Sample records for SUERO INMUNE (immune sera)
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Anticuerpos Neutralizantes contra el Virus de la Fiebre Amarilla 17 D en Colombianos Vacunados y no Vacunados con Inmunidad a Dengue/ Yellow fever virus 17D neutralising antibodies in vaccinated Colombian people and unvaccinated ones having immunity against dengue

Gómez, Sergio Y.; Ocazionez, Raquel E.
2008-12-01

Resumen en español Objetivo Determinar la frecuencia de título protector de anticuerpos neutralizantes contra el virus de la fiebre amarilla (AN-VFA a título >1:10) en colombianos vacunados con la cepa 17 D y conocer la magnitud de neutralización del VFA por anticuerpos contra dengue. Metodología Se colectó suero de 100 individuos con vacuna documentada por carné y de 116 residentes en municipios de Norte de Santander afectados por el brote en 2002-2003, quienes informaron haber sido (mas) vacunados. Se incluyeron sueros de individuos no vacunados con (n=61) y sin (n=16) anticuerpos contra dengue. Todos los sueros se analizaron por la prueba de neutralización para VFA por 75 % de reducción de placa. Resultados AN-VFA a título >1:10 se encontraron en 90 % de vacunados con carné y sin variación aparente en relación con edad. Al contrario, hubo correlación entre disminución de la frecuencia de título protector de anticuerpos e incremento del tiempo de inmunización (r=0,95; p=0,04). En residentes de Norte de Santander, AN-VFA a título >1:10 se encontraron en 92,6 % adultos y 69 % niños. El VFA fue neutralizado (52 -100 %) por sueros de inmunes a dengue más eficientemente que por sueros de no inmunes (p Resumen en inglés Objective Determining the frequency of yellow fever seroprotective antibody neutralising titres (YF-NT >1:10) in Colombians vaccinated with the 17 D virus and ascertaining the extent to which YF virus can be neutralised by dengue antibodies. Materials and Methods Serum samples were taken from 100 subjects who showed their vaccination record and from 116 residents in municipalities (Norte de Santander) affected by a wild YF outbreak in 2002-2003 who were reported to have b (mas) een YF vaccinated. Sera from individuals with (n=61) and without (n=16) dengue antibodies who had never been YF vaccinated were included. All the sera were tested by 75 % YF plaque-reduction neutralization test. Results YF-NT titres >1:10 were founded in 90 % of subjects with vaccination recorded with minors variations in relation to age. In contrast, there was correlation between decrease of seroprotective YF-NT titres frequency and increase of immunization time (r=0.95; p=0.04). In residents in YF endemic area, YF-NT titres > 1.10 were founded in 92,6 % adults and 69 % children. YF 17 D virus was neutralized (52-100 %) by dengue sera more efficiently than non-dengue immune sera (p

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Anticuerpos Neutralizantes contra el Virus de la Fiebre Amarilla 17 D en Colombianos Vacunados y no Vacunados con Inmunidad a Dengue/ Yellow fever virus 17D neutralising antibodies in vaccinated Colombian people and unvaccinated ones having immunity against dengue

Gómez, Sergio Y; Ocazionez, Raquel E
2008-11-01

Resumen en español Objetivo Determinar la frecuencia de título protector de anticuerpos neutralizantes contra el virus de la fiebre amarilla (AN-VFA a título >1:10) en colombianos vacunados con la cepa 17 D y conocer la magnitud de neutralización del VFA por anticuerpos contra dengue. Metodología Se colectó suero de 100 individuos con vacuna documentada por carné y de 116 residentes en municipios de Norte de Santander afectados por el brote en 2002-2003, quienes informaron haber sido (mas) vacunados. Se incluyeron sueros de individuos no vacunados con (n=61) y sin (n=16) anticuerpos contra dengue. Todos los sueros se analizaron por la prueba de neutralización para VFA por 75 % de reducción de placa. Resultados AN-VFA a título >1:10 se encontraron en 90 % de vacunados con carné y sin variación aparente en relación con edad. Al contrario, hubo correlación entre disminución de la frecuencia de título protector de anticuerpos e incremento del tiempo de inmunización (r=0,95; p=0,04). En residentes de Norte de Santander, AN-VFA a título >1:10 se encontraron en 92,6 % adultos y 69 % niños. El VFA fue neutralizado (52 -100 %) por sueros de inmunes a dengue más eficientemente que por sueros de no inmunes (p Resumen en inglés Objective Determining the frequency of yellow fever seroprotective antibody neutralising titres (YF-NT >1:10) in Colombians vaccinated with the 17 D virus and ascertaining the extent to which YF virus can be neutralised by dengue antibodies. Materials and Methods Serum samples were taken from 100 subjects who showed their vaccination record and from 116 residents in municipalities (Norte de Santander) affected by a wild YF outbreak in 2002-2003 who were reported to have b (mas) een YF vaccinated. Sera from individuals with (n=61) and without (n=16) dengue antibodies who had never been YF vaccinated were included. All the sera were tested by 75 % YF plaque-reduction neutralization test. Results YF-NT titres >1:10 were founded in 90 % of subjects with vaccination recorded with minors variations in relation to age. In contrast, there was correlation between decrease of seroprotective YF-NT titres frequency and increase of immunization time (r=0.95; p=0.04). In residents in YF endemic area, YF-NT titres > 1.10 were founded in 92,6 % adults and 69 % children. YF 17 D virus was neutralized (52-100 %) by dengue sera more efficiently than non-dengue immune sera (p

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Neutropenia Inmune - Aloinmune neonatal: IgG sérica reactiva y fenotipo específico de los neutrófilos evaluados por citometría de flujo/ Autoimmune-alloimmune neonatal neutropenia: Serum reactive IgG and neutrophil-specific phenotype detected by flow cytometry

Riera, Norma E.; Kantor, Gustavo L.; Khoury, Marina; Parias Nucci, Rodrigo; Rapetti, María Cristina; Aixala, Mónica; Goldsztein, Sofia; Flores, Gabriela; De E. De Bracco, María M.
2006-10-01

Resumen en español La neutropenia inmune se diagnostica por la presencia de auto o aloanticuerpos reactivos con los neutrófilos. La neutropenia aloinmune neonatal es consecuencia de la sensibilización materna a los antígenos específicos de los neutrófilos paternos que afectan al neonato al atravesar la barrera placentaria. Se presentan 4 casos de niños, 2 de ellos hermanos consanguíneos con doble vínculo. Se estudiaron los sueros de los pacientes y sus padres. Por citometría de flu (mas) jo se establecen los valores de referencia de la IgG sérica reactiva con los neutrófilos en voluntarios sanos, para 3 diluciones (1/2, 1/5 y 1/20) en reacción autóloga (suero y células de un mismo individuo) y heteróloga (suero y células de diferentes individuos). Los resultados se expresan por un índice definido como el cociente entre la mediana de la intensidad de fluorescencia media del suero incógnita y la de un suero utilizado como referencia. Por leucoaglutinación se evaluó la dilución del suero 1/20. Se determinó el nivel de complejos inmunes circulantes. Se determinó el fenotipo, para los epitopes HNA-1a, HNA-1b y HNA-2a. En los 4 niños se encontró IgG reactiva y/o factores aglutinantes; 2/3 sueros maternos fueron reactivos con los neutrófilos del cónyuge y de los hijos. Los complejos inmunes circulantes fueron positivos en 2/4 sueros negativos en 3/3 sueros maternos. Se encontró incompatibilidad materno-infantil en los 4 casos. Las 3 madres tenían igual fenotipo: homocigotos NA1/NA1, NB1+. En síntesis, se presenta el hallazgo de 4 casos con neutropenia inmune: 3/4 auto-inmune, 1/3 se asocia a complejos inmunes circulantes y 1/4 con neutropenia neonatal aloinmune. Resumen en inglés Auto or alloantibodies reactive with neutrophils define immune neutropenia. Alloimmune neonatal neutropenia is caused by maternal sensitization to paternal neutrophil antigens, resulting in IgG antibodies that are transferred to the fetus through the placenta. We present the studies in 4 children from 3 families with neutropenia of unknown origin (two of them were brothers). They were evaluated by flow cytometry in parallel with leukoagglutination. Reference values were e (mas) stablished for serum reactive IgG in healthy volunteers for three dilutions (1/2, 1/5 and 1/20), both for the autologous reaction (serum and cells of the same individual) and for the heterologous reaction (serum and cells of different individuals). Results were expressed by an index defined by the quotient of the mean fluorescence intensity of the patient's serum divided by that of the reference serum. Serum reactive/agglutinant factors and circulating immune complexes were evaluated in patients and parents serum. Neutrophil specific phenotypes were determined for HNA-1a, HNA-1b and HNA-2a. Reactive IgG/agglutinant factors were found in 4 children. Two maternal sera were reactive against paternal and/or children neutrophils. Circulating immune complexes were detected in 2/4 children sera and were negative in 3/3 maternal sera. Maternal/children incompatibility was detected in the four cases. The three mothers had the same phenotype: homozygous NA1/NA1, NB1+.

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USO DE COMPLEJOS INMUNES PARA CONFERIR PROTECCION EN TRICHINELLOSIS

MUÑOZ, JESUS; MUÑOZ, C R; DEL LLANO, T E; RAMOS DE, L P; FLORES, C G; ALVARADO, F E; MORENO, M A
1998-07-01

Resumen en español RESUMEN El presente trabajo se llevó a cabo en modelo experimental murino se utilizaron 60 ratones Balb/c de 3 meses de edad, los cuales fueron inmunizados con bandas de precipitación obtenidas de complejos inmunes formados por la interacción de antígeno-anticuerpo de triquina, las cuales fueron eluidas con Buffer de barbital pH 8.6, el esquema de inmunización fue aplicar 10mg de proteína cada 7 días por 4 ocasiones vía subcutánea, a la cuarta semana fueron reta (mas) dos con aproximadamente 100 larvas infectantes (LI) de T. spiralis por vía oral y se sacrificaron a la cuarta semana post-infección, se obtuvo suero pre-inmunización, de la cuarta semana post-inmunización y de la cuarta semana post-inoculación con LI de T. spiralis, para determinar la presencia de anticuerpos se realizó Dot-Elisa y Western Blot (WB). El tejido muscular obtenido del sacrificio de los animales experimentales y control se analizó por microscopio óptico. Por Dot-Elisa a la cuarta semana de post-inmunización de los 60 ratones, 50 resultaron positivos hasta títulos de 1:1020, y el grupo control de 10 ratones fue negativo. Por WB a la cuarta semana post-inmunización todos los animales inmunizados presentaron una banda de 45 kDa y el grupo control fue negativo, en los sueros post-inoculación de la semana de sacrificio todos los animales presentaron bandas en un promedio de 7 y predominio en la de 45 kDa, la carne de los inmunizados tuvo menor número de LI que el grupo control. En conclusión la inmunización con complejos inmunes de T. spiralis despertó una respuesta inmune humoral y probablemente un efecto protector al impedir el implante de las Larvas Infectantes (LI) de T. spiralis Resumen en inglés IMMUNE COMPLEXES IN TRICHINELLOSIS PROTECTION The animals were immunized with immune complexes formed in vitro in agar gels. The immunoprecipitates obtained from the reaction between soluble antigens from Trichinella spiralis and serum from infected animals, were eluted and used for immunization of animals. Mice were bleed weekly, they after seven weeks were challanged with infective larvae from T. spiralis. Antibody production against T. spiralis was detected by Western (mas) blot and the protection induced by immunization was evaluated by histology, counting the number and the integrity of muscular larvae. After five week's immunization anti-trichinella antibodies were detected by dot-ELISA and Western blot. Antigenic bands with different molecular weights were recognized by sera from most animals; being the prominent band at 45 kDa. Mice with antibodies against 45 kDa protein and challanged with T. spiralis had less number of muscular larvae than the non-immunized controls. In addition, immunized animals exhibited a strong reaction against Trichinella and muscular larvae were almost destroyed

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Evaluación del método de ELISA para detección de antígenos y complejos inmunes circulantes de Trypanosoma cruzi a través de un estudio de campo en una zona endémica de Argentina/ ELISA technique for detection of Trypanosoma cruzi circulating antigens and immune complexes in San Luis, Argentina

Petray, Patricia; Bonardello, Nelsa; Clark, Roberto; Agranatti, Mercedes; Corral, Ricardo; Grinstein, Saúl
1992-04-01

Resumen en español En una zona endémica de la República Argentina se llevó a cabo un ensayo de campo de la prueba inmunoenzimática ELISA para la detección de antígenos (cAg) y complejos inmunes circulantes (CIC) en sueros de pacientes chagásicos crónicos. Del total de 215 muestras de sangre analizadas, 51 fueron positivas para ELISA-CIC y 45 lo fueron para ELISA-cAg. De los 74 (34,32% de la población) sujetos considerados infectados con dos reacciones serológicas positivas, 49 (66 (mas) ,21%) presentaron CIC en suero, en tanto que en 43 (58,11%) de ellos se encontró cAg por ELISA. Solo en 2 casos serológicamente no reactivos, se detectaron inespecíficamente CIC y cAg. Dentro del grupo considerado no infectado, se observó reactividad inespecífica de bajo título por una de las pruebas serológicas en 16 (11,35%) de 141 individuos. Estos sueros arrojaron resultados consistentemente negativos por ELISA-CIC y cAg demostrando la utilidad de estos métodos de diagnóstico antigénico en casos de serología conflictiva. La determinación de fracciones antigénicas circulantes por ELISA en individuos chagásicos crónicos permite evidenciar la infección por T. cruzi de manera más directa que midiendo la respuesta inmune humoral en el huésped, presentando además mayor sensibilidad que el diagnóstico parasitológico clásico Resumen en inglés The ELISA technique for detection of T. cruzi circulating antigens (cAg) and immune complexes (CIC) in the sera of chronic chagasic patients was field-tested in a well-known endemic area of Argentina (San Luis province). Of 215 individuals screened, 51 were positive for ELISA-CIC and 45 for ELISA-cAg. Seventy four subjects were considered por T. cruzi-infected, as they showed Serologic reactivity at least by two different techniques. In this group, 49 (66.21%) were ELISA- (mas) CIC positive, whereas in 43 (58.11%) of them cAg was found by ELISA. Unspecific reactions were observed in only 2 cases with reactive serology for Chagas disease. Within the group considered as noninfected, a false-positive outcome was obtained at low dilution by one of the Serologic tests in 16 (11.35%) of 141 individuals. These sera yielded consistently negative results by ELISA-CIC and cAg, showing the utility of antigen detection in situations of conflictive serology. While antibody determination merely provides an indirect proof of infection, our ELISA tests for demonstration of T. cruzi-specific antigenic fractions in the host's circulation allow a parasitologic diagnosis in chronic patients, with higher sensitivity than that exhibited by traditional methods for detection of the whole parasite

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Modulación de la respuesta inmune: tendencias actuales/ Modulation of the immune response: current trends

Martínez Manrique, Clara Esther
2006-12-01

Resumen en español Se hizo una revisión sobre los inmunomoduladores, su modo de acción y clasificación, asumiendo estos criterios en los adyuvantes inmunológicos. Se valoró dentro de las tendencias actuales en la inmunomodulación, la conjugación de moduladores conocidos, la obtención y aplicación de otros de orígenes naturales o provenientes del sistema inmune como las citoquinas y como novedad la aplicación de la sustancia CM-95 tratada magnéticamente. Se dieron a conocer las t (mas) ecnologías utilizadas para la obtención de estas sustancias como: ADN recombinante, transfección de genes, técnicas de conjugación, así como el tratamiento magnético, entre otras. Estos enfoques nuevos han permitido disminuir la toxicidad de estas sustancias y aumentar su eficacia inmunológica, lo que posibilita establecer el balance entre eficacia e inocuidad de acuerdo con las normas establecidas para sus aplicaciones en la terapia de enfermedades o profilaxis, en la obtención de vacunas humanas y veterinarias de nueva generación y sueros inmunes. Resumen en inglés A review of immunomodulators, their mode of action and classification was made, assuming these criteria in the immunological adjuvants. The conjugation of known modulators, the obtention and application of other of natural origin or from the immune system, such as cytokines, and the application of the magnetically treated CM-95 substance as a novelty were assessed among the present trends in immunomodulation. The technologies used for the obtention of these substances, su (mas) ch as recombinant DNA, transfection of genes, conjugation techniques, and magnetic treatment, among others, were made known. These new approaches have allowed to reduce the toxicity of these substances and increase their immunological efficiency, allowing to establish a balance between efficacy and innocuousness, according to the norms established for their application in the therapy of diseases or prophylaxis, and in the obtention of human and veterinary vaccines of new generation and immune sera.

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Estudios sobre Trypanosoma rangeli Tejera, 1920: VIII. Respuesta a las reinfecciones en dos mamíferos/ Trypanosoma rangeli Tejera, 1920: VIII. Responses to reinfections in 2 mammals

Añez, N.; Velandia, J.; Rodríguez, A. M.
1985-06-01

Resumen en español Bajo condiciones experimentales se estudia el curso de la infección primaria y la respuesta a las reinfecciones por Trypanosoma rangeli en ratones albinos y Didelphis marsupialis. Durante el curso de la infección primaria en ratones, se observa una parasitemia relativamente baja y de corta duración. Los mismos muestran durante la primera reinfección una parasitemia escasa de cuatro días de duración, siendo resistentes a las sucesivas reinfecciones con T. rangeli. Lo (mas) s ejemplares de D. marsupialis exhiben una parasitemia de más larga duración, pero con un nivel de parásitos sanguícolas mucho menor que el detectado en el modelo ratón, siendo la respuesta a las reinfecciones similar a la observada en ratones. Se detectan anticuerpos hemaglutinantes en los sueros inmunes de ratones y Didelphis marsupialis, sometidos a la reinfección por T. rangeli. Se especula sobre la posible acción sinérgica de una respuesta inmune en el sitio de deposición en contra de las formas metacíclicas de T. rangeli y la acción de anticuerpos circulantes en contra de las formas sanguícolas, para explicar la resistencia de ambos modelos a las reinfecciones por T. rangeli. Resumen en inglés Under experimental conditions, the course of the infection and the response to the reinfection by Trypanosoma rangeli in mice and Didelphis marsupialis, are studied. During the initial infection the mice show a relatively low parasitaemia and a short patent period. A scanty parasitaemia level of four days length, was observed following the first reinfection, being the mice resistant to new reinfections by T. rangeli. In opossums a lower parasitaemia and a longer patent pe (mas) riod than that detected in mice, were observed during the initial infection. The response to reinfections in this mammal, was similar to that observed in mice. After reinfection with T. rangeli, haemagglutinant antibodies in immune-sera of both mice and opossums, were detected. The possible immune-response at the site of deposition against the metacyclic-forms of T. rangeli, and the action of circulating antibodies against the blood forms of the parasite, are speculated to explain the resistance of mice and opossums to the reinfection by T. rangeli.

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Estudio por Western Blot de sueros de pacientes con neuropatía epidémica

MUNÉ, MAYRA; ÁLVAREZ, MAYLING; RESIK, SONIA; SOTO, YUDIRA; MÁS, PEDRO; GUZMÁN, MARÍA GUADALUPE
1997-08-01

Resumen en español Se estudió la respuesta inmune de un grupo de pacientes con neuropatía epidémica y de individuos controles mediante la técnica de inmunoblotting frente a las proteínas del virus Coxsackie y a las proteínas de la cepa de efecto lento aislada en nuestro laboratorio. Se estudiaron 13 sueros de pacientes con neuropatía epidémica y 9 sueros controles. De los 13 sueros estudiados, 8 (61,5 %) reconocieron a la proteína VP1 y 2 sueros (15,3 %) a la proteína VP0 de la ce (mas) pa 47/93. De los 9 controles estudiados, 4 (44,4 %) reconocieron la proteína VP1 y 3 sueros (33,3 %) la proteína VP0 solamente. Con el antígeno preparado a partir de la cepa de efecto lento, en 5 (38,5 %) sueros de pacientes y 2 sueros (22,5 %) de controles se obtuvo una señal específica. Es de destacar en este último caso que la proteína observada tenía un peso molecular de 41 300 D, era de menor talla que la proteína precursora detectada frente a la cepa 47/93, que fue de 45 000 D. Resumen en inglés The immune response of a group of patients with epidemical neuropathy and of controls was studied by the immunoblotting technique against proteins of the Coxsackie virus and the proteins of slow effect isolated in our laboratory. 13 sera of patients with epidemical neuropathy and 9 sera of controls were studied. Of the 13 sera studied, 8 (61.5 %) recognized protein VPI and 2 sera (15.3 %) protein VP0 of the strain 47.93. Of the 9 controls studied, 4 (44.4 %) recognized pr (mas) otein VPI and 3 (33.3 %) protein VP0 only. With the antigen prepared from the slow effect strain it was obtained a specific signal in 5 (38.5 %) sera of patients and in 2 sera (22.5 %) of controls. It should be stressed that in this last case the protein observed had a molecular weight of 41 300 D, and that its size was smaller than that of the preceeding protein detected against the strain 47.93 was of 45 000 D.

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Transmisión congénita de Trypanosoma cruzi en ratas Wistar de segunda generación/ Congenital transmission of Trypanosoma cruzi in second generation Wistar rats

Moreno, Elio A; Ramírez A, Martha; Alarcón, Maritza E; Lugo de Yarbuh, Ana; Villarreal, Juana; Araujo, Sonia; Mogollón, Nora; González, Anajulia; Premoli, Gloria
2010-07-01

Resumen en español Se presentan los resultados de un estudio experimental sobre la transmisión congénita de Trypanosoma cruzi en crías de ratas albinas (Rattus norvegicus), cepa Wistar de segunda generación. El curso de la infección chagásica fue evaluado en las ratas infectadas inicialmente (RII) inyectadas con las formas metacíclicas del parásito, en las crías de la primera (C1ªG) y segunda generación (C2ªG), mediante pruebas de diagnóstico seroparasitológicas y molecular (P (mas) CR). En las RII se demostró infección aguda caracterizada por parasitemias patentes entre los 12 y 45 días post-inoculación (pi), e incremento en la respuesta inmune humoral con títulos desde 1:64 y 1:2048; en la fase crónica se evidencio ausencia de parasitemias y mantenimiento de una moderada respuesta humoral en el 100% de las madres. Las C1ªG no presentaron tripomastigotes en la sangre circulante, la prueba de IFI, reveló seropositividad apreciable en el 75% de los sueros. En las C2ªG, los exámenes directos de sangre y el hemocultivo, resultaron negativos; los xenodiagnósticos mostraron un 18,2% de positividad. Las pruebas serológicas empleadas (IFI y ELISA) detectaron un 31,8% y 34,1% anticuerpos circulantes anti-T. cruzi. La PCR aplicada a los sueros, presentó un bajo porcentaje de muestras positivas (6,8%) y en los tejidos (corazón y músculo esquelético) se observó una alta positividad de 54,5% y 45,4%, respectivamente. La presencia de formas flageladas en la sangre, la persistencia de la serología positiva por anticuerpos humorales transferidos vía materna y la permanencia de restos de ADN de T. cruzi en sueros y tejidos en un número importante de crías, confirma la infección congénita a su progenie, en segunda generación. Estos resultados son de gran importancia para una mejor comprensión de la epidemiología de la enfermedad de Chagas congénita. Resumen en inglés The results of the experimental study concerning the congenital transmission of Trypanosoma cruzi in second generation strain Wistar albino rats are presented. The course of the Chagas infection was evaluated in rats initially infected with the metacyclic forms of the parasite (RII) in first (C1stG) and second (C2ndG) generation offspring using parasitological, serological and molecular (PCR) diagnostic tests. In the RII, an acute infection characterized by patent parasit (mas) emias between 12 and 45 days post-inoculation and an increase in the humoral immune response with titers of 1:64 and 1:2048 in the chronic phase demonstrated the absence of parasitemia and maintenance of a moderate humoral response in 100% of the mothers. The C1stG did not show tripomastigotes in the blood circulation and the IIF test showed considerable seropositive in 75% of the sera. In C2ndG, direct blood and hemoculture exams performed were negative, while 18.2% of the xenodiagnosis were positive. The serological tests used (IIF and ELISA) detected 31.8% and 34.1% anti-T. cruzi circulating antibodies. The PCR applied to the serum presented a low percentage of positive (6.8%) samples and in tissues (heart and skeletal muscle) high positives of 54.5% and 45.4% respectively were observed. The presence of flagellated forms in the blood, the persistence of serological positive for humoral antibodies transferred by the mother and the permanence of remaining DNA of the T. cruzi in serum and tissues in a significant number of offspring confirm the congenital infection to their offspring in the second generation. These results are of great importance for the better understanding of the epidemiology of Chagas disease.

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Estudio de la protección pasiva inducida por el suero de vacunados con vax-SPIRAL (Vacuna Antileptospirósica Trivalente) en hámsters frente al reto con cepas virulentas de Leptospira canicola, copenhageni y mozdok/ Study of the Passive Protection induced by the serum of vaccinated people with vax-SPIRAL (Trivalent antileptospirosic vaccine) in Hámsters challenged with virulents strains of Leptospira canicola, copenhageni y mozdok

González, Marta; Rodríguez, Yoandra; González, Andrés; Medina, Roger; Batista, Niurka; Ferriol, Xenia; Ochoa, Rolando; Baró, Morelia; Armesto, Marlene; Sierra, Gustavo
2001-09-01

Resumen en español Como parte de los estudios de caracterización de la respuesta inmune inducida en vacunados con vax-SPIRAL (Vacuna Antileptospirósica Trivalente) se vacunaron 109 y 69 voluntarios pertenecientes a la Universidad Agraria y al Centro de Sanidad Agropecuaria respectivamente, pertenecientes al municipio San José de Las Lajas, provincia La Habana. Se realizaron dos muestreos de sangre: antes de la aplicación de la primera dosis (T0) y 21 días después de la segunda dosis ( (mas) T1). La IgG específica fue medida mediante un ELISA indirecto cuantitativo y su efecto protector se midió mediante un ensayo de protección pasiva en hámster. De acuerdo con el nivel de IgG específica medido por ELISA, se prepararon cuatro mezclas de sueros a evaluar. Entre las 18-24 h de inoculados los sueros, los hámsters se retaron frente a 1 000 -10 000 DL50 de los serovares canicola, copenhageni y mozdok, siendo observados durante 14 días. Coeficientes de correlación de 0,94 y 0,97 indicaron una fuerte relación entre el nivel de IgG y protección en el caso de canicola y mozdok respectivamente, para copenhageni se obtuvo un coeficiente de correlación de 0,83 indicativo de una moderadamente fuerte relación. El nivel de IgG específica medido en el suero de personas expuestas al riesgo natural está relacionado con la protección. Resumen en inglés As part of the characterisation studies of the human immune response induced in vaccinated people with vax-SPIRAL (Trivalent Antileptospirosic Vaccine), 109 and 69 voluntary people from the Universidad Agropecuaria and Centro Nacional de Sanidad Agropecuaria, Havana Province were vaccinated respectively. Two blood samples were taken, before vaccination (T0) and 21 days after the second dose (T1). The specific IgG response was measured by means a quantitative indirect ELIS (mas) A and its protective effect was evaluated by a passive protection test in hamsters. Taking into consideration the ELISA results four pools of sera were prepared and inoculated into the hamsters. They were challenge 18-24 hours later with 1000 -10 000 DL50 of virulent strains of serovars canicola, copenhageni and mozdok. The animals were observed during 14 days. The correlation coefficient of 0.94 and 0.97 indicating a relatively strong relationship between the IgG level and protection for canicola and mozdok respectively, for copenhageni a correlation coefficient equals to 0,83 was obtained indicating a moderately strong relationship. The specific IgG response of sera from risk people was related with protection.

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Validación de un ELISA para la cuantificación de IgG antipolisacárido capsular de Neisseria meningitidis serogrupo C en sueros de ratones/ Validation of the ELISA for quantifying capsular anti-polysaccharide IgG of Neisseria meningitidis of the serogroup C in mice sera

Cuello, Maribel; Acosta, Yanely; Martínez, Juan C; Cabrera, Osmir; Ochoa, Rolando; Balboa, Julio A; Soto, Carmen R; Martínez, Miguel E; Sierra, Gustavo
2001-12-01

Resumen en español Se desarrolló un ensayo inmunoenzimático de fase sólida (ELISA) indirecto para cuantificar anticuerpos IgG específicos antipolisacárido C en ratón, utilizando un prerrecubrimiento con Poli-L-lisina y luego el polisacárido capsular de Neisseria meningitidis serogrupo C (Instituto Finlay, La Habana, Cuba), para evaluar la respuesta inmune contra este componente en candidatos vacunales en estudios preclínicos. Como conjugado se utilizó anti-IgG ratón conjugado a fo (mas) sfatasa alcalina, el cual se une a los anticuerpos antipolisacárido C producidos en ratones. La reacción es evidenciada por la degradación del sustrato p-nitrofenilfosfato. La detectibilidad del ensayo fue de 123,74 U/mL y la especificidad fue alta. La precisión interensayo, intraensayo y total, así como las desviaciones de la recuperación, linealidad y paralelismo no sobrepasaron el 10%. El ELISA permitió cuantificar los anticuerpos antipolisacárido C inducidos en ratones tanto por candidatos vacunales conjugados, como por la vacuna VA-MENGOC-BC y el polisacárido C sin conjugar. Resumen en inglés An indirect enzyme-linked immunoabsorbent assay (ELISA) was developed to determine antibody anti-polysaccharide C mouse IgG. Polystyrene plates precoating with poly-L-lysine, then Neisseria meningitidis group C polysaccharide (Finlay Institute, Havana, Cuba) was used to evaluated the immune response against this component in a candidate vaccine in pre-clinical studies. Alkaline phosphatase conjugate was used for recognizing mouse antibodies against polysaccharide C. The e (mas) nzymatic reaction is evidenced by using the specific substrate p-nitrophenylphosphate. The detection limit of the assay was 123,74 U/mL, the specificity of assay was high. Intra-and interassay lack of precision, parallelism, linearity, and recovery were ± 10% of the expected values.

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Caracterización de antígenos de bajo peso molecular de Angiostrongylus costaricensis, reconocidos durante una infección experimental en roedores/ CHARACTERIZATION OF LOW MOLECULAR WEIGHT ANTIGENS OF Angiostrongylus costaricensis RECOGNIZED DURING AN EXPERIMENTAL INFECTION IN MICE

Abraham, Elizabeth S.; Schulz-Key, Hartwig; Geiger, Stefan M.
2004-01-01

Resumen en español La respuesta inmune hacia componentes de bajo peso molecular del antígeno somático de A. costaricensis fue investigada en el modelo animal experimental. Durante la fase crónica de la infección y mediante el Western blot, son detectados por la IgG e IgG1 tres antígenos inmunodominantes: uno de 20 otro de 15 y uno de 2 kDa respectivamente. Mediante el método de digestión de Edmann se obtuvo la secuencia de aminoácidos inicial de cada componente: para la banda de 15 (mas) kDa una secuencia con un 100% de homología con la enzima glutation-S-transferasa de Brugia malayi y Onchocerca volvulus, para el componete de 2kDa una secuencia con 95 % de homología con la proteína Ubiquitina, y para el compontente de 20 kDa una secuencia de trece aminoácidos, que no presenta homología con alguna proteína hasta ahora descrita. En general la reacción cruzada contra estos componentes es muy débil y en el caso particular del componente de 20 kDa no se detecta ninguna reacción cruzada. Se proponen futuros estudios con sueros humanos, para verificar la utilidad de dichos antígenos en el desarrollo de una prueba diagnóstica específica para la angiostrongiliosis abdominal Resumen en inglés The immune response to low molecular weight components of Angiostrongylus costaricensis somatic crude antigen was investigated. During the chronic phase of infection three immunodominant antigens: 20, 15 and 2 kDa, were recognized by IgG and IgG1 using the Western blot method. In order to obtain the initial amino acid sequences of each recognized antigen, the Edmann digestion method was utilized. The sequence of 15 kDa antigen was found to have 100% homology with the Glut (mas) ation-S-transferase enzyme of Brugia malayi and Onchocerca volvulus, and the sequence of 2 kDa antigen 95% homology with the Ubiquitine protein. For the 20 kDa antigen, a sequence of thirteen amino acids was obtained and it did not show homology to any protein described up to date. The cross reactivity to these components was weak, particularly to the 20 kDa component, to which no cross reactivity is detected. We propose further studies with human sera in order to investigate the usefulness of these antigen in the development of a specific diagnostic test for abdominal angiostrongylosis

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Evaluación de una bacterina homóloga contra la leptospirosis bovina/ Evaluation of an homologous bacterin against bovine Leptospirosis

Orozco Vega, Laura Elena; López Flores, Rafael; Moles y Cervantes, Luis Pedro; Quiroz Valiente, Jorge
2005-04-01

Resumen en español Se utilizaron 48 hembras bovinas adultas, asignadas a 6 grupos, con el objetivo de caracterizar la respuesta inmune inducida en vacas lactantes por una bacterina homóloga formulada con diferentes adyuvantes. Se les administró por vía intramuscular 2 mL de la bacterina formulada con Leptospira interrogans serovares uam, wolffi, hardjo, bratislava, grippotyphosa y panama adicionada con diferentes adyuvantes como: hidróxido de aluminio, adyuvante completo de Freud, adyuv (mas) ante incompleto de Freud, vitaminas liposolubles, bacterina más desparasitación con levamisol. Al grupo control solo se le administró bacterina. La inmunización se realizó en 2 ocasiones con diferencia de 28 d. Cada 7 d durante el primer mes posvacunación y posteriormente cada 28 d durante 8 meses se realizaron muestreos sanguíneos. Los sueros se analizaron por aglutinación microscópica. Los resultados se transformaron a Log10 y se analizaron por medio de los procedimientos para modelos no lineales y modelos lineales generales del programa estadístico SAS. Mediante el modelo de predicción (Wood) se estimó el período de mayor respuesta. La bacterina no produjo alteración en las constantes fisiológicas, ni en producción láctea. Los serovares de Leptospira interrogans que indujeron mayores títulos fueron uam, hardjo y wolffi. Se determinó diferencia estadística entre tratamientos y entre serovariedades. Resumen en inglés 48 adult bovine females dividided into 6 groups were used aimed at characterizing the immune response induced in breastfeeeding cows by an homologous bacterin formulated with different adjuvants. They were intramuscularly administered 2 milliliters of a bacterin formulated with Leptospira interrogans serovars uam, wolffi, hardjo, bratislava, grippotyphosa and panama added with different adjuvants, such as aluminum hydroxide, Freud’s complete adjuvant, Freud’s (mas) incomplete adjuvant, liposoluble vitamins, bacterin plus disparasitization with levamisol. The control group was administred only with bacterin. Immunization took place in 2 occasions at a time interval of 28 days. Blood samples were taken every 7 days during the first month after vaccination, and every 28 days for the next 8 months. All the sera were analyzed by the microscopic agglutination test. The results were transformed into Log10 and they were analyzed by NLIN and GLM of SAS. The period of greater response was estimated by the prediction model (Wood). The bacterin did not produce alteration either in the physiological constants, or in milk production. The serovars of Leptospira interrogans that induced higher titers were uam, hardjo and wolffi. The statistical difference between treatments and between serovars was determined.

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Niveles de anticuerpos bactericidas frente a meningococo C tras la vacunación de niños de 2 a 6 años de edad en Andalucía/ Levels of bactericidal antibodies against meningococcus C following the vaccination of children between 2 and 6 years of age in Andalusia

Delgado Torralbo, Elena; Vazquez Moreno, Julio A.; García León, Javier; González Enríquez, Jesús; Martínez Navarro, Ferrán; Berrón Morato, Sonsoles; Mayoral Cortés, José María; Rubin Gómez, Mª. Angeles; Méndez Martínez, Camila; Cortés Majó, Margarita; Chaves Caballero, Mónica; Bernal González, Mª Luisa
2000-08-01

Resumen en español FUNDAMENTO: En 1997 el 18,5% de los casos de Enfermedad Meningocócica por serogrupo C en Andalucía fueron niños de 2 a 4 años de edad; edades donde respuesta inmune inicial y duración de la vacuna antimeningocócica de polisacárido capsular A+C, es menor que en edades superiores. Se diseñó una investigación para medir la respuesta inmune producida por esta vacuna, en niños de 2 a 6 años de edad, y compararla con la inmunidad natural presente en niños no vacuna (mas) dos. MÉTODOS: I.- Doble estudio de seguimiento: a) grupos de niños previamente vacunados y grupos control, b) grupo de niños que iba a ser vacunado, para análisis pre y postvacunal (1, 6 y 12 meses) y grupo control. II.- La actividad bactericida se midió según protocolo estandarizado del CDC frente a cepa de N. meningítidis C-11. Los sueros con título de actividad bactericida (TAB) > o = 1:8 se consideraron protectores. RESULTADOS: Al mes y a los 2 meses de vacunarse la proporción de TAB > o = 1:8 era significativamente superior a la del grupo control (65,5% y 73,9% frente a 2,2% y 12%. En el prevacunal y en el postvacunal a los 6, 7, 12 y 13 meses no se observó diferencia significativa entre vacunados y controles. CONCLUSIONES: Las diferencias entre vacunados y no vacunados 1 y 2 meses después de la vacunación indican seroconversión en los vacunados. Para el grupo de edad de 2 a 6 años la actividad bactericida adquirida declina rápidamente, ya que a los 6 meses dejan de observarse diferencias con el grupo control. Resumen en inglés BACKGROUND: In 1997, 18.5% of the cases of Meningococcal Disease caused by serogroup C in Andalusia were children between 2 and 4 years of age; ages where the initial immune response and the duration of the capsular A+C meningococcal polyssacharide vaccine is less than in older age groups. Research was designed in order to measure the immune response produced by this vaccine in children from 2 to 6 years of age and to compare it with the natural immunity present in unvacc (mas) inated children. METHODS: I. Dual monitoring study: a) groups of children vaccinated previously and control groups, b) groups of children who were going to be vaccinated, for pre- and post-vaccination (1, 6 and 12 months) analysis and a control group. II. The bactericidal activity was measured according to the standardised protocol of the CDC with regard to the strain of N. meningitidis C-11. The sera with bactericidal activity (TAB) > 1:8 were considered to be protective.. RESULTS: 1 and 2 months following vaccination, the proportion of TAB > 1:8 was significantly higher than that of the control group (65.6% and 73% in comparison to 2.2% and 12%). In the pre-vaccine and post-vaccine (after 6, 7, 12 and 13 months) verification, no significant difference between vaccinated individuals and controls was observed. CONCLUSIONS: The differences between vaccinated and unvaccinated individuals 1 and 2 months following vaccination indicate seroconversion in the vaccinated individuals. For the age group of between 2 to 6 years of age, the bactericidal activity acquired decline quickly, as, after 6 months, differences between this group and the control group are no longer observed.

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Niveles de anticuerpos bactericidas frente a meningococo C tras la vacunación de niños de 2 a 6 años de edad en Andalucía/ Levels of bactericidal antibodies against meningococcus C following the vaccination of children between 2 and 6 years of age in Andalusia

Delgado Torralbo, Elena; Vazquez Moreno, Julio A.; García León, Javier; González Enríquez, Jesús; Martínez Navarro, Ferrán; Berrón Morato, Sonsoles; Mayoral Cortés, José María; Rubin Gómez, Mª. Angeles; Méndez Martínez, Camila; Cortés Majó, Margarita; Chaves Caballero, Mónica; Bernal González, Mª Luisa
2000-08-01

Resumen en español FUNDAMENTO: En 1997 el 18,5% de los casos de Enfermedad Meningocócica por serogrupo C en Andalucía fueron niños de 2 a 4 años de edad; edades donde respuesta inmune inicial y duración de la vacuna antimeningocócica de polisacárido capsular A+C, es menor que en edades superiores. Se diseñó una investigación para medir la respuesta inmune producida por esta vacuna, en niños de 2 a 6 años de edad, y compararla con la inmunidad natural presente en niños no vacuna (mas) dos. MÉTODOS: I.- Doble estudio de seguimiento: a) grupos de niños previamente vacunados y grupos control, b) grupo de niños que iba a ser vacunado, para análisis pre y postvacunal (1, 6 y 12 meses) y grupo control. II.- La actividad bactericida se midió según protocolo estandarizado del CDC frente a cepa de N. meningítidis C-11. Los sueros con título de actividad bactericida (TAB) > o = 1:8 se consideraron protectores. RESULTADOS: Al mes y a los 2 meses de vacunarse la proporción de TAB > o = 1:8 era significativamente superior a la del grupo control (65,5% y 73,9% frente a 2,2% y 12%. En el prevacunal y en el postvacunal a los 6, 7, 12 y 13 meses no se observó diferencia significativa entre vacunados y controles. CONCLUSIONES: Las diferencias entre vacunados y no vacunados 1 y 2 meses después de la vacunación indican seroconversión en los vacunados. Para el grupo de edad de 2 a 6 años la actividad bactericida adquirida declina rápidamente, ya que a los 6 meses dejan de observarse diferencias con el grupo control. Resumen en inglés BACKGROUND: In 1997, 18.5% of the cases of Meningococcal Disease caused by serogroup C in Andalusia were children between 2 and 4 years of age; ages where the initial immune response and the duration of the capsular A+C meningococcal polyssacharide vaccine is less than in older age groups. Research was designed in order to measure the immune response produced by this vaccine in children from 2 to 6 years of age and to compare it with the natural immunity present in unvacc (mas) inated children. METHODS: I. Dual monitoring study: a) groups of children vaccinated previously and control groups, b) groups of children who were going to be vaccinated, for pre- and post-vaccination (1, 6 and 12 months) analysis and a control group. II. The bactericidal activity was measured according to the standardised protocol of the CDC with regard to the strain of N. meningitidis C-11. The sera with bactericidal activity (TAB) > 1:8 were considered to be protective.. RESULTS: 1 and 2 months following vaccination, the proportion of TAB > 1:8 was significantly higher than that of the control group (65.6% and 73% in comparison to 2.2% and 12%). In the pre-vaccine and post-vaccine (after 6, 7, 12 and 13 months) verification, no significant difference between vaccinated individuals and controls was observed. CONCLUSIONS: The differences between vaccinated and unvaccinated individuals 1 and 2 months following vaccination indicate seroconversion in the vaccinated individuals. For the age group of between 2 to 6 years of age, the bactericidal activity acquired decline quickly, as, after 6 months, differences between this group and the control group are no longer observed.

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Ascaris lumbricoides: heterogeneidad en la expresión de epitopes ABO/ Ascaris lumbricoides: heterogeneity in ABO epithopes expression

Ponce-León, Patricia; Foresto, Patricia; Valverde, Juana
2006-12-01

Resumen en español Ascaris lumbricoides puede presentar los mismos epitopes del Sistema ABO que sus hospederos. El objetivo fue estudiar la expresión de epitopes ABO en el parásito por la técnica de Inhibición de la Aglutinación usando diferentes anticuerpos monoclonales y sueros policlonales. Se trabajó con 27 extractos parasitarios (14 de pacientes A, 2 AB, 1 B y 10 de Grupo ABO desconocido). Los extractos de pacientes A, AB y Grupo desconocido fueron enfrentados a anticuerpos monoc (mas) lonales y suero policlonal de especificidad A; y los de pacientes B, AB y Grupo desconocido a anticuerpos monoclonales y suero policlonal de especificidad B. Se hizo la Inhibición Semicuantitativa a los extractos que inhibieron la aglutinación de algún anticuerpo. Se observó que el 50% de los extractos enfrentados a anticuerpos de especificidad A y el 46% de los enfrentados a anticuerpos de especificidad B inhibieron la aglutinación de forma significativa. Ningún extracto inhibió a la totalidad de los anticuerpos. Todos los anticuerpos reaccionaron con algún extracto, excepto un anticuerpo de especificidad B. La actividad ABO del extracto fue independiente de la clase de inmunoglobulina, concentración y título del anticuerpo; Se observó que sólo depende de la unión del anticuerpo al epitope al cual está dirigido. La heterogeneidad en la expresión de epitopes ABO de A. lumbricoides podría estar involucrada en la evasión de la respuesta inmune del hospedero. Las técnicas de Inhibición utilizadas son sensibles, sencillas, rápidas y económicas. Se concluye que el uso de diferentes anticuerpos monoclonales permite la mejor definición de la especificidad antígeno-anticuerpo. Resumen en inglés Ascaris lumbricoides and its hosts can present the same ABO System epithopes. The aim was to study ABO epithopes expression in A.lumbricoides by Inhibition Agglutination Test using different monoclonal antibodies and policlonal sera. We worked with 27 parasite extracts (14 extracts from A Group patients, 2 AB Group 1, B Group and 10 from unknown ABO Group patients). Inhibition Agglutination Test was made facing the extracts from A, AB and unknown ABO Group patients agains (mas) t monoclonal antibodies and policlonal serum of A specificity and the extracts from B, AB and unknown ABO Group patients against monoclonal antibodies and policlonal serum of B specificity. The Semiquantitative Test was made with the extracts which inhibited the agglutination of any antibody. The 50% of the parasite extracts faced against A specificity antibodies and the 46% of the parasite extracts faced against B specificity antibodies significantly inhibited the agglutination in the Semiquantitative Test. No extract inhibited the totality of the antibodies. All the antibodies reacted with some extract, except one antibody of B specificity. The ABO activity in the extracts was independent of the antibody´s immunoglobulin class, titre and concentration and it only was dependent on the antibody union with the epithope at which the antibody is directed. The heterogeneity in the ABO epithopes expression of A.lumbricoides might be involved in the escape of the host´s immune response. The used Inhibition Tests are sensitive, simple, rapid and economic.We conclude that the use of different antibodies alows the best definition of the antigen-antibody specificity.

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Aspectos inmunológicos en el diagnóstico y control de la Epidemitis contagiosa del carnero por Brucella ovis/ Imunological aspects inthe diagnosis and control of contagious epidymitis of rams by Brucella ovis

ESTEIN, S.M.
1999-01-01

Resumen en español Brucella ovis es el agente etiológico de la epididimitis contagiosa de los carneros, enfermedad infectocontagiosa que ocasiona infertilidad en el carnero y ocasionalmente abortos en la oveja. El control de esta enfermedad se apoya en la eliminación de los machos con diagnóstico serológico y/o séminocultivo positivo, y en la vacunación de los animales sanos en lugares de alta prevalencia. La mejor vacuna frente a la brucelosis ovina por B. ovis, es B. melitensis Rev (mas) . 1, una cepa atenuada de Brucella melitensis. Sin embargo ésta vacuna heteróloga induce una respuesta serológica que interfiere con la interpretación de las pruebas serológicas utilizadas. B. ovis es una especie naturalmente rugosa; carece de la cadena O del lipopolisacárido. Las proteínas de la membrana externa han sido objeto de estudio de varios grupos de investigación por su utilidad como antígenos para el diagnóstico y en la pruebas de protección. Un extracto salino obtenido por calentamiento de B. ovis, posee el lipopolisacárido rugoso y varias proteínas, siendo más abundante el grupo 3 de las proteínas de la membrana externa. Las técnicas más eficientes para el diagnóstico de la infección por B. ovis, son la inmunodifusión doble bidimensional en gel de agar, la fijación del complemento y ELISA. Como antígeno, el extracto salino ha dado los mejores resultados en las tres pruebas; sin embargo se ha observado reacción cruzada con sueros de animales infectados por B. melitensis o vacunados con B. melitensis Rev. 1. Existe menos información disponible respecto de los antígenos internos de B. ovis. Recientemente, se ha desarrollado un ELISA indirecto utilizando la proteína periplásmica BP26 con utilidad para el diagnóstico de la infección por B. ovis, ya que permite diferenciar los carneros infectados de los vacunados. La identificación de los antígenos de B. ovis capaces de inducir una respuesta inmune protectora es de interés para el desarrollo de vacunas subcelulares que no presenten las desventajas de Rev. 1. Con ese objetivo se han desarrollado ensayos de inmunización pasiva con mezclas de anticuerpos monoclonales anti-proteínas de la membrana externa y anti-lipopolisacárido rugoso que han otorgado protección en el ratón contra B. ovis Resumen en inglés Brucella ovis is the aethiological agent of ram contagious epididymitis, an infectious disease causing reproductive failure in sheep. Control measures include elimination of rams found positive in serological tests and/or bacteriological culture of semen, and vaccination when the prevalence is high. The principal vaccine used against ovine brucellosis is B. melitensis Rev. 1, a live attenuated strain of B. melitensis. However Rev. 1 evokes antibodies interfering with the (mas) interpretation of serological tests used to diagnose infection by B. ovis and B. melitensis. B. ovis is a natural rough species so lacks O polisaccharide chain. The outer membrane proteins of B.ovis have been studied by several groups searching for antigens useful for diagnosis and protection. A hot saline extract fron B. ovis contains rough lipopolysaccharide and several proteins, including abundant group 3 outer membrane proteins The most efficient and widely used tests for serodiagnosis of B. ovis infection are double gel diffusion, complement fixation test and ELISA. Hot saline extract has provided best diagnostic results in all tests. However some cross-reactivity in these tests can be seen with sera of sheep naturally infected with B. melitensis or after B. melitensis Rev. 1 vaccination. Less information is available on internal B. ovis antigens. Recently, an indirect ELISA using BP26 (periplasmic protein) has been developed for the differentiation of infected and vaccinated rams. The identification of B. ovis antigens able to elicit a protective immune response is of great interest for the development of subcellular vaccines avoiding the drawbacks of living attenuated vaccine. In the mouse model, passive protection experiments with mixtures of anti-outer membrane proteins and rough lipopolysaccharide monoclonal antibodies have shown to protect against B. ovis infection

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Utilización de la autorradiografía en la detección de antígenos predominantes de Trichinella spiralis en tres modelos experimentales/ WESTERN BLOT AUTORADIOGRAPHY IN THE DETECTION OF DOMINANT ANTIGENS OF Trichinella spiralis IN THREE EXPERIMENTAL ANIMALS MODELS

MORENO CARCIA, MARIA ALEJANDRA; RAMOS DE LEON, MARIA PATROCINIO; MUÑOZ ESCOBEDO, JESUS
2001-01-01

Resumen en español En el presente estudio se llevó a cabo la detección de antígenos predominantes de Trichinella spiralis en 3 modelos experimentales (Rata, ratón y conejo), mediante Western blot (WB) autorradiografía. A los animales experimentales se les administró larvas infectantes del parásito y se sangraron pre-inoculación y a la cuarta semana postinfección. El AST (Antígeno soluble de Trichinella) se obtuvo a partir de larvas de músculo de rata experimentalmente infectadas. (mas) Con el AST se realizaron corridas electroforé-ticas en condiciones reductoras, los geles no teñidos fueron transferidos a papel de nitrocelulosa (NC), los anticuerpos unidos a papel de NC se marcaron con Proteína A de Staphylococcus aureus (SPA) y las bandas inmunorreactivas se observaron por autorradiografía. En WB se encontró que los animales de las tres especies, infectados con T. spiralis reconocen varios componentes antigénicos con rango de peso molecular de 29-97 kDa con predominio de un triplete de 50 kDa, 47 kDa y 45 kDa en el 100% de los sueros estudiados Resumen en inglés In this study, the detection of dominant antigens of Trichinella spiralis in three experimenta modeis (rat, mouse and rabbit), was carried out by Western Blot autoradiography (WB). Healthy animals were considered as controls. Experimenta animals were infected with infective larvae of T. spiralis: Animals were bleed before inoculation and at the fourth week post infection. The tri-chinella soluble antigens (AST) were obtained from muscles of experimentally infected rats. T (mas) he AST were separated by reducing electrophoresis. Proteins in not stained gels were transferred to nitrocellulose paper sheets (NC), antibodies linked to NC were labeled with Staphylococcus aureus protein A SPA y (SPA) and the immune reactive bands were observed by autoradiography. By WB, T. spiralis infected animals recognized several antigenic componentes with a molecular weight ranging from 29 to 97 kDa, with dominant bands at 50, 47 and 45 kDa observed in 100% of studied sera. All controls were negative

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Títulos de anticuerpos postvacunales en équidos inmunizados con la cepa tc-83 del virus de la encefalitis equina Venezolana/ Post- vaccination antibody titles in equines vaccinated with TC83 strain of the Venezuelan equine encephalitis virus

Valero, Nereida; Arias, Julia; Pérez, Mario; Medina, Alberto; Rodríguez, Eliseo; Nardone, María
2007-02-01

Resumen en español A raíz de la última epidemia de Encefalitis Equina Venezolana (EEV) ocurrida en Venezuela en 1995, que afectó a équidos y humanos del estado Zulia y otras entidades del país, se implementó el reforzamiento de los programas de vigilancia epidemiológica para la prevención y control de las encefalitis equinas. Se tomó como medida eficaz la implementación de nuevos ciclos de inmunización sistemática de los équidos en las zonas de riesgo. Para evaluar la duración (mas) de la inmunidad proporcionada por la vacuna a base de virus atenuado, cepa TC-83, utilizada en el programa de inmunización, se analizaron 662 muestras séricas de équidos vacunados en diferentes períodos (194 con dos años después de vacunados, 412 con un año y 56 con seis meses), sin antecedentes de enfermedad y procedentes de diferentes Municipios del estado Zulia, Venezuela. Las muestras fueron analizadas mediante la técnica de inmunoensayo enzimático (ELISA) para determinar títulos de anticuerpos IgG anti-EEV. Se detectó 39,8% (164/412) de sueros positivos en los animales con un año de vacunación, de los cuales al 60,2% no se les detectaron títulos de anticuerpos. Así mismo, se detectó un 95,9% (186/194) de équidos con dos años de vacunación sin inmunidad anti-EEV. De los 56 équidos con 6 meses de vacunados, 48 (87,7%) mostraron altos títulos de anticuerpos. Los resultados evidencian una pérdida de la inmunidad anti-EEV relacionada con el tiempo post vacunal y una efectiva respuesta en los équidos con seis meses de inmunización, sugiriendo una pronta revisión del programa de vacunación específicamente en cuanto a la evaluación del tiempo de duración de la actividad antigénica y/o posibles fallas en la aplicación de la misma Resumen en inglés As a result of the last Venezuelan equine encephalitis epizoodemic (VEE), happened in Venezuela during 1995 that affected equidae and humans of Zulia State and another states of the country, the reinforcement of epidemiological surveillance programs for the prevention and control of equine encephalitis was stablished. As an efficient measure, the new cycles implementation of systematic equine immunization in the risk areas was taken. In order to evaluate the duration of t (mas) he immunity with a TC-83 strain attenuated virus vaccine, used in the vaccination program, 662 equidae sera samples, vaccinated at different times (194 with two years, 412 with a year and 56 with 6 months postvaccinated) without disease precedents and from different municipalities of Zulia State, Venezuela, were analyzed through an immune enzymatic assay (ELISA) to determine IgG anti VEE antibodies titles. A 39.8% (164/412) of positive sera in one year postvaccinated animals was detected, from which 60.2% do not showed antibodies titles. Furthemore, a 95.9% (186/194) equidae with two years postvaccinated without immunity to anti-VEE were detected. From the 56 equidae with 6 months postvaccinated, 48 (87.7%) showed high antibodies titles. The results demonstrated a lack of anti-VEE immunity, suggesting a prompt revision of the vaccination program specifically related to the evaluation of the antigenic’s activity length time and/or possible faults in its application

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Seroprevalencia de la toxoplasmosis en mujeres que asistieron al Hospital “Dr. Rafael Gallardo”. Coro, estado Falcón/ Toxoplasmosis seroprevalence in women who attended the “Dr. Rafael Gallardo” hospital at Coro, Falcon State

Martínez Méndez, Dilia; Martínez Leal, Eustacia; Oberto Perdigón, Lairet; Navas Yamarte, Patricia
2009-06-01

Resumen en español En Falcón, no se han realizado estudios relacionados con la toxoplasmosis. La finalidad de este estudio es determinar la prevalencia de anticuerpos anti-Toxoplasma gondii tipo IgM e IgG, en mujeres no embarazadas que acudieron al hospital “Dr, Rafael Gallardo”. El diagnóstico se hizo a través de inmunoensayo enzimático. El 85,5% resultaron negativas para la presencia de ambos anticuerpos, 14,3% mostraron valores positivos de IgG y 0,37% tuvo valores positivos para I (mas) gM. Se descartó la presencia de infección activa en los pacientes que resultaron IgG(+). La paciente IgM(+) se manejó como primoinfección. La baja prevalencia encontrada puede deberse a escasa exposición a factores de riesgo o al subregistro. Hacer el diagnóstico precoz permite iniciar medidas profilácticas que reduzcan la transmisión. El estudio serológico debe ser extendido a mujeres embarazadas y complementado con los datos epidemiológicos Resumen en inglés Studies related with toxoplasmosis have not been done at Falcon State, Venezuela. The aim of this study was to determine the IgM and IgG type anti-Toxoplasma gondii antibody prevalence in non pregnant women who attended the “Dr. Rafael Gallardo” Hospital. Diagnosis was made through an immune-enzymatic assay. Of the sera tested, 85.5% were negative for both antibodies; 14.27% of the sera were positive for IgG  and 0.37% for IgM. The presence of active infection was reje (mas) cted in the IgG(+) patients. The one patient who was IgM positive was considered as recently infected. The low prevalence found may be due to scarce exposure to risk factors, or to a sub registration. An early diagnosis will allow initiating prophylactic measures that reduce transmission. Serologic studies should be extended to pregnant women and complemented with epidemiological data

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Respuestas inflamatorias y de anticuerpos contra Cladophialophora carrionii en caprinos/ Inflamatory and Antibody Responses against Cladophialophora carrionii in Goats

Martínez, Eustacia Coromoto; Rey-Valeirón, Catalina; Romero, Hilda; Yegres, Francisco
2006-03-01

Resumen en español Cladophialophora carrionii es un hongo dimórfico con melanina que causa en humanos una micosis profunda, localizada y crónica llamada cromomicosis, y se adquiere a través de la inoculación con espinas de cactáceas infectadas. El estado Falcón es una zona endémica para esta enfermedad, donde las poblaciones están integradas principalmente por campesinos criadores de caprinos. El objetivo de este trabajo fue evaluar la respuesta inmunitaria humoral e inflamatoria co (mas) ntra C. carrionii en caprinos con el fin de conocer la interacción hospedador-parásito en un animal usualmente considerado como resistente a la infección, a pesar de su exposición permanente a las espinas infectadas. Se inocularon seis cabritos con 1×10(6) células de C. carrionii, vía subcutánea, en la tabla del cuello. Se midió la temperatura corporal de cada animal y se tomaron muestras de sangre completa y suero para análisis hematológicos y ensayos inmunoenzimáticos (ELISA) dos veces a la semana. Se midió el diámetro de la piel 24 y 48 horas después de la inoculación. La respuesta inflamatoria en el sitio de inoculación fue notoria a las 48 horas. No hubo respuesta significativa de anticuerpos en los animales inoculados a partir de los 50 días post-inoculación. Se confirma que la respuesta celular es importante en la resistencia contra C. carrionii, pero la respuesta de anticuerpos parece no ser relevante en esta especie animal. Resumen en inglés Cladophialophora carrionii is a dimorphic fungus with melanin which causes a deep, localized and chronic mycosis in humans, named chromomycosis, acquired through inoculation with cactuses infected-spines. Falcon state is an endemic zone to this disease, where human populations make use of goat breeding as their main way of living. The objective of this work was to evaluate both humoral immune and inflammatory responses against C. carrionii in goats to improve knowledge ab (mas) out host-parasite interactions in a species usually considered as infection-resistant, in spite of permanent exposition to infected spines. Six kids were inoculated with 1 ×10(6) cells of C. carrionii, by subcutaneous route on the neck. Blood and sera samples for hematological and immunoenzimatic tests were taken and body temperature was also measured. The diameter of the inoculated skin was also evaluated 24 and 48 hours post-inoculation. Inflammatory response was considerable at 48 hours. There was no valuable response of antibodies. It is established that inflammatory response is important in resistance against C. carrionii, but antibody response seems not to be relevant for this animal specie.

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Obtención de extractos de membrana externa de Vibrio cholerae O1, mediante el uso de diferentes detergentes/ Obtaining Vibrio cholerae 01 outer membrane extracts with different detergents

Pérez, José Luis; González, Yamisley; Año, Gemma; Cedré, Bárbara; Valmaseda, Tania; Alvarez, Maydelis; Serrano; Millián, Ernesto; Fariñas, Mildrey; Talavera, Arturo; García, Luis
2006-04-01

Resumen en español En la actualidad existen dos variantes principales de vacunas orales contra el cólera: una basada en células inactivadas de diferentes biotipos y serotipos y otra basada en la administración de cepas vivas genéticamente atenuadas. Una vacuna por subunidades pudiera ser una variante muy atractiva. Este trabajo describe la purificación parcial y caracterización preliminar de extractos de proteínas de membrana externa-lipopolisacárido (PME-LPS), obtenidos a partir de (mas) Vibrio cholerae O1, con el interés de seleccionar un proteoliposoma que posteriormente será estructurado en forma de cocleatos para su uso por vía oral en humanos. Las preparaciones fueron obtenidas a través del uso de diferentes detergentes. La cantidad de LPS en cada preparación fue estimada mediante la determinación de las unidades endotóxicas en el ensayo del Limulus (LAL). La composición de cada muestra fue evaluada mediante SDS-PAGE y Dot Blot. La inoculación intranasal (IN) en ratones Balb/c se utilizó para la evaluación de la inmunogenicidad de las preparaciones, y la respuesta inmune fue determinada por ELISA y el título de anticuerpos vibriocidas. El tamaño molecular de la preparación con mejores resultados en inmunogenicidad se estimó mediante la cromatografía en Sephacryl S-1000. Se obtuvieron diferentes perfiles electroforéticos de acuerdo con el tipo de detergente utilizado. El LPS fue identificado en todas las preparaciones y aquella obtenida con el SDS al 15% mostró la más baja relación proteínas/LPS y los mejores resultados en los ensayos de inmunogenicidad. Adicionalmente se comprobó que su tamaño molecular es similar al observado en el proteoliposoma de VAMENGOC- BC. La preparación obtenida con el SDS al 15% constituye un proteoliposoma, con capacidad para estimular altos niveles de anticuerpos IgG anti-LPS y altos títulos de anticuerpos vibriocidas, luego de su administración por vía intranasal en ratones. Estos resultados constituyen un importante paso en las investigaciones dirigidas a la obtención de una vacuna por subunidades, como alternativa preventiva contra el cólera. Resumen en inglés Two oral vaccine variants have been developed to prevent cholera infection: one from genetically attenuated strains, and the other one from inactivated whole cells. A subunit vaccine could be another very attractive alternative. In this report, we describe the partial purification and preliminary characterization of V. cholerae O1 Outer Membrane Protein-Lipopolysaccharide (OMP-LPS) complexes, to select a proteoliposome that could be administered orally in humans as a coch (mas) leate. Preparations were obtained using different detergents. The quantity of LPS was estimated by determination of endotoxic units using Limulus test (LAL). The composition of the samples was visualized by SDS-PAGE and dot blot assay. Balb/c mice were inoculated intranasally (IN) and the immune response was evaluated using ELISA and vibriocidal antibody titer assay. The molecular size of the preparation giving the best results for immunogenicity assays was estimated by chromatography on Sephacryl S- 1000. Different electrophoretic profiles were obtained according to the type of detergent used. LPS was identified in all the preparations evaluated. The preparation obtained with 15% SDS showed the lowest OMP/LPS relation, the best results for the immunogenicity assay and a similar molecular size when compared to VA-MENGOC-BC proteoliposome. These results are very stimulating and constitute a very important step for research to obtain a subunit vaccine as a preventive alternative against cholera.

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Leptospirosis en camélidos sudamericanos. Estudio de prevalencia serológica en distintas regiones de la Argentina/ Leptospirosis in south-american camelids. A study on the serological prevalence in different regions of Argentina

LLORENTE, P.; LEONI, L.; MARTINEZ VIVOT, M.
2002-01-01

Resumen en español Se evaluó la seroprevalencia en Camélidos Sudamericanos de Leptospirosis, zoonosis de distribución mundial, producida por espiroquetas patógenas del género Leptospira. Se examinaron 494 animales (llamas, guanacos y vicuñas), clínicamente sanos sin vacunar, de diferentes regiones geográficas de la República Argentina. Se utilizó la técnica, serovar específica, de microaglutinación (MAT). El estudio reveló prevalencias entre 47.3 y 96.2% en llamas, entre 0 y 1 (mas) 3% en guanacos y entre 9 y 62.8% en vicuñas. De los serovares que se usaron como antígeno en las determinaciones, los que más frecuentemente reaccionaron con los anticuerpos séricos de los camélidos, fueron copenhageni y castellonis Resumen en inglés Leptospirosis is a zoonotic infectious disease, affecting wild and domestic animals and human beings, caused by pathogenic spirochetes, spread world wide, belonging to the genus Leptospira. It is transmited by direct contact with infected animal urine or tissues, and indirectly through contaminated water and soil. Leptospirosis has a negative economic impact on porcine and bovine productions. It causes abortions, stillbirths, placental retention, infertility and chronical (mas) renal deficiency, causing disturbance of flow milk and quality in dairy cattle. Studies on south-american camelids productive aspects, have increased during the last decades, in order to promote alternative regional economies. There exist three species in Argentina, llama (Lama glama), guanaco (Lama guanicoe) and vicuña (Vicugna vicugna). The knowledge of physiological parameters and susceptibility and immune response to infectious agents of these animals, are required to improve their breeding efficiency. Leptospirosis is an infectious disease, which may affect reproduction efficiency. Leptospira antibody prevalence in 494 sera obtained from healthy non vaccinated llamas, vicuñas and guanacos from different geographic zones in Argentina, was evaluated. The serovar specific microaglutination test (MAT) was applied, using live serovares of Leptospira spp. This study revealed prevalence results between, 47.3% and 96.2% in llamas, 0 and 13% in guanacos and 9 and 62.8% in vicuñas. The more frecuently reactive serovares were copenhageni (serogroup Icterohaemorrhagiae), and castellonis (serogroup Ballum), serogroups which have already been isolated from humans and domestic or wild animal infections, in our country (Dorta de Mazzonelli y col., 1997; Rosetti y col., 2000). From these results, it might be inferred that urine of domestic or wild species which lived with studied camelids, could have been the contagious source

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Interleukina 18, ¿nuevo factor a tener en cuenta en la patogénesis de la enfermedad periodontal?/ Interleukin 18, A new factor in the pathogenesis of the periodontal disease

Andrés, R.; Amaro, J.; Bascones, A.
2006-08-01

Resumen en español La enfermedad periodontal es un proceso infeccioso, crónico y de naturaleza inflamatoria, donde se produce la pérdida de los tejidos de sostén del diente. Existe un acuerdo general en que son las bacterias de la placa las responsables del inicio y mantenimiento de la enfermedad; pero se cree que será el tipo de respuesta inmune del individuo, la responsable del grado de destrucción periodontal que se desarrolle. Se piensa que una respuesta mediada por anticuerpos pro (mas) duciría una mayor destrucción debido a la hiperestimulación del sistema inmune, mientras que una respuesta celular sería más protectora con los tejidos periodontales. En este artículo proponemos que, la interleukina 18 (IL-18), citokina inductora de interferón gamma, favorecería el desarrollo de una respuesta inmune celular, permitiendo una eliminación bacteriana más eficaz, reduciendo así el daño que sufrirían los tejidos periodontales. Resumen en inglés Periodontal disease is an inflammatory, chronic and infectious process,where the tooth support tissues get lost.There is an agreement that bacteria are responsible for the beginning and support of the disease. It is believed that the type of individual immune response, is responsible for the periodontal destruction degree. It is thought that an immune response regulated by antibodies would produce a larger tissue destruction, due to the hyperstimulation of the immune syst (mas) em. While cellular immune response would be more protective with periodontal tissues. In this paper,we suggest that interleukin 18 (IL-18), as an interferon gamma inductor,would favor the cellular immune response development, allowing a more efficient bacterial elimination, reducing the periodontal tissue damage.

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Inmunoprotección de componentes de membrana externa de Leptospira pomona serovar mozdok

Machado, Maylen; Naranjo, Mariela; González, Marta; Batista, Niurka; González, Andrés; Abreu, Yolanda; Torres, Vismark; Pérez Amat, Viviana; Infante, Juan F
2007-08-01

Resumen en español Los componentes de membrana externa (CME) de Leptospira son candidatos potenciales para la producción de vacunas contra la leptospirosis. En este trabajo se inmunizaron hámsters y conejos con variantes de vacunas de CME solubilizados en SDS y adsorbidas en gel de hidróxido de aluminio. Se emplearon dos dosis por vía intramuscular, con un intervalo 6 semanas. Las dosis empleadas fueron de 25, 5 y 2,5 µg para hámsters y 25 µg para conejos. La respuesta humoral se eva (mas) luó mediante microaglutinación (MAT) y el ensayo inmunoabsorbente de unión a la enzima (ELISA). Se evaluó además el carácter protector de la respuesta inducida por estas preparaciones mediante el reto de los hámsters inmunizados, contra 20 000 dosis letal 50% (DL50) de la cepa homóloga altamente virulenta y mediante inmunización pasiva. Para ello se utilizó el suero de los conejos obtenidos en la semana 8 frente a 10 000 DL50. La MAT y el ELISA evidenciaron el poder inmunogénico de las preparaciones evaluadas. Las preparaciones vacunales empleadas no solo fueron capaces de proteger al 100% de los hámsters contra el reto de la cepa homóloga, sino que también, en el caso de los hámsters inmunizados pasivamente, fueron capaces de prevenir la infección renal y el establecimiento de leptospiras en órganos, evitando así el estado de portador, a diferencia de los controles no inmunizados, donde se obtuvo un 100% de mortalidad y se observaron serias lesiones a nivel de los órganos estudiados. Resumen en inglés The outer membrane components (OMC) might be useful as potential vaccine candidates. In this study rabbits and hamsters were immunized with OMC preparations obtained by SDS solubilization and adsorbed onto Aluminium hydroxyde gel. A two- doses schedule was used with an interval between doses of six weeks The animals were inoculated by intramuscular route .Doses of 25, 5 and 2,5 µg were used for hamsters and 25 µg for rabbits. The humoral response was evaluated by microa (mas) gglutination (MAT) test and enzyme-linked immunoabsorbent assay (ELISA). In addition, the protective effect of the immune response induced was evaluated by challenge of the inoculated hamsters against 20 000 DL50 of homologous high virulent strain and by passive immunization using rabbit’s sera obtained on week 8th against 10 000 DL50. Results showed immunogenic capacity of evaluated preparations which were able to protect all animals against challenge of homologous strain as well as to prevent renal infection and the establishment of leptospira in organs to avoid in this way carrier state in the case of hamsters passively immunized. The unvaccinated controls showed 100% of mortality and serious injuries in organs were observed.

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Inmunodiagnóstico de fasciolosis humana y ovina empleando una fracción de 24-29 kDa de Fasciola hepatica obtenida mediante inmunoadsorción/ IMMUNODIAGNOSIS OF HUMAN AND SHEEP FASCIOLOSIS WITH A 24-29 KDA FRACTION OF Fasciola hepatica OBTAINED BY IMMUNOADSORTION

SILVA, MARCOS; GORMAN, TEXIA; ALCAÍNO, HÉCTOR
2005-06-01

Resumen en español Los componentes proteicos de los productos de excreción-secreción (E-S) de F. hepatica adultas fueron fraccionados por cromatografía de filtración en gel (Sephacryl S-300), seguido de SDS-PAGE para identificar el eluido conteniendo la fracción de 24 - 29 kDa, de alta sensibilidad y especificidad en el inmuno-diagnóstico de fasciolosis. Con este material se preparó un suero hiperinmune en conejos que luego fue acoplado a una matriz de sefarosa para generar una colum (mas) na de cromatografía de afinidad que permitió la adsorción directa de estos polipéptidos. Las proteínas así adsorbidas por afinidad, se evaluaron como antígenos en 12 sueros humanos y 20 sueros de ovinos con fasciolosis (10 en fase prepatente y 10 en fase patente de la infección) y en 31 sueros humanos y 20 sueros ovinos negativos a F. hepatica, como sueros controles, mediante Western blot. La fracción antigénica inmunoadsorbida exhibió una sensibilidad de 91,3% y una especificidad de 100% en los sueros humanos y en el caso de los ovinos en fase patente y prepatente de la infección, la sensibilidad obtenida fue de 93,3 % y 80%, respectivamente, siendo su especificidad de 100%. Por lo tanto, se puede concluir que la purificación de la fracción polipeptídica de 24-29 kDa de extractos E-S de F. hepatica mediante inmunoadsorción es un procedimiento eficaz para obtener antígenos para el imunodiagnóstico de fasciolosis humana y animal Resumen en inglés In order to identify specific and sensitive polypeptides for human and sheep immunodiagnosis of fasciolosis, the protein components of E-S products of adult F.hepatica were separated by gel filtration chromatography (Sephacryl S-300) followed by SDS-PAGE to identify a 24 - 29 kDa fraction. With this fraction a rabbit immune antiserum was prepared and then coupled to a sepharose column matrix to develop an affinity chromatography which permitted the direct immunoadsortion (mas) of these polypeptides from crude E-S extracts. The affinity adsorved proteins were then assessed as antigen, using serum samples from 12 human patients and 20 sheep with fasciolosis as well as serum samples from 31 human patients and 20 non infected sheep, as controls, by Western blot analysis. The adsorved antigenic fraction in positive human samples exhibited a sensitivity value of 91.6 % and a specificity value of 100%. The sensitivity values were 93.3% and 80% for chronic and prepatent sheep infection, respectively. On the other hand, none of the control human or sheep negative sera reacted against this fraction, demonstrating 100% specificity values. Therefore, it may be concluded that immunoadsortion of F. hepatica 24-29 kDa fractions from crude E-S extracts is an efficient procedure of obtaining antigens for accurate serodiagnosis of F. hepatica infection in human and animal species

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Incremento de Interleucina-1 beta, Interferon gamma y Factor de Necrosis Tumoral alfa en suero y cerebro de ratones infectados con el virus de Encefalitis Equina Venezolana./ Increase of Interleukin-1 Beta, Gamma Interferon and Tumor Necrosis Factor Alpha in serum and brain of mice infected with the Venezuelan Equine Encephalitis virus.

Valero, Nereida; Bonilla, Ernesto; Espina, Luz Marina; Maldonado, Mery; Montero, Elsa; Añez, Florencio; Levy, Alegría; Bermudez, John; Meleán, Eddy; Nery, Anais
2008-12-01

Resumen en español Diversos esfuerzos han sido dirigidos a fin de esclarecer los principales mecanismos de protección y recuperación en las infecciones virales agudas y el posible papel de las citocinas involucradas en la respuesta inmunitaria primaria inducida por una cepa epizoótica del virus de Encefalitis Equina Venezolana (EEV). En el presente estudio se determinaron las concentraciones de citocinas TH1 Interleucina-2 (IL-2) e Interferon-gamma (IFN-g), TH2 Interleucina-4 (IL-4), pro (mas) inflamatorias (IL-1b) y el Factor de Necrosis Tumoral -alfa (TNF-a) en suero y cerebro de ratones infectados con el virus de EEV a diferentes períodos de infección. Se utilizaron ratones NMRI albinos machos infectados con una suspensión (10 DL50) de la cepa Guajira del virus de EEV, y un grupo control (sin infectar). En los días 1, 3 y 5post-infección, se extrajo sangre completa de ratones para la obtención de suero y el cerebro previa perfusión, para la obtención de homogeneizados cerebrales. En ambas muestras se determinaron IL-2, IFN-g, IL-4, IL-1b, y TNF-a por la técnica de ELISA. Se observó un incremento significativo (p Resumen en inglés Considerable efforts have been directed to clarify the main protective and recovery mechanisms in acute viral infections and, the possible role of the cytokines involved in the primary immune response induced by an epizootic strain of the Venezuelan Equine Encephalitis (VEE) virus. This study examined the levels of TH1 cytokines Interleukin-2 (IL-2) and Interferon-gamma (IFN-g), TH2 cytokines Interleukin-4 (IL-4) and proinflammatory cytokines (IL-1b, TNF-a) in serum and b (mas) rain of mice infected with the VEE virus during different post infection periods. NMRI albino male mice infected with a suspension (10 DL50) of the Guajira strain of the VEE virus, and a control group (without infection) were used. At one, 3 and 5 days post-infection, whole blood and brains were extracted to obtain sera and brain homogenates, respectively. IL-2, IFN-g, IL-4, IL-1b and TNF-a were determined by ELISA. A significant increment in the levels of IL-1b, IFN-g and TNF-a was observed (p

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Importancia de las pruebas específicas e inespecíficas para el diagnóstico de sífilis en donantes de sangre/ Importance of specific and unspecific tests to diagnosis syphilis in blood donors

Montiel, Milagros; Arias, Julia; Pozo, Elieth; Mogollón, Adriana
2008-12-01

Resumen en español Con la finalidad de mejorar el diagnóstico de laboratorio de sífilis como enfermedad infecto contagiosa en donantes de sangre, se realizó el presente estudio cuyo objetivo es determinar las pruebas serológicas específicas: Inmunoanálisis Enzimático (ELISA), Inmunocromatografía (IC) e inespecíficas: Laboratorio de investigación de enfermedades venéreas (VDRL) y Reaginas séricas no calentadas (USR) más confiable para el descarte de sífilis en donantes de sangr (mas) e del Hospital Dr. Adolfo Pons de Maracaibo, estado Zulia. Se analizaron 481 sueros de donantes de sangre aparentemente sanos, de ambos sexos en edades comprendidas entre 18 y 60 años. Del total de muestras analizadas por ELISA 10 resultaron positivas (2,07%) y 8 (1,66%) por IC. El VDRL captó 4 (0,82%) sueros con reactividad y USR sólo 2 sueros (0,41%). Se concluye que la prueba de ELISA conjuntamente con el VDRL son las herramientas más seguras y fidedignos para el descarte de sífilis en donantes de sangre, dado que proporcionan en paralelo resultados confiables, fidedigno que garantice la calidad de la misma al ser transfundida. Resumen en inglés In order to improve the laboratory diagnosis of syphilis as an infectious and contagious disease in blood donors, we performed this study to determine the reliability of the specific: Enzyme Immunoassay (Elisa) and Immune-chromatography (IC) tests, the unspecific: Venereal Disease Research Laboratory (VDRL) test and the Unheated serum regain (USR) Serologic tests to rule out syphilis from blood donors of the Dr Adolfo Pons Hospital in Maracaibo, Zulia state. We analyzed 4 (mas) 81 sera from apparently healthy blood donors, male and female, 18 to 60 years of ages. From the samples analyzed by Elisa 10 were positive (2.07%) and 8 (1.66%) by IC. VDRL detected 4 (0.82%) reactive sera and USR just 2 (0.421%). We concluded that Elisa with VDRL are the safest and more reliable tests to rule out syphilis from blood donors, since they gave in parallel reliable results to assure the quality of blood to be transfused.

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Identificación de antígenos inmunorreactivos de Leptospira interrogans/ Identification of immunoreactive antigens of Leptospira interrogans

Carrizo, A.; Brihuega, B.; Etchechoury, I.; Arese, A.; Romero, S.; Gioffré, A.; Romano, M. I.; Caimi, K.
2009-09-01

Resumen en español Se estudió un lote de 28 sueros de llama (Lama gama) de la provincia de Jujuy, Argentina, a fin de identificar antígenos inmunorreactivos contra Leptospira interrogans. Se utilizaron distintas preparaciones antigénicas de la bacteria para estudiar la inmunorreactividad mediante microaglutinación (MAT), ELISA y Western inmunoblot. Un pool de sueros bovinos positivos a la MAT fue empleado como control. Todos los sueros de llama fueron negativos mediante MAT e igual resu (mas) ltado se observó mediante ELISA. Dos de los 28 sueros de llama y el pool de sueros bovinos positivos, al ser evaluados por Western inmunoblot, arrojaron resultados positivos y permitieron identificar proteínas inmunorreactivas. Por MALDI-TOF se logró establecer que la proteína asociada a los dos sueros de llama inmunorreactivos era una flagelina periplásmica de Leptospira interrogans serovar Lai STR, mientras que la asociada al pool de sueros bovinos positivos a Leptospira sp. se trataba de una lipoproteína de la membrana externa de Leptospira interrogans serovar Ballum, LipL21. Estas proteínas podrían ser utilizadas en el diseño de un nuevo ELISA aplicado al diagnóstico temprano de leptospirosis, ya sea en distintos tipos de ganado como así también en reservorios silvestres. Resumen en inglés A batch of 28 llama (Lama gama) sera from Jujuy province in Argentina was studied in order to identify immune reactive antigens to Leptospira interrogans. Different antigenic preparations from the bacterium were used to study the immune reactivity by the microagglutinattion (MAT), ELISA and Western immunoblot tests. A control pool of positive bovine sera was used. All the llama sera were negative to MAT as well as to ELISA. Two of the llama sera and the positive bovine se (mas) ra pool rendered positive results when evaluated by Western immunoblot, allowing the identification of immune reactive proteins. These proteins were identified by MALDI-TOF. A periplasmic flagellin of Leptospira interrogans serovar Lai STR called FlaB1 was identified from the reactive llama sera, and an external membrane lipoprotein of Leptospira interrogans serovar Ballum called LipL21 was identified from the pool of bovine positive sera. These proteins could be used in a new ELISA applied to the early diagnosis of leptospirosis in different kind of cattle or wild reservoirs.

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Expresión de los receptores para el Fc de la IgG en leucocitos de sangre periférica de pacientes con hepatitis C crónica/ Expression of Fc receptors for IgG in peripheral blood leucocytes from hepatitis C virus infected individuals

Peinado, María; Conesa, Angela; Dávila, Luisana; De Sanctis, Juan Bautista; Deibis, Leopoldo; Toro, Félix
2007-06-01

Resumen en español La respuesta inmunitaria representa un elemento fundamental en el control de la infección por el Virus de Hepatitis C (VHC). Factores de origen viral y del hospedero modulan dicha respuesta. El presente trabajo tuvo como objetivo caracterizar complejos inmunitarios, bajo la forma de crioglobulinas, de pacientes infectados con el VHC y evaluar la expresión de superficie de los receptores para el Fc de la IgG (FcγR) en subpoblaciones leucocitarias de sangre periféri (mas) ca de estos pacientes. Se seleccionaron 12 individuos VHC (+) y 12 sujetos sanos. De ambos grupos se tomaron muestras de suero para aislar crioglobulinas y sangre venosa con EDTA para evaluar la expresión de los FcγR CD64 (FcγRI), CD32 (FcγRII) y CD16 (FcγRIII) mediante citometría de flujo. La presencia de ARN del VHC en suero y crioglobulinas fue analizada mediante RT-PCR. Los resultados muestran que el 50% de los pacientes VHC (+) presentaron niveles elevados de crioglobulinas constituidas fundamentalmente por IgG. En 3 de 5 pacientes con crioglobulinas elevadas se identificó ARN del VHC. La expresión de CD64 se observó principalmente en monocitos (80%), CD32 en monocitos, linfocitos B y neutrófilos (> 90%) y CD16 en células NK y neutrófilos (85% y 95% respectivamente) no encontrándose diferencias significativas entre pacientes y controles. La densidad de expresión de CD32 resultó significativamente menor en poblaciones de monocitos y neutrófilos de pacientes en comparación con controles (p Resumen en inglés The immune response represents a fundamental element in the control of Hepatitis C virus (HCV) infection. Viral and cellular host factors may modulate this response. In the present study, we characterized immune complexes (cryoprecipitates) isolated form HCV-infected patients and evaluated the expression of Fc receptors for IgG (FcγR) in peripheral blood leucocytes of these patients. Twelve HCV (+) patients and 12 healthy control individuals were selected for this st (mas) udy. For each group, sera samples were collected for cryoglobulins isolation and characterization and EDTA-anticoagulated venous blood samples were collected for flow cytometry analysis of FcγR, CD64 (FcγRI), CD32 (FcγRII) and CD16 (FcγRIII) expression. Presence of HCV RNA in serum and cryoprecipitates was analysed by RT-PCR. Results show that 50% of HCV-infected patients present high levels of cryoglobulins mainly constituted by IgG. Three out of 5 cryoglobulins analyzed by RT-PCR were positive for HCV-RNA. Expression of CD64 was observed mainly in monocytes (80%), CD32 in monocytes, B lymphocytes and neutrophils (> 90%) and CD16 in NK cells and neutrophils (85% and 95% respectively). No differences were observed in the percentage of FcγR expression when comparing HCV-infected patients with healthy controls. On the contrary, density of expression of CD32 in monocytes and neutrophils cell populations of HCV patients was significantly lower than that observed in healthy controls (p

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Ensayo de neutralización in vitro de aplicación en la evaluación de inmunógenos contra la hepatitis A, obtenidos mediante la tecnología de expresión en fagos filamentosos/ In vitro neutralization assay to evaluate new hepatitis A vaccine candidates

Aguilar, Alicia; Martínez, Raiza; Camacho, Frank; Amin¹, Nevis; Alfonso, José Luis; Stott, David; Pérez, Ela María
2010-04-01

Resumen en español La inmunidad contra el virus de la hepatitis A (VHA) se debe en primera instancia a la inducción de anticuerpos neutralizantes. Disponer de ensayos de neutralización es indispensable para evaluar nuevos candidatos vacunales contra este patógeno. En el presente trabajo se desarrolló un ensayo de neutralización in vitro que permitió evaluar la inmunogenicidad de mimotopos del VHA obtenidos mediante la tecnología de expresión en fagos al ser inmunizados ratones Balb/ (mas) c. Diferentes diluciones de anticuerpos se incubaron con 10³ o 10² Dosis Infecciosas en Cultivo de Tejidos 50% (DICT50) del clon citopático HM175/18f de VHA, y se inocularon en placas con células FRhK4. Después de 7 días de incubación el título neutralizante se determinó como el recíproco de la dilución del suero capaz de reducir la multiplicación viral al 50%. Tanto 10³ como 10² DICT50 fueron neutralizadas por el anticuerpo monoclonal 7E7 y los sueros humanos (A12 y A31) positivos a anticuerpos anti-VHA. Los controles negativos del ensayo no neutralizaron al virus. Los títulos neutralizantes de los sueros de ratones inmunizados con fagos portadores de mimotopos de VHA oscilaron entre 4 y 16, mientras que los sueros preinmunes y los de ratones inmunizados con fago salvaje M13 no neutralizaron la infectividad viral. Este ensayo de neutralización resultó adecuado para la evaluación de los inmunógenos propuestos. Resumen en inglés Immunity to hepatitis A virus (HAV) is in first instance due to neutralizing antibodies. Neutralization assays are essential to evaluate new candidate vaccines against this pathogen. In this paper, an in vitro neutralization assay to evaluate HAV vaccine candidates using phage-display technology is described. 10³ and 10² DICT50 of HAV were incubated with different antibodies preparations and were inoculated onto plates with FRhK4 cells. After seven days of incubation, t (mas) he neutralizing titer was determined as reciprocal of the serum dilution reducing HAV growth (inhibition of CPE) by 50%. 10³ and 10² DICT50 were neutralized by 7E7 anti-HAV monoclonal antibody and anti-VHA positive human sera (A12 and A31). Negative controls of the assay did not neutralize viral infectivity. Sera from mice immunized with phages displaying VHA mimotopes had neutralizing titers from 4-16. Neither negative control nor pre-immune and sera from mice immunized with M13 wild type phage neutralized HAV. A simple and faster in vitro neutralization assay was developed to evaluate new HAV vaccine candidates.

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El sistema inmunológico como herramienta diagnóstica de enfermedades reumatológicas/ The immune system as a diagnosis tool of rheumatologic diseases

Newball, McCarthy; Quintana L, Gerardo; Niño I., Luis Fernando
2007-12-01

Resumen en español Introducción: los sistemas biológicos han sido objeto de muchas observaciones y recientemente se han convertido en modelos para ser emulados en diversos ambientes y ofrecer soluciones a problemas de la vida real. El sistema inmune es uno de los más representativos y en la actualidad constituye motivo de inspiración para la implementa-ción de sistemas computacionales que respondan a diversas tareas, constituyendo los Sistemas Inmunes Artificiales. Objetivo: este estud (mas) io busca desarrollar mecanismos computacionales inspirados en la inmunología para el diagnóstico de enfermedades reumatológicas que contribuyan en la educación y la toma de decisiones diagnósticas en reuma-tología. Se pretende obtener una herramienta computacional que, partiendo de un conjunto de historias clínicas como datos de entrenamiento, obtenga una efectividad en el diagnóstico comparable a los sistemas de clasificación de documentos actuales. El sistema está inspirado en la interacción entre los tejidos y los linfocitos B, y se apoya en conceptos de la teoría de la información para extraer relaciones entre términos. Los linfocitos B tendrán la función de discriminar la enfermedad reumatológica de un paciente con base en su historia clínica. Materiales y métodos: se utilizó un conjunto de datos compuesto por 54 historias clínicas de 54 pacientes en reumatología, entre los cuales 21 padecían artritis reumatoide, y el resto padecían otras enfermedades reumatológicas. El conjunto de datos se dividió en dos grupos: pacientes con artritis reumatoide y pacientes sin artritis reumatoide. Se hizo un procesamiento manual de las historias clínicas para eliminar toda la información que no fuera relevante para el sistema en la tarea de diagnóstico. La efectividad del sistema fue comparada frente a otros tres algoritmos de clasificación de texto ampliamente utilizados en tareas de clasificación de documentos (ID3, BayesNet y PsoSVM). Resultados: el sistema obtuvo resultados de efectividad prometedores en comparación con los demás algoritmos, con un promedio de 87,65% de efectividad en el diagnóstico. Sin embargo, debido a la limitación de datos, cabe la posibilidad de sesgo en los resultados. Se observó, como se había previsto, que los anticuerpos que representan la información en varios casos son redundantes. Adicionalmente, la información que representan no corresponde necesariamente a conocimiento médico, sino a reglas de clasificación de texto. Conclusiones: la teoría de la información, ayudada por la teoría del sistema inmunológico adapta-tivo y un mecanismo de señalización, muestra tener un potencial grande para la clasificación de historias clínicas. Debido a la posibilidad de sesgo observada en los resultados, será necesario realizar experimentos adicionales sobre un conjunto de historias clínicas más numeroso y más heterogéneo. Aunque entre los experimentos no se obtuvo anticuerpos que representaran claramente los conceptos, de tal manera que puedan ayudar a un profesional médico en el aprendizaje para la toma de decisiones, el trabajo a seguir consiste en adaptar técnicas de procesamiento de lenguaje natural (i.e., sintaxis y semántica), para así llegar a un sistema de obtención de conocimiento en lugar de un sistema de obtención de reglas de clasificación de texto. Resumen en inglés Introduction: the biological systems have been observed and analyzed carefully and they have transformed into models to be emulated in many types of scenery and these offer solutions to problems of the real life, more recently. The immune system is one of the most representatives and at the moment is used for implementation of computational systems to respond to many tasks, constituting the Artificial Immune Systems. Objective: in this work a computational method inspired (mas) by immunology for diagnosis of rheuma-tologic diseases is developed. The goal is to obtain a computational tool that, given a group of clinical histories as training data, performs rheumatologic diagnosis comparable to the current systems used in document classification. The proposed tool is expected to contribute in education and decision making in rheumatologic diagnosis. The proposed system is inspired by the interaction between tissues and B lymphocytes, and it relies on concepts of information theory to extract relationships among terms. The B lymphocytes will have the function of discriminating a patient’s rheumatic diseases based on its clinical history. Materials and methods: a dataset consisting of 54 medical records from 54 patients with rheumatologic diseases was used; 21 patients suffered rheumatoid arthritis, and the rest suffered other rheumatologic diseases. The dataset was divided into two groups: patients with and without rheumatoid arthritis. A manual process on the clinical histories was performed to eliminate the irrelevant information in the diagnosis task. The effectiveness of the system was compared to other three text classification algorithms widely used in document classification tasks, namely, ID3, BayesNet and PsoSVM. Results: the proposed system obtained promising results in comparison with other algorithms, with an average of 87,65% effectiveness in the diagnosis. However, due to the limitation of the data, there is a possibility that the results are biased. It was observed, as expected that the antibodies that represent the information in several cases are redundant. Additionally, the information that it represents not necessarily corresponds to medical knowledge, but to rules of text classification. Conclusions: information theory in conjunction with an adaptive immune system and a signaling mechanism showed great potential for the classi-fication of medical records. Due to the possibility of a bias in the results, it will be necessary to carry out additional experiments on a larger and more heterogeneous group of medical records. From the experiments, antibodies that clearly represented concepts explaining rheumatoid arthritis were not obtained, which could help medical trainees in the learning process and medical doctors in decision making. Therefore, in future work, the task to continue consists on adapting natural language processing methods (i.e., syntax and semantics) to obtain a knowledge extraction system instead of a set of rules for text classification.

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Distinct repertoire of antigenic variants of foot-and-mouth disease virus in the presence or absence of immune selection

Borrego, Belen; Novella, Isabel S.; Giralt, Ernest; Andreu, David; Domingo, Esteban
1993-01-01

Digital.CSIC (Spain)

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Determinación de las condiciones de ensayo óptimas en un ELISA para la detección de anticuerpos séricos IgG anti-LPS de Pseudomonas aeruginosa O11/ Determination of the optimal assay conditions for an ELISA to detect serum IgG antibodies against Pseudomonas aeruginosa O11 lipopolysaccharide

Valmaseda, Tania; Alba, Lázaro; Ochoa, Rolando; Moya, Aniel; Pino, Yadira; Esnard., Sara Catalina
2004-12-01

Resumen en español La selección de sueros de donantes sanos para la obtención de una gamma hiperinmune contra la infección por Pseudomona aeruginosa, así como la evaluación de la respuesta inmunológica de cualquier candidato vacunal contra este microorganismo necesita contar en el laboratorio con técnicas estandarizadas. En este trabajo se realizaron los ensayos necesarios para el montaje y la optimización de un ELISA indirecto para la determinación de anticuerpos séricos de clase (mas) IgG anti- LPS de P. aeruginosa O11. Se evaluaron la concentración de recubrimiento, condiciones de bloqueo, dilución de trabajo de las muestras a evaluar y del conjugado con el fin de seleccionar en cada caso las mejores respuestas para el control positivo, el control negativo y el blanco del ensayo. Una concentración de 1,5 μg/mL de LPS O11 en PBS toda la noche a 4 °C como recubrimiento, la necesidad de no incluir un paso adicional de bloqueo y el conjugado humano anti IgG-HRP diluido 1:3000, 1 h a 37 °C resultaron las variables óptimas para el ensayo. Por otra parte, se estableció el rango lineal de la curva del control positivo y se seleccionó la dilución de trabajo 1:100 para las muestras de sueros a evaluar. Resumen en inglés An indirect quantitative ELISA was developed for the evaluation of the immune response elicited by Pseudomona aeruginosa vaccine candidates, and for obtaining hyperimmune immunoglobulins to be used in the medical treatment. Standard and control sera were made, and the optimal LPS coating dilution of the polystyrene plates, and the sample and conjugate dilutions were established. A 1.5 μg/mL concentration of O11 LPS in PBS, incubated for 16-20 h at 4°C were found to (mas) be the best coating conditions. The blocking step was unnecessary. A 1:100 dilution for the serum samples and 1:3000 for the anti-human IgG:HRP conjugate were selected. Accurate quantitative determinations were possible in the lineal range of the standard curve.

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Desarrollo de agentes inmunizantes contra el dengue/ Development of immunizing agents against dengue

López Antuñano, Francisco J.; Mota, Javier
2000-05-01

Resumen en español El complejo de los cuatro flavivirus del dengue es transmitido principalmente por el mosquito Aedes aegypti. Se han atribuido epidemias a la actividad de A. albopictus, A. polynesiensis y a varias especies del complejo A. scutellaris. Los factores de riesgo que determinan la probabilidad de enfermar o morir por dengue están relacionados tanto con el huésped (características genéticas, estado inmunitario, forma de vida y condiciones de salud, saneamiento básico de la (mas) vivienda y abastecimiento de agua potable) como con el virus (variabilidad genética de cepas entre y dentro de los serotipos, diferente capacidad patógena y distribución geográfica). A pesar de la falta de conocimiento sobre la inmunobiopatología del dengue, se han hecho importantes avances para conseguir una respuesta inmunitaria protectora con virus atenuados y con antígenos obtenidos por medio de tecnologías recombinantes. Desde los años 40, se ha intentado desarrollar vacunas contra el dengue. La inmunidad que se adquiere por infección natural es específica para cada serotipo y se han documentado infecciones por tres serotipos diferentes en la misma persona, por lo que probablemente sea necesaria una vacuna tetravalente. En voluntarios se han probado vacunas contra los cuatro serotipos que han sido inmunógenas y seguras. Aunque las vacunas con virus atenuados son prometedoras, son necesarios nuevos estudios sobre su eficacia y seguridad. Actualmente están en curso estudios para producir vacunas contra el virus del dengue mediante tecnologías de ADN recombinante y otras técnicas de biología molecular, utilizando como antígenos proteínas estructurales (principalmente la glicoproteína E) y no estructurales. Con el mismo propósito se han usado varios vectores de expresión, como Escherichia coli, baculovirus, virus de la vacuna y virus de la fiebre amarilla. Lamentablemente, no se han obtenido resultados satisfactorios en el hombre. La necesidad de desarrollar vacunas eficaces contra el dengue tiene especial importancia si se toma en cuenta la magnitud del problema de la transmisión de los cuatro serotipos en el mundo. La inmunización efectiva contra el dengue contribuirá a su prevención y la relación costo-beneficio será positiva. El hecho de que el dengue endémico afecte a niños de corta edad hace necesaria su inmunización, aprovechando la oportunidad que ofrece el Programa Ampliado de Inmunización. Resumen en inglés The four serotypes of dengue flaviviruses are transmitted mainly by the Aedes aegypti mosquito, and some epidemics have been attributed to Ae. albopictus, Ae. polynesiensis, and various species of the Ae. scutellaris complex. The risk factors involved in dengue mortality and morbidity are related to the human host (genetic characteristics of infected persons; lifestyles, immune status, and health conditions of people; basic sanitation of dwellings; and water supply) and t (mas) o the virus (genetic variability between and among serotypes, different pathogenicities, and geographic distribution). Notwithstanding the lack of knowledge of the immunopathobiology of dengue fever, important advances have been made in terms of a protective immune response, using attenuated dengue viruses or antigens produced by means of recombinant technologies. Efforts have been made since the 1940s to develop dengue vaccines. Immunity acquired from natural infection is specific for each serotype, and as many as three different serotype infections have been reported in one individual. For this reason, a tetravalent vaccine may likely be needed. Candidate vaccines against the four serotypes have been tested in volunteers and have proven to be immunogenic and safe. Although attenuated live virus vaccines are promising, more study is needed regarding their effectiveness and safety. Currently, several studies are ongoing to develop dengue vaccines using antigens from structural proteins (particularly E glycoprotein) and nonstructural proteins, with recombinant DNA technology and other biomolecular technologies. With the same goal, various expression vectors are being used, including Escherichia coli, baculovirus, vaccinia virus, and yellow fever virus. Unfortunately, no satisfactory results have been obtained in humans. The need for effective dengue vaccines is great, given the serious worldwide problem of the transmission of the four serotypes. Effective immunization against dengue would contribute to its prevention, with a positive cost-benefit relationship. Endemic dengue affects young children, and they should be immunized through the Expanded Program on Immunization.

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Coproantígenos de Fasciola hepatica de posible utilidad en el diagnóstico de la fascioliasis/ Identification and isolation of coproantigens of Fasciola hepatica that are potentially useful in the diagnosis of fascioliasis

Espino, Ana M.; Borges, Amarilys; Duménigo, Blanca E.
2000-04-01

Resumen en español En el presente estudio se describen cuáles son los antígenos de Fasciola hepatica que están presentes en las heces de pacientes con fascioliasis crónica y de ratas infectadas experimentalmente con metacercarias de F. hepatica. Mediante el empleo de la técnica de inmunoelectrotransferencia (Western blot) con un suero hiperinmune obtenido frente a antígenos de excreción/secreción de adultos de F. hepatica, se pudo demostrar que en las heces de los pacientes se encue (mas) ntran antígenos de posible interés para el diagnóstico con masas moleculares de 14, 19, 20, 23, 25, 32, 46, 51 y 62 kilodaltons (kDa). Además, se comprobó que algunos de estos péptidos (los de 14, 20, 23 y 51 kDa) son reconocidos también por la mayoría de los sueros de pacientes crónicos. Después de purificar por cromatografía de afinidad los antígenos presentes en heces de ratas con 6 a 12 semanas de infección, empleando para ello el anticuerpo monoclonal ES78 acoplado a Sepharosa 4B-CNBr, se identificaron seis polipéptidos de 11, 14, 26, 32, 47 y 51 kDa; otros tres polipéptidos, de 17, 24 y 66 kDa, solo se pudieron identificar en heces de ratas con 10 a 12 semanas de infección. Nuestros resultados sugieren que estos polipéptidos pueden ser antígenos comunes a ambos estadios parasitarios y constituir importantes marcadores de la fascioliasis aguda y crónica, en particular los de 14, 24, 26 y 51 kDa, puesto que reaccionaron con el inmunosuero, los sueros humanos y el anticuerpo monoclonal ES78. Resumen en inglés This study describes which antigens of Fasciola hepatica are present in the feces of patients with chronic fascioliasis and in the feces of rats infected experimentally with F. hepatica metacercariae. Using a Western blot assay technique with hyperimmune serum obtained from excretory-secretory antigens of adult F. hepatica, we found in the patients' feces antigens of possible diagnostic interest, with molecular weights of 14, 19, 20, 23, 25, 32, 46, 51, and 62 kilodaltons (mas) (kDa). In addition, we showed that the peptides of 14, 20, 23, and 51 kDa are also recognized by the majority of the sera from chronic patients. We used affinity chromatography to purify the antigens present in the feces of rats that had been infected for 6 to 12 weeks, using ES78 monoclonal antibody bound to CNBr-activated Sepharose 4B. Through that approach, we identified six polypeptides, of 11, 14, 26, 32, 47, and 51 kDa; three more polypeptides, of 17, 24, and 66 kDa, could only be identified in the feces of rats that had been infected for 10 to 12 weeks. Our results suggest that these polypeptides could be antigens common to both parasitic stages. This is particularly true for the polypeptides of 14, 24, 26, and 51 kDa, because they reacted with the immune sera, the human sera, and the ES78 monoclonal antibody. These polypeptides could be important markers for acute and chronic fascioliasis.

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Autoanticuerpos anti-galectina-8 en pacientes con lupus eritematoso sistémico/ Antibodies against galectin-8 in patients with systemic lupus erythematosus

Pardo, Evelyn; Cárcamo, Claudia; Massardo, Loreto; Mezzano, Verónica; Jacobelli, Sergio; González, Alfonso; Soza G, Andrea
2006-02-01

Resumen en inglés Background: The family of lectins known as galectins (galectins 1-14) are involved in the regulation of the immune system and in oncogenesis. During a search for antigens recognized by antibodies produced by a patient with systemic lupus erythematosus (SLE) we found reactivity against galectin-8, for which autoantibodies have not been previously described. Aim: To determine the frequency of autoantibodies against galectin-8 in lupus patients compared with healthy controls (mas) . Patients and Methods: Galectin-8 was purified from a bacterial expression system and used in immunoblot assays as antigen to screen the sera of 55 SLE patients and matched controls. Disease activity was evaluated using the Mexican Modification of the Systemic Lupus Erythematosus Disease Activity Index (MEX-SLEDAI). Results: Reactivity against galectin-8 was detected in 30% of SLE patients, compared to 7% of controls (p=0.003). We could not detect any particular SLE manifestation associated to the presence of these autoantibodies. Conclusions: This is the first description of autoantibodies against galectin-8. Its higher frequency in patients with SLE suggests a pathogenic role. Further studies are needed to determine their clinical relevance

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Anticuerpos policlonales antiinmunoglobulinas de salmón: herramientas potenciales para diagnóstico

AGUILLON, J.C.; SMITH, P.; COLOMBO, A.; MOLINA, M.C.; FERREIRA, A.
1997-01-01

Resumen en español A partir de sueros de salmón del Atlántico (Salmo salar) se han purificado sus inmunoglobulinas (Igs) mediante precipitación con sulfato de amonio al 50% de saturación, seguido de cromatografía de exclusión por tamaño molecular en Sephacryl S-300. La fracción de Igs purificadas fue utilizada como inmunógeno para generar un anticuerpo policlonal anti-Igs de salmón, el cual fue purificado por afinidad usando Sefarosa-proteína G. Mediante ensayo inmunorradiométri (mas) co contra el inmunógeno, la IgG anti-Igs de salmón demostró un elevado título (a lo menos 1/100.000) específico para el antígeno. El anticuerpo generado ofrece la posibilidad de detectar respuestas humorales en salmón y trucha (reactividad cruzada), con fines diagnósticos o de investigación Resumen en inglés Immunoglobulins (Igs) from sera of Atlantic salmon (Salmo salar) were purified with 50% saturated ammonium sulphate followed by molecular sieving chromatography using Sephacryl S-300. The fraction of purified Igs was used as immunogen to generate a polyclonal antibody anti-salmon Igs. This antibody was affinity purified in a Sepharose-protein G column. By immunoradiometric assay against the immunogen, the rabbit IgG anti-salmon Igs showed a high specific titer (at least 1 (mas) /100.000) for the antigen. This reagent offers the possibility of detection of salmon or trout (crossreactivity) humoral immune responses, both for diagnostic and research purposes

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Anticuerpos a proteínas recombinantes Ro60 Kd, Ro52 Kd y La48 Kd, en el síndrome de Sjögren primario: Utilidad de la combinación de métodos analíticos para detectar anticuerpos anti Ro y anti La/ Antibodies against recombinant Ro 60 Kd, Ro52 Kd and La 48 Kd proteins in primary Sjögren's Syndrome

Aguilera C, Sergio; González B, María Julieta; Pérez R, Paola; Castillo A, Darwin; Gatica R, Héctor
2002-08-01

Resumen en inglés Background: The use of new recombinant antigens may increase the sensitivity and specificity of the detection of anti Ro and anti La antibodies in Sjögren's syndrome. Aim: To determine the immune reactivity of sera from patients with Sjögren's syndrome, against fusion recombinant proteins (prf) Ro60 Kd, Ro52 Kd and La48 Kd expressed in E coli and recombinant protein Ro52 Kd, expressed in baculovirus (prb). Material and methods: Serum samples from 46 patients with a diag (mas) nosis of Sjögren's syndrome, according to the European criteria of 1997, were studied. Using conventional ELISA assays, 32 patients had positive anti Ro antibodies (group A) and 16 patients had negative anti Ro and anti La antibodies, but had positive antinuclear antibodies or rheumatoid factors (group B). Antibodies against recombinant proteins were measured by ELISA or Western Blot. Results: Reactivity against prf Ro60 was present in 69% of samples from group A patients and in 36% of samples from group B. Reactivity against prf Ro52 was present in 94% of samples from group A and 50% of samples from group B. Reactivity against prb Ro52 was present in 75% of samples from group A and 40% of samples from group B. Reactivity against prf La was present in 78% of samples by ELISA and 97% of samples by Western Blot. In 10 of 14 serum samples from group B patients, there was reactivity against at least one recombinant protein. Conclusions: A high prevalence of reactivity against recombinant Ro and La proteins was detected in serum samples from patients with Sjögren syndrome (Rev Méd Chile 2002; 130: 841-9)

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