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Adenomas hipofisários produtores de glicoproteínas: patogênese, diagnóstico e tratamento/ Glycoprotein-secreting pituitary adenomas: pathogenesis, diagnosis and treatment

Abucham, Julio; Vieira, Teresa C.
2005-10-01

Resumo em português Os adenomas hipofisários produtores de glicoproteínas compreendem duas entidades clínicas e patológicas distintas: os adenomas gonadotróficos e os tirotróficos. Embora possam ser agrupados por produzirem hormônios e/ou sub-unidades que são glicoproteínas, esses tumores se originam em tipos celulares distintos (gonadotrofos e tirotrofos) que são apenas remotamente relacionados. Os gonadotróficos estão entre os adenomas hipofisários mais comuns, correspondendo (mais) à grande maioria dos assim chamados adenomas "não-funcionantes", silenciosos ou clinicamente não-secretores, enquanto os tirotróficos são extremamente raros e clinicamente se apresentam com hipertiroidismo por secreção inapropriada de TSH. Nesse artigo, os autores revisam aspectos epidemiológicos, patológicos, patogenéticos, clínicos, diagnósticos e terapêuticos desses adenomas. Uma ênfase maior foi dada à patogênese molecular dos tumores hipofisários em geral, buscando, sempre que possível, contrastar as alterações moleculares encontradas nesses adenomas com outros tipos de adenomas hipofisários. No lado mais prático, a experiência dos autores de mais de duas décadas no diagnóstico e tratamento desses tumores na Unidade de Neuroendocrinologia da Unifesp, foi criteriosamente utilizada para discutir a literatura disponível nesses tópicos. Resumo em inglês The glycoprotein-secreting pituitary adenomas comprise two distinctive clinical and pathological entities, the gonadotroph and the thyrotroph cell pituitary adenomas. Although they can be grouped together for producing hormones and/or subunits that are glycoproteins, these tumors originate from distinctive cell types (gonadotrophes and thyrotrophes) that are only remotely related. Gonadotroph cell adenomas are among the commonest types of pituitary adenomas, corresponding (mais) to the majority of the so-called "nonfunctioning" or clinically silent adenomas, while thyrotroph cell adenomas are extremely rare and usually present with hyperthyroidism due to inappropriate TSH secretion. In this article, we review the literature covering epidemiological, pathological, pathogenetic, clinical, diagnostic and therapeutic aspects of gonadotroph and thyrotroph cell adenomas. Greater emphasis was given to the growing field of molecular pathogenesis of pituitary tumors in general, and a special effort was made to contrast molecular alterations found in these tumors with other tumor types. On the practical side, the authors’ extensive experience for more than two decades in the diagnosis and management of these tumors at the Neuroendocrine Unit (Endocrinology Division, Unifesp) was used to balance the extensive literature on this subject.

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Obtenção de oligossacarídeos N-ligados às glicoproteínas dos líquens Sticta tomentosa e Sticta damaecornis/ N-linked oligosaccharides obtained from glycoproteins of the lichens Sticta tomentosa and Sticta damaecornis

Oliveira, Patrícia Fidelis de; Doná, Flávia; Marcelli, Marcelo; Cardoso, Marilsa; Silva, Maria de Lourdes Corradi da
2002-01-01

Resumo em português As glicoproteínas dos líquens Sticta tomentosa e Sticta damaecornis foram extraídas utilizando-se tampão específico e fracionadas pela adição crescente de sulfato de amônio. Dentre os diferentes cortes de saturação obtidos, as frações 30-80% de ambos os líquens foram eleitas objeto de estudo desta pesquisa. Métodos químicos e enzimáticos foram aplicados para a obtenção de oligossacarídeos N-ligados, que em seguida, foram derivatizados resultando em tiro (mais) sinamida-oligossacarídeos. Após inserção do grupo cromóforo nas estruturas oligossacarídicas, os mesmos foram purificados por HPLC com detecção em 280 nm. Em relação ao líquen Sticta tomentosa, os cromatogramas revelaram a presença de dois picos com tempos de retenção de aproximadamente 11 e 18 minutos sugerindo a presença de dois diferentes oligossacarídeos N-ligados. O líquen Sticta damaecornis, seguindo as mesmas condições de purificação, apresentou em cromatografia quatro picos distintos com tempos de 11, 13, 18,2 e 18,4 minutos, respectivamente, sugerindo por sua vez a presença de quatro oligossacarídeos N-ligados diferentes. Resumo em inglês The lichens Sticta tomentosa and Sticta damaecornis were extracted to obtain glycoproteins. The extracts were fractionated with 30-80% saturation (NH4)2SO4. The fractions were reduced, alkylated and after dialysis the material were digested with trypsin. The digests were dialyzed, freeze-dried and analyzed in reverse-phase high performance chromatography (RP-HPLC) based on the peptide hydrophobicity.N-linked oligosaccharides were removed from glycopeptides with PNGase A a (mais) nd analyzed by HPAEC-PAD that indicated the presence of several peaks between 12 to 17 min. The reducing oligosaccharides were reacted with NH4HCO3 to form oligosaccharides-glycosylamines and then derivatized with N-hydroxysuccinimidyl ester of Boc-tyrosine, resulting in tyrosinamide-oligosaccharides with sufficient hydrophobicity to facilitate RP-HPLC separation. RP-HPLC purification of asialyl tyrosinamide oligosaccharides from S. tomentosa showed two peaks eluted at 11 and 18 min. The asialyl tyrosinamide oligosaccharides from S. damaecornis eluted as four peaks at 11, 13, 18,2 and 18,4 min. The components that eluted at 11 min for both lichens showed the same monosaccharide composition.

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Mucoproteína versus alfa-1-glicoproteína ácida: o que quantificar?/ Mucoprotein versus alpha-1-acid glycoprotein: what should be measured?

Picheth, Geraldo; Bresolin, Paula L.; Pereira Jr., Osmar; Jaworski, Maria Cristina G.; Santos, Celso M.; Pinto, Adriana P.; Scartezini, Marileia; Alcântara, Vânia M.; Fadel-Picheth, Cyntia M.T.
2002-01-01

Resumo em português A quantificação sérica da alfa-1-glicoproteína (GPA) ácida é útil no diagnóstico e no acompanhamento dos processos agudos resultantes de múltiplas causas. Esta proteína também pode ser estimada pela quantificação da mucoproteína (Muco), ensaio que reflete as glicoproteínas com elevado teor de açúcar, entre as quais a GPA é majoritária. O objetivo deste trabalho é verificar a correlação e a performance analítica das determinações de mucoproteína ( (mais) Muco) e alfa-1-glicoproteína ácida (GPA), propondo uma equação de regressão linear. Amostras de soros de 540 pacientes, com idades entre 10 e 79 anos (média de 34,6), predominando mulheres (71,3%), foram analisadas simultaneamente para Muco (Winzler, manual com reagentes próprios) e GPA (imunoturbidimetria automatizada, Roche; Cobas mira). A análise de regressão, fixando a Muco como variável dependente, apresentou Muco (mg/dl em tirosina) = 0,031 x GPA (mg/dl) + 0,8 (r = 0,91); e, fixando o intercepto em zero, Muco = 0,039 x GPA (r = 0,98). A imprecisão interensaio foi de 23,4% e 5,2% (coeficiente de variação), respectivamente, para Muco e GPA. Conclusão: a elevada variabilidade analítica da quantificação da mucoproteína pelo método de Winzler recomenda que este ensaio seja substituído pela dosagem da alfa-1-glicoproteína ácida. Quando necessário, recomendamos estimar a mucoproteína, quantificando a alfa-1-glicoproteína ácida com ensaios de mesmo desempenho que o do utilizado neste trabalho, e usar a equação de regressão AGP (mg/dl) x 0,039 = Muco (mg/dl em tirosina). Resumo em inglês The alpha-1-acid glycoprotein (AGP, orosomucoid) serum measurement is useful in the diagnosis and management of acute processes of multiple causes. This protein can also be estimated by measuring the mucoprotein (Muco) that reflects the serum glycoproteins with high levels of sugars, in which than AGP is the principal component. The analytical performance between Muco and AGP was analyzed and a linear regression equation was proposed in this study. Samples from 540 patien (mais) ts between the ages of 10 and 79 years, averaged 34.6, being most of then women (71.3%), were analyzed simultaneously for Muco (Winzler manual procedure with in house reagents) and AGP (immunoturbidimetry, Roche, automated in Cobas mira). The regression equation considering Muco as a dependent variable showed: Muco (mg/dL Tyrosine) = 0.031 x GPA (mg/dL) + 0.8 (r = 0.91), and fixing the intercept to zero showed Muco = 0.039 x GPA (r = 0.98). In the imprecision studies (inter-run, coefficient of variation) 23.4% and 5.2% were found for Muco and AGP, respectively. Conclusion: the determination of serum mucoprotein is a highly imprecise assay that must be substituted by alpha-1-acid glycoprotein measurement. When necessary, we recommend the estimate of mucoprotein values, measuring AGP, with assays with same performances as we did in this paper, and using the regression equation AGP (mg/dL) x 0.039 = Muco (mg/dL in Tyrosine).

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Produção e caracterização de anticorpos monoclonais contra uma cepa do herpesvírus bovino tipo 1 defectiva na glicoproteína C (gC)/ Production and characterization of monoclonal antibodies to a bovine herpesvirus type 1 strain defective on the glycoprotein C

Winkelmann, Evandro Reinoldo; Silva, Letícia Frizzo da; Mayer, Sandra Vanderli; Mazzutti, Ketty Cristina; Weiblen, Rudi; Flores, Eduardo Furtado
2007-08-01

Resumo em português A maioria dos anticorpos monoclonais (AcMs) já produzidos contra o herpesvírus bovino tipo 1 (BoHV-1) reage com a glicoproteína C (gC), um antígeno abundante e imunodominante presente no envelope viral. Com o objetivo de produzir AcMs com outras especificidades protéicas, antígenos de uma cepa do BoHV-1 defectiva no gene da gC foram utilizados para a imunização de camundongos BALB/c. Após fusão e seleção de 54 hibridomas resistentes ao meio seletivo HAT, foram (mais) obtidos três clones (1F1, 2H4 e 4D7) secretores de imunoglobulinas da classe IgG2a, que reagiram com antígenos da cepa homóloga. Os AcMs reagiram com antígenos virais nas técnicas de imunofluorescência (IFA) e imunoperoxidase (IPX) em diluições de até 1:640 (sobrenadante de cultivo) e 1:20.000 (fluído ascítico). Os três AcMs apresentaram um espectro amplo de reatividade, reagindo com antígenos de 14 herpesvírus isolados de doença respiratória ou genital (provavelmente BoHV-1) e com 17 isolados de doença neurológica (supostamente BoHV-5), e apresentaram atividade neutralizante em níveis variáveis contra todos esses isolados. A especificidade protéica dos AcMs não pode ser determinada diretamente, pois nenhum deles reagiu com proteínas virais na técnica de Western blot. Por outro lado, os três AcMs reagiram em IFA com células infectadas com uma cepa do BoHV-5 defectiva nas glicoproteínas E, I e proteína US9, o que exclui estes antígenos como possíveis alvos dos AcMs. Por exclusão (gC, gE, gI) e pela sua forte atividade neutralizante, os AcMs são provavelmente direcionados contra epitopos conservados de outras glicoproteínas do envelope viral que contêm epitopos neutralizantes: a gB e/ou gD. Pelo seu alto título de reação e pelo amplo espectro de reatividade, esses AcMs possuem potencial aplicação em técnicas diagnósticas. Além disso, podem ser úteis para o mapeamento de epitopos neutralizantes conservados nas glicoproteínas do envelope. Resumo em inglês Most monoclonal antibodies (MAbs) already produced against bovine herpesvirus type 1 (BoHV-1) react with glycoprotein C (gC), an abundant and immunodominant antigen present on the viral envelope. In order to obtain MAbs with other protein specificities, antigens of a BoHV-1 gC-negative strain were used to immunize BALB/c mice. After fusion and selection of 54 HAT-resistant hybridomas, three clones have been obtained (1F1, 2H4 and 4D7) that secrete IgG2a antibodies reactin (mais) g to BoHV-1 antigens. These MAbs reacted with viral antigens in immunofluorescence (IFA) and immunoperoxidase (IPX) in dilutions up to 1:640 (hybridoma supernatants) and 1:20.000 (ascitis fluid). The three MAbs showed a wide spectrum of reactivity, recognizing antigens of 14 herpesviruses isolated from respiratory or genital disease (supposedly BoHV-1) and with 17 isolates of neurological disease (likely BoHV-5) and displayed varied levels of neutralizing activity against all these viruses. The protein specificity could not be demonstrated directly as none of the MAbs bound to viral antigens in Western blot. On the other hand, the three MAbs reacted with cells infected with a BoHV-5 strain defective in glycoproteins gE and gI, demonstrating they are directed to other viral proteins. By exclusion (gC, gE and gI) and due to their neutralizing activity, these MAbs are probably directed to conserved epitopes on other envelope glycoproteins harboring neutralizing epitopes: gB or gD. In this sense, besides being useful for diagnosis purposes, these MAbs may be very useful for mapping neutralizing epitopes in these glycoproteins.

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Caracterização da ativação plaquetária nos concentrados de plaquetas por citometria de fluxo/ Flow cytometric characterization of platelet activation in platelet concentrates

Landi, Evaldo P.; Marques Júnior, José F. C.
2003-03-01

Resumo em português Flow cytometric characterization of platelet membrane glycoproteins expression and procoagulant surface is a sensitive technique to identify platelet activation in platelet concentrates. Platelet activation could contribute to platelet storage lesion reducing platelet viability and its hemostatic function. Detection of activation in platelet concentrates may help to determine the mechanism by which platelets activate during preparation and storage. It may also suggest int (mais) erventions to prevent and reduce the platelet storage lesion. A monoclonal antibody panel that evaluate glycoproteins IIb-IIIa and Ib-IX migration, platelet degranulation and platelet procoagulant surface would provide more information about platelet activation than activation-dependent monoclonal antibodies alone. Resumo em inglês A caracterização da expressão das glicoproteínas de superfície plaquetária e superfície pró-coagulante por citometria de fluxo é uma técnica sensível para identificação da ativação plaquetária em concentrados de plaquetas. A ativação plaquetária pode desencadear alterações que irão influir na viabilidade das plaquetas durante o período de estocagem. A detecção da ativação plaquetária durante o preparo e estocagem dos concentrados de plaquetas p (mais) ode permitir a identificação dos mecanismos de ativação e sugerir alterações que irão influir na qualidade final do produto. A utilização isolada de anticorpos monoclonais específicos para plaquetas ativadas pode levar a erros de interpretação. Assim, é aconselhável o uso de painéis de anticorpos capazes de avaliar a migração das glicoproteínas IIb-IIIa e Ib-IX, o processo de degranulação e a formação de superfície pró-coagulante.

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O papel das citocinas no colesteatoma adquirido da orelha média: revisão da literatura/ The role of cytokines in acquired middle ear cholesteatoma: literature review

Alves, Adriana Leal; Ribeiro, Fernando de Andrade Quintanilha
2004-12-01

Resumo em português Este estudo visa a analisar de modo crítico a literatura pertinente a respeito do papel das citocinas no colesteatoma adquirido. O colesteatoma da orelha média é caracterizado pela presença de epitélio escamoso estratificado queratinizado neste local, com alto poder invasivo, causando destruição óssea e podendo levar a complicações. As citocinas são glicoproteínas de baixo peso molecular que atuam na intercomunicação celular. São importantes na estimulaçã (mais) o e supressão dos eventos da resposta imune, desencadeando e coordenando a resposta inflamatória, assim como os processos de cicatrização e remodelação tecidual. No colesteatoma já foram observadas as seguintes citocinas e fatores de crescimento: IL-1, IL-6, IL-8, TNF-±, TGF- ±,TGF-², EGF e KGF. Ocorre um sinergismo entre as diferentes citocinas para resultar nas características agressivas do colesteatoma. Resumo em inglês The present study conducted a critical analysis of the literature regarding the role of cytokines in acquired cholesteatomas. Middle ear cholesteatomas are characterized by the presence of stratified squamous epithelium in this cavity revealing highly invasive properties evolving bone destruction and subsequent complications. Cytokines are low molecular weight-glycoproteins able to act in cellular intercommunication. They are important to stimulation and suppression of im (mais) mune response-related events, triggering and coordinating inflammatory response, as well as wound healing and tissue remodeling. In cholesteatoma, reported cytokines and growth factors were as follows: IL-1, IL-6, IL-8, TNF-a, TGF-alpha, TGF-beta, EGF and KGF. A synergism among different cytokines should occur to generate the aggressive characteristics of cholesteatoma.

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Funções biológicas dos antígenos eritrocitários/ Biological functions of blood group antigens

Bonifácio, Silvia L.; Novaretti, Marcia C. Z.
2009-04-01

Resumo em português Os antígenos de grupos sanguíneos eritrocitários são estruturas macromoleculares localizadas na superfície extracelular da membrana eritrocitária. Com o desenvolvimento de estudos moleculares, mais de 250 antígenos são conhecidos e estão organizados em 29 sistemas de grupos sanguíneos reconhecidos pela Sociedade Internacional de Transfusão Sanguínea (ISBT). Estudos têm revelado que os antígenos de grupo sanguíneo estão expressos na membrana eritrocitária (mais) com ampla diversidade estrutural, incluindo epítopos de carboidratos em glicoproteínas e/ou glicolipídios e em proteínas inseridas na membrana via um domínio, via domínios de multipassagem ou ligados a glicosilfosfatidinositol. Além das diversidades estruturais, muitas funções importantes têm sido associadas aos antígenos eritrocitários recentemente identificadas, podendo ser esquematicamente divididas em: estruturais, transportadores, receptores e moléculas de adesão, enzimas, proteínas controladoras do complemento e outras. Esta revisão tem como foco as funções potenciais das moléculas que expressam os antígenos eritrocitários. Resumo em inglês Erythrocyte blood group antigens are macromolecules structures located on the extracellular surface of the red blood cell membrane. The development of molecular studies allowed the recognition of more than 250 antigens by the International Society for Blood Transfusion (ISBT). These studies have also shown that blood group antigens are carried on red blood cell membrane of wide structural diversity, including carbohydrate epitopes on glycoproteins and/or glycolipids and o (mais) n proteins inserted within the membrane via single or multi-pass transmembrane domains, or via glycosylphosphatidylinositol linkages. In addition, to their structural diversity, many important functions associated with blood group antigens have been recently identified and can be didactically divided into: structural proteins, transporters, receptors and adhesion molecules, enzymes, complement control proteins and others. This review will focus on the potential functions of the molecules that express blood group antigens.

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Detecção de atividade lectínica e atividade hemolítica em extratos de esponjas (Porifera) nativas da costa atlântica do Brasil/ Detection of lectinic activity and hemolytic activity in extracts of native sponges (Porifera) of atlantic coast of Brazil

Dresch, R.R.; Haeser, A.S.; Lerner, C.; Mothes, B.; Vozári-Hampe, M.M.; Henriques, A.T.
2005-03-01

Resumo em português Extratos aquosos de vinte espécies de esponjas da costa Atlântica brasileira foram testados para verificação da presença de atividade lectínica e atividade hemolítica. Hemaglutinação para eritrócitos humanos e de distintos animais foi evidenciada em 12 dos 20 extratos testados. Os extratos das espécies Axinella corrugata, Chondrilla nucula, Chondrosia collectrix, Cinachyrella alloclada e Guitarra sp1. foram os que apresentaram maior atividade hemaglutinante. Do (mais) s doze extratos com atividade hemaglutinante dez tiveram a atividade inibida por um ou mais açúcares e/ou glicoproteínas. A lectina do extrato de Chondrilla nucula foi resistente à desnaturação térmica quando aquecida a 100 ºC por 60 minutos. Atividade hemolítica foi encontrada apenas nos extratos de Petromica citrina e Acervochalina sp. As espécies que apresentaram maior potencial para futuros estudos de suas lectinas foram Axinella corrugata, Chondrilla nucula e Chondrosia collectrix, em vista da maior atividade hemaglutinante apresentada por seus extratos, aliada à maior atividade específica. Resumo em inglês Aqueous extracts of twenty species of sea sponges of the Brazilian Atlantic coast were tested with the aim of searching the presence of lectinic and hemolytic activity. Hemagglutinating activity for human erythrocytes and for distinct animals were found in 12 of the 20 tested extracts. The extracts of Axinella corrugata, Chondrilla nucula, Chondrosia collectrix, Cinachyrella alloclada and Guitarra sp1. were the ones that presented highest hemagglutinating activity. Ten of (mais) the 12 hemagglutinating extracts had the activity inhibited by one or more sugars or glycoproteins. The lectin from Chondrilla nucula was resistant to thermal denaturation when heated up to 100 ºC for 60 minutes. Hemolytic activity was only found in the extracts from Petromica citrina and Acervochalina sp. The species of sea sponges that showed major potential for futures studies of their lectins were Axinella corrugata, Chondrilla nucula and Chondrosia collectrix, due to the highest hemagglutinating activity presented by their extracts, allied to the highest specific activity.

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Carboidratos das fibras de cotilédones e proteínas de produtos derivados de soja (Glycine max (L.) Merril)/ Carbohydrates from cotyledon fibers and proteins of soybean (Glycine max (L.) Merril) derivatives

Seibel, Neusa Fátima; Beléia, Adelaide Del Pino
2008-09-01

Resumo em português Fibras alimentares obtidas de cotilédones de soja original (FAO) e micronizada (FAM) foram fracionadas e avaliadas quanto a polissacarídeos e monossacarídeos constituintes. O componente majoritário foi a hemicelulose, totalizando 59% em FAO e 51% na FAM, a pectina representou em média 14% e a celulose 8,5%. As duas amostras de fibras apresentaram 17 mg.g-1 de ácidos urônicos e a mesma composição de monossacarídeos, sendo galactose, glicose e arabinose/ramnose os (mais) principais componentes. As proteínas de concentrado protéico, farinha desengordurada e fibras alimentares (FAO e FAM) foram avaliadas quanto à solubilidade em diferentes solventes (NaCl, água, etanol e NaOH) e quanto ao peso molecular. A farinha desengordurada de soja teve a maior parte das proteínas passível de extração com solução salina, e o concentrado protéico e as fibras de cotilédones com solução alcalina. A fração protéica que não foi extraída com nenhum dos quatro solventes utilizados permaneceu no resíduo, o maior percentual estava no concentrado, seguido pela fibra alimentar micronizada e a farinha, já a menor quantidade estava na fibra alimentar original. A eletroforese das proteínas dos quatro ingredientes alimentares mostrou as subunidades que constituem as frações β-conglicinina e glicinina. Bandas com peso molecular próximo aos 30 kDa foram reveladas nas proteínas extraídas das fibras de cotilédones de soja, sendo provavelmente glicoproteínas de parede celular, ricas em hidroxiprolina. Resumo em inglês Dietary fibers from soybean cotyledons classified as original (ODF) and milled (MDF) were fractionated and evaluated as to fractions and monosaccharide composition. The major constituent was hemicellulose, 59% in ODF and 51% MDF, pectin was in average 14% and cellulose, 8.5%. Both samples had 17 mg.g-1 uronic acids and the same composition in monosaccharides: galactose, glucose and arabinose/rhamnose, after hydrolysis. Protein fractions extracted from protein concentrate, (mais) defatted flour and dietary fibers were evaluated for protein solubility in different solvents (NaCl, water, ethanol and NaOH) and for molecular weight. Defatted flour had the highest concentration of proteins soluble in saline solution, while protein concentrate and dietary fibers had the highest protein solubility in alkaline solution. Residual protein, not extracted with any of the solvents used, remained in the insoluble fraction and the highest concentration was in the protein concentrate, followed by MDF, defatted flour and ODF. Protein electrophoresis of the four food ingredients showed subunits that constitute the fractions β-conglycinin and glycinin. Protein extracted from the dietary fibers showed bands with molecular weight of about 30 kDa, probably glycoproteins from cell wall material, rich in hydroxyproline.

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Vacinas com marcadores antigênicos contra o vírus da rinotraqueíte infecciosa bovina e o vírus da doença de Aujeszky/ Vaccines with antigenic markers against bovine herpesvírus type-1 and pseudorabies vírus

Zanella, Janice Reis Ciacci; Flores, Eduardo Furtado
1995-01-01

Resumo em português Vacinas contra o herpes vírus bovino tipo-1 (IBRV, vírus da rinotraqueíte infecciosa) e o herpesvírus suíno (PRV, vírus da doença de Aujeszky) têm sido amplamente utilizadas em vários países para minimizar as perdas associadas à essas infecções. As vacinas tradicionais, no entanto, induzem uma resposta humoral indistinguível da resposta à infecção natural, o que não permite a distinção entre animais vacinados dos infectados naturalmente. Isto tem dific (mais) ultado o estabelecimento de medidas de controle e erradicação dessas enfermidades. Nos últimos anos, a manipulação genética desses vírus tem permitido a obtenção de mutantes com marcadores antigênicos específicos. A estratégia consiste na deleção de uma ou mais glicoproteínas do envelope viral que não são essenciais para a replicação do vírus e o uso desses mutantes como vacinas. A utilização de um teste sorológico específico para a glicoproteína deletada permite a distinção entre animais vacinados dos infectados com o vírus de campo. A utilização de vacinas com marcadores antigênicos, também chamadas de vacinas diferenciais, tem sido a base de programas de controle e erradicação da doença de Aujeszky em vários países e começa a ser utilizada no controle da rinotraqueíte infecciosa bovina. Este artigo apresenta uma breve revisão sobre as bases moleculares e biológicas das vacinas diferenciais para o IBRV e PRV, assim como possíveis aplicações dessas vacinas no controle dessas enfermidades no Brasil em um futuro próximo. Resumo em inglês Vaccination has been widely used to minimize the economic losses caused by bovine herpesvírus type-1 (IBRV) and pseudorabies virus (PR V) infections. The traditional vaccines, however, induce a humoral response that is indistinguishable from that induced by the natural infection. The impossibility of distinction between vaccinated and naturally infected animais has impaired the establishment of control and eradication programs for these diseases. In the last years, the g (mais) enetic manipulation of infectious agents has allowed the development of mutants that are detective in expression of specific envelope glycoproteins. The strategy consists of deletion of one or more non-essential viral envelope glycoproteins and the use of these mutants as vaccines. By using a serologic test that is specific for the deleted glycoprotein, it is possible to differentiate the vaccinated animais from those that have been naturally infected. The use of these genetically engineered vaccines, also known as marker vaccines, has been the basis for control and eradication programs of Aujeszky's disease in several countries and has recently begun to be utilized for IBRV. This article presents a brief review on the molecular and biological basis of the differential vaccines against IBRV and PRV and the possible applications of such vaccines in the control of these infections in the near future in Brazil.

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Matriz extracelular e enzimas degradatórias na hematopoese e doenças onco-hematológicas/ Extracellular matrix in hematopoiesis and hematologic malignancies

Dreyfuss, Juliana L.; Oliveira, José S. R.
2008-10-01

Resumo em português A matriz extracelular (MEC) é uma rede complexa composta por quatro grandes classes de macromoléculas: colágenos, proteoglicanos (PGs), glicosaminoglicanos (GAGs) e glicoproteínas adesivas. As interações entre as células e a MEC são cruciais para determinar os padrões de comportamento celular, tais como crescimento, morte, diferenciação e motilidade. A hematopoese é o sistema responsável pela produção das células sangüíneas. O controle da proliferação (mais) e diferenciação destas células é feito através da interação das células com o microambiente da medula óssea (matriz extracelular). A adesão de progenitores hematopoéticos a moléculas da MEC e a ativação das integrinas são modulados por uma variedade de citocinas e fatores de crescimento, e esta modulação parece ser o mecanismo de regulação que influencia a proliferação de células-tronco e progenitores hematopoéticos, migração transendotelial ou transestromal e homing. Tanto no processo de migração, homing e invasão tumoral, as células seguem os seguintes passos: 1 - Degradação da MEC por enzimas secretadas pelas células: metaloproteinases, colagenases, plasmina, catepsinas, glicosidases e heparanases; 2 - Locomoção das células na região da MEC previamente degradada pelas enzimas; 3 - Adesão das células via receptores específicos da superfície celular, que geralmente interagem com componentes da MEC. Nas doenças onco-hematológicas, a interação das células neoplásicas com a matriz extracelular também influencia na agressividade e prognóstico da doença. Resumo em inglês The extracellular matrix (ECM) is a complex structure composed of collagens, proteoglycans, glycosaminoglycans and adhesive glycoproteins. Interactions between the cells and the ECM are crucial to determine cell behavior, such as growth, death, differentiation and motility. Hematopoiesis is the system responsible for the production of blood cells. The control of proliferation and differentiation of these cells is attained through the interaction of the cells with the bone (mais) marrow microenvironment. The adhesion of hematopoietic progenitors to ECM molecules and the integrin activation are modulated by a variety of cytokines and growth factors, and this modulation seems to be the mechanism of regulation that influences proliferation of hematopoietic cells, transendothelial/transstromal migration and homing. Both in the migration and homing process, and in tumoral invasion the cells undergo the following steps: 1 - Degradation of the ECM by enzymes, including metalloproteinase, collagenase, plasmin, cathepsin, glycosidase and heparanase, secreted by the cells; 2 - Cell migration through the region previously degraded by enzymes; and 3 - Cell adhesion to specific receptors located on the cellular surface, that generally interact with ECM components. In onco-hematologic diseases, the interaction of neoplastic cells with the extracellular matrix also influences aggressiveness and prognosis of the disease.

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Histologia e caracterização histoquímica do tubo gastrintestinal de Pimelodus maculatus (Pimelodidae, Siluriformes) no reservatório de Funil, Rio de Janeiro, Brasil/ Histology and histochemical characterization of the digestive tract of Pimelodus maculatus (Pimelodidae, Siluriformes) in Funil reservoir, Rio de Janeiro, Brazil

Santos, Clarice M.; Duarte, Silvana; Souza, Tatiana G. L.; Ribeiro, Thatiana P.; Sales, Armando; Araújo, Francisco G.
2007-12-01

Resumo em português As estruturas teciduais do trato gastrintestinal de Pimelodus maculatus La Cepède, 1803, do reservatório de Funil (22º30'-22º35'S; 44º35'- 44º40'W) foram descritas através das técnicas de hematoxilina-eosina (HE), tricômico Gomori, ácido Periódico de Schiff (PAS) e alcian blue (AB) pH 2,5. Objetivou-se a detecção de glicoproteínas (GPs) na mucosa através de uma análise histoquímica e caracterização de possíveis alterações ao longo do trato digestóri (mais) o destes peixes neste sistema de elevado grau de alteração. Cinqüenta e quatro indivíduos adultos, coletados entre abril de 2003 e julho de 2004 (CT=19-38 cm) foram utilizados. Na cavidade bucofaríngea, a mucosa apresenta-se com pregas longitudinais e o epitélio é do tipo estratificado pavimentoso. O esôfago apresenta o mesmo tipo de epitélio da cavidade bucofaríngea, destacando-se a predominância de células mucosas que tiveram forte reação aos métodos utilizados. O estômago foi diferenciado em região cárdica, fúndica e pilórica. A mucosa é continuamente revestida por um epitélio simples cilíndrico que apresentou reação positiva ao AB e PAS somente na superfície apical das células; a lâmina própria possui glândulas tubulares que se ramificam gradativamente e consistem de um tipo celular denominado oxinticopépticas, relacionadas com a síntese de ácido clorídrico e pepsinogênio. O intestino apresenta vilosidades revestidas por um epitélio simples cilíndrico com planura estriada e células caliciformes. Na camada submucosa do duodeno foi observada a abertura do colédoco, sendo o epitélio do tipo simples cilíndrico sem células caliciformes, positivo tanto ao PAS quanto ao AB. O ambiente eutrófico do reservatório de Funil não parece influenciar os padrões morfológicos das estruturas (esôfago, estômago e intestino) e não foram observadas modificações nas atividades das células mucosas. Resumo em inglês Histological structures of the digestive traits of Pimelodus maculatus La Cepède, 1803, in the Funil reservoir (22º30'- 22º35'S; 44º35'- 44º40'W) were described using haematoxilin-eosin (HE), trichome Gomori, periodic acid Schiff (PAS) and alcian blue (AB) pH 2.5 techniques. The main aim of this study was to detect the levels of glycoproteins (GPs) in the mucous tunic based in histochemical techniques and to characterize eventual alteration in the digestive tract of (mais) this species in a polluted system. Fifty-four adult individuals collected between April-2003 and July-2004 (TL=19-38 cm) were examined. The mucosa showed longitudinal folds in the buccopharyngeal cavity, with a stratified squamous epithelium. The oesophagus showed epithelium similar to buccopharyngeal cavity, with a predominance of mucous cells, which reacted strongly with the used methods. The stomach showed three regions: cardic, fundic and pyloric. The mucous tunic is continuously revested by a single cylindrical epithelium which showed positive reaction to AB and PAS only at the apical cells surface. The proper tunic has tubular glands that ramify gradatively, being a cellular type named oxyntopeptic, related to chloridric acid and pepsinogenic cells synthesis. The intestine showed vilosities, with the mucous tunic revested by a single cylindrical epithelium with striated planure and caliciform cells. The duodenum submucosa layer was located at the coledocum opening, as a single cylindrical epithelium lacking caliciforms cells, reacting positively with both PAS and AB. The eutrophic environment of Funil reservoir did not seem to influence morphologic patterns of the structures (oesophagus, stomach and intestine) and no modification was observed in the mucous cells activity.

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Ácidos siálicos: da compreensão do seu envolvimento em processos biológicos ao desenvolvimento de fármacos contra o agente etiológico da gripe/ Sialic acids: from the comprehension of their involvement in biological processes to antiinfluenza drug design

Fátima, Ângelo de; Baptistella, Lúcia Helena Brito; Pilli, Ronaldo Aloise; Modolo, Luzia Valentina
2005-03-01

Resumo em inglês Sialic acids are nine-carbon carbohydrates that occur widely in nature and occupy the terminal portions of some glycoproteins and glycolipids of cell membranes. These carbohydrates are closely involved in cell-cell interactions and in processes such as microbial infection, inflammation, etc. Studies on the participation of sialic acids in biological processes have provided comprehension about their role in the infection by the influenza virus, the causal agent of flu. In (mais) this article, we present an overview of the importance of sialic acids in the influenza virus infection and how the knowledge of their involvement in this process has allowed the development of selective and efficient drugs against the virus.

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Caracterização antigênica e molecular de oito amostras do vírus da doença de Aujeszky isoladas no estado do Rio Grande do Sul em 2003/ Antigenic and molecular characterization of eight samples of Aujeszky's disease virus isolated in the state of Rio Grande do Sul, Brazil, in 2003

Silva, Alessandra D'Ávila da; Sortica, Vinícius A.; Braga, Alexandre C.; Spilki, Fernando R.; Franco, Ana C.; Esteves, Paulo A.; Rijsewijk, Frans; Rosa, Júlio César A.; Batista, Helena Beatriz C.R.; Oliveira, Anna P.; Roehe, Paulo M.
2005-03-01

Resumo em português A doença de Aujeszky ou pseudoraiva (DA), causada pelo vírus da pseudoraiva (PRV) é a maior preocupação na produção de suínos. No estado do Rio Grande do Sul, Brasil, a DA foi somente detectada em 1954, em bovino. Em 2003, ocorreram dois surtos de encefalite em granjas na região norte do estado, fronteira com o estado de Santa Catarina. O vírus da doença de Aujeszky (VDA) foi isolado a partir de animais coletados em oito granjas distintas da região e submetido (mais) a análises antigênicas e moleculares. As amostras de VDA isoladas foram comparadas com as amostras padrão NIA-3 e NP. A caracterização antigênica dos mesmos foi realizada com testes de imunoperoxidase frente a um painel de anticorpos mono-clonais (Mabs) preparado contra epitopos de glicoproteinas virais (gB, gC, gD e gE). A caracterização genômica foi realizada através da análise restrição enzimática (REA) sobre o genoma total das amostras, com a enzima de restrição (REA) Bam HI. O perfil antigênico das oito amostras isoladas no Rio Grande do Sul, bem como os apresentados pelas amostras padrão NIA-3 e NP, foram similares. A REA revelou que todos as oito amostras do Rio Grande do Sul apresentaram um arranjo genômico do tipo II, genótipo frequentemente encontrado em surtos prévios de DA em outros estados do Brasil. Os resultados aqui obtidos indicam que as oito amostras isoladas no Rio Grande do Sul são similares. Resumo em inglês Pseudorabies or Aujeszky's disease (AD), caused by pseudorabies virus (PRV) is a major concern in swine production. In the state of Rio Grande do Sul, Brazil, AD was only detected in 1954, in cattle. In 2003 two outbreaks of encephalitis occurred on the northern region of the state, close to the border with the state of Santa Catarina. Pseudorabies virus (PRV) was isolated from distinct farms within the region and subjected to antigenic and genomic analyses. These isolate (mais) s were compared with prototype strains NIA-3 and NP. Antigenic characterization with a panel of monoclonal antibodies (Mabs) directed to viral glycoproteins (gB, gC, gD and gE,) was performed by an imunoperoxidase monolayer assay (IPMA) on infected cell monolayers. Genomic characterization was carried out by restriction enzyme analysis (REA) of the whole DNA viral genome with Bam HI. The antigenic profile of the eight isolates from Rio Grande do Sul as well as strains NIA-3 and NP were similar. REA analysis revealed that all isolates from Rio Grande do Sul displayed a genomic type II arrangement, a genotype often found in other outbreaks of AD previously reported in other Brazilian states. The results obtained suggest that the eight isolates examined here were similar.

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Avaliação de testes imunológicos para o diagnóstico da neurocisticercose/ Evaluation of immunological tests for the diagnosis of neurocysticercosis

Macedo, Heloisa Werneck de; Peralta, Regina Helena Saramago; Cipriano, Armando; Sarmento, Maria Rosa; Vaz, Adelaide José; Peralta, José Mauro
2002-01-01

Resumo em português Introdução: O diagnóstico da neurocisticercose (NCC) deve ser feito pela associação de técnicas de imagem com métodos imunológicos sensíveis e específicos. Objetivos: Avaliar os métodos Elisa e Western blot (Wb), utilizando-se como antígeno extrato bruto salino da larva da Taenia solium, o Cysticercus cellulosae e Wb, empregando-se como antígeno cisticercos da Taenia crassiceps em amostras de soro, para o diagnóstico da NCC. Materiais e métodos: Foram avali (mais) adas amostras de soro de 43 pacientes com diagnóstico de NCC: 21 por clínica, tomografia computadorizada de crânio (TC) e presença de anticorpos anticisticerco no líquido cefalorraquiano (LCR); 22 por clínica e TC e 229 pacientes com diferentes parasitoses. Para as análises desses materiais biológicos foram empregados os métodos Elisa, usando-se como antígeno C. cellulosae, e Wb, usando-se como antígeno C. cellulosae e Cysticercus longicollis. Resultados: O método Elisa utilizando C. cellulosae como antígeno apresentou especificidade de 95% e sensibilidade de 71%. O método Wb utilizando C. cellulosae ou C. longicollis como antígeno apresentou sensibilidade de 86% e especificidade de 99%. Conclusões: Os métodos imunológicos no LCR são importantes para a definição da NCC. Entretanto o método Elisa no soro ainda não é adequado pela sua baixa sensibilidade, mas o Wb apresentou alta especificidade e boa sensibilidade, podendo auxiliar no diagnóstico da NCC, possibilitando sugerir a existência de forma transicional da doença, não demonstrada pela TC. Resumo em inglês Background: The diagnosis of neurocysticercosis (NCC) has been made by association of neuroimaging studies and use of sensitive and specific serological assays. Objectives: Evaluating Elisa and Western blot (Wb) tests using a crude extract of Cysticercus cellulosae (Taenia solium) as antigen and a Wb test using a glycoprotein of Cysticercus longicollis (Taenia crassiceps) as antigen for the diagnosis of NCC. Methods: Serum samples from 43 patients with NCC: 21patients pre (mais) senting clinical manifestations, cerebral computed tomography findings compatible with cerebral lesions and high levels of anti-cysticercus antibodies in cerebrospinal fluid (CSF); 22 patients with clinical manifestations and cerebral computed tomography findings compatible with cerebral lesions and serum samples from 229 patients with other parasitic infections were tested by Elisa standardized with crude extract of C. cellulosae and Wb standardized with glicoprotein of C. cellulosae and C. longicollis. Results: The Elisa test using crude extract of C. cellulosae showed specificity of 95% and sensibility of 71%. Both tests using glycoproteins of either C. cellulosae or C. longicollis showed specificity of 99% and sensibility of 86%. Conclusions: The use of immunological techniques for antibodies detection in CSF was shown to be an important tool for NCC diagnosis. However, detection of antibodies in serum lacked sensibility when Elisa was evaluated. The Wb assay in serum samples was sensitive and specific and it can be helpful for the diagnosis of the transitional form of NCC frequently not detected by cerebral computed tomography.

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Aspectos histológicos e histoquímicos da cloaca feminina de Columba livia (Gmelin) (Columbidae, Columbiformes)/ Histological and histochemical aspects of female cloaca of Columba livia (Gmelin) (Columbidae, Columbiforme)

Teles, Maria Eloíza de Oliveira; Ribeiro, Maria das Graças; Maruch, Sandra Maria das Graças; Ribeiro, Roseli Deolinda
2001-03-01

Resumo em inglês The domestic dove Columba livia (Gmelin, 1789) is a species well adapted to Brazil and the study of its reproductive biology is part of a broad research project on birds. This essay describes the morphological aspects of the cloaca of female Columba livia, describing compartments lengthwise starting from the head such as the coprodeo, urodeo and proctodeo limited by mucosal folds. Each compartment of the cloaca presents its own morphological characteristics which differ o (mais) ne from the other in form, height and position of mucosal projections, kinds of tissues, presence and histological aspects of glands, presence of lymphonodus. The rectum opens into the coprodeo, the ureter opens into the oviduct and the cloacal sac opening into the proctodeo. Histochemical studies have shown the presence of glycoproteins in tissue cells and gland cells on the three segments of the cloaca.

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