Sample records for endotoxins
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1

Estimativa da incerteza em ensaio de detecção de endotoxina bacteriana pelo método de gelificação/ Estimation of uncertainty in the detection of bacterial endotoxin by gel-clot method

Lourenço, Felipe Rebello; Kaneko, Telma Mary; Pinto, Terezinha de Jesus Andreoli
2005-12-01

Resumo em português Desde a publicação da ISO 17025:1999, o interesse em métodos para estimativa da incerteza em ensaios qualitativos, do tipo "passa/não passa", têm ganho grande importância. Uma forma de estimar e informar a incerteza deste tipo de ensaio é o uso das probabilidades de respostas-falsas, particularmente falsos-positivos e falsos-negativos, determinados a partir do teorema de Bayes. O objetivo deste artigo é estabelecer um método para a estimativa de incerteza em ensa (mais) ios de detecção de endotoxina bacteriana pelo método in vitro Limulus Amebocyte Lysate (LAL). Considerando a confirmação da sensibilidade do LAL e a validação do teste, a probabilidade de uma resposta falsa corresponde à soma da probabilidade dos resultados falso-negativos e falso-positivos. A partir dos resultados obtidos foi verificado que a etapa da confirmação da sensibilidade do LAL contribui para a incerteza de forma mais significativa (67,6%) que a etapa de validação do teste (32,4%). Através de um procedimento simples, descrito neste artigo, e de dados obtidos a partir da confirmação da sensibilidade do LAL e validação do teste para um produto em questão é possível obter uma estimativa de incerteza razoável para o ensaio de detecção de endotoxinas bacterianas pelo método de gelificação. Resumo em inglês Since the publication of ISO 17025:1999, the interest in methods for estimation of the uncertainty in qualitative analysis, such as 'pass/fail', have became more important. The usual form of estimating and informing the uncertainty in this kind of analysis is the use of false-response rates, particularly false-positive and false-negative, determinated from Bayes theorem. The aim of this paper is establish a method for estimation of the uncertainty in the detection of bact (mais) erial endotoxins by in vitro Limulus Amebocyte Lysate (LAL) test. Considering the confirmation of LAL sensitivity and the validation of the test, the probability of a false-response corresponds to the sum of false-negative and false-positive result probabilities. From results obtained was verified that the confirmation of LAL sensitivity contributed to the uncertainty in a more significant way (67,6%) than the validation of the test (32,4%). Through this simple procedure and data obtained from the confirmation of LAL sensibility and the validation of the test is possible to obtain a reasonable estimation of the uncertainty of the detection of bacterial endotoxins by gel-clot test.

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2

Avaliação da atividade e caracterização de eritropoietina humana recombinante em produtos farmacêuticos/ Activity evaluation and characterization of recombinant human erythropoietin in pharmaceutical products

Schmidt, Cleber A.; Ramos, Andréa S.; Silva, José E.P. da; Fronza, Marcio; Dalmora, Sérgio L.
2003-04-01

Resumo em português Realizou-se a identificação de eritropoietina humana recombinante em produtos farmacêuticos comerciais por eletroforese em gel de poliacrilamida e detecção com anticorpos específicos, demonstrando-se típica banda larga, semelhante ao padrão de rhEPO da Farmacopéia Européia. Igualmente por focalização isoelétrica e imunodetecção, observaram-se 5-6 isoformas características de acordo com o laboratório produtor. A avaliação de potência efetuada através d (mais) e ensaio biológico em camundongos normocitêmicos forneceu valores entre 67,6% e 119,4% em relação à declarada. A precisão dos ensaios combinados, calculada pela ponderação, variou de 200 a 389. Os testes de endotoxinas bacterianas, toxicidade e pH apresentaram valores variáveis conforme o lote. Concluiu-se destacando a importância dos testes e ensaios de controle para assegurar a qualidade lote a lote e garantir a eficácia terapêutica dos produtos farmacêuticos. Resumo em inglês The identification of rhEPO in pharmaceutical products was carried out by polyacrylamide gel electrophoresis and detection with specific antibodies that revealed a typical single broad band similar to that obtained with the European Pharmacopoeia Biological Reference Preparation for erythropoietin. The isoelectric focusing with immunodetection revealed extensive heterogeneity with 5-6 isoforms, characteristic according to the manufacturer. The potency was assessed by the (mais) normocythaemic mouse assay with values within 67.6% and 119.4% calculated against the stated potency. The precision evaluated by the weight was within 200 and 389, for the combined assays. The toxicity, bacterial endotoxins, and pH gave variable results according to the batch. In conclusion, we emphasize the importance of the batch-to-batch tests and assays that would guarantee the quality and therapeutic efficacy of the pharmaceutical products.

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Infecção na modulaçâo da asma/ The role of infection in asthma

Mendes, J Pinto
2008-10-01

Resumo em português Faz -se uma revisão da influência das infecções no aparecimento e na clínica da asma brônquica. Dá -se o relevo que merece à intervenção virusal, sobretudo ao rinovírus, pela sua influência nas exacerbações, e ao vírus sincicial respiratório, sobre o qual recai a suspeita de poder ser causa determinante no aparecimento da síndroma asmática. Tentam-se esclarecer os mecanismos da resposta imune à agressão virusal em função das debilidades da resposta d (mais) o asmático e do atópico, sobretudo no período perinatal, salientando -se, ainda, um efeito de potenciação da agressão virusal sobre a resposta atópica. Aborda -se a hipótese higiénica e a sua falta de consistência científica, pelo menos no papel que pretende atribuir a um não demonstrado antagonismo das respostas linfocitárias Th1 e Th2, apontando -se a importância actual da investigação, não das bactérias mas dos produtos bacterianos, como as endotoxinas, na modulação da asma e da atopia, dando -se relevo aos estudos que, a partir deste modelo, demonstram uma influência do ambiente na secreção génica e, consequentemente, no fenótipo. Invocam -se, nas entrelinhas, vários mecanismos que podem explicar a asma neutrofílica que, para muitos, é um paradoxo perante o consagrado domínio do eosinófilo na inflamação asmática. Resumo em inglês This paper reviews the impact of infections on the onset and clinical course of bronchial asthma. A just emphasis is given to the role viral infections, particularly rhinovirus infections, play in exacerbations, and that played by respiratory syncytial virus, suspected of triggering the asthmatic syndrome. The mechanisms of the immune response to virus attacks are explained, highlighting the asthmatic and allergic patient’s weakened response, particularly in the perinata (mais) l period. Further stressed is a potentiating effect of viral aggression on the allergic response. The hygiene hypothesis and its lack of scientific consistency is detailed, at least as far as the role it seeks to confer on an unproven antagonism of the Th1 and Th2 lymphocyte responses. The current importance of research not into bacteria, but into bacterial products, including endotoxins, on the modulation of asthma and allergy is noted. Studies which, along these lines, show anenvironmental impact on genetic secretion in the phenotype are underlined. Also discussed in passing are several mechanisms which go towards explaining neutrophilic asthma - for many a contradiction, given eosinophilia’s stranglehold on asthmatic inflammation.

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4

Peróxido de hidrogênio como agente despirogenizante de componentes para produtos médico-hospitalares/ Hydrogen peroxide as depyrogenation agent for medical devices components

Pinto, Terezinha de Jesus A.
1995-02-01

Resumo em português A atual busca de solventes alternativos aos fluorados, frente ao problema de depleção de ozônio da estratosfera, obriga a desenvolvimentos de processos aplicáveis à fabricação de produtos médico-hospitalares. Frente ao desafio, e considerando a água estar sendo opção de escolha de outros segmentos industriais, preocupa a rápida proliferação microbiana na mesma, tornando-a fonte potencial de endotoxinas. Tal risco incompatibiliza-se por exemplo, com a produç (mais) ão de itens destinados ao emprego em procedimentos cirúrgicos da área cardiovascular. Desta forma foi ralizada pesquisa com o objetivo de investigar possibilidade de emprego da água como agente de limpeza de componentes para tais produtos, desde que incorporada de peróxido de hidrogênio. Trabalhou-se inoculando água e soluções de peróxido com níveis de 0,1, 0,25, 0,5 e 1,0 UE/ml; obteve-se a confirmação de efetividade de ação a concentração de 5% de peróxido de hidrogênio, através de determinação analítica pelo método "in vitro". Investigou-se, em peças injetadas em policarbonato, destinadas a fabricação de oxigenadores e reservatórios sangüíneos, inoculadas com endotoxina, a efetividade no uso do peróxido. Os resultados permitem concluir pela possibilidade de sucesso do processo proposto, seja pelo aspecto biológico ou pela remoção de sujidades. Resumo em inglês The current search for alternative solvents to fluorina ted products, in face of the depletion of ozone in the stratosphere calls for the development of alternative processes applicable to the manufacture of medical devices. In view of the challenge and as water is serving particularly as the choice for other industrial segments, the fast macrobial proliferation in it is of concern, as it is a potencial source of endotoxins. Such a risk is inconsistent with the production (mais) of items designed for example, for use in surgical procedures in the cardio-vascular field. Thus research was undertaken for the purpose of investigating the possibility of using water as a cleansing agent for components for such products, providing that hydrogen peroxide is added. The work was carried out by inoculating water and peroxide at levels of 0. 1, 0.25, 0.5 e 1.0 UE/ml. The confimation was obtained as to the active effectiveness at a 5% concentration of hydrogen peroxide by means of analytical determination using the "in vitro" method. The effectiveness of the use of peroxide was investigated on polycarbonate injected parts designed for the manufacture of oxigenators and blood reservoirs and containated with endotoxins. The findings permit one to draw a favorable conclusion regarding the adequacy of the proposed process both biologically as well as regards the removal of impurities.

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Peróxido de hidrogênio como agente despirogenizante de componentes para produtos médico-hospitalares/ Hydrogen peroxide as depyrogenation agent for medical devices components

Pinto, Terezinha de Jesus A.
1995-02-01

Resumo em português A atual busca de solventes alternativos aos fluorados, frente ao problema de depleção de ozônio da estratosfera, obriga a desenvolvimentos de processos aplicáveis à fabricação de produtos médico-hospitalares. Frente ao desafio, e considerando a água estar sendo opção de escolha de outros segmentos industriais, preocupa a rápida proliferação microbiana na mesma, tornando-a fonte potencial de endotoxinas. Tal risco incompatibiliza-se por exemplo, com a produç (mais) ão de itens destinados ao emprego em procedimentos cirúrgicos da área cardiovascular. Desta forma foi ralizada pesquisa com o objetivo de investigar possibilidade de emprego da água como agente de limpeza de componentes para tais produtos, desde que incorporada de peróxido de hidrogênio. Trabalhou-se inoculando água e soluções de peróxido com níveis de 0,1, 0,25, 0,5 e 1,0 UE/ml; obteve-se a confirmação de efetividade de ação a concentração de 5% de peróxido de hidrogênio, através de determinação analítica pelo método "in vitro". Investigou-se, em peças injetadas em policarbonato, destinadas a fabricação de oxigenadores e reservatórios sangüíneos, inoculadas com endotoxina, a efetividade no uso do peróxido. Os resultados permitem concluir pela possibilidade de sucesso do processo proposto, seja pelo aspecto biológico ou pela remoção de sujidades. Resumo em inglês The current search for alternative solvents to fluorina ted products, in face of the depletion of ozone in the stratosphere calls for the development of alternative processes applicable to the manufacture of medical devices. In view of the challenge and as water is serving particularly as the choice for other industrial segments, the fast macrobial proliferation in it is of concern, as it is a potencial source of endotoxins. Such a risk is inconsistent with the production (mais) of items designed for example, for use in surgical procedures in the cardio-vascular field. Thus research was undertaken for the purpose of investigating the possibility of using water as a cleansing agent for components for such products, providing that hydrogen peroxide is added. The work was carried out by inoculating water and peroxide at levels of 0. 1, 0.25, 0.5 e 1.0 UE/ml. The confimation was obtained as to the active effectiveness at a 5% concentration of hydrogen peroxide by means of analytical determination using the "in vitro" method. The effectiveness of the use of peroxide was investigated on polycarbonate injected parts designed for the manufacture of oxigenators and blood reservoirs and containated with endotoxins. The findings permit one to draw a favorable conclusion regarding the adequacy of the proposed process both biologically as well as regards the removal of impurities.

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O óxido nitrico como neurotransmissor no sistema nervoso entérico: fisiopatologia e implicações no íleo adinâmico/ Nitric oxide as neurotransmitter of nervous system: implications and pathophysiology of adinamic ileus

Flora Filho, Rowilson; Zilberstein, Bruno
1998-10-01

Resumo em português Nesta revisão do sistema nervoso entérico, enfatiza-se o mecanismo da inibição não-adrenérgica e não-colinérgica na contratilidade do sistema digestório. Introduz-se a síntese e metabolismo do óxido nítrico com apresentação das sintases do óxido nítrico. Atualiza-se mostrando o óxido nítrico como neurotransmissor do mecanismo inibitório não-adrenérgico e não-colinérgico, demonstrando sua atividade na musculatura lisa gastrointestinal e possível mec (mais) anismo intracelular através da cGMP. Após atualização do mecanismo do peristaltismo e do complexo motor migratório, faz-se uma descrição do íleo adinâmico. Por fim, todo raciocínio apresentado condensa-se na fisiopatologia do íleo adinâmico. Resumo em inglês The non-adrenergic and non-cholinergic (NANC) inhibition has an important role in the intrinsic control of enteric nervous system (ENS). The ENS is poor in the upper digestive tract (esophagus and stomach) and totally present in the intestine. Starling and Bayliss experiments demonstrated the intrinsic activity of ENS in 1899. Since then there are searching for neurotransmitters of NANC like VIP (Vasoactive Intestinal Polypeptide) and ATP (Adenosine Triphosphate). Recent (mais) works demonstrate nitric oxide as a neurotransmitter of NANC. The nitric oxide (NO) is a gaseous molecule produced from L- arginine, with less than ten seconds half-life. The enzymes involved in the synthesis of NO are the NO synthases (NOS): neuronal NOS or isoform I, inducible NOS or isoform II, and endothelial NOS or isoform III. The isoform I and III are constitutive, and the isoform 11 is inducible. The mechanisms involved in the induction of isoform III are TNFα (Tumor Necrosis Factora), IL-Iβ (Interleukin I-β), and bacteria lypopolyssacarides stimulus. The intestinal smooth muscle motility is mediated by NANC and one example of this is the migratory motor complex (MMC). The MMC can be modified by infusion of NO-like drugs and this modification is reversed by infusion of L-NAME (L-arginine analog) in experimental trials with animals. The NO causes relaxation and inhibition of peristalsis in the small intestine. The adynamic ileum is a very common situation for surgeons. In the adynamic ileum is observed the dysfunction of MMC. The adynamic ileum induced by infusion of endotoxins is reverted by use of NOS inhibitors.

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Inibidores seletivos de prostaglandina endoperóxido sintase-2 (PGHS-2): nova estratégia para o tratamento da inflamação/ Selective inhibitors of prostaglandin endoperoxide synthase-2 (PGHS-2): new target to the treatment for inflammatory diseases

Lages, Adriana dos Santos; Romeiro, Nelilma Correia; Fraga, Carlos Alberto Manssour; Barreiro, Eliezer Jesus
1998-11-01

Resumo em inglês Prostaglandins (PG's), produced from arachidonic acid metabolism, are potent mediators of inflammation. Nonsteroidal anti-inflammatory (NSAIDs) exert their effects by inhibition of prostaglandin endoperoxide synthase (PGHS) enzyme, which catalyses the first committed step in arachidonic acid metabolism. Two isoforms of PGHS are known: PGHS-1, constitutively expressed in most tissues, and is responsible for physiological production of PG's. The second isoform, PGHS-2, is i (mais) nduced by cytokines, mitogens and endotoxins in inflammatory cells, and appears to be responsible for the elevated production of PG's during inflammation. With the recent discovery of the inducible PGHS (PGHS-2), the medicinal chemist now possesses a novel target for designing therapeutic agents that could provide suitable anti-inflammatory activity without the ulcerogenic and renal side effects associated with currently available NSAIDs, all of which inhibit both PGHS-1 and PGHS-2.

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