, Coffea arabica L., specie, in the wet processing. The organic loading rate applied was 136 kgCOD d-1.The performance of this unit was monitored through chemical and physical-chemical analysis, and the mathematical modeling was developed based on the hydric balance, on the theoretical COD estimation and on the actual analysis of COD realized. The stabilization pond effluent presented averages of initial and final COD concentration of 7.100 mg L-1 and 100 mg L-1, respectively. It was found that the stabilization pond was responsible for removing 80% of the total organic matter present in the affluent. The adjusted model developed showed a satisfactory regression coefficient (r² = 0,8015).

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Avaliação da qualidade da água e autodepuração do ribeirão do meio, Leme (SP)/ Evaluation of the water quality and auto-purification from the meio stream, Leme (SP)

Sardinha, Diego de Souza; Conceição, Fabiano Tomazini da; Souza, Antonio Donizetti Gonçalves de; Silveira, Alexandre; De Julio, Marcelo; Gonçalves, Julio César de Souza Inácio
2008-09-01

Resumo em português Este trabalho utilizou relações hidroquímicas para avaliar possíveis entradas antropogênicas nas águas superficiais do Ribeirão do Meio (SP). Realizaram-se três coletas de água durante os meses de fevereiro, abril e julho de 2005 em cinco pontos de coleta analisando: vazão, temperatura, turbidez, pH, condutividade, oxigênio dissolvido, sólidos totais dissolvidos, sólidos totais em suspensão, Ca2+, Mg2+, Na+, K+, HCO3-, Cl-, SO4(2-), PO4(3-) e NO3-. As caract (mais) erísticas da água próximo à nascente até a cidade de Leme permitem concluir que há pouca interferência na sua qualidade, porém, a falta de tratamento para o esgoto doméstico da cidade de Leme piora a sua qualidade. Para se modelar à autodepuração utilizou-se o modelo QUAL 2K, que identificou as zonas de autodepuração e indicou a necessidade de tratamento de esgotos em nível secundário, com eficiência de 76%. Resumo em inglês This investigation utilized hydrochemical relations to evaluate possible anthropogenic inputs at Meio Stream, São Paulo State. Realized three sampling of water during the months of February, April and July/2005, in five sampling points analyzing: discharge, temperature, turbidity, pH, electrical conductivity (EC), dissolved oxygen (DO), TDS (total dissolved solids), TSS (total suspended solids), Ca2+, Mg2+, Na+, K+, HCO3-, Cl-, SO4(2-), PO4(3-) and NO3-. The characterist (mais) ics of water close to spring until Leme city allow concluding that there is a small interference in its quality, however the absence of treatment of domestic wastewater at Leme city reduced its quality. It was applied the QUAL 2K modeling to evaluate the Meio Stream auto-purification identified the auto-purification zones and indicated the necessity of secondary wastewater treatment, with 76% of efficiency.

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Autodepuração de cursos d´água: um programa de modelagem Streeter Phelps com calibração automática e correção de anaerobiose/ Self-depuration in watercourses: a program for Streeter Phelps modeling with automatic calibration and correction for anaerobic conditions

Bezerra, Iury Steiner de Oliveira; Mendonça, Luiz Alberto Ribeiro; Frischkorn, Horst
2008-06-01

Resumo em português Foi desenvolvido um programa usando Object Pascal e Matlab, para o modelo de Streeter Phelps de autodepuração. Foram incorporadas condições de contorno, sugeridas por Chapra, que propiciam: a simulação do perfil de OD e DBO5 considerando várias entradas de efluentes ao longo do curso d'água e a correção para condições de anaerobiose, condições estas que contribuem com o surgimento de concentrações negativas de OD e conduzem a previsões errôneas. Foi, tam (mais) bém, incorporada uma metodologia de calibração automática, baseada na minimização dos erros quadráticos entre as concentrações calculadas e observadas, para obtenção e escolha dos valores dos coeficientes de desoxigenação e reaeração. Para o teste do programa, foram feitas várias simulações: uma para testar o método de calibração automática e outras duas para testar as condições de contorno. Em todos os casos, os resultados obtidos produziram bons desempenhos. O aplicativo executável servirá como ferramenta auxiliar no meio acadêmico, como recurso didático, em aulas de saneamento ambiental, e como ferramenta de gestão da qualidade das águas. Resumo em inglês Using Object Pascal and Matlab, a program was developed for Streeter Phelps modeling of self-purification. Boundary conditions suggested by Chapra were incorporated that permit the simulation of DO and BOD5 profiles considering multiple point sources along the flow path and a correction for conditions of anaerobiosis, which lead to negative DO and erroneous previsions in Streeter Phelps modeling. A method of automatic calibration, based on minimizing square deviations bet (mais) ween simulated and observed concentrations, for obtaining the coefficients of deoxygenation and reaeration, was incorporated also. Various simulations for testing the program were performed: one for automatic calibration and two for boundary conditions. In all cases a good performance was obtained. The program may serve equally as a teaching instrument in environmental sciences classes and as a working tool in water quality management.

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Atividade e seletividade de catalisadores a base de caulim modificado/ Activity and selectivity of catalysts based on modified kaolin

Silva, Lindomar Roberto Damasceno da; Garla, Luis Carlos
1999-04-01

Resumo em inglês Studies of the use of a soil from river Pardo basin located at the Ribeirão Preto region, were realized with the aim of preparing catalysts. A clay, high purity kaolin type, was obtained after purification followed by treatment with acid and then calcined. The activity and selectivity of the catalysts were determined using cycloexene as substrate. The majority of the catalysts obtained yield a conversion higher than 70%.

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Análises quali- e quantitativa de cafés comerciais via ressonância magnética nuclear/ Quali- and quantitative analysis of commercial coffee by NMR

Tavares, Leila Aley; Ferreira, Antonio Gilberto
2006-10-01

Resumo em inglês Coffee is one of the beverages most widely consumed in the world and the "cafezinho" is normally prepared from a blend of roasted powder of two species, Coffea arabica and Coffea canephora. Each one exhibits differences in their taste and in the chemical composition, especially in the caffeine percentage. There are several procedures proposed in the literature for caffeine determination in different samples like soft drinks, coffee, medicines, etc but most of them need a (mais) sample workup which involves at least one step of purification. This work describes the quantitative analysis of caffeine using ¹H NMR and the identification of the major components in commercial coffee samples using 1D and 2D NMR techniques without any sample pre-treatment.

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