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Clonaje de la proteína de choque térmico de 20 kDa de Leishmania amazonensis/ Cloning of 20 kDa heat shock protein of Leishmania amazonensis

Montalvo Álvarez, Ana Margarita; Folgueira Fernández, Cristina; Requena Rolanía, José María
2009-08-01

Resumen en español INTRODUCCIÓN: la inducción de las proteínas de choque térmico constituyen un mecanismo homeostático que protege a las células del efecto destructivo del calor u otras condiciones de estrés ambiental, paralelamente, ellas cumplen importantes funciones celulares. La proteína de choque térmico de 20 kDa se reportó recientemente en Leishmania amazonensis. OBJETIVO: describir la metodología utilizada para realizar el clonaje de las proteínas de choque térmico, lo (mas) que permitió acometer estudios de algunas propiedades biológicas. MÉTODOS: la región codificante del gen hsp20 se amplificó mediante la reacción en cadena de la polimerasa con cebadores adecuados. El producto amplificado se clonó inicialmente en el vector pCR2.1 (Invitrogen) y después en el vector de expresión en procariotas pET-28b (Novagen), para obtener proteína recombinante. De manera paralela, el mismo fragmento se clonó en el vector de expresión en eucariotas pcDNA3 (Invitrogen) para obtener un posible preparado vacunal de ADN. Se realizó la secuenciación nucleotídica de los clones obtenidos, con la finalidad de verificar su fidelidad. RESULTADOS: se obtuvieron plásmidos recombinantes que codifican la HSP20 de Leishmania, y permiten la obtención de proteína recombinante y de ADN en forma masiva. CONCLUSIONES: ambos plásmidos fueron útiles para estudiar algunas de las propiedades biológicas de esta proteína. Este acercamiento puede ser de interés en otros trabajos de esta índole y constituir una guía metodológica. Resumen en inglés INTRODUCTION: the induction of heat shock proteins is a homeostatic mechanism that protects cells from the deleterious effects of thermal and other environmental stresses. In addition, they have important cell functions. The 20kDa heat shock protein in Leishmania amazonensis was recently reported. OBJECTIVE: to describe the methodology used for cloning of heat shock proteins, which allowed the study of some biological properties. METHODS: the hsp20 gene coding region was (mas) amplified by polymerase chain reaction using adequate primers. The amplified product was initially cloned in pCR2.1 vector (Invitrogen) and then in pET-28b vector (Novagen), to obtain recombinant protein. The same fragment was cloned also in the eukariote expression vector pcDNA3 (Invitrogen). The nucleotidic sequencing of the different clones was made, in order to verify their fidelity. RESULTS: the recombinant plasmids that encode HSP20 protein in Leishmania and allow obtaining massively recombinant protein and DNA were produced. CONCLUSIONS: both plasmids were useful to study some of the biological properties of this protein. This approach could be useful for similar research and represent a suitable methodological guideline.

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La ciencia neoliberal/ Neo-liberal Science

Lander, Edgardo
2005-05-01

Resumen en español En las pocas décadas desde el inicio de la tecnología del recombinante ADN (1972), en un contexto geopolítico caracterizado por la expansión de la lógica mercantil a todos los ámbitos de la vida colectiva, se han producido transformaciones profundas en la práctica y el ethos de las llamadas ciencias de la vida y en el papel de las universidades en este campo. Estos cambios se han originado y adquieren particular extensión en Estados Unidos. Los valores y normas de (mas) la ciencia liberal -tal como las caracterizó clásicamente Robert Merton- tienden a convertirse en reliquias del pasado. El estudio de este nuevo paradigma científico -la ciencia neoliberal- es indispensable como guía para prever (y resistir) tendencias similares en otras disciplinas y su extensión al resto del mundo. Resumen en inglés In the few decades since the origins of recombinant DNA technology (1972), in a geopolitical context characterized by a growing mercantilization of all spheres of society, profound transformations have taken place in the practice and ethos of the so-called life sciences and in the role universities in these fields. These changes originated and have been particularly widespread in the United States. The values and norms of liberal science -as classically described by Rober (mas) t Merton- tend to become relics of the past. It is necessary to study this new scientific paradigm -neoliberal science- as a guide to foresee (and resist) similar trends in other scientific disciplines, and their extension to the rest of the world.

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La biotecnología en plantas y aspectos biotecnológicos del mango/ PLANT BIOTECHNOLOGY AND BIOTECHNOLOGICAL ASPECTS OF MANGO/ A BIOTECNOLOGIA EM PLANTAS E ASPECTOS BIOTECNOLÓGICOS DA MANGA

Rivera-Domínguez, Marisela
2006-02-01

Resumen en portugués O presente trabalho analisa aspectos biotecnológicos gerais para o melhoramento das características agronômicas de plantas hortofrutigranjeiras, utilizando a tecnologia do ADN recombinante, mediante a qual, tem-se logrado como objetivo a obtenção de plantas resistentes à insetos, fungos, bactérias, herbicidas, com melhores características de qualidade durante a pre e pós-colheita e com alto conteúdo nutricional. Tem-se dado um foco especial aos aspectos biotecno (mas) lógicos para o melhoramento da manga, uma vez que, durante as duas décadas passadas muito poucas cultivares têm sido melhoradas. Em alguns ensaios, os principais aspectos estudados são a eficiência na indução de embriões durante a embriogenese somática e na recuperação de plantas, a indução ao acaso de mutantes para obter plantas resistentes à agentes seletivos e a transformação com genes que regulam certas características agronômicas. A biotecnologia tem um alto potencial para prover soluções alternativas a problemas que demandam não só os produtores de manga, mas também para os demais produtores agrícolas Resumen en español El presente trabajo analiza aspectos biotecnológicos generales para el mejoramiento de características agronómicas de plantas hortofrutícolas, utilizando la tecnología del ADN recombinante. Mediante la misma se ha logrado obtener plantas transgénicas resistentes a insectos, hongos, bacterias y herbicidas, con mejores características de calidad durante poscosecha y con alto contenido nutricional. Se ha dado un enfoque especial a los aspectos biotecnológicos para el (mas) mejoramiento del mango, dado que durante las pasadas dos décadas muy pocos cultivares han sido mejorados. En algunos ensayos, los principales aspectos estudiados son la eficiencia en la inducción de embriones durante la embriogénesis somática y en la recuperación de plantas, la inducción al azar de mutantes para obtener plantas resistentes a agentes selectivos y la transformación con genes que regulan ciertas características agronómicas. La biotecnología tiene un alto potencial para proveer soluciones alternativas a problemas que demandan no sólo los productores de mango, sino también para los demás productores agrícolas. Resumen en inglés This paper gives an overview of general biotechnological procedures for the improvement of agronomical characteristics of plants using DNA recombinant technologies. Transgenic plants have been obtained which show resistance to insects, fungi, bacteria and herbicides, high nutritional value and improved quality traits during pre and post harvest. Special emphasis is placed on efforts to improve mango through biotechnology, given that very few improved mango cultivars have (mas) been released during the past two decades. Some assays involved studies on the induction of efficient embryo induction during somatic embryogenesis and on plant recovery, the random induction of mutants to obtain resistance to selective agents, and the transformation by genes that regulate given horticultural traits. Biotechnology has a high potential to provide alternative solutions to the problems claimed by mango producers as well as other horticultural producers.

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Modulación de la respuesta inmune: tendencias actuales/ Modulation of the immune response: current trends

Martínez Manrique, Clara Esther
2006-12-01

Resumen en español Se hizo una revisión sobre los inmunomoduladores, su modo de acción y clasificación, asumiendo estos criterios en los adyuvantes inmunológicos. Se valoró dentro de las tendencias actuales en la inmunomodulación, la conjugación de moduladores conocidos, la obtención y aplicación de otros de orígenes naturales o provenientes del sistema inmune como las citoquinas y como novedad la aplicación de la sustancia CM-95 tratada magnéticamente. Se dieron a conocer las t (mas) ecnologías utilizadas para la obtención de estas sustancias como: ADN recombinante, transfección de genes, técnicas de conjugación, así como el tratamiento magnético, entre otras. Estos enfoques nuevos han permitido disminuir la toxicidad de estas sustancias y aumentar su eficacia inmunológica, lo que posibilita establecer el balance entre eficacia e inocuidad de acuerdo con las normas establecidas para sus aplicaciones en la terapia de enfermedades o profilaxis, en la obtención de vacunas humanas y veterinarias de nueva generación y sueros inmunes. Resumen en inglés A review of immunomodulators, their mode of action and classification was made, assuming these criteria in the immunological adjuvants. The conjugation of known modulators, the obtention and application of other of natural origin or from the immune system, such as cytokines, and the application of the magnetically treated CM-95 substance as a novelty were assessed among the present trends in immunomodulation. The technologies used for the obtention of these substances, su (mas) ch as recombinant DNA, transfection of genes, conjugation techniques, and magnetic treatment, among others, were made known. These new approaches have allowed to reduce the toxicity of these substances and increase their immunological efficiency, allowing to establish a balance between efficacy and innocuousness, according to the norms established for their application in the therapy of diseases or prophylaxis, and in the obtention of human and veterinary vaccines of new generation and immune sera.

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Inmunogenicidad de la vacuna Heberbiovac-HB en impedidos físicos y mentales

PEDROSO FLAQUET, PLÁCIDO; DÍAZ GONZÁLEZ, MANUEL; RODRÍGUEZ LAY, LICEL; BRAVO GONZÁLEZ, JOSÉ R.
1997-04-01

Resumen en español Se aplicó la vacuna ADN recombinante Heberbiovac-HB contra la hepatitis B a 2 grupos de niños recluidos en 2 hogares de impedidos físicos y mentales, a las dosis de 10 y 5 myg con el esquema 0, 1 y 6 meses para estudiar su inmunogenicidad, la que fue evaluada a los 2, 7 y 12 meses después de aplicada la primera dosis. A los 60 d se obtuvo 80,9 % de seroprotección en los niños que recibieron 10 myg, mientras que en el grupo que fue vacunado con 5 myg se logró 65,0 % (mas) de seroprotección y no se encontraron diferencias significativas entre los grupos. Cuando se midió la respuesta inmune 1 mes después de aplicada la tercera dosis se obtuvo 100,0 % de seroprotección (³ 10 UI/L) en los 2 grupos de vacunados. Al año, la seroprotección fue del 100,0 % para los 2 grupos de niños. La media geométrica de los títulos de anticuerpos (TMG) alcanzó, 30 d después de la segunda dosis en los 2 grupos de estudio, niveles por encima de 10 UI/L, que es el mínimo protector. Un mes después de la tercera dosis, los TMG alcanzaron valores de 527,7 UI/L en el grupo de 10 myg y 324,7 UI/L en el de 5 myg y no se encontraron diferencias significativas entre los grupos (p Resumen en inglés The recombinant DNA Heberbiovac-HB vaccine against hepatitis B was applied to 2 groups of children at 2 homes for the physically and mental disabled at doses of 10 and 5 mug with the scheme 0, 1 and 6 months to study its immunogenenecity, which was evaluated at 2, 7 and 12 months after the first dose was administered. On the 60th day it was obtained 80,9 % of seroprotection in children who received 10 mug, whereas in the group that was vaccinate de with 5 mug 65,0 % of se (mas) roprotection was attained and there were no significant differences between the groups. 100 % of seroprotection (³ 10 UI/L) was obtained in the 2 vaccinated groups when the immune response was measured 1 month after the third dose was applied. A year later, seroprotection was 100 % for the 2 groups of children. The geometrical mean of the antibody titres (TMG) reached levels avove 10 UI/L, which is the minimum protector, in the 2 study groups 30 days after the second dose. A month after the third dose, the TMG attained values of 527,7 UI/L in the group of 10 mug and of 324,7 UI/L in that of 5 mug. No remarkable differences were found between the groups (p

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Esferocitosis hereditaria: aspectos clínicos, bioquímicos y moleculares/ Hereditary spherocytosis: Clinical, biochemical and molecular aspects

Herrera García, Mayelín; Estrada del Cueto, Marianela
2002-04-01

Resumen en español La esferocitosis hereditaria (EH) es una enfermedad caracterizada por anemia hemolítica de severidad variable, con presencia de esferocitos en sangre periférica y una respuesta clínica favorable a la esplenectomía. Con el desarrollo de nuevas técnicas se encontraron las primeras alteraciones bioquímicas de las proteínas de la membrana eritrocitaria, y posteriormente, se han podido precisar las alteraciones moleculares mediante las técnicas del ADN recombinante. La (mas) EH es una enfermedad muy heterogénea que se produce por un defecto intrínseco del glóbulo rojo, y existen otras alteraciones secundarias a esta afección. La prueba más utilizada para el diagnóstico de la EH es la fragilidad osmótica del glóbulo rojo. Se ha demostrado que esta enfermedad es producida por defectos de las proteínas que intervienen en las interacciones verticales entre el esqueleto de la membrana y la bicapa lipídica. El tratamiento de elección en la EH es la esplenectomía, ya que es el más efectivo en el control de la anemia, aunque la sobrevida de los glóbulos rojos permanece acortada y los esferocitos no desaparecen. Este proceder se indica en pacientes con anemia hemolítica severa o en individuos moderadamente asintomáticos pero que presentan litiasis vesicular Resumen en inglés Hereditary spherocytosis(HS) is a disease characterized by hemolytic anemia of variable severity, with spherocytes in peripheral blood and a clinical response to splenectomy. The development of new techniques allowed finding out the first biochemical alterations in erythrocyte membrane proteins and later on, the recombinant DNA techniques made possible to detect molecular alternations. HS is a very heterogeneous disease caused by an intrinsic defect of red cells; there ar (mas) e other secondary disorders to this affection. The most used test for diagnosing HS is the osmotic fragility of the red cell. It has been proved that this disease is caused by defects in proteins participating in vertical interactions between membrane skeleton and lipid bi-layer. The treatment of choice in HS is splenectomy, since this is the most effective method in the control of anemia, although red cell survival is still short and spherocytes do not disappear. This procedure is recommended for patients with severe hemolytic anemia and moderately asymptomatic individuals who have vesicular lithiasis

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Propuesta de cotejo de impacto de la acumulación de transgenes en el maíz (Zea mays L.) nativo mexicano/ Evaluation proposal of possible impact of transgene accumulation in mexican maize landraces

Turrent-Fernández, Antonio; Serratos-Hernández, J. Antonio; Mejía-Andrade, Hugo; Espinosa-Calderón, Alejandro
2009-05-01

Resumen en español La liberación del cultivo de maíz genéticamente modificado (MGM) a escala comercial en México, involucra potencialmente la interacción genética entre más de 30 eventos transgénicos independientes (probablemente más de 30 loci transgénicos diferentes) y más de 50 razas nativas de maíz (RNM) en el campo mexicano. Aunque la Ley de Bioseguridad de Organismos Genéticamente Modificados (LBOGM) y su reglamento establecen el supuesto de que el control del polen permi (mas) te minimizar la interacción genética entre ambos maíces, es posible que la vía alterna "semilla-polen", no prevista en esa ley, contravenga el realismo del supuesto. El status actual de la tecnología del ADN recombinante no permite predeterminar el locus transgénico de cada transformación, por lo que los más de 30 loci transgénicos independientes del mercado de semillas estarían dispersos en el espacio cromosómico. Esto es causa central de la acumulación de transgenes en las RNM, cuando los MGM y las RNM interaccionan genéticamente, con efectos que se desconocen. En este ensayo se propone el cotejo de la hipótesis de un umbral deletéreo de acumulación de transgenes en cada RNM. Se discute el impacto de 10 ciclos de cruzamientos entre las RNM y 32 o más híbridos transgénicos, para obtener poblaciones con individuos que acumulen cargas transgénicas desde cero hasta 32 o más. Además se discute la evaluación biológica, agronómica y molecular de los genotipos estudiados. Resumen en inglés The liberation of genetically modified maize (GMM) on commercial scale in México, potentially involves the genetic interaction among over 30 independent transgenic events (probably more than 30 different transgenic loci) and more than 50 Mexican maize landraces (MML) in Mexican farmlands. Although the Law of Biosecurity of Genetically Modified Organisms (LBGMO) and its Norms establish the assumption that the control of pollen makes it possible to minimize the genetic int (mas) eraction between the two maizes, it is possible that the "seed-pollen" alternative, not forseen in this law, contradicts the realism of this assumption. The present status of recombinant DNA technology does not allow the predetermination of the transgenic locus of each transformation, thus the more than 30 independent transgenic loci of the seed market would be dispersed in the chromosomic space. This is the central cause of transgene accumulation in the MML, when the GMM and the MML interact genetically, with effects that still unknown. This assay proposes a test of the hypothesis of a damage deleterious threshold of transgene accumulation in each MML. The impact of 10 cycles of crosses between the MML and 32 or more transgenic hybrids is discussed, to obtain populations with individuals that accumulate transgenic weights from zero to 32 or more. Also it is discussed the biological, agronomic and molecular evaluation of the genotypes under study.

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Obtención de clones recombinantes que expresan las proteínas prM-E-NS1 del virus dengue serotipo 2/ Obtaining recombinant clones expressing dengue virus serotype 2 prM-E-NS1 proteins

Muné Jiménez, Mayra; Harn, Donald; Soto, Yudira; Ramírez, Rosa; Alfonso, Melkis; D´dara, Akran
2008-04-01

Resumen en español OBJETIVO: obtener clones recombinantes que expresen diferentes proteínas del virus dengue 2 en un vector de expresión en células eucariotas. MÉTODOS: se realizó el clonaje de los genes prM, envoltura (E) y 65 aminoácidos (aa) de la proteína NS1 del virus dengue serotipo 2 (cepa Nueva Guinea C) en un vector de expresión en células eucariotas pcDNA (3.1). La obtención de los genes correspondientes a la zona prM/E/NS1 y prM/E truncada en 100 aa se realizó mediante (mas) reacción en cadena de la polimerasa (RCP). La detección de los posibles clones recombinantes se llevó a cabo mediante las técnicas de RCP, análisis de restricción enzimática y secuenciación nucleotídica. Se realizó la transfección de la línea celular CHO con cada plásmido recombinante. Para determinar la expresión transciente de los genes clonados se empleó la técnica de inmunofluorescencia indirecta (IFI) y trascripción reversa-RCP (TR-RCP). RESULTADOS: se obtuvieron bandas de 2 202 y 1 600 pares de bases (pb), respectivamente. Se estudiaron 20 posibles colonias recombinantes, de las cuales, 7 resultaron positivas para prM-E-NS1 y 5 para prM/E truncada. Se obtuvieron células fluorescentes 48 h después de transfectadas, además una RCP positiva a ese mismo tiempo, lo que indicó la presencia de las proteínas en las células transfectadas. CONCLUSIONES: el vector empleado fue eficiente para el clonaje y la expresión de las proteínas seleccionadas, por lo que las construcciones genéticas obtenidas pudieran ser evaluadas en animales como posibles candidatos vacunales para la obtención de una vacuna de ADN contra el dengue. Resumen en inglés OBJECTIVE: To obtain recombinant clones expressing different dengue virus 2 proteins in an expression vector of eukaryote cells. METHODS: Cloning of prM genes, E envelope and 65 amino-acids (aa) of dengue virus serotype 2 NS1 proteins (Nueva Guinea strain) in an expression vector of pcDNA eukaryote cells (3.1). The prM/E/NS1 zone and the truncated prM/E zone at 100 aa genes were obtained by polymerase chain reaction (PCR). Possible recombinant clones were detected using P (mas) CR, enzyme restriction analysis and nucleotide sequencing. Transfection of the CHO cell line with each recombinant plasmid was performed. Indirect immunofluorescence and reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) determined the transient expression of cloned genes. RESULTS: Bands of 2 202 and 1 600 base pairs (bp) respectively were obtained. Twenty possible recombinant colonies were studied, 7 of them were pr-E-NSI-positive and 5 truncated prM/E-positive. Fluorescent cells emerged 48 hours after being transfected in addition to positive PCR, all of which indicated that the studied proteins were present in transfected cells. CONCLUSIONS: The used vector proved to be efficient for cloning and expression of the selected proteins; therefore, the obtained genetic constructions could be evaluated in animals as likely vaccinal candidates for a dengue virus DNA vaccine.

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VIRUS DEL OESTE DEL NILO: PERSPECTIVAS EN EL MUNDO VERTEBRADO/ WEST NILE VIRUS: PERSPECTIVE IN THE VERTEBRATE WORLD

Peña, José; Berrocal, Luís; González, Marco; Ponce, César; Ariza, Katiuska; Máttar, Salim
2005-07-01

Resumen en español El virus del Oeste del Nilo (VON) pertenece a la familia Flaviviridae, género flavivirus, es transmitido por artrópodos en un ciclo que involucra a mosquitos y aves. Por muchas décadas había sido reconocido en África, Asia y el sur de Europa. El virus apareció por primera vez en Estados Unidos en año de 1999 y se ha documentado su circulación en México, Islas Caimán, Jamaica, República Dominicana, Martinica, Guadalupe, Cuba, Puerto Rico, El Salvador y Colombia. (mas) Sólo recientemente fue asociado con un creciente número de brotes de encefalitis en humanos y equinos, además de infecciones en vertebrados de una gran variedad de especies. Muchos animales, incluyendo más de 150 especies de aves y al menos 30 vertebrados de otras especies son susceptibles a la infección por VON. El resultado de las infecciones depende de la especie, la edad del animal, su estado inmune y la patogenicidad de la cepa del virus. La infección ocurre en aves, como passeriformes, pollos jóvenes y gansos domésticos, lo que resulta en altos títulos de viremia que permite la transmisión a los artrópodos. Está menos caracterizado el rol de los vertebrados en la transmisión indirecta, como por órganos contaminados, tejidos o excreciones. La creciente importancia de la infección por VON ha conducido al desarrollo de vacunas veterinarias con virus muertos, atenuados, quiméricos y vacunas de ADN recombinante. En esta revisión se discute en forma general la importancia de infección por VON en vertebrados, su rol en medicina veterinaria y su posible impacto en salud animal por su reciente introducción a Colombia. Resumen en inglés West Nile virus, an arthropod-borne virus belonging to the family Flaviviridae, genus flavivirus, is transmitted in a cycle involving mosquitoes and birds. For many decades it had been recognized in Africa, Asia and the south of Europe. In 1999 it appeared by first time in North America and its circulation has been documented in México, Jamaica, Dominican Republic, Guadalupe, Cuba, Puerto Rico, El Salvador and Colombia. Only recently it has been associated with an increa (mas) sing number of outbreaks of encephalitis in humans and equines, as well as infections in vertebrates of a wide variety of species. A wide variety of vertebrates, including more than 150 bird species and at least 30 other vertebrate species, are susceptible to WNV infection. The outcome of infection depends on the species, the age of the animal, its immune status and the pathogenicity of the WNV isolate. WNV infection of various birds, especially Passeriforms, but also of young chickens and domestic geese, results in high-titred viremia that allows arthropod-borne transmission. The role of vertebrates in direct, non-arthropod-born transmission, such as via virus-contaminated organs, tissues or excretions is less well characterized. The increased importance of WNV infections has led to the development of killed, live attenuated, DNA-recombinant and chimeric veterinary vaccines. In this article, are reviewed the role of vertebrates in the WNV infection and its importance in medicine veterinary. Future perspectives are discussed as well as its impact in animal health because of its recent introduction to Colombia.

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Análogos de insulina/ Insulin analogues

Licea Puig, Manuel E.
2006-12-01

Resumen en español Se han realizado considerables esfuerzos para desarrollar la insulina, ideal en el tratamiento de la diabetes mellitus (DM). La tecnología recombinante del ácido desoxiribonucleico (ADN) ha permitido el desarrollo de la insulina humana; sin embargo, esta no ha resuelto totalmente los problemas relacionados con la inmunogenicidad, entre otros problemas. Por tanto, las nuevas tecnologías son aplicadas para crear los análogos de insulina. Este trabajo se propone como obj (mas) etivos revisar aspectos farmacológicos y clínicos relevantes, relacionados con los análogos de insulina, así como su utilidad en el tratamiento de la DM. Los análogos de insulina surgen de modificaciones bioquímicas de la insulina humana. Estas modificaciones de la molécula de insulina alteran tanto la absorción como el inicio y la duración de la acción, lo que ofrece ventajas sobre las insulinas convencionales. En la actualidad se dispone de tres análogos de insulina de acción rápida: la insulina lispro, la aspártica y la glulisina, y de tres análogos de acción prolongada: la insulina glargina, detemir y el albulin. El albulin es el último análogo de acción prolongada comunicado, el cual se está sometiendo actualmente a variados estudios in vitro y en vivo. Además, se han desarrollado diversas formulaciones donde están premezclados los análogos de insulina de acción rápida con análogos de acción prolongada. Los análogos de insulina de acción rápida han demostrado un modesto beneficio global frente a las insulinas convencionales en los diabéticos tipo 1. Los análogos de acción prolongada centran su atención en las personas con DM con episodios hipoglucémicos nocturnos. Se necesitan estudios a más largo plazo para confirmar la seguridad y los beneficios de estos preparados, así como precisar su efecto sobre las complicaciones micro y macroangiopáticas de la DM. Resumen en inglés Considerable efforts have been made to develop the ideal insulin in the treatment of diabetes mellitus (DM). The recombinant technology of deoxyribonucleic acid (DNA) has allowed the development of human insulin; however, this has not totally solved the problems related to immunogenecity, among other problems. Therefore, the new technologies are applied to create insulin analogues. It is our purpose to review relevant pharmacological and clinical aspects related to the in (mas) sulin analogues, as well as their usefulness in the treatment of DM. The insulin analogues result from biochemical modifications of human insulin. These modifications of the insulin molecule alter not only the absorption, but also the beginning and duration of the action, which offer advantages over the conventional insulins. At present, there are three rapid acting insulin analogues: insulin lispro, insulin aspart and glulisine; and three long acting analogues; glargine, detemir and albulin. Albulin is the latest long acting analogue reported. At present, it is being subjected to various in vitro and in vivo studies. Besides, there have been developed diverse formulations where the rapid acting insulin analogues are premixed with the long acting analogues. The rapid acting insulin analogues have showed a modest global benefit against the conventional insulins in type 1 diabetics. The long acting analogues focus their attention in those persons with DM with nocturnal hypoglycemic episodes. Longer term studies are necessary to confirm the safety and benefits of these preparations, as well as to determine their effect on the micro- and macroangiopathic complications of DM.

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Desarrollo de agentes inmunizantes contra el dengue/ Development of immunizing agents against dengue

López Antuñano, Francisco J.; Mota, Javier
2000-05-01

Resumen en español El complejo de los cuatro flavivirus del dengue es transmitido principalmente por el mosquito Aedes aegypti. Se han atribuido epidemias a la actividad de A. albopictus, A. polynesiensis y a varias especies del complejo A. scutellaris. Los factores de riesgo que determinan la probabilidad de enfermar o morir por dengue están relacionados tanto con el huésped (características genéticas, estado inmunitario, forma de vida y condiciones de salud, saneamiento básico de la (mas) vivienda y abastecimiento de agua potable) como con el virus (variabilidad genética de cepas entre y dentro de los serotipos, diferente capacidad patógena y distribución geográfica). A pesar de la falta de conocimiento sobre la inmunobiopatología del dengue, se han hecho importantes avances para conseguir una respuesta inmunitaria protectora con virus atenuados y con antígenos obtenidos por medio de tecnologías recombinantes. Desde los años 40, se ha intentado desarrollar vacunas contra el dengue. La inmunidad que se adquiere por infección natural es específica para cada serotipo y se han documentado infecciones por tres serotipos diferentes en la misma persona, por lo que probablemente sea necesaria una vacuna tetravalente. En voluntarios se han probado vacunas contra los cuatro serotipos que han sido inmunógenas y seguras. Aunque las vacunas con virus atenuados son prometedoras, son necesarios nuevos estudios sobre su eficacia y seguridad. Actualmente están en curso estudios para producir vacunas contra el virus del dengue mediante tecnologías de ADN recombinante y otras técnicas de biología molecular, utilizando como antígenos proteínas estructurales (principalmente la glicoproteína E) y no estructurales. Con el mismo propósito se han usado varios vectores de expresión, como Escherichia coli, baculovirus, virus de la vacuna y virus de la fiebre amarilla. Lamentablemente, no se han obtenido resultados satisfactorios en el hombre. La necesidad de desarrollar vacunas eficaces contra el dengue tiene especial importancia si se toma en cuenta la magnitud del problema de la transmisión de los cuatro serotipos en el mundo. La inmunización efectiva contra el dengue contribuirá a su prevención y la relación costo-beneficio será positiva. El hecho de que el dengue endémico afecte a niños de corta edad hace necesaria su inmunización, aprovechando la oportunidad que ofrece el Programa Ampliado de Inmunización. Resumen en inglés The four serotypes of dengue flaviviruses are transmitted mainly by the Aedes aegypti mosquito, and some epidemics have been attributed to Ae. albopictus, Ae. polynesiensis, and various species of the Ae. scutellaris complex. The risk factors involved in dengue mortality and morbidity are related to the human host (genetic characteristics of infected persons; lifestyles, immune status, and health conditions of people; basic sanitation of dwellings; and water supply) and t (mas) o the virus (genetic variability between and among serotypes, different pathogenicities, and geographic distribution). Notwithstanding the lack of knowledge of the immunopathobiology of dengue fever, important advances have been made in terms of a protective immune response, using attenuated dengue viruses or antigens produced by means of recombinant technologies. Efforts have been made since the 1940s to develop dengue vaccines. Immunity acquired from natural infection is specific for each serotype, and as many as three different serotype infections have been reported in one individual. For this reason, a tetravalent vaccine may likely be needed. Candidate vaccines against the four serotypes have been tested in volunteers and have proven to be immunogenic and safe. Although attenuated live virus vaccines are promising, more study is needed regarding their effectiveness and safety. Currently, several studies are ongoing to develop dengue vaccines using antigens from structural proteins (particularly E glycoprotein) and nonstructural proteins, with recombinant DNA technology and other biomolecular technologies. With the same goal, various expression vectors are being used, including Escherichia coli, baculovirus, vaccinia virus, and yellow fever virus. Unfortunately, no satisfactory results have been obtained in humans. The need for effective dengue vaccines is great, given the serious worldwide problem of the transmission of the four serotypes. Effective immunization against dengue would contribute to its prevention, with a positive cost-benefit relationship. Endemic dengue affects young children, and they should be immunized through the Expanded Program on Immunization.

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Viejos y nuevos enfoques para el desarrollo de vacunas contra la tuberculosis/ Old and New approaches for Vaccines against tuberculosis

Bercovier, H
2000-03-01

Resumen en español ¿Necesitamos esfuerzos renovados para desarrollar nuevas vacunas para combatir la tuberculosis? Los datos epidemiológicos muestran que la disminución de la ya baja incidencia de tuberculosis se ha detenido en los países en desarrollo. En ciertos países occidentales la incidencia de tuberculosis ha aumentado incluso en los últimos 10 años. En Africa y Asia se encontró una alta incidencia de tuberculosis similar a la del mundo occidental en los años 30. ¿Podemos p (mas) redecir por la historia de la tuberculosis en Europa Occidental que la epidemia de tuberculosis en los países en desarrollo ya alcanzó su pico o se encuentra todavía en aumento? Datos revisados muestran que en Europa la epidemia de tuberculosis comenzó al menos tres siglos antes de alcanzar su apogeo a mediados del siglo XIX. Las razones para la disminución de la tuberculosis en la primera mitad del siglo XX en el mundo occidental todavía no son bien comprendidas.¿Las medidas de salud pública o el adecuado tratamiento con antibióticos reducirán o detendrán la tuberculosis en Africa y Asia o continuará aumentando la tuberculosis? Nuestra posibilidad para controlar la diseminación de la enfermedad se complica por la aparición de cepas resistentes a antibióticos y el VIH. Por lo tanto se requiere una mejor comprensión de la base molecular de la interacción entre el bacilo y sus huéspedes para el desarrollo de mejores enfoques de tratamiento e inmunización. La inmunidad celular y la hipersensibilidad de tipo retardado (HTR) son procesos claves en el curso de la infección por el Mycobacterium y están involucradas tanto en la infección primaria como en la secundaria, así como en la inducción de la inmunidad protectora en el huésped. Los diferentes tipos de vacuna contra la tuberculosis que están siendo reevaluadas incluyen: BCG con dosis de refuerzo, BCG oral, BCG modificada (multivalente), cepas auxotróficas atenuadas del M. tuberculosis, proteínas secretadas o recombinantes de M. tuberculosis con o sin inmunomoduladores y vacunas de ADN. Estas nuevas vacunas inducen una buena inmunidad celular y pueden contribuir al desarrollo de enfoques mejorados de inmunización y tratamiento. Resumen en inglés Do we need renewed efforts to develop new vaccines to fight tuberculosis? Epidemiological data show that the decrease of the already low incidence of tuberculosis has stopped in developed countries. In certain Western countries the incidence of tuberculosis has even increased in the last ten years. In Africa and in Asia, a high incidence of tuberculosis is found similar to that of the Western world in the 1930s. Can we predict from the history of tuberculosis in Western E (mas) urope that the epidemic of tuberculosis in developing countries has reached his peak or is still developing? Revisited data from Europe show that the epidemic of tuberculosis started at least three centuries before it reached its apogee in the middle of the 19th century. The reasons for the decrease of tuberculosis in the first half of the 20th century in the Western world are still not well understood. Will public health measures and proper antibiotic treatment reduce and stop tuberculosis in Africa and in Asia or will the incidence of tuberculosis increase? Our ability to control the spread of the disease is complicated by the appearance of antibiotic resistant strains and HIV. Therefore, a better understanding of the molecular basis for the interaction between the bacilli and the hosts is necessary for the development of improved approaches for treatment and immunization. Cellular immunity and delayed type hypersensitivity (DTH) are key processes in the course of mycobacterial infection and are involved in both primary and secondary infection as well as in the induction of protective immunity in the host. The different types of tuberculosis vaccines being reevaluated comprise: BCG with booster, oral BCG, modified BCG (multivalent), auxotrophic M. tuberculosis attenuated strains, M. tuberculosis secreted proteins or recombinant proteins with or without immunomodulators and DNA vaccines. These new vaccines inducing a good cellular immunity may contribute to the development of improved approaches for immunization and treatment.

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VACUNAS CONTRA EL HERPESVIRUS BOVINO-1: UNA MIRADA DESDE EL PASADO HACIA EL FUTURO DE LA INMUNIZACIÓN/ Bovine Herpesvirus-1 Vaccine’s: A Look From The Past To The Immunization Future

RUIZ-SAENZ, JULIÁN; JAIME, JAIRO; VERA, VÍCTOR
2009-08-01

Resumen en español El herpesvirus Bovino-1 (BHV-1) es uno de los principales patógenos que afecta el ganado; la infección primaria se acompaña de varias manifestaciones clínicas tales como la rinotraqueitis, aborto, vulvovaginitis/balanopostitis pustular y en algunos casos, enfermedad neurológica. Luego de la recuperación, la infección persiste durante toda la vida del individuo en un estado de latencia en ganglios nervioso trigémino o sacro. La Organización Mundial de Sanidad Anim (mas) al (OIE) reporta que la vacunación contra el BHV-1 puede ser efectiva en reducir las manifestaciones clínicas y en consecuencia las pérdidas económicas, pero no logra proteger completamente de la infección. Es por esto que durante los últimos años se han desarrollado gran cantidad de agentes vacunales que van desde las vacunas clásicas inactivadas hasta aquellas que usan tecnología de DNA recombinante. El presente artículo se enfoca en presentar una actualización acerca de las vacunas más usadas desde hace ya varios años y resumir los avances más importantes en la generación de nuevas vacunas contra el BHV-1; tratando así de abrir un nuevo panorama para la generación de vacunas en Colombia. Resumen en inglés Bovine herpesvirus-1 is one of the most important pathogens of cattle; the primary infection is characterized by clinical manifestations such as infectious bovine rhinotracheitis, abortion, infectious pustular vulvovaginitis and in some cases, neurological signs. After recovering, the virus establishes viral latency in sensory neurons of trigeminal or sacral ganglia. The World Organization for Animal Health (OIE) reports that vaccination against BHV-1 could be useful to r (mas) educe the clinical manifestations and in consequence the economic looses, but it can not protect against the infection. Therefore, a huge amount of vaccines have been developed that includes from classic inactivation to recombinant DNA technologies. This paper makes an updated review about the most used vaccines since many years and try to resume the most important advances in BHV-1 vaccine’;s generation; trying to open a window for new vaccine’;s generation in Colombia.

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The contribution of recombination to heterozygosity differs among plant evolutionary lineages and life-forms

Jaramillo-Garcia, Juan P.; Verdú, M.; González Martínez, Santiago C.
2010-01-25

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The Drosophila spn-D gene encodes a RAD51C-like protein that is required exclusively during meiosis

Abdu, Uri; González-Reyes, Acaimo; Ghabrial, Amin; Schüpbach, Trudi
2003-09-01

Digital.CSIC (Spain)

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Sequential Loading of Cohesin Subunits during the First Meiotic Prophase of Grasshoppers

Valdeolmillos, Ana M.; Viera, Alberto; Page, Jesús; Prieto, Ignacio; Santos, Juan L.; Parra, María Teresa; Heck, Margarete M. S.; Martínez-Alonso, Carlos; Barbero, José Luis; Suja, José A.; Rufas, Julio S.
2007-02-23

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SMC proteins, new players in the maintenance of genomic stability

Cortés-Ledesma, Felipe; Piccoli, Giaccomo de; Haber, James E.; Aragón, Luis; Aguilera, Andrés
2007-04-15

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Recombinant production of serine hydroxymethyl transferase from Streptococcus thermophilus and its preliminary evaluation as a biocatalyst

Vidal, Luis; Calveras Ibáñez, Jordi; Clapés Saborit, Pere; Ferrer, Pau; Caminal, Glòria
2005-02-23

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Perspectivas para nuevas vacunas antituberculosas en la era posgenómica

García, Luis F; Barrera, Luis F
2004-06-01

Resumen en español A pesar de que la vacunación con Mycobacterium bovis BCG es el procedimiento más utilizado a nivel mundial para prevenir la tuberculosis, su eficicacia es muy cuestionable, lo cual ha motivado la búsqueda de nuevas opciones inmunoprofilácticas. El conocimiento generado con el secuenciamiento completo de una cepa de Mycobacterium tuberculosis H37Rv y la aplicación de nuevas tecnologías inmunológicas, bioquímicas y genéticas han permitido realizar una disección fi (mas) na del transcriptoma y el proteoma de M. tuberculosis, lo cual ha generado una gran cantidad de conocimiento sobre la biología de este microorganismo. Dado que alrededor de una tercera parte de la población mundial puede estar infectada con M. tuberculosis y que éste sólo se detecta cuando se inicia la enfermedad, la mayor parte de los esfuerzos se han dedicado al diseño de vacunas posinfección que induzcan un aumento selectivo de la inmunidad celular específica del hospedero a largo plazo, no generen reacciones adversas y sean de bajo costo. Dentro de las nuevas estrategias que están siendo utilizadas para el desarrollo de vacunas, se destaca la utilización de mezclas de proteínas con una alta inmunogenicidad, cepas de M. bovis BCG recombinantes y de M. tuberculosis genéticamente atenuadas o modificadas para inducir una mayor respuesta inmune, y las vacunas de AND desnudo. Los candidatos con más potencial incluyen las vacunas de subunidades micobacterianas, las cuales expresan moléculas ampliamente reconocidas por el sistema inmune y cuyo reconocimiento resulta en el incremento de la respuesta Th1 y aquéllas que utilizan vectores virales diseñados para expresar moléculas micobacterianas antigénicas. Aunque los modelos animales son de valor limitado, puesto que la patología observada en ellos sólo reproduce parcialmente la observada en humanos, los resultados obtenidos con estas vacunas son muy prometedores y algunas están siendo actualmente evaluadas en ensayos clínicos de fase I. Resumen en inglés Perspectives for new anti-tuberculous vaccines in the post-genomic era Vaccination with attenuated Mycobacterium bovis BCG has been used as the routine procedure to immunize against tuberculosis. Since the efficacy of BCG vaccination is very controversial, the search for new immunoprophylatic tools against tuberculosis is an area of intense interest. Knowledge of the complete sequence of Mycobacterium tuberculosis (Mtb) H37Rv genome and the application of new immunologica (mas) l, biochemical and genetic technologies has led to a detailed understanding of the transcriptome and proteome of this bacterium. Approximately one-third of the human population is infected with Mtb; however, the bacillus is only detected once the symptoms appear and therefore most of the recent efforts have been devoted to the development of a post-infection vaccine. In theory, this vaccine (1) will give rise to an increase in the long-lasting specific immunity against Mtb, (2) will not have significant adverse effects, and (3) will be affordable for the people in third world countries. The main strategies that have been developed include the subunit vaccines, either as a mixture of relevant immunogenic proteins or DNA constructs, recombinant strains of Mycobacterium bovis BCG and Mtb, designed to secrete immunogenic proteins or with attenuated virulence, respectively, and DNA-based vaccines. The subunit vaccines are delivered either as mixtures of immunogenic proteins and adjuvants, or as naked DNA or by viral vectors in order to induce a potent Th1 response. Most of these vaccines have been tested in several kinds of animal models, but they do not fully reproduce the human pathology. However, the results obtained so far are very encouraging and have led to the development of phase I trials in humans.

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Nuevas armas inmunológicas para la medicina del siglo XXI: Terapia biológica basada en el uso de anticuerpos monoclonales de última generación/ Biological therapy based on the use of last generation monoclonal antibodies

Aguillón G, Juan C; Contreras L, Juan; Dotte G, Andrés; Cruzat C, Andrea; Catalán M, Diego; Salazar A, Lorena; Molina S, María Carmen; Guerrero P, Julia; López N, Mercedes; Soto S, Lilian; Salazar-Onfray, Flavio; Cuchacovich T, Miguel
2003-12-01

Resumen en inglés The fusion of a murine B cell and a myeloma cell generates a hybridoma that produces monoclonal antibody (mAb). These murine mAb induce the HAMA (human anti-mouse antibodies) response. Murine mAb have been modified by genetic engineering, producing molecules with a higher proportion of human protein. At present, chimeric, humanized and fully human mAb are available. mAb block interactions between target molecules and their ligands or trigger the lyses of mAb-coated tumor (mas) cells. Numerous mAb have been developed using the recombinant DNA technology and several are available in the market. Trastuzumab, against HER2/neu, is useful in breast cancer; rituximab, against CD20 in B lymphocytes is useful in lymphoma; alemtuzumab, against CD52 is used in lymphoma and leukemia; daclizumab and basiliximab block the IL-2 receptor interaction and reduce acute rejection in kidney transplantion; abciximab, an antagonist of GPIIb/IIIa platelet receptor, is used in patients undergoing acute coronary syndromes. In autoimmunity diseases, blocking tumor necrosis factor by infliximab and adalimumab has demonstrated excellent results. Thus, infliximab is useful in the treatment of rheumatoid arthritis (RA), Crohn's disease and ulcerative colitis while adalimumab is the first fully human mAb available for RA. Infliximab and adalimumab reduce signs and symptoms in RA and they also interfere with progression of joint damage. Finally, the direct benefits of antagonist treatment can occur at the expense of a major adverse effect in some other biological function (Rev Méd Chile 2003; 131: 1445-53)

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Multilocus sequence analysis for assessment of the biogeography and evolutionary genetics of four Bradyrhizobium species that nodulate soybeans on the asiatic continent

Vinuesa, P; Rojas-Jiménez, K.; Contreras-Moreira, Bruno; Mahna, S.K.; Prasad, B.N.; Moe, H.; Selvaraju, S.B.; Thierfelder, H.; Werner, D.
2008-01-01

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Multilocus Sequence Analysis for Assessment of the Biogeography and Evolutionary Genetics of Four Bradyrhizobium Species That Nodulate Soybeans on the Asiatic Continent

Vinuesa, Pablo; Rojas-Jiménez, Keilor; Contreras-Moreira, Bruno; Mahna, Suresh K.; Nandan Prasad, Braj; Moe, Hia; Babu Selvaraju, Suresh; Thierfeider, Heidemarie; Werner, Dietrich
2008-11-01

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Molecular cloning and expression in different microbes of the DNA encoding Pseudomonas putida U phenylacetyl-CoA ligase. Use of this gene to improve the rate of benzylpenicillin biosynthesis in Penicillium chrysogenum

Miñambres Rodríguez, Baltasar; Martínez Blanco, Honorina; Olivera, Elías R.; García, Belén; Díez, Bruno; Barredo, José L.; Moreno, Miguel A.; Schleissner, Carmen; Salto, Francisco; Luengo, José M.
1996-01-01

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Molecular analysis of the 21-kb bacteriocin-encoding plasmid pEF1 from Enterococcus faecium 6T1a

Ruiz-Barba, José Luis; Caballero-Guerrero, Belén; Maldonado-Barragán, Antonio; Jiménez Díaz, Rufino
2010-01-01

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Integrative food-grade expression system based on the lactose regulon of Lactobacillus casei

Gosalbes, María José; Esteban, Carlos David; Galán Asuncion, José Luis; Pérez Martínez, Gaspar
2000-11-01

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INMUNOGENICIDAD DE LA PROTEÍNA RECOMBINANTE ASP1R DE Ancylostoma caninum EN UN MODELO MURINO/ IMMUNOGENICITY OF THE PROTEIN RECOMBINANT ASP1R OF A caninum IN A MURINE MODEL

Giraldo G, María; Castaño O, Jhon C
2009-08-01

Resumen en español Objetivo. Construir un plásmido recombinante que exprese la proteína ASP1r de Ancylostoma caninum y evaluar su capacidad inmunogénica en un modelo murino. Materiales y métodos. Se realizó extracción de ARN de parásitos adultos de Ancylostoma caninum, se amplificó por RT-PCR el gen de la proteína ASP1. Este gen fue insertado en el vector pcDNA3. El inserto fue digerido con Bamh1 y EcoR1 y clonado direccionalmente. Posteriormente, se llevó a cabo transformación y (mas) selección de las células de E. coli DH5a competentes con el producto de la ligación. Se realizó un tamizaje por PCR confirmando la presencia del gen ASP1. El vector pcDNA3-ASP1 fue administrado vía intraglandular en la parotida e intramuscular en ratones Balb/c. En estos animales se les realizó determinación de anticuerpos en suero y saliva mediante las técnicas de ELISA e inmunohistoquímica. Resultados. Se determinó que el plásmido pcDNA3-ASP1 fue incorporado y expresado células E. coli DH5a. Este plásmido recombinante indujo la producción de anticuerpos Anti-ASP1 específicos en ratones Balb/c. Conclusiones. Se logró demostrar que la utilización de pcDNA3-ASP1 no produjo reacciones desfavorables en ratones Balb/c, además indujo respuesta humoral contra la proteína pcDNA3-ASP1 de excreción/secreción de Ancylostoma caninum en ratones. Resumen en inglés Objective. To construct a recombinant plasmid expressing the ASP1r protein of A. caninum and evaluate its immunogenic capacity in a murine model. Materials and methods. RNA of adults of Ancylostoma caninum was amplified by reverse transcription polymerase chain reaction. The ASP1 protein gene was inserted into the pcDNA3 vector. Plasmid was digested with Bamh1 and EcoR1 and cloning was performed directionally. Later a transformation and selection of E. coli DH5a cell comp (mas) etent with the product for the ligation was made. Then, a screening by PCR was carried out to confirm the presence of ASP1 gene. PcDNA3-ASP1 was inoculated by intraglandular parotide and intramuscular route in Balb/c mice. Antibodies in these animals was measured in serum and saliva by ELISA and immunochemistry. Results. PcDNA3-ASP1 was incorporated and expressed in E. coli DH5a cell. This recombinant plásmid was able to produce antibodies anti-ASP1 specific in Balb/c mice. Discussion. It was possible to demonstrate that using of pcDNA3-ASP1 did not display reactogenicity and it did not produce unfavorable reactions, futhermore, it induced a humoral response against the excreción/secretion protein of Ancylostoma caninum in mice.

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INFECCION EXPERIMENTAL CON Trypanosoma cruzi EN MACHOS Y HEMBRAS DE TRES CEPAS DE RATONES

ZUÑIGA, CLAUDIO; VARGAS, RAMON; COURCELLES, MARIA TERESITA; VERGARA, ULISES
1997-07-01

Resumen en español Se inocularon 3 cepas de ratones, machos y hembras, con 2.000 trypomastigotes sanguíneos del clon Dm 28c de Trypanosoma cruzi. Los ratones HTI de ambos sexos se comportaron como resistentes, en cambio, murió el 100% de los animales de las cepas A/Sn y AKR entre los 30 y 50 días post-infección, respectivamente. En las tres situaciones se observaron diferencias significativas en los niveles máximos de parasitemia entre machos y hembras, teniendo los primeros niveles m� (mas) �s altos. Los sueros de los ratones infectados obtenidos a distintos tiempos post-infección, se probaron con una batería de antígenos recombinantes de T. cruzi. Los sueros de los ratones A/Sn y AKR mostraron reactividad preferencial. Con los antígenos recombinantes SAPA y 13. Los sueros de los ratones HTI reconocieron además de SAPA y 13, al antígeno recombinante 36 y tardíamente al antígeno 1. En cuanto al sexo, la única diferencia parece ser los niveles de parasitemias, pero este hecho no se refleja en diferencias a nivel de susceptibilidad o resistencia, como tampoco en el reconocimiento de los antígenos recombinantes Resumen en inglés Males and females fron three different strains of mice have been experimentally infected with 2000 bloodstream trypomastigotes from clon DM 28c of Trypanosoma cruzi, in order to evaluate the role of sex difference in the evolution of parasitic infection. Males and females from HTI (H-2) strain were resistant (100% survival), while males and females from Asn (H2ª) and AKR (H-2k) starins were highly susceptible with 100%mortality between days 34 and 54 post experimental in (mas) fection. In all these strains of mice males showed significally higher levels of parasitemia than the corresponding females. Serum samples from all infected mice were then tested by dot immunoradiometric assay, for reactivity against recombinant antigens 1, 2, 13, 26, 30, 36, 54 and SAPA of T. cruzi. Males and females from Asn and AKR susceptibles strains only showed reactivity against clones SAPA and 13. Mice from HTI resistant strain not only reacted with clon SAPA and 13, but also with clones 1 and 36. In conclusion, in this present study we showed no sex difference in susceptibility or resistance to T. cruzi infection in mice. Although males showed higher levels of parasitemia than females, this phenomenon has no effect in mortality of the infected mice. We also found that there were no dyfferences in the reactivity against the recombinant DNA clones from T. cruzi

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Global patterns of sequence evolution in Drosophila

Gallach, Miguel; Arnau, Vicente; Marín, Ignacio
2007-11-09

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38

Generation of Food-Grade Recombinant Lactic Acid Bacterium Strains by Site-Specific Recombination

Martín, M. Cruz; Alonso, Juan C.; Suárez Fernández, Juan Evaristo; Álvarez González, Miguel Ángel
2000-06-01

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41

Expression of recombinant Rhipicephalus (Boophilus) microplus, R. annulatus and R. decoloratus Bm86 orthologs as secreted proteins in Pichia pastoris

Canales, Mario; Pérez de la Lastra, José M.; Naranjo, Victoria; Nijhof, Ard M.; Hope, Michelle; Jongejan, Frans

[Background] Rhipicephalus (Boophilus) spp. ticks economically impact on cattle production in Africa and other tropical and subtropical regions of the world. Tick vaccines constitute a cost-effective and environmentally friendly alternative to tick control. The R. microplus Bm86 protective antigen h...

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Expression of recombinant Rhipicephalus (Boophilus) microplus, R. annulatus and R. decoloratus Bm86 orthologs as secreted proteins in Pichia pastoris

Canales García-Menocal, Mario; Pérez de Lastra, José Manuel; Naranjo, María Victoria; Nijhof, Ard M.; Hope, Michelle; Jongejan, Frans; Fuente García, José de la
2008-02-14

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43

Estudio de la inestabilidad cariotípica de levaduras vínicas

Llagostera Casas, Montserrat; Piña, Bejamín; Carro Puentedura, David
2006-01-01

Digital.CSIC (Spain)

44

Environmental biocatalysis: from remediation with enzymes to novel green processes

Alcalde, Miguel; Ferrer, Manuel; Plou, Francisco J; Ballesteros, Antonio
2006-01-01

Digital.CSIC (Spain)

46

Dynamic structures of Bacillus subtilis RecN–DNA complexes

Sánchez, Humberto; Cárdenas, Paula P.; Yoshimura, Shige H.; Takeyasu, Kunio; Alonso, Juan Carlos
2008-01-01

Digital.CSIC (Spain)

48

Disparate roles of ATR and ATM in immunoglobulin class switch recombination and somatic hypermutation

Pan-Hammarström, Qiang; Lähdesmäki, Aleksi; Zhao, Yaofeng; Du, Likun; Zhao, Zhihui; Wen, Sicheng; Ruiz-Pérez, Victor L.; Dunn-Walters, Deborah K.; Goodship, Judith A.; Hammarström, Lennart
2006-01-23

Digital.CSIC (Spain)

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DNA removal from a purification process of recombinant hepatitis B surface antigen

Beldarraín Iznaga, Alejandro; Candelario Frontera, Mayda; Rodríguez Uramis, Javier; Tejera González, José Blas; Calvo Parra, Yodelis; Madruga González, Yoel
2007-01-01

Resumen en inglés We studied the capacity of an API-rHBsAg purification process to eliminate DNA contamination from yeast-host cell. Firstly, was demonstrated consistency of manufacturing purification process to remove DNA, from (3.9 ± 1.9)10(8) pg/dose in starting material to (3.4 ± 1.6) pg/dose, equivalent to 8.2 log in Active Pharmaceutical Ingredient (API), measuring DNA quantity in several unit operations along manufacturing process for twenty batches, five consecutive in 2000, 2001 (mas) , 2003 and 2005. These values for API, lower than 10 pg/dose, accomplish current WHO requirements for Hepatitis B vaccines obtaining by recombinant DNA technology (WHO, 1989; European Pharmacopoeia, 2001a). The main removal factor for manufacturing process, equivalent to 6.4-log, was reached in negative anion-exchange chromatography. Then, the capacity of immunoaffinity chromatography and positive anion-exchange chromatography to remove chromosomal DNA purified from yeast-host cell was assessed using a scaled-down chromatographic process which was shown to yield product meeting purity criteria set for the manufacturing process. Log10 reductions for DNA through the immunoaffinity chromatography and positive anion-exchange chromatography were 7.3 ± 0.1, and 5.8 ± 0.1 respectively. Overall, these studies indicate that total DNA clearance factor for API-rHBsAg manufacturing process was 19.4 log, 2.4 times higher than the real DNA contamination, indicating that API-rHBsAg manufacturing as described here have sufficient DNA reducing capacity to achieved a high margin of DNA safety

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Construcción de una biblioteca genómica de Leishmania amazonensis y su expresión en músculo de ratones BALB/c

Montalvo Álvarez, Ana Margarita; Alberti Amador, Esteban; González Elías, Marta M.; García Miniet, Rocío; Sarmiento García, María E.; Acosta Domínguez, Armando
2001-12-01

Resumen en español Se construyó una biblioteca genómica de Leishmania amazonensis mediante el vector pcDNA3, con promotor de expresión en células eucariotas, con el objetivo de contribuir a la aplicación de la tecnología de inmunización con ácidos nucleicos en la leishmaniosis. Para demostrar la expresión de la genoteca en el músculo de ratones inmunizados con esta, se realizó la técnica de inmunofluorescencia indirecta. Como anticuerpo primario se utilizó una mezcla de sueros (mas) con alto título antileishmania, de una zona donde predomina la infección con L. braziliensis. Se obtuvo una biblioteca con 80 % de clones recombinantes. Se demostró la expresión de determinantes antigénicos en el músculo de ratones BALB/c inmunizados, según resultados de la inmunofluorescencia. Resumen en inglés A genomic library of Leishaminia amazonensis was built through a pcDNA3 vector, with expression promoter in eukaryot cells, to contribute to the application of immunization technology with nucleic acids in leishmaniasis. To show the expression genomic library in the muscles of mice immunized with it, the indirect immunofluoresce technique was used. A mix of sera with high antileishmania titers from an area where L.braziliensis infection is predominant was used as primary (mas) antibody. A library of 80% recombinant clones was obtained. Antigen determinant expression was confirmed in immunized BALB/c mice´s muscles, according to the results of immunofluorescence testing.

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52

Comment on “Direct and Real-Time Visualization of the Disassembly of a Single RecA-DNA-ATPγS Complex Using AFM Imaging in Fluid”

Van der Heijden, Thijn; Moreno-Herrero, Fernando; Kanaar, Roland; Wyman, Claire; Dekker, Cees
2006-11-11

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53

Cloning of the sole (Solea senegalensis) growth hormone-encoding cDNA

Pendón, Carlos; Martínez-Barberá, Juan P.; Pérez-Sánchez, Jaume; Rodríguez Martínez, Ramón B.; Grenett, Hernán

4 pages. | We report here the complete nucleotide (nt) sequence of a cDNA clone encoding Solea senegalensis growth hormone (sGH) isolated from an expression library prepared from sole pituitary gland poly (A)+ RNA. The library was screened using a flounder GH cDNA. The cDNA sequence containing an in...

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Cloning of the sole (Solea senegalensis) growth hormone-encoding cDNA

Pendón, Carlos; Martínez-Barberá, Juan P.; Pérez-Sánchez, Jaume; Rodríguez Martínez, Ramón B.; Grenett, Hernán; Valdivia, Manuel M.
1994-08-01

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Chromatin assembly controls replication fork stability

Clemente-Ruiz, Marta; Prado, Félix
2009-05-22

Digital.CSIC (Spain)

57

Chimeric Genomes of Natural Hybrids of Saccharomyces cerevisiae and Saccharomyces kudriavzevii

Belloch Trinidad, Carmela; Pérez Torrado, Roberto; González, Sara S.; Pérez Ortín, José E.; García Martínez, José; Querol, Amparo; Barrio, Eladio
2009-02-27

Digital.CSIC (Spain)

58

Characterization of two highly similar Rad51 homologs of Physcomitrella patens

Ayora, Silvia; Piruat, José I.; Luna, Rosa; Reiss, Bernd; Russo, Vincenzo E. A.; Aguilera, Andrés; Alonso, Juan Carlos
2002-02-08

Digital.CSIC (Spain)

59

Bacillus subtilis SbcC protein plays an important role in DNA inter-strand cross-link repair

Mascarenhas, Judita; Sánchez, Humberto; Tadesse, Serkalem; Kidane, Dawit; Krisnamurthy, Mahalakshmi; Alonso, Juan Carlos; Graumann, Peter L.
2006-06-16

Digital.CSIC (Spain)

60

Analysis and dynamics of the chromosomal complements of wild sparkling-wine yeast strains

Nadal, Dolors; Carro, David; Fernández-Larrea, Juan; Piña, Benjamín
1999-04-01

Digital.CSIC (Spain)

61

An O-Acetylserine(thiol)lyase Homolog with L-Cysteine Desulfhydrase Activity Regulates Cysteine Homeostasis in Arabidopsis1,[C],[W]

Álvarez, Consolación; Calo, Leticia; Romero, Luis C.; García, Irene; Gotor, Cecilia
2009-12-02

Digital.CSIC (Spain)

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An HIV-1 clade C DNA prime, NYVAC boost vaccine regimen induces reliable, polyfunctional, and long-lasting T cell responses

Harari, Alexandre; Bart, Pierre-Alexandre; Stöhr, Wolfgang; Tapia, Gonzalo; García, Miguel; Medjitna-Rais, Emmanuelle

15 pages, 8 figures.-- PMID: 18195071 [PubMed].-- PMCID: PMC2234371. | The EuroVacc 02 phase I trial has evaluated the safety and immunogenicity of a prime-boost regimen comprising recombinant DNA and the poxvirus vector NYVAC, both expressing a common immunogen consisting of Env, Gag, Pol, and Nef ...

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An HIV-1 clade C DNA prime, NYVAC boost vaccine regimen induces reliable, polyfunctional, and long-lasting T cell responses

Harari, Alexandre; Bart, Pierre-Alexandre; Stöhr, Wolfgang; Tapia, Gonzalo; García Cabezas, Miguel Ángel; Medjitna-Rais, Emmanuelle; Burnet, Séverine; Cellerai, Cristina; Erlwein, Otto; Barber, Tristan; Moog, Christiane; Liljeström, Peter; Wagner, Ralf; Wolf, Hans; Kraehenbuhl, Jean-Pierre; Esteban, Mariano; Heeney, Jonathan L.; Frachette, Marie-Joelle; Tartaglia, James; McCormack, Sheena; Babiker, Abdel; Weber, Jonathan; Pantaleo, Giuseppe
2008-01-14

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Altered Hematopoiesis in Mice Lacking DNA Polymerase μ Is Due to Inefficient Double-Strand Break Repair

Lucas, Daniel; Escudero, Beatriz; Ligos, José Manuel; Segovia, Jose Carlos; Estrada, Juan Camilo; Terrados, Gloria; Blanco, Luis; Samper, Enrique; Bernad, Antonio
2009-02-01

Digital.CSIC (Spain)

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A novel role for RecA under non-stress: promotion of swarming motility in Escherichia coli K-12

Gómez-Gómez, José María; Manfredi, Candela; Alonso, Juan Carlos; Blázquez, Jesús
2007-03-28

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A Method for the Generation of Ectromelia Virus (ECTV) Recombinant: In Vivo Analysis of ECTV vCD30 Deletion Mutants

Alejo, Alí; Saraiva, Margarida; Ruiz-Arguello, Maria Begoña; Viejo-Borbolla, Abel; Fernández de Marco, María del Mar; Salguero, Francisco J.; Alcami, Antonio

Digital.CSIC (Spain)

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1997-04-01

Resumen en inglés Infection with hepatitis B virus (HBV) is responsible for 80% of the cases of primary liver cancer and cirrhosis worldwide. Every year almost a million people, of whom 25% are chronic carriers of the virus, die from these diseases. Anti-HBV vaccine is the best means of prevention and can be considered the first immunization against a type of cancer, owing to the sequelae that hepatitis produces in many chronically infected patients. This vaccine is made from the surface a (mas) ntigen of hepatitis B virus (HBsAg); it is manufactured from plasma derivatives or through recombinant DNA and confers up to 95% protection. It is suggested that this vaccine be given at the same time as other vaccines to avoid the need for additional contacts with the immunization services. In 1992 the World Health Assembly proposed that the vaccine should be available in all countries by 1997. In its Ninth General Program of Work, WHO established the goal of reducing the number of new carriers by 80% through the introduction of this vaccine into national child immunization programs. Recently, a quadrivalent DTP-HB vaccine has been produced, resulting in increased benefits and lower cost. However, countries should not wait until the combined vaccines are marketed to begin vaccination against hepatitis B.

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