Sample records for CLONACION (cloning)
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Sobre la reproducción de personas: La ética y la tecnología de la clonación

Ferré, Frederick
2005-05-01

Resumen en español Este artículo examina especialmente los problemas éticos que plantea la clonación de seres humanos desde la perspectiva del organicismo personalista -posición filosófica inspirada en la obra de Alfred North Whitehead. En primer lugar, bosqueja el escenario que hace de la tecnología de la clonación humana una posibilidad tecnológicamente realizable y describe las reacciones que despierta. En segundo lugar, analiza diferentes modelos para pensar a los clones humanos (mas) . En particular, discute los presupuestos metafísicos que subyacen tanto a la atribución así como a la negación del estatuto de persona humana a los clones humanos. Finalmente, presenta la perspectiva filosófica del organicismo personalista y argumenta por qué razones tenemos que tratar a los clones humanos como personas completas. Resumen en inglés This article specially examines ethical problems settled by cloning human beings from the perspective of personalistic organicism -a philosophical position inspired by Alfred North Whitehead's work. Firstly, it sketches out the scene within which human cloning is a realizable technological possibility, and describes the reactions that it prompts. Secondly, it analyses different models under which to think of human clones. Particularly, it discusses metaphysical presupposi (mas) tions that underlie both attribution as well as denial of personhood to human clones. Finally, it presents the philosophical perspective of personalistic organicism, and argues in favour of different reasons that we do have to treat human clones as complete person.

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Avances de clonación in vitro de árboles adultos de raulí (Nothofagus alpina Poepp. et Endl.) Oerst.) para propagación comercial/ In vitro cloning advances of adult trees of rauli (Nothofagus alpina Poepp. et Endl.) Oerst) trees for commercial propagation

Sabja, Ana M.; Ortiz, Oriana; Triviño, Claudia
2008-08-01

Resumen en español Raulí, Nothofagus alpina (= N. nervosa) es una especie nativa con potencial comercial en Chile. En el presente trabajo se describe el procedimiento para establecer in vitro fenotipos adultos de raulí de dos orígenes: terreno e injerto cultivados in vitro por periodos de varios años y producir plantas de tamaño y forma adecuada para usar a escala comercial. Se discuten los resultados obtenidos en la fase de enraizamiento, donde esta especie mantenida en cultivo in vit (mas) ro en concentración constante de BAP (0.125 mg L-1) se propaga sin declinar el potencial de enraizamiento después de varios años de subcultivos sucesivos en laboratorio. Para evaluar el potencial rizogénico en el tiempo se aplicaron dos tratamientos: enraizamiento de brotes después de un año del inicio del establecimiento in vitro y cuatro años después de subcultivos sucesivos. No hubo diferencias significativas en los porcentajes de enraizamiento entre ambos tratamientos y orígenes. La posibilidad de mantener el potencial rizogénico de una especie cultivada in vitro por períodos prolongados es una ventaja para implementar un programa de producción clonal de plantas a gran escala mediante técnicas de micropropagación. Resumen en inglés Rauli, Nothofagus alpina (= N. nervosa) is a species native to Chile with commercial potential. This study describes the procedure for in vitro establishment of adult phenotypes of rauli from two sources, field and graft, cultivated in vitro for periods of several years to produce plants of adequate size and form for commercial scale use. We discuss the results obtained in the rooting phase. The species kept in in vitro culture with constant concentration of BAP (0.125 mg (mas) L-1) propagates with no decline in rooting potential after several years of successive subcultures in the laboratory. To evaluate rhizogenic potential over time, two treatments were tested: shoot rooting one year after establishment in vitro and four years of successive subcultures. No significant differences in percentages of rooting were found for treatments or sources. The possibility of maintaining rhizogenic potential of a species cultivated in vitro for prolonged periods is an advantage in implementing a program of large-scale production of clones using micropropagation techniques.

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Ética científica de la clonación humana/ Scientific ethics of human cloning

Valenzuela, Carlos Y
2005-01-01

Resumen en inglés True cloning is fission, budding or other types of asexual reproduction. In humans it occurs in monozygote twinning. This type of cloning is ethically and religiously good. Human cloning can be performed by twinning (TWClo) or nuclear transfer (NTClo). Both methods need a zygote or a nuclear transferred cell, obtained in vitro (IVTec). They are under the IVTec ethics. IVTecs use humans (zygotes, embryos) as drugs or things; increase the risk of malformations; increase dev (mas) elopment and size of abnormalities and may cause long-term changes. Cloning for preserving extinct (or almost extinct) animals or humans when sexual reproduction is not possible is ethically valid. The previous selection of a phenotype in human cloning violates some ethical principles. NTClo for reproductive or therapeutic purposes is dangerous since it increases the risk for nucleotide or chromosome mutations, de-programming or re-programming errors, aging or malignancy of the embryo cells thus obtained (Rev Méd Chile 2005; 133: 105-12)

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Implicaciones éticas de la transgénesis y la clonación/ Ethic implications of transgenesis and cloning

Rodríguez Pargas, Ayní; Junco Barranco, Jesús Arturo; Rodríguez Pargas, Aymed de la C; de la Cruz Cardoso, María Antonia
2003-04-01

Resumen en español La biotecnología, aunque tan antigua como la invención del vino y la fermentación de la cerveza por el hombre, tiene en los años 60 del siglo XX, un importante despegue con las técnicas de biología molecular y clonaje de genes foráneos en organismos unicelulares, y el surgimiento de los primeros medicamentos recombinantes. En la década de 1980 y 1990, se obtiene sorprendentes resultados de transgénesis de animales y plantas y ya finalizando el siglo aparece la cl (mas) onación ó generación de animales idénticos a partir de células somáticas. En este trabajo se valora críticamente las oportunidades y riesgos de la transgénesis y la clonación en el plano ético actual, teniendo en cuenta la amenaza de los seres clónicos, la responsabilidad social de los científicos, la polarización del sistema científico internacional y los códigos morales, además de la ética del profesional científico cubano que responde al principio de que el futuro de nuestra patria tiene que ser necesariamente un futuro de hombres de ciencia Resumen en inglés Even though Biotechnology is as old as the invention of wine and beer fermentation by men, it experiences an important take off in the 60s, with the development of molecular biology techniques and cloning of strange genes in unicellular organisms, and the emergence of the first recombinant medications. In the decade of 1980 and 1990, surprising results in transgenesis of animals and plants are obtained and by the end of the century cloning or generation of identical anima (mas) ls starting from somatic cells is carried out. In this work the opportunities and risks of transgenesis and cloning are analyzed critically taking into account the current ethical perspective, keeping in mind the threat of cloned beings, the social responsibility of scientists, the polarization of the international scientific system and moral codes, as well as the Cuban science professionals ' ethics that responds to the principle that the future of our homeland is necessarily a future of science men

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El riesgo de malformaciones congénitas y defectos de la programación genómica, en relación con las técnicas de reproducción asistida y la clonación/ The risk of congenital malformations and genomic imprinting defects in assisted reproductive technologies and nuclear transfer cloning

Valenzuela, Carlos Y
2005-09-01

Resumen en inglés Recent studies show that assisted reproductive technologies (ART), whether in vitro fertilization (IVF) or intra-cytoplasmatic sperm injection (ICSI) or applied to cloning by somatic cell nuclear transfer (SCNT) are associated to a higher risk of congenital malformations and errors in deprogramming, maintenance or reprogramming genomic imprinting in humans and animals. IVF and ICSI are also associated to an increased admission to neonatal intensive care units and more nee (mas) d for health care resources in infancy. A mutagenic effect of a chemical used in SCNT has been reported and gene depression was found in bovine embryos obtained by IVF or SCNT. The causes of these anomalies could be pathological conditions for which ART is applied, a direct effect of technologies on the zygotes or embryos, avoidance for zygotes or embryos of the oviduct path that is needed to elicit necessary immunity or genomic programming processes, or adaptive selective steps acquired during thousands of millions of generations in evolution. The knowledge of evolution is emphasized as essential in the scientific ethical analysis (Rev Méd Chile 2005; 133: 1075-80)

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Acción de la 5'azacitidina en cromosomas de células linfocitarias de bovinos/ 5'azacytidine effect in bovine lymphocytes chromosomes

Llambí, Silvia; Coppola, Betina; Gagliardi, Rosa; Tejedor, Teresa; Arruga, María V
2008-01-01

Resumen en español La azacitidina (5-azaC) es una sustancia que actúa inhibiendo la metilación del ADN, es utilizada en experiencias de clonación, transgénesis por transferencia nuclear y estudios de fragilidad cromosómica. Se ha observado la manifestación de diversas patologías en animales domésticos nacidos de experiencias de clonación. Ellas estarían asociadas a una inexacta reprogramación nuclear relacionada con fenómenos epigenéticos de metilación del ADN. En el presente (mas) trabajo se realizó una curva de inducción con diferentes concentraciones finales de 5-azaC (0 uM, 5 uM, 10 uM, 20 uM, 50 uM y 70 uM) con el objetivo de estudiar los efectos sobre la estructura cromosómica en cultivos linfocitarios bovinos. Se utilizó la técnica de macrocultivo para análisis cromosómico a partir de sangre de un bovino macho (Bos taurus, Holstein Friesian). Se analizó un total de 50 placas metafásicas por tubo de cultivo y se encontraron diferencias significativas (p Resumen en inglés Azacytidine (5-azaC) is a substance that inhibits the metilation of DNA, being used in cloning experiments, nuclear transference transgenesis and in chromosomal fragility studies. The manifestation of diverse pathologies has been observed in domestic animals born from cloning experiments. These would be associated to an incorrect nuclear reprogramation related to epigenetic metilation phenomena of the DNA. In the present work an induction curve with different final concen (mas) trations of 5-azaC (0 uM, 5 uM, 10 uM, 20 uM, 50 uM and 70 uM) were carried out, with the objective of studying the effects on chromosome structure in bovine lymphocyte cultures. The macroculture technique was used for chromosomic analysis, from a blood sample of a male bovine (Bos taurus, Holstein Friesian). A total of 50 metaphases were analyzed from each culture. Significative differences (p

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Bases teóricas y aplicación clínica de las proteínas morfogenéticas óseas en cirugía maxilofacial/ Base theories and the clinical application of bone morphogenetic proteins in maxillofacial surgery

Ardila Medina, C.M.
2009-06-01

Resumen en español Uno de los grandes avances en la neoformación ósea ha sido la identificación de factores de crecimiento importantes para ella como son las proteinas morfogenéticas óseas (PMO) que regulan la diferenciación ósea y cartilaginosa in vivo. La depuración, clonación genética y expresión de las PMO han establecido las bases para el análisis celular y molecular del desarrollo y la regeneración ósea. El estudio genético de las PMO señala que son esenciales para la (mas) función normal animal y en la osteogénesis postfetal es importante en el desarrollo embrionario orgánico, esquelético y de los tejidos dentales y craneofaciales. La disponibilidad de las PMO proporciona retos y oportunidades para mejorar los conocimientos que regulan la regeneración ósea con el fin de optimizar los resultados en el paciente. Resumen en inglés One of the fundamental advances in bone neoformation has been the identification of important growth factors like the bone morphogenetic proteins that regulate live cartilage and bone differentiation. The cleansing, genetic cloning and expression of recombinant human bone morphogenetic proteins (BMP) have laid the basis for cellular and molecular analysis of bone development and regeneration. The genetic study of the BMPs indicates that they are essential to the normal de (mas) velopment and function of animals. BMP post-natal bone development is also very important in embryonic organic, skeletal, craniofacial and dental tissue development. The availability of BMPs provides several challenges and opportunities to improve insights into the mechanisms that regulate the regeneration of bone for optimal outcome in the patient.

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La producción científica española en bioética a través de MEDLINE/ Scientific production in bioethics in Spain through MEDLINE

Belinchón, Isabel; Ramos, José Manuel; Bellver, Vicente
2007-10-01

Resumen en español Fundamento: Describir la producción científica española en bioética entre 1966 y 2003. Métodos: Se seleccionaron los documentos publicados por autores españoles y recogidos en la base de datos MEDLINE, mediante el cruce de las palabras bioética con otras diversas del mismo ámbito. Resultados: Se estudiaron 858 documentos, de los cuales 78 (9,1%) se publicaron entre 1966 y 1983, 163 (19%) entre 1984 y 1993, y 617 (71,9%) entre 1994 y 2003. Los principales temas pub (mas) licados fueron: legislación y derechos (15,4%) e investigación y comités de ética (13,1%). En el último período se ha observado un aumento significativo de las publicaciones sobre genética y clonación y un descenso sobre las de aborto. El 38,9% de los documentos se atribuyó a universidades y el 38,5% a hospitales. Conclusiones: La publicaciones científicas de bioética se incrementó durante el período de estudio, lo que demuestra un aumento progresivo de la producción científica española en bioética. Resumen en inglés Objective: To describe Spain's scientific production in the field of bioethics from 1966 to 2003. Methods: Manuscripts published by Spanish authors between 1966 and 2003 and containing key word references to bioethics, ethics, and 22 other related terms were retrieved from the Medline database. Results: 858 documents were selected: 78 (9.1%) were published between 1966 and 1983, 163 (19%) between 1984 and 1993, and 617 (71.9%) between 1994 and 2003. The main subject areas (mas) treated were laws and rights (15.4%) and research and ethics committees (13.1%). The last of these periods witnessed an increase in publications on genetics and human cloning and a decrease in those treating abortion. Institutional affiliations referred mainly to universities (38.9%) and hospitals (38.5%). Conclusions: There was a progressive increase in the number of scientific publications on bioethics by Spanish authors during the study period.

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La producción científica española en bioética a través de MEDLINE/ Scientific production in bioethics in Spain through MEDLINE

Belinchón, Isabel; Ramos, José Manuel; Bellver, Vicente
2007-10-01

Resumen en español Fundamento: Describir la producción científica española en bioética entre 1966 y 2003. Métodos: Se seleccionaron los documentos publicados por autores españoles y recogidos en la base de datos MEDLINE, mediante el cruce de las palabras bioética con otras diversas del mismo ámbito. Resultados: Se estudiaron 858 documentos, de los cuales 78 (9,1%) se publicaron entre 1966 y 1983, 163 (19%) entre 1984 y 1993, y 617 (71,9%) entre 1994 y 2003. Los principales temas pub (mas) licados fueron: legislación y derechos (15,4%) e investigación y comités de ética (13,1%). En el último período se ha observado un aumento significativo de las publicaciones sobre genética y clonación y un descenso sobre las de aborto. El 38,9% de los documentos se atribuyó a universidades y el 38,5% a hospitales. Conclusiones: La publicaciones científicas de bioética se incrementó durante el período de estudio, lo que demuestra un aumento progresivo de la producción científica española en bioética. Resumen en inglés Objective: To describe Spain's scientific production in the field of bioethics from 1966 to 2003. Methods: Manuscripts published by Spanish authors between 1966 and 2003 and containing key word references to bioethics, ethics, and 22 other related terms were retrieved from the Medline database. Results: 858 documents were selected: 78 (9.1%) were published between 1966 and 1983, 163 (19%) between 1984 and 1993, and 617 (71.9%) between 1994 and 2003. The main subject areas (mas) treated were laws and rights (15.4%) and research and ethics committees (13.1%). The last of these periods witnessed an increase in publications on genetics and human cloning and a decrease in those treating abortion. Institutional affiliations referred mainly to universities (38.9%) and hospitals (38.5%). Conclusions: There was a progressive increase in the number of scientific publications on bioethics by Spanish authors during the study period.

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Producción in vitro de embriones bovinos: suplementación de los medios de cultivo con suero/ In vitro production of bovine embryos: serum supplementation to the culture media

Mucci, N; Aller, J F; Kaiser, G G; Hozbor, F; Alberio, R H
2006-01-01

Resumen en español Las técnicas para producir embriones bovinos, en estadios de preimplantación mediante la maduración de ovocitos y su posterior fertilización in vitro, ofrece la posibilidad de obtener embriones a bajo costo para ser utilizados con fines de estudio (desarrollo embrionario temprano, transgénesis, clonación) o con propósitos comerciales. Las condiciones de cultivo in vitro pueden influenciar significativamente el desarrollo embrionario, determinando cambios responsabl (mas) es de su menor calidad, comparados con los embriones producidos in vivo . En particular, la adición de suero a los medios de cultivo altera tanto la morfología embrionaria como su calidad, y su eliminación posibilitaría producir embriones de buena calidad para ser criopreservados y transferidos. Los objetivos de esta revisión son describir los aspectos generales del cultivo in vitro de embriones y resumir algunas hipótesis referidas a los mecanismos por los cuales el suero podría alterar el desarrollo y la calidad embrionaria Resumen en inglés Techniques for producing bovine preimplantation embryos by in vitro maturation and fertilization, offers the potential for a large number of embryos at low cost to be used for basic scientific research (embryo development, transgenesis, cloning) or for commercial purposes. Embryo culture conditions can influence in vitro embryo development significantly, provoking deviations responsible for low quality compared with in vivo counterparts. In particular, serum supplementati (mas) on alters both embryo morphology and quality and eliminating serum from the media could be beneficial to produce good quality embryos for cryopreservation and embryo transfer. The objectives of this review are to describe the general aspects of in vitro embryo culture and summerize some hypotheses about the way serum could alter embryo development and quality

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Mejoramiento genético y taza de autofecundación del Camu Camu arbustivo en la Amazonía Peruana/ Genetic improvement and mating system of the Camu Camu shrub in the Peruvian Amazon

Cruz, Carlos Oliva; Resende, Marcos Deon Vilela de
2008-06-01

Resumen en español El camu camu (Myrciaria dubia (H.B.K.) MC VAUGH) es una frutera silvestre conocida mundialmente como un excepcional productor de vitamina C. Su mejoramiento se encuentra en fase inicial. Este trabajo tuvo por objetivos estudiar el sistema reproductivo (taza de autofecundación), el efecto del origen del polen (autofecundación o polinización abierta) en la producción de ácido ascórbico y porcentaje de germinación, la repetibilidad de caracteres productivos y sus impl (mas) icaciones en el programa de mejoramiento. El sistema reproductivo del camu camu es mixto con variables tazas de autofecundación. No fue confirmada la existencia de efecto del origen del polen para el carácter de producción de ácido ascórbico. La repetibilidad individual de la producción fue de moderada magnitud (0.41); la repetibilidad del promedio de 5 cosechas de fruta fue de 0.77, propiciando exactitud selectiva de 0.88. Genotipos superiores pueden ser seleccionados con precisión y, por lo tanto, cinco a seis cosechas por planta es un número adecuado. La selección y clonación de los diez mejores individuos deberá propiciar una ganancia genética del 237.5 %, elevando la productividad media anual de frutas por planta de 7.75 para 26.17 kg/año. Resumen en inglés The camu camu (Myrciaria dubia H.B.K. MC VAUGH) is a well known fruit species with a high vitamin C content. It is wild and a genetic improvement program is at an early stage. This paper reports on studies of its mating system, the possible effect of the source of the pollen (self pollination or outcrossing) and the repeatability of vitamin C production in this species with implications for the genetic improvement program. The results showed a mixed mating system with bot (mas) h crossing and selfing, no effects of the source of the pollen, individual repeatability of 0.41, repeatability of the mean of five harvests of 0.77 and accuracy of 0.88. Five to six fruit harvests is an adequate number to provide high selection efficiency. Selection and cloning of the best 10 trees can provide a genetic gain of 237.5%, enhancing annual fruit production from 7.75 to 23.17 kg per plant.

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Aplicación de las técnicas de biología molecular en oncología oral/ Application of molecular biology techniques in oral cancer

López-Durán, M.; Campo-Trapero, J.; Cano-Sánchez, J.; Díez-Pérez, R.; Bascones-Martínez, A.
2010-08-01

Resumen en español Este artículo de revisión se propone exponer las principales técnicas de biología molecular disponibles actualmente para los investigadores, en el campo del cáncer y precáncer oral, clasificadas según el tipo de material biológico del que se disponga para iniciar la investigación. Éste puede ser ADN, ARN o proteínas. La explicación de cada técnica comprenderá una breve sistemática del proceso, así como sus ventajas, inconvenientes y estado de actividad act (mas) ual. Todo ello con la finalidad de esclarecer las aplicaciones, pronto indispensables, de las técnicas más destacadas, en el diagnóstico precoz, pronóstico y tratamiento individualizado del carcinoma oral. Entre las técnicas más útiles en este proceso se encuentran: la electroforesis en gel, las técnicas de hibridación, la tecnología microarray, los biochips, la PCR convencional, la cuantitativa o la transcriptasa inversa, las técnicas de Southern, Northern y Western blot, la secuenciación de ADN, la clonación de genes, la inmunohistoquímica, el ensayo ELISA y la citometría de flujo. Destacan en particular por su gran utilidad, la tecnología microarray, los biochips y la PCR. Resumen en inglés This article summarizes the main techniques in the area of molecular biology that are available for the investigation of oral cancer and precancer. They have been classified depending on the biological material we expect to analyze, which can be DNA, RNA or proteins. The explanation for each technique includes a brief description of its basics, as well as some advantages, drawbacks and current use of the technique. Our aim is to throw light on the applications of these te (mas) chniques, soon indispensable for most studies, in the early diagnosis, prognosis and individualized treatment of oral carcinoma. The most useful techniques for this objective are nowadays: gel electrophoresis, hybridation, microarray technology, biochips, PCR (conventional, quantitative or reverse transcriptase), Southern, Northern and Western blot studies, DNA sequenciation, cloning, immunohistochemistry, ELISA and flow citrometry. Some techniques that deserve a special mention due to their greater usefulness in the area of oral cancer are microarray technology, biochips and PCR.

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GENOMA Y BIOÉTICA: UNA VISIÓN HOLÍSTICA DE CÓMO VAMOS HACIA EL MUNDO FELIZ QUE NOS PROMETEN LAS BIOCIENCIAS/ GENOME AND BIOETHICS: AN HOLLISTIC VISION OF THE WAY WE MARCHTOWARDS THE HAPPY WORLD BIOSCIENCES PROMISE/ GENOMA E BIOÉTICA: UMA VISÃO HOLÍSTICA PARA O MUNDO FELIZ QUENOS PROMETE AS BIOCIÊNCIAS

Antoine, Jean-Luc M.J
2004-01-01

Resumen en portugués A idéia da cidade utópica é quase tão antiga como o pensamento humano. Consiste numa sociedade teoricamente perfeita e transparente onde tudo está perfeitamente controlado, onde consequentemente os cidadãos poderiam alcançar a felicidade. Neste artigo pretendemos refletir, mediante uma perspectiva holística -e com exemplos práticos como a clonagem, células tronco e eugenismo-, acerca da sociedade genética atualmente em cernes, a que, apesar de apresentar-se com (mas) o uma potente ferramenta para alcançar uma cidade utópica, hoje seria impossível pelos numerosos riscos e perigos existentes. Portanto, cremos que é importante e necessário fazer uma análise sobre a bioética e o progresso, antes de seguir enfrente Resumen en español La idea de la ciudad utópica es casi tan antigua como el pensamiento humano. Ella consiste en una sociedad teóricamente perfecta y transparente donde todo está perfectamente controlado y, en consecuencia, los ciudadanos podrían alcanzar la felicidad. En este artículo pretendemos reflexionar, mediante una perspectiva holística -y con ejemplos prácticos como la clonación, células troncales y eugenismo-, acerca de la sociedad genética actualmente en ciernes, la que (mas) , a pesar de presentarse como una potente herramienta para alcanzar una ciudad utópica, sería hoy imposible por los numerosos riesgos y peligros existentes. Por tanto, creemos importante un análisis sobre la bioética y el progreso, antes de seguir adelante Resumen en inglés The idea of an utopian city is almost as old as human thinking. It consists in a society theoretically perfect and transparent where everything is under control, so that citizens could achieve happiness. In this article, using a historical perspective, we pretend to reflect, with practical examples such as cloning, stem cells and eugenics, on a genetic society which is blossoming and in spite of presenting itself as a strong tool to achieve the utopian city, this would no (mas) t be possible due to the warning for many risks and dangers. Therefore we believe it is important to carry out an analysis on bioethics and progress, before moving on

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Animales transgénicos: pasado, presente y futuro/ Transgenic animals: past, present and future

Felmer, R.
2004-12-01

Resumen en español Desde la demostración del primer animal transgénico en 1980, la ingeniería genética ha revolucionado todos los aspectos de la investigación biológica y biomédica. Desde entonces, se ha logrado la generación de varios tipos de animales transgénicos, incluyendo vacas, cerdos, ovejas, cabras y conejos. Hasta muy recientemente, la generación de animales transgénicos involucraba la microinyección de pequeñas cantidades de ADN en el pronúcleo de un embrión al est (mas) ado de dos células, técnica conocida como microinyección pronuclear. El descubrimiento de que los animales podrían ser clonados mediante transferencia nuclear de células mantenidas en cultivo abrió las puertas para realizar recombinación homóloga en estas especies. Esto podría tener importantes implicaciones especialmente para los propósitos del descubrimiento de nuevas drogas, para mejorar características productivas de los animales, en la clonación de cerdos como fuentes de órganos para trasplantes y en la producción de proteínas farmacéuticas. En esta revisión se discuten los avances que ha tenido la tecnología para la generación de animales transgénicos y los beneficios de la transferencia nuclear como una nueva ruta para la generación de animales transgénicos de granja Resumen en inglés Since the initial demonstration in 1980 that a transgenic animal could be generated harbouring a transgene from a different species, genetic engineering has revolutionized all aspects of fundamental biological and biomedical research. Since then, much has been accomplished in the generation of various types of transgenic animals, including cows, pigs, sheeps, goats and rabbits. Until recently, genetically modified livestock could only be generated by pronuclear injection. (mas) The discovery that animals can be cloned by nuclear transfer from cultured somatic cells means that it is now possible to achieve gene targeting in these species. This may have important implications for the purposes of drug discovery research, to improve animal health and productivity, in cloning pigs as a source donor for xenotransplantion, and in the production of pharmaceutical proteins. This review discusses the development of transgenic technology and the potential benefits emerging from nuclear transfer as a novel route for the generation of transgenic livestock

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VALUACIÓN BIOÉTICA DEL PROYECTO "GENOMA HUMANO"/ BIOETHICAL VALIDATION OF THE "HUMAN GENOME PROJECT"/ AVALIAÇÃO BIOÉTICA DO PROJETO "GENOME HUMANO"

Santos y Vargas, Leonides
2002-01-01

Resumen en portugués Este texto propõe reflexões sobre os recentes progressos apresentados pelas investigações decorrentes do Projeto Genoma Humano que conduzem a sólidos conhecimentos em tecnologias biomedicas. As novas informações sobre a natureza da espécie humana obtidas por esses avanços permitem reexaminar explicações mitológicas e metafísicas acumuladas por milênios através da ótica da antropologia filosófica. Os progressos nas intervenções da ciência sobre a saúde (mas) e qualidade de vida humana permitem avaliar a legitimidade de uma série de proposições biomédicas. Nesse sentido, o presente texto apresenta reflexões sobre o tema da clonagem e seus diferentes aspectos econômicos e políticos Resumen en español Este texto propone una serie de reflexiones que se desprenden de los recientes progresos acaecidos en las investigaciones sobre el Proyecto del Genoma Humano, los cuales conducen al fortalecimiento acelerado de conocimientos y tecnologías biomédicas. Las nuevas afirmaciones sobre la naturaleza biológica de la especie humana, legitimadas por estos nuevos progresos, posibilitan reexaminar explicaciones mitológicas y metafísicas acumuladas desde hace milenios, en el con (mas) texto de una nueva antropología filosófica. Los progresos en las intervenciones de la ciencia médica sobre la salud y la calidad de la vida humana permiten evaluar nuevamente la legitimidad de una serie de nuevas posibilidades biomédicas. Es así como este texto aborda también, de manera particular, la temática de la clonación y de sus distintos aspectos económicos y políticos Resumen en inglés This text proposes a number of reflections that issue fron the recent advancements that have taken place in investigations on the Human Genoma Project, which lead to the accelerated reinforcement of biomedical knowledge and technologies. The new statements upon human species’ biological nature, legitimated by these new progress, allow us to reexamine the mythological and metaphysical explanations accumulated for millenia, facing a new philosophical anthropology. The (mas) advancements of medical science’s interventions upon health and quality of life, allow us to evaluate again the legitimateness of a quantity of new biomedical possibilities. This text touches, too, in a particular way, the subject of cloning and it’s different economic and political aspects

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Biología de las células madre embrionarias (ES cells) en distintas especies: potenciales aplicaciones en biomedicina/ Biology of embryonic stem cells (ES cells) in different species: potential applications in biomedicine

Arias, ME; Felmer, R
2009-01-01

Resumen en español Las células madre embrionarias (ESC del inglés, Embryonic Stem Cells) son células indiferenciadas que derivan de la masa celular interna (MCI) de embriones en estado de blastocisto. Estas células se caracterizan por su habilidad para crecer indefinidamente in vitro y conservar la capacidad de diferenciarse hacia todos los tipos celulares de un individuo. Las células madre embrionarias se han constituido en una poderosa herramienta para estudios del desarrollo embrion (mas) ario, genómica funcional, para la generación de animales transgénicos vía recombinación homóloga y más recientemente en clonación y medicina. Debido a su potencial aplicación en la manipulación específica de genes, el aislamiento de estas células en especies domésticas como el cerdo y el bovino podría tener numerosas aplicaciones agropecuarias, farmacéuticas y biomédicas. Más aún, las actuales investigaciones desarrolladas acerca de sus propiedades biológicas y sobre sus posibles aplicaciones en medicina regenerativa, debido al enorme potencial de reparación que encierran, están abriendo grandes posibilidades que permitirán, en un futuro no muy lejano, disponer de revolucionarias terapias para diversas enfermedades humanas que hoy en día son incurables. En esta revisión se describen aspectos generales del aislamiento, derivación, cultivo, transformación y diferenciación de estas células en diferentes especies así como también algunas de sus potenciales aplicaciones en biomedicina Resumen en inglés Embryonic stem cells (ES cells) are undifferentiated cells that derive from the inner cellular mass (ICM) of blastocyst-stage embryos. These cells can grow indefinitely in vitro preserving the ability to differentiate into all cell types of an individual. ES cells have become a powerful tool to study the early embryonic development, in functional genomic, to generate gene targeted transgenic animals and recently in animal cloning and medicine. Furthermore, current researc (mas) h developed on their biological properties and possible applications in regenerative medicine, due to their enormous potential of repair, are opening great possibilities that will allow to design, in the near future, revolutionary therapies to diverse human diseases nowadays incurables. In this review the general aspects of the isolation, derivation, culture, differentiation and transformation of these cells in different animal species are described as well as their promising applications in biomedicine

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Agentes calciomiméticos en el tratamiento del hiperparatiroidismo secundario a la insuficiencia renal crónica/ Calcimimetic agents in the treatment of hyperparathyroidism secondary to chronic renal failure

Negri, A. L.; Slatopolsky, E. A.
2003-04-01

Resumen en español La reciente identificación y clonación del receptor sensor de calcio (RSCa) ha permitido tener una mejor comprensión de la regulación normal del metabolismo del calcio y entender un número de trastornos relativamente poco frecuentes del metabolismo mineral. En la glándula paratiroides el RSCa es el mecanismo responsable de modular la liberación de la hormona paratiroidea en función del nivel de calcio extracelular. Este descubrimiento también ha permitido desarro (mas) llar drogas que imitan o potencian las acciones del calcio extracelular sobre el RSCa (llamadas calciomiméticos) que disminuyen la secreción de paratohormona sin incrementar el calcio sérico. Los calciomiméticos de última generación son pequeñas moléculas orgánicas que actúan como moduladores alostéricos del RSCa y se encuentran en su fase inicial de desarrollo clínico. A pesar de que la experiencia obtenida con estas drogas hasta ahora es limitada, ellas han mostrado ser efectivas para reducir los niveles de paratohormona en pacientes con hiperparatiroidismo secundario a fallo renal terminal sin inducir efectos secundarios de importancia. Es por ello que los compuestos calciomiméticos tienen un considerable potencial como nuevas drogas para el tratamiento del hiperparatiroidismo secundario y de la enfermedad ósea secundaria a la insuficiencia renal. Resumen en inglés The recent discovery and cloning of the extra cellular calcium sensing receptor (CaSR) has allowed a better understanding of the regulation of normal calcium metabolism and of rare disturbances in mineral metabolism. In the parathyroid glands the CaSR is responsable for modulating parathyroid hormone release as a function of the extra cellular calcium level. This discovery has allowed the development of drugs that mimics or potentiates the actions of extra cellular calciu (mas) m on the CaSR, called calcimimetics that decrease parathyroid hormone secretion without increasing serum calcium. The new calcimimetics are small organic molecules that act as allosteric activators of the CaSR and they are in their initial face of clinical development. Although the experience with these drugs is limited, they have shown to effectively lower parathyroid hormone levels in patients with hyperparathyroidism secondary to end-stage renal failure without inducing important side-effects. Thus calcimimetic compounds have considerable potential as new drugs for the treatment of secondary hyperparathyroidism and uremic bone disease.

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GENES DE SUSCEPTIBILIDAD/RESISTENCIA A Flavivirus, IMPLICACIONES EN LA SEVERIDAD DE LA INFECCIÓN/ Susceptibility/Resistance Genes to Flavivirus, Implications on Disease Severity

PRADAARISMENDY, JEANETTE; CASTELLANOS, JAIME E
2006-06-01

Resumen en español Las infecciones transmitidas por Flavivirus se encuentran entre las enfermedades transmisibles con mayor incidencia en el mundo. La mayoría de ellas se manifiestan clínicamente como un síndrome febril que puede estar o no acompañado de diversos síntomas. La severidad de estas infecciones es variable con casos asintomáticos y otros que pueden llegar a ser letales. La razón de esta variabilidad en la presentación clínica, se desconoce en humanos. En ratones se han (mas) identificado cepas susceptibles y cepas resistentes a la infección por algunos Flavivirus. Por clonación posicional se mapeó el gen responsable de la resistencia a virus West Nile en el cromosoma 5 de ratón y se identificó como oligoadenilato sintetasa 1b (Oas1b). Este gen codifica una proteína que sintetiza oligómeros de adenina que activan la RNasaL, que a su vez degrada los RNAs virales. Células provenientes de ratones resistentes a la infección por Flavivirus producen menor cantidad de virus que su contraparte susceptible. Recientemente en humanos, se identificó un polimorfismo asociado con susceptibilidad a infección por virus West Nile en el gen de OasL. Sin embargo, el mecanismo bioquímico y molecular exacto por el cual se produce la susceptibilidad no ha sido completamente dilucidado. Este conocimiento permitiría aclarar aspectos de la fisiopatología de estas enfermedades y enfocar la terapéutica desde un punto de vista más específico. Resumen en inglés Flavivirus caused infections are among the diseases with the highest incidence in the world. Most of these infections have a wide severity clinical profile, from unspecific fever to lethal hemorrhages and encephalitis. The reason of the clinical variability remains unclear, but it appears to be associated to host genetic features. Susceptible or resistant mouse strains to Flavivirus infection have been identified and the gene responsible for this has been mapped by positi (mas) onal cloning as the West Nile Virus susceptibility mouse gene in chromosome 5, that codifies for Oligoadenylate Synthetase, isoform 1b (OAS1b). OAS produces adenine oligomers that activate endoribonuclease RNAseL to degrade viral RNA. Resistant mice strains produce significantly less virus than susceptible ones. In humans, it has recently been reported a single nucleotide polymorphism associated with susceptibility to West Nile Virus infection in the OASL gene. However, the biochemical or molecular mechanisms that explained this susceptibility are not clear. Further knowledge related with these processes is important for understanding flaviviral pathogenesis and for the design of therapeutic alternatives.

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Competencia morfogénica de embriones maduros de Pinus radiata cultivados in vitro y su relación con la posición del cono en el árbol/ Morphogenic competence of mature in vitro cultured Pinus radiata embryos and their relation with cone position in the tree

Sánchez-Olate, Manuel; Zapata Valenzuela, Jaime; Sáez Delgado, Patricia; Ríos Leal, Darcy; Spiercolli Henríquez, Scarlette; Alvarez Maldini, Carolina; Delaveau, Catherine; Pereira Cancino, Guillermo
2008-01-01

Resumen en español La micropropagación de material embrionario colectado de árboles adultos constituye una alternativa importante en la propagación masiva de fenotipos selectos, adecuados para los programas de clonación implementados por las empresas forestales. Utilizando esta técnica, ejes embrionarios maduros extraídos desde conos lignificados ubicados a diferentes alturas en el árbol (zonas basal, media y apical) fueron introducidos in vitro con el objeto de analizar la posible r (mas) elación entre el estado fisiológico del tejido formador y la respuesta obtenida en la micropropagación de embriones maduros de Pinus radiata. Embriones obtenidos desde conos ubicados en la zona basal del árbol donador mostraron los mejores resultados en germinación (95%), supervivencia (100%), proliferación de microtallos (1,7 yemas/microtallos) y longitud de microtallos (25 mm). Ello permitió establecer una relación entre el estado de desarrollo del explanto y su respuesta en condiciones artificiales de cultivo in vitro, entregando antecedentes para la implementación de criterios de clasificación del material colectado para ser utilizado en cultivo de tejidos debido a la respuesta variable según el origen de los embriones desde el árbol donador Resumen en inglés The micropropagation of zygotic material collected from adult trees constitutes an important alternative in massive propagation of select phenotypes, appropriate for cloning programs implemented by forest companies. Using this technique, embryonic axes extracted from lignified cones located at different heights in the trees (basal, medial and apical zones) where in vitro introduced, with the objective of analyzing the possible relation between the physiological state of t (mas) he forming tissue and the response obtained in the micropropagation of mature Pinus radiata embryos. Embryos obtained from cones located in the basal zone of the donor tree, demonstrated the best results in regards to germination (95%), survival (100%), microshoot proliferation (1.7 buds/microstems) and microshoot elongation (25 mm), which allowed to establish a relation between the development states of the explants and their response in artificial in vitro conditions, supplying background information for the implementation of a classification criteria of the collected material to be used in tissue cultures, due to the variable responses obtained according to the origin of the embryos from donor trees

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Avances biotecnológicos en el diagnóstico de enfermedades infecciosas/ Biotechnological advances in infectious diseases diagnosis

Hernández-Hernández, Fidel de la Cruz; Rodríguez, Mario H
2009-01-01

Resumen en español La detección de moléculas de patógenos (antígenos y material genético) y moléculas de respuesta de los hospederos ante la infección (anticuerpos) es el principio básico de las pruebas diagnósticas moleculares. Estas pruebas han hecho innecesaria la detección directa del microorganismo patógeno agresor. Los nuevos avances en biología molecular y el desarrollo de tecnología robótica y secuenciación genómica y proteica han permitido el desarrollo de nuevas pr (mas) uebas diagnósticas altamente específicas y de gran rendimiento. La genómica y proteómica contribuyen a la identificación de biomarcadores y la biotecnología aporta métodos para producir reactivos de alta pureza. La identificación de genes codificantes de antígenos específicos, su clonación y producción recombinante y la producción de anticuerpos monoclonales, fragmentos de éstos y anticuerpos de una sola cadena han hecho posible el desarrollo de nuevas técnicas inmunológicas más seguras y de sensibilidad y especificidad elevadas. Nuevas moléculas de reconocimiento, incluidos los aptámeros, podrán pronto superar la necesidad de producir anticuerpos mediante inmunización. Para la detección de material genético se han desarrollado nuevas medidas metodológicas basadas en la hibridación y amplificación (PCR, de punto final y en tiempo real) en formatos multiplex y en microarreglos y para su detección se han diseñado moléculas reporteras que permiten su cuantificación. Aunque estos métodos requieren instrumentación compleja, puede ya anticiparse que pronto serán accesibles para su aplicación en salud pública. Resumen en inglés The detection of molecules of pathogens (antigens and genetic material) and host molecules in response to infections (antibodies) is the basic principle involved in molecular diagnostic tests. These tests have avoided the need to detect the attacking pathogen. New advances in molecular biology and the development of robotic technology and genomic and protein sequencing have allowed for the development of new high performance and highly specific tests. Genomics and proteom (mas) ics contribute to the identification of biomarkers and biotechnology provides methods to produce high purity reagents. The identification of coding genes of specific antigens, their cloning and recombinant production, the production of monoclonal antibodies, their fragments and single chain antibodies enabled new, safer, high sensitivity and specificity immunological techniques to develop. New recognition molecules, including aptamers, will soon replace the need to produce antibodies by immunization. For the detection of genetic material, new methodological strategies based on hybridization and amplification (PCR, end point and real time) in multiplex and microarray formats have been developed, and for their detection new reporter molecules have been designed that enable their quantification. Although these methods require sophisticated instrumentation, they will soon be accessible for application in public health.

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Avances biotecnológicos en el diagnóstico de enfermedades infecciosas/ Biotechnological advances in infectious diseases diagnosis

Hernández-Hernández, Fidel de la Cruz; Rodríguez, Mario H
2009-01-01

Resumen en español La detección de moléculas de patógenos (antígenos y material genético) y moléculas de respuesta de los hospederos ante la infección (anticuerpos) es el principio básico de las pruebas diagnósticas moleculares. Estas pruebas han hecho innecesaria la detección directa del microorganismo patógeno agresor. Los nuevos avances en biología molecular y el desarrollo de tecnología robótica y secuenciación genómica y proteica han permitido el desarrollo de nuevas pr (mas) uebas diagnósticas altamente específicas y de gran rendimiento. La genómica y proteómica contribuyen a la identificación de biomarcadores y la biotecnología aporta métodos para producir reactivos de alta pureza. La identificación de genes codificantes de antígenos específicos, su clonación y producción recombinante y la producción de anticuerpos monoclonales, fragmentos de éstos y anticuerpos de una sola cadena han hecho posible el desarrollo de nuevas técnicas inmunológicas más seguras y de sensibilidad y especificidad elevadas. Nuevas moléculas de reconocimiento, incluidos los aptámeros, podrán pronto superar la necesidad de producir anticuerpos mediante inmunización. Para la detección de material genético se han desarrollado nuevas medidas metodológicas basadas en la hibridación y amplificación (PCR, de punto final y en tiempo real) en formatos multiplex y en microarreglos y para su detección se han diseñado moléculas reporteras que permiten su cuantificación. Aunque estos métodos requieren instrumentación compleja, puede ya anticiparse que pronto serán accesibles para su aplicación en salud pública. Resumen en inglés The detection of molecules of pathogens (antigens and genetic material) and host molecules in response to infections (antibodies) is the basic principle involved in molecular diagnostic tests. These tests have avoided the need to detect the attacking pathogen. New advances in molecular biology and the development of robotic technology and genomic and protein sequencing have allowed for the development of new high performance and highly specific tests. Genomics and proteom (mas) ics contribute to the identification of biomarkers and biotechnology provides methods to produce high purity reagents. The identification of coding genes of specific antigens, their cloning and recombinant production, the production of monoclonal antibodies, their fragments and single chain antibodies enabled new, safer, high sensitivity and specificity immunological techniques to develop. New recognition molecules, including aptamers, will soon replace the need to produce antibodies by immunization. For the detection of genetic material, new methodological strategies based on hybridization and amplification (PCR, end point and real time) in multiplex and microarray formats have been developed, and for their detection new reporter molecules have been designed that enable their quantification. Although these methods require sophisticated instrumentation, they will soon be accessible for application in public health.

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EL PROYECTO DEL GENOMA EN LA LITERATURA BIOMÉDICA LATINOAMERICANA DE CUATRO PAÍSES/ THE GENOME PROJECT IN BIOMEDICAL LITERATURE WITHIN FOUR COUNTRIES IN LATIN AMERICA/ O PROJETO DO GENOMA NA LITERATURA BIOMÉDICA LATINO-AMERICANA DE QUATRO PAÍSES

Lolas Stepke, Fernando; Rodríguez Yunta, Eduardo; Valdebenito Herrera, Carolina
2004-01-01

Resumen en portugués A presente reflexão se refere aos dados obtidos sobre representações sociais da investigação genómica e suas aplicações através da revisão da literatura escrita em meios locais por pesquisadores biomédicos de quatro países latino-americanos: Argentina, Chile, México y Perú. São identificados vários temas: pouco acesso na América Latina aos métodos de prevenção e terapêuticos da medicina genómica; o risco associado às modificações genéticas em hum (mas) anos, a falta de equidade no acesso a benefícios da saúde; o controle exercido pelas companhias biotecnológicas; a comercialização das seqüências génicas por patentes que levam à exploração comercial de países em desenvolvimento; a possibilidade de danos físicos ou psicológicos por estigmatização ou por discriminação genética; a possibilidade de modificações genéticas ou aborto por razões eugenésicas, a necessidade de salvaguardar a confidencialidade; a baixa participação das comunidades indígenas no estudo de seu DNA, algumas vezes sem um consentimento informado apropriado; a necessidade de regulação legal para prevenir a realização de modificações genéticas de aprimoramento ou a clonagem humana reprodutiva, e para regular o acesso à informação genética Resumen en español La reflexión presente se refiere a los datos obtenidos sobre representaciones sociales de la investigación genómica y sus aplicaciones, a través de la revisión de la literatura escrita en medios locales por investigadores biomédicos de cuatro países latinoamericanos: Argentina, Chile, México y Perú. Se identifican varios temas: poco acceso en Latinoamérica a los métodos de prevención y terapéuticos de la medicina genómica; el riesgo asociado con modificacion (mas) es genéticas en humanos; la falta de equidad en el acceso a beneficios de la salud; el control que ejercen las compañías biotecnológicas; la comercialización de las secuencias génicas por patentes que llevan a la explotación comercial de países en desarrollo; la posibilidad de daño físico o psicológico por estigmatización o por discriminación genética; la posibilidad de modificaciones genéticas o aborto por razones eugenésicas, la necesidad de salvaguardar la confidencialidad; la poca participación de las comunidades indígenas en el estudio de su ADN, algunas veces sin un apropiado consentimiento informado; la necesidad de regulación legal para prevenir que se realicen modificaciones genéticas de mejoría o la clonación humana reproductiva, y para regular el acceso a la información genética Resumen en inglés The present reflection refers to data obtained about the social representations of genomic research and its applications through the review of local literature written by biomedical researchers in four Latin American countries: Argentine, Chile, Mexico and Peru. Several issues are addressed, such as: little access to prevention and therapeutic methods related to genomic medicine in Latin America; the risk associated to genetic modifications in human beings; lack of equity (mas) in the access to health benefits; control by biotechnological companies; commercialization of gene sequences through patents which leads to commercial exploitation of underdeveloped countries; the possibility of physical or psychological damage in the way of stigmatization or genetic discrimination; the possibility of genetic modifications or abortion for eugenic reasons; the necessity of safeguarding confidentiality; the little participation of indigenous communities in the studies done on their DNA, sometimes without proper informed consent; the necessity of legal regulation to prevent the pathway towards enhancement of genetic modifications or reproductive human cloning, and of regulating access to genetic information

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El concepto de calidad de vida y la evolución de los paradigmas de las ciencias de la salud

González Pérez, Ubaldo
2002-12-01

Resumen en español La medicina nació como respuesta pragmática a la necesidad de aliviar el dolor, el sufrimiento y la incapacidad, pero, al evolucionar en interacción con las concepciones predominantes de las demás disciplinas y tecnologías, se fueron desarrollando sus paradigmas. La investigación y las intervenciones médicas se movieron desde la enfermedad del individuo en fase aguda y con síntomas molestos hasta las acciones de educación para preservar la salud de la comunidad. (mas) Grandes hitos en los enfoques de la causalidad en medicina lo constituyeron las observaciones de los médicos griegos acerca de la importancia de los aires, las aguas y los lugares para la salud y las enfermedades, al igual que las ideas de los utopistas del renacimiento cuando predicaban la posibilidad de crear una sociedad mejor y una vida más sana dotando de mayor calidad los estilos de vida. Otro enfoque trascendental lo realizó Ramacini al plantear la influencia del modo de vida de los limpiadores de estercoleros en la génesis de sus enfermedades. Todo esto influyó en que se pusiera la atención en el medio laboral, en la vivienda, en la higiene y el hambre, por lo que aparecieron estudios sobre las condiciones de vida de los obreros y los sectores depauperados, realizados por médicos y economistas famosos, para explicar las enfermedades y epidemias que azotaron las zonas de desarrollo industrial de la Europa de los siglos XVII y XVIII. Esto propició el desarrollo de la medicina social, la higiene social y la salud pública, y a partir de ese momento quedó claro que el hambre y las guerras podían matar y enfermar a más personas que las bacterias, porque se había entendido el papel de la calidad de las condiciones de vida para la salud y la enfermedad. No obstante esta avanzada concepción, los primeros logros de la quimioterapia y la identificación microscópica de los agentes biológicos, a la vez que progreso, indujeron un optimismo ingenuo que postuló las posibilidades ilimitadas de los quimioterapéuticos. El desarrollo de la industria farmacéutica fue sometido por los intereses del mercado arrastrando las concepciones de algunos sectores médicos y de la población a un biologicismo a ultranza que hiciera creer que la solución de los problemas de la salud y la enfermedad dependen de la producción y uso de medicamentos eficaces. Las tecnologías para las terapias intensivas, los trasplantes y la clonación fueron tomadas de la mano por el mercado y de nuevo se desatendió el peligro de los cambios bruscos en el modo de vida, la contaminación del ambiente y la pobre calidad de vida a la que conducen el desarrollismo, el consumismo y la inseguridad social. El reconocimiento de estos errores puede ser atenuado aprovechando la teoría de la actividad para estudiar la calidad de la vida en un contexto de integración de las condiciones biológicas a los factores medioambientales, economicosociales, psicológicos y éticos. Lo cual implica asumir una concepción en el paradigma de la salud para enfrentar los problemas de la sociedad actual. Resumen en inglés Medicine emerged as a pragmatic response to the need of relieving pain, suffering and disability, but when it developed in interaction with the predominant conceptions of the rest of disciplines and technologies, its paradigms were also developed. Research and medical interventions moved from the disease of an individual at critical state and with disturbing symptoms to educational actions for preserving the health of the community. Great landmarks in the approaches to ca (mas) usality in medicine were the observations made by the Greek doctors about the importance of air, waters and places for the health and diseases as well as the ideas of Renaissance utopists when they predicated the possibility of creating a better society and a healthier life by providing higher quality lifestyles. Raminici also presented another transcendental approach when he spoke about the influence of the way of life of dunghill cleaners on the genesis of their diseases. All this brought the attention to working environment, housing, hygiene and hunger and hence famous physicians and economists performed studies on the living conditions of workers and impoverished sectors to explain the diseases and epidemics that hit the industrial development areas in Europe during the 17th and 18th centuries. This gave rise to the development of social medicine, social hygiene and public health, and from that moment on, it was clear that hunger and wars could kill and cause illness in more people than the bacteria did, because the role of the quality of life for health and disease had been finally understood. Regardless of this advanced conception, the first accomplishments of chemotherapy and the microscopic identification of biological agents brought about progress but at the same time a naive optimism that set out the unlimited possibilities of the chemotherapeutical drugs. The development of the drug industry was subjected to the interests of the market, leading some medical sectors and population sections to biologicism at all costs that made them believe that the solution of health problems and disease depend on the production and use of efficient drugs. The technologies aimed at intensive therapy, transplantation and cloning were led by the hand by the market, so, once again the danger represented by sudden changes in the way of life, environmental pollution and the poor quality of life caused by excessive development, excessive consumption and social insecurity was neglected. Recognizing these mistakes may be attenuated by making good use of (determinar) to study the quality of life in a context of integration of biological conditions with environmental, economic-social, psychological and ethical factors. This means to assume a conception within the paradigm of health to face the present society's problems.

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La epigenética y los estudios en gemelos en el campo de la psiquiatría/ Epigenetics and twin studies in psychiatric domains

González Ramírez, Adriana Estrella; Díaz Martínez, Alejandro; Díaz-Anzaldúa, Adriana
2008-06-01

Resumen en español La secuencia de ADN genómico que caracteriza a nuestra especie constituye la piedra fundamental de la vida humana; parte de ella se refleja en la secuencia del ARN y a través de éste se dicta la información necesaria para que nuestras células produzcan proteínas. La genética contribuye de manera importante a los avances en el campo médico. Los descubrimientos genéticos han permitido desarrollar estrategias para modificar, prevenir y proponer nuevas terapias para (mas) diversas enfermedades. En el siglo XIX, Gregor Johann Mendel desarrolló un modelo teórico capaz de predecir la naturaleza y propiedades de los mecanismos de la herencia, que sigue siendo indispensable para explicar la base de la herencia humana. Otro suceso determinante en la historia de la Medicina se dio a conocer casi nueve décadas después cuando James Watson y Francis Crick describieron su modelo estructural para el ADN. Posteriormente se introdujeron la clonación posicional y la reacción en cadena de la polimerasa; más recientemente se publicó cerca del 99% de la secuencia del genoma humano. El período actual se conoce como la era post-genómica, ya que además de descifrar genomas completos, los investigadores pretenden, entre otras cosas, esclarecer los mecanismos que influyen en la activación e inactivación de los genes, lo cual en parte involucra un nivel epigenético. En las ciencias médicas los gemelos constituyen un grupo idóneo para abordar el estudio de las enfermedades hereditarias. En este tipo de padecimientos suelen observarse similitudes entre parientes, en especial si se trata de gemelos monocigóticos. Sin embargo, aun en este tipo de hermanos se detectan diferencias importantes. Parámetros como los grados de concordancia y porcentajes de heredabilidad han puesto de manifiesto que un gemelo monocigótico puede presentar trastornos hereditarios que su co-gemelo nunca tendrá. La epigenética es el estudio de los cambios en la función de los genes que no afectan la secuencia del ADN, por modificaciones que tienen lugar principalmente en las citosinas de éste y en las histonas de la cromatina. Se ha determinado que las modificaciones epigenéticas son mucho más frecuentes que aquellas que modifican la secuencia del ADN, por lo que constituyen uno de los fundamentos de la diversidad biológica, muestran la manera en que el ambiente puede modular la expresión genética y contribuyen así a nuestro fenotipo. Esta revisión reúne datos sobre la posible relevancia de la epigenética en el estudio de los trastornos mentales y como posible explicación parcial de las diferencias observadas entre gemelos >. Un conocimiento más profundo de los patrones epigenéticos podría contribuir a identificar factores de riesgo para estos trastornos. Resumen en inglés The sequence of the human genome integrates the keystone of our life. Part of it is transcribed to RNA, which in turn provides the information required by our cells to produce proteins. Discoveries in the genetics field have been essential to medicine and have been used to develop strategies to modify, prevent and propose new therapeutic approaches for human diseases. In the 19th Century, Gregor Johann Mendel developed a theoretical model which was able to predict in an a (mas) ccurate way hereditary mechanisms; indeed, his laws still explain the basis of human inheritance. Almost ninety years later, James Watson and Francis Crick announced their double-helix model of the DNA molecule. Then, positional cloning and the polymerase chain reaction (PCR) were introduced; more recently, almost 99% of the sequence of our genome was made public. The current period of time is known as the post-genomic era, due to the fact that researchers are not only obtaining the complete sequences of thousands of genomes, but are also searching for clues that may help understand the mechanisms that affect gene activation and deactivation, in which epigenetic factors are also involved. In medical domains, twins constitute a suitable group to study inherited disorders. Dizygotic or fraternal twins are produced by different egg and sperm cells, and even when these two fertilization events occur simultaneously, dizygotic twins share approximately the same percentage of genetic material than any pair of siblings, that is, around 50%. Some authors have suggested that the tendency for spontaneous dizygotic twinning could be attributed to a double ovulation which is genetically determined in an autosomal dominant manner. Monozygotic, as opposed to dizygotic twins, are produced by a single zygote whose cells are dissociated and originate two independent organisms; approximately a third of monozygotic twins are separated before the 5th day after fertilization, and the rest between the 5th and the 15th day. Most monozygotic twins are very similar; nevertheless, some few exceptions prove that in fact they actually do not have to be identical. Relatives of a person with a mental disorder tend to share traits associated with this disease, especially if the patient and the relative are monozygotic twins. However, important differences may be detected even between each pair of identical twins. Parameters such as concordance and heritability have shown that a monozygotic twin can develop an inherited disorder while his or her co-twin will always be disease-free. In addition to differences in susceptibility to inherited diseases, this kind of twins can display dissimilarities in somatic cell mutations (more overtly noticeable when ageing), their set of antibodies and T cell receptors, their number of mitochondrial DNA molecules, and chromosome X inactivation patterns in women, all of which are the main subject of many ongoing studies. A recent report shows that from 160 monozygotic twin pairs who were 3 to 74 years old, epigenetic patterns were identical early in life, but differences were more obvious at older ages, especially if twins were raised apart or if they had different medical history. Medical conditions, but also environmental factors such as pregnancy tobacco exposure, physical activity, and diet could contribute to differences in epigenetic patterns. It has been shown that epigenetic modifications (or epi-mutations) are more frequent than the ones that modify DNA sequence, so they are part of the fundamental causes of biological diversity, and they show how environment can modulate gene expression and contribute to our phenotype. Even when twin studies are sometimes considered purely genetic, they also give information about the influence of environmental factors. However, it is important to consider with caution the results from this type of studies. Heritability estimates are not unchangeable facts. They depend on the sample being analyzed, the genes involved in the specific sample, the characteristics of the environmental factors which members of this group were exposed to, and the precise moment the study was done. Epigenetics refers to changes that do not alter the DNA sequence but affect gene function due to chemical modifications which mainly occur in DNA cytosines and in chromatin-related histones. Epigenetic processes are covalent modifications which include the addition of functional groups (methyl, acetyl, phosphate, etc.) or proteins (ubiquitin, SUMO, etc.) to the DNA molecule or to associated proteins. These modifications contribute to the activation or inhibition of transcription, which leads to changes in messenger ARN expression that can ultimately influence the onset of disease. Pseudogenes are still being excluded while new genes are being confirmed in our genome sequence, but the current estimates indicate that each one of our nucleated cells contains almost 22000 genes (excluding mitochondrial DNA) which encode for polypeptides and more than 4,000 whose final product is RNA. Gene expression is partially controlled by DNA coiling around globular proteins called histones, which constitute a structure known as chromatin, a DNA-protein complex that represents the packaging of 3.25 billion base pairs of our genetic information. Physical and chemical chromatin modifications can also affect gene expression by changing DNA-protein interactions; in general terms, genes are inhibited when chromatin is packed and they are active when it is free. These dynamic states are controlled by epigenetic reversible modifications on DNA methylation or by changes in histones. It has been shown that subtle epigenetic differences between any two human beings are associated with dissimilar final chromatin remodeling, as well as expression/repression of genes.

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cDNA-AFLP analysis of seed germination in Arabidopsis thaliana identifies transposons and new genomic sequences

Gutiérrez de Diego, Juana; Rodríguez García, David; Rodríguez Lorenzo, José Luis; Grappin, Philippe; Cervantes, Emilio
2006-03-01

Digital.CSIC (Spain)

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Zea mays L. transglutaminase expression in Escherichia coli

Carvajal, Patricia; Villalobos, Enrique; Campos, Alexandre; Torné, J. Mª.; Barberà, Eduard; Santos, Mireya
2006-10-10

Digital.CSIC (Spain)

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The use of recombinant gilthead sea bream (Sparus aurata) growth hormone for radioiodination and standard preparation in radioimmunoassay

Martínez-Barberá, Juan P. ; Pendón, Carlos ; Martí-Palanca, Hilario ; Calduch-Giner, Josep A. ; Rodríguez Martínez, Ramón B.

6 pages. | A gilthead sea bream growth hormone (sbGH) obtained by cloning and expression of sbGH cDNA was used to develop a sensitive and specific radioimmunoassay (RIA). Iodination of recombinant sbGH (rsbGH) was performed by the classical Chloramine-T method. Specific antiserum, raised in rabbits,...

DRIVER (Spanish)

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The influence of 110-Ritcher and SO4 rootstocks on the performance of scions of Vitis vinifera L. cv. Albariño clones

Boso Alonso, Susana; Santiago Blanco, José Luis; Martínez Rodríguez, María del Carmen
2008-01-01

Digital.CSIC (Spain)

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The development and characterisation of a bacterial artificial chromosome library for Fragaria vesca

Bonet, Julio; López Girona, Elena; Sargent, Daniel J.; Muñoz Torres, Mónica C.; Monfort, Amparo; Abbott, Albert G.; Arús, Pere; Simpson, David W.; Davik, Jahn
2009-09-23

Digital.CSIC (Spain)

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TNFalpha-Polymorphismus bei Patienten mit Sepsis und Schilddrüsenkarzinomen

Rossbach, Christiane

Das Zytokin Tumornekrosefaktor a (TNFa) hat einen entscheidenden Anteil an der Entwicklung schwerer Komplikationen, wie septischer Schock und Multiorganversagen nach Entwicklung einer Sepsis. Eine Assoziation des TNF2-Allels mit einem erhöhten TNF a Spiegel und einer höheren Mortalitätsrate wurde i...

DRIVER (Spanish)

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Susceptibilidad clonal del álamo (Populus sp.) al ataque de Platypus mutatus en Buenos Aires, Argentina/ Cloning susceptibility of Poplar (Populus sp.) when attacked by Platypus mutatus in Buenos Aires, Argentina

Marquina, Jorge Luis; Marlats, Raúl; Núñez Cresto, Marcela
2006-01-01

Resumen en español El objetivo del trabajo fue caracterizar la incidencia de Platypus mutatus en varios clones de Populus de uso comercial, en plantaciones ubicadas en Palantelén, Alberti, Buenos Aires, Argentina (35° 40’ S, 60° 15’ O). Sobre rodales de 10 años de edad de Populus deltoides cvs. Catfish 2, Stoneville 62, Stoneville 66, Stoneville 71, y Populus x euroamericana cvs. I-214 y Conti 12, se comparó el número medio de galerías por ejemplar, y se evaluaron quebraduras ocasi (mas) onadas por la plaga y supervivencia de ejemplares quebrados. El ordenamiento de clones resultó variable según la perturbación analizada. Conti 12 y Stoneville 66 fueron los clones más afectados medidos por la presencia de galerías; I-214, Stoneville 71 y Stoneville 62, fueron los menos afectados. Catfish 2 y Stoneville 66, seguidos por Conti, se presentaron como más propensos al quiebre; I-214 no presentó quebraduras. Conti 12 fue el de menor supervivencia; Stoneville 71 no registró muertes, a pesar de las quebraduras; Stoneville 62, Stoneville 66, y Catfish 2, presentaron alta supervivencia de ejemplares quebrados Resumen en inglés The objective of the present work was to characterize the incidence of Platypus mutatus on clones of poplars from plantations located at Palantelén, Alberti, Buenos Aires, Argentina (35° 40’ S; 60° 15’ W). 10-year-old plantations of Populus deltoides cvs. Catfish 2, Stoneville 62, Stoneville 66, Stoneville 71 and Populus x euroamericana cvs. I-214 and Conti 12 were studied. The number of galleries by trunk, breaks caused by the insect and survival of broken trees wer (mas) e analyzed. Classifications of clones depending on the pest varied according to the analyzed perturbation. Conti 12 and Stoneville 66 were the most attacked clones measured by presence of galleries. I-214, Stoneville 71 and Stoneville 62 were the least attacked clones. Catfish 2 and Stoneville 66 were more easily broken; followed by Conti 12. I-214 did not have any broken plant. Conti 12 was the clone presenting the least survival of broken plants. Broken plants of Stoneville 71 did not die. Stoneville 62, Stoneville 66, and Catfish 2, presented high survival of broken trees

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Statistical analysis of post mortem DNA damage-derived miscoding lesions in Neandertal mitochondrial DNA

Vives, Sergi; Gilbert, M. Thomas; Arenas, Conchita; Gigli, Elena; Lao, Oscar; Lalueza-Fox, Carles
2008-07-10

Digital.CSIC (Spain)

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Side effects of antibiotics on genetic variability

Couce, Alejandro; Blázquez, Jesús
2009-01-01

Digital.CSIC (Spain)

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Sequential Quantum Cloning

Delgado, Y. ; Lamata, Lucas ; León García, Juan José ; Salgado, D. ; Solano, E.

4 pages, 1 table.-- PACS nrs.: 03.67.Mn; 03.67.Dd.-- ArXiv pre-print available at: http://arxiv.org/abs/quant-ph/0607105 | Not all unitary operations upon a set of qubits can be implemented by sequential interactions between each qubit and an ancillary system. We analyze the specific case of sequent...

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41

Sequential Quantum Cloning

Delgado, Y.; Lamata, Lucas; León García, Juan José; Salgado, D.; Solano, E.
2007-04-13

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42

Sequencing of 6.7 Mb of the melon genome using a BAC pooling strategy

González, Víctor M.; García-Mas, Jordi; Arús, Pere; Puigdomènech, Pere
2010-05-28

Digital.CSIC (Spain)

43

Sequence analysis of a genomic clone encoding a Zc2 protein from Zea mays W64 A

Reina, Manuel; Guillén, Pedro; Ponte, Inmaculada; Boronat, Albert; Palau, Jaume
1990-11-11

Digital.CSIC (Spain)

45

Selección del pollizo de Murcia como patrón de melocotonero

Cambra Ruíz de Velasco, Rafael; Tabuenca Abadía, María de la Concepción; Moreno Sánchez, María Ángeles
1990-07-01

Digital.CSIC (Spain)

48

Selección de híbridos interespecíficos para la obtención de nuevos patrones de albaricoquero

Arbeloa Matute, Arancha; Marín Velázquez, Juan Antonio; Daorden Álvarez, María Elena
2003-06-01

Digital.CSIC (Spain)

51

Seasonality in bacterial diversity in north-west Mediterranean coastal waters: assessment through clone libraries, fingerprinting and FISH

Alonso-Sáez, Laura; Balagué, Vanessa; Sà, Elisabet L.; Sánchez, Olga; González, José M.; Pinhassi, Jarone; Massana, Ramon; Penthaler, Jakob; Pedrós-Alió, Carlos; Gasol, Josep María
2007-01-24

Digital.CSIC (Spain)

53

Resistance of Eight Different Clones of the Grape Cultivar Albariño to Plasmopara viticola

Santiago Blanco, José Luis; Boso Alonso, Susana; Martínez Rodríguez, María del Carmen
2004-01-01

Digital.CSIC (Spain)

55

Reduced diversity and increased virulence-gene carriage in intestinal enterobacteria of coeliac children

Sánchez, Ester; Nadal, Inmaculada; Donat, Ester; Ribes-Koninckx, Carmen; Calabuig, Miguel; Sanz, Yolanda
2008-11-04

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56

Purification and Characterization of Two Different -L-Rhamnosidases,RhaA and RhaB, from Aspergillus aculeatus

Manzanares, Paloma; van den Broeck, Hetty C; Graaff, Leo H de; Visser, Jaap
2001-05-01

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57

Presentación diferencial de ARN mensajeros e identificación del gen selenocisteína liasa en células de carcinoma hepatocelular con expresión transitoria de la proteína core del virus de la hepatitis C/ Differential display of messenger RNA and identification of selenocysteine lyase gene in hepatocellular carcinoma cells transiently expressing hepatitis C virus Core protein

Yepes, Jesús Orlando; Gunturíz, María Luz; Henao, Luis Felipe; Navas, María Cristina; Balcázar, Norman; Gómez, Luis Alberto
2006-06-01

Resumen en español Introducción. El virus de la hepatitis C se asocia a diversas hepatopatías como hepatitis aguda, hepatitis crónica, esteatosis, cirrosis y carcinoma hepatocelular. Numerosos estudios han explorado mecanismos virales implicados en el establecimiento de la infección persistente y en las propiedades oncogénicas e inmunomoduladoras de la proteína core del virus de la hepatitis C. Las investigaciones orientadas a evaluar los cambios en la expresión de genes celulares en (mas) dógenos inducidos por la proteína core son importantes para identificar genes candidatos responsables de los mecanismos de patogenicidad del virus de la hepatitis C. Objetivos. Comparar perfiles de expresión e identificar genes celulares endógenos en la línea celular derivada de carcinoma hepatocelular humano, HepG2, con expresión transitoria de la proteína core del virus de la hepatitis C. Materiales y métodos. Se utilizó la técnica de presentación diferencial de ARN mensajero por RT-PCR en células HepG2 con y sin expresión transitoria de la proteína core del virus de la hepatitis C o de la proteína verde fluorescente, obtenidas previamente con el sistema de expresión del Semliki Forest Virus, mediante transducción de partículas recombinantes rSFVCore o rSFV-GFP. Resultados. Se observaron diferencias en las intensidades de las bandas de ARNm expresadas en células HepG2 transducidas con rSFV-Core comparadas con células sin transducir y trasducidas con rSFV-GFP. Un ARNm de 258 pb expresado diferencialmente en células HepG2 transducidas con rSFV-Core fue clonado e identificado como selenocisteína liasa. Conclusión. Los resultados confirman que la expresión de la proteína core del virus de la hepatitis C se asocia con cambios en la expresión de ARN mensajeros específicos, incluido al gen selenocisteina liasa, el cual puede estar involucrado en la fisiopatología del carcinoma hepatocelular. Resumen en inglés Introduction. Hepatitis C virus is associated with diverse liver diseases including acute and chronic hepatitis, steatosis, cirrhosis and hepatocellular carcinoma. Several studies have explored viral mechanisms involved in the establishment of persistent infection and oncogenic Hepatitis C virus. Expression assays of Hepatitis C virus core protein suggest that this protein has transforming and carcinogenic properties with multifunctional activities in host cells. Characte (mas) rization of expressed genes in cells expressing Core protein is important in order to identify candidate genes responsible for these pathogenic alterations. Objective. To compare and identify gene expression profiles in the human hepatocarcinoma derived cell line, HepG2, with transient expression of Hepatitis C virus Core protein. Materials and methods. We have used comparative PCR-mediated differential display of mRNA from HepG2 hepatocarcinoma with and without transient expression of HCV Core protein or green fluorescent protein, previously obtained using the Semliki Forest Virus-based expression, through transduction of recombinant particles, rSFV-Core and rSFV-GFP,respectively. Results. We observed differences in band intensities of mRNA in HepG2 cells transduced with rSFV-Core compared with those detected in cells without transduction, and transduced with rSFV-GFP. Cloning and sequencing of a gene fragment (258 bp) that was expressed differentially in HepG2 cells transduced with rSFV-Core, was identified as selenocystein lyase. Conclusion. The results confirm that HCV Core protein expressed in HepG2 is associated with specific changes in mRNA expression, including the gene for selenocystein lyase. This gene may be involved in the pathophysiology of hepatocellular carcinoma.

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59

Population Genetics of Vibrio vulnificus: Identification of Two Divisions and a Distinct Eel-Pathogenic Clone

Gutacker, Michaela; Conza, Nadine; Benagli, Cinzia; Pedroli, Ambra; Bernasconi, Marco Valerio; Permin, Lise; Aznar, Rosa; Piffaretti, Jean-Claude
2003-06-01

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60

Polymorphism and structure of the gene coding for the alpha 1 subunit of the Artemia franciscana Na/K-ATPase

García-Sáez, Alberto; Perona Abellán, Rosario; Sastre Garzón, Leandro
1997-01-15

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61

PERSPECTIVAS SANITARIAS PROMETEDORAS DEL CLONAJE HUMANO/ PROMISING HEALTH PERSPECTIVES FOR HUMAN CLONING/ PERSPECTIVAS SANITARIAS PROMETEDORAS DA CLONAGEM HUMANO

Schramm, Fermín Rolando
2003-01-01

Resumen en portugués Para avaliar corretamente as promessas da clonagem humana, tanto as terapêuticas como as reprodutivas, podese partir de dois pontos de vista pertinentes: o ponto de vista sanitário e o ponto de vista da bioética laica. O ponto de vista sanitário, graças a políticas públicas de prevenção e promoção da saúde adequadas às condições objetivas existentes, visa proteger a população humana do adoecimento não necessário. A bioética laica procura entender a eti (mas) cidade da clonagem através da análise racional e imparcial das implicações morais de seu uso e, se este for considerado legítimo, propôlo como meio para proteger a saúde humana. Apesar de ter aparentemente funções muito diferentes, tanto a clonagem terapêutica como a reprodutiva buscam responder ao desafio do sofrimento humano não necessário: a clonagem terapêutica, graças à técnica que utiliza célulastronco totipotentes, busca produzir órgãos e tecidos para eliminar o sofrimento evitável; a clonagem reprodutiva pode também eliminar formas de sofrimento humano evitáveis e pode, portanto, ser considerada um caso particular da clonagem terapêutica Resumen en español Para evaluar las promesas del clonaje humano -tanto las terapéuticas como las reproductivas- se puede partir de dos puntos de vista pertinentes: el sanitario y el de la bioética laica. El punto de vista sanitario, a través de políticas públicas de prevención y de promoción de salud adecuadas a las condiciones objetivas existentes, busca proteger la población humana de enfermedades innecesarias. El clonaje puede, en principio, ser parte de una política sanitaria, (mas) con la condición de que sean respetados los derechos fundamentales del individuo -en particular el derecho a la autodeterminación personal-, los derechos sociales -como la justicia distributiva- y los derechos de tercera generación -que incluyen medidas protectoras de bioseguridad. La bioética laica busca entender la eticidad del clonaje por medio del análisis racional e imparcial de las implicaciones morales de su uso y, si se considera legítimo, proponerlo como medio para proteger la salud humana. A pesar de sus funciones aparentemente muy diferentes, tanto el clonaje terapéutico como el reproductivo buscan responder al desafío del sufrimiento humano innecesario: el clonaje terapéutico, gracias a la técnica que utiliza célulasmadre o estaminales totipotentes, busca producir órganos y tejidos para eliminar el sufrimiento evitable; el clonaje reproductivo puede también paliar formas de sufrimiento humano innecesario y puede, por ende, ser considerado un caso particular del terapéutico Resumen en inglés To evaluate the promises of human cloning, both therapeutic and reproductive, we can start from two pertinent points of view: health and secular bioethics. Under the point of view of health, though public prevention and health promotion policies, adequate to objective existing conditions, they try to protect human population from unnecessary diseases. Secular bioethics seeks to understand the ethics of cloning through rational analysis, free from the moral implications of (mas) its use; and if the conclusion is that it is legitimate, to propose it like a tool to protect human health. In spite of their apparently very different functions, both therapeutic cloning and reproductive cloning seek to respond to the challenge of unnecessary human suffering: therapeutic cloning, thanks to the technique that uses totipotent stem cells, seek to grow organs and tissues to eliminate avoidable suffering; reproductive cloning may also diminish forms of unnecessary human suffering and if can, therefore, to be considered a particular case of therapeutic approach

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62

Overproduction in Escherichia coli and Characterization of a Soybean Ferric Leghemoglobin Reductase

Ji, L.; Becana Ausejo, Manuel; Sarath, G.; Shearman, L.; Klucas, R. V.
1994-09-01

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64

Optimización del método SCAR (Sequence Characterized Amplified Region) que favorece el aislamiento de loci polimórficos para estudios filogenéticos en taxa cercanamente relacionados/ Optimization to the SCAR (Sequence Characterized Amplified Region) favors the isolation of polymorphic loci for phylogenetic studies in closely related taxa

González, Dolores
2010-04-01

Resumen en español Las secuencias génicas han contribuido enormemente a los estudios filogenéticos en plantas. Sin embargo, una desventaja importante en las secuencias de varios loci es su baja resolución filogenética para resolver las relaciones de taxa cercanamente relacionados. En este trabajo se propone una modificación al método SCAR que consiste en: a) digerir fragmentos polimórficos generados con marcadores RAPD en lugar de clonarlos, b) secuenciar los fragmentos digeridos y c (mas) ) alinear las secuencias para diseñar oligos específicos. Esta estrategia permitió comparar de manera más rápida y sencilla regiones variables útiles para los análisis filogenéticos en rangos taxonómicos menos inclusivos. Resumen en inglés DNA sequence data have made a tremendous contribution to plant phylogenetics. Nonetheless, a notable shortcoming of several loci has been the poor phylogenetic resolution of relationships among closely related species. In this study a modification to the SCAR method is proposed that consists of: a) digestion of polymorphic RAPD fragments instead of cloning them, b) sequencing of the digested fragments, and c) alignment of sequences for designing specific primers. This simple approach allowed us to find variable DNA loci suitable for phylogenetic analysis at lower taxonomic ranks.

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65

Obtención de clones recombinantes que expresan las proteínas prM-E-NS1 del virus dengue serotipo 2/ Obtaining recombinant clones expressing dengue virus serotype 2 prM-E-NS1 proteins

Muné Jiménez, Mayra; Harn, Donald; Soto, Yudira; Ramírez, Rosa; Alfonso, Melkis; D´dara, Akran
2008-04-01

Resumen en español OBJETIVO: obtener clones recombinantes que expresen diferentes proteínas del virus dengue 2 en un vector de expresión en células eucariotas. MÉTODOS: se realizó el clonaje de los genes prM, envoltura (E) y 65 aminoácidos (aa) de la proteína NS1 del virus dengue serotipo 2 (cepa Nueva Guinea C) en un vector de expresión en células eucariotas pcDNA (3.1). La obtención de los genes correspondientes a la zona prM/E/NS1 y prM/E truncada en 100 aa se realizó mediante (mas) reacción en cadena de la polimerasa (RCP). La detección de los posibles clones recombinantes se llevó a cabo mediante las técnicas de RCP, análisis de restricción enzimática y secuenciación nucleotídica. Se realizó la transfección de la línea celular CHO con cada plásmido recombinante. Para determinar la expresión transciente de los genes clonados se empleó la técnica de inmunofluorescencia indirecta (IFI) y trascripción reversa-RCP (TR-RCP). RESULTADOS: se obtuvieron bandas de 2 202 y 1 600 pares de bases (pb), respectivamente. Se estudiaron 20 posibles colonias recombinantes, de las cuales, 7 resultaron positivas para prM-E-NS1 y 5 para prM/E truncada. Se obtuvieron células fluorescentes 48 h después de transfectadas, además una RCP positiva a ese mismo tiempo, lo que indicó la presencia de las proteínas en las células transfectadas. CONCLUSIONES: el vector empleado fue eficiente para el clonaje y la expresión de las proteínas seleccionadas, por lo que las construcciones genéticas obtenidas pudieran ser evaluadas en animales como posibles candidatos vacunales para la obtención de una vacuna de ADN contra el dengue. Resumen en inglés OBJECTIVE: To obtain recombinant clones expressing different dengue virus 2 proteins in an expression vector of eukaryote cells. METHODS: Cloning of prM genes, E envelope and 65 amino-acids (aa) of dengue virus serotype 2 NS1 proteins (Nueva Guinea strain) in an expression vector of pcDNA eukaryote cells (3.1). The prM/E/NS1 zone and the truncated prM/E zone at 100 aa genes were obtained by polymerase chain reaction (PCR). Possible recombinant clones were detected using P (mas) CR, enzyme restriction analysis and nucleotide sequencing. Transfection of the CHO cell line with each recombinant plasmid was performed. Indirect immunofluorescence and reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) determined the transient expression of cloned genes. RESULTS: Bands of 2 202 and 1 600 base pairs (bp) respectively were obtained. Twenty possible recombinant colonies were studied, 7 of them were pr-E-NSI-positive and 5 truncated prM/E-positive. Fluorescent cells emerged 48 hours after being transfected in addition to positive PCR, all of which indicated that the studied proteins were present in transfected cells. CONCLUSIONS: The used vector proved to be efficient for cloning and expression of the selected proteins; therefore, the obtained genetic constructions could be evaluated in animals as likely vaccinal candidates for a dengue virus DNA vaccine.

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66

Nucleotide and predicted amino acid sequences of cloned human and mouse preprocathepsin B cDNAs

Chan, Shu Jin; San Segundo, Blanca; McCormick, Mary Beth; Steiner, Donald F.
1986-10-01

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67

Novelty and spatio-temporal heterogeneity in the bacterial diversity of hypersaline Lake Tebenquiche (Salar de Atacama)

Demergasso, Cecilia; Escudero, Lorena; Casamayor, Emilio O.; Chong, Guillermo; Balagué, Vanessa; Pedrós-Alió, Carlos
2008-03-18

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68

Novel nickel resistance genes from the rhizosphere metagenome of plants adapted to acid mine drainage

Mirete, Salvador; González de Figueras, Carolina; González Pastor, José Eduardo
2007-08-03

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69

Normalización de un sistema de reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real para la cuantificación del herpesvirus humano 8/ Standardization of a real-time polymerase chain reaction system for quantification of human herpesvirus 8

Martínez Rodríguez, Pedro Ariel; Muné Jiménez, Mayra; Soto Brito, Yudira; Ramírez Bartutis, Rosa; Correa Sierra, Consuelo; Alfonso Castellanos, Melkis; Kourí Cardellá, Vivian
2009-08-01

Resumen en español OBJETIVO: normalizar un sistema de reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real para determinar la carga viral del herpesvirus humano 8, en diferentes muestras clínicas de pacientes en los que se sospeche la infección por este agente. MÉTODOS: se evaluaron 3 de los métodos reportados internacionalmente para obtener ADN estándar en la construcción de curvas externas estándar, que permiten determinar el número de copias de ADN diana en la muestra problema. RE (mas) SULTADOS: se obtuvieron 3 ADN estándar a partir del clonaje de un fragmento del gen ORF26 del herpesvirus humano 8 en un vector (ADN plasmídico), con la utilización de productos purificados de reacción en cadena de la polimerasa y el empleo de ADN genómico de la línea celular BCBL. Se pudieron construir las curvas patrón a partir de cada uno de los ADN estándar obtenidos, los que mostraron una fuerte correlación lineal (r= -1) y valores muy bajos de error a lo largo de 6 magnitudes de concentración de ADN diana. El límite inferior de detección a partir del ADN plasmídico y de los productos de reacción en cadena de la polimerasa fue de hasta 100 copias, mientras que con el ADN genómico fue de hasta 10 copias; este último sistema resultó el más sensible. CONCLUSIONES: la reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real normalizada a partir de los 3 ADN estándar probó ser un sistema rápido, específico y altamente sensible que permitirá un mejor diagnóstico y además desarrollar estudios sobre la patogenia de la infección por el herpesvirus humano 8 en Cuba. Resumen en inglés OBJECTIVE: to standardize a real-time polymerase chain reaction system to determine the human herpes virus 8 viral load in several samples from patients suspected of this type of infection. METHODS: three internationally known methods were evaluated to obtain standard DNA in standard external curve constructions, which allow determining the number of target DNA copies in the suspected samples. RESULTS: three standards DNA were obtained from cloning ORF26 gene fragment of (mas) human herpesvirus 8 in a vector (plasmid DNA), with the use of purified polymerase chain reaction products and of genomic DNA of BCBL cell lines. The pattern curves were constructed on the basis of each of the resulting standard DNA, which showed strong linear correlation (r= -1) and very low error values throughout 6 target DNA concentrations. The lower detection limit based on plasmid DNA and the polymerase chain reaction products was 100 copies, whereas that obtained with genomic DNA reached up to 10 copies; this last system turned to be the most susceptible. CONCLUSIONS: real-time polymerase chain reaction system, standardized for the three standard DNA proved to be a rapid, specific and highly sensitive system for better diagnosis, and for the development of studies on the pathogenesis of human herpesvirus 8 infection in Cuba.

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70

Necesidades de frío invernal en almendro

Tabuenca Abadía, María de la Concepción
1972-01-01

Digital.CSIC (Spain)

71

Necesidades de frío invernal de variedades de melocotonero. II

Tabuenca Abadía, María de la Concepción
1972-01-01

Digital.CSIC (Spain)

73

Multilocus sequence analysis for assessment of the biogeography and evolutionary genetics of four Bradyrhizobium species that nodulate soybeans on the asiatic continent

Vinuesa, P; Rojas-Jiménez, K.; Contreras-Moreira, Bruno; Mahna, S.K.; Prasad, B.N.; Moe, H.; Selvaraju, S.B.; Thierfelder, H.; Werner, D.
2008-01-01

Digital.CSIC (Spain)

74

Molecular cloning of disintegrins from Cerastes vipera and Macrovipera lebetina transmediterranea venom gland cDNA libraries: insight into the evolution of the snake venom integrin-inhibition system

Sanz, Libia ; Bazaa, Amine ; Marrakchi, Naziha ; Pérez, Alicia ; Chenik, Mehdi ; Bel Lasfer, Zakaria ; El Ayeb, Mohamed

Copyright © by Portland Press. The final version of record is available at http://www.biochemj.org/bj/default.htm | We report the cloning and sequence analysis of Cerastes vipera and Macrovipera lebetina transmediterranea cDNAs coding for short non-RGD (Arg-Gly-Asp) disintegrins and for dimeric disi...

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Molecular cloning of disintegrins from Cerastes vipera and Macrovipera lebetina transmediterranea venom gland cDNA libraries: insight into the evolution of the snake venom integrin-inhibition system

Sanz, Libia; Bazaa, Amine; Marrakchi, Naziha; Pérez, Alicia; Chenik, Mehdi; Bel Lasfer, Zakaria; El Ayeb, Mohamed; Calvete, Juan J.
2006-03-28

Digital.CSIC (Spain)

76

Molecular cloning of Senegalese sole (Solea senegalensis) follicle-stimulating hormone and luteinizing hormone subunits and expression pattern during spermatogenesis

Cerdà, Joan; Chauvigné, François; Agulleiro, María J.; Marin, Elena; Halm, Silke; Martínez-Rodríguez, Gonzalo; Prat, Francisco
2008-05-01

Digital.CSIC (Spain)

77
78

Molecular cloning and pattern of expression of an alpha-L-fucosidase gene from pea seedlings

Augur, Christopher; Stiefel, Virginia; Darvin, Alan; Albersheim, Peter; Puigdomènech, Pere
1995-10-01

Digital.CSIC (Spain)

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Molecular cloning and expression in different microbes of the DNA encoding Pseudomonas putida U phenylacetyl-CoA ligase. Use of this gene to improve the rate of benzylpenicillin biosynthesis in Penicillium chrysogenum

Miñambres Rodríguez, Baltasar ; Martínez Blanco, Honorina ; Olivera, Elías R. ; García, Belén ; Díez, Bruno

8 pages, 5 figures, 3 tables.-- PMID: 8969218 [PubMed]. | The gene encoding phenylacetyl-CoA ligase (pcl), the first enzyme of the pathway involved in the aerobic catabolism of phenylacetic acid in Pseudomonas putida U, has been cloned, sequenced, and expressed in two different microbes. In both, th...

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Molecular cloning and expression in different microbes of the DNA encoding Pseudomonas putida U phenylacetyl-CoA ligase. Use of this gene to improve the rate of benzylpenicillin biosynthesis in Penicillium chrysogenum

Miñambres Rodríguez, Baltasar; Martínez Blanco, Honorina; Olivera, Elías R.; García, Belén; Díez, Bruno; Barredo, José L.; Moreno, Miguel A.; Schleissner, Carmen; Salto, Francisco; Luengo, José M.
1996-01-01

Digital.CSIC (Spain)

81

Molecular characterization of the phenylacetic acid catabolic pathway in Pseudomonas putida U: the phenylacetyl-CoA catabolon

Olivera, Elías R. ; Miñambres Rodríguez, Baltasar ; García, Belén ; Muñiz, Carmen ; Moreno, Miguel A. ; Ferrández, Abel

6 pages, 7 figures, 1 table.-- PMID: 9600981 [PubMed] | Fourteen different genes included in a DNA fragment of 18 kb are involved in the aerobic degradation of phenylacetic acid by Pseudomonas putida U. This catabolic pathway appears to be organized in three contiguous operons that contain the follo...

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82

Molecular characterization of Miraflores peach variety and relatives using SSRs

Bouhadida, Mariem; Casas Cendoya, Ana María; Moreno Sánchez, María Ángeles; Gogorcena Aoiz, Yolanda
2007-01-04

Digital.CSIC (Spain)

83

Molecular characterization and genetic diversity of Prunus rootstocks

Bouhadida, Mariem; Casas Cendoya, Ana María; Gonzalo Pascual, María José; Arús, Pere; Moreno Sánchez, María Ángeles; Gogorcena Aoiz, Yolanda
2009-04-01

Digital.CSIC (Spain)

84

Molecular approach to determine contributions of the protist community to particle flux

Amacher, Jessica; Neuer, Susanne; Anderson, Ian; Massana, Ramon
2009-12-01

Digital.CSIC (Spain)

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Molecular Cloning, Functional Characterization, and Subcellular Localization of Soybean Nodule Dihydrolipoamide Reductase

Morán, José F. ; Sun, Z. H. ; Sarath, G. ; Arredondo-Peter, R. ; James, E. K. ; Becana Ausejo, Manuel ; Klucas, R. V.

This is journal paper no. 12,643, Agricultural Research Division, University of Nebraska. | Nodule ferric leghemoglobin reductase (FLbR) and leaf dihydrolipoamide reductase (DLDH) belong to the same family of pyridine nucleotide-disulfide oxidoreductases. We report here the cloning, expression, and ...

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86

Molecular Cloning, Functional Characterization, and Subcellular Localization of Soybean Nodule Dihydrolipoamide Reductase

Morán, José F.; Sun, Z. H.; Sarath, G.; Arredondo-Peter, R.; James, E. K.; Becana Ausejo, Manuel; Klucas, R. V.
2002-01-01

Digital.CSIC (Spain)

88
89

Metagenomic retrieval of a ribosomal DNA repeat array from an uncultured marine alveolate

Massana, Ramon; Karniol, Baruch; Pommier, Thomas; Bodaker, Idan; Béjà, Oded
2008-02-03

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90

Linkage of 35S and 5S rRNA genes in Artemisia (family Asteraceae): first evidence from angiosperms

Garcia Giménez, Sònia; Lim, K.Y.; Chester, M.; Garnatje, Teresa; Pellicer, J.; Vallès, Joan; Leitch, A.R.; Kovaric, Ales
2009-01-01

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92

La región intergénica del gen H2A apoya las subpoblaciones KP1(-) y KP1(+) de Trypanosoma rangeli/ The intergenic region of the histone h2a gene supports two major lineages of Trypanosoma rangeli

Suárez, Brian Alejandro; Cuervo, Claudia Liliana; Puerta, Concepción Judith
2007-09-01

Resumen en español Introducción. Con base en la amplificación del ADN de los minicírculos del cinetoplasto y de los genes miniexón, Trypanosoma rangeli ha sido clasificado en las subpoblaciones KP1(-) y KP1(+). Objetivo. Comparar la región intergénica de los genes H2A entre cepas KP1(+) y KP1(-) de T. rangeli, con el fin de aportar evidencias a dicha división. Materiales y métodos. Se amplificó, clonó y determinó la secuencia de la región intergénica de los genes h2a de las cep (mas) as KP1(-) Tre y 5048 y de la cepa Choachí KP1(+). Dichas secuencias, junto con las reportadas para las cepas C23 KP1(-) y H14 KP1(+), fueron utilizadas para la reconstrucción de árboles filogenéticos basados en los métodos de neighbor-joining, máxima parsimonia y máxima verosimilitud, utilizando la cepa Y de Trypanosoma cruzi como grupo raíz externo. Resultados. Se evidenció heterogeneidad intraespecífica en el tamaño de la región estudiada, soportados por valores bootstrap de 85% (neighbor-joining), 66% (máxima parsimonia) y 57% (máxima verosimilitud), los resultados indican que las cepas KP1(-) se agrupan aparte, claramente diferenciadas de las cepas KP1(+), las cuales presentan una mayor heterogeneidad intraespecífica en tamaño y secuencia. Además, se encontró mayor proximidad filogenética entre T. rangeli y T. cruzi que entre T. rangeli y Trypanosoma brucei. Conclusiones. Los análisis filogenéticos basados en la región intergénica de los genes h2a de las cepas estudiadas apoyan la división de T. rangeli en las subpoblaciones KP1(-) y KP1(+). Sin embargo, se requiere estudiar un mayor número de cepas para confirmar estos hallazgos. Resumen en inglés Introduction. Trypanosoma rangeli has been classified in the KP1(+) and KP1(-) subpopulations, based on the mini-exon gene and kinetoplast DNA minicircle amplification profiles. Objective. The intergenic region of the histone h2a gene was compared between KP1(+) and KP1(-) strains of T. rangeli to substantiate this classification. Materials and methods. The amplification, cloning and sequencing of the h2a gene intergenic region was undertaken for the Tre and 5048 KP1(-) s (mas) trains for comparison with the Choachí KP1(+) strain. These sequences, along with those previously reported for the KP1 (+) and KP1 (-) H14 and C23 strains, were used to reconstruct phylogenetic trees based on the "neighbor-joining", maximum parsimony and maximum likelihood methods. The Y strain of Trypanosoma cruzi was chosen as the outgroup. Results. Intra-specific heterogeneity was observed in the size of the gene region under study, supported by bootstarp values of 85% (neighbor-joining), 66% (maximum parsimony) and 57% (maximum likelihood). The KP1(-) strains were grouped apart, clearly differentiated from the KP1(+) strains. The latter demonstrated a higher intra-specific heterogeneity, both in sequence length and composition. In addition, a closer phylogenetic relationship between T. rangeli and T. cruzi was found to be more closely related to one another than to T. rangeli and Trypanosoma brucei. Conclusion. Phylogenetic analyses of analyzed strains based on the intergenic region of the h2a genes supported the T. rangeli grouping in two major subpopulations known as KP1(+) and KP1(-) strains. However, a higher number of strains are needed to confirm this finding.

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94

Isolation, cloning and structural characterisation of boophilin, a multifunctional kunitz-type proteinase inhibitor from the cattle tick

Macedo-Ribeiro, Sandra ; Almeida, Carla ; Calisto, Barbara M. ; Friedrich, Thomas ; Mentele, Reinhard ; Stürzebecher, Jörg

Inhibitors of coagulation factors from blood-feeding animals display a wide variety of structural motifs and inhibition mechanisms. We have isolated a novel inhibitor from the cattle tick Boophilus microplus, one of the most widespread parasites of farm animals. The inhibitor, which we have termed b...

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95

Isolation and characterization of promoters from the Lactobacillus casei temperate bacteriophage A2

García Suárez, María Pilar; Bascarán, Victoria; Rodríguez González, Ana; Suárez Fernández, Juan Evaristo
1997-11-01

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96

Isolation and characterization of casein kinase I from Dictyostelium discoideum

Moreno-Bueno, Gema; Calés Bourdet, Carmela; Behrens, M. Margarita; Fernández-Renart, Margarita
2000-07-15

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97

Isolation and characterization of (gamma, delta) CD4+ T Cell clones derived from human fetal liver cells

Aparicio, Pedro; Alonso, José M.; Toribio, María Luisa; Marcos, Miguel A. R.; Pezzi, Luis; Martínez-Alonso, Carlos
1989-09-01

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98

Integrative food-grade expression system based on the lactose regulon of Lactobacillus casei

Gosalbes, María José; Esteban, Carlos David; Galán Asuncion, José Luis; Pérez Martínez, Gaspar
2000-11-01

Digital.CSIC (Spain)

99

Influence of primer mismatch and microdiversity on DGGE results: a case study with SAR 11

Sánchez, Olga; Gasol, Josep M.; Balagué, Vanessa; Massana, Ramon; Mas Gordi, Jordi; Pedrós-Alió, Carlos
2009-02-18

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100

Infectious clones.

Enjuanes Sánchez, Luis
2001-06-07

Digital.CSIC (Spain)

101

Identification of dynorphin a from zebrafish: A comparative study with mammalian dynorphin A

González-Núñez, V. ; Marrón Fernández de Velasco, E. ; Arsequell, Gemma ; Valencia Parera, Gregorio ; Rodríguez, R. E.

10 pages, 4 figures.-- PMID: 17069980 [PubMed].-- Available online Oct 25, 2006. | We report the cloning and molecular characterization of the zfPDYN. The complete open reading frame for this propeptide is comprised in two exons that are localized onchromosome 23. zfPDYN cDNA codes for a polypeptid...

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Identification of dynorphin a from zebrafish: A comparative study with mammalian dynorphin A

González-Nuñez, V.; Marrón Fernández de Velasco, E.; Arsequell, Gemma; Valencia Parera, Gregorio; Rodríguez, R. E.
2007-06-19

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Identificación de defectos moleculares en las enfermedades hepáticas.: Ejemplos recientes/ Identification of molecular defects in liver diseases: Recent advances

Arrese J, Marco
1999-09-01

Resumen en inglés Recent molecular studies have resulted in the identification of genetic alterations underlying several hereditary disorders of the liver. Cloning of disease genes are increasing our understanding of the basic defects in liver diseases. This review focuses on selected inherited liver diseases such as hyperbilirubinemic syndromes, hemochromatosis, Wilson disease and genetic cholestatic syndromes and illustrate the knowledge gained on these disorders from molecular studies. (mas) Potential implications of the identification of disease genes such as practical applications for diagnosis, information on prognosis and the possibility to design new therapies are discussed

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INMUNOGENICIDAD DE LA PROTEÍNA RECOMBINANTE ASP1R DE Ancylostoma caninum EN UN MODELO MURINO/ IMMUNOGENICITY OF THE PROTEIN RECOMBINANT ASP1R OF A caninum IN A MURINE MODEL

Giraldo G, María; Castaño O, Jhon C
2009-08-01

Resumen en español Objetivo. Construir un plásmido recombinante que exprese la proteína ASP1r de Ancylostoma caninum y evaluar su capacidad inmunogénica en un modelo murino. Materiales y métodos. Se realizó extracción de ARN de parásitos adultos de Ancylostoma caninum, se amplificó por RT-PCR el gen de la proteína ASP1. Este gen fue insertado en el vector pcDNA3. El inserto fue digerido con Bamh1 y EcoR1 y clonado direccionalmente. Posteriormente, se llevó a cabo transformación y (mas) selección de las células de E. coli DH5a competentes con el producto de la ligación. Se realizó un tamizaje por PCR confirmando la presencia del gen ASP1. El vector pcDNA3-ASP1 fue administrado vía intraglandular en la parotida e intramuscular en ratones Balb/c. En estos animales se les realizó determinación de anticuerpos en suero y saliva mediante las técnicas de ELISA e inmunohistoquímica. Resultados. Se determinó que el plásmido pcDNA3-ASP1 fue incorporado y expresado células E. coli DH5a. Este plásmido recombinante indujo la producción de anticuerpos Anti-ASP1 específicos en ratones Balb/c. Conclusiones. Se logró demostrar que la utilización de pcDNA3-ASP1 no produjo reacciones desfavorables en ratones Balb/c, además indujo respuesta humoral contra la proteína pcDNA3-ASP1 de excreción/secreción de Ancylostoma caninum en ratones. Resumen en inglés Objective. To construct a recombinant plasmid expressing the ASP1r protein of A. caninum and evaluate its immunogenic capacity in a murine model. Materials and methods. RNA of adults of Ancylostoma caninum was amplified by reverse transcription polymerase chain reaction. The ASP1 protein gene was inserted into the pcDNA3 vector. Plasmid was digested with Bamh1 and EcoR1 and cloning was performed directionally. Later a transformation and selection of E. coli DH5a cell comp (mas) etent with the product for the ligation was made. Then, a screening by PCR was carried out to confirm the presence of ASP1 gene. PcDNA3-ASP1 was inoculated by intraglandular parotide and intramuscular route in Balb/c mice. Antibodies in these animals was measured in serum and saliva by ELISA and immunochemistry. Results. PcDNA3-ASP1 was incorporated and expressed in E. coli DH5a cell. This recombinant plásmid was able to produce antibodies anti-ASP1 specific in Balb/c mice. Discussion. It was possible to demonstrate that using of pcDNA3-ASP1 did not display reactogenicity and it did not produce unfavorable reactions, futhermore, it induced a humoral response against the excreción/secretion protein of Ancylostoma caninum in mice.

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Glutathione and Homoglutathione Synthetases of Legume Nodules. Cloning, Expression, and Subcellular Localization

Morán, José F. ; Iturbe-Ormaetxe, I. ; Matamoros Galindo, Manuel Antonio ; Rubio Luna, Mari Carmen ; Clemente, María Rebeca

The thiol tripeptides glutathione (GSH) and homoglutathione (hGSH) are very abundant in legume root nodules and their synthesis is catalyzed by the enzymes -glutamylcysteine synthetase (ECS), GSH synthetase (GSHS), and hGSH synthetase (hGSHS). As an essential step to elucidate the role of thiols in ...

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Genetics of lactic acid bacteria with special reference to lactococci

Rodríguez González, Ana ; Ramón, Daniel

Lactic acid bacteria play an important role in the manufacture of fermented foods. Genetic studies have made these microorganisms, particularly lactococci, accessible to genetic manipulation. The instability of key metabolic traits of lactococci has been explained by the presence of plasmid DNA spec...

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108

Genetics of lactic acid bacteria with special reference to lactococci

Rodríguez González, Ana; Ramón Vidal, Daniel
1990-12-01

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110

Genetic diversity of Prunus rootstocks analyzed by RAPD markers

Casas Cendoya, Ana María; Igartua Arregui, Ernesto; Moreno Sánchez, María Ángeles
1999-11-01

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111

Genetic diversity and habitats of two enigmatic marine alveolate lineages

Groisillier, Agnès; Massana, Ramon; Valentin, Klaus; Vaulot, Daniel; Guillou, Laure
2006-03-29

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112

Genetic dissection of a stem cell niche: the case of the Drosophila ovary

Bolívar, Jorge; Pearson, John; López-Onieva, Lourdes; González-Reyes, Acaimo
2006-11-01

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113

Generation of a BAC-based physical map of the melon genome

González, Víctor M.; García-Mas, Jordi; Arús, Pere; Puigdomènech, Pere
2010-05-28

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114

Gene expression in developing zea mays embryos: regulation by Abscisic acid of a highly phosphorylated 23- to 25-kD group of proteins

Goday, Adela; Sánchez-Martínez, Demetrio; Gómez, Jordi; Puigdomènech, Pere; Pagès, Montserrat
1988-11-01

Digital.CSIC (Spain)

116

From a Short Amino Acidic Sequence to the Complete Gene

Miñambres Rodríguez, Baltasar; Olivera, Elías R.; García, Belén; Naharro, Germán; Luengo, José M.
2000-01-01

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117

Fibrosis Quística: mutaciones más frecuentes en la población mundial/ Cystic fibrosis: more frequent mutations in world population

Collazo Mesa, Teresa
2008-06-01

Resumen en español La Fibrosis Quística (FQ) es la enfermedad autosómica recesiva más común en la población Caucásica, con una incidencia en un rango entre uno en 1700 y uno en 7700. Desde que fue clonado el gen regulador de transmembrana de la FQ (CFTR) e identificada la mutación principal F508del, más de 1300 mutaciones han sido reportadas. El número y la frecuencia de estas mutaciones varían de acuerdo al origen étnico y localización geográfica de la población Resumen en inglés Cystic fibrosis (FC) is the autosomal recessive disease commonest in Caucasian population; its incidence is in a rank between 1 in 1700, and 1 in 7700. Since its cloning, regulator gen of FQ (CFTR) transmembrane and the identification of main F508del mutation, more of 1 300 mutations have benn reported. Number and frequency of these mutations hange according to ethnic origin, and geographical localization of population

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118

Few mutations in the 5' leader region mediate fitness recovery of debilitated human immunodeficiency type 1 viruses

Yuste, Eloísa; Bordería, Antonio V.; Domingo, Esteban; López-Galíndez, Cecilio
2005-01-01

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120

Expression of a maize cell wall hydroxyproline-rich glycoprotein gene in early leaf and root vascular differentiation

Stiefel, Virginia; Ruiz-Ávila, Luis; Raz, Regina; Vallés, María Pilar; Gómez, Jordi; Pagès, Montserrat; Martínez-Izquierdo, José Antonio; Ludevid, M. Dolors; Langdale, Jane A.; Nelson, Timothy; Puigdomènech, Pere
1990-08-01

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121

Expression and evolution of Δ(9) and Δ(11) desaturase genes in the moth Spodoptera littoralis

Rodríguez Ropero, Sergio; Hao, Guixia; Liu, Weitian; Piña, Benjamín; Rooney, Alejandro P.; Camps Díez, Francisco; Roelofs, Wendell L.; Fabriàs, Gemma
2004-10-20

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122

Existence of a True Phosphofructokinase in Bacillus sphaericus: Cloning and Sequencing of the pfk Gene

Alice, Alejandro F ; Pérez Martínez, Gaspar ; Sánchez Rivas, Carmen

Some strains of Bacillus sphaericus are entomopathogenic to mosquito larvae, which transmit diseases, such as filariasis and malaria, affecting millions of people worldwide. This species is unable to use hexoses and pentoses as unique carbon sources, which was proposed to be due to the lack of glyco...

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Existence of a True Phosphofructokinase in Bacillus sphaericus: Cloning and Sequencing of the pfk Gene

Alice, Alejandro F; Pérez Martínez, Gaspar; Sánchez Rivas, Carmen
2002-12-01

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124

Exclusion of four candidate genes, KHDRBS2, PTP4A1, KIAA1411 and OGFRL1, as causative of autosomal recessive retinitis pigmentosa

Abd El-Aziz, MM; Patel, RJ; El-Ashry, MF; Barragan, I; Marcos, I; Borrego, S; Antinolo, G; Bhattacharya, SS

To identify the disease gene in 6 Spanish families with autosomal recessive retinitis pigmentosa linked to the RP25 locus, mutation screening of 4 candidate genes, KHDRBS2, PTP4A1, KIAA1411 and OGFRL1, was undertaken based on their expression or functional relevance to the retina. Twenty-six single ...

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Evaluación y mejoramiento del ensayo Inmunoenzimático (Elisa) para el diagnóstico de la Anaplasmosis Bovina, utilizando la Msp5 Recombinante como antígeno.

Eleizalde, Mariana; Caballero, Henry; Reyna-Bello, Armando
2007-08-01

Resumen en español La anaplasmosis, es una enfermedad producida por la bacteria Anaplasma marginale que está ampliamente distribuida en Venezuela, originando efectos negativos en la salud y productividad de los rebaños bovinos. Hasta el presente se han caracterizado 6 proteínas mayoritarias de superficie (MSP) de esta bacteria, de las cuales la MSP5, ha sido señalada como un excelente polipéptido para el diagnóstico de la enfermedad, debido a que esta proteína es altamente conservada (mas) e inmunogénica. Esto ha motivado su clonamiento e inserción en un plásmido de E. coli, para usarla purificada como antígeno en ensayos inmunoenzimáticos. Sin embargo, estudios posteriores, indican que proteínas de E. coli recombinante que eluyen conjuntamente con la MSP5 durante el proceso de purificación, interfieren en el ELISA originando falsos positivos. En el presente trabajo se estandarizó un ELISA indirecto, utilizando la MSP5 como antígeno y se logró disminuir las uniones inespecíficas a las proteínas contaminantes de E. coli, por adición de un suero de conejo anti E. coli que bloquea los epítopes de estas proteínas. A través de un cuadro de contingencia de doble entrada, se determinaron los parámetros de validación del ELISA al compararla con la técnica de naranja de acridina-bromuro de etídio, obteniéndose como resultado que la técnica de ELISA mejorada es 96,1% sensible, 9% específica y presenta un valor predictivo del 88,6%. Además, se estudió una población bovina de 48 mautes de la Estación Experimental La Iguana (estado Guárico), utilizando ambas técnicas, obteniendo una seroprevalencia de 93,7% por ELISA y una prevalencia de 54,1% por naranja de acridina-bromuro de etidio. Estos resultados muestran que el bloqueo de los epítopes de las proteínas de E. coli contaminates, utilizando para ello un suero de conejo anti-E. coli, permite disminuir los falsos negativos cuando se utilizan proteínas recombinantes. Resumen en inglés Anaplasmosis, is a disease produced by Anaplasma marginale widely distributed in Venezuela, causing negative effects on the health and productivity of bovine herds. Until now, 6 constitutive Anaplasma marginale Mayor Surface Proteins (MSPs) have been characterized, including MSP5 which appears to be an excellent polypeptide for the diagnosis of this disease since it is highly conserved and immunogenic. This has motivated its cloning and insertion into a plasmid in E. coli (mas) and the use of the purified antigen in immunoenzymatic assays. However, subsequent indicated that E. coli recombinant proteins, that copurify with MSP5, interfere with the ELISA giving rise to false positives. In the present study, it was accomplished the standardization of an indirect ELISA, using MSP5 as the antigen and it was also diminishing the non-specific unions to the contaminating proteins of E. coli by adding anti-E. coli rabbit serum that blocks the epitopes of these proteins. With the use of a double entry contingency table, the parameters of validation of the ELISA were determined, comparing it to the acridine orange-ethidium bromide technique. The result indicate that the improve MSP5 indirect ELISA has a 96.1% sensitivity, 9% specificity and a predictive value of 88.6%. It was also studied a bovine population of 48 cattle from the Experimental Station “La Iguana” (Guárico State), using both techniques, obtaining a seroprevalence of 93.7% with ELISA and a prevalence of 54.1% with orange acridine-ethidium bromide. These results show that the blockage of the contaminating E. coli protein epitopes using an anti-E. coli rabbit serum permits the diminishment of false negatives when using recombinant proteins.

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126

Estudios sobre la irregularidad de producción de la variedad de peral "Agua de Aranjuez"

Cambra Ruíz de Velasco, Mariano; Herrero Catalina, Joaquín
1978-01-01

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128

Ectopic expression of the erythrocyte band 3 anion exchange protein, using a new avian retrovirus vector

Fuerstenberg, S.; Beug, H.; Introna, M.; Khazaie, K.; Muñoz, A.; Ness, S.; Nordström, Kristina; Sap, J.; Stanley, I.; Zenke, M.; Vennström, Björn
1990-12-01

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129

Diversity and phylogeny of Baltic Sea picocyanobacteria inferred from their ITS and phycobiliprotein operons

Haverkamp, Thomas; Acinas, Silvia G.; Doeleman, Marije; Stomp, Maayke; Huisman, Jef; Stal, Lucas J.
2008-01-01

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130

Distinct repertoire of antigenic variants of foot-and-mouth disease virus in the presence or absence of immune selection

Borrego, Belen; Novella, Isabel S.; Giralt, Ernest; Andreu, David; Domingo, Esteban
1993-01-01

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131

Diseño y construcción de vectores de transferencia para la obtención de virus vaccinia Ankara modificado (MVA) recombinantes/ Design and construction of transfer vectors in order to obtain recombinant modified vaccinia virus Ankara (MVA)

Ferrer, M. F.; Zanetti, F. A.; Calamante, G.
2007-09-01

Resumen en español El virus vaccinia Ankara modificado (MVA) constituye un buen candidato para el desarrollo de vectores virales de expresión no replicativos porque no replica en la mayoría de las células de mamíferos. Para la producción de MVA recombinantes es fundamental disponer de vectores de transferencia que, por recombinación homóloga con el genoma viral, permitan introducir los genes de interés en regiones no esenciales para la replicación in vitro. En este trabajo se dise� (mas) �aron y obtuvieron los vectores de transferencia denominados VT-MHA y VT-MTK que portan las regiones correspondientes a las posiciones 1-303 y 608-948 del gen MVA165R y 1-244 y 325-534 del gen MVA086R, respectivamente, las que flanquean un sitio de clonado múltiple para la inserción de los genes foráneos. En dichos vectores se clonaron los casetes para la expresión de los genes lac Z o uid A, y la actividad de las enzimas marcadoras b-galactosidasa y b-glucuronidasa se confirmó in situ. Además, utilizando el vector denominado VT-MTK-GUS, se obtuvieron y aislaron MVA recombinantes puros que portan y expresan el gen uid A. Los resultados obtenidos constituyen las herramientas básicas para establecer la metodología de obtención de MVA recombinantes, con el propósito de desarrollar localmente vectores virales no replicativos candidatos a vacunas. Resumen en inglés Modified Vaccinia virus Ankara (MVA) constitutes a good candidate for the development of non-replicative expression viral vectors because it does not replicate in most of mammalian cells. It is essential, for the production of recombinant MVA, the availability of transfer vectors which allow the introduction of desired genes into non-essential regions for in vitro viral replication, by homologous recombination with the viral genome. In the present work, the transfer vecto (mas) rs named VT-MHA and VT-MTK were designed and obtained. They carried genomic regions corresponding to 1- 303 and 608-948 positions of the MVA165R gene and 1-244 and 325-534 of the MVA086R gene, respectively, which flank a multiple cloning site for the insertion of foreign genes. In these vectors, the cassettes for the expression of lac Z or uid A genes were cloned, and the activity of the marker enzymes b-galactosidase and b-glucuronidase was confirmed in situ. Furthermore, the vector named VT-MTK-GUS was used to obtain and isolate pure recombinant MVA, which carried and expressed the uid A gene. The results herein constitute the basic tools for establishing the methodology to obtain recombinant MVA with the purpose of locally developing non-replicative viral vectors as candidate vaccines.

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Desarrollo de Embriones Caprinos In Vitro: Efecto del Co-Cultivo con Células Epiteliales de Oviducto/ In Vitro Development of Goat Embryos: Effect of Co-culture with Oviductal Epithelial Cells

Bosch, Pablo; Blanch, María S.; Ferrero, Susana; Díaz, Hernán; Piccatto, Fernando; Bosch, Ricardo A.
2006-05-01

Resumen en español El desarrollo de sistemas de cultivo in vitro que permitan obtener altos porcentajes de embriones viables es de gran importancia para la implementación de biotecnologías como el clonado y la transferencia de genes. Estudios tendientes a mejorar la eficiencia de los sistemas de cultivo embrionario son especialmente importantes en ganado caprino por el escaso desarrollo de estos métodos en dicha especie. El objetivo del presente estudio fue comparar el desarrollo de embr (mas) iones caprinos fecundados in vivo cultivados: a) con células epiteliales de oviducto caprino (CEO), b) en fluido sintético de oviducto (SOF; del Inglés: synthetic oviduct fluid) o c) en medio condicionado por células epiteliales de oviducto caprino (MC). Embriones de 1-8 células colectados del oviducto de cabras superovuladas se cultivaron in vitro durante 4-5 días en los diferentes tratamientos. Al término del cultivo se estableció el estadio de desarrollo embrionario alcanzado y el número de células por embrión a partir de embriones teñidos con lacmoid. Un mayor porcentaje de embriones se desarrollaron hasta el estado de mórula/blastocisto en cocultivo comparado con los cultivados en SOF (75% vs. 41% respectivamente; P Resumen en inglés Development of reliable in vitro culture systems to produce high percentages of viable embryos is instrumental in the application of biotechnologies such as cloning and transgenesis. This is especially true for caprine species in which in vitro technology for embryo culture has been poorly developed. The objective of this study was to compare in vitro development of in vivo fertilized caprine embryos in: a) coculture with caprine oviductal epithelial cells (OEC), b) synth (mas) etic oviduct fluid (SOF), or c) medium conditioned by oviductal epithelial cells (CM). In vivo fertilized 1-8 cell caprine embryos collected by oviductal flushing were allocated to treatments and cultured for 4-5 days in vitro. At the end of the culture period, embryonic development was recorded and the number of cells per embryo was determined in lacmoid-stained embryos. A significantly higher percentage of embryos reached the morula/blastocyst stage in coculture compared with those cultured in SOF (75% vs. 41% respectively; P

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DESARROLLO DE CONTROLES POSITIVOS PARA MÉTODOS MOLECULARES DE DETECCIÓN DE VIRUS DE INFLUENZA AVIAR/ DEVELOPMENT OF POSITIVE CONTROLS FOR MOLECULAR METHODS OF AVIAN INFLUENZA VIRUS DETECTION

Acevedo, Ana María; Santana, Elaine; Díaz de Arce, Heidy; Pérez, L.J; Caballero, A; Suárez, L; Sánchez, O
2009-04-01

Resumen en español La influenza aviar (IA) constituye una gran amenaza para la salud animal y humana por lo que es una prioridad a nivel mundial el fortalecimiento de los sistemas de diagnóstico frente a probables brotes, de ahí la importancia de la detección por métodos moleculares (RT-PCR y Real time RT-PCR) por su elevada rapidez, sensibilidad y especificidad de estos que permiten tomar las medidas de control para evitar la diseminación del agente. En este trabajo se describe la obt (mas) ención y evaluación de controles positivos de amplificación y cuantificación para RT-PCR y Real time RT-PCR (RRT-PCR) obtenidos a partir del clonaje de dos productos de PCR, uno correspondiente a una región del gen de la hemaglutinina del subtipo H5 y el otro al gen de la matriz (M) para Influenza tipo A. Los cebadores se seleccionaron teniendo en cuenta que los productos de PCR incluyeran las regiones correspondientes de parejas de cebadores de H5 e influenza tipo A reportados tanto por RT-PCR y RRT-PCR de laboratorios de referencia de la OIE/FAO para el diagnóstico de esta enfermedad. De un RNA extraído a partir de la cepa H5N2 (gentilmente donado por el laboratorio de referencia para Influenza aviar de la OIE) se obtuvo el cDNA que se utilizó como molde para la amplificación con los cebadores J3/J1C para H5 y M2/M+25 para Influenza tipo A, recomendados por laboratorios de referencia. Se seleccionó un clón a partir del cual se logró amplificar un fragmento de la talla esperada, que se ha utilizado como control positivo en los ensayos de detección de ácidos nucleicos para el subtipo H5 y para influenza tipo A. Además, el plásmido de H5 se evaluó por RRT-PCR y se obtuvo una curva estándar con un Ct de 15. El control de amplificación obtenido para la detección del subtipo H5 permitirá estandarizar los ensayos y evaluar posibles falsos negativos para la detección rápida de este subtipo en Cuba y en el caso del control positivo de influenza tipo A se podrá usar para cuantificación en ensayos de RRT-PCR. Resumen en inglés Avian influenza is a great threat for animal and human health, thus strengthening diagnostic systems against probable outbreaks is a priority all over the world. That is why detection is important by the use of molecular methods (RT-PCR and Real Time RT-PCR) due to their high speed, sensitivity and specificity allowing to take control measures in order to avoid the dissemination of the agent. In this work, the obtaining and evaluation of amplification and quantification p (mas) ositive controls for RT-PCR and Real Time RT-PCR (RRT-PCR) have been described. They were obtained from the cloning of two PCR products, one of them corresponding to a region of the subtype H5 hemagglutinin gene and the other to the matrix gene (M) for Influenza type A. The primers were selected keeping in mind that the PCR products included the corresponding regions of H5 and influenza type A primer couples reported by RT-PCR and RRT-PCR of OIE/ FAO reference laboratories for the diagnosis of this disease. From an RNA extracted from H5N2 strain (kindly donated by the OIE reference laboratory for avian influenza), the cDNA used as a mold for the amplification with the primers J3/J1C for H5 subtype and M2 M+25 for Influenza type A, recommended by reference laboratories, was obtained. A clone from which a fragment of the size expected was amplified, was selected as a positive control in the detection assays of nucleic acids for the H5 subtype and influenza A type. Also, the H5 plasmid was evaluated for RRT-PCR and a standard curve with a Ct of 15 was obtained. The amplification control obtained for H5 subtype detection will allow to standardize assays and evaluate possible negative falses for the quick detection of this subtype in Cuba; and in the case of the positive control for influenza type A it will be used for quantification in RRT-PCR assays.

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136

Cloning, Expression, and Characterization of a Recombinant Gilthead Seabream Growth Hormone

Martínez-Barberá, Juan P. ; Pendón, Carlos ; Rodríguez Martínez, Ramón B. ; Pérez-Sánchez, Jaume ; Valdivia, Manuel M.

10 pages. | cDNA clones coding for the gilthead seabream (Sparus aurata) growth hormone (sbGH) were isolated from a pituitary expression library using a flounder cDNA probe. The nucleotide sequence of a GH cDNA clone containing an insert of 896 nucleotides was determined. The cDNA encoded a polypept...

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137

Cloning, Expression, and Characterization of a Recombinant Gilthead Seabream Growth Hormone

Martínez-Barberá, Juan P.; Pendón, Carlos; Rodríguez Martínez, Ramón B.; Pérez-Sánchez, Jaume; Valdivia, Manuel M.
1994-11-01

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138

Cloning of the sole (Solea senegalensis) growth hormone-encoding cDNA

Pendón, Carlos ; Martínez-Barberá, Juan P. ; Pérez-Sánchez, Jaume ; Rodríguez Martínez, Ramón B. ; Grenett, Hernán

4 pages. | We report here the complete nucleotide (nt) sequence of a cDNA clone encoding Solea senegalensis growth hormone (sGH) isolated from an expression library prepared from sole pituitary gland poly (A)+ RNA. The library was screened using a flounder GH cDNA. The cDNA sequence containing an in...

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Cloning of the sole (Solea senegalensis) growth hormone-encoding cDNA

Pendón, Carlos; Martínez-Barberá, Juan P.; Pérez-Sánchez, Jaume; Rodríguez Martínez, Ramón B.; Grenett, Hernán; Valdivia, Manuel M.
1994-08-01

Digital.CSIC (Spain)

140

Cloning of the promoter from the gonadal aromatase gene of the European sea bass and identification of single nucleotide polymorphisms

Galay-Burgos, Malyka; Gealy, Claire; Navarro-Martín, Laia; Piferrer, Francesc; Zanuy, Silvia; Sweeney, Glen E.
2006-04-30

Digital.CSIC (Spain)

141

Cloning and developmental expression of Sna, a murine homologue of the Drosophila snail gene

Nieto, M. Ángela; Bennett, Michael F.; Sargent, Michael G.; Wilkinson, David G.
1992-09-01

Digital.CSIC (Spain)

142

Cloning and Sequence Analysis of a cDNA Encoding Ferric Leghemoglobin Reductase from Soybean Nodules

Ji, L. ; Becana Ausejo, Manuel ; Sarath, G. ; Klucas, R. V.

Published as Joumal Series No. 10405, Agricultura1 Research Division, University of Nebraska. | A cDNA encoding soybean (Glycine max [L.] Merr) ferric leghemoglobin reductase (FLbR), an enzyme that is postulated to play and important role in maintaining leghemoglobin in its functional ferrous state,...

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Cloning and Biochemical Characterization of ToFZY, a Tomato Gene Encoding a Flavin Monooxygenase Involved in a Tryptophan-dependent Auxin Biosynthesis Pathway

Expósito-Rodríguez, Marino ; Borges, Andrés Antonio ; Borges-Pérez, Andrés ; Hernández, Mercedes ; Pérez, José A.

Indole-3-acetic acid (IAA), the main endogenous auxin, has been known for decades to be a key regulator for plant growth and development. Multiple routes have been proposed for IAA biosynthesis but physiologic roles or relevance of the different routes are still unclear. Recently, four members of th...

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Clones y vectores infectivos derivados de coronavirus y sus aplicaciones

Enjuanes Sánchez, Luis; Almazán Toral, Fernando; González, José Manuel; Izeta Permisan, Ander; Penzes, Zoltan; Alonso Villanueva, Sara; Sánchez Sánchez, Carlos; Solá Gurpegui, Isabel; Sánchez Morgado, J. Manuel; Calvo Alcocer, Enrique; Ortego Alonso, Francisco J.; Escors Murugarren, David; Barrado Guerrero, Patricio; Riquelme Gabriel, Cristina; Plana Durán, Juan
2004-05-16

Digital.CSIC (Spain)

146

Clone size distributions in networks of genetic similarity

Hernández-García, Emilio; Rozenfeld, Alejandro F.; Eguíluz, Víctor M.; Arnaud-Haond, Sophie; Duarte, Carlos M.
2006-12-01

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147

Clonamiento Molecular de las Asas Intracelulares de los receptores Muscarínicos M2 y M3 implicadas en la interacción con Proteínas G en el Músculo Liso Traqueal de Bovino

Bruges, GA; Borges, A; González de Alfonzo, R; Lippo de Bécemberg, I; Alfonzo, M
2002-01-01

Resumen en español En el músculo liso traqueal de bovino (MLTB) se ha propuesto una vía de señalización celular asociada con la actividad de una guanililciclasa de membrana plasmática (GCm) la cual se encuentra regulada por dos subtipos de receptores muscarínicos (mAChRs), m2 y m3 acoplados a proteínas G de manera opuesta. El objetivo del presente estudio fue la identificación de las secuencias primarias de las regiones intracelulares de los receptores muscarínicos implicadas en la (mas) interacción con las proteínas G que regulan a esta GCm. El cDNA del MLTB fue usado para la amplificación de las regiones intracelulares de los subtipos m2 y m3 utilizando oligonucleótidos cebadores específicos. Los productos de amplificación fueron identificados en geles de agarosa y posteriormente secuenciados, encontrándose un 99% de similitud con las secuencias obtenidas del bGen Data Bank de los mAChRs en cerebro de bovino. Este es el primer clonamiento molecular para los mAChRs presentes en MLTB y sugiere posibles similitudes con el cerebro de bovino en relación a la interacción receptor/proteína G. Resumen en inglés Two muscarinic receptors subtypes (mAChRs), m2 and m3, have been reported to regulate in opposite ways the activity of a membrane-bound guanylyl cyclase (GCm) via G-proteins in bovine tracheal smooth muscle (BTSM). The present study was undertaken to identify the primary sequences from intracellular loops of mAChRs subtypes from BTSM involved in the interaction with these G-proteins. cDNA from BTSM was used to amplify via RT-PCR, by using specific primers, the intracellul (mas) ar regions of m2 and m3 involved in the interaction with G-proteins. Amplification products for m3 and m2 loops were readily identified in agarose gel electrophoresis. Sequences for these loops were almost identical (99%) those found in bovine brain m2 and m3 mAChRs. This is the first molecular cloning of m2 and m3 mAChRS for BTSM. These results suggest the existence of similar mAChRs/G-proteins interactions in bovine airways.

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Clonaje y caracterización molecular in silico de un transcrito de fosfolipasa A2 aislado del veneno de la serpiente peruana Lachesis muta/ Molecular cloning and characterization in silico of phospholipase A2 transcripto isolated from Lachesis muta peruvian snake venom

Jimenez, Karim L.; Zavaleta, Amparo I.; Izaguirre, Victor; Yarleque, Armando; Inga, Rosio R.
2010-12-01

Resumen en español Objetivo. Aislar y caracterizar in silico un transcrito del gen de fosfolipasa A2 (PLA2) aislado del veneno de Lachesis muta de la Amazonía peruana. Materiales y métodos. Se amplificó el transcrito del gen sPLA2 mediante la técnica de RT-PCR a partir de RNA total utilizando cebadores específicos, el producto de DNA amplificado se insertó en el vector pGEM para su posterior secuenciación. Mediante análisis bioinformático de la secuencia nucleotídica se determinó (mas) un marco de lectura abierta de 414 nucleótidos que codifica 138 aminoácidos, incluyendo16 aminoácidos del péptido señal, el peso molecular y el pI fueron de 13 976 kDa y 5,66 respectivamente. Resultados. La secuencia aminoacídica denominada Lm-PLA2- Perú, contiene Asp49, así como Tyr-28, Gly-30, Gly-32, His-48, Tyr52, Asp99 importantes para la actividad enzimática. La comparación de Lm-PLA2-Perú con las secuencias aminoacídicas de los bancos de datos mostró 93% de similitud con las sPLA2 de Lachesis stenophrys y más del 80% con otras sPLA2 de venenos de la familia Viperidae. El análisis filogenético de la secuencia nucleotídica del transcrito del gen sPLA2 indica que Lm-PLA2-Perú se agrupa con otras sPLA2 [Asp49] ácidas previamente aisladas del veneno de Bothriechis schlegelii con un 89% de identidad. El modelaje tridimensional de Lm-PLA2-Perú, presenta una estructura característica de sPLA2 del Grupo II formada por tres hélices-α, una lámina-β, una hélice corta y un lazo de unión con calcio. Conclusión. La secuencia nucleotídica corresponde al primer transcripto del gen de PLA2 clonado a partir del veneno de la serpiente Lachesis muta, que habita en la selva del Perú. Resumen en inglés Objective. Isolate and characterize in silico gene phospholipase A2 (PLA2) isolated from Lachesis muta venom of the Peruvian Amazon. Material and methods. Technique RT-PCR from total RNA was using specific primers, the amplified DNA product was inserted into the pGEM vector for subsequent sequencing. By bioinformatic analysis identified an open reading frame of 414 nucleotides that encoded 138 amino acids including a signal peptide of 16 aminoacids, molecular weight and p (mas) I were 13 976 kDa and 5.66 respectively. Results. The aminoacid sequence was called Lm-PLA2-Peru, contains an aspartate at position 49, this aminoacid in conjunction with other conserved residues such as Tyr-28, Gly-30, Gly-32, His-48, Tyr52, Asp99 are important for enzymatic activity. The comparison with the amino acid sequence data banks showed of similarity between PLA2 from Lachesis stenophrys (93%) and other PLA2 snake venoms and over 80% of other sPLA2 family Viperidae venoms. A phylogenetic analysis showed that Lm-PLA2-Peru grouped with other acidic [Asp49] sPLA2 previously isolated from Bothriechis schlegelii venom showing 89 % nucleotide sequence identity. Finally, the computer modeling indicated that enzyme had the characteristic structure of sPLA2 group II that consisted of three α-helices, a β-wing, a short helix and a calcium-binding loop. Conclusion. The nucleotide sequence corresponding to the first transcript of gene from PLA2 cloned of Lachesis muta venom, snake from the Peruvian rainforest.

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Clonaje de la proteína de choque térmico de 20 kDa de Leishmania amazonensis/ Cloning of 20 kDa heat shock protein of Leishmania amazonensis

Montalvo Álvarez, Ana Margarita; Folgueira Fernández, Cristina; Requena Rolanía, José María
2009-08-01

Resumen en español INTRODUCCIÓN: la inducción de las proteínas de choque térmico constituyen un mecanismo homeostático que protege a las células del efecto destructivo del calor u otras condiciones de estrés ambiental, paralelamente, ellas cumplen importantes funciones celulares. La proteína de choque térmico de 20 kDa se reportó recientemente en Leishmania amazonensis. OBJETIVO: describir la metodología utilizada para realizar el clonaje de las proteínas de choque térmico, lo (mas) que permitió acometer estudios de algunas propiedades biológicas. MÉTODOS: la región codificante del gen hsp20 se amplificó mediante la reacción en cadena de la polimerasa con cebadores adecuados. El producto amplificado se clonó inicialmente en el vector pCR2.1 (Invitrogen) y después en el vector de expresión en procariotas pET-28b (Novagen), para obtener proteína recombinante. De manera paralela, el mismo fragmento se clonó en el vector de expresión en eucariotas pcDNA3 (Invitrogen) para obtener un posible preparado vacunal de ADN. Se realizó la secuenciación nucleotídica de los clones obtenidos, con la finalidad de verificar su fidelidad. RESULTADOS: se obtuvieron plásmidos recombinantes que codifican la HSP20 de Leishmania, y permiten la obtención de proteína recombinante y de ADN en forma masiva. CONCLUSIONES: ambos plásmidos fueron útiles para estudiar algunas de las propiedades biológicas de esta proteína. Este acercamiento puede ser de interés en otros trabajos de esta índole y constituir una guía metodológica. Resumen en inglés INTRODUCTION: the induction of heat shock proteins is a homeostatic mechanism that protects cells from the deleterious effects of thermal and other environmental stresses. In addition, they have important cell functions. The 20kDa heat shock protein in Leishmania amazonensis was recently reported. OBJECTIVE: to describe the methodology used for cloning of heat shock proteins, which allowed the study of some biological properties. METHODS: the hsp20 gene coding region was (mas) amplified by polymerase chain reaction using adequate primers. The amplified product was initially cloned in pCR2.1 vector (Invitrogen) and then in pET-28b vector (Novagen), to obtain recombinant protein. The same fragment was cloned also in the eukariote expression vector pcDNA3 (Invitrogen). The nucleotidic sequencing of the different clones was made, in order to verify their fidelity. RESULTS: the recombinant plasmids that encode HSP20 protein in Leishmania and allow obtaining massively recombinant protein and DNA were produced. CONCLUSIONS: both plasmids were useful to study some of the biological properties of this protein. This approach could be useful for similar research and represent a suitable methodological guideline.

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Characterization of two divergent endo-beta-1,4-glucanase cDNA clones highly expressed in the nonclimacteric strawberry fruit

Llop-Tous, Immaculada; Domínguez-Puigjaner, Eva; Palomer Tarrides, Xavier; Vendrell Melich, Miguel
1999-04-01

Digital.CSIC (Spain)

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Characteristics of Grapevine (Vitis vinifera L.) ‘Albariño’ Clones Resulting from Two Clonal Selections

Boso Alonso, Susana; Alonso-Villaverde Iglesias, Virginia; Gago Montaña, Pilar; Santiago Blanco, José Luis; Martínez Rodríguez, María del Carmen
2007-01-01

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Cambios de expresión génica asociados a la respuesta de los frutos cítricos frente a la infección por hongos del género Penicillium

González Candelas, Luis; Marcos López, José Francisco; Zacarías García, Lorenzo; Alamar Cort, Santiago
2009-01-01

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CONSTRUCCIÓN DE UNA LIBRERÍA DE ADNc EN YUCA: UNA HERRAMIENTA PARA EL DESARROLLO BIOTECNOLÓGICO DEL CULTIVO/ Cassava cDNA Library Construction: One Tool for Biotechnological Development of the Crop

GONZÁLEZ ALMARIO, CAROLINA; LÓPEZ CARRASCAL, CAMILO E
2008-08-01

Resumen en español La yuca es un cultivo de importancia en la seguridad alimentaria mundial ya que constituye la base de la alimentación de más de 600 millones de personas en el mundo. También es un alto productor de almidón con niveles que oscilan entre 73,7 y 84,9% de su peso seco total en raíces (FAO, 2007). El almidón de yuca puede utilizarse en una gama amplia de industrias (textil, cosmética, alimentaria, etc). Además, es empleado en la producción de biocombustibles. Una de l (mas) as principales limitantes en la producción de yuca es la bacteriosis vascular producida por la bacteria Xanthomonas axonopodis pv. manihotis (Xam). Esta enfermedad puede comprometer no solo el suministro de almidón para las plantas industriales productoras de bioetanol sino que también puede amenazar la seguridad alimentaria. El mejoramiento genético convencional de yuca es complicado dado su largo ciclo reproductivo, su alta heterocigocidad y su naturaleza tetraploide. Por estas razones se deben buscar alternativas que involucren desarrollos en biotecnología que permitan un mejoramiento eficaz y rápido. En la actual era genómica y postgenómica muchos de los experimentos dependen de la posibilidad de contar con la secuencia de transcritos clonados. Dado que estos clones provienen de librerías de ADNc contar con este tipo de recursos de excelente calidad es un paso esencial. En este artículo reportamos la construcción de una librería de ADNc empleando el sistema Gateway® a partir de plantas de yuca que han sido inoculadas con la cepa CIO151 de Xam. La librería presentó un título de 1 x 10(7) unidades formadoras de colonias (ufc)/ml y el tamaño de los insertos osciló entre 600-1.500 pb. Los análisis de secuencia de 14 clones al azar confirmaron que se trata de genes expresados y mostraron similitud con genes previamente reportados en especies estrechamente relacionadas a yuca. Esta librería se convierte en un excelente recurso para identificar novedosos genes y para el estudio de su función a través de la identificación y la interacción entre proteínas. Resumen en inglés Cassava is one of the most important crops for global food security and provides food and livelihood for 600 million people in the developing world. It is also good source of starch, with levels between 73.7 y 84.9% of total dry weight in roots (FAO, 2007). Cassava starch can be used in a wide range of industries (textile, cosmetic, nourishing, etc) and it has a high potential for the production of biofuel. Cassava bacterial blight, caused by Xanthomonas axonopodis pv. ma (mas) nihotis (Xam), is one of the most important diseases that affects cassava. This disease can compromise the starch supply not only for bioetanol production but also affect global food security. The long reproductive cycle, high heterozigosity and tetraploid character of cassava are characteristics that have complicated the genetic breeding for this crop. For these reasons new alternatives based on biotechnology are necessary to accelerate its improvement. In the postgenomic era many experiments rely on the availability of transcript sequences for cloning. As these clones usually originate from cDNA libraries, the quality of these libraries is crucial. In this article we report the construction of the first cassava cDNA library employing the Gateway® system. For this, in vitro grown plants were inoculated with the Xam strain CIO151. The expression library shows a high titer of 1 x 10(7) cfu/ml, with inserts ranging between 600 and 1500 bp. The sequence analyses from 14 random clones confirmed that these are expressed genes and showed similarity with previously cloned genes from species related to cassava. This library is an excellent resource for the identification of novel genes and for functional studies through the identification of their interactions with other proteins.

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CLONAJE BIOLÓGICO DE UN AISLADO DE CORONAVIRUS BOVINO/ BIOLOGICAL CLONING OF A BOVINE CORONAVIRUS ISOLATE

Betancourt, A; Rodríguez, Edisleidy; Relova, Damarys; Barrera, Maritza
2008-12-01

Resumen en español Con el objetivo de obtener un aislado de Coronavirus bovino clonado biológicamente se adaptó el aislado VB73/04 a la multiplicación en la línea celular MDBK. Este aislado indujo la formación de placas, las cuales resultaron homogéneas después del clonaje biológico. La población viral obtenida fue identificada como Coronavirus bovino por RT-PCR y Seroneutralización. Resumen en inglés In order to obtain a biologically cloned bovine coronavirus isolate, the isolate VB73/04 was adapted to multiplication in MDBK cell line. This isolate induced the formation of plaques, which were homogeneous after biological cloning. The viral population obtained was tested for bovine coronavirus by RT-PCR assay and seroneutralization.

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Biochemical mechanisms of resistance in Daphnia magna exposed to the insecticide fenitrothion

Damásio, Joana B.; Guilhermino, Lúcia; Soares, Amadeu M. V. M.; Riva, M. Carmen; Barata Martí, Carlos
2007-08-30

Digital.CSIC (Spain)

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An Eph-related receptor protein tyrosine kinase gene segmentally expressed in the developing mouse hindbrain

Gilardi-Hebenstreit, Pascale; Nieto, M. Ángela; Frain, M.; Mattéi, Marie-Geneviève; Chestier, A.; Wilkinson, David G.; Charnay, Patrick
1992-01-01

Digital.CSIC (Spain)

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A seed-specific heat-shock transcription factor involved in developmental regulation during embryogenesis in sunflower.

Almoguera, C. ; Rojas, A. ; Díaz-Martín, J. ; Prieto-Dapena, P. ; Jordano, Juan

Originally published In Press as doi:10.1074/jbc.M207330200 on September 12, 2002 | We report the cloning and functional characterization of the first heat-shock transcription factor that is specifically expressed during embryogenesis in the absence of environmental stress. In sunflower embryos this...

DRIVER (Spanish)

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A novel p34cdc2-binding and activating protein that is necessary and sufficient to trigger G2/M progression in Xenopus oocytes

Ferby, Ingvar; Blazquez, Montserrat; Palmer, Amparo; Eritja Casadellà, Ramón; Nebreda, Angel R.
1999-08-15

Digital.CSIC (Spain)

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A new set of ESTs and cDNA clones from full-length and normalized libraries for gene discovery and functional characterization in citrus

Marques, M. Carmen; Alonso-Cantabrana, Hugo; Forment, Javier; Arribas, Raquel; Alamar Cort, Santiago; Conejero, Vicente; Pérez Amador, Miguel A.
2009-09-01

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A multifunctional desaturase involved in the biosynthesis of the processionary moth sex pheromone

Serra, Montserrat ; Piña, Benjamín ; Abad, José Luis ; Camps Díez, Francisco ; Fabriàs, Gemma

6 paginas, 7 figuras. | The sex pheromone of the female processionary moth, Thaumetopoeapityocampa, is a unique C16 enyne acetate that is biosynthesizedfrom palmitic acid. Three consecutive desaturation reactionstransform this saturated precursor into the triunsaturated fattyacyl intermediate: f...

DRIVER (Spanish)

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A multifunctional desaturase involved in the biosynthesis of the processionary moth sex pheromone

Serra, Montserrat; Piña, Benjamín; Abad, José Luis; Camps Díez, Francisco; Fabriàs, Gemma
2007-10-05

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A cDNA clone highly expressed in ripe banana fruit shows homology to pectate lyases

Domínguez-Puigjaner, Eva; Llop, Inmaculada; Vendrell Melich, Miguel; Prat, Salomé
1997-07-01

Digital.CSIC (Spain)