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Aplicação da técnica de imunoensaio enzimático de multiplicação (EMIT) para dosagem de ciclosporina na amostra de sangue absorvido em papel-filtro/ Application of the enzyme-multiplied imunoassay technique (EMIT) to measure ciclosporin in the blood sample absorbed in filter paper

Lin-Wang, Hui Tzu; Manrique, Ricardo
2002-01-01

Resumo em português Objetivo: Investigar a aplicabilidade da técnica de imunoensaio enzimático de multiplicação (enzyme-multiplied immunoassay technique - EMIT) para dosagem de ciclosporina A (CsA) nas amostras de sangue absorvido em papel-filtro (STAP). Material e método: Realizaram-se determinações de CsA utilizando-se técnica de EMIT em 110 amostras; 24 eram de pacientes transplantados cardíacos e 86, dos pacientes transplantados renais. Todos faziam uso da CsA por via oral. Exat (mais) amente 12 horas após a tomada da CsA, coletou-se o sangue e prepararam-se as amostras de STAP. As amostras de STAP foram estocadas à temperatura ambiente por períodos de 15 e 30 dias, e as amostras de sangue total foram estocados a ± 4ºC, por um tempo inferior a 48 horas, para o teste. Resultados: O coeficiente de correlação entre a técnica que utiliza como amostra sangue total e a amostra de STAP realizada 15 dias após a preparação foi de 0,963, e de 30 dias foi de 0,972 (p 0,005). Conclusões: A técnica de STAP pode ser utilizada rotineiramente por ser estável, reprodutível e prática. Considerando-se a dimensão continental de muitos países, este método pode ser bastante útil para a otimização da terapia. Resumo em inglês Objective: The purpose of this work is to research the applicability of the Enzyme-multiplied imunoassay technique (EMIT) to measure Ciclosporin A (CsA) in the whole blood sample absorbed in filter paper (STAP). Methods: It was performed dosage of CsA in 110 blood samples: 24 samples in patients with heart transplantation and 86 patients of renal transplantation. All of them were using CsA orally. Just 12 hours after the last CsA intake, the blood was collected and the ST (mais) AP samples were prepared. The STAP samples were stored at room temperature for a period of 15 and 30 days. The whole blood samples were stored at about 4ºC for a time lower than 48 hours to the test. Results: The coefficient of correlation between the whole blood and the STAP samples of 15 days was 0.963 and 30 days was 0.972 (p 0.005). Conclusions: The STAP technique can be used in the clinic practice, because it is stable, reproducible and practical. Considering the wide continental dimension of many countries, such method can be quite useful to optimize the therapy.

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Vírus-T linfotrópico humano em familiares de candidatos a doação de sangue soropositivos: disseminação silenciosa/ Human T-cell lymphotropic virus in family members of seropositive blood donors: silent dissemination

Catalan-Soares, Bernadette; Carneiro-Proietti, Anna Bárbara; Proietti, Fernando Augusto; Grupo Interdisciplinar de Pesquisas em HTLV
2004-12-01

Resumo em português OBJETIVO: Verificar a ocorrência de transmissão do vírus-T linfotrópico humano entre familiares de portadores assintomáticos, identificados por ocasião de doação de sangue; e avaliar a provável direção da transmissão em parceiros sexuais com o mesmo diagnóstico sorológico (concordantes). MÉTODOS: Entre março de 1997 e junho de 2003 foram estudados familiares e parceiros sexuais estáveis de doadores de sangue soropositivos (e assintomáticos) para o vírus (mais) -T linfotrópico humano dos tipos I e II. O diagnóstico foi obtido pelos testes imunoenzimático e Western blot. Para determinar a direção da transmissão, foram coletados, através de um questionário, dados demográficos e comportamentais. Os participantes do estudo residiam na região metropolitana de Belo Horizonte, capital do Estado de Minas Gerais. RESULTADOS: A soroprevalência geral para o vírus-T linfotrópico humano do tipo I foi de 25,9% entre 352 familiares de 343 pacientes soropositivos (334 positivos para o tipo I e 9 positivos para o tipo II). Em mães, parceiros sexuais e filhos de doadores soropositivos a prevalência foi de 36,6% (15/41), 35,9% (42/117) e 17,5% (34/194), respectivamente. Os dados obtidos acerca de fatores de risco indicaram maior eficiência de transmissão no sentido do homem para a mulher. CONCLUSÕES: As taxas de prevalência sugerem agregação familiar da infecção por vírus-T linfotrópico humano. A transmissão se deu principalmente por via sexual (horizontal). Deve-se avaliar a presença do vírus em pessoas relacionadas a indivíduos infectados, mesmo se assintomáticos, para melhor compreensão da transmissão e implementação de medidas mais eficazes de prevenção contra a disseminação do vírus. Resumo em inglês OBJECTIVE: To investigate human T-cell lymphotropic virus transmission among family members of asymptomatic carriers identified through blood donor screening tests; and to determine the most likely direction of transmission in sexual partners having the same (concordant) serological diagnosis. METHODS: Between March 1997 and June 2003 the relatives and steady sexual partners of seropositive, asymptomatic blood donors were investigated for the presence of human T-cell lymp (mais) hotropic virus types I and II. Diagnosis was based on enzyme-linked immunoassay and Western blot. To determine the direction of transmission, demographic and behavioral data were obtained through questionnaires. All participants lived in the metropolitan region of Belo Horizonte, capital of the state of Minas Gerais, Brazil. RESULTS: The overall prevalence of infection with human T-cell lymphotropic virus type I was 25.9% among 352 relatives of 343 seropositive patients. The prevalence rates in mothers, sexual partners, and children of seropositive donors were 36.6% (15/41), 35.9% (42/117), and 17.5% (34/194), respectively. The demographic and behavioral data obtained suggest greater efficiency of male-to- female transmission. CONCLUSIONS: The observed prevalence rates suggest there is familial aggregation of human T-cell lymphotropic virus infection. The main transmission mode was horizontal (sexual). It is important to identify the presence of the virus in family members of infected individuals, even if they are asymptomatic. Doing so may lead to a better understanding of how the virus spreads and to more efficient measures for preventing disease transmission.

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Triagem neonatal para infecção chagásica congênita: aplicação de análise de classe latente para avaliação dos testes diagnósticos/ Neonatal screening for congenital Chagas infection: application of latent class analysis for diagnostic test evaluation

Andrade, André Queiroz de; Gontijo, Eliane Dias
2008-12-01

Resumo em português O presente estudo tem como objetivo avaliar os testes sorológicos convencionais usados na triagem neonatal para doença de Chagas, discutindo métodos estatísticos disponíveis. Estudou-se uma amostra aleatória dentre 23.308 recém-nascidos triados para doença de Chagas congênita por meio de três testes: imunoensaioenzimático, imunofluorescência indireta e hemoaglutinação indireta. Os dados obtidos foram analisados por diferentes metodologias estatísticas: a an (mais) álise de classe latente, o teste Kappa e a análise de sensibilidade relativa. Utilizando a análise de classe latente, a maior sensibilidade foi do imunoensaioenzimático (48,6%), seguido pela imunofluorescência indireta (39,8%) e pela hemoaglutinação indireta (23,2%). O valor Kappa foi 0,496. A razão entre as sensibilidades dos testes imunoensaioenzimático e imunofluorescência indireta foi de 92% [0,74;1,13]. A análise de classe latente não se mostrou adequada para determinação de sensibilidade e especificidade, mas forneceu dados importantes sobre a equivalência dos testes, corroborados pela análise de sensibilidade relativa. Os resultados mostraram que o teste imunoensaioenzimático em sangue-seco pode ser utilizado com a mesma segurança do teste imunofluorescência indireta. Resumo em inglês The present study had the aim of evaluating conventional serum tests that are used in neonatal screening for Chagas disease, with a discussion on the statistical methods available. A random sample among 23,308 newborns who were screened for congenital Chagas disease was studied using the following three tests: enzyme immunoassay, indirect immunofluorescence and indirect hemagglutination. The data were analyzed by different statistical methodologies: latent class analysis, (mais) Kappa test and relative sensitivity analysis. Using latent class analysis, enzyme immunoassay had the highest sensitivity (48.6%), followed by indirect immunofluorescence (39.8%) and indirect hemagglutination (23.2%). The kappa value was 0.496. The ratio between the sensitivities of enzyme immunoassays and indirect immunofluorescence tests was 92% [0.74;1.13]. Latent class analysis was not found to be adequate for sensitivity and specificity determination, but it provided important data about the equivalence of the tests, corroborated by relative sensitivity analysis. The results showed that enzyme immunoassaying of dry blood samples can be used as safely as the indirect immunofluorescence test.

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Toxoplasmose: soroprevalência em puérperas atendidas pelo Sistema Único de Saúde/ Toxoplasmosis: seroprevalence in postpartum women attended by SUS (Brazilian Public Health System)

Leão, Paulo Roberto Dutra; Meirelles Filho, José; Medeiros, Sebastião Freitas de
2004-09-01

Resumo em português OBJETIVO: estabelecer a taxa de soroprevalência para toxoplasmose em puérperas atendidas pelo SUS, em duas maternidades de Cuiabá, buscando relacioná-la à idade, antecedentes de abortamento e ao conhecimento desta doença pelas mulheres. MÉTODOS: trata-se de estudo de corte transversal, sendo a amostra constituída por 205 mulheres, com idade entre 14 e 43 anos, no primeiro ou segundo dias de puerpério, atendidas nestes hospitais durante dois meses. Cada mulher foi (mais) entrevistada através de um pequeno questionário e submetida à coleta de amostra de sangue periférico. Estas amostras foram armazenadas a 20°C até serem analisadas. A soroprevalência foi determinada, quantitativamente, pela detecção de imunoglobulina G específica contra toxoplasma, através de um método imunoenzimático indireto. Todas as amostras foram analisadas ao mesmo tempo. RESULTADOS: a média de idade das pacientes foi de 22,4 anos, tendo em média 2,2 gestações, sendo a maioria primigestas. A soropositividade para toxoplasma foi detectada em 165 (70,7%) das 205 puérperas estudadas. Não se identificou associação significante entre soropositividade para toxoplasmose e a idade das mulheres (p = 0,967) ou o abortamento prévio (p = 0,82). A maioria das mulheres incluídas neste estudo desconhecia a existência da toxoplasmose (78%) e não se identificou associação significante entre este aspecto e maior soroprevalência contra a doença (p = 0,49). CONCLUSÕES: esta alta prevalência encontrada é concordante com muitos estudos nacionais e estrangeiros. Permanece, entre o grupo de mulheres incluídas neste estudo, um importante contingente delas (29,3%) sob risco de contaminação. A ausência de associação significante entre soroprevalência e a idade das pacientes, relato de abortamento prévio e conhecimento ou não da doença é concordante com alguns estudos e discordante de outros. Resumo em inglês OBJECTIVE: to establish the rate of toxoplasmosis soroprevalence in postpartum women, attended in two hospitals of the Public Health System (SUS) in Cuiabá, and its correlation with age, previous abortion and women's knowledge of the disease. METHODS: a cross-sectional study including 205 women with ages from 14 to 43 (mean 22.4) years old, attended in these hospitals for two months, in the first or second days postpartum. Each woman answered a short questionnaire and ha (mais) d peripheral blood sample collected. Blood samples were stored at 20°C until assay. The seroprevalence was determined by quantitative detection of specific IgG antibody against Toxoplasma gondii, using a microparticle enzyme immunoassay. All samples were assayed at the same time. RESULTS: The average number of pregnancies in the women included in this study was 2.2, and the majority of them was pregnant for the first time. The seroprevalence found was 70.7% (165 of 205 women). No statistical correlation was found between seroprevalence and age (p = 0.967) or previous abortion (p = 0.82). Most of the women in this study (78%) did not know about toxoplasmosis and no statistical correlation was found between this condition and seroprevalence (p = 0.49). CONCLUSION: the high seroprevalence found in the present study is in accordance with surveys previously reported in our country and other developing countries. Among the women included in this study, an expressive number (29.3%) is still under risk of contamination. The lack of statistical correlation between seroprevalence and women's age, lack of knowledge about the disease and report of previous abortion is in accordance with some previous studies and in disagreement with others.

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Rotavírus, adenovírus, astrovírus, calicivírus e "Small Round Virus Particles" em fezes de crianças, com e sem diarréia aguda, no período de 1987 a 1988, na Grande São Paulo/ Rotavirus, adenovirus, astrovirus, calicivirus and Small Round Virus Particles in faeces of children with and without acute diarrhea within the period of 1987 to 1988, in São Paulo

Timenetsky, María do Carmo Sampaio Tavares; Kisielius, Jonas José; Grisi, Sandra Josefina Ferraz Ellero; Escobar, Ana Maria de Ulhôa; Ueda, Marli; Tanaka, Hatune
1993-06-01

Resumo em português No período de agosto de 1987 a setembro de 1988, 193 amostras de fezes de crianças, com e sem sintomatologia diarréica aguda, foram submetidas às provas diagnósticas do ensaio imunoenzimático (EIE), eletroforese em gel de poliacrilamida (EGPA) e microscopia eletrônica (ME) para a detecção de vírus. A positividade para Rotavírus, Adenovírus, Astrovírus, Calicivírus e "Small Round Virus Particles" (SRVP) foi encontrada nas 97 crianças com diarréia aguda em 1 (mais) 1,3%, 3,1%, 2,1%, l,0%e4,l%, respectivamente. Das 96 crianças sem diarréia, 4,2% foram positivas para Rotavírus, 1,0% para Calicivírus e 7,3% para SRVP. Das 15 amostras positivas para Rotavírus, 14 apresentaram perfil eletroforético característico do Grupo A e 1 amostra do Grupo C. A análise dos eletroforotipos demonstrou a grande heterogeneidade de perfis e a predominância do perfil "longo". A associação de vírus, bactéria e parasita foi encontrada tanto em crianças com diarréia como em crianças sem diarréia. Resumo em inglês Between 1987 and 1988, 193 faecal specimens from children, with or without diarrhea, were submitted to enzyme immunoassay, polyacrylamide-gel electrophoresis and electronmicroscopy tests for virus detection. The positivity for Rotavirus, Adenovirus, Astrovirus, Calicivirus and Small Round Virus Particles (SRVP) was 11.3%, 3.1%, 2.1%, 1.0% and 4.1%, respectively, for the 97 children with acute diarrhea. Of the 96 children without diarrhea, 4.2% were positive for Rotavirus, (mais) 1.0% for Calicivirus and 7.3% for SRVP. Of 15 positive specimens for Rotavirus, 14 showed electrophoretic patterns proper to group A and 1 specimen of group C Rotavirus. The analysis of electrophorotypes demonstrated great heterogeneity of electrophoretic patterns and predominance of subgroup 2, "long". The association of virus, bacteria and parasites was present both in children with or without acute diarrhea.

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Respostas hormonais agudas a diferentes intensidades de exercícios resistidos em mulheres idosas/ Acute hormonal responses to different intensities of resistance exercises in older women

Oliveira, Ricardo Jacó de; Lima, Ricardo Moreno; Gentil, Paulo; Simões, Herbert Gustavo; Ávila, Waldney Roberto de Matos e; Silva, Rogério Wagner da; Silva, Francisco Martins da
2008-08-01

Resumo em português O treinamento resistido vem sendo apontado como eficaz em retardar o declínio de força e massa muscular que acompanham o envelhecimento; contudo, a resposta hormonal aguda a esse tipo de exercício precisa ser mais bem caracterizada. Os objetivos do presente estudo foram caracterizar e comparar as respostas hormonais agudas resultantes de diferentes intensidades de exercícios resistidos realizados por mulheres idosas. A amostra foi composta por 15 mulheres com idade m� (mais) �dia de 67,5 anos, as quais realizaram, de forma aleatória, três visitas ao laboratório: 1) exercícios resistidos realizados a 50% de 1-RM (G50); 2) exercícios resistidos realizados a 80% de 1-RM (G80); e 3) sessão controle (GC). Coletas sanguíneas foram realizadas imediatamente antes e após (TO e T1, respectivamente) cada sessão, bem como três e 48 horas após (T2 eT3, respectivamente), para posterior análise hormonal através do método imunoensaio quimiluminescente. ANOVA e ANCOVA foram utilizadas, respectivamente, para examinar diferenças intra e intersessões. Não foram observadas diferenças significativas entre as sessões para nenhum dos hormônios avaliados. EmT2, as concentrações do cortisol encontraram-se significativamente inferiores quando comparados com T0 nas três sessões realizadas, enquanto a testosterona apresentou-se reduzida no T2 do GC. Apenas a sessão G80 induziu elevação transitória significativa da razão testosterona/cortisol e nenhuma das sessões provocou alterações nas concentrações séricas de GH. Conclui-se que exercícios resistidos realizados a 50% ou a 80% de 1-RM não induziram agudamente elevação significativa de cortisol, testosterona ou GH na amostra estudada. Por outro lado, a sessão realizada a 80% de 1-RM promoveu aumento significativo da razão testosterona/cortisol três horas pós-exercício quando comparada com a dos valores basais, em mulheres idosas. Resumo em inglês Resistance training has been pointed as an effective intervention to minimize muscle mass and strength decline observed with advancing age, however, its acute hormonal responses need to be better characterized. The purposes of the present study were characterize and compare the acute hormonal responses to different resistance exercises intensities performed by older women. Sample was composed by 15 women with a mean age of 67,5 years, who performed, in a randomized order, (mais) three visits at the laboratory: 1) resistance exercises performed at 50% of 1-RM (G50); 2) resistance exercises performed at 80% of 1-RM (G80) and 3) control session (GC). Blood samples were taken immediately before and after (T0 and T1, respectively) each session, as well as three and 48 hour after (T2 and T3, respectively), for subsequent hormonal analyses by the enzyme immunoassay chemiluminescent method. ANOVA and ANCOVA were used, respectively, to examine intra and inter sessions differences. No significant differences were observed between sessions for any of the evaluated hormone. In T2, cortisol concentrations were significantly reduced when compared to T0 for the three examined sessions, while testosterone was reduced after (T2) GC. Only G80 elicited a significant transient elevation in testosterone/cortisol ratio and none of the sessions provoked alterations on serum GH concentrations. It's concluded that resistance exercises performed at 50% or 80% of 1-RM do not acutely induce significant elevation of cortisol, testosterone or GH in the studied population. On the other hand, the session performed at 80% of 1-RM promoted significant elevations on the testosterone/cortisol ratio three hours post exercises when compared to basal values, in older women.

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Prevalência, fatores de risco e caracterização genética dos vírus linfotrópico de células T humana tipo 1 e 2 em pacientes infectados pelo vírus da imunodeficiência humana tipo 1 nas Cidades de Ribeirão Preto e São Paulo/ Prevalence, risk factors and genetic characterization of human T-cell lymphotropic virus types 1 and 2 in patients infected with human immunodeficiency virus type 1 in the cities of Ribeirão Preto and São Paulo

Kleine Neto, Walter; Sanabani, Sabri Saeed; Jamal, Leda Fátima; Sabino, Ester Cerdeira
2009-06-01

Resumo em português O objetivo deste estudo foi definir a prevalência dos vírus linfotrópico de células T humana tipo 1 e 2 em pacientes positivos para o vírus da imunodeficiência humana tipo 1 no Estado de São Paulo, Brasil. Avaliamos 319 indivíduos atendidos em clínicas de Ribeirão Preto e Capital. Os pacientes foram entrevistados e testados sorologicamente. Foram seqüenciadas as regiões tax e long terminal repeat para diferenciação e determinação do subtipo. A soroprevalê (mais) ncia geral foi de 7,5% (24/319) e esteve associada somente com uso de drogas injetáveis e ao vírus da hepatite tipo C (p Resumo em inglês The aim of this study was to define the prevalence of human T cell lymphotropic virus types 1 and 2 in patients who were positive for human immunodeficiency virus type 1 in the State of São Paulo, Brazil. We evaluated 319 individuals infected with HIV type 1 who were attended at specialized clinics in two cities (Ribeirão Preto and São Paulo). The patients were interviewed and tested for antibodies against HTLV types 1 and 2 (Orthoâ HTLV-1/HTLV-2 Ab-Capture enzyme imm (mais) unoassay). Direct DNA sequencing of polymerase chain reaction products from the tax region of HTLV type 2 and the long terminal repeat region of HTLV types 1 and 2 were performed to differentiate and determine the subtypes. The overall prevalence of anti-HTLV type 1 and 2 antibodies was 7.5% (24/319; 95% CI: 5.2-11.5). HTLV type 1 and 2 infection was associated with a history of injected drug use and with antibodies for hepatitis C virus (p 0.05). HTLV DNA was detected in 13 out of 24 samples, of which 12 were characterized as HTLV subtype 2c and one as HTLV subtype 1a. Among the 12 HTLV type 2 samples, seven were from injected drug users, thus indicating that this route is an important risk factor for HTLV type 2 transmission among our population infected with HIV type 1.

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Prevalência de soropositividade para toxoplasmose em gestantes/ Seroprevalence of toxoplasmosis in pregnant women

Varella, Ivana S.; Wagner, Mário B.; Darela, Alessandra C.; Nunes, Leandro M.; Müller, Regina W.
2003-02-01

Resumo em português Objetivo: medir a prevalência de soropositividade para toxoplasmose em gestantes e avaliar associações de ocorrência da soropositividade com idade, cor, procedência e escolaridade maternas. Métodos: estudo transversal, incluindo 1.261 gestantes atendidas na maternidade do Hospital Nossa Senhora da Conceição de Porto Alegre (RS), e que realizaram teste sorológico para toxoplasmose durante a gestação, ou no momento do parto, foi conduzido entre julho a outubro e (mais) dezembro de 2000. Foram investigadas as variáveis idade, cor, procedência, escolaridade e sorologia para toxoplasmose (IgG e IgM), utilizando o método enzimático por micropartícula quantitativo (MEIA). Resultados: a prevalência de soropositividade para toxoplasmose nas gestantes estudadas foi de 59,8% (IC95%: 57,0% - 62,5%). Houve aumento na proporção de soropositividade com aumento da idade da mãe (p = 0,012); já maior nível de escolaridade foi fator de proteção para toxoplasmose (p Resumo em inglês Objective: : to measure the prevalence of seropositivity for toxoplasmosis in pregnant women and evaluate its association with maternity age, skin color, place of residence and education. Methods: a cross-sectional study in 1,261 pregnant women cared for at the maternity ward of Hospital Nossa Senhora da Conceição was performed from June to October and in December 2000. Serological tests for toxoplasmosis were performed during their pregnancy or delivery. The variables (mais) considered were place of residence, skin color, education and serum tests for toxoplasmosis (IgG and IgM). Microparticle Enzyme Immunoassay method (MEIA) was used. Results: the prevalence of seropositivity for toxoplasmosis in the pregnant women studied was of 59.8% (95% CI: 57.0% - 62.5%). An increase in seropositivity in relation to the mother's age was observed (p = 0.012). On the other hand, a higher educational level was found to be a protective factor against toxoplasmosis (p

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Pesquisa de gliadina em medicamentos: informação relevante para a orientação de pacientes com doença celíaca/ Assessment of gliadin in pharmaceutical products: important information to the orientation of celiac disease patients

SDEPANIAN, Vera Lucia; SCALETSKY, Isabel Cristina Affonso; MORAIS, Mauro Batista de; FAGUNDES-NETO, Ulysses
2001-09-01

Resumo em português Racional — Alguns medicamentos podem conter gliadina, portanto, sua utilização poderá ser prejudicial aos pacientes com doença celíaca. Objetivo - Detectar a presença de gliadina em medicamentos comumente comercializados no Brasil. Métodos - Foram analisados 78 medicamentos sorteados a partir de uma lista de 180 produtos comumente comercializados. Os medicamentos analisados foram: analgésicos (n = 9), anti-helmínticos (n = 3), antiácidos (n = 8), antibióti (mais) cos (n = 13), anticolesterolêmicos (n = 1), anticonvulsivantes (n = 2), antidepressivos (n = 2), antidiabéticos (n = 1), antieméticos (n = 3), anti-hipertensivos (n = 3), anti-histamínicos (n = 3), antiinflamatórios (n = 7), antitérmicos (n = 2), broncodilatadores (n = 1), descongestionantes (n = 4), laxantes (n = 1), contraceptivos orais (n = 5) e vitaminas (n = 10). As amostras foram analisadas pela técnica de ELISA utilizando anticorpo monoclonal ômega-gliadina, considerada de eleição segundo o Codex Alimentarius Commission WHO/FAO. Todas as amostras foram analisadas em duplicata. O nível de detecção do teste é de 4 mg de gliadina/100 g de produto. Resultados - Dentre os 78 medicamentos analisados, em apenas 1 (1,3%) foi detectada a presença de gliadina (5,5 mg/100 g). O componente ativo do medicamento é ranitidina. De acordo com o Codex Alimentarius Commission WHO/FAO, o limite máximo diário permitido ao consumo pelos indivíduos com doença celíaca é igual a 10 mg de gliadina. Considerando a quantidade de gliadina num único comprimido de ranitidina, a quantidade ingerida seria bem menor do que a máxima permitida ao consumo pelo paciente com doença celíaca. Conclusões - Neste estudo não foi identificada gliadina em medicamentos em quantidade que constitua risco para pacientes com doença celíaca. Resumo em inglês Background — Some drugs might contain gliadin which can be dangerous for celiac disease patients. Objective - Detect gliadin in pharmaceutical products commonly used in Brazil. Methods - We analyzed 78 pharmaceutical products selected aleatory from a list of 180 products most frequently sold at Brazilian community pharmacies. The analyzed samples were analgesics (n = 9), anthelmintics (n = 3), antiacids (n = 8), antibiotics (n = 13), anticolesterolemics (n = 1), anti (mais) convulsants (n = 2), antidepressants (n = 2), antiemetics (n = 3), antihipertensives (n = 3), antihistaminics (n = 3), anti-inflamatories (n = 7), antipyretics (n = 2), bronchodilatadors (n = 1), laxatives (n = 1), oral contraceptives (n = 5) and vitamins (n = 10). The samples were analyzed by enzyme immunoassay based on monoclonal antibodies omega-gliadins, the elected technique according to the Codex Alimentarius Commission WHO/FAO. All samples were analyzed in duplicate. The sensitivity of this test is 4 mg of gliadin/100 g of product. Results - Only one (1.3%) out of 78 pharmaceutical products contained detectable amounts of gliadin (5,5 mg/100 g). The active ingredient of this drug is ranitidine. According to the Codex Alimentarius Commission WHO/FAO the intake of 10 mg of gliadin/day should not be exceeded by celiac disease patients. Considering the amount of gliadin in each capsule of ranitidine, the ingested quantity would be lower than the maximum allowed for celiac patients. Conclusions - In this study gliadin was not detected in pharmaceutical products in harmful amount for celiac disease patients.

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Padronização de um teste imunoenzimático para detecção de Salmonella em alimentos/ Standardization of an enzyme immunoassay for detection of Salmonella in foods

Reis, Regina Baptista dos; Mamizuka, Elsa M.; Franco, Bernadette Dora Gombossy de Melo
2002-08-01

Resumo em português A metodologia convencional utilizada para detecção de Salmonella em alimentos é trabalhosa, apresenta custo elevado e os resultados definitivos somente estão disponíveis após 96 horas. Vários métodos rápidos têm sido propostos, sendo os testes imunoenzimáticos os mais empregados. Este estudo relata o desenvolvimento de um teste imunoenzimático para detecção de Salmonella em alimentos, empregando-se um anti-soro policlonal monovalente contendo aglutininas f,g (mais) ,s, não absorvido, e um anti-soro polivalente absorvido contendo as aglutininas e,h; 1,6; i; 1,2; f,g,s e m,t. A eficiência foi comparada com a da metodologia de cultivo tradicional. O teste imunoenzimático foi empregado para a detecção de Salmonella em amostras de alimentos infantis experimentalmente inoculadas com este patógeno e com outras enterobactérias, em diferentes proporções. O teste imunoenzimático revelou-se significativamente mais sensível que o método de cultivo. Esse mesmo teste, utilizando-se o anti-soro f,g,s não absorvido com antígenos heterólogos revelou concordância de 89,6% com o método de cultivo e sensibilidade de 100,0%. Por outro lado, empregando-se o anti-soro polivalente absorvido, a concordância com o método de cultivo foi de 81,3% embora a sensibilidade tenha se mantido no mesmo nível. O desempenho do teste imunoenzimático empregando-se um desses dois anti-soros indica um grande potencial de aplicação como método de triagem na detecção de Salmonella em alimentos. Resumo em inglês The conventional method for detection of Salmonella in foods is cumbersome, it is not cost-effective and results are available only after 96h. Many alternative rapid methods have been already proposed and enzyme immunoassays are the most common. This study reports the standardization of a new enzyme immunoassay for detection of Salmonella in foods, based on a policlonal non-absorbed antiserum containing f,g,s aglutinins and a pool of policlonal absorbed antisera, containi (mais) ng e,h; 1,6; i, 1,2, f,g,s and m,t aglutinins. The efficiency of the new assay was compared to that of the conventional method. The immunoassay was used for detection of Salmonella in baby-foods experimentally contaminated with different proportions of Salmonella and other enterobacteria. The sensitivity of the new assay was significantly higher than that of the conventional method. The agreement between the assay using the non-absorbed f,g,s antiserum and the conventional method was 89.6% and the sensitivity was 100.0%. When the pool of absorbed antisera was used, the agreement between results was 81.3% and the sensitivity 100.0%. Results indicate that this immunoassay has a good potential to be used as an alternative method for screening Salmonella in foods.

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PRODUÇÃO DE IMUNORREAGENTES PARA USO EM UM TESTE IMUNOENZIMÁTICO DE DETECÇÃO DE SALMONELLA EM ALIMENTOS/ PRODUCTION OF IMMUNOREAGENTS TO BE USED IN A ENZYME IMMUNOASSAY FOR DETECTION OF SALMONELLA

REIS, Regina Baptista dos; MAMIZUKA, Elsa Masae; FRANCO, Bernadette Dora Gombossy de Melo
2001-12-01

Resumo em português O objetivo deste trabalho foi o desenvolvimento de imunorreagentes policlonais convenientes para uso em um teste imunoenzimático para detecção rápida de Salmonella em alimentos. Foram produzidos seis anti-soros policlonais anti-Salmonella contendo as aglutininas e, h; 1,6; i; 1,2; f,g,s e m,t. Como antígenos, foram empregadas culturas formolizadas de quatro sorotipos de Salmonella (S. Typhimurium fases 1 e 2, S. Anatum fases 1 e 2, S. Agona monofásica e S. Oranienbu (mais) rg monofásica) cultivadas em caldo tripticase de soja. O teste imunoenzimático utilizado foi o indireto, empregando-se anti-IgG-peroxidase como conjugado e OPD-H2O2 como sistema cromógeno. Os testes imunoenzimáticos foram conduzidos com os anti-soros policlonais individuais absorvidos e não-absorvidos, bem como empregando-se um anti-soro polivalente, correspondente a um "pool" de anti-soros absorvidos e não-absorvidos com culturas puras de Salmonella e outras enterobactérias. A absorção dos soros eliminou as reações cruzadas com todas as enterobactérias testadas nesse estudo, apresentadas tanto por alguns anti-soros individuais quanto pelo polivalente. Entre os seis anti-soros estudados, os que apresentaram melhor desempenho foram o f,g,s não-absorvido e o polivalente absorvido. Resumo em inglês This research aimed for the development of convenient policlonal immunoreagents to be used in an enzyme immunoassay for detection of Salmonella. Six anti-Salmonella antisera were prepared, which contained the following agglutinins: e, h. 1.6; i; 1.2; f,g,s and m,t. The antigens consisted of formolized cultures of four Salmonella serotypes (S. Typhimurium phases 1 and 2, S. Anatum phases 1 and 2, S. Agona and S. Oranienburg), grown in tryptic soy broth. An indirect-type im (mais) munoassay was used, employing anti-IgG-peroxidase as conjugate and OPD-H2O2 as chromogen. These tests were developed with individual and polivalent sera (pool of the individual sera), absorbed and non-absorbed with cultures of Salmonella and other enterobacteria. Absorption eliminated the cross reactions with enterobacteria, presented by some individual sera and by the polivalent serum. The best performance in the immunoassay was achieved by the non-absorbed f,g,s and by the absorbed polivalent sera.

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O corrência natural de desoxinivalenol e toxina T-2 em milho pós-colheita/ Natural occurrence of desoxinivalenol and toxin T-2 in recently harvested corn

PRADO, Guilherme; OLIVEIRA, Marize Silva; FERREIRA, Solange Oliveira; CORRÊA, Tânia Barreto Simões; AFFONSO, Beatriz Ramalho Ramos
1997-12-01

Resumo em português Foi verificada a incidência natural de desoxinivalenol (DON) e toxina T-2 em 115 amostras de milho em grão, pós-colheita, procedentes de diferentes localidades do Brasil, Argentina e Paraguai, safra 1994/1995. Os grãos de milho foram obtidos da Associação Brasileira de Milho. DON foi extraído do grão com acetonitrila-água (84+16) e o extrato foi submetido a uma purificação em coluna de carvão ativo, alumina e Celite. A detecção foi feita por cromatografia em (mais) camada delgada, impregnando a placa com solução de cloreto de alumínio, aquecida após desenvolvimento e visualização em luz ultravioleta (366 nm). Para a toxina T-2, um método direto e competitivo de ELISA foi utilizado, após extração da amostra com metanol a 70%. As recuperações médias para o DON e toxina T-2 foram superiores a 70%. O limite de detecção foi cerca de 90 ng/g e 50 ng/g, para DON e toxina T-2, respectivamente. DON foi detectado em 7 das amostras (102-542 ng/g) e a toxina T-2 em uma amostra (104 ng/g). Resumo em inglês One hundred and fifteen samples of postharvest corn from the 1994/1995 season, from different locations of Brasil, Argentina and Paraguay, were examined for deoxynivalenol (DON) and T-2 toxin. The samples were obtained from the Brazilian Corn Association. DON was extracted with acetonitrile - water (84 + 16) and the extract submitted to a cleanup on a charcoal - alumina - Celite colunm. The detection was performed on silica gel TLC plates impregnated with aluminum chlorid (mais) e solution. After development the plates were heated and examined under UV light (366 nm). An enzyme-linked immunoassay (ELISA), direct and competitive, was employed for the detection and quantitation of T-2 toxin. The average recoveries for DON and T-2 toxin were above 70%. The detection limits were 90 ng/g for DON and 50 ng/g for T-2 toxin. DON was found in 7 of the samples (102 - 542 ng/g) and T-2 toxin in one sample (104 ng/g).

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Níveis de interleucina-6 e fator de necrose tumoral-alfa no liquor de recém-nascidos a termo com encefalopatia hipóxico-isquêmica/ Levels of interleukin-6 and tumor necrosis factor-alpha in the cerebrospinal fluid of full-term newborns with hypoxic-ischemic encephalopathy

Silveira, Rita de Cássia; Procianoy, Renato S.
2003-08-01

Resumo em português OBJETIVO: avaliar os níveis liquóricos de IL-6 e TNF-alfa em recém-nascidos a termo com encefalopatia hipóxico-isquêmica (EHI), comparando-os com os de recém-nascidos controles. METODOLOGIA: estudo caso-controle realizado no período de julho de 1999 a outubro de 2001, incluindo dois grupos de recém-nascidos a termo: controle, com 20 recém-nascidos sem sepse e/ou meningite e com escore de Apgar > 9 no primeiro e quinto minutos de vida; e casos, com 15 recém-nasci (mais) dos asfixiados, caracterizados pelo escore de Apgar 3,0 mmol/l e necessidade de ventilação com pressão positiva pelo menos durante 2 minutos após o nascimento. Foram coletadas amostras de liquor nas primeiras 48 horas de vida, para determinação dos níveis de IL-6 e TNF-alfa pelo método de enzimoimunoensaio. RESULTADOS: os grupos não diferiram quanto ao peso de nascimento, idade gestacional, classificação quanto ao peso e idade gestacional, tipo de parto e tempo médio de obtenção do liquor; seus exames foram obtidos em média com 17 horas de vida. Nos recém-nascidos asfixiados, as medianas dos níveis liquóricos foram: 157,5 pg/ml para IL-6 e 14,7 pg/ml para TNF-alfa, significativamente mais elevadas que nos controles (IL-6: 4,1 pg/ml e TNF-alfa: 0,16 pg/ml). CONCLUSÕES: recém-nascidos a termo com EHI apresentaram níveis liquóricos de IL-6 e TNF-alfa mais elevados que controles, possivelmente devido à produção local cerebral dessas citocinas, especialmente o TNF-alfa. Estes achados estimulam estudos futuros, utilizando bloqueadores cerebrais das ações dessas citocinas como estratégia de neuroproteção. Resumo em inglês OBJECTIVE: to determine cerebrospinal fluid levels of interleukin-6 and tumor necrosis factor-alpha in full-term infants with hypoxic-ischemic encephalopathy, comparing with control infants. METHODS: controlled, prospective study, performed between July 1999 and October 2001 with two groups of full-term newborns: 20 controls with no sepsis and/or meningitis and Apgar score > 9 at first and fifth minutes; and cases, 15 asphyxiated full-term newborns with Apgar (mais) at first and fifth minutes, umbilical blood cord pH 3.0 mmol/L, and requiring positive pressure ventilation for at least 2 minutes after birth. Cerebrospinal fluid samples were collected within 48 hours of birth for determination of interleukin-6 and tumor necrosis factor-alpha by enzyme immunoassay. RESULTS: groups were similar concerning birthweight, gestational age, type of delivery and mean time required for cerebrospinal fluid sample collection. The samples were collected at mean with 17 hours of life. The medians cerebrospinal fluid levels in asphyxiated newborn infants were: 157.5 pg/ml for interleukin-6 and 14.7 pg/ml for tumor necrosis factor-alpha, significantly higher than the controls (interleukin-6: 4.1 pg/ml and tumor necrosis factor-alpha: 0.16 pg/ml). CONCLUSIONS: full-term newborns with hypoxic-ischemic encephalopathy present higher cerebrospinal fluid interleukin-6 and tumor necrosis factor-alpha levels than the controls, possibly because of the local cerebral production of these cytokines, especially tumor necrosis factor-alpha. These results support a recommendation for future studies with brain blockers of the actions of these cytokines for neuroprotective strategies.

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Métodos imunoquímicos para análise de contaminantes ambientais: conceitos, estado da arte e perspectivas/ Immunochemical methods for analysis of environmental contaminants: concepts, state of the art and perpectives

Nunes, Gilvanda Silva
2005-06-01

Resumo em inglês Immunoassay techniques provide simple, powerful and inexpensive methods for analysis of environmental contaminants. However, the acceptance of immunoassays is dependent on the clear demonstration of quality and validity compared to more traditional techniques. In this review, primarily, the understanding and the fundamentals of immunoassay methods are given in order to make good use of immunoassays, especially of EIA tests. Special attention is given to the concepts relat (mais) ed to the enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) formats, such as inhibition concentration at 50% (IC50), detection limit (LOD), cross-reactivity (CR %). It is also explained why some immunoassays are quantitative methods whereas others can only be used as screening methods. A list of main commercial kits for detection of priority pollutants is given in order to help analysts. Others formats, such as flow-injection immunoassay analysis (FIIA), immunoassay chromatography and immunosensors are also cited.

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Manifestações articulares nas viroses exantemáticas/ Joint complaints in exanthematic diseases

Oliveira, Solange Artimos de; Camacho, Luís A.B.; Bettini, Lílian Rachel; Fernandes, Daniele Guerreiro; Gouvea, Nathalia A.C.; Barros, Roberto A.Q.; Setúbal, Sérgio; Siqueira, Marilda Mendonça
1999-04-01

Resumo em português A freqüência de manifestações articulares foi avaliada em 251 pacientes com diagnóstico clínico e laboratorial (detecção de IgM por ensaio imunoenzimático) de virose exantemática. As artropatias (artralgia e/ou artrite) foram mais observadas nos casos de dengue (49%) e de rubéola (38,2%) do que naqueles com parvovirose humana (30%) e sarampo (28,1%). Com exceção do sarampo, as artropatias predominaram nos adultos (315 anos de idade), sendo tal diferença esta (mais) tisticamente significativa. A ocorrência maior de artropatias em adultos foi mais evidente nos pacientes com parvovirose (75%), rubéola (65%) e dengue (57,7%) do que naqueles com sarampo (31%). As queixas articulares também predominaram nos pacientes do sexo feminino para todas as viroses avaliadas. Os resultados encontrados demonstram o freqüente acometimento articular nas doenças estudadas, e indicam a necessidade de comprovação laboratorial para o diagnóstico diferencial entre elas. Resumo em inglês The frequency of arthropathy was evaluated in 251 patients with clinical and serological diagnosis (specific IgM detection by enzyme immunoassay) of exanthematic disease. Arthropathy (arthralgia and/or arthritis) was more frequent in dengue fever (49%) and rubella (38.2%) cases than in human parvovirus (30%) and measles (28.1%) cases. Except for measles cases, joint complaints prevailed in adults (315 years of age) and this difference was significant. The higher frequency (mais) of arthropathy in adults was more evident in human parvovirus (75%), rubella (65%) and dengue fever (57.7%) cases than in measles cases (31%). Arthropathy was also more frequent in females for all rash diseases studied. The results of this study showed the high occurrence of joint complaints in the diseases described here and the importance of laboratory confirmation for their differential diagnosis.

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Investigação sorológica de casos subclínicos de leishmaniose tegumentar após um surto em uma localidade endêmica/ Serological investigation of subclinical cutaneous leishmaniasis cases following an outbreak in an endemic area

Arraes, Sandra Mara Alessi Aristides; Marini, Mirela Teixeira; Martello, Daiane; Silveira, Thaís Gomes Verzignassi; Lonardoni, Maria Valdrinez Campana; Nanni, Marcos Rafael
2008-04-01

Resumo em português Investigou-se casos subclínicos de leishmaniose tegumentar em um bairro de Maringá-Paraná, pelas reações de imunofluorescência indireta e enzimaimunoensaio. Das 130 amostras analisadas, uma amostra apresentou título 40 e três apresentaram título 20 pela imunofluorescência indireta, enquanto 11 amostras apresentaram-se positivas pela reação de enzimaimunoensaio. Estes dados sugerem a existência de casos subclínicos nesta localidade. Resumo em inglês Subclinical cases of cutaneous leishmaniasis were investigated in a district of Maringá, State of Paraná, by means of the indirect immunofluorescence reaction and enzyme immunoassay. Among the 130 samples analyzed, one presented titer 40 and three presented titer 20 in the indirect immunofluorescence reaction, while 11 samples were positive in the enzyme immunoassay reaction. These data suggest that subclinical cases exist at this locality.

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Incidência de Leifsonia xyli subsp. xyli em áreas de multiplicação de cana-de-açúcar no Espírito Santo, sul da Bahia e oeste de Minas Gerais/ Incidence of Leifsonia xyli subsp. xyli in sugarcane multiplication areas of Espírito Santo, South of Bahia, and Western of Minas Gerais States

Ponte, Elaine Cristina de; Silveira, Silvaldo Felipe da; Carneiro Jr, Josil de Barros; Lima, Rozana Moreira Pereira de
2010-12-01

Resumo em português O controle do raquitismo-da-soqueira da cana-de-açucar, causado pela bactéria Leifsonia xyli subsp. xyli (Lxx), requer o diagnóstico preciso da doença, pela detecção do patógeno na seiva do xilema. Neste trabalho, avaliou-se a incidência do raquitismo em 108 talhões (principalmente de primeiro e segundo cortes) distribuídos em 7 municípios do Espírito Santo, sul da Bahia e oeste de Minas Gerais, nos anos de 2003 e 2004, totalizando 558 ha amostrados. Para dete (mais) cção do patógeno empregou-se a técnica sorológica Dot Blot-EIA (Dot Blot Enzyme Imunoassay). O raquitismo foi diagnosticado em 67,6% dos talhões amostrados (67,7% da área). Em 2003, a incidência média de colmos infectados (IC%) correlacionou-se positivamente com a idade de corte (4,8% nas áreas de primeiro corte e 10,3% nas áreas de sexto corte). No ano de 2004, observou-se elevada incidência de raquitismo em cana de primeiro corte (IC=18%). A doença foi diagnosticada em 28 dentre 34 variedades estudadas. Nestas, a incidência varietal média variou entre 0,6 e 42%, em áreas predominantemente de primeiro e segundo corte, atingindo IC máxima de 59,5% em talhão de cana-planta da variedade RB855113. As variedades RB72454, SP711406 e SP813250, que tiveram número razoável de talhões amostrados, apresentaram geralmente valores de IC (por talhão) menores que 10%. Conclui-se que o raquitismo-da-soqueira encontra-se amplamente disseminado nas regiões estudadas e que as mudas utilizadas para a renovação dos canaviais possuem altos índices de contaminação por Lxx. Estudos adicionais devem ser conduzidos para se caracterizar variedades regionais promissoras quanto à resistência/tolerância ao raquitismo, visando-se aperfeiçoar o manejo varietal e melhorar a sanidade das mudas. Resumo em inglês This paper describes a survey of the Ratoon Stunting Disease (RSD) prevalence in 108 sugarcane multiplication areas (558 ha) of seven municipalities of the Espírito Santo, western of Minas Gerais and southern Bahia States, during 2003 and 2004. The diagnostic method of RSD is mainly based on detection of the pathogenic bacterium Leifsonia xyli subsp. xyli (Lxx) in xylem sap extracts, which is important on sugarcane propagation material to direct the control of disease. T (mais) he Dot Blot Enzyme Immunoassay (Dot Blot-EIA) was used as diagnostic method of RSD on this work. The pathogen was detected in 67.6% of the sampled areas (67,7% of the whole area). In 2003, the average incidence of infected stalks (canes) was correlated with the crop age, being 4.8% for first harvested (one year) areas and 10.3% for two six harvested (six years) areas. In 2004, highest average IC (18%) was observed for one year areas. Twenty eight cultivars were infected by Lxx of a total of 34 sampled. The IC varied from 0.6 to 42% for infected cultivars. The highest IC of 59,5% was observed for RB855113 in an one year area. All the uninfected cultivars were poorly sampled (one area per cultivar only). Despite cultivars RB72454, SP711406 and SP813250 were susceptible to RSD they presented IC values lowers than 10% in general, being considerate intermediate resistant to RSD. We concluded that RSD was found largely disseminated in the studied regions and the propagations materials used for replanting were highly contaminated by Lxx. Additional studies have to be taken to characterize the cultivar resistance or tolerance to RSD and to improve the cultivar manage and the sanity of the seedcane nurseries in the studied regions.

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Identificação do vírus do mosaico do tomateiro (ToMV) Tobamovirus, por meio de anticorpos monoclonais/ Identification of tomato mosaic virus (ToMV) Tobamovirus using monoclonal antibodies

Duarte, Keila Maria Roncato; Gomes, Luiz Humberto; Andrino, Felipe Gabriel; Leal Jr., Gildemberg Amorin; Silva, Fabio Henrique Bicudo da; Paschoal, Jonas Augusto Rizzato; Giacomelli, Ana Maria Brancalion; Tavares, Flavio Cesar Almeida
2002-03-01

Resumo em português O tomateiro é uma olerícola de grande importância econômica e uma das mais suscetíveis a viroses, dentre as quais, a causada pelo vírus do mosaico do tomateiro (ToMV), gênero Tobamovirus, que tem como sintomas mosaico verde claro-escuro nas folhas, afilamento dos folíolos e diminuição da produção, entre outros sintomas. Visando a identificação do ToMV, foram produzidos anticorpos monoclonais (MAbs), testados através de PTA- ELISA ("plate trapped antigen- en (mais) zyme linked immunoassay"). O MAb (10.H1) foi utilizado para avaliar a capacidade de identificação do ToMV em testes no campo em plantas de tomate infectadas. O MAb não apresentou reação cruzada com TMV (tobamovirus do mosaico do tabaco) nem com extrato de plantas sadias. O ToMV das amostras foi isolado, purificado e re-inoculado em plantas de tomateiro e de tabaco, para confirmação dos sintomas. Em "immunobloting" o MAb 10.H1 reconheceu somente a proteína referente à capa protéica do ToMV (de 17,5 kDa). A especificidade do MAb 10.H1 pode permitir o diagnóstico precoce desta doença na fase de plântulas, ainda em casa de vegetação, evitando assim a disseminação desta virose no campo. Resumo em inglês Tomato is a highly important crop for the world economy, and very susceptible to virus diseases, among them the tomato mosaic tobamovirus (ToMV), which causes light and dark green mosaic in the leaves, decreases yield, among other symptoms. With the aim of early identifying ToMV in biological material, harvested from crop fields, monoclonal antibodies (MAbs) were produced against ToMV. The MAb 10.H1 tested through PTA-ELISA (Plate Trapped Antigen--Enzyme-Linked immunosorb (mais) ent assay), does not cross-react with TMV (tobacco mosaic tobamovirus) or with proteins extracted from plant sap. The MAb was able to identify ToMV from infected plants. The ToMV was isolated, purified and used to re-inoculate tobacco and tomato plants to confirm the symptoms. In immunoblotting assays the MAb recognizes only the band corresponding to the coat protein of the ToMV (17.5 kDa). The MAb 10.H1 opens the possibility to identify ToMV in tomato seedlings avoiding its dissemination in cropped fields.

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Glomerulonefrite associada à infecção pelo vírus da hepatiteC/ Glomerulonephritis associated with hepatitis C virus infection

Lopes, Lucila M. Valente; Lopes, Edmundo P.A.; Silva, A. Eduardo; Abreu, Patrícia Ferreira; Kirsztajn, Gianna Mastroianni; Pereira, Aparecido B.; Ferraz, Maria Lúcia
1999-02-01

Resumo em português Descrevem-se pacientes com glomerulonefrites (GNs) associadas à infecção pelo vírus da hepatite C (HCV). Entre agosto de 93 e julho de 96 foram observados 4 pacientes, com idade mediana de 41 anos, sendo 2 do sexo masculino. Pesquisaram-se o anti-HCV por ensaio imuno-enzimático e o HCV-RNA por PCR. Também foram pesquisadas crioglobulinas séricas, hemácias dismórficas no sedimento urinário e proteinúria de 24h. Viremia, crioglobulinas, hematúria e proteinúria (mais) foram observadas nos 4 pacientes. As biópsias hepáticas revelaram atividade inflamatória nos 3 pacientes em que foram realizadas e as do rim revelaram glomerulonefrite membranoproliferativa em 3 e glomerulonefrite proliferativa mesangial em 1 paciente. Dois pacientes vêm recebendo antivirais (IFN associado à ribavirina) e evoluindo com melhora. A presença de viremia e de hepatite concomitante com as alterações urinárias constituem indícios do envolvimento viral na glomerulopatia. Tais achados são reforçados pela melhora das alterações urinárias durante o tratamento específico. Conclui-se que a pesquisa de marcadores virais em pacientes com GNs assume relevância na medida em que pode modificar a conduta terapêutica. Resumo em inglês We report 4 patients with glomerulonephritis (GN) associated with hepatitis C virus (HCV) infection seen between August 1993 and July 1996. Two of them were male and median age was 41 years. Anti-HCV was detected by enzyme-immunoassay and HCV-RNA by PCR. Serum cryoglobulins, 24-hour proteinuria, and erythrocyte dismorphism were also determined. Viremia, cryoglobulinemia, hematuria and proteinuria were observed in all patients. Liver biopsies revealed inflammatory activity (mais) in 3 cases, and renal biopsies revealed membranoproliferative glomerulonephritis in 3 patients and mesangial proliferative glomerulonephritis in 1 patient. Two patients are on specific therapy for HCV infection (IFN in combination with ribavirin) and have presented clinical and laboratory improvement. The occurrence of active liver disease and viremia concurrent with urinary alterations suggests viral involvement in renal disease, a conclusion supported by the by improvement of urinary alterations observed after treatment for HCV. We conclude that the search for viral markers in patients with GN is important since their detection could change the therapeutic approach.

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Folato, vitamina B12 e ferritina sérica e defeitos do tubo neural/ Folate, vitamin B12, serum ferritin and defects of the neural tube

Thame, Gizele; Shinohara, Elvira Maria Guerra; Santos, Hosana Gonçalves dos; Moron, Antonio Fernandes
1998-09-01

Resumo em português Objetivo: verificar os níveis de folatos, vitamina B12 e ferritina em pacientes cujos fetos apresentaram defeitos de tubo neural (DTN). O folato sangüíneo e a vitamina B12 atuam como cofatores para as enzimas envolvidas na biossíntese do DNA. A interrupção deste processo pode impedir o fechamento do tubo neural. A suplementação vitamínica contendo folato pode reduzir as taxas de ocorrência de defeitos de tubo neural, embora exista a preocupação de que esta pre (mais) venção possa mascarar a deficiência de vitamina B12. Métodos: dosagens de vitamina B12 e ferritina pelo método de enzimaimunoensaio com micropartículas e a dosagens de ácido fólico pelo método de captura iônica (IMx ABBOTT). Resultados: a porcentagem de gestantes com deficiência de vitamina B12 (níveis séricos Resumo em inglês Purpose: to determine folate, vitamin B12 and ferritin levels in patients whose fetuses presented neural-tube defects (NTD). Blood folate and vitamin B12 act as cofactors of enzymes involved in DNA biosynthesis. Interruption of this process may block neural-tube closing. Vitamin supplementation with folate may reduce occurrence rates and recurrence of NTD, although there is concern about the fact that this prevention may mask vitamin B12 deficiency. Methods: vitamin B12 a (mais) nd ferritin determinations by enzyme immunoassay with microparticles and folic acid determination using the ion capture method (IMx ABBOTT). Results: the percentage of pregnant women with vitamin B12 deficirncy (serum levels

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Emprego de reação imuno-enzimática na determinação do caráter genético de amostras de poliovírus/ Use of an immunoenzymatic reaction in the determination of the genetic character of poliovirus samples

Schatzmayr, Hermann G.; Fujita, Mitiko
1985-03-01

Resumo em português Uma reação imuno-enzimática em microplacas foi utilizada para a diferenciação do caráter genético de amostras de poliovirus, em relação às amostras padrões atenuadas de Sabin tipos 1,2 e 3 e às amostrwas virulentas Mahoney, MEF- 1 e Saukett, utilizando soros policlonais mono-específicos, preparados por absorção com as amostras heterólogas de cada tipo. Em 74 das 79 amostras de vírus examinadas (93,6%) foi possivel identificar o seu caráter como amostras (mais) selvagens ou vacinais. A utilização da prova imuno-enzimática aplicada aos vírus da poliomielite é discutida. Resumo em inglês Characterization of poliovirus strains by an enzyme immunoassay (EIA). An enzyme immunoassay performed with polyclonal antisera to poliovirus types 1, 2 and 3 absorbed with heterologous strains of the same types was used for the characterization of poliovirus field isolates. The assay allowed the identification of 74 (93.6%) out of 79 isolates as wild or vaccine-like strains. Applications of EIA for the study of polioviruses are discussed.

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Determinação de ácido valpróico em soro por cromatografia líquida de alta eficiência com detector de arranjo de diodos (CLAE-DAD), após derivatização com brometo de fenacila/ Determination of valproic acid in serum by high performance liquid chromatography with diode array detection (HPLC-DAD), after derivatization with phenacyl bromide

Antunes, Marina Venzon; Nagel, Viviane; Linden, Rafael; Werlang, Helenice Orosco; Hermes, Daniela
2009-01-01

Resumo em inglês Valproic acid (VA) is a drug used to control seizures in several epileptic conditions. In VA pharmacotherapy, therapeutic drug monitoring is recommended to obtain adequate seizure control and avoid toxicity. The aim of this study was to validate a method for the determination of valproic acid in serum, employing high performance liquid chromatography with diode array detection (HPLC-DAD), after derivatization with phenacyl bromide. The calibration curve (y=0.0133x-0.0025) (mais) presented good linearity with r²=0.9999. Accuracy (101-115%), intra-assay precision (4.53-8.15%) and inter-assay precision (3.15-6.77%) were acceptable. The quantification limit was 2.0 µg/mL. The method presented similar results to enzyme immunoassay.

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Dengue: inquérito populacional para pesquisa de anticorpos e vigilância virológica no Município de Campinas, São Paulo, Brasil/ Dengue: sero-epidemiological survey and virological surveillance in Campinas, São Paulo, Brazil

Lima, Virgília Luna Castor de; Rangel, Osias; Andrade, Valmir Roberto; Silveira, Naoko Yanagizawa Jardim da; Oliveira, Susely Salviano de; Figueiredo, Luiz Tadeu M.
2007-03-01

Resumo em português Estudou-se a epidemiologia do dengue no Município de Campinas, São Paulo, Brasil, por meio de um inquérito populacional aleatório realizado em 1998, visando à detecção dos níveis de anticorpos para dengue, e de dados de vigilância epidemiológica do período de 1996 a 2003, com ênfase na vigilância virológica. Foram coletadas 1.260 amostras, por meio de punção digital, utilizando-se papel de filtro, sendo as amostras testadas pelo teste imunoenzimático em c (mais) ulturas celulares infectadas (EIA-ICC). Observou-se que a prevalência de soro reagentes (14,79%) é mais baixa que as encontradas em outros inquéritos realizados no país e superior às encontradas em dois inquéritos realizados em cidades do Estado de São Paulo. Detectou-se uma prevalência de soro reagentes muito superior à incidência de casos notificados e confirmados laboratorialmente durante as epidemias de 1996, 1997 e 1998. Não se encontrou proporcionalidade entre a prevalência de anticorpos para dengue e a incidência de casos durante a epidemia nos diferentes Distritos de Saúde da cidade. Sugerem-se um estudo aprofundado do significado dos indicadores de transmissão utilizados em epidemias e uma vigilância virológica mais intensa, principalmente em anos com níveis de transmissão baixos. Resumo em inglês The epidemiology of dengue in the municipality of Campinas, São Paulo, Brazil, was studied in 1998 using a randomized sero-epidemiological survey. Epidemiological surveillance data from 1996-2003 were also analyzed, with an emphasis on virological surveillance. 1,260 individuals participated in the survey and had blood samples drawn by finger stick on filter paper. Blood samples were tested by EIA-ICC, an enzyme immunoassay using infected cells as antigen. Dengue antibod (mais) y prevalence (14.79%) was lower than in other surveys in other States of Brazil, but higher than in two other serological surveys in São Paulo State. Dengue antibody prevalence was far higher than the reported case incidence during the 1996, 1997, and 1998 epidemics. Antibody prevalence and reported case incidence in different health districts were disproportional. The article concludes by recommending further research on the significance of transmission rates during epidemics and more intensive virological surveillance, especially in years with few reported cases.

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Dengue: inquérito populacional para pesquisa de anticorpos e vigilância virológica no Município de Campinas, São Paulo, Brasil/ Dengue: sero-epidemiological survey and virological surveillance in Campinas, São Paulo, Brazil

Lima, Virgília Luna Castor de; Rangel, Osias; Andrade, Valmir Roberto; Silveira, Naoko Yanagizawa Jardim da; Oliveira, Susely Salviano de; Figueiredo, Luiz Tadeu M.
2007-03-01

Resumo em português Estudou-se a epidemiologia do dengue no Município de Campinas, São Paulo, Brasil, por meio de um inquérito populacional aleatório realizado em 1998, visando à detecção dos níveis de anticorpos para dengue, e de dados de vigilância epidemiológica do período de 1996 a 2003, com ênfase na vigilância virológica. Foram coletadas 1.260 amostras, por meio de punção digital, utilizando-se papel de filtro, sendo as amostras testadas pelo teste imunoenzimático em c (mais) ulturas celulares infectadas (EIA-ICC). Observou-se que a prevalência de soro reagentes (14,79%) é mais baixa que as encontradas em outros inquéritos realizados no país e superior às encontradas em dois inquéritos realizados em cidades do Estado de São Paulo. Detectou-se uma prevalência de soro reagentes muito superior à incidência de casos notificados e confirmados laboratorialmente durante as epidemias de 1996, 1997 e 1998. Não se encontrou proporcionalidade entre a prevalência de anticorpos para dengue e a incidência de casos durante a epidemia nos diferentes Distritos de Saúde da cidade. Sugerem-se um estudo aprofundado do significado dos indicadores de transmissão utilizados em epidemias e uma vigilância virológica mais intensa, principalmente em anos com níveis de transmissão baixos. Resumo em inglês The epidemiology of dengue in the municipality of Campinas, São Paulo, Brazil, was studied in 1998 using a randomized sero-epidemiological survey. Epidemiological surveillance data from 1996-2003 were also analyzed, with an emphasis on virological surveillance. 1,260 individuals participated in the survey and had blood samples drawn by finger stick on filter paper. Blood samples were tested by EIA-ICC, an enzyme immunoassay using infected cells as antigen. Dengue antibod (mais) y prevalence (14.79%) was lower than in other surveys in other States of Brazil, but higher than in two other serological surveys in São Paulo State. Dengue antibody prevalence was far higher than the reported case incidence during the 1996, 1997, and 1998 epidemics. Antibody prevalence and reported case incidence in different health districts were disproportional. The article concludes by recommending further research on the significance of transmission rates during epidemics and more intensive virological surveillance, especially in years with few reported cases.

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Concentrações de interleucina-2 na secreção nasofaríngea de crianças com bronquiolite viral aguda pelo vírus respiratório sincicial/ Concentrations of interleukin-2 in the nasopharyngeal secretion of children with acute respiratory syncytial virus bronchiolitis

Giugno, Katia M.; Machado, Denise C.; Amantéa, Sérgio L.; Barreto, Sérgio S. Menna
2004-08-01

Resumo em português OBJETIVO: Avaliar as concentrações de interleucina-2 (IL-2) na secreção nasofaríngea de crianças (0-24 meses) acometidas de bronquiolite viral aguda pelo vírus respiratório sincicial nas primeiras 12 horas de hospitalização e correlacionar os níveis encontrados com a gravidade da doença. MÉTODOS: Estudo prospectivo com amostragem seqüencial realizado no período de junho a agosto de 1999. Foram incluídos 62 pacientes previamente hígidos, internados com dia (mais) gnóstico de bronquiolite viral aguda caracterizado por pródromos recentes de coriza e/ou obstrução nasal que evoluíram com pelo menos dois dos seguintes sinais: disfunção respiratória, taquipnéia, sibilos ou crepitações. Todos os pacientes tiveram a presença de vírus respiratório sincicial detectada no aspirado nasofaríngeo. As amostras de secreção nasofaríngea foram obtidas nas primeiras 12 horas de hospitalização. As dosagens de IL-2 foram realizadas por ensaio imunoenzimático. A gravidade da doença foi avaliada por: medida da saturação de oxigênio da hemoglobina por oximetria de pulso, sistema de escore clínico modificado, tempo de uso de oxigênio, tempo de hospitalização e necessidade de ventilação mecânica, sendo estas variáveis comparadas em relação às medianas de IL-2 através dos testes de Spearman e Kruskal-Wallis e, para a análise categorizada da interleucina, através do teste de qui-quadrado. RESULTADOS: A mediana de idade dos pacientes foi 2,2 (1,3-4) meses. O sexo masculino foi observado em 54% dos casos. Saturação de oxigênio da hemoglobina por oximetria de pulso na hospitalização foi Resumo em inglês OBJECTIVE: To assess interleukin-2 concentrations in nasopharyngeal secretion of children (0-24 months) with acute respiratory syncytial virus bronchiolitis, within the first 12 hours of hospital admission, and compare the levels of IL-2 with the severity of the illness. METHODS: Prospective study performed between June and August 1999. The study included 62 patients, previously healthy, hospitalized with acute viral bronchiolitis characterized by recent prodromes of cory (mais) za and/or nasal obstruction, which evolved to at least two of the following signs: respiratory dysfunction, tachypnea, wheezing or rales, and detection of respiratory syncytial virus in nasopharyngeal aspirate. The nasopharyngeal specimens were collected within 12 hours of hospital admission. The interleukin-2 levels were obtained by enzyme immunoassay. Severity of illness was assessed through oxygen saturation by pulse oximetry, Modified Clinical Score System, time of supplemental oxygen required, length of hospital stay, and mechanical ventilation. Spearman's correlation and Kruskal-Wallis test were used to compared these variables in relation to the median of interleukin-2. The chi-square test was used for categorical analysis of interleukin-2. RESULTS: The mean age of patients was 2.2 (1.3-4) months. Males comprised 54% of cases. Hemoglobin oxygen saturation by pulse oximetry at hospital admission was below 95% in 66.1% of patients. The mean time of supplemental oxygen use was 4.7 days (±3.54). The mean length of hospital stay was 4.25 days (±1.76). Mechanical ventilation was used in 4.8% of patients. The values of interleukin-2 in nasopharyngeal aspirates varied from 0 to 40,256 ng/ml with median of 86 ng/ml (4.4 - 457.3). The study showed no statistical difference between levels of IL-2 and severity of illness. CONCLUSIONS: The interleukin-2 levels showed a heterogeneous behavior. We found no association between interleukin-2 levels in nasopharyngeal secretion and respiratory syncytial virus bronchiolitis.

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Ciclosporina A e tacrolimus: uma revisão/ Cyclosporine A and tacrolimus: a review

Garcia, Solange Cristina; Lopes, Luciana dos Santos; Schott, Karen Lilian; Beck, Sandra Trevisan; Pomblum, Valdeci Juarez
2004-12-01

Resumo em português INTRODUÇÃO: Monitorização terapêutica de imunossupressores ciclosporina A (CsA) e tacrolimus (FK506) é indispensável para manter níveis estáveis das drogas, evitando para o transplantado a perda do enxerto, no caso de baixas doses, ou a toxicidade, em altas doses, permitindo ajustes individuais. HISTÓRICO: Na década de 80, foi introduzida a utilização dos potentes imunossupressores CsA e FK506, revolucionando o transplante de órgãos com a diminuição da re (mais) jeição. MECANISMO DE AÇÃO: A CsA e o FK506 são inibidores da transcrição do primeiro sinal para ativação dos linfócitos T, apresentando estruturas químicas diferentes, mas mecanismos semelhantes. TOXICIDADE: Os principais efeitos relacionados à dose da CsA e do FK506 são a nefro e a neurotoxicidade. Estudos apontam o FK506 como droga alternativa à utilização da CsA porque aquele demonstrou menor nefrotoxicidade e uma reversibilidade dos efeitos neurotóxicos diante da redução da dose. METODOLOGIA ANALÍTICA: Na monitorização de rotina para a CsA, os imunoensaios, radioimunoensaio (RIA) e imunoensaio monoclonal com fluorescência polarizada (FPIAm) ocuparam o lugar da cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE), detecção ultravioleta (UV). O método de referência para o FK506 é a CLAE com detecção por espectrometria de massa (LC/MS). Porém, metodologias como ensaio imunoenzimático de micropartículas (MEIA) ou enzyme linked imunosorbent assay (ELISA) têm sido utilizadas na rotina laboratorial. CONCLUSÃO: Parece existir uma tendência para a substituição terapêutica da CsA pelo FK506 no tratamento imunossupressor, porém ainda não se estabeleceu consenso nessa conduta. A metodologia analítica para a análise da CsA encontra-se bem estabelecida; para o FK506, estudos ainda são necessários. Resumo em inglês INTRODUCTION: Therapeutic monitoring of immunosuppressants cyclosporine A (CsA) and tacrolimus (FK506) is indispensable to maintain stable levels of these drugs, avoiding graft rejection in the transplanted patient in the case of low dosage, or toxicity in high dosage, and allowing monitoring of individual treatment. BACKGROUND: In the 80's, the introduction of the potent immunosuppressive drugs CsA and FK506 reduced the incidence of rejection episodes after solid organ t (mais) ransplantation. MECHANISM OF ACTION: CsA and FK506 have distinct chemical structures but similar mechanisms of action, inhibiting the transcription of the first signal for T-lymphocyte activation. TOXICITY: The major side effects associated with CsA and FK506 therapies are nephrotoxicity and neurological disturbances. However, clinical studies demonstrate that FK506 is a potent alternative to CsA due to its lower nephrotoxicity and reversible neurotoxicity when the dosage is decreased. ANALYTICAL METHODOLOGY: For routine monitoring of CsA, the high-performance liquid chromatography with ultraviolet detection (HPLC-UV) was replaced by the radioimmunoassay (RIA) and monoclonal antibody-based fluorescence polarization immunoassay (mFPIA). For the assessment of FK506, it is consensus that highly specific liquid chromatography/tandem mass spectrometry (LC/MS/MS) is the reference method, although the microparticle enzyme immunoassay (MEIA) and the enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) are currently used for routine monitoring. CONCLUSION: There is a tendency to substitute CsA by FK506 at immunosuppressive regimens, but this is not a consensus yet. The analytical methodology for CsA analysis is well established in the clinical laboratory, but further studies are needed to define the best methodologies for routine FK506 analysis.

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Caracterização eletroforética e análise de subgrupo de rotavírus em rebanhos bovinos leiteiros do Estado de São Paulo/ Eletrophoretical characterization and subgroup analysis of rotavirus in dairy cattle in the State of São Paulo, Brazil

Buzinaro, M.G.; Munford, V.; Brito, V.M.E.D.; Rácz, M.L.; Jerez, J.A.
2000-12-01

Resumo em português Foi realizado um estudo para determinar a ocorrência de infecção por rotavírus em rebanhos bovinos leiteiros. Foram analisadas 375 amostras de fezes de bezerros, na faixa etária 1 a 45 dias, provenientes de animais pertencentes a nove propriedades rurais, situadas em seis municípios da região nordeste do Estado de São Paulo. Destas, 193 pertenciam a animais com diarréia e 182 foram obtidas de animais clinicamente sadios. As técnicas utilizadas para a detecção (mais) de rotavírus foram o ensaio imunoenzimático (EIE) e a eletroforese em gel de poliacrilamida (EGPA). Por meio do EIE foram detectadas 11,2% (42/375) de amostras positivas, 15% delas (29/193) obtidas de animais com diarréia e 7,1% (13/182) colhidas de animais sem diarréia. A análise do perfil do genoma indicou a presença de seis eletroferótipos distintos, característicos de rotavírus do grupo A. Um único eletroferótipo foi detectado em três rebanhos, o qual permaneceu constante durante o período de amostragem. Em dois rebanhos diferentes eletroferótipos foram detectados, embora com maior prevalência de um dado perfil. A caracterização das amostras positivas em subgrupos foi realizada por meio do EIE com "duplo sanduíche", utilizando-se anticorpos monoclonais (MAb) específicos para antígenos de subgrupo (I e II). Foram caracterizadas como subgrupo I 52,4% (22/42) das amostras testadas, nenhuma reagiu com MAb de subgrupo II, enquanto as demais, 47,6% (20/42), não reagiram com nenhum dos dois subgrupos. Resumo em inglês A study was accomplished to determine the occurrence of rotavirus in feces of calves, in the State of São Paulo, Brazil. A total of 375 samples of feces from calves 1 to 45 day-old were collected. The animals belonged to farms situated in six counties of the northeast region of the State. One hundred and ninety tree out of these samples belonged to animals with a clinical picture of diarrhea and 182 were obtained from clinically healthy animals. The techniques used for t (mais) he detection of rotavirus were the enzyme immunoassay (EIA) and the polyacrilamide gel electrophoresis (PAGE). By the use of EIA, 11.2% (42/375) of the samples were positive for rotavirus. Among the samples of diarrheic calves, 15% (29/193) were found to be positive for rotavirus, whereas 7.1 (13/182) positive samples were obtained from clinically healthy animals. The PAGE test presented a lower sensitivity than EIA, since from the 42 positive samples in EIA, only 36 presented an electrophoretical profile characteristic of rotavirus. The genome analysis indicated the presence of six distinct electrophoretical types characteristic of group A rotavirus. A unique electropherotype was detected in tree farms, which remained constant during the sampling period. In two farms a second electropherotype was detected. The serological characterization of the positive samples in subgroups was accomplished through EIA with "double sandwich", utilizing monoclonal antibodies ( I and II). Twenty two group A rotavirus strains I (52.4%, 22/42) reacted with MAb of subgroup I, none to subgroup II, and the remaining 47.6% (20/42) did not react with the two subgroups.

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Avaliação de um teste imunoenzimático competitivo no diagnóstico sorológico da brucelose em búfalos (Bubalus bubalis)/ Evaluation of a competitive enzyme immunoassay for the serological diagnosis of brucellosis in buffaloes (Bubalus bubalis)

Mathias, Luis A.; Chaves, Lucila F.; Girio, Raul J. S.; Del Fava, C.
1998-07-01

Resumo em português O trabalho teve por objetivo avaliar o teste imunoenzimático competitivo (CEIA) para uso no diagnóstico sorológico da brucelose em búfalos (Bubalus bubalis), comparando seus resultados com aqueles obtidos na reação de fixação de complemento (CFT) e no teste rosa Bengala (RBT). Foram examinados 477 soros por meio do CEIA e do RBT e 465, desses mesmos soros, por meio da CFT. Na CFT e no CEIA, soros com títulos maiores ou iguais a 1/4 foram considerados positivos. P (mais) ara a determinação da sensibibilidade e da especificidade relativas do CEIA, foram considerados como doentes os animais com resultados positivos no RBT e na CFT e sãos os animais com resultados negativos nesses dois testes. Soros com resultados discordantes nesses duas provas foram eliminados da análise. Os resultados apontaram uma concordância de 97,42% entre o CEIA e a CFT e uma concordância de 95,39% entre o CEIA e o RBT. A sensibilidade relativa do CEIA foi de 100% e a especificidade relativa do teste foi de 98,55%. Esses dados mostram que o desempenho do CEIA diferiu pouco do desempenho dos outros dois testes, sugerindo que o mesmo pode constituir um recurso útil para o diagnóstico sorológico da brucelose em búfalos. Resumo em inglês The competitive enzyme immunoassay (CEIA) for the serological diagnosis of brucellosis in buffaloes (Bubalus bubalis) was evaluated by comparing its results with those obtained by the complement fixation test (CFT) and rose Bengal test (RBT). Four hundred and seventy-seven sera were tested by CEIA and RBT, and 465 of these were tested by CFT. Sera with a titre equal to or higher than 1/4 in CFT and CEIA were considered as positive. To determine the relative sensitivity an (mais) d specificity of CEIA, animals with a positive result to RBT and to CFT were considered as diseased, and animals with a negative result to both of those tests were considered as non diseased. Sera with disagreeing results for both of these tests were excluded from the analysis. The results showed an agreement of 97.42% between CEIA and CFT and an agreement of 95.39% between CEIA and RBT. The relative sensitivity of CEIA was 100% and its relative specificity 98.55%. These data show that the performance of CEIA little differed from the one of the other two tests, suggesting that CEIA may be an useful tool for the serological diagnosis of brucellosis in buffaloes.

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Avaliação da resposta humoral à vacina pneumocócica 7-valente em crianças com Aids/ Evaluation of humoral response to heptavalent pneumococcal conjugate vaccine in HIV-infected children/ Evaluación de la vacuna neumocócica 7-valente en la respuesta humoral de niños con SIDA

Costa, Isabel de Camargo; Guilardi, Fabiana; Kmiliauskis, Mariana Acenjo; Arslanian, Christina; Baldacci, Evandro Roberto
2008-10-01

Resumo em português OBJETIVO: A doença pneumocócica invasiva é importante causa de morbi-mortalidade em crianças infectadas pelo HIV. O objetivo do estudo foi avaliar quantitativamente a resposta com anticorpos aos sete sorotipos pneumocócicos da vacina em um grupo de crianças infectadas pelo HIV. MÉTODOS: Estudo realizado com 40 crianças infectadas pelo HIV, com idade entre 2 e 9 anos, em seguimento em ambulatório especializado no município de São Paulo, em 2002-2003. A dosagem d (mais) e anticorpos IgG contra os polissacarídeos da cápsula pneumocócica foi realizada por meio de ensaio imunoenzimático (ELISA). Os anticorpos foram dosados imediatamente antes e um mês após a aplicação da segunda dose da vacina. Utilizaram-se dois critérios para avaliar a resposta à vacina: títulos de anticorpos >1,3 µg/mL na sorologia pós-imunização e aumento >4 vezes nos títulos da sorologia pós em relação à pré-imunização. RESULTADOS: Para o primeiro critério (>1,3 µg/mL), 26 (65%) crianças obtiveram resposta sorológica à vacina, 12 (30%) delas apresentaram títulos de IgG pós-imunização em níveis de pelo menos 1,3 µg/mL para todos os sorotipos. Para o segundo critério (incremento >4 vezes nos títulos para quatro sorotipos ou mais), obteve-se resposta sorológica para 15 (37,5%) crianças. CONCLUSÕES: A resposta à vacina foi considerada satisfatória, com aumento estatisticamente significante dos títulos geométricos médios pós-vacinais em relação aos pré-vacinais para todos os sorotipos estudados. Resumo em espanhol OBJETIVO: La enfermedad neumocócica es una importante causa de morbi-mortalidad en niños infectados por HIV. El objetivo del estudio fue evaluar cuantitativamente la respuesta de anticuerpos para los siete serotipos neumocócicos de la vacuna en un grupo de niños infectados por HIV. MÉTODOS: El estudio fue realizado con 40 niños infectados por HIV, con edades entre 2 y 9 años, con seguimiento en ambulatorio especializado en el municipio de Sao Paulo (Sureste de Bras (mais) il), en 2002-2003. La dosis de anticuerpos IgG contra los polisacáridos de la cápsula neumocócica fue realizada por medio de ensayo inmuno enzimático (ELISA). Los anticuerpos fueron dosificados inmediatamente antes y un mes después de la aplicación de la segunda dosis de la vacuna. Se utilizaron dos criterios para evaluar la respuesta a la vacuna: títulos de anticuerpos ? 1,3 ?g/mL en la serología post-inmunización y aumento ?4 veces en los títulos de la serología post-inmunización con relación a la pre-inmunización. RESULTADOS: Para el primer criterio (?1,3 ?g/mL), 26 (65%) niños obtuvieron respuesta serológica con la vacuna, 12 (30%) de ellas presentaron títulos de IgG post-inmunización en niveles de por lo menos 1,3 ?g/mL para todos los serotipos. Para el segundo criterio (incremento >4 veces en los títulos para cuatro serotipos o mas), se obtuvo respuesta serológica en 15 (37,5%) niños. CONCLUSIONES: La respuesta frente a la vacuna fue considerada satisfactoria, con aumento estadísticamente significativo de los títulos geométricos promedios post-vacunales con relación a los pre-vacunales para todos los serotipos estudiados. Resumo em inglês OBJECTIVE: Invasive pneumococcal disease is a major cause of death in HIV-infected children. The objective of the study was to assess the quantitative antibody response to the seven pneumococcal serotypes of heptavalent pneumococcal conjugate vaccine in a group of HIV-infected children. METHODS: Study comprising 40 HIV-infected children aged between 2 and 9 years followed up in a specialized outpatient clinic in São Paulo, Brazil, between 2002 and 2003. Enzyme immunoassa (mais) y (ELISA) was used to measure IgG antibody titers against pneumococcus capsule. Antibodies were measured immediately before and 1 month after the second dose of the vaccine. Two response criteria were used: IgG titers >1.3 µg/mL in the post-immunization serology and an increase of at least 4-fold in post- compared to pre-immunization serology. RESULTS: For the first criterion (>1.3 µg/mL), 26 (65%) children had serological response to the vaccine, 12 (30%) showed post-immunization IgG titers of at least 1.3 µg/mL for all seven serotypes studied. For the second criterion studied (>4-fold increase in post- compared to pre-immunization titers for four serotypes or more), serological response was seen in 15 (37.5%) children. CONCLUSIONS: Overall response to the heptavalent pneumococcal conjugate vaccine was adequate, showing a statistically significant increase in the post-immunization geometric mean titers for the seven serotypes studied.

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Avaliação da resposta humoral à vacina pneumocócica 7-valente em crianças com Aids/ Evaluation of humoral response to heptavalent pneumococcal conjugate vaccine in HIV-infected children/ Evaluación de la vacuna neumocócica 7-valente en la respuesta humoral de niños con SIDA

Costa, Isabel de Camargo; Guilardi, Fabiana; Kmiliauskis, Mariana Acenjo; Arslanian, Christina; Baldacci, Evandro Roberto
2008-10-01

Resumo em português OBJETIVO: A doença pneumocócica invasiva é importante causa de morbi-mortalidade em crianças infectadas pelo HIV. O objetivo do estudo foi avaliar quantitativamente a resposta com anticorpos aos sete sorotipos pneumocócicos da vacina em um grupo de crianças infectadas pelo HIV. MÉTODOS: Estudo realizado com 40 crianças infectadas pelo HIV, com idade entre 2 e 9 anos, em seguimento em ambulatório especializado no município de São Paulo, em 2002-2003. A dosagem d (mais) e anticorpos IgG contra os polissacarídeos da cápsula pneumocócica foi realizada por meio de ensaio imunoenzimático (ELISA). Os anticorpos foram dosados imediatamente antes e um mês após a aplicação da segunda dose da vacina. Utilizaram-se dois critérios para avaliar a resposta à vacina: títulos de anticorpos >1,3 µg/mL na sorologia pós-imunização e aumento >4 vezes nos títulos da sorologia pós em relação à pré-imunização. RESULTADOS: Para o primeiro critério (>1,3 µg/mL), 26 (65%) crianças obtiveram resposta sorológica à vacina, 12 (30%) delas apresentaram títulos de IgG pós-imunização em níveis de pelo menos 1,3 µg/mL para todos os sorotipos. Para o segundo critério (incremento >4 vezes nos títulos para quatro sorotipos ou mais), obteve-se resposta sorológica para 15 (37,5%) crianças. CONCLUSÕES: A resposta à vacina foi considerada satisfatória, com aumento estatisticamente significante dos títulos geométricos médios pós-vacinais em relação aos pré-vacinais para todos os sorotipos estudados. Resumo em espanhol OBJETIVO: La enfermedad neumocócica es una importante causa de morbi-mortalidad en niños infectados por HIV. El objetivo del estudio fue evaluar cuantitativamente la respuesta de anticuerpos para los siete serotipos neumocócicos de la vacuna en un grupo de niños infectados por HIV. MÉTODOS: El estudio fue realizado con 40 niños infectados por HIV, con edades entre 2 y 9 años, con seguimiento en ambulatorio especializado en el municipio de Sao Paulo (Sureste de Bras (mais) il), en 2002-2003. La dosis de anticuerpos IgG contra los polisacáridos de la cápsula neumocócica fue realizada por medio de ensayo inmuno enzimático (ELISA). Los anticuerpos fueron dosificados inmediatamente antes y un mes después de la aplicación de la segunda dosis de la vacuna. Se utilizaron dos criterios para evaluar la respuesta a la vacuna: títulos de anticuerpos ? 1,3 ?g/mL en la serología post-inmunización y aumento ?4 veces en los títulos de la serología post-inmunización con relación a la pre-inmunización. RESULTADOS: Para el primer criterio (?1,3 ?g/mL), 26 (65%) niños obtuvieron respuesta serológica con la vacuna, 12 (30%) de ellas presentaron títulos de IgG post-inmunización en niveles de por lo menos 1,3 ?g/mL para todos los serotipos. Para el segundo criterio (incremento >4 veces en los títulos para cuatro serotipos o mas), se obtuvo respuesta serológica en 15 (37,5%) niños. CONCLUSIONES: La respuesta frente a la vacuna fue considerada satisfactoria, con aumento estadísticamente significativo de los títulos geométricos promedios post-vacunales con relación a los pre-vacunales para todos los serotipos estudiados. Resumo em inglês OBJECTIVE: Invasive pneumococcal disease is a major cause of death in HIV-infected children. The objective of the study was to assess the quantitative antibody response to the seven pneumococcal serotypes of heptavalent pneumococcal conjugate vaccine in a group of HIV-infected children. METHODS: Study comprising 40 HIV-infected children aged between 2 and 9 years followed up in a specialized outpatient clinic in São Paulo, Brazil, between 2002 and 2003. Enzyme immunoassa (mais) y (ELISA) was used to measure IgG antibody titers against pneumococcus capsule. Antibodies were measured immediately before and 1 month after the second dose of the vaccine. Two response criteria were used: IgG titers >1.3 µg/mL in the post-immunization serology and an increase of at least 4-fold in post- compared to pre-immunization serology. RESULTS: For the first criterion (>1.3 µg/mL), 26 (65%) children had serological response to the vaccine, 12 (30%) showed post-immunization IgG titers of at least 1.3 µg/mL for all seven serotypes studied. For the second criterion studied (>4-fold increase in post- compared to pre-immunization titers for four serotypes or more), serological response was seen in 15 (37.5%) children. CONCLUSIONS: Overall response to the heptavalent pneumococcal conjugate vaccine was adequate, showing a statistically significant increase in the post-immunization geometric mean titers for the seven serotypes studied.

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Avaliação da IgG Anti-Péptido Citrulinado Cíclico (CCP) em doentes com artrite reumatóide, outras doenças difusas do tecido conjuntivo e controlos saudáveis/ IgG Antibodies to Cyclic Citrullinated Peptide (CCP) in patients with rheumatoid arthritis, other rheumatic disorders and healthy controls

Pereira, Ana Maria; Bodas, Abília; Barbosa, Joselina; Bernardes, Miguel; Delgado, Luís
2006-02-01

Resumo em português Introdução: A Artrite Reumatóide (AR) é uma doença autoimune sistémica, representando uma das mais graves e potencialmente incapacitantes formas de artrite. Avaliámos neste trabalho a pesquisa e quantificação dos anticorpos IgG para o Péptido Citrulinado Cíclico (IgG anti-CCP), um novo marcador para o diagnóstico da AR, usando um método imunoenzimático. Métodos: A quantificação da IgG anti-CCP foi realizada usando um método imunoenzimático, a da proteí (mais) na C reactiva (PCR) e factor reumatóide (FR) por imunonefelometria e os anticorpos anti-queratina (AKA) por imunofluorescência indirecta. Estudámos a sensibilidade, a especificidade e o valor predictivo do teste no diagnóstico da AR, comparando--o com o FR e anticorpos AKA. Incluímos 33 doentes com AR, 24 com outras doenças reumáticas (doenças difusas do tecido conjuntivo - DDTC: Lúpus Eritematoso Sistémico n=10, Síndrome de Sjögren n=3, Esclerose Sistémica n=6 e Artrite Indiferenciada n=5) e 30 Controlos. Resultados: Na AR a concentração de IgG anti-CCP foi significativamente superior à das outras doenças reumáticas (mediana 188,7U versus 0,30U p Resumo em inglês Background: Rheumatoid arthritis (RA) is a systemic auto-immune disorder and one of the most severe and disabling chronic rheumatic diseases. The objective of this study was to evaluate serum anti-cyclic citrullinated antibodies (anti--CCP) as a new diagnostic tool in RA. Methods: IgG anti-CCP was measured by a second generation enzyme immunoassay, C-reactive protein (CRP) and IgM Rheumatoid Factor (RF) by nephelometry and anti-keratin antibodies (AKA) by indirect immunof (mais) lorescence. We evaluated the clinical performance of these tests in terms of sensitivity, specificity, and positive predicted ratio. We studied 57 patients, subsequently classified according to their clinical records in RA (n=33) or other rheumatic disorders (diffuse connective tissue disorders - DCTD: Systemic Lupus Erythematosus n=10, Sjogren Syndrome n=3, Systemic Sclerosis n=6 and Arthropathies n=5) and 30 healthy persons as controls. Results: In RA, IgG anti-CCP levels were significantly higher than in the other rheumatic disorders (median 188.7U versus 0.30U p

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Alguns aspectos de imunoensaios aplicados à química analítica/ Some aspects of immunoassays applied to analytical chemistry

Gil, Eric de Souza; Kubota, Lauro Tatsuo; Yamamoto, Yoshimi Imoto
1999-12-01

Resumo em inglês In the last years, the use of antibody-antigen interactions, has earned attention not only for clinical analysis, but also for food industry and environmental control. Since the scope and diversity of immunoassay technology have shown a wide development. Continuous advances in order to analyse complex matrices, to improve reliability, simplicity (nonseparation) and to get multiple simultaneous assays, and extreme sensitivity (lower than zeptomole detection limits) are inc (mais) reasing. Many strategies have been investigated including chemiluminescent enzyme immunoassays, DNA as label and development of flow injection and immunosensors techniques. This subject became very usefull and important in nowadays that are taught in the undergraduate courses of chemistry in the european universities. However in our country are still ignored in the chemistry course.

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Alfafetoproteína: valores normais no líquido amniótico entre 14 e 21 semanas/ Alphafetoprotein: amniotic fluid normal values between 14 and 21 weeks

Maestri, D.; Sanseverino, M.T.V.; Cheinquer, N.; Correa, M.C.M.; Kessler, R.G.; Magalhães, J.A. de Azevedo
1998-12-01

Resumo em português OBJETIVO: Definir uma curva de normalidade dos valores de alfafetoproteína (AFP) no líquido amniótico em gestantes entre 14 e 21 semanas de gravidez no Hospital de Clínicas de Porto Alegre. MATERIAIS E MÉTODOS: Nas 137 mulheres que procuraram o diagnóstico pré-natal e tiveram indicação de coleta de líquido amniótico. A alfafetoproteína foi dosada em todas as amostras por enzima imunoensaio. Foram selecionadas 109 gestações normais (sem malformações, carió (mais) tipo normal, não-gemelares) e cujas amostras de líquido amniótico não eram sanguinolentas. Essas foram divididas quanto à idade gestacional e tiveram calculadas as medianas dos valores de AFP e seus múltiplos. RESULTADOS: As medianas da alfafetoproteína (KUI/ml) para cada idade gestacional foram as seguintes: 14 semanas:16,32; 15 semanas:14,36; 16 semanas: 13,43; 17 semanas:10,93; 18 semanas: 8,22; 19 semanas: 7,35; 20 semanas: 5,62; 21 semanas:4,47. CONCLUSÃO: O estabelecimento de uma curva normal de AFP em nosso serviço permite a utilização deste exame para pacientes em risco de defeitos de fechamento de tubo neural. Permite também que sejam analisadas amostras enviadas para estudos citogenéticos ou metabólicos de maneira a identificar fetos com níveis elevados de AFP que necessitarão de estudos ultrasonográficos mais detalhados pela possibilidade de defeitos morfológicos. Resumo em inglês BACKGROUND: To define the normal values of amniotic fluid alphafetoprotein in pregnant women, whose gestational ages range from 14 to 21 weeks, in the Hospital de Clínicas de Porto Alegre. MATERIAL AND METHOD: One hundred thirty seven women with indication for amniocentesis were studied. The alphafetoprotein was measured in all samples using enzyme immunoassay. One hundred and nine normal pregnancies were selected. All of these fetuses had normal cariotype and had no mal (mais) formation. They were not twins and their amniotic fluid samples were not bloody. These samples were divided by their gestational ages. Then the medians of the alphafetoprotein values and their multiples were calculated. RESULTS: The medians of alphafetoprotein (KUI/ml) for each gestational age were as follows: 14 weeks: 16.32; 15 weeks: 14.36; 16 weeks: 13.43; 17 weeks: 10.93; 18 weeks: 8.22; 19 weeks: 7.35; 20 weeks: 5.62; 21 weeks: 4.47. CONCLUSION: The establishment of alphafetoprotein normal values in our service allows us to use this assay for patients at risk of neural tube defects. It also makes possible to analise samples sent for cytogenetic or metabolic studies, in order to identify elevated levels of alphafetoprotein, so that these fetuses could have a more detailed sonography study to look for malformations.

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