Sample records for CIGOTOS (zygotes)
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Sample records 1 - 13 shown.



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Desarrollo de embriones de bovino obtenidos por fecundación in vitro cultivados con células oviductales o medio condicionado y transferidos a hembras receptoras/ Bovine embryo development produced by in vitro fertilization cultured with oviductal cell or conditioned medium and transfer to recipients

RATTO, M; BERLAND, M.; WOLTER, M.; MATAMOROS, R.
1999-01-01

Resumen en español Se comparó el desarrollo in vitro de ovocitos obtenidos de ovarios de vaca de matadero, madurados, fecundados y cultivados in vitro bajo dos sistemas. Los ovocitos fueron cultivados en un medio de maduración a 39 °C, 5 % de CO2 y humedad relativa de 95 % durante 22 horas. Posteriormente, fueron incubados con espermatozoides seleccionados a través de una gradiente discontinua de Percoll. La tasa de maduración nuclear y fecundación fueron de 93,7 % (74/79) y 76 (mas) ,9 % (50/65) respectivamente. Un total de 252 ovocitos fecundados fueron cultivados in vitro. El porcentaje de desarrollo in vitro a las 2 días post-inseminación (embriones de 4-8 células) fue de 62,7 % (64/102) para los cigotos cultivados con células oviductales y de 67 % (100/150) para los cultivados en medio condicionado (P0,05). El porcentaje de desarrollo de mórulas fue de 17,6 % (18/102) para los cigotos cultivados con células oviductales y de 13,3 % (20/150) para los cultivados con medio condicionado (P0,05). Se obtuvo una tasa de desarrollo del 15,7 % (16/102) de blastocistos para aquellos cigotos cultivados con células oviductales. No se obtuvo blastocistos a partir de cigotos cultivados en medio condicionado. Cuatro blastocistos fueron transferidos a dos hembras receptoras. A los 42 y 57 días se encontró la presencia de un feto en cada hembra Resumen en inglés The in vitro development of matured and fertilized bovine oocytes was compared between two culture systems. Oocytes were collected by aspiration of follicles of 3-8 mm in diameter using an 18g needle. After morphological selection the oocytes were incubated at 39 0C, 5 % C02 y 95 % relative humidity, during 22 hours. Afterwards, oocytes were incubated with spermatozoa selected by Percoll gradient system. The rate of nuclear maturation and fertilization was 93,7 % (74/79) (mas) and 76,9 % (50/65), respectively. A total of 252 zygotes were cultured, 102 with oviductal cells and 150 in conditioned medium. The in vitro development on day 2 of culture (4- or 8-cell embryos) was 62,7 % (64/102) for the zygotes co-cultured with oviductal cells and 66,7 % (100/150) for the zygotes cultured in conditioned medium. The development to the morula stage was 17,6 % (18/102) for the zygotes co-cultured with oviductal cells and 13,3 % (20/150) for the zygotes cultured in conditioned medium. A statiscally significant difference was not found in the development of 4, 8-cell embryos or morula. The development of embryos up to the blastocyst stage was 15,7 % (16/102) for the zygotes co-cultured with oviductal cells. Two blastocysts were transferred to the uterine horn ipsilateral to the CL in two recipients by non-surgical embryo transfer. Pregnancy was confirmed by ultrasonography at 42 and 57 days detecting the presence of one conceptus in each animal. This work has shown that in vitro inseminated of bovine oocytes with espermatozoa prepared with modified BO and co-cultured with oviductal cells, can develop to the blastocysts stage, unlike those that were cultured with conditioned medium. Finally, it is important to mention that this is the first communication in Chile of pregnancy after in vitro fertilization of bovine oocytes

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EFECTO DE LA SUPLEMENTACIÓN CON ALANINA Y GLICINA SOBRE LOS CLIVAJES INICIALES DE EMBRIONES BOVINOS PRODUCIDOS IN VITRO/ EFFECT OF SUPPLEMENTATION WITH ALANINE AND GLICYNE ON THE INITIAL CLEAVAGES OF BOVINE EMBRYOS PRODUCED IN VITRO

Arias L, Catalina; Ruiz, Tatiana; Olivera A, Martha; Tarazona, Ariel
2007-07-01

Resumen en español Objetivo. Determinar el efecto de la suplementación con alanina y glicina en el medio de cultivo sobre el porcentaje de clivaje de embriones bovinos, bajo condiciones de alta (20%) y baja (7%) tensión de oxígeno. Materiales y métodos. Los embriones fueron producidos a partir de oocitos madurados in vitro en M-199 suplementado con hormonas e inseminados con semen criopreservado; los cigotos fueron cultivados en medio CR1- AA. Al momento del cultivo se adicionaron alani (mas) na y glicina (5 mM y 10mM final respectivamente). Se usaron 4 tratamientos (T1: aminoácidos y baja tensión de oxígeno; T2: aminoácidos y alta tensión de oxígeno; T3: no aminoácidos y baja tensión de oxígeno; T4: no aminoácidos y alta tensión de oxígeno). El clivaje fue evaluado a las 48 hpi (horas post inseminación) evaluándose el número de embriones clivados sobre el total de embriones cultivados y el estadío de desarrollo (no clivados, 2, 4, 5-8 células). Se usó el programa estadístico STATISTICA (versión 5.0). Resultados. El porcentaje de embriones de 5-8 células en el tratamiento 1 respecto a los otros 3 tratamientos fue mayor (p= 0.007). Conclusiones. Los aminoácidos alanina y glicina son fundamentales para los clivajes iniciales y en bajas tensiones de oxígeno se aumenta la proporción de embriones competentes hasta las 48hpi. Resumen en inglés Objective. To determine the effect of supplementation with alanine and glicyne in vitro culture systems on the cleavage rate of bovine embryos under conditions of high (20%) and lower (7%) oxygen tension. Materials and methods. The embryos were produced from oocytes matured in vitro in M-199 supplemented with hormones and inseminated with cryopreservated semen; the zygotes were cultivated in CR1-AA medium. At culture moment alanine and glicyne were added (5 mm and 10mM fi (mas) nal respectively). Four (4) treatments were used (T1: amino acids and low oxygen tension; T2: amino acids and high oxygen tension; T3: non amino acids and low oxygen tension; T4: non amino acids and high oxygen tension). The cleavage was evaluated to 48 hpi (hours post insemination) being evaluated the number of embryos cleavaged on the total of culture embryos and the development stage (non cleavaged, 2, 4, 5-8 cells). The statistical program STATISTICA version 5.0 was used. Results. Embryos rate of 5-8 cells in the treatment one regarding the other 3 ones were higher (p = 0.007). Conclusions. The amino acids alanine, glicyne and in low oxygen tensions are fundamental for the initial cleavages because the proportion of competent embryos increases up to 48 hpi.

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Primera gestación lograda a partir de óvulos humanos vitrificados/ First pregnancy achieved from human vitrified oocytes

Lucena, Elkin; Bernal, Diana Patricia; Lucena, Carolina; Rojas, Alejandro; Mojica, Sandra; Saa, Ángela María; Suárez, Zulma; Morán, Abby
2004-09-01

Resumen en español La vitrificación de óvulos humanos tiene múltiples aplicaciones y demostró ser altamente efectiva en el manejo de una paciente con síndrome de hiperestimulación ovárica que se encontraba en tratamiento para infertilidad secundaria. Objetivo: mostrar la eficiencia de la vitrificación de oocitos aplicada a óvulos en metafase II (MII) de una mujer con síndrome de hiperestimulación ovárica. Procedimiento: se vitrificaron óvulos MII de una paciente con síndrome d (mas) e hiperestimulación ovárica, para lo cual se utilizó la técnica cryotop y como agentes crioprotectores etilenglicol, dimetilsulfóxido (DMSO) y sacarosa. Dos meses después, una vez restablecida a la normalidad la condición clínica de la paciente, se desvitrificaron los óvulos, se realizó la técnica de inyección intracitoplasmática de espermatozoides (ICSI) y 24 horas más tarde se evaluó fertilización, los cigotos obtenidos se cultivaron in vitro por 72 horas hasta el momento de la transferencia embrionaria intrauterina. Resultados: la técnica de vitrificación con cryotop demostró ser una herramienta efectiva para preservar óvulos en lugar de embriones, además de disminuir los problemas éticos, morales, legales y religiosos que ésta conlleva. Conclusiones: la vitrificación por cryotop proporciona altas tasas de supervivencia, fertilización, desarrollo embrionario y embarazo; así mismo, ofrece una nueva alternativa para el manejo del síndrome de hiperestimulación ovárica. Resumen en inglés Among its multiple applications, vitrification of human oocytes has demonstrated to be highly effective in the handling of a patient with OHSS, who was under treatment for secondary infertility. Objective: to demonstrate the efficiency of oocyte vitrification applied to metaphase II oocytes (MII), of women presenting OHSS. Procedure: MII oocytes from a patient with OHSS were vitrified, using the cryotop technique with ethylenglycol, dimethylsulfoxide, and sucrose as cryop (mas) rotectants agents. Two months after, once the clinical stage of the patient was normalized, the oocytes were thawed and underwent ICSI; 24 hours later, fertilization was evaluated and zygotes were maintained under in vitro culture conditions during 72 hours, time of intrauterine embryo transfer. Results: vitrification technique with cryotop demonstrated to be an effective tool for preservation of oocytes instead of freezing embryos due to all the ethical, moral, legal and religious points of view concerning preservation. Conclusions: vitrification with cryotop provides high rates of survival, fertilization, embryo development and ongoing normal pregnancies, offering a new alternative for handling OHSS.

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Medio alternativo para la producción in vitro de embriones bovinos/ Alternative medium for in vitro production of bovine embryos

Ahuja Aguirre, Concepción; Montiel Palacios, Felipe; Pérez Hernández, Ponciano; Gallegos Sánchez, Jaime
2009-09-01

Resumen en español Se evaluó la tasa de desarrollo de blastocistos bovinos producidos in vitro utilizando medio de cultivo convencional para embriones bovinos y medio de cultivo para producción in vitro (PIV) de embriones humanos. Se obtuvieron ovocitos de ovarios de vacas Cebú sacrificadas en matadero. Los folículos ováricos fueron aspirados y los complejos cumulus-ovocitos (CCO) con al menos dos capas de células del cumulus intactas fueron madurados durante 22 a 24 h. Posteriormente (mas) , los CCO fueron fertilizados con semen bovino descongelado y coincubados por 20 a 24 h. Los presuntos cigotos fueron cultivados por 48 h en medio KSOM o en medio HTF modificado. En los días 3 y 5 post-fertilización in vitro (FIV), los embriones fueron cambiados a gotas nuevas de KSOM o de IVC-Two/IVC-Three. Para ambos cultivos, en el día 3 post-FIV se determinó la tasa de división y entre los 7 a 9 días post-FIV, se evaluó el desarrollo embrionario a etapa de blastocisto. La tasa de maduración in vitro fue 89,7%. La tasa de división fue 82,3% para ovocitos cultivados en KSOM y de 80,1% para ovocitos cultivados en HTF (P>0,05). La tasa de desarrollo de blastocistos fue 31,6% para embriones cultivados en KSOM y 29,5% para embriones cultivados en HTF/IVC-Two/IVC-Three (P>0,05). En conclusión, las tasas de desarrollo in vitro de blastocistos bovinos fueron similares para los embriones cultivados en un medio convencional para PIV de embriones bovinos y para los embriones cultivados en medios utilizados para PIV de embriones humanos, por lo que ambos tipos de medios pueden utilizarse para la PIV de embriones bovinos con resultados aceptables. Resumen en inglés The objective of this study was to evaluate the blastocyst development rate for in vitro produced bovine embryos using either the conventional culture medium for bovine embryos or culture media used for the in vitro production (IVP) of human embryos. Oocytes were obtained from ovaries of slaughtered Zebu cows. Ovarian follicles were aspirated and the cumulus-oocytes complexes (COC) with at least two layers of intact cumulus cells were matured for 22 to 24 h. Following tha (mas) t, COC were fertilized with frozen-thawed bovine semen and coincubated for 20 to 24 h. The presumptive zygotes were cultured for 48 h in KSOM medium or modified HTF medium. On days 3 and 5, post-in vitro fertilization (IVF) embryos were placed into new drops of KSOM or IVC-Two/IVC-Three. For both culture types, the cleavage rate was determined on day 3 post-IVF and the embryo development rate to blastocyst stage was evaluated on days 7 to 9 post-IVF. In vitro maturation rate was 89.7%. Cleavage rate was 82.3% for oocytes cultured in KSOM and 80.1% for oocytes cultured in HTF (P>0.05). Blastocyst development rate was 31.6% for embryos cultured in KSOM and 29.5% for embryos cultured in HTF/IVC-Two/IVC-Three (P>0.05). In conclusion, in vitro blastocyst development rates were similar for both the embryos cultured in the conventional medium for IVP of bovine embryos and the embryos cultured in media used for the IVP of human embryos, thus, both types of media can be used for the IVP of bovine blastocysts with acceptable results.

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Uso del microhábitat por el protozoo parásito Aggregata patagonica Sardella, Ré & Timi, 2000 (Apicomplexa: Aggregatidae) en su hospedador definitivo, el pulpo Enteroctopus megalocyathus (Gould, 1852) (Cephalopoda: Octopodidae) en el sur de Chile/ Microhabitat use by the protozoan parasite Aggregata patagonica Sardella, Ré & Timi, 2000 (Apicomplexa: Aggregatidae) in his definitive host Enteroctopus megalocyathus (Gould, 1852) (Cephalopoda: Octopodidae) in southern Chile

IBÁÑEZ, CHRISTIAN M.; PARDO-GANDARILLAS, M. CECILIA; GEORGE-NASCIMENTO, MARIO
2005-09-01

Resumen en español Los protozoos de la familia Aggregatidae requieren de dos hospedadores para completar su ciclo biológico: un crustáceo y un cefalópodo. En este estudio se busca evidenciar si existe un uso diferencial de microhábitats de las infrapoblaciones de Aggregata patagonica entre dos zonas del tracto digestivo de su hospedador definitivo, el pulpo Enteroctopus megalocyathus. Para ello, se examinaron 40 ejemplares de Ancud y 37 de Quellón, provenientes de las capturas artesana (mas) les de la Isla de Chiloé. El tamaño y la densidad de los ooquistes se cuantificaron en el ciego y el intestino del hospedador. Además, se efectuaron observaciones histológicas para determinar cuantitativamente la ocurrencia de los distintos estados de desarrollo del parásito. En Ancud el 80 % de los pulpos estaban parasitados en el ciego y el intestino, mientras que en Quellón era el 100 %. Se determinaron cuatro estados de desarrollo (microgametos, cigotos, esporoquistes inmaduros y maduros). Los ooquistes de A. patagonica fueron más pequeños y abundantes en el ciego, pero la cobertura fue mayor en el intestino. Además, la densidad y cobertura aumenta en pocos meses entre una muestra y otra. Al parecer, A. patagonica no usaría a los dos microhábitats como lugares de preferencia para pasar los diferentes estados de desarrollo, sino más bien, y según las condiciones del microhábitat, en el intestino crecerían más los ooquistes pero en menos cantidad, ocupando una mayor superficie del microhábitat, contrario a lo que ocurre en el ciego. Por esto se sugiere que A. patagonica hace un uso diferencial del microhábitat, mediante dos estrategias distintas de historia de vida Resumen en inglés The protozoan parasites of the family Aggregatidae, require two hosts to complete their life cycle, a crustacean and a cephalopod. This research looks for evidence of differential microhabitat use of Aggregata patagonica infrapopulations between two zones of the digestive tract of his definitive host, the octopus Enteroctopus megalocyathus. Forty specimens from Ancud and 37 from Quellón coming from artisanal catch from Chiloé Island in southern Chile were examined. The (mas) size and density of the oocysts were quantified in the caecum and intestine of the host. Histological preparations were carried out to determine quantitatively the occurrence of the different development stages of the parasite. In Ancud, 80 % of octopuses were parasited in the caecum and intestine, while in Quellón 100 % had oocyst. Four development stages (microgametes, zygotes, immature and mature sporocysts) were recognized. The oocysts of Aggregata patagonica were smaller and more abundant in the caecum, but their coverage was higher in the intestine. Moreover, density and coverage increased in few months between samples. Apparently, Aggregata patagonica does not use the two microhabitats as preferential places to pass the different developmental stages, but rather, and according to the conditions of the microhabitat, the oocysts would grow more in the intestine albeit in small number, occupying a higher surface of the microhabitat, contrary to what happens in the caecum. This suggests that A. patagonica may have two distinct life history strategies

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Simplificación de la fertilización de ovocitos durante la producción in vitro de embriones bovinos/ Simplification of oocytes fertilization during in vitro production of bovine embryos/ Simplificação da fecundação de oócitos durante produção in vitro de embriões de bovinos

Urrego, Rodrigo; Tarazona, Ariel; Olivera Ángel, Martha; Camargo, Omar
2008-09-01

Resumen en portugués O objetivo deste estudo foi avaliar um novo procedimento de fertilização in vitro (FIV) de oócitos bovinos, que foi omitida na centrífuga esperma lavar os processos de seleção e de esperma. Dentro de cada um dos poços pratos convencionais quatro poços (poços externa) um novo bem menor (poços internos) cerca de 50 μl fato em vidro (0,3 mm de altura por 0,8 mm de diâmetro) foram introduziu. O procedimento foi de encher poços interna e externamente com 700 & (mas) #956; l meio de fertilizaηγo, até que a fossa foi coberto por meios internos e, em seguida, depositadas 10 CCOs em poços internos; então 30 μl previamente descongelados sêmen foi depositado no fundo da cova fora. Depois de uma hora é retirada a todo o conteúdo da cova, e foi deixada fora da doméstica no conteúdo do bem com o ambiente e células germinativas por um período de incubação de 16 h. A alegada zygotes foram cultivados em meio CR1aa por um período de 7 dias com uma mudança no meio-72h. Como um controle, utilizado uma gradiente de Percoll 45-90% de selecção de espermatozóides. A taxa de oócitos foi dividida (70.8 vs 73.1) e da proporção de oócitos que atingiu o estádio e foi Mórula blastocisto (18.8 vs 20.3), respectivamente. Os resultados obtidos com a nova metodologia proposta são semelhantes aos obtidos com a metodologia convencional (p Resumen en español El objetivo de este estudio fue evaluar un nuevo procedimiento de fertilización in vitro (FIV) de ovocitos bovinos, en el cual se omitió la centrifugación de los espermatozoides para los procesos de lavado y selección espermática. Dentro de cada uno de los pozos de los platos convencionales de cuatro pozos (pozos externos) se introdujo un nuevo pozo más pequeño (pozos internos) de aproximadamente 50 μl hecho en material de vidrio (0.3 mm de alto por 0.8 mm de (mas) diámetro). El procedimiento consistió en llenar los pozos interno y externo con 700 μl de medio de fertilización, hasta que el pozo interno quedara cubierto de medio, luego se depositaron 10 CCOs por pozo interno; luego 30 μl de semen previamente descongelado se depositaron en el fondo del pozo externo. Despuιs de una hora se removiσ todo el contenido del pozo externo y se dejσ el contenido del pozo interno con el medio y las células germinales por un periodo de incubación de 16 h. Los presuntos cigotos fueron cultivados en medio CR1aa por un periodo de siete días con un cambio de medio a las 72h. Como control, se utilizó un gradiente de Percoll 45-90% para la selección espermática. La tasa de de ovocitos divididos fue de (70.8 vs. 73.1) y la proporción de ovocitos que llegaron al estadio de morúla y blastocisto fue de (18.8 vs. 20.3), respectivamente. Los resultados obtenidos con la nueva propuesta metodológica son similares a los obtenidos con la metodología convencional (p Resumen en inglés This study was conducted to evaluate an in vitro fertilization (IVF) procedure that avoids the washing-selection-centrifugation of spermatozoa prior to coincubation with oocytes. A special dish was constructed as follows: in the middle of each of the 4-wells of a conventional plastic dish (larger wells), another little (≈50 μl) glass dish (inner well) was placed (0.3 mm-tall x 0.8 mm in diameter), in such a way that when the larger plate was filled with 700 (mas) 56;l of IVF media (Fert-TALP), the inner well was also filled up to overflowing. Ten in vitro matured oocytes were set into the inner well, and 30 μl of thawed semen were placed on the bottom of the outer well. After one hour of incubation, the media from the outer well was removed, and the well with the remaining media and the germ cells, were incubated for 16 hours. Presumptive zygotes were cultured in a CR1aa media for seven days with a culture media replace at 72 h. As a control, a conventional IVF, using the classical 45%-90% Percoll gradient selection, was carried out. The cleavage rates (70.8 vs. 73.1) and the proportion of oocytes reaching morula and blastocyst stages (18.8 vs. 20.3) by the "easy-IVF" were similar to the results obtained by the classical method (p

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Comparación entre el clivaje temprano y el estadio pronuclear como parámetros de referencia para inducir el embarazo en pacientes ovoreceptoras en Cali (Colombia)/ Comparing early cleavage and pronuclear state as reference parameters for inducing pregnancy in embryo implantation patients in Cali, Colombia

Estela-Paz, María Esther; Saavedra-Saavedra, Jaime; Moyano, Martha Norah
2009-09-01

Resumen en español Introducción: algunos autores han propuesto métodos no invasivos que se centran en el clivaje temprano del estadio de dos células a las 25 y 27 horas luego de ocurrida la inseminación, los cuales son aplicables a los programas de fertilización in vitro que aumentan la probabilidad de implantación y embarazo. Objetivo: comparar la tasa de embarazo en pacientes ovoreceptoras con embriones provenientes de clivaje temprano con respecto a la del estadio pronuclear. Metod (mas) ología: se realizó un estudio de cohorte retrospectivo, en el cual se incluyeron a las pacientes ovoreceptoras que asistieron entre abril de 2004 y diciembre de 2007 al Centro de Biomedicina -FECUNDAR en Cali (Colombia) por presentar baja respuesta al ciclo de estimulación ovárica controlada, factor edad, falla ovárica o por ser pacientes subrogadas o gestacionales. El tamaño de la muestra se dividió de la siguiente manera: el porcentaje de embarazo esperado para el grupo de clivaje temprano-singamia (grupo 1) fue 79% (36 pacientes) mientras que el porcentaje de embarazo para el grupo pronuclear (grupo 2) llegó a ser 21% (9 pacientes). A partir de la obtención de estos datos, se determinaron las tasas de implantación y de embarazo y se compararon los dos grupos por medio de la prueba Chi-cuadrado (X²). Resultados: de un total de 289 cigotos, se incluyeron 183 que cumplieron los parámetros propuestos, entre embriones provenientes de clivaje temprano (CT), singamia (S) y estadio pronuclear (PN) a las 25 y 27 horas posinseminación. De este total, 79% provenían del estadio clivaje temprano-singamia y 21% del estadio pronuclear. El promedio de embriones transferidos a las pacientes ovoreceptoras fue tres embriones, la edad promedio fue 38 años, la tasa de embarazo obtenida al transferir los embriones provenientes de clivaje temprano fue 44% en comparación con 41% para la transferencia de los embriones no clivados a las 25 horas posinseminaci ón. Finalmente, no se encontraron diferencias significativas en la obtención del embarazo. Conclusión: bajo las condiciones del estudio, el resultado muestra que no hay diferencias en la tasa de éxitos para ambos procedimientos. Resumen en inglés Introduction: some authors have proposed that non-invasive embryo implantation methods (based on early cleavage or pronuclear stage for two cells 25 and 27 hours post-insemination) are applicable to in vitro fertilisation programmes, thereby increasing the probability of implantation and pregnancy. Objective: comparing pregnancy rates in patients implanted with embryos originating from early cleavage to those from the pronuclear stage. Methodology: a retrospective cohort (mas) study was carried out. Embryo implantation patients were included who had been attending the FECUNDAR -Biomedicine Centre in Cali, Colombia, from April 2004 to December 2007 who presented a poor responsetothecontrolledovarianstimulationcycle, age factor and/or ovarian failure and pregnancy substitute patients. The sample consisted of 45 patients; 36 patients (79%) were expected to become pregnant in the early-syngamy and cleavage group (group 1) and 9 patients (21%) in the pronuclear group (group 2). Implantation and pregnancy rates were determined and the Chi-square (X²) test was used for comparing both groups. Results: 183 of the 289 zygotes complied with the proposed parameters (i.e. embryos from early cleavage, syngamy and pronuclear stage 25 and 27 hours post-insemination); 79% of these 183 came from the early cleavage and syngamy stage and 21% from the pronuclear stage. Three embryos on average were transferred to embryo implantation patient; average age was 38, the pregnancy rate obtained when transferring early cleavage embryos was 44% compared to 41% for non-cleaved embryo transfer 25 hours post-insemination. No statistically significant differences were found regarding how pregnancy was induced. Conclusion: equal success rates were obtained for both procedures in the given study conditions.

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Hibridación entre los Camarones de río macrobrachium rosenbergii (de man) y m. Acanthurus (Wiegmann). ¿Es posible?

Salazar, Greys; Graziani, César; Villarroel, Elvis; Luna, Merirros; Moreno, Carlos; Guevara, Miguel
2005-08-01

Resumen en portugués Macrobrachium rosenbergii é uma espécie exótica de camarão de rio da Venezuela e existe preocupação quanto à possibilidade de hibridar com espécies nativas afetando a biodiversidade local. Neste trabalho se ensaiou a factibilidade de hibridação entre M. rosenbergii e a espécie nativa M. acanthurus mediante cópula controlada e inseminação artificial. Comparou-se a eficiência de ambos formas de reprodução mediante cruzamentos intraespecíficos em ambas esp� (mas) �cies. Ambos métodos resultaram igualmente eficientes nas duas espécies de acordo a maioria das variáveis quantificadas. No entanto, a porcentagem de êxito na produção larvária foi menor em cruzamentos intraespecíficos de M. rosenbergii por inseminação artificial. Realizaram-se dez cruzamentos interespecíficos por cópula controlada entre machos M. rosenbergii e fêmeas M. acanthurus e dez no sentido inverso do cruzamento, nos quais não se observou cortejo nem apareamento, o que sugere a existência de isolamento reprodutivo etológico. Realizaram-se 19 tentativas de inseminação artificial entre machos M. rosenbergii e fêmeas M. acanthurus, e 21 no sentido inverso do cruzamento, nos que se observou que os ovos foram fertilizados mas não completaram o processo de blastulação. O isolamento reprodutivo etológico e a morte dos zigotos híbridos constituem barreiras pré- e pós-zigóticas, que impediriam a hibridação destas duas espécies no meio natural. Resumen en español Macrobrachium rosenbergii es una especie de camarones de río exótica en Venezuela y existe preocupación en cuanto a la posibilidad de que hibride con especies nativas afectando la biodiversidad local. En este trabajo se ensayó la factibilidad de hibridación entre M. rosenbergii y la especie nativa M. acanthurus mediante cópula controlada e inseminación artificial. Se comparó la eficiencia de ambas formas de reproducción mediante cruzamientos intraespecíficos en (mas) dos especies. Ambos métodos resultaron igualmente eficientes en las dos especies de acuerdo a la mayoría de las variables cuantificadas. Sin embargo, el porcentaje de éxito en producción larvaria fue menor en cruzamientos intraespecíficos de M. rosenbergii por inseminación artificial. Se realizaron diez cruzamientos ínterespecíficos por cópula controlada entre machos M. rosenbergii y hembras M. acanthurus y diez en sentido inverso del cruzamiento, en los cuales no se observó cortejo ni apareamiento, lo que sugiere la existencia de aislamiento reproductivo etológico. Se realizaron 19 intentos de inseminación artificial entre machos M. rosenbergii y hembras M. acanthurus, y 21 en sentido inverso del cruzamiento, en los que se observó que los huevos fueron fertilizados pero no completaron el proceso de blastulación. El aislamiento reproductivo etológico y la muerte de los cigotos híbridos constituyen barreras pre- y postcigóticas, que impedirían la hibridación de estas dos especies en el medio natural. Resumen en inglés Macrobrachium rosenbergii is an exotic freshwater shrimp species found in Venezuelan rivers, and there is concern about the possibility of hybridization with native species affecting the natural biodiversity of the region. In this study, the possibility of hybridization between M. rosenbergii and the native species M. acanthurus was evaluated using controlled mating and artificial insemination. We compared the efficiency of both types of reproduction using intraspecific c (mas) rosses in both species. Both reproduction methods were equally efficient in both species according to most of the quantified variables. However, the success rate in the production of larvae was lower in the intraspecific crosses of M. rosenbergii using artificial insemination. Ten interspecific crosses were carried out using controlled mating between M. rosenbergii males and M. acanthurus females, as well as ten reciprocal crosses. Neither courtship nor mating attempts were observed, which suggests that ethological reproductive isolation exists between these two species. Nineteen attempts were carried out using artificial insemination between M. rosenbergii males and M. acanthurus females, as well as 21 reciprocal crosses. In every case, fertilized eggs were observed but they did not progress past the blastula stage. The ethological reproductive isolation and the lack of viability of the hybrid zygotes constitute pre- and postzygotic barriers that should preclude the natural hybridization of these species.

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Ética científica de la clonación humana/ Scientific ethics of human cloning

Valenzuela, Carlos Y
2005-01-01

Resumen en inglés True cloning is fission, budding or other types of asexual reproduction. In humans it occurs in monozygote twinning. This type of cloning is ethically and religiously good. Human cloning can be performed by twinning (TWClo) or nuclear transfer (NTClo). Both methods need a zygote or a nuclear transferred cell, obtained in vitro (IVTec). They are under the IVTec ethics. IVTecs use humans (zygotes, embryos) as drugs or things; increase the risk of malformations; increase dev (mas) elopment and size of abnormalities and may cause long-term changes. Cloning for preserving extinct (or almost extinct) animals or humans when sexual reproduction is not possible is ethically valid. The previous selection of a phenotype in human cloning violates some ethical principles. NTClo for reproductive or therapeutic purposes is dangerous since it increases the risk for nucleotide or chromosome mutations, de-programming or re-programming errors, aging or malignancy of the embryo cells thus obtained (Rev Méd Chile 2005; 133: 105-12)

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Gestaciones producidas con embriones bovinos clonados por transferencia nuclear/ Pregnancies produced by bovine embryos cloned by nuclear transfer

Martínez Díaz, M A; Gatica, R; Correa, J E; Eyestone, W
2007-01-01

Resumen en español El presente estudio comunica la obtención de gestaciones de embriones clonados por transferencia nuclear de células somáticas en bovinos por primera vez en Chile. Ovocitos bovinos obtenidos de ovarios de matadero fueron madurados in vitro y enucleados por micromanipulación. Células donantes de núcleos fueron obtenidas de la oreja de una vaca adulta, cultivadas por 9-14 días y criopreservadas en nitrógeno líquido. Células somáticas confluentes fueron desagregada (mas) s e insertadas individualmente en el espacio perivitelino de un ovocito enucleado. Cada par ovocito-célula obtenido fue tratado con dos pulsos eléctricos para inducir su fusión y luego los embriones fueron cultivados por 2 horas y tratados con ionomicina y 6-dimetilaminopurina para su activación. Los embriones fueron cultivados en medio sintético oviductual por 8-9 días hasta el estado de blastocisto. Blastocistos fueron transferidos a vaquillas receptoras 7 a 9 días postcelo. Se realizaron 25 transferencias a vaquillas receptoras y se logró la preñez en 5 (20%) de ellas. Dos de éstas abortaron a los 42 días y una tercera a los 120 días. Las dos vaquillas preñadas restantes mantuvieron su gestación (más de 45 días) hasta el momento de escribir esta comunicación Resumen en inglés With the aim of obtaining pregnancies from nuclear transfer embryos reconstituted with somatic cells and enucleated oocytes, bovine oocytes from slaughterhouse were matured in vitro and enucleated by micromanipulation. Nuclear donor cells were obtained from the ear of an adult cow, cultured for 9 to 14 days and cryopreserved in liquid nitrogen. Confluent cells were inserted individually in the perivitelline space of enucleated oocytes and treated with 2 electric pulses to (mas) induce fusion. The reconstituted zygotes were then cultured for 2 hours and treated with ionomycin and 6-dimethylaminopurine for their activation. The embryos were cultured in synthetic oviduct fluid for 8 to 9 days to obtain the blastocyst stage. These blastocysts were transferred to recipient heifers 7 to 9 days after oestrus. The ultrasound pregnancy diagnosis was done about 30 days after recipient oestrus. Five pregnancies were obtained from 25 transfers (20%). Two of them were lost at 42 days and a third at 120 days. This seems to be the first report on pregnancies obtained by cloned embryos in Chile

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Gametocitos de Plasmodium vivax y Plasmodium falciparum: etapas relegadas en el desarrollo de vacunas/ Plasmodium vivax and Plasmodium falciparum gametocyte stages are neglected in vaccine development

Contreras-Ochoa, Carla; Ramsey, Janine M
2004-02-01

Resumen en español Los gametocitos de Plasmodium son los responsables de la transmisión del huésped vertebrado al mosquito vector. Sufren un proceso de desarrollo complejo a partir de parásitos asexuales, que no está completamente entendido, expresando proteínas y moléculas de adhesión específicas. Son capaces de inducir una respuesta inmune humoral específica con anticuerpos IgG, y celular específica, con producción de TNFa, IFNg y proliferación de linfocitos gd+, aun cuando ex (mas) isten respuestas inducidas en contra de las etapas previas del parásito (esporozoito, exo-eritrocítica y eritrocítica). Las vacunas destinadas a bloquear la transmisión del parásito no contemplan a los gametocitos circulantes en el huésped como blancos de acción, sino que van enfocadas contra antígenos expresados en los gametos y en las etapas posfertilización. El estudio de los mecanismos que regulan la producción de gametocitos y de la respuesta inmune contra éstos, ofrece una oportunidad para el desarrollo de estrategias adicionales para el control de la transmisión. Resumen en inglés Plasmodium gametocytes are responsible for transmission from the vertebrate host to the mosquito. Plasmodium gametocytes undergo a complex cycle from asexual stages, through a poorly understood process characterized by expression of stage-specific proteins and adhesion molecules. Gametocytes are capable of inducing specific humoral IgG, and cellular responses, which include induction of TNFa, IFNg and gd+ lymphocyte proliferation, in addition to immune responses to other (mas) stages of the parasite (sporozoite, exo-erythrocytic stages, erythrocytic stages). Although transmission-blocking vaccines against Plasmodium do not currently include components against the gametocytes (rather they focus on gametes, zygotes or ookinetes, stages which occur in the mosquito), further understanding of the mechanisms underlying gametocytogenesis and immune responses against these stages may provide additional strategies for more effective transmission inhibition.

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Gametocitos de Plasmodium vivax y Plasmodium falciparum: etapas relegadas en el desarrollo de vacunas/ Plasmodium vivax and Plasmodium falciparum gametocyte stages are neglected in vaccine development

Contreras-Ochoa, Carla; Ramsey, Janine M
2004-02-01

Resumen en español Los gametocitos de Plasmodium son los responsables de la transmisión del huésped vertebrado al mosquito vector. Sufren un proceso de desarrollo complejo a partir de parásitos asexuales, que no está completamente entendido, expresando proteínas y moléculas de adhesión específicas. Son capaces de inducir una respuesta inmune humoral específica con anticuerpos IgG, y celular específica, con producción de TNFa, IFNg y proliferación de linfocitos gd+, aun cuando ex (mas) isten respuestas inducidas en contra de las etapas previas del parásito (esporozoito, exo-eritrocítica y eritrocítica). Las vacunas destinadas a bloquear la transmisión del parásito no contemplan a los gametocitos circulantes en el huésped como blancos de acción, sino que van enfocadas contra antígenos expresados en los gametos y en las etapas posfertilización. El estudio de los mecanismos que regulan la producción de gametocitos y de la respuesta inmune contra éstos, ofrece una oportunidad para el desarrollo de estrategias adicionales para el control de la transmisión. Resumen en inglés Plasmodium gametocytes are responsible for transmission from the vertebrate host to the mosquito. Plasmodium gametocytes undergo a complex cycle from asexual stages, through a poorly understood process characterized by expression of stage-specific proteins and adhesion molecules. Gametocytes are capable of inducing specific humoral IgG, and cellular responses, which include induction of TNFa, IFNg and gd+ lymphocyte proliferation, in addition to immune responses to other (mas) stages of the parasite (sporozoite, exo-erythrocytic stages, erythrocytic stages). Although transmission-blocking vaccines against Plasmodium do not currently include components against the gametocytes (rather they focus on gametes, zygotes or ookinetes, stages which occur in the mosquito), further understanding of the mechanisms underlying gametocytogenesis and immune responses against these stages may provide additional strategies for more effective transmission inhibition.

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El riesgo de malformaciones congénitas y defectos de la programación genómica, en relación con las técnicas de reproducción asistida y la clonación/ The risk of congenital malformations and genomic imprinting defects in assisted reproductive technologies and nuclear transfer cloning

Valenzuela, Carlos Y
2005-09-01

Resumen en inglés Recent studies show that assisted reproductive technologies (ART), whether in vitro fertilization (IVF) or intra-cytoplasmatic sperm injection (ICSI) or applied to cloning by somatic cell nuclear transfer (SCNT) are associated to a higher risk of congenital malformations and errors in deprogramming, maintenance or reprogramming genomic imprinting in humans and animals. IVF and ICSI are also associated to an increased admission to neonatal intensive care units and more nee (mas) d for health care resources in infancy. A mutagenic effect of a chemical used in SCNT has been reported and gene depression was found in bovine embryos obtained by IVF or SCNT. The causes of these anomalies could be pathological conditions for which ART is applied, a direct effect of technologies on the zygotes or embryos, avoidance for zygotes or embryos of the oviduct path that is needed to elicit necessary immunity or genomic programming processes, or adaptive selective steps acquired during thousands of millions of generations in evolution. The knowledge of evolution is emphasized as essential in the scientific ethical analysis (Rev Méd Chile 2005; 133: 1075-80)

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