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Aplicação do processamento de imagens por computador na quantificação das variáveis histopatológicas da reparação tecidual de anastomoses colocólicas em cães/ Computer-assisted image processing for quantifying histopathologic variables in the healing of colonic anastomosis in dogs

Novelli, M.D.; Barreto, E.; Matos, D.; Saad, S.S.; Borra, R.C.
1997-12-01

Resumo em português OBJETIVO. Os autores apresentam a metodologia de quantificação, através do processamento de imagens, de estruturas teciduais microscópicas envolvidas no processo de reparação de anastomoses colocólicas, feitas por meio de sutura manual e por anel biofragmentável. As variáveis quantificadas neste trabalho foram líquido de edema, tecido fibromuscular, vasos e núcleos celulares. MATERIAL E MÉTODOS. Para esta análise, foi utilizado programa de processamento de im (mais) agens desenvolvido no Laboratório de Informática Dedicado à Odontologia (LIDO) da Universidade de São Paulo, com a finalidade de quantificar as alterações patognomônicas do processo inflamatório em anastomoses colocólicas em 14 cães. Os resultados foram comparados, como contraprova, aos obtidos através de leituras convencionais feitas por dois patologistas. A gradação de alterações ausentes, leves, moderadas e intensas foi utilizada nesta leitura para que se semiquantificassem as mesmas variáveis lidas pelo computador. RESULTADOS. Houve diferença significativa entre as duas técnicas, com a de anel biofragmentável apresentando menor quantidade de edema, fibras organizadas e prevalência de núcleos celulares alongados em relação aos esféricos, sinal evidente de organização tecidual. CONCLUSÃO. Os resultados permitiram concluir que a histometria por processamento de imagem computacional mostrou-se eficiente na quantificação das principais estruturas teciduais envolvidas no processo inflamatório e reparativo. Resumo em inglês BACKGROUND. The authors present the experimental results of the computerized quantifying of tissular structures involved in the reparative process of colonic anastomosis performed by manual suture and biofragmentable ring. The quantified variables in this study were: oedema fluid, myofiber tissue, blood vessel and celular nuclei. MATERIAL AND METHODS. An image processing software developed at Laboratório de Informática Dedicado à Odontologia (LIDO) was utilized to quan (mais) tifying the pathognomonic alterations in the inflammatory process in colonic anastomosis performed in 14 dogs. The results were compared to those obtained through traditional way diagnosis by two pathologists in view of counterproof measures. The criteria for these diagnoses were defined in levels represented by absent, light, moderate and intensive which were compared to analysis performed by the computer. RESULTS. There was significant statistical difference between two techniques: the biofragmentable ring technique exhibited low oedema fluid, organized myofiber tissue and higher number of alongated celular nuclei in relation to manual suture technique. CONCLUSION. The analysis of histometric variables through computational image processing was considered efficient and powerful to quantify the main tissular inflammatory and reparative changing.

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Toxicidade da mitomicina C no epitélio corneano de coelhos/ Mitomycin C toxicity in the corneal epithelium of rabbits

Holzchuh, Nilo; Holzchuh, Ricardo; Arieta, Carlos Eduardo Leite; Kara-José, Newton; Alves, Milton Ruiz
2004-10-01

Resumo em português OBJETIVO: Avaliar os efeitos do uso tópico da mitomicina C a 0,02%, no epitélio íntegro da córnea de coelhos, sob o ponto de vista histopatológico. MÉTODOS: A mitomicina C a 0,02% (olhos esquerdo) e água destilada (olhos direito, controle) foram instiladas, 4 vezes ao dia, por 14 dias, nos olhos de 28 coelhos, na superfície ocular íntegra. Os animais foram sacrificados no 15º, 50º e 100º dia de experimento. O exame histopatológico do epitélio corneano foi co (mais) mplementado por análise morfométrica, que pelo método de contagens de pontos, estudou área do epitélio, número de núcleos, relação núcleo-citoplasma, área da célula epitelial, área do núcleo e área do citoplasma, na região do limbo e central da córnea. RESULTADO: O uso de mitomicina C não desencadeou alterações histopatológicas no epitélio corneano, observando-se a continuidade do epitélio, as células epiteliais se apresentaram dispostas de maneira ordenada, com número de camadas obedecendo a maturação normal e ausência de atipia celular. A análise morfométrica demonstrou alterações significativas nas diferentes estruturas do epitélio, na região do limbo e central da córnea, principalmente nas áreas estimadas do epitélio, do citoplasma e do número de núcleos, verificando-se hipertrofia da célula epitelial, redução da relação núcleo-citoplasma e diminuição do número de núcleos. Estes valores voltaram próximos ao nível controle no 100º dia de avaliação. CONCLUSÃO: Os resultados desta investigação demonstraram baixo potencial tóxico do uso da mitomicina C na superfície ocular íntegra de coelhos, nessa dosagem e concentração. Resumo em inglês OBJECTIVE: To evaluate the effects of mitomycin C eye drops (0.2 mg/ml) on the corneal epithelium of rabbits. METHODS: Mitomycin C and distilled water (controls) were instilled 4 times daily for 14 consecutive days in the eyes with intact ocular surface. The animals were sacrificed in the 15th, 50th and 100th day of the experiment. The histopathologic analysis of the corneal epithelium was complemented by morphometry. Epithelium area, number of nuclei, nucleus-cytoplasm r (mais) elation, epithelial cell and cytoplasm area were studied. RESULTS: The morphometric analysis was performed by point counting under light microscopy. It showed variations characterized by alteration of the epithelium area, nucleus area and cytoplasm area, epithelial cell hypertrophy, alteration of the nucleus-cytoplasm relationship and decrease of the number of nuclei. CONCLUSION: The results of this investigation, in the study conditions, showed that 0.02% mitomycin C, instilled 4 times daily for 14 consecutive days, has low toxic potential in the intact ocular surface.

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Proposição de modelo experimental para estudo morfométrico de vasos e células em esclera de coelhos/ Proposition of an experimental model for the morphometric study of vessels and cells in rabbit sclera

Matayoshi, Suzana; Santo, Ruth Miyuki; Capelozzi, Vera; Saldiva, Paulo Hilário; Alves, Milton Ruiz
2003-08-01

Resumo em português OBJETIVO: A inexistência de modelos experimentais para estudo de alterações causadas por terapêuticas variadas na esclera motivou os autores à proposição de modelo animal para estudo quantitativo de vasos e células na esclera. MÉTODOS: Por meio de estudo experimental prospectivo, aleatório e mascarado, foram avaliadas 15 coelhas albinas, divididas em 3 grupos. O grupo 1 (controle) foi constituído por animais que não foram submetidos a procedimento cirúrgico o (mais) u aplicação de medicação; o grupo 2 foi submetido à cirurgia conjuntival e aplicação de esponja embebida em água destilada; e o grupo 3 foi submetido à cirurgia conjuntival e à aplicação de esponja contendo mitomicina C a 0,4 mg/ml. Foi realizada análise histológica morfométrica (contagem de pontos) da esclera. RESULTADOS: O grupo 3 mostrou redução dos parâmetros vasculares e aumento dos parâmetros celulares quando comparado aos outros dois grupos. O grupo 2 mostrou diminuição do número de núcleos de células endoteliais e aumento de células inflamatórias comparativamente ao grupo controle. CONCLUSÕES: O modelo apresentado mostrou-se exeqüível para quantificação vascular e celular em esclera de coelhos. O modelo experimental proposto revelou-se de utilidade para quantificação de vasos e células em esclera, viabilizando a detecção de alterações vasculares e celulares esclerais provocadas pela aplicação tópica de mitomicina C a 0,4 mg/ml. Resumo em inglês PURPOSE: The lack of experimental models to study diverse therapeutical alterations in sclera led the authors to propose an animal model for a quantitative study of scleral vessels and cells. METHODS: This is a randomized, masked, prospective study using 15 female rabbits divided into 3 groups. The first group of animals (control) was not submitted to surgery or drug application; the second group was submitted to conjunctival surgery and application of a sponge containing (mais) distilled water. The third group was submitted to conjunctival surgery and application of 0.4 mg/ml mitomycin C. A morphometric histological analysis (point counting) was made with light microscopy. The proposed model could quantify vessels and cells in rabbit sclera. RESULTS: The third group presented a reduction of vascular parameters and an increase of cell parameters when compared to the other two groups. The second group showed a reduction in the number of endothelial cell nuclei and an increase in inflammatory cells when compared to the control group. CONCLUSIONS: The model was shown to be feasible in quantifying vessels and cells in rabbit sclera. It was able to detect vascular and cell alterations in sclera due to the topical application of 0.4 mg/ml mitomycin C.

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Nucleofragmentação horizontal: uma nova técnica para a cirurgia de catarata/ Horizontal nucleofragmentation: a new technique for cataract surgery

Jacobovitz, Sérgio; Araújo Júnior, Alair Rodrigues de; Diniz, Cristiano Menezes; Alvim, Heryberto da Silva; Tzelikis, Patrick Frensel de Moraes; Gonçalves, Roberto Martins
2003-06-01

Resumo em português OBJETIVOS: Estudar in vitro a eficácia de um par de instrumentos na divisão de núcleos extraídos por meio da técnica extracapsular. MÉTODOS: A amostra foi constituída de 47 núcleos obtidos de facectomias extracapsulares. Foram classificados em maduros (4+) e imaturos (1 a 3 +), de pacientes com acuidade visual variando de 20/60 à percepção luminosa. Um par de instrumentos, desenvolvido por um dos autores, foi utilizado para fragmentação. Para tal, foi idealiz (mais) ado suporte constituído de gel e metilcelulose sobrejacente. RESULTADOS: A média de idade foi de 67,38 anos sendo que a maior parte dos pacientes (66%) possuía acuidade visual inferior a 20/400. Um percentual de 42,6% das cataratas eram maduras. A fixação e segmentação foram fáceis em 95,7% e 91,5% dos núcleos, respectivamente. CONCLUSÃO: O par de instrumentos idealizados é eficaz em executar a fixação e segmentação dos núcleos. Resumo em inglês PURPOSE: To study in vitro the efficacy of a pair of instruments designed to capture and split human nuclei obtained from extracapsular surgeries. METHODS: The sample is a compound of 47 cataract nuclei. They were classified as mature (4+) and immature (1 to 3+), and the visual acuity ranged from 20/60 to light perception. The instruments were used to split the nuclei. A methylcellulose over a gel base was made for this purpose. RESULTS: The average age was 67,38 years. M (mais) ost patients (66%), had a visual acuity less than 20/400. 42,6% of the cataracts were mature. The capturing and splitting was easily done in over 90% of the nuclei. CONCLUSIONS: The designed instruments are effective to capture and split cataract nuclei.

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Histologia e ultra-estrutura do vaso dorsal de Scaptotrigona postica (Hymenoptera, Apidae) em operárias e rainhas de diferentes idades/ Histology and ultrastructure of the dorsal vessel of Scaptotrigona postica (Hymenoptera, Apidae) in workers and queens of various ages

Poiani, Silvana B.; Cruz-Landim, Carminda da
2006-03-01

Resumo em português O vaso dorsal é um órgão tubular localizado na região mediano-dorsal do corpo dos insetos, abaixo do tegumento. Fez-se um estudo de microscopia de luz e eletrônica de transmissão da porção abdominal do vaso dorsal, o coração, em uma espécie de abelha indígena. Foram estudadas operárias e rainhas em diferentes idades. O coração está localizado no sinus pericárdico. A parede cardíaca é formada por fibras musculares estriadas e apresenta aberturas ou ostí (mais) olos providos de válvulas. A fibra cardíaca contém miofibrilas arranjadas irregularmente, núcleos alongados ou redondos, mitocôndrias grandes e numerosas, e depósitos de glicogênio. Em operárias e rainhas longevas, as fibras encontram-se em degeneração, evidenciada por vacúolos autofágicos, alterações mitocondriais e acúmulo de corpos mielínicos. Em conclusão, o coração de Scaptotrigona postica é semelhante ao de outros insetos estudados. As alterações encontradas estão relacionadas ao processo de envelhecimento e mantêm relação temporal com a expectativa de vida da casta. Resumo em inglês The dorsal vessel is a tubular organ located in the mid-dorsal region of the insects body, just below the tegument. This work is a light and electron microscopy study of the abdominal part of the vessel, the heart, in a stingless bee species. Workers and queens of several ages were studied. The heart is located inside the pericardial sinus. Its wall presents openings or ostia provided with valves and is composed by special striated muscular fibers. The cardiac fiber prese (mais) nts myofibrils irregularly arranged, round or elongated nuclei, numerous and large mitochondria, and glycogen deposits. Old workers and queens present fibers degeneration, represented by autophagic vacuoles, mitochondria alterations and accumulation of myelinic bodies. In conclusion, the heart of Scaptotrigona postica Latreille, 1807 is similar to other insects. The changes found are related to aging progress and maintain temporal relationship with the caste life expectancy.

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Estudo histomorfométrico dos cardiomiócitos do ventrículo esquerdo das ratas albinas durante a prenhez/ Histomorphometrical study of cardiomyocytes of the left ventricular of albino rats during pregnancy

Liberatori Filho, A.W.; Lopes, R.D.; Mora, O.A.; Simões, M.J.; Lopes, A.C.
1999-07-01

Resumo em português OBJETIVO. No presente estudo propusemo-nos a avaliar, por meio da microscopia de luz, os aspectos morfológicos e morfométricos dos cardiomiócitos do ventrículo esquerdo de ratas albinas durante a prenhez. MÉTODOS. Acasalamos doze ratas virgens que foram dividas ao acaso em quatro grupos, de acordo com a idade gestacional. Os animais correspondentes a cada grupo foram sacrificados ao 1o(G-A), 7o(G-B), 14o(G-C) e 21o(G-D) dias de prenhez, sendo coletados fragmentos do (mais) terço médio do ventrículo esquerdo, os quais após processamento apropriado, permitiram observação adequada à microscopia de luz. A cariometria foi realizada mensurando-se os diâmetros maiores e menores dos cardiomiócitos com o auxílio de um tambor rotativo modelo K 8 X adaptado a um microscópio de luz. RESULTADOS. O estudo em nível da microscopia de luz praticamente não mostrou alterações com o decorrer da prenhez. No entanto, a morfometria revelou que os volumes dos cardiomiócitos estão aumentados no 14o dia da prenhez, mostrando-se estatisticamente significante quando comparado aos demais grupos estudados. Assim, nossos resultados demonstraram haver hipertrofia ventricular esquerda durante a gestação. CONCLUSÃO. Durante a gestação há um processo dinâmico reversível de remodelação ventricular em conseqüência das alterações adaptativas gravídicas. Resumo em inglês PURPOSE. In the present study we evaluated, by light microscopy, and throughout morphometry, whether hypertrophy of cardiac striated muscular fibers of left ventricular occur in albino rat, during pregnancy. METHODS. After maiting, 12 nuliparous rats were divided into four groups with three animals for each group. The female rats corresponding to each group were killed at 1st, 7th, 14th and 21st days of pregnancy. RESULTS. Observation, on light microscopy (H.E) had at one (mais) view, did not display any alterations during pregnancy. However, the morphometry revealed that nuclei of cardiomyocytes are augmented in volume at 14th day of pregnancy and statistically significant data show the hypertrophy. CONCLUSION. The obtained data show the existence of a dinamic and reversible process of ventricular remodelling in consequence of adaptation physiological alterations of the cardiovascular normal pregnancy.

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Estudo da ocorrência de enteroparasitas em hortaliças comercializadas na região metropolitana de São Paulo - SP, Brasil: II - Pesquisa de protozoários intestinais/ Study of the occurrence of intestinal parasites os vegetables comercially traded in the metropolitan area of S.Paulo, SP - Brazil: II - Research into protozoan cysts

Oliveira, Carlos Augusto Fernandes de; Germano, Pedro Manuel Leal
1992-10-01

Resumo em português Foram analisadas hortaliças "in natura", comercializadas na Região Metropolitana de São Paulo, SP-Brasil, visando à pesquisa e à identificação de cistos de protozoários de interesse médico. As hortaliças, constituídas de 50 amostras de cada variedade, consistiram em: alface (Lactuca sativa), variedades lisa e crespa, escarola (Chichorium sp) e agrião (Nasturtium officinale). Os resultados evidenciaram elevados percentuais de contaminação em todas as variedad (mais) es de hortaliças analisadas, porém as freqüências de protozoários foram maiores no agrião. As amostras de alfaces apresentaram os menores percentuais de contaminação, enquanto que a escarola apresentou valores geralmente situados entre o agrião e as alfaces. Observou-se uma grande variedade de protozoários, cujas freqüências de ocorrência na população residente na Região Metropolitana de São Paulo são igualmente elevadas. Os mais freqüentes foram Entamoeba sp (com 4 e 8 núcleos) e Giardia sp. Foram também isolados cistos de Iodamoeba sp, Endolimax sp e Chilomastix sp. Os elevados níveis de contaminação fecal encontrados nas amostras analisadas apontam para a importância dos alimentos na transmissão de protozoários intestinais. Resumo em inglês Vegetables in natura , commercially traded in the metropolitan area of S.Paulo, Brazil, were analised by means of the appropriate methodology with a view to discovering and identifying protozoan cysts of medical interest. The vegetables under study consisted of 50 samples of each of the variaties listed bel ow: lettuce (Lactuca sativa) - oily leaves and crisphead varieties, endive (Chicorium sp) and water-cress (Nasturtium officinale). Results showed high rates of contami (mais) nation in all the varieties of vegetable analysed. However, the water-cress was the one which presented the highest frequencies of enteroparasites. Both the oily leafes and crisphead varieties of lettuce presented the lowest rates of contamination, whereas endive presented values ranking, in general, between those of the lettuce and those of the water-cresses. A great variety of those protozoans which occur frequently in the population resident in the metropolitan area of S. Paulo were observed in the samples, the most frequent being Entamoeba sp (with 4 and 8 nuclei) and Giardia sp. Cysts of Iodamoeba sp, Endolimax sp and Chilomastix sp were also recovered from the samples, thus corroborating the occurrence of high rates of fecal contamination. The significance of these kinds of food in the transmission of protozoans is discussed in the light of the results obtained.

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Estudo da ocorrência de enteroparasitas em hortaliças comercializadas na região metropolitana de São Paulo - SP, Brasil: II - Pesquisa de protozoários intestinais/ Study of the occurrence of intestinal parasites os vegetables comercially traded in the metropolitan area of S.Paulo, SP - Brazil: II - Research into protozoan cysts

Oliveira, Carlos Augusto Fernandes de; Germano, Pedro Manuel Leal
1992-10-01

Resumo em português Foram analisadas hortaliças "in natura", comercializadas na Região Metropolitana de São Paulo, SP-Brasil, visando à pesquisa e à identificação de cistos de protozoários de interesse médico. As hortaliças, constituídas de 50 amostras de cada variedade, consistiram em: alface (Lactuca sativa), variedades lisa e crespa, escarola (Chichorium sp) e agrião (Nasturtium officinale). Os resultados evidenciaram elevados percentuais de contaminação em todas as variedad (mais) es de hortaliças analisadas, porém as freqüências de protozoários foram maiores no agrião. As amostras de alfaces apresentaram os menores percentuais de contaminação, enquanto que a escarola apresentou valores geralmente situados entre o agrião e as alfaces. Observou-se uma grande variedade de protozoários, cujas freqüências de ocorrência na população residente na Região Metropolitana de São Paulo são igualmente elevadas. Os mais freqüentes foram Entamoeba sp (com 4 e 8 núcleos) e Giardia sp. Foram também isolados cistos de Iodamoeba sp, Endolimax sp e Chilomastix sp. Os elevados níveis de contaminação fecal encontrados nas amostras analisadas apontam para a importância dos alimentos na transmissão de protozoários intestinais. Resumo em inglês Vegetables in natura , commercially traded in the metropolitan area of S.Paulo, Brazil, were analised by means of the appropriate methodology with a view to discovering and identifying protozoan cysts of medical interest. The vegetables under study consisted of 50 samples of each of the variaties listed bel ow: lettuce (Lactuca sativa) - oily leaves and crisphead varieties, endive (Chicorium sp) and water-cress (Nasturtium officinale). Results showed high rates of contami (mais) nation in all the varieties of vegetable analysed. However, the water-cress was the one which presented the highest frequencies of enteroparasites. Both the oily leafes and crisphead varieties of lettuce presented the lowest rates of contamination, whereas endive presented values ranking, in general, between those of the lettuce and those of the water-cresses. A great variety of those protozoans which occur frequently in the population resident in the metropolitan area of S. Paulo were observed in the samples, the most frequent being Entamoeba sp (with 4 and 8 nuclei) and Giardia sp. Cysts of Iodamoeba sp, Endolimax sp and Chilomastix sp were also recovered from the samples, thus corroborating the occurrence of high rates of fecal contamination. The significance of these kinds of food in the transmission of protozoans is discussed in the light of the results obtained.

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Descrição anatômica da presença do íon zinco nos núcleos cocleares/ Anatomic description of the presence of zinc in cochlear nuclei

Féres, Maria Cristina L. C.; Cairasco, Norberto G.
2003-03-01

Resumo em português A presença do íon zinco tem sido descrita em algumas diferentes regiões do sistema nervoso central e, dentro do sistema auditivo, nos núcleos cocleares. Seu papel fisiológico ainda não é totalmente compreendido. OBJETIVO: O presente trabalho teve como objetivo o estudo da distribuição anatômica da marcação para zinco. FORMA DE ESTUDO: Experimental. MATERIAL E MÉTODO: Mediante o uso de técnica histoquímica, comparando-a com os padrões anatômicos e citoarqu (mais) itetônicos normais evidenciados com a coloração de Nissl, em núcleos cocleares. Foram estudados ratos adultos, sacrificados por perfusão intracardíaca e submetidos à histoquímica de Neo-Timm, a qual evidencia zinco nos tecidos. Os núcleos cocleares foram estudados à microscopia ótica. RESULTADO: Os autores descrevem a distribuição diferenciada do íon segundo os subnúcleos dorsal e ventral. CONCLUSÃO: Concluem que esta característica certamente tem uma íntima relação com a diferenciação fisiológica destes. Resumo em inglês The presence of zinc has been noticed in different areas of the central nervous system, and, in the auditory system, cochlear nuclei. Its physiological role has not yet been fully described. AIM: This work has as main goals: to study the anatomic distribution of zinc. STUDY DESIGN: Experimental. MATERIAL AND METHOD: By means of histochemistry, and to compare it with the morphological features observed by using Nissl-staining methods, in cochlear nuclei. The subjects were (mais) adults rats. They were sacrificed by intracardiac perfusion, following a protocol for zinc histochemistry. The cochlear nuclei were studied by light microscopy. RESULTS: The authors describe the differenciated distribution of zinc among dorsal and ventral cochlear nuclei. CONCLUSION: They concluded that this feature has a relationship with the physiological differentiation of them.

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Charles Baudelaire e a arte da memória

Nascimento, Roberta Andrade do
2005-06-01

Resumo em português Análise da noção de memória do presente - dimensão dialética - desenvolvida por Charles Baudelaire em seus textos críticos e poéticos a partir da articulação de um duplo regime temporal que permite pensar a obra de arte como um objeto policrônico. À luz de teóricos como Georges Didi-Huberman e Walter Benjamin, pretende-se examinar como as noções de crítica, anacronismo, alegoria, imagem, ruína, origem e tempo presente dialogam e interagem para constituir núcleos de reflexão. Resumo em inglês Analysis of the concept of memory of the present - dialectical dimension - developed by Charles Baudelaire in his critical and poetical texts by means of the articulation of a double time regime, which enables the compreension of a work of art as an object that entails different times. In the light of some authors, such as Georges Didi-Huberman and Walter Benjamin, the aim of this article is to analyse how the notions of critics, anachronism, allegory, image, ruin, origin and present time interact in order to create reflection nuclei.

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Avaliação do Desenvolvimento de Embriões Bovinos Pós-Biópsia: um Modelo para Treinamento/ Evaluation of the Post-Biopsy Development of Bovine Embryos: Proposal of a Training Model

Almodin, Carlos Gilberto; Moron, Antonio Fernandes; Junior, Luiz Kulay; Krüger, Edegar; Pereira, Lis Andréa Cardoso; Minguetti-Câmara, Vania Cibele
1999-10-01

Resumo em português Objetivo: montar um protocolo animal para estudo e treinamento em biópsia embrionária. Métodos: ovários de vaca obtidos em abatedouro eram transportados ao laboratório onde os oócitos aspirados eram maturados. Posteriormente eram submetidos à fertilização in vitro. No dia 5 pós-fertilização, os embriões eram biopsiados, com a abertura da zona pelúcida realizada mediante lâmina de corte ajustada ao microscópio óptico. Após abertura da zona pelúcida 1 ou (mais) 2 blastômeros eram removidos dos embriões. Após a biópsia, os embriões permaneciam em co-cultivo por mais três dias. Ao final deste tempo, o desenvolvimento dos embriões era avaliado e comparado ao do grupo controle por meio de estudo morfológico e contagem do número de células, usando coloração específica para núcleos. Resultados: dos 57 embriões biopsiados, 40 atingiram o estágio de blastocisto (70,2%) e em 11 foi observado o "hatching" (27,5%). No grupo controle obtiveram-se 42 blastocistos (73,7%) e, destes, 11 chegaram a "hatching" (26,2%). Após contagem do número de células, observou-se que não houve diferença estatisticamente significante entre os 2 grupos. Conclusão: podemos verificar por meio dos resultados que o protocolo proposto foi tecnicamente viável, além de fornecer bom número de embriões, pela facilidade de obtenção de oócitos bovinos, podendo ser adotado para treinamento. Resumo em inglês Purpose: to develop an animal model for the study of, and training in, bovine biopsies. Methods: cow ovaries were obtained from a slaughterhouse and transported to the laboratory where the oocytes were aspirated, maturated and submitted to in vitro fertilization. On the 5th day after fertilization, the embryos were biopsied, with the zona pellucida being opened with a cutting blade fitted to the light microscope. One or two blastomeres were removed from the embryos and le (mais) ft in coculture for three additional days. After this time, embryo development was evaluated in comparison to a control group by morphological study and cell counts using specific staining for nuclei. Results: forty of the 57 biopsied embryos reached the blastocyst stage (70.2%) and hatching was observed in 11 (27.5%). Forty-two blastocysts were obtained in the control group (73.7%) and 11 of them hatched (26.2%). Cell counts showed no significant differences between groups. Conclusions: we conclude that the proposed protocol is technically feasible and supplies a good number of embryos because of the easy technique for obtaining bovine oocytes, thus representing a method that could be adopted for training.

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Análise morfológica e fisiológica dos fígados e rins de ratas prenhes e seus fetos tratados pela associação zidovudina, lamivudina e ritonavir durante toda a prenhez/ Morphological and physiological analysis of livers and kidneys of pregnant rats and their fetuses treated by the association of zidovudine, lamivudine and ritonavir for the whole period of pregnancy

Wagner, Adriana; Carvalho, Adelino Moreira de; Nakamura, Mary Uchiyama; Simões, Ricardo Santos; Fontes, Tereza Maria Pereira; Espiridião, Silvia; Kulay Júnior, Luiz
2010-11-01

Resumo em português OBJETIVO: avaliar os efeitos da administração da associação zidovudina-lamivudina-ritonavir nos fígados e rins de ratas prenhes e seus conceptos do ponto de vista morfológico e fisiológico. MÉTODOS: 40 ratas albinas prenhes foram aleatoriamente divididas em 4 grupos: 1 controle (Ctrl: controle de veículo) e 3 experimentais (Exp1x, Exp3x e Exp9x). Estes últimos foram tratados por solução oral de zidovudina/lamivudina/ritonavir (Exp1x: 10/5/20 mg/kg; Exp3x: 30/1 (mais) 5/60 mg/kg; Exp9x: 90/45/180 mg/kg). As drogas e o veículo foram administrados por gavagem, desde o 1º até o 20º dia de prenhez. No último dia do experimento, todos os animais foram anestesiados e sangue foi retirado da cavidade cardíaca para avaliação sérica das enzimas aspartato aminotransferase (AST) e alanina aminotransferase (ALT), por método calorimétrico, bem como da ureia, determinada por método cinético-enzimático, e creatinina, por método cinético-colorimétrico. Em seguida, fragmentos dos fígados e rins maternos e fetais foram coletados, fixados em formol a 10% e processados segundo os métodos histológicos para inclusão em parafina. Cortes com 5 µm de espessura foram corados pela hematoxilina-eosina (HE) e analisados por microscopia de luz. Na leitura das lâminas, considerou-se o padrão de normalidade para fígado e rins, tais como: hepatócitos, espaço porta íntegros e veias hepáticas bem definidas. Nos rins, a presença de corpúsculos renais, túbulos contorcidos e alças de Henle típicos. Nos fígados fetais considerou-se, ainda, a morfologia das células da linhagem eritrocitária nas diferentes fases do desenvolvimento, bem como os megacariócitos. Quando houve alteração da coloração padrão estabelecida para as estruturas hepáticas e renais, alteração na morfologia de núcleos, rompimento de limites de alguma organela citoplasmática, presença de congestão vascular, tudo isso foi entendido como provavelmente provocado pelas drogas em sua(s) dose(s) de aplicação. A avaliação estatística foi realizada por análise de variância (ANOVA), completada pelo teste de Tukey-Kramer (p Resumo em inglês PURPOSE: to evaluate the effect of administration of three different doses of the zidovudine/lamivudine/ritonavir combination on the liver and kidneys of pregnant rats and their concepts from a morphological and physiological standpoint. METHODS: 40 pregnant EPM-1 Wistar rats were randomly divided into 4 groups: 1 control (Ctrl: drug vehicle control, n=10) and 3 experimental groups: Exp1x, Exp3x and Exp9x. An oral solution of the zidovudine/lamivudine/ritonavir combinatio (mais) n was administered to the experimental groups from the day 0 to day 20 of pregnancy: Exp1x=10/5/20 mg/kg; Exp3x=30/15/60 mg/kg; Exp9x=90/45/180 mg/kg. On the 20th pregnancy day the rats were anesthetized and blood was taken directly from the ventricular chambers for further biochemical determinations: aspartate-(AST) and alanine-(ALT) aminotransferases (Calorimetric method), urea nitrogen (BUN) by an enzymatic-kinetic method, and creatinine by a kinetic-calorimetric method. Maternal and fetal liver and kidney samples were taken, fixed in 10% formaldehyde and processed histologically for paraffin embedding. Five µm-thick fragments of maternal and fetal livers and kidneys were stained with hematoxilyn-eosin, being analyzed by light microscopy. To interpret the results, the well-known pattern of normality for livers and kidneys was considered on the basis of the following structures: hepatocytes, portal structure, hepatic veins, renal corpuscles, renal tubules and loop of Henle. Regarding the fetal livers, we also considered the erythrocytes in their different stages of development as well as the megacariocytes. If there was a change in the established staining pattern for liver and kidney structures, changes in nuclear morphology, rupture of some cytoplasmic organelles, and presence of vascular congestion, this was considered to be due to the drug doses. Results were submitted to analysis of variance (ANOVA) and to the Tukey-Kramer multiple comparisons test (p

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Análise morfológica dos fígados e rins no binômio materno-fetal após tratamento de ratas prenhes com Ritonavir durante toda a prenhez/ Morphological analysis of liver and kidneys of pregnant rats and their fetuses upon chronic Ritonavir administration

Carvalho, Adelino Moreira de; Simões, Ricardo Santos; Oliveira, Fábio Hideo Martins; Simões, Manuel de Jesus; Oliveira-Filho, Ricardo Martins; Nakamura, Mary Uchiyama; Kulay Júnior, Luiz
2007-07-01

Resumo em português OBJETIVO: avaliar os efeitos da administração crônica de três diferentes doses de Ritonavir nos fígados e rins de ratas prenhes e seus conceptos do ponto de vista morfológico. MÉTODOS: Quarenta ratas albinas EPM-1 Wistar, prenhes, foram aleatoriamente divididas em quatro grupos: Contr (controle do veículo) e três grupos experimentais, Exp20, Exp60 e Exp180, que receberam, respectivamente, 20, 60 e 180 mg/kg por dia de Ritonavir por via oral. A droga e o veículo (mais) (propilenoglicol) foram administrados por gavagem, desde o primeiro até o 20º dia da prenhez. No último dia do experimento, todos os animais foram anestesiados e sacrificados. Em seguida, fragmentos dos fígados e rins maternos e fetais foram coletados e preparados para análise em microscopia de luz. RESULTADOS: não observamos nenhuma alteração morfológica nas vísceras estudadas nos Grupos Contr e Exp20. No Grupo Exp60, encontramos, no fígado materno, hepatócitos com sinais de atrofia e de apoptose (eosinofilia citoplasmática e núcleos picnóticos) e vasodilatação marcante dos capilares sinusóides (congestão). No rim materno, encontramos áreas eosinofílicas e núcleos hipercromáticos na parede dos túbulos contorcidos proximais. O fígado e rins maternos do Grupo Exp180 tiveram alterações morfológicas mais intensas do que no Grupo Exp60. Não observamos alterações histomorfológicas nos fígados e rins fetais em todos os grupos, o que pode ser decorrente da ação protetora da glicoproteína P. CONCLUSÕES: nossos resultados mostram que a administração de Ritonavir a ratas prenhes causou alterações morfológicas nos fígados e rins maternos em doses mais altas que a convencional. Já a ausência de anormalidades nos órgãos fetais pode ser explicada pelo papel protetor da glicoproteína P. Resumo em inglês PURPOSE: to evaluate the effect of the chronic administration of three different doses of Ritonavir in the liver and kidneys of pregnant albino rats and their concepts from a morphological standpoint. METHODS: forty pregnant albino EPM-1 Wistar rats were randomly divided into four groups: Contr (vehicle control), and three experimental groups, Exp20, Exp60, Exp180, which received daily 20, 60 or 180 mg/kg of Ritonavir, respectively. The drug and the vehicle (propyleneglyc (mais) ol) were orally administered by gavage, from the first up to the 20th day of pregnancy. At the last experimental day, all the animals were sacrificed under deep anesthesia, and fragments from the maternal and fetal liver and kidneys were taken and prepared for histological analysis by light microscope. RESULTS: no morphological changes were identified in Exp20 and control group. In the Exp60 group, we found hepatocytes with signs of atrophy and apoptosis (eosinophilic cytoplasm and picnotic nuclei) and marked sinusoid capillary vasodilation (congestion). The proximal convoluted tubules of maternal kidneys and liver showed eosinophilic areas and hyperchromatic nuclei, as well as signs of vasodilation. The maternal kidneys and livers of the Exp180 rats presented more prominent morphological changes than the ones of Exp60. Regarding the fetal organs, no histomorphological abnormalities were observed in all the groups. CONCLUSIONS: our results show that the administration of Ritonavir to pregnant rats, in higher than conventional doses causes morphological changes in the maternal liver and kidneys. On the other hand, the lack of abnormalities in the fetal organs may be due to the protective role of glycoprotein P.

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