Sample records for EMBRIONES (embryos)
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Embriones híbridos como fuente de células troncales embrionarias/ Hybrid embryos as a source of embrionic stem cells

Beca I, Juan Pablo
2007-11-01

Resumen en inglés The HFEA (Human Fertilisations & Embryology Authority) recently accepted to perform research in hybrid embryos generated by transferring human somatic cell nucleus to cow enucleated oocytes, named cytoplasmatic hybrids. The aim is to obtain a source of embryonic stem cells without the use of human oocytes. The arguments for the approval are to avoid the risk of obtaining human oocytes and that these embryos will not be transferred to a female's womb for its development. T (mas) hose who oppose the technique argue that it is a manipulation of the beginning of life and a disrespect to the dignity of human life because of the destruction of embryos. Nevertheless, the real nature of this new entity has not been established. Biologically it is an embryo with 99% of human genome and animal's cytoplasm, not generated from human gametes, it is not a new genome and it will be used only to cultivate stem cells. It does not seem possible to define its nature beyond any doubts. If it were considered as a human embryo it should be respected and protected as every human being. Once more, scientific progress opens new ethical and legal questions that we cannot answer in a definitive way. Researchers are exploring new roads to obtain pluripotential stem cells which should favor the development of innovative therapies. The main objection is the unavoidable destruction of human embryos, although in this case its origin and nature are not clear

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Efecto del número de embriones por pajuela sobre la viabilidad morfológica post vitrificación en embriones murinos obtenidos in vivo/ Efect of the number of embryos per straw on the post-vitrification morphological viability of murine embryos obtained in vivo

Cabrera, Pedro; Fernández, Adriana; Díaz, Thaís; Bastidas, Pedro; Molina, Magaly; Bethencourt, Angélica; Vivas, Isis; Reyes, Yuraima; Sifontes, Freddy
2006-12-01

Resumen en español La técnica de criopreservación de embriones por vitrificación ha adquirido gran relevancia a nivel mundial debido a lo fácil de su ejecución, los reducidos costos requeridos en equipos y, además por los altos niveles de viabilidad obtenidos post vitrificación. Con el objeto de determinar la influencia del número de embriones cargados en la pajuela antes de la vitrificación sobre la apariencia morfológica inmediatamente después de la misma, se utilizaron 4 tipos (mas) de cargado de la pajuela, 1, 2, 4 ó 6 embriones por pajuela, no evidenciándose influencia significativa (P>0,05) del tipo de cargado sobre la tasa de recuperación de embriones post vitrificación, ni sobre la tasa de embriones morfológicamente normales y anormales, sin embargo, al vitrificar 4 embriones por pajuela se presentaron numéricamente los mejores resultados. Resumen en inglés The technique of cryopreservation of embryos by vitrification has acquiredgreat relevance world-wide because of the easiness of the process, the low costof the equipment and the high levels of viability of the embryos after vitrification.To determine the effect of the number of embryos per straw on the morphologicalappearance, we used four different numbers of embryos per straw: 1, 2, 4 and6, obtaining no effects (P>0.05) of the number of embryos on the rate of embryoreco (mas) very after vitrification, or on the rate of normal embryos. However, thebest results were shown when 4 embryos per straw were used.

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Desarrollo de Embriones Caprinos In Vitro: Efecto del Co-Cultivo con Células Epiteliales de Oviducto/ In Vitro Development of Goat Embryos: Effect of Co-culture with Oviductal Epithelial Cells

Bosch, Pablo; Blanch, María S.; Ferrero, Susana; Díaz, Hernán; Piccatto, Fernando; Bosch, Ricardo A.
2006-05-01

Resumen en español El desarrollo de sistemas de cultivo in vitro que permitan obtener altos porcentajes de embriones viables es de gran importancia para la implementación de biotecnologías como el clonado y la transferencia de genes. Estudios tendientes a mejorar la eficiencia de los sistemas de cultivo embrionario son especialmente importantes en ganado caprino por el escaso desarrollo de estos métodos en dicha especie. El objetivo del presente estudio fue comparar el desarrollo de embr (mas) iones caprinos fecundados in vivo cultivados: a) con células epiteliales de oviducto caprino (CEO), b) en fluido sintético de oviducto (SOF; del Inglés: synthetic oviduct fluid) o c) en medio condicionado por células epiteliales de oviducto caprino (MC). Embriones de 1-8 células colectados del oviducto de cabras superovuladas se cultivaron in vitro durante 4-5 días en los diferentes tratamientos. Al término del cultivo se estableció el estadio de desarrollo embrionario alcanzado y el número de células por embrión a partir de embriones teñidos con lacmoid. Un mayor porcentaje de embriones se desarrollaron hasta el estado de mórula/blastocisto en cocultivo comparado con los cultivados en SOF (75% vs. 41% respectivamente; P Resumen en inglés Development of reliable in vitro culture systems to produce high percentages of viable embryos is instrumental in the application of biotechnologies such as cloning and transgenesis. This is especially true for caprine species in which in vitro technology for embryo culture has been poorly developed. The objective of this study was to compare in vitro development of in vivo fertilized caprine embryos in: a) coculture with caprine oviductal epithelial cells (OEC), b) synth (mas) etic oviduct fluid (SOF), or c) medium conditioned by oviductal epithelial cells (CM). In vivo fertilized 1-8 cell caprine embryos collected by oviductal flushing were allocated to treatments and cultured for 4-5 days in vitro. At the end of the culture period, embryonic development was recorded and the number of cells per embryo was determined in lacmoid-stained embryos. A significantly higher percentage of embryos reached the morula/blastocyst stage in coculture compared with those cultured in SOF (75% vs. 41% respectively; P

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Gestación con embriones producidos in vitro a partir de ovocitos recuperados de vacas ovariectomizadas/ Gestation with in vitro produced embryos from oocytes of ovariectomized cows

Aller, J.F.; Alberio, R.H.; Palma, G.A.
2000-01-01

Resumen en español Los objetivos de este trabajo fueron evaluar la eficiencia de la producción in vitro (PIV) de embriones empleando ovocitos de vacas ovariectomizadas y determinar la tasa de preñez después de la transferencia de embriones descongelados. Ciento veinte vacas Holando Argentino de alto valor productivo fueron ovariectomizadas en 6 sesiones de 18-25 vacas, utilizando un ovariótomo por vía vaginal. Los ovarios fueron transportados entre 18-20C en solución salina con antibi (mas) óticos durante 6 horas y procesados dentro de las 11 horas de comenzadas las ovariectomías. Los Complejos Cumulus-Ovocitos (CCOs) fueron aspirados de folículos antrales (2-8 mm de diámetro). Los CCOs fueron madurados en TCM 199 suplementado con 10% de suero de vaca en estro durante 22 horas. Luego de la maduración, los ovocitos fueron inseminados con semen descongelado y cultivados en medio CR1aa. A los 7 y 8 días después de la fecundación, los blastocistos y blastocistos expandidos de buena calidad fueron equilibrados en 1,5 M etilenglicol. Se colocaron dos embriones por pajuela de 0,25 ml y posteriormente fueron congelados. Los embriones descongelados fueron transferidos directamente a las receptoras. Un total de 57 vaquillonas lecheras fueron utilizadas como receptoras. El diagnóstico de preñez fue realizado por palpación rectal a los 55 días después de la transferencia. La eficiencia en la PIV fue de 9,5 ovocitos y 2,7 embriones por ovario y la tasa total de preñez fue 31,5%. La tasa de gestación obtenida con embriones de 7 días (35,5%) fue significativamente mayor (P<0,05) a la obtenida con embriones de 8 días (16,6%). Se concluye de estos resultados que por cada vaca de rechazo se podría producir 0,82 gestación adicional después de la aplicación de esta tecnología. Estos datos demuestran que la PIV de embriones a partir de ovarios de vacas ovariectomizadas es una buena alternativa para preservar recursos genéticos y para propósitos comerciales Resumen en inglés The objectives of this work were to evaluate the efficiency of in vitro production (IVP) of embryos from ovariectomized cows and the pregnancy rate of transferred frozen-thawed embryos. One hundred and twenty Argentine-Holland cows were ovariectomized in 6 sessions by using the effeminator by vaginal via. The ovaries were transported at 18-22C into saline solution supplemented with antibiotics during 6 h and processed whitin of 11 h since the first ovary obtained. Cumulus (mas) -oocytes complexes (COCs) were aspirated from small antral follicles (2-8 mm in diameter). The COCs were matured in TCM 199 plus 10% oestrus cow serum for 22 h. Following maturation the oocytes were fertilised with frozen-thawed semen in TALP medium and cultured in CR1aa medium. At Day 7 and 8 after fertilisation, good quality blastocysts and expanded blastocysts were equilibrated in 1.5 M ethylene glycol. Two embryos were loaded into 0.25 ml straws and frozen. The embryos were thawed and directly transferred into the recipients. A total 57 dairy heifer was used as recipients. Pregnancy diagnosis was performed by rectal palpation 55 d after embryo transfer. The efficiency of IVP technology was 9.5 oocytes and 2.7 embryos per ovary. The overall pregnancy rate was 31.5%. A higher pregnancy rate (P<0.05) was obtained for Day-7 (35.5%) versus Day-8 (16.6%) IVF embryos. It can be concluded from the results that a culled cow could produce 0.82 additional pregnancy after application of this technology. These data demonstrate that IVP embryos originating from ovaries of ovariectomized cows is a good alternative to preserve genetic resources and for commercial purposes

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Malformaciones en embriones y neonatos de tortuga golfina (Lepidochelys olivacea) en Nuevo Vallarta, Nayarit, México/ Malformations in embryos and neonates of Olive Ridley sea turtle (Lepidochelys olivacea) in Nuevo Vallarta, Nayarit, Mexico

Bárcenas Ibarra, Annelisse; Maldonado Gasca, Adrián
2009-12-01

Resumen en español Con el propósito de conocer las malformaciones en embriones y neonatos de tortuga golfina (Lepidochelys olivacea) en Nuevo Vallarta, Nayarit, México, se revisaron 100 nidos de dichos animales para registrar el número total de huevos, de embriones y de neonatos con algún tipo de malformación; los datos se analizaron con índices de prevalencia e intensidad y pruebas de Ji cuadrada. En 21 tipos de malformaciones localizadas en siete regiones anatómicas, se registraron (mas) tres nuevos tipos: bifurcación de aletas anteriores, biamelia anterior y rinodimo. La región corporal con mayor frecuencia de malformaciones fue el caparazón (41.7%), seguida por las mandíbulas y las malformaciones generales (17.6% cada una). El tipo de malformación más frecuente fue el caparazón comprimido (26.9%), seguido de albinismo (14.8%) y quifosis (13.2%). La prevalencia (50% de los nidos y 1.8% de los organismos) y la intensidad (2.78 malformaciones/nido y 1.57 malformaciones/organismo) resultaron medianamente altas, en comparación con estudios previos. Las tortugas marinas de Bahía de Banderas pueden estar expuestas a contaminantes antropogénicos, pero aún falta hacer estudios a largo plazo para corroborar esta posible relación. Resumen en inglés With the aim to know the types of malformations in Olive Ridley sea turtle (Lepidochelys olivacea) embryos and neonates, and determine their prevalence and intensity indexes and %² in Nuevo Vallarta Nayarit, 100 nests were surveyed. From each nest, the total number of eggs and the number of embryos and neonates with any kind of abnormalities were registered. In 21 types of malformations located on seven anatomical regions, three new types were registered: anterior flippe (mas) rs amelia, bifurcated anterior flippers and rinodimo. The carapace presented significantly higher frequency of abnormalities (41.7%), followed by mandibles and general malformations (17.6% each one). The most frecuent type of malformation was the compressed carapace (26.9%), followed by albinism (14.8%) and xiphosis (13.2%). Prevalence (50% on nests and 1.8% on the organisms) and intensity (2.78 malformed organisms per nest and 1.57 malformations per organism) were high medium, compared to previous studies. Sea turtles from Bahía de Banderas may be exposed to anthropogenic contaminants, but is necessary to do long term studies to corroborate this possible relationship.

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Manipulación de embriones humanos: algunas objeciones/ Human embryos' manipulations: some objections

Gómez Fajardo, Carlos A
2008-03-01

Resumen en español En este ensayo se entiende la ética como un saber práctico orientado hacia la "eupraxis", el buen obrar. El acto médico prudente es respetuoso con la vida humana en condiciones de fragilidad. No todo lo que técnicamente se "puede" hacer, en realidad se "debe" hacer. La vida de los embriones humanos merece respeto pues son miembros de esta especie. En las aplicaciones de las tecnologías de manipulación embrionaria se causa de modo deliberado la muerte de aquellos, ac (mas) ción que es racionalmente inaceptable a la luz de la ética; por lo tanto, se debe ejercer objeción de conciencia ante tales actuaciones de la tecnociencia contemporánea. Resumen en inglés Ethics is a practical knowledge, oriented to "eupraxis", the good action. Prudential medical actions must behave respectfully toward human life in conditions of fragility. Not all things and actions that are technically possible are correct in terms of morality. Human embryos are members of our species; in the process of applying embryo manipulation techniques many of them are deliberately conducted to death. Such actions are rationally objectionable on an anthropological basis.

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Caracterización de embriones múltiples en almendro

Martínez-Gómez, Pedro; Sánchez-Pérez, Raquel; Dicenta, Federico; Gradziel, Thomas M.
2003-06-01

Digital.CSIC (Spain)

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Competencia morfogénica de embriones maduros de Pinus radiata cultivados in vitro y su relación con la posición del cono en el árbol/ Morphogenic competence of mature in vitro cultured Pinus radiata embryos and their relation with cone position in the tree

Sánchez-Olate, Manuel; Zapata Valenzuela, Jaime; Sáez Delgado, Patricia; Ríos Leal, Darcy; Spiercolli Henríquez, Scarlette; Alvarez Maldini, Carolina; Delaveau, Catherine; Pereira Cancino, Guillermo
2008-01-01

Resumen en español La micropropagación de material embrionario colectado de árboles adultos constituye una alternativa importante en la propagación masiva de fenotipos selectos, adecuados para los programas de clonación implementados por las empresas forestales. Utilizando esta técnica, ejes embrionarios maduros extraídos desde conos lignificados ubicados a diferentes alturas en el árbol (zonas basal, media y apical) fueron introducidos in vitro con el objeto de analizar la posible r (mas) elación entre el estado fisiológico del tejido formador y la respuesta obtenida en la micropropagación de embriones maduros de Pinus radiata. Embriones obtenidos desde conos ubicados en la zona basal del árbol donador mostraron los mejores resultados en germinación (95%), supervivencia (100%), proliferación de microtallos (1,7 yemas/microtallos) y longitud de microtallos (25 mm). Ello permitió establecer una relación entre el estado de desarrollo del explanto y su respuesta en condiciones artificiales de cultivo in vitro, entregando antecedentes para la implementación de criterios de clasificación del material colectado para ser utilizado en cultivo de tejidos debido a la respuesta variable según el origen de los embriones desde el árbol donador Resumen en inglés The micropropagation of zygotic material collected from adult trees constitutes an important alternative in massive propagation of select phenotypes, appropriate for cloning programs implemented by forest companies. Using this technique, embryonic axes extracted from lignified cones located at different heights in the trees (basal, medial and apical zones) where in vitro introduced, with the objective of analyzing the possible relation between the physiological state of t (mas) he forming tissue and the response obtained in the micropropagation of mature Pinus radiata embryos. Embryos obtained from cones located in the basal zone of the donor tree, demonstrated the best results in regards to germination (95%), survival (100%), microshoot proliferation (1.7 buds/microstems) and microshoot elongation (25 mm), which allowed to establish a relation between the development states of the explants and their response in artificial in vitro conditions, supplying background information for the implementation of a classification criteria of the collected material to be used in tissue cultures, due to the variable responses obtained according to the origin of the embryos from donor trees

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Producción in vitro de embriones bovinos: suplementación de los medios de cultivo con suero/ In vitro production of bovine embryos: serum supplementation to the culture media

Mucci, N; Aller, J F; Kaiser, G G; Hozbor, F; Alberio, R H
2006-01-01

Resumen en español Las técnicas para producir embriones bovinos, en estadios de preimplantación mediante la maduración de ovocitos y su posterior fertilización in vitro, ofrece la posibilidad de obtener embriones a bajo costo para ser utilizados con fines de estudio (desarrollo embrionario temprano, transgénesis, clonación) o con propósitos comerciales. Las condiciones de cultivo in vitro pueden influenciar significativamente el desarrollo embrionario, determinando cambios responsabl (mas) es de su menor calidad, comparados con los embriones producidos in vivo . En particular, la adición de suero a los medios de cultivo altera tanto la morfología embrionaria como su calidad, y su eliminación posibilitaría producir embriones de buena calidad para ser criopreservados y transferidos. Los objetivos de esta revisión son describir los aspectos generales del cultivo in vitro de embriones y resumir algunas hipótesis referidas a los mecanismos por los cuales el suero podría alterar el desarrollo y la calidad embrionaria Resumen en inglés Techniques for producing bovine preimplantation embryos by in vitro maturation and fertilization, offers the potential for a large number of embryos at low cost to be used for basic scientific research (embryo development, transgenesis, cloning) or for commercial purposes. Embryo culture conditions can influence in vitro embryo development significantly, provoking deviations responsible for low quality compared with in vivo counterparts. In particular, serum supplementati (mas) on alters both embryo morphology and quality and eliminating serum from the media could be beneficial to produce good quality embryos for cryopreservation and embryo transfer. The objectives of this review are to describe the general aspects of in vitro embryo culture and summerize some hypotheses about the way serum could alter embryo development and quality

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Germinación in vitro de embriones inmaduros a distintas temperaturas de estratificación | In vitro germination of immature embryos at different stratification temperatures

Daorden Álvarez, María Elena; Marín Velázquez, Juan Antonio; Arbeloa Matute, Arancha

[ES] En los programas de mejora de especies frutales adquiere gran importancia la reducción del tiempo para la obtención de una nueva generación. La estratificación y germinación in vitro de los embriones inmaduros permite mejorar tanto el porcentaje de su germinación como acortar el tiempo necesari...

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REFLEXIONES ACERCA DE CÉLULAS TRONCALES OBTENIDAS MEDIANTE LA UTILIZACIÓN DE EMBRIONES HUMANOS

Salinas P, Hugo; Adauy E, Arlette; Ide V, Rodolfo
2005-01-01

Resumen en español Se comentan los aspectos éticos de la obtención de células troncales de embriones humanos Resumen en inglés The ethical aspects of obtaining stems cells from human embryos are comment

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Transformación de embriones somáticos de mango por biobalística

Chavarri, Marleny; Vegas, Ariadne; Zambrano, Asia Y.; Demey, Jhonny R.
2004-05-01

Resumen en portugués Com a finalidade de transformar geneticamente manga mediante biobalística, se bombardearam embriões somáticos das variedades Haden, Madame Francis e Kent. Determinou-se a dose máxima de PPT em que os embriões somáticos sobrevivem, cultivando-os no meio Gamborg, Miller e Ojima em concentrações de 0; 0,5; 1 e 2mg/l de PPT durante 3 meses e sub cultivando mensalmente para avaliar peso fresco e seco. Os embriões somáticos foram bombardeados com o plásmido CAMBIA 32 (mas) 01 que contêm os gens GUS e BAR, com dois tamanhos de partículas de tungstênio (0,7 e 1,3µm), pressão de 80psi, duas distâncias de bombardeio (10,0 e 16,5cm) e 5µg de ADN. Se selecionaram os embriões transformados em meio Gamborg, Miller e Ojima com 0,5mg/l de PPT. As condições de bombardeio escolhidas foram o tamanho de partícula de 0,7µm e a distância de bombardeio de 16,5cm. Depois de três meses de seleção nas concentrações de PPT utilizadas se fez evidente a sobrevivência dos embriões transformados na variedade Kent, enquanto que os embriões não transformados sobreviveram em concentração de 0,5mg/l. As variedades Haden e Madame Francis foram sensíveis às condições de bombardeio e seleção subministrados, morrendo depois deste processo. Se conseguiu uma sobrevivência de 4% e a regeneração de 3 clones por 0,5g de tecido bombardeado. Se evidenciou a atividade enzimática da expressão transitória do gene GUS mas não a estável e a incorporação dos gens GUS e BAR mediante PCR. Resumen en español Con la finalidad de transformar genéticamente mango mediante biobalística, se bombardearon embriones somáticos de las variedades Haden, Madame Francis y Kent. Se determinó la dosis máxima de PPT en que los embriones somáticos sobreviven, cultivándolos en el medio Gamborg, Miller y Ojima en concentraciones de 0; 0,5; 1 y 2mg/l de PPT durante 3 meses y subcultivando mensualmente para evaluar peso fresco y seco. Los embriones somáticos fueron bombardeados con el plá (mas) smido CAMBIA 3201 que contiene los genes GUS y BAR, con dos tamaños de partículas de tungsteno (0,7 y 1,3µm), presión de 80psi, dos distancias de bombardeo (10,0 y 16,5cm) y 5µg de ADN. Se seleccionaron los embriones transformados en medio Gamborg, Miller y Ojima con 0,5mg/l de PPT. Las condiciones de bombardeo escogidas fueron el tamaño de partícula de 0,7µm y la distancia de bombardeo de 16,5cm. Después de tres meses de selección en las concentraciones de PPT utilizadas se hizo evidente la sobrevivencia de los embriones transformados en la variedad Kent, mientras que los embriones no transformados sobrevivieron en concentración de 0,5mg/l. Las variedades Haden y Madame Francis fueron sensibles a las condiciones de bombardeo y selección suministrados, muriendo después de este proceso. Se logró una sobrevivencia de 4% y la regeneración de 3 clones por 0,5g de tejido bombardeado. Se evidenció la actividad enzimática de la expresión transitoria del gen GUS pero no la estable y la incorporación de los genes GUS y BAR mediante PCR. Resumen en inglés In order to genetically transform mango by biobalistic, somatic embryos of the varieties Haden, Madame Francis and Kent were bombarded. The maximum dose of PPT that somatic embryos survive was determined by exposing them in Gamborg, Miller y Ojima media containing 0, 0.5, 1 and 2mg/l PPT during 3 months and subculturing every month to evaluate fresh and dry weight. The embryos were bombarded with the plasmid CAMBIA 3201 with genes GUS y BAR, using two tungsten particle si (mas) zes (0.7 and 1.3µm), pressure of 80psi, bombardment distances of 10 and 16.5cm, and 5µg of DNA. Embryos were selected using 0.5mg/l PPT as selective agent. Particle size of 0.7µm and the bombardment distance of 16.5cm were selected. After 3 months of selection in the indicated PPT concentrations, selected clones of the Kent variety survived all concentrations, while non-transformed embryos survived only at 0.5mg/l. Haden and Madame Francis varieties were sensitive to the bombardment and selection conditions, and did not survive the process. Embryo survival was 4%, and 3 clones per 0.5g of tissues bombarded were regenerated. Enzymatic activity of transient expression of the GUS gene was observed and the incorporation of the GUS and BAR genes was demonstrated by means of PCR.

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Etica científica y embriones congelados/ Scientific ethics and frozen embryos

Valenzuela, Carlos Y
2001-05-01

Resumen en inglés Background: Scientific Ethics is the theory and praxis of decisions. Philosophical Ethics is presented as the theory and praxis of the good. As the good differs among cultures, Philosophical Ethics is dependent on the endo-cultural good conception. The decision (included that one of adhesion or not to a world vision) depends on neuro-psychic specific factors: i) cognitive factors that include mostly the knowledge of the alternatives and their consequences and the ideologi (mas) cal or religious conception of good in relation to the alternatives; ii) affective factors that make alternatives pleasant, unpleasant or neutral, attractive, repulsive or neutral; iii) emotional factors that associate to alternatives anger, peace or neutrality, sadness, happiness or neutrality; iv) value factors that assign importance, triviality or neutrality to alternatives, or assign them significance, irrelevancy or neutrality. There are unspecific factors such as the psychic energy, desire or others. Mixed factors such as attitude, motivation, intention and others. Scientific Ethics deals with the mind as a materio-energetic process which is different from the soul, eggs and embryos of any species are full individuals of that species, because, they have initiated a copy of their genome that specify, give autonomy and define them as individuals. For Scientific Ethics to leave frozen embryos like that for ever, to defrost and get rid of them or to use their cells for science are synonymous of killing them. To defrost them to use their cells as stem cells for somatic cell therapy or to implant them into uteri to continue their development is to maintain alive their cells, but only the implantation allows their maintenance as individuals, thus, being the only compatible with the Christian ethics. The compatibility of these alternatives with other ethics is discussed (Rev Méd Chile 2001; 129: 561-8)

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Gestaciones producidas con embriones bovinos clonados por transferencia nuclear/ Pregnancies produced by bovine embryos cloned by nuclear transfer

Martínez Díaz, M A; Gatica, R; Correa, J E; Eyestone, W
2007-01-01

Resumen en español El presente estudio comunica la obtención de gestaciones de embriones clonados por transferencia nuclear de células somáticas en bovinos por primera vez en Chile. Ovocitos bovinos obtenidos de ovarios de matadero fueron madurados in vitro y enucleados por micromanipulación. Células donantes de núcleos fueron obtenidas de la oreja de una vaca adulta, cultivadas por 9-14 días y criopreservadas en nitrógeno líquido. Células somáticas confluentes fueron desagregada (mas) s e insertadas individualmente en el espacio perivitelino de un ovocito enucleado. Cada par ovocito-célula obtenido fue tratado con dos pulsos eléctricos para inducir su fusión y luego los embriones fueron cultivados por 2 horas y tratados con ionomicina y 6-dimetilaminopurina para su activación. Los embriones fueron cultivados en medio sintético oviductual por 8-9 días hasta el estado de blastocisto. Blastocistos fueron transferidos a vaquillas receptoras 7 a 9 días postcelo. Se realizaron 25 transferencias a vaquillas receptoras y se logró la preñez en 5 (20%) de ellas. Dos de éstas abortaron a los 42 días y una tercera a los 120 días. Las dos vaquillas preñadas restantes mantuvieron su gestación (más de 45 días) hasta el momento de escribir esta comunicación Resumen en inglés With the aim of obtaining pregnancies from nuclear transfer embryos reconstituted with somatic cells and enucleated oocytes, bovine oocytes from slaughterhouse were matured in vitro and enucleated by micromanipulation. Nuclear donor cells were obtained from the ear of an adult cow, cultured for 9 to 14 days and cryopreserved in liquid nitrogen. Confluent cells were inserted individually in the perivitelline space of enucleated oocytes and treated with 2 electric pulses to (mas) induce fusion. The reconstituted zygotes were then cultured for 2 hours and treated with ionomycin and 6-dimethylaminopurine for their activation. The embryos were cultured in synthetic oviduct fluid for 8 to 9 days to obtain the blastocyst stage. These blastocysts were transferred to recipient heifers 7 to 9 days after oestrus. The ultrasound pregnancy diagnosis was done about 30 days after recipient oestrus. Five pregnancies were obtained from 25 transfers (20%). Two of them were lost at 42 days and a third at 120 days. This seems to be the first report on pregnancies obtained by cloned embryos in Chile

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Producción In vitro de Embriones Bovinos/ In vitro Production of Bovine Embryos

Fernández, Adriana; Díaz, Thaís; Muñoz, Gladys
2007-01-01

Resumen en español El objetivo del presente trabajo fue estandarizar y validar las técnicas de fertilización in vitro (FIV) y producción de embriones bovinos in vitro en el Laboratorio de Biotecnología del Instituto de Reproducción Animal de la Facultad de Ciencias Veterinarias de la Universidad Central de Venezuela. De un total de 544 ovocitos obtenidos de ovarios recolectados en el matadero y seleccionados para ser sometidos al proceso de FIV, se fertilizaron 399, obteniéndose una t (mas) asa de fertilización del 73,3%, alcanzando una tasa de desarrollo embrionario del 35,1% (191/544), un total de 74 mórulas (13,6%) y 9 blastocitos transferibles (1,6%). De acuerdo a su morfología, de 148 ovocitos rodeados de más de 6 capas de células del cumulus, se fertilizaron 107 (72,2%) con una tasa de desarrollo embrionario de 35,1% (52/147); mientras que los ovocitos rodeados de 4 a 6 capas de células del cumulus, alcanzaron una tasa de fertilización de 81,8% (122/149) y una tasa de división embrionaria de 46,3% (69/149). Ovocitos que presentaban 2 a 3 capas de células del cumulus para el momento de la maduración, alcanzaron una tasa de fertilización de 76,9% (117/152) con una tasa de división embrionaria de 36,8% (56/152). En el grupo de ovocitos que estaban desnudos para el momento de la maduración, se observó una tasa de fertilización mucho menor (55,7%; 53/95), así como una tasa de desarrollo embrionario de 14,7% (14/95). Los resultados obtenidos demuestran la factibilidad del desarrollo e implementación de la técnica de FIV para la producción de embriones bovinos in vitro que permita aumentar la producción, selección y comercialización de embriones bovinos, con el objetivo de impulsar la industria de transferencia de embriones y utilizar esta metodología como base para el desarrollo de otras biotecnologías. Resumen en inglés The aim of the present work was to standardize and validate the techniques for in vitro fertilization (IVF) and the in vitro production of bovine embryos at the Biotechnology Lab of Instituto de Reproducción Animal, at the Facultad de Ciencias Veterinarias, Universidad Central de Venezuela. A total of 544 oocytes were obtained from ovaries collected at the slaughterhouse and selected to undergo the process of IVF. Of the total, three hundred and ninety nine oocytes were (mas) fertilized, reaching a fertilization rate of 73.3%; with an embryo development rate of 35.1% (191/544); a total of 74 morulae (13.6%); and 9 transferable blastocysts (1.6%). According to their morphology, out of 148 oocytes surrounded by more than six layers of cumulus cells, 107 (72.7%) were fertilized; 35.1% (52/148) had embryo development rate, while oocytes surrounded by 4-6 layers of cumulus cells reached a fertilization rate of 81.8% (122/148), and a rate of embryo division of 46.3% (69/149). Oocytes with 2-3 layers of cumulus cells at the moment of oocyte maturation, reached a fertilization rate of 76.9% (117/152), with an embryo division rate of 37% (56/152). Denuded oocytes at the moment of maturation had a fertilization rate of 55.7% (53/95), as well as 14.7% (14/95) of embryo development. These results show the feasibility of the development and implementation of the IVF technique for production of bovine embryos, which allows an increase in the production, selection and commercialization of bovine embryos with the purpose of stimulating the embryo transfer biotechnology industry in Venezuela. These techniques could serve as the basis for the development of other technologies.

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Análisis de costos de esquemas de transferencia de embriones bovinos utilizados en Colombia/ Cost analysis of protocols for transfer of bovine embryos used in Colombia/ Custo análise de esquemas de transferência de embriões de bovinos utilizado na Colômbia

Bolívar, Paula A; Maldonado Estrada, Juan G
2008-09-01

Resumen en portugués Neste trabalho apresenta a análise dos custos de transferência embrionária três esquemas utilizados na Colômbia, feita com base no preço de produtos comerciais na casa dos preços em 2005. Os regimes avaliados hormônio-cio referência ao: esquema 1 (E1), sincronização com progesterona implantes, estável dose de FSH e de calendário da ovulação com GnRH, seguido pelo IA; esquema 2 (E2), sincronização com prostaglandinas, estável dose de FSH, LH e de insemina (mas) ção; e esquema 3 (E3), sincronização com progesterona, estável dose de FSH, prostaglandina, GnRH (36h), LH e AI. As fontes de variação consideradas na análise foram as seguintes: 1) superovulação (SOV) da doadora, 2) sincronização do destinatário, ET 3) personel. Como fontes de variação na análise foram consideradas as seguintes: 6.3, 6.6 et 10.3 embriões transferibles produzidos/lavagem, lavados/doadora/ano (n = 4), e 50 o 100% taxa de gestação. Os custos estimados para a implantação do embrião para E1, E2 e E3, foram E.U. $ 239.8 ($ 479.585.7), E.U. 156 ($ 312.879.0), e E.U. 115.1 ($ 230.186.5), respectivamente, que passou a assumir as perdas embriões não implantados (50% aprox.) e receber o valor de E.U. $ 359.7 ($719.378.6), E.U. $ 234.7 ($ 469.318.4), e E.U. $ 172.6 ($ 345.279.7). No que diz respeito poderia consultar a literatura, este é o primeiro relatório que uma análise de custos TE programa na Colômbia. Este trabalho traz elementos do sistema de custos que são propostos para o cálculo dos custos de programas de transferência embrionária. Resumen en español En el presente trabajo se presenta el análisis de los costos de tres esquemas de transferencia de embriones aplicados en Colombia, realizado con base en la cotización de los productos en las casa comerciales a precios actualizados del año 2008. Las fuentes de variación consideradas en el análisis fueron las siguientes: 1) superovulación (SOV) de donadoras, 2) sincronización de las receptoras, y 3) mano de obra. Los esquemas comparados fueron: esquema 1 (E1), sincro (mas) nización con implantes de progesterona, dosis constante de FSH y sincronización de la ovulación con GnRH, seguidas de la IA; esquema 2 (E2), sincronización con prostaglandinas, dosis constante de FSH, LH e inseminación; y esquema 3 (E3), sincronización con progesterona, dosis constante de FSH, prostaglandina, GnRH (36h), LH e IA. El costo por embrión transferible producido se calculó con base en 6.3, 6.6, y 10.3 embriones transferibles/lavado, para los esquemas 1, 2, y 3, respectivamente; cuatro lavados/donadora/año, y 50 o 100% de embriones implantados, para los tres esquemas. Los costos estimados por embrión transferible, asumiendo un 100% de tasas de gestación fueron: US 239.8 ($ 479.585.7), US 156 ($ 312.879.0), y US 115.1 ($ 230.186.5), para los esquemas E1, E2 y E3, respectivamente, sin diferencias estadísticas significativas (p>0.05) en los componentes de costos entre esquemas. Los costos aumentaron a US 359.7 ($719.378.6), US 234.7 ($ 469.318.4), y US 172.6 ($ 345.279.7), respectivamente, cuando se incluyeron las pérdidas por embriones transferidos no implantados (50%). En el trabajo se discuten otros costos fijos del proceso de TE que fueron invariables para los tres esquemas. Hasta donde se pudo consultar la literatura, este es el primer reporte que hace un análisis de costos de programa de TE en Colombia. Este trabajo aporta elementos del sistema de costos que se proponen para el cálculo de costos en programas de transferencia de embriones. Resumen en inglés In this work an estimated calculation of the cost of three of the most common protocols for superovulation and embryo trasnsfer in Colombia is presented. Estimate costs were defined according to commercial avalilable products at december 2005, taking into account the following sources of costs: 1) Superovulation of donor cows, 2) sinchronization of receptor cows, and 3) personnel. Hormonal schedules that were analyzed included: schedule 1 (S1), sinchronization with proges (mas) terone implants, FSH (continuous dose) GnRH (synchronization of ovulation), and AI; schedule 2 (S2), sinchronization with two dose prostaglandins, FSH (continuous dose), LH source and insemination; and schedule 3 (S3), sinchronization with progesterone implants, FSH (continuous dose), prostaglandin, GnRH (36h) after, and AI. Costs were calculated on the basis of 6.3, 6.6, and 10.3 transferable embryos/flush, for schedule 1, 2 and 3, respectively; flushes/donor/year (n = 4), and global pregnancy rate (50 or 100%). The estimated costs for transferable embryo were US 239.8 ($ 479.585.7), US 156 ($ 312.879.0), y US 115.1 ($ 230.186.5) for S1, S2, and S3, respectively. No statistically significant differences (p>0.05) between schedules were found for cost components. Average costs/transferable embryo were increased to US 359.7 ($719.378.6), US 234.7 ($ 469.318.4), y US 172.6 ($ 345.279.7), respectively, when 50% of transferred embryo losses were included in the analysis. To our knowledge, this is the first report on estimated costs for embryo transfer in Colombia. In this work several cost components for calculating the cost of ET according to each hormonal schedule are provided.

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Germinación in vitro de embriones inmaduros a distintas temperaturas de estratificación

Daorden Álvarez, María Elena; Marín Velázquez, Juan Antonio; Arbeloa Matute, Arancha
2002-01-01

Digital.CSIC (Spain)

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Racionalidad de los esquemas de superovulación y sincronización en la transferencia de embriones en bovinos: ¿terapéutica basada en la evidencia o ausencia de ética?/ Rational of superovulation and synchronization protocols for bovine embryo transfer: ¿Evidence-based therapeutics or lack of ethics?/ Racionalidade dos esquemas de superovulação e sincronização na transferência de embriões em bovinos: terapêutica baseada em provas ou falta de ética?

Maldonado Estrada, Juan G; Bolívar, Paula A
2008-09-01

Resumen en portugués Desde o início da transferência de embriãos (TE) na Colômbia, nos esquemas hormonais para a indução da superovulação (SOV) no dadora e sincronização do receptor (SR), foram executadas de acordo com estudos realizados noutras partes do mundo. Um lote de variações nos esquemas está disponível na literatura, cuja execução não tenha obedecido a concepção dos estudos clínicos completos, sem controlo ou a sua farmacocinética ou potenciais efeitos colaterais (mas) adversos sobre a fertilidade. Os esquemas utilizados poderiam ter efeitos secundários associados direta ou indiretamente com o uso descontrolado de hormônios exógenos, ou o tempo durante o qual o doador ou receptor são submetidos a tratamento, ignorando os aspectos-chave da ética na experimentação animal. A proliferação de esquemas SOV e SR pretendem melhorar as taxas de resposta na produção de embriões qualidade I e II (transferíveis ou congeladas) eu aumento das taxas de gravidez de embriões transferidos, mas os resultados não têm melhorado significativamente ao longo dos últimos 20, uma situação comum em todos os países do mundo. Neste documento é uma revisão sobre o uso de hormônios nas formas de SOV e sincronização de receptores, com ênfase na utilização racional das hormonais e os resultados obtidos. Por último, propomos vários elementos de juízo para levantar uma discussão sobre a racionalidade e bioética dos esquemas utilizados na TE. Resumen en español Desde el inicio del uso intensivo de la transferencia de embriones (TE) en Colombia, los esquemas hormonales para la inducción de la superovulación (SOV) en las donadoras y la sincronización de las receptoras (SR), se han aplicado de conformidad con los estudios realizados en otras partes del mundo. Una gran cantidad de variaciones en los esquemas está disponible en la literatura, cuya aplicación no ha obedecido al diseño de estudios clínicos completos, sino que se (mas) basan en el principio de la utilización de productos hormonales por su presumida farmacología, sin hacer seguimiento ni de su farmacocinética ni de los potenciales efectos colaterales adversos en la fertilidad. Los esquemas utilizados podrían tener efectos colaterales asociados de manera directa o indirecta con el uso incontrolado de hormonas exógenas, o con el tiempo durante el cual las donadoras o receptoras son sometidas a los tratamientos, olvidando aspectos fundamentales de la ética en la experimentación animal. La proliferación de esquemas de SOV y de SR busca mejorar las tasas de respuesta en la producción de embriones de calidad I y II (transferibles o congelables), y aumentar las tasas de gestación de los embriones transferidos, pero los resultados no han mejorado significativamente a lo largo de los últimos 20, situación común en todos los países del mundo. En el presente trabajo se hace una revisión sobre el uso de hormonas en los esquemas de SOV y sincronización de receptoras, con énfasis en la racionalidad del uso de las hormonas y los resultados obtenidos. Finalmente, se proponen varios elementos de juicio para plantear una discusión sobre la racionalidad y la bioética de los esquemas utilizados en la TE. Resumen en inglés Since the beginning of the use of bovine embryo transfer (ET) in Colombia, hormonal protocols for superovulation (SOV) of donors and for synchronization of recipients (RS) have been used in accordance with protocols reported elsewhere. Several variations of ET protocols have been reported most of they not based in controlled clinical studies but in the supposed pharmacological mechanisms of action of the used hormones, neither with pharmacokinetic studies nor considering (mas) the potential collateral effects on cow's fertility. Such collateral effects could be directly or indirectly related with the uncontrolled use of exogenous hormones, or with the time-related additional open days of donor and recipients, without considering the bioethics for animal experimentation. The huge proliferation of protocols for SOV and RS aims for improving both grade I and II (transferable or freezable embryos) embryo yield per transfer, and pregnancy rates for transferred embryos, without having achieved significant improvements during the last 20 years all around the world. In the present review we critic the use of exogenous hormones in bovine ET with emphasis in the rationality of indiscriminating use of exogenous hormones and embryo yield. Finally, we suggest several arguments on the bioethics of the protocols for SOV and RS in bovine ET.

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Efecto de la Variedad en el Desarrollo de Embriones in vitro de Vides Estenospermocárpicas/ Cultivar Effect in the Development of Stenospermocarpic Grape Embryos Cultured in vitro

Hewstone O, Nicole; Valenzuela B, Jorge; Muñoz Sch, Carlos
2006-06-01

Resumen en español El propósito del mejoramiento genético de uva de mesa (Vitis vinifera L.) en el Instituto de Investigaciones Agropecuarias (INIA), Centro Regional de Investigación La Platina, es la obtención de nuevas variedades de alta calidad, alto rendimiento, buen calibre y larga vida de postcosecha. En uvas estenospermocárpicas ocurre el aborto prematuro de las semillas en desarrollo. Sin embargo, mediante el cultivo de semillas inmaduras y rescate de embriones es posible utili (mas) zar variedades apirenas como madres. El objetivo de este trabajo fue analizar el efecto de la variedad utilizada ya sea como polinizante o madre, en los cruzamientos sobre el rendimiento de plantas por óvulo. Se analizaron los resultados de cruzamientos de cinco temporadas, de siete variedades utilizadas como madres y sus cruzamientos recíprocos. El rendimiento en número de embriones por semilla y plantas por embriones estuvo afectado principalmente por la variedad utilizada como madre. Variedades como Ruby Seedless y Red Seedless presentaron alto porcentaje de formación de embriones por semilla sembrada, sobre 68 y 40%, respectivamente. En cambio, en Superior o Black Seedless, el porcentaje de embriones rescatado por semilla alcanzó sólo al 30%. El rendimiento promedio de plantas por embriones varió entre un 10,5% en Black Seedless x Superior y un 81,3% en Ruby Seedless x Flame Seedless Resumen en inglés The goal of the table grape (Vitis vinifera L.) breeding program of the Instituto de Investigaciones Agropecuarias (INIA), Centro Regional de Investigación La Platina, is to obtain new varieties with good quality, high yield, large berry size and long post harvest life. In stenospermocarpic seedless cultivars premature abortion of developing seeds occurs. However, with the embryo rescue technique and in vitro culture, it is possible to use seedless cultivars as mothers. (mas) The aim of this work was to study cultivar effect whether pollinating or mother, on the percentage of plantlets per ovule obtained through this technique. The results of crosses made during five years among seven cultivars and their reciprocal crosses were analyzed. The main factor affecting the yield of embryos per ovule and plantlets per embryos was the variety used as mother. The cultivars Ruby Seedless and Red Seedless showed the highest percentage of embryos/ovule, with 68 and 40%, respectively. On the other hand, Superior and Black Seedless produced only 30% of embryos per ovule. The mean percentage of plantlets per embryo obtained varied between 10.5% for Black Seedless x Superior to 81.3% for Ruby Seedless x Flame Seedless

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EVALUACIÓN DE TRES METODOLOGÍAS DE RECUPERACIÓN DE EMBRIONES EN CANINOS UTILIZANDO UN MODELO POSTMORTEM/ EVALUATION OF THREE TECHNIQUES TO RECOVER CANINE EMBRYOS USING A POST-MORTEM MODEL

Jiménez E, Claudia; Bustos B, Omar
2008-09-01

Resumen en español Objetivo. Evaluar tres técnicas de recuperación de embriones, utilizando como modelos de simulación oocitos desnudos introducidos en úteros recuperados post-mortem. Materiales y métodos. Se introdujeron 10 oocitos en el extremo ovárico de cada cuerno. El tratamiento 1 (T1) consistió en realizar una punción a nivel del extremo ovárico de cada cuerno para introducir el medio de lavado. Se incidió la base de cada cuerno para ubicar un catéter TOMCAT 8-Fr, recupera (mas) ndo el medio en una caja de petri. En el tratamiento 2 (T2) se realizó una punción en el extremo ovárico de cada cuerno pero la recuperación de los oocitos se realizó con un catéter de 56 cm de longitud que se pasó transcervicalmente hasta la base de cada cuerno. En el tratamiento 3 (T3) se utilizó el mismo tipo de catéter por vía transcervical y el lavado y la recuperación se realizó a través del mismo catéter. Resultados. El número de estructuras recuperadas fue de 7.3 ± 2.4 (73%) para el T1; 8.5 ± 1.9 (85%) para el T2 y de 5.8±2.2 (58%) para el T3. La tasa de recuperación fue similar para T1 y T2, pero significativamente mayores que para el T3 (p>0.01). Conclusiones. Las técnicas que se proponen son menos invasivas y tienen resultados comparables a otros estudios donde realizan histerectomía y laparotomía. Con este tipo de técnicas, se disminuye el trauma generado por incisiones quirúrgicas y la posible generación de adherencias. Adicionalmente permitirían realizar recuperaciones de embriones no quirúrgicas en caninos. Resumen en inglés Objective. To compare three embryo recovery techniques, using simulation models in which denuded oocytes were introduced in recently recovered uteri. Materials and methods. Ten denuded oocytes were deposited in the ovarian tip of each uterine horn using a Tomcat catheter. Technique one (T1) consisted of a puncture made close to the ovarian tip of the uterine horn with a 20 G needle connected to a 20 ml syringe loaded with 20 ml of PBS (flush medium). In the base of each h (mas) orn, a 1 cm incision was made to place the Tomcat catheter from which the fluid was recovered into a Petri dish. For technique two (T2) a puncture in the ovarian tip was made as in T1 but the oocytes were recovered with a catheter that was passed through the cervix and the fluid recovered in a Petri dish. In technique three (T3) a catheter was inserted through the cervix and was used for pumping the collection media in and out. Results. The number of structures recovered per horn was 7.3 ± 2.4 (73%) for T1; 8.5 ± 1.9 (85%) for T2 and 5.8±2.2 (58%) for T3. The first two techniques were not significantly different (p>0.01) and showed better recovery rates than the technique used in T3. Conclusions. Canine embryos could be retrieved using a less invasive technique by passing an 8-french catheter through the cervix thereby reducing the damage to the uterus and the possible generation of adhesions.

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Influencia de las condiciones de iluminación en la germinación de embriones somáticos del cultivar híbrido de plátano `FHIA-21'./ Influence of illumination conditions on germination of somatic embryos of plantain crop hybrid `FHIA-21'.

García Águila, L; Gómez Kosky, R; Albany, N.R; Vilchez, J.A; Alvarado, Y; Reyes, M
2007-12-01

Resumen en español La germinación de los embriones somáticos y formación de plantas completas es determinante en la eficiencia de la propagación masiva a través de la embriogénesis somática. Las condiciones de iluminación es uno de los factores de mayor influencia en la germinación y es por ello que se evaluó su influencia en la germinación de embriones somáticos del cultivar híbrido `FHIA-21'. Los embriones somáticos maduros fueron colocados en cámaras de crecimiento con ilu (mas) minación solar y artificial. A los 15 días se evaluó el número de embriones germinados con plúmula clorofílica expuesta y la formación de plantas completas. Se evidenció el efecto de las condiciones de iluminación en el desarrollo del proceso de germinación de los embriones somáticos. Las condiciones de cultivo en cámara de crecimiento con luz artificial y fotoperíodo de 16 horas luz proporcionaron mayor número de embriones germinados (29,4) y la formación de nuevos embriones somáticos a partir de los existentes, originados por embriogénesis secundaria o repetitiva. Resumen en inglés The germination of the somatic embryos and formation of complete plants is decisive in the efficiency of the massive propagation through the somatic embryogenesis. The conditions of illumination is one of factors of more influence in the germination and it is for that their influence was evaluated in the germination of somatic embryos of cultivating hybrid `FHIA-21'. The mature somatic embryos were placed in growing cameras with solar and artificial illumination. At 15 da (mas) ys the number of germinated embryos and formation of complete plants were evaluated. The influence of the illumination conditions was evidenced in the development of germination process of the somatic embryos. The crop conditions of the controlled-growth environment chamber with artificial light and photoperiod of 16 hours light provided the highest number of germinated embryos (4, 29) and the formation of new somatic embryos from the existent ones, originated by secondary o repetitive embryogenesis.

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MODELO TEÓRICO PARA EXPLICAR LA ACUMULACIÓN DE GOTAS LIPÍDICAS EN EMBRIONES BOVINOS MACHOS O HEMBRAS PRODUCIDOS in vitro Theoretical Model For Explaining Accumulation Of Fat Drops In In Vitro Produced Bovine Embryos

CAMARGO, OMAR; RUIZ, TATIANA; OLIVERA, MARTHA
2008-08-01

Resumen en español La glucosa 6-fosfato deshidrogenasa (G6PD), codificada por un gen ubicado en el cromosoma X, es la enzima limitante de vía de las pentosas fosfato (PF). La entrada de la glucosa así como su flujo y el rendimiento metabólico de esta vía están determinados tanto por los mismos niveles glucosa así como por la actividad de la G6PD. Por esta vía, la glucosa regula la trascripción de varios genes lipogénicos. En algunos embriones hembra producidos in vitro, se registra (mas) un retardo en la normal inactivación de uno de sus cromosomas X, lo cual se traduce en una doble actividad de los genes allí ubicados, si se compara con los embriones macho producidos in vitro. Se postula entonces que, la sobre-regulación de la vía PF a consecuencia de la doble dosis de su enzima limitante (G6PD) y en presencia de elevados niveles de glucosa (mayores a 2,5 mM en el medio de cultivo), conllevaría a un dimorfismo sexual en relación con la transcripción de los genes Acetil CoA Carboxilasa Alfa (en adelante ACACA, símbolo oficial de la acetyl-Coenzyme A carboxylase alpha), y la Sintetasa de Ácidos Grasos (en edelante FASN, símbolo oficial de la fatty acid synthase) que corriente abajo codifican para las enzimas limitantes en la síntesis de lípidos. Este dimorfismo sexual para el fenotipo metabolismo de lípidos, derivaría en una mayor acumulación citoplasmática de gotas lipídicas en los embriones hembra en comparación con los embriones machos que, de ser así, tendría efectos expansivos sobre el metabolismo general, la actividad transcripcional de otros genes y sobre la resistencia a la criopreservación. Resumen en inglés The encoding gene for glucose 6-phosphate dehydrogenase (G6PD) is located on chromosome X. This enzyme regulates the entrance of glucose into the pentose phosphate pathway (PPP). Besides, throughout this route, glucose regulates the transcription of some lipogenic genes. Compared with in vitro produced male embryos, and due to a delaying in X-chromosome inactivation as a consequence of in vitro culture conditions, some early female embryos show two-fold increase in this e (mas) nzyme (G6PD) and consequently in PPP. It is postulated therefore that this kind of failures in genetic dosage compensation, and in a dependent manner of glucose levels, would generates a sexual dimorphism in lipid metabolic phenotype, at the level of transcription of genes associated to rate limiting enzymes of the synthesis of lipids such as Acetyl-CoA Carboxylase-Alpha (ACACA) and Fatty Acid Synthase (FASN). This would lead to a higher cytoplasmic accumulation of lipid droplets in female embryos with effects on their general metabolism, transcriptional activity of some down stream genes and on their cryotolerance

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Tipos de ansiedad de parejas tratadas con fecundación asistida frente a la donación hipotética de embriones para investigación en una clínica privada en Lima, Perú/ Types of anxiety reported by couples treated with assisted fertilization vis a vis hypothetical embryo donation for research purposes in a private clinic in Lima, Peru

Álvarez-Díaz, Jorge Alberto
2006-06-01

Resumen en español Introducción: La donación de embriones presenta características especiales en el marco latinoamericano, donde no existe la constante de los países desarrollados de tener embriones criopreservados sobrantes. Además, la religiosidad cristiana occidental es un poco mayor. La necesidad de regular desde lo ético y lo jurídico la práctica de la donación de embriones sugiere que se pueden tomar en cuenta las opiniones de los involucrados: los pacientes, los profesionale (mas) s de la salud, y la sociedad. El objetivo de este estudio es explorar la esfera de los pacientes mediante la búsqueda de tipos de ansiedad frente a la donación hipotética de embriones para investigación. Material y métodos: Con un diseño descriptivo y transversal se realizó una entrevista semiestructurada, individual y grabada, a 32 pacientes en una clínica privada en Lima, Perú, que habían acudido a técnicas complejas de fecundación asistida (FIV e ICSI); al transcrito de la entrevista se le aplicó la escala de ansiedad del método de análisis de la conducta verbal de Gottschalk et al., identificándose el tipo de ansiedad predominante en cada entrevistado. Resultados: Los tipos de ansiedad más comunes frente a la donación de embriones para investigación en este grupo de participantes fueron la ansiedad por sentimiento de culpa, la ansiedad por separación y la ansiedad por vergüenza. Divididos por género, los tipos de ansiedad más comunes para el género masculino fueron la ansiedad por culpa, vergüenza y separación; para el femenino, la ansiedad por culpa, separación y vergüenza. Resumen en inglés Introduction: Embryo donation displays special characteristics within the Latin American context, where spare cryopreserved embryos are not currently available as is the case of industrialized countries. The catholic church also plays a significant role. The need to regulate ethically and legally the practice of embryo donation suggests that we need to take into account the opinions from the main key players: patients, health professionals, and society. The objective of t (mas) his study is to explore the patients perceptions vis a vis potential embryo donation for research purposes. Materials and methods: A descriptive, cross-sectional design included a tape recorded semi-structured interview administered to 3 2 patients attending a private clinic in Lima, Peru. Participants had undergone complex techniques of assisted fertilization (FIV and ICSI). The verbal Gottschalk analytical method was used to identify predominant anxiety manifestations in the interviews. Results: The most common types of anxiety associated with embryo donation for research in this group of participants were guilt, separation anxiety and shame. Divided by gender, the more common types of anxiety reported by men were guilt, shame and separation anxiety. Women reported guilt, separation anxiety and shame.

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Morfogénesis in vitro de dioon merolae de Luca, Sabato & Vázquez-Torres (zamiaceae, cycadales) a partir de megagametofitos y embriones cigóticos/ In vitro morphogenesis of dioon merolae de Luca, Sabato & Vázquez Torres (zamiaceae, cycadales) from megagametophytes and zygotic embryos/ Morfogênese in vitro de dioon merolae de Luca, Sabato & Vázquez-Torres (zamiaceae, cycadales) a partir de megagametofitos e embriões zigóticos

Cabrera Hilerio, Sandra Luz; Chávez Ávila, Victor Manuel; Sandoval Zapotitla, Estela; Litz, Richard E; Cruz Sosa, Francisco
2008-12-01

Resumen en portugués A partir de explantes de embriões zigóticos e megagametofitos foram induzidos cultivos organogênicos de Dioon merolae do estado de Chiapas (México), Cicas em perigo de extinção. O meio de indução Litz consistiu nos macronutrientes do meio B5, os micronutrientes do meio MS e os compostos orgânicos glutamina (400mg·l-1) arginina (100mg·l-1), asparagina (100mg·l-1), sacarose (60g·l-1), goma gelana (4g), e suplementado com 0; 0,45; 2,26; 4,52 e 9,05μM α (mas) cido 2,4-diclorofenoxiacético (2,4-D), e 0; 2,32; 4,60; 9,30 e 13,90μM kinetina (K), com um arranjo de 5×5 com um desenho de bloco selecionado aleatoriamente. Os cultivos foram mantidos no escuro a 25°C e o calo foi subcultivado, em meio fresco, cada quatro semanas. A iniciação do calo ocorreu em uma ampla faixa de combinações de reguladores de crescimento em explantes de megagametofito. O calo em explantes de embriões zigóticos se formou em poucas combinações. A formação de brotos adventícios ocorreu somente em calos que provinham de combinações com K e 2,4-D. Através da análise histológica de secções longitudinais de embriões zigóticos se detectaram células meristemáticas apicais de broto e raiz, e em megagametófitos a formação de elementos de condução similares a traqueídes e raízes coralóides. Esta técnica apresenta grande potencial para a preservação de espécies de Cicas em perigo de extinção. Resumen en español A partir de explantes de embriones cigóticos y megagametofitos fueron inducidos cultivos organogénicos de Dioon merolae del estado de Chiapas (México), cícada en peligro de extinción. El medio de inducción Litz consistió en los macronutrientes del medio B5, los micronutrientes del medio MS y los compuestos orgánicos glutamina (400mg·l-1) arginina (100mg·l-1), asparagina (100mg·l-1), sacarosa (60g·l-1), gellan-gum (4g), y suplementado con 0; 0,45; 2,26; 4,52 y (mas) 9,05μM αcido 2,4-diclorofenoxiacético (2,4-D), y 0; 2,32; 4,60; 9,30 y 13,90μM kinetina (K), con un arreglo de 5´5 con un diseño de bloque seleccionado al azar. Los cultivos fueron mantenidos en oscuridad a 25°C y el callo fue subcultivado en medio fresco cada cuatro semanas. La iniciación del callo ocurrió en un amplio rango de combinaciones de reguladores de crecimiento en explantes de megagametofito. El callo en explantes de embriones cigóticos se formó en pocas combinaciones. La formación de brotes adventicios ocurrió solo en callos que provenían de combinaciones con K y 2,4-D. A través del análisis histológico de secciones longitudinales de embriones cigóticos se detectaron células meristemáticas apicales de brote y raíz, y en megagametofitos la formación de elementos de conducción similares a traqueidas y raíces coraloides. Esta técnica presenta gran potencial para la preservación de especies de cícadas en peligro de extinción. Resumen en inglés Organogenic cultures were induced from zygotic embryo and megagametophyte explants of the Chiapas State (México) endangered cycad species, Dioon merolae. The Litz induction medium consisted of B5 major salts, MS medium minor salts and the organics glutamine (400mg·l-1), arginine (100mg·l-1), asparagines (100mg·l-1), sucrose (60g·l-1), gellan gum (4g), and supplemented with 0, 0.45, 2.26, 4.52 and 9.05μM 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D) and 0, 2.32, 4.60, 9 (mas) .30, 13.90μM kinetin (K), arranged as a 5´5 factorial in a randomized block design. Cultures were maintained in darkness at 25°C, and callus was subcultured onto fresh medium at 4 week intervals. Callus initiation occurred on a wide range of plant growth regulators (PGR) combinations from megagametophyte explants. In comparison, callus initiation from explanted zygotic embryos occurred on few PGR combinations. Adventitious shoot induction occurred from callus on formulations with K and 2,4-D. Through the histological analysis of longitudinal sections of zygotic embryos were detected apical meristematic cells of the shoot and root and in megagametophytes the formation of elements similar to tracheids and coralloid roots. This technique has a great potential for preservation of the highly endangered cycads.

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EFECTO DEL CO-CULTIVO SOBRE EL DESARROLLO TEMPRANO DE EMBRIONES BOVINOS PRODUCIDOS IN VITRO/ CO-CULTURE EFFECT ON EARLY DEVELOPMENT OF IN VITRO BOVINE EMBRYOS

López, Angela; Olivera, Martha; Ruiz, Tatiana; Tarazona, Ariel
2007-07-01

Resumen en español Objetivo. Estudiar el efecto del cocultivo con células oviductales sobre el porcentaje de clivaje 48 horas post inseminación (hpi) de embriones bovinos en bajas tensiones de oxígeno. Materiales y métodos. Se recolectaron ovarios de matadero para la extracción de los ovocitos que fueron puestos en medio TCM 199 suplementado con hormonas, se fertilizaron con semen criópreservado y se cocultivaron en medio CR1aa con células de oviducto durante 48 horas. Se evaluó el (mas) porcentaje de clivaje total y el porcentaje de clivaje por estadios de 2-4 células y 5-8 células. La viabilidad de las células para el cocultivo se determinó por observación del movimiento ciliar y observación de monocapa. Los tratamientos fueron T1: células de oviducto + oxígeno 20%; T2: células de oviducto + oxígeno 7%; T3 y T4 fueron controles sin células para ambas concentraciones de oxígeno. Resultados. En cuanto al porcentaje de clivaje no hubo diferencia significativa entre los cuatro tratamientos, pero hubo una tendencia a mayor clivaje para los embriones cocultivados con células y 20% oxígeno. Conclusiones. La utilización de altas tasas de oxígeno 20% en los sistemas de cococultivo con células oviductales tienden a mejorar los porcentajes de clivaje a las 48 hpi. Resumen en inglés Objective. To study the effect of co-culture with oviductal cells on the cleavage rate 48 hours post insemination (hpi) of bovine embryos in low oxygen tensions. Materials and methods. Slaughterhouse ovaries were collected for the extraction of oocytes put on TCM 199 medium supplemented with hormones, fertilized with semen cryo-preserved and co-cultured in CR1aa medium with oviductal cells during 48 hours. Total cleavage rate and cleavage per stages of 2-4 cells and 5-8 c (mas) ells were evaluated. The viability of cells for the co-culture was determined by observation of the ciliary movement and monolayer observation. Treatments were T1: oviduct cells + oxygen 20%; T2: oviduct cells + oxygen 7%; T3 and T4 were controls without cells for both oxygen concentrations. Results. For cleavage rate there was not significant difference among the four treatments, but there was a tendency to more cleavage for co-cultured embryos with cells and 20% oxygen. Conclusions. The use of high oxygen rates (20%) in co-culture systems with oviductal cells intend to improve the cleavage percentages to 48 hpi.

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Un estudio exploratorio sobre la donación hipotética de embriones humanos en Chile/ An exploratory study regarding the hypothetical human embryo donation in Chile

Álvarez Díaz, J. A.
2007-12-01

Resumen en español Objetivo: Explorar opiniones de pacientes que han acudido a TRA complejas, respecto a la donación de gametos y embriones, así como las razones para hacerlo o no. Pacientes y métodos: La sede fue el Hospital Clínico de la Universidad de Chile. Se entrevistaron diez participantes (siete mujeres, tres hombres), quienes habían acudido al menos a una TRA, sin formar parte de programas de donación. Se trata de un estudio transversal de bioética descriptiva, realizado con (mas) metodología cualitativa etnográfica mediante entrevista semiestructurada aplicando análisis del discurso al texto resultante. Resultados: Respecto a la donación de embriones, seis participantes aceptarían donarlos, cinco con fines de terapia de fertilidad y uno con fines de investigación. En relación con criopreservación, tres participantes la aceptarían siempre, y tres con restricciones, de los cuales uno preferiría descartar en lugar de donar un embrión criopreservado. Discusión: Puede sugerirse que: la donación de gametos es más comentada y generalmente aceptada; la donación de embriones es un tema menos discutido y más conflictivo al momento de pensar acerca de él, tanto para donar como para aceptar; la criopreservación es un tema complejo, comentado pero también conflictivo, cuya aceptación o no, así como el destino de los embriones probablemente criopreservados, depende de las concepciones que se tienen respecto al origen de la vida, la ética personal, etc.; se puede plantear que una hipótesis construida, a partir de este estudio y por verificarse en estudios cuantitativos, es que la donación de embriones podría efectuarse, mayormente para terapia de fertilidad, y excepcionalmente con fines de investigación. Resumen en inglés Objective: To explore opinions of patients who undergone to complex ART towards gamete and embryo donation, as well as the reasons to do it or not. Patients and methods: The seat was the Hospital Clínico de la Universidad de Chile. There were interviewed ten participants (seven women, three men), who had undergone at least to one ART, without comprising of donation programs. It was a cross-sectional study of descriptive bioethics, done with ethnographic qualitative metho (mas) dology with a semistructured interview applying speech analysis to the resulting text. Results: Regarding embryo donation, six participants would accept to donate them, five to fertility therapy and one to research. Regarding the cryopreservation, three participants would always accept it, and three with some restrictions, just one on them would rather to discard instead of donating a cryopreserved embryo. Discussion: It could be suggested: gamete donation is more commented and generally accepted; embryo donation is a more conflicting and less discussed subject, as much to donate as to accept; cryopreservation is a complex subject, commented but also conflicting, whose acceptance or not, as well as the destiny of the probably cryopreserved embryos, depends on the believes that participants have about the origin of the life, personal ethics, and the religion. It could be possible to say that a hypothesis constructed in this study (to be verified in future quantitative researches) is that embryo donation could take place, for therapy of fertility, and exceptionally to research.

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Efecto de la vitrificación sobre la viabilidad morfológica de embriones murinos (Mus musculus)/ Vitrification effect on the morphological viability of murine embryos (Mus musculus)

Cabrera, Pedro; Fernández, Adriana; Bastidas, Pedro; Perozo, Edison; Molina, Magaly; Bethencourt, Angélica; Vivas, Isis; Reyes, Yuraima; Díaz, Thaís
2008-03-01

Resumen en español El objetivo del presente estudio fue evaluar la viabilidad morfológica post vitrificación de embriones murinos (Mus musculus), de dos estadios de desarrollo (mórula y blastocito), obtenidos in vivo de hembras superovuladas, para lo cual se utilizaron los siguientes criterios: blastómeras morfológicamente intactas, zona pelúcida íntegra y reexpansión del blastocele. Quinientos setenta y dos embriones murinos de excelente calidad se vitrificaron a través de la téc (mas) nica pajuela estirada abierta modificada, utilizando una solución de equilibración (25% de etilenglicol, 25% de glicerol) en tres pasos. No hubo diferencia significativa (P>0,05), entre la tasa de recuperación para mórulas (92,6%) y blastocitos (93,7%). Sin embargo, se obtuvo diferencia (P Resumen en inglés The objective of present study was to evaluate the morphological viability post vitrification of murine embryos (Mus musculus) of two stages (morulae and blastocyst), obtained in vivo from superovulated female, following this criterion: morphologically intact blastomeres, intact zona pellucida, and re-expanding of the blastocele. Five hundred seventy two murine embryos of excellent quality were vitrified through the modified open pulled straw procedure, using an equilibra (mas) ted solution (25% of ethylene glycol, 25% of glycerol) in three steps. There were not significant differences (P>0.05), between recovery rates for morula (92.6%) and blastocyst stage (93.7%). Nevertheless, we observed differences (P

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Efecto del peso de la donadora sobre la tasa de colecta de embriones murinos (Mus musculus)/ Effect of donor weight on recovery rate of murine embryos (Mus musculus)

Cabrera, Pedro; Fernandez, Adriana; Bastidas, Pedro; Perozo, Edison; Molina, Magaly; Bethencourt, Angélica; Vivas, Isis; Reyes, Yuraima; Díaz, Thaís
2009-01-01

Resumen en español La producción in vivo de embriones en la especie murina constituye una práctica biotecnológica influenciada ampliamente por una serie de variables, como dosis y tipo de hormonas superovulatorias utilizadas, la cepa y aspectos nutricionales de la donadora, entre otras. Estos factores pueden afectar en gran medida la eficiencia del sistema. Conocer y controlar la mayor cantidad de estas y otras variables permitirá obtener un número elevado de embriones de excelente cal (mas) idad en corto tiempo y a muy bajo costo. Con la finalidad de evaluar la influencia del peso de la donadora al inicio del protocolo de superovulación sobre la tasa de colecta de embriones se utilizaron 54 ratones hembra agrupados de acuerdo a su peso en cinco categorías: 12,2 - 14,9; 15,0 - 17,6; 17,7 - 20,3; 20,4 - 23,0 y 23,1 - 25,8 g. Un total de 940 embriones fueron colectados, en los cuales se demostró el efecto (P Resumen en inglés In vivo production of murine embryos is a biotechnology practice widely influenced by a series of variables such as dose and type of hormone for superovulation, strain and level of nutrition of the donor, among others. These factors can affect the efficiency of the system. Therefore, knowing and controlling most of these factors would allow obtaining a higher number of excellent quality embryos at a very low cost in a shorter period of time. With the aim to evaluate the e (mas) ffect of the donor weight at the beginning of the superovulation protocol on the recovery rate, 54 female mice were divided according to their weight in five categories: 12.2 - 14.9, 15.0 - 17.6, 17.7 - 20.3, 20.4 - 23.0, and 23.1 - 25.8 g. A total of 940 embryos were collected, which showed a weight effect (P

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Efecto teratógeno de la aflatoxina b1 sobre embriones murinos/ Teratogenic effect of b1 aflatoxin on murine embryos

Cabrera, Pedro; Fernández, Adriana; Díaz, Thaís; Bastidas, Pedro; Molina, Magaly; Bethencourt, Angélica; Ascanio, Elias
2006-12-01

Resumen en español Las aflatoxinas son micotoxinas producidas por hongos del género Aspergillus, que causan efecto carcinógeno en roedores adultos, además de daños teratógenos en embriones, posterior a la implantación. Al someter ratones hembra donadoras de embriones en estadios preimplantacionales a dos niveles de aflatoxina B1 (AFB1) presentes en el alimento, se pudo evidenciar una reducción marcada del grado de calidad embrionaria en aquellos animales que consumieron el alimento c (mas) on el mayor nivel de AFB1 (3,6 ppb), mientras que en las hembras donadoras en contacto con niveles menores de AFB1 (0,8 ppb) se colectaron embriones con excelente grado de calidad morfológica. A través del presente hallazgo se concluye que los altos niveles de AFB1 influyeron negativamente en la calidad de embriones murinos producidos in vivo. Resumen en inglés Aflatoxins are mycotoxins produced by Aspergillus sp. This type of aflatoxincauses a carcinogenic effect on adult rodents and a teratogenic effect onembryos after implantation. Donor mice females consuming a high level(3,6 ppb) of aflatoxin B1 (AFB1) had a marked reduction on embryo quality,whereas those donors consuming a lower level (0,8 ppb) of AFB1, hadembryos with excellent quality. Based on these findings we conclude thathigh levels of AFB1 (3,6 ppb) had a negative effect on the quality of murineembryos produced in vivo.

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Rol de la mitocondria y el estrés oxidativo en el bloqueo del desarrollo de embriones bovinos producidos in vitro/ Mitochondrial rol and oxidative stress in the developmental blockade of in vitro produced bovine embryos

Tarazona, AM; Olivera-Angel, M; Lenis, YY
2010-01-01

Resumen en español Uno de los mayores obstáculos en la producción de embriones in vitro con fines de investigación básica, comerciales, o de conservación, es el detenimiento temprano del clivaje que ocurre de forma específica en una etapa del desarrollo. Para explicar este fenómeno se han postulado diferentes factores causales como: desórdenes en la cromatina, rearreglos del citoesqueleto, estrés oxidativo y daños mitocondriales. Esta última propuesta ha recibido gran atención, (mas) debido a que la mitocondria es fuente de especies reactivas de oxígeno (EROs) y el estrés oxidativo es un mediador crítico de procesos fisiológicos y estados patológicos. Durante los últimos años se ha demostrado que el peróxido de hidrógeno (H2O2) es una molécula pivotante capaz de desencadenar muerte celular por diferentes mecanismos que pueden involucrar o no a los factores de transcripción: NFκB - p53, y es ejecutado por caspasas efectoras. Se cree que la mitocondria podría estar jugando un papel importante como productora o como blanco del H2O2, y como mediadora en la muerte por apoptosis de los embriones. El objetivo de esta revisión es mostrar el estado del arte en cuanto a la apoptosis desencadenada por estrés oxidativo y mediada por la mitocondria en los embriones bovinos producidos in vitro, como parte de la explicación del bloqueo del clivaje y la baja eficiencia que aún se tiene en este proceso Resumen en inglés One of the biggest obstacles in the in vitro embryo production for basic research, commercial purposes, or conservation, is the blockade of the early cleavage, which occurs on a species-specific manner in a particular stage of development. To explain this phenomenon some causative factors have been postulated such as: disturbances in chromatin, cytoskeleton rearrangement, oxidative stress and mitochondrial damage. The latter has received considerable attention because mit (mas) ochondrion is a source of reactive oxygen species (ROS), and oxidative stress is a critical mediator of physiological and pathological states. Over the past years it has been shown that hydrogen peroxide (H2O2) is a pivoting molecule able to trigger cell death by different mechanisms that may or may not involve the transcription factors such as NFκB-p53, and is executed by effector caspases. It is believed that mitochondria may play an important role as a producer or as a target of H2O2, and as a mediator in apoptotic death of embryos. The purpose of this review is to present the state of the art about apoptosis triggered by oxidative stress and mediated by mitochondria in in vitro produced bovine embryos, as part of the explanation for the low efficiency in this process

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Medio alternativo para la producción in vitro de embriones bovinos/ Alternative medium for in vitro production of bovine embryos

Ahuja Aguirre, Concepción; Montiel Palacios, Felipe; Pérez Hernández, Ponciano; Gallegos Sánchez, Jaime
2009-09-01

Resumen en español Se evaluó la tasa de desarrollo de blastocistos bovinos producidos in vitro utilizando medio de cultivo convencional para embriones bovinos y medio de cultivo para producción in vitro (PIV) de embriones humanos. Se obtuvieron ovocitos de ovarios de vacas Cebú sacrificadas en matadero. Los folículos ováricos fueron aspirados y los complejos cumulus-ovocitos (CCO) con al menos dos capas de células del cumulus intactas fueron madurados durante 22 a 24 h. Posteriormente (mas) , los CCO fueron fertilizados con semen bovino descongelado y coincubados por 20 a 24 h. Los presuntos cigotos fueron cultivados por 48 h en medio KSOM o en medio HTF modificado. En los días 3 y 5 post-fertilización in vitro (FIV), los embriones fueron cambiados a gotas nuevas de KSOM o de IVC-Two/IVC-Three. Para ambos cultivos, en el día 3 post-FIV se determinó la tasa de división y entre los 7 a 9 días post-FIV, se evaluó el desarrollo embrionario a etapa de blastocisto. La tasa de maduración in vitro fue 89,7%. La tasa de división fue 82,3% para ovocitos cultivados en KSOM y de 80,1% para ovocitos cultivados en HTF (P>0,05). La tasa de desarrollo de blastocistos fue 31,6% para embriones cultivados en KSOM y 29,5% para embriones cultivados en HTF/IVC-Two/IVC-Three (P>0,05). En conclusión, las tasas de desarrollo in vitro de blastocistos bovinos fueron similares para los embriones cultivados en un medio convencional para PIV de embriones bovinos y para los embriones cultivados en medios utilizados para PIV de embriones humanos, por lo que ambos tipos de medios pueden utilizarse para la PIV de embriones bovinos con resultados aceptables. Resumen en inglés The objective of this study was to evaluate the blastocyst development rate for in vitro produced bovine embryos using either the conventional culture medium for bovine embryos or culture media used for the in vitro production (IVP) of human embryos. Oocytes were obtained from ovaries of slaughtered Zebu cows. Ovarian follicles were aspirated and the cumulus-oocytes complexes (COC) with at least two layers of intact cumulus cells were matured for 22 to 24 h. Following tha (mas) t, COC were fertilized with frozen-thawed bovine semen and coincubated for 20 to 24 h. The presumptive zygotes were cultured for 48 h in KSOM medium or modified HTF medium. On days 3 and 5, post-in vitro fertilization (IVF) embryos were placed into new drops of KSOM or IVC-Two/IVC-Three. For both culture types, the cleavage rate was determined on day 3 post-IVF and the embryo development rate to blastocyst stage was evaluated on days 7 to 9 post-IVF. In vitro maturation rate was 89.7%. Cleavage rate was 82.3% for oocytes cultured in KSOM and 80.1% for oocytes cultured in HTF (P>0.05). Blastocyst development rate was 31.6% for embryos cultured in KSOM and 29.5% for embryos cultured in HTF/IVC-Two/IVC-Three (P>0.05). In conclusion, in vitro blastocyst development rates were similar for both the embryos cultured in the conventional medium for IVP of bovine embryos and the embryos cultured in media used for the IVP of human embryos, thus, both types of media can be used for the IVP of bovine blastocysts with acceptable results.

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Vitrificación como técnica de crioconservación de embriones bovinos/ Vitrification as a technique of bovine embryo cryopreservation

CELESTINOS, M; GATICA, R
2002-01-01

Resumen en español Desde hace más de 40 años se han conservado células y embriones de mamíferos, a temperatura ambiente, en refrigeración y por los diferentes métodos de crioconservación. Estas técnicas han ido evolucionando en procedimientos de congelación más simples, prácticos y menos costosos, uno es la vitrificación de embriones, proceso de solidificación, en el cual se utiliza una solución altamente concentrada que no cristaliza durante el congelamiento, en tanto que su (mas) viscosidad aumenta con el descenso de temperatura hasta la formación de un estado sólido amorfo semejante al vidrio. Por esto, la exposición y las tasas de congelamiento deben ser lo suficientemente rápidas para evitar la toxicidad y la formación de cristales intracelulares que puedan dañar al embrión. Para que los embriones soporten el choque osmótico, deben equilibrarse con una solución crioprotectora de menor concentración antes de exponerse a la solución vitrificante para su posterior congelación. Se ha publicado gran cantidad de técnicas de vitrificación para embriones, utilizando diferentes crioprotectores, concentración, volumen, método de adición, temperaturas, tiempo de exposición, tasa de congelación, descongelación y dilución, para mantener la función, estructura normal y viabilidad del embrión. Estas técnicas también se han experimentado en embriones producidos in vitro como in vivo y en diferentes etapas de desarrollo. El presente trabajo pretende dar una visión general de los métodos de conservación y en particular de la vitrificación de embriones bovinos, así como mencionar los últimos avances y procedimientos para tener una buena base bibliográfica a partir de la cual emprender las diferentes investigaciones Resumen en inglés Over the last 40 years cells and embryos of mammals have been preserved, at room temperature, refrigeration temperature and by different cryoconservation methods. These techniques have evolved into more simple, practical and less expensive freezing procedures. One of these is vitrification, a process of solidification that uses a highly concentrated solution which does not crystallize during freezing; its viscosity increases with the descent of the temperature until the f (mas) ormation of an amorphous solid state similar to glass. For this reason, exposure and freezing rates should be quick enough to avoid toxicity and the formation of intracellular ice, which can cause embryonic damage. In order for the embryos to support the osmotic shock, they should be equilibriated with a less concentrated crioprotectant solution before being exposed to the vitrificant solution for their later freezing. Several vitrification procedures have been published about embryo preservation, using different crioprotectants, concentration, volume, addition method, temperatures, exposition time, freezing rate, thawing procedure and dilution, to maintain the function, normal structure and viability of the embryo. These techniques have also been experimented with in vitro and in vivo produced embryos, at different developmental stages. This paper aims to review the present bovine embryo cryopreservation methods, particulary vitrification, as well as to mention the latest procedures and progress so that new researchers may have an updated literature review to start their works

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EFECTO DE LA SUPLEMENTACIÓN CON ALANINA Y GLICINA SOBRE LOS CLIVAJES INICIALES DE EMBRIONES BOVINOS PRODUCIDOS IN VITRO/ EFFECT OF SUPPLEMENTATION WITH ALANINE AND GLICYNE ON THE INITIAL CLEAVAGES OF BOVINE EMBRYOS PRODUCED IN VITRO

Arias L, Catalina; Ruiz, Tatiana; Olivera A, Martha; Tarazona, Ariel
2007-07-01

Resumen en español Objetivo. Determinar el efecto de la suplementación con alanina y glicina en el medio de cultivo sobre el porcentaje de clivaje de embriones bovinos, bajo condiciones de alta (20%) y baja (7%) tensión de oxígeno. Materiales y métodos. Los embriones fueron producidos a partir de oocitos madurados in vitro en M-199 suplementado con hormonas e inseminados con semen criopreservado; los cigotos fueron cultivados en medio CR1- AA. Al momento del cultivo se adicionaron alani (mas) na y glicina (5 mM y 10mM final respectivamente). Se usaron 4 tratamientos (T1: aminoácidos y baja tensión de oxígeno; T2: aminoácidos y alta tensión de oxígeno; T3: no aminoácidos y baja tensión de oxígeno; T4: no aminoácidos y alta tensión de oxígeno). El clivaje fue evaluado a las 48 hpi (horas post inseminación) evaluándose el número de embriones clivados sobre el total de embriones cultivados y el estadío de desarrollo (no clivados, 2, 4, 5-8 células). Se usó el programa estadístico STATISTICA (versión 5.0). Resultados. El porcentaje de embriones de 5-8 células en el tratamiento 1 respecto a los otros 3 tratamientos fue mayor (p= 0.007). Conclusiones. Los aminoácidos alanina y glicina son fundamentales para los clivajes iniciales y en bajas tensiones de oxígeno se aumenta la proporción de embriones competentes hasta las 48hpi. Resumen en inglés Objective. To determine the effect of supplementation with alanine and glicyne in vitro culture systems on the cleavage rate of bovine embryos under conditions of high (20%) and lower (7%) oxygen tension. Materials and methods. The embryos were produced from oocytes matured in vitro in M-199 supplemented with hormones and inseminated with cryopreservated semen; the zygotes were cultivated in CR1-AA medium. At culture moment alanine and glicyne were added (5 mm and 10mM fi (mas) nal respectively). Four (4) treatments were used (T1: amino acids and low oxygen tension; T2: amino acids and high oxygen tension; T3: non amino acids and low oxygen tension; T4: non amino acids and high oxygen tension). The cleavage was evaluated to 48 hpi (hours post insemination) being evaluated the number of embryos cleavaged on the total of culture embryos and the development stage (non cleavaged, 2, 4, 5-8 cells). The statistical program STATISTICA version 5.0 was used. Results. Embryos rate of 5-8 cells in the treatment one regarding the other 3 ones were higher (p = 0.007). Conclusions. The amino acids alanine, glicyne and in low oxygen tensions are fundamental for the initial cleavages because the proportion of competent embryos increases up to 48 hpi.

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Influencia de la subdivisión del callo embriogénico en la formación de embriones somáticos de cocotero/ Influence of embryogenic callus subdivision on coconut somatic embryo formation

Azpeitia Morales, Alfonso; Chan, José Luis; Sáenz Carbonell, Luis; Oropeza Salin, Carlos
2009-03-01

Resumen en español El presente estudio tuvo como objetivo determinar la influencia de la subdivisión del callo embriogénico primario de cocotero en la formación de embriones somáticos. El estudio se llevó a cabo en el laboratorio de biotecnología del Centro de Investigaciones Científicas (CICY-Yucatán), México. Se utilizaron callos embriogénicos de tres meses de cultivo procedentes del cultivo de plúmulas en condiciones de obscuridad por tres meses del genotipo de cocotero Enano (mas) Malayo Verde, cultivados previamente en un medio Y3 y adicionado con 0.55 mM de 2,4-D. Los resultados permitieron observar que con callos embriogénicos subdivididos en cuatro partes se incrementa en 3.36 veces el número de embriones somáticos tipo torpedo con respecto al control en los primeros 15 días de cultivo. En un segundo ensayo en el que se utilizó mayor número de muestras la respuesta fue similar, aunque en menor cantidad (2.7 veces) y el peso fresco se incrementó 2.36 veces en subdivisiones de callo embriogénico cultivadas sin fitohormonas, con respecto al control con fitohormonas durante los primeros 15 días de cultivo en condiciones de luminosidad. Los resultados obtenidos son prometedores y establecen las bases para incrementar el número de embriones somáticos y eventualmente la multiplicación de callos embriogénicos en cocotero, lo cual podrá facilitar la propagación a gran escala de palmas híbridas o palmas élite. Resumen en inglés The objective of this study was to determine the influence of primary embryogenic callus subdivision on the formation of somatic embryos. The research was carried out at the biotechnology laboratory of the Centro de Investigación Cientificade Yucatán, Mexico. Three months old embryogenic callus from plumules cultivated during three months under dark conditions in Y3 medium added with 0.55 mM of 2,4-D of the cultivar Enano Malayo Verde, were used. The subdivision in four (mas) parts of the embryogenic callus showed after fifteen days in culture a 3.36 times increase in the number of torpedo type somatic embryos compared to the control. In a second experiment, using a larger number of samples, the results were similar although in smaller amount (2.7 times more somatic embryos) and 2.36 times increase in fresh weight with the subdivision of callus cultured without phytohormones in relation to the control with phytohormones after fifteen days under light culture conditions. These results are promising and could be useful to increase the number of somatic embryos and eventually facilitate large-scale propagation of hybrids or elite coconut palms.

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Propagación in vitro de Nothofagus procera ((Poepp. et Endl.) Oerst.) a partir de embriones aislados/ In vitro propagation of Nothofagus procera ((Poepp. et Endl.) Oerst.) from isolated embryos

SANCHEZ-OLATE, MANUEL; RIOS, D; PEDRAZA, M; PEREIRA, G; CASTELLANOS, H; ESCOBAR, R
2004-04-01

Resumen en español Se estudió la propagación in vitro de Nothofagus procera sobre los medios de cultivo MS y BTM usando embriones maduros como material inicial. En la fase de establecimiento embrionario, pese a no haber diferencias estadísticas, se optó por el medio MS, ya que en éste las microplántulas mostraron mayor vigor. En una posterior etapa de proliferación, los resultados mostraron que los tratamientos hormonales, en especial 0,5 mgl-1 de BAP y 0,05 mgl-1 de AIB son signific (mas) ativamente mejores para la inducción de yemas y tallos. Se observó que muchos puntos de crecimiento no elongaron a estas concentraciones, lo cual se superó al estrechar la relación citoquinina/ auxina a 0,5 mgl-1 de BAP más 0,07 mgl-1 de AIB. Sin embargo, la manifestación y crecimiento de los órganos inducidos es significativamente mejor en medio MS sin hormonas, donde se logra, incluso, rizogénesis adventicia en forma espontánea Resumen en inglés In vitro propagation of Nothofagus procera was studied in MS and BTM culture media using mature embryos as the initiation material. Even at the embrionary establishment phase, there was no statistical difference between two media and the MS medium was selected because it produced more vigorous microseedlings. In the following proliferation phase, the results showed that hormonal treatments, in particular 0.5 mg/l of BAP and 0.05 mg/l of IBA, were better for the induction (mas) of buds and shoots. There were not many growth points observed at this concentration, which was improved by increasing the hormonal concentration to 0.5 mg/l of BAP and 0.07 mg/l of IBA. However, the manifestation and growth of the induced organs was significantly better in MS medium without hormones, which also spontaneously formed roots

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ANÁLISIS MULTIFACTORIAL DE LAS TASAS DE PREÑEZ EN PROGRAMAS DE TRANSFERENCIA DE EMBRIONES EN COLOMBIA/ MULTIFACTORIAL ANALYSIS OF PREGNANCY RATES IN EMBRYOS TRANSFER PROGRAMS IN COLOMBIA

Rodríguez, Juan; Giraldo, Carlos; Castañeda, Susana; Ruiz, Tatiana; Olivera, Martha
2007-07-01

Resumen en español Objetivo. Analizar varias características del embrión transferible, así cómo algunas características de las receptoras sobre las tasas de preñez. Materiales y métodos. Se evaluaron ciento setenta y cuatro transferencias en dos haciendas en Colombia. Las variables analizadas en las receptoras fueron los niveles de progesterona sérica, tamaño del cuerpo lúteo y el grupo genético. Las variables analizadas en los embriones fueron estudió de desarrollo, calidad y t (mas) ransferencia en fresco o congelado. Resultados. Ninguna de las variables individualmente predicen la tasa de preñez, sin embargo, existe la probabilidad de un mejor resultado cuando se usa un embrión excelente congelado (OD=5.100), bueno fresco (OD= 4.180) y si la receptora es ¾ Angus (OD=2.945). Conclusiones.La tasa de preñez sigue siendo un evento regulado de manera multifactorial y ninguno de los parámetros evaluados individualmente son responsables del éxito reproductivo. Resumen en inglés Objective. To analyze several characteristics of transferable embryo, as well as some of receptors on the pregnancy rates. Materials and methods. Hundred seventy four transfers were evaluated in two farms in Colombia. The analyzed variables in the receptors were serum progesterone levels, corpus luteum size and genetic group. The analyzed variables in embryos were stage of development, quality and transferin fresh or frozen. Results. None of the variables individually pre (mas) dicts the rate of pregnancy, however, the probability of a better result exists when a frozen excellent embryo is used (OD=5.100), good fresh (OD = 4.180) and if the receptor is ¾ Angus (OD=2.945). Conclusions. The pregnancy rate continues being a regulated event in multifactorial way and none of the evaluated parameters individually is responsible for the reproductive success

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Vitrificación de ovocitos bovinos y su uso en el desarrollo partenogenético de embriones/ Vitrification of bovine oocytes and its use in the parthenogenetic development of embryos

Ruiz, J; Correa, JE; Martínez, M
2010-01-01

Resumen en español El objetivo de este trabajo fue evaluar el efecto de la vitrificación en la viabilidad de ovocitos activados químicamente para la producción de embriones partenogenéticos bovinos. Ovocitos bovinos aspirados de ovarios obtenidos en el matadero fueron madurados in vitro por 20-22 horas y se distribuyeron en los siguientes grupos. I (n=76): ovocitos vitrificados/descongelados, II (n=119): ovocitos expuestos a crioprotectantes sin vitrificación y III (n=142): ovocitos co (mas) ntrol. Los ovocitos fueron vitrificados en microgotas sobre un papel de aluminio preenfriado flotando en nitrógeno líquido, utilizando una solución de equilibrio con 4% de etilenglicol y una solución de vitrificación con 35% de etilenglicol 5% de polivinilpirrolidona y 0,4 M de trehalosa. Las microgotas vitrificadas fueron almacenadas en nitrógeno líquido y fueron descongeladas 1-3 días después del almacenamiento. Los tres grupos de ovocitos se activaron partenogenéticamente por exposición de 4 minutos a 5 µM de ionomicina de Ca a temperatura ambiente seguido de una incubación por 5 horas en 6-dimetilaminopurina a 38,5 ºC en una atmósfera húmeda con 5% CO2. Los embriones se cultivaron en medio mSOF durante 8-9 días. Las tasas de ovocitos sobrevivientes fueron 55,1% y 93,7% para ovocitos vitrificados/descongelados (I) y expuestos (II) respectivamente. Las tasas de segmentación de 55,3%, 72,3% y 74,6%, y de desarrollo hasta blastocistos fueron 7,1%, 17,4% y 21,7% en los grupos I, II y III respectivamente. Estos resultados demuestran que la técnica de vitrificación ha quedado establecida y permite la producción de embriones partenogenéticos bovinos Resumen en inglés The aim of this study was to evaluate vitrification effects on the viability of chemically activated oocytes in order to produce parthenogenetic bovine embryos. Bovine oocytes retrieved from ovaries obtained in a slaughterhouse were matured in vitro for 20-22 hours and then assigned to the following groups: I (n=76): Vitrified/thawed oocytes, II (n=119): exposed oocytes to cryoprotectans without vitrification and III (n=142): control oocytes. Bovine oocytes were vitrified (mas) in microdrops on a precooled aluminum foil floating in liquid nitrogen, using an equilibrium solution with 4% ethylene glycol and a vitrification solution with 35% ethylene glycol, 5% polyvinyl-pyrrolidone and 0,4 M trehalose. The vitrified microdrops were stored in liquid nitrogen and were thawed after 1-3 days of storage. The oocytes of the 3 groups were parthenogenetically activated by 4-min exposure to 5 µM Ca ionomycin at room temperature followed through 5 hours incubation in 6-dimethylaminopurine at 38.5 ºC in a 5% CO2 in humidified atmosphere. Embryos were cultivated on mSOF medium during 8-9 days. The rates of oocytes survival were 55.1% and 93.7% to vitrified/thawed (I) and exposed (II) oocytes respectively. The rates of cleavage were 55.3%, 72.3% and 74.6%; and development to blastocysts were 7.1%, 17.4% and 21.7% in groups I, II and III respectively. These results demonstrate that the oocyte vitrification technique has been set up in our laboratory and parthenogenetic bovine embryos can be produced from such as vitrified/thawed oocytes

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Vitrificación: Una Alternativa para la Criopreservación de Embriones/ Vitrification: An Embryo Cryopreservation Alternative

Cabrera, Pedro; Fernández, Adriana; Bastidas, Pedro; Molina, Magaly; Bethencourt, Angélica; Díaz, Thaís
2006-06-01

Resumen en español A nivel mundial, la técnica de criopreservación de embriones mamíferos más utilizada es la criopreservación lenta o estándar, la cual hace uso de equipos de criopreservación programados que descienden la temperatura a una tasa constante; sin embargo, la implementación de técnicas avanzadas de criopreservación como la vitrificación, surge como una alternativa factible. Debido a la importancia que ha tomado esta técnica de criopreservación desde su aparición e (mas) n 1985, se ha desarrollado la presente revisión, abordando aspectos básicos de la técnica y detallando algunos factores que intervienen en todo el proceso de vitrificación de embriones. Resumen en inglés The most commonly used cryopreservation technique for mammalian embryos is the standard cryopreservation method, which uses programmed equipments for freezing, that decrease temperature at a constant rate. However, implementation of more advanced techniques for cryopreservation, as  vitrification, rises as an alternative worldwide. Because of the importance that vitrification has reached since its beginning in 1985, this review focuses on basic aspects of the technique and details some factors that affect the whole process of embryo vitrification.

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FACTORES DE CRECIMIENTO EN EL DESARROLLO FOLICULAR, EMBRIONARIO TEMPRANO E IMPLANTACIÓN. IMPLICACIONES EN LA PRODUCCIÓN DE EMBRIONES BOVINOS/ GROWTH FACTORS IN THE FOLLICULAR DEVELOPMENT, EMBRYONIC EARLY AND IMPLANTATION. IMPLICATIONS IN THE PRODUCTION OF BOVINE EMBRYOS

Peña J, Miguel; Góngora O, Agustín; Estrada L, José
2007-01-01

Resumen en español Se describe el papel de los factores de crecimiento en el desarrollo folicular, embrionario temprano e implantación y se destaca su importancia en la producción de embriones bovinos. Los factores de crecimiento cumplen importantes funciones en eventos claves de la actividad reproductiva. Aunque se conocen algunos mecanismos de acción y el efecto sinérgico con otras hormonas reproductivas, se está lejos de conocer totalmente su papel. Estudios previos tanto in vivo co (mas) mo in vitro señalan que podrían mejorar notablemente las tasas de fertilización, de clivaje e implantación. Resumen en inglés The review describes the role the growth factors on follicular development, early embryonic, implantation and their importance in the production of bovine embryos. It describes, growth factors its important roles in key events of the reproductive activity, although some mechanisms action and their synergistic effects with other hormones are well known, their full role is far from being elucidated. Previous works in vivo and in vitro studies point out that they could improve notably, fertilization and clivage rates and implantation.

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Transgénesis mediada por espermatozoides en la especie porcina: efecto de la presencia de ADN exógeno sobre la calidad seminal y evaluación de la producción in vivo de embriones transgénicos/ Sperm mediated gene transfer in pigs: Effect of exogenous DNA presence in seminal quality and evaluation of in vivo transgenic embryo production

García-Vázquez, Francisco Alberto; Ruiz, Salvador; Grullón, Luis Alberto; de Ondiz, Aitor; Gutiérrez-Adán, Alfonso; Gadea, Joaquín
2010-02-01

Resumen en español Una alternativa biotecnológica para la producción de animales transgénicos es la transgénesis mediada por espermatozoides (SMGT), basada en la habilidad de las células espermáticas de unir e interiorizar ADN exógeno. En este estudio se plantearon dos objetivos principales: 1) evaluar el efecto de la presencia de ADN exógeno sobre la calidad seminal y 2) evaluar la eficiencia en la producción de embriones transgénicos porcinos in vivo mediante inseminación intra (mas) uterina quirúrgica con espermatozoides incubados con el transgén. Para alcanzar estos objetivos, los espermatozoides (libres de plasma seminal) fueron incubados en presencia del transgén EGFP (proteína verde fluorescente) durante 2 h a 16°C (en una relación de 10(8) cels/mL y 5 µg ADN/mL). Se valoró la motilidad, motilidad progresiva e integridad de membrana de los espermatozoides incubados, en presencia o ausencia del transgén. Los resultados mostraron que la presencia del ADN no afectó a ninguno de los parámetros seminales estudiados. Con muestras seminales incubadas con el transgén se llevaron a cabo inseminaciones intrauterinas mediante laparotomía en 4 hembras prepúberes. A los 6-7 días tras la inseminación se recolectaron los embriones, para evaluar la tasa de fecundación y la expresión de la proteína verde fluorescente EGFP en los mismos. El número medio de cuerpos lúteos por cerda fue de 10,50 ± 2,90 con una tasa de recolección de 11,90%. Se recolectó un total de 5 embriones presentando todos ellos un estado normal de desarrollo y una alta calidad (dos de ellos presentaban más de 400 células por embrión). Cuando fue analizada la expresión mediante microscopia de fluorescencia, ninguno de ellos expresaba la proteína EGFP. Este resultado, bajo las condiciones experimentales del presente estudio, podría indicar que el transgén se una en su mayoría a espermatozoides con baja viabilidad por lo que la probabilidad de que los espermatozoides vivos unan el ADN y sean capaces de fecundar en comparación con espermatozoides sin el transgén es realmente baja. Resumen en inglés An alternative technology for producing transgenic animals is sperm mediated gene transfer (SMGT), based on the ability of sperm cells to bind and internalize exogenous DNA. The aims of this work were: 1) evaluate the effects of the presence of exogenous DNA in the seminal quality and 2) evaluate the efficiency of transgenic embryos production by surgery artificial insemination using sperm mediated gene transfer technique. Fresh spermatozoa (removed seminal plasma) were i (mas) ncubated with DNA (EGFP) at 16°C for 2 h (10(8) cells/mL and 5 µg DNA/mL). At first motility, progressive motility and viability were evaluated in spermatozoa incubated with or without exogenous DNA. The results showed that the presence of the DNA did not affect any of the studied sperm parameters (motility, progressive motility and viability). On the other hand insemination was carried out in 4 gilts by laparotomy in utero tubaric junction. Six-seven days after insemination blastocysts were collected and fertilization rate and transgene expression were determined. The mean number of corpora lutea/gilt was 10.50 ± 2.90 with a mean recovery rate of 11.90%. After the surgery, a total of 5 embryos were recovered and the percentage of normally developed embryos was 100% and with a high quality (two of them had more than 400 cells). When the blastocysts recovered after 6-7 days post-insemination were analyzed by fluorescence microscopy, it was revealed that none of them expressed protein EGFP. These results show the possibility that exogenous DNA bound to the sperm with low viability and only a low percentage to viable sperm, so the probability that live sperm bind the DNA and are able to fertilize in comparison with live sperm without the transgene are really low.

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Estudio preliminar para el establecimiento de un protocolo de crioconservación para palma de aceite (Elaeis guineensis Jacq.)/ Preliminary study of the establishment of cryoconservation protocol for oil palm (Elaeis guineensis Jacq.)

Villa, Alba Lucía; Jiménez, Pablo Édgar; Valbuena, Raúl Iván; Bastidas, Silvio; Núñez, Víctor Manuel
2007-07-01

Resumen en español El objetivo de esta investigación fue desarrollar e implementar un protocolo de crioconservación para embriones cigóticos de palma de aceite (Elaeis guineensis Jacq.), como alternativa para complementar la conservación de genotipos de palma ante las dificultades que se presentan en la colección de campo en la actualidad. Se evaluaron las etapas de pre y poscongelación de embriones cigóticos con la metodología de desecación en silica gel a diferentes tiempos de ex (mas) posición (2, 2,5 y 3 h), seguido de un congelamiento rápido y una etapa de recuperación en un medio de cultivo Murashige y Skoog (1962). Todos los tratamientos de crioconservación fueron evaluados con un fotoperíodo de 16 h luz y 8 h de oscuridad, con una temperatura media de 28 °C. Previamente se determinó el estado de desarrollo adecuado de los embriones para crioconservar. Además, se realizó la prueba de viabilidad con Tetrazolio para embriones desnudos como un control inicial del lote de semilla solicitado. Se logró establecer un protocolo de crioconservación a partir de embriones cigóticos desnudos de palma, el cual permitió obtener plántulas de embriones congelados en nitrógeno líquido (-196 °C); alcanzando una sobrevivencia del 84,37% para embriones crioconservados. En cuanto a la diferenciación de estructuras de los embriones crioconservados, el tratamiento de dos horas obtuvo valores para plúmula del 88,9%, radícula del 55,57% y haustorio del 66,7%. Esta metodología permitiría conservar material valioso a largo plazo como copia de seguridad complementaria de la colección de campo y reduciría los costos de mantenimiento y conservación. Resumen en inglés The objective of this research was to develop and implement a cryoconservation protocol for zygotic embryos of oil palm (Elaeis guineensis Jacq.) as a complement alternative to the conservation of oil palm genotypes due to the difficulties that occur in the field collection. Pre- and post-freezing steps of zygotic embryo cryoconservation were evaluated using the methodology of desiccation in silica gel at different exposure times (2, 2,5, and 3 h), followed by a rapid fre (mas) ezing and a recovery step in Murashige and Skoog (1962) culture medium. All the cryoconservation treatments were evaluated under a photoperiod of 16 h light and 8 h darkness at an average temperature of 28 °C. The appropriate embryo development for the cryoconservation was previously determined. Additionally, the viability test with tetrazolium was applied to naked embryos as an initial control of the batch seed required. It was achieved a cryoconservation protocol for naked zygotic embryos of palm, which allowed obtaining plantlets from embryos frozen in liquid nitrogen (-196 °C) with up to 84.37% survival. In relation to structure differentiation of the cryoconserved embryos, the two hour treatment gave values of 88.9% for plumula, 55.57% for radicle, and 66.7 % for haustorium. This methodology might allow a long-term conservation of valuable material as a complementary security procedure to copy the field collection and reduce the costs of maintenance and conservation.

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Manifestaciones cutáneas como parámetro de teratogenicidad en la intoxicación con metales pesados/ Cutaneous signs as parameter in teratogenicity by heavy metal intoxication

Pauza, N L; Pérez Cotti, M J; Godar, M L; Sopena, Y; Ferramola de Sancovich, A M; Sancovich, H A
2007-03-01

Resumen en español Se estudiaron los efectos teratogénicos de metales pesados (acetatos de Cd2+ y Pb2+ y sulfato de Cu2+), en embriones de pollo en desarrollo, después de la administración de una monodosis del metal. Los huevos embrionados fueron inyectados en la yema en el día 12 de incubación. Las concentraciones de los iones fueron (nmoles/g huevo): Cd2+: Dosis 1 (D1): 0,16 y Dosis 2 (D2): 0,32; Pb2+: D1: 8,0 y D2: 16,0 y Cu2+: D1: 1,7 y D2: 3,3. Los resultados se evaluaron después (mas) de continuar la incubación in ovo durante 12 y 60 hs Cu2+ y Pb2+ no aumentaron la mortalidad de los embriones, en cambio, la presencia de Cd2+ produjo entre 30 y 86 % de mortalidad de los embriones, con efectos dosis y tiempo dependientes. Los embriones intoxicados con la D2 de Cd2+ durante 60 hs fueron los únicos ejemplares que presentaron disminución en su peso promedio, respecto de los ejemplares de control. La administración de Cd2+ causó efectos teratogénicos más severos que los tratamientos con Cu2+ y Pb2+. Se puede concluir que los metales pesados son embriotóxicos e inducen teratogenia en embriones de pollo en desarrollo. Se sugiere que los mejores parámetros para evaluar la teratogenicidad producida por la intoxicación Cd2+, Cu2+ y Pb2+ son los derrames cutáneos y hepáticos. Resumen en inglés Teratogenic effects of heavy metals (Cd2+- and Pb2+- acetates and Cu2+- suphate) were studied on chick embryos, after the administration as a single dose. Test materials were injected into the yolk on day 12 of incubation. Tested concentrations were (nmole/g egg): Cd2+ Dose 1 (D1): 0.16 and Dose 2 (D2): 0.32; Pb2+: D1: 8.0 and D2: 16.0 and Cu2+: D1: 1.7 and D2: 3.3. Evaluations were performed after in ovo incubation for 12 and 60 hours. Embryonic mortality did not increas (mas) e at the two dose levels of Cu2+ and Pb2+, while Cd2+ caused 30 and 86% of mortality, showing dose and time responses. Eggs treated with D2 of Cd2+ for 60 hs, significantly decreased the average of body mass embryo, when compared to the control group. Cd2+ administration was responsible for the most severe teratogenic signs compared to Cu2+ and Pb2+ treatments. It can be concluded that heavy metals are embryotoxic and teratogenics. We suggest that cutaneous and liver hemorrhages are the best signs to evaluate teratogenicity induced by Cd2+, Cu2+ and Pb2+.

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Primary and secondary somatic enbryogenesis in leaf sections and cell suspensins of coffea arabica cv. catimor

Fernández-Da Silva, Rafael; Hermoso-Gallardo, Luis; Menéndez-Yuffá, Andrea
2005-11-01

Resumen en portugués O objetivo principal de este estudo foi caracterizar e melhorar u desenvolvimento dos embriões somáticos secundários no café (Coffea arabica cv. Catimor). Ademais, devido a que u desenvolvimento dos embriões somáticos primários e a primeira estágie da diferenciación dos embriões somáticos secundários, foram comparados três metodos para indução: 1) um meio solido em dois estágios, primeiro meio com 4,5µM do ácido 2,4-diclorofenoxiacetico (2,4-D) e 35µM d (mas) o benzyladenine (BA) e segundo meio com 4,3µM do ácido naftalenoacético, 2) um meio solido em uma estágio (4,4-53,3µM BA), e 3) suspensões celulares. Em esse ultimo tratamento, u calo fui formado em dois estágies do meio solido, uma com 9,3µM do cinetine e 2,3µM da 2,4-D, e segundo com 22,2µM do BA, e um terceiro meio líquido com 35µM do BA. Todos os tratamentos induziram embriognese somática primária e secundária. O rendimento mais elevado dos embriões somáticos foi obtido em suspensões celulares. Os embriões somáticos secundários foram diferenciados na maneira direta das células epidérmicas e subepidérmicas da zona hipocotilar dos embriões somáticos primários. Resumen en español El principal objetivo de esta investigación fue caracterizar y optimizar el desarrollo de embriones somáticos secundarios en café (Coffea arabica cv. Catimor). Adicionalmente, dado que la formación de embriones somáticos primarios es la etapa previa a la diferenciación de embriones somáticos secundarios, se compararon tres métodos para su inducción: 1) medio sólido en dos etapas, primero un medio con 4,5µM de ácido 2,4-diclorofenoxiacético (2,4-D) y 35µM de (mas) benciladenina (BA), y luego un medio con 4,3µM de ácido naftalenoacético, 2) medio sólido con 4,4-53,3µM BA en una etapa, y 3) cultivos en suspensión. En este último tratamiento el callo se formó en dos etapas de medio sólido, un medio con 9,3µM de cinetina y 2,3µM de 2,4-D y un segundo medio con 22,2µM de BA, así como en un tercer medio líquido con 35µM de BA. Todos los tratamientos indujeron la embriogénesis somática primaria y secundaria. El máximo rendimiento de embriones somáticos primarios se obtuvo en suspensiones celulares. Los embriones somáticos secundarios se diferenciaron directamente a partir de células epidérmicas y subepidérmicas en la zona hipocotilar de los embriones somáticos primarios. Resumen en inglés The main purpose of this research was to characterize and optimize the development of secondary somatic embryos in coffee (Coffea arabica cv. Catimor). In addition, as the primary somatic embryos formation is the previous stage to the differentiation of secondary somatic embryos, three methods for its induction were compared: 1) solid media in two stages, first in a medium with 4.5µM of 2,4-dichlorophenoxiacetic acid (2,4-D) and 35µM of benzyladenin (BA) and then in a m (mas) edium with 4.3µM naphtaleneacetic acid, 2) solid media with 4.4-53.3µM BA in one stage, and 3) suspension cultures. In the latter treatment the callus was formed in two stages of solid media, one containing 9.3µM of kinetin and 2.3µM of 2,4-D, and a second one with 22.2µM of BA, and a third liquid medium with 35µM of BA. All the treatments induced primary and secondary somatic embryogenesis. The highest yield of somatic embryos was obtained in suspension cultures. The secondary somatic embryos differentiated directly from epidermal and subepidermal cells of the hypocotilar zone of the primary somatic embryos.

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EXPRESIÓN DE FILAMENTOS INTERMEDIOS DURANTE EL DESARROLLO EMBRIONARIO DE CERDO (Sus scrofa) Y BOVINO (Bos taurus)/ INTERMEDIATE FILAMENTS EXPRESSION DURING EMBRYONIC DEVELOPMENT OF PIG (Sus scrofa) AND BOVINE (Bos taurus)

Rodríguez, Angel; Rojas, Mariana A.; Montenegro, M. Angélica; Regadera, Javier
2000-01-01

Resumen en español Utilizando la técnica de inmunoperoxidasa y un panel de anticuerpos monoclonales, se realizó un estudio para caracterizar la expresión de citoqueratinas y vimentina, proteínas constituyentes de los filamentos intermedios, en los tejidos en diferenciación de embriones de cerdo y bovino, en diferentes etapas de la embriogénesis. Ambas especies presentaron características similares en la expresión de citoqueratinas y vimentina. En los embriones prefetales, mayores de (mas) 18 mm de longitud cráneo-caudal, ya existe un patrón de citoqueratinas en la mayoría de las células epiteliales, ya que éstas se tiñeron intensamente con los anticuerpos antiqueratinas AE1/AE3 y AE1. En embriones menores, sólo reaccionaron moderadamente con estos anticuerpos, el mesonefros, tubo digestivo y epitelio celómico. La vimentina aparece en embriones más pequeños en el endotelio vascular, en el mesonefros y en algunas células conectivas y del tubo neural. En embriones mayores, además, aparece inmunotinción con este anticuerpo, en el endocardio, dermis, plexos coroídeos, osteoblastos y odontoblastos. La citoqueratina 18 y los controles negativos de las inmunotinciones empleadas, no mostraron reacción positiva en ninguna de las estructuras embrionarias de ambas especies. Nuestros resultados enfatizan la importancia de los filamentos intermedios, especialmente de las citoqueratinas, como marcadores de diferenciación de los tejidos embrionarios y sugieren que en aquellos órganos que comienzan a funcionar tempranamente en el embrión, como el mesonefros y la red vascular, el citoesqueleto se organiza más tempranamente Resumen en inglés Using immunoperoxidase technique, an established panel of antibodies was used to characterise the cytokeratin and vimentin intermediate filaments profile of tissues from bovine and pig embryos, in different stages of development. Both species presented similar characteristics in cytokeratin and vimentin expression. In prefetal embryos, a pattern of keratin is established in most of the epithelial cells. These epithelial cells were intensely stained with the antikeratin an (mas) tibodies AE1/AE3 and AE1. In embryos smaller than 18 mm crown-rump length, there was only a weak immunoreaction with these antibodies in the mesonephros, in the intestinal tract and, in the coelomic epithelium. In these embryos, the immunostain with antivimentin antibody was positive only in vascular endothelium, in the mesonephros and, in some mesenchymal cells. No histological tissues were positive to the antikeratin 18 antibody in both species, at the stages studied. No positive staining was observed in the negative controls of immunostains for different antibodies employed in this work. The different pattern of cytokeratins are related to the degree of differentiation of immature epithelial cells. Our results emphasizes the importance of intermediate filaments, mainly cytokeratins, as useful markers of embryonic tissue differentiation, and suggest that in those organs that begin their function early in development, like the mesonephros and vascular system, the cytoskeleton organizes earlier in the embryonic life

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Comparación entre el clivaje temprano y el estadio pronuclear como parámetros de referencia para inducir el embarazo en pacientes ovoreceptoras en Cali (Colombia)/ Comparing early cleavage and pronuclear state as reference parameters for inducing pregnancy in embryo implantation patients in Cali, Colombia

Estela-Paz, María Esther; Saavedra-Saavedra, Jaime; Moyano, Martha Norah
2009-09-01

Resumen en español Introducción: algunos autores han propuesto métodos no invasivos que se centran en el clivaje temprano del estadio de dos células a las 25 y 27 horas luego de ocurrida la inseminación, los cuales son aplicables a los programas de fertilización in vitro que aumentan la probabilidad de implantación y embarazo. Objetivo: comparar la tasa de embarazo en pacientes ovoreceptoras con embriones provenientes de clivaje temprano con respecto a la del estadio pronuclear. Metod (mas) ología: se realizó un estudio de cohorte retrospectivo, en el cual se incluyeron a las pacientes ovoreceptoras que asistieron entre abril de 2004 y diciembre de 2007 al Centro de Biomedicina -FECUNDAR en Cali (Colombia) por presentar baja respuesta al ciclo de estimulación ovárica controlada, factor edad, falla ovárica o por ser pacientes subrogadas o gestacionales. El tamaño de la muestra se dividió de la siguiente manera: el porcentaje de embarazo esperado para el grupo de clivaje temprano-singamia (grupo 1) fue 79% (36 pacientes) mientras que el porcentaje de embarazo para el grupo pronuclear (grupo 2) llegó a ser 21% (9 pacientes). A partir de la obtención de estos datos, se determinaron las tasas de implantación y de embarazo y se compararon los dos grupos por medio de la prueba Chi-cuadrado (X²). Resultados: de un total de 289 cigotos, se incluyeron 183 que cumplieron los parámetros propuestos, entre embriones provenientes de clivaje temprano (CT), singamia (S) y estadio pronuclear (PN) a las 25 y 27 horas posinseminación. De este total, 79% provenían del estadio clivaje temprano-singamia y 21% del estadio pronuclear. El promedio de embriones transferidos a las pacientes ovoreceptoras fue tres embriones, la edad promedio fue 38 años, la tasa de embarazo obtenida al transferir los embriones provenientes de clivaje temprano fue 44% en comparación con 41% para la transferencia de los embriones no clivados a las 25 horas posinseminaci ón. Finalmente, no se encontraron diferencias significativas en la obtención del embarazo. Conclusión: bajo las condiciones del estudio, el resultado muestra que no hay diferencias en la tasa de éxitos para ambos procedimientos. Resumen en inglés Introduction: some authors have proposed that non-invasive embryo implantation methods (based on early cleavage or pronuclear stage for two cells 25 and 27 hours post-insemination) are applicable to in vitro fertilisation programmes, thereby increasing the probability of implantation and pregnancy. Objective: comparing pregnancy rates in patients implanted with embryos originating from early cleavage to those from the pronuclear stage. Methodology: a retrospective cohort (mas) study was carried out. Embryo implantation patients were included who had been attending the FECUNDAR -Biomedicine Centre in Cali, Colombia, from April 2004 to December 2007 who presented a poor responsetothecontrolledovarianstimulationcycle, age factor and/or ovarian failure and pregnancy substitute patients. The sample consisted of 45 patients; 36 patients (79%) were expected to become pregnant in the early-syngamy and cleavage group (group 1) and 9 patients (21%) in the pronuclear group (group 2). Implantation and pregnancy rates were determined and the Chi-square (X²) test was used for comparing both groups. Results: 183 of the 289 zygotes complied with the proposed parameters (i.e. embryos from early cleavage, syngamy and pronuclear stage 25 and 27 hours post-insemination); 79% of these 183 came from the early cleavage and syngamy stage and 21% from the pronuclear stage. Three embryos on average were transferred to embryo implantation patient; average age was 38, the pregnancy rate obtained when transferring early cleavage embryos was 44% compared to 41% for non-cleaved embryo transfer 25 hours post-insemination. No statistically significant differences were found regarding how pregnancy was induced. Conclusion: equal success rates were obtained for both procedures in the given study conditions.

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Desarrollo embrionario en ovejas Pelibuey y Suffolk en condiciones de estrés calórico/ Embryonic development in Pelibuey and Suffolk ewes under heat stress conditions

Tabarez-Rojas, Abigail; Porras-Almeraya, Antonio; Vaquera-Huerta, Humberto; Hernández-Ignacio, Javier; Valencia, Javier; Rojas-Maya, Susana; Hernández-Cerón, Joel
2009-11-01

Resumen en español El estrés calórico antes y después de la ovulación afecta el desarrollo embrionario en la oveja y se han observado diferencias genéticas en termotolerancia. En el presente trabajo se evaluó si el estrés calórico durante el periodo posovulatorio reduce la proporción de embriones transferibles y de blastocistos en ovejas, y si el efecto es menor en ovejas adaptadas a climas cálidos (Pelibuey) que en las no adaptadas (Suffolk). Se superovularon 32 ovejas. El día 2 (mas) del ciclo (estro=día 0), las ovejas se asignaron aleatoriamente a dos tratamientos: 1) estrés calórico (n=16; 8 Pelibuey y 8 Suffolk), del día 2 al 6 permanecieron 6 h al día en una cámara climática a 37±2.5 °C y 25 % de humedad relativa (HR); 2) testigo (n=16; 8 Pelibuey y 8 Suffolk), se alojaron a temperatura ambiente (18±3 °C y 50 % de HR). Se determinaron las concentraciones de progesterona diariamente del día 0 al 7. Los embriones se recolectaron el día 7. No se encontró diferencia (p>0.05) entre el grupo de estrés calórico y el testigo en la proporción de embriones transferibles (55 vs 69 %), ni en la proporción de blastocistos (34 vs 42 %). Tampoco hubo diferencias entre razas (p>0.05). Una mayor proporción (p Resumen en inglés Heat stress before and after ovulation affects embryonic development in sheep, and genetic differences in heat tolerance have been observed. In the present study, it has been assessed whether heat stress during the postovulatory period may reduce the proportion of transferable embryos and blastocysts in ewes, and if the effect on sheep adapted to warm climates (Pelibuey) is lower than that on unadapted ones (Suffolk). Thirty-two ewes were superovulated. On day 2 of the cy (mas) cle (estrus=day 0), the ewes were randomly assigned to two treatments: 1) heat stress (n= 16, 8 Pelibuey and 8 Suffolk), from day 2 to 6 they stayed in a climatic chamber 6 h a day, at 37±2.5 °C and 25 % relative humidity (HR); 2) control (n=16; 8 Pelibuey and 8 Suffolk sheep), kept at environmental temperature (18±3 °C and 50 % HR). Progesterone concentrations were determined daily from day 0 to 7. The embryos were collected on day 7. There was no difference (p>0.05) between the group exposed to heat stress and the control with respect to the proportion of transferable embryos (55 vs 69 %), nor to the blastocyst proportion (34 vs 42 %); between breeds there were no differences either (p>0.05). A larger proportion (p

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Efecto de la aplicación de la hormona de crecimiento recombinante (rbST) sobre la respuesta superovulatoria y la viabilidad embrionaria en ovejas de pelo./ Effect of Recombinant Growth Hormone (rbST) Application on Superovulatory Response and Embryo Viability in Hair Ewes.

Navarrete-Sierra, Luis F; Cruz-Tamayo, Alvar A; González-Parra, Eugenia I; Piña-Aguilar, Raúl E; Sangines-García, José R; Toledo-López, Víctor; Ramón-Ugalde, Julio P
2008-04-01

Resumen en español Se estudió el efecto del uso de una proteína de alto valor nutricional y su interacción con la hormona de crecimiento recombinante (rbST) sobre la respuesta superovulatoria y la viabilidad embrionaria en ovejas de pelo. Se utilizaron doce ovejas adultas de raza Pelibuey, distribuidas completamente al azar en dos tratamientos. T A: Control. T B: 100 mg de Somatotropina Bovina recombinante (rbST). La sincronización del estro en ambos grupos duró 14 días, utilizando es (mas) ponjas vaginales impregnadas con 40 mg de FGA, con cambio a los 7 días. La superovulación se realizó con FSH ovina (oFSH) a intervalos de 12 h en dosis decrecientes, iniciando 72 h antes de la retirada de las esponjas. En la primera aplicación se les administró adicionalmente 2 mL de prostaglandina PGF2a a las ovejas. La inyección de rbST en el TB se hizo junto con la octava aplicación de oFSH. Todas las ovejas se inseminaron vía intrauterina a las 56±1 h de la retirada de las esponjas, con semen refrigerado (108 espermatozoides/pajuela). Los embriones se colectaron 5 días después de la inseminación y la viabilidad embrionaria se midió utilizando criterios morfológicos. Se observó un incremento en todas las variables de respuesta evaluadas por efecto de la aplicación de rbST: cuerpos lúteos (89 vs 119), cuerpos lúteos considerados (77 vs 117), embriones recuperados (64 vs 78), embriones viables (35 vs 64) y embriones viables por oveja (5,8 vs 10,6) siendo significativa la tasa de ovulación (86,52% vs 96,64%) y la tasa de viabilidad embrionaria (54,69% vs 82,05%) (P Resumen en inglés The objective of this study was measure the effect of using nutritional high quality protein and its interaction with recombinant growth hormone over the ovulatory response and embryo viability in hair ewes. Twelve adult multiparous Pelibuey ewes were used and randomly submitted to two different treatments. In treatment A (T A, Control group), the ewes received a superovulation treatment without the application of recombinant growth hormone (rbST) in treatment B (T B), th (mas) e ewes received the same superovulation treatment with the addition of 100 mg of recombinant bovine somatotropin (rbST). The induction and synchronization of the estrous cycle was realized by the insertion of vaginal sponges impregnated with 40 mg of FGA during 14 days, with sponge change at the seventh day. To induce the superovulation follicle stimulating ovine hormone (oFSH) was used in decreasing doses levels (every 12 h) starting 72 h before the sponges withdrawal. In the first application 2 mL of prostaglandin PGF2a were additionally applied. The application of 100 mg of rbST was done during the eighth administration of oFSH. The ewes were inseminated 56 ± 1 h after the sponge withdrawal with refrigerated semen (108 sperm/ straw). The embryos were collected 5 days after the insemination and the embryo viability was measured by morphological evaluation. An increase was observed in all the variables evaluated in the rbST group: corporea lutea (89 vs 119), corporea lutea considered (77 vs 117), embryos recovered (64 vs 78), viable embryos (35 vs 64), and viable embryos by ewe (5.8 vs 10.6), with statistical significance, considered ovulation rate (86.52% vs 96.64%) and embryo viability rate (54.69% vs 82.05%) (P

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Apomixis, poliembrionía somática y cigótica in vivo en lechosa

Vegas, Ariadne; Trujillo, Gustavo; Sandrea, Yanet; Mata, Jonás
2003-12-01

Resumen en portugués No presente trabalho descrevem-se a apomixia, poliembrionia somática e zigótica in vivo no mamão (Carica papaya L.). A Apomixia foi estudada em sete populações ginóicas de mamão semeadas no campo e cujas flores foram cobertas com um saco de papel antes da ântese. Uma média de 61% das flores resultaram em frutos. Nestes frutos, sementes foram formadas e foi possível regenerar rebentos verdes de aparencia normal em meio de cultura. Nos frutos de algumas populaçõ (mas) es de mamão ginóica e andromonóica foi possível observar sementes sem endosperma com um a quatro embriões localizados na extremidade micropilar. Estes embriões foram resgatados e germinados em meios de cultivo in vitro. As plantas regeneradas mantiveram as características da planta-mãe, o que sugere a sua natureza somática. Por outro lado, em sementes normais de mamão do tipo Amameyada foram observados dois embriões zigóticos por semente provida de endosperma, numa frequência de cinco em 3.000 sementes dissectadas. Resumen en español Se describen la apomixis, la poliembrionía somática y cigótica in vivo en lechosa (Carica papaya L.). Se estudió la apomixis en siete poblaciones de lechosa ginóicas, para ello se taparon las flores con una bolsa de papel, previo a la antesis. Se obtuvo un promedio de 61% de frutos cuajados. En estos frutos, hubo formación de semillas, de las cuales se logró regenerar in vitro brotes verdes de apariencia normal. Por otro lado, en frutos de algunas poblaciones de le (mas) chosa ginóicas y andromonóicas se observaron en las semillas vanas sin endospermo, de 1 a 4 embriones localizados en el extremo del micrópilo. Estos embriones se rescataron y se germinaron in vitro. Las plantas regeneradas mantuvieron las características de la planta madre. En semillas normales del tipo Amameyada, se observaron dos embriones cigóticos por semilla, en una frecuencia de 5 en 3000 semillas disectadas. Resumen en inglés Apomixis, somatic and zygotic polyembryony in vivo are described in papaya (Carica papaya L.). Apomixis was studied in seven populations of ginoic papaya plants, by enclosing the flowers in paper bags before opening. An average of 61% of the flowers set fruits. These fruits formed seeds from which green normal shoots were regenerated in vitro. In fruits of some ginoic and andromonoic papaya populations, empty seeds were observed without endosperm, with one to four embryos (mas) located in the micropile end. These embryos were rescued and germinated in vitro. Regenerated plants showed the same characteristics as mother plants. In normal seeds from the Amameyada papaya type, the occurrence of two zygotic embryos per seed was observed with a frequency of 5 in 3000 dissected seeds.

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Embriogénesis somática en onoto

Michelangeli de Clavijo, Claret C.; Artioli G., Paola I.; Medina M., Ada M.
2002-10-01

Resumen en español Con la finalidad de inducir la formación de callos, embriones somáticos y regeneración de plántulas a partir de anteras de onoto, Bixa orellana L., se tomaron botones florales mayores de 0,7 cm, con granos de polen uninucleados de 19 genotipos del campo experimental del Instituto de Agronomía, Universidad Central de Venezuela. Las anteras fueron sometidas a cinco regímenes de temperatura (8 °C durante 0, 2, 4, 6 y 8 días) removidas asépticamente. Se evaluó el ef (mas) ecto de tres medios de cultivo: Murashige Skoog (MS) Nitsch y Nitsch y B5, con diferentes combinaciones de reguladores de crecimiento: ácido naftalenacético (ANA), Kinetina (Kin), 2,4-dichlorophenoxiacético (2,4-D), Picloram (Pic), ácido indolbutírico (AIB), 6-bencilaminopurina (BA) y Thidiazuron (TDZ) solos o en combinación, probándose condiciones de iluminación y oscuridad para cada tratamiento. En los casos donde se utilizaron las sales MS suplementado con 4 mg l-1 de ANA y 2 mg l-1 de BA, bajo oscuridad y a una temperatura de 30 ± 1 °C, para los genotipos identificados como ‘G1’, ‘41’ e ‘I’, se indujo la formación de embriones somáticos. No se observaron diferencias en la respuesta de los tratamientos a cinco regímenes de temperatura. Por otra parte, la germinación de embriones hasta el desarrollo de plántulas se logró en el medio MS, sacarosa (20 g l-1), sin regulador de crecimiento. El protocolo obtenido permitió la regeneración eficiente de plántulas mediante la embriogénesis somática a partir de cultivo de anteras. Resumen en inglés SUMMARY Floral buds 0.7 cm in length with uninucleate pollen grains, were removed from 19 annatto, Bixa orellana L., genotypes from the Agronomy Institute’s experimental field, Faculty of Agronomy, Universidad Central de Venezuela, in order to induce callus, somsatic embryos and plantlet regeneration. Anthers were aseptically removed and subjected to five temperature regimes: 8 °C during 0, 2, 4, 6 and 8 days. The effect of three medium cultures Murashige and Skoog (MS) (mas) , Nitsch and Nitsch and B5 and different growth regulators alone or in combination (naftalenacetic acid (ANA), Kinetine (Kin), 2,4-dichlorophenoxiacetic (2,4-D), Picloram (Pic), indolbutyric acid (AIB), 6-bencilaminopurine (BA) y Thidiazuron (TDZ)) were tested both under ilumination and dark conditions. Somatic embryos were formed on MS medium supplemented with ANA (4 mg l-1) and BA (2 mg l-1), under dark conditions at 30 ± 1 °C from the genotypes identified as ‘G1’, ‘41’ and ‘I’. There were no differences among thermal shock treatments. On the other hand, the development of somatic embryos to plantlets was achieved on half MS medium, sugar (20 g l-1), without growth regulators. Therefore, the efficient regeneration to plantlets through somatic embryogenesis from annatto anthers was achieved with the protocol obtained.

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Obtención, regeneración y evaluación de híbridos intergenéricos entre Carica papaya Y Vasconcellea cauliflora

Vegas, Ariadne; Trujillo, Gustavo; Sandrea, Yanet
2003-12-01

Resumen en portugués O resgate de híbridos provenientes de cruzamentos intergenéricos entre mamão (Carica papaya L.) e outras espécies de vasconcelleas (antes conhecidas como caricas) possibilita a tranferência de genes das espécies selvagens para a cultivada. O objectivo do presente trabalho foi a obtenção e avaliação de plantas híbridas mediante o resgate e regeneração de embriões ou óvulos resultantes do cruzamento entre C. papaya e Vasconcellea cauliflora. Dos cruzamentos e (mas) fectuados, 0 a 76% formaram frutos, de acordo com o tipo de papaya usado. As sementes presentes nos frutos foram vás, inmaduras o possuiam embriões zigóticos. Na maioria dessas sementes ocorreu poliembrionia zigótica in vivo, embora também foram formado alguns híbridos individuais. Conseguiu-se o desenvolvimento, germinação, multiplicação de embriões híbridos e regeneração de plantas in vitro. As plantas establecidas em campo produziram flores andróicas y andromonóicas. Resumen en español El rescate de híbridos de cruces intergenéricos entre la lechosa (Carica papaya L.) y otras especies de vasconcelleas (antes conocidas como caricas) posibilita la transferencia de genes desde las especies silvestres hacia la cultivada. El objetivo del presente trabajo fue la obtención y evaluación de plantas híbridas mediante el rescate y regeneración de embriones u óvulos después del cruce entre C. papaya y Vasconcellea cauliflora. Se obtuvo un porcentaje de fruc (mas) tificación entre 0 y 76%, de acuerdo al tipo de lechosa usada en el cruce. En los frutos, las semillas fueron vanas, inmaduras o contenían embriones cigóticos. En la mayoría de ellas ocurrió la poliembrionía cigótica in vivo, aún cuando también se produjeron híbridos individuales. Se logró el desarrollo, germinación y multiplicación de embriones híbridos, y la regeneración de plantas in vitro. Las plantas sembradas en campo produjeron flores andróicas y andromonóicas. Resumen en inglés The rescue of hybrids from intergeneric crosses between papaya (Carica papaya L.) and other vasconcelleas species (known before as caricas) can make possible gene transfer from a wild species to a cultivated one. The object of this research was to obtain and evaluate hybrid plants after rescue and regeneration of embryos or ovules, from the crosses made between C. papaya and Vasconcellea cauliflora. After cross pollination, 0 to 76% fructification was attained, according (mas) to the papaya type used. In the fruits, seeds were vain, immature or contained zygotic embryos. In most of them occurred in vivo zygotic polyembryony, although some individual hybrids were also formed. Development, germination, multiplication of embryo hybrids and plant regeneration in vitro were achieved. In the field, plants produced androic and andromonoic flowers.

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Importancia de la respuesta a la inducción de ovulación y la edad en el resultado de las técnicas de reproducción asistida/ Importance of the response to the ovulation induction and the age in the result of the assisted reproduction techniques

Madero, José Ignacio; López, Claudia; León, María Fernanda; Ruiz, Jair; Gutiérrez, Carlos; Guerra, Óscar; Avila, Mábel; Escobar, Magally; Ruiz, Jesús A
2004-12-01

Resumen en español Objetivo: este estudio pretendió analizar la eficacia de las técnicas de reproducción asistida en un grupo de pacientes con una respuesta disminuida a la estimulación ovárica (tres folículos o menos al finalizar la estimulación ovárica) y correlacionarla con la edad. Materiales y métodos: se describen 966 casos de pacientes sometidas a fertilización in vitro o inyección intracitoplasmática de espermatozoides, de las cuales 100 tuvieron una respuesta pobre. Res (mas) ultados: el grupo de las «pobres respondedoras » en un 80% de los casos correspondió a mujeres mayores de 35 años, siendo el 46% mayor de 40. El promedio de embriones transferidos fue 1,59 para el grupo de estudio y 3,47 para el grupo control, con una tasa de implantación de 11,34 y 12,34% respectivamente. La tasa de embarazo fue menor en el grupo de las «pobres respondedoras» (16,39%) comparado con el grupo control (29,62%). Conclusiones: los resultados sugieren que las pacientes con una respuesta pobre a la inducción de ovulación (tres folículos o menos) tienen mayor riesgo de un resultado adverso al someterse a técnicas de reproducción asistida por la poca producción de ovocitos, lo cual limita la posibilidad de seleccionar los mejores embriones para transferir y aumenta la probabilidad de obtener embriones con anomalías cromosómicas. Resumen en inglés Objective: the aim of the present study is to do an analysis about the efficacy of assisted reproduction techniques in a group of women with diminished response to ovary stimulation (three or less follicles at the end of stimulation process) and its correlation with age. Materials: we perform an analysis of 966 cases of patients who undergo to in vitro fertilization or intracytoplasmatic spermatozoids injection, 100 of these cases had poor response. Results: 80% of women (mas) in the group with poor response were 35 years or older, with 46% older than 40 years old. The mean of embryo transfer was 1.59 for the study group and 3.47 for the control group with an implantation rate of 11.34% and 12.34% respectively. The pregnancy rate was less within the poor response women group than (16.39%) than the control group (29.62%). Conclusions: our results suggest that women with poor response to ovulation induction, it means three or less follicles have higher risk of adverse results when they go through assisted reproduction techniques probably because of the presence of low oocytes counts limits the possibility to select the best embryos to transfer and increase the chance of obtaining embryos with abnormal chromosomal constitution.

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Aspectos éticos en el empleo de las células madre/ Ethical aspects in the use of stem cells

Hernández Ra, Porfirio
2007-08-01

Resumen en español En los animales superiores, las células madre pueden ser embrionarias y somáticas o adultas, según su estado evolutivo. En la actualidad se mantiene una extraordinaria polémica sobre qué células madre utilizar: las embrionarias o las adultas, debate en el que se han incluido aspectos científicos, éticos, religiosos, sociales y políticos. Un aspecto del debate científico está relacionado con la capacidad generativa de tumores por las células embrionarias. Tambi (mas) én se ha señalado que los beneficios de las células embrionarias se han exagerado y que en su lugar podrían utilizarse células madre adultas, con las que no existen restricciones éticas ni se ha comprobado la generación de tumores. Desde el punto de vista ético, se ha argumentado que el uso de las células madre embrionarias humanas implica la destrucción de embriones y se ha considerado que la vida comienza en el mismo momento de la unión del espermatozoide con el óvulo. Lo que equivaldría a la destrucción de una vida humana, algo no justificable. Otros no están de acuerdo con estos criterios, y plantean que su uso para salvar vidas mediante la investigación o la terapéutica estaría justificado. Recientemente se ha logrado la obtención de células madre embrionarias denominadas “células madre éticas”, pues este nuevo método eliminaría el dilema ético de destruir embriones. Algunos han planteado que estos resultados son preliminares, posiblemente exagerados, y la eficiencia del método es muy baja. Otros señalan que resulta más ético trabajar con embriones que de todas formas se van a destruir. Resumen en inglés In the superior animals, the stem cells may be embryonary and somatic, or adults, according to their evolutive state. At present, there is an extraordinary polemic about the stem cells that should be used: the embryonary or the adults. Scientific, religious, social and political aspects have been included in this debate. An aspect of the scientific discussion is related to the tumour-producing capacity of the embryonary cells. It has also been stated that the benefits of (mas) the embryonary cells have been exaggerated, and that adult stem cells should be used instead, since they do not have ethical restrictions and do not generate tumours. From the ethical point of view, it has been explained that the use of human embryonary stem cells leads to the destruction of embryos and, as it is considered that life begins in the very moment the spermatozoid joins the ovule, it would mean the extermination of a life, which is something intolerable. Others do not agree with this criterion and express that their use to save lives by investigation or biopsy would be justified. Recently, there have been obtained embryonary stem cells so-called “ethical stem cells”. This new method would eradicate the ethical dilemma of destroying embryos. Some have stated that these are preliminary and possibly exaggerated results, and that the efficiency of the method is very low, while others say that it is more ethical to work with embryos that will be destroyed anyway.

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Manejo de Plántulas de Mango (Mangifera indica L.) Obtenidas in vitro para Estudios de Sanidad Vegetal/ Management of mango (Mangifera indica L.) seedlings obtained in vitro for plant health studies

López-Estrada, Martha Elena; Acosta-Rodríguez, María Concepción; Otero-Colina, Gabriel; Michel-Aceves, Alejandro Casimiro; Noriega-Cantú, David Heriberto
2008-01-01

Resumen en español A partir de embriones inmaduros de mango se obtuvieron plántulas in vitro libres de contaminantes externos y transmitidos por semilla; luego se trasplantaron a suelo usando sólo materiales esterilizados. Se sembraron embriones de mango de 45 a 60 días de edad en medio B5 modificado; cuando las plántulas alcanzaron 10 cm de altura se trasplantaron a suelo + perlita expandida en recipientes de plástico especialmente diseñados y ahí se regaron con solución nutritiva (mas) universal. En la etapa in vitro se presentó 10% de contaminación por Penicillium, Aspergillus, Xanthomonas y Cladosporium. La contaminación en los recipientes asépticos alcanzó gradualmente 15% después de cinco meses. En el sustrato se determinó a Cladosporium, Alternaria, Aspergillus, Rhizopus y Fusarium, mientras que en los recipientes se identificó a Helminthosporium, Curvularia, Penicillium y Syncephalastrum. Resumen en inglés In vitro mango seedlings free of external and seed-transmitted contaminants were obtained from immature embryos. Then, they were transplanted to soil using only sterilized materials. Mango embryos 45-60 days old were plated in modified B5 medium; and after seedlings attained 10 cm height, they were transplanted to soil + expanded perlite in specially designed plastic containers. Plants were irrigated with nutritive universal solution. During the in vitro stage 10% contami (mas) nation with Penicillium, Aspergillus, Xanthomonas and Cladosporium was observed. Contamination in plastic containers gradually reached 15% after five months. Cladosporium, Alternaria, Aspergillus, Rhizopus, and Fusarium were identified in the substrate, whereas Helminthosporium, Curvularia, Penicillium, and Syncephalastrum appeared in the plastic containers.

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Embriogénesis somática en dos especies del género plantago (Plantago major L. y Plantago hirtella Kunth)/ Somatic embryogenesis for two species of plantago genus (Plantago major L. y Plantago hirtella Kunth)

González A, Jorge A; Oropeza C, Maira; Vargas C, Teresa Edith; de García, Eva
2006-12-01

Resumen en español Con la finalidad de inducir el proceso de embriogénesis somática, segmentos de hojas jóvenes de plantas de Plantago major L. y Plantago hirtella Kunth fueron cultivadas “in vitro” en un medio Murashige y Skoog (MS), suplementado con mioinositol (10 mg l-1), tiamina (0,4 mg l-1), piridoxina (0,5 mg l-1), ácido nicotínico (0,5 mg l-1), glicina (2,0 mg l-1), sacarosa (3%) y empleando como agente gelificante agar (8 g l-1). Se probaron diferentes concentraciones (0; 0, (mas) 05; 0,1; 0,3; 0,5 y 1,0 mg l-1) de ácido 2,4- dicloclorofenoxiacético (2,4-D). A partir de la tercera semana de cultivo, se desarrolló un callo de apariencia nodular, friable y con una coloración entre pardo claro y crema. La inducción del callo varió levemente dependiendo de la concentración del regulador de crecimiento suministrada al medio. La formación de callo, así como la aparición de embriones somáticos se pudo observar al final de la cuarta semana de cultivo. Alrededor de un 65% de los explantes de las dos especies produjeron embriones después de la octava semana de cultivo, con ausencia de sincronización en los diferentes estados de desarrollo embrionario. Resumen en inglés With the purpose of inducing the process of somatic embryogenesis, segments of young leaves of Plantago major L. and Plantago hirtella Kunth plants were cultured “in vitro” in Murashige and Skoog (MS) media, supplemented with myoinositol (10 mg l-1), thiamine (0,4 mg l-1), pyridoxine (0,5 mg l-1), nicotinic acid (0,5 mg l-1), glycine (2,0 mg l-1), sucrose (3%) and solidified with agar (8 g l-1). Different 2, 4-dichlorophenoxyacetic acid concentrations were tested (0; 0, (mas) 05; 0,1; 0,3; 0,5 and 1,0 mg l-1). Since the third week of culture, a nodular and friable light brown callus developed. One week later, somatic embryos originated on callus surface. Around 65% of the explants produced embryos at the eighth week of culture, with absence of synchronization in the different stages of embryo development.

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Estudio morfométrico de las malformaciones craneofaciales experimentales inducidas por ácido retinoico

González, T.; Lassaletta, L.; Martínez, L.; Tovar, J.A.; Martorell, V.
2003-10-01

Resumen en español Objetivo: El ácido retinoico es un metabolito activo de la vitamina A que administrado en grandes cantidades tiene efecto teratógeno sobre la embriogénesis de los mamíferos. Hemos investigado los efectos de la exposición temprana de embriones de rata sobre las estructuras craneofaciales. Diseño: Cuarenta y cinco ratas Sprague-Dawley gestantes fueron tratadas con 125 mg/kg de ácido all-trans-retinoico el día 10 de gestación. Las 20 ratas controles fueron tratadas (mas) con aceite. Los fetos de ambos grupos se extrajeron el día antes de llegar a término y fueron sometidos a un estudio morfológico y otro estudio morfométrico, analizando las malformaciones craneofaciales. Resultados: Ninguno de los fetos controles presentó malformaciones. El 100% de los embriones tratados con retinoico presentaron defectos craneofaciales, incluyendo fisuras faciales, exoftalmos, malformaciones e inserción baja de los pabellones auriculares, apéndices faciales y anomalías nasales. El análisis morfométrico reveló un incremento de la distancia entre los poros nasales (p Resumen en inglés Objective: Retinoic acid is an active metabolite of Vitamin A that is teratogenic when present in excess during mammalian embriogenesis. We have investigated the effects of early exposure of rat embryos to retinoic acid on craniofacial structures. Design: Treatment of 45 pregnant Sprague-Dawley rats with 125mg./Kg all-trans-retinoic acid on pregnancy day 10 was performed. Twenty controls were treated only with oil. The fetuses were recovered the day before term, and both (mas) morphologic and morphometric analyses of the craniofacial structures were performed. Results: None of the control fetuses had malformations. Craniofacial defects were observed in 100% of the retinoic embryos including facial clefts, proptosis, abnormalities and inferior placement of the pinnae, skin tags, and nasal anomalies. Morphometric analyses revealed an increased distance between nasal pores (p

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Análisis Macroscópico y Microscópico del Desarrollo Embrionario y Fetal en el Gato (Felis catus), en Relación con el Desarrollo de la Vesícula Coriónica y de la Placenta/ Macroscopic and Microscopic Analysis of the Embryonic and Fetal Growth in the Cat (Felis catus), in Relation to Chorionic Vesicle and Placental Development

Illanes, Julio; Orellana, Cupertina; Fertilio, Bárbara; Leyton, Victor; Venegas, Felipe
2007-09-01

Resumen en español La gata doméstica (Felis catus) presenta una gestación que dura, en promedio 62 + 5 días. Sin embargo, establecer la edad gestacional en forma más o menos precisa resulta difícil, ya que no existe un análisis que correlacione el tamaño de la vesícula coriónica; desarrollo de la placenta; desarrollo embrionario y Fetal durante la gestación. En este trabajo se utilizaron 12 úteros grávidos, provenientes de gatas mestizas entre 8 y 18 meses de edad, éstos fueron (mas) fijados en formol neutro al 10%. Para cada útero se determinó el número de vesículas coriónicas, de cada una se removieron el embrión, feto y la placenta, los que fueron medidos, tarados y fotografiados para su análisis morfológico. Las etapas del desarrollo embrionario y Fetal fueron establecidas conforme a las características y estructuras externas de los embriones y fetos, desde el inicio hasta el término de la gestación. A los 13 días de gestación se observó una gástrula tardía. Embriones somíticos, entre los 13 y 18 días. Embriones prefetales, entre los 18 y 28 días, y fetos desde el día 28 hasta el nacimiento. El amnios se cierra a los 17 días; la formación de la cara y cuello ocurre entre los 16 y 28 días, y de los miembros, entre los 17 y 28 días de gestación. A los 15 días de gestación comienza el latido cardiaco, momento en que se observa el tubo endocárdico. El tabicamiento del corazón se produce entre los 17 y 20 días. El tubo neural está cerrado a los 17 días de gestación. Todos los parámetros estudiados en los diferentes estadios del desarrollo en el gato están significativamente correlacionados (p Resumen en inglés The domestic cat (Felis catus) presents a gestation that lasts 62 ± 5 days. However, gestational age determination in a more precise way is difficult, as there are no analysis that correlate chorionic vesicle size; placental development; embryonic and Fetal development during gestation. In this work 12 gravid uteruses from hybrid cats between 8 and 18 months of age were studied; these were fixed in 10% neutral formaldehyde. For each uterus the chorionic vesicles number w (mas) as determined. The embryos, fetuses and placenta were removed, measured, weighed and photographed for morphologic analysis. The embryonic and Fetal stages of development were determined according to the external characteristics and structures of the embryos or fetuses, from gastrulation to term. At 13 days of gestation a late gastrula was observed; between days 13 and 18, somitic embryos; between days 18 and 28, prefetal embryos; and fetuses from day 28 until birth. The amnion is closed by day 17; differentiation of the facial region occurs between days 16 and 28, while limb development takes place between days 17 and 28. At 15 days of gestation the heart begins to beat and the endocardial tube is observed. Septation of the heart occurs between days 17 and 20 and the neural tube is closed by day 17. All parameters studied in the different developmental stages in the cat are significantly correlated (p

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EFECTO DE LA ADICIÓN DE FSH Y LH EN EL MEDIO SOBRE LA MADURACIÓN Y EL DESARROLLO EMBRIONARIO in vitro DE OVOCITOS DE CERDA/ EFFECT OF THE ADDITION OF FSH AND LH IN MEDIUM ON THE MATURATION AND THE EMBRYONIC DEVELOPMENT in vitro OF OOCYTES OF SOW

Fernández Reyes, F; Hernández Pichardo, J.E; Rosales Ávila, María del Rocio
2009-08-01

Resumen en español Se recuperaron 1025 ovocitos de ovarios de cerdo obtenidos en mataderos, de estos 165 (tratamiento 1) se maduraron con 0.75 U.I. de FSH y 0.75 U.I. de LH y 125 (tratamiento 2) con 1.5 U.I. de FSH y 1.5 U.I. de LH, la maduración fue evaluada por fijación con alcohol-ácido acético y teñido con orceína acética. Se obtuvo un 40 % y 39.2 % de ovocitos madurados para los tratamientos 1 y 2 respectivamente, sin diferencia estadística significativa entre los mismos. En lo (mas) s dos tratamientos para la fertilización in vitro se evaluó la maduración de los ovocitos mediante la observación de cuerpo polar, los cuales fueron divididos en dos grupos: se obtuvieron 155 ovocitos madurados con el primer tratamiento y 137 ovocitos con el segundo tratamiento, lo que corresponde a 42.1% y 37.3% de madurados, respectivamente. Como resultado de la fertilización in vitro se obtuvieron 122 embriones en sus diferentes etapas alcanzando, 76 embriones en el primer tratamiento y 46 con el segundo tratamiento, para un 49%ª y 33.5%b (a diferente de b P Resumen en inglés One thousand twenty five oocytes from sow ovaries, obtained in slaughter houses were recovered. From them, 165 (treatment 1 ) were matured with 075 U.I. of FSH and 0.75 U.I. of LH, and 125 (treatment 2 ) with 1.5 U.I. of FSH and 1.5 U.I. of LH. Maturation was evaluated by fixation with alcohol-acetic acid and stained with acetic orcein. There was a 40% and 39% of maturated oocytes from the treatments 1 and 2 respectively, without significant statistical differences among (mas) them. In the two treatments for in vitro fertilization, the maturation of oocytes was evaluated by polar body observation. They were divided into two groups: one having 155maturated with the first treatment and the other having 137 oocytes with the second treatment, which corresponded to a 42.1% and 37.3% respectively . As result of in vitro fertilization, 122 embryos were obtained in their different stages, reaching 76 with the first treatment and 46 with the second one, for a 49% and 33.5% (a different fom b p

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Embriogénesis somática en cultivares de cacao Venezolanos¹/ Somatic embryogenesis in Venezuelan cocoa cultivars

Velásquez Salazar, Rosalía; Sandrea, Yanet; Betancourt, Carmen; Mata, Jonás; García, Félix
2006-03-01

Resumen en español Los métodos tradicionales de propagación del cacao, Theobroma cacao L. (vegetativa y sexual) han sido las técnicas mayormente utilizadas por los productores venezolanos; sin embargo, estas no han sido las más favorables, porque se producen plantas con características agronómicas indeseables. Actualmente, dentro de las técnicas de cultivo de tejidos, la embriogénesis somática parece ser el método más eficiente de regeneración y multiplicación de clones de caca (mas) o. Para ello, se ajustó un protocolo donde se utilizaron como explantes órganos florales (estaminoidios, pétalos y anteras) y cotiledones inmaduros de los genotipos Choroní-42, Ocumare-77, Ocumare-61 y Porcelana, induciendo la formación de callo con Thidiazuron (TDZ), altas concentraciones de sacarosa y 2,4-D (2,4 diclorofenoxiacético); se indujo la formación de proembriones con cinetina y agua de coco. Los embriones fueron transferidos a un medio con aminoácidos y KNO3, bajo condiciones de oscuridad y temperatura entre 26 - 29 ºC. Los embriones cotiledonares se subcultivaron bajo condiciones de fotoperíodo 16/8 horas luz-oscuridad para la posterior formación de plantas. Resumen en inglés The traditional sexual and asexual methods of cocoa propagation have been widely used in Venezuela and worldwide, however, they have not been successful since plants with undesirable agronomic characteristics are produced. At present, plant regeneration via somatic embryogenesis provides an alternative method for clonally propagating cocoa. Therefore, a protocol was developed in order to use staminode, petal, anther and immature cotyledon explants of genotypes Choroní-42 (mas) , Ocumare-77, Ocumare-61 and Porcelana. Callus formation was induced with Thidiazuron (TDZ), high sucrose concentration and 2,4-D. Somatic embryos were induced with kinetin and coconut water. Embryos were transferred to a medium containing amino acids and KNO3 and placed under dark conditions and 26-29 ºC. Cotyledonary embryos were subcultivated under photoperiodic conditions of 16/8 hours light-dark for posterior formation of plants.

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DESARROLLO EMBRIONARIO DE LA PINTARROJA COMUN Schroederichthys chilensis (Guichenot, 1848) (CHONDRICHTHYES: SCYLIORHINIDAE)/ EMBRIONARY DEVELOPMENT OF THE REDSPOTTED CATSHARK Schroederichthys chilensis (Guichenot, 1848) (CHONDRICHTHYES: SCYLIORHINIDAE)

Hernández, Sebastián; Lamilla, Julio; Dupré, Enrique; Stotz, Wolfgang
2005-01-01

Resumen en español El presente estudio describe el desarrollo embrionario de la pintarroja común Schroederichthys chilensis, a través de observaciones de la morfología externa de la cápsula, morfología del embrión y mediciones del tiempo de gestación. Se recolectaron 60 cápsulas de huevos en la localidad de Chungungo (IV Región). Además se obtuvieron dos cápsulas desovadas por una hembra mantenida en cautiverio. Las cápsulas fueron descritas basándose en mediciones morfométric (mas) as, coloración, textura y presencia de las fisuras respiratorias. Para la determinación y descripción de la morfología embrionaria se utilizaron embriones extraídos de las cápsulas recolectadas. Para la determinación del tiempo de gestación se observaron continuamente 15 cápsulas con embriones vivos, a través de una ventana transparente en la pared de cada cápsula. Las cápsulas de huevos son rectangulares y tienen dos prolongaciones anteriores llamadas "filamentos del ovisaco" y dos posteriores llamadas "zarcillos". Las cápsulas recientemente desovadas son de coloración parda o verde opaco, textura parcialmente lisa y pegajosa y las fisuras respiratorias están selladas. Sin embargo, las cápsulas con embriones en estados avanzados son de coloración café oscura opaca, textura lisa y las fisuras respiratorias están abiertas. Se establecieron 6 estados de desarrollo embrionario en base a los siguientes caracteres diagnósticos: saco vitelino sin embrión, aperturas faríngeas, filamentos branquiales, diferenciación de las aletas desde el pliegue dorsal y ventral, espinas en la cola, hilera de espinas dorsales y pigmentación. El tiempo de gestación es de 211 días a una temperatura entre 11,1-15,8° C Resumen en inglés The present study describes the embrionary development of the redspotted shark, Schroederichthys chilensis, through observations of the external morphology of the eggs capsules, embryo morphology and measurement of gestation time. Sixty egg capsules were collected in the locality of Chungungo (IV Region, Chile). Two additional capsules were laid by a female kept in captivity. Eggs capsules were described based on morphometric measurements, coloration, texture and presence (mas) of respiratory fissures. For the determination and description of the embryonic morphology, embryos extracted from the collected capsules. For the determination of the gestation time 15 capsules with alive embryos were observed through a transparent window on the wall of each capsule. The eggs capsules are rectangular and they have two anterior prolongation called "filaments ovisac" and two posterior called "tendrils". The recently eggs capsules laid are brown or green opaque in coloration, partially smooth and sticky in texture and closed respiratory fissures. The eggs capsules with embryos in advanced stages are dark brown, flat texture and respiratory fissures open. Six stages of embrionary development were determined on the basis of the following diagnostic characters: viteline sac without embryo, pharyngeal clefts, gill filaments, differentiation of the fins from the dorsal and fold ventral ridge, spines on the tail, row of dorsal spines and pigmentation. The gestation time is 211 days at temperature of 11,5-15,8° C

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Establecimiento de una metodología para la inducción de regenerantes de arveja (Pisum sativum L.) variedad ‘Santa Isabel’*/ Establishing a methodology for inducing the regeneration of pea (Pisum sativum L.) explants, ‘Santa Isabel’ variety

Sánchez, Edgar Alexander; Mosquera, Teresa
2006-01-01

Resumen en español Con el fin de establecer una metodología para la obtención de regenerantes de arveja a partir de diferentes tipos de explantes, se evaluó el efecto de diferentes concentraciones de bencilaminopurina (BAP),ácido 2,4-diclorofenoxiacético (2,4-D) y 2-isopenteniladenina (2-ip) sobre la obtención de regenerantes para uso en transformación genética, como parte del proyecto de introducción de resistencia a Fusarium oxysporum f. sp.pisi, causante de la enfermedad marchit (mas) ez vascular. Se evaluaron varios tipos de explantes, cotiledones en posición abaxial y adaxial, hipocótilos, epicótilos y embriones cigóticos obtenidos de semillas secas y semillas jóvenes. Estos explantes se evaluaron en interacción con reguladores de crecimiento bajo dos condiciones de luz: la primera, de fotoperíodo con 16 h de luz y 8 h de oscuridad y la segunda, de oscuridad total. De esta forma, se probaron tres reguladores de crecimiento (2,4-D, BAP y 2-ip) en tres combinaciones y diferentes concentraciones. Se obtuvieron regenerantes a partir de embriones cigóticos bajo las dos condiciones de luz, especialmente en la condición de fotoperíodo y con la aplicación de BAP en concentraciones de 1,0 y 2,5 mg· L-¹. Resumen en inglés The effect of different 2,4-D, BAP and 2- ip concentrations on inducing the regeneration of peas from different types of explants was evaluated for use in genetic transformation as part of a project aimed at introducing resistance to Fusarium oxysporum f. sp. pisi which causes vascular wilt disease. Several types of explants were tested: cotyledons in abaxial and adaxial position, hypocotyls, epicotyls and zygotic embryos obtained from dry seeds and young seeds. These exp (mas) lants were evaluated in interaction with growth regulators in two types of light/cultivation conditions, the first being a 16-hour light and 8- hour darkness photoperiod and the second consisting of total darkness. Three growth regulators were tested (2,4-D, BAP and 2-ip) in three combinations and different concentrations. Zygotic embryo regeneration was obtained two light conditions, especially in the photoperiod and when applying BAP at 1 and 2.5 mg· L-¹ concentrations.

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Características espacio-temporales del desarrollo embrionario preimplantacional de Myocastor coypus (coipo)/ Spatio-temporal characteristics of the preimplantational embryonic development in Mycastor coypus (coypu)

Felipe, Antonio E.
2006-11-01

Resumen en español El objetivo de este trabajo fue caracterizar el desarrollo preimplantacional del coipo (Myocastor coypus). Se realizó el seguimiento colpocitológico y apareamiento dirigido de 33 hembras. La división en estadíos se efectuó considerando atributos morfológicos. El número medio de embriones por hembra fue de 6.3 ± 2.03 (rango de 1 a 11). En el día 1 poscoito (p.c.), predominaron ovocitos y en el día 2 p.c. las cigotas. El período de segmentación abarcó desde el (mas) día 3 al día 6 p.c. Las mórulas se recolectaron desde el día 6 al día 9 p.c., en tanto que los estadíos de blastocisto se recolectaron en los días 8 y 9 p.c. Por el lavaje de oviductos, se recolectaron embriones en los estadíos de cigota hasta mórulas con menos de 30 células y por lavaje de hemiúteros se obtuvieron desde mórulas hasta blastocistos en crecimiento. El desarrollo preimplantacional abarcó 10 días. Resumen en inglés Myocastor coypus (coypu) is a rodent world-wide used as a skin species. The purpose of the present study was to determine the morphology of the preimplantation embryonic development in Myocastor coypus (coypu). Thirty-three virgin and sexually mature females allotted in 6 family nuclei and 1 male were utilised. The mating program implied the daily colpocytological examination by using standardised routine techniques. Samples for the colpocytological followup were collecte (mas) d from all the animals between 11 and 11:30 hours a.m. The observation of vaginal smears was done directly within 5 minutes of sampling. The controlled mating methodology was used. After the oestrus was established by colpocytology, the female was immediately moved to the male's pen. The embryonic age was determined in days post-coitus (d.p.c.), establishing as day 0 the day when spermatozoa were identified in the vaginal smear. Oocytes and embryos were obtained by flushing from day 0 to 10 post-coitus (p.c.). On day 1 p.c., oocytes predominated whereas on day 2 p.c. zygote were predominant. The cleavage period was from day 3 to day 6 p.c. Morulae were collected from day 6 to 9 p.c., whereas blastocysts were collected in days 8 and 9. From oviduct flushing, embryos in zygote and up to morula with less than 30 cells stage were recovered. Embryos in morula with 30 or more cells and up to blastocyst in growth stage were collected from the flushing of hemiuteri.

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Micropropagación de Espeletiopsis muiska (Cuatrecasas), frailejón del Parque Natural La Ranchería - Boyacá, Colombia/ Micropropagation of Espeletiopsis muiska (Cuatrecasas), 'frailejon' from Rancheria Natural Park-Boyaca, Colombia

Rache C., Leidy; Pacheco M., José
2009-12-01

Resumen en español Este estudio desarrolló un protocolo para micropropagación de Espeletiopsis muiska -especie de importancia ecológica, medicinal e industrial, actualmente en riesgo de extinción- en medio de cultivo Murashige y Skoog (1962). Se cultivaron embriones sexuales en medio completo y con la mitad de la concentración habitual de las macrosales; con y sin reguladores de crecimiento. Para proliferación de brotes se sembraron segmentos caulinares apicales en el medio de cultivo (mas) mencionado, con auxinas y citoquininas adicionadas individualmente o combinadas. Además se evalúo el efecto de diferentes concentraciones de caseína hidrolizada y sacarosa. Para enraizamiento se sembraron brotes en medio del cultivo con ácido 3-indol-butírico. La aclimatización de las plántulas -proceso que se inició en cuarto de incubación y finalizó en invernadero- se llevó a cabo en diferentes sustratos. El mayor porcentaje de embriones germinados (91%) se contabilizó en medio sin reguladores de crecimiento. En el medio de proliferación con ácido 3-indol-butírico 2,46 μM más 6-bencilaminopurina 0,044 μM se contabilizó la mayor cantidad de brotes de apariencia normal (5,96 brotes/explante). Durante la fase de enraizamiento el porcentaje de brotes enraizados en medio con ácido 3-indol-butírico 0,49 μM, fue del 54,1%. Después de 30 días de aclimatización, se constató la viabilidad del 60% de las plántulas transferidas a suelo de capote. Resumen en inglés The study developed a protocol for the micropropagation of Espeletiopsis muiska, an endangered species of ecological, medicinal and industrial importance. Sexual embryos were cultured in vitro in Murashige and Skoog (1962) complete and incomplete (reducing macrosalts by half) mediums, with and without growth regulators. Initial proliferation was carried out by culturing apical stem segments in medium with individual and combined addition of auxins and cytokinins; also eva (mas) luating the effect of different concentrations of hydrolyzed casein and sucrose. Rooting was promoted by growing the shoots in culture medium with 3-indole-butyric acid. Plantlet acclimatization, which started in incubation room and finished in greenhouse, made use of different substrates. The highest percentage of germinated embryos (91%) was obtained in growth regulator free medium. The largest number of normal appearance shoots per explant (5.96) was observed in proliferation medium containing 2.46 μM 3-indole-butyric acid plus 0.044 μM 6-benzylaminopurine. During the root taking phase, the medium containing 0.49 μM 3-indole-butyric acid promoted a rooting percentage of 54.1%. After 30 days of acclimatization, 60% of the plantlets transferred to soil enriched with organic matter resulted viable.

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Inducción de callo embriogénico en Eucalyptus globulus Labill/ EMBRYOGENIC CALLUS INDUCTION IN Eucalyptus globulus Labill/ INDUÇÃO DE CALO EMBRIOGÊNICO EM Eucalyptus globulus LABILL

Gómez, Cristian; Matilde Uribe, Darcy Ríos; Sánchez-Olate, Manuel
2006-10-01

Resumen en portugués Estudou-se a indução de calo embriogênico a partir de três explantes provenientes de sementes maduras (embriões zigóticos maduros, hipocótilos e cotilédones). Os resultados indicaram que o meio I3 (B5 + ANA 0,5mg·l-1 + BAP 1,0mg·l-1) produziu as maiores porcentagens de formação de calo em todos os explantes. A micromorfologia evidenciou presença de células embriogênicas em todos os explantes, mas em hipocótilos e cotilédones se encontraram estados globula (mas) res em fases iniciais. Posteriormente, na fase de diferenciação, se obteve como máximo 25 estados globulares por calo reativo, em um meio B5 suplementado com maltose (2% p/v) ao utilizar embriões zigóticos maduros. O estudo histológico indicou uma diferenciação interna dos estados globulares, caracterizada por uma formação concêntrica de feixes vasculares, células de tipo parenquimático na área periférica e finalmente uma protoderme, formada por células isodiamétricas. Resumen en español Se estudió la inducción de callo embriogénico a partir de tres explantos provenientes de semillas maduras (embriones cigóticos maduros, hipocótilos y cotiledones). Los resultados indicaron que el medio I3 (B5 + ANA 0,5mg·l-1 + BAP 1,0mg·l-1) produjo los mayores porcentajes de formación de callo en todos los explantes. La micromorfología evidenció presencia de células embriogénicas en todos los explantes, pero en hipocótilos y cotiledones se encontraron estado (mas) s globulares en fases iniciales. Posteriormente, en la fase de diferenciación, se obtuvo como máximo 25 estados globulares por callo reactivo, en un medio B5 suplementado con maltosa (2% p/v) al utilizar embriones cigóticos maduros. El estudio histológico indicó una diferenciación interna de los estados globulares, caracterizada por una formación concéntrica de haces vasculares, células de tipo parenquimático hacia la periferia y finalmente una protodermis, formada por células isodiamétricas. Resumen en inglés Embryogenic callus induction starting from three explants coming from mature seeds (mature zygotic embryos, hypocotils and cotyledons) was studied. The results indicated that the medium I3 (B5 + ANA 0.5mg·l-1 + BAP 1.0mg·l-1) produced the largest percentages of callus formation in all the explants. Micromorphology revealed the presence of embryogenic cells in all explants, while globular states in initial phases were found in hypocotils and cotyledons. Later, in the dif (mas) ferentiation phase, a maximum of 25 globular states by callus were obtained in a B5 medium with maltose (2% p/v) added, when using mature zygotic embryos. The histological study showed internal differentiation of globular states, characterized by a concentric formation of vascular bundles, parenchymatous cells towards the periphery and, finally, a protodermis formed by isodiametrical cells.

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PLANTAS DOBLE HAPLOIDES GENERADAS POR CRUZA INTERGENERICA DE TRIGO x MAIZ/ Double haploid plants generated by intergeneric wheat x maize crosses

Jobet, Claudio; Zuñiga, Javier; Campos de Quiroz, Hugo
2003-07-01

Resumen en español El uso de la técnica de dobles haploides en mejoramiento de plantas tiene el potencial de acortar los ciclos de mejoramiento genético en comparación a los métodos convencionales, mediante la producción rápida (un ciclo) de líneas homocigóticas provenientes de poblaciones segregantes, lo que conlleva a la rápida homogeneización y estabilización genética. El material utilizado (F3) en este trabajo fue previamente seleccionado bajo condiciones de campo. Se alcanz (mas) ó una alta eficiencia en la obtención de embriones (31%) los cuales fueron rescatados y germinados in vitro para posteriormente, por medio de duplicación vía colchicina, obtener mas de 1.000 plantas de trigo doble haploides Resumen en inglés The use of double haploid techniques in plant breeding has the potential of shortening genetic improvement cycles in comparison to conventional methods, by means of the fast production (one cycle) of homozygous lines derived from segregant populations, which facilitates rapid homogenization and genetic stabilization. The parental material used (F3) was previously selected under field conditions. A high level of efficiency was reached in obtaining embryos (31.1%), which we (mas) re rescued and germinated in vitro cultivationto later, by means of duplication via colchicine, to obtain more than 1000 double haploid wheat plants

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Embarazo gemelar ectópico tubárico: reporte de un caso

Velázquez Brucoli, Geraldine; Trías Nancy, Erma; Velásquez Durán, Vicente; Saulny de Jorges, Jacqueline
2005-09-01

Resumen en español Se presenta caso clínico de paciente de 36 años IIIg, II abortos anteriores con diagnóstico ecográfico de embarazo gemelar ectópico tubárico, edad de gestación de 12 semanas y actividad cardíaca en ambos embriones. El motivo de consulta fue dolor abdominal, náuseas y vómitos y antecedente de legrado uterino 3 semanas atrás. El ultrasonido abdominal permitió diagnosticar embarazo ectópico gemelar monoamniótico, monocoriónico izquierdo roto. Se practicó lapa (mas) rotomía exploradora y salpingectomía izquierda. El estudio histológico confirmó embarazo tubárico gemelar con conservación de arquitectura histológica fetal. Por ser este un caso poco común quisimos realizar una revisión de la literatura nacional e internacional, con el fin de darlo a conocer, y hacer referencia sobre la incidencia y factores de riesgo del embarazo ectópico. Resumen en inglés gestation, with cardiac activity in both embryos. The patient presented abdominal pain, nausea and vomit, associated with curettage practiced 3 weeks before. An abdominal ultrasonography led to the diagnosis of ruptured uni-ovular, uni-amniotic twin tubal left ectopic pregnancy. Laparotomy and left salpingectomy followed. Histological studies confirmed a twin tubal ectopic pregnancy with fetal architecture preserved. Since this case is not common, we made a review of national and international literature in order to show incidence and risk factors.

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Inducción de mellizos mediante la transferencia de un segundo embrión ipsilateral o contralateral al cuerpo lúteo en vacas cubiertas/ Twin induction by transfer of a second embryo ipsilateral or contralateral to the corpus luteum in mated cows

Silva, M. E.; Gatica, R.; Correa, J. E.
2000-01-01

Resumen en español El objetivo de este trabajo fue comparar el efecto del sitio de depósito (ipsi o contralateral al CL) de un segundo embrión en vacas cubiertas sobre la tasa de preñez y de gestaciones dobles. Treinta y dos vacas receptoras recibieron un embrión congelado-descongelado ipsilateralmente a su cuerpo lúteo y 28 contralateralmente, 7 días posterior a su cubierta. En el grupo de transferencias ipsilaterales 21 receptoras se preñaron al primer servicio (65,6%), mientras (mas) que en el grupo contralateral 21 de las 28 receptoras se diagnosticaron preñadas (75%), no existiendo diferencias entre ambos grupos. Sin embargo, sí se observó diferencias en la tasa de preñez doble, entre los 60 y 90 días post servicio en ambos grupos (57,1 v/s 14,3% y 45 v/s 4,8% respectivamente). Contrariamente a algunos antecedentes que señalan la mayor sobrevida de embriones transferidos ipsilateralmente al ocurrir la muerte del embrión nativo, no se observó diferencias entre los porcentajes de preñez en ambos grupos. La diferencia observada en el número de gestaciones dobles entre el grupo de transferencia ipsilateral y el contralateral es mayor a la descrita en la literatura, pero confirma antecedentes de que la existencia de dos embriones en el cuerno uterino ipsilateral no aumenta la tasa de mortalidad embrionaria ni fetal. De acuerdo a lo descrito, se concluye que la transferencia de un segundo embrión al cuerno uterino ipsilateral de vacas previamente cubiertas es un método más efectivo de inducción de mellizos que la transferencia contralateral Resumen en inglés SUMMARY The purpose of this work was to compare the effect of the site of transfer (ipsilateral or contralateral to the corpus luteum) of a second embryo to already mated cows on pregnancy and twinning rate. Thirty two frozen-thawed embryos were transferred ipsilateral to the corpus luteum of recipient cows and twenty eight were transferred contralaterally. On the ipsilateral group 21 cows became pregnant after first service (65.6%), while 21 out of 28 recipients were (mas) diagnosed as pregnant in the contralateral group (75%). No significant differences were observed between both groups. Twin pregnancy rate at 60 and 90 days after service was 57.1 and 45% of pregnant recipients for the ipsilateral group and 14.3 and 4.8% for the contralateral group. Significant differences (P< 0.05) were observed between groups at both times. Although embryos transferred to the ipsilateral horn have higher probabilities to survive when the native embryos are reabsorbed in comparison with the ones transferred to the contralateral horn, we did not observe differences on the pregnancy rate of both groups after first service. The difference we observed in the number of twin pregnancies between groups was higher than that described in the literature. These results confirm the fact that the existence of 2 embryos in one uterine horn does not increase the embryo or foetal mortality rate. According to our findings we can conclude that the transfer of a second embryo to the ipsilateral uterine horn of already mated cows is a better twin induction technique than contralateral transfers

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Germinación como parámetro de selección en Karwinskia por su potencial de productividad en peroxisomicina A1/ Germination as a selection parameter in Karwinskia for its productivity potential in peroxisomicine A1

Luján-Rangel, R; Olivares-Sáenz, E; Vázquez-Alvarado, RE; Garza-Ocañas, L; Torres-Alanís, O
2007-12-01

Resumen en español Karwinskia parvifolia (Kp) y Karwinskia humboldtiana (Kh) son plantas venenosas de la familia rhamnácea. Los estudios toxicológicos y clínicos realizados con uno de los compuestos presentes en el fruto [peroxisomicina A1 (PA1)) sugieren su posible utilidad farmacológica en el tratamiento de algunos tipos de cáncer. Esta es la razón por la cual estas plantas se cultivan para incrementar su productividad en PA1. Se investigó el efecto del nitrógeno y de la especie s (mas) obre la viabilidad de las semillas, y se determinó la curva de germinación para Kp con (grupo Kp-CN) y sin (grupo Kp-SN) nitrógeno, y para Kh sin nitrógeno (grupo Kh-SN) a través del modelo probit. Este modelo se caracteriza por la probabilidad de germinación en función del tiempo. Los resultados sobre promedios de cavidades con una o más plántulas por endocarpio fueron de 26,4 y 15,8 % para los grupos Kp- CN y Kp-SN, respectivamente, y 32,7 % en el grupo Kh-SN. Se observaron diferentes velocidades de germinación entre los grupos de plantas estudiados contenido y entre especies. El orden fue Kp-CN > Kp-SN > Kh-SN. El mayor de PA1 se obtiene de los endocarpios y testas de las semillas de Karwinskia, y los endocarpios con un mayor número de embriones tienen un mayor número de testas. Por lo tanto, a través de los porcentajes de germinación es posible estimar el número de embriones viables y por lo tanto el potencial de productividad de PA1, tan solo por tener un mejor llenado de grano. Como resultado, las pruebas de germinación serían una forma de obtener evidencia sobre el contenido embrionario de los endocarpios, y un parámetro a considerar para la preselección de plantas de alto rendimiento de PA1. Resumen en inglés Karwinskia parvifolia (Kp) and Karwinskia humboldtiana (Kh) are poisonous plants of the rhamnacea family. Toxicological and clinical studies performed with one of the compounds present in the fruit [peroxisomicine A1 (PA1)) suggest its possible pharmacological usefulness in the treatment of certain types of cancer. This is why these plants are cultivated: to increase their productivity of PA1. We studied the effects of nitrogen and species on seed viability. The germinati (mas) on curve was determined for Kp with (Kp-WN) and without (Kp-NN) nitrogen, and for Kh without nitrogen (Kh-NN) using the probitmodel. This is characterized by the probability of germination in relation to time. The results of the average amount of cavities with one or more seedlings per endocarp were 26.4 and 15.8 % for the Kp-WN and Kp-NN groups, respectively; and 32.7 % for the Kh-NN group. Different germination speeds were observed between the study plants and between species, and the order was Kp-WN > Kp-NN > Kh-NN. The greatest amount of PA1 is obtained from the endocarps and testae of Karwinskiaseeds, and the endocarps with the greatest number of embryos have a greater number of testae. As a result, using the germination percentages it is possible to estimate the number of viable embryos and therefore the potential productivity of PA1, by only having better grain filling. Thus, the germination tests would be a way of obtaining evidence for the embryo content of the endocarps, and a parameter to consider for the selectivity of plants with high PA1 yield.

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FECUNDIDAD Y PRIMERAS FASES DEL DESARROLLO LARVAL DE LA ASCIDIA ECTEINASCIDIA TURBINATA (ASCIDIACEA: PEROPHORIDAE) EN CUBA/ Fecundity and early larval development of the ascidian Ecteinascidia turbinata (Ascidiacea: Perophoridae) in Cuba

García-Cagide, Alida; Hernández-Zanuy, Aida; Cárdenas, Antonio
2005-12-01

Resumen en español Se presentan los valores de la fecundidad de los zooides (sumatoria de la cantidad de ovocitos, embriones y larvas en zooides en fase de liberación larval), la fecundidad de la colonia (producto de la fecundidad promedio de los zooides por la cantidad de zooides maduros, liberando larvas y en reabsorción, en colonias en fase de liberación larval) y las características y duración de las primeras fases del desarrollo de la larva de la ascidia, Ecteinascidia turbinata ( (mas) Ascidiacea: Perophoridae). Las colonias de ascidia fueron colectadas en manglares no estuarinos de la región noroccidental de Cuba. En 200 zooides con 17 mm a 31 mm de longitud, provenientes de 20 colonias colectadas en diferentes meses y lugares, se contaron como promedio 41 ± 12 ovocitos, embriones y larvas. Las colonias que tenían como promedio 163 mm de longitud y 252 zooides, produjeron, en promedio por colonia, 10590 larvas durante cada ciclo de generación-degeneración que dura aproximadamente 40 días. Tanto la fecundidad de los zooides como la de las colonias fueron muy variables en zooides y colonias con estadio reproductivo semejante, pero fue alta la correlación (r=0.84) entre la fecundidad de la colonia y la cantidad de zooides por colonia. Se realizaron dos experimentos, en septiembre y noviembre de 2000, colocándose colonias en fase de liberación larval en acuarios de 10 l de capacidad. La temperatura del agua en los acuarios varió entre 23 y 30 ºC. La mayor liberación de larvas se produjo entre las 10:00 y las 14:00 horas. La larva al salir del zooide progenitor midió, como promedio, 2.7 mm de longitud total (LT). La etapa planctónica de la larva duró de cuatro a ocho horas, alcanzando 3.1 mm LT. El proceso de metamorfosis y fijación de la larva duró de ocho a doce horas. A las 19 horas la larva comienza la alimentación exógena. El zooide juvenil midió entre 1.3 mm y 2.05 mm. Un 9 % de las larvas completaron la metamorfosis. Resumen en inglés Zooids (the total amount of ovocytes, embryos, andlarvae in larval release stage zooids), colonial (zooids mean fecundity per number of mature zooids on resorption or releasing larvae colonies) fecundity and the characteristics and duration of the early larval stages of the ascidian Ecteinascidia turbinata (Ascidiacea: Perophoridae) are given. The ascidian colonies were collected from non-estuarine mangroves in the NW region of Cuba. An average of 41 ± 12 ovocytes, embry (mas) os, and larvae were counted in 200 zooids of 17- 31 mm length from 20 colonies gathered during different months and sites. Ascidian colonies of 163 mm length and 252 zooids average produced 10590 larvae as average per colony during each generation-degeneration cycle that lasts about 40 days. Zooids and colonial fecundity were very variable in zooids and colonies with similar reproductive stage, but a high correlation (r = 0.84) between colonial fecundity and number of zooids per colony was found. Ascidian colonies prior to larvae release stage were placed in 10-liter glass aquaria. The experiments were carried out on September and November, 2000. Water temperature ranged between 23 and 30 ºC. The biggest larval release took place between 10:00 and 14:00 h. Average total length (TL) of larvae leaving the parental zooid was 2.7 mm. The larvae planktonic stage lasted 4 to 8 hours, attaining 3.1 mm (TL). Metamorphosis and larvae settlement lasted 8 to 12 hrs, and exogenous feeding began at 19 hrs. The juvenile zooid measured between 1.3 and 2.05 mm, and 9 % of the larvae completed the metamorphosis.

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El diagnóstico de preimplantación genética, el caso Nash y las indicaciones no médicas: De la transgresión del imperativo kantiano a las advertencias de Habermas/ Diagnosis of genetic pre-implantations. The Nash case and non-medical indications: From the transgression of Kant's mandate to Habermas' warnings

Mejía, Orlando
2005-12-01

Resumen en español El diagnóstico de preimplantación genética (DPG) ha extendido sus usos e indicaciones más allá de los limites de la detección de anomalías genéticas. Con el caso Nash se ha dado el primer paso hacia la denominada "construcción de embriones" y por primera vez se ha manipulado un embrión para beneficio de un tercero existente. En este trabajo se analizan los aspectos científicos y bioéticos de este caso. Interpretando las implicaciones de la transgresión del im (mas) perativo kantiano, que refiere que todo ser racional debe ser un fin en sí mismo y no un medio al servicio de otros. De igual manera, se exponen las advertencias que ha hecho el filósofo Jurgen Habermas de utilizar el DPG como una técnica de eugenesia positiva. Por último, se muestran otras indicaciones no médicas del DPG y sus dilemas bioéticos. Resumen en inglés The diagnosis of genetic pre-implantation (GPD) has extended its use and indications beyond the limits of genetic abnormalities detection. With the Nash case, the first step to the so called, embryos' constructions has been taken, and for the first time, an embryo has been manipulated to benefit a third party alive. This work analyses the scientific and bio ethical aspects of this case. Interpretation of the implications of Kant's mandate transgression, that says that eve (mas) ry rational being must be an end by itself and not a means to serve others. Likewise, the warnings made by the philosopher Jurgen Habermas are exposed; the use of GPD as a positive eugenics technique. And last, other non medical indications of GPD and the bio-ethical dilemma are shown.

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Complicaciones materno fetales en pacientes con Síndrome de Turner: Reporte de dos casos manejados con donación de óvulos/ Maternal-fetal complications in patients suffering from Turner syndrome: A report of two cases with oocyte donation

Velasco, Harvy; García, Natalia; Madero, José Ignacio; Duque, Marco A; Saumet, Julio; López, Claudia; León, María Fernanda; Avila, Luz Mabel; Ruiz, Jesús A
2006-06-01

Resumen en español El Síndrome de Turner (ST) es la patología más frecuente que compromete los cromosomas sexuales, es causada por la ausencia completa o parcial del cromosoma X. Las implicaciones reproductivas de estos pacientes que se constituyen en infertilidad por una falla ovárica prematura y disgenesia gonadal, sugieren que el manejo indicado es la donación de óvulos asociada con la generación de embriones in vitro y su posterior transferencia, previa preparación endometrial. (mas) En este artículo se informan dos casos de ST manejados con ovodonación y sus implicaciones clínicas en el embarazo: Desproporción cefalo-pélvica por talla baja, complicaciones cardiovasculares que generan linfedema, lesiones aórticas y preeclampsia. Resumen en inglés Turner’s syndrome (TS) is the most frequent pathology compromising the sexual chromosomes, being caused by the complete or partial absence of chromosome X. The reproductive implications for these patients (i.e. infertility caused by early ovarian failure and gonad disgenesis) have suggested that the indicated management for this condition lies in anonymous ovodonation, followed by embryos being produced in vitro and their subsequent transfer, after suitable endometr (mas) ial preparation. This article reports oocyte donation to two patients suffering from TS and their clinical implications for pregnancy: cephalo-pelvic imbalance due to small maternal size and cardiovascular complications producing lymphoedema, aortic dissection and preeclampsy.

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APORTES A LA BIOLOGÍA DE TIBURONES Y RAYAS DEMERSALES EN LA REGIÓN NORTE DEL CARIBE COLOMBIANO/ Contribution To Biology Of Demersal Sharks And Rays In The North Region Of Colombian Caribbean

MORENO RODRÍGUEZ, FABIÁN; ACEVEDO URZOLA, KELLY; PARAMO, JORGE
2008-12-01

Resumen en español El presente estudio es una contribución al conocimiento biológico de los peces cartilaginosos en la región norte del Caribe colombiano. Los ejemplares examinados se capturaron con una red demersal, se determinó su peso, longitud total y estado de madurez sexual. Adicionalmente se realizó la ubicación espacial de las capturas y la relación con las variables ambientales. Se capturaron un total de 21 individuos, colectando tres especies de rayas, Dasyatis americana, D (mas) . guttata y Rhinobatos percellens, dos de tiburones Mustelus minicanis y Rhizoprionodon porosus, la más común fue D. guttata con 56%, las tallas (longitud total) fluctuaron entre los 1760 -394 mm en rayas y 595 -585 mm en tiburones. Se obtuvieron más hembras que machos para todas las especies, con predominio de estados inmaduros y en maduración, solo se registró una hembra grávida de M. minicanis con dos embriones. Resumen en inglés The present study is a contribution to the biological knowledge of cartilaginous fish from the north of Colombian Caribbean. The samples were obtained from a demersal net in the north of Colombian Caribbean, its weight, overall length and sexual maturity stage was determined. Additionally, spatial distribution and its relationships with environmental variables were explored. A total of 21 individuals were captured, three ray species were collected, Dasyatis americana, D. (mas) guttata and Rhinobatos percellens, two sharks Mustelus minicanis and Rhizoprionodon porosus, the most common was D. guttata with 56%, the sizes (total length) fluctuated between 1760 - 394 mm in rays and 595 -585 mm in sharks. More females were obtained than males in all the species, with predominance of immature and in maturation states, a single pregnant female of M: minicanis with two embryos was registered.

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Nacimiento de la primera niña en Venezuela con selección de sexo en espermatozoides

Rosemberg, Estrella; Olivieri, María T; Brofenmajer, Sammy
2008-03-01

Resumen en español El objetivo del presente trabajo es realizar la selección de sexo de espermatozoides portadores del cromosoma sexual femenino, para lograr el embarazo y nacimiento de una niña. Paciente de 36 años, III gesta, dos embarazos simples y un gemelar, acude con su esposo a consulta por deseos de tener una hija. Se seleccionaron los espermatozoides portadores del cromosoma X y fueron teñidos con bisbenzimida y seleccionados por citometría de flujo con tecnología Microsort. (mas) La fracción enriquecida fue congelada. Se realizó a la paciente una inducción de la ovulación con agonista de GnRH y FSH. Se realizó la inyección intracitoplasmática de espermatozoides (ICSI) con los espermatozoides sexados a 9 ovocitos maduros. Se transfirieron dos embriones de 8 células. Se confirmó el embarazo y el sexo femenino diagnosticado por US y amniocentesis, con el nacimiento de una niña normal. Esta es la primera vez, que se aplica con éxito la selección de sexo de espermatozoides en Venezuela, lo que abre caminos para lograr tener un hijo del sexo deseado. Resumen en inglés The aim of the study is to perform sperm separation for female gender selection in order to achieve the pregnancy and birth of a baby girl. This procedure was performed for family balancing of a couple with four boys who contracted the aid of EMBRIOS, Hospital de Clínicas Caracas. The X bearing sperm cells were stained with bisbenzimide and sorted by Flow Citometry with MicroSort technology. The enriched fraction was frozen. Ovulation induction was performed with GnRH ag (mas) onist and FSH. Nine mature oocytes were injected by Intracitoplasmic Sperm Injection (ICSI) and 2 embryos were transferred to the uterus. Pregnancy and the female sex fetus were confirmed by ultrasound and amniocentesis with the birth of a normal baby girl. This is the first time that sperm separation for gender selection has been successfully performed in Venezuela opening new frontiers for sex selection.

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Embriogénesis somática en samán/ Somatic embryogenesis in pod tree

Velásquez S, Rosalía; Colmenares, Jesús; Chirinos, Marilú; Noguera, Arnaldo; Pérez, Miguel
2006-12-01

Resumen en español El samán, Albizia saman, es un árbol usado ampliamente, su madera es muy estimada en algunos lugares para la elaboración y tallado de muebles. El uso indiscriminado y la falta de programas de recuperación, renovación y mejoramiento de la especie ha ocasionado un deterioro a nivel genético haciéndolo susceptible al ataque de plagas y enfermedades. La embriogénesis somática (ES) se asoma como una alternativa para la propagación asexual de esta especie, ya que la s (mas) emilla sexual presenta problemas de latencia y contaminación endógena. El objetivo de la siguiente investigación fue inducir la formación de callos y ES a partir de cotiledones y embriones cigóticos inmaduros en el medio de Murashige y Skoog, evaluándose dos tipos de reguladores: Citocinina (TDZ) y Auxina (2,4-D). La inducción de ES en samán se produjo en los cotiledones inmaduros implantados en el medio de cultivo constituido por las sales de Murashige y Skoog suplementado con 0,01 mg l-1 TDZ y 30 gr l-1 sacarosa, bajo condiciones de total oscuridad y 28 °C. Se demostró la influencia positiva de la citocinina en el desarrollo de ES en comparación con las auxinas. Resumen en inglés Pod tree has been largely used during the last years for its wood is highly appreciated for elaboration and design of household furniture. Indiscriminate used and the lack of recuperation, renewal and breeding programs have provoted damage at the genetic making the species more susceptible to pest and diseases. Somatic embryogenesis (SE) is a good alternative for asexual propagation, because seeds have too many problems with germination and endogen contamination. Callus a (mas) nd SE induction from immature cotyledon and embryos growing in MS medium and provided with two different grow regulators (auxins and cytokinins) were the objectives of study. The SE was induced from immature cotyledons, growing in MS medium supplemented with 0,01 mg l-1 TDZ and 30 g l-1 sucrose under dark condition and 28 °C. It was demonstrated that the cytokinins induce a better development of explant than the auxins.

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Efecto de la ticlopidina en los cambios morfológicos de cultivos endoteliales inducidos por la interacción endotoxina plaqueta

Martínez de Lima, Nina
2007-12-01

Resumen en español La endotoxina (lipopolisacárido) induce estados trombogénicos en el shock séptico. La agregación plaquetaria inducida por lipopolisacárido es inhibida por ticlopidina. Investigamos si ticlopidina podía modificar el efecto de la interacción lipopolisacárido - plaqueta sobre la morfología de cultivos endoteliales. Las células fueron aisladas de la microvasculatura dérmica de embriones de rata. Los cultivos fueron incubados con: lipopolisacárido; lipopolisacárid (mas) o + plasma rico en plaquetas; lipopolisacárido + plasma rico en plaquetas de ratas pretratadas con ticlopidina; lipopolisacárido + solución de ticlopidina; lipopolisacárido + plasma rico en plaquetas + solución de ticlopidina; solución de ticlopidina. Se evidenció daño celular con lipopolisacárido, que se acentuó en presencia de plasma rico en plaquetas, pero con plasma rico en plaquetas procedente de ratas pretratadas con ticlopidina, estas alteraciones no estuvieron presentes. En conclusión ticlopidina suprimió las alteraciones derivadas de la interacción lipopolisacárido - plaqueta sobre el endotelio por lo que podría tener un potencial terapéutico en el shock séptico Resumen en inglés induced by lipopolysaccharide is inhibited by ticlopidina. We investigated if ticlopidina could modify the effect of the lipopolysaccharide -platelets interaction, on endothelial cell morphology. The endothelial cells were isolated from rat embryos dermal microvasculature. The cultures were incubated with: lipopolysaccharide; lipopolysaccharide + platelet rich plasma; lipopolysaccharide + platelet rich plasma from rats treated with ticlopidina; lipopolysaccharide + ticlop (mas) idina solution; lipopolysaccharide + control platelet rich plasma + ticlopidina; ticlopidina solution. The results evidenced citoplasmatic alterations with lipopolysaccharide. This cellular damage was strengthen by platelet rich plasma; however, in the presence of platelet rich plasma from rats pretreated with ticlopidina, these changes did not become present. We concluded that ticlopidina suppresses some derived adverse effects of the lipopolysaccharide -platelet interaction on the endothelium, thus ticlopidina could have a therapeutic potential on septic shock

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CAPACIDAD ANTIMITOTICA DE EXTRACTOS DE ESPONJAS MARINAS DEL CARIBE COLOMBIANO/ ANTIMITOTIC CAPACITY IN EXTRACTS OF MARINE SPONGES FROM COLOMBIAN CARIBBEAN

Mora-Cristancho, Jennyfer; Zea, Sven; Santos-Acevedo, Marisol; Newmark-Umbreit, Federico
2007-12-01

Resumen en español La determinación de actividad antimitótica de extractos de organismos marinos genera expectativas para la obtención de sustancias con potencial anticancerígeno a partir de fuentes alternativas. Se evaluó la actividad antimitótica in vitro de extractos orgánicos crudos de 15 esponjas de la costa Caribe colombiana, en embriones del erizo de mar Lytechinus variegatus. El 80% de las especies (Spirastrella coccinea, Myrmekioderma rea, Iotrochota imminuta, Halichondria s (mas) p., Petromica ciocalyptoides, Cinachyrella kuekenthali, Biemna cribaria, Oceanapia peltata, Xestospongia proxima, Oceanapia bartschi, Polymastia tenax y Dragmacidon reticulata) mostró un nivel de actividad fuerte inhibiendo la divisiones mitóticas desde el primer estadio celular durante la división de los huevos fertilizados de este erizo. Los extractos de Halichondria sp., P. ciocalyptoides y X. proxima desintegraron los núcleos celulares instantáneamente. El extracto de Cribrochalina infundibulum resultó medianamente activo; mientras que los extractos de las esponjas Desmapsamma anchorata y Myrmekioderma gyroderma no mostraron actividad. Resumen en inglés The determination of antimitotic activity of organic extracts from marine organisms generates expectations on the isolation of substances with potential anticancer activity. The antimitotic activity of crude organic extracts from 15 marine sponges from the Colombian Caribbean coast were tested in vitro against embryos of the sea urchin Lytechinus variegatus. 80% of the species evaluated (Spirastrella coccinea, Myrmekioderma rea, Iotrochota imminuta, Halichondria sp., Petr (mas) omica ciocalyptoides, Cinachyrella kuekenthali, Biemna cribaria, Oceanapia peltata, Xestospongia proxima, Oceanapia bartschi, Polymastia tenax y Dragmacidon reticulata) showed significant levels of inhibiting activity on the mitotic divisions at the first cellular phase of fertilized eggs. The extracts from Halichondria sp., P. ciocalyptoides and Xestospongia proxima disintegrate the cellular nuclei instantly. Extracts from Cribrochalina infundibulum showed an intermediate level of activity, while extracts from Desmapsamma anchorata and Myrmekioderma gyroderma showed no activity.

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Estudios citogenéticos de estructuras embriogénicas y plántulas regeneradas de onoto¹/ Cytogenetic studies of annato embryogenic structures and regenerated plantlets

Michelangeli de Clavijo, Claret C; Medina M, Ada M; Artioli G, Paola I; Mata, Jonás
2006-03-01

Resumen en español En la actualidad se cuenta con un protocolo de regeneración de plántulas de onoto, Bixa orellana L., mediante la embriogénesis somática (ES) a partir del cultivo de anteras, el cual ha sido probado eficientemente en varios genotipos. Con la finalidad de determinar si las plántulas obtenidas eran haploides, o si había ocurrido una duplicación espontánea de los cromosomas, se realizaron estudios citogenéticos a embriones normales y anormales, así como a plántulas (mas) cultivadas in vitro y plantas aclimatadas regeneradas por esta técnica en umbráculo. Se describen los procesos de prefijación, fijación, hidrólisis y tinción más eficientes para cada uno de los materiales evaluados. Las observaciones citológicas realizadas mostraron que fueron haploides (n=8 cromosomas), percibiéndose una gran estabilidad en el número cromosómico en las diferentes fases evaluadas. Estos estudios ponen en evidencia la importancia de obtener información relevante sobre la estabilidad genética que permitiría establecer protocolos con el uso de agentes mutagénicos (colchicina) en programas de mejoramiento en onoto donde se pretenda obtener plantas dihaploides ciento por ciento homocigotas, mediante la técnica de ES a partir del cultivo de anteras. Resumen en inglés At this time, a protocol for regeneration of plantlets through somatic embryogenesis from annatto, Bixa orellana L., anthers has been efficiently achieved in different genotypes. In order to verify if plantlets obtained were haploid or if spontaneous chromosome duplication had occurred, cytogenetic studies were made on normal and abnormal embryos, as well as on in vitro cultivated and acclimatized plants regenerated by this technique in the greenhouse. A description of th (mas) e most efficient processes of prefixation, fixation, hydrolysis and dyeing for each genetic material evaluated is presented. According to mitotic countings, they were all haploids (n=8 chromosomes), showing great stability in chromosome number at different phases. These studies indicate the importance of obtaining relevant information on genetic stability in order to establish protocols using mutagenic agents such as colchicine in breeding programs where dihaploids annatto plants are to be obtained by means of somatic embryo techniques from anther culture.

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Biología de la gestación en la gata doméstica (Felis catus)/ Biology of pregnancy in the domestic cat (Felis catus)

SANCHEZ, A.E; SILVA, M.E
2002-01-01

Resumen en español La gata es una hembra poliéstrica estacional en la cual el estímulo coital desencadena la liberación de LH y la ovulación, fenómenos que ocurren dentro de las primeras 50 horas postcoito. La fecundación de los ovocitos ocurre en el oviducto dentro de 30 horas post-ovulación. El transporte embrionario en oviducto toma alrededor de 132 horas y al momento de ingresar al útero los embriones se encuentran al estado de mórula compacta. A continuación los blastocistos (mas) migran entre los cuernos uterinos por aproximadamente 80 horas, hasta producirse la implantación 12 a 13 días post-coito. Durante la etapa preimplantacional existe un aumento significativo de la progesterona sérica así como de los receptores luteales a LH. A partir de la segunda mitad de la gestación, decae la producción de progesterona y aumenta la secreción de prolactina, postulándose que esta última sería el principal agente luteotrófico en la gata. También durante la segunda mitad de la gestación aumenta la secreción de relaxina. La producción y rol de la progesterona en la gestación tardía es un tema controversial. Se ha demostrado que la placenta felina posee actividad esteroidogénica y capacidad de sintetizar progesterona, lo cual sugiere que estaría relacionada con el soporte hormonal de la preñez Resumen en inglés The domestic cat can be defined as a seasonal poliestrous female. During mating the physical stimulus produce the release of LH and ovulation, which occur during the first 50 hours post mating. The fertilization of oocytes takes place inside the oviduct during the 30 hours post ovulation. The embryos transport on the oviduct takes about 132 hours and when embryos reach the uterus they are already a compacted morulae. After this, the blastocyst migrates to both uterine hor (mas) ns for a period of 80 hours aproximately until implantation ocurrs 12 to 13 days after mating. During the preimplantation period, there is a significant increase in blood progesterone and also in LH lutheal receptors. From the second half of gestation, the production of progesterone decrease and prolactin secretion increase. Thus it is thought that the later would be the main luteotrophic agent in the cat. Also during the second half of gestation the secretion of relaxin increase. The production and function of progesterone during late gestation is controversial. It has been shown that placenta of cats has a steroidogenic function and that it is also to produce progesterone

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El Ensayo Cometa: una técnica para evaluar genotoxicidad en el ADN de oocitos bovinos/ The Comet Assay: a technic to evaluate genotoxicity in DNA bovine oocytes

Rodrigo A, Urrego; Pareja, Andrés; Vásquez, Neil A; Márquez, María E
2005-09-01

Resumen en español La electroforesis en gel de células individuales o Ensayo Cometa, es frecuentemente usada para medir el daño en el ADN de las células. En la mayoría de estudios, los linfocitos de sangre periférica son utilizados como modelo celular. Sin embargo, en los últimos años, la aplicación de esta técnica se ha extendido a las células germinales, con el fin de evaluar la integridad del ADN espermático, las condiciones de estrés oxidativo en oocitos porcinos y en embrio (mas) nes bovinos; además, la muerte celular en embriones de ratón. Para la realización de la electroforesis de células individuales en un sistema como los oocitos bovinos se hace imprescindible superar dos grandes limitantes en la estructura complejo-cúmulo-oocito (CCOS): una, la degradación de las glicoproteínas de la zona pelúcida y dos, eliminar el nivel de compactación del genoma haploide bovino en metafase II. Dichas limitantes no permiten una migración adecuada del ADN dentro del gel de agarosa. En este estudio se demuestra que el uso de una solución de lisis con proteinasa K durante 3 h y 10 min de corrido electroforético, permite obtener cometas cuantificables de oocitos bovinos madurados in vitro que pueden ser utilizados en estudios genotóxicos en este sistema celular. Resumen en inglés The single cell gel electrophoresis or the comet assay is used to measure the DNA damage of individual cells, for most studies the lymphocytes from peripheral blood are used as cellular model. However, during the last years, the application of this technique has been extended to the germinal cells with the purpose of evaluating the integrity of the spermatic DNA, oxidative stress conditions in boar oocytes and bovine embryos besides cellular death in mouse embryos. Applyi (mas) ng the comet assay to a system such as the bovine oocytes it becomes indispensable to overcome two big structural barriers in the cumulus-oocyte-complex (COC): first, the degradation of the glycoproteins in the zona pellucida and second, the elimination of the flatten level of the haploid metaphase II bovine oocyte genome. These obstacles do not allow an appropriate migration of the DNA through the agarose gel. In this study it is demonstrated that the use of a lysis solution with proteinase K during 3 h and 10 min in electrophoretic running allows to obtain quantifiable comets of bovine oocytes matured in vitro, which can be used in genotoxic studies.

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ANATOMÍA Y ULTRA ESTRUCTURA DE LA FMBRIOGÉNESIS SOMÁTICA EN ONOTO

Michelangeli de Clavijo, Claret C.; Artioli G, Paola I.; Medina M.**, Ada M.
2003-03-01

Resumen en español Con la finalidad de estudiar el proceso de la embriogénesis somática (ES) en onoto, Bixa orellana L., a partir del cultivo de anteras, se realizaron estudios anatómicos y ultraestructurales (microscopía electrónica de barrido) a callos embriogénicos y no embriogénicos, así como a ES en cuatro estados de crecimiento: globular, corazón, torpedo y cotiledonar. Para los estudios anatómicos, las muestras fueron fijadas en FAA 70%, deshidratadas en una serie creciente (mas) de etanol-terbutanol, inmersas en parafina, seccionadas entre 5 y 24 m m y teñidas en Safranina-Fast Green. Para los estudios ultraestructurales, las muestras fueron fijadas en FAA 70%, deshidratadas en una serie creciente de etanol, secadas hasta su punto crítico, realizándose un cubrimiento iónico-metalización con oro. La masa embriogénica-presentó ES globulares con células de forma redondeada, pared relativamente gruesa, citoplasma denso y núcleo prominente. Posteriormente, se desarrollaron los estados de torpedo y cotiledonares, caracterizados por el alargamiento del eje hipocótilo-radícula y la expansión de los cotiledones, respectivamente. También se observaron embriones secundarios y anormalidades, con formación de numerosos cotiledones fusionados en roseta. Resumen en inglés Summary With the purpose of studying somatie embryogenesis process of annatto, Bixa orellana L., from anther culture, anatomical and ultrastructural studies (scanning electron microscopy) were performed of embryogenic and non embryogenic callus, as weil as somatic embryos in four growing stages globular, heart, torpedo and cotiledonary. For anatomical studies, the samples were established in FAA 70%, dehydrated in a graded ethanol - terbutanol increasing series, immersed (mas) in paraffin, sectioned between 5 and 24 pim and stained with safranine - fast green. For the ultrastructural studies, the samples were established in FAA 70%, dehydrated in a graded ethanol series, dried to critica¡ point and covered with gold with an ionic- metallization procedure. The embryogenic tissue was characterized by round celis, relative thick walls, dense cytoplasm and prominent nuclei. Later, torpedo and cotyledonary stages were developed, characterized by hipocotyl and radicle axis'enlargement and cotyledon expansion, respectively. The formation of secondary embryos and anomalies were observed, with fonnation of many cotyledons j oined together in a small rose way. Key Words: Anatomy; anthers; Bixa orellana L.; somatic embryos; SEM; ultrastructure

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La migración de la burbuja de aire postransferencia embrionaria es un evento al azar

Rísquez, Francisco; Briceño, Jorge; Rísquez, María C; Navarro, Carmen; Tang, Mónica; Reyes, Ibrahim; Trias, Alexis; Confino, Edmond
2007-09-01

Resumen en español Objetivo: Demostrar que la migración de la burbuja de aire postransferencia embrionaria es un evento al azar que no depende de la posición del paciente. Métodos: Estudio prospectivo multicéntrico. Se practicó transferencia embrionaria a 69 pacientes bajo guía ultrasonográfica. Se cargó el catéter de transferencia con una o dos burbujas junto con el medio conteniendo los embriones usando catéter de Frydman o catéter de Wallace y luego se les hizo seguimiento eco (mas) gráfico en posición horizontal, 20-25 minutos más tarde y luego a los 90 minutos postransferencia en posición vertical para verificar movimiento y configuración de las burbujas. Ambiente: Centro Médico Docente La Trinidad, Caracas. Nortwestern University Feimberg School of medicine, Chicago, IL. EE.UU. Resultados: En 50 (72,46 %) de las pacientes se observó movimiento de las burbujas. En posición de pie se demostró una distribución al azar sin efecto visible de la gravedad. Conclusión: Las burbujas de aire se mueven y dividen frecuentemente posterior a la transferencia con la paciente en posición horizontal y de pie, lo que sugiere actividad contráctil uterina. No fue común observar movimiento de burbujas relacionada con la gravedad, lo que sugiere que el descanso horizontal postransferencia embrionaria puede ser innecesario Resumen en inglés Objective: To demonstrate that air bubble migration is a random event after embryo transfer regardless of the position of patient. Methods: Multicenter prospective study. Sixty nine embryo transfers were performed under ultrasound guidance. Transfer catheter was loaded with one or two air bubbles and medium containing embryos, either Wallace catheter or Frydman catheter were used, ultrasound tracking of air bubble was performed to verify movement and configuration inmedia (mas) tely, 20-25 minutes in horizontal position and 90 minutes on standing position after embryo transfer. Setting: Centro Medico Docente La Trinidad, Caracas. Northwestern University Feinberg School of Medicine, Chicago, Illinois, USA. Results: Movement was observed in 50 (72,46 %) of the patients. Movement was not observed related to gravity while standing up. Conclusion: Air bubbles move and split frequently after embryo transfer with the patient in the horizontal position and on standing, suggestive of active uterine contractions. Gravity related bubble motion was uncommon, suggesting that horizontal rest post embryo transfer may be unnecessary

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Biología de las células madre embrionarias (ES cells) en distintas especies: potenciales aplicaciones en biomedicina/ Biology of embryonic stem cells (ES cells) in different species: potential applications in biomedicine

Arias, ME; Felmer, R
2009-01-01

Resumen en español Las células madre embrionarias (ESC del inglés, Embryonic Stem Cells) son células indiferenciadas que derivan de la masa celular interna (MCI) de embriones en estado de blastocisto. Estas células se caracterizan por su habilidad para crecer indefinidamente in vitro y conservar la capacidad de diferenciarse hacia todos los tipos celulares de un individuo. Las células madre embrionarias se han constituido en una poderosa herramienta para estudios del desarrollo embrion (mas) ario, genómica funcional, para la generación de animales transgénicos vía recombinación homóloga y más recientemente en clonación y medicina. Debido a su potencial aplicación en la manipulación específica de genes, el aislamiento de estas células en especies domésticas como el cerdo y el bovino podría tener numerosas aplicaciones agropecuarias, farmacéuticas y biomédicas. Más aún, las actuales investigaciones desarrolladas acerca de sus propiedades biológicas y sobre sus posibles aplicaciones en medicina regenerativa, debido al enorme potencial de reparación que encierran, están abriendo grandes posibilidades que permitirán, en un futuro no muy lejano, disponer de revolucionarias terapias para diversas enfermedades humanas que hoy en día son incurables. En esta revisión se describen aspectos generales del aislamiento, derivación, cultivo, transformación y diferenciación de estas células en diferentes especies así como también algunas de sus potenciales aplicaciones en biomedicina Resumen en inglés Embryonic stem cells (ES cells) are undifferentiated cells that derive from the inner cellular mass (ICM) of blastocyst-stage embryos. These cells can grow indefinitely in vitro preserving the ability to differentiate into all cell types of an individual. ES cells have become a powerful tool to study the early embryonic development, in functional genomic, to generate gene targeted transgenic animals and recently in animal cloning and medicine. Furthermore, current researc (mas) h developed on their biological properties and possible applications in regenerative medicine, due to their enormous potential of repair, are opening great possibilities that will allow to design, in the near future, revolutionary therapies to diverse human diseases nowadays incurables. In this review the general aspects of the isolation, derivation, culture, differentiation and transformation of these cells in different animal species are described as well as their promising applications in biomedicine

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Multiplicación in vitrodel Piñón Azul Pinus maximartinezii (Rzedowski)/ In vitro multiplication of the Piñón Azul Pinus maximartinezii (Rzedowski)

Ojeda-Zacarías, Ma del Carmen; Luna-Olvera, Hugo A; Morales-Ramos, Lilia H; Verde-Star, María J; Torres-Cepeda, Teresa E; Pereyra-Alférez, Benito; Iracheta- Donjuan, Leobardo; Olivares-Sáenz, Emilio; Salazar-Sáenz, Raúl; Cárdenas-Cerda, Elizabeth
2006-12-01

Resumen en inglés Pinus maximartinezii (Rzedowski) es una especie endémica en peligro de extinción, confinada a una población de aproximadamente 2000 a 2500 árboles maduros en una superficie de 400 ha. En estos casos, es necesario establecer técnicas de propagación que permitan incrementar la disponibilidad del material vegetativo. El objetivo de este trabajo fue desarrollar un protocolo para la multiplicación in vitro de Pinus maximartinezii por medio de organogénesis. Embriones c (mas) igóticos y cotiledones obtenidos de semillas maduras fueron colocados en los medios de cultivo DCR y GD adicionados con 0.3 mgl-1 y 0.5mgl-1 de BAP; 0.01 mgl-1 de NAA, permaneciendo por 6 semanas en condiciones de 26°C ± 2°C y un fotoperíodo de 16 h luz y 8 h oscuridad. Posteriormente los explantes fueron transferidos a los medios de cultivo (DCR y GD) sin reguladores de crecimiento a intervalos de 15 días, durante 6 semanas. En la siguiente etapa (alargamiento de yemas), la variable evaluada fue número de explantes con yemas. Por último los explantes fueron transferidos a los mismos medios de cultivo sin reguladores de crecimiento, adicionados con 0.1% de carbón activado, permaneciendo por 8 semanas; evaluándose posteriormente el número de brotes por embrión. Los análisis de varianza mostraron diferencia significativa en medios de cultivo y concentración de reguladores de crecimiento. Pinus maximartinezii (Rzedowski) is an endemic endangered species, confined to a single population of approximately 2000 to 2500 mature trees. It covers about 400 ha in southern Zacatecas, Mexico. The success of tissue culture techniques for germplasm preservation depends on regeneration of cultures. The objective of this study was to achieve an in vitro proliferation protocol using organogenesis technique for Pinus maximartinezii. Mature seeds were surface sterilized in 6% H2O2 v/v. Isolated cotyledons and zygotic embryos were cultured on shoot induction media. DCR and GD media were supplemented with 0.3 and 0.5 mgl-1 BAP; 0.01 mgl-1 ANA and vitamin solution. Explants were incubated at 26 ± 2ºC under a 16h photoperiod. The explants were transferred every 15 days to hormone-free medium (DCR and GD) for a period of 6 wk for bud development. The number of explants forming buds was determined. After induction of buds, the explants were transferred to a hormone-free basal medium, to which 0.1% activated charcoal was added. After 8 wk, the number of shoots per embryo was evaluated. Effects of either basal media or plant growth regulator concentrations were significantly different (p

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Estudio del desarrollo embrionario del sábalo (Prochilodus lineatus)/ Study of the embrionary development in sábalo (Prochilodus lineatus)

Botta, P; Sciara, A; Arranz, S; Murgas, LDS; Pereira, GJM; Oberlender, G
2010-01-01

Resumen en español El almacenamiento de espermatozoides de peces por medio de la criopreservación es muy utilizado hoy en día. Si bien se sabe que el proceso de congelamiento/descongelamiento genera la fragmentación del ADN del espermatozoide, no se conocen las consecuencias que esto tiene en el desarrollo embrionario. Actualmente hay un gran interés en el desarrollo de métodos de fecundación in vitro para la especie Prochilodus lineatus utilizando semen criopreservado. En este trabaj (mas) o estudiamos el desarrollo embrionario de esta especie, a fin de sentar las bases para la observación de anormalidades en el desarrollo de embriones obtenidos a partir de espermatozoides crioconservados. Los huevos producidos por esta especie son translúcidos y poseen un gran espacio perivitelino; son del tipo telolecítico y presentan una división meroblástica durante los primeros estadíos del desarrollo. Si bien el desarrollo embrionario de Prochilodus lineatus (sábalo) se llevó a cabo en menor tiempo en comparación con Danio rerio, las etapas que atravesó el embrión son muy similares. Durante el estudio se observaron los períodos de Cigoto, Clivaje, Blástula, Gástrula, Segmentación y Eclosión de la larva de sábalo. De esta manera se logró registrar los diferentes estadíos de su desarrollo, principalmente aquellos posteriores a la transición de la blástula media (TBM), a partir del cual el embrión comienza a transcribir su propio genoma Resumen en inglés Currently, the storage of fish spermatozoa through cryopreservation is widely used. Although it is of common knowledge that the process of freezing / thawing generates DNA fragmentation of spermatozoa, the consequences of this process on embryonary development are unknown. There is great interest in developing methods for in vitro fertilization for the species Prochilodus lineatus using cryopreserved semen. In this paper we study the embryonic development of this fish, to (mas) lay the groundwork for the observation of abnormalities in the development of embryos derived from criopreserved spermatozoa. The eggs produced by this species are translucent and have a large perivitelline space, are of the telolecitic type, and presented meroblastic division during the early stages of development. Although the embrionary development of Prochilodus lineatus (Sábalo) took place in less time compared with Danio rerio (Zebrafish) the embryo goes through very similar stages. During the study it was possible to observe the periods of zygote, cleavage, blastula, gastrula, segmentation and hatching of the larvae of Sábalo. The different stages of development were successfully recorded, especially those after the transition of blastula media (TBM), when the embryo begins to transcribe its own genome

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Biología reproductiva de Rhinobatos percellens (Walbaum, 1792) (Batoidea: Rajiformes) en el Caribe colombiano/ Reproductive biology of Rhinobatos percellens (Walbaum, 1792)(Batoidea: Rajiformes) from the Colombian Caribbean

Grijalba-Bendeck, Marcela; Acero P, Arturo; González, Esperanza
2008-12-01

Resumen en español Se evaluó la condición reproductiva de 172 rayas guitarra Rhinobatos percellens extraídas como fauna incidental de las capturas de chinchorro playero entre agosto 2005 y octubre 2006 en playa Salguero, Santa Marta, Colombia. Se describió la estructrura del sistema reproductor y la incidencia que sobre el ciclo reproductivo ejerce la condición ambiental. La raya guitarra es matrotrófica vivípara, con ovarios compuestos. El desarrollo ovocitario se compone de cuatro (mas) etapas y el de los testículos, que son compuestos, de nueve estados espermatogénicos. Se evidenció desarrollo vitelogenético simultáneo al crecimiento embrionario con un periodo de reproducción activa (cópula, nacimiento, gestación) entre octubre y abril y un receso de mayo a septiembre, durante el cual, al parecer, ocurre la diapausa embrionaria; este es inverso en términos de tiempo al descrito en la literatura para rinobátidos del hemisferio norte. En el Caribe de Colombia, las hembras gestan de dos a cuatro embriones entre dos y diez meses de abril a diciembre, sin que exista una relación de su talla y número, con el tamaño materno. El comportamiento de los índices biológicos (gonadosomático, hepatosomático y factor de condición) permitió comprender la dinámica reproductiva, pero no reveló tendencias marcadas en el tiempo, que deberán ser evaluadas en profundidad considerando la condición ambiental y la disponibilidad de alimento Resumen en inglés The reproductive condition of 172 guitarfish Rhinobatos percellens was evaluated in animals incidentally captured in the captures of chinchorro playero between August 2005 and October 2006 at Salguero beach on Santa Marta, Colombia. To understand the reproductive cycle and how it is influenced by the environmental conditions, the reproductive systems were described. The guitarfish is a viviparous matrotrophic ray, with compound ovaries. Four ovarian developmental stages a (mas) nd nine espermatogenic phases of compound testis were observed. The vitellogenetic development was simultaneous to embryonic growth, with an active reproductive (matting, births, gestation) period between October and April, and a reduction in activity from May to September when embryos stop their growth. North hemisphere rhinobatids show an inverse cycle. Guitarfish females produced between two and four embryos with a gestation period of ten months from April to December; maternal size did not have any relation with embryo length and number. Biological indexes (gonadosomatic, hepatosomatic and condition factor) did not show clear time tendencies in relation to reproductive dynamics; they must be analyzed altogether with environmental condition and food availability

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Inducción eficiente de brotes adventicios en cotiledones de Pinus maximartinezii Rzedowski/ Efficient induction of adventitious shoots in cotyledons of Pinus maximartinezii Rzedowski

Robledo Paz, Alejandrina; Villalobos Arámbula, Víctor Manuel; Santacruz Varela, Amalio
2009-10-01

Resumen en español Pinus maximartinezii Rzedowski es una especie de piñonero originaria de México, considerada en peligro de extinción debido a la alteración de sus poblaciones y de su hábitat, así como a su distribución geográfica restringida. A pesar de que tecnologías como el cultivo de tejidos podrían ser una alternativa para su conservación y propagación, la literatura existente al respecto es escasa. En este trabajo se presenta un protocolo que permite la diferenciación e (mas) ficiente de brotes adventicios de este taxon. Se probaron embriones y cotiledones en cuanto a su capacidad para formar yemas adventicias. Los segundos mostraron la mejor respuesta y fueron entonces cultivados en el medio de Schenk y Hildebrandt (SH) modificado, suplementado con cuatro concentraciones (2.2 a 16.8 mg L-1) de N6-benciladenina (BA). El porcentaje de explantes que produjeron brotes y el número de brotes formados en éstos fue estadísticamente diferente entre los niveles de BA probados; con 16.8 mg L-1 se indujo el mayor porcentaje de órganos que formaron brotes (53.5) y el número más alto de brotes generados por explante (29.1) a las 14 semanas de cultivo; de los vástagos individualizados, 3% formó raíces. La metodología desarrollada permite la diferenciación de yemas adventicias de P. maximartinezii a partir del cultivo de cotiledones, con una tasa de multiplicación significativamente superior a la obtenida por otros autores. Resumen en inglés Pinus maximartinezii Rzedowski is a nut pine native to Mexico that currently is considered as an endangered species because of disturbance of populations and natural habitat, as well as its limited geographic distribution. Even though such technologies as tissue culture could represent an alternative for its conservation and propagation, the existing literature for this pine is scarce. In this paper a protocol that allows an efficient differentiation of adventitious shoot (mas) s for this species is presented. Different types of explants (embryos and cotyledons) were evaluated regarding their capacity to differentiate adventitious shoots. Explants from cotyledons showed the best response, so they were cultivated in a modified Schenk and Hildebrandt (SH) medium supplemented with four different concentrations (2.216.8 mg L-1) of N6-benzyladenine (BA). Percentages of explants forming shoots and number of shoots developed per explant were statistically different among the tested concentrations. The 16.8 mg L-1 of BA concentration induced the largest percentage of explants forming shoots (53.5) and the highest number of shoots developed per explant (29.1) after 14 weeks of culture. Three percent of the individual shoots produced roots. The developed methodology allows differentiation of adventitious shoots of Pinus maximartinezii from cotyledon explants, with a multiplication rate significantly higher than the one obtained by other authors.

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REFLEXIONES PRELIMINARES SOBRE UNA APLICACIÓN CIENTÍFICO-MÉDICA DE ACTUALIDAD: LA CLONACIÓN/ PRELIMINAR REFLECTIONS ABOUT A PRESENT TECHNO MEDICAL APPLICATION: CLONATION/ REFLEXÕES PRELIMINARES SOBRE UMA APLICAÇÃO CIENTÍFICO-MÉDICA DE ATUALIDADE: DA CLONAGEM

Arranz, José Antonio; Ariza, Xavier; Riudor, Encarnació; Vilar, Lluis; Salvadó, Jordi; Galofré, Núria; Vendrell, Susana; Esquirol, Josep María
2003-01-01

Resumen en portugués Este artigo confronta o novo desafio que a tecnociência médica abriu: a possibilidade de clonagem terapêutica ou reprodutiva. O presente trabalho aborda de uma forma clara e esquemática, a terminologia científicomédica, a partir dos conceitos de reprodução sexual ou assexual até a endonucleação, passando pelos conceitos de embrião gamético, somático, de cultivos e células tronco, para analisar os conflitos éticos que surgem em cada caso. A última parte do (mas) ensaio centrase no problema ético do embrião e nos problemas criados pelos embriões excedentes dos processos de fertilização in vitro, origem de uma importante controvérsia entre a comunidade científica, que pede que sejam utilizados para fines de pesquisa, diferentes grupos sociais que se opõe à sua utilização e a lei que os declara como não utilizáveis para fins reprodutivos, quando sua viabilidade não pode ser garantida Resumen en español Este artículo afronta el nuevo reto que la tecnociencia médica ha abierto: la posibilidad de clonación terapéutica o reproductiva. En el presente trabajo se aborda, clara y esquemáticamente, la terminología científico médica, desde los conceptos de reproducción sexual o asexual hasta la endonucleación, pasando por los conceptos de embrión gamético, somático, de cultivo y células madres, para ir realizando un análisis de los conflictos éticos que se abren e (mas) n cada caso. La última parte del ensayo se centra en el problema ético del embrión y los problemas generados por los embriones sobrantes de los procesos de fertilización in vitro, origen de una importante controversia entre la comunidad científica, que pide que sean utilizados para fines de investigación, diferentes grupos sociales que se oponen a su utilización y la ley que los declara como no utilizables para fines reproductivos cuando su viabilidad no pueda ser garantizada Resumen en inglés This paper reflects about the new medical technoscience challenge opened: the possibility of therapeutic or reproductive clonation. The present paper approximates the medicalscientific terminology clearly and schematically, from the concepts of sexual or asexual reproduction to endonucleation, to the concepts of germinal, somatic or in vitro embryos and stem cells, to carry out an analysis of the ethical conflicts opened in each case. The last part of the essay centers in (mas) ethical issues related to the embryo, particularly the problems generated by the surplus embryos of fertilization in vitro, origin of an important controversy between the scientific community, that would like that they be utilized for research, different social groups, that opposed to their use, and the law, that declares them unusabel for reproductive purposes when their viability cannot be guaranteed

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Efectos del encalado completo y aplicación de tdz sobre la brotación, rendimiento y calidad de frutos del manzano cv. Golden delicious/ Effect of the entire whitewashing and TDZ application on budbreak, yield and quality of apple cv. Golden Delicious

Zermeño, Alejandro; Gil, José Alexander; Hernández, Alejandro; Rodríguez, Raúl; Ramírez, Homero; Benavides, Adalberto; Jasso, Diana; Munguia, Juan; Ibarra, Luis
2010-04-01

Resumen en español La producción de manzanas en el norte de México presenta problemas asociados a la ocurrencia de días muy soleados y cálidos seguidos por noches frías durante el invierno; estas fluctuaciones de temperatura tienen un efecto negativo en el letargo de las yemas, que resulta en una brotación retardada con falta de uniformidad, desprendimiento de yemas y aborte de embriones. El objetivo de esta investigación fue analizar el efecto del encalado completo del follaje de á (mas) rboles de manzano (Malus domestica Borkh) al inicio del invierno sobre la brotación vegetativa y floral, rendimiento y calidad del fruto, y su relación con la aplicación de thidiazuron (TDZ) como promotor de brotación. El estudio se desarrolló durante el invierno 2005-2006 en una huerta de manzano (cultivar Golden Delicious) de nueve años de edad en Jame, municipio de Arteaga, Coahuila. La brotación vegetativa en el tratamiento de encalado completo superó en 25 % al tratamiento testigo (sin aplicaciones) y en 21 % a la aplicación de TDZ. La combinación de encalado y aplicación de TDZ retrasó la brotación floral, en relación con los árboles sin encalado y sin la aplicación de TDZ. Asimismo, la combinación no mejoró la brotación de yemas florales. El encalado completo incrementó cerca del 27 % el rendimiento de frutos por árbol con respecto a la aplicación de TDZ. No hubo diferencias en las variables de calidad de frutos entre el encalado y la aplicación del promotor de brotación. Resumen en inglés The apple production in northern Mexico shows problems related to the occurrence during the winter time of sunny and warm days followed by cold nights; those temperature fluctuations have a negative effect in the bud dormancy that results in a late bud break, lack of uniformity, bud detachment, and abort of embryos. The objective of this research was to analyze the effect of whitewashing (with calcium hydroxide) of entire apple trees (Malus domestica Borkh), at the beginn (mas) ing of the winter season, on vegetative and floral bud break, fruit yield and quality, and its relationship to the use of thidiazuron (TDZ) as bud break promoter. The study was conducted during the winter of 2005-2006, in an apple orchard cv. Golden delicious of nine year-old at Jame, Arteaga County, Coahuila State, Mexico. The vegetative budbreak of the whitewashed trees was 25 % higher than those of the control treatment and 21 % more than the trees receiving TDZ .The combined use of whitewash and TDZ retarded floral bud break as compared to the control tress (no whitewashing, no TDZ). Likewise, such a combination did not improve floral budbreak. The whitewashing increased up to 27 % the fruit yield per tree as compared to the application of TDZ. No statistical differences in the variables of fruit quality were observed between whitewashing and the application of TDZ.

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Efecto de la temperatura en el desarrollo embrionario y larval del mejillón, Mytilus galloprovincialis (Lamarck, 1819)/ Temperature effect in the embryonic and larval development of the mussel, Mytilus galloprovincialis (Lamarck, 1819)

Ruiz, Maryori; Tarifeño, Eduardo; Llanos-Rivera, Alejandra; Padget, Christa; Campos, Bernardita
2008-04-01

Resumen en español El mejillón del Mediterráneo (Mytilus galloprovincialis Lamarck, 1819) ha sido registrado recientemente en las costas chilenas, desde Concepción (36ºS) hasta el Estrecho de Magallanes (54ºS). En el estudio de factibilidad de su cultivo masivo en Chile (Proyecto FONDEF D05I-10258) se evaluó el efecto de la temperatura sobre su desarrollo temprano para modular empíricamente las tasas de crecimiento larval. Los embriones y larvas se cultivaron a 12, 16 y 20ºC, en una (mas) unidad productora de semillas marinas en la bahía de Coliumo (36ºS), Chile, desde donde se extrajeron los reproductores. El desarrollo embrionario siguió la secuencia conocida para otros bivalvos. Las trocóforas se transformaron en velígeras, a las 45 h post fertilización, seguidas por las larvas D (longitud inicial 99 ± 6 µm), con velo ciliado, estómago bien definido y líneas de crecimiento concéntricas en la concha; las larvas umbonadas, a partir del día 15 post fertilización, desarrollaron manchas oculares y músculos aductores; las pedivelígeras (talla inicial 265 ± 2 µm) desarrollaron un órgano pedal y filamentos branquiales. Los estadios embrionario y larval fueron acelerados a mayores temperaturas. Las tasas de crecimiento larval a 20ºC (9,1 µm*día-1) fueron significativamente mayores que a 12 y 16ºC (6,7 µm*día-1 y 7,4 µm*día-1, respectivamente). Comparado con Mytilus chilensis, M. galloprovincialis presentó mejores de tasas de crecimiento a iguales temperaturas. Esto sugiere que, en Chile, se puede producir semillas de M. galloprovincialis en condiciones controladas, para su cultivo masivo Resumen en inglés The Mediterranean mussel (Mytilus galloprovincialis Lamarck, 1819) has been recently registered for the Chilean coast, from Concepcion (36ºS) to the Magellan Strait (54ºS). To determine the feasibility of the massive culture of M. galloprovincialis in Chile, a study of the temperature effects on the early development was carried out. Embryos and larvae were raised at 12, 16 and 20ºC in laboratory facilities at Coliumo Bay (36ºS), Chile, from where adults mussels were (mas) collected. Embryonic development followed the common sequence exhibited by other bivalves. Trocophores turned into veligers at 45 h post fertilization, followed by D-larvae (99 ± 6 µm length, initial size), with a large ciliated velum, a well-developed stomach and concentric growth lines in the shell; 15 days post-fertilization, umbonate larvae developed eye-spots and adductors muscles; pediveliger larvae (265 ± 2 µm initial length size) developed a pedal organ and gill filaments. Both embryonic and larval stages were accelerated at higher temperatures. The larval growth rates at 20ºC (9.1 µm*d-1) were significantly larger than at 12 and 16ºC (6.7 µm*d-1 and 7.4 µm*d-1, respectively). In comparison with Mytilus chilensis, M. galloprovincialis showed better growth rates at the same temperatures. This fact suggests that in Chile M. galloprovincialis seed can be produced under controlled conditions for its massive cultivation

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Efecto cardíaco del extracto de epitelio pigmentado de la retina (melanina), del globo ocular de embrión de pollo “in vivo” e “in vitro”

Álvarez, Marco A; Ercolino, José M
2009-12-01

Resumen en español La melanina y su participación en la génesis de ciertas patologías cardíacas, ha sido revisada recientemente. Sin embargo, la expresión funcional y celular del efecto sobre el corazón no ha sido claramente establecida. En el presente trabajo se hizo uso del extracto de epitelio pigmentado de la retina del globo ocular de embrión de pollo, contentivo de melanina, para estudiar "in vivo" el patrón de contracción del corazón y la frecuencia cardíaca por videocardi (mas) ograma, un método semi-invasivo en embriones de pollo de 3½-4½ días de incubación, e "in vitro", su efecto sobre el patrón mitocondrial de mioblastos cardíacos en cultivo primario de Gota pendiente, incubados con el fluorocromo catiónico, 3,3´-dimetiloxicabonocianida (DiOC1 [3]). El tratamiento promovió una disfunción de la contracción peristáltica del corazón embrionario, con un incremento en el llenado auricular y una reducción de llenado ventricular durante las diástoles. Se determinó una reducción significativa de frecuencia cardíaca del 18,73 %, luego de una hora de tratamiento. A diferencia de los controles, con un patrón homogéneo de fluorescencia verde emitido por las mitocondrias de forma alargada, la población de mioblastos tratados mostró un patrón de fluorescencia difusa, mitocondrias redondeadas y se observó la presencia de blebs a nivel de la superficie celular. Los resultados sugieren que el extracto de epitelio pigmentado de retina, contentivo de melanina, altera la contracción peristáltica e induce una reducción de la frecuencia cardíaca en modelo experimental de embrión de pollo, acompañada con un daño en las mitocondrias, probablemente vinculado a la activación de un proceso de muerte celular mediado por factores apoptoticos mitocondriales que podrían estar asociados a tales efectos. Resumen en inglés Melanin and its involvement in the genesis of certain cardiac diseases, has recently been revised. However, the expression of functional and cellular effects on the heart has not been clearly established. In this paper we made use of the extract of the retinal pigmented epithelium of the eyeball of the chick embryo, containing melanin, to study "in vivo" the pattern of contraction of the heart and the heart rate by Videocardiograma semi-invasive method in embryos of 3 ½ (mas) -4 ½ days of incubation, and in vitro, their effect on the pattern of mitochondrial using Hanging drop method, to primary culture of cardiac myoblasts, incubated with the cationic fluorochrome, 3,3-dimetiloxicabonocianida (DiOC1 [3]). The treatment promoted a malfunction of the peristaltic contraction of the embryonic heart, with an increase in atrial filling and reduced ventricular filling during diastole. We determined a significant reduction in heart rate of 18.73 %, after an hour of treatment. The population of myoblasts showed a diffuse pattern of fluorescence, mitochondria were rounded and the cytoplasm showed the presence of blebs at the surface unlike controls with a uniform pattern of green fluorescence emitted by the elongated shape of mitochondria. The results suggested that the extract of retinal pigmented epithelium, melanin containing, alters the peristaltic contraction and decrease the heart rate in experimental model of chick embryo, together with mitochondrial damage, probably linked to the activation of a process of cell death mediated by factors apoptotic mitochondria, which could be associated with such effects.

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Potencial de la organogénesis como estrategia para la masificación in vitro de Persea lingue en la zona centro-sur de Chile/ Potential of organogenesis as a strategy to the in vitro propagation of Persea lingue in the south-central region of Chile

Cob, José; Sabja, Ana M; Ríos, Darcy; Lara, Antonio; Donoso, Pablo J; Arias, Luis; Escobar, Bernardo
2010-01-01

Resumen en español Persea lingue (lingue) es una especie arbórea nativa de Chile apta para producir madera de alta calidad y belleza. El presente estudio evaluó el efecto de componentes hormonales suplementado con medios de cultivo sobre la capacidad morfogénica de Persea lingue y se analizó el proceso de regeneración in vitro mediante estudios histológicos. Se ensayó el medio de cultivo básico Murashige y Skoog (MS) complementado con diferentes concentraciones de ácido indol 3-but (mas) írico (AIB) y 6-bencilaminopurina (BAP), usando secciones apicales de microtallos obtenidos de embriones maduros germinados in vitro. Se utilizó un diseño en bloques completos aleatorizados con cinco repeticiones y arreglo factorial de tratamientos; la unidad experimental fue un recipiente de cultivo conteniendo un explante. Hubo efectos significativos (P = 0,001) del tratamiento sobre las variables respuesta número de yemas, número de brotes y elongación caulinar. La prueba de rangos múltiples de Duncan confirmó que los tratamientos que observaron diferencias significativas fueron 0,1 mg L-1 de AIB y 2,0 mg L-1 de BAP para la inducción de yemas por explante y 0,05 mg L-1 de AIB y 0,5 mg L-1 de BAP para la elongación caulinar. El análisis histológico demostró que la proliferación de células meristemáticas se inició a partir del tejido epidérmico y subepidérmico. Asimismo, corroboró el proceso de regeneración in vitro vía organogénesis directa. Estos resultados ratifican a la organogénesis como una potencial herramienta biotecnológica útil para rescatar, conservar y propagar masivamente a esta especie nativa Resumen en inglés Lingue (Persea lingue) is a native arboreal species of Chile, adequate for producing high quality wood and also recognized for its beauty. The effect of supplemented hormonal components in the culture medium of the Persea lingue were studied, morphogenetic capacity and the in vitro regeneration process via histological studies were analyzed. The Murashige and Skoog (MS) basic culture medium was used and complemented with different concentrations of indole 3-butyric acid ( (mas) IBA) and 6- Benzylaminopurine (BAP) using apical sections of microshoots obtained from in vitro germinated mature embryos. A complete random block design was applied with five repetitions and factorial arrangement of treatments, the experimental unit was a culture recipient containing one explant. The variance analysis showed statistically significant differences (P = 0.001) of the treatment factor on the above response, variable number of buds per explant and caulinary elongation. Regarding Duncan’s multiple range test, it was possible to confirm that the treatments with significant differences were 0.1 mg L-1 of IBA and 2.0 mg L-1 of BAP for the induction of buds per explant and 0.05 mg L-1 of IBA and 0.5 mg L-1 of BAP for caulinary elongation. The histological analyses revealed that the proliferation of meristematic cells was originated in the epidermic and subepidermic tissue. As well, the study confirmed in vitro regeneration process through direct organogenesis. These results ratify that organogenesis can be a potential biotechnological tool, useful for massive rescue, conservation, and propagation of native species under a critical status

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Alteraciones del desarrollo embrionario, poliaminas y estrés oxidativo inducidos por plaguicidas organofosforados en Rhinella Arenarum/ Alterations in embryonic development, polyamines and oxidative stress induced by organophosphates in Rhinella arenarum

Lascano, Cecilia Inés; Sotomayor, Verónica; Ferrari, Ana; Venturino, Andrés
2009-07-01

Resumen en español Los plaguicidas organofosforados (OP) son masivamente aplicados en el Alto Valle de Río Negro y Neuquén, afectando al ecosistema. Utilizamos un modelo embrionario de anfibios (Rhinella arenarum) para estudiar mecanismos por los cuales OP como metilazinfos (MA) y clorpirifos (CP) podrían provocar teratogénesis. Los embriones fueron desarrollados en diferentes concentraciones de MA o CP hasta opérculo completo (OC), analizando: malformaciones, histología, glutatión r (mas) educido (GSH) y enzimas antioxidantes, poliaminas, actividad de ornitina-decarboxilasa (ODC) y proteínaquinasa- C (PKC). Ambos OP provocaron un incremento tiempo/concentración-dependiente de malformaciones, llegando a 100% de teratogénesis en estadios avanzados y a las mayores concentraciones, incluyendo: exogastrulación, curvaturas de aleta caudal, acortamiento axial, edema, y atrofia branquial. Se evidenció una condición de estrés oxidativo creciente: las enzimas GSH-dependientes (S-transferasa (GST), peroxidasa y reductasa) fueron inducidas tempranamente a bajas concentraciones, pero inhibidas en el estadio de OC a altas concentraciones, junto con una caída significativa de GSH (62%) para MA. MA incrementó significativamente (18X) la actividad de ODC en OC, aumentando los niveles de putrescina (60%) pero disminuyendo espermidina (56%) y espermina (100%); CP disminuyó en estadios tempranos la actividad de ODC y niveles de poliaminas. La disminución de poliaminas podría deberse al incremento de degradación por poliamino-oxidasa, contribuyendo al estrés oxidativo inducido por OP. Esto causaría la disminución de GSH, y la activación de PKC en OC (55%), que participaría en el control positivo de GST y ODC. Finalmente, el estrés oxidativo y la disminución en los niveles de poliaminas podrían ser causantes de alteraciones del desarrollo embrionario. Resumen en inglés Organophosphate (OP) pesticides are widely applied in the region of Alto Valle de Río Negro y Neuquén, affecting the ecosystem. We use an amphibian embryonic model (Rhinella arenarum) in order to assess the mechanisms by which the OP pesticides azinphos methyl (AM) and chlorpyrifos (CP) could cause teratogenesis. The embryos were developed in different concentrations of AM or CP until they reached the stage of complete operculum (CO). We analyzed malformations, histolog (mas) y, reduced gluthatione content (GSH) and activity of antioxidant enzymes, polyamine content, ornithine decarboxilase (ODC) and protein kinase C (PKC) activities. Both OP pesticides caused a time- and dose-dependent increase in the number of malformations, reaching 100% teratogenesis in late embryonic development at the highest OP concentrations used. Malformations assessed include exogastrulation, caudal fin curvature, axial shortening, edema, and gill atrophy. Increasing evidence of oxidative stress was observed: GSH dependent enzymes (S- transferase, GST; peroxidase and reductase) were early induced in embryos exposed to low concentrations of the OP pesticides, but their activities were inhibited in the stage of CO at high concentrations of OP. These changes were accompanied by a significant decrease in GSH content (62%) in embryos exposed to AM. Besides, AM significantly increased (18X) ODC activity in the stage of CO, along with putrescine levels (60% of increase) but spermidine and spermine levels were significantly decreased (56% and 100%, respectively). The OP pesticide CP caused and early decrease in ODC activity and polyamine levels. The decrease in polyamine levels could be due to an increase in their degradation by polyamine oxidase, contributing to the oxidative stress induced by OP. This, in turn, would cause the decline in GSH levels and the activation of PKC in the embryonic stage of CO (55%), which is involved in the positive feedback of GST and ODC. Finally, the oxidative stress and the decrease in PA levels could be the cause of the observed embryonic alterations.

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Ética científica de la clonación humana/ Scientific ethics of human cloning

Valenzuela, Carlos Y
2005-01-01

Resumen en inglés True cloning is fission, budding or other types of asexual reproduction. In humans it occurs in monozygote twinning. This type of cloning is ethically and religiously good. Human cloning can be performed by twinning (TWClo) or nuclear transfer (NTClo). Both methods need a zygote or a nuclear transferred cell, obtained in vitro (IVTec). They are under the IVTec ethics. IVTecs use humans (zygotes, embryos) as drugs or things; increase the risk of malformations; increase dev (mas) elopment and size of abnormalities and may cause long-term changes. Cloning for preserving extinct (or almost extinct) animals or humans when sexual reproduction is not possible is ethically valid. The previous selection of a phenotype in human cloning violates some ethical principles. NTClo for reproductive or therapeutic purposes is dangerous since it increases the risk for nucleotide or chromosome mutations, de-programming or re-programming errors, aging or malignancy of the embryo cells thus obtained (Rev Méd Chile 2005; 133: 105-12)

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Zinc sulphate improved microspore embryogenesis in barley

Echavarri, Begoña; Soriano, Mercedes; Cistué Solá, Luis; Vallés Brau, María Pilar; Castillo Alonso, Ana María
2008-06-01

Digital.CSIC (Spain)

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Use of flavanol derivatnes for the cryopreservation of living cells.

Torres, Josep Lluís; Álvarez González, Juan Jesús; Lozano Pérez, Carles
2006-03-30

Digital.CSIC (Spain)

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UNIONES EN HENDIDURA Y SU PAPEL FUNCIONAL EN EL TRACTO REPRODUCTOR FEMENINO

Brañes O, María C.; Sáez R, Alejandra; Villalón B, Manuel J; Sáez C, Juan C
2004-01-01

Resumen en español En el aparato reproductor femenino se expresan diferentes conexinas (Cxs), proteínas que forman canales de uniones en hendidura (CUH) entre células en contacto, permitiendo la coordinación de respuestas metabólicas y/o eléctricas de grupos celulares. Los CUH jugarían un papel relevante en el desarrollo de las células de la granulosa, ya que permiten la comunicación heteróloga entre el ovocito y las células del cúmulo manteniendo la detención meiótica. En la t (mas) rompa de Falopio, los CUH coordinarían el batido ciliar del epitelio y la contracción muscular, facilitando el desplazamiento de los gametos y del embrión. En el útero, los CUH conectan a las células miometriales y también a las endometriales. El aumento de CUH durante el preparto permitiría la contracción uterina coordinada facilitando el trabajo de parto al término del embarazo. La expresión de las Cxs es regulada por hormonas, lo que explicaría el perfil de CUH presentes en los diversos tipos celulares del tracto genital en diferentes estadios fisiológicos del sistema reproductor Resumen en inglés Several connexins, protein subunits that constitute gap junction channels (GJC), are expressed in the female reproductive tract allowing coordination of metabolic and/or electrical responses. The GJC could play relevant roles in the development of granulosa cells, since they permit heterologous oocyte-cumulus cell communication maintaining the meiotic arrest. In the Fallopian tube, GJC would coordinate the epithelial ciliary beat and muscle contraction, favoring the trans (mas) port of gametes and embryos. In the uterus, GJC connect myometrial, as well as, endometrial cells. The increase in intercellular communication via GJC before labor would allow coordinated uterine contraction, favoring labor at term pregnancy. The expression of connexins is hormonally regulated and seems to explain the pattern of GJC expression in different cell types of the reproductive system at different physiological stages

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The progamic phase of an early-divergent angiosperm, Annona cherimola (Annonaceae)

Lora, Jorge; Hormaza, José Ignacio; Herrero Romero, María
2010-02-01

Digital.CSIC (Spain)

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The Snail Gene Family during Gastrulation

Morales, Aixa V.; Nieto, M. Ángela
2004-01-01

Digital.CSIC (Spain)

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The Influence of the Environment on Cajal--Retzius Cell Migration

Ceci, María Laura; López-Mascaraque, Laura; Carlos, Juan A. de
2010-01-01

Digital.CSIC (Spain)

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Somatic Embryogenesis in Chestnut. New Approaches

Ballester, Antonio; Corredoira, Elena; Viéitez, Francisco Javier; Viéiztez, Ana M.
2005-12-22

Digital.CSIC (Spain)

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Sobre las causas ontogénicas de la productividad diferencial de semillas en la especie anficárpica Trifolium polymorphum (Leguminosae)/ On the causes of the differential seed production in the anficarpic species Trifolium polymorphum (Leguminosae)

Speroni, Gabriela; Izaguirre, Primavera; Bernardello, Gabriel
2010-06-01

Resumen en español Trifolium polymorphum es una leguminosa de pradera con buena adaptación y persistencia en este tipo de vegetación. Combina diferentes estrategias reproductivas como la reproducción vegetativa por estolones y la reproducción por semillas producidas en dos tipos de frutos y flores, subterráneas y aéreas. Las subterráneas son cleistógamas y las aéreas son casmógamas. Empíricamente se ha detectado mayor formación de semillas en los frutos subterráneos que en los (mas) aéreos. En el presente trabajo se realizan estudios embriológicos y de desarrollo de semillas en ambos tipos de flores para dilucidar si existen causas ontogenéticas que determinan la productividad diferencial de semillas en ambos tipos de frutos. No se detectaron causas embriológicas pre-cigóticas que expliquen el menor número de semillas en los frutos de las flores aéreas. Ambos tipos de semillas comparten características ontogenéticas y presentan apropiado desarrollo de los óvulos, sacos embrionarios y establecimiento de vías nutricionales para saco embrionario, embrión y endosperma. En general las floraciones insumen un costo energético importante para las especies vegetales. La floración aérea de T. polymorphum, aunque sometida a una fuerte presión de herbivoría del ganado, incorpora variabilidad genética a sus poblaciones a través de la polinización cruzada y permite la dispersión a distancia. Resumen en inglés Trifolium polymorphum is recognized as one of the best adapted legume in field conditions. It combines different reproductive strategies such as stoloniferous vegetative reproduction and seed reproduction by two types of fruits produced in underground and aerial flowers. These last ones are chasmogamous and underground flowers are cleistogamous. A higher seed production has empirically been detected in underground flowers rather than in aerial ones. In the present work, e (mas) mbryological studies in aerial and underground flowers were carried out in order to determine the existence of ontogenetic causes which may promote productivity differences in both types of seeds. No embryological pre-zygotic cause explaining aerial flowers low productivity was detected. Aerial and underground seeds share ontogenetic characteristics as both types of flowers showed normal ovule and embryo sac development. Similar nutritional pathways for embryo sacs, embryos and endosperms were also observed. In general, flowering represents a high energetic inversion for plant species. Aerial flowering in T. polymorphum, though subjected to a strong herbivorous pressure, incorporates genetic variability to populations through cross-pollination and succeeds in facilitating long distance dispersion.

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Snail family members and cell survival in physiological and pathological cleft palates

Martínez-Álvarez, Concepción; Blanco Fernández de Valderrama, María José; Pérez, Raquel; Rabadán, M. Angeles; Aparicio, Marta; Resel, Eva; Martínez, Tamara; Nieto, M. Ángela
2004-01-01

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106

Sexual polyembryony in almond

Martínez-Gómez, Pedro; Gradziel, Thomas M.
2003-09-01

Digital.CSIC (Spain)

107

Selective activation of the developmentally regulated Ha hsp17.6 G1 promoter by heat stress transcription factors

Rojas, Anabel; Almoguera, Concepción; Carranco, Raúl; Klaus-Dieter, Scharf; Jordano, Juan
2002-06-14

Digital.CSIC (Spain)

108

Selective Activation of the Developmentally Regulated Ha hsp17.6 G1 Promoter by Heat Stress Transcription Factors

Rojas, A.; Almoguera, C.; Carranco, R.; Klaus-Dieter, Schaf; Jordano, Juan

Using two well-characterized heat stress transcription factors (Hsfs) from tomato (Lycopersicon peruvianum; LpHsfA1 and LpHsfA2), we analyzed the transcriptional activation of the Ha hsp17.6 G1 promoter in sunflower (Helianthus annuus) embryos. In this system, we observed transient promoter activati...

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110

Rescue of multiple embryos in almond through in vivo micrografts

Martínez-Gómez, Pedro; Sánchez-Pérez, Raquel; Dicenta, Federico; Gradziel, Thomas M.
2004-01-01

Digital.CSIC (Spain)

117

Presencia de neonatos y juveniles del tiburón martillo Sphyrna lewini (Griffith & Smith, 1834) y del tiburón sedoso Carcharhinus falciformis (Müller & Henle, 1839) en la costa de Oaxaca, México/ Presence of neonates and juvenile scalloped hammerhead sharks Sphyrna lewini (Griffith & Smith, 1834) and silky sharks Carcharhinus falciformis (Müller & Henle, 1839) in the Oaxaca coast, Mexico

Alejo-Plata, Carmen; Gómez-Márquez, José L; Ramos, Samuel; Herrera, Eduardo
2007-12-01

Resumen en inglés The Oaxaca coast in Mexico has a narrow continental shelf and it reaches depths greater than 500 meters near the coast; furthermore it consists of bays and sheltered areas, where high food availability is found. Each week, from March 2001 to December 2005, the unloading areas of artisanal fisheries between the bays of Huatulco and Puerto Escondido in the Oaxaca coast were visited. Data on fishing gear and zones, as well as the species composition of the captures were take (mas) n. In the zone, three fishery units operated: shark, pelagic and demersal. All three capture sharks in a direct or incidental way. At the studied region, 419 organisms of S. lewini were registered; from August to September newborn individuals (43.9%, 44 to 64 cm of total length), young of the year (9.3% 65-75 cm Tl) and juveniles (30.3%, 75 to 168 cm Tl) were observed; pregnant females were registered in March, May and June with a fecundity ranging from 18 to 24 embryos (35 to 45 cm Tl). With respect to C. falciformis, 1314 individuals were registered. Newborns (4.7%, 65-71 cm Tl) and young of the year (3.8%, 72 to 80 cm Tl) were observed from January to September; juveniles (65.4%, 80 to 170 cm Tl) were captured throughout the year; from January to November, 52 pregnant females were observed with embryos at different developmental stages. The presence of newborns, young of the year and pregnant females with embryos in advanced development condition, suggest that the coastal waters near the shoreline of the Oaxaca coast are a spawning and nursery area for these shark species

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118

Potencial de la transferencia embrionaria para la conservación del caballo de raza hispano-árabe Potential of embryos transfer as a tool for the conservation of the spanish-arab horse breed

Pérez-Marín, C.C.; Delgado-Bermejo, J.V.; Cabello, A.; Henríquez, O.; Vallecillo, A.

The Spanish-Arab horse breed is registred in the Spanish catalogue of breeds as an endangered breed into the special protection category. A strategy of conservation basedon the embryos transferring is presented here with the intention of the use so this tool to utilize male and female genetic potent...

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120

PRESENCIA DE UROTRYGON MICROPHTHALMUM (ELASMOBRANCHII: UROLOPHIDAE) EN AGUAS BAJAS DE MARANHÃO (BRASIL) Y NOTAS SOBRE SU BIOLOGIA/ REPORT OF UROTRIGON MICROPHTHALMUM (ELASBRANCHII: UROLOPHIDAE) FFROM MARANHÃO (BRASIL)`S SHALLOW WATERS AND NOTES ABOUT ITS BIOLOGY

Almeida, Zafira S.; Nunes, Jorge S.; Costa, Clarissa L.
2000-12-01

Resumen en inglés From October 1997 to April, 1998 seventy-nine specimens of the ray Urotrygon microphthalmum were captured, all of them showing sexual dimorphism. They were processed in order to study their morphometrics, feeding habits, and reproduction. The largest was 300 mm in total length and the smallest one 64.4 mm, weighing 103.4 g and 12.5 g respectively. They fed mainly on crustaceans and ploychaeta; of the stomach contents 94.5 % were shrimp and 5.49% polychaeta. 7.6% of the to (mas) tal had empty stomachs. As far as reproduction, three sexual stages were found: 51% juvenile, 30% adult and 19% pregnant, with an average of three embryos per uterus. Among the male fishes analysed 84.4% were juvenile and 16.6% adults.

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123

Neurotrophin-3 antibodies disrupt the normal development of the chick retina

Bovolenta, Paola; Frade López, José María; Martí, Elisa; Rodríguez Peña, Ángeles; Barde, Yves Alain; Rodríguez-Tébar, Alfredo
1996-07-15

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124

Neural Induction in Whole Chick Embryo Cultures by FGF

Álvarez, Ignacio S.; Araujo, María; Nieto, M. Ángela
1998-07-01

Digital.CSIC (Spain)

125

Multicellular structures developing during maize microspore culture express endosperm and embryo-specific genes and show different embryogenic potentialities

Massonneau, Agnès; Coronado, María José; Audran, Arthur; Bagniewska, Agnieszka; Mòl, Rafal; Sánchez-Testillano, Pilar; Goralski, Grzegorz; Dumas, Christian; Risueño, María del Carmen; Matthys-Rochon, Elisabeth
2005-05-13

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126

Molecular characterization of multiple embryos in almond using Simple Sequence Repeats (SSR) markers

Sánchez-Pérez, Raquel; Dicenta, Federico; Gradziel, Thomas M.; Martínez-Gómez, Pedro
2002-12-01

Digital.CSIC (Spain)

129

Influencia del ClNa sobre la ultraestructura del corion de Dacus oleae Gmel.

Robles-Chillida, E.M.; Muñiz, M.; Blanco-Marco, E.
1970-01-01

Digital.CSIC (Spain)

132

Independent regulation of initiation and maintenance phases of Hoxa3 expression in the vertebrate hindbrain involve auto- and cross-regulatory mechanisms

Manzanares, Miguel; Bel-Vialar, Sophie; Ariza McNaughton, Linda; Ferretti, Elisabetta; Marshall, Heather; Maconochie, Mark M.; Blasi, Francesco; Krumlauf, Robb
2001-09-01

Digital.CSIC (Spain)

133

In Vitro Culture of ‘Myrobalan’ (Prunus cerasifera Ehrh.) Embryos

Arbeloa Matute, Arancha; Daorden, María Elena; García Martín, Elena; Andreu Puyal, Pilar; Marín Velázquez, Juan Antonio
2009-10-01

Digital.CSIC (Spain)

134

In Situ Hybridization Analysis of Chick Embryos in Whole-Mount and Tissue Sections

Acloque, Hervé; Wilkinson, David G.; Nieto, M. Ángela
2008-01-01

Digital.CSIC (Spain)

135
136

Improving genetic transformation of European chestnut and cryopreservation of transgenic lines

Corredoira, Elena; San José, M.ª Carmen; Viéiztez, Ana M.; Ballester, Antonio
2007-12-01

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137

Hermafroditismo en camarones: El sistema sexual y su relación con atributos socioecológicos

Bauer, Raymond T
2001-10-01

Resumen en portugués Uma pergunta importante na ecologia da reprodução é: por quê há sexos separados em algumas espécies mas hermafroditismo em outras? Este artigo está enfocado em um sistema sexual recentemente descrito, hermafroditismo simultâneo protândrico (HSP), em camarões "limpadores" do gênero Lysmata. Neste sistema, os indivíduos maduram primeiro em uma fase masculina (FM) mas, mais tarde mudam a uma fase feminina (FF). Ainda que os indivíduos FF produzem embriões como (mas) se fossem fêmeas, também retêm os dutos masculinos e produzem esperma. Os FF são hermafroditas simultâneos que podem copular como machos e fertilizar outros FF mas não podem auto-fertilizar-se. É possível que o tamanho (idade) de mudança de FM a FF seja dependente da abundância relativa dos FM e FF na população (determinação ambiental de sexo). Dada a ampla variação dos atributos socio-ecológicos entre espécies de Lysmata, é difícil propor uma só força seletiva que possa explicar a evolução de HSP. Propõe-se uma hipótese baseada na história evolutiva de Lysmata. É sugerido que o HSP não ocorre em outros grupos de carídeos porque a Lysmata evoluiu sob circunstâncias únicas ("contingência histórica"). Para entender este raro sistema sexual, há que estudar em detalhe a ecologia, etiologia e filogenia de Lysmata. Resumen en español Una pregunta importante en la ecología de reproducción es ¿por qué hay sexos separados en algunas especies pero hermafroditismo en otras? Este artículo está enfocado en un sistema sexual recientemente descrito, hermafroditismo simultáneo protándrico (HSP), en camarones "limpiadores" del género Lysmata. En este sistema, los individuos maduran primero en una fase masculina (FM) pero más tarde cambian a una fase femenina (FF). Aunque los individuos FF producen embr (mas) iones como si fueran hembras, también retienen los ductos masculinos y producen esperma. Los FF son hermafroditas simultáneos que pueden copular como machos y fertilizar otros FF pero no pueden autofertilizarse. Es posible que el tamaño (edad) de cambio de FM a FF sea dependiente de la abundancia relativa de los FM y FF en la población (determinación ambiental de sexo). Dada la amplia variación de los atributos socioecológicos entre especies de Lysmata, es difícil proponer una sola fuerza selectiva que pueda explicar la evolución de HSP. Se propone una hipótesis basada en la historia evolutiva de Lysmata. Se sugiere que el HSP no ocurre en otros grupos de carideos porque evolucionó bajo circunstancias únicas a Lysmata ("contingencia histórica"). Para entender este raro sistema sexual, hay que estudiar en detalle la ecología, etología y filogenia de Lysmata. Resumen en inglés An important question in reproductive ecology is: why are there separate sexes in some species but hermaphroditism in others? The focus of this paper is on a recently-described sexual system, protandric simultaneous hermaphroditism (PSH), in cleaner shrimps of the genus Lysmata. An individual first matures in a male phase (MP) but later changes to a female phase (FP). Although an FP produces embryos like a female, it also retains the male ducts and produces sperm. The FPs (mas) are simultaneous hermaphrodites that can copulate like males and fertilize other FP’s but they cannot self-fertilize. It is possible that the size (age) of change from MP to FP is dependent on the relative abundance of MPs and FPs in the population (environmental sex determination). Given the variation in socioecological attributes in Lysmata, it is difficult to propose a single selective pressure that explains the evolution of PSH. A hypothesis is proposed based on evolutionary history. It is suggested that PSH does not occur in other caridean groups because it evolved under unique circumstances in Lysmata ("historical contingency"). In order to understand this rare sexual system, it will be necessary to study in detail the ecology, behavior and phylogeny of Lysmata.

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138

Glucocorticoid receptor is required for skin barrier competence

Bayo, Pilar; Sanchís, Ana; Bravo, Ana; Cascallana, José Luis; Buder, Katrin; Tuckermann, Jan; Schütz, Günther; Pérez, Paloma
2007-11-26

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139

Gene expression in developing zea mays embryos: regulation by Abscisic acid of a highly phosphorylated 23- to 25-kD group of proteins

Goday, Adela; Sánchez-Martínez, Demetrio; Gómez, Jordi; Puigdomènech, Pere; Pagès, Montserrat
1988-11-01

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141

Fluid dynamics of establishing left-right patterning in development

Cartwright, Julyan H. E.; Piro, Nicolás; Piro, Oreste; Tuval, Idan
2008-06-10

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142

Eye development in southern calamary, Sepioteuthis australis, embryos and hachlings

Bozzano, Anna; Pankhurst, Patricia M.; Moltschaniwskyj, Natalie A.; Villanueva, Roger
2009-03-29

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144

Expression of the G protein-coupled receptor kinase 2 during early mouse embryogenesis

Sefton, Mark; Blanco Fernández de Valderrama, María José; Penela Márquez, Petronila; Mayor Menéndez, Federico; Nieto, M. Ángela
2000-11-01

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145

Evolutionary genomics of the recently duplicated amphioxus Hairy genes

Jiménez-Delgado, Senda; Crespo, Miguel; Permanyer, Jon; Garcia-Fernàndez, Jordi; Manzanares, Miguel
2006-01-01

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146

Establishment of cryopreserved gene banks of European chestnut and cork oak 

Vidal, Nieves; Viéiztez, Ana M.; Fernández, Rosario M.; Cuenca, Beatriz; Ballester, Antonio
2010-01-01

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148

Encoded microparticles

Santaló, Josep; Barrios, LLeonard; Ibañez, Elena; Nogués Sanmiquel, María del Carmen; Esteve i Tintó, Jaume; Plaza Plaza, José Antonio
2010-10-10

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151

El riesgo de malformaciones congénitas y defectos de la programación genómica, en relación con las técnicas de reproducción asistida y la clonación/ The risk of congenital malformations and genomic imprinting defects in assisted reproductive technologies and nuclear transfer cloning

Valenzuela, Carlos Y
2005-09-01

Resumen en inglés Recent studies show that assisted reproductive technologies (ART), whether in vitro fertilization (IVF) or intra-cytoplasmatic sperm injection (ICSI) or applied to cloning by somatic cell nuclear transfer (SCNT) are associated to a higher risk of congenital malformations and errors in deprogramming, maintenance or reprogramming genomic imprinting in humans and animals. IVF and ICSI are also associated to an increased admission to neonatal intensive care units and more nee (mas) d for health care resources in infancy. A mutagenic effect of a chemical used in SCNT has been reported and gene depression was found in bovine embryos obtained by IVF or SCNT. The causes of these anomalies could be pathological conditions for which ART is applied, a direct effect of technologies on the zygotes or embryos, avoidance for zygotes or embryos of the oviduct path that is needed to elicit necessary immunity or genomic programming processes, or adaptive selective steps acquired during thousands of millions of generations in evolution. The knowledge of evolution is emphasized as essential in the scientific ethical analysis (Rev Méd Chile 2005; 133: 1075-80)

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152
153

Efectos mnemónicos maternos prenatales sobre el sexo psíquico humano. Insuficiencia del mecanismo inmunitario: Nueva propuesta desde la tolerancia-rechazo materno-fetal/ Prenatal maternal mnemonic effects on the human neuro-psychic sex: A new proposition from fetus-maternal tolerance-rejection

Valenzuela, Carlos Y
2008-12-01

Resumen en inglés In approximately 15% of homosexual men, their phenotype is associated to the fraternal birth order. Older biological brothers induce in their mothers anti-male factors (antibodies) that interfere the brain maleness development ofyounger fetuses. This effect is seldom seen in non-right-handed men and is not seen in women. The influence of older siblings is seen in their sex ratio (SR). In contradiction with previous hypothesis, significant heterogeneities of SR have been f (mas) ound among older siblings of males or females, right or non-right-handed and homo or heterosexual individuáis. This can only be understood as if the ñndings found among homosexuals were part of a general mechanism of fetus-maternal tolerance-rejection processes of placental mammals. We found, in relation to ABO and Rh systems and sex, that embryos with genes different from those of their mothers, induced better pregnancies and maternal tolerance than embryos similar to their mothers. Assuming that homo or heterosexuality and right or non-right-handedness behave similar to ABO or Rh alíeles, the author provides a speculative interpretation ofthese results. Homosexual women (¡esbians) and especially if they are non-right-handed, are preceded by siblings with a high SR (maternal environment with anti-female or pro-male factors); then lesbianism or non-right-handedness may induce tolerance to be a woman in such anti-female environment. Non-right-handedness could induce tolerance for anti-male factors of mothers, thus preventing the production ofgays in a pro-male maternal environment, but leading to the production of non-right-handed gays in anti-male maternal environments. Several new hypotheses and interpretations merge from this newproposition. Also, complete sexual orientation could be acquired after birth

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154

Efectividad de los tratamientos del hidrosálpinx en pacientes que deben recurrir a técnicas de reproducción asistida/ The effectiveness of hydrosalpinx treatment on patients needing assisted reproductive techniques

Saavedra-Saavedra, Jaime
2009-06-01

Resumen en español Introducción: las teorías detrás de los mecanismos que explican los malos resultados de la fertilización in vitro (FIV) en pacientes con hidrosálpinx se han enfocado en la toxicidad del fluido del hidrosálpinx, el daño en la receptividad endometrial y el obstáculo mecánico a la implantación por la posible interfase que puede producir el fluido en la superficie endometrial. Objetivo: evaluar las diferentes opciones de tratamiento que eliminan el fluido del hidros (mas) álpinxantes de realizar una fertilización in vitro (FIV). Metodología: se realizó una selección y evaluación de la literatura relacionada con el tema, obtenida de las bases de datos de MEDLINE y EMBASE de enero de 1997 a septiembre de 2007. Los artículos fueron evaluados con relación a su objetivo, su metodología, tipo de estudio y tipo de revisiones. Resultados: la salpingectomía previa a la fertilización in vitro (FIV) es el único método que ha probado ser efectivo en restaurar las tasas de nacimientos en pacientes con hidrosálpinx. La ligadura proximal de la tuba uterina también puede ser efectiva, de acuerdo con un estudio controlado aleatorizado. Por el contrario, otros tratamientos sugeridos, como el drenaje transvaginal del hidrosálpinx, no ofrecen ningún beneficio. Además, el mecanismo fundamental que explique las bajas tasas de implantación y mal desarrollo embrionario aún no está definido. Conclusión: la salpingectomía laparoscópica pre-FIV se recomienda en pacientes con hidrosálpinx visible al examen ecográfico. Otros tratamientos sugeridos necesitan ser evaluados en estudios controlados aleatorizados. Resumen en inglés Introduction: it is well-known that the success of assisted-reproduction techniques (such as in vitro fertilisation - IVF) used on patients having tubaric pathology, specifically in cases of hydrosalpinx, become reduced by half when compared to patients without hydrosalpinx. Theories behind the mechanisms explaining the poor results have focused on the hydrosalpingueal fluid's toxic effect on embryos, damage in endometrial receptivity and the mechanical obstacle to im (mas) plantation by the possible interface which could be produced by fluid on the endometrial surface. Objective: this review is aimed at evaluating the different options for treatment which can eliminate hydrosalpingueal fluid before in vitro fertilization is performed. Methodology: the literature related to the subject was selected and evaluated; data was obtained from MEDLINE and EMBASE databases between January 1997 and September 2007. The articles on the reference list were selected as the source for this review; they were evaluated regarding their objectives, methodology, type of study and type of review. Results: salpingectomy prior to invitro fertilization (IVF) was the only method proved to be effective in restoring birth-rateinpatientswithhydrosalpinx. Proximal ligation of the fallopian tube was also effective according to a randomised controlled study. Other treatments suggested treatments such as trans-vaginal drainage of hydrosalpinx did not offer any benefits. The fundamental mechanisms explaining the low implantation rates and poor embryo development have not yet been defined. Conclusion: pre-IVF laparoscopic salpinguectomy is recommended in patients having visible hydrosalpinx during ecographic examination. Other treatments which have been suggested must be evaluated in randomised controlled studies.

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155

Ectopic expression of Cvh (Chicken Vasa homologue) mediates the reprogramming of chicken embryonic stem cells to a germ cell fate

Lavial, Fabrice; Acloque, Hervé; Bachelard, Élodie; Nieto, M. Ángela; Samarut, Jacques; Pain, Bertrand
2009-03-24

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156

Early telencephalic migration topographically converging in the olfactory cortex

García-Moreno, Fernando; López-Mascaraque, Laura; Carlos, Juan A. de
2008-06-01

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157

Early markers of in vitro microspore reprogramming to embryogenesis in olive (Olea europaea L.)

Solís, María Teresa; Pintos, Beatriz; Prado, María Jesús; Bueno, María Ángeles; Raska, Ivan; Risueño, María del Carmen

9 pages, 6 figures.-- Printed version published Jun 2008. | Microspore embryogenesis to form haploid and double-haploid embryos and regenerated plants is an efficient method of producing homozygous lines for crop breeding. In trees, the process is of special interest since classical methods are impr...

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161

Desarrollo de un antígeno para diagnóstico del parvovirus de las ratas (virus Kilham) por la técnica de inhibición de la hemaglutinación/ Development of an antigen for the diagnosis of Kilham rat parvovirus by hemagglutination inhibition test

Ayala, M.A.; Laborde, J.; Milocco, S.; Carbone, C.; Cid de la Paz, V.; Galosi, C.M.
2004-03-01

Resumen en español Se desarrolló un antígeno (Ag) para el diagnóstico de la infección por parvovirus Kilham de las ratas (KRV) por la técnica de inhibición de la hemaglutinación (IHA). Para su elaboración se utilizaron cultivos primarios de fetos de ratas, infectados con KRV, los que fueron cosechados a diferentes tiempos posinfección, centrifugados y cada sedimento celular resuspendido en un volumen 100 veces menor al original. Cada muestra fue posteriomente sonicada, centrifugada (mas) y el sobrenadante (Ag) fue titulado por hemaglutinación (HA). El Ag elaborado a partir de células al 5to día posinfección ofreció el mejor título hemaglutinante. La especificidad del mismo fue confirmada por IHA con sueros específicos de referencia positivo y negativo a KRV y positivos a otros agentes infecciosos virales y bacterianos. Se analizaron 98 sueros por IHA y los resultados coincidieron con los obtenidos por un laboratorio de referencia. El Ag producido resultó específico, sensible, de fácil elaboración y de gran utilidad para el control de las colonias de ratas de producción y experimentación del país. Resumen en inglés An antigen of rat parvovirus (Kilham virus) was developed for the diagnosis of viral infection in rat colonies by using hemagglutination inhibition (HAI) test. Primary cell cultures from rat embryos were infected with Kilham rat virus. Infected cells obtained at different time post infection were scraped, centrifuged, concentrated one hundred times, sonicated and centrifuged again. The supernatants obtained were titrated by hemagglutination. The specificity was confirmed (mas) with positive and negative reference sera. Ninety eight serum samples were studied by using HAI test. The results coincided with those obtained in a reference laboratory. Kilham rat parvovirus antigen obtained from 5 days-infected-cells was specific, sensitive, easy to prepare, with a high yield and it is useful to detect this virus in experimental and production rat colonies.

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163

Comparative radiosensitivity of Medfly cells and embryos.

Cavalloro, R.; Muñiz, M.; Pozzi, G.

This research is dealing with the effect of 6O Co gamma radiation on cultured "In vitro" cells and on embryos at different developmental stages, of Ceratitis capitata Wiedemann. The parameters ana1yzed for both the cells and the embryos were growrh, survival and mortality rates. The immediate and la...

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164
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Characterization of twin embryos in almond

Martínez-Gómez, Pedro; Arulsekar, S.; Gradziel, Thomas M.
2002-01-01

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167

Avances en la patogénesis de la embriopatía diabética/ Recent advances in the pathogenesis of diabetic embryopathy

García G, Damarys; García D, Ricardo
2009-12-01

Resumen en inglés The congenital malformations in the off spring of diabetic mothers are the result of a multifactorial process. Susceptibility to the effects of maternal diabetes in the pathogenesis of these anomalies is influenced by the genetic background, indicating that there are polymorphic genes that modify the cellular response to hyperglycemia. The modifier genes for the teratogenic effect of maternal diabetes are yet unknown. An excessive glucose supply to embryonic tissues leads (mas) to a state of oxidative stress, which affects the expression of genes encoding scavenging enzymes such as super oxide dismutase (SOD) and catastases and activates development genes such as PAX3, involved in neural tube defects. Cell proliferation and cell death are important mechanisms underlying malformations in infants born to diabetic mothers. There is an increase of apoptotic Bax and caspase-3 proteins and a low expression of Bcl-Z ant apoptotic protein in embryos exposed to a diabetic environment. Hyperglycemia decreases intracellular levels of reduced GSH, prostaglandin EZ (PGEZ) and DNA synthesis in embryo's tissues. Understanding the molecular pathogenesis of diabetic embryopathy will allow the use of effective therapies for the prevention of teratogenic effects in diabetic mothers

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168

Adaptive plasticity of killifish (Fundulus heteroclitus) embryos: dehydration stimulated

Tingaud-Sequeira, Angèle; Zapater, Cinta; Chauvigné, François; Otero, David; Cerdà, Joan
2009-04-01

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169

Accumulation of cell wall hydroxyproline-rich glycoprotein mRNA is an early event in maize embryo cell differentiation

Ruiz Ávila, Luis; Burgess, Shirley R.; Stiefel, Virginia; Ludevid, M. Dolors; Puigdomènech, Pere
1992-03-01

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170

Aborción de óvulos y semillas de caraota (phaseolus vulgaris l.) Y caracterización de anormalidades morfoanatómicas, en dos cultivares en dos localidades de Venezuela/ Ovule and seed abortion, and characterization of morphoanatomical abnormalities, in two black bean (phaseolus vulgaris l.) Cultivars from two localities in Venezuela/ Aborto de óvulos e sementes de feijão (phaseolus vulgaris l.) E caracterização de anormalidades morfoanatômicas, em dois cultivares em duas localidades de Venezuela

Madriz, Petra; Jáuregui, Damelis; Warnock, Rosemary
2008-12-01

Resumen en portugués Com a finalidade de determinar a proporção de óvulos e sementes abortadas, e caracterizar as anormalidades morfoanatômicas presentes nessas estruturas do feijão (Phaseolus vulgaris L.), plantaram-se os cultivares Tacarigua e Colombiana nas localidades de Sanare, estado Lara, e Montalbán, estado Carabobo, Venezuela, após a temporada de chuvas, entre set 2003 e janeiro 2004, e em época seca, jan-abr 2004, respectivamente. Tomaram-se flores e frutos localizados entre (mas) o quarto e sexto nó do caule principal, de 10 plantas mostradas aleatoriamente. Fixaram-se em formaldehido-ácido acético-etanol 70% (FAA) para seu processamento e obtenção de lâminas permanentes e semi-permanentes. Avaliou-se o número de óvulos/flor. Nas vagens se quantificou o número de óvulos abortados, de sementes totais, normais, enrugadas e não desenvolvidas (abortadas). As sementes normais e enrugadas foram separadas em cobertura seminal e embrião para observações sob o microscópio. Encontrou-se maior número de óvulos em cv Tacarigua e localidade Montalbán, enquanto que o número de sementes também foi maior em cv Tacarigua, mas em Sanare. O número de óvulos abortados foi maior ao de sementes não desenvolvidas. Estas últimas não apresentaram embrião ou este era deforme. Em sementes enrugadas as células de Malpighi, da cobertura seminal, apresentaram variação no comprimento e as células parenquimáticas adjacentes mostraram colapso e afundamentos na superfície. O comprimento do eixo embrionário parecera ser um caráter genético, pois se mantêm sem diferenças ante as condições climáticas das localidades. Resumen en español Con la finalidad de determinar la proporción de óvulos y semillas abortadas, y caracterizar las anormalidades morfoanatómicas presentes en esas estructuras de la caraota (Phaseolus vulgaris L.), se sembraron los cultivares Tacarigua y Colombiana en las localidades de Sanare, estado Lara, y Montalbán, estado Carabobo, Venezuela, a salidas de lluvias, entre set 2003 y ene 2004, y en época seca, ene-abr 2004, respectivamente. Se tomaron flores y frutos ubicados entre el (mas) cuarto y sexto nudo del tallo principal, de 10 plantas muestreadas al azar. Se fijaron en formaldehido-ácido acético-etanol 70% (FAA) para su procesamiento y obtención de láminas permanentes y semipermanentes. Se evaluó el número de óvulos/flor. En las vainas se cuantificó el número de óvulos abortados, de semillas totales, normales, arrugadas y no desarrolladas (abortadas). Las semillas normales y arrugadas fueron separadas en cubierta seminal y embrión para observaciones bajo el microscopio. Se encontró mayor número de óvulos en cv Tacarigua y localidad Montalbán, mientras que el número de semillas también fue mayor en cv Tacarigua, pero en Sanare. El número de óvulos abortados fue mayor al de semillas no desarrolladas. Estas últimas no presentaron embrión o éste era deforme. En semillas arrugadas las células de Malpighi, de la cubierta seminal, presentaron variación en longitud y las células parenquimáticas adyacentes mostraron colapso y hundimientos en la superficie. La longitud del eje embrionario pareciera ser un carácter genético, pues se mantiene sin diferencias ante las condiciones climáticas de las localidades. Resumen en inglés In order to establish the proportion of aborted black bean ovules and seeds, and to determine and characterize abnormalities in those structures, cultivars Tacarigua and Colombiana were sowed in the localities of Sanare, Lara state and Montalbán, Carabobo state, Venezuela, at the end of the rainy season (Sep 2003 to Jan 2004) and during the dry season (Jan-Apr 2004), respectively. Flowers and fruits were sampled from nodes 4 to 6 of ten plants at random. They were fixed (mas) in formaldehyde-acetic acid-ethanol 70% (FAA) and processed for permanent and semi-permanent slides. The number of ovules/flower was evaluated. In pods, the numbers of total, normal, rough and non-developed seeds (aborted seeds) as well as empty spaces (aborted ovules) were quantified. Normal and rough seeds were separated into seminal cover and embryo for observation under the microscope. The highest number of ovules was found in cv Tacarigua and in the locality of Montalban, but the number of seeds was higher in Sanare than in Montalban. The number of aborted ovules was higher than the number of non-developed seeds, which might be related to prefertilization abortion. Non-developed seeds did not present embryos or the latter were deformed. In the rough seed coat, Malpighi cells presented variations in length and the parenquimatic cells showed collapse that caused sinking of the surface. The length of the embryo axis appears to be a genetic trait as it remains unchanged with the different local climatic conditions.

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173

A seed-specific heat-shock transcription factor involved in developmental regulation during embryogenesis in sunflower.

Almoguera, Concepción; Rojas, A.; Díaz-Martín, J.; Prieto-Dapena, P.; Jordano, Juan
2002-11-15

Digital.CSIC (Spain)

174

A maize embryo-specific gene encodes a proline-rich and hydrophobic protein

José Estanyol, Matilde; Ruiz Ávila, Luis; Puigdomènech, Pere
1992-04-01

Digital.CSIC (Spain)

175

A Conserved Motif in Goosecoid Mediates Groucho-Dependent Repression in Drosophila Embryos

Jiménez, Gerardo; Verrijzer, C. Peter; Ish-Horowicz, David
1999-03-01

Digital.CSIC (Spain)