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MULTIPLICACIÓN Y TUBERIZACIÓN in vitro DE ÑAME (Dioscorea alata L.) EN SISTEMA DE INMERSIÓN TEMPORAL/ MULTIPLICATION AND in vitro TUBERIZATION OF YAM (Dioscorea alata L.) IN TEMPORARY IMMERSION SYSTEM

Salazar Díaz, Robinson; Hoyos Sánche, Rodrigo Alberto
2007-12-01

Resumen en español Se realizó la estandarización de la multiplicación y tuberización in vitro de ñame (Dioscorea alata L.) utilizando el sistema de inmersión temporal conocido como RITA®. Se evaluó inicialmente el porcentaje de brotación de segmentos nodales en medio de cultivo semisólido utilizando dos tipos de citoquininas (BAP y Kinetina). Las plantas obtenidas fueron subcultivadas cada cuatro semanas y luego utilizadas para la obtención de meristemos y plántulas para llevar (mas) a cabo los diferentes experimentos en sistema de inmersión temporal. Se obtuvo un mayor porcentaje de explantes brotados al utilizar Kinetina. Con el sistema RITA® se evaluó el efecto de la densidad de explantes sobre la tasa de multiplicación y sobre la inducción, formación y desarrollo de microtubérculos, no encontrándose diferencias estadísticamente significativas entre las densidades evaluadas. De igual manera, se evaluó el efecto de diferentes frecuencias y tiempos de inmersión sobre la tasa de multiplicación, encontrándose que a una frecuencia de inmersión cada 12 horas y durante 10 minutos se obtenía la formación de mayor número de nudos y mayor tamaño de las plantas a las cuatro semanas de cultivo. Al utilizar el sistema de inmersión temporal se alcanzaron mayores tasas de multiplicación y tuberización in vitro comparadas con el sistema de cultivo convencional. Demostrándose así, el potencial de estos sistemas para implementar un programa de producción de semillas de ñame. Resumen en inglés Multiplication rate and in vitro tuberización of yam (Dioscorea alata L.) was made using the temporary immersion system RITA®. Shoot percentage of nodal segments was initially evaluated in semisolid medium using two cytokinin types ((BAP and Kinetin). The obtained plants were subcultured every four weeks and then used to obtain meristems and plantlets to carry out different experiments in temporary immersion system. A higher sprouted explants percentage was obtained whe (mas) n using Kinetin. With the system RITA® the effect of explants density was evaluated on the multiplication rate and on the induction, formation and microtubers development, not find statistically significant differences among the evaluated densities. On the same way, the effect of different frequencies and immersion times on the multiplication rate were evaluated, finding that to an immersion frequency every 12 hours and during 10 minutes the formation of more number of knots and higher size of plants was obtained to four weeks of culture. When using temporary immersion system higher multiplication and in vitro tuberization rates were reached compared with the conventional culture system. This fact demonstrated the potential of these systems to implement a program of yam seeds production.

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Embriogénesis somática en cultivares de cacao Venezolanos¹/ Somatic embryogenesis in Venezuelan cocoa cultivars

Velásquez Salazar, Rosalía; Sandrea, Yanet; Betancourt, Carmen; Mata, Jonás; García, Félix
2006-03-01

Resumen en español Los métodos tradicionales de propagación del cacao, Theobroma cacao L. (vegetativa y sexual) han sido las técnicas mayormente utilizadas por los productores venezolanos; sin embargo, estas no han sido las más favorables, porque se producen plantas con características agronómicas indeseables. Actualmente, dentro de las técnicas de cultivo de tejidos, la embriogénesis somática parece ser el método más eficiente de regeneración y multiplicación de clones de caca (mas) o. Para ello, se ajustó un protocolo donde se utilizaron como explantes órganos florales (estaminoidios, pétalos y anteras) y cotiledones inmaduros de los genotipos Choroní-42, Ocumare-77, Ocumare-61 y Porcelana, induciendo la formación de callo con Thidiazuron (TDZ), altas concentraciones de sacarosa y 2,4-D (2,4 diclorofenoxiacético); se indujo la formación de proembriones con cinetina y agua de coco. Los embriones fueron transferidos a un medio con aminoácidos y KNO3, bajo condiciones de oscuridad y temperatura entre 26 - 29 ºC. Los embriones cotiledonares se subcultivaron bajo condiciones de fotoperíodo 16/8 horas luz-oscuridad para la posterior formación de plantas. Resumen en inglés The traditional sexual and asexual methods of cocoa propagation have been widely used in Venezuela and worldwide, however, they have not been successful since plants with undesirable agronomic characteristics are produced. At present, plant regeneration via somatic embryogenesis provides an alternative method for clonally propagating cocoa. Therefore, a protocol was developed in order to use staminode, petal, anther and immature cotyledon explants of genotypes Choroní-42 (mas) , Ocumare-77, Ocumare-61 and Porcelana. Callus formation was induced with Thidiazuron (TDZ), high sucrose concentration and 2,4-D. Somatic embryos were induced with kinetin and coconut water. Embryos were transferred to a medium containing amino acids and KNO3 and placed under dark conditions and 26-29 ºC. Cotyledonary embryos were subcultivated under photoperiodic conditions of 16/8 hours light-dark for posterior formation of plants.

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Propagación in vitro del 'Maguey bruto' (Agave inaequidens Koch), una especie amenazada de interés económico/ In vitro propagation of 'Maguey bruto' (Agave inaequidens Koch), an endangered species with economical interest

Aureoles-Rodríguez, F.; Rodríguez-de la O, J. L.; Legaria-Solano, J. P.; Sahagún-Castellanos, J.; Peña Ortega, M. G.
2008-12-01

Resumen en español El 'Maguey bruto' (Agave inaequidens Koch) es una especie silvestre poco estudiada que se encuentra amenazada y se utiliza para la elaboración de la bebida alcohólica "Raicilla". Con la finalidad de propagar in vitro la especie, se evaluaron diferentes tipos de explantes, tipos y concentraciones de reguladores de crecimiento y concentraciones de sales inorgánicas Murashige y Skoog (1962), así como, diferentes tamaños de planta y cantidades de raíz. El análisis de d (mas) atos detectó diferencia estadística significativa (P≤0.05) entre los efectos de los niveles de algunos factores y algunas interacciones. Las secciones de tallo formaron hasta 72 brotes en ocho semanas; la concentración de 3.0 mg·litro-¹ de 6-benciladenina (BA) produjo una mayor longitud y número de brotes con 6.39 mm y 2.02, respectivamente; las concentraciones de BA, Kinetina (Kin) y 6-γ,γ-dimethylallylamino purina (2ip) produjeron una amplia variedad de respuestas; el tamaño grande de plantas en un medio con sales MS al 100% de su concentración sin reguladores, produjo mayor número y longitud de raíces en menor tiempo, y las plantas de longitud mayor a 4.0 cm con más de dos raíces presentaron una sobrevivencia del 100%. Resumen en inglés 'Maguey bruto' (Agave inaequidens Koch) is a wild, little studied endangered species. It is used to make the alcoholic spirit "Raicilla". To develop a method for reproduction to increase the population, several explants, concentrations of hormone, inorganic Murashige and Skoog (1962) salts, plant sizes and root conditions were evaluated in vitro. Some variables showed statistical significance. The stem sections formed 72 shoots in 8 weeks; the concentration of 3.0 mg·lit (mas) er-1 of 6-benziladenine (BA) produced an increase in length and number of shoots (6.39 mm and 2.02 respectively). The concentration of BA, kinetin (Kin) and 6-γ,γ-dimethylallylamino purine (2ip) produced a wide variety of responses: larger plants in a medium with MS salts at 100% concentration produced more and larger roots in less time, and 100% of the plants larger than 4.0 cm with more than 2 roots survived.

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Evaluación de diferentes concentraciones de algunos reguladores de crecimiento en la multiplicación y enraizamiento in vitro de Limonium var. Misty blue/ Evaluation of different concentrations of some plant growth regulators on in vitro multiplication and rooting of Limonium var. Misty blue

Chamorro, Albeiro; Martínez, Sonia; Fernández, John Cristhian; Mosquera, Teresa
2007-06-01

Resumen en español Se evaluaron diferentes concentraciones de reguladores de crecimiento en las fases de multiplicación y enraizamiento in vitro de Limonium var. Misty blue, las cuales son bajas en esta especie. Se trabajó con material in vitro donado por la Empresa La Plazoleta Ltda. Se evaluaron diferentes tipos y concentraciones de citoquininas (kinetina, KIN; 6-bencilaminopurina, BAP; y thidiazuron, TDZ) en la fase de multiplicación y dos tipos de auxinas (ácido indolacético, AIA; (mas) y ácido indolbutírico, AIB) a diferentes concentraciones en la fase de enraizamiento in vitro. En la fase de multiplicación los mejores resultados fueron obtenidos con el uso del medio de cultivo MS (Murashige y Skoog, 1962) suplementado con KIN o BAP a 0,5 mg· L-1 durante un período de cuatro (4) semanas. Se encontró que concentraciones altas de las citoquininas evaluadas en este trabajo inducen desdiferenciación celular y reducen la tasa de multiplicación, especialmente el TDZ a 0,1 mg· L-1. En la fase de enraizamiento in vitro se obtuvieron buenos resultados manteniendo las plántulas por un período de tres (3) semanas en medio MS (1962) suplementado con AIB en concentraciones entre 0,5 y 1,0 mg· L-1, lo cual consiguió un sistema radical adecuado para su posterior endurecimiento. En presencia de AIA no se formaron raíces en ninguna de las concentraciones evaluadas. Resumen en inglés This research was carried out in order to evaluate the effect of different concentrations of plant growth regulators on in vitro multiplication and rooting of Limonium var. Misty Blue, which are low in this specie. The plant material was provided by La Plazoleta Ltda Company. There were evaluated different types and concentrations of cytokinin (kinetin- KIN, benzylaminopurine-BAP, thydiazuron-TDZ) during the multiplication phase, as well as two types of auxins (indolaceti (mas) c acid-IAA, and indolbutyric acid- IBA) at different concentrations during the in vitro rooting phase. In the multiplication period, the best results were obtained using the MS (Murashige y Skoog, 1962) supplemented with 0.5 mg· L-1 KIN or BAP for a period of four weeks. High concentrations of cytokinins induced cellular dedifferentiation and reduced multiplication rate, especially TDZ at 0.1 mg· L-1. In the in vitro rooting phase, there were accomplished remarkable results when plantlets were kept on MS medium supplemented with IBA at 0.5 mg· L-1 and 1.0 mg· L-1 for three weeks, obtaining a root system, which was adequate for plant acclimatation. With the IAA, there was no root formation at any of the evaluated concentrations.

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Primary and secondary somatic enbryogenesis in leaf sections and cell suspensins of coffea arabica cv. catimor

Fernández-Da Silva, Rafael; Hermoso-Gallardo, Luis; Menéndez-Yuffá, Andrea
2005-11-01

Resumen en portugués O objetivo principal de este estudo foi caracterizar e melhorar u desenvolvimento dos embriões somáticos secundários no café (Coffea arabica cv. Catimor). Ademais, devido a que u desenvolvimento dos embriões somáticos primários e a primeira estágie da diferenciación dos embriões somáticos secundários, foram comparados três metodos para indução: 1) um meio solido em dois estágios, primeiro meio com 4,5µM do ácido 2,4-diclorofenoxiacetico (2,4-D) e 35µM d (mas) o benzyladenine (BA) e segundo meio com 4,3µM do ácido naftalenoacético, 2) um meio solido em uma estágio (4,4-53,3µM BA), e 3) suspensões celulares. Em esse ultimo tratamento, u calo fui formado em dois estágies do meio solido, uma com 9,3µM do cinetine e 2,3µM da 2,4-D, e segundo com 22,2µM do BA, e um terceiro meio líquido com 35µM do BA. Todos os tratamentos induziram embriognese somática primária e secundária. O rendimento mais elevado dos embriões somáticos foi obtido em suspensões celulares. Os embriões somáticos secundários foram diferenciados na maneira direta das células epidérmicas e subepidérmicas da zona hipocotilar dos embriões somáticos primários. Resumen en español El principal objetivo de esta investigación fue caracterizar y optimizar el desarrollo de embriones somáticos secundarios en café (Coffea arabica cv. Catimor). Adicionalmente, dado que la formación de embriones somáticos primarios es la etapa previa a la diferenciación de embriones somáticos secundarios, se compararon tres métodos para su inducción: 1) medio sólido en dos etapas, primero un medio con 4,5µM de ácido 2,4-diclorofenoxiacético (2,4-D) y 35µM de (mas) benciladenina (BA), y luego un medio con 4,3µM de ácido naftalenoacético, 2) medio sólido con 4,4-53,3µM BA en una etapa, y 3) cultivos en suspensión. En este último tratamiento el callo se formó en dos etapas de medio sólido, un medio con 9,3µM de cinetina y 2,3µM de 2,4-D y un segundo medio con 22,2µM de BA, así como en un tercer medio líquido con 35µM de BA. Todos los tratamientos indujeron la embriogénesis somática primaria y secundaria. El máximo rendimiento de embriones somáticos primarios se obtuvo en suspensiones celulares. Los embriones somáticos secundarios se diferenciaron directamente a partir de células epidérmicas y subepidérmicas en la zona hipocotilar de los embriones somáticos primarios. Resumen en inglés The main purpose of this research was to characterize and optimize the development of secondary somatic embryos in coffee (Coffea arabica cv. Catimor). In addition, as the primary somatic embryos formation is the previous stage to the differentiation of secondary somatic embryos, three methods for its induction were compared: 1) solid media in two stages, first in a medium with 4.5µM of 2,4-dichlorophenoxiacetic acid (2,4-D) and 35µM of benzyladenin (BA) and then in a m (mas) edium with 4.3µM naphtaleneacetic acid, 2) solid media with 4.4-53.3µM BA in one stage, and 3) suspension cultures. In the latter treatment the callus was formed in two stages of solid media, one containing 9.3µM of kinetin and 2.3µM of 2,4-D, and a second one with 22.2µM of BA, and a third liquid medium with 35µM of BA. All the treatments induced primary and secondary somatic embryogenesis. The highest yield of somatic embryos was obtained in suspension cultures. The secondary somatic embryos differentiated directly from epidermal and subepidermal cells of the hypocotilar zone of the primary somatic embryos.

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Las citoquininas están asociadas al desarrollo floral de plantas de Solidago x luteus en días cortos/ Cytokinins are associated with flower development of Solidago x luteus plants under short days

Flórez, Víctor Julio; Pereira, Maria de Fátima D. Aleixo
2008-08-01

Resumen en español En Solidago x luteus (M.L. Greene) Brouillet y Semple (= x Solidaster hybridus,xS. luteus), planta comercializada principalmente para flor de corte, el proceso de inducción floral es dependiente de las condiciones fotoperiódicas ambientales. Con el objetivo de determinar la acción de las citoquininas en este proceso, se analizó su presencia en condiciones fotoperiódicas opuestas: días largos (DL) de 18 h y días cortos (DC) de 8 h. En la primera fase del ensayo, con (mas) el fin de analizar la respuesta de las plantas a fitohormonas con frecuencia semanal de aplicación, se realizaron los siguientes tratamientos: 1) ácido giberélico (GA3) 10-4M, 6-benzilaminopurina (6-BA) 4·10- M y GA3 10- M más 6-BA 4·10- M; 2) GA3 10-4M, kinetina (KI) 4·10- M y GA3 10- M más KI 4·10- M y 3) KI 4·10- M. Con el objeto de conocer la concentración endógena de hormonas, en la segunda fase los extractos vegetales se analizaron a través de cromatografía en capa fina y cuantificados por el ensayo inmunoenzimático de Elisa, previa separación por cromatografía líquida de alta eficiencia. Los resultados permitieron determinar la actividad citoquinínica en extractos provenientes de hojas y de botones florales de plantas en el inicio de los tratamientos, en DL y en DC. Se demostró que la aplicación de KI acelera la antesis floral, evidenciando la relación de citoquininas endógenas con el proceso de desarrollo floral. Por último, de los resultados obtenidos de los extractos sometidos a Elisa se sugiere la participación de las citoquininas en el proceso de antesis floral de S. x luteus, donde la iPA (isopentenil adenosina) tendría una acción importante al ser transportada rápidamente de la hoja al botón floral en DC, posibilitando tal vez la mayor velocidad de antesis floral observada en este fotoperíodo. Resumen en inglés In Solidago x luteus (M.L. Greene) Brouillet and Semple (= x Solidaster hybridus, x S. luteus), a plant commercialized principally as cut flower, the process of floral induction is dependent on photoperiodic environmental conditions. In order to determine the action of cytokinins in this process, their presence was analyzed in photoperiodically contrasting conditions (long days (LD, 18 h) and short days (SD, 8 h)). In the first phase of the test, with the purpose to analy (mas) ze the response of plants to phytohormones, weekly application of the following treatments were realized: 1) 10- M gibberellic acid (GA3), 4·10- M 6-benzylaminopurine (6-BA), and 10- M GA3 plus 4·10- M 6-BA; 2) 10- M GA3, 4·10- M kinetin (KI), and 10- M GA3 plus 4·10- M KI; and 3) 4·10- M KI. In the second phase, in order to know the endogenous concentration of hormones, plant extracts were analyzed by thin layer chromatography and quantified by enzyme linked immunosorbent assay (Elisa) previously separated by high determining the cytokinin activity in leafs and flower buds extracts of plants in the beginning of the treatments under LD and SD. It was showed that KI application accelerates the floral anthesis demonstrating the relation of endogenous cytokinins on the process of floral development. Finally, from the results obtained of the extracts submitted to Elisa, it is suggested the participation of cytokinins in the anthesis process of S. x luteus, where iPA (isopentenil adenosine) would have an important action being transported rapidly from the leaf to the flower bud in SD making faster process of anthesis floral observed in this photoperiod.

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Micropropagacion y organogenesis de aster ericoides cultivar "Monte Cassino"

Salazar, Renaldo; Vargas, Teresa Edith; De García, Eva; Oropeza, Maira
2005-05-01

Resumen en portugués A micropropagação e a organogênese de Aster ericoides Cultivar "Monte Cassino" foram estabelecidas a partir do cultivo de gemas, microestaquias e folhas obtidas de plantas de 2 meses de idade mantidas em condições de viveiro. As gemas e microestaquias foram cultivadas em meios MS suplementados com 1mg·l-1 de cinetina (K) e 0,5mg·l-1 de ácido indolacético (AIA), obtendo aos 2 meses de cultivo uma média de 4,68 brotes a partir do cultivo de microestaquias e de 2,6 (mas) 4 brotes a partir do cultivo de gemas. O processo de organogênese foi induzido utilizando explantes de folhas de plantas cultivadas in vitro em meios MS suplementados com benziladenina (BA) e ácido naftaleno acético (ANA). O processo de organogênese direta foi observado em meio MS suplementado com 0,5mg·l-1 BA e 0,5mg·l-1 ANA, obtendo um número médio de 1 brote por explante, aos 30-45 dias de cultivo. A organogênese indireta se se observou a partir de calos cultivados em meios suplementados com as maiores concentrações de BA, obtendo-se o maior índice de formação de brotes (1,16) no meio suplementado com 5mg·l-1 BA e 0,5mg·l-1 ANA, aos 6 meses de cultivo. A maior porcentagem de aclimatação (80%) foi observado em plantas obtidas a partir do processo de organogênese em substratos de terra negra. A micropropagação através do cultivo de microestaquias resultou o sistema de propagação in vitro mais eficiente para Aster ericoides cultivar "Monte Cassino". Resumen en español La micropropagación y la organogénesis de Aster ericoides cultivar "Monte Cassino" fueron establecidas a partir del cultivo de yemas, microesquejes y hojas obtenidos de plantas de 2 meses de edad mantenidas en condiciones de vivero. Las yemas y microesquejes fueron cultivados en medios MS suplementados con 1mg·l-1 de cinetina (K) y 0,5mg·l-1 de ácido indolacético (AIA), obteniendo a los 2 meses de cultivo un promedio de 4,68 brotes a partir del cultivo de microesque (mas) jes y de 2,64 brotes a partir del cultivo de yemas. El proceso de organogénesis fue inducido utilizando explantes de hojas de plantas cultivadas in vitro en medios MS suplementados con benciladenina (BA) y ácido naftaleno-acético (ANA). El proceso de organogénesis directa fue observado en medio MS suplementado con 0,5mg·l-1 BA y 0,5mg·l-1 ANA, obteniendo un número promedio de 1 brote por explante, a los 30-45 días de cultivo. La organogénesis indirecta se observó a partir de callos cultivados en medios suplementados con las mayores concentraciones de BA, obteniéndose el mayor índice de formación de brotes (1,16) en el medio suplementado con 5mg·l-1 BA y 0,5mg·l-1 ANA, a los 6 meses de cultivo. El mayor porcentaje de aclimatación (80%) fue observado en plantas obtenidas a partir del proceso de organogénesis en sustratos de tierra negra. La micropropagación a través del cultivo de microesquejes resultó el sistema de propagación in vitro más eficiente para Aster ericoides cultivar "Monte Cassino". Resumen en inglés Micropropagation and organogenesis were established for Aster ericoides cv. "Monte Cassino". Buds and micro cuttings were obtained from 2 months old greenhouse grown plants and cultured on an MS medium supplemented with kinetin (K) 1mg·l-1 and indol acetic acid (IAA) 0,5mg·l-1. Two months later, an average of 4.68 shoots from micro cuttings culture and 2.64 shoots from buds culture were obtained. Organogenic processes were induced using leaf explants obtained from in vi (mas) tro plants. These explants were cultured on an MS medium supplemented with bencyladenine (BA) and naphthalene acetic acid (NAA). Direct organogenesis was observed on a medium supplemented with BA 0.5mg·l-1 and NAA 0.5mg·l-1. After 30-45 days, an average of one shoot per explant was obtained. Indirect organogenesis was observed 15 days after culture initiation in almost all the culture media. After six months, the highest shoot formation index (1.16) was obtained on an MS medium supplemented with BA 5mg·l-1 and NAA 0.5mg·l-1. Plants regenerated by organogenesis were transferred to pots and a rate of 80% of plant acclimatization was obtained. Micropropagation from micro cuttings was the most efficient in vitro propagation system for Aster ericoides cv "Monte Cassino".

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Morfogénesis in vitro de dioon merolae de Luca, Sabato & Vázquez-Torres (zamiaceae, cycadales) a partir de megagametofitos y embriones cigóticos/ In vitro morphogenesis of dioon merolae de Luca, Sabato & Vázquez Torres (zamiaceae, cycadales) from megagametophytes and zygotic embryos/ Morfogênese in vitro de dioon merolae de Luca, Sabato & Vázquez-Torres (zamiaceae, cycadales) a partir de megagametofitos e embriões zigóticos

Cabrera Hilerio, Sandra Luz; Chávez Ávila, Victor Manuel; Sandoval Zapotitla, Estela; Litz, Richard E; Cruz Sosa, Francisco
2008-12-01

Resumen en portugués A partir de explantes de embriões zigóticos e megagametofitos foram induzidos cultivos organogênicos de Dioon merolae do estado de Chiapas (México), Cicas em perigo de extinção. O meio de indução Litz consistiu nos macronutrientes do meio B5, os micronutrientes do meio MS e os compostos orgânicos glutamina (400mg·l-1) arginina (100mg·l-1), asparagina (100mg·l-1), sacarose (60g·l-1), goma gelana (4g), e suplementado com 0; 0,45; 2,26; 4,52 e 9,05μM α (mas) cido 2,4-diclorofenoxiacético (2,4-D), e 0; 2,32; 4,60; 9,30 e 13,90μM kinetina (K), com um arranjo de 5×5 com um desenho de bloco selecionado aleatoriamente. Os cultivos foram mantidos no escuro a 25°C e o calo foi subcultivado, em meio fresco, cada quatro semanas. A iniciação do calo ocorreu em uma ampla faixa de combinações de reguladores de crescimento em explantes de megagametofito. O calo em explantes de embriões zigóticos se formou em poucas combinações. A formação de brotos adventícios ocorreu somente em calos que provinham de combinações com K e 2,4-D. Através da análise histológica de secções longitudinais de embriões zigóticos se detectaram células meristemáticas apicais de broto e raiz, e em megagametófitos a formação de elementos de condução similares a traqueídes e raízes coralóides. Esta técnica apresenta grande potencial para a preservação de espécies de Cicas em perigo de extinção. Resumen en español A partir de explantes de embriones cigóticos y megagametofitos fueron inducidos cultivos organogénicos de Dioon merolae del estado de Chiapas (México), cícada en peligro de extinción. El medio de inducción Litz consistió en los macronutrientes del medio B5, los micronutrientes del medio MS y los compuestos orgánicos glutamina (400mg·l-1) arginina (100mg·l-1), asparagina (100mg·l-1), sacarosa (60g·l-1), gellan-gum (4g), y suplementado con 0; 0,45; 2,26; 4,52 y (mas) 9,05μM αcido 2,4-diclorofenoxiacético (2,4-D), y 0; 2,32; 4,60; 9,30 y 13,90μM kinetina (K), con un arreglo de 5´5 con un diseño de bloque seleccionado al azar. Los cultivos fueron mantenidos en oscuridad a 25°C y el callo fue subcultivado en medio fresco cada cuatro semanas. La iniciación del callo ocurrió en un amplio rango de combinaciones de reguladores de crecimiento en explantes de megagametofito. El callo en explantes de embriones cigóticos se formó en pocas combinaciones. La formación de brotes adventicios ocurrió solo en callos que provenían de combinaciones con K y 2,4-D. A través del análisis histológico de secciones longitudinales de embriones cigóticos se detectaron células meristemáticas apicales de brote y raíz, y en megagametofitos la formación de elementos de conducción similares a traqueidas y raíces coraloides. Esta técnica presenta gran potencial para la preservación de especies de cícadas en peligro de extinción. Resumen en inglés Organogenic cultures were induced from zygotic embryo and megagametophyte explants of the Chiapas State (México) endangered cycad species, Dioon merolae. The Litz induction medium consisted of B5 major salts, MS medium minor salts and the organics glutamine (400mg·l-1), arginine (100mg·l-1), asparagines (100mg·l-1), sucrose (60g·l-1), gellan gum (4g), and supplemented with 0, 0.45, 2.26, 4.52 and 9.05μM 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D) and 0, 2.32, 4.60, 9 (mas) .30, 13.90μM kinetin (K), arranged as a 5´5 factorial in a randomized block design. Cultures were maintained in darkness at 25°C, and callus was subcultured onto fresh medium at 4 week intervals. Callus initiation occurred on a wide range of plant growth regulators (PGR) combinations from megagametophyte explants. In comparison, callus initiation from explanted zygotic embryos occurred on few PGR combinations. Adventitious shoot induction occurred from callus on formulations with K and 2,4-D. Through the histological analysis of longitudinal sections of zygotic embryos were detected apical meristematic cells of the shoot and root and in megagametophytes the formation of elements similar to tracheids and coralloid roots. This technique has a great potential for preservation of the highly endangered cycads.

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Xanthone biosynthesis and accumulation in calli and suspended cells of Hypericum androsaemum

Dias, Alberto C. P.; Seabra, Rosa M.; Andrade, Paula B.; Ferreres, Federico; Fernandes-Ferreira, Manuel
2000-01-14

Digital.CSIC (Spain)

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Inducción y crecimiento de cultivos de tejidos de "Erysimum soparius" (Brouss. ex Willd.) Wettst.

Pérez-Francés, J.F.; Iglesias-Jiménez, E.; Samarín, N.; Blesa, A.C.
1982-01-01

Digital.CSIC (Spain)