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Polimorfismos dos genes do receptor de serotonina (5-HT2A) e da catecol-O-metiltransferase (COMT): fatores desencadeantes da fibromialgia?/ Serotonin receptor (5-HT 2A) and catechol-O-methyltransferase (COMT) gene polymorphisms: Triggers of fibromyalgia?

Matsuda, Josie Budag; Barbosa, Flávia Regina; Morel, Lucas Junqueira Fernandes; França, Suzelei de Castro; Zingaretti, Sonia Marli; Silva, Lucienir Maria da; Pereira, Ana Maria Soares; Marins, Mozart; Fachin, Ana Lúcia
2010-04-01

Resumo em português INTRODUÇÃO: A fibromialgia é uma síndrome reumática caracterizada por dor difusa e crônica associada a fadiga, insônia, ansiedade, depressão, perda de memória e tontura. Embora os mecanismos fisiológicos que controlam a fibromialgia não tenham sido estabelecidos, fatores neuroendócrinos, genéticos ou moleculares podem estar envolvidos. OBJETIVO: O objetivo do presente estudo foi caracterizar os polimorfismos dos genes do receptor de serotonina (5-HT2A) e da c (mais) atecolO-metiltransferase (COMT) em pacientes brasileiros com fibromialgia, a fim de avaliar sua participação na etiologia da doença. MATERIAL E MÉTODOS: O DNA genômico extraído de 102 amostras de sangue (51 pacientes, 51 controles) foi usado para a caracterização molecular dos polimorfismos dos genes 5-HT2A e COMT, por meio de PCR-RFLP. RESULTADOS: A análise molecular dos polimorfismos do gene 5-HT2A demonstrou frequências de 25,49% C/C, 49,02% T/C e 25,49% T/T, nos pacientes com fibromialgia, e 17,65% C/C, 62,74% T/C e 19,61% T/T, no grupo controle, não apresentando diferença significativa entre o grupo de pacientes e o grupo controle. Os polimorfismos do gene da COMT em pacientes com fibromialgia apresentaram uma frequência de 17,65% e 45,10% para os genótipos H/H e L/H, respectivamente. No grupo controle, as frequências foram de 29,42%, para H/H, e 60,78%, para L/H, sem diferença significativa entre ambos os grupos. Entretanto, houve diferença significativa na frequência do genótipo L/L em pacientes (37,25%) e controles (9,8%), o que permitiu a diferenciação entre os dois grupos. CONCLUSÃO: A frequência do genótipo L/L foi maior nos pacientes com fibromialgia. Apesar de a fibromialgia envolver uma situação poligênica e fatores ambientais, o estudo molecular do SNP rs4680 do gene da COMT pode auxiliar a identificação de indivíduos suscetíveis. Resumo em inglês INTRODUCTION: Fibromyalgia is a rheumatic syndrome characterized by diffuse and chronic pain associated with fatigue, sleep disorders, anxiety, depression, memory loss, and dizziness. Although the physiological mechanisms that control fibromyalgia have not been precisely established, neuroendocrine, genetic or molecular factors may be involved in fibromyalgia. OBJECTIVE: The aim of the present study was to characterize serotonin receptor (5-HT2A) and catecholO-methyltrans (mais) ferase (COMT) gene polymorphisms in Brazilian patients with fibromyalgia and to evaluate the participation of these polymorphisms in the etiology of the disease. MATERIAL AND METHODS: Genomic DNA extracted from 102 blood samples (51 patients, 51 controls) was used for molecular characterization of the 5-HT2A and COMT gene polymorphisms by PCR-RFLP. RESULTS: Analysis of the 5-HT2A polymorphism revealed a frequency of 25.49% C/C, 49.02% T/C and 25.49% T/T in patients, and of 17.65% C/C, 62.74% T/C and 19.61% T/T in the control group, with no differences between the two groups.Analysis of the COMT polymorphism in patients showed a frequency of 17.65% and 45.10% for genotypes H/H and L/H, respectively. In the control group the frequency was 29.42% for H/H and 60.78% for L/H, also with no differences between the two groups. However, there was a significant difference in the frequency of the L/L genotype between patients (37.25%) and controls (9.8%), which permitted differentiation between the two groups. CONCLUSION: The L/L genotype was more frequent among fibromyalgia patients. Though considering a polygenic situation and environmental factors, the molecular study of the rs4680 SNP of the COMT gene may be helpful to the identification of susceptible individuals.

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Titulação amperométrica de compostos fenólicos usando polifenol oxidase de vegetal como titulante/ Amperometric titration of phenolic compounds using crude extract of sweet potato as titrant

Vieira, I. C.; Fatibello-Filho, O.; Granato, A. C.; Lupetti, K. O.
2004-01-01

Resumo em português Titulação amperométrica de compostos fenólicos usando extrato bruto de batata doce (Ipomoea batatas (L.) Lam.), fonte da enzima polifenol oxidase, como titulante é proposta para determinação de fenóis em águas residuárias. Esta enzima catalisa a oxidação de monofenol e difenol pelo oxigênio molecular produzindo o-quinona. Um eletrodo de oxigênio foi usado como eletrodo indicador e o consumo de oxigênio na solução foi proporcional à concentração do subs (mais) trato (analito). Esse método apresentou uma resposta linear para catecol, pirogalol, hidroquinona, fenol e p-cresol na faixa de concentração de 2,0x10-5 a 4,0x10-4 mol L-1 e a recuperação de catecol em duas amostras variou de 97,7 a 102%. Os resultados obtidos para compostos fenólicos em águas residuárias de indústrias usando o procedimento proposto e o método padrão estão em concordância a um nível de confiança de 95%. Resumo em inglês Amperometric titration of phenolic compounds using crude extract of sweet potato (Ipomoea batatas (L.) Lam.) as enzymatic source of polyphenol oxidase and titrant is proposed for determining phenols in wastewaters. This enzyme catalyses the oxidation of monophenol and diphenols by molecular oxygen producing o-quinone. The oxygen electrode was used as indicator electrode and the consumption of O2 in the solution was proportionally to the substrate concentration. This metho (mais) d provides a linear response for catechol, pyrogallol, hydroquinone, phenol and p-cresol in the concentration range of 2,0x10-5 a 4,0x10-4 mol L-1 and the recovery of catechol from two samples ranged from 97.7 to 102%. The results obtained for phenolic compounds in industrial wastewaters using the proposed procedure and those obtained using a standard method are in agreement at the 95 % confidence level.

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Propriedades físico-químicas de polifenoloxidase de feijão (Phaseolus vulgaris L.)/ Physical chemical properties of poliphenoloxidase from beans (Phaseolus vulgaris L.)

GOMES, Maria Regina Araújo; OLIVEIRA, Maria Goreti de Almeida; CARNEIRO, Geraldo Estevam Souza; BARROS, Everaldo Gonçalves de; MOREIRA, Maurílio Alves
2001-01-01

Resumo em português As atividades de polifenoloxidases do feijão (Phaseolus vulgaris L.), cultivares: (Aruã, Aporé, A774, Carioca, Diamante Negro, Ouro Branco, Pérola, RAO 33 e Rudá) foram investigadas sob condições de cinética enzimática. O pH ótimo para o extrato bruto das nove cultivares foi em pH 7,2 utilizando catecol como substrato. Nenhuma atividade PPO foi observada na presença do ácido gálico ou D,L- DOPA. Resumo em inglês The polyphenoloxidase activity of nine bean (Phaseolus vulgaris L.) cultivars (Aruã, Aporé, A774, Carioca, Diamante Negro, Ouro Branco, Pérola, RAO 33 e Rudá) were studied. The crude enzyme extract of the nine cultivars was found to have optimum pH in 7.2 using catechol as substrate. No PPO activity in beans (Phaseolus vulgaris L.) was observed using D,L DOPA and gallic acid as substrate.

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Determinação espectrofotométrica por injeção em fluxo de compostos fenólicos em águas residuárias empregando peroxidase de abobrinha (Cucurbita pepo)/ Flow injection spectrophotometric determination of phenolic compounds in wastewaters using peroxidase of zucchini (Cucurbita pepo)

FATIBELLO FILHO, Orlando; SOUZA, Micheli Guarento de; VIEIRA, Iolanda da Cruz
2002-01-01

Resumo em português Empregou-se nesse trabalho alguns vegetais como fonte de peroxidase. Após a determinação de proteína total, atividade e atividade específica, selecionou-se o extrato bruto da abobrinha (Cucurbita pepo) como fonte dessa enzima para ser empregado em um sistema de análise por injeção em fluxo com detecção espectrofotométrica para a determinação de diversos compostos fenólicos (e.g. fenol, catecol, 2,4-diclorofenol, 4-cloro-3-metilfenol, 4-acetamidofenol, 4-clor (mais) ofenol, 2,4,6-triclorofenol, o-cresol, m-cresol, p-cresol e hidroquinona). Após a otimização desse sistema em fluxo, o mesmo foi empregado na determinação de compostos fenólicos em águas residuárias de indústrias da região de São Carlos-SP, no intervalo de concentração de 2,0x10-4 a 4,0x10-3 mol L-1, com LD de 8,0x10-5 mol L-1 e freqüência analítica de 58 h-1. A recuperação de fenol em 3 amostras variou de 98,3 a 106, 2% e o RSD foi menor que 1,2% para soluções de fenol nas concentrações de 6,0x10-4 e 8,0x10-4 mol l-1 (n=10). Resumo em inglês In this work some vegetables were used as peroxidase source. After the determination of total protein, activity and specific activity, the crude extract of zucchini (Cucurbita pepo) was selected as peroxidase source and used in a flow injection spectrophotometric procedure for the determination of several phenolic compounds such as phenol, catechol, 2,4-dichlorophenol, 4-chloro-3-methylphenol, 4-acetamidophenol, 4-chlorophenol, 2,4,6-trichlorophenol, o-cresol, m-cresol, p (mais) -cresol and hydroquinone. After the optimization of the flow injection system, it was used in the determination of phenolic compounds in local industries wastewaters in the concentration range from 2.0x10-4 to 4.0x10-3 mol L-1, with detection limit of 8.0x10-5 mol L-1 and analytical frequency of 58 h-1. The recovery of phenol from three samples ranged from 98.3 to 106.2% and RDS were less than 1.2 % for solutions containing 6.0x10-4 and 8.0x10-4 mol L-1 phenol (n=10).

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Purificação da enzima polifenoloxidase (PFO) de polpa de pinha (Annona squamosa L.) madura/ Purification of polyphenoloxidase (PPO) from ripe custard apple (Annona squamosa L.) pulp

LIMA, Eliza Dorotea Pozzobon de A.; PASTORE, Gláucia Maria; LIMA, Carlos Alberto de A.
2001-01-01

Resumo em português A PFO (EC 1.10.3.2) extraída de polpa de pinha madura (Annona squamosa L.), foi parcialmente purificada por fracionamento em sulfato de amônio a 80% e purificada 411 (Fração I) e 118 (Fração II) vezes após cromatografia em coluna de troca iônica em DEAE-Toyopearl 650M, e 566 vezes em coluna de Toyopearl HW55F. A enzima da fração mais ativa foi caracterizada bioquimicamente. Quanto aos parâmetros cinéticos, a enzima apresentou valores de Km e Vmax de 7,14mM e 3 (mais) 02,0 unidades/min/ml para catecol e 25,0mM e 180,2 unidades/min/ml para L-dopa respectivamente, substratos que demonstraram maior especificidade. O peso molecular foi estimado em 90.700 daltons através de filtração em gel Sephadex G-200. O teor de cobre da enzima purificada encontrado foi de 11ppm/peso da amostra liofilizada. Quanto à composição de aminoácidos, a PFO apresentou maiores teores de ácido aspártico, ácido glutâmico e lisina e menores teores de metionina, arginina e tirosina, com ausência de cisteína. Resumo em inglês The PPO (EC 1.10.3.2) extract of ripe custard apple (Annona squamosa L.) pulps, was partially purified by ammonium sulphate fractionation and purified 411 (Fraction I) and 118 (Fraction II) fold in an ion exchange column of DEAE-Toyopearl 650M, and 566 fold in a gel column of Toyopearl HW 55F. The enzyme of the most active fraction was characterized biochemically. The partially purified and purified enzyme used the o-diphenols as substrates and no activity towards monophe (mais) nols was detected. With respect to the kinetic parameters, the purified enzyme presented values for Km and Vmax of 7.14 mM and 302.0 units/min/ml for catechol and 25.0 mM and 180.2 units/min/ml for L-dopa respectively, substrates which show greater specificity. The molecular weight was estimated as 90.700 daltons using gel filtration on Sephadex G-200. In the analysis of copper, the purified enzyme gave a value of 11ppm by weight of the liofilized sample. The amino acid composition of the custard apple fruit PPO, presented greater amounts of aspartic acid, glutamic acid and lysine and smaller amounts of methionine, arginine and tyrosine, with an absence of cysteine.

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OBTENÇÃO E UTILIZAÇÃO DA ENZIMA POLIFENOLOXIDASE EXTRAÍDA DE POLPA DE PINHA (Annona squamosa L.) MADURA NO MELHORAMENTO DO SABOR DO CACAU (Theobroma cacao L.)/ OBTAINING AND USE OF POLYPHENOLOXIDASE ENZYME EXTRACTED FROM RIPE CUSTARD APPLE (Annona squamosa L.) PULP ON THE COCOA (Theobroma cacao L.) NIBS IN TASTE IMPROVEMENT

LIMA, ELIZA DOROTEA POZZOBON DE ALBUQUERQUE; PASTORE, GLÁUCIA MARIA; BARBERY, SANDRA DRINA FERNANDEZ; GARCIA, NELSON HORÁCIO PEZOA; BRITO, EDY SOUSA DE; LIMA, CARLOS ALBERTO DE ALBUQUERQUE
2001-12-01

Resumo em português O presente trabalho teve como objetivo estudar a obtenção e a utilização da enzima polifenoloxidase (PPO) extraída de polpa de pinha madura na redução do teor de compostos polifenólicos com a finalidade de diminuir a adstringência e o amargor das amêndoas de cacau processadas na forma de "nibs". A PPO foi extraída com tampão fosfato de potássio 0,025M (pH 7,5), adicionando sulfato de amônio para a precipitação da enzima. O material em pó obtido foi denomi (mais) nado de enzima parcialmente purificada, sendo que a análise de atividade enzimática foi realizada, utilizando-se de catecol como substrato. As características bioquímicas apresentadas foram pH de estabilidade de 6,0 a 6,5 e temperatura de estabilidade de 10 a 30°C. Os "nibs" foram autoclavados (121°C por 15 minutos) e não autoclavados de amêndoas cruas insuficientemente fermentadas e secas, da mesma origem, sendo embebidas em 25 mL de uma solução da enzima contendo 200 unidades/min/mL, durante 30; 60; 90; 210 e 360 minutos, a 23°C e pH 6,0. Os "nibs" foram homogeneizados com a solução de enzima a cada 15 minutos, secos, moídos e desengordurados. Após o tratamento enzimático durante 210 minutos realizado nos "nibs" de cacau desengordurado não autoclavados foi possível observar diminuição de 15% nas concentrações de fenóis totais, 15% de taninos, 10% de flavan-3-ois e 18% de antocianidinas. Os "nibs" de cacau desengordurado autoclavados apresentaram diminuição de 25% nas concentrações de fenóis totais, 26% de taninos, 23% de flavan-3-ois e 51% de antocianidinas. Resumo em inglês The present work had as aim to study the obtaining and the uses of polyphenoloxidase enzyme (PPO) extracted from ripe custard apple pulp on the reduction of polyphenolic compounds with decrease adstringency and bitterness of cocoa nuts processed at nibs form. The PPO was extracted with 0.025M potassium phosphate buffer (pH 7.5), adding ammonium sulfate to the enzyme precipitation. The powdered material obtained was called partially purified enzyme, being the analyses of a (mais) ctivity carried out with catechol as substract, showing biochemical characteristics of 5.0 to 6.5 stability pH and 10 to 30°C stability temperature the nibs were autoclaved (121°C for 15 minutes) and non-autoclaved from the same origin, raw nuts insuficiently fermented and dried were soaked in a solution of the enzyme containing 200 units/min/mL, for 30, 60, 90, 210 and 360 minutes, at 23°C and pH 6.0 . The nibs were homogeneized with the enzyme solution each 15 minutes, dried, ground and became unfatted. After enzymatic treatment over 210 minutes carried out on the non-autoclaved unfatted cocoa nibs, it was possible to observe diminishing of 15% in the total phenol, 15% tannin content, 10% of flavan-3-ois and 18% of anthocyanidins concentrations. The nibs of autoclaved unfatted cacao showed diminishing of 25% in the total phenol, 26% of tannins 23% of flavan-3-ois, and 51% of anthocyanidins concentrations.

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Materiais à base de óxido de ferro para oxidação de compostos presentes no efluente da despolpa do café/ Oxidation of organic compounds in wastewater from the humid processing of coffee berries

Gonçalves, Maraísa; Guerreiro, Mário César; Oliveira, Luiz Carlos Alves; Rocha, Cristian Luciana da
2008-01-01

Resumo em inglês Materials based on pure iron oxide and impregnated with niobia (Nb2O5) were prepared. Their catalytic activities were tested on the oxidation of compounds present in the wastewater from the processing of coffee berries. Particularly caffeine and catechol were tested. The oxidation reactions were carried out with the following systems (i) UV/H2O2, (ii) photo-Fenton and (iii) heterogeneous Fenton. All materials were characterized with X-ray diffraction, Mössbauer and infra (mais) red spectroscopy. Iron was mainly in the forms of goethite and maghemite. The oxidation kinetics were monitored by UV-vis and the oxidation products were monitored by mass spectrometry. The photo-Fenton reaction presented highest oxidation efficiency, removing 98% of all caffeine and catechol contents.

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Degradação de benzeno, tolueno e xilenos em águas contaminadas por gasolina, utilizando-se processos foto-Fenton/ Degradation of benzene, toluene and xilenes in gasoline-contaminated waters by photo-Fenton processes

Tiburtius, Elaine Regina Lopes; Peralta-Zamora, Patricio; Emmel, Alexandre
2009-01-01

Resumo em inglês In this work the potentiality of photo-Fenton processes were investigated toward the degradation of aromatic hydrocarbons (BTXs) from water contaminated with gasoline. The main results demonstrated that BTXs can be quickly degraded by photo-Fenton process assisted by solar or artificial UV-A radiation, degradation that leads to generation of characteristic phenolic transient species (ie. phenol, hydroquinone and catechol). In the treatment of contaminated water by photo-F (mais) enton processes assisted by solar light, complete BTXs removal was observed in reaction times of about 5 min. Mineralization of about 90% was also observed by applying a multiple H2O2 addition system.

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Biossensor a Base de Extrato Bruto de Lacase (Pycnoporus sanguineus) para Análise Ambiental de Compostos Fenólicos/ Biosensor Based on Brut Extract from Laccase (Pycnoporus sanguineus) for Environmental Analysis of Phenolic Compounds

Gil, E. S.; Muller, L.; Santiago, M. F.; Garcia, T. A.
2009-01-01

Resumo em inglês Laccase is a poliphenoloxidase enzyme that catalyzes the oxidation of catechol compounds in the corresponding quinones. The current obtained in this redox process can be used for quantitative analysis. In this work, a carbon paste biosensor modified with a crude enzymatic extract of the Py cnoporus sanguineus fungi as a lacase source is proposed for catechol determination and other phenolic compounds. The effect of carbon paste and electrolyte composition, pH from 3.0 to (mais) 8.0, scan rate from 10 to 40 mVs-1 and potential pulse amplitude from 10 to 60 mV on the differential pulse voltammetric response was investigated. The analytical curves were linear in the catechol concentration range from 2.0 x 10-5 to 7.0 x 10-4 molL-1, with detection limits of 4,5 x 10-6 molL-1. This biosensor was used for the determination of different kind of phenolic compounds, presenting better response for catechol, hydroquinone and resorcine.

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