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Ultraestrutura do nervo facial intratemporal em pacientes com paralisia facial idiopática: estudo de evidências de infecção viral/ Intratemporal facial nerve ultrastructure in patients with idiopathic facial paralysis: viral infection evidence study

Florez, Rosangela Aló Maluza; Lang, Raquel; Veridiano, Adriano Mora; Zanini, Renato de Oliveira; Calió, Pedro Luiz; Simões, Ricardo dos Santos; Testa, José Ricardo Gurgel
2010-10-01

Resumo em português A etiologia da paralisia facial periférica idiopática (PFPI) ainda é uma incógnita, no entanto, alguns autores aventam a possibilidade de ser uma infecção viral. OBJETIVO: Analisar a ultraestrutura do nervo facial procurando evidências virais que possam nos fornecer dados etiológicos. MATERIAL E MÉTODO: Foram estudados 20 pacientes com PFP, com graus de moderado a severo, de ambos os sexos, entre 18-60 anos, provenientes de Ambulatório de Distúrbios do Nervo Fa (mais) cial. Os pacientes foram divididos em dois grupos: Estudo, onze pacientes com PFPI e Controle, nove pacientes com Paralisia Facial Periférica Traumática ou Tumoral. Foram estudados fragmentos de bainha do nervo facial ou fragmentos de seus cotos, que durante a cirurgia de reparação do nervo facial, seriam desprezados ou encaminhados para estudo anatomopatológico. O tecido foi fixado em glutaraldeído 2% e analisado em Microscopia Eletrônica de Transmissão. RESULTADO: Observamos no grupo estudo atividade celular intensa de reparação com aumento de fibras colágenas, fibroblastos com organelas desenvolvidas, isentos de partículas virais. No grupo controle esta atividade de reparação não foi evidente, mas também não foram observadas partículas virais. CONCLUSÃO: Não foram encontradas partículas virais, no entanto, houve evidências de intensa atividade de reparação ou infecção viral. Resumo em inglês The etiology of idiopathic peripheral facial palsy (IPFP) is still uncertain; however, some authors suggest the possibility of a viral infection. AIM: to analyze the ultrastructure of the facial nerve seeking viral evidences that might provide etiological data. MATERIAL AND METHODS: We studied 20 patients with peripheral facial palsy (PFP), with moderate to severe FP, of both genders, between 18-60 years of age, from the Clinic of Facial Nerve Disorders. The patients were (mais) broken down into two groups - Study: eleven patients with IPFP and Control: nine patients with trauma or tumor-related PFP. The fragments were obtained from the facial nerve sheath or from fragments of its stumps - which would be discarded or sent to pathology exam during the facial nerve repair surgery. The removed tissue was fixed in 2% glutaraldehyde, and studied under Electronic Transmission Microscopy. RESULTS: In the study group we observed an intense repair cellular activity by increased collagen fibers, fibroblasts containing developed organelles, free of viral particles. In the control group this repair activity was not evident, but no viral particles were observed. CONCLUSION: There were no viral particles, and there were evidences of intense activity of repair or viral infection.

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Morfologia das partículas do vírus do anel do pimentão/ Morphology of pepper ringspot virus (Brazilian tobacco rattle virus) particles

Kitajima, E. W.; Oliveira, A. R.; Costa, A. S.
1969-01-01

Resumo em português Partículas tubulares, ca. 25 m¼. em diâmetro externo e com um canal axial de 4 m¼ de largura, foram observadas em preparações rápidas ou purificadas e no interior de tecidos de plantas infetadas pelo vírus do anel do pimentão (VAP). Dois tipos de partículas, quanto ao comprimento normal, respectivamente 55 e 200 m¼, foram notadas em preparações in vitro, e com infetividade associada somente às partículas longas. Partículas, de preparações purificadas, qu (mais) ando incubadas com ribo-nuclease ou tripsina, não se alteravam, embora em algumas das experiências a tripsinização houvesse induzido uma agregação terminal das partículas. Quando aquecidas a temperaturas superiores a 65-70°C/10' há, paralelamente à redução da infetividade, uma decomposição dos virions, que se transformam em material pulverulento. Em secções ultra-finas de tecidos infetados foram encontrados agregados ordenados de partículas similares àquelas encontradas in vitro, no citoplasma. Essas inclusões constituiam-se somente de partículas longas (ca. 200 m¼), e a ausência de grupos de partículas curtas características sugere que estas representem fragmentos aproximadamente iguais a 1/4 das longas. Resumo em inglês Tubular particles, about 25 m¼ wide, with an axial channel 4 m¼ in diameter, were found in leaf dip or purified preparations and also within tissues, from plants infected with pepper ringspot virus (PRSV), but not in uninoculated control plants. The particle length determinations showed two prevalent types of particles in vitro, respectively with ca. 55 m¼ and 200 m¼ in normal length. These values were independent of the virus isolate, host plant or preparative proced (mais) ures for electron microscopy employed. In thin section profiles, a dense rim was observed bordering the axial channel, in cross section of particles stained with uranyl acetate, which might represent the location of the viral nucleic acid in the virion. The long, 200 m¼, particles can be separated from the short, 55 m¼ particles through sucrose gradient density ultracentrifugation, when it can be demonstrated that only the longer particles are infective. Incubation of purified preparations with ribonuclease and/or trypsin, did not affect infectivity or the structure of the virions. However, in some experiments, the trypsin treatment induced an end-to-end aggregation of the particles. Purified preparations lose infectivity after being heated for 10 minutes at 65-70°C. Simultaneously a generalized degradation of virions is noticeable. The end product of this degradation is a powdery material, composed of granules 30-40 Aº in diameter. In ultrathin sections of PRSV-infected tissues, ordered aggregates of particles, similar to those found in vitro,were observed in the cytoplasm. Such inclusions consisted of long (200 m¼) particles only. In no instance, groups of typical 55 m¼, short particles were found, and this suggests that they are fragments of the longer, 200 m¼. particles, rather than products of self multiplication.

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Ruptura da barreira hematoencefálica após injeção de droga gliotóxica no tronco encefálico de ratos wistar/ Blood-brain barrier breakdown following gliotoxic drug injection in the brainstem of Wistar rats

Bondan, Eduardo Fernandes; Lallo, Maria Anete; Dagli, Maria Lúcia Zaidan; Pereira, Luís Antonio Violin Dias; Graça, Dominguita Luhers
2002-09-01

Resumo em português O brometo de etídio (BE) determina desaparecimento astrocitário local, com ruptura da glia limitans e suposto dano na barreira hematoencefálica (BBB). Este estudo visou avaliar a integridade da BBB após injeção de solução de BE a 0,1% (grupo E) ou de salina a 0,9% (grupo C) na cisterna pontis de ratos Wistar. Fragmentos do tronco encefálico foram coletados das 24 horas aos 31 dias pós-injeção para estudo ultra-estrutural e marcação imuno-histoquímica para a (mais) GFAP. Alguns animais receberam carvão coloidal por via intravenosa nos mesmos períodos. Nos ratos do grupo C, não houve sinal de perda astrocitária, nem extravasamento vascular de carvão no sítio da injeção. No grupo E, o desaparecimento astrocitário começou às 48 horas e algumas áreas estavam ainda destituídas de processos astrocíticos 31 dias após. Extravasamento de partículas de carvão nas lesões foi visto de 48 horas até 7 dias, não sendo detectada qualquer alteração ultra-estrutural das junções oclusivas pela falta de astrócitos perivasculares. Resumo em inglês Ethidium bromide (EB) causes local astrocytic disappearance, with glia limitans disruption and supposed blood-brain barrier (BBB) breakdown The aim of this study was to investigate the BBB integrity after the injection of 0.1% EB (group E) or 0.9% saline solution (group C) into cisterna pontis of Wistar rats. Brainstem fragments were collected from 24 hours to 31 days post-injection for ultrastructural study and GFAP immuno-histochemical staining. Some animals received co (mais) lloidal carbon ink by intravenous route at the same periods. In rats from group C, there was no sign of astrocyte loss and no leakage of ink from blood vessels in the injection site. In group E, astrocyte disappearance began at 48 hours and some areas were still devoid of astrocytic processes 31 days after. Leakage of carbon particles was seen from 48 hours to 7 days in the EB-induced lesions. Tight junctions did not show any detectable ultrastructural change due to the lack of perivascular astrocytes.

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Caracterização do Tomato chlorotic spot virus isolado de jiló no Vale do Paraíba, Estado de São Paulo/ Characterization of a Tomato chlorotic spot virus isolated from gilo in Paraíba Valley, São Paulo, Brazil

EIRAS, MARCELO; CHAVES, ALEXANDRE L. R.; COLARICCIO, ADDOLORATA; HARAKAVA, RICARDO; ARAUJO, JANSEN DE; CHAGAS, CÉSAR M.
2002-06-01

Resumo em português Os tospovírus são responsáveis por perdas significativas em diversas culturas, principalmente solanáceas. No município de São José dos Campos (SP), plantas de jiló (Solanum gilo) apresentando sintomas de mosaico, bolhosidades, nanismo e queda acentuada da produção foram coletadas para análise. Visando a caracterização do agente causador dos sintomas, testes biológicos, elétrono microscópicos, sorológicos e moleculares foram realizados. Através de inocula (mais) ção mecânica em plantas indicadoras das famílias Amaranthaceae, Chenopodiaceae e Solanaceae obtiveram-se resultados típicos aos esperados para tospovírus. Ao microscópio eletrônico de transmissão, observaram-se, em contrastação negativa, partículas pleomórficas com diâmetro entre 80 e 110 nm e em cortes ultra-finos partículas presentes em vesículas do retículo endoplasmático. Através de DAS-ELISA, identificou-se o Tomato chlorotic spot virus (TCSV). A partir de RNA total extraído de folhas infetadas, amplificaram-se, via RT-PCR, fragmentos correspondentes ao gene da proteína do capsídeo (cp) os quais foram seqüenciados e comparados com outros depositados no "GenBank". A homologia de nucleotídeos e aminoácidos deduzidos foi respectivamente de 99 e 95% quando comparada com seqüências de isolados de TCSV. A comparação com as outras espécies do gênero Tospovirus apresentou valores de homologia entre 72 e 84%. Estes resultados confirmam a identidade deste vírus como pertencente à espécie TCSV, que é predominante no Estado de São Paulo e importante patógeno de outras plantas cultivadas. Além disso, variedades de jiló quando inoculadas foram susceptíveis tanto ao TCSV como às espécies Tomato spotted wilt virus (TSWV) e Groundnut ringspot virus (GRSV). Resumo em inglês Tospoviruses are responsible for important losses in most crops, mainly Solanaceae. Gilo (Solanum gilo) plants showing mosaic, blistering, stunting and 100% production losses were collected for analysis from São José dos Campos in the State of São Paulo. Biological, electron microscopy, serological and molecular tests were carried out in order to characterize the virus isolate. The mechanical inoculation on Amaranthaceae, Solanaceae and Chenopodiaceae plants showed typ (mais) ical tospovirus-induced symptoms. Pleomorphic particles from 80 to 110 nm were observed in negatively stained preparations and in vesicles of the endoplasmic reticulum of infected cells. Tomato chlorotic spot virus (TCSV) was identified by DAS-ELISA. DNA fragments were amplified by RT-PCR, with specific primers designed to the nucleocapsid gene (N) of the main Tospovirus species, sequenced and compared with others in the GenBank. The nucleotide and amino acid deduced sequences homology was 99 and 95%, respectively, with TCSV. Comparison with other Tospovirus species presented values between 74 and 81%. These results confirmed the identity of this virus isolate as TCSV, the main tospovirus species in São Paulo that also damages other Solanaceous crops. Varieties of gilo have been inoculated showing susceptibility to TCSV, Tomato spotted wilt virus (TSWV) and Groundnut ringspot virus (GRSV).

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Técnica para quantificação e qualificação de material coletado em filtros de proteção cerebral/ Technique for quantifying and qualifying debris captured in embolic protection filters

Novaes, Gabriel Santos; Razuk Filho, Álvaro; Pozzan, Geanete; Reis, Andrea; Fioranelli, Alexandre; Castelli Jr., Valter; Karakhanian, Walter Khegan; Caffaro, Roberto Augusto
2009-12-01

Resumo em português Contexto: A qualidade e a quantidade de partículas coletadas em filtros de proteção cerebral (FPC) durante angioplastia transluminal percutânea com stent (ATPS) podem esclarecer a importância desses dispositivos no tratamento de estenoses carotídeas. Objetivos: Analisar o conteúdo retido por FPC em pacientes submetidos a ATPS de artéria carótida interna com nova técnica de análise qualiquantitativa. Métodos: O material coletado em 10 FPC durante ATPS da bifurc (mais) ação da carótida em pacientes com alto risco cirúrgico foi submetido a análise microscópica qualiquantitativa. Fotografias digitais das lâminas com material corado com hematoxilina e eosina foram analisadas com o programa Axio Vision LE Release 4.1, que calculou a área das partículas em micrômetros/metro quadrado (µm²). Resultados: O exame histopatológico evidenciou material em 100% dos filtros consistindo predominantemente de restos hemáticos, cristais de colesterol e cálcio. A área média de fragmentos coletados foi expressiva (1.570.310 µm²), e houve ampla variância desses valores. Conclusões: Os FPC coletam quantidade importante de fragmentos de placas de ateroma, e a grande variância nas quantidades de material coletado pode estar associada com a gravidade da lesão, motivo pelo qual se tornam relevantes estudos que utilizem técnica padronizada para a quantificação desses fragmentos e para a compreensão de seu real significado clínico. Resumo em inglês Background: Quality and quantity of the content retained in embolic protection filters (EPFs) used in percutaneous transluminal angioplasty and stenting may possibly indicate the importance of EPFs in the management of carotid stenosis. Objectives: To analyze the content retained by EPFs in patients undergoing percutaneous transluminal angioplasty and stenting of the internal carotid artery using a new technique for qualitative and quantitative analysis. Methods: Material (mais) captured in 10 EPFs during percutaneous transluminal angioplasty and stenting in high-surgical-risk patients was examined to determine a qualitative and quantitative microscopic analysis. Digital photographs of the hematoxylin-eosin stained slides were analyzed using the Axio Vision LE Release 4.1 software in order to calculate the particles area in micra/square meter (µm²). Results: Histopathological examination identified particulate debris in 100% of the filters including predominantly blood residues, cholesterol crystals, and calcium Quantity of captured fragments was significant (mean of 1,570,310 µm²) with a wide range of these values. Conclusions: Significant quantity of fragments of atheromatous plaques is retained by EPFs and the wide range in the quantity of the retained debris can be associated with the lesion severity; therefore new studies using standardized technique for quantifying these fragments and for better understanding their real clinical meaning are necessary.

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Efeitos hemostático e estrutural da esponja de celulose liofilizada/ Hemostatic and structural effects of lyophilized cellulose sponge

MELLO, LUÍS RENATO; MACHADO, FLAVIA C. NUNES; HAAS, LEANDRO J.; ZACCHI, VANESSA; LUZZI, RICHARD; ZOSCHKE, JAMES; RAMOS, RODRIGO S.
1998-09-01

Resumo em português Os efeitos hemostáticos da celulose oxidada (Surgicel) são bem conhecidos. Baseados na similaridade estrutural e em um possível efeito hemostático, estudamos a esponja de celulose liofilizada utilizando dois modelos experimentais. Fase I - Realizada em 12 cães, consistiu na provocação de lesão cortical com sangramento, introdução de fragmento de esponja de celulose liofilizada no interior da lesão e medida do tempo necessário para obter-se hemostasia. Os anima (mais) is foram sacrificados em 7, 30 e 90 dias. A hemostasia foi obtida, em média, após 1 minuto e nenhum efeito colateral clínico foi detectado. A microscopia mostrou reação histiocitária leve aos 7 e 30 dias, com presença de pequena quantidade de células gigantes tipo corpo estranho. A reação histioplasmocitária regrediu e, aos 90 dias, a celulose estava circundada por pobre reação inflamatória. A membrana liofilizada revelou ter aspecto peculiar, representado por filamentos eosinofílicos, circundados por reação inflamatória, que diminuiu com o tempo. Somente esparsos e irregulares filamenos eosinofílicos foram percebidos aos 90 dias. Fase II - Foram introduzidos fragmentos de dimensões conhecidas de esponja de celulose, no interior do fígado de 12 ratos, que foram sacrificados em 7, 30 e 90 dias. Na autopsia, a inspeção a olho desarmado constatou, aos 30 e 90 dias, a formação de bridas peritoneais na altura do implante. Em todos os animais, especialmente aos 7 dias, a microscopia revelou intensa reação histiolinfoplasmocitária ao redor do implante. Em dois animais, aos 90 dias, detectaram-se grânulos refringentes à luz polarizada, no interior de células gigantes, demonstrando fagocitose ativa de celulose. Em conclusão, observou-se haver necessidade de modelo experimental comparativo para provar a existência de propriedades hemostáticas na esponja. Conseguiu-se, no entanto, provar a existência de reabsorção da celulose em mamíferos através de fagocitose, fato este ainda não relatado na literatura. Resumo em inglês Hemostatic effects of oxidized cellulose (Surgicel) are well known. Based on a possible similar effect of a sponge obtained after lyophilization of biosynthetic cellulose, two different experimental studies were planned. Phase I - Pieces of cellulose sponge were inserted into small provoked cortical wounds of twelve dogs. The time elapsed to obtain bloodstill after cortical damage and application of cellulose was observed in every dog, searching to detect any possible hem (mais) ostatic effect of the material. The animals were sacrificed after 7, 30 and 90 days. An average time of 1 minute was elapsed until bleeding control was achieved. No clinical adverse effect was noticed. Microscopy showed histiocytic and mild foreign body reaction at 7 days, which diminished at 30 days. Almost no reaction surrounded the implant at 90 days. Lyophilized cellulose has a peculiar eosinophilic appearance, composed by thin irregular filaments which diminished their thickness with the time. At 90 days only sparse irregular cellulose filaments could be detected. Phase II - Small equal sponge fragments were inserted in the liver of twelve rats and observed 7, 30 and 90 days. At autopsy, small peritoneal adhesions were noticed at 30 and 90 days. Microscopy showed intense histioplasmocytic and foreign body reaction in all animals mainly at 7 days. In two animals, refringent intracellular cellulose particles were evident inside giant foreign body cells after 90 days. This fact evidences that cellulose can be reabsorbed by phagocytic phenomena when implanted in mammalians. A comparative group with other hemostatic material and the same method must be done to clarify the issue of hemostatic effects of this membrane.

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Construção e avaliação do desempenho de três abanadoras de sementes/ Construction and performance evaluation of three seed blowers

Silva, José G. da; Soares, Dino M.
2006-03-01

Resumo em português Os métodos de trilhamento das plantas não proporcionam grãos limpos, em condições de serem comercializados, semeados ou armazenados. É necessário que passem por um processo de limpeza com o fim de eliminar os fragmentos dos próprios grãos, detritos vegetais, folhas e pedaços de hastes. Os processos comuns de limpeza são pouco eficientes e os mais sofisticados podem não estar ao alcance de pequenos produtores. Objetivou-se, com este trabalho, construir três ab (mais) anadoras e avaliar seu desempenho em sementes de arroz. Uma abanadora é provida de ventilador acionado a pedal; a outra possui ventilador acionado por motor elétrico e a terceira possui ventilador e peneiras movimentados por motor elétrico. Foram abanadas sementes com diferentes teores de impureza e em diferentes taxas de alimentação das máquinas. As abanadoras apresentaram maior eficiência de limpeza nas sementes com menor teor de impureza e na menor taxa de alimentação das máquinas. A eficiência foi considerada adequada para as sementes que possuíam até 4% de impureza antes da abanação. Com 6% de impureza, as sementes devem ser abanadas por três vezes, para ficarem com menos de 1% de impureza. A perda de sementes pelas abanadoras foi desprezível. Resumo em inglês Usually, the available methods to trash cereal seeds do not provide a clean product, as required for commercialization, seeding and storage. For this purpose it is necessary to submit the seed lot to a cleaning process to eliminate grain fragments and other contaminants such as soil and plant particles. Common processing procedures are not efficient and other methods available, more sophisticated, are not economically suitable for small farmers. The objective of this stud (mais) y was to construct three different blowers and evaluate their performance on rice: one provided with a foot operated fan; a second with an electric fan; and a third with electric fan and screeners. Seed lots with different degrees of impurities and different machine feeding rates were used. Greater operation efficiency was obtained for the least contaminated lot and smallest seeding rate. Efficiency was considered adequate for seed lots up to 4% contamination level. For 6% impurity, seed lots had to be blown three times to lower impurity level less than 1%. Seed loss was not significant.

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