Sample records for ion exchange chromatography
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Cromatografia de troca-iônica aplicada ao isolamento da fração ácida do óleo de copaíba (Copaifera multijuga) e da sacaca (Croton cajucara)/ Ion exchange chromatography applied to the fractionation of the copaíba oil (Copaifera multijuga) and sacaca (Croton cajucara) extracts

Barreto Júnior, Amaro Gomes; Biscaia Junior, Evaristo Chalbaud; Veiga Junior, Valdir Florêncio da; Pinto, Angelo C.; Carvalhaes, Sergio Freire de; Maciel, Maria Aparecida M.
2005-08-01

Resumo em inglês Plant extracts are usually complex mixtures which contain several molecules of different sizes with varied functional groups. Such extracts are a challenge to the chemist of natural products. Ion exchange chromatography in non-aqueous medium, used for separation of basic or acidic fractions from plant extracts, is an important unit operation in preparative scale separations. Anionic macroporous resin in non-aqueous medium was used with success in this study for separation (mais) of the acid fraction of Copaifera multijuga (Copaiba oil), rich in labdanic diterpenes and for the methanolic extract of Croton cajucara (acetyl aleuritoric acid).

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Determinação de bromato em melhoradores de farinha por cromatografia de troca iônica com detecção espectrofotométrica/ Bromate determination in flour improvers by ion exchange chromatography with spectrophotometric detection

Dallago, Rogério Marcos; Nascimento Filho, Irajá do; Zanella, Renato; Maroneze, Aline Machado
2005-08-01

Resumo em inglês KBrO3 is registered by the FAO/OMS as a genotoxic and carcinogenic compound. In spite of this, KBrO3 is still employed by Brazilian bakeries. Nowadays ion exchange chromatography (IEC) is the most rapid and trustful method for BrO3- analysis. When at high concentrations, chloride ions can interfere in the BrO3- analysis, if the detection is performed by electrical conductivity. On the other hand, spectrophotometric detection, presented here is based on the absorption of B (mais) rO3- in the ultraviolet region (210 - 230 nm) where the absortion of chloride ions is very low, thus making possible the qualitative and quantitative analysis of BrO3- in flour improver samples.

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CROMATOGRAFIA DE AFINIDADE COM CORANTE RED A versus TROCA IÔNICA-PERMEABILIDADE EM GEL: COMPARAÇÃO DA PRATICIDADE NA PURIFICAÇÃO DE ENTEROTOXINA ESTAFILOCÓCICA A

KAMOGAE, M.; MIYA, N.; PEREIRA, J.L.; HIROOKA, E.Y.
1998-05-01

Resumo em português O presente trabalho compara processos de purificação de enterotoxina estafilocócica A, utilizando cromatografia de afinidade com corante Red A em relação a troca iônica (SP - Sephadex C-25) - permeabilidade em gel (Sephadex G-75). Aplicou-se nas colunas o sobrenadante da cultura de Staphylococcus aureus 722 em caldo contendo 3% de triptona e suplementado com 1% de extrato de levedura, previamente concentradas com Amberlite CG-50. O processo capturou rapidamente a EE (mais) A, porém a proporção de 15 mg de resina para 150 mg de toxina causou saturação, recuperando apenas 10 a 30% de toxina do sobrenadante. A cromatografia de afinidade com Red A permitiu a recuperação de 60,87% de toxina aplicada em 76 horas, em relação a 114 horas requeridas para purificação utilizando coluna de troca iônica e permeabilidade em gel, com rendimento de 6,5%. O perfil eletroforético das amostras purificadas indicaram que, a toxina obtida da coluna Red A apresentou teor de pureza superior, na ordem de 90%, em relação a 60% atingida pelo método clássico. Resumo em inglês Culture supernatant of Staphylococcus aureus 722 in 3% triptone plus 1% yeast extract was used for EEA purification, proceeding comparison between dye ligand Red A affinity chromatography and classic chromatography. The capture of SEA with Amberlite CG-50 allowed rapid enterotoxin concentration from the culture supernatant. However, the ratio of 15 mg of the resin to a total of 150 mg of the toxin satured the resin, giving only 10 to 30% of SEA recuperation from the super (mais) natant. The elution of concentrated material throught the Red A column resulted in a recovery of 60,87% of the toxin, and required 76 hours, indicating advantage on classic chromatography. Ion exchange column plus gel filtration recovered only 6,5 % of the SEA, and required 114 hours to conclude the procedure. The eletrophoresis of purified SEA indicated high grade of toxin obtained from Red A column, with 90 % of purity, compared to 60 % of classic column.

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Produção de isomaltulose a partir da transformação enzimática da sacarose, utilizando-se Erwinia sp D12 imobilizada com alginato de cálcio/ Production of isomaltulose from enzymatic transformation of sucrose, using Erwinia sp D12 immobilized with calcium alginate

Moraes, Ana Lúcia Leite; Steckelberg, Claúdia; Sato, Hélia Harumi; Pinheiro, Andrelina
2005-03-01

Resumo em português A glicosiltransferase de Erwinia sp D12 é capaz de converter a sacarose em isomaltulose (6-o-alfa-glicopiranosil D-frutofuranose), um açúcar alternativo que apresenta baixo potencial cariogênico, e que pode ser utilizado em chocolates, gomas de mascar e balas. A isomaltulose é também utilizada na produção de isomalte, uma mistura de açúcar álcool, de baixo valor calórico e baixo potencial cariogênico. No estudo da influência dos componentes do meio de cultiv (mais) o, na produção de glicosiltransferase, em frascos agitados, foi obtido maior atividade da enzima (12,8 unidades de atividade/mL do meio de cultura) em meio de cultura A constituído de melaço 12% (p/v) de sólidos solúveis totais, peptona 4% (p/v) e extrato de carne 0,4% (p/v). No estudo do efeito do tempo e da temperatura na fermentação da linhagem de Erwinia sp D12, em fermentador New Brunswick de 3L, contendo meio de cultura A, foi obtida maior atividade de glicosiltransferase (15,6 unidades de atividade/ mL de meio de cultura) na fase exponencial de crescimento após 8 horas de fermentação a 30ºC. Na produção de isomaltulose a partir da sacarose utilizando-se células de Erwinia sp D12 imobilizadas em alginato de cálcio, estudou-se o efeito da temperatura (25 - 35ºC) e da concentração de substrato (12,5 - 60% p/v). Foi obtido um rendimento em torno de 50% de isomaltulose, com soluções de sacarose entre 20-30% (p/v) a 35ºC. Concentrações em excesso de sacarose (ao redor de 40% p/v) afetaram a atividade da célula imobilizada, diminuindo a conversão de sacarose em isomaltulose. O xarope de isomaltulose foi purificado através de cromatografia de troca iônica e o eluato cristalizado por abaixamento de temperatura. Os cristais apresentaram 91,39% de isomaltulose. Resumo em inglês The glucosyltransferase of Erwinia sp D12 is able to convert sucrose into isomaltulose (6-0-alpha-D-glucopyranosyl-D-fructofuranose), an alternative sugar which presents low cariogenic potential, and can be used to produce chocolate, chewing gum and candy. The isomaltulose is also used to produce isomalt, a mixture of alcohol-sugar with a low caloric value and low cariogenicity power. In the study of the influence of the components of the culture medium in the glucosyltra (mais) nsferase production in flasks under shaking conditions, the highest activity (12.8 units of activity /mL of culture medium) was obtained in culture medium A, containing molasses 12% (p/v) of the total soluble solid, peptone 4% (p/v) and meat extract 0,4% (p/v). In the study of the effects of time and temperature on the fermentation of Erwinia sp D12 in a 3L New Brunswick fermentor containing culture medium A. the highest glucosyltransferase activity (15.6 units of activity /mL of culture medium) was obtained during the exponential growth phase after 8 hours of fermentation at 30ºC. In the production of isomaltulose from enzymatic transformation of sucrose by Erwinia sp D12 cells immobilized in calcium alginate, the effects of the temperature (25-35ºC) and substrate concentration (12,5-60%) were evaluated, the yield of isomaltulose was approximately 50%, from sucrose solutions ranging from 20 to 30% at 35ºC. Excess of sucrose affected the activity of the immobilized cell, decreasing conversion of sucrose into isomaltulose. The syrup obtained was purified through Ion Exchange Chromatography, and the crystallization of eluent by the decreasing temperature. The obtained crystals presented 91,39% of isomaltulose.

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Caracterização e hidrólise in vitro da globulina principal de grão-de-bico (Cicer arietinum L.), var. IAC-Marrocos/ Characterization and in vitro tryptic hydrolysis of the major globulin from chickpea (Cicer arietinum L.)

Neves, Valdir A.; Silva, Maraiza A. da; Lourenço, Euclides J.
2004-03-01

Resumo em português No presente estudo procedeu-se ao isolamento e caracterização da fração globulina majoritária (11 S) de grão-de-bico, var. IAC-Marrocos. A globulina majoritária extraída foi isolada por cromatografia de filtração em gel e de troca-iônica mostrando apenas uma banda de proteína na eletroforese em gel de poliacrilamida. A globulina majoritária, após passagem em coluna de Sephadex, revelou duas bandas protéicas de 55 e 52,5kDa e três bandas menores em gel de p (mais) oliacrilamida dodecilsulfato de sódio. Na presença de 2-mercaptoetanol 6 polipeptídios na faixa de 18 a 42kDa foram revelados na eletroforese. A globulina isolada foi submetida à ação da tripsina e quimotripsina onde a forma nativa mostrou-se resistente à ação enzimática enquanto o aquecimento (96 e 121°C/15min) não foi suficiente para aumentar a susceptibilidade à hidrólise, significativamente. Adição de NaCl 0,3M levou a um aumento da estabilidade estrutural com menor susceptibilidade à digestão proteolítica, fato em parte perdido com o aquecimento. As hidrólises foram acompanhadas por eletroforese em gel de poliacrilamida dodecilsulfato de sódio. Resumo em inglês The isolation and characterization of the major globulin fraction (11 S) from Chickpea, vc IAC-Marrocos, were evaluated. The major globulin was extracted, isolated by gel filtration and ion-exchange chromatography showing only one protein band on PAGE. The globulin, after Sephadex elution, revealed two protein bands of 55 and 52.5kDa and three minor bands on SDS-PAGE. In the presence of 2-mercaptoethanol six polypeptides were revealed on SDS-PAGE in the range of 18 to 42k (mais) Da. The isolated native globulin shown to be resistant to trypsin and chymotrypsin however heating at 96 and 121ºC/15min was not sufficient to increase the hydrolysis significantly. The proteolytic susceptibility of the enzymes was reduced by 0.3M NaCl addition at the assay. The salt concentration was sufficient to stabilize the native protein structure that was lost after heating as demonstrated on SDS-PAGE.

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Preparo e caracterização de proteínas miofibrilares de tilápia-do-nilo para elaboração de biofilmes/ Extraction and properties of nile tilapia myofibrillar proteins for edible films

Monterrey-Quintero, Ednelí Soraya; Sobral, Paulo José do Amaral
2000-01-01

Resumo em português A elaboração de filmes comestíveis à base de biopolímeros implica conhecimento das propriedades físico-químicas da macromolécula. Os objetivos deste trabalho foram a descrição de um método de preparo de proteínas miofibrilares de tilápia-do-nilo (Oreochromis niloticus), o estudo das propriedades relacionadas com a formação de filmes, e a caracterização dos biofilmes elaborados com a proteína. Músculo moído de tilápia-do-nilo, recém-abatida, foi lavad (mais) o e processado até formação de uma pasta homogênea. A evolução das frações protéicas, durante o processamento, foi acompanhada por calorimetria diferencial de varredura. Estudou-se a solubilidade das proteínas miofibrilares liofilizadas (PML) em função do pH (2-7). A identificação das frações protéicas e dos aminoácidos foi realizada por SDS-PAGE e cromatografia de troca iônica, respectivamente. Os biofilmes formados foram submetidos a testes de perfuração, de solubilidade e microscopia eletrônica. A amostra de PML, constituída apenas de proteínas miofibrilares, apresentou uma região de máxima solubilidade (96,9%) em torno do pH 3,0 e elevado potencial de interações iônicas (74,4 kJ/100 kJ). Os biofilmes à base das PML de tilápia-do-nilo são pouco solúveis (abaixo de 20 g/100 g matéria seca). O glicerol influencia fortemente as propriedades mecânicas e a solubilidade dos biofilmes. Resumo em inglês The elaboration of edible films based on biopolymers, implies the knowledge of physicochemical properties of macromolecules. The objectives of this work were to describe a methodology of preparing Nile Tilapia myofibrillar proteins and study the properties related to formation and characterization of edible film elaborated with these proteins. Freshly slaughtered ground Nile Tilapia (Oreochromis niloticus) muscle was washed and processed until the formation of a homogeneo (mais) us paste. Evolution of protein fractions during processing was followed by scanning differential calorimetry. Solubility of freeze-dried myofibrillar proteins was studied as a function of pH (2-7). Identification of protein fractions and that of the composition of amino acids were accomplished by SDS-PAGE and ion-exchange chromatography, respectively. Biofilms, thus formed, were submitted to puncture, solubility and scanning electron microscopy tests. The sample of freeze-fried proteins, constituted only of myofibrillar proteins, presented maximum solubility (96.9%), at pH around 3 and a high ionic interaction potential (74.4 kJ/100 kJ). Nile Tilapia myofibrillar protein based biofilms were not very soluble (lower than 20 g/100 g dry matter). Glycerol strongly influenced mechanical as well as solubility properties of biofilms.

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Desenvolvimento de um método de análise de vitamina C em alimentos por cromatografa líquida de alta eficiência e exclusão iônica/ Development of a method for vitamin C analysis in food using high performance liquid chromatography and ion exclusion

Rosa, Jeane Santos da; Godoy, Ronoel Luiz de Oliveira; Oiano Neto, João; Campos, Rodrigo da Silveira; Matta, Virginia Martins da; Freire, Cyntia Abreu; Silva, Aline Soares da; Souza, Rafael Santos de
2007-12-01

Resumo em português A vitamina C é um nutriente extremamente importante para a fisiologia humana. No Brasil o consumo de vitamina C sob a forma de concentrados vitamínicos ainda é bastante restrito devido aos altos preços, restando para a maioria da população o consumo via alimentos como frutas e vegetais. A dosagem de vitamina C em alimentos tem, então, um papel crucial no que diz respeito aos estudos pós-colheita para a conservação e a minimização das perdas deste nutriente tã (mais) o sensível. Neste estudo, é apresentado um método para análise de vitamina C por cromatografia líquida de alta eficiência utilizando coluna de troca iônica forma hidrogênio, que demonstrou ser mais eficiente do que os métodos usuais por coluna de fase reversa (C18) para matrizes complexas e baixos teores do analito. A reprodução dos perfis cromatográficos foi em nível de linha de base com picos de pureza espectral comprovada por detector de arranjo de diodos. Esse método também foi avaliado segundo a extração mais adequada para estabilização da vitamina C, e mostrou que a fase móvel (ácido sulfúrico suprapuro® 0,05 M) foi uma solução extratora adequada para a estabilização da vitamina C. Resumo em inglês Vitamin C is an essential nutrient for human physiology. In Brazil, vitamin C supplements are expensive and most of the population obtains vitamin C through its consumption of fruits and vegetables. Therefore, the vitamin C assay in food is crucial in post-harvest studies to conserve and minimize losses of this highly sensitive nutrient. This study proposes a method for analyzing vitamin C by High Performance Liquid Chromatography using a hydrogen type ion exchange column (mais) , and demonstrates that it is more efficient than the traditional methods of reverse phase column (C18) for complex matrixes and low levels of this analyte. Chromatograms were baseline resolved and peak purity evaluation showed spectral homogeneity by photo diode array detector. This method was also tested using the best extraction solution to stabilize vitamin C, demonstrating that 0.05 M of superpure sulfuric acid (also the mobile phase) was the most efficient solution for this purpose.

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Efeito de frações parcialmente purificadas de Saccharomyces cerevisiae na germinação de conídios e formação de apressórios por Colletotrichum sublineolum e Colletotrichum lagenarium/ Effect of fractions partially purified from Saccharomyces cerevisiae on conidium germination and appressorium formation by Colletotrichum sublineolum and Colletotrichum lagenarium

Bonaldo, Solange Maria; Pascholati, Sérgio Florentino
2007-09-01

Resumo em português O trabalho teve por objetivo verificar o efeito de preparações ou de frações parcialmente purificadas obtidas de S. cerevisiae, autoclavada por 4 horas seqüencialmente, submetidas à cromatografia de troca iônica (CTI) utilizando tampão Tris-HCl ou bicarbonato de amônio, na germinação de esporos (GE) e formação de apressórios (FA) in vitro por C. lagenarium ou C. sublineolum. Para isto, 40 µL de cada preparação ou fração foram colocados em pocinhos (mais) de placa de ELISA, juntamente com 40 µL de uma suspensão de esporos (1 x 10(5) conídios/mL) de C. lagenarium ou de C. sublineolum. Após incubação, determinou-se GE e FA. Água destilada esterilizada foi utilizada como controle. Todas as preparações da levedura autoclavada promoveram estímulo da GE, sem a formação de apressórios por ambos os fitopatógenos. Frações provenientes da CTI, com tampão Tris-HCl, induziram a GE por C. sublineolum e C. lagenarium. Na FA de C. lagenarium houve estímulo pelas frações IV, V e VI, sem diferença, no entanto, na FA de C. sublineolum. Para as frações obtidas por CTI, utilizando tampão bicarbonato de amônio, houve estímulo da GE por C. lagenarium nas frações I e IV e efeito inibitório da germinação pelas frações V, VI e VII. Não houve FA na fração I e as demais frações apresentaram efeito inibitório da FA por C. lagenarium. As frações I e II estimularam a GE e a FA por C. sublineolum e demais frações apresentaram efeito inibitório. Assim, evidencia-se a importância da escolha de tampões no processo de purificação de frações de S. cerevisiae, o que pode resultar em frações que estimulem a germinação de esporos de fitopatógenos fúngicos ou em frações com atividade inibitória da germinação, podendo contribuir futuramente no controle de doenças causadas por esses fungos. Resumo em inglês The objective of this study was to verify the effect of preparations or fractions partially purified from S. cerevisiae, autoclavad for 4 hours sequentialy, submitted to ion-exchange chromatography (IEC), using Tris-HCl or ammonium bicarbonate buffers, on the in vitro conidium germination (CG) and appressorium formation (AF) of C. lagenarium and C. sublineolum. A total of 40 µL of each preparation or fraction was placed inside the wells of ELISA plates with 40 &micr (mais) o;L of a spore suspension (1 x 10(5) conidia/mL) of C. lagenarium or C. sublineolum. After incubation, CG and AF were determined. Distilled water was used as control. All the preparations from the autoclavad yeast stimulated CG, without AF for both pathogens. Fractions from IEC, with Tris-HCl buffer, induced CG for C. sublineolum and C. lagenarium. For AF by C. lagenarium there was a stimulus by the fractions IV, V and VI without difference in AF by C. sublineolum. With the fractions obtained by IEC, using ammonium bicarbonate buffer, there was a stimulation of CG by C. lagenarium by the fractions I and IV and an inhibitory effect of the germination by the fractions V, VI and VII. There was no AF in the presence of fraction I and the other fractions exhibited inhibitory effect on AF by C. lagenarium. The fractions I and II stimulated CG and AF by C. sublineolum and other fractions presented inhibitory effect. Thus, it was showed the importance to select specific buffers during the purification of fractions of S. cerevisiae. This can result in fractions that stimulate CG and AF of these pathogens or in fractions with inhibitory activity on conidium germination that can contribute to control dispasps caused by these pathogens.

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Purification and partial characterisation of a lectin from the red marine alga Vidalia obtusiloba C. Agardh/ Purificação e caracterização parcial de uma lectina da alga marinha vermelha Vidalia obtusiloba C. Agardh

Melo, Fábio R.; Benevides, Norma M.B.; Pereira, Maria G.; Holanda, Márjory L.; Mendes, Francisca N.P.; Oliveira, Stélio R.M.; Freitas, Ana L.P.; Silva, Luana M.C.M.
2004-06-01

Resumo em português A lectina da alga marinha vermelha Vidalia obtusiloba foi purificada através da combinação de precipitação com sulfato de amônio, cromatografia de troca iônica em DEAE-celulose e cromatografia de afinidade em goma de guar reticulada. A lectina preferencialmente aglutinou eritrócitos do grupo humano O, nativos e tratados com bromelaina. A atividade hemaglutinante revelou que a lectina era dependente de cátions divalentes (Ca++ ou Mn++) e inibida por N-acetil-galac (mais) tosamina, D-galactosamina, alfa-lactose and D-galactose e pela glicoproteína mucina de estômago de porco. A massa molecular da lectina, estimada por filtração em gel, foi de 78,9 kDa, enquanto por SDS-PAGE, em presença de beta-mercaptoetanol, a lectina exibiu duas subunidades protéicas diferentes com Mr de 59,6 e 15,2 kDa, sugerindo que a lectina é uma proteína dimérica. Focalização isoelétrica revelou a presença de uma proteína ácida simples, com um ponto isoelétrico entre 4 e 5. A lectina purificada exibiu um conteúdo de carboidrato de 43,2% e uma predominância dos aminoácidos Asp/Asn, Glu/Gln e Leu. A energia de ativação (deltaG') para a desnaturação da lectina foi calculada como sendo 25,4 kcalm.mol-1 a 90 ºC. Ensaios imunoquímicos usando um anti-soro de coelho produzido contra a lectina purificada de V. obtusiloba mostraram que foi possível detectar a presença da lectina em diferentes etapas do processo de purificação. Western blotting de géis de SDS-PAGE mostraram imunocoramento apenas da maior das subunidades da lectina. Resumo em inglês The lectin of the red marine alga Vidalia obtusiloba was purified by a combination of ammonium sulphate precipitation, ion-exchange chromatography on DEAE-cellulose and affinity chromatography on cross-linked guar gum. The lectin preferentially agglutinated native and bromelain-treated human group O erythrocytes. The haemagglutinating activity revealed that the lectin was dependent on divalent cations (Ca++ or Mn++) and was shown to be inhibited by N-acetyl-galactosamine, (mais) D-galactosamine, alpha-lactose and D-galactose and by the glycoprotein porcine stomach mucin. The molecular mass of the lectin, estimated by gel filtration, was 78.9 kDa while by SDS-PAGE, in the presence of beta-mercaptoethanol, the lectin exhibited two different protein subunits with Mr of 59.6 and 15.2 kDa, suggesting that the lectin is a dimeric protein. Isoelectric focusing revealed the presence of a simple acidic protein with an isoelectric point between 4 and 5. The purified lectin showed a carbohydrate content of 43.2% and a predominance of the amino acids Asp/Asn, Glu/Gln and Leu. The energy of activation (deltaG') for the denaturation of the lectin was estimated to be 25.4 kcal.mol-1 at 90 ºC. Immunochemical assays using a rabbit antiserum raised against the purified lectin of V. obtusiloba showed that it was possible to detect the presence of the lectin at different steps of the purification process. Western blotting of SDS-PAGE gels showed immunostaining of only the larger of the lectin subunits.

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Contribuição da glicemia pós-desjejum para o controle glicêmico do paciente com diabetes melito tipo 2/ Contribution of post-breakfast plasma glucose to the glycemic control of type 2 diabetic patients

Sartori, Maria Salete; Aragon, Flávio Ferrari; Padovani, Carlos Roberto; Pimenta, Walkyria de P.
2006-02-01

Resumo em português Estudos epidemiológicos observaram que glicemias pós-prandiais (GPPs) elevadas são fator principal na ocorrência de doenças cardiovasculares. Sabe-se que a hemoglobina glicada (HbA1C) reflete a glicemia média dos últimos 2-3 meses, entretanto é controversa a contribuição relativa da glicemia de jejum (GJ) e GPP para o valor da HbA1C. OBJETIVO: Avaliar a contribuição da GJ e GPPs para o valor da HbA1C em pacientes com diabetes melito tipo 2 (DM2). MÉTODOS: Par (mais) ticiparam 53 indivíduos com DM2, estáveis e em tratamento com antidiabéticos orais (n= 27) e/ou insulina (n= 26). Cada paciente comparecia a 3 visitas a intervalos de 2 meses. Em cada visita era medida a GJ, as GPPs (2h pós-desjejum: GPD e pós-almoço: GPA) e a HbA1C, sendo fornecido o desjejum e o almoço segundo seus hábitos alimentares. Mediu-se a glicose plasmática pela glicose-oxidase e a HbA1C, pela cromatografia de troca iônica. Realizou-se a análise das associações pelo coeficiente de correlação de Spearman, com P Resumo em inglês Epidemiological studies have documented that postprandial hyperglycemia is the main risk factor for cardiovascular diseases. It has been established that glycated hemoglobin (HbA1C) provides an integrated measure of plasma glucose (PG) of the last 2-3 months. However, the relative contribution of fasting PG (FPG) and postprandial PG (PPG) to the HbA1C value is controversial. OBJECTIVE: To evaluate FPG and PPG contributions to the HbA1C value in patients with type 2 diabet (mais) es mellitus (DM2). METHODS: 53 subjects with stable DM2 were studied. They were treated with oral anti-diabetic agents (n= 27) and/or insulin (n= 26). Each subject went to 3 visits at 2-month-intervals. On each visit, FPG, PPG (2h after breakfast and lunch), and HbA1C were measured and we provided breakfast and lunch according to their meal habits. PG was measured by glucose-oxidase and HbA1C by ion-exchange chromatography. Statistical analysis was performed by correlation coefficients at a

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Peroxidases ativadas por frações protéicas de extrato biológico eficaz na proteção do tomateiro contra a mancha bacteriana/ Peroxidases activated by protein fractions of a biological extract useful for tomato protection against bacterial spot

Cavalcanti, Fábio R.; Resende, Mário Lúcio V.; Oliveira, José Tadeu A.
2007-12-01

Resumo em português Uma formulação natural (VLAF) obtida da extração aquosa a frio dede tecido necrótico de lobeira (Solanum lycocarpum), infectado por Crinipellis perniciosa (Stahel) Singer, promoveu redução significativa no progresso da mancha foliar bacteriana (Xanthomonas campestris pv. vesicatoria), quando previamente pulverizado em folhas de tomateiro. Duas frações obtidas por precipitação salina, F0/30 e F30/60, apresentaram a maior parte das proteínas do extrato VLAF (mais) e foram submetidas à cromatografia de troca catiônica para separação das proteínas contidas nas frações. Os picos não retidos dessa cromatografia foram então submetidos à cromatografia de troca aniônica. Todos os picos, retidos e não retidos das duas cromatografias, foram amostrados e pulverizados sobre plantas de tomate cv. Santa Cruz Kada. Respostas diferenciais de atividade de peroxidases foram obtidas 14 horas após pulverizações. As amostras que induziram os maiores aumentos na atividade de peroxidases nas plantas foram o pico retido em CM-celulose da F0/30 (F0-30CMR) e o pico retido em DEAE-celulose da F30/60 (F30-60DEAER). Os resultados deste estudo indicaram a viabilidade da purificação e da caracterização de proteínas ou carboidratos eliciadores provenientes de VLAF. Resumo em inglês A crude formulation (VLAF) of an aqueous cold extract obtained from Solanum lycocarpum necrotic tissue infected by Crinipellis perniciosa was showed capable of reducing disease progress of tomato bacterial leaf spot, when previously sprayed on tomato plants. The fractions F0/30 and F30/60 were achieved by saline precipitation and they showed highest amounts of proteins from VLAF. The fractions were submitted to cationic exchange chromatography for protein scanning. Non-re (mais) tained peaks from this first chromatography were submitted to an anionic exchange chromatography. Both retained and non-retained peaks from both ion exchanges were sampled and sprayed on cv. Santa Cruz Kada tomatoes. Contrasting peroxidase activities were observed 14 hours after sprayings. The samples that produced the highest peroxidase increases were the retained peak in cationic exchange from F0/30 (F0-30CMR) and the retained peak in anionic exchange chromatography from F30/60 (F30-60DEAER). Our results indicate the viability of searching for protein- or carbohydrate-derived molecules from VLAF aqueous extract.

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Composição química de tabletes de caldo de carne: nitrogênio protéico, não-protéico e fenilalanina/ Chemical composition of bouillon cubes protein nitrogen, non protein nitrogen and phenylalanine

Guimarães, Claudia Passos; Lanfer Marquez, Ursula M.
2002-12-01

Resumo em português A redução dos níveis sangüíneos de fenilalanina (Phe) em pacientes fenilcetonúricos requer o conhecimento preciso do teor de Phe nos alimentos, para que possa haver um controle da ingestão desse aminoácido. Este trabalho teve como objetivo estudar o teor protéico e de Phe em tabletes de caldo de carne de duas marcas comerciais, contribuindo com informações para a elaboração de cardápios. A análise de aminoácidos foi realizada por cromatografia de troca iô (mais) nica em autoanalisador de aminoácidos e os teores de umidade, proteína bruta (Nx6,25) e lipídeos foram determinados por métodos descritos na AOAC (1995). A fibra alimentar foi quantificada por método enzimático. O nitrogênio protéico (NP) foi determinado após precipitação ácida da proteína. Observamos que os teores de umidade, lipídeos foram semelhantes nos dois produtos com valores médios de 3,7%, e 8,4%, respectivamente. Os teores de fibra foram inferiores a 2%, mas vale ressaltar o elevado teor de minerais, da ordem de 61% no produto A e de 54% no produto B. Comparando-se os valores de nitrogênio total e NP, verificamos que aproximadamente 95% do N correspondem a N de origem não protéica. O teor protéico real, pela somatória de aminoácidos, era de apenas 0,71g/100g e de 0,84g/100g nas amostras A e B, respectivamente, e não foi possível detectar a presença de Phe nestas amostras. Teoricamente, considerando que uma proteína contém 4% de Phe em sua composição, as amostras analisadas contém no máximo 34mg Phe/100g, o que corresponde a 3,6mg Phe por tablete de caldo de carne de 10,5g. Esta reduzida quantidade justifica a dificuldade em se detectar analiticamente este aminoácido. A elevada quantidade de nitrogênio não protéico corresponde à presença de monoglutamato de sódio (realçador de sabor), de modo que a conversão Nx6,25 resulta em valores protéicos superestimados. Resumo em inglês The dietary intervention to lower the phenylalanine (Phe) serum levels of patients with Phenylketonuria (PKU) requires a restricted supply and the precise knowledge of Phe contents in foods, in order to control the intake of this amino acid. This work aimed to get more accurate data for protein and Phe contents in soup cubes of two commercial products to give dieticians data they need for planning diets. The amino acid contents were estimated by ion-exchange chromatograph (mais) y and moisture, lipids, crude protein (Nx6.25) contents were determined according to AOAC (1995) methods. Fiber was determined enzymatically. Protein nitrogen was determined after acid precipitation. Our results showed in both products, similar moisture and lipid contents with mean values of 3.7 and 8.4%, respectively. Dietary fiber contents were lower than 2% but it is worthy to mention the high mineral contents 61% in product A and 54% in product B. The comparison of total nitrogen (TN) and protein nitrogen (PN), shows that approximately 95% of TN corresponds to N of non protein origin. The real protein contents were only 0.71g/100g and 0.84g/100g in samples A and B, respectively and we were not able to detect phenylalanine. Theoretically, based solely on calculations and considering that proteins contain about 4% Phe in their constitution, the samples contain a maximum of 34mg Phe /100g, meaning 3.6mg Phe per each cube of 10.5g. These small amounts of Phe could explain the enormous difficulty in detecting this amino acid. The high amount of non-protein N is due to the presence of monosodium glutamate, which does not allow a reliable protein estimation by Nx6.25, resulting in protein and Phe overestimation.

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Alendronato de sódio: metodologias para análise quantitativa/ Sodium alendronate: methods for analytical quantitation

Ribeiro, Ana Ferreira; Volpato, Nadia Maria
2005-10-01

Resumo em inglês This paper presents a review of some published proposals for the analysis of sodium alendronate. The drug is an aminobisphosphonate compound used to inhibit the osteoclastic resorption of bone, and different methods were developed for its quantitative determination. These methodologies employed reversed-phase or ion-exchange HPLC analysis, both associated with different detectors: UV and fluorescence detection after derivatization of the drug, conductivity and refractive (mais) index detectors, as well as the indirect UV detection. Titrimetry and spectrophotometry (with previous complexation of the drug), which are simpler procedures, were also described, but they showed poor specificity when compared to liquid chromatography.

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