Sample records for embryos
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1

Embriões, células-tronco e terapias celulares: questões filosóficas e antropológicas

Fagot-Largeault, Anne
2004-08-01

Resumo em inglês AS THE possibility of therapeutic cloning in humans has just been demonstrated by a Corean group of researchers, the paper argues that biotechnologies of that kind may contribute to alleviate the chronic shortage of organs and tissues for transplantation. Ever since immunosuppressant drugs have become available, transplantation surgery has made considerable progress, and the procurement of transplants, especially from living donors, has been problematic. The investigation (mais) of the properties of (adult or embryonic) stem cells opened great hopes. Conditions such as diabetes, multiple sclerosis, myocardial infarct, or neurodegenerative diseases (Parkinson's, Alzheimer's, Huntington's diseases), could be treated by cellular therapy, namely, transplantation of human cells issued from cell lines derived from human stem cells possibly stored in cell banks. Adult stem cells, however, are rare and difficult to identify (apart from bone marrow, which contains the precursors of blood cells, a resource already widely used). There exists a large supply of human embryonic stem cells in countries where the freezing of embryos for the purposes of medically assisted procreation leaves 'spare' or 'surplus' embryos which may be either destroyed or donated for research after couples have fulfilled their procreative aim. It is often considered that harvesting stem cells from those embryos, for use in research or therapeutics, is morally more acceptable than destroying them. But the constitution of stem cell banks is open to two objections. First, in order to offer HLA compatible grafts to a large population, the bank should offer a selection of cell supplies representative of all HLA types in the population, a virtually impossible task. Second, with HLA compatible grafts there remains a risk of immunorejection, and a necessity for the patients treated to take immunosuppressant drugs for the rest of their lives. Should biological research establish their feasibility and safety, cloning techniques might then appear to be the best choice. Treating (for example) diabetic patients with cells constructed by transferring the nucleus of a somatic cell of the patient into an enucleated oocyte would have the double advantage that the graft would be immunocompatible with the receiver, and that cell banks would not be required; instrumentalizing women for the collection of oocytes has been found objectionable, but a Chinese group of researchers suggested the possibility of using animal oocytes. It remains that such practices have raised lots of ethical controversies. It is at this moment difficult to assess their impact on our vision of 'humanity'.

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2

Embriões de pacu submetidos a diferentes protocolos de resfriamento/ Pacu embryos submitted to different cooling protocols

Streit Júnior, Danilo Pedro; Digmayer, Melanie; Ribeiro, Ricardo Pereira; Sirol, Rodolfo Nardez; Moraes, Gentil Vanini de; Galo, Juliana Minardi
2007-08-01

Resumo em português O objetivo deste trabalho foi avaliar a taxa de eclosão de larvas de pacu (Piaractus mesopotamicus), após o resfriamento dos embriões a -8ºC durante seis horas, utilizando soluções crioprotetoras, para obter um protocolo de resfriamento para a espécie. Utilizaram-se 2.400 embriões em estádio de pós-gástrula, em sete tratamentos de soluções crioprotetoras, mais um controle, com três repetições, em delineamento inteiramente casualizado. Os crioprotetores eti (mais) lenoglicol e geléia real foram inapropriados. A substituição de 50% da sacarose não produziu resultados positivos. A combinação metanol (9%) e sacarose (17,5%) possibilitou eclosão de 69,2%, sendo recomendada para o resfriamento a -8ºC de embriões de pacu por seis horas. Resumo em inglês The objective of this work was to evaluate the percentage of hatching after cooling of pacu (Piaractus mesopotamicus) embryos at -8ºC for six hours, treated with cryoprotectant solutions, to obtain a cooling protocol for the specie. There were 2.400 embryos in post-gastrula stage development, in seven cryoprotectants solutions and control with three replicates, in completely randomized design. Ethylene glycol and honey-jelly were inappropriate. The substitution of 50% su (mais) crose did not produce positive results. The combination of methanol (9%) and sucrose (17.5%) performed 69.2% of hatching and is recommended for cooling of pacu embryos at -8 ºC for six hours.

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RESGATE DE EMBRIÕES IMATUROS IN VITRO DE PORTA-ENXERTOS DE MACIEIRA (Malus spp.)/ RESCUE OF IMMATURE EMBRYOS IN VITRO OF ROOTSTOCK OF APPLE (Malus spp.)

DANTAS, ADRIANA CIBELE DE MESQUITA; NUNES, JÚLIO CÉSAR DE OLIVEIRA; MORAES, LIZIANE KADINE ANTUNES DE; PEDROTTI, ENIO LUIZ; NODARI, RUBENS ONOFRE
2001-08-01

Resumo em português A cultura in vitro de embriões permite desenvolver estudos nas áreas de fisiologia e melhoramento, possibilitando o resgate de embriões imaturos, oriundos de cruzamentos que podem ser incompatíveis. Em macieira, geralmente, os embriões imaturos apresentam dormência e baixa germinação. O objetivo deste trabalho foi testar concentrações de BAP (6-benzilaminopurina) em diferentes períodos de imersão para superação da dormência e germinação de embriões imatu (mais) ros de macieira. Os embriões foram extraídos de sementes retiradas de frutos oriundos do cruzamento entre os porta-enxertos de macieira Marubakaido (Malus prunifolia) x M9 (Malus pumilla), realizado em plantas matrizes cultivadas na Epagri -- São Joaquim (SC). Os 50 frutos colhidos ao acaso foram submetidos a uma esterilização com etanol 96º por 10 min e após com solução de hipoclorito de sódio a 2% por 20 min. As sementes foram submetidas a uma desinfestação, utilizando-se etanol 70% por 30 s e solução de hipoclorito de sódio 1,25% por 15 min, seguindo-se três lavagens com água esterilizada e autoclavada. Os embriões foram inoculados em 10 ml de meio MS/2, suplementado com 100 mg.L-1 de mio-inositol, 30 g.L-1 de sacarose e com BAP (0, 6 e 12 mg.L-1) e 6 g.L-1 de agar, com pH ajustado para 5,8. Os embriões foram mantidos por 24 ou 48 horas neste meio e depois transferidos para um meio MS/2 sem regulador vegetal. Não ocorreu contaminação nem oxidação em nenhum embrião. A concentração de BAP que promoveu maior crescimento dos embriões foi de 6 mg.L-1, mas o melhor aspecto quanto à intensidade de coloração e formação de brotos foi obtido utilizando-se 12 mg.L-1. Resumo em inglês The embryos culture in vitro allows studies in the physiology breeding areas, facilitating the rescue of immature embryos, originated from incompatible crossings. In apple, the immature embryos generally present dormancy and lower germination. The objective of this work was to test concentrations of BAP in different immersion periods for break of the dormancy and germination of apple immature embryos. The embryos were extracted from fruits seeds originated from the crossi (mais) ng between apple rootstock Marubakaido and M.9, accomplished in adult plants in Epagri - São Joaquim (SC). The 50 collected fruits were submitted to a sterilization with alcohol 96º for 10 minutes and after with NaClO solution (2%) for 20 minutes. The removed seeds were submitted to a disinfestations treatment with alcohol 70% for 30 seconds and with NaClO solution (1,25%) for 15 minutes, followed by three washes with sterilized water and autoclaved. The embryos were inoculated in 10 ml of MS/2 culture medium, to which was added 100 mg.L-1 of myo-inositol, 30 g.L-1 of sucrose and with BAP (0, 6 and 12 mg.L-1) and 6 g.L-1 of agar and with pH adjusted to 5.8. The embryos were maintained by 24 or 48 hours in this medium and later transferred for a medium MS/2 without growth regulators. There was no contamination or oxidation. The concentration that promoted larger growth of the embryos was of 6 mg.L-1. However, the best general aspect in the coloration intensity and formation of sprouts was obtained when medium containing 12 mg.L-1 was utilized.

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Cultivo de embriões imaturos de citros em diferentes concentrações de carvão ativado e ácido giberélico/ Activated charcoal and giberellic acid concentrations on immature embryos culture

Chagas, Edvan Alves; Pasqual, Moacir; Ramos, José Darlan; Pio, Leila Aparecida Salles; Dutra, Leonardo Ferreira; Cazetta, Jairo Osvaldo
2005-12-01

Resumo em português Adição de carvão ativado e giberelina no meio de cultura podem proporcionar melhores condições no desenvolvimento de embriões imaturos de citros. Objetivou-se avaliar o efeito de carvão ativado e GA3 (ácido giberélico) no cultivo de embriões imaturos provenientes do cruzamento entre laranjeira 'Pêra Rio' x tangerineira 'Poncã'. Após 118 dias da polinização, frutos imaturos, com 3 a 4 cm de diâmetro, foram coletados, suas sementes removidas e tratadas com � (mais) �lcool (70%) por cinco minutos, hipoclorito de sódio (2%) por 20 minutos e, posteriormente, lavadas três vezes em água destilada e autoclavada. Em condições assépticas, os tegumentos das sementes foram separados, os embriões globulares excisados e inoculados em tubos de ensaio contendo 15 mL do meio MT, acrescido de carvão ativado (0; 0,5; 1; 1,5 e 2 g L-1) e GA3 (0; 0,01; 0,1; 1 e 10 mg L-1). Após a inoculação, os embriões permaneceram por 90 dias em sala de crescimento a 27+1ºC, fotoperíodo de 16 horas e irradiância de 32 mmol m-2 s-1. Maior comprimento da parte aérea foi obtido em meio MT, acrescido de 0,1 e 1 mg L-1 de GA3, combinado com 2 g L-1 de carvão ativado. Maior comprimento do sistema radicular, massa da matéria fresca e número de folhas de plântulas foram obtidos em meio MT, acrescido de 0,01 mg L-1 de GA3, na ausência de carvão ativado. A adição de carvão ativado influenciou na concentração de ácido giberélico acrescido no meio de cultura. Resumo em inglês Activated charcoal and gibberelin provides better conditions on development of citrus immature embryos. Activated charcoal and GA3 (gibberelic acid) on 'Pêra Rio' sweet orange x 'Poncã' mandarin immature embryos culture was evaluated. After 118 days-pollination, imature fruits with 3 to 4 cm of diameter were collected, seeds removed and treated with alcohol (70%) for five min., sodium hypoclorite (2%) for 20 min. and three times washed with distilled and autoclaved wate (mais) r. In aseptic conditions, the teguments were separated, the globular embryos excised and inoculated in test tubes containing 15 mL of the MT medium culture, added of activated charcoal (0; 0.5; 1; 1.5 and 2 g L-1) and GA3 (0; 0.01; 0.1; 1 and 10 mg L-1). After inoculation, the embryos were maintained for 90 days in growth room at 27+1ºC, 16 hours photoperiod and 32 mmol m-2 s-1 irradiance. Higher length of the aerial part was obtained in MT medium added 0.01 and 1 mg L-1 of GA3 combined with 2 g L-1 of activated charcoal. Higher length of the roots system, fresh mass and number of leaves of seedlings was obtained in MT medium added 0.01 mg L-1 of GA3 and activated charcoal absence. Addition of activated charcoal influenced in giberellic acid concentration added in MT medium.

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Sexagem de embriões bovinos fecundados in vitro pela técnica de PCR multiplex/ Sexing of in vitro fertilized bovine embryos by multiplex PCR

LUZ, Marcelo Rezende; WATANABE, Yeda Fumie; FERRO, Jesus Aparecido; FERRO, Maria Inês T.; MAURO, Sônia Marli Singaretti de; HOSSEPIAN DE LIMA, Vera Fernanda Martins; FRANCESCHINI, Paulo Henrique
2000-12-01

Resumo em português Neste trabalho, a técnica de PCR ("polymerase chain reaction") foi utilizada para a sexagem de 92 embriões bovinos fertilizados in vitro. Os embriões originaram-se de fertilização in vitro de oócitos aspirados de ovários de fêmeas bovinas, provenientes de abatedouros comerciais. Os oócitos foram maturados, fertilizados e cultivados até o estádio de blastocisto. Os embriões foram lavados em solução de PBS, transferidos para tubos de polipropileno contendo ág (mais) ua ultrapura, e imediatamente congelados a -196ºC. Os embriões foram descongelados sobre isopor contendo gelo picado e tratados com proteinase K. Para a reação de PCR, utilizaram-se alíquotas de 34 µl de cada tudo, onde foram acrescidos dois pares de primers, seqüência BC1.2 e seqüência satélite 1.715, desoxinucleotídeos, MgCl2, tampão PCR 10X, TaqDNA polimerase e água, em um volume final de 50 µl. As amostras foram amplificadas e a eletroforese realizada em gel de poliacrilamida a 8%. Os géis foram corados com solução de brometo de etídio e analisados em transiluminador de luz ultravioleta. Um índice de 93,47% de amplificação foi atingido, com 41 embriões (47,67%) machos e 45 (52,32%) embriões fêmeas. O uso de gel de poliacrilamida a 8% foi eficaz na separação de fragmentos de DNA muito próximos. Resumo em inglês In the present study the polymerase chain reaction (PCR) was used for sexing ninety-two in vitro fertilized bovine embryos. The embryos were obtained after in vitro fertilization of oocytes from slaughterhouses. The oocytes were matured, fertilized, and cultured until the blastocyst stage. The embryos were washed in PBS solution, and transferred to polypropylene tubes with containing ultrapure water and immediately frozen at -196ºC. The embryos were thawed on ice and tre (mais) ated with proteinase K. For the PCR reaction, aliquots of 34 µl from each tube were mixed to the primers BC1.2 and microsatellite sequence 1715, dNTPs, MgCl2, 10X PCR buffer, Taq DNA polymerase and water in a final volume of 50 µl. The samples were amplified and the PCR products separated by electrophoresis in a 8% polyacrylamide gel. The gels were stained in ethidium bromide solution and vizualized under UV-light. The amplification rate was 93.47%, with 41 (47.67%) male embryos and 45 (52.32%) female embryos. The use of 8% polyacrylamide gel was efficient for separating DNA fragments of very similar size.

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Morfologia de embriões nucelares de laranja 'Valência' (Citrus sinensis (L.) Osbeck)/ Morphology of 'Valencia' sweet orange (Citrus sinensis (L.) Osbeck) nucellar embryos

Mendes-da-Glória, Fernanda Januzzi; Mourão Filho, Francisco de Assis Alves; Appezzato-da-Glória, Beatriz
2001-04-01

Resumo em português Esse trabalho teve como objetivo avaliar a morfologia de embriões nucelares de laranja 'Valência' (Citrus sinensis (L.) Osbeck) a fim de fornecer informações para estudos de embriogênese somática induzida in vitro visando o melhoramento de citros que utilizem essa variedade. Para a realização dessas avaliações, embriões coletados de sementes provenientes de frutos maduros (13 meses após o florescimento) foram fixados, desidratados e preparados para a realizaç (mais) ão dos cortes histológicos seriados. Dos embriões avaliados, apenas um apresentou a morfologia de embrião zigótico. Os demais mostraram cotilédones com angulações e formatos distintos. Foram observados embriões mal formados com a não diferenciação de ápice caulinar e/ou ápice radicular, não desenvolvimento de um dos cotilédones, além de eixo embrionário colapsado. Os dados obtidos poderão auxiliar na interpretação dos tipos morfológicos de embriões somáticos obtidos in vitro e sua capacidade de conversão em plantas. Resumo em inglês This research work evaluated the morphology of nucellar embryos of 'Valencia' sweet orange (Citrus sinensis (L.) Osbeck), in an effort to provide this information as a reference in somatic embryo induction experiments, for in vitro breeding of this cultivar. Embryos were collected from mature fruits (13 months after blooming), and were fixed, dehydrated and prepared for serial histological cuts. Among the embryos, only one presented similar morphology to a zygotic embryo, (mais) whereas the others showed different shapes and angles in the cotyledons. Not well formed embryos were also observed, mainly due to the lack of the differentiation of the shoot apex and/or root apex, undevelopment of one of the cotyledons, or sometimes due to the collapsed embryo. The results may contribute to a better understanding of different embryo morphologies of somatic embryos and their capacity to convert in plants.

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Inovulação de embriões bovinos recém-colhidos em receptoras tratadas com rbST no dia do estro/ Inovulation of bovine embryos recently collected in receiving treated with rbST in the estrus day

Marques, Paulo Alexandre Fernandes; Costa, Eduardo Paulino da; Fernandes, Carlos Antônio de Carvalho; Paula, Tarcízio Antônio Rêgo de; Almeida Neto, José Rogério Moura de; Santos, Giancarlo Magalhães dos
2009-03-01

Resumo em português Estudou-se o efeito da administração de rbST no dia do estro, na taxa de gestação e concentração sérica de progesterona em fêmeas bovinas receptoras de embrião. A administração subcutânea de rbST (500 mg) foi realizada em 67 receptoras, mantendo-se 77 sem administração de rbST (144 receptoras no total). Os diagnósticos de gestação foram realizados aos 30 dias após o estro e as taxas de gestação diferiram entre as receptoras: 32,5% (25 das 77 sem admini (mais) stração de rbST) e 65,7% (44 das 67 receptoras tratadas com rbST). As concentrações séricas de progesterona obtidas nas amostras de sangue coletadas no dia da inovulação não diferiram com a administração de rbST: 2,54 ± 0,19 ng/mL (sem rbST) e 2,27 ± 0,20 ng/mL (com rbST). Esses resultados indicam que a administração de 500 mg de rbST no dia do estro aumenta a taxa de gestação, mas não influencia a concentração sérica de progesterona de receptoras de embriões recém-colhidos. Resumo em inglês This study aimed to analyze the effects of rbST administration in the estrous day, on pregnancy rate and progesterone concentration in cows embryo receivers. The subcutaneously administration of rbST (500 mg) was done in 67 receivers, and 77 without the rbST administration (144 receivers totally). The pregnancy determination was done 30 days after the estrous day and the pregnancy rate was different between the treatments where: 32.5% (25 from 77 without rbST administrati (mais) on) and 65.7% (44 from 67 receivers treated with rbST). The serum progesterone concentration from the blood samples collected on the embryo transfer day were not different in presence of rbST treatment: 2.54 ± 0.19 ng/mL (without rbST) and 2.27 ± 0.20 ng/mL (rbST). In brief, these results suggests that 500 mg of rbST administration on the estrous day increase the pregnancy rate, however it does not have influence on serum progesterone concentration in cows receiver of fresh embryos.

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Co-cultivo de zigotos e embriões de duas células de camundongos (Mus musculus domesticus) em suspensão de células epiteliais de ovidutos de camundongos e bovinos nos meios CZB sem glicose, TCM199 e Ménézo B2/ Zygotes and two cells mouse embryos in co-culture of mouse and bovine epithelial cells in CZB glucose free, TCM199 and Ménézo B2 mediuns

TAVARES, Liliam Mara Trerrisan; ASSUMPÇÃO, Mayra Elena Ortiz D’Avila; FERREIRA, Fernando; LIMA, Alecsandra Sobreira; MELLO, Marco Roberto Bourg; VISINTIN, José Antonio
1999-01-01

Resumo em português Zigotos e embriões de 2 células de camundongos F1 (C57/DBA) foram cultivados (controle) e co-cultivados em suspensões de células epiteliais de ovidutos de camundongos (MOEC) e de bovinos (BOEC) até o estádio de blastocistos nos meios CZB, TCM199 e Ménézo B2. Os zigotos que atingiram os estádios de blastocistos expandido e eclodido no CZB foram 44 (38,26%) para o controle, 2 (1,89%) para as MOEC e 8 (6,72%) para as BOEC, sendo que o controle apresentou-se estatist (mais) icamente diferente (p0,05) entre os três grupos. No B2, o total de blastocistos foi de 28 (24,78%) para o controle, 34 (28,10%) para as MOEC e 25 (23,81%) para as BOEC, não havendo diferença estatística (p>0,05) entre os três grupos. Concluiu-se que o bloqueio dos zigotos nos meios TCM199 e B2 pode estar relacionado à presença da glicose e que o oviduto não é espécie-específico quanto a sua capacidade em promover o desenvolvimento de embriões de camundongos. Resumo em inglês Mouse embryos were cultured and co-cultured in mouse (MOEC) and bovine (BOEC) oviduct epithelial cells suspension. Embryos were co-cultured from one cell and two-cell stage to blastocyst stage. Cell culture (MOEC and BOEC) was made at a 100 µl drop under oil. Embryos were recovered 24-26 hours in the case of zygotes and 46-48 hours in the case of 2 cell embryos after hCG injection. Total embryos were randomly split into 3 groups: control (cultured), MOEC and BOEC (co-cul (mais) tured) with CZB, TCM199 and B2 mediums. In CZB group, 44 zygotes (38.26%) from the control achieved blastocyst stage (expanded or hatched), being statistically different (p

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Cultura in vitro de embriões e de gemas de mudas de pau-rosa (Aniba rosaeodora Ducke)/ Culture in vitro of rosewood (Aniba rosaeodora Ducke) embryos´seeds and buds explants

Handa, Lucia; Sampaio, Paulo de Tarso B.; Quisen, Regina Caetano
2005-01-01

Resumo em português Este trabalho teve como objetivo o estabelecimento in vitro de embriões e de gemas de mudas de pau-rosa (Aniba rosaeodora Ducke) livres de contaminações e de oxidação fenólica. As gemas foram obtidas da rebrota de mudas cultivadas em viveiro e os embriões a partir de sementes em diversos estágios de maturação. Para a assepsia dos explantes foram utilizados dois antibiótico (Ampicilina e Agrimicina), etanol (70%) e hipoclorito de sódio, em concentrações e tem (mais) po de exposição variando em função do tratamento. Para o controle da oxidação foram utilizados imersão em ácido ascórbico (250 mg/l) e PVP (Polivinilpirrolidona) no meio Murashige & Skoog (MS). O delineamento estatístico empregado foi o inteiramente ao acaso com tratamentos e repetições em função do tipo de explante. Foi observado 71% de sobrevivência e 53% de germinação de embriões tratados com hipoclorito de sódio (50% e 2% de cloro ativo) por 10 minutos e inoculados em meio MS contendo 20 mg/l de água de côco após 45 dias. As gemas das rebrotas de mudas tratadas com solução de Sulfato de Estreptomicina (Agrimicina) na concentração de 500 mg/l (1h) apresentaram 51% de sobrevivência. Quando submetidas ao pré-tratamento com o emprego de bomba a vácuo (180 mmHg) contendo a Agrimicina (500 mg/l), apresentaram 25% de sobrevivência. Resumo em inglês This study deals with the establishment in vitro of Aniba rosaeodora Ducke explants, free from fungical and endogenous contaminations and phenolic oxidation. Bud explants and embryos' seeds from many maturation stages were used in this trial. The explants were disinfected with Ampicilin antibiotic, Streptomicine Sulphate (Agrimicina), etanol (70%), sodium hipoclorite in many concentrations and exposure time acording to the type of explant. For the phenolic oxidation contr (mais) ol, the immersion on ascorbic acid and PVP (Polyvinilpirrolidone) in culture medium were used. The explants were inoculated in MS medium. The statistical design was the completely randomized and the treatments and repetitions varied according to the type of explant adopted. After 45 days, 100% of survival and 53% of germination in embryos were observed, which had been desinfested by sodium hipoclorite (50%) for 10 minutes and inoculated in MS medium, supplemented with 20 ml of coconut water. Satisfactory results (51% of survival) were observed in bud´s explants, which had been treated by immersion in 300 mg.l-1 of Agrimicina and 25% when submitted in 500 mg.l-1 on vacuum pre-treatment.

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Caracterização morfológica de embriões por imagens de raios x e relação com a massa e a qualidade fisiológica de sementes de Tecoma stans L. Juss. ex Kunth (Bignoniaceae)/ Embryo morphological characterization by x-ray image and relation with mass and physiological quality of seeds of Tecoma stans L. Juss. ex Kunth (Bignoniaceae)

Socolowski, Fábio; Cicero, Silvio Moure
2008-01-01

Resumo em português As imagens obtidas pelos raios X vêm sendo utilizadas na análise da qualidade de sementes desde os anos 50 e, atualmente, vêm se destacando por ser um método rápido, de boa precisão e não destrutivo. Deste modo, o presente trabalho foi realizado com o objetivo de avaliar as características morfológicas dos embriões de sementes de Tecoma stans L. Juss. ex Kunth pertencentes a diferentes classes de massa através da análise de imagens obtidas pelo uso dos raios X (mais) , correlacionando-as com a germinação e morfologia das plântulas. Foram utilizadas sete classes de massa com trinta sementes em cada classe, que foram submetidas aos raios X para a obtenção das imagens dos embriões. Os embriões, de cada uma das classes, foram separados de acordo com suas características morfológicas em 4 categorias (embriões sem defeito, embriões com pequenos defeitos, embriões deformados e sementes sem embrião). As sementes das diferentes classes de massa foram colocadas para germinar (emissão da raiz primária) e após dez dias foi observado o número de plântulas normais em cada uma das categorias e classes de massa. A maioria das sementes das classes 1 e 2, mais leves, apresenta-se com embriões deformados ou sem embrião, enquanto que as de maior massa (classes 3 a 7) apresentam embriões sem defeitos, em sua maioria ou totalidade. Quase a totalidade das sementes com embriões sem defeito germina, porém, nem todas dão origem a plântulas normais. Resumo em inglês The images obtained by X-ray have been used to analyze seed quality since the 1950s and recently have gained prominence because it is a fast, accurate and non-destructive method. Thus the objective of this study was to evaluate the morphological characteristics of the embryo structure of Tecoma stans L. Juss. ex Kunth seeds with different mass, making use of X-ray images and correlating these images with seed germination and seedling morphological aspects. To obtain embry (mais) o images, seven classes of seed mass were used with thirty seeds in each class that were X-rayed . The embryos of each class of seed mass were separated according to their morphological characteristics in four categories (embryos without defect, embryos with small defect, deformed embryos and seeds without embryo). The seeds were placed to germinate (radicle protrusion) and after ten days the normal seedling number was observed in each class of seed mass. Most of the seeds in the 1st and 2nd classes of seed mass, that were lighter, had seeds with embryo deformity or seeds without embryo. Almost all or all the seeds with the highest mass (classes 3rd to 7th) had seeds with embryos without defect. Almost all the seeds with embryos without defect germinated, buts not all gave origin to normal seedlings.

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Cultivo in vitro de embriões zigóticos e aclimatação de plântulas de coqueiro-anão/ In vitro culture of zygotic embryos and acclimatization of green dwarf coconut palm

Lédo, Ana da Silva; Gomes, Kicia Karinne Pereira; Barboza, Sarah Brandão Santa Cruz; Vieira, Giuseppe Serra Seca; Tupinambá, Evandro Almeida; Aragão, Wilson Menezes de
2007-02-01

Resumo em português O objetivo deste trabalho foi ajustar os protocolos de cultivo in vitro de embriões zigóticos e de aclimatação de plântulas de coqueiro-anão-verde do Brasil de Jiqui (Cocos nucifera L.). Os embriões zigóticos maduros, colocados assepticamente em meio de cultura líquido Y3 suplementado com 27,8 mg L-1 de Fe2SO4.7H2O e 60 g L-1 de sacarose, apresentaram maior germinação e formação de plântulas normais. As plântulas transferidas para meio indutor de enraizamen (mais) to Y3, gelificado e suplementado com 1 mg L-1 de ANA, 0,5 mg L-1 de BAP e 2,5 g L-1 de carvão ativado, apresentaram incremento do desenvolvimento radicular e da parte aérea. Na fase de aclimatação, o substrato composto por areia lavada e pó de casca de coco seco, na proporção de 1:1, proporcionou maior sobrevivência das plântulas (58,33%), maior crescimento da parte aérea (39,08 cm) e maior número de folhas (6,33). Os protocolos estabelecidos para o cultivo in vitro de embriões zigóticos e a aclimatação de coqueiro-anão-verde de Jiqui podem ser utilizados no intercâmbio e conservação de germoplasma. Resumo em inglês The objective of this work was to improve the protocols for culture and acclimatization of green dwarf coconut palm (Cocos nucifera L.). Mature zygotic embryos, cultivated in vitro aseptically in Y3 liquid medium culture, supplemented with 27.8 mg L-1 of Fe2SO4.7H2O and 60 g L-1 of sucrose, presented higher germination and normal plantlets formation. The plantlets transferred to Y3 semi-solid medium culture supplemented with 1 mg L-1 of ANA, 0.5 mg L-1 of BAP and 2.5 g L- (mais) 1 of activated charcoal, promoted better root and shoot development. In the acclimatization phase, the 1:1 substrate composed of washed sand and coconut coir dust provided higher survival of plantlets (58.33%), larger growth of the aerial part (39.08 cm) and larger number of leaves (6.33). The established protocols for in vitro culture of zygotic embryos and acclimatization of green dwarf coconut palm plantlets can be applied to germplasm exchange and conservation.

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Infecção experimental de embriões de frango de corte com Salmonella enterica sorovar Enteritidis fagotipo 4/ Experimental infection of broiler embryos with Salmonella enterica sorovar Enteritidis phagotype 4

Andrade, M.A.; Mesquita, A.J.; Stringhini, J.H.; Pedroso, A.A.; Leandro, N.S.M.; Café, M.B.; Mattos, M.S.
2008-10-01

Resumo em português Avaliou-se a infecção experimental por Salmonella Enteritidis fagotipo 4 (SEpt4) em embriões de frango de corte para averiguar a habilidade de penetração através da casca e o efeito da inoculação no albúmen, considerando-se a mortalidade, a eclodibilidade e a colonização intestinal dos pintos eclodidos. Foram realizados dois experimentos, distribuídos em quatro tratamentos (T) cada, com 200 e 194 ovos incubáveis das linhagens Ross e ISA Label, respectivamente (mais) . Utilizaram-se ovos não sanitizados e inoculados na casca com Salmonella Enteritidis (T1) ou com placebo (T2); ou inoculados no albúmen com Salmonella Enteritidis (T3) ou com placebo (T4). Imediatamente após a inoculação, os ovos foram incubados, e a mortalidade embrionária avaliada após 96, 432 e 528 horas. Salmonella Enteritidis inoculada na casca manteve-se viável na casca e nas membranas durante todo o período de incubação e migrou para o interior dos ovos, entretanto não afetou os parâmetros de incubação. O patógeno inoculado no albúmen determinou mortalidade embrionária tardia nas linhagens Ross, 17,0%, e ISA Label, 13,0%, e originou pintos com maior freqüência de colonização intestinal por Salmonella Enteritidis, 76,7% e 26,7% para Ross e ISA Label, respectivamente. Resumo em inglês The experimental infection of Salmonella Enteritidis phagotype 4 (SEpt4) was evaluated in broilers embryos to verify the ability of penetration through eggshell and the effect of albumen inoculation considering embryo mortality, hatchability, and intestinal colonization of hatched chicks. Two trials were conducted using in four treatments each, totaling 200 and 194 fertile eggs of Ross and ISA Label lineages, respectively. Non-sanitized eggs were inoculated on the shell w (mais) ith Salmonella Enteritidis (Treatment 1) or placebo (Treatment 2); and eggs were inoculated in albumen with Salmonella Enteritidis (Treatment 3) or placebo (Treatment 4). Immediately after inoculation, the eggs were incubated and embryo mortality was evaluated after 96, 432, and 528 hours. The results showed that Salmonella Enteritidis inoculated on egg shell remained active there and in shell membranes during all incubation period and migrated to the interior of the eggs; however, it did not affect the incubation parameters. It was observed that Salmonella Enteritidis inoculated in albumen caused late embryo mortality in Ross (17.0%) and ISA Label (13.0%) lineages, and originated chicks with high frequency of intestinal colonization by Salmonella Enteritidis, being 76.7% and 26.7% for Ross and ISA Label, respectively.

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Desenvolvimento in vitro de embriões imaturos oriundos de tangerineira 'poncã' x laranjeira 'pera' em diferentes fotoperíodos/ In vitro development of immature embryos from 'poncã' mandarin 'pera' sweet orange in different photoperiods

Pasqual, Moacir; Alves, Guilherme Pereira; Dutra, Leonardo Ferreira; Chagas, Edvan Alves; Ribeiro, Luciene de Oliveira
2003-06-01

Resumo em português Objetivou-se estudar a influência do fotoperíodo no cultivo in vitro de embriões imaturos oriundos do cruzamento entre tangerineira ‘Poncã’ e laranjeira ‘Pera’. Os embriões foram extraídos de frutos com 3 - 4 cm de diâmetro e inoculados em meio MS, adicionado de GA3 e carvão ativado nas concentrações de 0,3 mg.L-1 e 1 mg.L-1, respectivamente, previamente autoclavado a 121oC por 20 minutos. Os tratamentos constaram dos seguintes fotoperíodos: 8, 10, 12, 14, (mais) 16, 18 e 24 horas de luz contínua, na intensidade luminosa de 43 µM.m-2.s-1, a 27ºC, em estufas tipo B.O.D. O tratamento com 16 horas de luz contínua foi realizado em sala de crescimento em intensidade luminosa de 35 µM.m-2.s-1. O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado, com quatro repetições de três tubos de ensaio cada uma. Após 60 dias, melhores resultados para altura da parte aérea, número de folhas, peso da matéria fresca da parte aérea, comprimento das raízes e peso da matéria fresca das raízes foram obtidos com fotoperíodos de 8, 10, 12, 14, 18 e 24 horas. Fotoperíodo de 16 horas proporciona menor desenvolvimento de embriões imaturos. Resumo em inglês It was aimed to study the influence of the photoperiod on in vitro culture of immature embryos from ‘Poncã’ mandarin and ‘Pera’ sweet orange fruits. The embryos were removed from 30-40-mm wide fruits and inoculated on the MS medium, supplemented with 0.3 mg L-1 GA3 and 1 mg L-1 activated charcoal, previously sterilized at 121°C for 20 minutes. The following photoperiods were evaluated: 8, 10, 12, 14, 16, 18, and 24 hours of continuous light in 43 µM.m-2.s-1 intensi (mais) ty, at 27ºC, in B.O.D chambers. The 16 hours continuous light was performed in growth room at 35 µM m-2 s-1. The statistical analysis used was entirely randomized, with four replications, each one constituted of three tubes. After 60 days, better results for plant height, number of leaves, above ground fresh matter weight, root length, and root fresh weight were obtained with 8, 10, 12, 14, 18 e 24 hours photoperiod. The 16 hours rendered smaller immature embryos development.

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Coleta transcervical de embriões em ovinos da raça Dorper no semiárido do nordeste brasileiro/ Transcervical embryo recovery in Dorper ewes in the Brazilian semi-arid Northeast

Gusmão, A.L.; Silva, J.C.; Bittencourt, T.C.C.; Martins, L.E.P.; Gordiano, H.D.; Barbosa, L.P.
2009-04-01

Resumo em português Estudou-se o efeito da aplicação de misoprostol intravaginal, na dilatação cervical de ovelhas Dorper, com o objetivo de se viabilizar a coleta transcervical de embriões. Para isso, 68 fêmeas foram sincronizadas com dispositivo intravaginal de progesterona, superovuladas com FSHp, inseminadas por laparoscopia com sêmen fresco, 36 horas após a remoção do dispositivo intravaginal, e submetidas à coleta transcervical de embriões. Os animais foram distribuídos em (mais) dois tratamentos: tratamento 1 (n=10), controle, sem aplicação de misoprostol intravaginal antes da coleta de embriões, e tratamento 2 (n=58), com aplicação prévia de 200µ g de misoprostol no fundo do saco vaginal, cinco horas antes da coleta dos embriões. Não foi possível realizar a transposição cervical em nenhum dos animais do tratamento 1, o que inviabilizou as coletas dos embriões, diferentemente do tratamento 2, em que foi possível a transposição cervical em 94,8% dos animais (P Resumo em inglês The effect of intravaginal misoprostol application on the cervical expansion in Dorper ewes was evaluated to make feasible the transcervical embryo recovery. Sixty-eight female donors were synchronized with an impregnated vaginal device of progesterone; superovulated with FSHp; inseminated by laparoscopy technique with fresh semen, 36 hours after the removal of impregnated vaginal device; and submitted to transcervical embryo recovery. The ewes were arranged in two treatm (mais) ents: treatment 1 (n=10), representing the control group, without intravaginal misoprostol application before embryo recovery; and treatment 2 (n=58), with application of 200µ g of misoprostol in the vagine, five hours before the embryo recovery. The control group did not allow the cervical transposition, making unfeasible the recovery. Animals from treatment 2 reached 94.8% of cervical transposition, resulting in significant (P

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Desenvolvimento folicular de embriões de frangos de corte de diferentes genótipos expostos ao estresse térmico crônico/ Folicular development of chicken broiler embryos of different genotypes, exposed to chronic thermal stress

Dahlke, Fabiano; Gonzales, Elisabeth; Furlan, Renato Luis; Gadelha, Adriano Cordeiro; Rosa, Paulo Sérgio; Meurer, Régis Fernando Pastorelo; Maiorka, Alex
2008-11-01

Resumo em português O objetivo do trabalho foi avaliar as alterações tegumentares (morfogênese da pena), em embriões de frangos de corte de linhagens de diferentes padrões de crescimento, obtidos de ovos incubados sob diferentes temperaturas. Os ovos foram obtidos de matrizes das linhagens Cobb 500 e ISA JA57, distribuídos proporcionalmente em três incubadoras. Do primeiro (D1) ao sexto dia (D6) de incubação, utilizou-se uma temperatura padrão (37,8°C). A partir do sétimo dia (mais) (D7) e até o momento do nascimento aos 21 dias (D21), uma das incubadoras teve a temperatura reduzida para 36,8°C (fria) e uma outra alterada para 38,8°C (quente). A terceira incubadora foi mantida a 37,8°C (controle). O delineamento adotado foi o inteiramente casualizado, em esquema fatorial 3 x 2 (temperatura de incubação e linhagem). A temperatura de incubação e a linhagem não alteraram a densidade dos folículos da pena (número médio de folículos por área de 337,5µm²) nas regiões femural e dorsopélvica dos embriões até os 11 dias (D11). Entretanto, observou-se aumento na densidade folicular na região dorsal dos embriões aos 16 dias (D16) devido ao aumento da temperatura, permanecendo até o momento do nascimento. É possível oncluirque embriões incubados em temperatura acima da recomendada (38,8°C) apresentam uma maior densidade de folículos na região dorsopélvica. Apesar disso, a morfogênese dos folículos permaneceu inalterada. Resumo em inglês The objective of this research was to evaluate the tegument modification (feather morphogenesis) in embryos of broiler chicken, of different growth standard breeder lines, obtained from eggs incubated under different temperatures. Eggs of Cobb 500 and ISA JA57 breeders lines, were proportionally distributed in three incubators. From the first (D1) to the sixth day (D6) of incubation, temperature was maintained standard at 37.8°C. From the seventh day (D7) until the mo (mais) ment of the birth on the twenty one days (D21), temperature was reduced to 36.8°C (Cold) in one of the incubators, and in another incubator was increased to 38.8°C (Hot). The temperature in the third incubator was maintained at 37.8°C (Control). It was used a completely randomized design with factorial 3 x 2 (temperature of incubation and breeder lines). Incubation temperature and breeder factor do not modify the follicular density of the feather (average number of follicles per area of 337.5µm²) in the femoral and dorsal tract of until eleven days (D11) embryos. An increase of follicular density in the dorsal region of sixteen days (D16) embryos was observed, because the temperature increased, of the remaining until the moment of birth, demonstrating that embryos incubated above the recommended temperature (38.8°C) present higher follicles density in the dorsal tract. However, follicles morphogenesis remained unaltered.

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Taxa de gestação e morfologia de embriões bovinos da raça Nelore resfriados por 24 horas a 5°C em contêiner modelo Celle modificado/ Morphological aspects and pregnancy rate of Nelore cow embryos, cooling in a modified Celle container during 24 hours at 5°C

Pinto Neto, A.; Silva Filho, J.M.; Fonseca, J.F.; Palhares, M.S.; Costa, E.P.
1999-04-01

Resumo em português Na tentativa de se estabelecerem condições de estocagem de embriões bovinos da raça Nelore, resfriaram-se 29 embriões em um contêiner modelo Celle modificado, por 24 horas a 5°C. Os embriões foram avaliados, classificados quanto ao estádio de desenvolvimento e qualidade embrionária, antes e após o resfriamento, e transferidos a receptoras sincronizadas à base de prostaglandina e progestágeno. Dos embriões resfriados, 82,8% (24/29) eram grau I, 13,6% (3/29) g (mais) rau II e 6,9% (2/29) grau III. Após 24 horas de resfriamento, 62,1% (18/29) dos embriões continuaram grau I, 20,7% (6/29) grau II e 17,2% (5/29) grau III. Durante o resfriamento, todos os embriões permaneceram no mesmo estádio de desenvolvimento. Porém, dos embriões na fase de blastocisto inicial a blastocisto expandido, 82,8% (24/29) apresentaram colapso da blastocele. Após a transferência, obtiveram-se 37,9% (11/29) de gestação positiva, inferior (P Resumo em inglês In an attempt to establish good storage conditions for embryos of Nelore cows, 29 embryos were cooled in modified Celle model container during 24 hours at 5°C. Embryos were evaluated, classified and transferred to recipient heifers synchronized by prostaglandin and progestagen. Before cooling embryos were 82.8% (24/29) as level I, 13.6% (3/29) as level II and 6.9% (2/29) as level III. After a 24-hour period of cooling, 62.1% (18/29) of the embryos were level I, 20.7% (6/ (mais) 29) level II and 17.2% (5/29) level III. After the cooling process, all embryos were at the same stage of development as they were at the beginning of the process, however, 82.8% (24/29) of the embryos that were between blastocyst and expanding blastocyst stage showed a collapsed blastocoele. Transferred heifers showed that 37.9% (11/29) became pregnant, differing from heifers in the control group (75.6% - 62/82). The method used to syncronise the recipients, probably, has influenced this result, since only one became pregnant among the 11 recipients that received progestagen.

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Resgate in vitro de embriões em genótipos diplóides de bananeira/ In vitro recovery of diploid embryos in banana

Neves, Tárcia dos Santos; Silva, Sebastião de Oliveira e; Oliveira, Roberto Pedroso de
2001-02-01

Resumo em português Este trabalho teve por objetivo avaliar a técnica de resgate de embriões de sementes de bananeira em genótipos diplóides e a influência de defeitos do embrião e do endosperma na germinação in vitro. Foram utilizados os genótipos Calcutta, Malaccensis, Butuhan, França, 0304-02, 1304-06, 4252-04 e 9379-09. De cada genótipo, 100 sementes recém-coletadas foram embebidas em água destilada, por 24 horas, e desinfestadas em solução à base de nitrato de prata e cl (mais) oreto de sódio. Os embriões extraídos foram introduzidos em meio MS com 30 g L-1 desacarose e 7 g L-1 de ágar, e cultivados em câmara de crescimento, no escuro e em temperatura de 26 ± 2ºC. A germinação concentrou-se do quinto ao vigésimo dia de cultivo e apresentou uma média de 53,25% após 45 dias, independentemente do genótipo. As espécies selvagens apresentaram porcentagem média de germinação maior do que a dos genótipos híbridos. A presença de embrião e endosperma normais não foi essencial para a germinação in vitro. Resumo em inglês This study aimed to evaluate the recovery technique applied to zygotic embryos of banana diploid genotypes and to examine the effect of defective embryo and endosperm on in vitro germination. Genotypes Calcutta, Butuhan, Malaccensis, França, 0304-02, 1304-06, 4252-04 and 9379-09 were used. One hundred seeds of each genotype were collected and soaked in distilled water for 24 hours. They were then disinfected by solutions of 0.5% silver nitrate followed by 5% sodium chlor (mais) ide. Excised embryos were put in MS medium with 30 g L-1 sucrose and 7 g L-1 agar and cultured in growth chambers under dark and 26 ± 2ºC. Germination occurred between the 5th and the 20th day of growth, being 53.25% in average after 45 days independently of the genotype. Wild species showed a higher germination frequency as compared to that of the hybrid genotypes, and normal embryos and endosperm were not essential for the in vitro germination.

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Germinação in vitro de embriões zigóticos de murmuru (Astrocaryum ulei)/ In vitro germination of 'Murmuru' zygotic embryos (Astrocaryum ulei)

Pereira, Jonny Everson Scherwinski; Maciel, Tissiane Maria Silva; Costa, Frederico Henrique da Silva; Pereira, Maria Aparecida Alves
2006-04-01

Resumo em português Com o presente trabalho objetivou-se avaliar a influência de concentrações de sacarose e a idade fisiológica da semente na germinação in vitro de embriões zigóticos de murmuru. Frutos em dois estágios de desenvolvimento coletados de plantas do campo tiveram os embriões excisados, desinfestados e inoculados em meio de cultura de MS com 75% das concentrações de sais, suplementado com 2,5 g.L-1 de ácido giberélico e diferentes concentrações de sacarose: 15, 3 (mais) 0 e 45 g.L-1. Em sala de crescimento, o material foi mantido por 30 dias no escuro, sendo transferido em seguida para condições luminosas de 30 me.m-2.s-1, temperatura de 25±2ºC e fotoperíodo de 16 horas para completo desenvolvimento. O delineamento estatístico utilizado foi inteiramente casualizado em arranjo fatorial 2 x 3, com seis repetições e cinco embriões por parcela. Após 30 dias foi avaliada a porcentagem de germinação e altura das plântulas. Verificou-se que embriões provenientes de frutos imaturos apresentaram maior porcentagem de germinação, sendo a concentração de 30 g.L-1 de sacarosea que proporcionou os melhores resultados dentre as demais testadas. Embriões provenientes de frutos maduros apresentaram altura de plântulas significativamente maior aos imaturos e também para essa variável, a concentração de 30 g.L-1 de sacarose foi a que proporcionou os melhores resultados. Resumo em inglês The work aimed to evaluate the influence of sucrose concentrations and seed physiologic age on the in vitro germination of murmuru zygotic embryos. Fruits collected from field plants in two development stages had the embryos excised, desinfected and inoculated onto MS medium with 75% salts, 2.5 g.L-1 of giberelic acid and different sucrose concentrations: 15, 30 and 45 g.L-1. All cultures were kept for 30 days in the dark at 25±2ºC, being transferred afterwards to a gro (mais) wth chamber with 30 mmol.m-2s-1 of radiation and 16 hours photoperiod for complete development. The statistical design was a 2x3 factorial, with six repetitions and five embryos by experimental unit. After 30 days it was evaluated the germination percentage and plantlets height. It was verified that embryos from immature fruits presented higher germination percentage and the sucrose concentration of 30 g.L-1 was the one that provided the best results among the others tested. Embryos from mature fruits gave rise to plantlets with average height significantly greater than that of plantlets from immature fruits and 30 g.L-1 of sucrose was the concentration that provided the best results.

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Fetos anencefálicos e embriões para pesquisa: sujeitos de direitos?/ Anencephalic fetuses and research embryos: subjects of rights?

Luna, Naara
2009-08-01

Resumo em português O artigo analisa a emergência de sujeitos sociais em seres antes embutidos na figura materna, depois definidos e circunscritos pela biomedicina: os embriões extracorporais formados por fertilização in vitro e os fetos anencefálicos. Os embriões estiveram no centro de controvérsia nos debates para a aprovação da Lei de Biossegurança, que autorizou o seu uso em pesquisa. Já os fetos anencefálicos foram objeto do debate quanto à possibilidade de ampliação dos (mais) permissivos para o aborto. Analisando notícias da grande imprensa, principalmente em levantamento sistemático do jornal O Globo, entre 2000 e 2005, o objetivo é retratar os argumentos que integraram esses debates. Os argumentos que justificam ou recusam o uso de embriões para pesquisa e a antecipação de parto de anencéfalo coincidem em vários pontos porque são tributários da mesma configuração de valores e se fundamentam na figura de pessoa: o indivíduo como valor segundo Dumont. Resumo em inglês The present article analyzes the emergence of social subjects in the form of beings which had previously been embedded in mother's bodies and which have later become defined and circumscribed by biomedicine: extracorporal embryos, created by in vitro fertilization, and anencephalic fetuses. The embryos were at the center of the controversy regarding their use in scientific research during the debates for the approval of Brazil's new biosecurity law. Anencephalic fetuses b (mais) ecame the center of a debate regarding the relaxing of Brazil's abortion laws. This article analyzes mass media news stories provided mostly by a systematic review of articles published in O Globo newspaper between 2000 and 2005 in order to recover the arguments presented in these debates. The arguments to justify or ban embryo research or to anticipate the birth of anencephalic fetuses coincide, in large part, because they are derived from the same value configuration and are founded upon the person: Dumont's individual-as-value.

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Variações morfológicas de embriões somáticos obtidos a partir de inflorescências de bananeira/ Morphological variation of somatic embryos obtained from banana inflorescences

Filippi, Silvia Balbão; Appezzato-da-Gloria, Beatriz; Rodriguez, Adriana Pinheiro Martinelli
2001-12-01

Resumo em português A embriogênese somática pode ser uma alternativa para o melhoramento de espécies vegetais, quando associada à transformação genética. A regeneração de plântulas a partir de embriões somáticos é dependente de vários fatores, entre eles, a qualidade do embrião somático. Neste trabalho embriões somáticos com diferentes características morfológicas são descritos. Embriogênese somática de bananeira, cv. Grand Nain e Nanicão Jangada foi induzida a partir (mais) de inflorescências funcionalmente masculinas, em meio de indução (MI) seguido de subcultivo em meio de germinação (MG), em ausência de luz. A presença de luz na indução, não favoreceu a resposta embriogênica. Em ausência de luz, os explantes da cv. Nanicão Jangada, durante os seis meses de cultivo, sofreram diversas alterações, como a formação de calos embriogênicos e não embriogênicos, formação de embriões somáticos, continuidade no desenvolvimento do botão floral ou oxidação do explante. A freqüência de resposta embriogênica foi baixa, com apenas 6% dos explantes formando embriões somáticos e 23% com formação de calos embriogênicos. O acompanhamento histológico e morfológico das alterações ocorridas nos explantes permitiu a identificação de embriões somáticos com características morfológicas distintas: com maior freqüência observou-se um tipo de embrião com morfologia semelhante ao embrião zigótico de Musa acuminata; em menor freqüência desenvolveram-se embriões somáticos semelhantes a embriões zigóticos de outras monocotiledôneas, indicando que em um único protocolo de embriogênese somática, é possível ocorrer a formação de diferentes padrões morfológicos de embriões somáticos. Resumo em inglês Somatic embryogenesis is an alternative for genetic breeding of plant species when associated to genetic transformation techniques. Regeneration of plantlets from somatic embryos relies on somatic embryo quality, among other factors. In this work, banana somatic embryos with different morphological characteristics are described. Banana somatic embryogenesis was obtained from functional male inflorescences in induction medium (MI) followed by subculture to germination medi (mais) um MG, in the absence of light. Induction under a 16-h photoperiod did not favor the embryogenic formation. In absence of light, inflorescence explants of the cultivar Nanicão Jangada responded by several morphogenic responses. Induction of embryogenic and non-embryogenic callus, development of somatic embryos, continuity of the flower bud development or oxidation of the explants were observed in the cultures. The frequency of embryogenic response was low, with only 6% of the explants forming somatic embryos, while 23% showed the formation of embryogenic callus. Histological and morphological studies presented the formation of two types of somatic embryos: one resembling the zygotic embryo of Musa acuminata, and the other type showing more similarity to the zygotic embryo of other monocotyledonous species, indicating that in one somatic embryogenic protocol different morphological patterns can be observed. In addition to the formation of somatic embryos, continuity in the development of floral buds was frequently observed.

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Proporção macho: fêmea de embriões bovinos cultivados na presença ou ausência de glicose após FIV com espermatozóides selecionados por Swim-up ou Gradiente de Percoll

Rheingantz, Maria Gabriela Tavares; Pegoraro, Ligia Margareth Cantarelli; Dellagostin, Odir Antonio; Pimentel, Anita Mylius; Bernardi, Mari Lourdes; Deschamps, João Carlos
2004-02-01

Resumo em português No sistema de PIV em bovinos, tem sido obtida uma elevada porcentagem de embriões machos. Este experimento foi realizado para determinar se a presença de glicose no meio de cultivo afeta a proporção macho:fêmea (M:F) dos embriões bovinos PIV a partir da FIV com espermatozóides preparados pelos métodos do swim-up (S) ou do gradiente de Percoll (P). Após a MIV, os COCs foram divididos em dois grupos e inseminados com espermatozóides preparados por um dos métodos. (mais) Os zigotos foram cultivados em meio com ou sem 5,56mM de glicose, totalizando 4 tratamentos: S-Gli, S+Gli, P-Gli e P+Gli e 48h após a inseminação, os embriões de cada tratamento foram submetidos à sexagem por PCR (n=845). O efeito da glicose no meio de cultivo sobre a proporção M:F dos embriões PIV a partir dos dois métodos foi semelhante (teste do c²), resultando em uma porcentagem de machos menor do que 50% no estágio de 2-C (S: 30,8%; P: 23,8%: P Resumo em inglês In the bovine IVP system, it has been obtained a high percentage of male embryos. This experiment was carried ou to determine if the glucose presence in the culture medium affects the sex ratio of bovine embryos IVP from the IVF with spermatozoa prepared for the swim-up (S) or Percoll gradient (P) methods. After the IVM, the COCs had been divided in two groups and inseminated with spermatozoa prepared for one of the methods. The zygotes had been cultivated in medium with (mais) or without 5.56mM of glucose, totalizing 4 treatments: S-Glu, S+Glu, P-Glu and P+Glu, and 48h post-insemination, the embryos of each treatment had been sexed for the PCR method (n=845). The effect of glucose in the culture medium on sex ratio of embryos IVP from the two methods was similar (c² test), resulting in a percentage of males lower than 50% in the 2-C stage (S: 30.8%; P: 23.8%: P

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ESTÁDIOS DE DESENVOLVIMENTO DE EMBRIÕES NA OBTENÇÃO DE PLANTAS EM CRUZAMENTOS ENTRE GENITORES APIRENOS DE VIDEIRA/ EMBRYO GROWTH STAGES ON PLANT OBTENTION FROM CROSSES BETWEEN SEEDLESS GRAPE PARENTS

AMARAL, ADRIANE LEITE DO; OLIVEIRA, PAULO RICARDO DIAS DE; CZERMAINSKI, ANA BEATRIZ COSTA; CAMARGO, UMBERTO ALMEIDA
2001-12-01

Resumo em português Pesquisou-se o efeito do estádio de desenvolvimento de embriões resgatados na obtenção de plantas em cruzamentos entre genitores apirenos de videira, utilizando dois métodos de cultivo in vitro de sementes-traço. No método 1 (M1), as sementes-traço foram cultivadas 60 dias em meio-de-cultura ER e no método 2 (M2) 60 dias em ER, mais 30 dias em meio-de-cultura MS. O estádio de desenvolvimento do embrião foi identificado no final destes períodos, quando do resga (mais) te e transferência para meio-de-cultura WP. Quatro tipos de embriões foram identificados: globular, cordiforme, torpedo e indefinido. O estádio globular foi encontrado com maior freqüência, levando à obtenção de maior número de plantas, mesmo tendo apresentado menor capacidade de gerar plantas. A maior eficiência em gerar plantas foi obtida com o estádio torpedo. No M2, ocorreu maior número de embriões germinados e de plantas desenvolvidas. Como o estádio de desenvolvimento do embrião influencia na obtenção de plantas, o resgate de embriões em estádio mais avançado do seu desenvolvimento leva a tem maior capacidade de gerar plantas. Portanto, uso de técnicas que favoreçam o resgate de embriões mais desenvolvidos pode aumentar o número de plantas obtidas. Resumo em inglês It was investigated the effect of the growth stage of rescued embryos on plant obtention from crosses between seedless grape parents. Two methods for in vitro culture were compared. Method 1 (M1): seed traces were cultured 60 days in ER culture medium. Method 2 (M2): procedure of M1 followed by additional 30 days in MS culture medium. The stage of embryo growth was established at the end of this period, when the embryos were rescued and transfered to WP culture medium. Fo (mais) ur classes of embryo stages were indentified: globular, heart, torpedo and undefined. The globular stage, the most frequently found, produced the largest quantity of recovered plants, though it had the lowest capacity of originating plants. The torpedo stage was the most efficient in producing plants. M2 promoted the largest amount of germinated embryos and recovered plants. As the embryo growth stage affects the plant obtention, the rescue of embryos in an advanced growth stage promotes a higher capacity of producing plants. Therefore the use of techniques that favour the rescuing of embryos in an advanced growth stage can increase the obtention of plants.

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A incrível história da fraude dos embriões clonados e o que ela nos diz sobre ciência, tecnologia e mídia/ The amazing story of the fraudulent cloned embryos and what it tells us about science, technology, and the media

Souza, Iara Maria de Almeida; Caitité, Amanda Muniz Logeto
2010-06-01

Resumo em português Analisa, a partir de notícias em jornais brasileiros, o caso da fraude científica dos embriões clonados, cometida pelo cientista sul-coreano Hwang. A exposição da ciência pela mídia costuma destacar aspectos intelectuais, descobertas e promessas de aplicação. Nesse caso a ciência é mostrada em seu avesso, e desvela-se a trama de fios que ligam elementos de naturezas diferentes: governo coreano, pesquisadores, instrumentos, fundos para pesquisa, óvulos e fungos (mais) , revistas científicas, entre outros. Tais vínculos, que constituem a ciência na prática, só ganham visibilidade na mídia devido às tensões entre esses diferentes elementos e aos aspectos ilícitos presentes nesse caso em particular. Resumo em inglês Based on news reports from Brazilian papers, the article examines the case of scientific fraud involving cloned embryos, committed by South Korean scientist Hwang. The media generally focus on the intellectual process of science, its discoveries, and the new possibilities it promises. In this case, however, science is shown the other way around, revealing a web that interweaves elements of a radically disparate nature, like the Korean government, researchers, tools, resea (mais) rch funds, human eggs and funguses, scientific journals, among others. These ties are what make up science in practice, yet they only become visible in the media when there is tension between them and, in this case, when something illicit happens.

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Mobilização de água e conservação da viabilidade de embriões de sementes recalcitrantes de ingá (Inga vera Willd. subsp. affinis (DC.) T. D. Pennington)/ Water mobilization and viability conservation of embryos of recalcitrant seeds of "ingá" (Inga vera Willd. subsp. affinis (DC.) T. D. Pennington)

Andréo, Yara; Nakagawa, João; Barbedo, Claudio José
2006-06-01

Resumo em português Sementes anidrobióticas (ortodoxas) podem ter seu teor de água reduzido a valores suficientemente baixos para minimizar o metabolismo e, dessa forma, manter a viabilidade por períodos prolongados. Sementes não-anidrobióticas (recalcitrantes) não perdem sua viabilidade desde que o teor de água seja mantido acima de determinados valores em que a quantidade da água ainda é elevada para manter o metabolismo ativo; no entanto, a longevidade dessas sementes é relativa (mais) mente baixa. No presente trabalho procurou-se manter o teor de água dos embriões de ingá por meio do armazenamento em soluções de polietileno glicol 6000 (PEG), com potencial hídrico conhecido e pré-estabelecido, visando a prolongar a longevidade. Os resultados indicaram que embriões mantidos em substrato com solução de PEG a -2,4 MPa apresentaram germinação superior a 80% aos 90 dias de armazenamento a 10 ºC, enquanto os armazenados em substrato umedecido com água pura (0 MPa), na mesma temperatura, apresentaram germinação inferior a 60%. Resumo em inglês The water content of anhydrobiotic (orthodox) seeds is usually reduced to low values and its metabolism is reduced to a level that viability can be preserved for long periods. In contrast, typical non-anhydrobiotic (recalcitrant) seeds are intolerant to desiccation, possess lower longevity, and need a minimum water level to maintain viability, but the metabolism is still too active leading to a short seed longevity. In the present research "inga" seed embryos were stored (mais) in contact with polyethylene glycol 6000 (PEG) solutions, at pre-defined water potential with the objective of improving storability and longevity. Results indicated that germination of embryos kept in PEG solution at -2.4 MPa was higher than 80% after 90 days of storage at 10 ºC, while the germination of embryos kept at distilled water (0 MPa), at the same temperature, was lower than 60%.

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Sementes recalcitrantes: intolerantes a baixas temperaturas? Embriões recalcitrantes de Inga vera Willd. subsp. affinis (DC.) T. D. Penn. toleram temperatura sub-zero/ Recalcitrant seeds: intolerant to low temperatures? Recalcitrant embryos of Inga vera Willd. subsp. affinis (DC.) T. D. Penn., a tropical species, are tolerant to subzero temperature

Bonjovani, Marcio R.; Barbedo, Claudio J.
2008-06-01

Resumo em português Sementes recalcitrantes são intolerantes à dessecação e a baixas temperaturas, que são as principais formas de conservação de sementes e, portanto, são de difícil armazenamento. Inga vera subsp. affinis produz sementes denominadas recalcitrantes, uma vez que não toleram redução do teor de água para valores inferiores a 35%. Neste trabalho é demonstrada a tolerância desses embriões a temperatura de -2 ºC. Embriões de I. vera de diferentes estádios de mat (mais) uração foram armazenados por até 45 dias nas temperaturas de 8 ºC a -18 ºC, com ou sem secagens prévias até -4,0 e -6,0 MPa. Os resultados permitiram observar que, embora nenhum tratamento tenha proporcionado resistância à temperatura de -18 ºC, a secagem dos embriões maduros a -4 MPa proporcionou maior tolerância à redução de temperatura até níveis de congelamento da água (-2 ºC). Resumo em inglês Recalcitrant seeds are intolerant to both desiccation and low temperatures, the most important mechanisms of seed conservation, consequently their storage is difficult. Inga vera subsp. affinis produces the so-called recalcitrant seeds, since they do not survive to water content lower than 35%. In this work it is demonstrated that these seeds are tolerant to temperatures as low as -2 ºC. Embryos of I. vera of different stages of maturity were stored at temperatures varyi (mais) ng from 8 to -18 ºC for until 45 days. Non-dried embryos and both dried to -4 MPa and -6 MPa were stored. Results showed that, despite all embryos died at -18 ºC, some cold tolerance was obtained by mature embryos when stored at -2 ºC, as long as they are dried to -4 MPa.

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Efeito do transporte no desenvolvimento de embriões bovinos cultivados in vitro a fresco ou reaquecidos após vitrificação/ Effect of transportation on development of fresh or vitrified-warmed bovine embryos

Ramos, Alessandra de Almeida; Polisseni, Juliana; Sá, Wanderlei Ferreira de; Ferreira, Ademir de Moraes; Camargo, Luis Sérgio de Almeida; Folhadella, Danielle da Silva; Nogueira, Luiz Altamiro Garcia
2006-12-01

Resumo em português Avaliou-se a viabilidade de embriões bovinos cultivados in vitro, a fresco ou reaquecidos após vitrificação, depois de transportados por 6 ou 12 horas. Oócitos obtidos de folículos de ovários coletados em matadouro foram maturados, fecundados e cultivados in vitro. Após sete dias de cultivo, blastocistos com grau de qualidade I e II (segundo o manual da IETS-1998) foram selecionados, envasados em OPS (open pulled straws) e vitrificados em nitrogênio líquido. O r (mais) eaquecimento foi realizado a 39ºC pela passagem em soluções de HM com concentrações decrescentes de sacarose (0,25M - 0,15M) por cinco minutos em cada solução. Foram avaliados três tratamentos - V0: embriões vitrificados, reaquecidos e cultivados in vitro (n=25); V6: embriões vitrificados, transportados por 6 horas (simulação em palhetas), reaquecidos e cultivados in vitro (n=29); e V12: embriões vitrificados, transportados por 12 horas, reaquecidos e cultivados in vitro - comparados, cada um, a um tratamento controle, com embriões a fresco-C0: embriões a fresco cultivados in vitro (n=26); C6: embriões a fresco cultivados in vitro após 6 horas de transporte (n=30); e C12: embriões a fresco cultivados in vitro após 12 horas de transporte (n=30). Os embriões foram co-cultivados com células da granulosa em microgotas de TCM 199 acrescido de SFB. Foram avaliadas as taxas de re-expansão e eclosão após 48 horas de cultivo. A análise foi realizada pelo teste do qui-quadrado. As taxas de re-expansão entre os grupos V0, V6 e V12 não diferiram, assim como as taxas de eclosão entre os embriões vitrificados e os controles. As taxas de eclosão, no entanto, diferiram entre os embriões submetidos à vitrificação e os controles. Embriões bovinos produzidos in vitro podem ser transportados a fresco ou vitrificados por períodos de até 12 horas, pois possibilitam taxas de eclosão satisfatórias. Resumo em inglês The aim of this study was to evaluate the viability of in vitro produced bovine embryos, fresh or warmed, after submitted to different periods of transportation (6h-12h). Oocytes obtained from ovaries collected from slaughterhouse were matured, fertilized and cultured in vitro. After seven days, grades I and II blastocysts (according to IETS manual) were selected and vitrified after exposition to PBS solution with 5% fetal calf serum (HM), added with 10% ethylene glycol ( (mais) EG) and 10% of dymetil sulfoxide (DMSO), for one minute, followed by HM solution with 20% EG and 20% DMSO, for 20 seconds. Embryos were loaded into open pulled straws (OPS) and plunged into liquid nitrogen. Warming was performed at 39ºC by embryo exposure to decreasing concentration of sucrose (0.25 and 0.15M), for five minutes in each step. The warmed embryos were distributed in three groups: V0: in vitro cultured after warmed; V6: embryos loaded into straws and kept for 6 hours at 35ºC, before in vitro culture; and V12: embryos loaded into straws and kept for 12 hours at 35ºC, before in vitro culture. Each group was evaluated by control groups of fresh embryos (C0, C6 and C12, respectively). The embryos were co-cultured with cumulus cells in TCM-199 micro droplets added with SFB. Re-expansion and hatching rates after 48 hours in culture were evaluated and results were compared by the Chi-square test. Re-expanded rates among groups V0, V6 and V12 as well as hatching rates among vitrified groups and among control groups did not differ. However, hatching rates were different between vitrified groups and their respective controls. The satisfactory rates of hatching suggest that it is possible to transport warmed and fresh in vitro produced embryos for periods up to 12 hours.

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Histologia da embriogênese somática induzida em embriões de sementes maduras de Urochloa brizantha apomítica/ Histology of somatic embryogenesis induced in embryos of mature seeds of the apomictic Urochloa brizantha

Lenis-Manzano, Sandra Janeth; Araujo, Ana Claudia Guerra de; Valle, Cacilda Borges do; Santana, Eliana de Fátima; Carneiro, Vera Tavares de Campos
2010-05-01

Resumo em português O objetivo deste trabalho foi descrever o processo de embriogênese somática em Urochloa brizantha cv. Marandu (Syn. Brachiaria brizantha cv. Marandu) e fornecer subsídios para o aprimoramento dos métodos de cultura de tecidos e transformação genética. Calos embriogênicos foram obtidos por indução em embriões isolados de sementes maduras, e cultivados in vitro, em meio de cultura que continha ácido 2,4-diclorofenoxiacético, 6-benzilaminopurina e caseína hidro (mais) lisada. Plântulas foram regeneradas a partir dos calos embriogênicos, na presença de ácido naftalenoacético e cinetina. Esse processo foi descrito morfologicamente por observações em microscopia de luz de secções seriadas semifinas de tecidos fixados, ao longo do processo de regeneração, em FAA [formaldeído (40%): ácido acético glacial: etanol (50%), a 5:5:90 v/v/v]. Os embriões das sementes de U. brizantha cv. Marandu não têm epiblasto e são classificados como do tipo panicoide. Nas condições estabelecidas de cultura in vitro, calos embriogênicos e embriões somáticos de U. brizantha cv. Marandu, desenvolvem-se a partir de células meristemáticas do escutelo. Resumo em inglês The objective of this work was to describe the process of somatic embryogenesis in Urochloa brizantha cv. Marandu (Syn. Brachiaria brizantha cv. Marandu) and to provide support for the improvement of tissue culture and genetic transformation methods. Embryogenic calli were obtained by induction in embryos isolated from mature seeds, and cultivated in vitro in culture medium containing 2,4-dichlorophenoxyacetic acid, 6-benzylaminopurine and hydrolyzed casein. Plantlets wer (mais) e regenerated from the embryogenic calli in the presence of naphthaleneacetic acid and kinetin. This process was described by morphological observations of serial semithin sections of tissues fixed along the regeneration process in FAA (40% formaldehyde: acetic acid: 50% ethanol, at 5:5:90 v/v/v), using light microscopy. Seed embryos of U. brizantha cv. Marandu do not have epiblast and are classified as Panicum-type. Under in vitro culture conditions, embryogenic calli and somatic embryos of U. brizantha cv. Marandu develop from meristematic cells of the scutellum.

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Embriogênese somática a partir de embriões imaturos em genótipos de milho/ Somatic embryogenesis from immature embryos in maize genotypes

Fernandes, Eloise Helena; Prioli, Alberto José; Scapim, Carlos Alberto; Schuster, Ivan; Vieira, Elisa Serra Negra; Amaral Júnior, Antônio Teixeira do; Moterle, Lia Mara
2008-12-01

Resumo em português A primeira etapa de um programa de transformação genética de plantas é o estabelecimento de um protocolo de regeneração de plantas, a partir de cultura de tecidos. A regeneração de plantas pode ser conseguida por meio de organogênese ou embriogênese. A embriogênese somática é dependente do genótipo das plantas utilizadas e a identificação de genótipos mais responsivos a este método de regeneração resulta em maior eficiência da técnica. O trabalho tev (mais) e como objetivo identificar genótipos de milho com maior capacidade de produção de embriões somáticos e regeneração de plantas. Foram investigados 11 genótipos (linhagens e híbridos). As culturas foram obtidas a partir de embriões imaturos, inoculados em meio N6, suplementado com 690mg L-1 de prolina e 10mM de 2,4-D, com subcultivos quinzenais. Nos genótipos LD82025, CD308 e CML314, foram observados calos do tipo II, friáveis e embriogênicos. Esses genótipos foram submetidos ao processo de regeneração, destacando-se a linhagem LD82025. Os genótipos CD307, CD304, OC-705, 105-B e o GU04328 não apresentaram indução de calos embriogênicos. Os resultados indicam que a linhagem LD82025 é a mais promissora para utilização em um programa de transformação genética de plantas. Resumo em inglês The establishment of a protocol for regenerating plants by tissue culture is the first step in breeding programs which have the objective of using genetic transformation on plants. The plant regeneration can be achieved either by organogenesis or embryogenesis. In the second case, the somatic embryogenesis depends on the identification of responsive genotypes which enhance the efficiency of the program. The aim of the present study was to identify maize genotypes with hig (mais) h capacity to produce somatic embryos and consequently regenerate maize plants. Eleven genotypes (inbreds and hybrids) were investigated in the present experiment. Under two-week periods, the cultures were obtained from immature embryos which were inoculated into growing medium N6 with 690mg L-1 of proline and 10mM of 2,4-D. Callis of type II, friable and embryogenic, were observed in the LD82025, CD308, and CML314 genotypes. After, they were submitted to the regeneration process and the best performance was achieved by the LD82025. No embryogenic callus was developed from CD307, CD304, OC-705, 105-B, and GU04328. In the present case, the inbred LD82025 is the most promising maize genotype for participating in a breeding program that will use the genetic transformation of maize plants.

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Caracterização da inviabilidade evolutiva de embriões visando doações para pesquisas de células-tronco/ Characterization of unviable embryos suitable for donation to stem-cell research

Donadio, Nilka Fernandes; Donadio, Nilson; Celestino, Carlos Oliveira; Aoki, Tsutomu
2005-11-01

Resumo em português OBJETIVO: estabelecer quais as características que definem um embrião como inviável, tornando-o passível de doação para pesquisa com células-tronco. MÉTODOS: avaliação retrospectiva de ciclos de fertilização in vitro realizados entre janeiro de 1995 a 2005. Foram selecionados ciclos nos quais se transferiram para a cavidade uterina embriões com classificações morfológicas iguais entre si. Desta forma, avaliaram-se as taxas de gravidez, implantação e invo (mais) lução de sacos gestacionais dos embriões frescos e criopreservados, distribuídos em grupos, de acordo com sua morfologia. Foram considerados embriões tipo A aqueles simétricos e sem fragmentação; tipo B, assimétricos ou com até 25% de fragmentação; tipo C, com 25 a 50% do seu volume ocupado por fragmentos, e tipo D, aqueles com 50% ou mais de fragmentação. Para as análises estatísticas utilizaram-se os testes de Kruskal-Wallis e Mann-Whitney. RESULTADOS: em 87 ciclos foram transferidos 172 embriões tipo D, obtendo-se 11% de gravidez, embora somente metade dos embriões inicialmente implantados manteve sua evolução. Já embriões de mesma morfologia quando criopreservados, após descongelamento, não mostraram capacidade evolutiva, apresentando, a partir da transferência de 113 embriões em 36 ciclos, somente uma implantação, perfazendo uma diminuta taxa de 3% de gravidez. A única gestação obtida involuiu antes da 12ª semana de gestação. CONCLUSÃO: embriões de baixos escores morfológicos não podem ser considerados inviáveis por serem capazes, embora com uma freqüência muito baixa, de promoverem gestação. Mas estes mesmos embriões, quando criopreservados e posteriormente transferidos após descongelamento, mostraram taxa de gravidez irrisória, além de não resultarem em gravidez viável. Logo, quando extranumerários, os embriões tipo D não deveriam ser criopreservados, podendo então, ao invés de serem descartados, ser doados para pesquisa de células-tronco embrionárias. Resumo em inglês PURPOSE: to define the characteristics of unviable embryos that may be donated for stem-cell research. METHODS: a retrospective evaluation of in vitro fertilzation cycles between January 1995 and January 2005 was structured. Cycles were chosen in which the embryos transferred to the uterine cavity had the same morphological characteristics. Subsequently, the rates of pregnancy, implantation, and involution of the gestational sacs of the fresh embryos as well as of those c (mais) ryopreserved were analyzed and distributed into groups according to their morphology. Embryos that were symmetric and with 0% of fragmentation were designated type A; asymmetric with up to 25% of fragmentation were designated type B; between 25 and 50% of volume occupied were designated type C, and those with 50% or more of fragmentation were designated type D. RESULTS: one hundred and seventy-two type D embryos transferred in 87 cycles presented low rates of implantation (11%) with 50% of those implanted persisting in development. Embryos with the same morphology, after cryopreservation and thawing, did not show the capacity to evolve. In 36 cycles, 113 thawed type D embryos were transferred, resulting in only one implantation, presenting a minute 3% pregnancy rate. The implanted gestational sac did not evolve, showing a 100% rate of involution. CONCLUSION: embryos with low morphological scores cannot be considered unviable because they are capable, even though with a very low frequency, of supporting gestation. However, these same embryos, after cryopreservation, thawing and transfer showed an insignificant rate of pregnancy, that did not result in viable pregnancy. Therefore, when in excess to requirements, type D embryos should not be cryopreserved; instead, rather than discarded, they should be donated for embryo stem-cell research.

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Inibição do desenvolvimento in vitro de embriões de Coffea por cafeína exógena/ Inhibition of in vitro development of Coffea embryos by exogen caffeine

Rosa, Sttela Dellyzete Veiga Franco da; Santos, Cíntia Guimarães dos; Paiva, Renato; Melo, Patrícia Leonardo Queiroz de; Veiga, André Delly; Veiga, Adriano Delly
2006-12-01

Resumo em português A cafeína, alcalóide conhecido como 1,3,7-trimetilxantina, é encontrada em sementes quiescentes de cafeeiro, perfazendo um total de 1,1 a 1,7% em Coffea arabica L. e 2 a 3% em Coffea canephora Pierre, localizada em sua grande maioria no endosperma, na forma livre no citoplasma das células ou complexada com ácidos clorogênicos. Com função fisiológica em plantas ainda não totalmente esclarecida, a cafeína causa efeito alelopático, seja inibindo a germinação de (mais) várias espécies, seja como anti-herbívoro ou como agente pesticida natural. A lenta germinação de sementes de café ainda não foi esclarecida e várias causas são apontadas, como presença do endocarpo, baixa absorção de água e O2, presença de inibidores naturais e balanço hormonal. Embora sugeridos, estudos sobre a inibição de sementes de cafeeiro por ação da cafeína endógena e ou exógena são escassos. Assim, o presente trabalho teve como objetivo estudar o efeito da cafeína exógena sobre a germinação e o desenvolvimento de embriões de Coffea arabica L. e de Coffea canephora Pierre. O experimento foi realizado utilizando-se frutos no estádio cereja das cultivares Rubi e Apoatã IAC-2258. Após desinfestação dos frutos por 30 minutos de imersão em hipoclorito de sódio (2% i.a.) e lavagem por três vezes em água destilada e autoclavada, os embriões foram retirados e inoculados, de modo asséptico, em placas de petri com meio MS 50%, acrescido de sacarose e suplementado com diferentes concentrações de cafeína (0,00; 0,05; 0,10; 0,15; 0,20; 0,25; 0,30 e 0,40%). Os embriões foram mantidos em sala de crescimento a 27 ± 2ºC e densidade de fluxo de fótons de 13µmol.m-2.s-1, durante 23 dias, quando foram avaliados comprimento da parte aérea, comprimento de raiz e massa fresca das plântulas. Cinco dias após o cultivo, foram avaliadas a porcentagem de emissão de radículas e cotilédones, computando-se os embriões com cotilédones abertos e radículas expandidas. O delineamento experimental utilizado foi inteiramente casualizado com seis repetições por tratamento, sendo cada repetição constituída por cinco embriões. Concluiu-se que a germinação e o desenvolvimento in vitro de embriões de Coffea arabica L. e Coffea canephora Pierre são afetados por cafeína exógena. O efeito detrimental da cafeína exógena em embriões de Coffea é maior nas radículas do que nos cotilédones. Embriões de Coffea arabica L. são mais sensíveis aos efeitos negativos da cafeína exógena do que embriões de Coffea canephora Pierre. A cafeína pode contribuir para a lenta germinação de sementes e o lento desenvolvimento de plântulas de cafeeiro. Resumo em inglês Caffeine, the alkaloid known as 1,3,7 - trimetilxantina, is found in quiescent coffee seeds, amounting to a total of 1.1 to 1.7% in Coffea arabica L. and 2 to 3% in Coffea canephora Pierre, mostly localized in theo endosperm, in the free cytoplasm of cells or complexed with chlorogenic acids. With the physiological function in plants not yet completely understood, caffeine causes an allelophatic effect, either inhibiting germination of a number of species or as an anti-he (mais) rbivore or a natural pesticide agent. The slow germination of coffee seeds has not yet been elucidated and several causes are pointed to, such as the presence of the endocarp, low water and O2 uptake and presence of natural inhibitors and hormonal balance. Although suggested, studies on coffee seed inhibition by the action of endogenous or exogenous caffeine are scarce. Thus, the present study was designed to investigate the effect of exogenous caffeine on both germination and embryo development of Coffea arabica L. and Coffea canephora Pierre. The experiment was conducted by utilizing seeds from red ripe berries of the cultivars Rubi and Apoatã IAC-2258. After disinfecting the berries for 30 minutes by soaking in sodium hypochlorite (2% a.i.) and washing three times in distilled water and autoclaved, the embryos were removed and inoculated in a aseptic manner, in Petrri dishes with 50% MS medium with the addition of sucrose and supplemented with different of concentrations of caffeine (0.00; 0.05; 0.10; 0.15; 0.20; 0.25; 0.30 and 0.40%). The embryos were maintained in a growth room at 27±20ºC and photon flow density of 13µmol.m-2.s-1 for 23 days, when shoot length, root length and seedling fresh mass were evaluated. Five days after cultivation, the percentage of radicle emission and that of cotyledons were evaluated, calculating the embryos with open cotyledons and with expanded radicles. A complete randomized experimental design was used six replications per treatment, each replicate consisting of five embryos. It follows that germination and in vitro development of embryos of Coffea arabica L. and of Coffea canephora Pierre are affected by exogenous caffeine. The detrimental effect of exogenous caffeine on Coffea embryos is greater on the radicles than on the cotyledons. Coffea arabica L. embryos are more sensitive to the negative effects of exogenous caffeine than embryos of Coffea canephora Pierre. Caffeine can contribute to the slow seed germination and slow coffee seedling development.

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Falha na sexagem por inibição do desenvolvimento de embriões bovinos produzidos in vitro com anticorpos anti H-Y/ Failure of sexing by developmental arrest of bovine embryos in vitro produced with H-Y antisera

Resende, M.V.; Moreira-Filho, C.A.; Leal, C.L.V.; Ramalho, M.F.P.D.; Almeida, A.O.; Vantini, R.; Hossepian de Lima, V.F.M.
2008-06-01

Resumo em português Embriões bovinos produzidos in vitro, em estádio de mórula, foram cultivados em meio contendo anticorpos anti H-Y de alto título proveniente de ratos por 24h e, após este tempo, classificados em dois grupos: 1) embriões inibidos em estádio de mórula (classificados como machos) e 2) embriões que se desenvolveram e formaram a blastocele (classificados como fêmeas). O sexo de 311 embriões, distribuídos em três grupos de concentração dos anticorpos, 3%, 5% ou 7 (mais) %, foi identificado pela reação em cadeia da polimerase. Não houve desvio da proporção entre machos e fêmeas (P>0,05) nos grupos em que se utilizaram os anticorpos anti H-Y, quando comparadas ao grupo-controle, sem adição de anticorpos anti H-Y. Diferentemente dos resultados obtidos utilizando-se embriões bovinos produzidos in vivo, a sexagem com anticorpos anti H-Y de alto título em embriões produzidos in vitro não propiciou sucesso. Resumo em inglês In vitro produced bovine embryos at morula stage were cultured in medium containing high titer of rat H-Y antisera for 24h. The embryos were classified in two groups: 1) embryos arrested at morula stage (classified as males); and 2) embryos that developed and formed a blastocoele (classified as female). The sex of 311 embryos, divided in three groups of concentration of H-Y antisera, 3%, 5% or 7%, was identified by polimerase chain reaction. The results showed no differen (mais) ce (P>0.05) on sexual deviation in groups in which the H-Y antisera was added, in relation to control group, in which no H-Y antisera was added. In contrast with results obtained with in vivo produced bovine embryos, the sexing of in vitro produced bovine embryos with high H-Y antisera titer did not succed.

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Desenvolvimento morfológico dos ovários em embriões e fetos bovinos da raça Nelore/ Morphological development of the ovaries in embryos and fetuses of Nelore breed

Diniz, E.G.; Esper, C.R.; Jacomini, J.O.; Vieira, R.C.
2005-02-01

Resumo em português Investigaram-se os eventos morfológicos relacionados ao desenvolvimento pré-natal de ovários de 81 embriões e fetos da raça Nelore, coletados em frigoríficos, com idades variando de 26 a 240 dias pós-fecundação. Observou-se formação da crista gonádica e presença de células germinativas em seu interior aos 29 e 34 dias, respectivamente. As oogônias e folículos primordiais, ao contrário dos folículos em crescimento, apresentaram diferenças significativas (mais) de diâmetro nos vários períodos estudados. Verificou-se correlação positiva (P Resumo em inglês The morphologic events related to the prenatal development of the ovaries in 81 Nelore breed embryos and fetuses gathered in a local slaughterhouse, with age range from 26 to 240 days following fecundation were studied. The age of fetuses was estimated from measures taken in the cranium-caudal direction. The sex was identified from macroscopic observations and using Polymerase Chain Reaction (PCR) technique. For histology the gonads were fixed in Bouin’s fluid for 24 hou (mais) rs and 5 µm thick section’s were stained with hematoxylin-eosin. Formation of gonadal ridge and presence of germinal cells were found within it at 29 and 34 days, respectively. Oogonia and primordial follicles, unlike the growing follicles, exhibited significant differences in diameter in the various periods studied. Positive correlation (P

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Adequação de nutrientes do meio MT para o cultivo de embriões imaturos de tangerineira 'Cleópatra'/ Adjustment of nutrients of the MT medium for the cultivation of 'Cleópatra' tangerine immature embryos

Morais-Lino, Lucymeire Souza; Souza, Antônio da Silva; Soares Filho, Walter dos Santos; Ledo, Carlos Alberto da Silva
2008-03-01

Resumo em português Este trabalho teve como objetivo ajustar a concentração de macronutrientes, micronutrientes e vitaminas do meio de cultura Murashige & Tucker (MT), de modo a permitir a germinação de embriões imaturos, menores que 3 mm, de tangerineira 'Cleópatra'. As sementes foram obtidas a partir de frutos com 4 a 5 meses após a antese, cujos embriões não germinam nos meios de cultura atualmente indicados para citros. Inicialmente, os embriões foram cultivados em meio de cult (mais) ura básico contendo sacarose e ágar, seguindo uma seqüência de etapas, procedendo-se a ajustes da concentração normal dos macronutrientes (1/1, ½ e ¼), micronutrientes (1/1, ½, ¼ e 1/1, 3/2, 2/1) e vitaminas (2/1, 1/1 e ½) do meio MT. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado, em um esquema fatorial 3 (concentrações do MT) x 4 (comprimentos de embriões), com 10 repetições. As variáveis, porcentagem de germinação de embriões, porcentagem de plântulas normais e comprimentos dessas plântulas foram avaliadas 30 dias após a inoculação dos embriões em meio de cultura. Os melhores resultados foram obtidos utilizando-se de metade da concentração normal de macronutrientes, não havendo necessidade de alterar as concentrações de micronutrientes e vitaminas. Resumo em inglês The objective of the present work was to adjust the macronutrient, micronutrient and vitamin concentrations of the Murashige & Tucker (MT) culture medium in order to promote the germination of ´Cleopatra´ Tangerine immature embryos, smaller than 3 mm. Seeds from fruits, 4 to 5 months after anthesis, in which the embryos do not germinate in recently indicated culture media for citrus, were used. Initially, the embryos were cultivated in basic culture medium con (mais) taining sucrose and agar, followed by a sequence of steps, carrying out the adjustments of the normal concentration of macronutrients (1/1, ½ and ¼), micronutrients (1/1, ½, ¼ and 1/1, 3/2, 2/1) and vitamins (2/1, 1/1 e ½) of the MT medium. The experimental design was completely randomized in factorial scheme 3 (concentrations of MT) x 4 (embryo size), with 10 repetitions. The following variables were evaluated thirty days after embryo inoculation in culture medium: percentage of germination, percentage of normal plantlets and plantlet length. The best results were obtained using half the normal concentration of macronutrients, whereas the concentrations of micronutrients and vitamins remained unaltered.

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Transferência de blastocisto após descongelamento de embriões em mórula resultando em gestação gemelar: relato de caso/ Twin pregnancy after thawing of morula embryos and blastocyst transfer: case report

Albuquerque, Luiz Eduardo T.; Maciel, Maria Cecília R.; Matheus, Paulo C.; Catafesta, Edir; Pereira, Dirceu Henrique Mendes
1999-12-01

Resumo em português A criopreservação de embriões em estágios mais tardios do desenvolvimento parece apresentar resultados satisfatórios. Com o objetivo de melhor testar a sobrevivência e o desenvolvimento de embriões, os mesmos foram criopreservados e descongelados em estadio de mórula ou blastocisto e deixados em cultura para que pudesse ser avaliada sua evolução natural. Dos 2 blastocistos e 5 mórulas congelados, 4 mórulas sobreviveram ao descongelamento, tendo sido transferid (mais) as em estadio de blastocisto, 24 horas depois. A transferência, realizada em paciente jovem, segundo casamento de homem vasectomizado há dez anos, resultou em gestação gemelar. O descongelamento de embriões em estadio de mórula e a observação in vitro da retomada de seu desenvolvimento até o estadio de blastocisto fornecem um parâmetro adicional na avaliação da qualidade do embrião e, provavelmente, melhore as taxas de gravidez. Resumo em inglês The cryopreservation of embryos in late developing stages seems to present satisfactory results. With the purpose of better testing the embryos' survival, they were cryopreserved in the morula or blastocyst stage, thawed and left in culture for 24 hours so that their natural evolution could be observed. Amongst the frozen 2 blastocysts and 5 morulas, 4 morulas survived the thawing process, being transferred as blastocysts 24 hours later. The transfer was performed in a yo (mais) ung patient, second marriage of a ten-year vasectomized man and resulted in twin pregnancy. Thawing morula embryos and the in vitro observation of their development resumption until the blastocyst stage give us an additional parameter in the quality evaluation of the embryo and probably an improvement in pregnancy rates.

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Morfologia e desenvolvimento ultraestrutural do sistema renal de embriões bovinos com idade gestacional entre 10 e 50 dias/ Morphology and ultrastructural development of renal system in bovine embryos with gestational age between 10 and 50 days

Cagnoto, Daniela Gomes; Guerra, Ricardo Romão; Alberto, Miryan Vila; Ambrósio, Carlos Eduardo; Santos, José Manuel; Miglino, Maria Angélica
2009-10-01

Resumo em português O presente estudo teve como objetivo descrever o desenvolvimento dos sistemas renais de bovinos durante o período embrionário compreendido entre 10 e 50 dias. Embriões bovinos coletados em frigorífico foram fotografados e medidos utilizando-se o método Crow-Rump (CR) para estimar a idade gestacional. Os embriões destinados à miscroscopia óptica foram fixados em solução de Bouin para a avaliação do desenvolvimento do sistema renal, assim como suas estruturas. A (mais) lguns embriões também foram fixados em Glutaraldeído 2,5% e destinados à microscopia eletrônica de transmissão para o estudo ultraestrutural das células do sistema renal. Embriões entre o 14° e o 15° dia de desenvolvimento (E14-15) não apresentaram pronefro, mas apresentaram mesonefro, assim como indícios morfológicos que indicam sua atividade funcional. O mesonefro apresentou, no interior de suas células tubulares, inúmeras mitocôndrias e interdigitações, indicando uma alta atividade de transporte iônico. O metanefro, ou rim definitivo, iniciou seu desenvolvimento em E23-24. Os achados emonstram que a involução do mesonefro acontece simultaneamente com a diferenciação metanefrogênica. Em E45-46, já iniciando a fase fetal, o metanefro possuiu unidades filtradoras (néfrons), com seus respectivos glomérulos, túbulos contorcidos proximais e distais e alça de Henle. Nessa fase, o rim ainda não apresenta lobação externa. Resumo em inglês The aim of this study was to describe the bovine renal system development, during the early embryonic period (10-50 days). Bovine embryos collected in abattoir were photographed and measured by Crow-Rump (CR) method to estimate the gestational age. The embryos destined to optical microscopy were fixed in Bouin solution for development evaluations of renal system, as well as its structures. Some embryos also were fixed in Glutaraldeheyde 2.5% and destined to transmission e (mais) lectron microscopy for ultrastructural study of renal system cells. In bovine embryos with gestational age of 14 to 15 days (E14-15) the presence of pronephro were not observed, however the mesonephro was found, as well as morphologic indications of it is functional activity. Mesonephro presented, in the interior of its tubular cells, innumerable mitochondrias and interdigitations, indicating high activity of ionic transportation. The metanephro, or definitive kidney, initiates its development in E23-24. The study demonstrated that the involution of mesonephro happened simultaneously with the metanephrogenic differentiation. In E45-46, the embryos already initiated the fetal phase, and the metanephro possess the filter units (nephrons), with its respective glomeruli, proximal and distal convoluted tubules, and the loop of Henle.

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Doação e adoção como políticas para salvar os embriões humanos excedentes e congelados/ Donation and adoption as ways of saving excess frozen human embryos

Pereira, Gerson Odilon; Pacifico, Andrea Pacheco
2010-12-01

Resumo em português Este artigo trata da divergência científica existente com relação à sobra de embriões congelados, particularmente entre a biologia, a religião, o direito e a bioética, e focando especialmente nos meios e nas formas com que cada uma dessas ciências caracteriza o início da vida. É objetivo dos autores, ainda, fornecer alternativas para a proteção do embrião humano, como a adoção por casais ou apenas por mulheres que, por razões médicas, não podem ser fert (mais) ilizadas, mas que podem gestar. Em se tratando de Brasil, os autores concluem ser legal e legítimo a doação e a adoção de embrião humano para fertilização, desde que sejam considerados o princípio da dignidade da pessoa humana e mantido o sigilo sobre a identidade dos doadores de gametas, cujos dados devem permanecer registrados de forma permanente no centro onde ocorreu a fertilização. Resumo em inglês This article deals with the existing scientific divergence with regard to the surplus of frozen embryos, especially between biology, religion, the law and bioethics, with a specific focus on the ways in which each of these areas determines the onset of life. The aim of the authors is to suggest alternatives that protect the human embryo, such as adoption by couples or by single women, who, for medical reasons, are infertile, but are capable of bearing a child. In the case (mais) of Brazil, the authors conclude that it is legal and legitimate to donate and adopt human embryos for fertilization, so long as the principle of human dignity is upheld and confidentiality maintained regarding the identity of the donors of the gametes, whose data should remain on file permanently at the center where fertilization occurred.

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Efeito do citrato e taurina em meio CR2aa no desenvolvimento de embriões bovinos fecundados in vitro/ Effect of citrate and taurine added to CR2aa medium on the development of in vitro-fertilized bovine embryos

Camargo, L.S.A.; Sá, W.F.; Viana, J.H.M.; Ramos, A.A.; Ferreira, A.M.
2009-02-01

Resumo em português Avaliou-se o efeito do citrato em meio CR2aa suplementado com soro fetal bovino (SFB) ou livre de proteínas séricas e sua associação com taurina no desenvolvimento de embriões bovinos fecundados in vitro. Embriões foram cultivados em CR2aa contendo 0, 0,5, 1,0 e 3,0mM citrato, suplementado com 10% SFB (experimento 1) ou com álcool polivinil (PVA; experimento 2). No terceiro experimento, embriões foram cultivados em meio com 0,5mM citrato, ou 7mM taurina, ou com a (mais) associação de ambos, suplementado com SFB. Os cultivos foram realizados com células do cumulus em ambiente a 38,8ºC com 5% de CO2 em ar atmosférico. Melhora no desenvolvimento embrionário foi observado no cultivo de embriões em CR2aa com 0,5 e 1,0mM citrato na ausência de SFB (P0,05) a produção de embriões ou o número de células. Citrato em meio CR2aa pode ser uma alternativa para cultivo embrionário em condições atmosféricas com 5% de CO2 em ar na ausência de proteína sérica. Resumo em inglês The effect of citrate added to CR2aa medium supplemented with fetal calf serum (FCS) or serum-proteinfree and its association with taurine on the development of in vitro-fertilized bovine embryos was evaluated. Embryos were cultured with 0, 0.5, 1.0, and 3.0mM citrate, in CR2aa supplemented with 10% FCS (experiment 1), or polyvinyl alcohol (PVA; experiment 2). In experiment 3, embryos were cultured with 0.5mM citrate, 7.0mM taurine or with association of both, in medium s (mais) upplemented with FCS. Embryo culture was performed with cumulus cells at 38.8ºC in 5% CO2 under air for all experiments. Positive effect on embryo development was only observed with 0.5 and 1.0mM citrate in FCS-free CR2aa (P0.05) embryo rate nor total cell number. Citrate in CR2aa medium can be an alternative for serumfree embryo culture under 5% CO2 in air, absence of serum protein.

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Diferentes suplementos no cultivo in vitro de embriões de pinhão-manso/ Different supplements for in vitro embryo culture of physic nut

Nunes, Claudinéia Ferreira; Pasqual, Moacir; Santos, Dalilhia Nazaré dos; Custódio, Telde Natel; Araujo, Aparecida Gomes de
2008-01-01

Resumo em português O objetivo deste trabalho foi avaliar a influência do estádio de maturação dos frutos, no desenvolvimento de embriões de pinhão-manso (Jatropha curcas), cultivados em meio MS com diferentes suplementos: sacarose, água de coco e carvão ativado. Os frutos foram coletados, e os embriões de suas sementes extraídos assepticamente. Utilizaram-se duas condições experimentais: embriões oriundos de frutos em três estádios de desenvolvimento (imaturo, maduro e seco), (mais) colocados em meio de cultivo MS acrescido de sacarose (0, 15, 30 e 60 g L-1); embriões oriundos de frutos secos, colocados em meio MS acrescido de: 30 g L-1de sacarose, carvão ativado (0, 1, 2 e 3 g L-1) e de água de coco (0, 50, 100, 150, 200 e 250 mL L-1). O material foi mantido por 30 dias em sala de crescimento, sob condições ambientais controladas. Apenas os embriões zigóticos provenientes de frutos imaturos necessitam da suplementação de sacarose para sustentar sua germinação. O melhor desenvolvimento de embriões ocorre em meio MS suplementado com 60 g L-1 de sacarose. A associação de carvão ativado e água de coco proporcionam melhor crescimento de plântulas oriundas de embriões de sementes retiradas de frutos secos. Resumo em inglês The objective of this work was to evaluate the influence of maturation stages of physic nut fruits on the development of their embryos cultivated in MS medium supplemented with sucrose, coconut water and activated carbon. Fruits were collected, and their embryos were extracted aseptically. They were submitted to two experimental conditions: embryos from fruits in three development stages (immature, mature and dry) were put into MS medium, supplemented with sucrose (0, 15, (mais) 30 and 60 g L-1); embryos derived from dry fruits were put into MS medium supplemented with sucrose 30 g L-1, activated carbon (0, 1, 2 and 3 g L-1), and coconut water (0, 50, 100, 150, 200 e 250 mL L-1). Explants were kept in a growth chamber under controlled conditions during 30 days. Only the zygotic embryos from immature fruits needed sucrose supplementation in the culture medium to sustain germination. Better embryos development occurs in MS medium supplemented with 60 g L-1 of sucrose. The association of activated carbon and coconut water provides better growth of seedlings derived from embryos extracted from seeds of dry fruits.

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Análise de sistemas gene marcador/ agente seletivo alternativos para seleção positiva de embriões somáticos transgênicos de mamoeiro/ Analysis of marker gene/ selective agent systems alternatives to positive selection of transgenic papaya (Carica papaya L.) Somatic embryos

SOUZA JÚNIOR, M. T.; VENTUROLI, M. F.; COELHO, M. C. F.; RECH FILHO, E. L.
2001-01-01

Resumo em português Questões relacionadas à biossegurança de organismos geneticamente modificados e à percepção pública destes têm levado as instituições envolvidas no desenvolvimento comercial de plantas transgênicas a abandonarem o uso de genes marcadores que conferem resistência a antibióticos. O desenvolvimento de mamoeiros (Carica papaya L.) transgênicos tem sido baseado, até o momento, no uso de um único gene marcador, o gene npt II, que confere resistência a antibiót (mais) icos como canamicina e neomicina. O presente estudo objetivou avaliar os sistemas alternativos manA/ manose e bar/ PPT como sistemas gene marcador/ agente seletivo para a variedade ‘Sunrise’ de mamoeiro. O desenvolvimento de embriões somáticos secundários a partir de embriões primários foi avaliado em meio de indução de embriogênese suplementado com manose e/ou sacarose. Concentrações variando entre 0,1 e 120 g/l de manose foram testadas como única fonte de carbono, ou em combinação com sacarose. O desenvolvimento de embriões somáticos secundários a partir dos primários em meio suplementado com até 120 g.L-1 de manose, como única fonte de carbono, demonstrou que este sistema não é passível de uso no desenvolvimento de mamoeiros transgênicos. Quanto ao sistema bar/ PPT, avaliou-se o desenvolvimento de embriões somáticos primários e secundários em meio suplementado com concentrações de PPT variando de zero a 150 miM. Não foi observado desenvolvimento de embriões em meio suplementado com concentração igual ou superior a 125 miM, o que sugere o uso desta concentração para a seleção de embriões transgênicos de mamoeiro. Resumo em inglês Questions relative to biosafety and public perception of genetically modified organisms have taken those involved on the development of transgenic plants to a phase out on the use of antibiotic resistance marker genes. The development of transgenic papayas (Carica papaya L.) has been based so far on the use of one only marker gene, the npt II gene, which confers resistance to antibiotics such as kanamycin and neomycin. The present study aimed to evaluate the systems manA/ (mais) mannose and bar/ PPT as alternatives marker gene/ selective agent systems to be used on the development of transgenic ‘Sunrise’ papayas. Therefore, the development of secondary somatic embryos from primary ones was evaluated on embryogenesis induction medium supplemented with mannose and/or sucrose. Mannose concentration ranging from 0.1 to 120 g.L-1 were tested as sole carbon source, or in conjunction with sucrose. The development of secondary somatic embryos on medium supplement with up to 120 g/l, as sole carbon source, demonstrated that this system is not applicable for the development of transgenic papayas. When evaluating the bar/ PPT system, the development of primary and secondary somatic embryos was checked for on medium supplement with zero to 150 muM of PPT. No somatic embryos developed on medium supplemented with PPT at 125 muM or more, what suggests the use of this concentration for the in vitro selection of transgenic papaya embryos.

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Efeito da sacarose, cinetina, isopentenil adenina e zeatina no desenvolvimento de embriões de Heliconia rostrata in vitro/ Effect of sucrose, kinetin, isopentenyl adenine and zeatin on the development of embryos of Heliconia rostrata in vitro

Torres, Antonio Carlos; Duval, Fernanda D.; Ribeiro, Dalva G.; Barros, Ana Flavia F.; Aragão, Fernando A.D.
2005-07-01

Resumo em português Embriões provenientes de frutos maturos de Heliconia rostrata Ruiz & Pavon foram excisados e inoculados em meio de cultura contendo os sais básicos MS, vitaminas e sacarose. A adição de sacarose foi essencial para o desenvolvimento dos embriões. Em meio desprovido de sacarose os embriões morreram em cultura. Concentrações de 1%, 2% e 3% (p/v) de sacarose favoreceram o desenvolvimento dos embriões. Concentrações de 6%, 9% e 12% (p/v) de sacarose inibiram o cresc (mais) imento dos embriões. A adição de cinetina, isopentenil adenina e zeatina não favoreceram o crescimento e o desenvolvimento dos embriões. Resumo em inglês Embryos from mature fruits of Heliconia rostrata were excised and cultured in basal medium containing MS salts, vitamins and sucrose. Sucrose was essential for embryo development. In meclium without sucrose the embryos died in culture. Sucrose concentrations of 1%, 2% and 3% (w/v) were beneficial for embryo development. Sucrose concentrations of 6%, 9% and 12% (w/v) inhibited embryo growth. The addition of kinetin, isopentenyl adenine and zeatin did not improve embryo growth and development.

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Efeito do estradiol e da progesterona no desenvolvimento e na qualidade de embriões bovinos produzidos in vitro/ Effect of estradiol and progesterone on development and quality of bovine embryos produced in vitro

Reis, A.N; Silva, L.K.X; Silva, A.O.A; Sousa, J.S; Vale, W.G
2010-12-01

Resumo em português Avaliaram-se o desenvolvimento e a qualidade de embriões bovinos, cocultivados com células epiteliais do oviduto bovino (CEOBs) expostas ou não ao estradiol e à progesterona. Os ovócitos foram maturados in vitro por 24h e, então, fertilizados utilizando-se sêmen congelado, em estufa de CO2 a 5% e 38,5ºC. As CEOBs foram cultivadas em TCM-199 com ou sem estradiol (E2) (24 horas), nas mesmas condições da maturação e fertilização in vitro (MIV e FIV), e, em segu (mais) ida, adicionadas aos diferentes grupos em CR2 com ou sem progesterona (P4) (G1=P4+E2); (G2=E2); (G3=P4) e (G4=controle). Após 18h da FIV, as células foram cultivadas nos diferentes sistemas. Nenhuma diferença (P>0,05) foi observada nas taxas de clivagem entre G1, G2 e G4 (53,5%; 56,3%; 51,7%) e nos padrões de blastocistos (BLs) (29,3%; 31,2%, 28,7%). Índices menores (P Resumo em inglês The development and quality of bovine embryos co-cultivated with bovine oviduct epithelial cells (BOEC) supplemented or not with estradiol and progesterone were evaluated. Oocytes were matured and fertilized in vitro (MIV/FIV) (5%CO2/38.5ºC). The BOEC were cultivated in TCM-199 with or without estradiol (E2) (24h), in the same conditions of MIV/FIV. Presumptive zygotes were transferred to BOEC in suspension after in vitro maturation and fertilization of bovine oocytes wi (mais) th thawed percoll-selected sperm. The zygotes were cultivated in CR2 medium containing or not progesterone (P4) (G1=P4+E2), (G2=E2), (G3=P4), and (G4=control). No significant differences (P>0.05) were found in the cleavage rates among G1, G2, and G4 (53.5%, 56.3%, and 51.7%) as well as in relation to the blastocystis (BL) rates (29.3%, 31.2%, and 28.7%). However, significant differences (P

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Nitrato de amônio e nitrato de potássio no desenvolvimento in vitro de embriões somáticos de pupunheiras/ Ammonium nitrate and potassium nitrate on in vitro peach palm somatic embryos development

Santos, Thaís Lobo dos; Almeida, Cristina Vieira de; Brondani, Gilvano Ebling; Almeida, Marcílio de
2010-07-01

Resumo em português A pupunheira tem se mostrado boa alternativa à exploração extrativista de espécies como juçara e açaí. Porém, quando produzida via sementes apresenta plantio heterogêneo, o que torna a micropropagação ótima alternativa para seu cultivo em larga escala. O experimento objetivou avaliar a influência da interação entre nitrato de amônio e nitrato de potássio no enraizamento de microplantas obtidas a partir do desenvolvimento in vitro de embriões somáticos d (mais) e pupunheiras, visando otimizar seu protocolo de micropropagação. Os embriões foram inoculados em meio MS com diferentes concentrações de NH4NO3 e KNO3. Aos 120 e 240 dias de cultivo, foram avaliados parâmetros morfofisiológicos do desenvolvimento radicular. Aos 120 dias, nas concentrações mais baixas de nitrogênio, houve estímulo ao crescimento das raízes e a maior ramificação radicular ocorreu com baixas concentrações de NH4NO3 e altas de KNO3. Aos 240 dias, notou-se redução do crescimento radicular e raízes finas prevalecentes. Conclui-se que até 120 dias as microplantas devem ser mantidas em meio com concentrações menores de NH4NO3 e maiores de KNO3 que as empregadas no meio MS, voltando para as concentrações usuais após esse período. Resumo em inglês Pejibaye is a good alternative for the extractive exploration of species such as juçara and açaí. However, when it is produced by seeds its planting is heterogeneous, which makes micropropagation a good alternative for cultivation in large scale. This study aimed to evaluate the influence of the interaction between ammonium nitrate and potassium nitrate on peach palm somatic embryos rooting in vitro cultivated, for optimization of the micropropagation protocol. The emb (mais) ryos were inoculated in MS medium with different concentrations of NH4NO3 and KNO3. Morphophisyologic parameters of root development were measured at 120 and 240 days of cultivation. At 120 days, at lower nitrogen concentrations, roots were stimulated to grow and major root branching occurred at low concentrations of NH4NO3 and high concentrations of KNO3. At 240 days, there was a reduction of the root growing, with more percentage of thin roots. It was concluded that up to 120 days, the microplants should be cultivated in culture medium with lower concentrations of NH4NO3 and higher concentrations of KNO3 than those recommended by MS medium, and after this period they should be cultivated at the recommended doses.

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Micropropagação de plântulas de erva-mate obtidas de embriões zigóticos/ Micropropagation of holly plantlets obtained from zygotic embryos

Horbach, Micheli Angélica; Bisognin, Dilson Antônio; Kielse, Paula; Quadros, Kenia Michele de; Fick, Tiago Antonio
2011-01-01

Resumo em português O objetivo deste trabalho foi avaliar o potencial de micropropagação de erva-mate (Ilex paraguariensis Saint Hilaire) a partir de plântulas assépticas oriundas de embriões zigóticos imaturos. Ápices caulinares foram inoculados em meio base, formado por ¼ da concentração dos sais do meio MS, com diferentes doses de 6-benzilaminopurina (BAP). Ápices caulinares foram enraizados em meio base com diferentes doses de ácido indolbutírico (AIB) e avaliado o efe (mais) ito do AIB do meio de enraizamento in vitro na aclimatização das plantas. O meio base com 8,88µM de BAP foi o mais efetivo para a multiplicação, promovendo o maior número e comprimento de brotações adventícias. Ápices caulinares enraizaram em 30 dias de cultivo em meio base, acrescido de 7,38µM de AIB. A dose de AIB utilizada no enraizamento in vitro interfere na aclimatização das plantas. A técnica de micropropagação descrita pode ser utilizada para a produção massal de plantas de erva-mate. Resumo em inglês The aim of this research was to evaluate the micropropagation potential of holly (Ilex paraguariensis Saint Hilaire) aseptic plantlets derived from immature zygotic embryos. Shoot tip were inoculated in a quarter-strength MS basal medium with different doses of 6-benzylaminopurine (BAP) to induce multiple shoots. Shoot tips were inoculated in a basal medium with different doses of indol-butiric acid (IBA) for in vitro rooting and to test their effects in plantlet acclimat (mais) ization. The addition of 8.88µM BAP to the basal medium increased the number of adventitious shoots and shoot height. Shoot tip rooted in basal medium with 7.38µM IBA in 30 days of culture. The IBA doses of the rooting medium affect plantlet acclimatization. The described micropropagation protocol might be used to produce a high number of holly plants.

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Desempenho de diferentes estádios embrionários no cultivo in vitro de embriões de 'Pêra Rio' x 'Poncã'/ Perfomance of different embryo stage of sweet orange x mandarin cultivated in vitro

Chagas, Edvan Alves; Pasqual, Moacir; Dutra, Leonardo Ferreira; Silva, Adriano Bortolotti da; Cazetta, Jairo Osvaldo; Santos, Flávia Carvalho; Cardoso, Pollyana
2003-12-01

Resumo em português Objetivou-se verificar qual o melhor estádio embrionário para o cultivo de embriões imaturos oriundos de frutos provenientes de hibridação entre 'Pêra Rio' x 'Poncã' , bem como o efeito de diferentes concentrações do meio de cultura MT. Os embriões em diferentes estádios de desenvolvimento (globulares, torpedo e cordiforme) foram excisados e inoculados em tubos de ensaio contendo 15 mL do meio MT com diferentes concentrações (0; 50; 100 e 150% da composição (mais) original e acrescido de 50 g.L-1 de sacarose). Após a inoculação, os embriões foram incubados à 27±1ºC, fotoperíodo de 16 horas e irradiância de 32 mmol.m-2.s-1. Após 90 dias, avaliou-se o comprimento da parte aérea e do sistema radicular, massa fresca e número de folhas das plântulas. Melhor desenvolvimento dos embriões imaturos foi obtido em estádio cotiledonar e com a concentração de 150% do meio MT. Resumo em inglês Embryos obtained from Citrus sinensis Osbeck 'Pêra Rio' x Citrus reticulata Blanco 'Poncã' crossings were excised in diverse phases of development and cultivated in different medium concentrations. Embryos in globular, torped and cotiledonary stage were excised and inoculated individually in test tubes with 15 mL in distinct MT medium concentrations (0; 50; 100 and 150% of original composition and added sucrose (50 g.L-1). After inoculation, the embryos were maintained (mais) in growth room at 27±1ºC, 16 hour photoperiod and 32 umol.m-2.s-1 irradiance. After 90 days, the length of the aerial part and roots system, fresh mass and number of leaves, were evaluated. The best results were obtained by incubating embryos in the cotiledonary stage, in MT medium with concentrations of 150%.

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Efeito de diferentes meios de cultivo no desenvolvimento e proporção do sexo de embriões bovinos produzidos in vitro/ Effect of different culture media on development and sex ratio of bovine embryos fertilized in vitro

Gilardi, S.G.T.; Sá, W.F.; Camargo, L.S.A.; Ferreira, A.M.; Machado, M.A.; Serapião, R.V.; Soares, A.B.M.; Pinho, T.G.; Viana, J.H.M.
2004-10-01

Resumo em português Avaliou-se o efeito da suplementação de meios de cultivo sobre o desenvolvimento e proporção do sexo de embriões bovinos fertilizados in vitro. Complexos cumulus-oócitos obtidos de ovários de matadouro foram maturados e fertilizados in vitro. Os zigotos (n= 484) foram distribuídos aleatoriamente em meio CR2aa, contendo soro fetal bovino (SFB) (T1), albumina sérica bovina (BSA) (T2) ou BSA mais insulina:transferrina:selênio e vitaminas (BSA+) (T3), no cultivo emb (mais) rionário in vitro, a uma atmosfera de 5% CO2 a 38,8ºC em ar. A taxa de clivagem foi observada 72-76 horas pós-fertilização (PF) e a taxa de blastocistos com sete e oito dias PF. Os blastocistos (n= 63) foram sexados pela técnica de reação em cadeia de polimerase. A taxa de clivagem em T2 foi maior (P0,05) entre T2 e T3, porém menor (P0,05) entre os tratamentos. O T1 influenciou o desenvolvimento de blastocistos, mas não teve efeito sobre a proporção do sexo. Resumo em inglês The effect of culture media on the development and on the sex ratio of bovine embryos fertilized in vitro was studied. Cumulus oocyte-complexes from slaughterhouse ovaries were matured and fertilized in vitro. Zygotes (n= 484) were randomly allotted to different culture media and cultured with their cumulus cells in CR2aa medium and an atmosphere of 5% CO2 in air at 38.8ºC. The fetal calf serum (FCS), bovine seric albumin (BSA) or BSA plus insulin:transferrin:selenium an (mais) d vitamins (BSA+) supplementation effect on embryo culture was evaluated. Cleavage rate was assessed at 72-76h post-fertilization (PF) and blastocyst rate on days 7 and 8 PF. The blastocysts (n= 63) were also sexed using polymerase chain reaction. Cleavage rate for BSA medium supplemented was higher (P0.05), but lower (P

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Simulação e análise econômica da produção in vivo e in vitro de embriões em bovinos/ Simulation and economic analysis of in vivo and in vitro bovine embryo production

Beltrame, Renato Travassos; Quirino, Celia Raquel; Barioni, Luis Gustavo; Lima, Vera Fernanda Martins Hossepian de
2010-12-01

Resumo em português O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito das variáveis número de receptoras, protocolo de sincronização, indicadores de eficiência reprodutiva e custo da prenhez na eficiência econômica da produção in vivo e in vitro de embriões, em bovinos. Elaborou-se um aplicativo de simulação que permite ao usuário inserir os parâmetros das variáveis de entrada. Um cenário base, originado a partir de taxas tradicionais de eficiência das técnicas de produção i (mais) n vivo (TE) e in vitro (PIVE) de embriões bovinos, foi introduzido no aplicativo de simulação como critério para comparação dos resultados. O aplicativo desenvolvido foi capaz de reproduzir os cenários de TE e PIVE. A produção de embriões foi simulada com o uso de simulação estocástica. Posteriormente determinou-se o número ótimo de receptoras por análise de sensibilidade. O valor presente líquido e o custo por prenhez foram utilizados como parâmetros de decisão. A sincronização para inovulação em tempo fixo reduziu a ociosidade de receptoras e, consequentemente, o custo final da prenhez em comparação à metodologia tradicional. A sexagem fetal deve estar associada à produção in vivo de embriões bovinos. Além disso, o número ótimo de receptoras por doadora é variável e dependente dos parâmetros de entrada do sistema. Resumo em inglês The objective of this work was to evaluate the effect of the variables number of recipients, synchronization protocol, reproductive efficiency indicators and pregnancy cost, in the economic effectiveness of in vivo and in vitro bovine embryo production. A simulation application was elaborated to allow the user to insert the input variable parameters. A basic scenario, from the efficiency traditional rates of in vivo (ET) and in vitro production (IVP) techniques of bovine (mais) embryos, was introduced in the software as a criterion to compare the results. This software was able to reproduce both ET and IVP scenarios. The embryo production was simulated through stochastic simulation. The optimal number of recipients using sensitivity analysis was determined. The net present value and cost per pregnancy were used as a decision parameter. The synchronization for fixed-time embryo transfer decreased the recipient idleness and, consequently, the final cost of pregnancy, in comparison to the traditional methodology. Foetal sexing must be associated to IVP of bovine embryos. In addition, the optimal recipient number per donor is variable and depends on data inserted in the system.

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Avanços metodológicos na produção in vitro de embriões/ Methodological advances on in vitro embryo production

Rumpf, Rodolfo
2007-07-01

Resumo em português O desenvolvimento da metodologia de produção in vitro de embriões (PIV) para maximizar o ganho genético e a produção animal a um custo baixo é um desafio de pesquisa científica há vários anos. A possibilidade de produzir, em escala comercial, embriões a partir de oócitos puncionados dos folículos ovarianos pode aumentar os benefícios do uso da inseminação artificial devido ao seu decisivo papel no aumento do progresso genético entre gerações de acordo c (mais) om as necessidades de cada programa de melhoramento genético ou produção animal. Diferentes rotas tecnológicas foram desenvolvidas a partir da PIV em espécies de interesse zootécnico ou espécies ameaçadas de extinção. Resumo em inglês The development of in vitro embryo production (IVP) methodology to maximize genetic gain and animal production at lower cost is a challenge of the research and it has been studied for many years. The possibility to produce, in commercial scale, embryos from ovum pick up methodology may increase the benefits of the use of artificial insemination (AI) for its decisive role to maximize the genetic progress between generations, according to the requirements of each genetic im (mais) provement program and livestock capacity. Different technological routes are associated to IVP, both for zootechnical interest species and for endangered species.

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Efeito de diferentes níveis de ingestão de energia sobre a produção e viabilidade de embriões em novilhas e vacas/ Effect of different levels of energy intake on production and viability of embryos in heifers and cows

Rigolon, Luiz Paulo; Prado, Ivanor Nunes do; Cavalieri, Fábio Luiz Bim; Nascimento, Willian Gonçalves do; Negrão, João Alberto
2003-12-01

Resumo em português O objetivo do trabalho foi estudar o efeito do nível de ingestão de matéria seca (IMS/% do PV) sobre ganho de peso, produção e viabilidade de embriões em novilhas mestiças e vacas Nelore. No primeiro experimento foram utilizadas 27 novilhas cruzadas ( ½ Nelore x ½ Simental) distribuídas em três tratamentos e nove repetições: 1,2; 1,6 e 2,6% de IMS/dia em relação ao peso vivo, respectivamente. Os animais foram submetidas à superovulação com FSH e a coleta (mais) dos embriões realizada sete dias após a inseminação artificial, através de lavagem uterina. Este procedimento foi repetido por mais duas vezes com intervalos de 45 dias. No segundo experimento foram usadas 21 vacas Nelore de três anos, distribuídas em três tratamentos: 1,0; 1,8 e 2,6% de IMS em relação ao peso vivo. Após 30 dias os animais foram sincronizados com implante auricular de norgestomet e superovulados com FSH, sendo a coleta dos embriões realizada sete dias após a inseminação artificial, através de lavagem uterina. O peso vivo final, ganho médio diário e peso de carcaça foram maiores para os animais alimentados com 2,6% de IMS. O nível de IMS e o período de coleta não tiveram influência sobre o número de corpos lúteos, número de estruturas totais transferíveis e degeneradas e ovócitos, tanto para novilhas como para vacas. Resumo em inglês This work was carried out to study the effect of dry matter feed intake level (DMI/% BW), weight gain, production and viability of embryos in cross-breed heifers so does production and viability of embryonic structures in Nellore cows. During the first trial, 27 cross-breed (½ Nelore x ½ Simental) heifers were used divided in 3 treatments and 9 replications: 1.2%; 1.6% and 2.6% of DMI/day in relation to body weight, respectively. The heifers were synchronized and after (mais) nine days these animals were superovulated using FSH. The embryos were collected seven days after the artificial insemination by uterus flushing. This procedure was repeated twice with intervals of 45 days. In the second trial, 21 Nellore cows of 3 years old were used. The cows were divided in 3 treatments: 1.0; 1.8 and 2.6% of DMI according to body weight. After 30 days, the cows were synchronized with norgestomet implant and superovulated with FSH. The embryos were collected seven days after artificial insemination by uterus flushing. The final body weight, average daily gain and carcass weight were superior for cows fed 2.6% of DMI. On the other hand, the DMI levels and collect period did not influence on corpus luteum number nor on total, transferable and degenerated numbers of structures and not fertilized oocites for heifers and the cows.

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Análise multivariada de resultados da ovulação múltipla seguida de transferência de embriões de doadoras zebuínas/ Multivariate analysis of multiple ovulation followed by embryo transfer results from zebu donors

Peixoto, M.G.C.D.; Fonseca, C.G.; Penna, V.M.; Alvim, M.T.T.
2002-10-01

Resumo em português Resultados de 1390 ovulações múltiplas seguidas de transferência de embriões foram submetidas à análise multivariada para estudo da relação entre algumas variáveis envolvidas no processo. As superovulações foram realizadas no período de 1989 a 1999 em várias doadoras zebuínas das raças Brahman (31), Gir (22), Guzerá (68) e Nelore (411), provenientes de 61 rebanhos de diversas regiões do Brasil. As doadoras tinham idades entre 1,5 e 19,5 anos. Analisaram- (mais) se apenas dados de primeira colheita e dados de colheitas consecutivas. As principais correlações encontradas com a análise de ambos os arquivos pelo método de Pearson foram de: 0,72 entre o total de estruturas recuperadas (ER) e o número de embriões viáveis (EV); 0,66 entre ER e o total de prenhezes positivas (PP); 0,53 entre ER e o número de corpos lúteos palpados (CL); 0,89 entre EV e PP; 0,33 entre EV e CL; e 0,30 entre PP e CL. Observou-se associação entre coeficiente de endogamia, idade das doadoras à superovulação, droga estimuladora, dose da droga estimuladora, ordem de colheita e número de inseminações. Foram estimados os seguintes fatores nas análises de colheitas consecutivas: fator 1 - que reduz a resposta à superovulação, fator 2 - que define os esquemas de superovulação de doadoras e fator 3 - que define o sucesso do esquema de superovulação. Com os dados de primeira colheita foram obtidos: fator 1 - que define a idade ótima à superovulação, fator 2 - que define os esquemas de superovulação de doadoras e fator 3 - que define esquema alternativo de superovulação. As análises indicaram que os resultados de superovulação são muito variáveis e que há grande efeito da idade da doadora à superovulação, do coeficiente de endogamia da doadora, da ordem de colheita, da dose da droga e do número de inseminações sobre esses resultados. O número de embriões viáveis por superovulação e a correlação entre número de embriões viáveis e total de prenhezes positivas podem ser indicadores da eficiência do MOET. Resumo em inglês Data on 1390 Zebu donors multiple ovulation followed by embryo transfer results were analyzed. The donors came from different regions of Brazil and belonged to Brahman (31), Gir (22), Guzerá (68) and Nelore (411) breeds. The age of donors ranged from 1.5 to 19.5 years old. The first recovery data and consecutive recovery data were submitted to multivariate analysis. The estimated Pearson correlation coefficients were: 0.72 between total recovered structures (ER) and numb (mais) er of viable embryos (EV); 0.66 between ER and total of positive pregnant receptors (PP); 0.53 between ER and number of palpated corpora luteum; 0.89 between EV and PP; 0.33 between EV and CL and 0.30 between PP and CL. Relationships among inbreeding coefficient, age of donors to superovulation, stimulating drug, drug dosage, recovery number and number of executed insemination were also observed. Factor analysis indicated the following factors for consecutive recoveries: factor 1 - factors that reduce superovulation response, factor 2 - superovulation scheme according to characteristics of donors, factor 3 - success of superovulation scheme. For first recovery analysis the following factors were designated: factor 1 - optimum age for superovulation, factor 2 - superovulation scheme according to characteristics of donors, and factor 3 - alternative superovulation scheme. The analysis also indicated the results of superovulation are quite variable and that the age of donors to superovulation, inbreeding coefficient of donors, recovery number, drug dosage and number of inseminations have high effect on the results. The number of viable embryos and the correlation between number of viable embryos and total of positive pregnant receptors can be indicators of MOET success.

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Efeito do ibuprofeno administrado uma hora antes da inovulação de embriões bovinos/ Effect of ibuprofen administered one hour before the bovine embryo transfer

Narváez, H.J.; Fontes, R.S.; Costa, R.L.D.; Quirino, C.R.; Moreira, L.Z.
2010-06-01

Resumo em português Avaliou-se o efeito do ibuprofeno administrado uma hora antes da inovulação de embriões bovinos, com o objetivo de melhorar a taxa de prenhez. Após a avaliação da resposta ao protocolo de sincronização do estro, 76 fêmeas selecionadas como receptoras de embriões foram distribuídas em três grupos (G) experimentais: G1 (n=25) receptoras usadas como controle, G2 (n=30) receptoras que receberam ibuprofeno 5mg/kg, I.M, uma hora antes da inovulação dos embriões, (mais) e G3 (n=21) receptoras que receberam uma matriz polimérica de liberação controlada de ibuprofeno administrado por via subcutânea. As taxas de prenhez foram de 16% (4/25), 43,3% (13/30) e 14,2% (3/21), para G1, G2 e G3, respectivamente. Observou-se diferença (P Resumo em inglês The effect of the administered ibuprofen was evaluated one hour before the embryo transfer of bovine embryos in order to improve pregnancy rates. After evaluating the response to protocol synchronization of estrus, 76 Females selected as the recipients of embryos were distributed into three experimental groups: G1 (n = 25) surrogate cows used as control, G2 (n = 30) surrogate cows that received 5mg/kg ibuprofen, IM, one hour before the embryo transfer, and G3 (n = 20) sur (mais) rogate cows that received an array polymeric release of controlled ibuprofen subcutaneously administered. The pregnancy rates were 16% (4/25), 43.3% (13/30), and 14.2% (3/21) for G1, G2, and G3, respectively. There was statistical difference (P

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Uso da uréia como suplemento protéico na dieta de doadoras e receptoras de embriões bovinos/ Urea as a protein supplementation in the diet of bovine embryo donors and recipients

Barreto, Amílcar Gasperin; Louvandini, Hélder; Costa, Celso de Paula; McManus, Concepta; Rumpf, Rodolfo
2003-02-01

Resumo em português Doze doadoras de embriões Bos indicus da raça Nelore foram confinadas recebendo 25 kg de silagem de milho e 2,5 kg de três diferentes suplementos concentrados ao dia. O ingrediente protéico ofertado foi SOJA (S), SOJA+URÉIA (S+U) e URÉIA (U). Após período de 20 dias, as doadoras foram superovuladas e seus embriões colhidos e cultivados in vitro até eclosão. Não se observou diferença entre tratamentos com relação ao número total de estruturas colhidas (4,17 (mais) ; 8,42 e 7,00), número de embriões viáveis (2,25; 3,50 e 4,33), de ovócitos (1,42; 3,92 e 1,08) ou de estruturas degeneradas (0,5; 1,0 e 1,83), bem como na taxa de eclosão in vitro (81,48%; 78,57% e 84,62%) nos grupos S, S+U e U, respectivamente. As 66 receptoras de embriões foram mantidas em pasto de Braquiaria decumbens com 1,25 kg de suplemento concentrado dividido em três tratamentos semelhantes aos recebidos pelas doadoras. Após 37 dias, embriões foram descongelados e transferidos em grupos S, S+U e U. Não se observaram diferenças na taxa de gestação aos 30 dias (25; 28 e 28,57%) e aos 60 dias (16,67; 28 e 25%), nos grupos S, S+U e U, respectivamente. Tendo em vista que não foi observado efeito deletério na qualidade dos embriões, taxa de eclosão e fertilidade das receptoras, pode-se concluir que a uréia se mostrou como uma opção na substituição do farelo de soja em concentrados na suplementação de doadoras e receptoras de embriões. Resumo em inglês Twelve Bos indicus (Nellore) embryo donors were confined receiving 25 kg maize silage and 2.5 kg concentrate supplement per day. The proteic supplements used were SOYA (S), SOYA+UREA (S+U) and UREA (U). After 20 day, embryo donors were superovulated and their embryos collected and cultivated in vitro until eclosion. There was no significant statistical difference between the three groups in total number of structures collected (4.17, 8.42 and 7.00), number of viable embry (mais) os (2.25, 3.50 and 4.33), oocytes (1.42, 3.92 and 1.08) or degenerated embryos (0.5, 1.0 and 1.83), as well as in vitro eclosion rate (81.48, 78.57 and 84.62%), for the groups S, S+U and U, respectively. The 66 recipients were kept on Braquiaria decumbens pasture with 1.25kg of concentrate supplements for the S, S+U and U groups. Frozen embryos were thawed and transferred after 37 days. There was no significant statistical difference in pregnancy rates at 30 days (25, 28 and 28.57%), and 60 days of pregnancy (16.67, 28 and 25%). It may be concluded that urea can replace the soybean meal in concentrated rations for supplementation of bovine embryo donors and recipients since there were no negative effects in embryo quality, eclosion rate and recipient fertility.

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A bipartição como alternativa para melhorar os índices de gestação na transferência de embriões eqüinos/ The embryo splitting as an alternative to improve gestation indices from embryo transfer in horses

Silveira, Leonardo Luiz da; Souza, Regivaldo Vieira de; Melo, Natalie Soter Sousa; Pezzini, Tomaz Gelson; McManus, Concepta; Rumpf, Rodolfo
2005-04-01

Resumo em português A transferência de embriões (TE) já vem sendo utilizada em eqüinos há pelo menos duas décadas, sempre a partir de ovulação simples. Para aumentar a eficiência reprodutiva, este estudo avaliou a bipartição embrionária como uma alternativa para melhorar os índices de gestação na transferência de embriões em eqüinos. Foram utilizadas 21 éguas de diferentes padrões raciais, com idade variando entre 4 e 15 anos de idade, pesando entre 270 a 480kg. A partir (mais) da identificação do cio (rufiação), os animais foram monitorados através de exames ultra-sonográficos trans-retais até o momento da ovulação, sendo as receptoras, uma vez ao dia e as doadoras três vezes ao dia. As receptoras utilizadas ovularam um dia antes ou até três dias depois das doadoras. As doadoras foram coletadas entre 144 e 156 horas após a ovulação (D0). Foram recuperados 20 embriões (mórulas) em 29 coletas (68,96%), sendo que 10 embriões foram transferidos inteiros (T1), e 10 embriões foram bipartidos (T2), originando 20 hemi-embriões e transferidos para 20 receptoras. Não houve diferença na taxa de prenhez entre os grupos, T1, 70% (7/10), e T2, 50% (10/20) (P>0,05). Em relação ao número inicial de embriões em cada grupo (10), houve diferença na taxa de prenhez entre os grupos, T1, 70% (7/10) e T2, 100% (10/10) (P Resumo em inglês Embryo transfer (ET) has been used in horses for at least twenty years, always from a single ovulation. In order to increase reproductive efficiency this study evaluated embryo splitting as an alternative, to improve pregnancy rates in horse embryo transfer. Twenty-one mares of different genetic groups, aged between 4 and 15 yrs, and weighing 270 to 480kg were used. Estrus was identified using a teaser and the animals were monitored with transrectal ultrasonography exams (mais) until ovulation (donors were examined three times a day and recipients once a day). The recipients ovulated one day prior, or up to 3 days after, the donors. Donors were collected between 144 and 155 hours after ovulation. A total of 20 embryos (morulas) in 29 collections (68.96%) were recovered, 10 embryos were transferred intact (T1) and 10 split in two (T2), giving rise to 20 half-embryos, which were then transferred to 20 recipients. No differences in pregnancy rates were found between groups (T1: 70% (7/10) and T2: 50% (10/20) P>0.05). Looking at the original number of embryos, there was a significant difference in pregnancy rate (70% vs 100% for T1 and T2 respectively P

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Avaliação da utilização do "cio do potro" na coleta de embriões/ Evaluation of the foal heat for the embryo transfer

Carvalho, Giovanni Ribeiro de; Fonseca, Francisco Aloizio; Silva Filho, José Monteiro da; Ruas, José Reinaldo Mendes; Borges, Alan Maia
2001-10-01

Resumo em português Foram comparadas coletas de embriões de éguas paridas no "cio do potro" (n=19) com coletas de éguas solteiras (n=18). Não foram observadas diferenças entre os grupos nas taxas de recuperação de embriões (57,9 e 50,0%); no dia da coleta (idade do embrião), 7,84 e 7,66; na duração da coleta (8,63 e 9,00 minutos); na recuperação do meio de lavagem (1921 e 1934 mL); no tamanho do embrião com sete dias (0,42 e 0,44 mm); no tamanho do embrião com oito dias (1,11 (mais) e 1,66 mm); na condição do embrião (3,81 e 3,55); no intervalo do início do cio à ovulação (6,44 e 5,66 dias); e no diâmetro do folículo à ovulação (38,76 e 37,55 mm), para éguas paridas no "cio do potro" e solteiras, respectivamente. Houve diferença no número de cobrições por ciclo, que foi de 2,5 e 1,9 para o "cio do potro" e as éguas solteiras, respectivamente. Não houve diferenças entre os grupos nas concentrações de progesterona no dia da coleta. Resumo em inglês Embryos collections of foaling mares (n=19) and non-lactating mares (n=18) were compared. No differences were observed between treatments on embryo recovery rates (57.9% and 50.0%); on embryo age (7.84 and 7.86 days); on duration of collection (8.63 and 9.00 minutes); on recovery of flushed medium from the uterus (1921 and 1934 mL); on the size of 7-day embryo (.42 mm and .44 mm); on the size of 8-day embryo (1.11 mm and 1.66 mm); on the quality grade of the embryos (3.81 (mais) and 3.55); on the interval from estrus to ovulation (6.44 and 5.66 days); on the follicle diameter at ovulation (38.76 mm and 37.55 mm) and on progesterone concentration in the flushing day. The number of services per cycle differed between the foal heat mares (2.5) and non-lactating mares (1.9).

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Embriogênese somática direta em explantes foliares de Coffea arabica L. cv. acaiá cerrado: efeito de cinetina e ácido giberélico/ Direct somatic embryogenesis in Coffea arabica L. cv. Acaiá Cerrado: kinetin and giberelic acid effects

Pereira, Alba Regina; Carvalho, Samuel Pereira de; Pasqual, Moacir; Santos, Flávia Carvalho
2007-04-01

Resumo em português Objetivou-se estudar o efeito da cinetina, GA3 e ANA na indução in vitro de embriões somáticos de cafeeiro pela via direta. Segmentos foliares retirados de plântulas cultivadas in vitro foram inoculados em meio de cultura 'MS' com 50% dos sais contendo as seguintes combinações de cinetina (0; 1; 2; 4 e 8 mg L-1) e GA3 (0; 2,5; 5; 10 e 20 mg L-1). Os meios de cultura utilizados tiveram pH ajustado para 5,8 ± 1 antes de serem autoclavados. O experimento foi mantido (mais) em sala de crescimento a 25 ± 1ºC. Avaliou-se número total de embriões somáticos, o número de embriões cotiledonares, o número de embriões torpedo e a média dos comprimentos dos embriões. A ação combinada entre cinetina, GA3 e ANA estimulou a indução de embriões somáticos pela via direta. O maior comprimento de embriões foi observado quando se utilizou 8 mg L-1 de cinetina e 8,0 mg L-1 de ANA ou 17 mg L-1 de GA3 e 8,0 mg L-1 de ANA isoladamente. Resumo em inglês It was aimed to study kinetin, GA3 and ANA effects in the in vitro induction of direct somatics embryos. Leaf segments withdrawn from plantlets in vitro were inoculated in 'MS'50% containing the following combination of kinetin (0; 1; 2; 4 and 8 mg L-1) and GA3 (0; 2,5; 5; 10 and 20 mg L-1). The culture media utilized had their pH adjusted to 5,8 ± 1 before being autoclaved. The experiment was carried out growth room at 25 ± 1ºC. Total number of embryos, number of embr (mais) yos cotiledonar, number of embryos of torped and length of embryo were evaluated. The combination between kinetin and GA3 promoved induction of embryos. The use of kinetin 8 mg L-1 and GA3 17 mg L-1 not associate in medium with 8,0mg L-1 of ANA, promoter higher rates in vitro.

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Poliembrionia e aspectos da embriogênese em Tabebuia ochracea (Chamisso) Standley (Bignoniaceae)/ Polyembryony and aspects of embryogenesis in Tabebuia ochracea (Chamisso) Standley (Bignoniaceae)

Costa, Maria Eugênia; Sampaio, Diana S.; Paoli, Adelita A.S.; Leite, Simone C.A.L.
2004-06-01

Resumo em português A origem dos embriões supranumerários e a embriogenia de Tabebuia ochracea foram analisadas. Embriões supranumerários apomíticos têm origem adventícia a partir de células da hipóstase e do tegumento da região micropilar do óvulo. A embriogenia corresponde ao tipo Onagrado. Das 233 sementes dissecadas 81,37% apresentaram poliembrionia e foram encontrados até sete embriões em uma mesma semente. Aparentemente, embriões sexuais e adventícios podem se desenvolve (mais) r juntos, numa mesma semente. Alguns dos embriões adventícios apresentam alterações morfoanatômicas graves que podem prejudicar seu desenvolvimento em plântulas. Resumo em inglês The origin of the extranumerary embryos and the embryogeny of Tabebuia ochracea were analysed. Extranumerary apomictic embryos are of adventitious origin from hypostase cells and from the integument of ovule micropilar region. The embryogeny corresponds to Onagrad type. Among 233 dissected seeds, 81.37% presented polyembryony and up to seven embryos were detected in a single seed. Sexual and adventitious embryos can develop together in a single seed. Some of the adventitious embryos show severe morphoanatomical anomalies that can affect their development into seedlings.

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Efeito do frio sobre os carboidratos solúveis em culturas embriogênicas de Acca sellowiana O. Berg (Myrtaceae)/ Effect of cold on soluble carbohydrates of embryogenic cultures of Acca sellowiana O. Berg (Myrtaceae)

Mengarda, Liana H. G.; Pescardo, Rosete; Chu, Edison P.; Figueiredo-Ribeiro, Rita de Cássia L.
2009-06-01

Resumo em português A rota da embriogênese somática de Acca sellowiana, uma espécie arbórea frutífera com limitações quanto à propagação vegetativa, já foi estabelecida mas o número de embriões que restabelecem o crescimento após a fase cotiledonar é baixo. No presente trabalho, embriões somáticos em diferentes fases de desenvolvimento foram obtidos após tratamentos com 2,4-D e submetidos à condição de frio (4 °C) durante 20 dias, visando induzir a transformação de em (mais) briões somáticos em plântulas. Observou-se que 95% dos embriões zigóticos desenvolveram embriões somáticos quando tratados com 2,4-D de forma contínua (T1), enquanto que apenas 55% foram formados quando a auxina foi usada na forma pulsada (T2). Porém, o tratamento T1 induziu altas taxas (82%) de deformações nos embriões quando comparados a T2 (62%). Em ambos os tratamentos, não houve formação de plântulas a partir de embriões somáticos após a exposição ao frio, sendo observada redução nos níveis de rafinose. Em T1, 50% dos embriões cultivados na fase globular permaneceram quiescentes e apenas os embriões na fase cotiledonar (76%) apresentaram características positivas de retomada de desenvolvimento, havendo, porém, redução nos teores de açúcares totais com o desenvolvimento e a diferenciação dos embriões. No tratamento T2, apenas 30% dos embriões na fase cotiledonar tornaram-se verdes e apresentaram maiores valores de carboidratos solúveis totais. A análise da composição destes açúcares evidenciou que os componentes majoritários foram myo-inositol, glucose e frutose, no início da cultura e teores decrescentes de sacarose durante o período de cultivo. As baixas concentrações de rafinose durante o período de crescimento e sua redução durante o tratamento a frio, bem como o complexo metabolismo dos carboidratos associado ao uso de reguladores de crescimento podem estar relacionadas com as alterações observadas no desenvolvimento normal dos embriões somáticos, sem haver acúmulo de carboidratos, e inibindo a regeneração das plântulas de Acca sellowiana. Resumo em inglês The pathway of somatic embryogenesis in Acca sellowiana, a fruit tree species with limitations concerning vegetative propagation,was well established but the number of embryos that restart growth after the cotyledonary phase is low. In this work, somatic embryos at different developmental stages obtained after treatments with 2,4-D were submitted to cold (4 °C) during 20 days to induce transformation of embryos into plantlets. High proportion (95%) of somatic embryogenes (mais) is was found from zygotic embryos treated with 2,4-D continuously (T1) when compared to transitory treatment with 2,4-D (T2 - 55%). However, T1 induced higher rates (82%) of deformation than T2 (62%). In both treatments, no plantlets were obtained from somatic embryos after cold. In T1, 50% of the embryos cultivated at the globular phase remained quiescent and only embryos at the cotyledonary phase (76%) showed positive responses indicating restart of growth. In T2, only 30% of embryos at cotyledonary phase turned greenish, and presented higher values of total sugars. The carbohydrate analyses showed myo-inositol, glucose, fructose and sucrose as the major components, present in different proportions, the latter decreasing during the culture period. The low levels of raffinose during the growth period and their reduction under cold treatment could be related to changes of the normal somatic embryo development, without accumulation of carbohydrates, thus inhibiting plantlet regeneration.

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Viabilidade de sementes de acerola (Malpighia emarginata DC): avaliação da vitalidade dos tecidos/ Seed viability of acerola (Malpighia emarginata DC.): evaluation of the tissue vitality

Costa, Luciana Claudia; Pavani, Maria do Carmo Morelli Damasceno; Moro, Fabíola Vitti; Perecin, Dilermando
2003-12-01

Resumo em português A morfologia interna e a viabilidade de sementes de acerola (Malpighia emarginata DC.) foram estudadas utilizando-se o tetrazólio (cloreto de 2, 3, 5 trifenil tetrazólio). Dos clones testados, o Flórida Sweet foi o que apresentou a menor percentagem de sementes com embriões normais (10%) como também em reação às sementes sem embriões (8%) e o maior percentagem de sementes com embriões deformados (81%). O clone 07-OS apresentou maior percentagem de sementes com e (mais) mbriões normais (51%) e um número considerado elevado de sementes sem embriões (34%). Os demais clones apresentaram valores intermediários. Para todos os clones avaliados, as sementes com embriões normais apresentaram 100% de embriões viáveis. Essas sementes submetidas ao teste de tetrazólio por um período de 12 horas, apresentaram-se com uma coloração vermelha intensa, considerada ideal para a avaliação positiva da viabilidade das sementes. Estes resultados não podem, entretanto, ser tomados para prognóstico e o cálculo da taxa de germinação e dormência, apenas indicando que as sementes estão vivas. Resumo em inglês The morphology and seed viability of acerola (Malpighia emarginata DC.) were evaluated using the tetrazolium (2, 3, 5 triphenyl tetrazolium chloride). From all clones tested, Florida Sweet presented the smallest percentage of seeds with normal embryos (10%) or without them (8%) and the greatest percentage of seeds with malformed embryos, (81%). The clone 07-0S had the greatest percentage of seeds with normal embryos (5 l%) and an elevated number of seeds without embryos ( (mais) 34%). For all other clones evaluated, the seeds with normal embryos were 100% viable. The seeds subjected to the tetrazolium test for 12 hours, had a deep red color, considered ideal for viability positive evaluation. These tests cannot be taken as prognosis to calculate the germination and dormancy rates, only indicating that the seeds are alive.

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POLIEMBRIONIA EM CLONES DE LARANJA 'PÊRA' E VARIEDADES ASSEMELHADAS/ POLYEMBRYONY IN CLONES OF 'PÊRA' AND OTHERS SWEET ORANGE VARIETIES

DOMINGUES, EDSON TOBIAS; TEÓFILO SOBRINHO, JOAQUIM; TULMANN NETO, AUGUSTO; SUGAHARA, VIVIANA YOSHIE
1998-01-01

Resumo em português A poliembrionia é uma das principais limitações para os programas de melhoramento convencional, via hibridação sexual, em Citrus, ao lado do longo ciclo reprodutivo e longo período juvenil, uma vez que dificulta o reconhecimento de possíveis híbridos. Com a finalidade de verificar a taxa de poliembrionia em clones de laranja 'Pêra' e variedades assemelhadas, foram quantificados os embriões observados nas sementes e em sementeira e suas relações com o número, (mais) massa e taxa de germinação de sementes. A variedade Pêra, clone EEL, apresentou menor número médio de embriões por semente (1,4); a maioria dos genótipos, de 2 a 4 embriões por semente e a `Pêra Premunizada-1212', o maior valor médio (6,2 embriões por semente). A `Pêra Vimusa' apresentou 70,8% de germinação de sementes; os demais genótipos, valores inferiores a 50% de germinação. Em geral, o número médio de embriões por semente germinada variou de 1,3, para as variedades Redonda e Lamb's Summer, até 2,3, para a `Pêra GS-2000'. Todos os genótipos apresentaram de média a elevada taxa de poliembrionia. Resumo em inglês Polyembryony is one of the most important limitations to sexual breeding programs in Citrus, as well as the great reproductive cycle and long juvenility period, once it becomes difficult the recognition of possible hybrids. Aiming at to evaluate the intensity of polyembryony in different clones of `Pera' and other six sweet orange varieties similar to `Pera', quantification of embryos per seed and by seed germination in greenhouse were studied and related to number, weigh (mais) t and germination tax of seeds. The `Pera EEL' showed a fewer number of embryos per seed (1.4); most of genotypes showed from 2 to 4 embryos per seed and the `Pera Premunizada-1212' showed a larger value (6.2 embryos per seed). The `Pera Vimusa' showed 70.8% of seed germination and the other genotypes values below 50% of germination. The number of embryos by germinated seed varied from 1.3, for Redonda and Lamb's Summer varieties, to 2.3 for `Pera GS-2000'. All genotypes showed from median to high level of polyembryony.

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Observação do comportamento biológico de Biomphalaria glabrata de concha anômala/ Observations on the biological behaviour of Biomphalaria glabrata with an anomalous shell

Souza, Cecília Pereira de
1975-06-01

Resumo em português Foi encontrado na criação de Biomphalaria glabrata em laboratório, um caramujo vivo com anomalia na concha. A anomalia consiste na mudança de nível das voltas. O exemplar foi isolado para estudo de seu comportamento biológico. Depois foi juntado a outro exemplar com a mesma anomalia. Os resultados mostraram que suas funções biológicas eram normais. A anomalia é de caráter genético. Na F1 houve aparecimento de 0,01% de anomalia nos embriões. Em vinte e cinco m (mais) eses de observação dos descendentes desses caramujos foram isolados treze embriões anômalos. Um dos embriões chegou ao estado adulto, mas não desovou. Resumo em inglês Among laboratory-bred Biomphalaria glabrata, a live snail in an anomalous shell was found. The anomaly consisted in changes of level in the whorls. The specimen was isolated for a study on its biological behaviour. Afterwards, another specimen displaying a similar anomaly was joined to it. The results obtained showed their biological functions to be normal, their anomaly being of genetic character. In F1 embryos, the anomaly observed was 0.01%. In a 25-month period of inv (mais) estigation, 13 anomalous embryos were isolated. One of the embryo snails reached the adult stage but did not lay any eggs.

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Observação do comportamento biológico de Biomphalaria glabrata de concha anômala/ Observations on the biological behaviour of Biomphalaria glabrata with an anomalous shell

Souza, Cecília Pereira de
1975-06-01

Resumo em português Foi encontrado na criação de Biomphalaria glabrata em laboratório, um caramujo vivo com anomalia na concha. A anomalia consiste na mudança de nível das voltas. O exemplar foi isolado para estudo de seu comportamento biológico. Depois foi juntado a outro exemplar com a mesma anomalia. Os resultados mostraram que suas funções biológicas eram normais. A anomalia é de caráter genético. Na F1 houve aparecimento de 0,01% de anomalia nos embriões. Em vinte e cinco m (mais) eses de observação dos descendentes desses caramujos foram isolados treze embriões anômalos. Um dos embriões chegou ao estado adulto, mas não desovou. Resumo em inglês Among laboratory-bred Biomphalaria glabrata, a live snail in an anomalous shell was found. The anomaly consisted in changes of level in the whorls. The specimen was isolated for a study on its biological behaviour. Afterwards, another specimen displaying a similar anomaly was joined to it. The results obtained showed their biological functions to be normal, their anomaly being of genetic character. In F1 embryos, the anomaly observed was 0.01%. In a 25-month period of inv (mais) estigation, 13 anomalous embryos were isolated. One of the embryo snails reached the adult stage but did not lay any eggs.

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Efeito dos reguladores de crescimento dicamba e picloram na embriogênese somática em Eucalyptus grandis/ Somatic embryogenesis in Eucalyptus grandis: effect of growth regulators dicamba and picloram

Titon, Miranda; Xavier, Aloisio; Otoni, Wagner Campos; Motoike, Sérgio Yoshimitsu
2007-01-01

Resumo em português Este trabalho objetivou avaliar o efeito das auxinas dicamba e picloram na indução de embriogênese somática em embriões zigóticos maduros, cotilédones e hipocótilos de Eucalyptus grandis. Os calos foram induzidos em meio de cultura MS contendo dicamba (0,25; 0,5; 1,0; e 2,0 mg L-1) ou picloram (0,5; 1,5; 5,0; e 10,0 mg L-1). Nos tratamentos com 0,5 mg L-1 de dicamba ou 5,0 e 10,0 mg L-1 de picloram, em explantes cotiledonares, foram observadas estruturas semelhant (mais) es a embriões somáticos em diferentes estádios de desenvolvimento. A análise histológica confirmou tratar-se de estruturas independentes, com um sistema vascular fechado, evidenciando se tratar de embriões somáticos. Resumo em inglês The objective of this paper was to evaluate the effect of dicamba and picloram on the induction of somatic embryogenesis in mature zygotic embryos, cotyledons and hypocotyls of Eucalyptus grandis. Callus induction was obtained in MS culture medium with dicamba (0.25; 0.5; 1.0 and 2.0 mg L-1) or picloram (0.5; 1.5; 5.0 and 10.0 mg L-1). Treatments of cotyledonary explants with dicamba (0.5 mg L-1) or picloram (5.0 and 10.0 mg L-1) resulted in structures similar to somatic (mais) embryos, which appeared in different development stages. The histological analysis confirmed the presence of independent structures with an independent vascular system, suggesting that the structures are somatic embryos.

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Efeito do número da passagem e do gênero das células doadoras de núcleo no desenvolvimento de bovinos produzidos por transferência nuclear/ Effect of culture time and gender of nuclei donor cells on bovine development produced by nuclear transfer

Merighe, Giovana Krempel Fonseca; Miranda, Moysés dos Santos; Bem, Tiago Henrique Câmara de; Watanabe, Yeda Fumie; Meirelles, Flávio Vieira
2010-10-01

Resumo em português Objetivou-se com este trabalho avaliar o efeito do número da passagem e do sexo das células doadoras de núcleo no desenvolvimento embrionário e fetal após transferência nuclear. Para isso, oócitos bovinos foram maturados, enucleados e reconstruídos com células somáticas de animal adulto. Após a fusão e ativação química, os zigotos reconstituídos foram cultivados em Charles Rosenkranz 2 (CR2) com monocamada de células da granulosa a 38,8ºC em atmosfera um (mais) idificada a 5% de CO2 em ar, durante sete dias, e transferidos para receptoras sincronizadas. As taxas de clivagem e desenvolvimento a blastocisto de embriões reconstruídos com células cultivadas por tempo maior foram inferiores às obtidas com os demais tempos de cultivo. Além disso, os blastocistos produzidos não resultaram no desenvolvimento de uma gestação a termo. Embora a taxa de clivagem em embriões fêmeas tenha sido maior, o número de embriões que atingiram o estádio de blastocisto foi maior nos embriões machos. No período gestacional, fêmeas apresentaram maior taxa de aborto entre 90 e 120 dias de gestação. Esses resultados indicam que células doadoras de núcleos cultivados por longos períodos dificultam a produção de blastocistos e aumentam as chances de perdas durante a gestação. Embriões clonados machos têm maior competência para se desenvolver a blastocisto e resultam em menor taxa de perda gestacional. Resumo em inglês The objective of this study was to evaluate the effects of culture time and sex of nuclei donor cells on embryo and fetal development after nuclear transfer. Thus, bovine oocytes were matured, enucleated and reconstructed with somatic cells from an adult animal. After fusion and chemical activation, the reconstituted zygotes were cultured in Charles Rosenkranz 2 (CR2) on a granular monolayer cell at 38.8ºC in a humidified atmosphere 5% CO2 in air for seven days, and tran (mais) sferred to synchronized receptors. Cleavage rates and development to blastocyst of embryo reconstructed with cells cultured for a longer time were lower than rates obtained with other culture times. Moreover, these produced blastocysts did not result in the development of full term pregnancy. Although cleavage rates were higher in female embryos, the number of embryos that reached blastocyst stage was higher in male embryos. During gestation period, females showed higher abortion rates from 90 to 120 days of gestation. These results indicate that cells donnors of nuclei cultured for long periods make the production of blastocysts difficult and increase the chances of losses during pregnancy. Cloned male embryos are more succesful in becoming blastocysts and result in lower gestational loss rate.

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Estádios de desenvolvimento embrionário de vacas zebuínas superovuladas/ Superovulated zebu cows embryonic developmental stages

Fonseca, J.F.; Silva Filho, J.M.; Pinto Neto, A.; Palhares, M.S.
2001-12-01

Resumo em português O objetivo deste estudo foi relatar o estádio de desenvolvimento de embriões coletados a partir de processos superovulatórios em zebuínos. Foram utilizadas 26 vacas, 16 da raça Nelore Padrão, três da Nelore Mocho, quatro da Gir, duas da Brahman e uma da raça Guzerá. Para o processo de superovulação utilizaram-se 350 UI de FSH em oito doses decrescentes a cada 12 horas, a partir do 10ºdia do ciclo estral (estro = dia 0). Ao sétimo dia após o estro os embriõe (mais) s foram coletados pelo método não cirúrgico e avaliados ao microscópio estereoscópio quanto à qualidade e estádio de desenvolvimento embrionário. Foram coletados 135 embriões viáveis, sendo 68,2% (92/135) Nelore Padrão, 12,6% (17/135) Nelore Mocho, 11,1% (15/135) Gir, 5,2% (7/135) Brahman e 3,0% (4/135) Guzerá. Os embriões foram classificados segundo a qualidade em grau I, 51,1% (69/135), grau II, 43,7% (59/135), grau III, 4,4% (6/135), e grau IV, 0,7% (1/135), e segundo o estádio de desenvolvimento em mórula, 3,7% (5/135), blastocisto inicial, 16,3% (22/135), blastocisto, 37,0% (50/135), blastocisto expandido, 42,2% (57/135), e blastocisto eclodido, 0,7% (1/135). Observou-se predominância de estádios embrionários avançados (blastocisto, blastocisto expandido e blastocisto eclodido) que representaram 80% do total de embriões. Resumo em inglês This study was carried out with the objective of reporting the developing stages of embryos collected from superovulated zebu cows. Twenty-six zebu cows of Nelore (16), Polled Nelore (3), Gir (4), Brahman (2) and Guzerá (1) breeds were superovulated with 350IU of FSH, divided into eight decreasing doses administered each 12 hours, starting on day 10 of the estrous cycle (estrous = day 0). Seven-day embryos were collected non-surgically and evaluated at microscopy to dete (mais) rmine the grade and stage of development. A total of 135 viable embryos were collected, being 68.2% (92/135) Nelore, 12.6% (17/135) Pooled Nelore, 11.1% (15/135) Gir, 5.2% (7/135) Brahman and 3.0% (4/135) Guzerá. Embryos were classified according to quality as grade I, 51.1% (69/135), grade-II, 43.7% (59/135), grade-III, 4.4% (6/135), and grade-IV, 0.7% (1/135), and according to developmental stage in morulae, 3.7% (5/135), young blastocyst, 16.3% (22/135), blastocyst, 37.0% (50/135), expanded blastocyst, 42.2% (57/135), and hatched blastocyst, 0.7% (1/135). These results showed the predominance of advanced developing stages (blastocyst, expanded blastocyst and hatched blastocyst) witch represented 80% of the total of embryos.

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Embriogênese somática do caquizeiro/ Somatic embryogenesis of japanese persimmon

Carvalho, Dayse Cristina de; Biasi, Luiz Antonio; Ribas, Luciana Lopes Forets; Telles, Charles Allan; Zanette, Flávio
2004-08-01

Resumo em português O objetivo deste trabalho foi o estabelecimento de um protocolo para a embriogênese somática do caquizeiro. Como explantes, foram utilizados embriões zigóticos em diversos estádios de desenvolvimento, retirados de frutos coletados de plantas adultas a campo, a partir de quatro semanas após o pleno florescimento até 22 semanas. O meio básico para os experimentos foi o MS½NO3. O meio inicial de indução foi suplementado com 20µM de 2,4-D e 2µM de cinetina. (mais) Os calos escuros obtidos foram repicados para outro meio de indução, com concentrações 10 ou 20 µM de 2,4-D e 2 µM de cinetina. Os calos com massas pró-embriogênicas obtidos foram transferidos para meio de manutenção e multiplicação com 2 µM de cinetina e 2,4-D nas concentrações 2,5; 5,0 e 10 µM. As massas embriogênicas formadas foram transferidas para meio de maturação suplementado com 0,5 µM de AIB e as concentrações 5; 10 e 20 µM de 2-iP. Os embriões formados foram isolados em dois meios de conversão, sendo o primeiro com 5 µM de 2-iP, 5 µM de AG3 e 0,5 µM de AIB e o segundo com 0,5 µM de AG3 e BAP, nas concentrações 0; 0,25; 0,5 e 1,0 µM. Como resultados, obteve-se o padrão indireto de embriogênese somática a partir de embriões zigóticos maduros, com mais de 22 semanas de formação, quando cultivados em meio de cultura com 10 µM de 2,4-D combinado com 2 µM de cinetina. A manutenção e a multiplicação das culturas embriogênicas foram mais eficientes com 5 µM de 2,4-D, na qual os pró-embriões avançaram para o estádio globular. Na fase de maturação, as concentrações de 2-iP testadas atuaram promovendo os embriões globulares a estádios mais avançados da ontogenia como cordiforme, torpedo e cotiledonar. A suplementação do meio de cultura com 1 µM de BAP e 0,5 µM de AG3 gerou a formação de plantas mais desenvolvidas, com maior número e tamanho de folhas. Resumo em inglês The goal of this work was to develop a protocol for persimmon cloning through somatic embryogenesis. Zygotic embryos excised from fruits collected from adult plants were tested at several developmental phases. They were collected during 22 weeks after 4 weeks blossoming. The basic medium tested was MS½NO3. Initial induction medium was supplemented with 20 µM 2,4-D + 2 µM kinetin. Dark calluses obtained were transferred to induction medium, with concentrations of (mais) 10 and 20 µM 2,4-D + 2 µM kinetin. The calli with pro-embryogenic masses were transferred to a maintenance and multiplication medium, with 2 µM kinetin and 2,4-D at the concentrations of 2.5, 5.0 and 10 µM. Embryogenic masses formed were transferred to a maturation medium supplemented with 0.5 µM IBA and 5, 10 and 20 µM 2iP. Embryos formed were isolated in two conversion media, one with 5 µM 2-iP + 5 µM GA3 and 0.5 µM IBA, and another medium with 0.5 µM GA3 and BAP at 0, 0.25, 0.5 and 1.0 µM. Indirect somatic embryogenesis were obtained from mature zygotic embryos collected after 22 weeks, when cultivated in culture medium with 10 µM 2,4D combined with 2 µM kinetin. Embryos maintenance and multiplication were more efficient with 5 µM 2,4-D, in which the pro-embryos advanced to the globular embryos phase. At the maturation phase the concentrations of 2-iP tested promoted globular embryos to more advanced stages of ontogeny, such as cordiform, torpedo and cotiledonary. Supplementation of the culture medium with 1 µM BAP generated better developed plants, with highest number of leaves and size.

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Resposta superovulatória de novilhas mestiças holandês-zebu tratadas com somatotropina bovina recombinante (rbST)/ Superovulatory response of holstein-zebu crossbred heifers treated with recombinant bovine somatotropin (rbST)

Borges, Álan Maia; Torres, Ciro Alexandre Alves; Ruas, José Reinaldo Mendes; Rocha Júnior, Vicente Ribeiro; Carvalho, Giovanni Ribeiro de
2001-10-01

Resumo em português O objetivo do experimento foi estudar o efeito do pré-tratamento com 500 mg de sometribove (rbST) sobre a resposta superovulatória, o número e a qualidade dos embriões coletados de 26 novilhas mestiças holandês-zebu, divididas em dois tratamentos: T1 = tratadas com rbST (n=13) e T2 = controle (n=13). Foram feitas 13 superovulações entre o mês de setembro e o início de dezembro de 1997 (período 1) e 13 superovulações entre o final do mês dezembro de 1997 e fe (mais) vereiro de 1998 (período 2), sendo que, para cada período, sete animais receberam 500 mg de rbST (T1) por via subcutânea, no terceiro dia do ciclo estral, e seis animais (T2) não receberam medicação. Os animais foram superovulados com FSH a partir do 10º dia do ciclo estral, e as coletas foram realizadas entre os dias 7 e 8 após a inseminação artificial. A resposta superovulatória, o número total de estruturas, o número de embriões viáveis, de não-viáveis e de ovócitos não foram afetados pelo tratamento com somatotropina bovina. Foram coletadas médias de 15,3 ± 9,5 e 17,4 ± 10,9 estruturas totais, 8,5 ±8,3 e 11,5 ± 10,0 embriões viáveis, 4,6 ± 4,7 e 3,4 ± 1,3 embriões não-viáveis, 2,2 ± 2,8 e 2,8 ± 4,0 ovócitos por coleta dos tratamentos 1 e 2, respectivamente. As mórulas e os blastocistos jovens foram os estádios de desenvolvimento coletados em maior percentagem, entre o sétimo e oitavo dia após a inseminação artificial. Resumo em inglês The objective of the experiment was to study the effect of pretreatment with 500 mg of sometribove (rbST) on superovulatory response, on number and embryos quality of twenty six crossbred holstein-zebu heifers, allocated into two treatments: T1 -- treated with rbST (n=13) and T2 - control (n=13). Thirteen superovulations were done between september and december of 1997 (period 1), and thirteen superovulations between the end of december 1997 and february of 1998 (period 2 (mais) ). For each period seven animals were injected with 500 mg SC sustained-release formulated rbST (T1) on day 3 of estrous cycle, while six animals (T2) did not receive any medication. The animals were superovulated with FSH on day 10, and the embryo collection were performed on day 7 or 8 after the artificial insemination (A.I.). Pretreatment of heifers with rbST did not increase the superovulatory response, total number of structures recover, viable and non viable embryos and ova per collection. The average of total number of structures recovered, viable and non viable embryos and ova per collection were: 15.3 ± 9.5 and 17.4 ± 10.9; 8.5 ± 8.3 and 11.5 ± 10.0; 4.6 ± 4.7 and 3.4 ± 1.3; 2.2 ± 2.8 and 2.8 ± 4.0, respectively, for T1 and T2. The morulae and initial blastocists were recovered in greater percentage on day 7 or 8 after A.I.

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Comparação entre três escores embrionários como fator prognóstico do sucesso em fertilização in vitro/ Comparison between three embryo scoring systems as predictive of the outcome of in vitro fertilization

Moura, Marcos Dias de; Oliveira, Vinícius Alves de; Sala, Maria Matheus de; Ferriani, Rui Alberto; Reis, Rosana Maria dos
2003-04-01

Resumo em português OBJETIVO: avaliar três sistemas de escore embrionário para embriões de 3º dia e correlacioná-los com resultados positivos da técnica de fertilização in vitro. MÉTODO: estudo retrospectivo desenvolvido pelo programa de fertilização in vitro do Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto - USP. Foram incluídas 137 pacientes submetidas a fertilização in vitro e transferência de 439 embriões. Os principais resultados avaliados foram (mais) taxa de gravidez e taxa de implantação. RESULTADOS: nos três métodos observou-se diferença significativa no escore embrionário entre o grupo de grávidas (n=53) e não grávidas (n=84) (p Resumo em inglês PURPOSE: to evaluate three embryo scoring systems specific for 3-day embryos and to correlate them with positive in vitro fertilization outcome. METHOD: retrospective study of the In Vitro Fertilization Program of the University Hospital, Faculty of Medicine of Ribeirão Preto, University of São Paulo. A total of 137 patients submitted to the transfer of 439 embryos were evaluated. The main outcomes measured were pregnancy and implantation rates. RESULTS: a significant d (mais) ifference in the three scoring systems was observed between pregnant (n=53) and non-pregnant (n=84) patients (p

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Biologia reprodutiva de Ligia exotica (Crustacea, Isopoda, Ligiidae) em Rio Grande, Rio Grande do Sul, Brasil/ Reproductive biology of Ligia exotica (Crustacea, Isopoda, Ligiidae) in Rio Grande, Rio Grande do Sul State, Brazil

Lopes, Elis R. C.; Blasina, Juliana R.; Dumont, Luiz F. C.; D'Incao, Fernando
2006-03-01

Resumo em português Com o objetivo de elucidar alguns aspectos da biologia reprodutiva de Ligia exotica Roux, 1828, duas populações que habitam o Estuário da Lagoa dos Patos (Molhe Oeste da Barra de Rio Grande e Ilha do Leonídeo) foram analisadas. A amostragem foi realizada quinzenalmente entre o verão/2003 e o inverno/2004. Os animais foram coletados manualmente durante uma hora. O período reprodutivo da espécie foi registrado para os meses de outubro a junho. Nenhuma fêmea ovígera (mais) foi observada de julho a setembro. No Molhe Oeste da Barra de Rio Grande, 5.376 indivíduos foram capturados (1.494 juvenis, 1.748 machos e 2.134 fêmeas, das quais 245 eram ovígeras). A proporção sexual estimada foi 0,78 (M:F). Para a análise da fecundidade, 178 fêmeas ovígeras com o marsúpio intacto foram analisadas. O comprimento total destas fêmeas variou entre 20,73 a 34,3 mm, e o número de ovos-embriões variaram de 33 a 142. O comprimento médio de primeira maturação sexual das fêmeas foi 24,65 mm e o número médio de ovos-embriões foi 88. Na Ilha do Leonídeo, 5.519 animais foram coletados (510 juvenis, 1.956 machos e 3.053 fêmeas, das quais 129 eram ovígeras). A proporção sexual foi 0,68 (M:F). Pequenas porcentagens de fêmeas ovígeras foram encontradas de setembro a maio, sendo a mais alta porcentagem observada no final de março. Neste local, 101 fêmeas ovígeras foram analisadas, com o comprimento total variando entre 17,62 a 28,61 mm e o número de ovos-embriões entre 25 e 113. O comprimento médio de primeira maturação sexual das fêmeas e o número médio de ovos-embriões foram, respectivamente, 21,43 mm e 73,8. Resumo em inglês Aiming to elucidate some aspects of the reproductive biology of Ligia exotica Roux, 1828, two populations inhabiting the Estuary of the Patos Lagoon (West Breakwater of Rio Grande Channel and Leonidio Island) were analyzed. Sampling was performed fortnightly, from summer/2003 to winter/2004. Animals were collected manually during one hour. The reproductive season of the species occurred from October to June. No ovigerous females were observed from July to September. In We (mais) st Breakwater of Rio Grande, 5,376 individuals were captured (1,494 juvenile, 1,748 males and 2,134 females, in which 245 were ovigerous). Sex ratio estimated was 0.78 (M:F). To perform fecundity analysis, 178 ovigerous females with intact marsupium were analyzed. Total length of these females varied from 20.73 to 34.3 mm, and the number of eggs-embryos ranged from 33 to 142. The mean length of sexual maturity of females was 24.65 mm and the mean number of eggs-embryos was 88.0. In Leonidio Island, 5,519 animals were collected (510 juvenile, 1,956 males and 3,053 females, from which 129 were ovigerous). The sex ratio was 0.68 (M:F). While the lowest percentages of ovigerous females were found from September to May, the highest percentage of ovigerous female was observed at the end of March. In this location, 101 ovigerous females were analyzed, with total length varying from 17.62 to 28.61 mm, and the number egg-embryos ranged from 25 to 113. The mean length of sexual maturity of females was 21.43 mm and the mean number of eggs-embryos was 73.8.

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Efeito do nível de uréia na dieta sobre o desempenho, a qualidade e o estádio de desenvolvimento embrionário em cabras Alpinas/ Effect of the dietary urea level on performance, quality and embryonic development stage on Alpine goats

Alves, N.G.; Torres, C.A.A.; Rodrigues, M.T.; Cecon, P.R.; Santos, A.D.F.; Siqueira, L.G.B.; Bitencourt, L.L.; Moraes, E.A.
2007-08-01

Resumo em português Utilizaram-se 22 cabras da raça Alpina, distribuídas aleatoriamente em quatro tratamentos (T): as cabras do T1 (n=5) formaram o grupo-controle; as do T2 (n=7) receberam 0,73% de uréia na matéria seca da dieta; as do T3 (n=4) receberam 1,46% de uréia; e as do T4 (n=6), 2,24% de uréia. As cabras foram superovuladas e os embriões, coletados entre sete e oito dias após a primeira monta, foram avaliados quanto à qualidade e ao estádio de desenvolvimento. Amostras de (mais) sangue para dosagem dos teores de uréia e glicose foram coletadas nos dias do estro e da coleta de embriões. Houve efeito linear crescente do nível de uréia nas dietas sobre o consumo de MS (kg/dia) e de proteína bruta (kg/dia). O peso das cabras não diferiu (P>0,05) entre os tratamentos nem entre as semanas experimentais. Dezoito cabras (81,8%) manifestaram estro após a sincronização. A duração do estro e o intervalo da remoção da esponja ao início do estro não foram influenciados (P>0,05) pelos tratamentos. Quatorze cabras (77,8%) responderam à superovulação. O número de estruturas e de embriões coletados não diferiu (P>0,05) entre os tratamentos. O número (Y= 10,90 - 11,64NS U + 4,93§U²; R² = 0,67; PªU²; R² = 0,94; P0,05) pelos tratamentos. A uréia pode ser fornecida no nível de 2,24% na MS da dieta de cabras não lactantes. Resumo em inglês Twenty-two Alpine goats were allocated at random into four treatments: 0.0% (T1 - control, n=5); 0.73% (T2, n=7); 1.46% (T3, n=4) or 2.24% (T4, n=6) of urea in the dry matter (DM) of the diet. Embryos collected from 7 to 8 days after mating of superovulated goat were evaluated by quality and development stage. Blood samples for urea and glucose analyses were collected at estrus and at embryos collection day. The DM (kg/day) and crude protein (kg/day) intake increased line (mais) arly in function of dietary urea level. Goat body weights were not affected by treatments out experimental weeks (P>0.05). Eighteen goats (81.8%) came in estrus after the synchronization. The estrus length and the interval from sponge removal to the beginning of estrus were not affected (P>0.05) by treatments. Fourteen goats (77.8%) were responsive to superovulation protocol. The levels of urea (treatments) did not affect structures and embryo numbers (P>0.05). Number (Y= 10.90 - 11.64NS U + 4.93§U²; R²= 0.67; PªU²; R²= 0.94; P0.05). Diets for no nursing goats can be supplied by urea at 2.24% of DM.

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Criopreservação e embriogênese somática de calos de Dimocarpus longan/ Cryopreservation and somatic embryogenesis of Dimocarpus longan calli

Matsumoto, Kazumitsu; Raharjo, Simon Hadi Teguh; Dhekney, Sadanand; Moon, Pamela April; Litz, Richard Earle
2004-12-01

Resumo em português Os objetivos deste trabalho foram avaliar os efeitos de crioprotetores na criopreservação e da sacarose na embriogênise somática de calos de Dimocarpus longan. Após degelo os calos foram cultivados em meio de multiplicação, e a massa da matéria fresca foi determinada. Para se obter os embriões somáticos, calos e massas pro-embriônicas foram transferidos para meio de cultura contendo diferentes concentrações de sacarose. Entre os crioprotetores, a mistura de 5 (mais) % de glicerol + 5% de dimetilsulfóxido proporcionou a maior quantidade de massa fresca dos calos. O maior número de embriões foi obtido no meio de cultura com 50 g L-1 de sacarose. Os resultados mostram que calos de Dimocarpus longan podem ser criopreservados e plântulas podem ser obtidas. Resumo em inglês Cryoprotectors on cryopreservation and sucrose on somatic embryogenesis of Dimocarpus longan calli were evaluated. The post-thaw calli were cultivated on multiplication medium, and the obtained fresh matter mass was measured. In order to obtain somatic embryos, calli and pro-embryonic masses were transferred into culture medium containing different concentrations of sucrose. Among the cryoprotectors, the mixture of 5% glycerol + 5% dimethylsulfoxide provided the largest q (mais) uantity of calli fresh matter. The highest number of embryos was obtained on the culture medium with 50 g L-1 sucrose. The results show that Dimocarpus longan calli can be cryopreserved and plantlets be obtained.

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Avaliação de sementes de acerola por meio de raios-x/ Evaluation of acerola seeds by x-ray

Nassif, Daniel Silveira Pinto; Cícero, Silvio Moure
2006-12-01

Resumo em português O teste de raios-X tem sido utilizado por ser um método rápido, preciso e não-destrutivo. Neste contexto, o presente trabalho foi realizado com o objetivo de verificar a possibilidade de sua utilização na detecção de anormalidades em embriões de sementes de acerola. Sementes, dos clones Olivier e Waldy e de "pé-franco", foram radiografadas (radiação de 16 kv e tempo de exposição de 180 segundos) e classificadas em função das condições em que seus embriõe (mais) s se encontravam (morfologicamente normais, morfologicamente anormais ou ausentes). Após a radiografia, as sementes foram colocadas para germinar e, em seguida, as plântulas e as sementes mortas foram fotografadas e disponibilizadas em computador juntamente com as respectivas imagens de raios-X. A técnica de raios-X permite a detecção de danos e anormalidades em embriões de sementes de acerola que são prejudiciais à germinação. Resumo em inglês The X-ray test has been used for being a fast, accurate and no destructive method. The present paper was carried out with the purpose of verifying the possibility of identifying embryos abnormality of acerola seeds. Seeds from Olivier and Waldy clones androotstock, were radiographed (16 kv radiation and 180 seconds exposition time) and classified in function of their embryos condition (morphologically normal, morphologically abnormal and absent). After the X-ray, all seed (mais) s were submitted to a germination test and, after that, the seedlings and dead seeds were photographed and used in a computer with respective X-ray images. The X-ray method permits the detection of damage and abnormality on embryos of acerola seeds which are harmful to germination.

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Pré-tratamento com somatotropina bovina (rbST) na superovulação de doadoras da raça Holandesa/ Pre-treatment with bovine somatotropin (rbST) in the superovulation of Holstein donors

Neves, E.F.; Ramos, A.F.; Marques Júnior, A.P.
2005-04-01

Resumo em português Estudou-se o efeito da somatotropina bovina recombinante (rbST) sobre o número e qualidade dos embriões de 40 vacas da raça Holandesa, distribuídas aleatoriamente em três grupos: controle (GI, n=15), tratadas com 250mg de rbST (GII, n=11) e tratadas com 500mg de rbST (GIII, n=14) no sexto dia do ciclo estral. No décimo dia após o estro, as doadoras foram submetidas ao tratamento superovulatório com 360mg de hormônio folículo estimulante (FSH) em doses decrescent (mais) es, duas vezes ao dia, com intervalos de 12 horas. Juntamente com a sétima aplicação de FSH foram administrados 0,5mg de cloprostenol (análogo da PGF2alfa) e as doadoras inseminadas artificialmente 12, 20 e 28 horas após o início da manifestação de estro. Os embriões foram coletados, não cirurgicamente, no sétimo dia após a primeira inseminação. A administração de 250 ou 500mg de rbST aumentou (P Resumo em inglês The use of recombinant bovine somatotropin (rbST) in superovulated Holstein donors to increase the number and quality of the embryos was studied. Forty cows were randomly allotted into three groups: control (n=15), treated with 250mg rbST (n=11) and treated with 500mg rbST (n=14) on the 6th day of the oestrous cycle. On the 10th day after estrus the donors were submitted to a superovulatory treatment with 360mg of FSH in decreasing doses, twice-a-day, with 12 hours interv (mais) al. Along with the 7th application of FSH, 0.5mg of cloprostenol was injected and the donors were inseminated 12, 20 and 28 hours after the onset of estrus. Embryos were collected non-surgically on the 7th day after the 1st insemination. The use of 250 or 500mg of rbST increased (P

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Efeito da superovulação sobre o desempenho de bovinos doadores de embrião importados de clima temperado para clima tropical nos dois primeiros anos de adaptação/ Effect of superovulation on performance of bovine embryo donors imported from temperate zone to tropical climate during the first two years of adaptation

Bényei, B.; Barros, C.C.W.
2000-08-01

Resumo em português Avaliou-se o desempenho de fêmeas bovinas doadoras de embrião nos primeiros dois anos de trabalho em um centro do programa multiple ovulation and embryo transfer (MOET). Utilizaram-se novilhas prenhes de recente importação de clima moderado para o Nordeste Brasileiro. Compararam-se os resultados de superovulação em 1996, primeiro ano de adaptação dos animais, e 1997 com AUSA-Superov (FSH) e Folligon (eCG). O número de CL contados no ovário foi 3,3 (FSH) e 4,2 (e (mais) CG) em 1996 e 8,2 (FSH) e 9,6 (eCG) em 1997, o de óvulos e embriões degenerados coletados de 2,8 (FSH) e 3,8 (eCG) em 1996 e 6,5 (FSH) e 7,4 (eCG) em 1997, o de embriões de boa qualidade de 1,9 (FSH) e 2,3 (eCG) em 1996 e 5,5 (FSH) e 4,0 (eCG) em 1997. A eficiência da coleta foi de 40% (FSH) e 35% (eCG) em 1996 e 85% (FSH) e 83% (eCG) em 1997. Todos os valores citados para 1996 e 1997 foram significativamente diferentes (P Resumo em inglês The results of a multiple ovulation and embryo transfer (MOET) program, obtained in its first two years, were evaluated. The donor heifers were imported already pregnant from Hungary to the North-East area of Brazil. Comparisons of the results obtained in 1996 and 1997 with superovulation programs with AUSA-Superov (FSH) and Folligon (eCG) were made. The number of CL found on both ovaries was 5.3 (FSH) and 4.2 (eCG) in 1996, and 8.2 (FSH) and 9.6 (eCG) in 1997, while the (mais) number of degenerated eggs and embryos was 2.8 (FSH) and 3.8 (eCG) in 1996, and 6.5 (FSH) and 7.4 (eCG) in 1997. The number of good quality embryos was 1.9 (FSH) and 2.3 (eCG) in 1996, and 5.5 (FSH) and 4.0 (eCG) in 1997. The embryo collection efficiency was 40% (FSH) and 35% (eCG) in 1996, and 85% (FSH) and 83% (eCG) in 1997. Significant differences were found for all results obtained in 1996 and 1997 (P

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O impacto do índice de massa corpórea nos resultados de fertilização in vitro/ Impact of body mass index on in vitro fertilization outcomes

Vilarino, Fabia Lima; Bianco, Bianca; Christofolini, Denise Maria; Barbosa, Caio Parente
2010-11-01

Resumo em português OBJETIVO: avaliar o impacto do índice de massa corpórea (IMC) nos resultados de FIV/ICSI (Fertilização in vitro/injeção intracitoplasmática de espermatozoide) obtidos no Serviço de Reprodução Humana da Faculdade de Medicina do ABC. MÉTODOS: estudo retrospectivo que incluiu 488 ciclos de FIV/ICSI de 385 pacientes. As pacientes foram divididas em dois grupos de acordo com o IMC em peso normal (18,5 > IMC (mais) oram avaliados a dose de hormônio folículo-estimulante recombinante (FSHr) utilizada, as taxas de cancelamento dos ciclos por resposta ovariana, e os resultados do laboratório de reprodução assistida como o número de oócitos, número de embriões de boa qualidade, número de embriões transferidos, e as taxas de gravidez, gestação química, abortamento e nascimentos. Para a comparação das variáveis quantitativas entre os grupos foi utilizado o teste t e o teste χ2 para comparação entre as variáveis qualitativas. Os valores de p Resumo em inglês PURPOSE: to evaluate the impact of body mass index (BMI) on in vitro fertilization/intracytoplasmic sperm injection (IVF/ICSI) outcomes performed at the Human Reproduction Center of Faculdade de Medicina do ABC. METHODS: retrospective data from 488 IVF cycles of 385 patients. Patients were classified into two groups according to BMI: normal weight (18.5-24.9 kg/m²) and overweight/obesity (>25 kg/m²). We evaluated the dose of recombinant follicle stimulating hormone ( (mais) FSHr), the cancellation rates for ovarian cycle response, and the results of the assisted reproduction laboratory such as number of oocytes, number of good quality embryos, number of embryos transferred, and pregnancy rates, chemical pregnancy rates, miscarriage rate and live birth rate. The t test was used for comparison of quantitative variables between groups, and the χ2 test for comparison between qualitative variables. P values

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A compreensão jurídica, médica e "leiga" do embrião em Portugal: um alinhamento com a biologia?/ Legal, medical and lay understanding of embryos in Portugal: alignment with biology?/ La comprensión jurídica, médica y "lega" del embrión en Portugal: ¿en línea con la biología?

Silva, Susana; Machado, Helena
2009-09-01

Resumo em português Pretende-se contribuir para o debate em torno dos processos de circulação de conhecimentos e sentidos entre especialistas e "leigos" no que concerne ao estatuto dos embriões humanos em Portugal. Reflete-se sobre as expectativas e preocupações manifestadas quanto à confiança, qualidade, segurança e eficácia das tecnologias médicas de reprodução assistida. O estudo assenta na realização de entrevistas individuais, com vistas a explorar as complexidades, simili (mais) tudes e diferenças entre as visões e os valores de juristas, médicos e casais envolvidos em tratamentos de fertilização in vitro. Trata-se de uma análise qualitativa em um estudo de caso. Se os juristas e os médicos enquadram o estatuto dos embriões em categorias de índole biológica, técnica e/ou jurídico-legal, já os casais estabelecem com os mesmos diversas relações ontológicas de índole moral, afetiva e social, pelo que estes podem ser representados como seres éticos face à biologização médico-legal dos embriões. Resumo em espanhol Se pretende contribuir para el debate en torno de los procesos de circulación de conocimientos y sentidos entre especialistas y "legos" en lo que concierne al estatuto de los embriones humanos en Portugal. Se reflexiona sobre las expectativas y preocupaciones manifestadas respecto a la confianza, calidad, seguridad y eficacia de las tecnologías médicas de reproducción asistida. El estudio se basa en la realización de entrevistas individuales con la intención de expl (mais) orar las complejidades, similitudes y diferencias entre las visiones y los valores de juristas, médicos y parejas implicados en tratamientos de fertilización in vitro. Se trata de un análisis cualitativo en un estudio de caso. Si los juristas y los médicos encuadran el estatuto de los embriones en categorías de índole biológica, técnica y / o jurídico-legal, las parejas establecen con ellos diferentes relaciones ontológicas de índole moral, afectiva y social; por lo que pueden ser representadas como seres éticos frente a la consideración médico-legal de los embriones. Resumo em inglês Our aim is to contribute towards the debate about the processes through which knowledge and meanings regarding the status of human embryos circulate among experts and laymen in Portugal. Expectations and concerns expressed regarding the reliability, quality, safety and efficacy of medical technologies for assisted reproduction were assessed. This study is based on data from individual interviews that sought to explore the complexities, similarities and differences among t (mais) he views and values of jurists, doctors and couples involved in in vitro fertilization treatments. It consists of a qualitative analysis on a case study. If jurists and doctors frame the status of embryos as categories of a biological, technical and/or legal nature, couples establish between themselves a variety of ontological relationships of a moral, affective and social nature. Through these, they can be represented as ethical beings, thus contrasting with the medical-legal biologization of the embryos.

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Desenvolvimento pré-embrionário em ratas tratadas com oxcarbazepina nos quatro primeiros dias após a inseminação/ Pre-embryo development in rats treated with oxcarbazepine in the first four days after insemination

Guerra, M. de O.; Oliveira, L. E. G. de; Peters, V. M.
2000-10-01

Resumo em português A oxcarbazepina é uma droga antiepiléptica de alta eficácia e poucos efeitos colaterais, mas pouco estudada quanto a seus efeitos durante a gestação humana e animal. OBJETIVO: Verificar se a administração de oxcarbazepine em ratas, nos quatro primeiros dias após a inseminação, altera a viabilidade ou o desenvolvimento do pré-embrião. MÉTODOS: Ratas Wistar foram tratadas com 20 ou 200 mg de oxcarbazepina/ Kg de peso corporal, via gástrica, nos dias 1, 2, 3, o (mais) u 4 a partir da inseminação ou, consecutivamente, do 1º ao 4º. Os pré-embriões foram coletados no quinto dia, visando verificar a quantidade e o desenvolvimento até a fase de blastocisto expandido. O peso corporal materno e sinais como pelos eriçados e alteração de atividade locomotora foram anotados para verificar indícios de toxicidade materna. Número de corpos lúteos e peso de ovários foram anotados com vistas à capacidade reprodutiva do animal. RESULTADOS: Não ocorreram perdas de pesos corporais maternos e nenhuma alteração física indicativa de desconforto para as ratas. Peso de ovários e número de corpos lúteos não diferiram entre tratados e controles. O número médio de pré-embriões por mães, o índice de perdas embrionárias, a proporção de blastocistos expandidos com relação ao total de pré-embriões e a média de blastocistos expandidos/mãe, não diferiram entre tratados e controles. CONCLUSÃO: A oxcarbazepina administrada em ratas, seguindo o esquema terapêutico mencionado, não apresentou efeito tóxico sobre a mãe e não alterou o desenvolvimento do pré-embrião. Resumo em inglês Oxcarbazepine is a highly efficcacious antiepileptic drug which has very few side effects and has been poorly investigated as to its effects during human and animal gestation. PURPOSE: To verify if the administration of oxcapazepine to female rats in the first four days ofter fertilization alters the viability or development of the pre-embryo. METHODS: Wistar rats were treated with 20 or 200mg oxcarbazepine/Kg body weight by oral gavage, 1,2,3,or 4 days after insemination (mais) or, consecutively, from the first to de fourth day aiming at veryfing the amount and the development up to the expanded blastocyst stage. Maternal body weight and signs such as hair bristling and alteration of the locomotion activity were observed in order to verify any signs of maternal toxicity. A number of corpora lutea and ovaries weight were noted for the analysis of the animal reproductive capacity. RESULTS: Neither maternal body weight losses nor any physical alteration indicative of discomfort to the rats was observed. Ovaries weight and number of corpora lutea did not differ between treated and control animals. The average of pre-embryos per mother, the index of embryonic losses, the proportion of expanded blastocysts in relation to the total number of pre-embryos and the average of expanded blastocyst/mother did not differ between treated and control animals. CONCLUSIONS: The data indicate that oxcarbazepine administered to female rats following the therapeutic procedure mentioned above, did not show any toxic effect on the mother and did not alter the pre-embryo development.

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Poliembrionomia e caracterização de frutos de critrumelo 'Swingle' e de Poncirus trifoliata/ Polyembryony and characterization of fruits of the 'swingle' citrumelo and Poncirus trifoliata

Ramos, José Darlan; Araújo Neto, Sebastião Elviro de; Castro, Nilmar Eduardo Arbex de; Martins, Paula Cristina Caruana; Correia, Mariana Guimarães
2006-02-01

Resumo em português Objetivou-se com este trabalho, avaliar a taxa de poliembrionia e caracterizar os frutos dos porta-enxertos citrumelo cv. Swingle e Poncirus trifoliata. O experimento foi realizado na Universidade Federal de Lavras. Para cada porta-enxerto foram coletados aleatoriamente 100 frutos maduros em três plantas. As porcentagens de poliembrionia no citrumelo 'Swingle' e P. trifoliata foram de 48,1% e 31,5% e o número médio de embriões por sementes de 1,6 e 1,4, respectivament (mais) e. O peso do fruto foi correlacionado com as seguintes características: comprimento e diâmetro do fruto, sementes viáveis e inviáveis, peso e germinação de sementes, taxa de poliembrionia e número de embriões por semente. Houve correlação positiva do peso do fruto com o comprimento e diâmetro do fruto e número de sementes inviáveis para o citrumelo 'Swingle' e correlação positiva do peso do fruto com o comprimento e diâmetro do fruto, sementes viáveis, peso e porcentagem de germinação de sementes para a espécie P. trifoliata. Resumo em inglês The purpose of this work was to evaluate the polyembryony and characterize the fruits of the 'Swingle' citrumelo and Poncirus trifoliata rootstocks. The experiment was conducted at the Universidade Federal de Lavras. Concerning a 100 fruits ripening per rootstock at three plants were colletes at randon. The polyembryony percentage in 'Swingle' citrumelo and Poncirus trifoliata rootstocks was of 48.1% and 31.5% and embryos number per seeds of 1.6 and 1.4, respectively. The (mais) fruit weight was correlated with the follow characterizes: fruit length and diameter, vigorous and no vigorous seed, seed weight and germination percentage, polyembryony rate and number the embryos per seed. A positive correlation was obtained among the fruit weight with fruit length and diameter and number no vigorous seed for 'Swingle' citrumelo and positive correlation among the fruit weight with fruit length and diameter, number vigorous seed, seed weight and germination percentage for Poncirus trifoliata.

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Transmissão por mãos contaminadas e ausência de transmissão embrionária do vírus do amarelo letal do mamoeiro/ Transmission by contaminated hands and absence of embryonary seed transmission of papaya lethal yellowing virus

Saraiva, Armando C. M.; Paiva, Waldelice O. de; Rabelo Filho, Francisco A. C.; Lima, J. Albérsio A.
2006-02-01

Resumo em português O vírus do amarelo letal do mamoeiro ("Papaya lethal yellowing virus", PLYV) é responsável por uma das principais doenças do mamoeiro (Carica papaya) no Nordeste brasileiro. O PLYV pode ser transmitido por solo, água, instrumentos de corte contaminados e por inoculação mecânica em condições experimentais. Na presente pesquisa, avaliou-se a transmissão do PLYV por mãos contaminadas e sua presença em embriões de sementes de frutos infetados. O PLYV foi transmi (mais) tido por mãos contaminadas, e mãos contaminadas e lavadas em água corrente revelando elevada estabilidade. Experimentos com 1.128 embriões de sementes obtidas de frutos infetados com o vírus revelaram a ausência do PLYV, cuja presença foi constatada em 112 tegumentos das 670 sementes analisadas. O PLYV não foi perpetuado por plantio direto de sementes, envolvendo 310 plântulas e 362 mudas, comprovando não ser o mesmo transmitido por semente de forma embrionária. De outra parte, a presença do PLYV foi comprovada por Elisa indireto em 49 de 456 sementes per si testadas. Resumo em inglês The "Papaya lethal yellowing virus" (PLYV) is responsible for an important disease of papaya (Carica papaya) in Northeast Brazil. PLYV can be transmitted by soil, water and contaminated cutting instruments, as well as through mechanical inoculation. The objective of the present work was to evaluate the possibility of the virus transmission by contaminated hands, and its presence in the embryos of infected papaya fruit seeds. The virus was transmitted through contaminated (mais) hands, thus revealing that PLYV is very stable. Experiments with embryos from 1,128 seeds of infected fruits revealed the absence of PLYV in the embryos from seeds of infected fruits, although the virus was present in 112 out of the 670 seed peel samples analyzed. Direct planting of seeds from infected fruits, involving 310 seedlings and 362 plant-seedlings, did not perpetuate PLYV, demonstrating that the virus is not transmitted in the embryo of the seeds. On the other hand, PLYV was detected by indirect Elisa in 49 out of 456 seeds per si.

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Embriogênese somática e regeneração de plantas a partir de embrião maduro de aveia/ Somatic embryogenesis and plant regeneration derived from mature embryos of oat

Lamb, Caren Regina Cavichioli; Milach, Sandra Cristina Kothe; Pasquali, Giancarlo; Santiago Barro, Raquel
2002-02-01

Resumo em português Calo embriogênico tem sido o tecido-alvo mais utilizado para transformação genética de cereais. O objetivo deste trabalho foi investigar o estabelecimento de calos embriogênicos e a regeneração de plantas in vitro a partir de embriões maduros de genótipos de aveia (Avena sativa L.). Embriões maduros foram retirados das sementes e colocados em meio MS (Murashige & Skoog), contendo 30,0 g L-1 de sacarose e 2,0 mg L-1 de ácido 2,4-diclorofenoxiacético (2,4-D). Ap (mais) ós o período de indução de calos, agregados embriogênicos foram isolados e subcultivados a cada 21 dias para meio fresco. Os calos embriogênicos foram então transferidos para meio de indução de parte aérea, e, na seqüência, as partes aéreas foram transferidas para meio de indução de raízes. Houve diferenças entre genótipos quanto à capacidade de embriogênese somática e regeneração de plantas in vitro a partir de embrião maduro. Este explante permitiu a indução de calos embriogênicos, que se multiplicaram, e que regeneraram in vitro um grande número de plantas de genótipos como UFRGS 7 e UFRGS 19, o que o faz passível de ser utilizado na transformação genética da aveia. Resumo em inglês Embryogenic callus has been the most used target tissue for cereal genetic transformation. Therefore, the objective of this study was to investigate the establishment of embryogenic calli and the in vitro plant regeneration from mature embryos of oat genotypes (Avena sativa L.). Mature embryos were taken out of the seeds and placed on a culture medium MS (Murashige & Skoog), containing 30,0 mg L-1 of sucrose and 2,0 mg L-1 of 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D). From t (mais) he induction period, embryogenic aggregates were isolated and subcultivated each 21 days into a fresh medium. After this period, embryogenic calli were transferred to a medium for shoot regeneration. Subsequently, the shoot was transferred to a medium for root induction. There was variability among genotypes for somatic embryogenesis and in vitro plant regeneration from mature embryos. This explant allowed the induction of calli with ability to multiply and regenerate high number of plants from genotypes as UFRGS 7 and UFRGS 19, what makes it capable for oat genetic transformation.

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A Antropologia e o advento da Fertilização In Vitro no Reino Unido: uma história curta/ Anthropology and the advent of IVF in the UK: a short story

Strathern, Marilyn
2009-12-01

Resumo em português O ano de 2009 marcou o quadragésimo aniversário de um texto pioneiro que apareceu na revista inglesa Nature e que pressagiava o advento de procedimentos bem sucedidos de Fertilização in Vitro e de muito mais. Esse foi o tema de uma conferência reunida sob o título "Embriões Humanos in Vitro: reflexões interdisciplinares sobre as primeiras quatro décadas". Meu trabalho era simplesmente chamado de "A Visão da Antropologia Social", sua "obra" básica está na bibli (mais) ografia anexa. Ele se refere a desenvolvimentos no mundo de fala inglesa, mas espero que seja de interesse mais amplo. Resumo em inglês The year 2009 marked the 40th anniversary of a ground-breaking paper that appeared in the UK journal Nature that presaged the advent of successful IVF procedures, and much else. This was the subject of a conference held under the title "In vitro human embryos: Interdisciplinary reflections on the first four decades". My paper was simply called "The view from social anthropology", the basic "work" of the paper being in the accompanying bibliography. It concerns developments in the English-speaking world, but hopefully is of wider interest.

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Dietas com nitrogênio não-proteico para fêmeas bovinas superovuladas sem prévia adaptação durante curto tempo e em diferentes fases do ciclo estral/ Effect of short term non-protein nitrogen feeding for superovulated beef cows without previous adaptation and at different periods of the oestrus cycle

Alves, Flávio Rocha; Martins, Claudiney de Melo; Braga, Fernando do Amaral; Costa, Ricardo Lopes Dias da; Demarchi, João José Assumpção de Abreu; Rodrigues, Paulo Henrique Mazza
2010-09-01

Resumo em português Objetivou-se neste estudo avaliar o efeito do fornecimento, sem prévia adaptação, durante curto tempo e em diferentes fases do ciclo estral, de dietas contendo nitrogênio não-proteico (NNP) na produção, na qualidade e no grau de desenvolvimento de embriões recuperados em fêmeas bovinas superovuladas. Sessenta e oito vacas Nelore foram distribuídas em três grupos: um controle e dois com fornecimento de ureia antes (UA = do dia -5 ao dia 0) e após (UD = dia 0 ao (mais) dia 5) a inseminação artificial. As vacas foram mantidas em pastagem e receberam concentrado (3,0 kg/animal/dia) durante 16 dias. Foram formulados dois concentrados, e as dietas totais (concentrado e consumo estimado de pastagem) apresentaram 12,0% (dieta controle) e 14,6% (dieta NNP) de proteína bruta (PB). As vacas foram sincronizadas, superovuladas e inseminadas. Sete dias (dia 7) após a inseminação (dia 0), realizou-se a colheita e análise dos embriões. Amostras de sangue foram coletadas nos dias -5, 0 e 5 para determinação da concentração de nitrogênio ureico plasmático (NUP), glicose, insulina e progesterona. A época de fornecimento de ureia influenciou as concentrações médias de NUP nos dias -5, 0 e 5, mas não tiveram efeito nas concentrações de glicose, insulina e progesterona. O período de fornecimento da ureia teve efeito na porcentagem de mórulas compactas em relação ao total de estruturas (UA = 51,4 vs. UD = 15,3%), em relação ao total de oócitos fecundados (UA = 62,5 vs. UD = 30,6%) e em relação ao total de embriões viáveis (UA = 68,8 vs. UD = 38,6%). No grupo que recebeu ureia depois da inseminação artificial, houve redução de 70,2% da proporção de mórulas compactas por total de estruturas em relação ao grupo que recebeu ureia antes da inseminação. Dietas com nitrogênio não-proteico fornecidas imediatamente após a inseminação promovem aceleração do desenvolvimento embrionário inicial. Resumo em inglês The aim of this study was to evaluate the effects of short term non-protein nitrogen feeding at different periods of the oestrus cycle in superovulated cows, without previous adaptation, on yield, quality and development degree of recovered embryos. A total of sixty-eight Nelore cows were distributed in three groups: the control group (C) and two groups with urea supply before (UB; urea supply from day -5 to day 0) and after (UA; supply from day 0 to day 5) artificial ins (mais) emination. Animals were kept grazing and received 3.0 kg/animal/day of concentrate during 16 days. Two concentrates were formulated and the total diets (concentrate and estimate forage intake) showed 12.0% (control diet) and 14.6% (non-protein diet) of crude protein. Animals were synchronized, superovulated and inseminated. The embryos were collected and analysed seven days (day 7) after insemination (day 0). Blood samples were collected on days -5, 0 and 5 to determine concentration of plasmatic urea nitrogen, glucose, insulin and progesterone. The time of urea supply affected average plasmatic urea nitrogen concentration on days -5, 0 5 but it did not affect concetrations of glucose, insulin and progesterone. The moment of urea inclusion had effect on compact morula percentage in relation to the total number of structures (UB = 51.4 vs. UA = 15.3%), to the total number of fertilized oocytes (UB = 62.5 vs. UA = 30.6%) and to the total number of viable embryos (UB = 68.8 vs. UA = 38.6%). In the after insemination group of urea supply there was 70.2% of reduction on compact morula proportion over the total structures in relation to the group that received urea before insemination. Non-protein nitrogen feeding immediately after insemination promotes faster rates of embryo development.

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Embriogênese somática a partir de calos de cultivares de laranja doce/ Somatic embryogenesis from calli of sweet orange cultivars

Castro, Lívia Mendes de; Mourão Filho, Francisco de Assis Alves; Mendes, Beatriz Madalena Januzzi; Miyata, Luzia Yuriko
2010-08-01

Resumo em português A regeneração de plantas, por organogênese ou embriogênese somática, a partir do cultivo de células e tecidos vegetais in vitro, é a base para a utilização da biotecnologia no melhoramento. O objetivo deste trabalho foi avaliar a embriogênese somática a partir de calos embriogênicos das cultivares de laranjeiras doces 'Hamlin', 'Pêra', 'Natal', 'Lima Verde' e 'Westin', em função da composição dos meios de cultura relacionada à fonte e concentração de d (mais) iferentes carboidratos, utilizando-se meio de cultura MT modificado com 500mg L-1 de extrato de malte, acrescido de sacarose, galactose, glicose, sorbitol, lactose ou maltose, nas concentrações de 18, 37, 75, 110 ou 150mM à 27°C. O delineamento experimental utilizado foi inteiramente casualizado, em esquema fatorial cinco (cultivares) x seis (fontes de carboidratos) x cinco (concentrações das fontes de carboidratos no meio de cultura), com cinco repetições. A formação de embriões somáticos variou conforme a cultivar, e as laranjeiras 'Hamlin' e 'Natal' registraram o maior número de embriões, enquanto 'Lima Verde' e 'Westin' apresentaram menores números. A melhor fonte de carboidratos para indução de embriogênese somática foi a maltose, seguida pela lactose, nas concentrações de 37 e 75mM. Embriogênese somática não foi observada nos meios de cultura contendo galactose, glicose ou sorbitol para nenhuma cultivar estudada. Resumo em inglês Plant regeneration, by organogenesis or somatic embryogenesis, from cell cultures and in vitro plant tissue culture is the basis for biotechnology usage in plant breeding. This research aimed to evaluate somatic embryogenesis from embryogenic calli of 'Hamlin', 'Pêra', 'Natal', 'Lima Verde', and 'Westin' sweet orange cultivars related to culture medium composition as source and concentration of carbohydrates with the use of MT culture medium modified with 500mg L-1 of ma (mais) lt extract, supplemented with sucrose, galactose, glucose, maltose, lactose, or sorbitol at concentrations of 18, 37, 75, 110 or 150mM at 27°C. Statistical design were complete randomized, in a factorial five (cultivars) x six (carbohydrate source) x six (carbohydrate concentration in culture medium) with five replicates. The production of somatic embryos varied with the genotype, as 'Hamlin' and 'Natal' cultivars registered higher number of embryos, whereas 'Lima Verde' and 'Westin' showed lower numbers. The best carbohydrate source was maltose, followed by lactose at concentrations of 37 and 75mM. Somatic embryogenesis was not observed on culture media supplemented with galatose, glucose or sorbitol in any studied cultivar.

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Metodologia para teste de tetrazólio em sementes de Amburana cearensis (Allemão) A.C. Smith/ Methodology for tetrazolium test in Amburana cearensis (Allemão) A.C. Smith seeds

Guedes, R.S; Alves, E.U; Gonçalves, E.P; Viana, J.S; Silva, K.B; Gomes, M.S.S
2010-03-01

Resumo em português Objetivou-se com este trabalho estudar a metodologia do teste de tetrazólio para sementes de Amburana cearensis (Allemão) A.C. Smith, determinando as melhores condições de pré-umedecimento, bem como temperatura, período de coloração e concentração da solução de tetrazólio. Avaliou-se a coloração das sementes intactas e escarificadas (lixadas), ambas com tegumento, diretamente na solução de tetrazólio nas concentrações de 0,025; 0,050; 0,075 e 1% a 35 e (mais) 40ºC, por 12 e 24h no escuro. Verificou-se o pré-umedecimento para retirar o tegumento utilizando-se sementes intactas e escarificadas, as quais foram imersas diretamente em água e submetidas a embebição em papel toalha e por 12, 24, 36 e 48 horas em temperaturas de 35 e 40ºC. Após a determinação do método para retirar o tegumento os embriões foram submetidas à coloração em solução de tetrazólio nas concentrações de 0,025; 0,050; 0,075 e 1%. Com os resultados obtidos verificou-se a necessidade da retirada total do tegumento para que ocorra a coloração e que a temperatura de 40ºC é prejudicial para a embebição no pré-umedecimento. O teste de tetrazólio nas sementes de A. cearensis deve ser realizado com o pré-umedecimento das sementes escarificadas (lixadas) e imersas diretamente em água por 24 horas, na temperatura de 35ºC, para posterior retirada total do tegumento. E para atingir a coloração ideal os embriões devem ser imersos em solução de tetrazólio a 0,05% por 3 horas, a 40ºC. Resumo em inglês This work aimed to evaluate the methodology of tetrazolium test in Amburana cearensis (Allemão) A.C. Smith seeds, establishing the best pre-moistening conditions, as well as temperature, coloration period and tetrazolium solution concentration. The coloration of intact and scarified (sanded) seeds, both with tegument, was directly evaluated in tetrazolium solution at the concentrations of 0.025; 0.050; 0.075; and 1%, at 35 and 40ºC, for 12 and 24 h in the dark. Pre-mois (mais) tening to remove the tegument was evaluated by using intact and scarified seeds, which were directly immersed in water and subjected to imbibition in paper towel for 12, 24, 36, and 48 h at 35 and 40ºC. After establishing the method to remove the tegument, embryos were subjected to coloration in tetrazolium solution at the concentrations of 0.025; 0.050; 0.075; and 1%. Based on the obtained results, the complete tegument removal is needed for coloration; besides, the temperature of 40ºC is harmful for imbibition during pre-moistening. The tetrazolium test in A. cearensis seeds should be performed including pre-moistening through direct immersion of scarified (sanded) seeds in water for 24h at 35ºC for later complete tegument removal. To achieve the ideal coloration, embryos must be immersed in tetrazolium solution at 0.05% for 3h at 40ºC.

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Embriogênese somática em híbridos de Pennisetum sp. e avaliação de estabilidade genômica por citometria/ Somatic embryogenesis in hybrids of Pennisetum sp. and genomic stability evaluation by cytometry

Campos, José Marcello Salabert de; Calderano, Clara de Azevedo; Pereira, Antônio Vander; Davide, Lisete Chamma; Viccini, Lyderson Facio; Santos, Marcelo de Oliveira
2009-01-01

Resumo em português Os objetivos deste trabalho foram estabelecer um protocolo eficiente de embriogênese somática, em híbridos triploides entre capim elefante (Pennisetum purpureum Schumach.) e milheto (P. glaucum (L.) R. Br.), e avaliar por citometria de fluxo a estabilidade genômica das plantas obtidas in vitro. A embriogênese somática e a regeneração das plantas foram estabelecidas a partir de embriões zigóticos maduros de híbridos entre capim elefante e milheto. Foram testados (mais) quatro tratamentos com 2,4 ácido diclorofenoxiacético (2,4 D), nas concentrações 0, 1, 2 e 3 mg L-1, para indução de calos embriogênicos, e dois tratamentos com inositol a 1 e 2 g L-1, para regeneração das plantas. Os tratamentos foram dispostos em delineamento inteiramente ao acaso. A combinação ótima de hormônios foi de 2 mg L-1 de 2,4 D, para indução de calos embriogênicos, e de 1 g L-1 de inositol, para conversão de embriões e regeneração de plantas. A análise de quantidade de DNA, por citometria de fluxo das plantas regeneradas, indicou a não ocorrência de alterações em ploidia durante a embriogênese somática e a regeneração das plantas. A quantidade de DNA nuclear e a ploidia das plantas regeneradas foram estáveis e homogêneas em comparação às das plantas controle. Não ocorreu instabilidade cariotípica no sistema de regeneração usado para híbridos de Pennisetum. Resumo em inglês The objectives of this study were to establish an efficient protocol for somatic embryogenesis in triploid hybrids between napiergrass (Pennisetum purpureum Schumach.) and pearl millet (P. glaucum (L.) R. Br.), and to assess the genomic stability by flow cytometry of the plants obtained in vitro. Somatic embryogenesis and plant regeneration were successfully established from mature zygotic embryos of napiergrass and pearl millet hybrids. Four treatments with 2,4 dichlorop (mais) henoxyacetic acid (2,4-D) at 0, 1, 2 e 3 mg L-1 were tested for embryogenic calli induction and two treatments with inositol at 1 e 2 g L-1 were tested for plant regeneration. The treatments were arranged in a completely randomized design. The optimum hormone combinations were 2 mg L-1 of 2,4 D for embryogenic callus induction, and 1 g L-1 of inositol for embryos conversion and plant regeneration. The analysis of DNA content by flow cytometry of the regenerated plantlets indicated that no ploidy changes had been induced during somatic embryogenesis and plant regeneration. The nuclear DNA content and ploidy levels of the regenerated plants were stable and homogeneous in comparison to those of the control plants. There was no occurrence of karyological instability in the regeneration system utilized for Pennisetum hybrid.

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Capacidade reprodutiva de ratas aleitadas por mães que receberam levonorgestrel durante a lactação/ Reproductive performance of female wistar rat, descendent of mothers treated with levonorgestrel during the lactation

GUERRA, MARTHA DE OLIVEIRA; SOUZA, EEVELISE ROCHA DE; PETERS, VERA MARIA
2002-06-01

Resumo em português O levonorgestrel é um dos contraceptivos usados por mulheres durante a lactação. Estudos prévios mostraram que a administração de levonorgestrel a ratas lactando causou nas crias retardo de puberdade em machos e alterações no peso de oviduto e útero. OBJETIVO: Estudar a capacidade reprodutiva das fêmeas F1, de mães tratadas com levonorgestrel. MÉTODOS: Ratas Wistar foram tratadas com levonorgestrel (0.030 mg/1 ml de água destilada) do 7º ao 13º dia (mais) após o nascimento (dia 1 = nascimento). Aos 90 dias, as fêmeas F1 foram acasaladas com machos férteis e a inseminação comprovada pela presença de espermatozóides no esfregaço vaginal (primeiro dia de prenhez). As fêmeas inseminadas foram distribuídas em três lotes de 20 animais (10 F1 Controles e 10 F1 Tratadas). Os animais foram sacrificados no 2º, 4º e 5º dias após a inseminação, por excesso de inalação com éter, e os ovários, ovidutos e cornos uterinos foram removidos. Os ovários foram pesados e os corpos lúteos contados. Ovidutos e cornos uterinos foram lavados com solução fisiológica e os pré-embriões obtidos foram contados e examinados em cada um dos segmentos. RESULTADOS: O peso de ovários, número de corpos lúteos, número e fase de desenvolvimento de pré-embriões foram semelhantes nos dois grupos. CONCLUSÃO: No modelo experimental usado, o aleitamento de crias de ratas por mães tratadas com levonorgestrel não interfere com a capacidade reprodutiva de fêmeas F1. Resumo em inglês Levonorgestrel is one of the contraceptives used by women during lactation. Previous studies have shown that the administration of levonorgestrel to lactating female rats has affected the offspring, causing puberty delay in males and alterations on uterus and oviduct weight.PURPOSE: To study the reproductive capacity of F1 females from rats treated with levonorgestrel.METHODS: Female Wistar rats were treated with levonorgestrel (0.030 mg/1 ml of distilled water) from day (mais) 7 to day 13 after birth (day 1 = birth). On day 90 F1 females were mated with fertile males and insemination was confirmed by the presence of spermatozoa in the vaginal smear (first day of pregnancy). Inseminated females were distributed in three groups of 20 animals each (10 F1 control and 10 F1 treated). The animals were killed on days 2, 4 and 5 after insemination by ether overdose inhalation and the ovaries, oviducts and uterine cornua were removed. The ovaries were weighed and the corpora lutea counted. Oviducts and corpora lutea were washed with saline solution and the pre-embryos were counted and examined in all segments.RESULTS: The ovaries weight, the number of corpora lutea, the number and development phase of the pre-embryos were similar in both groups.CONCLUSION: In the experimental model used, F1 females whose mothers were treated with levonorgestrel during lactation, did not show any alteration in their reproductive capacity.

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Reprodutibilidade interobservador dos índices vasculares do Doppler de amplitude tridimensional do embrião entre 7 e 10 semanas e 6 dias de gestação/ Interobserver reproducibility of vascular indices obtained with three-dimensional power Doppler ultrasonography of embryos at 7 to 10 weeks and 6 days of gestation

Bortoletti Filho, João; Nardozza, Luciano Marcondes Machado; Araujo Júnior, Edward; Rolo, Liliam Cristine; Nowak, Paulo Martin; Guimarães Filho, Hélio Antonio; Moron, Antonio Fernandes
2010-06-01

Resumo em português OBJETIVO: Avaliar a reprodutibilidade interobservador dos índices de vascularização do Doppler de amplitude tridimensional (Doppler de amplitude 3D) no primeiro trimestre de gestação. MATERIAIS E MÉTODOS: Realizou-se estudo de reprodutibilidade com 32 gestantes normais entre 7 e 10 semanas e 6 dias. Para o cálculo do volume tridimensional dos embriões utilizou-se o método VOCAL (Virtual Organ Computer-aided AnaLysis) com ângulo de rotação de 12°. Em seguida o (mais) btiveram-se, automaticamente, os três índices vasculares do Doppler de amplitude 3D: índice de vascularização (VI), índice de fluxo (FI) e índice de vascularização e fluxo (VFI). Para o cálculo da variabilidade interobservador, um examinador realizou uma segunda medida dos 32 embriões e um segundo examinador realizou uma terceira medida dos mesmos volumes, ambos desconhecendo os resultados do outro. Utilizaram-se, para análise estatística, o coeficiente de correlação intraclasse (CCI) e gráficos de Bland-Altman. RESULTADOS: Observou-se boa reprodutibilidade interobservador dos três índices vasculares. O VI apresentou CCI = 0,9 e média da diferença = -1,1; o FI apresentou CCI = 0,9 e média da diferença = -0,5; e o VFI apresentou CCI = 0,9 e média da diferença = -1,1. CONCLUSÃO: Os índices vasculares do Doppler de amplitude 3D do embrião no primeiro trimestre de gestação foram altamente reprodutíveis, em especial o FI. Resumo em inglês OBJECTIVE: To evaluate the interobserver reproducibility of vascular indices obtained with three-dimensional power Doppler (3D power Doppler) ultrasonography at the first trimester of gestation. MATERIALS AND METHODS: The present reproducibility study involved 32 healthy pregnant women with 7 to 10 weeks and 6 days of gestation. The VOCAL (Virtual Organ Computer-aided AnaLysis) method was utilized to calculate embryos volume, with a 12° rotational angle. Subsequently, th (mais) e software automatically displayed three 3D power Doppler vascular indices: vascularization index (VI), flow index (FI) and vascularization and flow index (VFI). In order to calculate the interobserver variability, an investigator performed a second blind measurement of the 32 embryos, and another investigator performed a third blind measurement of the same volumes. The interclass correlation coefficient (ICC) and Bland-Altman plots were utilized for statistical analysis. RESULTS: A good interobserver reproducibility was observed in relation to the three vascular indices. The VI presented ICC = 0.9 and mean difference between measurements = -1.1. For the FI, the ICC was 0.9 and mean difference = -0.5. The VFI presented ICC = 0.9 and mean difference = -1.1. CONCLUSION: The vascular indices, particularly the FI, obtained with 3D power Doppler ultrasonography at the first trimester of gestation demonstrated a high reproducibility.

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Natureza humana criada em laboratório: biologização e genetização do parentesco nas novas tecnologias reprodutivas/ Human nature created in the laboratory: the biologization and genetization of kinship in new reproductive technologies

Luna, Naara
2005-08-01

Resumo em português As novas tecnologias reprodutivas, também chamadas de 'reprodução assistida', são procedimentos que permitem a procriação sem a relação sexual, sendo as técnicas mais conhecidas a inseminação artificial e a fertilização in vitro (bebê de proveta). O acesso às técnicas também levanta a discussão sobre a genetização dos laços de parentesco, em contraste com as práticas de adoção ou procedimentos como a doação de gametas (óvulos e espermatozóides) (mais) e embriões. Com base em pesquisa etnográfica com usuárias e profissionais envolvidos em reprodução assistida, e em bibliografia específica, este trabalho visa discutir que concepções de natureza humana estão implicadas na biologização e na genetização do parentesco nas novas tecnologias reprodutivas. Resumo em inglês New reproductive technologies or assisted reproduction are procedures that make procreation possible without sexual relations, the most well-known being artificial insemination and in vitro fertilization ('test-tube' babies). Use of these new techniques raises the issue of the genetization of kinship ties, in contrast with adoption or procedures involving the donation of gametes (eggs and sperms) and embryos. Based both on ethnographic research with users and professional (mais) s in assisted reproduction and also on bibliographic research, the article discusses the concepts of human nature implied in the biologization and genetization of kinship through these new reproductive technologies.

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Identificação de plântulas zigóticas de trifoliata com o uso de marcadores moleculares RAPD/ Identification of zygotic trifoliate orange seedlings with RAPD molecular markers

Schäfer, Gilmar; Bastianel, Marinês; Dornelles, Ana Lúcia Cunha
2004-02-01

Resumo em português O objetivo deste trabalho foi identificar a freqüência de germinação dos embriões zigóticos de sementes de trifoliata [Poncirus trifoliata (L.) Raf.] oriundas de polinização aberta, com o uso de marcador molecular RAPD. Folhas e sementes de trifoliata foram coletadas de cinco viveiros comerciais e de uma coleção experimental de citros. Essas sementes foram colocadas para germinar em tubetes e casa de vegetação, totalizando uma amostra final de 62 plântulas. F (mais) oram utilizadas nove seqüências inicializadoras e os resultados foram analisados a partir da comparação dos padrões das bandas geradas pelas plantas germinadas com os da planta matriz. Identificaram-se 3,23% de plântulas oriundas da germinação do embrião zigótico, valor que é aceitável na propagação por sementes deste porta-enxerto cítrico. Resumo em inglês This work aimed to determine germination frequency of zygotic embryos of seeds originated from open pollinated trifoliate orange [Poncirus trifoliata (L.) Raf.], using RAPD molecular markers. Leaves and seeds of P. trifoliata were collected from five commercial nurseries and from a citrus germplasm collection. The seeds were placed to germinate in plastic tubes in a greenhouse, reaching a final sample of 62 seedlings. Nine primers were used and the band patterns generated (mais) from seedlings leaves were compared to progenitor-plant-leaf hands. It was possible to identify 3.23% of seedlings originated from zygotic embryos which is acceptable in propagation by seeds in this rootstock.

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Efeito do intervalo entre recrutamentos foliculares na superovulação de vacas da raça Holandesa não-lactantes/ Effect of interval between follicular recruitments on superovulatory response in non-lactanting Holstein cows

Santos, R.M.; Vasconcelos, J.L.M.
2007-08-01

Resumo em português Vacas da raça Holandesa não-lactantes, distribuídas em dois grupos, foram sincronizadas com o protocolo Ovsynch modificado. No dia sete (dia 0 = dia do segundo GnRH), o grupo 7 (G-7; n=19) recebeu CIDR usado previamente por cinco dias e 100mcg de GnRH, e o grupo 14 (G-14; n=21), CIDR e 25mg de PGF2alfa. No dia 14 foi aspirado o folículo dominante (FD), trocado o CIDR usado por um novo e foram aplicados 25mg de PGF2alfa. Iniciou-se o tratamento com FSH 36h depois, remo (mais) veu-se o CIDR com o sétimo FSH e aplicou-se GnRH 36h depois. As inseminações foram feitas 12 e 24h depois. Recuperaram-se os embriões sete dias depois da inseminação artificial. O diâmetro do FD no G-7 foi 13,1±0,57mm no dia sete e 11,2±0,57mm no dia 14. O diâmetro FD persistente no G-14 aumentou de 12,6±0,55mm no dia sete para 16,4±0,55mm no dia 14 (P8mm, 48h após o início do tratamento com FSH, foi maior (P Resumo em inglês Dry Holstein cows were synchronized by a modified Ovsynch protocol. On day 7 (day 0 = day of the second GnRH), group 7 (G-7; n=19) received an used CIDR and GnRH (100µg). Group 14 (G-14; n=21) received an used CIDR and PGF2alpha (25mg). On day 14, the dominant follicle (DF) was removed, by aspiration; the used CIDR was changed for a new CIDR plus PGF2alpha. Thirty-six hours later, the FSH treatment was initiated. On the seventh injection of FSH, the CIDR was removed. Thi (mais) rty-six hours after, the cows received GnRH. Donors were inseminated 12 and 24h after the GnRH injection. Embryos were recovered seven days after AI. The DF diameter in G-7 was 13.1mm on day 7 and 11.2mm on day 14. The persistent DF in the G-14 increased from 12.6mm on day 7 to 16.4mm on day 14 (P8mm, 48h after the beginning of the FSH treatment, was 15.6 in G-7 and 12.5 in G-14 (P

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A idade como fator prognóstico in vitro/ The age as a predictive factor in in vitro fertilization cycles

Gomes, Luiz Mauro Oliveira; Canha, Aparecida dos Santos; Dzik, Artur; Novo, Neil Ferreira; Juliano, Yara; Santos, Sandra Irene Sprogis dos; Cavagna, Mario
2009-05-01

Resumo em português OBJETIVO: avaliar a idade da paciente como fator indicador de resultados em um programa de fertilização in vitro. MÉTODOS: estudo transversal que incluiu 302 mulheres, com idade variando entre 24 e 46 anos, submetidas ao tratamento com fertilização in vitro (FIV), no período de Maio de 2005 a Julho de 2007. As pacientes foram divididas em três grupos, de acordo com a faixa etária: G40 (n=52). Foram avaliados: número de oócitos aspi (mais) rados, taxas de fertilização, número de embriões transferidos, qualidade embrionária e taxas de gravidez. A análise estatística foi realizada pela análise de variância de Kruskal-Wallis e pelo teste do χ2. RESULTADOS: no Grupo G40, 1,6 oócitos por paciente. O número de oócitos obtidos no Grupo G>40 foi significantemente menor que nos Grupos G40), havendo redução estatisticamente significante no Grupo G>40 (p40 apresentou taxa de 9,6%, resultado significantemente inferior (p=0,0339) aos Grupos G Resumo em inglês PURPOSE: to evaluate the patient's age as an outcome predictor in an in vitro fertilization (IVF) program. METHODS: transversal study, which has included 302 women with ages varying from 24 to 46 years old, submitted to IVF, from May 2005 to July 2007. The patients were divided in three groups, according to their age: G40 (n=52). The number of collected oocytes, the fertilization rates, the number of transferred embryos, the embryonary qual (mais) ity and the pregnancy rate were evaluated. Statistical analysis was realized through Kruskal-Wallis variance analysis and χ2 test. RESULTS: in the G40 group, 1.6. The number of oocytes obtained in G>40 group was significantly lower than in the other two groups (p40), respectively, with statistically significant decrease in the G>40 group (p40 group has presented a rate of 9.6%, a result which is significantly lower (p=0.0330) than the one presented by the G

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Avaliação da viabilidade e do vigor de sementes de pepino pelo teste de tetrazólio/ Viability and vigor of cucumber seeds as evaluated by the tetrazolium test

Lima, Liana Baptista de; Pinto, Tais Leite F.; Novembre, Ana Dionisia da Luz Coelho
2010-01-01

Resumo em português O objetivo do presente trabalho foi adequar o teste de tetrazólio para avaliação da viabilidade e do vigor das sementes de pepino. As sementes foram hidratadas entre papel a 25 ºC e por imersão em água a 40 ºC, durante 30 e 60 minutos. Após a hidratação, o tegumento foi removido e, em seguida, os embriões foram imersos em água a 40 ºC por 30 e 60 minutos para retirar a membrana que cobre o embrião. Posteriormente, foi realizada a coloração dos tecidos pela (mais) imersão em soluções 0,075% e 1% de tetrazólio por 60 minutos a 40 °C no escuro. Para a avaliação, foram estabelecidas três classes: 1) sementes vigorosas, 2) sementes viáveis não vigorosas e 3) sementes não viáveis. Definido o método, sementes de 12 lotes de pepino foram avaliadas pelos testes de tetrazólio, germinação, emergência das plântulas e envelhecimento acelerado. O teste de tetrazólio pode ser utilizado para avaliar a viabilidade e o vigor de sementes de pepino. Para a condução do teste, as sementes secas devem ser cortadas no lado oposto ao do eixo embrionário, imersas em água a 40 ºC por 60 minutos, para a retirada do tegumento, e por mais 60 minutos a 40 ºC, para a remoção da membrana interna, e, em seguida, imersas em solução de tetrazólio 0,075%, a 40 ºC no escuro por 60 minutos. Resumo em inglês We assessed the usefulness of the tetrazolium test for determining the quality of cucumber seeds (Cucumis sativus). The base of cucumber seeds were scarified opposite the embryonic axis and the seeds hydrated between moist paper at 25 ºC and by immersion in water at 40 ºC for 30 minutes or 60 minutes. After hydration, the tegument was removed and the seeds re-soaked in water at 40 ºC for 30 minutes or 60 minutes to remove the membrane covering the embryo. The embryos w (mais) ere immersed, in the dark, for 60 minutes at 40 °C in either 0.075% (w/v) or 1% (w/v) tetrazolium solution and the seeds classified as vigorous, viable but non-vigorous, or unviable. Twelve lots of cucumber seeds were subsequently evaluated by the tetrazolium test and compared to tests based on germination, seedling emergence and accelerated aging. Our results show that the tetrazolium test can be used to evaluate the viability and vigor of cucumber seeds by scarifying the seeds, soaking them in water at 40 ºC for 60 minutes to remove the tegument, removing the embryo membrane by soaking in water for a further 60 minutes at 40 ºC and staining the embryos at 40 ºC by immersing them for 60 minutes, in the dark, in 0.075% tetrazolium solution.

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Vitrificação de ovócitos imaturos de bovinos utilizando etilenoglicol associado à trehalose e polivinilpirrolidona/ Vitrification of immature bovine oocytes, by the ethylene glycol associated with trehalose and polivinylpyrrolidone

Souza, M.R.; Costa, E.P.; Torres, C.A.A.; Guimarães, J.D.; Fagundes, L.M.
2003-10-01

Resumo em português Avaliaram-se os efeitos da vitrificação de ovócitos imaturos de bovinos utilizando o etilenoglicol (EG) associado à trehalose e à polivinilpirrolidona (PVP). Utilizaram-se ovócitos provenientes de ovários de vacas abatidas em matadouro, distribuídos aleatoriamente em três tratamentos (T). TI - ovócitos não desnudados e não congelados, TII - ovócitos vitrificados com cumulus oophorus e TIII - ovócitos desnudados vitrificados. A percentagem de ovócitos recupe (mais) rados e ovócitos com morfologia normal após a vitrificação foi diferente entre TII e TIII (92,2 e 72,6%; 79,0 e 63,6%, respectivamente). Os ovócitos normais foram cultivados à 38,5ºC em atmosfera de 5% de CO2 por 24 horas. Após o cultivo, os ovócitos foram fecundados e os embriões cultivados in vitro por sete dias. Foram encontradas diferenças entre tratamentos quanto às taxas de maturação nuclear, fecundação e clivagem (83,9, 70,0 e 44,0%; 17,5, 23,7 e 5,1%; 0,0, 0,0 e 0,0% para os tratamentos I, II e III, respectivamente). Apenas no TI foram obtidas mórulas e blastocistos (21,4%). Os procedimentos de vitrificação, segundo os protocolos utilizados, não são indicados para a criopreservação de ovócitos imaturos de bovinos. Resumo em inglês This study aimed to evaluate the effects of vitrification procedure of immature bovine oocytes using ethylene glycol (EG) associated with trehalose and polivinylpyrrolidone on the percentage of recovered oocytes with normal morphology and nuclear maturation, fecundation and cleavage rates for in vitro cultivated embryos. Ovary oocytes of slaughtered cows were randomly allotted to three treatments (T): TI - oocytes neither undenuded nor vitrified, TII - vitrified oocytes w (mais) ith cumulus oophorus, TIII - undenuded vitrified oocytes. The percentage of recovered oocytes and oocytes with normal morphology after vitrification was different for TII and TIII (92.2 and 72.6%, 79.0 and 63.3% for TII and TIII, respectively). All normal oocytes were cultivated at 38.5ºC in atmosphere with 5% CO2 for 24 hours. After culture, the oocytes were fecundated and the embryos were cultivated in vitro for seven days. The nuclear maturation, fecundation and cleavage rates for TI, TII and TIII were different (83.9, 70.0 and 44.0%, 17.5, 23.7 and 5.1%, 0.0, 0.0 and 0.0% for TI, TII and TIII, respectively). Morulas and blastocysts were obtained only for TI (21.4%). These results indicate that the protocol used for vitrification procedure is not recommended for cryopreservation of immature bovine oocytes.

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Poliembrionia em citrus

Moreira, Sílvio; Gurgel, J. T. A.; Arruda, Lineu F. de
1947-01-01

Resumo em inglês The studies on polyembryony in Citrus reported in this paper show that there is a great variability in the degree of polyembryony among the seeds, fruits and trees of a same form or variety of Citrus. Seeds from different crops of the same plant also show considerable variation in the degree of polyembryony. In order to obtain reliable data on the degree of polyembryony in Citrus the samples for study should include a great number of seeds taken from several fruits of dif (mais) ferent trees. Since there is a yearly variation on the degree of polyembryony it was found necessary to study samples from several crops. The average number of embryos was determined by direct examination of individual seeds. Determinations based on the number of plants developed from every seed always give lower results as many embryos do not grow into seedlings.

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Poliembri onia em mangueira mangifera indica, L

Brieger, F. G.; Gurgel, J. T. A.
1942-12-01

Resumo em inglês The occurrence of polyembryonic seeds in Mangifera indica has been known for a long time, but nothing is known with reference to the forms cultivated in Brazil. It was found impossible to count the number of embryos in the seed, in spite of the size of both seed and embryo. But the cotyledons are in such a way twisted around each other that it is impossible to separate them. Thus it was necessary to take into acount only the embryos which were able to germinate and their (mais) number was determined after 3 and 7 months. It was necessary to dig up the seedlings and wash off all soil in order to distinguish ramifications of shoot and root from the actual polyembryony. In 7 months old seedlings a new complication arises owing to the complete fusion of their base. Evidently there is a pronounced variation in the occurrence of polyembryonic seeds. In 30 resp. 40 germinated seeds, taken from one tree each oí the varieties "Santa Alexandrina" and "Itamaracá", all had one embryo only, while in "Pêssego" (one tree), "J. F. da Silva" (two trees) and "Oliveira Neto" (one tree) from 46 to 84% of the seeds contained more than one embryo. "Oliveira Neto", with 24 polyembryonic seeds out of the 25 germinated, had 4 seeds with four embryos and 1 with five.

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Nascimento de bezerra gerada com auxílio das técnicas de punção folicular e fertilização in vitro no Estado de Minas Gerais/ Birth of a calf produced by follicular puncture and in vitro fertilization techniques in Minas Gerais State, Brazil

Viana, J.H.M.; Camargo, L.S.A.; Ferreira, A.M.; Sá, W.F.; Marques Júnior, A.P.
2001-08-01

Resumo em inglês Ultrasound-assisted follicular puncture is a technique of oocyte recovery for in vitro fertilization and production of embryos. In order to adjust the methodology, a field trial was performed using lactating Holstein cows (n=8) as oocyte donors. Punctures were done with an ultrasound device equipped with a 7.5 MHz intravaginal sectorial probe. Oocytes recovered were matured, fertilized and cultured in vitro, and embryos produced transferred to recipients heifers. On July, 2000, the first calf produced by these techniques in Minas Gerais State, Brazil, was born.

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Influência da icterícia obstrutiva na capacidade reprodutiva, desenvolvimento fetal e morfologia ovariana em ratas/ Influence of jaundice in the reproductive capacity, fetal development and ovarian morphology in rats

Resende, Vivian; Petroianu, Andy; Alves, Marlene Soares Dias; Alberti, Luiz Ronaldo
2009-08-01

Resumo em português OBJETIVO: Estudar a influência da icterícia obstrutiva sobre a capacidade reprodutiva e desenvolvimento fetal em ratas. MÉTODOS: Foram utilizadas 60 ratas sexualmente maduras e sabidamente férteis distribuídas em dois grupos: grupo 1 (n=30)- submetidas a ligadura do ducto biliopancreático e grupo 2 (n=30) -controles. A partir do 23? dia pós-operatório, as ratas foram acasaladas e seus ciclos estrais avaliados diariamente por meio de esfregaços vaginais, que permi (mais) tiram determinar o dia da cópula e a idade gestacional em que foram mortas. Realizou-se estudo histológico dos corpos lúteos nos ovários de todas as ratas e analisou-se macroscopicamente a morfologia externa dos fetos. RESULTADOS: Observou-se que 23 ratas controle (92%) e 11 ratas ictéricas (39,3%) desenvolveram prenhez (p=0,0002). As 17 ratas com hiperbilirrubinemia e sem prenhez (60,7%) apresentaram somente corpos lúteos com aspecto involutivo em seus ovários e sofreram modificações em seus ciclos estrais, permanecendo vários dias em proestro ou estro. As ratas prenhes com hiperbilirrubinemia não apresentaram alterações em seus corpos lúteos, porém os seus fetos eram anormais. CONCLUSÃO: Em presença de hiperbilirrubinemia, a fertilização é viável, a capacidade reprodutiva é muito reduzida, os ciclos estrais tornam-se irregulares, o epitélio vaginal permanece cornificado, os corpos lúteos ovarianos regridem, os corpos lúteos gravídicos não são alterados aumentando progressivamente durante a prenhez e o desenvolvimento fetal é gravemente alterado. Resumo em inglês OBJECTIVE: To assess the influence of jaundice on the reproductive capacity and fetal development in rats. METHODS: 60 sexually mature rats were divided into two groups: Group 1 (n=30) - submitted to ligature of the biliopancreatic duct and Group 2 (n=30) -control- submitted only to sham operation. 23 days later, the animals were matted with sexually mature males for copulation. Vaginal smears were daily collected in order to verify the presence of spermatozoids and copul (mais) a. The morphologic aspect of the ovaries and the corpi lutea diameter were studied. The morphology of the embryos of rats that became pregnant were assessed. Serum bilirubin levels were also determined. RESULTS: It was observed that 23 rats of the control group (92%) and 11 jaundiced rats (39.3%) became pregnant (p=0,0002). The 17 rats with hyperbilirubinemia that did not become pregnant (60.7%) present only involutive corpi lutea and had suffered modifications in their estrous cycles, remaining some days in proestro or estro. The pregnant rats with hyperbilirubinemia did not presented corpi lutea alterations, however their embryos were abnormal. CONCLUSION: In jaundice rats fertilization is viable, the reproductive capacity is intensive reduced, the estrus cycles becomes irregular, the corpi lutea is presented in regression, the gravidic lutea is not modified increasing gradually during the pregnancy and the fetal development is seriously impaired.

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Evolução morfométrica dos anexos embrionários e fetais bovinos obtidos por monta natural, com 10 a 70 dias da gestação/ Biometrics evolution of the embryonic and fetal annexes in cows obtained by natural mating, at 10 to 70 days of gestation

Assis Neto, Antônio C. de; Morceli, José Antônio B.; Fonseca, Ricardo da; Ambrósio, Carlos Eduardo; Pereira, Flávia T.V.; Miglino, Maria Angélica
2009-10-01

Resumo em português O período inicial da gestação de bovinos é caracterizado por grandes perdas embrionárias. Considerando a importância deste fator no âmbito da reprodução animal foram estudados os anexos embrionários e fetais bovinos fecundados por monta natural de 15-70 dias de gestação, com o objetivo de estabelecer parâmetros morfométricos da placenta na fase inicial da gestação. Com uso de um paquímetro foram realizadas mensurações do comprimento (crânio caudal), la (mais) rgura (latero lateral) e altura (dorso ventral) das membranas corioalantóide e amniótica. O início da formação dos cotilédones foi observado e quantificado, assim como, o peso placentário. O peso médio do saco gestacional aumentou com o evoluir da idade gestacional, entretanto, o crescimento foi acelerado a partir de 20-30 dias de gestação. O comprimento crânio caudal e dorso ventral da membrana corioalantóide e do âmnio apresentaram crescimento lento e gradual com o evoluir dos períodos gestacionais analisados. Com 30-40 dias de gestação, os primeiro cotilédones já eram visualizados e contatos com facilidade na superfície coriônica. Os períodos de crescimento coincidiram com os maiores índices de perdas gestacionais em bovinos. Os parâmetros aqui analisados poderão servir para futuras investigações dos anexos embrionários de organismos manipulados em laboratório. Resumo em inglês The main goal of this morphometrical study was to characterize the development of the extra-embryonic membranes of 15 to 70-day-old bovine embryos obtained by natural mating. With a millimeter paquimeter the cranio-caudal, latero-lateral and dorso-ventral measurements of chorion and amnion were determined. The development of the cotyledons and weight of the gestational sac were observed and quantified. The weight of the gestational sac increased during gestation; however, (mais) the growth was faster then 20 to 30 days. The cranial-caudal and dorsal-ventral length of the choriallantois and the amnion developed slowly and gradually with progress of the gestational period, and the cranio-caudal length decreased after 50 to 60 days of gestation, increasing in the next period. After 30 to 40 days of gestation, the first cotyledons were visualized and counted easily in the chorionic surface. The growth periods were the same of the main gestational losses in cattle. The parameters analyzed could be useful for investigations of extra-embryonic membranes in organisms manipulated in the laboratory.

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Efeito da microbiota cecal e do Lactobacillus salivarius inoculados in ovo em aves desafiadas com Salmonella enterica sorovar Enteritidis/ Effect of cecal microflora and Lactobacillus salivarius in ovo administration used on chicken previously challenged with Salmonella enterica serovar Enteritidis

Andreatti Filho, R.L.; Okamoto, A.S.; Lima, E.T.; Gratão, P.R.; DelBem, S.R.
2006-08-01

Resumo em português Ovos embrionados provenientes de matrizes pesadas foram inoculados na câmara de ar com microbiota cecal total, microbiota cecal diluída e cultura de Lactobacillus salivarius, no 18º dia de incubação. Dois dias após o nascimento, as aves foram desafiadas com Salmonella enterica sorovar Enteritidis (SE) e, cinco dias após o desafio, avaliou-se a presença da bactéria no fígado e ceco. O efeito de exclusão competitiva, após o desafio com SE, somente foi observado (mais) pela ausência da bactéria no fígado das aves tratadas in ovo com L. salivarius. A inoculação in ovo de microbiota cecal indefinida ou diluída não reduziu a colonização de SE no fígado e no ceco das aves, incluindo, neste último, também o tratamento com L. salivarius. Nenhum dos tratamentos in ovo determinou índice de eclodibilidade superior a 65%. Resumo em inglês Commercial 18-day-old incubating chicken embryos were inoculated with total or diluted cecal microbiota and Lactobacillus salivarius cultures directly into the inner air sac. Two days after hatching, the chicks were challenged with Salmonella enterica serovar Enteritidis (SE), and five days later the presence of bacteria in cecum and liver was evaluated. The competitive exclusion effect was determined by the search for SE in the liver of chicks treated in ovo with L. sali (mais) varius and challenged with SE. The in ovo inoculation of total or diluted cecal microbiota, in addition to the L. salivarius treatment did not significantly decrease the colonization of SE in liver and cecum. All treatments resulted in hatchability of 65% or less.

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Efeito da Mannheimia granulomatis sobre cultivo de fibroblastos/ Effect of Mannheimia granulomatis on fibroblastos cultures

Ladeira, S.; Gomes, F.R.; Vidor, T.; Portianski, E.L.; Gimeno, E.J.
2008-04-01

Resumo em inglês Primary cultures of Mannheimia granulomatis were established in chicken embryos to assess their capacity to stimulate fibroblast proliferation. The capacity of the bacterium-activated macrophages to stimulate cytokine and enzyme proliferation was assessed in a mouse peritoneum macrophage culture. To evaluate the bacteria infection on fibroblasts and their growth within 48h in relation to the active macrophages, cultures were washed and trypsinized and the cells counted. R (mais) esults showed no significant differences when the bacteria-infected fibroblasts were mixed with bacterial extract (P=0.9682). The treatment using just products of macrophages resulted similar to the negative control. Significant differences on cell proliferation were established (P=0,0039) when the products of M. granulomatis-activated macrophages were used, meaning that bacterial components were unable to promote fibroblast increase. Further research is needed to elucidate the effect of M. granulomatis on the macrophages.

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Diagnóstico pré-natal das genodermatoses/ Prenatal diagnosis of genodermatoses

Sampaio, Maria Carolina de Abreu; Oliveira, Zilda Najjar Prado de; Miguelez, Javier
2007-08-01

Resumo em português O diagnóstico pré-natal está indicado para algumas genodermatoses graves, como a epidermólise bolhosa distrófica recessiva e a epidermólise bolhosa juncional. A biópsia de pele fetal foi introduzida em 1980, mas não pode ser realizada antes da 15a semana de gestação. A análise do DNA fetal é método preciso e pode ser realizado mais precocemente na gestação. No entanto, deve-se conhecer a base molecular da genodermatose, e é essencial determinar a mutação (mais) e/ou marcadores informativos nas famílias com criança previamente afetada. O DNA fetal pode ser obtido pela biópsia da vilosidade coriônica ou amniocentese. O diagnóstico genético pré-implantação tem surgido como alternativa que dispensa a interrupção da gestação. Essa técnica, que envolve fertilização in vitro e teste genético do embrião. vem sendo realizada para genodermatoses em poucos centros de referência. A ultra-sonografia é exame não invasivo, mas tem uso limitado no diagnóstico pré-natal de genodermatoses. A ultrasonografia tridimensional geralmente estabelece o diagnóstico tardiamente na gestação, e há apenas relatos anedóticos de diagnóstico pré-natal de genodermatoses usando esse método. Resumo em inglês Prenatal diagnostic testing is indicated for some severe genodermatoses, such as recessive dystrophic epidermolysis bullosa and junctional epidermolysis bullosa. Fetal skin biopsy was introduced in 1980, but it cannot be performed before 15th gestational week. Fetal DNA analysis is a precise method and can be performed earlier in pregnancy. However, the molecular basis of the genodermatoses must be known and it is essential to determine the gene mutations and/or informati (mais) ve markers in the families with a previously affected child. Fetal DNA can be obtained by chorionic villus sampling or amniocentesis. Preimplantation genetic diagnosis is an alternative approach obviating the need for termination of pregnancy. It involves in vitro fertilization and genetic testing of embryos. However, this technique has been performed for genodermatoses in only a few reference centers. Ultrasonography is a non-invasive test, but has a limited use in prenatal diagnosis of genodermatoses. Tridimensional ultrasonography usually establishes diagnosis late in pregnancy and there are only anecdotal reports of prenatal diagnosis of genodermatoses using this method.

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