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Diagnóstico laboratorial do líquido amniótico/ Laboratory diagnosis of amniotic fluid

Campana, Sabrina Gonçalves; Chávez, Juliana Helena; Haas, Patrícia
2003-09-01

Resumo em português O presente trabalho tem como objetivos a definição e a fisiologia do líquido amniótico, ressaltando aspectos citológicos e principais técnicas para diagnóstico laboratorial das patologias mais freqüentes. A metodologia utilizada foi a revisão bibliográfica atualizada relacionando os aspectos citológicos com a idade gestacional e técnicas laboratoriais para diagnóstico das principais patologias em que são observadas alterações do líquido amniótico, conclu (mais) indo-se que este é um importante componente do ambiente intra-uterino. Sua produção e absorção dependem de uma série de mecanismos interdependentes entre o feto, a placenta, as membranas e o organismo materno. Atualmente este fluido pode fornecer inúmeras informações sobre a saúde fetal, realizando-se diversas técnicas, entre elas a amniocentese e a dosagem de alfafetoproteína, que pode detectar defeitos do tubo neural e trissomia do cromossomo 21. A análise do líquido amniótico reforça a importância da realização adequada de um pré-natal, sendo importante relacionar os resultados laboratoriais com a clínica. Resumo em inglês This present paper aims the definition of the amniotic fluid and its physiology standing out cytological aspects and main techniques for laboratorial diagnosis of the most frequent pathologies. The methodology was based on updated bibliographical research relating the cytological aspects with the pregnancy age and laboratorial techniques for diagnosis of the main pathologies in which alterations of the amniotic fluid are observed, concluding that this is an important comp (mais) onent of the intrauterine environment. Its production and absorption depend on a series of interdependent mechanisms among the fetus, the placenta, the membranes and the maternal organism. Currently this fluid can supply innumerable information on the fetal health by the use of diverse techniques, among which, amniocentesis and dosage of alpha-fetoprotein, which can detect defects of the neural tube and trissomia of chromosome 21. The analysis of the amniotic fluid strengthens the importance of the adequate prenatal care, being important to relate the laboratorial results to clinical practice.

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Contribuição ao estudo do diagnóstico de gestação em Capra hircus, através da histologia e citologia do epitélio vaginal/ Gestation diagnostic in Capra hircus, through histological and cytological analysis of the vaginal epithelium

YAMADA, Maria Luiza Assis; KOZICKI, Luiz Ernandes
1998-01-01

Resumo em português O experimento objetivou estudar as diferentes características do epitélio vaginal de 55 cabras que, através de exame, conduzissem ao diagnóstico de gestação. Os animais foram divididos em dois grupos, sendo o 1º constituído de 35 animais submetidos a indução hormonal do estro. Cada fêmea desse grupo foi tratada com esponja vaginal impregnada com 50 mg de medroxiprogesterona, a qual permaneceu no interior da vagina durante 10 dias. No 8º dia foram administradas (mais) 500 UI de gonadotrofina coriônica humana (via submucosavulvar) e 250 µg de cloprostenol (via intramuscular). O grupo controle, composto por 25 animais, permaneceu sem qualquer tratamento. Procedeu-se à observação do estro, após a retirada das esponjas, sendo as fêmeas cobertas por monta natural dirigida. As coletas do material iniciaram-se no 20º dia pós cobertura, sendo repetidas a cada 10 dias, totalizando 8 por fêmea. O material para a citologia foi colhido com espátulas, na região anterior da vagina e corado pela técnica de Papanicolaou. As amostras para a histologia vaginal foram retiradas por biópsia da mesma região e coradas com HE e PAS com e sem digestão enzimática. Os exames histológicos comprovaram diferenças significativas quanto à espessura do epitélio e composição da camada de superfície do epitélio vaginal. Os animais não-gestantes apresentaram 8 a 10 camadas e superfície composta por células do tipo intermediário alto e/ou superficial, enquanto as gestantes manifestaram epitélio composto por apenas 4 a 5 camadas e células do tipo intermediário baixo na camada superficial, tornando possível diferenciar animais em gestação e não-gestação por esse método. Nos exames citológicos evidenciaram-se células dos tipos intermediário baixo, parabasal e cuboidal em ambos os grupos, não sendo possível diagnosticar gestação, anestro ou diestro. Resumo em inglês The present research was developed in order to try a method of pregnancy diagnosis in goats, through the differentiable characteristics of the vaginal epithelium. A total of 55 goats were used. Materials for histologic and cytologic examination were taken from the anterior region of the vagina with a 10-day interval, initiating by day 20 until day 90 after mating. Biopsies were processed using standard techniques and stained with H.E. and PAS. Vaginal smears were stained (mais) by PAPANICOLAOU’s technique. During pregnancy, the epithelium was recorded as immature, being composed of 4 to 5-cell layers, with parabasal or low intermediate cells on the surface. The non-pregnant epithelium was composed of 8 to 10 cell-layers, showing high intermediate or superficial cells on the surface. This difference allowed to diagnose pregnancy and non-pregnancy status. Vaginal smears showed low intermediate, parabasal and cuboidal cells for both pregnant and non-pregnant groups.

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Prevalência de talassemias e hemoglobinas variantes em pacientes com anemia não ferropênica/ Prevalence of thalassemias and variant hemoglobins in patients with non-ferropenic anemia

Wagner, Sandrine C.; Silvestri, Matheus C.; Bittar, Christina M.; Friedrisch, João R.; Silla, Lúcia M. R.
2005-03-01

Resumo em português Para estabelecer a freqüência de hemoglobinopatias e talassemias em pacientes com anemia não ferropênica foram estudados 58 casos de pacientes comprovadamente com anemia não ferropênica e 235 controles obtidos de pessoas sem anemia. Todas as amostras foram obtidas do Hospital de Clínicas de Porto Alegre (HCPA), RS, Brasil. As técnicas realizadas foram eletroforese em acetato de celulose, pH alcalino, pesquisa citológica de Hb H, HPLC, hemograma e ferritina. A an� (mais) �lise dos dados realizada no grupo de pacientes com anemia não ferropênica demonstrou que 63,8% eram portadores de alguma forma de anemia hereditária: 25,9% de talassemia alfa heterozigota, 32,8% de talassemia beta heterozigota, 3,4% de heterozigose para hemoglobina S (Hb AS) e 1,7% de homozigose para hemoglobina C (Hb CC). No grupo dos controles, foram identificados 14,1% de anemias hereditárias, sendo destas 11,5% de talassemia alfa, 0,9% de talassemia beta, 1,3% de heterozigose para hemoglobina S (Hb AS) e 0,4% de heterozigose para hemoglobina C (Hb AC). Os resultados obtidos permitem concluir que a prevalência de talassemias e hemoglobinas variantes no grupo controle é coincidente com a descrita na literatura. Entretanto, a excepcional prevalência dessas hemopatias hereditárias em pessoas com anemia não ferropênica deve ser divulgada entre médicos e serviços de saúde dada a sua importância no diagnóstico definitivo de anemia e dos corretos procedimentos terapêuticos. Resumo em inglês To establish the frequency of hemoglobinopathies and thalassemias in patients with non-ferropenic anemia, 58 patients with confirmed non-ferropenic anemia and 235 non-anemic individuals (control group) were studied. All samples were obtained from the Hospital de Clínicas de Porto Alegre (HCPA), Rio Grande do Sul, Brazil. The techniques used were Alkaline pH cellulose acetate electrophoresis and cytological screening of Hb, Hl, HPLC, hemogram and ferritin. The data analys (mais) is showed that 63% of the patients with non-ferropenic anemia carried some type of inherited anemia: 25.9% of heterozygous alpha-thalassemia, 32.8% of heterozygous beta-thalassemia, 3.4% of heterozygosity for hemoglobin S (Hb AS) and 1.7% of homozygosity for hemoglobin C (Hb CC). Inherited anemias were detected in 14.1% of the control group: 11.5% of alpha-thalassemia, 0.9% of beta-thalassemia, 1.3% of heterozygosity for hemoglobin S (Hb AS) and 0.4% of heterozygosity for hemoglobin C (Hb AC). The results obtained showed that the prevalence of variant thalassemias and hemoglobins in the control group is coincident with that described in the literature. However, physicians and health services should be informed about the overwhelming prevalence of these inherited homeopathies in individuals with non-ferropenic anemia, due to its importance in the definitive diagnosis of anemia and for the correct therapeutic proceedings.

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Metástase oculta em linfonodo sentinela no câncer de mama em estádios iniciais/ Occult metastasis in sentinel lymph node in early-stage breast cancer

Piato, José Roberto Morales; Pincerato, Kátia Maciel; Gomes, Vivian Carla da Silva; Carvalho, Filomena Marino; Pinheiro, Walter da Silva; Baracat, Edmund Chada
2008-09-01

Resumo em português OBJETIVO: a identificação e biópsia do linfonodo sentinela (LS) no câncer de mama em estádio inicial vêm substituindo a dissecção axilar total. Neste estudo, será apresentada a técnica de processamento do LS, visando o diagnóstico de metástase oculta com base no exame histológico e imuno-histoquímico. MÉTODOS: entre os anos de 2002 e 2005, 266 linfonodos sentinelas foram dissecados em 170 pacientes com câncer de mama em estádio inicial. Foram incluídos a (mais) penas os linfonodos considerados negativos durante análise intra-operatória por citologia. Os linfonodos foram seccionados tranversalmente em quatro ou cinco fatias e incluídos em parafina. Em cada bloco de parafina, dois cortes histológicos com 4 µm de espessura foram montados em lâminas para microscopia de luz e corados pela técnica da hematoxilina-eosina e imunoperoxidase (citoqueratina AE1/AE3). RESULTADOS: a avaliação histológica convencional identificou metástase no LS de 22 pacientes (12,9%). Em seis destas (3,5%), o acometimento foi do tipo micrometástase. Já a metástase oculta diagnosticada exclusivamente pela imuno-histoquímica ocorreu em 16 pacientes (9,4%). Em 11 destas (6,5%) foram detectadas células tumorais isoladas e em cinco (2,9%), micrometástases. CONCLUSÕES: a associação do exame histológico de parafina e imuno-histoquímica aumenta a capacidade de identificar metástase oculta no LS de pacientes com câncer de mama em estádios iniciais. Resumo em inglês PURPOSE: sentinel lymph node biopsy in early-stage breast cancer patients has been substituting the total axillary lymph node is presented dissection. The technique of processing the sentinel lymph node and the aim of this study was to investigate the efficacy of occult metastasis identification based on the standard histological and immunohistochemical examination. METHODS: between 2002 and 2005, 266 sentinel lymph nodes were harvested from axillary biopsy of 170 patient (mais) s with early stage breast cancer. All lymph nodes were considered to be negative according to standard intra-operative cytological assessment. Lymph nodes were transversally sectioned in four or five slices and embedded in paraffin blocks. Two paraffin-embedded tissue sections with 4 µm in thickness were mounted on glass slides and stained with hematoxylin-eosin and immunoperoxidase (cytokeratin AE1/AE3) techniques. RESULTS: standard histological examination identified metastasis in 22 patients (12.9%) and micrometastatic disease was observed in six of these patients (3.5%). The immunohistochemical examination identified metastatic disease in 16 patients (9.4%). Among them, isolated tumor cells were observed in 11 (6.5%) and micrometastases were identified in five (2.9%). CONCLUSIONS: the association of the standard histological examination and immunohistochemical technique increases the chances of sentinel lymph node metastasis identification.

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Hemoglobinas anormais e dificuldade diagnóstica/ Abnormal hemoglobins

Leoneli, Guilherme G.; Imperial, Rodrigo E.; Marchi-Salvador, Daniela P.; Naoum, Paulo C.; Bonini-Domingos, Cláudia R.
2000-12-01

Resumo em português As hemoglobinas humanas, com padrão de herança definido geneticamente, apresentam variações polimórficas características dentro de nossa população, na dependência dos grupos raciais que formam cada região. Aparecem sob a forma de variantes de hemoglobinas ou talassemias, sendo mais freqüentes, no Brasil, os tipos variantes S e C e as talassemias alfa e beta, todas na forma heterozigota. Durante o ano de 1999, amostras de sangue de 506 indivíduos com anemia a e (mais) sclarecer ou que já passaram por alguma triagem de hemoglobinopatias foram encaminhadas ao Centro de Referência de Hemoglobinas da UNESP, para confirmação diagnóstica e submetidas a procedimentos eletroforéticos, análises bioquímicas e citológicas, para caracterização das hemoglobinas anormais. O objetivo do presente estudo foi verificar quais tipos de hemoglobinas anormais apresentam maior dificuldade diagnóstica. As amostras foram provenientes de 24 cidades de doze estados. Os resultados mostraram que 354 indivíduos (69,96%) apresentaram hemoglobinas anormais, sendo 30 Hb AS (5,93%), 5 Hb AC (0,98%), 76 sugestivos de talassemia alfa heterozigota (15,02%), 134 sugestivos de talassemia beta heterozigota (26,48%) e 109 com outras formas de hemoglobinas anormais (21,54%), que incluem variantes raras e interações de diferentes formas de talassemias e hemoglobinas variantes. Concluiu-se que, apesar da melhoria técnica oferecida atualmente e a constante formação de recursos humanos capacitados, as talassemias em sua forma heterozigota (210 indivíduos -- 41,50%) são responsáveis pela maior dificuldade diagnóstica, seguido da caracterização de variantes raras e formas interativas de hemoglobinopatias (109 indivíduos -- 21,54%), sugerindo que se deve aumentar a capacidade de formação de pessoal e as informações a respeito destas alterações genéticas em nossa população. Resumo em inglês The human hemoglobins, with genetically defined inheritance patterns, have shown characteristic polymorphic variation within the Brazilian population, depending on the racial groups of each region. They have appeared under the form of hemoglobin variants or thalassemias, the variant types S and C and the alpha and beta thalassemias being more common, all of them in heterozygote form. During the year of 1999, blood samples from 506 individuals, with suspected anemia or tha (mais) t had already passed through hemoglobinopathies screening, were sent to the Hemoglobin Reference Center -- UNESP for diagnostic confirmation and submitted to electrophoresis proceedings, biochemical and cytological analyses in order to characterize the type of abnormal hemoglobins. The goal of the present study was to verify which abnormal hemoglobin types show greater diagnostic difficulty. The samples came from 24 cities in twelve states. The results showed that 354 (69.96%) individuals presented abnormal hemoglobins, 30 (5.93%) being Hb AS, 5 (0.98%) being Hb AC, 76 (15.02%) suggestive of heterozygote alpha thalassemia, 134 (26.48%) suggestive of heterozygote beta thalassemia and 109 (21.54%) with other forms of abnormal hemoglobin, including rare variants and different forms of thalassemias and variant hemoglobin interactions. It has been concluded that, despite the improved techniques currently available and a constant influx of capacitated personnel, the heterozygote form of thalassemias (210 individuals -- 41.50%) is challenging to diagnose, followed in difficulty by rare variant characterization and interactive forms of hemoglobinopathies (109 individuals -- 21,54%), suggesting that the capacity for production of qualified professionals and information about these genetic changes in our population should be increased.

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Diagnóstico laboratorial de hemoglobinopatias em populações diferenciadas/ Laboratory diagnosis of Hemoglobinopathies in different population groups

Orlando, Giselda M.; Naoum, Paulo C.; Siqueira, Fatima A. M.; Bonini-Domingos, Cláudia R.
2000-08-01

Resumo em português As hemoglobinopatias são um grupo heterogêneo de distúrbios herdados recessivamente que incluem as talassemias e as doenças falciformes. As mutações que as originam são específicas de algumas regiões e em muitos casos determinadas por distribuições étnicas e geográficas, fundamentando os programas de controle destas alterações e o aconselhamento genético. O diagnóstico de alterações de hemoglobinas envolve cuidados com a metodologia aplicada e o grupo p (mais) opulacional que será avaliado. A informação sobre o tipo de hemoglobina alterada e o suporte clínico, psicológico e genético ao portador e seus familiares é de grande importância para o sucesso de programas preventivos nesta área. Com objetivo de avaliar as metodologias disponíveis para o diagnóstico laboratorial das hemoglobinopatias e suas aplicações em laboratórios clínicos, comparamos a incidência de hemoglobinas anormais em populações diferenciadas a saber: doadores de sangue, portadores de anemia a esclarecer, recém-nascidos, e estudantes. As metodologias aplicadas envolveram procedimentos eletroforéticos, análises citológicas e bioquímicas de triagem e para confirmação. No período de setembro de 1999 a janeiro de 2000 analisamos 524 indivíduos, com presença de formas variadas de alteração de hemoglobina para cada grupo, sendo que, dentre as amostras da população de doadores de sangue, foram diagnosticados dois casos de indivíduos heterozigotos para anemia falciforme. Resumo em inglês The inherited haemoglobinopathies are a heterogeneous group of recessive disorders that include the thalassaemias and sickle cell disease. Nearly a thousand mutant alleles have now been characterized. The mutations are regionally specific and in most cases the geographical and ethnic distributions have been determined providing the foundation for a program of control through screening, genetic counseling and prenatal diagnosis. The diagnosis of hemoglobinopathies requires (mais) care for the methodologies applied and the population group which will be evaluated. The information about the abnormal hemoglobin, the medical and psychological aspects and genetic counseling of the carriers and their families are goals of great importance for the success of preventive programs in this area. Aiming to evaluate the laboratory methods for hemoglobinopathy screening and their use in clinical laboratories, we have compared abnormal hemoglobins incidence in the different population groups: blood donors, anemia carriers, newborn and students. The laboratory methods applied involved eletrophoretic proceedings, cytological and biochemical analysis. Within the period from September 1999 through January 2000, we analyzed 524 individuals with varied types of abnormal hemoglobins. Among blood donors, we diagnosed two sickle cell carriers, which suggest the necessity for better care in the process of selection of blood donor candidates. The current interest in the medical and social aspects of sickle cell anemia has resulted in a great increase in methodology research leading to the development of sickle cell screening techniques.

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Animais em aulas práticas: podemos substituí-los com a mesma qualidade de ensino?/ Animals in practical lessons: can we substitute them maintaining the quality of education?

Diniz, Renata; Duarte, Ana Lúcia dos Anjos; Oliveira, Charles Artur Santos de; Romiti, Marcello
2006-01-01

Resumo em português Com o objetivo de verificar a possibilidade de substituição de animais em aulas práticas, comparou-se o grau de aprendizagem entre duas turmas do curso de Medicina submetidas a aulas distintas, com e sem o uso de animais. Foram verificados, também, os sentimentos despertados pela presença destes animais. Os alunos ingressantes do curso de Medicina foram divididos em dois grupos, estabelecendo-se dois protocolos de aulas práticas, um deles com animais de laboratório (mais) e outro sem. O assunto, comum às duas aulas, refere-se ao estudo de técnicas citológicas. Ao final, foi entregue um questionário para avaliar as técnicas de aprendizagem, bem como os sentimentos vivenciados pela presença dos animais. Verificou-se que a curiosidade foi o sentimento mais freqüente em ambos os sexos, havendo um predomínio de sentimentos negativos entre as mulheres, diferentemente dos homens, nos quais predominaram sentimentos positivos e indiferença. As duas turmas apresentaram desempenho semelhante com relação às questões específicas. É preciso reavaliar as metodologias de várias aulas do curso médico, já que há evidências de que, na maioria das situações, o conhecimento pode ser obtido por meio de outras fontes, respeitando a vida animal e induzindo valores éticos aos alunos. Resumo em inglês Aiming to verify the possibility of substituting animals in practical lessons we compared the learning performance of two separate groups of medical students. The groups participated in different classes teaching cytological techniques, with and without use of experimental animals. At the end of the lessons the students were asked to answer a questionnaire, evaluating the learning techniques and the feelings they experienced in the lessons using animals. Curiosity was fou (mais) nd to be the most frequent feeling in the students of both gender. Negative feelings predominated among women on the contrary to men, whose feelings were mostly positive or indifferent. As refers to the specific questions, the performance of the two groups was similar. There is evidence that in most cases animals can be substituted in practical lessons without any prejudice for the teaching/learning process. Seen that the same knowledge can be transmitted through other means, the methodologies used in some lessons of the medical course should be reconsidered, not only in respect to the life of animals but also for introducing ethical values to the students.

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Acurácia do exame citológico no diagnóstico de processos inflamatórios e proliferativos dos animais domésticos/ Accuracy of cytological exam for diagnosis of inflammatory and proliferative process in domestic animals

Guedes, R.M.C.; Zica, K.G.B.; Coelho-Guedes, M.I.M.; Oliveira, S.R.
2000-10-01

Resumo em inglês The purpose of this study was to demonstrate the importance and accuracy of cytology as a diagnostic method for proliferative and inflammatory processes in domestic animals. The cytology samples were collected by biopsy or during necropsy, using fine needle aspiration or imprint techniques in 80 dogs, 4 cats, 3 goats, 2 cows and 1 horse. Histopathology of formalin fixed tissues processed by the routine embedding paraffin technique was used as a confirmatory diagnostic tes (mais) t. Cytology results agreed with histopathological findings in 75 (83.3%) cases. They held higher accord in round cell tumor cases. Therefore, this study shows that cytology is a valuable diagnostic method for diagnosis of proliferative process in domestic animals, especially for round cells tumors.

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Técnicas para a obtenção de preparações citológicas com alta freqüência de metáfases mitóticas em plantas: Passiflora (Passifloraceae) e Crotalaria (Leguminosae)/ Techniques to obtain cytological preparations with high frequency of mitotic metaphases in plants: Passiflora (Passifloraceae) and Crotalaria (Leguminosae)

Cuco, Silvia Marina; Mondin, Mateus; Vieira, Maria Lúcia Carneiro; Aguiar-Perecin, Margarida L. R.
2003-09-01

Resumo em português Foram conduzidos experimentos visando à otimização de procedimentos para preparações citológicas de pontas de raiz com alta freqüência de metáfases mitóticas, apresentando cromossomos com morfologia nítida, em espécies pertencentes a dois gêneros de plantas, Passiflora (Passifloraceae) e Crotalaria (Leguminosae). Para o acúmulo de metáfases, bem como de prófases e prometáfases com cromossomos bem condensados, foram avaliados pré-tratamentos de raízes, e (mais) m que foram utilizadas diferentes combinações de 8-hidroxiquinolina, inibidor do fuso mitótico, com cicloheximida, inibidor da síntese protéica. As preparações foram coradas pelo método de Feulgen. Os melhores resultados foram obtidos com o tratamento com 8-hidroxiquinolina a 300ppm combinado com cicloheximida a 3,125ppm, por 1 hora e 30 minutos para as espécies de Passiflora, e a combinação de 8-hidroxiquinolina a 300ppm + cicloheximida a 6,25ppm também durante 1 hora e 30 minutos para as espécies de Crotalaria. Esta investigação ilustra a situação de dois gêneros de plantas em que a adequação de pré-tratamentos diferiu entre os grupos, e é fundamental para estudos envolvendo comparação do cariótipo das espécies, sobretudo para a detecção de marcadores cromossômicos evidenciados por meio de métodos diversos de citogenética (bandamento-C, bandamento com fluorocromos e hibridação in situ fluorescente). Resumo em inglês Experiments were carried out aiming to optimize procedures for cytological preparations of root tips with high frequency of metaphase cells showing clear features of chromosome morphology, in species belonging to two genera of plants, Passiflora (Passifloraceae) and Crotalaria (Leguminosae). For the accumulation of metaphases, as well as prophases and prometaphases with well condensed chromosomes, pretreatments of root tips with different combinations of 8-hydroxiquinolin (mais) e, a mitotic fuse inhibitor and with cycloheximide, a protein synthesis inhibitor, were evaluated in Feulgen stained preparations. The treatments with 8-hydroxiquinoline at 300ppm + cycloheximide at 3.125ppm, and with 8hydroxiquinoline at 300ppm + cycloheximide at 6.25ppm, both for 1 hour and 30 minutes, were more effective respectively for Passiflora and Crotalaria species. This investigation illustrates a case of differences of pretreatment procedures between two genera of plants, as well as represents a basic work for studies involving the comparison of the karyotype of species belonging to these genera, and especially, for the detection of chromosome markers via several cytogenetic methods (C-banding, fluorescent-chromosome banding and in situ hybridization).

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