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Vitrificación de ovocitos bovinos y su uso en el desarrollo partenogenético de embriones/ Vitrification of bovine oocytes and its use in the parthenogenetic development of embryos

Ruiz, J; Correa, JE; Martínez, M
2010-01-01

Resumen en español El objetivo de este trabajo fue evaluar el efecto de la vitrificación en la viabilidad de ovocitos activados químicamente para la producción de embriones partenogenéticos bovinos. Ovocitos bovinos aspirados de ovarios obtenidos en el matadero fueron madurados in vitro por 20-22 horas y se distribuyeron en los siguientes grupos. I (n=76): ovocitos vitrificados/descongelados, II (n=119): ovocitos expuestos a crioprotectantes sin vitrificación y III (n=142): ovocitos co (mas) ntrol. Los ovocitos fueron vitrificados en microgotas sobre un papel de aluminio preenfriado flotando en nitrógeno líquido, utilizando una solución de equilibrio con 4% de etilenglicol y una solución de vitrificación con 35% de etilenglicol 5% de polivinilpirrolidona y 0,4 M de trehalosa. Las microgotas vitrificadas fueron almacenadas en nitrógeno líquido y fueron descongeladas 1-3 días después del almacenamiento. Los tres grupos de ovocitos se activaron partenogenéticamente por exposición de 4 minutos a 5 µM de ionomicina de Ca a temperatura ambiente seguido de una incubación por 5 horas en 6-dimetilaminopurina a 38,5 ºC en una atmósfera húmeda con 5% CO2. Los embriones se cultivaron en medio mSOF durante 8-9 días. Las tasas de ovocitos sobrevivientes fueron 55,1% y 93,7% para ovocitos vitrificados/descongelados (I) y expuestos (II) respectivamente. Las tasas de segmentación de 55,3%, 72,3% y 74,6%, y de desarrollo hasta blastocistos fueron 7,1%, 17,4% y 21,7% en los grupos I, II y III respectivamente. Estos resultados demuestran que la técnica de vitrificación ha quedado establecida y permite la producción de embriones partenogenéticos bovinos Resumen en inglés The aim of this study was to evaluate vitrification effects on the viability of chemically activated oocytes in order to produce parthenogenetic bovine embryos. Bovine oocytes retrieved from ovaries obtained in a slaughterhouse were matured in vitro for 20-22 hours and then assigned to the following groups: I (n=76): Vitrified/thawed oocytes, II (n=119): exposed oocytes to cryoprotectans without vitrification and III (n=142): control oocytes. Bovine oocytes were vitrified (mas) in microdrops on a precooled aluminum foil floating in liquid nitrogen, using an equilibrium solution with 4% ethylene glycol and a vitrification solution with 35% ethylene glycol, 5% polyvinyl-pyrrolidone and 0,4 M trehalose. The vitrified microdrops were stored in liquid nitrogen and were thawed after 1-3 days of storage. The oocytes of the 3 groups were parthenogenetically activated by 4-min exposure to 5 µM Ca ionomycin at room temperature followed through 5 hours incubation in 6-dimethylaminopurine at 38.5 ºC in a 5% CO2 in humidified atmosphere. Embryos were cultivated on mSOF medium during 8-9 days. The rates of oocytes survival were 55.1% and 93.7% to vitrified/thawed (I) and exposed (II) oocytes respectively. The rates of cleavage were 55.3%, 72.3% and 74.6%; and development to blastocysts were 7.1%, 17.4% and 21.7% in groups I, II and III respectively. These results demonstrate that the oocyte vitrification technique has been set up in our laboratory and parthenogenetic bovine embryos can be produced from such as vitrified/thawed oocytes

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Maduración in vitro de ovocitos de gatas tratadas con hormona folículo estimulante (FSH)/ In Vitro Maturation of Cat Oocytes Obtained From Females Treated with Follicle Stimulating Hormone

Sánchez Riquelme, Alfonso; López Zamorano, Leonardo; Silva Jiménez, Mauricio; Berland Olea, Marco
2006-03-01

Resumen en español El objetivo de este trabajo fue evaluar el efecto del tratamiento con hormona folículo estimulante (FSH) sobre la calidad y potencial de maduración in vitro (MIV) de ovocitos de gata. Veintiún gatas adultas fueron asignadas aleatoriamente a grupos de estudio. Grupo FSH (n = 9) 5 mg NIH/día de Foltropin-V por 4 días vía subcutánea y Grupo Control (n = 12) 1 mL de suero fisiológico por 4 días vía subcutánea. Los ovarios fueron obtenidos quirúrgicamente y transpo (mas) rtados al laboratorio dentro de las 4 horas subsiguientes a 37°C. Los complejos cumulus-ovocito (CCOs) fueron obtenidos por rebanado ovárico, seleccionándose por criterios morfológicos aquellos considerados aptos para MIV. Se utilizó como medio de maduración TCM-199, BSA (0,4%), FSH (1µL/mL), LH (1µL/mL), 17beta estradiol (1µg/mL), gentamicina (50 µg/mL) y piruvato (0,2 mM). El cultivo se realizó durante 24 horas a 38,5°C con 5% de CO2. Posteriormente los ovocitos fueron denudados, fijados y teñidos para evaluar la maduración, considerándose maduros aquellos en metafase II. Se recuperaron en promedio por hembra 10,6 ± 3,6 y 7,1 ± 2,8 CCOs aptos para MIV en los grupos FSH y Control respectivamente (P Resumen en inglés The aim of this research was to evaluate the effect of Follicle Stimulating Hormone (FSH) treatment on quality and in vitro maturation potential of cumulus-oocyte complexes (COCs) recovered from domestic cats. Twenty-one mature cats were randomly assigned to two groups, FSH (n=9) and Control (n=12). Cats in FSH group were treated with 5 mg of Folltropin-V subcutaneously every 24 hours, for 4 consecutive days. Cats in Control group received 1 mL of sterile saline solution (mas) every 24 hours for 4 days. Ovaries were obtained surgically 24 hours after the end of the gonadotrophic treatment. Ovaries were then transported to the laboratory at 37°C within 4 hours after surgery. COCs were recovered by slicing, and classified according to morphological features. Maturation medium was based on TCM-199, and supplemented with 0.4% BSA, 1µL/mL FSH, 1µL/mL LH y 1µg/mL of 17ß oestradiol, 50 µg/mL gentamicin, 0.20 mM sodium pyruvate. The maturation period was of 24 hours under 38.5°C, 5% CO2 and saturated humidity. After this period oocytes were denuded, fixed and stained to asses their maturational status. Oocytes were considered mature when it was observed the presence of metaphase II plate and the expulsion of the first polar body. An average of 10.6 ± 3.6 and 7.1 ± 2.8 excellent and good quality COCs were recovered from cats in FSH and Control group respectively (P

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Simplificación de la fertilización de ovocitos durante la producción in vitro de embriones bovinos/ Simplification of oocytes fertilization during in vitro production of bovine embryos/ Simplificação da fecundação de oócitos durante produção in vitro de embriões de bovinos

Urrego, Rodrigo; Tarazona, Ariel; Olivera Ángel, Martha; Camargo, Omar
2008-09-01

Resumen en portugués O objetivo deste estudo foi avaliar um novo procedimento de fertilização in vitro (FIV) de oócitos bovinos, que foi omitida na centrífuga esperma lavar os processos de seleção e de esperma. Dentro de cada um dos poços pratos convencionais quatro poços (poços externa) um novo bem menor (poços internos) cerca de 50 μl fato em vidro (0,3 mm de altura por 0,8 mm de diâmetro) foram introduziu. O procedimento foi de encher poços interna e externamente com 700 & (mas) #956; l meio de fertilizaηγo, até que a fossa foi coberto por meios internos e, em seguida, depositadas 10 CCOs em poços internos; então 30 μl previamente descongelados sêmen foi depositado no fundo da cova fora. Depois de uma hora é retirada a todo o conteúdo da cova, e foi deixada fora da doméstica no conteúdo do bem com o ambiente e células germinativas por um período de incubação de 16 h. A alegada zygotes foram cultivados em meio CR1aa por um período de 7 dias com uma mudança no meio-72h. Como um controle, utilizado uma gradiente de Percoll 45-90% de selecção de espermatozóides. A taxa de oócitos foi dividida (70.8 vs 73.1) e da proporção de oócitos que atingiu o estádio e foi Mórula blastocisto (18.8 vs 20.3), respectivamente. Os resultados obtidos com a nova metodologia proposta são semelhantes aos obtidos com a metodologia convencional (p Resumen en español El objetivo de este estudio fue evaluar un nuevo procedimiento de fertilización in vitro (FIV) de ovocitos bovinos, en el cual se omitió la centrifugación de los espermatozoides para los procesos de lavado y selección espermática. Dentro de cada uno de los pozos de los platos convencionales de cuatro pozos (pozos externos) se introdujo un nuevo pozo más pequeño (pozos internos) de aproximadamente 50 μl hecho en material de vidrio (0.3 mm de alto por 0.8 mm de (mas) diámetro). El procedimiento consistió en llenar los pozos interno y externo con 700 μl de medio de fertilización, hasta que el pozo interno quedara cubierto de medio, luego se depositaron 10 CCOs por pozo interno; luego 30 μl de semen previamente descongelado se depositaron en el fondo del pozo externo. Despuιs de una hora se removiσ todo el contenido del pozo externo y se dejσ el contenido del pozo interno con el medio y las células germinales por un periodo de incubación de 16 h. Los presuntos cigotos fueron cultivados en medio CR1aa por un periodo de siete días con un cambio de medio a las 72h. Como control, se utilizó un gradiente de Percoll 45-90% para la selección espermática. La tasa de de ovocitos divididos fue de (70.8 vs. 73.1) y la proporción de ovocitos que llegaron al estadio de morúla y blastocisto fue de (18.8 vs. 20.3), respectivamente. Los resultados obtenidos con la nueva propuesta metodológica son similares a los obtenidos con la metodología convencional (p Resumen en inglés This study was conducted to evaluate an in vitro fertilization (IVF) procedure that avoids the washing-selection-centrifugation of spermatozoa prior to coincubation with oocytes. A special dish was constructed as follows: in the middle of each of the 4-wells of a conventional plastic dish (larger wells), another little (≈50 μl) glass dish (inner well) was placed (0.3 mm-tall x 0.8 mm in diameter), in such a way that when the larger plate was filled with 700 (mas) 56;l of IVF media (Fert-TALP), the inner well was also filled up to overflowing. Ten in vitro matured oocytes were set into the inner well, and 30 μl of thawed semen were placed on the bottom of the outer well. After one hour of incubation, the media from the outer well was removed, and the well with the remaining media and the germ cells, were incubated for 16 hours. Presumptive zygotes were cultured in a CR1aa media for seven days with a culture media replace at 72 h. As a control, a conventional IVF, using the classical 45%-90% Percoll gradient selection, was carried out. The cleavage rates (70.8 vs. 73.1) and the proportion of oocytes reaching morula and blastocyst stages (18.8 vs. 20.3) by the "easy-IVF" were similar to the results obtained by the classical method (p

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Evaluación de respuesta ovárica y calidad de ovocitos en gatas tratadas con hormona folículo estimulante (FSH) utilizando dos esquemas de administración/ Evaluation of ovarian response and oocyte quality in domestic cats treated with two administration schemes of follicle stimulating hormone (FSH)

SANCHEZ, A. E.; SILVA, M. E.
2003-01-01

Resumen en español El objetivo de este trabajo fue estudiar el efecto del tratamiento gonadotrófico con FSH sobre las características foliculares y ovocitarias de gatas adultas, y comparar dos esquemas de administración de FSH en términos del número de ovocitos potencialmente aptos para MIV. Usando veinte gatas adultas, aleatoriamente, se formaron tres grupos de tratamiento. Grupo SC (n=7) 5 mg/ día de FSH por 4 días, vía subcutánea; Grupo IM (n=6) 2 mg/día de FSH por 5 días, ví (mas) a intramuscular y un Grupo Control (n=7). Las gatas fueron ovariectomizadas y se realizó recuento, medición de folículos y recuperación de ovocitos. Los folículos fueron agrupados en dos categorías: o = 2 mm (considerados como preovulatorios). El tratamiento gonadotrófico aumentó (P o = 2 mm, comparado con el grupo control, independiente del esquema de administración de FSH. El tratamiento gonadotrófico, también aumentó (P o = 2 mm versus folículos Resumen en inglés The purpose of this work was to study the effects of FSH administration upon follicular and oocyte characteristics of female cats. Two FSH administration schemes were compared and their effects on the number of follicles and good grade oocytes for IVM obtained by follicular punction was determined. Twenty adults female cats were randomly distributed on 3 experimental groups: Group SC (n=7) recieved 5 mg/day of FSH for 4 days, subcutaneoulsy; Group IM (n=6) recieved 2 mg/d (mas) ay of FSH for 5 days, intramuscular and Control Group (n=7) which did not recieve any treatment. The ovaries were surgically removed from all female cats and follicles were counted and measured and the oocytes were recovered. Follicles were clasified according to their diameter on or = 2 mm (preovulatory). Gonadotrophine treatment increased the total number of follicles and follicles with > or = 2 mm diameter when compared to control group (P or = 2 mm than for follicles with

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Evaluación de tres protocolos de tratamiento hormonal sobre el diámetro de ovocitos de sabaleta Brycon henni/ Evaluation of three protocols hormone treatment on the size of the oocytes of sabaleta Brycon henni/ Avaliação de tres protocolos de tratamento hormonal sob o diámetro dos ovocitos da sabaleta Brycon henni

Lenis, Gustavo A; Restrepo, Luis F; Cruz-Casallas, Pablo E
2009-06-01

Resumen en portugués O estudo foi realizado no Município de San Carlos (Antioquia, Colombia), pela Facultad de Ciencias Agrarias de la Universidad de Antioquia, conjuntamente com a corporação CORNARE, ISAGEN, entre os meses de maio e julho de 2008. Foram utilizadas 12 fêmeas e 24 machos de sabaleta Brycon henni de aproximadamente 100 g de peso corporal e 20 cm de comprimento, provenientes de um lote de reprodutores capturados em ambiente natural em agosto de 2007. Os animais receberam um (mas) dos três tratamentos: T1 extrato de hipófise de Hipófise de Carpa (Argent, USA) (EHC), n=4; T2 Ovopel (Sigma Co., St Louis, Missouri), n=4; T3 Ovaprim (Syndel Laboratories Ltd, Vancouver, BC Canadá), n=4, durante quatro datas de amostragem e fertilizadas cada uma com sêmen de dois machos, injetados previamente com EHC. 11 das 12 fêmeas responderam aos tratamentos e apresentaram ovócitos entre 1428.8 e 1679.8 (T1), 1531.2 e 1879.2 (T2) e de 1712.8 a 1803.3 (T3) de diâmetro, antes e depois do tratamento hormonal, respectivamente. Observaram-se diferencias significativas ao interior do T1 e T2 (p Resumen en español El estudio fue realizado en el Municipio de San Carlos (Antioquia, Colombia), por la Facultad de Ciencias Agrarias de la Universidad de Antioquia, en convenio con la Corporación CORNARE, ISAGEN, durante la temporada reproductiva Mayo-Julio de 2008. 12 hembras y 24 machos de sabaleta Brycon henni de aproximadamente 100 g de peso corporal y 20 cm de longitud estándar, provenientes de un lote de 320 reproductores capturados del ambiente natural en Agosto del 2007 y manteni (mas) dos en cautiverio en un estanque de tierra de 200 m², fueron seleccionados por sus características externas de madurez sexual como vientre abultado, papila genital enrojecida y expulsión de semen después de leve presión sobre la cavidad celómica. Además como carácter de dimorfismo sexual se consideró para las hembras la presencia de aleta anal lisa o con espinaciones en máximo el 50% de su longitud, mientras que en los machos es rugosa en toda su extensión. También se tuvieron en cuenta características internas, en las hembras se realizó biopsia ovárica por aspiración de una muestra de ovocitos para observar la posición de sus núcleos y medición del de diámetro.. Las hembras fueron seleccionadas con la condición que presentaran ovocitos con diámetros superiores a 900 µm. Los animales fueron distribuidos para recibir uno de tres tratamientos, T1 Extracto de Hipófisis de Carpa (Argent, USA) (EHC), n=4; T2 Ovopel (Sigma Co., St Louis, Missouri), n=4; T3 Ovaprim (Syndel Laboratories Ltd, Vancouver, BC Canadá), n=4, durante cuatro fechas de muestreo y fertilizadas cada una con el semen de dos machos, inyectados previamente con EHC. 11 de las 12 hembras respondieron a los tratamientos y presentaron diámetros ovocitarios promedio de 1428.8 y 1679.8 (T1), 1531.2 y 1879.2 (T2) y de 1712.8 a 1803.3 (T3), antes y después del tratamiento hormonal, respectivamente. Se observaron diferencias significativas al interior del T1 y T2 (p Resumen en inglés The evaluation of three hormone treatments on the diameter size of ovocytes in Sabaleta was conducted during the breeding season from May to July 2008. Twelve Brycon henni females and 24 males, 100 g and a standard length of 24 cm, were selected according to their sexual maturity and external features such as bulging belly, red genital papilla and semen expulsion after softly pressing its coelomic cavity. The fish were selected from a 320 brood fish batch caught in the wi (mas) ld in August 2007 and kept in captivity in a 200 m² earth pond. The presence of an anal fin with or without spines of a maximum length of 50% was considered as sexual dimorphism in females. Internal characteristics were also considered; e.g., an ovarian aspiration biopsy was performed in females in order to observe its nuclei position and diameter. Ovocytes from selected females were at least 900 µm in diameter. Animals were distributed into three treatment groups for four sampling dates: T1 carp pituitary extract (CPE) (Argent Chemical Laboratories Inc., USA), n = 4; T2 Ovopel (Sigma Co. USA), n = 4; and T3 Ovaprim (Syndel Laboratories Ltd., Canada), n = 4. Each female was fertilized with the semen of two males previously injected with CPE. 11 out of 12 females had a treatment response, and resulting ovocyte average diameters were 1428.8 and 1679.8 (T1), 1531.2 and 1879.2 (T2), and 1712.8 to 1803.3 (T3), before and after hormone treatment, respectively. Significant differences were found within T1 and T2 (p

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Evaluación de la capacidad de desarrollo in vitro de ovocitos bovinos provenientes de vacas con predominancia fenotípica Bos taurus y Bos indicus/ Evaluation of in vitro development capacity of bovine oocytes obtained from predominantly Bos taurus and Bos indicus cows

Báez Contreras, Francisco J; Chávez Corona, Adeymi C; Hernández Fonseca, Hugo J; Villamediana Monreal, Patricia C
2010-06-01

Resumen en español El objetivo de este estudio fue evaluar la capacidad de desarrollo in vitro de ovocitos bovinos de vacas mestizas B. taurus y B. indicus. Los ovocitos fueron recuperados de ovarios de hembras bovinas provenientes de un matadero comercial. Para la obtención de los complejos cumulus-ovocitos (CCO) se realizó la técnica de slicing, seleccionando los ovocitos que tenían al menos una capa de células del cumulus y un citoplasma homogéneo. Los ovocitos seleccionados fueron (mas) madurados y fecundados in vitro (MIV-FIV). Se utilizó semen de un toro Brahman puro (B. indicus). Para la evaluación de la MIV y FIV todos los ovocitos se fijaron por al menos 24 h a 4°C en solución metanol-ácido acético (3:1) y teñidos con aceto-orceína al 1,1%. La tasa de maduración de ovocitos de vacas con predominancia fenotípica B. indicus fue del 66,17% mientras que las vacas con predominancia fenotípica B. taurus alcanzaron un 50,94% (P>0,05). En cuanto a la tasa de fecundación se obtuvo un 14,28 y 35,72% de ovocitos penetrados normalmente y anormales, respectivamente, para el grupo de ovocitos con predominancia fenotípica B. indicus. Mientras que para vacas con predominancia fenotípica B. taurus, un 10,22% correspondió a ovocitos penetrados normales y 19,31% de ovocitos penetrados anormales, sin encontrar diferencias estadísticamente significativas en ambos grupos. Los presentes resultados, tanto para la progresión meiótica como para las tasas de fecundación, indican que los ovocitos de vacas mestizas con predominancia fenotípica B. indicus son más competentes en las primeras etapas de desarrollo in vitro que los ovocitos de vacas mestizas con predominancia fenotípica B. taurus. Resumen en inglés The aim of this study was to evaluate the in vitro development capacity of bovine oocytes from crossbred B. taurus and B. indicus cows. Oocytes from bovine cows were collected from commercial slaughterhouse. The cumulus-oocyte complex (COC) ovaries were obtained by Slicing technique, selecting those oocytes that had 2 to 3 layers of cumulus cells and homogeneous cytoplasm. After selection oocytes proceed with maturation (IVM) and fertilization in vitro (IVF). It used seme (mas) n from a pure Brahman bull (B. indicus). For the assessment of IVM as for IVF oocytes were fixed for about 24 hours at 4°C in methanol-acetic acid (3:1) solution and stained with 1.1% aceto-orcein. The maturation rate of oocytes from cows with B. indicus phenotypic predominance was 66.17%, whereas cows with B. taurus phenotypic predominance 50.94% (P>0.05). Fertilization rate obtained in B. indicus phenotypic predominance group was 14.28% of oocytes normal penetrated and abnormal penetrated 35.72%, for cows with a phenotypic predominance B. taurus oocytes normal penetrated were 10.22% and 19.31% of abnormal oocytes penetrated. In conclusion, the present results indicate that oocytes from cows with phenotypic predominance B. indicus are more competent in the early stages of development in vitro than oocytes from cows with phenotypic predominance B. taurus.

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Estudio Estructural del Huso Meiótico de Ovocitos Bovinos Vitrificados/ Structural Study of Meiotic Spindle of Vitrified Bovine Oocytes.

Bóez Contreras, Francisco J; Hernández, Ludwing; Villamediana Monreal, Patricia C
2008-06-01

Resumen en español La vitrificación de ovocitos bovinos se ha venido utilizando como uno de los protocolos de criopreservación más prometedores. Se ha expresado el temor por los efectos que puede causar la utilización de aditivos crioprotectores sobre la integridad estructural de los ovocitos. En este trabajo, los experimentos fueron conducidos para evaluar el efecto de la vitrificación sobre la estructura del huso meiótico y la capacidad de desarrollo de ovocitos bovinos. Para ello, (mas) ovocitos acabados de liberar de sus folículos y madurados in vitro fueron expuestos a temperatura ambiente a las soluciones vitrificadoras (etilenglicol y sacarosa), también fueron vitrificados ovocitos inmaduros y madurados in vitro. Los ovocitos fueron teóidos in toto, para evaluar la maduración nuclear y a través de la tinción inmunocitoquímica fueron estudiadas las alteraciones estructurales del huso meiótico. Los ovocitos en estadio de VG, son más sensibles al efecto tóxico causado por los agentes crioprotectores a temperatura ambiente y al proceso de criopreservación, valorados mediante la progresión meiótica y el análisis inmunocitoquímico del huso meiótico. La anomalía más frecuentemente observada fue la ausencia de huso meiótico. La estructura del huso meiótico de ovocitos vitrificados MIV, es más resistentes al daño crioinducido, que los ovocitos vitrificados en estadio de VG. Se recomienda la vitrificación de ovocitos bovinos madurados in vitro. Resumen en inglés Bovine oocytes vitrification has been used as one of the most promising cryopreservation protocols. Fear of the effects of cryoprotectant additives on the oocytes structural integrity have been posed. In this study, trials were conducted to evaluate the effects of vitrification over meiotic spindle structure and development capability in bovine oocytes. Based in this evidence, oocytes recently released from their follicles and in vitro matured were exposed at room tempera (mas) ture to vitrifying solutions (ethylenglicol and sucrose), also immature and in vitro matured oocytes were vitrified. Oocytes were stained in toto to assess nuclear maturation stage and meiotic spindle structural alterations were studied by immunocytochemistry. Oocytes at GV stage are more sensitive to the toxic effects caused by cryoprotectant agents at room temperature and to the cryopreservation procedure, assessed through meiotic progression and immunocytochemical analysis of meiotic spindle. The most frequently encountered anomaly was absence of meiotic spindle. Meiotic spindle structure in vitrified and IVM oocytes endure better the cryoinduced injuries compared with oocytes vitrified the GV stage. It is recommend the vitrification of in vitro matured bovine oocytes.

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Gestación con embriones producidos in vitro a partir de ovocitos recuperados de vacas ovariectomizadas/ Gestation with in vitro produced embryos from oocytes of ovariectomized cows

Aller, J.F.; Alberio, R.H.; Palma, G.A.
2000-01-01

Resumen en español Los objetivos de este trabajo fueron evaluar la eficiencia de la producción in vitro (PIV) de embriones empleando ovocitos de vacas ovariectomizadas y determinar la tasa de preñez después de la transferencia de embriones descongelados. Ciento veinte vacas Holando Argentino de alto valor productivo fueron ovariectomizadas en 6 sesiones de 18-25 vacas, utilizando un ovariótomo por vía vaginal. Los ovarios fueron transportados entre 18-20C en solución salina con antibi (mas) óticos durante 6 horas y procesados dentro de las 11 horas de comenzadas las ovariectomías. Los Complejos Cumulus-Ovocitos (CCOs) fueron aspirados de folículos antrales (2-8 mm de diámetro). Los CCOs fueron madurados en TCM 199 suplementado con 10% de suero de vaca en estro durante 22 horas. Luego de la maduración, los ovocitos fueron inseminados con semen descongelado y cultivados en medio CR1aa. A los 7 y 8 días después de la fecundación, los blastocistos y blastocistos expandidos de buena calidad fueron equilibrados en 1,5 M etilenglicol. Se colocaron dos embriones por pajuela de 0,25 ml y posteriormente fueron congelados. Los embriones descongelados fueron transferidos directamente a las receptoras. Un total de 57 vaquillonas lecheras fueron utilizadas como receptoras. El diagnóstico de preñez fue realizado por palpación rectal a los 55 días después de la transferencia. La eficiencia en la PIV fue de 9,5 ovocitos y 2,7 embriones por ovario y la tasa total de preñez fue 31,5%. La tasa de gestación obtenida con embriones de 7 días (35,5%) fue significativamente mayor (P<0,05) a la obtenida con embriones de 8 días (16,6%). Se concluye de estos resultados que por cada vaca de rechazo se podría producir 0,82 gestación adicional después de la aplicación de esta tecnología. Estos datos demuestran que la PIV de embriones a partir de ovarios de vacas ovariectomizadas es una buena alternativa para preservar recursos genéticos y para propósitos comerciales Resumen en inglés The objectives of this work were to evaluate the efficiency of in vitro production (IVP) of embryos from ovariectomized cows and the pregnancy rate of transferred frozen-thawed embryos. One hundred and twenty Argentine-Holland cows were ovariectomized in 6 sessions by using the effeminator by vaginal via. The ovaries were transported at 18-22C into saline solution supplemented with antibiotics during 6 h and processed whitin of 11 h since the first ovary obtained. Cumulus (mas) -oocytes complexes (COCs) were aspirated from small antral follicles (2-8 mm in diameter). The COCs were matured in TCM 199 plus 10% oestrus cow serum for 22 h. Following maturation the oocytes were fertilised with frozen-thawed semen in TALP medium and cultured in CR1aa medium. At Day 7 and 8 after fertilisation, good quality blastocysts and expanded blastocysts were equilibrated in 1.5 M ethylene glycol. Two embryos were loaded into 0.25 ml straws and frozen. The embryos were thawed and directly transferred into the recipients. A total 57 dairy heifer was used as recipients. Pregnancy diagnosis was performed by rectal palpation 55 d after embryo transfer. The efficiency of IVP technology was 9.5 oocytes and 2.7 embryos per ovary. The overall pregnancy rate was 31.5%. A higher pregnancy rate (P<0.05) was obtained for Day-7 (35.5%) versus Day-8 (16.6%) IVF embryos. It can be concluded from the results that a culled cow could produce 0.82 additional pregnancy after application of this technology. These data demonstrate that IVP embryos originating from ovaries of ovariectomized cows is a good alternative to preserve genetic resources and for commercial purposes

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Histochemical characterisation of oocytes of the swordfish Xiphias gladius | Caracterización histoquímica de ovocitos de pez espada, Xiphias Gladius

Ortiz, Juan B.; Sarasquete, M.ª Carmen; Porcelloni, Serena; Fossi, Cristina

Publicación online disponible en: http://www.icm.csic.es/scimar/index.php | [EN] This paper reports a histological, histochemical and immunohistochemical characterisation of growing oocytes of the swordfish Xiphias gladius. The presence and distribution of carbohydrates, proteins, lipids, calcium, i...

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Influencia de la suplementación en la dieta con levaduras y minerales sobre la producción de ovocitos de ovejas púberes estimuladas ováricamente/ The influence of diet supplementation with yeasts and organic minerals over oocyte production of ovarian stimulated ewes

González Parra, Eugenia I; Navarrete Sierra, Luis F; Cruz Tamayo, Alvar A; Domínguez Rebolledo, Alvaro; Sanginés García, José R; Ramón Ugalde, Julio P
2007-02-01

Resumen en español Para producir ovocitos cultivados “in vivo” se estudió la respuesta superovulatoria de ovejas púberes suplementadas con un alimento proteico que contiene levaduras o minerales orgánicos. Dieciocho hembras (7 meses de edad) fueron distribuidas en 3 grupos: TA:1 kg alimento 15% PC+Yea Sacc®, (levadura Saccharomyces cerevisiae cepa 1026). Dosis: 5 gr/animal/día+heno ad libitum. TB:1 kg alimento 15% PC+Bioplex Plus®, (cultivo de levaduras vivas y minerales orgánicos) (mas) . Dosis: 4 gr/animal/día+heno ad libitum. TT:Testigo. 1 kg alimento 15% de PC+heno ad libitum. El estro se sincronizó con esponjas vaginales (40 mg FGA) durante 12d. A los 10d de la inserción de las esponjas se aplicó 225 mg de prostaglandina/oveja. La superovulación se realizó 36h antes de la retirada de las esponjas mediante 100 mg-NIH FSHp y 500 UI eCG en una sola dosis/oveja. 24h de la retirada de las esponjas se aplicaron 100 µg GnRH/oveja. La tasa de ovulación se midió por endoscopia. Los ovocitos se recuperaron del oviducto 48h de la retirada de las esponjas. La TO resultó superior (P Resumen en inglés The superovulatory response of pre-pubertal or pubertal ewes fed with protein suplement that contained yeast or organic minerals was evaluated in order to obtain “in vivo” maturated oocytes. Eighteen females (7 months of age) were allocated to one of the following treatment and fed as follow: Treatment A (TA): 1 kg food with 15% PC+Yea sacc® (yeast Saccharomyces cerevisiae stump 1026), dose: 5 gr/animal/day and hay ad libitum. Treatment B (TB): 1 kg food with 15% PC+Bi (mas) oplex Plus® (Cultivation of live yeasts and organic minerals), dose: 4 gr/animal/day and hay ad libitum. Treatment C (TT: Control): 1 kg food with 15% PC and hay ad libitum. The estrous cycle was synchronized through the insertion of vaginal sponges with 40 mg of fluorogestone acetate (FGA) during 12 days. At day 10th of the sponges insertion 225 mg of prostaglandin F2á was administered per ewe. To induce supra-ovulation 100 mg-NIH FSHp and 500 UI eCG in a single dose were applied 36 h before the withdrawal of the sponges, and 24 h from the last application 100 µg of GnRH was also injected. The ovulation rate was measured by endoscopy and ovulated oocytes collected by flushing. The total of ovulation (TO) was greater in the TA and TB (16.6±6.84 and 15.5±4.18) treatment, than on the control TT (9.16±3.81) (P

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Efecto de la suplementación con L-cisteína en la maduración in vitro de ovocitos bovinos/ L-cysteine supplementation effect on the in vitro maturation of bovine oocytes

Hernández-Fernández, Adirmo; Hernández-Fonseca, Hugo
2010-06-01

Resumen en español utilizada como herramienta para el estudio de diversos aspectos relacionados con la maduración de ovocitos, la fecundación y el desarrollo temprano del embrión en condiciones in vitro. La L-cisteína es un sustrato externo requerido para la síntesis del glutation en la maduración de ovocitos bovinos. Con el objetivo de evaluar el efecto de la suplementación con L-cisteína sobre la maduración in vitro de ovocitos bovinos, se llevó a cabo un experimento con ovarios (mas) obtenidos de vacas mestizas beneficiadas en una sala de matanza local. Se utilizaron tres tratamientos con diferentes concentraciones T1: 0 mM; T2: 0,1 mM y T3: 1,0 mM. Aproximadamente 400 Complejos Cumulus Ovocito (COCs) por tratamiento se maduraron en pozos de 500 µL del medio de maduración (TCM-199), distribuyéndose 50 COC por pozo en una incubadora a 5% de CO2, a 38,5°C y con humedad saturada. Los datos se analizaron por medio de un análisis de varianza (ANAVAR). No se observaron diferencias significativas entre los tratamientos en el porcentaje de ovocitos que llegaron a Metafase II (MII, T1: 72,77%, T2: 67,47% y T3: 70,43%). Los resultados indican que la suplementación con L-cisteína durante la maduración no ejerció un efecto sobre el porcentaje de ovocitos bovinos que alcanzaron el estado de MII, sin embargo se deben realizar otras investigaciones para determinar el efecto ulterior que tiene la L-cisteína adicionada en la maduración sobre la fecundación y el desarrollo embrionario in vitro. Resumen en inglés In vitro fertilization (IVF) is now a routine technique in a number of biotechnology research laboratories worldwide. IVF is used as a tool for the study of various aspects related to oocytes maturation, fertilization and early embryo development. L-cysteine constitutes an external substrate required for synthesis of glutathione in the maturation of cattle oocytes. In order to study the effect of L-cysteine supplementation on in vitro maturation of cattle oocytes, ovaries (mas) were obtained from crossbred cows culled at a local slaughterhouse. Three different in vitro maturation treatments were utilized. Each treatment had a different concentrations of L-cysteine: T1: 0 mM, T2: 0.1 mM and T3: 1.0 mM. Approximately 400 Cumulus Oocyte Complexes (COCs) were matured in wells of 500 ìL of maturation medium (TCM-199), with 5% CO2 at 38.5°C and saturated relative humidity. Data were analyzed using analysis of variance (ANOVA). There were no significant differences between treatments in term of oocytes that arrived to Metafase II (MII, T1: 72.77%, T2: 67.47% and T3: 70.43%). Results indicate that supplementation with L-cysteine during maturation did not possitively affect the percentage of bovine oocytes that reached the M II state. Nonetheless further research should be carried out to determine the effect of L-cysteine supplementation during maturation, on fertilization and on embryonic development in vitro.

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EFECTO DE LA ADICIÓN DE FSH Y LH EN EL MEDIO SOBRE LA MADURACIÓN Y EL DESARROLLO EMBRIONARIO in vitro DE OVOCITOS DE CERDA/ EFFECT OF THE ADDITION OF FSH AND LH IN MEDIUM ON THE MATURATION AND THE EMBRYONIC DEVELOPMENT in vitro OF OOCYTES OF SOW

Fernández Reyes, F; Hernández Pichardo, J.E; Rosales Ávila, María del Rocio
2009-08-01

Resumen en español Se recuperaron 1025 ovocitos de ovarios de cerdo obtenidos en mataderos, de estos 165 (tratamiento 1) se maduraron con 0.75 U.I. de FSH y 0.75 U.I. de LH y 125 (tratamiento 2) con 1.5 U.I. de FSH y 1.5 U.I. de LH, la maduración fue evaluada por fijación con alcohol-ácido acético y teñido con orceína acética. Se obtuvo un 40 % y 39.2 % de ovocitos madurados para los tratamientos 1 y 2 respectivamente, sin diferencia estadística significativa entre los mismos. En lo (mas) s dos tratamientos para la fertilización in vitro se evaluó la maduración de los ovocitos mediante la observación de cuerpo polar, los cuales fueron divididos en dos grupos: se obtuvieron 155 ovocitos madurados con el primer tratamiento y 137 ovocitos con el segundo tratamiento, lo que corresponde a 42.1% y 37.3% de madurados, respectivamente. Como resultado de la fertilización in vitro se obtuvieron 122 embriones en sus diferentes etapas alcanzando, 76 embriones en el primer tratamiento y 46 con el segundo tratamiento, para un 49%ª y 33.5%b (a diferente de b P Resumen en inglés One thousand twenty five oocytes from sow ovaries, obtained in slaughter houses were recovered. From them, 165 (treatment 1 ) were matured with 075 U.I. of FSH and 0.75 U.I. of LH, and 125 (treatment 2 ) with 1.5 U.I. of FSH and 1.5 U.I. of LH. Maturation was evaluated by fixation with alcohol-acetic acid and stained with acetic orcein. There was a 40% and 39% of maturated oocytes from the treatments 1 and 2 respectively, without significant statistical differences among (mas) them. In the two treatments for in vitro fertilization, the maturation of oocytes was evaluated by polar body observation. They were divided into two groups: one having 155maturated with the first treatment and the other having 137 oocytes with the second treatment, which corresponded to a 42.1% and 37.3% respectively . As result of in vitro fertilization, 122 embryos were obtained in their different stages, reaching 76 with the first treatment and 46 with the second one, for a 49% and 33.5% (a different fom b p

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Efectos de la incorporación en la dieta de pigmentos carotenoides, sobre el desarrollo gonadal y la madurez de los ovocitos en hembras de trucha arco iris (Onchorhynchus mykiss, Walbaum, 1972)

Ingle de la Mora¹, Genoveva; Arredondo-Figueroa², J. L.; Barriga-Sosa², Irene de los Ángeles; Bazán-Arias², J; Vernon-Carter³, J
2004-06-01

Resumen en español Se utilizaron cuatro grupos experimentales con 60 hembras de trucha arco iris (Onchorhynchus mykiss) cada uno, con un peso promedio de 467 g, las cuales fueron sometidas a un ensayo aleatorio para comparar la eficiencia de cuatro dietas conteniendo diferentes concentraciones de pigmentos carotenoides y determinar sí la concentración y el origen del mismo presentaba una influencia sobre el desarrollo gonadal y la maduración de los ovocitos. La primera dieta fue una diet (mas) a control no pigmentada (C); la segunda contenía 100 mg kg-1 de Carofil Rosa (CR); la tercera y cuarta contenía 200 (CR200) y 250 (CR250) mg kg-1 de oleorresina saponificada de chile rojo (Capsicum annuum), respectivamente. Los resultados mostraron que existieron diferencias significativas (p Resumen en inglés Four groups of rainbow trout (Onchorhynchus mykiss) each with 60 females with an average body weight of 467 g were submitted to an aleatory assay in order to compare the efficiency of four diets containing different concentrations of carotenoid pigments, and to determine if pigment concentration and source had an influence on female gonad development and oocyte maturity. The first diet was the non-pigmented control (C). The second diet contained 100 mg kg-1 of Carophyll P (mas) ink (CR). The third and fourth diets contained 200 (RC200) and 250 (RC250) mg kg-1 of saponified red chili oleoresin, respectively. The results indicated significant differences (p

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Aproximación a los cambios intra-anuales en el contenido de energía del ovario de sardina (Sardinops sagax Jenyns, 1842) en el norte de Chile/ An aproach to intra-anual changes in the energy contents of the ovary of south american pilchard (Sardinops sagax Jenyns, 1842) in northern Chile

Tascheri O, Renzo; Claramunt Q, Gabriel
1996-01-01

Resumen en español Se estimó el peso seco del ovario y de las dos modas de ovocitos vitelados de hembras maduras de sardinas de dos estratos de talla (300 hembras de 26-28 cm y 327 hembras de 28-30 cm), durante el ciclo reproductivo de abril'92-marzo'93 en el norte de Chile (19º-22ºS). Las estimaciones se obtuvieron mediante la función Weibull, relacionando el diámetro de los ovocitos y su peso seco, conocidos el peso húmedo del ovario, el peso húmedo de la submuestra de tejido ovár (mas) ico para el cálculo de la fecundidad parcial y la distribución de frecuencias del diámetro de los ovocitos contenidos en la submuestra. Las variables estimadas fueron relacionadas con estimaciones del mismo ciclo reproductivo de fecundidad, tamaño medio del ovocito de la moda más avanzada, índice de condición, frecuencia de desove y porcentaje de hembras desovantes. El peso seco del ovario de las modas de ovocitos vitelados siguieron la misma tendencia que el tamaño medio de ovocitos de la moda más avanzada y la fecundidad, es decir con valores altos en los dos períodos de mayor incidencia de desove (invierno y verano), y bajos en períodos de reducida actividad sexual. Una baja en la fecundidad y tamaño medio del ovocito de la moda más avanzada en julio y en las variables estimadas, ocurre junto a una baja en el índice de condición en ambos estratos de talla, discutiéndose su posible relación con el evento El Niño 1991-92 Resumen en inglés Ovary and yolked oocytes modal dry weight of mature females of south American pilchard, distributed in two total length strata (300 females of 26-28 cm and 327 of 28-30 cm), was estimated on a monthly basis in northern Chile (19º-22ºS) during the reproductive cycle (between april'92 and march`93). The estimates were obtained using a Weibull function which relates the oocyte diameter to its dry weight, given the wet weight of the ovary, the wet weight of the subsample of (mas) ovarian tissue for the fecundity estimates and the oocyte diameter frequency distributions. The estimated variables fluctuations were related to monthly estimates of fecundity, oocyte average size for the more advanced batch, condition index, spawning frequency and the fraction of spawning females for the same reproductive cycle. The estimated ovary and yolked oocytes modal dry weight followed the same trend as the asymptotic oocyte dry weight and batch fecundity, with high values for the two spawning periods (winter and summer) and low values for the periods of less reproductive activity. A low fecundity and asymptotic oocyte dry weight value occurred in july along with a low value in the condition index by length stratum. A possible related effect to El Niño phenomenon is discussed

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Período de desove y fecundidad del pez espada (Xiphias gladius) capturado en el Pacífico suroriental/ Spawning period and fecundity of swordfish (Xiphias gladius) caught in the southeastern Pacific

Claramunt, Gabriel; Herrera, Gustavo; Donoso, Miguel; Acuña, Enzo
2009-01-01

Resumen en español Se entregan resultados de la biología reproductiva del pez espada capturado frente a la costa chilena. Se realizaron muéstreos biológicos en la zona económica exclusiva y alta mar adyacente a las islas de Pascua, Salas y Gómez, San Félix y San Ambrosio, entre febrero de 2001 y enero de 2002 y fueron sometidos a análisis histológicos. Los registros mensuales de hembras sexualmente activas, la frecuencia de estadios ováricos y el índice gonádico, muestran la mayo (mas) r actividad reproductiva circunscrita a la época estival, durante enero y febrero. Mediante el análisis de la distribución de frecuencia de ovocitos, se observa una separación de la moda más avanzada alrededor de 600 µm; si se considera como fecundidad parcial a los ovocitos mayores a este diámetro y la fecundidad varía entre 0,5 y 31 millones de ovocitos para ejemplares de 217 y 303 cm de la longitud mandíbula inferior a horquilla respectivamente. Los resultados indican evidencias que podría ser un pez sincrónico por grupo, ya que entre otras características, en algunos ejemplares existe una discontinuidad entre ovocitos maduros e inmaduros Resumen en inglés This study presents the reproductive biology of the swordfish caught off the Chilean coast. Biological samples were taken in the economic exclusive zone and oceanic áreas adjacent to Easter Island, Salas y Gómez Island, and San Félix and San Ambrosio islands between February 2001 and January 2002 and subjected to histological analysis. The monthly records of reproductively active females, the frequency of ovarian stages, and the gonadosomatic index show that spawning a (mas) ctivity is greatest in austral summer, during January and February. An analysis of the oocyte frequency distributions revealed a separation of the most advanced mode around 600 µm if taking partial fecundity to be oocytes larger than 600 µm and if the fecundity varíes between 0.5 and 31 million oocytes for females with 217 and 303 cm of lower jaw to fork length, respectively. The results indicate that the swordfish could be synchronous by group because, amongst their other characteristics, some specimens show a discontinuity between mature and immature oocytes

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Producción In vitro de Embriones Bovinos/ In vitro Production of Bovine Embryos

Fernández, Adriana; Díaz, Thaís; Muñoz, Gladys
2007-01-01

Resumen en español El objetivo del presente trabajo fue estandarizar y validar las técnicas de fertilización in vitro (FIV) y producción de embriones bovinos in vitro en el Laboratorio de Biotecnología del Instituto de Reproducción Animal de la Facultad de Ciencias Veterinarias de la Universidad Central de Venezuela. De un total de 544 ovocitos obtenidos de ovarios recolectados en el matadero y seleccionados para ser sometidos al proceso de FIV, se fertilizaron 399, obteniéndose una t (mas) asa de fertilización del 73,3%, alcanzando una tasa de desarrollo embrionario del 35,1% (191/544), un total de 74 mórulas (13,6%) y 9 blastocitos transferibles (1,6%). De acuerdo a su morfología, de 148 ovocitos rodeados de más de 6 capas de células del cumulus, se fertilizaron 107 (72,2%) con una tasa de desarrollo embrionario de 35,1% (52/147); mientras que los ovocitos rodeados de 4 a 6 capas de células del cumulus, alcanzaron una tasa de fertilización de 81,8% (122/149) y una tasa de división embrionaria de 46,3% (69/149). Ovocitos que presentaban 2 a 3 capas de células del cumulus para el momento de la maduración, alcanzaron una tasa de fertilización de 76,9% (117/152) con una tasa de división embrionaria de 36,8% (56/152). En el grupo de ovocitos que estaban desnudos para el momento de la maduración, se observó una tasa de fertilización mucho menor (55,7%; 53/95), así como una tasa de desarrollo embrionario de 14,7% (14/95). Los resultados obtenidos demuestran la factibilidad del desarrollo e implementación de la técnica de FIV para la producción de embriones bovinos in vitro que permita aumentar la producción, selección y comercialización de embriones bovinos, con el objetivo de impulsar la industria de transferencia de embriones y utilizar esta metodología como base para el desarrollo de otras biotecnologías. Resumen en inglés The aim of the present work was to standardize and validate the techniques for in vitro fertilization (IVF) and the in vitro production of bovine embryos at the Biotechnology Lab of Instituto de Reproducción Animal, at the Facultad de Ciencias Veterinarias, Universidad Central de Venezuela. A total of 544 oocytes were obtained from ovaries collected at the slaughterhouse and selected to undergo the process of IVF. Of the total, three hundred and ninety nine oocytes were (mas) fertilized, reaching a fertilization rate of 73.3%; with an embryo development rate of 35.1% (191/544); a total of 74 morulae (13.6%); and 9 transferable blastocysts (1.6%). According to their morphology, out of 148 oocytes surrounded by more than six layers of cumulus cells, 107 (72.7%) were fertilized; 35.1% (52/148) had embryo development rate, while oocytes surrounded by 4-6 layers of cumulus cells reached a fertilization rate of 81.8% (122/148), and a rate of embryo division of 46.3% (69/149). Oocytes with 2-3 layers of cumulus cells at the moment of oocyte maturation, reached a fertilization rate of 76.9% (117/152), with an embryo division rate of 37% (56/152). Denuded oocytes at the moment of maturation had a fertilization rate of 55.7% (53/95), as well as 14.7% (14/95) of embryo development. These results show the feasibility of the development and implementation of the IVF technique for production of bovine embryos, which allows an increase in the production, selection and commercialization of bovine embryos with the purpose of stimulating the embryo transfer biotechnology industry in Venezuela. These techniques could serve as the basis for the development of other technologies.

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Análisis comparativo del ciclo gametogénico de Perumytilus purpuratus (Bivalvia: Mytilidae), en las localidades de Taltal y Huasco, norte de Chile/ Comparative analysis of the gametogenic cycle from Perumytilus purpuratus (Bivalvia: Mytilidae), at the localities of Taltal and Huasco, northern Chile

Oyarzún Cabañas, Pablo; Toro, Jorge E; Jaramillo, Roberto; Guiñez, Ricardo; Briones, Carolina; Astorga, Marcela
2010-04-01

Resumen en español Se estudió el ciclo gametogénico de forma cualitativa y cuantitativa en poblaciones naturales de Perumytilus purpuratus provenientes de las localidades de Taltal y Huasco, Chile, durante el período entre octubre de 2007 y octubre de 2008. A través del análisis histológico se construyó una tabla de madurez gonadal de acuerdo a las características microscópicas. También se determinó el volumen de la fracción gamética (VFG) (% de ovocitos previtelogénicos, ovoc (mas) itos vitelogénicos y ovocitos maduros), porcentaje de tejido interfolicular e índice gonadal (IG). De acuerdo al análisis cualitativo P. purpuratus tiene un ciclo reproductivo semi-anual, que comienza en enero con desoves principalmente en primavera-verano, aunque también se detectaron desoves invernales. Sin embargo, el análisis cuantitativo de porcentajes de ovocitos maduros encontró que en Taltal se produjeron cuatro desoves (diciembre, marzo, julio y octubre) mientras que en Huasco tres (diciembre, febrero y septiembre). La relación del IG con los estados gametogénicos y el porcentaje de ovocitos maduros es significativa en las localidades estudiadas. También se observaron diferencias significativas del índice gonadal entre machos y hembras. En un gradiente latitudinal, el ciclo reproductivo de P. purpuratus mostró variaciones de acuerdo al periodo y a la sincronía Resumen en inglés A qualitative and quantitative study of the gametogenic cycle from natural populations of Perumytilus purpuratus at the localities of Taltal and Huasco was carried out between October 2007 and October 2008. By means of histological analysis a gonadal maturation table was constructed according to the microscopic characteristics. Also the Gametic Volume Fraction (GVF) (% of previtelogenic oocytes, vitelogenic oocytes and mature oocytes), percentaje of interfolicular connect (mas) ive tissue and Gonadic Index (GI) were determined. According to the qualitative analysis, P. purpuratus has a semiannual reproductive cycle starting in January with spawning mainly during spring-summer, even do some winter spawning were detected. However, the quantitative analysis of mature oocytes percentajes found that at Taltal population four spawnings were detected (December, March, July and October) while in Huasco population three spawnings were detected (December, February and September). The relationship between GI with the gametogenic stages and the mature oocyte percentajes were significant at the localities studied. Also significant differences of the condition index between males and females were observed. Along the latitudinal gradient the reproductive cycle of P. purpuratus showed variations according to the timing and synchrony

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Medio alternativo para la producción in vitro de embriones bovinos/ Alternative medium for in vitro production of bovine embryos

Ahuja Aguirre, Concepción; Montiel Palacios, Felipe; Pérez Hernández, Ponciano; Gallegos Sánchez, Jaime
2009-09-01

Resumen en español Se evaluó la tasa de desarrollo de blastocistos bovinos producidos in vitro utilizando medio de cultivo convencional para embriones bovinos y medio de cultivo para producción in vitro (PIV) de embriones humanos. Se obtuvieron ovocitos de ovarios de vacas Cebú sacrificadas en matadero. Los folículos ováricos fueron aspirados y los complejos cumulus-ovocitos (CCO) con al menos dos capas de células del cumulus intactas fueron madurados durante 22 a 24 h. Posteriormente (mas) , los CCO fueron fertilizados con semen bovino descongelado y coincubados por 20 a 24 h. Los presuntos cigotos fueron cultivados por 48 h en medio KSOM o en medio HTF modificado. En los días 3 y 5 post-fertilización in vitro (FIV), los embriones fueron cambiados a gotas nuevas de KSOM o de IVC-Two/IVC-Three. Para ambos cultivos, en el día 3 post-FIV se determinó la tasa de división y entre los 7 a 9 días post-FIV, se evaluó el desarrollo embrionario a etapa de blastocisto. La tasa de maduración in vitro fue 89,7%. La tasa de división fue 82,3% para ovocitos cultivados en KSOM y de 80,1% para ovocitos cultivados en HTF (P>0,05). La tasa de desarrollo de blastocistos fue 31,6% para embriones cultivados en KSOM y 29,5% para embriones cultivados en HTF/IVC-Two/IVC-Three (P>0,05). En conclusión, las tasas de desarrollo in vitro de blastocistos bovinos fueron similares para los embriones cultivados en un medio convencional para PIV de embriones bovinos y para los embriones cultivados en medios utilizados para PIV de embriones humanos, por lo que ambos tipos de medios pueden utilizarse para la PIV de embriones bovinos con resultados aceptables. Resumen en inglés The objective of this study was to evaluate the blastocyst development rate for in vitro produced bovine embryos using either the conventional culture medium for bovine embryos or culture media used for the in vitro production (IVP) of human embryos. Oocytes were obtained from ovaries of slaughtered Zebu cows. Ovarian follicles were aspirated and the cumulus-oocytes complexes (COC) with at least two layers of intact cumulus cells were matured for 22 to 24 h. Following tha (mas) t, COC were fertilized with frozen-thawed bovine semen and coincubated for 20 to 24 h. The presumptive zygotes were cultured for 48 h in KSOM medium or modified HTF medium. On days 3 and 5, post-in vitro fertilization (IVF) embryos were placed into new drops of KSOM or IVC-Two/IVC-Three. For both culture types, the cleavage rate was determined on day 3 post-IVF and the embryo development rate to blastocyst stage was evaluated on days 7 to 9 post-IVF. In vitro maturation rate was 89.7%. Cleavage rate was 82.3% for oocytes cultured in KSOM and 80.1% for oocytes cultured in HTF (P>0.05). Blastocyst development rate was 31.6% for embryos cultured in KSOM and 29.5% for embryos cultured in HTF/IVC-Two/IVC-Three (P>0.05). In conclusion, in vitro blastocyst development rates were similar for both the embryos cultured in the conventional medium for IVP of bovine embryos and the embryos cultured in media used for the IVP of human embryos, thus, both types of media can be used for the IVP of bovine blastocysts with acceptable results.

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Efecto de la ración alimenticia sobre la maduración gonadal y acumulación de grasa de anchoveta peruana (Engraulis ringens Jenyns, 1842) en cautiverio/ Effect of feeding ration on gonad maturation and fat accumulation in Peruvian anchovy (Engraulis ringens Jenyns, 1842) in captivity

Espinoza, Carlos; Vera, Víctor; Perea, Ángel; Buitrón, Betsy; Rojas, Pablo; Sigurd Kjesbu, Olav
2009-01-01

Resumen en español Se evaluó el efecto de la ración alimenticia sobre la tasa de maduración gonadal, el desempeño de las gónadas maduras y la redistribución de la energía consumida en gónada, músculo o grasa corporal en ejemplares de anchoveta peruana Engraulis ringens en condiciones de cautiverio Estos resultados ayudan a comprender los procesos reproductivos ocurridos en el medio natural ante alteraciones de factores ambientales tales como los eventos El Niño y La Niña, de gran (mas) implicancia en el ecosistema y las pesquerías del Pacífico oriental. El tiempo trascurrido desde el estadio inmaduro hasta vitelogénico fue de 45 días bajo condiciones alimenticias energéticamente óptimas y temperatura alrededor de 16,5°C (46,1 cal g-1 pez día-1 ). Las hembras alimentadas con 138,3 cal g-1 pez día-1 alcanzaron la máxima vitelogénesis en 30 días y, aunque el alimento fue excesivo, no incrementaron su masa muscular pero si presentaron mayor acumulación de grasa corporal y presencia de ovocitos más grandes, lo cual indica un incremento en el almacenamiento energético en la hembra y su progenie. Los ovocitos vitelogénicos de los peces alimentados con 46,1 cal g-1 pez día-1 presentaron atresia más rápido que los ovocitos vitelogénicos de peces alimentados con 138,3 cal g-1 pez día-1 . Aunque la cantidad de alimento fue adecuada, las hembras no desovaron durante el experimento. En machos, la disponibilidad de alimento también aceleró la maduración gonadal pero la expulsión de espermatozoides parece haber estado condicionada por la presencia de hembras con ovocitos en máximo estado de vitelogénesis Resumen en inglés We analyzed the effect that feeding rations have on gonad maturation, mature gonad performance, and the redistribution of the energy taken up by the gonads, muscle, and body fat in captive specimens of Peruvian anchovy (Engraulis ringens). These results help us understand the reproductive processes occurring in the natural environment given changes in the environmental factors such as El Niño and La Niña events, which heavily affect the ecosystem and fisheries in the Ea (mas) st Pacific. The specimens required 45 days under optimal feeding conditions (46.1 cal g-1 fish day-1) and at a temperature of 16,5°C to go from an unyoked to a vitellogenic stage. Those females fed 138.3 cal g-1 fish day-1 reached maximum vitellogenesis in 30 days. Despite the excessive amount of food, the specimens' muscle mass did not increase. However, greater body fat accumulation and larger vitellogenic ovocytes were observed, indicating augmented energy storage for the female and her offspring. The yoked oocytes from fish fed 46.1 cal g-1 fish day-1 became atretic earlier than oocytes from fish fed 138.3 cal g-1 fish day-1. Although the food supply was adequate, the females did not spawn during the experiment. In males, food availability also accelerated gonad maturation, but the release of sperm was apparently conditioned by the presence of females with ovocytes in the advanced vitellogenic stage

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Desarrollo de embriones de bovino obtenidos por fecundación in vitro cultivados con células oviductales o medio condicionado y transferidos a hembras receptoras/ Bovine embryo development produced by in vitro fertilization cultured with oviductal cell or conditioned medium and transfer to recipients

RATTO, M; BERLAND, M.; WOLTER, M.; MATAMOROS, R.
1999-01-01

Resumen en español Se comparó el desarrollo in vitro de ovocitos obtenidos de ovarios de vaca de matadero, madurados, fecundados y cultivados in vitro bajo dos sistemas. Los ovocitos fueron cultivados en un medio de maduración a 39 °C, 5 % de CO2 y humedad relativa de 95 % durante 22 horas. Posteriormente, fueron incubados con espermatozoides seleccionados a través de una gradiente discontinua de Percoll. La tasa de maduración nuclear y fecundación fueron de 93,7 % (74/79) y 76 (mas) ,9 % (50/65) respectivamente. Un total de 252 ovocitos fecundados fueron cultivados in vitro. El porcentaje de desarrollo in vitro a las 2 días post-inseminación (embriones de 4-8 células) fue de 62,7 % (64/102) para los cigotos cultivados con células oviductales y de 67 % (100/150) para los cultivados en medio condicionado (P0,05). El porcentaje de desarrollo de mórulas fue de 17,6 % (18/102) para los cigotos cultivados con células oviductales y de 13,3 % (20/150) para los cultivados con medio condicionado (P0,05). Se obtuvo una tasa de desarrollo del 15,7 % (16/102) de blastocistos para aquellos cigotos cultivados con células oviductales. No se obtuvo blastocistos a partir de cigotos cultivados en medio condicionado. Cuatro blastocistos fueron transferidos a dos hembras receptoras. A los 42 y 57 días se encontró la presencia de un feto en cada hembra Resumen en inglés The in vitro development of matured and fertilized bovine oocytes was compared between two culture systems. Oocytes were collected by aspiration of follicles of 3-8 mm in diameter using an 18g needle. After morphological selection the oocytes were incubated at 39 0C, 5 % C02 y 95 % relative humidity, during 22 hours. Afterwards, oocytes were incubated with spermatozoa selected by Percoll gradient system. The rate of nuclear maturation and fertilization was 93,7 % (74/79) (mas) and 76,9 % (50/65), respectively. A total of 252 zygotes were cultured, 102 with oviductal cells and 150 in conditioned medium. The in vitro development on day 2 of culture (4- or 8-cell embryos) was 62,7 % (64/102) for the zygotes co-cultured with oviductal cells and 66,7 % (100/150) for the zygotes cultured in conditioned medium. The development to the morula stage was 17,6 % (18/102) for the zygotes co-cultured with oviductal cells and 13,3 % (20/150) for the zygotes cultured in conditioned medium. A statiscally significant difference was not found in the development of 4, 8-cell embryos or morula. The development of embryos up to the blastocyst stage was 15,7 % (16/102) for the zygotes co-cultured with oviductal cells. Two blastocysts were transferred to the uterine horn ipsilateral to the CL in two recipients by non-surgical embryo transfer. Pregnancy was confirmed by ultrasonography at 42 and 57 days detecting the presence of one conceptus in each animal. This work has shown that in vitro inseminated of bovine oocytes with espermatozoa prepared with modified BO and co-cultured with oviductal cells, can develop to the blastocysts stage, unlike those that were cultured with conditioned medium. Finally, it is important to mention that this is the first communication in Chile of pregnancy after in vitro fertilization of bovine oocytes

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Arquitectura del ovario de la langosta de Juan Fernández, Jasus frontalis/ Ovary architecture of the Juan Fernández spiny rock lobster, Jasus frontalis

Elorza, Alvaro; Dupré, Enrique
2000-01-01

Resumen en español Estudios anteriores han demostrado que la aplicación de hormonas exógenas estimulan el proceso de maduración ovárica en camarones y cangrejos. Sin embargo, previamente es necesario conocer la dinámica del proceso de maduración ovárica y caracterizar los diferentes estados por los cuales atraviesan los ovocitos en su maduración. En este estudio se caracteriza la morfología y estructura fina de las etapas de la maduración del ovario y su dinámica en la langosta e (mas) spinosa Jasus frontalis, utilizando microscopía de luz y electrónica de barrido. El ovario presenta una capa externa de tejido conjuntivo laxo y una gruesa pared muscular que origina tabiques musculares internos y extensiones filiformes. Las primeras atraviesan el ovario de pared a pared y las segundas se extienden hasta los folículos. Tanto en la pared muscular como en las extensiones se observaron numerosos vasos hemolinfáticos. En la región central de cada ovario y sostenido principalmente por tabiques musculares, se ubica un cordón germinativo ramificado, donde se encuentran ovogonias y ovocitos previtelogénicos. Se observó una zona de proliferación de este cordón en una zona cercana a la unión ovario-oviducto. Durante la maduración, los ovocitos se rodean de células foliculares, aumentan de tamaño y se desplazan hacia la periferia, donde forman folículos individuales. A medida que el ovario madura, hay un aumento progresivo de fibras colágenas que rodean a los folículos. La disposición entrecruzada de los haces musculares de la pared ovárica y extensiones, sugiere que éstos tienen una activa participación en el proceso de ovulación, concomitante con la acción de una colagenasa que hidrolisaría las fibras colágenas del folículo. A diferencia de las langostas Homaridae, esta especie ovula y desova casi simultáneamente, sin embargo la estructura ovárica en general es similar a las langostas de los géneros Homarus y Palinurus y camarones Resumen en inglés The injection of exogenous hormones has been proofed to stimulate the ovary maturation process in different species. However, previously it is necessary to know the dynamics of the process of ovary maturation, and to characterize the different stages of it. The present study characterizes the ovary maturation process of the spiny rock lobster Jasus frontalis using light and scanning electron microscopy. The ovary of this species is distinguished by having an external laye (mas) r of loose connective tissue and a strong muscular wall with inner muscular partitions and filamentous extensions that reach the basal lamina of the follicles. It has an unusually well developed system of hemolymphatic vessels within the muscular wall and extensions of it, and produces extensive amounts of collagen fibers throughout the ovary as maturation of oocytes progresses. The inner epithelium of the ovary is modified for various functions in its different regions, serving a germinative function within the ovary, and a secretory function near to, and within the oviduct. Along the core of the ovary a germinative cord is extended, with oogonia and previtelogenic oocytes. From this cord, extensions to the ovary wall arise, containing vitellogenic and mature oocytes. It determines a proliferation zone near to the connection with the oviduct. The organization of a network of criss-crossed muscular fibers of the wall and the extensions, suggests an active participation of the muscular wall in the oocytes extrusion from the ovarian follicles, and a posterior efficient translocation of the oocytes to the oviduct. A concomitant action of a collagenase to hydrolyze the collagen fibres of the mature follicles during the ovulation is suggested. Unlike homarid lobsters, this species ovulates and spawns almost simultaneously, but it has numerous features in common with the Palinuridae family and other crustaceans

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ASPECTOS REPRODUCTIVOS DEL PEJERREY PATAGÓNICO (Odontesthes hatcheri Eigenmann, 1909) EN EL EMBALSE EZEQUIEL RAMOS MEXIA (ARGENTINA)/ REPRODUCTIVE ASPECTS OF THE PATAGONIAN SILVERSIDE (Odontesthes hatcheri Eigenmann, 1909) FROM THE EZEQUIEL RAMOS MEXIA RESERVOIR ( ARGENTINA )

Dománico A, Alejandro; Lauce Freyre, R
2008-09-01

Resumen en español Objetivo. Estudiar el ciclo sexual y la fecundidad del pejerrey patagónico, especie de alto valor comercial y deportivo, en el embalse Ezequiel Ramos Mexía (Neuquén, Río Negro; Argentina). Materiales y métodos. Se colectaron 9307 ejemplares. El ciclo sexual se estudió mediante la observación macroscópica de las gónadas y la fecundidad absoluta se calculó con la técnica volumétrica. Resultados. La talla de primera madurez sexual (Lm 50%) se estimó a través de (mas) l ajuste de una curva logística. El desove tuvo lugar en primavera y principios de verano (septiembre a diciembre). La talla de primera madurez sexual, en las hembras, fue de 244,37 mm (Lt). La fecundidad absoluta varió entre 3.976 ovocitos en una hembra de 296 mm (Lt) y 190 g y 20.879 ovocitos en una hembra de 420 mm (Lt) y 704 g. Conclusiones. No se observó una relación significativa entre la fecundidad relativa y la longitud total de los ejemplares. La proporción de sexos resultó equilibrada en las clases de longitud intermedias, pero mostró una preponderancia de hembras en las mayores. El ciclo ovárico es altamente estacional y coincide con el de poblaciones de la especie en otros ambientes patagónicos. La fecundidad, en cambio, resultó más elevada que la observada en el lago Moreno, situado en la región cordillerana. Resumen en inglés Objective. To study the sexual cycle and fecundity of the Patagonian silverside, a species of high commercial and sport value, from Ezequiel Ramos Mexia reservoir (Neuquen, Rio Negro; Argentina ). Materials and methods. Sampling was conducted between 1982 and 1986, and 9307 specimens were collected. The sexual cycle was studied by macroscopic observation of the gonads and fecundity was assessed using the volumetric method. Results. Length at first maturity (Lm 50%) was es (mas) timated by fitting a logistic curve. Spawning took place in spring and early summer (September to December). Length at first maturity was 244.37 mm (Lt) in females. Absolute fecundity ranged between 3.976 oocytes in a 296 mm (Lt), 190 g female and 20.879 oocytes in a 420 mm (Lt), 704 g female. Conclusions. No significant relation was found between relative fecundity and total length. The sex ratio was approximately 1:1 at intermediate length classes, but females predominated in the larger classes. The ovarian cycle was highly seasonal and coincided with that of populations from other Patagonian environments. Fecundity, on the other hand, was higher than that observed at Moreno Lake, in the Andean region.

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Talla de primera madurez sexual y fecundidad parcial de la merluza común (Merluccius gayi, Guichenot 1848) del área de la pesquería industrial de la zona de Talcahuano, Chile/ Size of first sexual maturity and batch fecundity in the Chilean hake (Merluccius gayi, Guichenot 1848) for the area of the industrial fishery of Talcahuano, Chile

Cerna, José F.; Oyarzún, Ciro
1998-01-01

Resumen en español Se determinó la talla de primera madurez sexual y la fecundidad parcial de la merluza común en el período abril-junio de 1992. Las muestras analizadas fueron recolectadas a bordo de pesqueros industriales de Talcahuano, Chile, en un área que abarcó de los 34°20'S a los 38°00'S. En el cálculo de la talla de primera madurez sexual se utilizaron dos criterios: 1) considerar como hembras maduras aquellas que presentaron ovocitos en estado previtelogénico, vitel (mas) ogénico, maduro, hidratado y/o folículos postovulatorios, y 2) no considerando de los estados anteriores el previtelogénico. El primer criterio dio una talla de primera madurez de 38,9 cm de longitud total (LT) con un r2 = 0,58 y en el segundo fue de 46,3 cm de LT con un r2 = 0,30. La fecundidad parcial (FP) (ovocitos700 mm) se relacionó con la LT y el peso total (PT); en ambos casos la relación se ajustó a una regresión lineal simple, con los siguientes parámetros: FP = - 391.144 + 9.732 * LT (predictiva) FP = - 5.372 + 132 * PT (funcional) A través de la ecuación de regresión FP - PT y la distribución de frecuencia de longitud para el período, se calculó la fecundidad modal. El porcentaje más alto de aporte lo hicieron las hembras del intervalo de 50-54 cm de LT con un 37%. El mismo análisis, considerando la distribución de frecuencia por edad, consignó el porcentaje más alto para la edad 6 con un 31% de aporte Resumen en inglés Length at maturity and batch fecundity of the hake south pacific was estimated for the time period extending from April to June of 1992. The samples were collected on board industrial trawlers operating in the Chilean fishery with base port in Talcahuano, in an area, which extends from 34°20' S to 38° S. For the length at first maturity estimations two criteria were considered: 1) to regard as ripe those females presenting oocytes in previtellogenic, vitellogenic, (mas) ripe and hidrated condition and /or post-ovulatory follicles, and 2) not taking into account the maturity stages preceding the previtellogenic stage. Using criteria 1, length at first maturity was estimated as 38.9 cm of total length (TL) (r2 = 0.58), while with criteria 2 length at first maturity was 46.3 cm of TL. Batch fecundity (BF) (700 muoocytes) was related with both, TL and total weight (TW) through a linear function with the following parameters: FP = - 391.144 + 9.732 * LT (predictiva) FP = - 5.372 + 132 * PT (funcional) The modal fecundity was calculated by means of the Bf - TW functional relation and the length frequency distribution for the period. Females distributed in the 50-54 cm length class with an estimated 37% made the highest reproductive contribution. The same analysis but considering the length at age distribution, estimated age 6 as the main contributor to spawning (31%)

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ESTUDIO COMPARATIVO DE OVARIOS Y CUBIERTAS OVOCITARIAS EN PECES SILURIFORMES DE AGUAS CONTINENTALES DE CHILE/ A COMPARATIVE STUDY OF THE OVARIES AND OOCYTE ENVELOPES OF FRESHWATER SILUROID CATFISHES FROM CHILE

Huaquín, Laura G.; Veliz, Dina; Arratia, Gloria
2002-01-01

Resumen en español El conocimiento de la estructura ovárica permite analizar la capacidad desovante, duración, temporalidad y forma en que se realiza esta función reproductiva. Se describen y analizan aspectos estructurales de las cubiertas ovocitarias de 2 especies de Siluriformes Nematogenys inermis especie considerada en peligro de extinción y de Trichomycterus areolatus, la más abundante y de mayor distribución en Chile continental. Cortes histológicos de 6 mm de ovarios fijados (mas) en Bouin fueron teñidos con HE, Azán, Van Gieson, Alcian Blue y PAS. El estudio histológico muestra la pared del ovario formada por el peritoneo externo, una túnica media y el epitelio ovárico. Desde la túnica se proyectan hacia el interior, láminas de tejido conectivo que van a constituir el estroma ovárico. En los ovarios maduros de T. areolatus se observaron ovocitos en diferentes estados de desarrollo que corresponderían a la categoría de maduración asincrónica, con desoves durante toda una temporada. N. inermis pertenecería a la categoría de sincronismo parcial, con desoves una sóla vez por temporada reproductiva. En las dos especies los ovocitos inmaduros sólo están envueltos por la membrana plasmática; cuando estos maduran es posible distinguir las cubiertas bien desarrolladas, la zona radiata, el epitelio folicular con su membrana basal y la teca externa, constatándose diferencias específicas en las cubiertas ovocitarias Resumen en inglés Reproductive biology including the mode, timing and duration of spawning can be inferred from the ovarian structure of fishes. This study describes and analyses ovarian and oocyte structure of two siluroid species, the one Nematogenys inermis threatened with extinction, the other, Trichomycterus areolatus, the most abundant and widespread in Chilean continental waters. Histological sections (6 mm) of ovaries fixed in Bouins fluid were routinely stained with hematoxilin-eo (mas) sin and some with trichromic (Azan) and Periodic Acid Schiff (PAS). Histologically the ovarian wall consisted of an external serosa, a median tunic and ovarian epithelia. The tunic reaches internally with leaflets of connective tissue comprising the ovaric strome. In mature ovaries of T. areolatus oocytes with several developmental stages were observed. This indicates asynchronous maturation with spawning taking place throughout the reproductive period. N inermis showed partial synchronisation indicating a single spawning activity in the reproductive cycle. In both species the immature oocytes are enveloped with the plasma membrane. Mature ova show well developed envelopes, a radiata zone, folicular epithelium with basal membrane and an external theca, with specific differences shown by the ovocytic envelopes

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Efecto de la administración de diferentes dosis de gonadotrofina coriónica equina sobre la respuesta ovárica y el desarrollo in vitro de embriones de ratón/ Effect of different doses of equine chorionic gonadotropin on ovary response and in vitro mouse embryo development

Teruel, M. T.; Catalano, R. C.; Callejas, S. S.; Cabodevila, J. A.; Gómez, S.
2006-12-01

Resumen en español El objetivo del trabajo fue evaluar el efecto de diferentes dosis de gonadotrofina coriónica equina (eCG) (5, 7,5 o 10 UI) sobre parámetros ováricos y desarrollo in vitro de embriones de hembras ratón Balb C. El peso y diámetro ovárico fueron superiores en animales tratados con 7,5 y 10 UI de eCG que en animales controles (P(mas) mórulas no difirió entre grupos. Los porcentajes de ovocitos y mórulas morfológicamente normales resultaron independientes de la dosis de eCG (73,8 ± 22,7; 63,8 ± 24,8; 70,6 ± 16,1 y 53,3 ± 36,0; 80,7 ± 16,0; 69,2 ± 25,5 para 5, 7,5 o 10 UI de eCG respectivamente). La formación de blastocistos no fue modificada por la dosis de eCG. A las 96 horas de cultivo, el porcentaje de hatching del grupo 7,5 UI fue superior al del grupo estimulado con 10 UI de eCG (82,22 vs 64,39, P Resumen en inglés The aim of this study was to evaluate the effect of different doses of equine gonatotropin hormone (eCG) (5, 7.5 or 10 IU) on the ovary response and in vitro embryo development in Balb C mice. The ovary weight and diameter increased for 7.5 and 10 IU of eCG compared to control group (P(mas) milar between groups. The percentage of oocytes and morulae with normal morphology was not modified for the eCG level (73.8 ± 22.7; 63.8 ± 24.8; 70.6 ± 16.1 and 53.3 ± 36.0; 80.7 ± 16.0; 69.2 ± 25.5 for 5, 7.5 or 10 IU of eCG respectively, P>0.05). In vitro, the differentiation was not modified by the dose level. The hatching rate at 96 h was higher for embryos from 7.5 IU compared to 10 IU (82.22 vs 64.39, P

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Nacimiento de la primera niña en Venezuela con selección de sexo en espermatozoides

Rosemberg, Estrella; Olivieri, María T; Brofenmajer, Sammy
2008-03-01

Resumen en español El objetivo del presente trabajo es realizar la selección de sexo de espermatozoides portadores del cromosoma sexual femenino, para lograr el embarazo y nacimiento de una niña. Paciente de 36 años, III gesta, dos embarazos simples y un gemelar, acude con su esposo a consulta por deseos de tener una hija. Se seleccionaron los espermatozoides portadores del cromosoma X y fueron teñidos con bisbenzimida y seleccionados por citometría de flujo con tecnología Microsort. (mas) La fracción enriquecida fue congelada. Se realizó a la paciente una inducción de la ovulación con agonista de GnRH y FSH. Se realizó la inyección intracitoplasmática de espermatozoides (ICSI) con los espermatozoides sexados a 9 ovocitos maduros. Se transfirieron dos embriones de 8 células. Se confirmó el embarazo y el sexo femenino diagnosticado por US y amniocentesis, con el nacimiento de una niña normal. Esta es la primera vez, que se aplica con éxito la selección de sexo de espermatozoides en Venezuela, lo que abre caminos para lograr tener un hijo del sexo deseado. Resumen en inglés The aim of the study is to perform sperm separation for female gender selection in order to achieve the pregnancy and birth of a baby girl. This procedure was performed for family balancing of a couple with four boys who contracted the aid of EMBRIOS, Hospital de Clínicas Caracas. The X bearing sperm cells were stained with bisbenzimide and sorted by Flow Citometry with MicroSort technology. The enriched fraction was frozen. Ovulation induction was performed with GnRH ag (mas) onist and FSH. Nine mature oocytes were injected by Intracitoplasmic Sperm Injection (ICSI) and 2 embryos were transferred to the uterus. Pregnancy and the female sex fetus were confirmed by ultrasound and amniocentesis with the birth of a normal baby girl. This is the first time that sperm separation for gender selection has been successfully performed in Venezuela opening new frontiers for sex selection.

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Características espacio-temporales del desarrollo embrionario preimplantacional de Myocastor coypus (coipo)/ Spatio-temporal characteristics of the preimplantational embryonic development in Mycastor coypus (coypu)

Felipe, Antonio E.
2006-11-01

Resumen en español El objetivo de este trabajo fue caracterizar el desarrollo preimplantacional del coipo (Myocastor coypus). Se realizó el seguimiento colpocitológico y apareamiento dirigido de 33 hembras. La división en estadíos se efectuó considerando atributos morfológicos. El número medio de embriones por hembra fue de 6.3 ± 2.03 (rango de 1 a 11). En el día 1 poscoito (p.c.), predominaron ovocitos y en el día 2 p.c. las cigotas. El período de segmentación abarcó desde el (mas) día 3 al día 6 p.c. Las mórulas se recolectaron desde el día 6 al día 9 p.c., en tanto que los estadíos de blastocisto se recolectaron en los días 8 y 9 p.c. Por el lavaje de oviductos, se recolectaron embriones en los estadíos de cigota hasta mórulas con menos de 30 células y por lavaje de hemiúteros se obtuvieron desde mórulas hasta blastocistos en crecimiento. El desarrollo preimplantacional abarcó 10 días. Resumen en inglés Myocastor coypus (coypu) is a rodent world-wide used as a skin species. The purpose of the present study was to determine the morphology of the preimplantation embryonic development in Myocastor coypus (coypu). Thirty-three virgin and sexually mature females allotted in 6 family nuclei and 1 male were utilised. The mating program implied the daily colpocytological examination by using standardised routine techniques. Samples for the colpocytological followup were collecte (mas) d from all the animals between 11 and 11:30 hours a.m. The observation of vaginal smears was done directly within 5 minutes of sampling. The controlled mating methodology was used. After the oestrus was established by colpocytology, the female was immediately moved to the male's pen. The embryonic age was determined in days post-coitus (d.p.c.), establishing as day 0 the day when spermatozoa were identified in the vaginal smear. Oocytes and embryos were obtained by flushing from day 0 to 10 post-coitus (p.c.). On day 1 p.c., oocytes predominated whereas on day 2 p.c. zygote were predominant. The cleavage period was from day 3 to day 6 p.c. Morulae were collected from day 6 to 9 p.c., whereas blastocysts were collected in days 8 and 9. From oviduct flushing, embryos in zygote and up to morula with less than 30 cells stage were recovered. Embryos in morula with 30 or more cells and up to blastocyst in growth stage were collected from the flushing of hemiuteri.

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Gestaciones producidas con embriones bovinos clonados por transferencia nuclear/ Pregnancies produced by bovine embryos cloned by nuclear transfer

Martínez Díaz, M A; Gatica, R; Correa, J E; Eyestone, W
2007-01-01

Resumen en español El presente estudio comunica la obtención de gestaciones de embriones clonados por transferencia nuclear de células somáticas en bovinos por primera vez en Chile. Ovocitos bovinos obtenidos de ovarios de matadero fueron madurados in vitro y enucleados por micromanipulación. Células donantes de núcleos fueron obtenidas de la oreja de una vaca adulta, cultivadas por 9-14 días y criopreservadas en nitrógeno líquido. Células somáticas confluentes fueron desagregada (mas) s e insertadas individualmente en el espacio perivitelino de un ovocito enucleado. Cada par ovocito-célula obtenido fue tratado con dos pulsos eléctricos para inducir su fusión y luego los embriones fueron cultivados por 2 horas y tratados con ionomicina y 6-dimetilaminopurina para su activación. Los embriones fueron cultivados en medio sintético oviductual por 8-9 días hasta el estado de blastocisto. Blastocistos fueron transferidos a vaquillas receptoras 7 a 9 días postcelo. Se realizaron 25 transferencias a vaquillas receptoras y se logró la preñez en 5 (20%) de ellas. Dos de éstas abortaron a los 42 días y una tercera a los 120 días. Las dos vaquillas preñadas restantes mantuvieron su gestación (más de 45 días) hasta el momento de escribir esta comunicación Resumen en inglés With the aim of obtaining pregnancies from nuclear transfer embryos reconstituted with somatic cells and enucleated oocytes, bovine oocytes from slaughterhouse were matured in vitro and enucleated by micromanipulation. Nuclear donor cells were obtained from the ear of an adult cow, cultured for 9 to 14 days and cryopreserved in liquid nitrogen. Confluent cells were inserted individually in the perivitelline space of enucleated oocytes and treated with 2 electric pulses to (mas) induce fusion. The reconstituted zygotes were then cultured for 2 hours and treated with ionomycin and 6-dimethylaminopurine for their activation. The embryos were cultured in synthetic oviduct fluid for 8 to 9 days to obtain the blastocyst stage. These blastocysts were transferred to recipient heifers 7 to 9 days after oestrus. The ultrasound pregnancy diagnosis was done about 30 days after recipient oestrus. Five pregnancies were obtained from 25 transfers (20%). Two of them were lost at 42 days and a third at 120 days. This seems to be the first report on pregnancies obtained by cloned embryos in Chile

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EFECTO DEL CO-CULTIVO SOBRE EL DESARROLLO TEMPRANO DE EMBRIONES BOVINOS PRODUCIDOS IN VITRO/ CO-CULTURE EFFECT ON EARLY DEVELOPMENT OF IN VITRO BOVINE EMBRYOS

López, Angela; Olivera, Martha; Ruiz, Tatiana; Tarazona, Ariel
2007-07-01

Resumen en español Objetivo. Estudiar el efecto del cocultivo con células oviductales sobre el porcentaje de clivaje 48 horas post inseminación (hpi) de embriones bovinos en bajas tensiones de oxígeno. Materiales y métodos. Se recolectaron ovarios de matadero para la extracción de los ovocitos que fueron puestos en medio TCM 199 suplementado con hormonas, se fertilizaron con semen criópreservado y se cocultivaron en medio CR1aa con células de oviducto durante 48 horas. Se evaluó el (mas) porcentaje de clivaje total y el porcentaje de clivaje por estadios de 2-4 células y 5-8 células. La viabilidad de las células para el cocultivo se determinó por observación del movimiento ciliar y observación de monocapa. Los tratamientos fueron T1: células de oviducto + oxígeno 20%; T2: células de oviducto + oxígeno 7%; T3 y T4 fueron controles sin células para ambas concentraciones de oxígeno. Resultados. En cuanto al porcentaje de clivaje no hubo diferencia significativa entre los cuatro tratamientos, pero hubo una tendencia a mayor clivaje para los embriones cocultivados con células y 20% oxígeno. Conclusiones. La utilización de altas tasas de oxígeno 20% en los sistemas de cococultivo con células oviductales tienden a mejorar los porcentajes de clivaje a las 48 hpi. Resumen en inglés Objective. To study the effect of co-culture with oviductal cells on the cleavage rate 48 hours post insemination (hpi) of bovine embryos in low oxygen tensions. Materials and methods. Slaughterhouse ovaries were collected for the extraction of oocytes put on TCM 199 medium supplemented with hormones, fertilized with semen cryo-preserved and co-cultured in CR1aa medium with oviductal cells during 48 hours. Total cleavage rate and cleavage per stages of 2-4 cells and 5-8 c (mas) ells were evaluated. The viability of cells for the co-culture was determined by observation of the ciliary movement and monolayer observation. Treatments were T1: oviduct cells + oxygen 20%; T2: oviduct cells + oxygen 7%; T3 and T4 were controls without cells for both oxygen concentrations. Results. For cleavage rate there was not significant difference among the four treatments, but there was a tendency to more cleavage for co-cultured embryos with cells and 20% oxygen. Conclusions. The use of high oxygen rates (20%) in co-culture systems with oviductal cells intend to improve the cleavage percentages to 48 hpi.

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Biología de la gestación en la gata doméstica (Felis catus)/ Biology of pregnancy in the domestic cat (Felis catus)

SANCHEZ, A.E; SILVA, M.E
2002-01-01

Resumen en español La gata es una hembra poliéstrica estacional en la cual el estímulo coital desencadena la liberación de LH y la ovulación, fenómenos que ocurren dentro de las primeras 50 horas postcoito. La fecundación de los ovocitos ocurre en el oviducto dentro de 30 horas post-ovulación. El transporte embrionario en oviducto toma alrededor de 132 horas y al momento de ingresar al útero los embriones se encuentran al estado de mórula compacta. A continuación los blastocistos (mas) migran entre los cuernos uterinos por aproximadamente 80 horas, hasta producirse la implantación 12 a 13 días post-coito. Durante la etapa preimplantacional existe un aumento significativo de la progesterona sérica así como de los receptores luteales a LH. A partir de la segunda mitad de la gestación, decae la producción de progesterona y aumenta la secreción de prolactina, postulándose que esta última sería el principal agente luteotrófico en la gata. También durante la segunda mitad de la gestación aumenta la secreción de relaxina. La producción y rol de la progesterona en la gestación tardía es un tema controversial. Se ha demostrado que la placenta felina posee actividad esteroidogénica y capacidad de sintetizar progesterona, lo cual sugiere que estaría relacionada con el soporte hormonal de la preñez Resumen en inglés The domestic cat can be defined as a seasonal poliestrous female. During mating the physical stimulus produce the release of LH and ovulation, which occur during the first 50 hours post mating. The fertilization of oocytes takes place inside the oviduct during the 30 hours post ovulation. The embryos transport on the oviduct takes about 132 hours and when embryos reach the uterus they are already a compacted morulae. After this, the blastocyst migrates to both uterine hor (mas) ns for a period of 80 hours aproximately until implantation ocurrs 12 to 13 days after mating. During the preimplantation period, there is a significant increase in blood progesterone and also in LH lutheal receptors. From the second half of gestation, the production of progesterone decrease and prolactin secretion increase. Thus it is thought that the later would be the main luteotrophic agent in the cat. Also during the second half of gestation the secretion of relaxin increase. The production and function of progesterone during late gestation is controversial. It has been shown that placenta of cats has a steroidogenic function and that it is also to produce progesterone

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Descripción Histológica de la Cámara Incubatriz de Moina hutchinsoni (Brem, 1937)/ Histological Description of the Brood-chamber of Moina hutchinsoni (Brem, 1937)

Góngora-Landeros, Elizabeth; Uría-Galicia, Esther A; Martínez-Jerónimo, Felipe Fernando; López-Villegas, Edgar Oliver
2010-12-01

Resumen en español Los cladóceros son partenogenéticos por lo que la mayor parte del año, las poblaciones consisten enteramente de hembras que se reproducen asexualmente, en ellas el ovario se comunica por medio de un oviducto, con la cámara incubatriz, la cual se localiza en el margen interno posterior del caparazón, cerca del corazón y antes del intestino. Los huevos provenientes de los oviductos se depositan en la cámara y se incuban hasta terminar el desarrollo embrionario. Se co (mas) nsidera que Moina presenta un desarrollo postembrionario directo, porque los organismos juveniles o neonatos, salen completamente formados e independientes durante la muda. En la reproducción asexual la cámara contiene a las diferentes etapas del desarrollo embrionario llamadas; ovocito, huevo y embrión. En la etapa sexual o gamogenética la cámara contiene un efipio con dos huevos. La cámara incubatriz histológicamente esta conformada por un epitelio plano simple, que descansa sobre una membrana basal evidente, la cual se continúa con el tejido conjuntivo laxo, después del cual se encuentra el caparazón. En el interior de la cámara se identificaron los ovocitos, huevos y algunas etapas del desarrollo embrionario, en cortes semifinos y finos por microscopia óptica y de transmisión, respectivamente Resumen en inglés Cladocerans are parthenogenetic during the greater part of the year. Populations consist entirely of females that reproduce asexually; in these females the ovary communicates through an oviduct with the brood chamber which is located at the rear inner shell border, near the heart and before the intestine. The eggs originating from the oviducts are deposited in the brood chamber and are incubated until the end of embryonic development. Moina is considered post embryonic de (mas) velopment because juvenile or neonate organisms emerge fully formed and independent during moulting. In asexual reproduction the brood chamber contains the various stages of embryonic development denominated, oocyte, egg and embryo. At this stage the sexual gamogenetic contains an ephippium with two eggs. The brood chamber is formed histologically by a simple, plane epithelium that rests on a clear basal membrane continuous with the loose connective tissue, after which the shell can be located. Inside the brood chamber oocytes, eggs and some stages of embryonic development are identified, as well as fine semi optical and transmission microscopy cuts respectively

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Importancia de la respuesta a la inducción de ovulación y la edad en el resultado de las técnicas de reproducción asistida/ Importance of the response to the ovulation induction and the age in the result of the assisted reproduction techniques

Madero, José Ignacio; López, Claudia; León, María Fernanda; Ruiz, Jair; Gutiérrez, Carlos; Guerra, Óscar; Avila, Mábel; Escobar, Magally; Ruiz, Jesús A
2004-12-01

Resumen en español Objetivo: este estudio pretendió analizar la eficacia de las técnicas de reproducción asistida en un grupo de pacientes con una respuesta disminuida a la estimulación ovárica (tres folículos o menos al finalizar la estimulación ovárica) y correlacionarla con la edad. Materiales y métodos: se describen 966 casos de pacientes sometidas a fertilización in vitro o inyección intracitoplasmática de espermatozoides, de las cuales 100 tuvieron una respuesta pobre. Res (mas) ultados: el grupo de las «pobres respondedoras » en un 80% de los casos correspondió a mujeres mayores de 35 años, siendo el 46% mayor de 40. El promedio de embriones transferidos fue 1,59 para el grupo de estudio y 3,47 para el grupo control, con una tasa de implantación de 11,34 y 12,34% respectivamente. La tasa de embarazo fue menor en el grupo de las «pobres respondedoras» (16,39%) comparado con el grupo control (29,62%). Conclusiones: los resultados sugieren que las pacientes con una respuesta pobre a la inducción de ovulación (tres folículos o menos) tienen mayor riesgo de un resultado adverso al someterse a técnicas de reproducción asistida por la poca producción de ovocitos, lo cual limita la posibilidad de seleccionar los mejores embriones para transferir y aumenta la probabilidad de obtener embriones con anomalías cromosómicas. Resumen en inglés Objective: the aim of the present study is to do an analysis about the efficacy of assisted reproduction techniques in a group of women with diminished response to ovary stimulation (three or less follicles at the end of stimulation process) and its correlation with age. Materials: we perform an analysis of 966 cases of patients who undergo to in vitro fertilization or intracytoplasmatic spermatozoids injection, 100 of these cases had poor response. Results: 80% of women (mas) in the group with poor response were 35 years or older, with 46% older than 40 years old. The mean of embryo transfer was 1.59 for the study group and 3.47 for the control group with an implantation rate of 11.34% and 12.34% respectively. The pregnancy rate was less within the poor response women group than (16.39%) than the control group (29.62%). Conclusions: our results suggest that women with poor response to ovulation induction, it means three or less follicles have higher risk of adverse results when they go through assisted reproduction techniques probably because of the presence of low oocytes counts limits the possibility to select the best embryos to transfer and increase the chance of obtaining embryos with abnormal chromosomal constitution.

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Monosacáridos terminales presentes en las cubiertas ovocitarias del camarón de roca Rhynchocinetes typus (Crustacea, Decapoda)/ Terminal monosaccharid on the oocyte envelope of the shrimp rock Rhynchocinetes typus (Crustacea, Decapoda)

Gómez, Daniel; Dupré, Enrique
2002-01-01

Resumen en español Durante la primera interacción gamética, los oligosacáridos de las glicoproteínas presentes en las cubiertas ovocitarias son importantes en el reconocimiento del espermatozoide. Estos oligosacáridos presentan monosacáridos terminales que pueden ser reconocidos mediante lectinas específicas. En otras especies marinas no sólo se ha determinado la presencia de monosacáridos en las cubiertas ovocitarias sino que su número y ubicación varía durante la maduración d (mas) el ovocito. El presente estudio determina la presencia de monosacáridos en las cubiertas ovocitarias y su ubicación durante la maduración del ovocito en el camarón de roca, mediante el uso de las siguientes lectinas específicas conjugadas con FITC: LCA, BS-1, LTA y Con-A, las cuales reconocen los monosacáridos manosa, galactosa, fucosa y glucosa respectivamente. Los resultados mostraron que manosa está presente en cantidades 2-3 veces mayores que los otros azúcares y que manosa, galactosa y glucosa se incrementan desde los 5 días premuda hasta los 2 días postmuda sin ser estadísticamente significativas. La fucosa presentó la menor concentración. Estos resultados sugieren que estos azúcares podrían participar en la primera interacción gamética, sin embargo, la participación en la fecundación debe ser determinada a través de ensayos de inhibición de la fecundación in vitro con espermatozoides previamente tratados con estos azúcares a fin de bloquear los sitios que interactúan con las cubiertas de los ovocitos Resumen en inglés Oligosaccharids of glycoproteins present in oocytes envelope during the first gamete interaction have an important role in the sperm recognizing process. The terminal monosaccharid of oligosaccharids can be recognized by specific lectins. The number and location of monosaccharid on the oocyte coat changes in many marine species according to the oocyte maturation. This study determines the presence of monosaccharids on the oocyte envelope and its location during the oocyte (mas) maturation by the following specific FITC-labeled lectins: LCA, BS-1, LTA and Con-A which recognize the mannose, galactose, fucose and glucose monosaccharid respectively. The results of the lectins experiments showed a high concentration of mannose (2-3 time) on the mature oocyte coat. From 5 days pre-molt to 2 day post-molt he concentration of mannose, galactose and glucose increasing on the oocyte envelope increaded. The fucose monosacharide was 3 time less than mannose. This results suggest that mannose could be participating in the first gametic interaction., however the involvement of these carbohydrates during the fertilization must be determined by in vitro fertilization inhibition experiments

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Evaluación de la unión espermatozoide-ADN exógeno en espermatozoides porcinos eyaculados y epididimarios/ Evaluation of binding sperm-exogenous DNA in ejaculate and epididimary porcine spermatozoa

García-Vázquez, FA; Gutiérrez-Adán, A; Gadea, J
2009-01-01

Resumen en español La transgénesis es una potente herramienta biotecnológica para la generación de animales modificados genéticamente con aplicaciones en diversas áreas como veterinaria, biomedicina y agricultura. En 1989 se describe un nuevo método para la producción de animales transgénicos, la transgénesis mediada por espermatozoides (SMGT). Este método está basado en la habilidad intrínseca de las células espermáticas para unir ADN exógeno y permitir su transferencia al i (mas) nterior de los ovocitos. El objetivo de este estudio fue comparar la capacidad de transferencia de ADN exógeno que presenta el espermatozoide eyaculado libre de plasma seminal vs epididimario, así como la viabilidad y cinética de unión mediante la citometría de flujo. Los resultados que obtuvimos mostraron que los espermatozoides epididimarios presentan una capacidad similar a los eyaculados y centrifugados tanto en el grado de unión al ADN (12,63 ± 1,23% vs 10,94 ± 1,05%, P = 0,31) como en la viabilidad (espermatozoides no viables 14,64 ± 0,94% vs 13,42 ± 0,61%, P = 0,23) a lo largo del tiempo de incubación. La mayor parte de dicha unión tiene lugar en los espermatozoides no viables para ambos tipos de espermatozoides (10,53 ± 1,01% vs 9,89 ± 0,97%, P = 0,98). En relación a la cinética de unión, observamos que para ambos grupos experimentales el mayor porcentaje de unión con el transgén ocurre en los primeros 15 minutos de coincubación, a partir del cual la unión se mantiene más o menos constante hasta los 120 minutos. Con este estudio hemos demostrado que tanto espermatozoides epididimarios como eyaculados son capaces de interactuar con el ADN exógeno, por lo que se podría utilizar la SMGT combinada con técnicas de reproducción asistida como la ICSI para la obtención de embriones y lechones transgénicos Resumen en inglés Transgenic biotechnology is a powerful tool for the generation of genetically modified animals with applications in various fields such as veterinary, agriculture and biomedicine. Sperm mediated gene transfer (SMGT) is an interesting tool for animal transgenesis consisting on the intrinsic ability of the spermatic cells to bind and internalize exogenous DNA and allow their transfer into oocytes after fertilization, to become part of the genome of the new embryo. The semin (mas) al plasma plays an important role acting as a natural barrier and protecting the spermatozoa from exogenous molecules that could compromise their integrity. So, the epididymal spermatozoa are a valuable model to explore the possible effect of seminal plasma components. The objective of this study was to evaluate the interaction among sperm and transgene using Epididymal (EP) vs Ejaculated (EJ) sperm without seminal plasma. Linealized plasmid (GFP) (5.7 kb) labelled with fluorescein was added (1x10(8) spermatozoa/ml + 5µg DNA/ml) and incubated at 16 ºC. DNA binding and viability were measured simultaneously by flow cytometry during 120 minutes of incubation. The results showed that EP spermatozoa present a similar DNA-binding ability (12.63 ± 1.23% vs 10.94 ± 1.05%, P = 0.31) and viability throughout the incubation (14.64 ± 0.94% vs 13.42 ± 0.61%, P = 0.23) than EJ. We only detected a greater percentage of living DNA-bound spermatozoa in EP compared to EJ (2.10 ± 0.33% vs 1.05 ± 0.14%, P

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Inducción al desove, desarrollo embrionario y larval del corocoro rayao Haemulon bonariense Cuvier, 1830 (Pisces: Haemulidae)/ Hatching induction, embryonic and larval development of grunt Haemulon bonariense Cuvier, 1830 (Pisces: Haemulidae)

Cuartas, Alvaro; Rosas, Jesús; Velásquez, Aidé; Cabrera, Tomás
2003-07-01

Resumen en español Durante septiembre y octubre 2001 se realizó la inducción al desove con la hormona gonadotropina coriónica humana (GCH) de 61 ejemplares adultos de Haemulon bonariense (56% hembras y 44% machos), con un rango de longitud total de 240 a 320 mm y peso de 217 a 705 g. Se utilizaron las dosis hormonales de 3,00; 1,00 y 0,50 UI/g/pez para hembras y 1,50; 0,50 y 0,25 UI/g/pez para machos. Los ejemplares hembras produjeron desoves con las tres dosis empleadas, aunque sólo la (mas) de 0,50 UI/g/pez produjo ovocitos viables. Por su parte los machos sólo desovaron con la dosis 0,25 UI/g/pez. En ambos casos el desove se detectó transcurrido un periodo de 10 horas después de inyectados a 27 + 1ºC y salinidad de 38 ± 1 ppm. Los huevos fertilizados son esféricos, flotantes, transparentes, con corion liso, no adhesivos, telolecitos con un diámetro promedio de 0,80 ± 0,05 mm y una gota de aceite de 0,20 ± 0,02 mm de diámetro. Se describió el desarrollo embrionario y larval. La primera división ocurrió a 0 h: 24 min, la blástula a 1 h: 56 min, la gástrula a 5 h: 7 min. La eclosión ocurrió a las 15 h: 19 min después de la fertilización. La longitud total promedio de las larvas recién eclosionadas fue 1,42 + 0,05 mm, con saco vitelino de 0,94 ± 0,10 mm de longitud y 0,13 mm³ de volumen. A las 48 horas midieron 2,52 ± 0,10 mm, el saco vitelino fue reabsorbido completamente y se abrió la boca. A las 78 horas las larvas presentaron una longitud de 2,32 ± 0,14 mm con las lentes ópticas pigmentadas. Se les suministró como alimento la microalga Tetraselmis chuii (40 X 10³ cél. mL-1), la cual fue observada en su tracto digestivo; a partir de las 88 horas ocurrió una mortalidad gradual de las larvas. Se evidenció la efectividad de la inducción al desove con la hormona gonadotropina coriónica humana (GCH) aunque es necesario realizar un estudio sobre los requerimientos nutricionales de las larvas de Haemulon bonariense para establecer las bases de su larvicultura Resumen en inglés During September and October 2001, hatching induction using Human Chorionic Gonadotropin hormone (HCG) was carried out in 61 Haemulon bonariense specimens (56% females and 44% males). The range of their total length was 240 to 320 mm and the range of weight was 217 to 705 g. The hormonal doses used were 3.00; 1.00 and 0.50 UI/g/fish for females and 1.50; 0.50 and 0.25 UI/g/fish for males. Females hatched out with all doses used, but viable oocytes were produced only with (mas) 0.50 UI/g/fish. On the other hand, males specimens hatched out only with 0.25 UI/g/fish. In both cases hatching took place ten hours after injection. The fertilized eggs are spherical, floating, transparent, with a smooth envelope, non adherent, telolecite, with an average diameter of 0.80 ± 0.05 mm and a oil drop with an average diameter of 0.20 ± 0.02 mm. The embryonic and larval development was described, observing the first cleavage at 0h: 24 min, the blastula at 1 h: 56 min, the gastrula at 5 h: 7 min. The hatching out started at 15 h: 19 min after fertilization at 27.25 ± 0.50 °C. The larval total length was 1.42 ± 0.05 mm, the vitelline sac total length was 0.94 ± 0.10 mm and the volume was 0.13 mm³. At 48 hours, the larval total length was 2.52 ± 0.10 mm, the vitelline sac was completely reabsorbed and the mouth opened. At 78 hours the larval total length was 2.32 ± 0.14 mm, and pigmented optical lenses were observed. Tetraselmis chuii microalgae (40 X 10³ cells mL-1) was offered to the larvae and it was observed in their intestinal tract; a gradual larval mortality occurred from 88 hours. The hatching induction with Human Corionic Gonadotropin hormone (HCG) was effective although it is recommended nutritional studies on Haemulon bonariense larvae to establish the base for its larvae culture

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Análisis morfológico del sistema reproductor femenino de Baeacris punctulatus (Orthoptera: Acrididae: Melanoplinae)/ Morphological analysis of the female reproductive system in Baeacris punctulatus (Orthoptera, Acrididae, Melanoplinae)

Michel, Adriana A.; Terán, Héctor R.
2005-12-01

Resumen en español RESUMEN. Baeacris punctulatus (Thunberg) es una especie de importancia económica, de amplia distribución en Sudamérica. En el presente trabajo se realiza un estudio anatomo-histológico de los órganos reproductivos internos, en hembras silvestres y obtenidas en cámara de cría. El estudio permitió determinar particularidades histomorfológicas, en ovarios, glándulas accesorias, oviductos laterales y oviducto medio, relacionadas con la génesis y transferencia de la (mas) s gametas y la ovoposición. Se caracteriza la espermateca por la morfología externa y la histología de sus regiones, se compara con especies emparentadas. El tipo de espermateca observada en B. punctulatus no se incluye en las clasificaciones de esta estructura realizadas para Orthoptera. Se describe la morfología de la cámara genital, se definen por sus características anatomo-histológicas las regiones destinadas a la cópula y ovoposición y a la fecundación del ovocito. Se aportan datos para la comprensión integral del sistema biológico reproductivo y el análisis sistemático de los Acrididae. Resumen en inglés ABSTRACT. Baeacris punctulatus (Thunberg) is an economical important species widely distributed in Southamerica. In the present contribution an anatomical-histological study of the internal reproductive organs from females collected in the wild and also laboratory raid was carried out. The present study allowed us to determine histomorphologic particularities in the ovaries, accessory glands, lateral oviducts and medial oviduct related with gamete genesis and transference (mas) and oviposition. The spermathecal organ is characterized by its external morphology and histology of its regions and compare to closely related species. The type of spermatheca observed in Baeacris punctulatus is not included in the current classification of Orthoptera. The morphology of the genital chamber and regions used in breeding, oviposition and fecundation of oocytes are described and characterized by its histology. New data to contribute to the understanding of reproductive biology and systematic position of the Acrididae is provided.

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mRNA from NCB-20 cells encodes the N-methyl-D-aspartate/phencyclidine receptor: a Xenopus oocyte expression study

Lerma Gómez, Juan; Kushner, Leslie; Spray, David C.; Bennet, Michael V.; Zukin, R. Suzanne
1989-03-01

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Yolk proteolysis and aquaporin-1o play essential roles to regulate fish oocyte hydration during meiosis resumption

Fabra, Mercedes; Raldúa, Demetrio; Bozzo, María G.; Deen, Peter M.T.; Lubzens, Esther; Cerdà, Joan
2006-01-01

Digital.CSIC (Spain)

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Use of flavanol derivatnes for the cryopreservation of living cells.

Torres, Josep Lluís; Álvarez González, Juan Jesús; Lozano Pérez, Carles
2006-03-30

Digital.CSIC (Spain)

41

Ultrastructural studies of oogenesis in Bolinus brandaris (Gastropoda: Muricidae)

Amor, María José; Ramón, Montserrat; Durfort, Mercè
2004-01-01

Digital.CSIC (Spain)

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The zebrafish genome encodes the largest vertebrate repertoire of functional aquaporins with dual paralogy and substrate specificities similar to mammals

Tingaud-Sequeira, Angèle; Calusinska, Magdalena; Finn, Roderick N.; Chauvigné, François; Lozano, Juan José; Cerdà, Joan
2010-02-11

Digital.CSIC (Spain)

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The Drosophila spn-D gene encodes a RAD51C-like protein that is required exclusively during meiosis

Abdu, Uri; González-Reyes, Acaimo; Ghabrial, Amin; Schüpbach, Trudi
2003-09-01

Digital.CSIC (Spain)

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Structural and functional divergence of two fish aquaporin-1 water channels following teleost-specific gene duplication

Tingaud-Sequeira, Angèle; Chauvigné, François; Fabra, Mercedes; Lozano, Juanjo; Raldúa, Demetrio; Cerdà, Joan

Additional files: Alignment of the amino acid sequences of vertebrate AQP1 and teleost Aqp1a and Aqp1b.--Water permeability of X. laevis oocytes expressing sea bream wild-type (WT) or mutant Aqp1b.--Degenerate and gene- or cDNA-specific oligonucleotide primers used for cloning and RT-PCR analysis.--...

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Structural and functional divergence of two fish aquaporin-1 water channels following teleost-specific gene duplication

Tingaud-Sequeira, Angèle; Chauvigné, François; Fabra, Mercedes; Lozano, Juan José; Raldúa, Demetrio; Cerdà, Joan
2008-09-23

Digital.CSIC (Spain)

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Structural and functional divergence of two fish aquaporin-1 water channels following teleost-specific gene duplication

Tingaud-Sequeira, Angèle; Chauvigné, François; Fabra, Mercedes; Lozano, Juan José; Raldúa, Demetrio; Cerdà, Joan
2008-09-23

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Structural and functional divergence of two fish aquaporin-1 water channels following teleost-specific gene duplication

Tingaud-Sequeira, Angèle; Chauvigné, François; Fabra, Mercedes; Lozano, Juan José; Raldúa, Demetrio; Cerdà, Joan
2008-09-23

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Spawning pattern and reproductive strategy of female pouting Trisopterus luscus (Gadidae) on the Galician shelf of north-western Spain

Alonso-Fernández, Alexandre; Domínguez-Petit, Rosario; Bao, Miguel; Rivas, Cathaysa; Saborido-Rey, Fran
2008-12-03

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Sobre el origen ontogénico del ser humano: La solución científica/ On the ontogenetic origin of human beings: The scientific solution

Valenzuela, Carlos Y
2007-01-01

Resumen en inglés Every living being is the result of a genome-environment interaction. Neither human oocytes nor spermatozoids have human functional genomes, but the zygote that they constitute may have a human functional genome and other functional genomes such as those of the hydatidiform mole, polyploids, and non-human living beings. When the zygotic human functional genome is integrated and activated, the biotic humanity is acquired. This may occur when the paternal chromatin deconden (mas) ses; the nuclear environment and envelope of both nuclei are changed to constitute pronuclei; the replacement of sperm protamines by histones; genome imprinting modifications; centriole duplication; and more importantly, the fourfold genome replication. Other propositions on the origin of humans are: embryo implantation [6-7 days post fertilization, (dpf)]; the appearance of the antero-posterior axis; the limit for monozygote twining (13dpf) and the appearance of the neural tissue (16dpf). They are refuted because some mammals do not implant; embryo axes are present in the zygote; some animals regenerate complete individuals from each part in which they are divided; plants do not have neural system; a human whose brain was destroyed by cancer continues to be a human. Alternative propositions coming from philosophies, theologies, perceptive knowledge, beliefs and intuitions and based on conceptualizations like person, anima, soul, organization, socio-cultural relations are ideologically or religiously biased and based on irreducible beliefs such as faith. They lead to disagreement rather than to agreement

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Sex hormone-binding globulin expression in sea bass (Dicentrarchus labrax L.) throughout development and the reproductive season

Miguel-Queralt, Solange; Blázquez, Mercedes; Piferrer, Francesc; Hammond, Geoffrey L.
2007-07-19

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Role of oocyte position in establishment of anterior-posterior polarity in Drosophila

González-Reyes, Acaimo; St Johnston, Daniel

Final full-text version of the paper available at: http://dx.doi.org/10.1126/science.7939717 | The polarized microtubule cytoskeleton of the Drosophila oocyte directs the localization of the maternal determinants which establish the anterior-posterior (AP) axis of the embryo. Because the formation o...

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Reproductive strategy and oocyte recruitment process of European hake (Merluccius merluccius) in Galician shelf waters

Domínguez-Petit, Rosario; Alonso-Fernández, Alexandre; Saborido-Rey, Fran

2 pages, 3 figures.-- Published in: Comptes-Rendus / Proceedings "8th International Symposium on Reproductive Physiology of Fish (ISRPF)", Saint-Malo, France, 3-8 juin 2007, Équipe "Reproduction des Poissons" de l’INRA (éd). | Larger hake females have both higher batch fecundity and numbers of devel...

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Reproduction patterns of four Antarctic octocorals in the Weddell Sea: an inter-specific, shape, and latitudinal comparison

Orejas, Covadonga; Gili, Josep María; López González, P. J.; Hasemann, C.; Arntz, Wolf E.
2007-01-01

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REPRODUCCIÓN Y HÁBITOS ALIMENTICIOS DEL NICURO, PIMELODUS BLOCHII (VALENCIENNES, 1840) (PISCES: PIMELODIDAE), EN LA CIÉNAGA DE CACHIMBERO, RÍO MAGDALENA, COLOMBIA/ REPRODUCTION AND FEEDING OF NICURO, PIMELODUS BLOCHII (VALENCIENNES, 1840) (PISCES: PIMELODIDAE), IN CACHIMBERO FLOODPLAIN LAKE, MAGDALENA RIVER BASIN, COLOMBIA

López-Casas, Silvia; Jiménez-Segura, Luz F.
2007-12-01

Resumen en español Analizamos aspectos tróficos y reproductivos de Pimelodus blochii en el sistema cenagoso de Cachimbero (cuenca media del río Magdalena, Colombia), en tres periodos del ciclo pluviométrico del año 2003. Colectamos 384 individuos con una biomasa total de 31,4 kg y un intervalo de longitud estándar (LS) de 52,4 a 253,0 mm. No observamos diferencias entre las capturas en los diferentes periodos del ciclo pluviométrico, ni entre estaciones de muestreo. El coeficiente alo (mas) métrico (b)y el factor de condición no mostraron diferencias entre periodos de muestreo ni entre sexos. La población estuvo representada en su mayoría por individuos en estados inmaduros. En octubre de 2003, observamos un pico de madurez gonadal para las hembras. El número de oocitos de las hembras fue igual entre los tres periodos pluviométricos. La proporción machos:hembras mostró una mayor cantidad de hembras que de machos. La relación gonadosomática y hepatosomática fluctuó estacionalmente para las hembras, mientras que en los machos se mantuvo constante. En los contenidos estomacales, encontramos restos de animales acuáticos y terrestres pertenecientes a 16 taxas, lo que sugiere que la especie tiene un nicho trófico amplio y se comporta como omnívoro oportunista. Resumen en inglés We analyzed trophic and reproductive aspects of Pimelodus blochii in the Cachimbero floodplain lake (Magdalena river basin, Colombia) in three raining periods of year 2003. We collected 384 individuals with a total biomass of 31.4 kg and a standard length (LS) interval between 52.4 and 253.0 mm. Differences were not observed neither on the catches among three periods of the pluviometric cycle, nor among sampling stations. The allometric coefficient (b) and the condition f (mas) actor did not show differences among pluviometric periods or sexes. Population was mainly represented by immature individuals. On October 2003, we observed a gonadic matureness peak for females. Relative number of oocytes was equal between in stomach contents, we pluviometric raining periods. Sex ratio showed a greater number of females than males. Females gonadosomatic and hepatosomatic relationships showed a seasonal fluctuation. Found aquatic and terrestrial animal fragments of at least 16 taxa, it suggests that this species has a wide trophic niche and an a opportunistic omnivorous feeding behaviour.

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Procedures to Estimate Fecundity of Marine Fish Species in Relation to their Reproductive Strategy

Murua, Hilario; Kraus, Gerd; Saborido-Rey, Fran; Witthames, Peter R.; Thorsen, Anders; Junquera, Susana
2003-12-01

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Primera gestación lograda a partir de óvulos humanos vitrificados/ First pregnancy achieved from human vitrified oocytes

Lucena, Elkin; Bernal, Diana Patricia; Lucena, Carolina; Rojas, Alejandro; Mojica, Sandra; Saa, Ángela María; Suárez, Zulma; Morán, Abby
2004-09-01

Resumen en español La vitrificación de óvulos humanos tiene múltiples aplicaciones y demostró ser altamente efectiva en el manejo de una paciente con síndrome de hiperestimulación ovárica que se encontraba en tratamiento para infertilidad secundaria. Objetivo: mostrar la eficiencia de la vitrificación de oocitos aplicada a óvulos en metafase II (MII) de una mujer con síndrome de hiperestimulación ovárica. Procedimiento: se vitrificaron óvulos MII de una paciente con síndrome d (mas) e hiperestimulación ovárica, para lo cual se utilizó la técnica cryotop y como agentes crioprotectores etilenglicol, dimetilsulfóxido (DMSO) y sacarosa. Dos meses después, una vez restablecida a la normalidad la condición clínica de la paciente, se desvitrificaron los óvulos, se realizó la técnica de inyección intracitoplasmática de espermatozoides (ICSI) y 24 horas más tarde se evaluó fertilización, los cigotos obtenidos se cultivaron in vitro por 72 horas hasta el momento de la transferencia embrionaria intrauterina. Resultados: la técnica de vitrificación con cryotop demostró ser una herramienta efectiva para preservar óvulos en lugar de embriones, además de disminuir los problemas éticos, morales, legales y religiosos que ésta conlleva. Conclusiones: la vitrificación por cryotop proporciona altas tasas de supervivencia, fertilización, desarrollo embrionario y embarazo; así mismo, ofrece una nueva alternativa para el manejo del síndrome de hiperestimulación ovárica. Resumen en inglés Among its multiple applications, vitrification of human oocytes has demonstrated to be highly effective in the handling of a patient with OHSS, who was under treatment for secondary infertility. Objective: to demonstrate the efficiency of oocyte vitrification applied to metaphase II oocytes (MII), of women presenting OHSS. Procedure: MII oocytes from a patient with OHSS were vitrified, using the cryotop technique with ethylenglycol, dimethylsulfoxide, and sucrose as cryop (mas) rotectants agents. Two months after, once the clinical stage of the patient was normalized, the oocytes were thawed and underwent ICSI; 24 hours later, fertilization was evaluated and zygotes were maintained under in vitro culture conditions during 72 hours, time of intrauterine embryo transfer. Results: vitrification technique with cryotop demonstrated to be an effective tool for preservation of oocytes instead of freezing embryos due to all the ethical, moral, legal and religious points of view concerning preservation. Conclusions: vitrification with cryotop provides high rates of survival, fertilization, embryo development and ongoing normal pregnancies, offering a new alternative for handling OHSS.

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Polarization of both major body axes in Drosophila by gurken-torpedo signalling

González-Reyes, Acaimo; Elliott, Heather; St Johnston, Daniel

Final full-text version of this paper available at: http://dx.doi.org/10.1038/375654a0 | Anterior–posterior polarity in Drosophila arises from the movement of the oocyte to the posterior of the egg chamber, and the subsequent acquisition of posterior fate by the adjacent somatic follicle cells. We d...

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70

Polarization of both major body axes in Drosophila by gurken-torpedo signalling

González-Reyes, Acaimo; Elliott, Heather; St Johnston, Daniel
1995-06-22

Digital.CSIC (Spain)

72
73

Novel method of generating non-human transgenic animals, and transgenic animals thus obtained

Ventura Oliveira, Pedro Nuno; Gutiérrez-Adán, Alfonso; Motoliu José, Lluís
2005-10-20

Digital.CSIC (Spain)

74

New insights into molecular pathways associated with flatfish ovarian development and atresia revealed by transcriptional analysis

Tingaud-Sequeira, Angèle; Chauvigné, François; Lozano, Juan José; Agulleiro, María J.; Asensio, Esther; Cerdà, Joan
2009-09-15

Digital.CSIC (Spain)

75

New insights into molecular pathways associated with flatfish ovarian development and atresia revealed by transcriptional analysis

Tingaud-Sequeira, Angèle; Chauvigné, François; Lozano, Juan José; Agulleiro Gozalbo, María Josep; Asensio, Esther; Cerdà, Joan
2009-09-15

Digital.CSIC (Spain)

76

N-methyl-D-aspartate activates different channels than do kainate and quisqualate

Lerma Gómez, Juan; Kushner, Leslie; Zukin, R. Suzanne; Bennet, Michael V.
1989-03-01

Digital.CSIC (Spain)

78

Molecular Characterization and Expression Pattern of Zona Pellucida Proteins in Gilthead Seabream (Sparus aurata)

Modig, Carina; Modesto, Teresa; Canário, Adelino V. M.; Cerdà, Joan; von Hofsten, Jonas; Olsson, Per-Erik
2006-01-01

Digital.CSIC (Spain)

79

Modulation of inhibitory glycine receptors by phosphorylation by protein kinase C and cAMP-dependent protein kinase

Vaello, María Luisa; Ruiz-Gómez, Ana; Lerma Gómez, Juan; Mayor Menéndez, Federico
1994-01-01

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80

MONITOREO DE LOS NIVELES DE TESTOSTERONA Y ESTRADIOL EN EL PLASMA SANGUÍNEO DE HEMBRAS DE PARGO PALMERO LUTJANUS ANALIS MANTENIDAS BAJO DOS TERMOPERIODOS DE ACONDICIONAMIENTO DIFERENTES/ Monitoring of testosterone and oestradiol levels in blood plasma of mutton snapper Lutjanus analis females maintained under two different thermoperiod conditioning cycles

Castaño, Fabio; Botero, Julián
2005-12-01

Resumen en español Dos grupos de pargos palmeros Lutjanus analis adultos capturados en el medio natural, cada uno compuesto por tres hembras y cuatro machos, fueron sometidos durante ocho meses a condiciones de temperatura y fotoperiodo controladas en el laboratorio para estimular su maduración sexual, que estaba en estado de latencia por efectos del confinamiento. El primer grupo se mantuvo bajo un ciclo artificial con manipulación de la temperatura y el segundo bajo un ciclo control don (mas) de este parámetro se dejó en condiciones naturales. Para el análisis de los niveles plasmáticos de testosterona (T) y estradiól (E2) se tomaron muestras bimensuales de sangre a cada una de las hembras, recolectándose biopsias ováricas simultáneamente para registrar el diámetro medio de los oocitos. Al cabo de seis meses se hizo evidente un incremento en el diámetro medio de los oocitos en las tres hembras del ciclo artificial, el cual coincidió y se correlacionó con el aumento de los niveles de T y E2 (r = 0.62 y 0.82, respectivamente). En las hembras del ciclo control no se observó crecimiento de los oocitos. En los dos ciclos se observó que los niveles de T y E2 se relacionaron con el fotoperiodo (r = 0.84 y r = 0.61), mientras que con la temperatura esta relación fue mucho menor, o incluso no significante (r = 0.40 y r = 0.20). Se presentaron diferencias significativas (P Resumen en inglés Two groups of adult Mutton snapper fish Lutjanus analis captured in the wild, each one of three females and four males, were kept during eight months under controlled temperature and photoperiod conditions in the lab in order to stimulate their sexual maturation which was in a state of latency because of the effects of confinement. The first group was maintained under an artificial cycle with temperature manipulation and the second under a control cycle, in which this par (mas) ameter was left at natural conditions. Every two months blood samples from all females were taken for the analysis of plasma testosterone (T) and oestradiol (E2) levels, taking ovarian biopsies simultaneously to register the mean diameter of the oocytes. After six months, a significative increase in the mean diameter of the oocytes of the three females of the artificial cycle was observed, with coincidence and statistic relationship with the increase in the T and E2 (r = 0.62 y 0.82 respectively). No oocyte growth was observed in the females under the control cycle. In both, artificial and control cycles, T and E2 levels showed a close relationship with photoperiod (r = 0.84 y r = 0.61) while temperature showed a lower or non significant relationship (r = 0.40 y r = 0.20). Statistical differences (P

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82

Interaction of Mg2+ and phencyclidine in use-dependent block of NMDA channels

Lerma Gómez, Juan; Zukin, R. Suzanne; Bennet, Michael V.
1991-02-25

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83

Improving the generation of genomic-type transgenic mice by ICSI

Moreira, Pedro N.; Pozueta, Julio; Pérez-Crespo, Miriam; Valdivieso Amate, Fernando; Gutiérrez-Adán, Alfonso; Montoliu, Lluís
2007-02-16

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84

Illex coindetii

Sánchez, Pilar; González, Ángel F.; Jereb, Patrizia; Laptikhovsky, V. V.; Mangold, K. M.; Nigmatullin, Ch. M.; Ragonese, S.
1998-01-01

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86

Histochemical characterisation of oocytes of the swordfish Xiphias gladius

Ortiz, Juan B.; Sarasquete, M.ª Carmen; Porcelloni, Serena; Fossi, Cristina
2008-01-01

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94

Functional Genomics and Proteomic Approaches for the Study of Gamete Formation and Viability in Farmed Finfish

Cerdà, Joan; Bobe, Julien; Babin, Patrick J.; Admon, Arie; Lubzens, Esther
2008-01-01

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95

Function of Partially Duplicated Human α7 Nicotinic Receptor Subunit CHRFAM7A Gene POTENTIAL IMPLICATIONS FOR THE CHOLINERGIC ANTI-INFLAMMATORY RESPONSE

Lucas-Cerrillo, Ana M.; Maldifassi, M. Constanza; Arnalich, Francisco; Renart, Jaime; Atienza, Gema; Serantes, Rocío; Cruces, Jesús; Sánchez-Pacheco, Aurora; Andrés-Mateos, Eva; Montiel, Carmen
2010-11-03

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96

First Report of the Foliar Nematode Aphelenchoides ritzemabosi infecting chrysanthemum in Iran

Mohammad Deimi, Abbas; Barouti, S.; Palomares Rius, Juan E.; Castillo, Pablo
2007-05-01

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97

Female description of the hydrothermal vent cephalopod Vulcanoctopus hydrothermalis

González, Ángel F.; Guerra, Ángel; Pascual, Santiago; Segonzac, Michel
2008-03-01

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99

Fecundity estimation of Atlantic cod (Gadus morhua) and haddock (Melanogrammus aeglefinus) of Georges Bank: Application of the autodiametric method

Alonso-Fernández, Alexandre; Vallejo, Ann Carole; Saborido-Rey, Fran; Murua, Hilario; Trippe, Edward A.
2009-05-04

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100

FERTILIDAD Y FECUNDIDAD DE MONTASTRAEA ANNULARIS EN UN ARRECIFE DEGRADADO/ FERTILITY AND FECUNDITY OF MONTASTREA ANNULARIS IN A DEGRADED REEF

Alvarado Ch., Elvira; Acosta, Alberto
2009-12-01

Resumen en español Este estudio determinó el ciclo gametogénico, fecundidad y fertilidad de Montastraea annularis en el arrecife de isla Grande, archipiélago de Nuestra Señora del Rosario, uno de los arrecifes más degradados del Caribe colombiano. La población de estudio se caracteriza por poseer colonias medianas (alrededor de 3379 cm²), con mortalidad parcial en 27 % de los ramets y total en el 10 % de los mismos. Las colonias presentan un alto número de ramets pequeños producto (mas) de la fisión (76 % menores a 50 cm²). Basado en las características de la estructura de tallas de la población mencionada, el objetivo de esta investigación fue explicar el bajo reclutamiento registrado en la zona, a través de la respuesta reproductiva de una población con dominancia de ramets pequeños. Entre septiembre de 2003 y septiembre de 2004, se tomaron muestras de tejido y se elaboraron placas histológicas para detallar el desarrollo gamético de oocitos y espermarios y cuantificar la fecundidad. Adicionalmente, durante septiembre de 2003 y 2004, se recolectaron huevos liberados in situ. Los resultados indicaron que la oogénesis ocurre entre mayo y septiembre y la espermatogénesis entre julio y septiembre. La fertilidad fue baja (35 % y 40 %, in situ e histología, respectivamente), así como la fecundidad (20 y 11 huevos/cm²/año-1, in situ e histología, respectivamente). De un 33 % de ramets que mostraron presencia de espermarios, sólo un 3 % de los mesenterios presentaron gametos masculinos y dentro de éstos, la presencia de los paquetes espermáticos también fue escasa (4 espermarios/gónada). Aunque la talla de los ramets no mostró una relación significativa con la fertilidad o la fecundidad, sí se observó que ramets entre 50 y 100 cm² eran más fecundos que los de tallas muy pequeñas ( 200 cm²). El pobre esfuerzo reproductivo observado puede, en parte, explicar, el bajo número de colonias pequeñas que exhibe la población estudiada, lo cual es esperado tanto para sitios degradados, como para poblaciones con alta tasa de fisión. Los resultados sugieren que la viabilidad de la población de M. annularis en isla Grande, está determinada por el bajo número de ramets fértiles y la baja fecundidad, pero especialmente por la escasa producción de gametos masculinos. Resumen en inglés This study determined the gametogenic cycle, fecundity and fertility of Montastraea annularis, in the Isla Grande coral reef, Archipelago of Nuestra Señora del Rosario, one of the most degraded reefs in the Colombian Caribbean. The surveyed population is currently characterized by medium size colonies (ca. 3379 cm²), with 27 % of the ramets showing partial mortality and 10 % with total mortality. Colonies present high number of small sized ramets formed by fission (76 % (mas) , smaller than 50 cm²). Based on the above mentioned population structure characteristics, the aim of this research was to explain the low recruitment rate reported for this reef through the reproductive response of a population dominated by small ramets. Between September 2003-2004, tissue fragments were collected and histological slides were made to detail the development of oocytes and spermaries and to estimate fecundity. Additionally during September of 2003 and 2004, in situ spawned eggs were collected to quantify fecundity. Results showed that oogenesis occurred between May and September and the spermatogenesis between July and September. Fertility was low (35 % and 40 %, in situ and histology, respectively) as well as fecundity (20 and 11 eggs/cm²/year-1, in situ and histology, respectively). Of the 33 % of ramets that showed spermaries, only 3 % of the mesenteries presented male gametes and in these, the presence of sperm cysts was also scarce (4 espermaries/gonad). Although the size of the ramets did not show a statistical relationship with fertility or fecundity, ramets between 50 and 100 cm² were found more fecund than smaller (200 cm²). The poor reproductive effort found can, in part, explain the low number of small colonies in the studied population, which in turn is expected in degraded sites and in populations with high fission rates. The results suggest that the viability of the population of M. annularis at Isla Grande is defined by the low number of fertile ramets and the low fecundity, but especially by low production of male gametes.

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101

FECUNDIDAD EN ARGOPECTEN CIRCULARIS (SOWERBY, 1835) (BIVALVIA: PECTINIDAE) DE BAHÍA CONCEPCIÓN, BAJA CALIFORNIA SUR, MÉXICO

Villalejo-Fuerte, Marcial
1995-12-01

Resumen en inglés Argopecten circularis (Sowerby, 1835) fecunddity was estimated during spawnings of February-March 1989 and March-May 1990 in Bahía Concepción, Baja California sur, México. In general, the number of oocytes released during the spawning of Argopecten circularis were potentially related to shell height. The calculated average oocyte wet weight during the maturity period was 8.9033x10ˆ-8 g. Spawning ocurred in individuals 44 to 77 mm in height. The highest fecundity o (mas) ccurred in bivalves 58 to 77 mm in height. Mean fecundity obtained for all heigts by regression analysis during spawning in February-march 1989 was 12, 102, 243 oocytes. In April-May of the same year, there were 17, 917, 006 oocytes, and during March-May 1990, 16, 938, 117 oocytes.

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102

Evolutionary structural and functional conservation of an ortholog of the GLUT2 glucose transporter gene (SLC2A2) in zebrafish

Castillo, Juan; Crespo, Diego; Capilla, Encarnación; Díaz, Mònica; Chauvigné, François; Cerdà, Joan; Planas, Josep V.
2009-09-23

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103

Evidence for the Involvement of Aquaporins in Sperm Motility Activation of the Teleost Gilthead Sea Bream (Sparus aurata)

Zilli, Loredana; Schiavone, Roberta; Chauvigné, François; Cerdà, Joan; Storelli, Carlo; Vilella, Sebastiano
2009-05-01

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104

Estimaciones de atresia mayor en la temporada reproductiva 1999-2000 en la sardina monterrey (Sardinops sagax) en Bahía Magdalena, México/ Major atresia assessment in the Pacific sardine (Sardinops sagax) in the 1999-2000 reproductive season, off Bahia Magdalena, Mexico

Torres-Villegas, J. René; Ochoa-Báez, Rosa Isabel; Perezgómez, Liduvina; García-Melgar, Gustavo
2007-12-01

Resumen en español Durante la temporada de pesca 1999-2000 en Bahía Magdalena, México, se hizo un seguimiento de la reproducción de la sardina monterrey por medio de los índices gonadosomático (IGS) y gonádico relativo (IGR). En diciembre se registraron solo sardinas juveniles y los adultos se encontraron hasta enero. Se observó una variación atípica con respecto a años anteriores; un incremento del peso de la gónada en enero, declinación en febrero y una recuperación nuevament (mas) e en marzo. El análisis histológico de los ovarios mostró que la actividad gametogénica se inició en enero y terminó en marzo. Desde el inicio de la temporada reproductiva en enero de 2000 se registró una alta incidencia de atresia en oocitos en estadio de alveolo cortical (9%). En marzo, cuando normalmente se presenta el máximo de puesta se registró atresia también en oocitos en vitelogénesis avanzada y atresia mayor con una frecuencia de 90%. Lo anterior indicó una interrupción de la temporada reproductiva evidenciándose por una frecuencia mínima de hembras reproductivamente activas. Se discute la influencia del ambiente en la reabsorción ovárica y en la interrupción de la reproducción de la sardina monterrey Resumen en inglés The gonadosomatic index (GSI) and the gonadic relative index (GRI) were used for monthly monitoring of Pacific sardine maturity in Bahia Magdalena, Mexico, for the reproductive season of 1999-2000. These indices showed an increase in gonadic growth in January and March, and a decline in February. Histological analysis of ovaries showed a short spawning season. Juvenile fish were recorded in December. Adults appeared until January. In February, high incidence of atresia in (mas) oocytes at the cortical alveolli stage was detected. Later, atresia occurred in advanced vitellogenic oocytes. The active female frequency ranged from 11 to 55% in the spawning season of 1999-2000. Atresia on isolated oocyte frequency was 9% in January 2000, at the beginning of the spawning season. The incidence of major atresia started in February, and reached 54% in March, indicating the end of the spawning season. These results were compared with time series from 1980-1990 on Pacific sardine reproduction in Bahia Magdalena. Evidence indicates that the Pacific sardine spawning season was reduced to two months, and that the active female frequency was low. Environmental influence on ovary reabsorption and skip reproduction season is discussed

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105

Endosymbiotic Yeast Maternally Transmitted in a Marine Sponge

Maldonado, Manuel; Cortadellas, Nuria; Trillas, Mª Isabel; Rützler, Klaus
2005-10-01

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Embriones híbridos como fuente de células troncales embrionarias/ Hybrid embryos as a source of embrionic stem cells

Beca I, Juan Pablo
2007-11-01

Resumen en inglés The HFEA (Human Fertilisations & Embryology Authority) recently accepted to perform research in hybrid embryos generated by transferring human somatic cell nucleus to cow enucleated oocytes, named cytoplasmatic hybrids. The aim is to obtain a source of embryonic stem cells without the use of human oocytes. The arguments for the approval are to avoid the risk of obtaining human oocytes and that these embryos will not be transferred to a female's womb for its development. T (mas) hose who oppose the technique argue that it is a manipulation of the beginning of life and a disrespect to the dignity of human life because of the destruction of embryos. Nevertheless, the real nature of this new entity has not been established. Biologically it is an embryo with 99% of human genome and animal's cytoplasm, not generated from human gametes, it is not a new genome and it will be used only to cultivate stem cells. It does not seem possible to define its nature beyond any doubts. If it were considered as a human embryo it should be respected and protected as every human being. Once more, scientific progress opens new ethical and legal questions that we cannot answer in a definitive way. Researchers are exploring new roads to obtain pluripotential stem cells which should favor the development of innovative therapies. The main objection is the unavoidable destruction of human embryos, although in this case its origin and nature are not clear

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El Ensayo Cometa: una técnica para evaluar genotoxicidad en el ADN de oocitos bovinos/ The Comet Assay: a technic to evaluate genotoxicity in DNA bovine oocytes

Rodrigo A, Urrego; Pareja, Andrés; Vásquez, Neil A; Márquez, María E
2005-09-01

Resumen en español La electroforesis en gel de células individuales o Ensayo Cometa, es frecuentemente usada para medir el daño en el ADN de las células. En la mayoría de estudios, los linfocitos de sangre periférica son utilizados como modelo celular. Sin embargo, en los últimos años, la aplicación de esta técnica se ha extendido a las células germinales, con el fin de evaluar la integridad del ADN espermático, las condiciones de estrés oxidativo en oocitos porcinos y en embrio (mas) nes bovinos; además, la muerte celular en embriones de ratón. Para la realización de la electroforesis de células individuales en un sistema como los oocitos bovinos se hace imprescindible superar dos grandes limitantes en la estructura complejo-cúmulo-oocito (CCOS): una, la degradación de las glicoproteínas de la zona pelúcida y dos, eliminar el nivel de compactación del genoma haploide bovino en metafase II. Dichas limitantes no permiten una migración adecuada del ADN dentro del gel de agarosa. En este estudio se demuestra que el uso de una solución de lisis con proteinasa K durante 3 h y 10 min de corrido electroforético, permite obtener cometas cuantificables de oocitos bovinos madurados in vitro que pueden ser utilizados en estudios genotóxicos en este sistema celular. Resumen en inglés The single cell gel electrophoresis or the comet assay is used to measure the DNA damage of individual cells, for most studies the lymphocytes from peripheral blood are used as cellular model. However, during the last years, the application of this technique has been extended to the germinal cells with the purpose of evaluating the integrity of the spermatic DNA, oxidative stress conditions in boar oocytes and bovine embryos besides cellular death in mouse embryos. Applyi (mas) ng the comet assay to a system such as the bovine oocytes it becomes indispensable to overcome two big structural barriers in the cumulus-oocyte-complex (COC): first, the degradation of the glycoproteins in the zona pellucida and second, the elimination of the flatten level of the haploid metaphase II bovine oocyte genome. These obstacles do not allow an appropriate migration of the DNA through the agarose gel. In this study it is demonstrated that the use of a lysis solution with proteinase K during 3 h and 10 min in electrophoretic running allows to obtain quantifiable comets of bovine oocytes matured in vitro, which can be used in genotoxic studies.

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108

Egalitarian and the case of the missing link

Pearson, John; González-Reyes, Acaimo

Final full-text version of the paper available at: http://dx.doi.org/10.1038/ncb0504-381 | The specificity of cytoskeleton-mediated cargo transport is critical for cell polarization. The Egalitarian protein — required for the localization of mRNAs and proteins to the oocyte of the Drosophila melanog...

DRIVER (Spanish)

109

Egalitarian and the case of the missing link

Pearson, John; González-Reyes, Acaimo
2004-05-01

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Efficient Generation of Transgenic Mice with Intact Yeast Artificial Chromosomes by Intracytoplasmic Sperm Injection

Moreira, Pedro N.; Giraldo, Patricia; Cozar, Patricia; Pozueta, Julio; Jiménez, Adela; Montoliu, Lluís; Gutiérrez-Adán, Alfonso
2004-07-30

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Efecto del inhibidor de fosfodiesterasa tipo 4 -rolipram, sobre la maduración in vitro de oocitos bovinos/ Effect of phosphodiesterase type 4-inhibitor rolipram on in vitro maturatrion of bovine oocytes/ Efeito do inibidor de fosfodiesterasa tipo 4 -rolipram, sobre a maturação in vitro de oocitos bovinos

López, Yuddy S; Mejía, Ana M; Escobar, Elder E; Agudelo Jaramillo, Bernardo; Vásquez Araque, Neil A; Echavarría, Hernán
2008-03-01

Resumen en portugués Durante o processo de maturação in vitro de oocitos, as gonadotrofinas FSH e LH induzem a produção de AMPc. O AMPc tem duplo efeito, pois os altos níveis de AMPc intraoocitario mantém o bloqueio meiótico, enquanto que nas células da granulosa induzem a maturação do oocito. Os níveis de AMPc são regulados pela hidrólise mediada das fosfodiesterasas (PDE), as quais apresentam expressão específica no folículo, o oocito expressa a PDE 3, enquanto que as célul (mas) as da granulosa PDE 4. Com o objetivo de avaliar o efeito do rolipram, um inibidor específico de PDE 4, sobre a percentagem de maturação nuclear in vitro (MNIV) de oocitos bovinos, 629 complexos cúmulo oocito (CCO) foram cultivados a 38.5 °C/5% CO2/24 h, em meio TCM-199 com a adição de pFSH e hrLH, o rolipram. Os grupos experimentais foram: adição de gonadotrofinas, rolipram (25, 50 ó 75 µM), rolipram 50 µM + gonadotrofinas, ou controle sem estímulo. Os oocitos foram tingidos com DAPI e avaliados sob fluorescência para determinar a percentagem de maturação nuclear pela expulsão do primeiro corpo polar. O rolipram 50µM estimulou a maturação nuclear de oocitos bovinos de maneira similar a obtida com as gonadotrofinas (76.83 vs 79.46%, p>0.05), porém em maior medida que a observada com rolipram 25 y 75 µM (31.25, y 28.61%, respectivamente). Os CCOs cultivados na presença de rolipram 50 µM+Gonadotrofinas maturaram em menor proporção (63.74%) quando comparado com gonadotrofinas (p Resumen en español Durante el proceso de maduración in vitro de oocitos, las gonadotropinas FSH y LH inducen la producción de AMPc. El AMPc tiene efecto dual, donde los altos niveles de AMPc intraoocitario mantienen su bloqueo meiótico, mientras que en las células de la granulosa inducen la maduración del oocito. Los niveles de AMPc son regulados por hidrólisis mediada por fosfodiesterasas (PDE), las cuales presentan expresión específica en el folículo, el oocito expresa la PDE 3, (mas) mientras que las células de la granulosa PDE 4. Con el objetivo de evaluar el efecto del rolipram, un inhibidor específico de PDE 4, sobre el porcentaje de maduración nuclear in vitro (MNIV) de oocitos bovinos, 629 complejos cúmulo oocito (CCO) fueron cultivados a 38.5 °C/5% CO2/24 h, en medio TCM-199 con la adición de pFSH y hrLH, o rolipram. Los grupos experimentales fueron: adición de gonadotropinas, rolipram (25, 50 ó 75 µM), rolipram 50 µM + gonadotropinas, o control sin estímulo. Los oocitos fueron teñidos con DAPI y evaluados bajo fluorescencia para determinar el porcentaje de maduración nuclear por la expulsión del primer cuerpo polar. El rolipram 50µM estimuló la maduración nuclear de oocitos bovinos de una manera similar a la obtenida con las gonadotropinas (76.83 vs 79.46%, p>0.05), pero en mayor medida que la observada con rolipram 25 y 75 µM (31.25, y 28.61%, respectivamente). Los CCOs cultivados en presencia de rolipram 50 µM+Gonadotropinas maduraron en menor proporción (63.74%) comparada con gonadotropinas (p Resumen en inglés Gonadotropic follicle stimulating hormone (FSH) and lutenizing hormone (LH) induce intracellular cyclic AMP (cAMP) production during the in vitro maturation (IVM) of bovine oocytes. Cyclic AMP exerts a dual effect, where high intraoocyte cAMP levels are responsible for oocyte meiotic blockage, while high cAMP levels into the granulose cells induce oocyte maturation. Intracellular cAMP levels are regulated by phosphodiesterases (PDE)-mediated hydrolysis, enzymes having a s (mas) pecific follicle expression pattern. Oocyte expresses typo 3 PDE (PDE 3), while granulose cells expresses type 4 PDE (PDE 4). With the aim to test the effect of the specific PDE 4 inhibitor rolliprom on percentage in vitro nuclear maturation (IVNM) of bovine oocytes, 629 cumulus-oocyte complexes (COC) were cultured at 38.5 °C/CO2 5%/24 h on TCM-199 medium with pFSH and hrLH with or without rolipram. Experimental groups were: gonadotrophins alone, gonadotropins + rolipram (25, 50, or 75 µM), rolipram 50 µM + gonadotrophins, and control (media without stimulus). In order to determinate the nuclear maturation percentage by the first polar body expulsion, oocytes were dyed with DAPI and evaluated by fluorescence. Rolipram 50 µM stimulated bovine oocyte nuclear maturation in a similar way to gonadotrophins stimulus (76.83 vs. 79.46%, p>0.05) did, but in a higher way than rolipram 25 µM (31.25%) or 75 µM (28.61%). The COC cultured with rolipram 50 µM+gonadotrophins maturated in a lower proportion (63.74%) than did with gonadotropins (p

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Efecto de la heparina y de la concentración espermática sobre el porcentaje de fertilización de oocitos bovinos in vitro/ Heparin and spermatic concentration effect over the percentage of in vitro fertilization of bovine oocites

Salgado, Roger D; Rugeles, Clara C; Alvarez, Jaime
2005-08-01

Resumen en español El objetivo de este estudio fue evaluar el efecto de diferentes concentraciones de heparina y de semen en el medio de fertilización sobre el porcentaje de oocitos bovinos fertilizados in vitro. En el experimento uno, los oocitos obtenidos de ovarios de matadero fueron madurados in vitro y distribuidos al azar en seis tratamientos para fertilización in vitro, de acuerdo a las concentraciones de heparina (2, 4, 8, 10, 16, 20 µg/ml). En el experimento dos, una vez selecci (mas) onada la concentración de heparina en experimento 1, se evaluaron tres dosis de espermatozoides en el medio de fertilización (0.5x10(6) espermatozoides/ml, 1x10(6)espermatozoides/ml y 2x10(6)espermatozoides/ml). En cada experimento se utilizó un diseño completamente al azar y los datos fueron analizados por ANAVA. La concentración de heparina tuvo efecto (p0.05). Los resultados indican que la tasa de fertilización guarda relación directa con la dosis de heparina y la concentración espermática. Resumen en inglés The objective of this study was to evaluate the effect of different heparin concentrations and of the semen in the percentage of bovine oocytes in fertilization medium. In the experiment 1, the obtained oocytes of slaughterhouse ovaries were matured in vitro and distributed at random in six treatments for fertilization in vitro, according to the heparin concentration (2, 4, 8, 10, 16, 20 µg/ ml). In the experiment 2, once selected the heparin concentration from experimen (mas) t 1, three sperms doses were evaluated in fertilization medium (0.5x10(6) espermatozoas/ml, 1x0(6) espermatozoas/ml and 2x0(6) espermatozoas/ml). In each experiment totally randomized design was used and data were analyzed by ANAVA. The concentration of heparin (p0.05). The results indicate that the fertilization rate keeps direct relationship with the heparine dose and the spermatic concentration.

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Efecto de la heparina en la capacidad fecundante in vitro de espermatozoides caprinos/ Effect of heparin on the in vitro fertilizing ability of goat spermatozoa as assessed by heterologous solubilized zona pellucidae

COX, J.F.; FERNANDEZ, P.; SARAVIA, F.; BRIONES, M.; SANTA MARIA, A.
1997-01-01

Resumen en español El presente estudio está destinado a establecer la etapa del proceso de fecundación en que la heparina ejerce el efecto estimulatorio de la fecundación en caprinos. Oocitos bovinos fueron madurados en medio 199 y alternativamente utilizados para la producción de zonas pelúcidas solubilizadas o para estudios de fecundación. Las zonas pelúcidas, colectadas eliminando mecánicamente al oocito, fueron solubilizadas en ácido acético, liofilizadas y almacenadas a -20� (mas) � C, hasta su reconstitución. Los espermatozoides fueron colectados con vagina artificial, lavados y capacitados por incubación en medio Talp con suero y heparina. En el Experimento 1, los espermatozoides fueron suspendidos en Talp más heparina, Talp más heparina y zonas pelúcidas o en condiciones no capacitantes y fueron incubados por 90 min a 39° C y 5% de CO2 en aire. En el Experimento 2, los espermatozoides agrupados como en el experimento anterior fueron coincubados por 18 h con oocitos. En el Experimento 3, los espermatozoides fueron suspendidos en plasma seminal y Talp con y sin heparina e incubados por 90 min a los 0, 45 y 90 min, muestras de suspensión fueron expuestas a zonas solubilizadas e incubadas por otros 30 min. En los experimentos 1 y 3, el daño acrosomal fue evaluado usando la tinción PI/PSA y en el Experimento 2, la fecundación fue verificada por la presencia de pronúcleos y cola espermática en el oocito. Los resultados en el Experimento 1 muestran que a los 90 min de incubación el daño acrosomal aumenta en los espermios tratados con zonas en relación a los controles (P< 0.001). En el Experimento 2. sólo hubo fecundación en los grupos espermáticos incubados en condiciones capacitantes. En el Experimento 3, los resultados muestran que el daño acrosomal aumenta ya a los 45 min de incubación (P<0.01) Resumen en inglés Heparin has been shown to improve the fertilizing ability of goat spermatozoa in a dose-dependent manner. The present study assessed the mechanism involved in the stimulatory effect by using solubilized zona pellucidae from bovines. Bovine cumulus-oocyte complexes were matured in 199 plus serum and insuline. Thereafter, oocytes were denuded from granulosa cells and used either to obtain zona pellucidae or for fertilization. Free zonae were collected by mechanical means, (mas) solubilized in heated acetic acid, liofilized and stored at -20° C until their reconstitution in Talp plus serum. In Experiment 1, spermatozoa were suspended either in non-capacitated conditions or in Talp plus heparin and Talp plus heparin and zonae, and incubated for 90 min at 39° C in 5% CO2 in air. In Experiment 2, spermatozoa were grouped as before and co-incubated with matured oocytes for 18 hr to assess their fertilizing ability. In Experiment 3, spermatozoa were suspended either in seminal plasma, Talp plus heparin or Talp without heparin for 90 min. At 0, 45 and 90 min, semen samples were exposed to solubilized zonae and were further incubated for 30 min. Acrosome disruption in Experiment 1 and 3 was assessed by staining spermatozoa with PI/PSA. Fertilization in Experiment 2 was verified by the presence of pronuclei and sperm tail. The results in Experiment 1 showed that the acrosome disruption rate increased above the control groups after 90 min of incubation only in zonae-treated spermatozoa (P<0.001). In Experiment 2, fertilization was seen only when spermatozoa were previously incubated in conditions known to capacitate them. In Experiment 3, the results showed that the acrosome disruption rate first increased when spermatozoa were exposed to zonae after 45 min of incubation (P<0.01). The cumulative results suggest that heparin improves fertilization by stimulating sperm capacitation. The effect is expressed after 45 min of sperm incubation

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Efecto de gonadotropinas sobre la maduración y desarrollo embrionario de oocitos bovinos cultivados in vitro/ Effect of gonadotropins on the maturation and embryo development of bovine oocytes cultured in vitro

Salgado O, Roger; Vergara G, Oscar; Ramirez P, Leonardo
2010-01-01

Resumen en español Objetivo. Evaluar el efecto de las hormonas FSH y LH sobre las tasas de maduración, fertilización y desarrollo embrionario in vitro. Materiales y métodos. Se utilizaron 1309 oocitos de ovarios de matadero, donde el medio base fue TCM-199 suplementado (FSH y LH) y se conformaron cuatro tratamientos al azar: T1: sin hormonas, T2: 50 µg/ml FSH + 150 µg/ml LH; T3: 100 µg/ml FSH + 100 µg/ml LH y T4: 150 µg/ml FSH + 50 µg/ml LH. Resultados. No se presentó efecto (p>0. (mas) 05) de los tratamientos suplementados con FSH y LH sobre la tasa de maduración; por el contrario, T1 fue diferente (p0.05) cuando el medio de maduración fue suplementado con FSH y LH. Conclusiones. La adición de LH en mayor proporción con respecto a la FSH en el medio de maduración induce una mayor tasa de maduración, fecundación y desarrollo embrionario in vitro a partir de oocitos bovinos recuperados postmortem. Resumen en inglés Objective. To evaluate the effect of FSH and LH on the maturation rates, fertilization and embryo development in vitro. Materials and methods. 1309 oocytes were used slaughterhouse ovaries, where the basal medium was TCM-199 plus (FSH and LH) and four treatments were randomized: T1: no hormones, T2: 50 g / ml FSH + 150 g / ml LH; T3: 100 ng / ml FSH + 100 ng / ml LH and T4: 150 g / ml FSH + 50 g / ml LH. Results. No effect was found (p>0.05) from treatments supplemented w (mas) ith FSH and LH on the rate of maturation, by contrast, T1 was different (p 0.05) when maturation medium was supplemented with FSH and LH. Conclusions. The addition of LH to a greater extent with respect to FSH in maturation medium induces a higher rate of maturation, fertilization and embryo development in vitro from bovine oocytes recovered postmortem.

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EVALUACIÓN DE TRES METODOLOGÍAS DE RECUPERACIÓN DE EMBRIONES EN CANINOS UTILIZANDO UN MODELO POSTMORTEM/ EVALUATION OF THREE TECHNIQUES TO RECOVER CANINE EMBRYOS USING A POST-MORTEM MODEL

Jiménez E, Claudia; Bustos B, Omar
2008-09-01

Resumen en español Objetivo. Evaluar tres técnicas de recuperación de embriones, utilizando como modelos de simulación oocitos desnudos introducidos en úteros recuperados post-mortem. Materiales y métodos. Se introdujeron 10 oocitos en el extremo ovárico de cada cuerno. El tratamiento 1 (T1) consistió en realizar una punción a nivel del extremo ovárico de cada cuerno para introducir el medio de lavado. Se incidió la base de cada cuerno para ubicar un catéter TOMCAT 8-Fr, recupera (mas) ndo el medio en una caja de petri. En el tratamiento 2 (T2) se realizó una punción en el extremo ovárico de cada cuerno pero la recuperación de los oocitos se realizó con un catéter de 56 cm de longitud que se pasó transcervicalmente hasta la base de cada cuerno. En el tratamiento 3 (T3) se utilizó el mismo tipo de catéter por vía transcervical y el lavado y la recuperación se realizó a través del mismo catéter. Resultados. El número de estructuras recuperadas fue de 7.3 ± 2.4 (73%) para el T1; 8.5 ± 1.9 (85%) para el T2 y de 5.8±2.2 (58%) para el T3. La tasa de recuperación fue similar para T1 y T2, pero significativamente mayores que para el T3 (p>0.01). Conclusiones. Las técnicas que se proponen son menos invasivas y tienen resultados comparables a otros estudios donde realizan histerectomía y laparotomía. Con este tipo de técnicas, se disminuye el trauma generado por incisiones quirúrgicas y la posible generación de adherencias. Adicionalmente permitirían realizar recuperaciones de embriones no quirúrgicas en caninos. Resumen en inglés Objective. To compare three embryo recovery techniques, using simulation models in which denuded oocytes were introduced in recently recovered uteri. Materials and methods. Ten denuded oocytes were deposited in the ovarian tip of each uterine horn using a Tomcat catheter. Technique one (T1) consisted of a puncture made close to the ovarian tip of the uterine horn with a 20 G needle connected to a 20 ml syringe loaded with 20 ml of PBS (flush medium). In the base of each h (mas) orn, a 1 cm incision was made to place the Tomcat catheter from which the fluid was recovered into a Petri dish. For technique two (T2) a puncture in the ovarian tip was made as in T1 but the oocytes were recovered with a catheter that was passed through the cervix and the fluid recovered in a Petri dish. In technique three (T3) a catheter was inserted through the cervix and was used for pumping the collection media in and out. Results. The number of structures recovered per horn was 7.3 ± 2.4 (73%) for T1; 8.5 ± 1.9 (85%) for T2 and 5.8±2.2 (58%) for T3. The first two techniques were not significantly different (p>0.01) and showed better recovery rates than the technique used in T3. Conclusions. Canine embryos could be retrieved using a less invasive technique by passing an 8-french catheter through the cervix thereby reducing the damage to the uterus and the possible generation of adhesions.

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EFECTO DE LA SUPLEMENTACIÓN CON ALANINA Y GLICINA SOBRE LOS CLIVAJES INICIALES DE EMBRIONES BOVINOS PRODUCIDOS IN VITRO/ EFFECT OF SUPPLEMENTATION WITH ALANINE AND GLICYNE ON THE INITIAL CLEAVAGES OF BOVINE EMBRYOS PRODUCED IN VITRO

Arias L, Catalina; Ruiz, Tatiana; Olivera A, Martha; Tarazona, Ariel
2007-07-01

Resumen en español Objetivo. Determinar el efecto de la suplementación con alanina y glicina en el medio de cultivo sobre el porcentaje de clivaje de embriones bovinos, bajo condiciones de alta (20%) y baja (7%) tensión de oxígeno. Materiales y métodos. Los embriones fueron producidos a partir de oocitos madurados in vitro en M-199 suplementado con hormonas e inseminados con semen criopreservado; los cigotos fueron cultivados en medio CR1- AA. Al momento del cultivo se adicionaron alani (mas) na y glicina (5 mM y 10mM final respectivamente). Se usaron 4 tratamientos (T1: aminoácidos y baja tensión de oxígeno; T2: aminoácidos y alta tensión de oxígeno; T3: no aminoácidos y baja tensión de oxígeno; T4: no aminoácidos y alta tensión de oxígeno). El clivaje fue evaluado a las 48 hpi (horas post inseminación) evaluándose el número de embriones clivados sobre el total de embriones cultivados y el estadío de desarrollo (no clivados, 2, 4, 5-8 células). Se usó el programa estadístico STATISTICA (versión 5.0). Resultados. El porcentaje de embriones de 5-8 células en el tratamiento 1 respecto a los otros 3 tratamientos fue mayor (p= 0.007). Conclusiones. Los aminoácidos alanina y glicina son fundamentales para los clivajes iniciales y en bajas tensiones de oxígeno se aumenta la proporción de embriones competentes hasta las 48hpi. Resumen en inglés Objective. To determine the effect of supplementation with alanine and glicyne in vitro culture systems on the cleavage rate of bovine embryos under conditions of high (20%) and lower (7%) oxygen tension. Materials and methods. The embryos were produced from oocytes matured in vitro in M-199 supplemented with hormones and inseminated with cryopreservated semen; the zygotes were cultivated in CR1-AA medium. At culture moment alanine and glicyne were added (5 mm and 10mM fi (mas) nal respectively). Four (4) treatments were used (T1: amino acids and low oxygen tension; T2: amino acids and high oxygen tension; T3: non amino acids and low oxygen tension; T4: non amino acids and high oxygen tension). The cleavage was evaluated to 48 hpi (hours post insemination) being evaluated the number of embryos cleavaged on the total of culture embryos and the development stage (non cleavaged, 2, 4, 5-8 cells). The statistical program STATISTICA version 5.0 was used. Results. Embryos rate of 5-8 cells in the treatment one regarding the other 3 ones were higher (p = 0.007). Conclusions. The amino acids alanine, glicyne and in low oxygen tensions are fundamental for the initial cleavages because the proportion of competent embryos increases up to 48 hpi.

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Dual signaling by mGluR5a results in bi-directional modulation of N-type Ca2+ channels

Sánchez-Prieto, José; Paternain, Ana V.; Lerma Gómez, Juan
2004-10-22

Digital.CSIC (Spain)

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Dissociation of protamine-DNA complexes by Xenopus nucleoplasmin and minichromosome assembly in vitro

Ruíz Lara, Simón A.; Cornudella, Lluís; Rodríguez Campos, Antonio
1996-08-15

Digital.CSIC (Spain)

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Derivation of Major Yolk Proteins from Parental Vitellogenins and Alternative Processing During Oocyte Maturation in Fundulus heteroclitus

LaFleur, Gary J.; Raldúa, Demetrio; Fabra, Mercedes; Carnevali, Oliana; Denslow, Nancy; Wallace, Robin A.; Cerdà, Joan
2005-01-01

Digital.CSIC (Spain)

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DE LA MADURACIÓN in vitro DE OOCITOS BOVINOS CON SUERO FETAL BOVINO SOBRE SU ACTIVIDAD MITOCONDRIAL POST-DESVITRIFICACIÓN/ THE EFFECT OF in vitro MATURATION OF BOVINE OOCITES WITH FETAL BOVINE SERUM ON THEIR MITOCHONDRIAL ACTIVITY FOLLOWING DEVITRIFICATION

Restrepo B, Giovanni; Vásquez, Neil
2009-04-01

Resumen en español Objetivo. Evaluar el efecto de la maduración in vitro (MIV) con suero fetal bovino (SFB) sobre la actividad mitocondrial (potencial de membrana) de oocitos bovinos desvitrificados. Materiales y métodos. Se recolectaron oocitos bovinos a partir de ovarios post-mortem, para su posterior MIV en medio Sintetic Oviductal Fluid Amino Acids (SOFaa) en tratamientos con y sin SFB. Posteriormente, fueron destinados para su criopreservación mediante vitrificación en Open Pulled (mas) Straw (OPS). Los oocitos fueron desvitrificados y evaluados para su potencial de membrana mitocondrial mediante el uso del colorante fluorescente JC-1. Los datos fueron analizados mediante la prueba t de Student y un análisis de varianza. Resultados. Los resultados evidenciaron una diferencia estadística (p Resumen en inglés Objective. To evaluate the effect of in vitro maturation (IVM) with fetal calf serum (FCS) on the mitochondrial activity (membrane potential) of devitrified bovine oocytes. Materials and methods. Bovine oocytes were collected from post-mortem ovaries and matured in vitro in SOFaa medium with and without FCS. The oocytes were cryopreserved by OPS vitrification. Devitrified oocytes were evaluated for their mitochondrial membrane potential by JC-1 dye staining. Statistical e (mas) valuations were done using Student´s t-test and analysis of variance. Results. There was a statistically significant difference (p

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Criterios de nuliparidad y de paridad en Lutzomyia townsendi (Ortiz, 1959) del occidente de Venezuela

Márquez, Margarita; Scorza, José V.
1982-09-01

Resumen en español Lutzomyia townsendi (Ortiz, 1959) es un flebótomo antropofílico con concordancia gonadotrófica, en las zonas endémicas de Leishmania brasiliensis y L. garnhami en el occidente de Venezuela. Mediante el estudio de hembras colonizadas en el laboratorio, nuliparas o paridas, de hembras silvestres alimentadas sobre voluntarios y de hembras silvestres mantenidas con sacarosa, se establecen criterios de nuliparidad con un 56,6% de confianza. En cambio, signos de paridad apa (mas) recen en un 82% de las hembras consideradas como tales. La digestión de un ingesta sanguínea inicia un ciclo gonadotrófico con oogénesis abortiva y acumulación de fosfolípidos en las células epiteliales del estómago y en las glândulas accesorias. La ovoposición completa produce un calix ovárico grueso e irregular con restos de oocitos abortivos y acumulación de pigmentos. Estos caracteres son suficientes para precisar un criterio de paridad. La presencia de fosfolípidos en el estómago y en las glândulas accesorias de hembras nulíparas es una indicación de ingesta incompleta de sangre. Resumen en inglés Lutzomyia townsendi (Ortiz, 1959) is the main anthropophilic sandfly in endemic places for Leishmania braziliensis and L. garnhami in Western Venezuela. The study of laboratory bred females, nulliparous or parous and, wild females fed on man as well as wild females maintained with sucrose, allowed to establish a criterion of nulliparity with 56.6% of confidence for those captured in field conditions. In the same wild females, parity can be assessed with 81.5% of confidenc (mas) e. After blood digestion of full-engorged females a gonotrophic cycle is completed. Abortive oogenesis and accumulation of phospholipids in midgut epitelial cells and into accessory glands are observed. The ovoposition produces a thick and irregular ovaric calix with rests of abortive oocytes and accumulation of a melanin-like black pigment. All these changes are enough for identification of a parous fly. The presence of phospholipids in the stomach and accessory glands of a nulliparous sandfly is indicative of digestion of an incomplete blood meal.

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Comparación del Desarrollo Embrionario de Piaractus brachypomus (Serrasalmidae) y Pseudoplatystoma sp. (Pimelodidae)/ Comparison of the Embryonic Development of Piaractus brachypomus (Serrasalmidae) and Pseudoplatystoma sp. (Pimelodidae)

Díaz Olarte, John; Marciales-Caro, Lili J; Cristancho Vásquez, Freddy; Cruz-Casallas, Pablo E
2010-12-01

Resumen en español Pseudoplatystoma sp y Piaractus brachypomus son dos especies de peces dulceacuícolas endémicas de América del Sur de alto interés comercial como peces de cultivo. El objetivo de este trabajo fue comparar el desarrollo embrionario hasta la eclosión en estas dos especies. Para observar el desarrollo embrionario se incubaron oocitos fertilizados, obtenidos por inducción hormonal, en incubadoras de flujo ascendente tipo Woynarovich bajo condiciones controladas de calida (mas) d de agua. Los clivajes, la fase de blástula, gástrula hasta el cierre del blastoporo y eclosión en Pseudoplatystoma sp se observaron entre las 0:30 - 18:00 HPF, mientras que en P. brachypomus fue más rápida, observándose desde las 0:30 hasta las 14:00 HPF, siendo más homogénea que en Pseudoplatystoma sp Resumen en inglés Pseudoplatystoma sp. and Piaractus brachypomus are two species of freshwater fishes endemic to South America as a high commercial crop species. The aim of this study was to compare the embryonic development of these two species until they hatch. To observe embryonic development fertilized oocytes were incubated obtained by hormonal induction in upwelling incubators Woynarovich type under controlled conditions of water quality. The cleavages were observed for Pseudoplatyst (mas) oma sp. from 0:30 hours post fertilization (HPF) until 2:00 pm (HPF), whereas in P. brachypomus these occurred between 0:30 - 1:30 HPF. The stage of blastula, gastrula until the closure of blastopore Pseudoplatystoma sp. was observed in sp between 2:00 to 12:00 P. HPF while in P. brachypomus between 2:00 to 8:00. The hatching in Pseudoplatystoma sp was observed between 14:00 to 18:00 HPF, whereas P. brachypomus was faster, was observed from 12:00 until 14:00 HPF HPF, and was more homogeneous than Pseudoplatystoma sp

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Coexpression of N-methyl-D-aspartate and phencyclidine receptors in Xenopus oocytes injected with rat brain mRNA

Kushner, Leslie; Lerma Gómez, Juan; Zukin, R. Suzanne; Bennet, Michael V.
1988-05-01

Digital.CSIC (Spain)

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Ciclo reproductivo y talla media de madurez del congrio colorado, Genypterus chilensis (Guichenot, 1881) en el litoral de Talcahuano, Chile/ Reproductive cycle and maturity mean size of the red cusk eel, Genypterus chilensis (Guichenot, 1881) in the coast off Talcahuano, Chile

Chong, Javier; González, Paola
2009-04-01

Resumen en inglés ABSTRACT A study on the reproduction of the red cusk eel Genypterus chilensis was conducted in the fishing area of Talcahuano, Chile. The mean sexual maturity and size at first maturity were determined in a sample of 490 specimens. The microscopic analysis showed the simultaneous presence of oocytes in different maturity stages, in mature individuals. This allows the characterization of the red cusk eel as a partial or multiple spawner. The frequencies of maturity stages (mas) in females showed a spawning period between July and October, and a secondary peak in March. The size at first maturity of the red cusk eel was 72.4 cm

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Centrosome migration into the Drosophila oocyte is independent of BicD and egl, and of the organisation of the microtubule cytoskeleton

Bolívar, Jorge; Huynh, Jean-René; López-Schier, Hernán; González, Cayetano; St Johnston, Daniel; González-Reyes, Acaimo
2001-04-19

Digital.CSIC (Spain)

135
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An improved and simplified terminology for reproductive classification in fishes

Brown-Peterson, Nancy; Lowerre-Barbieri, Sue K.; Macewicz, Beverly J.; Saborido-Rey, Fran; Tomkiewicz, Jonna; Wyanski, David
2007-07-11

Digital.CSIC (Spain)

139

Adaptive plasticity of killifish (Fundulus heteroclitus) embryos: dehydration stimulated

Tingaud-Sequeira, Angèle; Zapater, Cinta; Chauvigné, François; Otero, David; Cerdà, Joan
2009-04-01

Digital.CSIC (Spain)

141

Activation and blockade by choline of bovine α7 and α3β4 nicotinic receptors expressed in oocytes

González-Rubio, Juana María; Rojo Ruiz, Jonathan; Tapia López, Laura; Maneu Flores, Victoria; Mulet Soler, José

DRIVER (Spanish)

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A novel p34cdc2-binding and activating protein that is necessary and sufficient to trigger G2/M progression in Xenopus oocytes

Ferby, Ingvar; Blazquez, Montserrat; Palmer, Amparo; Eritja Casadellà, Ramón; Nebreda, Angel R.
1999-08-15

Digital.CSIC (Spain)

143

A novel mutant phenotype implicates dicephalic in cyst formation in the Drosophila ovary

McCaffrey, Ruth; St Johnston, Daniel; González-Reyes, Acaimo
2006-04-01

Digital.CSIC (Spain)

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A new primnoid genus (Anthozoa: Octocorallia) from the Southern Ocean

López González, Pablo J.; Gili, Josep María; Orejas, Covadonga
2002-01-01

Digital.CSIC (Spain)