Sample records for LIPOPOLISACARIDOS (lipopolysaccharides)
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Efecto del lipopolisacárido en cultivos de células dendríticas humanas y su inhibición por la polimixina B/ Effect of lipopolysaccharides on human dentritic cell cultures and its inhibition by polymyxin B

Cuéllar, Adriana; Fonseca, Ángela; Gómez, Alberto
2004-12-01

Resumen en español Algunos estímulos de maduración utilizados en cultivos de células dendríticas, como las proteínas recombinantes obtenidas en sistemas bacterianos o los extractos proteicos de ectoparásitos, contienen lipopolisacáridos (LPS) y su presencia afecta el comportamiento de las células dendríticas en cultivo. En este trabajo se evaluó el efecto del LPS en un sistema de cultivo de células dendríticas humanas y la actividad de la polimixina B como inhibidor del efecto d (mas) el LPS. Para esto, los monocitos obtenidos a partir de sangre periférica humana se diferenciaron a células dendríticas con IL-4 y GM-CSF y como estímulo de maduración se utilizó LPS o PGE2/FNTá. La expresión de marcadores y la secreción de citocinas se evaluaron por citometría de flujo. Los resultados mostraron que la preexposición a endotoxina disminuyó la expresión de CD83, inhibió la secreción de IL-12p70, FNTá e IL-10 y disminuyó la secreción de IL-6 en células dendríticas. Además, la utilización de 10 mg/ml de polimixina B fue efectiva en la inhibición de la actividad de 1 mg/ml de LPS y la máxima concentración de polimixina B que no afectó la morfología de las células fue de 50 mg/ml. En conclusión, la polimixina B es efectiva para inhibir la actividad del LPS en los cultivos de células dendríticas. Resumen en inglés Dendritic cells have been described as effective antigen presenting cells. Human dentritic cells are highly susceptible to lipopolysaccharide (LPS) tolerance, consisting of a differential deactivation state in which some cellular functions are impaired. LPS tolerance can be experimentally induced in vitro, in which the presence of LPS strongly affects the behavior of cultured dendritic cells. Recombinant proteins obtained from bacterial systems or protein extracts of ecto (mas) parasites containing LPS can be used as stimuli to enhance maturation processes in these cells. The present study evaluated the effect of LPS in human dendritic cell cultures, and the activity of polymyxin B as an inhibitor of the LPS effect. Dendritic cells were obtained from peripheral blood monocytes in the presence of IL-4 and GM-CSF, followed by exposure with LPS and PGE2/TNFá. Surface markers and cytokine levels were evaluated by flow cytometry. The dendritic cells pre-exposed to single doses of endotoxin demonstrated a reduced capacity to mature, reduced CD83 expression, inhibited secretion of IL-12, TNFá, IL-10 and diminished secretion of IL-6. Furthermore, polymyxin B at 10 mg/ml inhibits LPS activity at 1 mg/ml. The maximum polymyxin B concentration with no effect on cellular morphology was 50 mg/ml. Consequently, polymyxin B was determined to be an effective LPS inhibitor in dendritic cell cultures.

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Purificación de lipopolisacárido de Neisseria meningitidis a partir de una fracción colateral del proceso de producción de VA-MENGOC-BC®/ Purification of Neisseria meningitidis lipopolysaccharide starting from a collateral fraction of the process of the antimeningococcal vaccine, VA-MENGOC-BC® production process

Balboa, Julio A; Estrada, Jorgelina; Nápoles, Liliam D; Aguilar, Susan; González, Humberto; Hernández, Dairis; Aranguren, Yisabel; Garrido, Yoanna; Cardoso, Marlenis; Puentes, Gisela; Barberá, Ramón; Sierra, Gustavo
2008-04-01

Resumen en español El trabajo tuvo como objetivo purificar lipopolisacáridos (LPS) de Neisseria meningitidis a partir de una fracción colateral del proceso de producción de la vacuna antimeningocócica VA-MENGOC-BC®, el sobrenadante que se obtiene del paso de ultracentrifugación durante el proceso de extracción de las proteínas de membrana externa del meningococo. La purificación se realizó mediante precipitación con etanol al 80%, extracción de las proteínas con fenol al 90% en (mas) tre 65-70 ºC y ultracentrifugación fraccionada a 105,000 g. Se obtuvieron tres lotes de LPS, en total 1,069 g, con un contenido de proteínas, ácidos nucleicos y ácido sálico respecto al LPS de 0,5%, 0,3% y 2,2% (m/m) respectivamente. La evaluación por cromatografía mostró una alta integridad molecular, con valores de constante de distribución reproducibles (0,36-0,38) y una posible asociación del ácido siálico al LPS. Se apreció homogeneidad en el perfil electroforético de los tres lotes y alta actividad endotóxica. El LPS purificado fue identificado fundamentalmente como del inmunotipo L3,7,9. El procedimiento de purificación empleado permite aprovechar una fracción colateral del proceso de producción de la vacuna, es escalable, no incluye métodos cromatográficos, y posibilita la obtención de gran cantidad de LPS de Neisseria meningitidis, no disponible en el mercado, con elevada pureza y alta actividad endotóxica. Resumen en inglés The work aimed at purifying lipopolysaccharides (LPS) of Neisseria meningitidis from a collateral fraction of the antimeningococcal BC vaccine, VAMENGOC-BC®. production process, the supernatant obtained from the ultra centrifugation stage during the proteins extraction process of the meningococcus outer membrane. The purification was carried out by precipitation 80% ethanol, protein extraction with 90% phenol from 65-70 ºC and fractional ultra centrifugation at 105 000 (mas) g. Three lots of LPS were obtained, in total 1.069 g, with a content of proteins, nucleic acids and sialic acid in respect to the LPS of 0.5%, 0.3% and 2.2% (m/m) respectively. The assessment by chromatography showed a high molecular integrity. with constant valves of reproducible distribution (Kd 0.36 - 0.38) and a possible sialic acid association to the LPS. Homogeneity was observed in the electrophoretic profile of the three lots and a high endotoxic activity. The purified LPS was mainly identified as the inmunotype L3,7,9. The purification procedure used allows making use of a collateral fraction of the vaccine production process, it is scalable, it does not include chromatographic methods and makes easy the obtainment of large quantity of LPS of Neisseria meningitidis, wihich it is non available on the market, with high purity and high endotoxic activity.

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Reconocimiento de antígenos lipopolisacarídicos de Pseudomonas aeruginosa por sueros humanos/ Recognises of antigen lipopolysaccharide from Pseudomonas aeruginosa by human sera

Hernández, Jonatán; Alfonso, Jacquelin; Almenares, Juan F.; Moya, Aniel; Pérez, Jose L.; Esnard, Sara C.; Cádiz, Armando; Sierra, Gustavo
2004-04-01

Resumen en español En este trabajo se procedió al reconocimiento de lipopolisacáridos de diferentes serotipos de Pseusodomas aeruginosa por sueros humanos. Los lipopolisacáridos fueron aislados por el método Wespthal y Jann. Se utilizaron un total de 104 sueros de pacientes infectados y donantes voluntarios, provenientes de instalaciones hospitalarias y del Banco de Sangre, para el reconocimiento de antígenos lipopolisacarídicos, mediante el ensayo de Dott Blot. Los resultados mostrar (mas) on que los serotipos de mayor reconocimiento, por los sueros testados, fueron el O11, O13, O16 y el O15, existiendo diferencias significativas entre ellos (p Resumen en inglés ABSTRACT This work presents the recognition of different serotypes of Pseudomonas aeruginosa lipopolysaccharide by human sera. The lipopolysaccharides were purified by the methods of Wespthal and Jann. On the other hand, a total of 104 serums, of infected patients and voluntary donors, coming from different hospitals and from the Blood Bank of the Marianao municipality were used for the recognition of the antigenic lipopolysaccharides, using of dot blot. Our results showe (mas) d that the serotypes most frequently recognized by the tested serums, were O11, O13, O16 and O15, with significant differences among them (p

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Origen e importancia de la fosfolipasa A2 de secreción

Valdés Rodríguez, Yolanda C; Bilbao Díaz, Miguel; León Álvarez, José L; Merchán González, Francisco
2002-08-01

Resumen en español Las fosfolipasas A2 son una familia de enzimas que hidrolizan el enlace éster sn-2 de los glicerofosfolípidos liberando ácidos grasos, principalmente el ácido araquidónico y lisofosfolípidos. Las fosfolipasas A2 de secreción son producidas por numerosas células bajo la acción de diferentes estímulos como la interleucina-1, el factor de necrosis tumoral alfa y los lipopolisacáridos, los cuales provocan su acumulación en los líquidos inflamatorios y en el plasm (mas) a de pacientes con diversas enfermedades inflamatorias. Recientemente se propuso que las fosfolipasas de secreción actúan preferencialmente sobre microvesículas emitidas por las células cuyas membranas han perdido la asimetría fosfolipídica. Resumen en inglés Phospholipases A2 form a family of enzymes that hydrolizes the ester sn-2 binding of the glycerophospholipids and release fatty acids mainly araachidonic acid and lisophospholipids. Secretory phospholipids A2 are produced by a number of cells activated by various stimuli like interleukin-1, tumor necrosis factorµ and lipopolysaccharides that cause the accumulation of secretory phospholipases A2 into inflammatory fluids and plasma of patients suff (mas) ering from several inflammatory diseases. It was recently pointed out that secretory phospholipases preferably act upon microvesicles from cells whose membranes have lost their phospholipid asymmetry.

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Efecto citotóxico de la toxina shiga tipo 2 y su subunidad b en células epiteliales tubulares renales humanas en cultivo/ Cytotoxic effect of Shiga toxin type 2 and its B subunit on human renal tubular epithelial cell cultures

Pistone Creydt, Virginia; Nuñez, Pablo; Zotta, Elsa; Ibarra, Cristina
2005-04-01

Resumen en español Escherichia coli enterohemorrágica productora de toxina Shiga (Stx) causa diarrea acuosa, colitis hemorrágica y síndrome urémico hemolítico (SUH). En Argentina, el SUH es la principal causa de insuficiencia renal en niños. El objetivo de este trabajo fue estudiar la toxicidad de Stx tipo 2 (Stx2) y su subunidad B (Stx2B) en células epiteliales tubulares renales humanas (CERH), en presencia y ausencia de factores inflamatorios. Los efectos citotóxicos se evaluaron (mas) como alteración de la funcionalidad del epitelio; daños histológicos; viabilidad celular; síntesis de proteínas y apoptosis celular. Los resultados muestran que Stx2 regula el pasaje de agua a través de CERH a tiempos menores de 1h de incubación. A tiempos mayores, hasta 72 hs, el estudio de la morfología, la viabilidad, la síntesis de proteínas y la apoptosis demostró que las CERH fueron sensibles a la acción citotóxica de Stx2 y Stx2B de una manera dosis y tiempo dependiente. Estos efectos fueron potenciados por lipopolisacáridos bacterianos (LPS), IL-1b, y butirato. Resumen en inglés Shiga toxin (Stx)-producing E.coli causing watery diarrhea, hemorrhagic colitis and hemolytic-uremic syndrome (HUS). In Argentina, HUS is the most common cause of acute renal failure in children. The purpose of the present study was to examine the cytotoxicity of Stx type 2 (Stx2) and its B subunit (Stx2B) on human renal tubular epithelial cells (HRTEC), in the presence and absence of inflammatory factors. Cytotoxic effects were assessed in terms of functionality of the e (mas) pithelium, histological damage, cell viability, protein synthesis and cellular apoptosis. Results show that Stx2 regulates the passage of water through the HRTEC within an incubation period of 1h. Within longer periods, up to 72 hours, the study of morphology, viability, protein synthesis and apoptosis shows that HRTEC were sensitive to the cytotoxic action of Stx2 and Stx2B in a dose- and time-dependent manner. These effects were potentiated by lipopolysaccharides (LPS), IL-1b, and butirate.

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Principales protagonistas de la respuesta inflamatoria a la infección

Velázquez Acosta, Juan Carlos
1998-06-01

Resumen en español Se hace una revisión de los principales elementos implicados en la respuesta inflamatoria del individuo a la infección, por el beneficio que este conocimiento reporta al mejor manejo terapéutico de los pacientes. Se revisan los principales protagonistas de la inflamación, desde los detonantes como: lipopolisacárido, peptidoglicano, ácidos lipoteicoico y murámico, hasta los principales mediadores implicados. Se discute el proceso de activación de monocitos y célul (mas) as endoteliales y la repercusión de ello, y se hace un análisis dinámico del proceso de activación en función del tiempo trancurrido desde el comienzo de la infección, y sus etapas fisiopatológicas. Se evidencia el papel protagónico que tiene el propio organismo en el daño producido por la respuesta a la infección, además de la importancia del adecuado equilibrio entre proinflamación y contrarregulación para el pronóstico del enfermo, lo que obliga a tenerlo en cuenta a la hora del tratamiento. Resumen en inglés A review of the main elements involved in the inflamatory response of the individuals to infection is made, taking into account that this knowledge helps to improve the therapeutic management of patients. The main agents of inflammation are reviewed, starting from detonators such as: lipopolysaccharides, petpidoglycans, muramic acid to the principal mediators involved. The activation process of monocytes and endothelial cells is dicussed, as well as its repercussion. A dy (mas) namic analysis of the activation process according to the time elapsed since the onset of the infection and of its physiopathological stages is made. It is demonstrated the fundamental role played by the organism in the damage produced by the response to infection, and the importance of an adequate balance between proinflammation and contraregulation for the patient´s prognosis, which makes it necessary at the time of treatment.

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Consideraciones sobre el empleo de antisueros somáticos en la clasificación por serotipos de cepas de Pseudomonas aeruginosa

Moya, Aniel; Callicó, Adriana; Cedré, Bárbara
2007-08-01

Resumen en español El lipopolisacárido (LPS) de bacterias gramnegativas se emplea en el desarrollo de candidatos vacunales, como antígeno expuesto en la preparación o formando parte de esta para aumentar su poder inmunogénico. Sin embargo, esta estructura química de la membrana externa puede ser también utilizada para clasificar bacterias. Según el LPS, presente en la membrana externa bacteriana, Pseudomonas aeruginosa se puede clasificar en 20 tipos somáticos diferentes, clasificac (mas) ión muy útil para estudios epidemiológicos. P. aeruginosa expone sus LPS en la membrana de forma estable, pero ocurren cambios en el fenotipo del LPS bacteriano durante la infección, sucesos que dificultan su clasificación. En estos momentos, los estudios que se desarrollan en el Instituto Finlay necesitan del empleo de tecnologías modernas de clasificación y del diagnóstico molecular para poder establecer patrones más precisos de expresión de los LPS por métodos que junto a los ya existentes permitan diferenciar cepas bacterianas de la misma especie en cualquier tipo de infección. Resumen en inglés Lipopolysaccharides (LPS) of gramnegative bacteria are used for developing vaccine candidates as a complete exposed antigen in the preparation or as essential part of vaccines to improve its immunogenic power. Nevertheless, this outer membrane structure can also be used in bacterial classification according to the LPS chemical structure in outer membrane structure. Twenty different LPS have been reported as somatic antigens useful in P. aeruginosa strains classification i (mas) n epidemiological studies. Current studies of Finlay Institute need the introduction of up-dated classification technologies and molecular diagnosis tools to establish more accurate epidemiological standards to improve the reports about the presence of new strains at the infection site.

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Upregulation of p21Cip1 in activated glial cells

Tusell, Josep Maria; Ejarque-Ortiz, Aroa; Mancera, Pilar; Solà, Carme; Saura, Josep; Serratosa, Joan
2009-04-01

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Temperature and pyoverdine-mediated iron acquisition control surface motility of Pseudomonas putida

Matilla, Miguel A.; Ramos, Juan L.; Duque, Estrella; Alché Ramírez, Juan de Dios; Espinosa-Urgel, Manuel; Ramos-González, María Isabel
2007-07-01

Digital.CSIC (Spain)

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Protein kinase Cepsilon is required for macrophage activation and defense against bacterial infection

Castrillo, Antonio; Pennington, Daniel J.; Otto, Florian; Parker, Peter J.; Owen, Michael J.; Boscá, Lisardo
2001-11-05

Digital.CSIC (Spain)

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Protection by nitric oxide against liver inflammatory injury in animals carrying a nitric oxide synthase-2 transgene

Mojena, Marina; Hortelano, Sonsoles; Castrillo, Antonio; Díaz-Guerra, María José; García-Barchino, María J.; Sáez, Guillermo T.; Boscá, Lisardo
2001-03-01

Digital.CSIC (Spain)

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Nuclear factor kappaB is required for the transcriptional control of type II NO synthase in regenerating liver

Díaz-Guerra, María José; Velasco, Marta; Martín-Sanz, Paloma; Boscá, Lisardo
1997-09-15

Digital.CSIC (Spain)

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Novel epicatechin derivatives with antioxidant activity modulate interleukin-1β release in lipopolysaccharide-stimulated human blood

Mitjans, Montserrat; Martínez, Verónica; Campo, Jaime del; Abajo, Celia; Lozano, Carles; Torres, Josep Lluís; Vinardell, M. Pilar
2004-09-01

Digital.CSIC (Spain)

19

New structural and functional defects in polyphosphate deficient bacteria: A cellular and proteomic study

Varela, Cristian; Mauriaca, Cecilia; Paradela, Alberto; Albar, Juan Pablo; Jerez, Carlos A.; Chávez, Francisco P.
2010-01-12

Digital.CSIC (Spain)

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Mice with targeted disruption of p8 gene show increased sensitivity to lipopolysaccharide and DNA microarray analysis of livers reveals an aberrant gene expression response

Vasseur, Sophie; Hoffmeister, Albrecht; Garcia-Montero, Andrés; Barthet, Marc; Saint-Michel, Laure; Berthézène, Patrice; Fiedler, Fritz; Closa, Daniel; Dagorn, Jean Charles; Iovanna, Juan Lucio
2003-09-08

Digital.CSIC (Spain)

24

Lipoprotein lipase is nitrated in vivo after lipopolysaccharide challenge

Casanovas, Albert; Carrascal, Montserrat; Abián, Joaquín; López-Tejero, M. Dolores; Llobera, Miquel
2009-12-01

Digital.CSIC (Spain)

26

Insulin-like growth factor-I gene delivery to astrocytes reduces their inflammatory response to lipopolysaccharide

Bellini, Maria J.; Herenu, Claudia B.; Goya, Rodolfo G.; García Segura, Luis Miguel
2011-03-03

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27

Inhibition of IkappaB kinase and IkappaB phosphorylation by 15-deoxy-Delta(12,14)-prostaglandin J(2) in activated murine macrophages

Castrillo, Antonio; Díaz-Guerra, María José; Hortelano, Sonsoles; Martín-Sanz, Paloma; Boscá, Lisardo
2000-03-01

Digital.CSIC (Spain)

28

Induction of nitric oxide synthase-2 proceeds with the concomitant downregulation of the endogenous caveolin levels

Navarro-Lérida, Inmaculada; Portolés, María Teresa; Álvarez Barrientos, Alberto; Gavilanes, Francisco; Boscá, Lisardo; Rodríguez-Crespo, Ignacio
2004-04-01

Digital.CSIC (Spain)

29

Immunomodulatory activity of a new family of antioxidants obtained from grape polyphenols

Mitjans, Montserrat; Campo, Jaime del; Abajo, Celia; Martínez, Verónica; Selga, Ariadna; Lozano, Carles; Torres, Josep Lluís; Vinardell, M. Pilar
2004-10-28

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Identification from a positional scanning peptoid library of in vivo active compounds that neutralize bacterial endotoxins

Mora, Puig; Masip, Isabel; Cortés, Nuria; Marquina, Regina; Merino, Ramón; Merino, Jesús; Carbonell, Teresa; Mingarro, Ismael; Messeguer Peypoch, Àngel; Pérez-Payá, Enrique
2005-02-02

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Expression of the calcium-independent cytokine-inducible (iNOS) isoform of nitric oxide synthase in rat placenta

Casado, Marta; Díaz-Guerra, María José; Rodrigo, José; Fernández, Ana P.; Boscá, Lisardo; Martín-Sanz, Paloma
1997-05-15

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Dissection of Host Cell Signal Transduction during Acinetobacter baumannii – Triggered Inflammatory Response

Bengoechea, José Antonio; March, Catalina; Llobet Brossa, Enrique; Garmendia, Junkal; Regueiro, Verónica; Moranta, David; Morey, Pau
2010-04-07

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Different, overlapping mechanisms for colonization of abiotic and plant surfaces by Pseudomonas putida

Yousef-Coronado, Fátima; Travieso, María L.; Espinosa-Urgel, Manuel
2008-09-09

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Constitutive expression of cyclo-oxygenase 2 transgene in hepatocytes protects against liver injury

Mayoral, Rafael; Mollá, Belén; Flores, Juana María; Boscá, Lisardo; Casado, Marta; Martín-Sanz, Paloma
2008-08-15

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Bacterial lipopolysaccharide stimulates the thyrotropin-dependent thyroglobulin gene expression at the transcriptional level by involving the transcription factors thyroid transcription factor-1 and paired box domain transcription factor 8

Vélez, María L.; Costamagna, Eugenia; Kimura, Edna T.; Fozzatti, Laura; Pellizas, Claudia G.; Montesinos, María M.; Lucero, Ariel M.; Coleoni, Aldo H.; Santisteban, Pilar; Masini-Repiso, Ana M.
2006-07-01

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