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Características de nuevos cultivos celulares derivados de tejidos embrionarios de Aedes aegypti (Diptera: Culicidae): Nuevos cultivos celulares de Aedes aegypti/ Characteristics of new cell cultures derived from embryonic tissues of Aedes aegypti (Diptera: Culicidae)

Ariosto, Ardila; Escovar, Jesús; Bello, Felio
2005-03-01

Resumen en español Introducción. Los cultivos celulares de insectos son una metodología útil en estudios biomédicos y tecnológicos. Objetivo. El propósito principal del presente trabajo fue obtener y caracterizar cultivos celulares derivados de tejidos embrionarios de Aedes aegypti. Materiales y métodos. Se emplearon huevos embrionados para los explantes de tejidos en los medios de cultivos MM/VP12 y L-15/Grace, con suplemento de 20% de suero fetal bovino y una mezcla al 1% de antibi (mas) ótico y antimicótico, con un rango de pH entre 6,8 y 7,0. Los cultivos se incubaron a una temperatura de 28ºC sin atmósfera de CO2. Resultados. El crecimiento celular se obtuvo en el medio L-15/Grace, 3 semanas después de haber sido sembrados los tejidos embrionarios; sin embargo, se necesitaron 6 meses para la formación de la monocapa confluente. Desde agosto de 2003 hasta junio de 2004, se habían realizado 28 subcultivos. Las células se caracterizaron morfológicamente; predominaron las formas epitelioides en subcultivos de pases altos. También se reconocieron las particularidades morfométricas del cariotipo y, además, se determinaron los perfiles isoenzimáticos y moleculares de los cultivos celulares, los cuales se compararon con muestras de adultos de la especie tomadas de la misma colonia y con líneas celulares derivadas de otros insectos. Discusión. Estas células representan, potencialmente, un importante sistema in vitro en investigaciones básicas y aplicadas. Resumen en inglés Introduction. Cell cultures from insects are a useful methodology in technological and biomedical studies. Objective. The present work was aimed at obtaining and characterizing cell cultures derived from Aedes aegypti embryonic tissues. Materials and methods. Embryonated eggs were used for embryonic tissue explants in L-15/Grace and MM/VP12 culture media, supplemented with 20% fetal bovine serum and a mixture of 1% antimycotic and antibiotics, at a pH ranging from 6.8 to (mas) 7.0. The incubation temperature was 28º C; a CO2 atmosphere was not required. Results. Cell growth was obtained in L-15/Grace medium three weeks after embryonic tissues explants. Six months were required for achieving a confluent monolayer. Twenty eight serial cell subcultures were carried out from August 2003 to June 2004. Cell morphology was characterized as being epithelial in subcultures of high passages; karyotype morphometric characteristics were recognized and the molecular and isozymatic profiles were also established. The cultures were compared with adult samples from the species taken from the same colony and with cell lines derived from other insects. Discussion. These cells are an important in vitro system in applied and basic research.

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Detección de contaminación por Mollicutes en cultivos celulares mediante amplificación del gen 16S rARN/ Detection of Mollicutes contamination in cell cultures by 16S rRNA amplification

Sobarzo Aguayo, Gustavo; Martínez Tagle, María Angélica; Vidal Alvarez, Roberto; Martínez Torrens, María Cristina; Avendaño Carvajal, Luis Fidel
2006-12-01

Resumen en español La contaminación de los cultivos celulares por Mollicutes es un hecho frecuente en los laboratorios, reportándose hasta un 80% de cultivos contaminados, lo que resulta en ensayos experimentales poco confiables y en productos biológicos poco seguros. Los objetivos del presente estudio fueron: estimar la frecuencia de micoplasmas como contaminantes de cultivos celulares y analizar la eficiencia de un ensayo de PCR que emplea como ADN blanco al gen 16S rARN de los Mollicu (mas) tes. Se estudiaron 39 cultivos celulares, representativos de las líneas celulares más utilizadas y 17 cultivos celulares primarios, recibidos para análisis de contaminación, entre julio y diciembre de 2005. Se detectaron micoplasmas en 18/39 (46,2%) cultivos de líneas celulares, mientras que no se detectaron micoplasmas en los cultivos celulares primarios. El análisis mediante HpaII del espacio intergénico 16S-23S rARN de 6 cultivos positivos determinó dos patrones de restricción. La secuenciación del ADN de dos amplicones identificó a Mycoplasma hyorhinis y a Mycoplasma salivarium como micoplasmas contaminantes. La sensibilidad analítica de la PCR, determinada a partir de diluciones de un cultivo de Mycoplasma hominis fue 0,01 u.c.c./mL (unidades cambiadoras de color por mL), mientras que su especificidad analítica fue 100%. Los resultados de este estudio confirman la importancia de los micoplasmas como contaminantes de cultivos celulares y sugieren que la PCR dirigida al gen 16S rARN es un procedimiento útil para el diagnóstico de estos microorganismos. Resumen en inglés Up to 80% of cell cultures have been reported to be contaminated with Mollicutes, causing unreliable experimental results and giving rise to unsafe biological products. The aims of this study were to estimate the frequency of mycoplasmas as contaminants in cell cultures, and to analyze the performance of a PCR assay targeting the 16S rRNA of Mollicutes. Thirty-nine cell cultures representing the most used lines of cell cultures and 17 primary cell cultures submitted for d (mas) etection of mycoplasma contamination were studied between July and December 2005. Mycoplasmas were detected in 18/39 (46.2%) cell line cultures, and in none of the primary cell cultures. HpaII analysis of the 16S-23S rRNA intergenic space of 6 positive cultures belonging to different laboratories gave two different restriction patterns. The sequentiation of each of the two patterns identified Mycoplasma hyorhinis and Mycoplasma salivarium as the contaminant mycoplasmas. The analytic sensitivity of the 16S rRNA PCR was 0.01 color-changing units per mL, as determined for dilutions of a Mycoplasma hominis culture, whereas the analytical specificity was 100%. In conclusion, these results reaffirm the importance of mycoplasmas as cell culture contaminants, and suggest that 16S rRNA PCR is a reliable method for detection of these organisms as cell culture contaminants.

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AISLAMIENTO DEL VIRUS DE LA GASTROENTERITIS TRANSMISIBLE DEL CERDO EN CULTIVOS CELULARES/ ISOLATION OF SWINE TRANSMISSIBLE GASTROENTERITIS VIRUS IN CELL CULTURES

Rodríguez, Edisleidy; Betancourt, A; Acevedo, Ana María; Relova, Damarys; Ayala, J; Barrera, Maritza
2008-08-01

Resumen en español La gastroenteritis transmisible (TGE) es una enfermedad de los cerdos, infecciosa, aguda y altamente contagiosa; causada por un virus de la familia Coronaviridae, género Coronavirus. En nuestro país, a partir del año 2003 se comenzaron a presentar brotes de síndrome diarreico con las características clínico epizotiológicas de la enfermedad de TGE, pero para lograr la confirmación del diagnóstico era necesario aislar el virus en cultivos celulares a partir de anim (mas) ales enfermos, seguido de una identificación en aquellos cultivos que presentaran efecto citopático, para lo cual era necesario desarrollar una metodología para el aislamiento viral, ya que para este virus ha sido reportado con anterioridad que el aislamiento en células resulta muy difícil de lograr. En esta investigación se desarrolló una metodología para el aislamiento del virus de TGE. Los aislamientos obtenidos durante la evaluación de la técnica fueron identificados como positivos a través de la aplicación de inmunoperoxidasa indirecta sobre las células infectadas con un anticuerpo monoclonal comercial específico anti TGE. Resumen en inglés Transmissible gastroenteritis (TGE) is an infectious, acute and highly contagious disease in swine. It is caused by a virus belonging to the Coronaviridae family, Coronavirus genus. Some outbreaks starting with diarrheic symptoms with the clinical characteristics of TGE disease have been present in our country since 2003. But for having the confirmation of the diagnostic, it was necessary to isolate the virus in cell cultures from sick animals, followed by an identificati (mas) on in those cell cultures with cytopatic effect. That is why, it was necessary to develop a methodology for the virus isolation, since for this virus, it has been previously reported that isolation in cells is very difficult to obtain. In this research, a methodology was developed for the virus isolation. The isolates obtained during the technique evaluation were identified as positive by indirect immunoperoxidase in cells with an anti TGE specific commercial monoclonal antibody

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La agregación celular en la producción de metabolitos secundarios en cultivos vegetales in vitro/ Cellular aggregation in secondary metabolite production in in vitro plant cell cultures/ A agregação celular na produção de metabólitos secundários nos cultivos vegetais in vitro

Trejo-Tapia, Gabriela; Rodríguez-Monroy, Mario
2007-10-01

Resumen en portugués O cultivo de células vegetais é uma alternativa biotecnológica para a produção de metabólitos secundários. No entanto, a produtividade dos sistemas in vitro é menor à obtida de plantas. Nesta revisão se ilustra a diferenciação e compartimentalização celular como eventos necessários para a síntese de metabólitos secundários nas plantas. Discute-se a indução da agregação celular nos cultivos in vitro como uma das estratégias para favorecer a acumulaç (mas) ão destes compostos químicos. Este efeito positivo poderia ser explicado como conseqüência da formação de estruturas morfogênicas e/ou por uma condição de estresse por limitações de oxigênio ao interior dos agregados. Finalmente, se mostra que a combinação da agregação com outras estratégias tais como a seleção de linhas celulares, a elicitação e a adição de precursores constituem uma alternativa para desenvolver bioprocessos a partir de células vegetais in vitro para a produção de compostos químicos de alto valor agregado Resumen en español El cultivo de células vegetales es una alternativa biotecnológica para la producción de metabolitos secundarios. Sin embargo, la productividad de los sistemas in vitro es menor a la obtenida de plantas. En esta revisión se ilustra la diferenciación y compartamentalización celular como eventos necesarios para la síntesis de metabolitos secundarios en las plantas. Se discute la inducción de la agregación celular en los cultivos in vitro como una de las estrategias (mas) para favorecer la acumulación de estos compuestos químicos. Este efecto positivo podría ser explicado como consecuencia de la formación de estructuras morfogénicas y/o por una condición de estrés por limitaciones de oxígeno al interior de los agregados. Finalmente, se muestra que la combinación de la agregación con otras estrategias tales como la selección de líneas celulares, la elicitación y la adición de precursores constituye una alternativa para desarrollar bioprocesos a partir de células vegetales in vitro para la producción de compuestos químicos de alto valor agregado Resumen en inglés Plant cell culture represents a biotechnological alternative to direct extraction of whole plant for production of secondary metabolites. However, the productivity of in vitro systems is lower than that obtained from plants. This review illustratates cell differentiation and compartmentalization as necessary events for the biosynthesis of chemical compounds. The induction of in vitro cell aggregation is discussed as one of the strategies to stimulate the accumulation of t (mas) he compounds of interest. This positive effect might be explained as a consequence of the development of morphogenic structures and/or a stress condition induced by oxygen limitation in the interior of the aggregates. Finally, it is shown that the combination of aggregation with other strategies such as selection of cell lines, elicitation or precursor addition constitutes an alternative for the development of bioprocesses based on plant cell cultures for the production of high value chemical compounds

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Evaluacion de la capacidad inmunogénica de la vacuna antirrábica tipo Fuenzalida- Palacios (CRL) y de la vacuna antirrábica de cultivo celular (Verorab®) en personas con tratamiento preexposición/ Immune response of suckling mouse brain (CRL) rabies vaccine and tissue culture rabies vaccine (Verorab®) in pre-exposure prophylaxis in humans

Favi C, Myriam; Yung P, Verónica; Roos K, Orietta; Rodríguez A, Luis; Trujillo M, Rodrigo; Acevedo A, Attia
2004-01-01

Resumen en inglés A WHO experts committee recommended the substitution of antirabic vaccines produced in nervous tissue, by vaccines produced in tissue cultures. Aim: To compare the immunogenic capacity of antirabic vaccines CRL (produced in nervous tissue) and Verorab® (produced in tissue culture), used for pre-exposure prophylaxis in humans. Patients and methods: Fifty four volunteers were immunized for this study. The first group, vaccinated with CLR was treated with a scheme of 4 subc (mas) utaneous peri umbilical doses in days 0, 3, 7 and 28. The second group, vaccinated with Verorab® vaccine was treated with a scheme of 3 intramuscular doses in deltoid zone at days 0, 7 and 28. Blood samples were obtained at days 0, 7, 42 and 365 to measure neutralizing antibodies using the Inhibition of Fluorescent Focus Technique (RFFIT). Results: At day seven, a primary non protective immunologic response was observed in both groups, with titers significantly higher in the group vaccinated with Verorab®. At day 42, no differences were observed. At day 365, all subjects vaccinated with Verorab® and 50% of individuals vaccinated with CRL had protective antibody titers (p

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Aislamiento y propagación del virus de la hepatitis E en diferentes líneas celulares/ Isolation and propagation of hepatitis E virus in several cell lines

Montalvo Villalba, María de la Caridad; Goyenechea Hernández, Ángel de Jesús; Morier Díaz, Luis; González, Zoila; Rodríguez Sanchéz, Hermis; Bello Corredor, Marité; Gutiérrez Moreno, Aidonis; Sariego Frometa, Susel; Mendoza Llanes, Dianeya; Caballero Lorenzo, Yamira; Rodríguez Lay, Licel de los Ángeles
2008-12-01

Resumen en español ANTECEDENTES: el virus de la hepatitis E es el agente causal de la hepatitis E. Las propiedades biológicas y moleculares de las cepas asiáticas del VHE ya han sido exploradas en cultivos celulares. OBJETIVOS: aislar y propagar una cepa cubana del virus de la hepatitis E en diferentes líneas celulares. MÉTODOS: la monocapa de las células A549 fue inoculada con una suspensión de heces obtenida de un paciente con diagnóstico serológico y molecular de hepatitis E. Est (mas) as células fueron observadas hasta el décimo pase. Mientras que, las líneas celulares MRC5, LLCMK2, HEP-2, FRhK4 y HeLa fueron utilizadas para propagar el virus de la hepatitis E, a partir del sobrenadante obtenido del tercer pase en A549. Estas células fueron seguidas hasta el tercer pase. El ARN y los antígenos de la cepa ECV/2349-03 fueron identificados por TR-RCP e inmunofluorescencia indirecta. RESULTADOS: en las células A549 el ECP apareció desde el primer pase, a los 3 d de posinoculación. El genoma y los antígenos del virus fueron identificados en todos los pases seriados. En el resto de las líneas celulares estudiadas no se observó el ECP. En estas células el material genético del virus de la hepatitis E se detectó desde el primer pase y los antígenos a partir del segundo pase, excepto en las HeLa. CONCLUSIONES: estos resultados confirman que las células A549 pueden ser utilizadas para aislar y propagar el virus de la hepatitis E, mientras que las células MRC5, LLCMK2, HEP-2 y FRhK4 son capaces de mantener el crecimiento viral. Resumen en inglés BACKGROUND: hepatitis E virus (HEV) is the causative agent of hepatitis E. Biological and molecular properties of Asian HEV strains have been explored in cells cultures. OBJECTIVES: the aim of this investigation was to isolate and propagate a Cuban HEV isolate in different cell lines. METHODS: A549 cells monolayer was infected with faeces suspension from patient with sporadic hepatitis E and followed up until tenth passage. Lately, the supernatant harvested from third pas (mas) sage in A549 cells was inoculated in MRC5, HEP-2, LLCMK2, HeLa y FRhK4 for propagation study. These cells were observed up to third passage. RNA and viral antigen of ECV/2349-03 HEV strain were identified by RT-PCR and indirect immunofluorescence. RESULTS: CPE appeared since first passage, at third day of post-inoculation in A549 cells. HEV antigens and genome were detected in all serial passages. CPE was not observed in the rest of cellular cultures. In the cells used for propagation the viral genome was observed from first passage, while the antigens were detected since second passage, except HeLa. CONCLUSIONS: these results confirm that A549 can be used to isolate and propagate HEV. Meanwhile, the MRC5, HEP-2, LLCMK2 and FRhK4 were able to support viral growing.

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Infección por el virus de la Lengua azul: activación de señales celulares que inducen apoptosis/ Bluetongue virus infection: signaling pathway activated during apoptosis

Mortola, E.; Larsen, A.
2009-09-01

Resumen en español El virus de la Lengua azul (VLA) es un ARN virus de doble cadena que induce apoptosis tanto en cultivos celulares como en tejidos blanco. Con el fin de dilucidar el mecanismo de apoptosis en la infección por el VLA, en el presente trabajo examinamos en detalle, por la técnica de Western blot, las señales celulares de caspasas, Bax, citocromo c, Smac/DIABLO y factor nuclear kappa B (NF-kB) que se activan en la infección viral. Hemos comprobado que luego de la infecció (mas) n in vitro con el VLA, se detectó la activación de la caspasa 8 y con ello el mecanismo extrínseco de la apoptosis. También detectamos por primera vez no sólo la activación de miembros de la familia Bcl-2 (Bax), sino también la liberación del citocromo c y la proteína Smac/DIABLO, confirmando que en la infección por el VLA está involucrado el mecanismo secuencial intrínseco de la apoptosis. Asimismo, demostramos que la infección por el VLA activa el NF-kB y que la apoptosis es sustancialmente reducida mediante la inhibición del mismo. La activación de las señales celulares tales como Bax, citocromo c, Smac/DIABLO y NF-kB presentados en este trabajo, esclarecen los mecanismos apoptóticos durante la infección por el VLA para una mayor comprensión del papel primario que juega la apoptosis en la patogénesis del virus. Resumen en inglés Bluetongue (BTV) is a double-stranded RNA virus that induces apoptosis both in mammalian cell cultures and in target tissues. To elucidate the apoptosis pathways in BTV infection, we have examined in detail the apoptosis mechanism by examination of caspases, Bax, cytochrome c, Smac/DIABLO and NF-kB signalling pathways. In this report, after cell infection with BTV, the activation of caspase 8 was detected, proving the extrinsic receptor binding apoptotic pathway. Apoptosi (mas) s followed a sequential pathway involving the detection of activated Bcl-2 family members. Furthermore, its translocation to the mitochondria, as well as the release of cytochrome c and Smac/Diablo confirmed that BTV apoptosis involves the sequential intrinsic pathway. In addition, we demonstrated that NF-kB was activated following BTV infection and cell treatment with an inhibitor peptide before BTV infection, prevented NF-kB activation and substantially reduced cellular apoptosis. Our accumulating data concerning the activation of Bax, cytochrome c, Smac/DIABLO and NF-kB clarify the mechanism of apoptosis during BTV infection, and confer a better understanding of the primary role of apoptosis in BTV pathogenesis.

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Análisis de la susceptibilidad de una línea celular de Aedes aegypti (Diptera: Culicidae) a la infección con leishmania (L) chagasi y Leishmania (V) braziliensis/ Susceptibility Analysis of a Cell Line Derived from Aedes aegypti (Diptera: Culicidae) to Leishmania (L) chagasi and Leishmania (V) braziliensis Infection

Muñoz-Camargo, Carolina; Barreto, Alfonso; Bello, Felio
2005-12-01

Resumen en español Se evaluó la susceptibilidad de los cultivos celulares derivados de tejidos embrionarios de Aedes aegypti a la infección con Leishmania (L) chagasi y Leishmania (V) braziliensis, agentes etiológicos de leishmaniasis visceral americana y leishmaniasis cutánea, respectivamente. Metodología: Se seleccionaron células de A. aegypti mantenidas en una mezcla de medio de cultivo Grace/L15, suplementado con suero fetal bovino al 15%, albendazol 5,4 mg/ml y una mezcla de anti (mas) bióticos, e incubadas a una temperatura promedio de 26 °C. Los cultivos celulares fueron inoculados con promastigotes metacíclicos de la cepa MH/CO/84/CI-044B de L. chagasi y la cepa HOM/BR752903 de L. braziliensis en una concentración de 10 parásitos por célula. Como control positivo de la infección se utilizó la línea celular J774. Resultados: Los registros más altos en el porcentaje de infección y en el número de amastigotes por células en los cultivos celulares A. aegypti y en la línea celular J774 se obtuvieron en los días 6 y 9 pos-infección. Los resultados mostraron interacción, internalización y maduración in vitro de las dos especies del parásito en las células de este insecto no vector de Leishmania. Las células de A. aegypti infectadas mostraron cambios en el área por la influencia de los parásitos, contrario a lo registrado en las células no infectadas (P Resumen en inglés The susceptibility of culture cells derived from embryonic tissues of Aedes aegypti to the infection with Leishmania (L) chagasi and Leishmania (V) braziliensis was evaluated. Methodology: These parasites are etiological agents of American visceral leishmaniasis and cutaneous leishmaniasis, respectively. Selected cells of Aedes aegypti were maintained in culture medium Grace/L15, supplement with 15% bovine fetal serum, 5,4 mg/ml of albendazol and an antibiotic mixture and (mas) incubated at an average temperature of 26°C. The cultures were inoculated with metacyclic promastigotes of the strain MH/ CO/84/CI-044B of L. chagasi and the strain HOM/BR752903 of L. braziliensis in a concentration of 10 parasites by cell. The J774 cell line was used as positive control of infection. Results: The highest percentage of infection represented as the number of amastigotes per cell in A. aegyti cell cultures and in the J774 cell line were obtained on days 6 and 9 post-infection. The results showed interaction, internalization and maturation in vitro of the two species of the parasite in the cells of a non-vector insect of Leishmania. Infected A. aegypti cells showed changes in its area because of the influence of the parasites that differ significantly (P

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Las proteínas arabinogalactanos en cultivos de células vegetales/ Arabinogalactan proteins in plant cell cultures/ As proteínas arabinogalactanos em cultivos de células vegetais

Hernández Sánchez, Arianna Michelle; Capataz Tafur, Jacqueline; Rodríguez-Monroy, Mario; Sepúlveda-Jiménez, Gabriela
2009-03-01

Resumen en portugués As proteínas arabinogalactanos (AGPs) são macromoléculas que se encontram praticamente em todos os órgãos das plantas, sendo associadas com vários aspectos do crescimento e desenvolvimento vegetal. Estas moléculas se caracterizam bioquímicamente por conter carboidratos e proteínas em relação 9:1. O carboidrato está composto principalmente por arabinogalactanos tipo II; enquanto que a parte protéica está organizada em domínios que definem as AGPs como cláss (mas) icas ou não clássicas. As primeiras se caracterizam, além disso, por apresentar uma sequência C-terminal que prediz a incorporação de um grupo glicosilfosfatidilinositol (GFI), que permite sua união à membrana plasmática. Em cultivos de células vegetais se relatam várias espécies que liberam AGPs ao meio de cultivo. Apresenta-se uma revisão das características bioquímicas das AGPs liberadas ao meio e das propostas sobre os mecanismos bioquímicos e celulares pelos quais as AGPs participam na diferenciação e crescimento das células vegetais. Os cultivos de células liberam ao meio de cultivo AGPs clássicas e não clássicas, e se propõe que poderiam provir da membrana plasmática ou da parede celular. As AGPs intervêm no controle do crescimento celular, além de estar relacionadas com a embriogênese somática e a organogênese, processos de diferenciação celular importantes nos sistemas de micropropagação de plantas. O mecanismo bioquímico pelo qual as AGPs participam no crescimento celular e a diferenciação, implica que estas, ou os produtos de sua degradação, talvez atuem como moléculas de sinalização. Resumen en español Las proteínas arabinogalactanos (AGPs) son macromoléculas que se encuentran prácticamente en todos los órganos de las plantas, siendo asociadas con varios aspectos del crecimiento y desarrollo vegetal. Estas moléculas se caracterizan bioquímicamente por contener carbohidratos y proteínas en relación 9:1. El carbohidrato está compuesto principalmente por arabinogalactanos tipo II; mientras que la parte proteica está organizada en dominios que definen a las AGPs c (mas) omo clásicas o no clásicas. Las primeras se caracterizan además por presentar una secuencia C-terminal que predice la incorporación de un grupo glicosilfosfatidilinositol (GFI), que permite su unión a la membrana plasmática. En cultivos de células vegetales se reportan varias especies que liberan AGPs al medio de cultivo. Se presenta una revisión de las características bioquímicas de las AGPs liberadas al medio y de las propuestas sobre los mecanismos bioquímicos y celulares por los cuales las AGPs participan en la diferenciación y crecimiento de las células vegetales. Los cultivos de células liberan al medio de cultivo AGPs clásicas y no clásicas, y se propone que podrían provenir de la membrana plasmática o la pared celular. Las AGPs intervienen en el control del crecimiento celular, además de estar relacionadas con la embriogénesis somática y la organogénesis, procesos de diferenciación celular importantes en los sistemas de micropropagación de plantas. El mecanismo bioquímico por el cual las AGPs participan en el crecimiento celular y la diferenciación implica que éstas, o los productos de su degradación, quizás actúen como moléculas de señalización. Resumen en inglés The arabinogalactan proteins (AGPs) are macromolecules found in practically all plant organs, being associated with several aspects of the plant growth and development. These molecules contain carbohydrates and proteins in a 9:1 relation. The carbohydrate moiety is composed mainly of type II arabinogalactans, whereas the protein has particular amino acid domains that allow classifying the AGPs into two groups, classical and non-classical. In addition, the former are chara (mas) cterized by a C-terminal tail that predicts the incorporation of a glycosylphosphatidylinositol group (GPI) that allows the attachment of the AGPs to the plasma membrane. Plant cell cultures of several species release AGPs into the culture medium. The biochemical characteristics of the AGPs released into the medium, and the proposed biochemical and cellular mechanisms by which AGPs participate in plant cell differentiation and growth are reviewed. The plant cells release classical as well as non-classical AGPs into the culture medium. The origin of these AGPs could likely be the plasma membrane or the cell wall. They are involved in the control of cellular growth and differentiation processes, aspects that have fundamental importance in the induction of somatic embryogenesis and organogenesis, key steps in plant micropropagation programs. The biochemical mechanism by which the AGPs participate in cell growth and differentiation implies that the AGPs or their degradation products participate like signal molecules.

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Identificación rápida de los serotipos del virus del dengue mediante la reacción en cadena de la polimerasa

DOMÍNGUEZ, DELFINA ROSARIO; SUÁREZ MORÁN, CARLOS MANUEL; RODRÍGUEZ ROCHE, ROSMARI; SOLER NODARSE, MARITZA; GUZMÁN TIRADO, MARÍA G
1996-12-01

Resumen en español Se emplearon 4 juegos de cebadores que permitieron la amplificación de una secuencia nucleotídica con talla única para cada uno de los serotipos del virus del dengue mediante la reacción en cadena de la polimerasa (RCP), con un método que consistió de extracción del ácido ribonucleico (ARN) de sobrenadante de cultivos celulares infectados, transcripción reversa - reacción en cadena de la polimerasa (TR-RCP), todo lo cual pudo ser completado en aproximadamente 7 (mas) horas, en un simple tubo. La talla de la secuencia amplificada se evidenció por electroforesis en un gel de agarosa, teñido con bromuro de etidio. El método demostró una sensibilidad de al menos 2,5 unidades formadoras de placa (ufp) por tubo de reacción, siendo útil para la detección e identificación simultánea de los 4 serotipos, a partir de sobrenadante de cultivos infectados de cepas provenientes de varios países del Caribe, América Central y del Sur. Resumen en inglés 4 primer sets, were used to allow the amplification of a nucleotide sequence with unique size for each of the dengue virus serotypes by polymerase chain reaction (PRC). The method consisted in the extraction of ribonucleic acid from supernatant of infected cell cultures, reverse transcription - polymerase chain reaction (RT-PCR). This was completed in approximately 7 hours in a simple tube. The size of the amplified sequence was evidenced by electrophoresis in Agarose gel (mas) stained with ethidium. The method showed a sensitivity of at least 2.5 plate forming units (pfu) per tube of reaction. It es useful for the detection and simultaneous identification of the 4 serotypes, starting from supernatants of infected strains cultures from different countries of the Caribbean, Central America, and South America.

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Evaluación de la capacidad protectora de la alfa-cristalina en el endotelio vascular

Pereira Roche, Nayade; Bequet Romero, Mónica; Martínez Bermúdez, Ana K; Manzanares, Dahis; García Piñeiro, José Carlos
2001-03-01

Resumen en español El endotelio vascular es un órgano de vital importancia para el mantenimiento de la función circulatoria. Su disfunción se asocia con enfermedades vasculares de alta incidencia. La búsqueda de agentes que reviertan o atenúen los efectos del daño oxidativo sobre el endotelio constituye una prioridad. Se utilizó la línea celular H5V para evaluar el daño producido por el isoprostano iPF2-III, producto de la peroxidación del ácido araquidónico por la acción de lo (mas) s radicales libres, y la capacidad protectora de la a-cristalina frente a esta agresión. La supervivencia de los cultivos celulares se evaluó por el ensayo MTT. Se obtuvo una disminución de la supervivencia en los cultivos tratados con iPF2-III a concentraciones mayores de 300 nmol durante 18 h de exposición. El tratamiento con alfa-cristalina disminuyó el efecto de iPF2-III en 20 %. Este trabajo propuso el efecto de las proteínas de shock término como protectoras endoteliales Resumen en inglés The vascular endothelium is a vital organ for keeping the circulatory function; its dysfunction is associated with vascular diseases of high incidence. The search for agents that reverse or mitigate the effects of the oxidative damage on the endothelium is a high priority. H5V cell line was used to evaluate the damage caused by iPF2-III isoprostane, a product of the free-radical catalized peroxidation of arachidonic acid, and the alpha crystallin´s protective capacity to (mas) this attack. The survival of cell cultures was assessed through the MTT assay. There was reduced survival in cultures treated with iPF2-III isoprostane at concentrations higher than 300 nmol for 18 hrs of exposure. The therapy with alpha crystallin lowered the iPF2-III effect by 20%. This paper showed the effect of heat-shock proteins as endothelial protective agents

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PERFIL DE SENSIBILIDAD DE HEP-G2 COMO MODELO PARA EVALUACIÓN DE ACTIVIDAD CITOTÓXICA DE XENOBIÓTICOS BIOACTIVADOS VIA CYP450/ SENSITIVILITY PROFILE HEP-G2 AS A MODEL OF CYTOTOXIC ACTIVITY DETERMINATION OF BIOACTIVATED XENOBIOTICS VIA CYP450

PRIETO, Stephanie O; ARISTIZÁBAL G, Fabio A
2009-05-01

Resumen en español Para establecer la acción anticancerígena se han propuesto numerosas metodologías, principalmente enfocadas en la valoración de la citotoxicidad in vitro sobre líneas celulares neoplásicas derivadas de diferentes tipos de cáncer humano; sin embargo, gran parte de estas líneas celulares presentan el inconveniente de ser limitadas metabólicamente y, por lo tanto, pueden no resultar apropiadas para establecer la citotoxicidad de potenciales profármacos, al mostrar (mas) falsos negativos. La línea celular Hep-G2 se emplea en la detección de moléculas que requieran activación metabólica para ejercer una actividad biológica, por ser de origen hepático y por exhibir actividad de varias enzimas de la fase I y II, que juegan un importante rol en la activación y detoxificación de xenobióticos. Hep-G2 es utilizada como modelo para encontrar actividad citotóxica producida por 2-amino-1-metil-6-fenilimidazol[4,5-b]piridina (PhIP) y ciclofosfamida, en presencia o ausencia de agentes inductores. Para este análisis se mide indirectamente el número de células viables mediante los ensayos de reducción del MTT y de tinción con resazurina. Adicionalmente se evalúa la posibilidad de emplear sistemas de co-cultivos con otras líneas celulares para fortalecer la sensibilidad del método. Se observa una limitada citotoxicidad de PhIP y ciclofosfamida, por lo cual se establece un sistema de cocultivos, en donde las respuestas son similares a las obtenidas con cada línea celular independiente. Los resultados permiten proponer que Hep-G2, pretratada con algunos agentes inductores, muestra, aunque limitadamente, una sensibilidad por PhIP, similar a lo propuesto por diferentes autores. Resumen en inglés Several methodologies have been proposed in order to establish anticancer action, mainly focused on in vitro cytotoxicity valuation on neoplasic cell lines derived from human cancer. However, most of these cell lines are metabolically incompetent, restricting model sensibility and generating false negative answers. Hep-G2 cell line is widely used because of its high sensibility reflecting phase I and II activity of some enzymes of phase I and II, which play an important r (mas) ole in activation and detoxification of xenobiotics. In this study, Hep-G2 is used as a model to find cytotoxic activity produced by 2-amino-1-methyl-6-phenylimidazo [4,5-b]pyridine (PhIP) and Cyclophosphamide, in presence or absence of inductor agents. This analysis was carried out by measuring indirectly viable number of cells with assays like MTT and resazurine staining. In addition, the possibility of co-cultures with other cell lines was evaluated according to strengthen method sensibility. Cytotoxicity of PhIP and cyclophosphamide was observed with the cellular staining methods. For this reason a co-culture system was established. The answer was similar to independent cell lines. These results propose that pre-treated Hep-G2 cells with some inductive agents show sensibility by PhIP as different authors postulate.

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La dicotomía de los virus polioma: ¿Infección lítica o inducción de neoplasias?/ The paradox of polyomaviruses Lytic infection or tumor induction?

Sanjuan, Norberto A.
2004-02-01

Resumen en español Los virus Polioma murinos provocan infecciones líticas en cultivos de células de ratón y transforman in vitro células de rata a través de la interacción de su oncogén mT con diversos reguladores celulares. Luego de su inoculación en ratones neonatos inducen neoplasias epiteliales y mesenquimáticas. Se ha propuesto que las cepas de polioma más oncogénicas son aquellas que previamente replican más en el ratón. Sin embargo, a nivel de una sola célula la infecci (mas) ón lítica y la transformación deberían ser mutuamente excluyentes. En cada neoplasia han sido descriptos 3 tipos celulares según expresen el DNA viral solo o concomitantemente con la proteína mayor de la cápside VP1, o que no contengan DNA viral ni VP-1. En nuestro laboratorio detectamos la existencia de un cuarto tipo celular en las neoplasias, en el que se expresa la totalidad del genoma viral pero no ocurre el ensamblaje, probablemente por alteraciones en la fosforilación de VP-1. Se discuten los mecanismos de migración intracelular de Polioma, la diseminación en el ratón y los factores que podrían estar involucrados en la inducción de neoplasias o en la infección lítica inducidas por el virus. Resumen en inglés Murine polyomaviruses can produce lytic infections in mouse cell cultures or transform in vitro rat fibroblasts through a complex interaction with key cellular regulators. After infection of newborn mice, some strains of polyomavirus induce epithelial and mesenchymal tumors. It has been described that there is a direct relationship between viral dissemination in the mouse and tumor induction. However, at a single cell level lytic infection and transformation would not be (mas) able to coexist. The existence of 3 distinct cell populations in polyoma-induced tumors, classified according to the presence or absence of viral DNA and viral capsid protein VP-1 have been described. We have reported a fourth type of cell in the neoplasms, that can express the early and the late viral genes but do not allow virus assembly, probably due to underphosphorylation of VP-1. The mechanisms of polyoma intracellular migration and dissemination in the mouse are discussed, related to the virus’ ability of tumor induction.

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Primary and secondary somatic enbryogenesis in leaf sections and cell suspensins of coffea arabica cv. catimor

Fernández-Da Silva, Rafael; Hermoso-Gallardo, Luis; Menéndez-Yuffá, Andrea
2005-11-01

Resumen en portugués O objetivo principal de este estudo foi caracterizar e melhorar u desenvolvimento dos embriões somáticos secundários no café (Coffea arabica cv. Catimor). Ademais, devido a que u desenvolvimento dos embriões somáticos primários e a primeira estágie da diferenciación dos embriões somáticos secundários, foram comparados três metodos para indução: 1) um meio solido em dois estágios, primeiro meio com 4,5µM do ácido 2,4-diclorofenoxiacetico (2,4-D) e 35µM d (mas) o benzyladenine (BA) e segundo meio com 4,3µM do ácido naftalenoacético, 2) um meio solido em uma estágio (4,4-53,3µM BA), e 3) suspensões celulares. Em esse ultimo tratamento, u calo fui formado em dois estágies do meio solido, uma com 9,3µM do cinetine e 2,3µM da 2,4-D, e segundo com 22,2µM do BA, e um terceiro meio líquido com 35µM do BA. Todos os tratamentos induziram embriognese somática primária e secundária. O rendimento mais elevado dos embriões somáticos foi obtido em suspensões celulares. Os embriões somáticos secundários foram diferenciados na maneira direta das células epidérmicas e subepidérmicas da zona hipocotilar dos embriões somáticos primários. Resumen en español El principal objetivo de esta investigación fue caracterizar y optimizar el desarrollo de embriones somáticos secundarios en café (Coffea arabica cv. Catimor). Adicionalmente, dado que la formación de embriones somáticos primarios es la etapa previa a la diferenciación de embriones somáticos secundarios, se compararon tres métodos para su inducción: 1) medio sólido en dos etapas, primero un medio con 4,5µM de ácido 2,4-diclorofenoxiacético (2,4-D) y 35µM de (mas) benciladenina (BA), y luego un medio con 4,3µM de ácido naftalenoacético, 2) medio sólido con 4,4-53,3µM BA en una etapa, y 3) cultivos en suspensión. En este último tratamiento el callo se formó en dos etapas de medio sólido, un medio con 9,3µM de cinetina y 2,3µM de 2,4-D y un segundo medio con 22,2µM de BA, así como en un tercer medio líquido con 35µM de BA. Todos los tratamientos indujeron la embriogénesis somática primaria y secundaria. El máximo rendimiento de embriones somáticos primarios se obtuvo en suspensiones celulares. Los embriones somáticos secundarios se diferenciaron directamente a partir de células epidérmicas y subepidérmicas en la zona hipocotilar de los embriones somáticos primarios. Resumen en inglés The main purpose of this research was to characterize and optimize the development of secondary somatic embryos in coffee (Coffea arabica cv. Catimor). In addition, as the primary somatic embryos formation is the previous stage to the differentiation of secondary somatic embryos, three methods for its induction were compared: 1) solid media in two stages, first in a medium with 4.5µM of 2,4-dichlorophenoxiacetic acid (2,4-D) and 35µM of benzyladenin (BA) and then in a m (mas) edium with 4.3µM naphtaleneacetic acid, 2) solid media with 4.4-53.3µM BA in one stage, and 3) suspension cultures. In the latter treatment the callus was formed in two stages of solid media, one containing 9.3µM of kinetin and 2.3µM of 2,4-D, and a second one with 22.2µM of BA, and a third liquid medium with 35µM of BA. All the treatments induced primary and secondary somatic embryogenesis. The highest yield of somatic embryos was obtained in suspension cultures. The secondary somatic embryos differentiated directly from epidermal and subepidermal cells of the hypocotilar zone of the primary somatic embryos.

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LÍNEA CELULAR DE Aedes aegypti (DIPTERA: CULICIDAE) AEGY28 REFRACTARIA A LA INFECCIÓN CON LOS VIRUS DENGUE 2 Y FIEBRE AMARILLA/ AEGY28 Cell Line of Aedes aegypti (Diptera Culicidae) is Infection Refractory to Dengue 2 and Yellow Fever Virus

CASTAÑEDA, NADIA Y; CASTELLANOS, JAIME E; ZAPATA, ANGELA C; BELLO, FELIO
2007-11-01

Resumen en español Los cultivos celulares de mosquitos son frecuentemente utilizados para el aislamiento, identificación y caracterización de arbovirus. Para el estudio de los virus dengue (VDEN) y virus de fiebre amarilla (VFA) se emplean, principalmente, la línea celular C6/36 de Aedes albopictus y la línea celular AP61, obtenida de Aedes pseudoscutellaris. La línea celular de A. aegypti AEGY28, previamente obtenida a partir de tejidos embrionarios del vector, se utilizó en el prese (mas) nte trabajo para evaluar la susceptibilidad a la infección por VDEN y VFA. Para ello, los cultivos celulares se ensayaron a diferente multiplicidad de infección con los aislados clínicos de virus dengue tipo 2 (COL789, MOI: 1 y 5) y VFA (V341, MOI 0,02). Posteriormente se realizó la detección de antígenos virales por la técnica de inmunocitoquímica y su cuantificación por la técnica de CellELISA fluorométrica. Se usaron como controles positivos de infección, tanto células C6/36 como células VERO. Inesperadamente, no se observó inmunoreactividad en las células de A. aegypti infectadas con ambos tipos de virus en ninguno de los MOI o tiempos estudiados. Tampoco se evidenció antígeno por la técnica fluorométrica ni fue posible detectar RNA viral por RTPCR a partir de células infectadas. Por lo tanto, se puede concluir que la línea celular de A. aegypti no es susceptible a la infección por VDEN ni por VFA. Ello podría estar relacionado con características propias de la membrana celular o de la maquinaria enzimática necesaria para la replicación viral Resumen en inglés Mosquito cell derived cultures are useful tools for arbovirus isolation, identification or characterization. For studying dengue (DENV) and yellow fever viruses (YFV) Aedes albopictus C6/36 or Aedes pseudoscutellaris AP61 cell lines, are normally used. The Aedes aegypti AEGY28 cell line was obtained from embryonic tissues and characterized previously by one of us. In order to evaluate its susceptibility to two Flavivirus, AEGY28 cells were inoculated with different multip (mas) licity of infection (MOI) with type 2 DENV (COL789, MOI: 1 and 5) and YFV clinical isolates (V341, MOI 0,02) then processed at different times post infection (p.i.). Immunostaining and fluorometric cellELISA were carried out to identify and quantify viral antigens. C6/36 and Vero cells were used as positive controls. Unexpectedly, immunoreactivity was not found in inoculated AEGY28 cells, even in higher MOI or late times p.i., therefore antigen quantification using fluorometric cellELISA were not plausible. Reverse transcriptase PCR with specific primers did not detect viral RNA in AEGY28 inoculated cells. We can conclude that Aedes aegypti AEGY28 cell line is not susceptible to dengue and yellow fever Flavivirus, a finding possibly related with the lacking of specific molecules at the plasma membrane or absence of cell machinery necessary for viral replication

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EVALUACIÓN DE ALGUNAS COMBINACIONES DE REGULADORES DE CRECIMIENTO INDUCTORAS DE CALLOS EN ACHIOTE (Bixa orellana L.), PLANTA ACTIVA CONTRA LA MORDEDURA DE SERPIENTES/ EVALUATION OF SOME GROWTH REGULATORS COMBINATION FOR CALLUS INDUCTION IN ANNATTO (Bixa orellana L.) ACTIVE PLANT AGAINST SNAKE BITES

ALARCÓN P., Juan C.; CASTAÑO P., Hader I.; CORRALES G., Ligia L.; JIMÉNEZ R., Silvia L.; DÍAZ C., Abel
2006-03-01

Resumen en español Recientes evidencias sugieren que el achiote puede constituirse en una alternativa terapéutica por sus efectos directos e indirectos contra el veneno de Bothrops asper, serpiente causante de la mayoría de mordeduras en nuestro país. Considerando que la producción metabólica ex vitro de esta planta no se obtiene de manera temprana y que eventualmente puede lograrse con ayuda de cultivos celulares, el trabajo evalúa algunas combinaciones inductoras de callos en segmen (mas) tos de hojas, raíces y tallos de plantas de Bixa orellana L. con el fin de inducir y masificar tejidos precursores de suspensiones celulares potencialmente productores de los metabolitos activos. Estos explantes, dispuestos en medios nutritivos sin reguladores de crecimiento, o con suplementos de algunas combinaciones de ellos, se almacenan por ocho semanas a 25± 1º C y oscuridad, verificando los porcentajes de formación de callo en las semanas dos, cinco y ocho del cultivo. La generación de callo en explantes provenientes de raíces no resulta masiva, mientras que en tallos y hojas se favorece con el tratamiento empleado y con el tiempo de exposición a los reguladores de crecimiento. Sin importar el explante utilizado, la inducción de callo se aumenta con la exposición al tratamiento que involucra NAA (5 µM) y kinetina (4,64 µM), alcanzando valores de 17.0 % (raíces), 58.9 % (tallos) y 77.5 % (hojas) Resumen en inglés Recent evidences suggest annatto can be constituted in a therapeutic alternative by its direct and indirect influences against the poison of Bothrops asper, cause of most of snake bite in our country. The ex- vitro metabolic production of this plant is not obtained in early growth stages but it is possible to obtain it by means of cell cultures. This research evaluates some inductive calli combinations of plant segments of Bixa orellana L., like leaves, roots and stems gr (mas) own in vitro, in order to get high induction rates and bigger amounts of tissue precursors of cellular suspensions, potentially producers of active metabolites. These explants, located in nutritious means without growth regulators, or with supplements of some combinations of them, are stored for eight weeks (25± 1º C and darkness) and the calli formation percentage tested in second, fifth and eighth week of growing. The calli generation in explants from roots is low, whereas in those from stems and leaves is favored with the treatment and with exposition time to the growth regulators. Regardless of the kind of explant used, the calli formation percentage is increased by the treatment that uses NAA (5 µM) and kinetine (4.64 µM), and showing values of 17,0 %, 58,9 % and 77,5 % for roots, stems and leaves respectively.

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Cultivos primarios de células endoteliales aisladas de cordón umbilical humano: un modelo biológico para el estudio de los mecanismos de infección por enterococos/ Primary cultures of human umbilical chord vein endothelial cells: a biological model for studying enterococcal infection mechanisms

Chiriboga, Carlos Andrés; Fontanilla, Marta Raquel
2004-12-01

Resumen en español Aunque las especies de enterococos son flora normal del tracto gastrointestinal humano, se encuentran entre los tres agentes patógenos microbianos que más se asocian con infecciones intrahospitalarias. Tradicionalmente, los enterococos se han considerado bacterias extracelulares. Sin embargo, es creciente la información que reporta su ingreso a través de líneas celulares epiteliales o macrófagos. A pesar de que estos microorganismos constituyen el tercer grupo de ai (mas) slamientos obtenido de pacientes con bacteriemia o endocarditis, su interacción con la célula endotelial no se ha descrito completamente. En el presente trabajo evaluamos si el aislamiento intrahospitalario de Enterococcus faecalis (Ef2880) podía penetrar en células endoteliales de la vena de cordón umbilical humano (HUVEC) cultivadas in vitro. Nuestros resultados indican que los cultivos primarios HUVEC después de ser inoculados con Ef2890, incubados y tratados con antibióticos bactericidas para las bacterias extracelulares y adheridas a la cara externa de la membrana celular, exhiben bacterias intracelulares que pueden ser recuperadas vivas cuatro horas después de la inoculación. El modelo biológico desarrollado se puede constituir en una herramienta útil para el estudio de las interacciones que establecen los enterococos con el endotelio. Resumen en inglés Although enterococcus bacteria are normal human intestinal flora, they rank as the third most common pathogen involved in hospital acquired infections. Generally, these bacteria are considered extracellular pathogens; however, an increasing number of reports indicate invasiveness to epithelial cell lines and macrophages. Despite their importance as nosocomial infection agents in patients suffering bacteremias and endocarditis, their interaction with endothelial cells has (mas) not been fully described. Herein, the nosocomial Enterococcus faecalis isolate Ef2890 from a hospitalized patient was exposed to cultured human venous endothelial cells from the umbilical chord. When the primary cell cultures were inoculated with Ef2890 and treated with bactericidal antibiotics to kill extracellular and adhered bacteria, intracellular bacteria were recovered and plated 4 h post-infection. These observations indicate that cell cultures provide a valuable biological model to study interactions between endothelium and enterococci.

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Detección de virus herpes canino tipo 1 en Chile/ Canine herpesvirus-1 detection in Chile

NAVARRO, C; CELEDON, M; PIZARRO, J
2003-12-01

Resumen en español RESUMEN Este trabajo informa la detección del virus herpes canino tipo 1 (VHC-1) en nuestro país, confirmando la fuerte sospecha clínica de su existencia. Se logró obtener un aislado viral, denominado RP5, a partir de casos clínicos diagnosticados como enfermedad hemorrágica de los cachorros. Este aislado inoculado en monocapas celulares produce el típico efecto citopático de miembros de la subfamilia alphaherpesvirinae, familia Herpesviridae: lisis celular a tiem (mas) pos cortos. Este aislado manifiesta este efecto tanto en cultivos primarios de pulmón y riñón canino, como también en la línea celular MDCK. Este efecto se pierde al preincubar el inóculo con solventes orgánicos, lo cual indica presencia de envoltura lipoproteica, lo cual descartaría la presencia de VAC-1 en este aislado. Como segunda confirmación de la presencia de VHC-1 en los cultivos celulares inoculados se procedió a realizar una prueba de inmunofluorescencia directa, utilizando un anticuerpo monoclonal anti VHC-1, conjugado con isotiocianato de fluoresceína (VMRD, Inc.), cuyos resultados señalan inequívocamente la presencia del virus. Determinar la presencia del virus es de gran importancia, pues al aislar y caracterizar el virus se podrá contar con un instrumento imprescindible para realizar futuras investigaciones. Por ejemplo, evaluar la magnitud de la infección en la especie canina, conocer de la repercusión de la infección por este virus en planteles reproductores, como también enfrentar el desafío del diseño de métodos diagnóstico de laboratorio mediante técnicas que involucran la inmunofluorescencia, el enzimoinmunoanálisis (ELISA) y la reacción en cadena de la polimerasa (PCR), y también elaborar posibles estrategias mediante la utilización de una eventual vacuna Resumen en inglés SUMMARY This work reports the detection of canine herpesvirus type 1 (CHV-1) in Chile, confirming the strong clinical suspicion of its existence. A viral isolate, RP5, was obtained from diagnosed clinical cases such as hemorrhagic diseases of puppies. This viral isolate was inoculated in cell monolayers and produced the typical cytopathic effect of members of the Alphaherpesvirinae subfamily, Herpesviridae family: cellular lysis in a short period of time. This viral isola (mas) te demostrated its effect in primary cultures of canine lung and canine kidney, and also in the MDCK cell line. This effect was lost due to prior incubation of the inoculate with an organic solvent, therefore the adenovirus presence was ruled out. As a specific confirmation of VHC-1 presence, a direct fluorescence test in inoculated cell cultures was carried out using monoclonal antibody anti CHV-1, fluorescein isothiocyanate conjugated (VMRD, Inc.) whose results suggest the presence of the virus. It is of great importance to determine the presence of the virus because the isolation and characterization of the virus will allow to carry out future investigations. This includes the evaluation of the magnitude of infection in the canine population and obtaining information about virus infection repercussion in reproductive places. It may also the challenge of diagnostic design of laboratory methods such as immunofluorescence, Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA) and Polymerase Chain Reaction (PCR). In addition it may possible to devise strategies in order to develop an eventual vaccine

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Aislamiento e identificación de células madre adultas a partir de la grasa infrapatelar de Hoffa/ Isolation and identification of stem cells derived of infrapatelar fat pad

Celis, Luis Gustavo; Losada, Fernando Lizcano; Garay, Jennifer; Acero, Edward; Maldonado, María Inés; Brochero, Johanna; Vargas, Diana; Navarro, Juliana; Ortiz, Juan Guillermo; Kling, Felipe; Arango, Roberto; Jaimes, Leonardo; Carrillo, Germán
2009-12-01

Resumen en español Introducción: La grasa infrapatelar de Hoffa es una inclusión infraarticular presente en la rodilla y existen evidencias que células multipotentes están presentes en tejido adiposo del humano adulto. Objetivo: El propósito de este trabajo es aislar e identificar células mesenquimales a partir de muestras de la grasa de Hoffa tomadas de pacientes a los que se les practicó cirugía de rodilla que expongan este tejido. Metodología: Una vez obtenido el consentimiento (mas) informado de un total de 12 pacientes, se obtuvo la muestra de tejido graso. La grasa fue disgregada incubándola en colagenasa en PBS a 37°C y con agitación, luego se inactivo con suero fetal bovino, se separaron mediante centrifugación los adipocitos maduros de las células multipotentes y se obtuvieron las muestras para sembrar en medio Mesencult. Una porción de muestra fue utilizada para identificación mediante citometría de flujo y otra parte para ser coloreada con azul de metileno. Resultados y Discusión: Tanto en las tinciones con azul de metileno como en los cultivos celulares se han apreciado células con la morfología propia de una célula mesenquimal en forma de estrella y que fueron corroborados mediante citometría de flujo para los marcadores CD13, CD29, CD59 y CD105; igualmente hemos podido observar la efectividad del tratamiento enzimático. Conclusiones: En la actualidad nos encontramos consolidando los cultivos primarios para posteriormente diferenciarlos en líneas celulares específicas que puedan ser utilizadas en estudios de patologías, tales como obesidad, diabetes y trastornos articulares. Resumen en inglés Introduction: The infrapatellar fat pad (sometimes know Hoffa's pad) is a soft tissue that lies beneath the patella (kneecap) separating it from the femoral condyle. There is evidence suggesting the presence of stem cells on adipose tissue in the adult human. Objective: The purpose of this work is to isolate and identify grown stem cells from Hoffa's fat samples obtained from patients undergoing surgeries exposing this tissue. Materials and Methods: After obtaining inform (mas) ed consent, the biopsy of Hoffa's fat pad was obtained. The samples were incubated with collagenase and PBS a 37 °C and agitated, then it was inactivated with fetal bovine serum and centrifuged, washed twice with PBS, the pellet was resuspended and one part was cultivated on Mesencult medium the other part was used for flow cytometry and stained with methylene blue for morphologic analysis. Also before and after the enzyme digestion, the samples were added to 10% formaldehyde to evaluate the collagenase treatment. Results and analysis: The results show the effectiveness of the enzymatic treatment, the architecture of the adipose tissue was lost. The star shape stem cells morphology was appreciated with methylene blue in the cultures, it was corroborated by flow cytometry with CD13, CD29, CD59 and CD 105 markers. Conclusions: Primary cultures are consolidating, the next aim will be to obtain differentiated specific cell types that can be use in the study of obesity, diabetes and articular illnesses.

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Estudio de alteraciones cromosómicas y su relación con el crecimiento in vitro en células de meningiomas/ Chromosomal alterations of meningioma cells and its relation to growth in vitro

Isaza, Carolina; Escobar, Martha Isabel; Montoya, Antonio; Sánchez, Jairo 
2006-03-01

Resumen en español Objetivos: Demostrar la frecuencia de alteraciones cromosómicas y su relación con la velocidad de crecimiento in vitro en cultivos de células de meningiomas. Los datos obtenidos en estudios previos han enseñado que existe una asociación entre las alteraciones cromosómicas con el riesgo de recurrencia y el estadío del tumor. Materiales y métodos: Se sometieron a cultivo muestras tomadas durante la cirugía de resecciones de meningiomas de cualquier localización, e (mas) n enfermos del HUV, Clínica Rafael Uribe y clínicas particulares, previo consentimiento firmado de los pacientes o familiares. Se realizaron cultivos celulares, se determinó la velocidad de crecimiento y se obtuvo el cariotipo para definir las alteraciones cromosómicas en cada tumor. Resultados: El 47% de los meningiomas que fue posible estudiar, presentan alteraciones cromosómicas diferentes o además de monosomía del cromosoma 22 que según publicaciones previas se asocian con progresión tumoral, y representan un riesgo de recurrencia mayor a 10%. Conclusiones: Los estudios citogenéticos y la velocidad de crecimiento in vitro de las células tumorales, pueden ser un excelente complemento del resultado quirúrgico, del estudio patológico, que contribuirían a establecer el riesgo de recurrencia y así ayudar a definir el pronóstico para el paciente intervenido. Resumen en inglés Objectives: To demonstrate the frequency of chromosomic alterations and their relationship to the growth velocity of in vitro meningioma cells cultures. Data obtained in previous studies have shown that there is a kinship between chromosomic alterations, the risk of recurrence and tumor stage. Materials and methods: Samples taken during meningioma resection surgery from any location were cultured. The samples were obtained from patients at the University Hospital, the Raf (mas) ael Uribe Clinic and private clinics, previous informed consent either from patients or their relatives. Cell cultures were performed, speed of growth was measured, and the karyotype was obtained in order to define the chromosomic alterations present in each tumor. Results: 47% of the meningiomas studied showed different chromosomic alterations or besides monosomy of the chromosome 22 that according to previous publications are associated to tumoral progression and represent a recurrence risk greater than 10%. Conclusions: The cytogenetic studies and the in vitro cellular growth velocity of the tumoral cells could be excellent complements of the surgical result and the pathology study, contributing to establish the risk of recurrence, so helping to define the patient’s prognosis.

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Comparative effect of the fungicide Prochloraz-Mn on Agaricus bisporus vegetative-mycelium and fruit-body cell walls/ Estudios comparativos del efecto del fungicida Prochloraz-Mn sobre las paredes celulares del micelio vegetativo y de los cuerpos fructíferos de Agaricus bisporus/ Estudos comparativos sobre o efeito do fungicida Prochloraz-Mn sobre as paredes celulares do micélio vegetativo e dos corpos de frutificação de Agaricus bisporus

Bernardo, Dolores; Pérez Cabo, Amelia; Novaes-Ledieu, Monique; Pardo, José; García Mendoza, Concepción
2004-12-01

Resumen en portugués Os fungicidas usados no controle de micopatógenos de Agaricus bisporus, um fungo de cultivo comercial para consumo humano, representam um importante tema de estudo devido ao fato de que são tóxicos tanto para o hospedeiro como para os parasitas fúngicos. O fungicida Prochloraz-Mn, empregado na sua dose LD50 para A. bisporus, inibe parcialmente a biossíntese de proteínas da parede celular do micélio vegetativo deste fungo e provoca mudanças significativas na estrut (mas) ura polissacarídica da parede celular, tal como se observa mediante a análise de metilação e de cromatografia líquida de gases-espectrometria de massa (GLC-MS). Por outro lado, as paredes agregadas do micélio apresentam diferentes alterações na composição química global depois da administração de Prochloraz-Mn nas doses LD50 e LD50 ×1000. Como esperado, os estudos de GLC-MS, indicaram que a última dose causa diferenças mais significativas na estrutura polissacarídica. A diminuição na produção do fungo nos cultivos industriais tratados com Prochloraz-MN para controle da infeção por V. fungicola, foi dependente da dose de fungicida empregada, enquanto que a morfologia do corpo de frutificação resulta ligeiramente afetada somente quando foi usada uma concentração mais elevada de Prochloraz-Mn. Resumen en español Los fungicidas para el control de micopatógenos de Agaricus bisporus, un hongo de cultivo comercial para consumo humano, representan un importante tema de estudio debido a que son tóxicos tanto para el huésped como para sus parásitos fúngicos. El fungicida Prochloraz-Mn, empleado a su LD50 para A. bisporus, inhibe parcialmente la biosíntesis de proteínas en las pared celular del micelio vegetativo de este hongo y provoca cambios significativos en la estructura poli (mas) sacárida de la pared celular, tal como se observa mediante el análisis de metilación y la cromatografía líquida de gases-espectrometría de masa (GLC-MS). Además, las paredes agregadas del micelio presentan diferentes alteraciones en la composición química global después de la administración de Prochloraz-Mn a la LD50 y LD50 ×1000. Como cabría esperar, los estudios de GLC-MS, indican que la última dosis causa más diferencias apreciables en la estructura polisacárida. La disminución en la producción del hongo en los cultivos industriales tratados con Prochloraz-Mn para controlar la infección por V. fungicola, dependía de la dosis de fungicida empleada, mientras que la morfología del cuerpo fructífero sólo resulta ligeramente afectada a la concentración de Prochloraz-Mn más elevada. Resumen en inglés Fungicides to control mycopathogens of commercial Agaricus bisporus, a mushroom cultivated for human consumption, are a major field of study, since these chemicals are toxic to both the host and its fungal parasites. The fungicide Prochloraz-Mn, used at its LD50 for A. bisporus, partially inhibited protein biosynthesis in the vegetative mycelial cell walls of this mushroom and caused significant changes in cell-wall polysaccharide structure, as deduced by methylation anal (mas) ysis and gas liquid chromatography-mass spectrometry (GLC-MS). Furthermore, the aggregated mycelial walls showed distinct alterations in their overall chemical composition following the administration of Prochloraz-Mn at the LD50 and the LD50 ×1000. As expected, GLC-MS studies indicated that the latter dose caused more appreciable differences in polysaccharide structure. The decrease in mushroom crop yields obtained from industrial cultures treated with Prochloraz-Mn to control V. fungicola infection depended on the dose of the fungicide employed, whereas fruit-body morphology was only slightly affected at the highest Prochloraz-Mn concentration used.

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Establecimiento y caracterización de una línea celular derivada de un glioblastoma multiforme/ Initiation and characterization of a glioblastoma multiforme derived cell line

Rincón, Verónica; Roa, Carmen Lucía; Osorio, Gloria; Aristizábal, Gerardo; Castellanos, Jaime E
2007-03-01

Resumen en español Introducción: Las líneas celulares y los cultivos primarios son una excelente herramienta para el estudio de la biología, desarrollo y respuesta a la terapia en tumores cerebrales. Objetivo: Establecer y caracterizar una línea celular derivada de un glioblastoma multiforme como un modelo de estudio in vitro para la extrapolación y aplicación futura en terapia génica. Material y métodos: Se obtuvo una muestra de un paciente con diagnóstico clínico e histopatológ (mas) ico de glioblastoma multiforme, se caracterizó mediante inmunohistoquímica en cortes de tejido y por inmunocitoquímica sobre células cultivadas a partir del tumor desde el inicio del cultivo y durante los seis primeros pases, con dos tipos de marcadores específicos para glía: GFAP (glial fibrillary acidic protein) y S-100 (proteína de unión a calcio). Además, se evaluó la expresión de p53 y Bcl-2, como moduladores de apoptosis. Por último se hizo la caracterización citogenética. Resultados: Histopatológicamente, se confirmó el diagnóstico de glioblastoma multiforme. En los cultivos primarios se encontraron características citomorfológicas propias de un glioblastoma: células fibroblastoides planas, células con escaso citoplasma con 3 ó más procesos y por último bipolares o unipolares. Se encontró una expresión diferencial con los cuatro marcadores, con un patrón de marcaciones a nivel citoplasmático y nuclear a través de los pases estudiados. La línea celular se caracterizó por ser en su mayoría aneuploide con un número modal cromosómico entre 43 y 45, con un gran número de poliploidías (55-102 , XXYY) y endo-reduplicaciones (end 45, X, -Y). Conclusión: Se estableció una línea celular derivada de un glioblastoma multiforme con un fenotipo estable, con un notable mantenimiento del perfil glial y citogenético. Resumen en inglés Introduction: Cell lines and primary cultures are a useful tool for studying basic biology, development and therapy responses in cancer and nervous system tumors. Aim: To establish and characterize a human glioblastoma multiforme (GBM) derived cell line as an in vitro biological model to study nervous system cancer chemotherapy and gene therapy. Materials and methods: A resected tumor piece was obtained from a patient with clinical and histopathological diagnosis of GBM. (mas) It was processed to obtain viable cells to culture and histological sections, which were immunostained to glial fibrillary acid protein (GFAP) and S-100 protein (calcium binding protein) and to evaluate expression of apoptosis related proteins p53 and Bcl-2. Finally a cytogenetic evaluation was carried out. Results: Histopathological examination confirmed classic findings of GBM. Typical cytomorphological features of GBM were found in cells of the primary cultures: bipolar or unipolar cells, flat fibroblastoid cells, process-bearing cells with scant cytoplasm and 3 or more processes. It was found a differential expression of the four markers, which had a nuclear and cytoplasmatic staining pattern throughout studied subcultures. Cell line exhibited a high level of aneuploidy with modal chromosomal number between 43-45, with presence of poliploidy (55-102 , XXYY) and endoreduplication (end 45, X, -Y). Conclusion: It was established a GBM derived cell line with a stable phenotype, maintaining morphological cell and cytogenetic characteristics.

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Virus de la Enfermedad Infecciosa de la Bolsa de Fabricio: Relaciones antigénicas de aislados cubanos y chilenos/ Infectious Bursal Disease Virus: antigenic interrelationships between

Noda, J; Ulloa, J; Perera, C L; Jara, G; Cuello, S; Rodríguez, E
2005-01-01

Resumen en español La Enfermedad Infecciosa de la Bolsa (EIB) sigue afectando la industria avícola por la aparición de variantes patogénicas y antigénicas del virus, originadas en la permanente evolución del virus producto de la presión inmunológica por el uso intensivo de vacunas. La caracterización antigénica de los virus de campo resulta esencial para la aplicación de vacunas más adecuadas en el control de la enfermedad. En este trabajo se determinaron las relaciones antigéni (mas) cas de aislados cubanos y chilenos, obtenidos de poblaciones de pollos vacunados con el virus de la EIB. Los aislados virales se adaptaron a cultivos celulares y se obtuvieron antisueros monoespecíficos de cada uno de ellos y de una cepa de referencia. Las relaciones se establecieron por virusneu-tralización cruzada utilizando nueve aislados cubanos (BD, BL, 35/95, 29/96, 118/96, BF2, BF8, BF9 y 70/98), tres chilenos (G1, G2 y G4) y una cepa de referencia del serotipo 1 (Lukert). Los aislados cubanos y chilenos se adaptaron eficientemente a cultivos de fibroblastos de embrión de pollo (con excepción de BF3 y G3). Además, los aislados cubanos se adaptaron a células VERO, presentando mayores títulos infectivos en fibroblastos de embrión de pollo que en esta línea celular. Los resultados de la seroneutralización cruzada mostraron entre los aislados cubanos una relación mayor a un 80% y entre éstos y la cepa de referencia mayor de un 70%, de igual modo con los aislados chilenos G1 y G4 (mayor de 77%). El aislado G2 presentó diferencias antigénicas consideradas menores con los aislados cubanos BL, 35/95 y 29/96 (­ 69%). Ninguno de los aislados mostró relaciones antigénicas inferiores al 30% con la cepa de referencia del serotipo 1, por lo tanto no corresponden a cepas variantes Resumen en inglés Infectious Bursal Disease (IBD) is still affecting the poultry industry through the appearance of pathogenic and antigenic variations of the virus. This is due to its permanent evolution as a consequence of the immunological pressure caused by the intensive use of vaccines. The antigenic characterization of field viruses is essential in order to use the most appropriate vaccines to control the disease. The purpose of this study was to determine the antigenic interrelation (mas) ship between cuban and chilean isolates obtained from flocks vaccinated with the IBD virus. Viral isolates were adapted to cell culture and mono-specific antisera were obtained for each isolate and for a reference strain. The interrelationship between the isolates were established by cross virus neutralization using nine cuban isolates (BD, BL, 35/95, 29/96, 118/96, BF2, BF8, BF9, y 70/98), three chilean isolates (G1, G2, y G4) and a reference strain from serotype 1 (Lukert). Both types of isolates adapted efficiently to chicken embryo fibroblast cultures. In addition, cuban isolates adapted to VERO cells and showed higher infective titers in chicken embryo fibroblasts than in this cell line. Cross virus neutralization results showed an interrelationship greater than 80% amongst cuban isolates and greater than 70% between the isolates and the reference strain. Chilean isolates G1 and G4 showed a similar result (higher than 77%). The G2 isolate had lower antigenic differences from cuban isolates BL 35/95 y 29/96 (­ 69%). None of the isolates showed antigenic interrelationships lower than 30% with the serotype 1 reference strain and consequently, they do not correspond to variant strains

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Primer aislamiento de Encephalitozoon intestinalis a partir de muestra de materia fecal de un paciente colombiano con sida/ isolate of Encephalitozoon intestinalis from stools of a Colombian patient with AIDS

Bedoya, Katherine; Montoya, Martha Nelly; Botero, Jorge; Galván, Ana Luz
2008-09-01

Resumen en español Introducción. Los microsporidios son agentes de infecciones oportunistas en pacientes con sida y con trasplantes, principalmente. Enterocytozoon bieneusi y Encephalitozoon intestinalis son los más frecuentes, asociados con infecciones entéricas. Los cultivos celulares han contribuido al conocimiento de los microsporidios. En Colombia no se han obtenido aislamientos provenientes de pacientes con microsporidiosis y, por consiguiente, no existen cepas autóctonas de los m (mas) ismos. Objetivo. Establecer el cultivo celular de microsporidios intestinales a partir de materia fecal de pacientes parasitados. Materiales y métodos. Se realizó concentración agua-éter de la materia fecal positiva para microsporidios y el sedimento resultante se trató con una mezcla de antibióticos y antimicóticos durante 18 horas a 37 oC. Se inocularon células Vero previamente cultivadas en placas de 24 pozos y en medio RPMI con suplemento de suero bovino fetal al 10% y antibióticos, con las esporas concentradas. Los cultivos se mantuvieron a 37 oC al 5% de CO2. Se cambió de medio cada dos días y se evaluó la presencia de esporas en los sobrenadantes mediante Gram-cromótropo rápido en caliente. Resultados. En la segunda semana después de la infección, se encontraron esporas de microsporidios con morfología y coloración características. Mediante PCR se determinó que el microsporidio encontrado correspondía a la especie E. intestinalis. Conclusión. Se estableció el cultivo in vitro de microsporidios de materia fecal. Este protocolo es importante para la obtención y el mantenimiento de cepas autóctonas en Colombia, y contribuirá a las investigaciones de aspectos bioquímicos, inmunológicos y epidemiológicos de dichas cepas. Resumen en inglés Introduction. Microsporidia are obligate intracellular parasites that are recognized as important opportunistic pathogens of immunocompromised and transplanted patients. Enterocytozoon bieneusi and, less frequently, Encephalitozoon intestinalis are the most prevalent species in humans; both of them are associated with enteric infections. Cell cultures have been useful in the study of microsporidia biology. In Colombia, however, no isolates of microsporidia from patients w (mas) ith AIDS have been obtained. Objective. A cell culture of intestinal microsporidia was established from stools of positive patients in order to isolate a native strain. Materials and methods. Stool from a single AIDS patient was concentrated with the water-ether technique, and the sediment was treated with a mixture of antibiotics and antifungal agents for 18 hours at 37o C. Vero cells were cultivated in 24-well plates with Gibco® RPMI medium supplemented with 10% bovine fetal serum and antibiotics. The culture was subsequently inoculated with previously concentrated spores. The medium was changed every second day and the presence of spores was evaluated with the Quick Hot Gram chromotrope stain. Results. Two weeks post-infection, microsporidial spores were identified with characteristic morphology and staining properties. PCR results showed that Encephalitozoon intestinalis was the isolated species. Conclusions. A cell culture of microsporidia was established from a stool sample. This protocol is important to isolate and maintain additional native Colombian strains and it will contribute to biochemical, immunological and epidemiological studies of the currently established strain.

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Principales características y diagnóstico de los grupos patógenos de Escherichia coli/ Diagnosis and main characteristics of Escherichia coli pathogenic groups

Rodríguez-Angeles, Guadalupe
2002-09-01

Resumen en español Escherichia coli coloniza el intestino del hombre pocas horas después del nacimiento y se considera de flora normal, pero hay descritos seis grupos de E. coli productora de diarrea: enterotoxigénica (ETEC), enterohemorrágica (EHEC), enteroinvasiva (EIEC), enteropatógena (EPEC), enteroagregativa (EAEC) y de adherencia difusa (DAEC). La bacteria se puede aislar e identificar tradicionalmente con base en sus características bioquímicas o serológicas, pero también se (mas) pueden estudiar sus mecanismos de patogenicidad mediante ensayos en cultivos celulares o modelos animales y, más recientemente, empleando técnicas de biología molecular que evidencian la presencia de genes involucrados en dichos mecanismos. La intención del presente trabajo es resaltar la importancia del estudio y diagnóstico de E. coli como patógeno capaz de causar casos aislados o brotes de diarrea, síndrome urémico hemolítico, colitis hemorrágica y cuadros de disentería, principalmente en niños; por esto es necesario conocer mejor a la bacteria y mantener la vigilancia epidemiológica. Resumen en inglés Escherichia coli colonizes the human intestinal tract within hours of birth and is considered a non-pathogenic member of the normal intestinal flora. However, there are six pathogenic groups that may produce diarrhea: enterotoxigenic (ETEC), enterohemorrhagic (EHEC), enteroinvasive (EIEC), enteropathogenic (EPEC), enteroaggregative (EAEC) and diffusely adherent (DAEC) groups. E. coli can be isolated and classified using traditional methods, by identifying its biochemical (mas) or serum characteristics. The pathogenic mechanisms may be studied in cell cultures and animal model assays, as well as more up to date molecular biology methods for study and diagnosis. The latter have proven that genes are involved in pathogenesis. The objective of the present work is to draw attention to the importance of E. coli as a pathogenic organism. This microorganism is an etiologic agent of sporadic cases of diarrhea, hemorrhagic colitis, dysentery, and hemolytic uremic syndromes and outbreaks. Diarrheic E. coli manifestations occur mainly among infants, and deep knowledge and understanding of this microorganism are crucial to better epidemiologic surveillance.

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Principales características y diagnóstico de los grupos patógenos de Escherichia coli/ Diagnosis and main characteristics of Escherichia coli pathogenic groups

Rodríguez-Angeles, Guadalupe
2002-09-01

Resumen en español Escherichia coli coloniza el intestino del hombre pocas horas después del nacimiento y se considera de flora normal, pero hay descritos seis grupos de E. coli productora de diarrea: enterotoxigénica (ETEC), enterohemorrágica (EHEC), enteroinvasiva (EIEC), enteropatógena (EPEC), enteroagregativa (EAEC) y de adherencia difusa (DAEC). La bacteria se puede aislar e identificar tradicionalmente con base en sus características bioquímicas o serológicas, pero también se (mas) pueden estudiar sus mecanismos de patogenicidad mediante ensayos en cultivos celulares o modelos animales y, más recientemente, empleando técnicas de biología molecular que evidencian la presencia de genes involucrados en dichos mecanismos. La intención del presente trabajo es resaltar la importancia del estudio y diagnóstico de E. coli como patógeno capaz de causar casos aislados o brotes de diarrea, síndrome urémico hemolítico, colitis hemorrágica y cuadros de disentería, principalmente en niños; por esto es necesario conocer mejor a la bacteria y mantener la vigilancia epidemiológica. Resumen en inglés Escherichia coli colonizes the human intestinal tract within hours of birth and is considered a non-pathogenic member of the normal intestinal flora. However, there are six pathogenic groups that may produce diarrhea: enterotoxigenic (ETEC), enterohemorrhagic (EHEC), enteroinvasive (EIEC), enteropathogenic (EPEC), enteroaggregative (EAEC) and diffusely adherent (DAEC) groups. E. coli can be isolated and classified using traditional methods, by identifying its biochemical (mas) or serum characteristics. The pathogenic mechanisms may be studied in cell cultures and animal model assays, as well as more up to date molecular biology methods for study and diagnosis. The latter have proven that genes are involved in pathogenesis. The objective of the present work is to draw attention to the importance of E. coli as a pathogenic organism. This microorganism is an etiologic agent of sporadic cases of diarrhea, hemorrhagic colitis, dysentery, and hemolytic uremic syndromes and outbreaks. Diarrheic E. coli manifestations occur mainly among infants, and deep knowledge and understanding of this microorganism are crucial to better epidemiologic surveillance.

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Listeria monocytogenes en alimentos: ¿son todos los aislamientos igual de virulentos?/ Foodborne Listeria monocytogenes: are all the isolates equally virulent?

López, V.; Suárez, M.; Chico-Calero, I.; Navas, J.; Martínez-Suárez, J. V.
2006-12-01

Resumen en español Listeria monocytogenes es un patógeno humano que se transmite a través de los alimentos y que causa infecciones graves, con una alta tasa de mortalidad. A pesar de la ubicuidad del microorganismo, la tasa real de la enfermedad es bastante baja y se asocia casi siempre a condiciones predisponentes. Tradicionalmente se consideraba que los aislamientos presentes en los alimentos y en el ambiente tenían la misma capacidad patogénica que los aislamientos de origen clínico (mas) . Pero el análisis de mutaciones en los genes de determinados factores de virulencia (internalina, hemolisina, fosfolipasas, proteína de superficie ActA y proteína reguladora PrfA), los estudios cuantitativos realizados con cultivos celulares y la genética de poblaciones, están replanteando la discusión sobre la variabilidad de la virulencia de L. monocytogenes. A pesar de todos estos avances, no existe un único marcador que permita comprobar la virulencia de los aislamientos naturales de esta especie. Probablemente en el futuro, la combinación de diferentes marcadores moleculares permitirá detectar los alimentos contaminados sólo por los clones virulentos de L. monocytogenes, con lo que se mejorará la prevención de la listeriosis humana transmitida por alimentos. Resumen en inglés Listeria monocytogenes is a foodborne human pathogen responsible for invasive infections presenting overall a high mortality. Despite the ubiquity of the microorganism, the actual disease rate is quite low and the disease is most often associated with an underlying predisposition. Foodborne and environmental isolates were traditionally considered of similar pathogenicity compared to clinical isolates. But the analysis of mutations in the genes encoding specific virulence (mas) factors (internalin, hemolysin, phospholipases, surface protein ActA and regulator protein PrfA), quantitative studies with cell cultures and population genetics have raised considerable concerns about virulence differences among L. monocytogenes strains. Despite this great step forward, there is not a single marker available to test the virulence of field isolates of this species. In the future, the combination of different molecular markers will probably allow the screening of food contamination by only the virulent clones of L. monocytogenes, thus improving the prevention of foodborne human listeriosis.

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Respuesta del receptor de lipoproteína de muy baja densidad a estresores inflamatorios/ Very low density lipoprotein receptor response to inflammatory stressors

Forcato, Diego Oscar; Sampedro, María Cecilia; Artola, Rodolfo; Pécora, Rolando Pascual; Kivatinitz, Silvia Clara
2007-12-01

Resumen en español Se estudió la regulación del receptor de lipoproteína de muy baja densidad (VLDLR) en dos tipos de células que intervienen en la respuesta inflamatoria: hepatocitos (HepG2) y células linfocitarias de bazo de ratón (CMB) por agentes implicados en la inflamación: VLDL o Gemfibrozil, lipopolisacárido bacteriano (LPS) para HepG2 o Concanavalina A (ConA) para CMB. Se determinaron por citometría de flujo las subpoblaciones de CMB y de HepG2 en distintas fases del ciclo (mas) celular (G1 y G2/M) con ioduro de propidio y las VLDLR+ con VLDL fluorescente. Entre 10 a 60 por ciento de células expresaron VLDLR dependiendo de las condiciones experimentales. El enfrentamiento con LPS o ConA produjo un aumento de células VLDLR+. El tratamiento con Gemfibrozil disminuyó el número de hepatocitos en reposo VLDLR+ pero incrementó significativamente (más de dos veces) los hepatocitos VLDLR+ en fase G2/M. En los cultivos de CMB Gemfibrozil aumentó por igual el porcentaje de células VLDLR+ quiescentes y en G2/M. El comportamiento de estos tipos celulares con VLDL fue distinto: CMB no mostró cambios en las subpoblaciones VLDLR+, los hepatocitos mostraron disminución de VLDLR+ tanto en fase G1 como en fase G2/M. Se concluyó que el estudio de la regulación de VLDLR en distintas células facilitará el diseño de fármacos específicos para el tratamiento de enfermedades de etiología inflamatoria. Resumen en inglés The regulation of the VLDL receptor (VLDLR) by molecules involved in the inflammation process (lipopolysaccharide, LPS; Concanavalin A, ConA, VLDL or Gemfibrozil) in two cellular types implied in the inflammatory response, hepatocytes (HepG2) and lymphocitary cells from mice spleen (CMB), was studied. Different subpopulations of CMB and HepG2 in different cell cycle phases (G1 and G2/M) were analyzed using flow citometry techniques with propidium iodide, and the VLDLR+ wi (mas) th fluorescent VLDL. In cultures of both cell types, it was observed that 10 to 60% of the cells expressed the VLDLR (VLDLR+ cells) indistinctly of the culture conditions. VLDLR+ cells belonged equally to cells in the quiescent and in the synthesis or mitosis phase of the cell cycle. Challenging them with LPS or ConA an increase in the percentage of VLDLR+ cells was produced. Gemfibrozil treatment decreased the number of resting hepatocytes VLDLR+ but increased significantly (more than twice) the number of hepatocytes VLDLR+ in phase G2/M. In hepatocytes there was almost the same proportion of VLDLR+ cells that were in the G1 or in the G2/M phase of the cell cycle. It is concluded that the study of VLDLR regulation will facilitate the design of new drugs to treat inflammatory diseases.

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El 17β-estradiol disminuye la expresión y asociación de quinasas responsables de la hiperfosforilación de Tau/ 17β-estradiol decreases the expression and association of kinases responsible of Tau hyperphosphorylation

Cepeda-Prado, Efraín; López-Tobón, Alejandro; García-Segura, Luis Miguel; Cardona- Gómez, Gloria Patricia
2008-09-01

Resumen en español Introducción: Un componente molecular predominante en el estudio de las enfermedades neurodegenerativas es la presencia del complejo Tau-GSK3β y su asociación con agregados proteicos al interior de la célula. Evidencias considerables muestran que GSK3β es el principal causante de la hiperfosforilación de Tau. Sin embargo, son poco claros los eventos moleculares que gobiernan este complejo. Objetivo: Determinar el efecto del 17β-estradiol en la expresió (mas) n y asociación de las quinasas responsables de la hiperfosforilación de Tau. Métodos: Se realizaron tratamientos con 17β-estradiol en hipocampo de rata Wistar adulta ovariectomizada y en cultivos primarios de hipocampo de rata tratados con b-amiloide. Se evaluó la asociación de complejos proteicos por co-inmunoprecipitación, ensayo de toxicidad por liberación LDH y cambios morfológicos celulares por microscopía confocal. Resultados: Este estudio mostró evidencias de que el estradiol disocia complejos macromoleculares como Tau/GSK3β, Tau/GluR2/3, Tau/FAK, Tau/Fyn en hipocampo de rata adulta. Además, disminuyó la expresión de GSK3β-ptyr por el tratamiento hormonal y éste reguló la defosforilación de Tau en un modelo de excitoxicidad porβ-amiloide. Conclusiones: Lo anterior sugiere, nuevos blancos que contribuyen al estudio de la neuroprotección y plasticidad neuronal mediada por el estrógeno. Resumen en inglés Introduction: A predominant molecular component analyzed in the study of neurodegenerative diseases is the presence of the Tau-GSK3β complex and its association with protein aggregation into the cell. Several evidences show that GSK3β has an important role in abnormal pattern of the phosphorylation of Tau. However, the molecular events that are governing this complex are unknown. Aim: To determine the effect of 17β-estradiol treatment on the expression and (mas) association of Tau hyperphosphorylation responsible kinases. Methods: 17β-estradiol treatments were realized in the hippocampus of ovariectomized adult wistar rats and in hippocampal primary cultures treated withβ-amiloid. Protein complex association was assessed by co-immunoprecipitation, toxicity assay by LDH release and cell morphologic changes by confocal microscopy. Results: Our results show that 17β-estradiol produced dissociation of macromolecular complexes like Tau/GSK3β, Tau /GluR2/3, Tau/FAK, and Tau/Fyn in hippocampus of adult rat. In addition the expression of GSK3β-ptyr was decreased by the hormonal treatment and this one regulated the defosforilation of Tau in an excitotoxicity model byβ-amiloid. Conclusions: It suggests new targets that will contribute to neuroprotection and neuronal plasticity studies mediated by the estrogen.

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Mecanismos del ciclo celular y la apoptosis implicados en las resistencias a los fármacos de uso intravesical en el cáncer superficial de vejiga/ Cell cycle and apoptosis mechanisms implicated in intravesical chemotherapy resistances in superficial bladder cancer

Burgués Gasión, J.P.; Pontones Moreno, J.L.; Vera Donoso, C.D.; Jiménez Cruz, J.F.; Ozonas Moragues, M.
2005-10-01

Resumen en español Numerosos estudios han demostrado la utilidad de la quimioterapia intravesical en la profilaxis de las recidivas del tumor vesical superficial después de la resección transuretral. Pero la eficacia de esta práctica puede verse limitada por la existencia de resistencias a agentes individuales o de multirresistencias a varios fármacos. Además de los mecanismos de resistencia clásicos o "unicelulares" determinados genéticamente, como la expresión de la glicoproteína (mas) P-170 (gen mdr-1), la sobreexpresión del gen Bcl-2 o la actividad de la glutation S-transferasa, existen otros mecanismos de resistencia "multicelular" que han podido ser demostrados en cultivos de agregados celulares tridimensionales, y no en las mismas células cultivadas en monocapa o en suspensión de células individuales. La adhesión célula-célula y célula-estroma condiciona por un lado una limitada penetración de las drogas y, por otro, unos gradientes de oxígeno y proliferación en los tejidos que crean distintas susceptibilidades al efecto citotóxico. El conocimiento de las resistencias y sus mecanismos es de gran importancia, puesto que se trata de uno de los puntos donde se puede actuar para optimizar la eficacia de la quimioterapia intravesical. Muchos investigadores han dedicado sus esfuerzos a la búsqueda de medios contra las resistencias mediante la aplicación de métodos para mejorar la penetración de los fármacos, la búsqueda de agentes reversores o la identificación de las resistencias con tests in vitro de quimiosensibilidad. Resumen en inglés It is well documented the effectiveness of intravesical chemotherapy following transurethral resection to prevent recurrences of superficial bladder cancer. But it is also known that efficacy may be limited by tumour cell resistance to one or several of the drugs available for instillation. In addition to the genetically determined unicellular mechanisms classically described in the literature such as glycoprotein P-170 expression (mdr-1), overexpression of Bcl-2 or gluta (mas) tion S-transferase activity, it has been recently shown that multicellular mechanisms may also be involved in drug resistance. Multicellular resistance can only be demonstrated in three-dimensional cultures and fails to be shown in monolayers or cell suspensions. This is explained by the fact that cell-to-cell and cell-to-stroma adhesion limits drug penetration and by the variable susceptibility to cytotoxicity determined by oxygen and tissue proliferation gradients. A better understanding of the molecular mechanisms involved in drug resistance is necessary to increase intravesical chemotherapy effectiveness. Current research includes improving drug penetration, searching resistance reversing agents and developing in vitro chemosensitivity tests to identify drug resistance.

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Evaluación de dos métodos biológicos (Subcutáneo e Intradérmico) para detectar Toxina Diftérica/ Evaluation of two different Biological Methods (Subcutaneous and Intradermal) for detecting Diphtheria Toxin

Fajardo, Esther María; Álvarez, Eduardo; Ruiz, Boris; Muñoz, Pedro
2004-08-01

Resumen en español Los Requisitos de la Organización Mundial de la Salud establecen los ensayos de toxicidad específica y reversión a la toxicidad de la anatoxina diftérica purificada como controles obligatorios del proceso productivo. El método propuesto para evaluar la toxicidad específica consiste en inocular curieles por vía subcutánea (método subcutáneo) con 1 mL del producto conteniendo 500 Lf/mL; señalan como posibles el ensayo en cultivos celulares y la inoculación intra (mas) dérmica (método intradérmico) de 20 Lf en curieles o conejos. Para la reversión a la toxicidad no se propone un método determinado, sólo que debe aprobarlo la Autoridad Reguladora Nacional y ser suficientemente sensible para detectar pequeñas cantidades de toxina. Por la importancia de estos ensayos que garantizan la seguridad del producto, se evaluaron ambos métodos, fundamentalmente sobre la base de su límite de detección (empleando concentraciones conocidas de una toxina diftérica de referencia), pero también con relación al cumplimiento del principio ético de las “tres Erres” (Reemplazo, Reducción, Refinamiento) y el tiempo requerido para obtener resultados. El método intradérmico resultó más sensible que el subcutáneo (límite de detección de 0,0067 x 10-4 Lf/mL vs 4,17 x 10-4 Lf/mL), requiere menos animales (2 vs 5 por muestra), su punto final es una reacción local (eritema), sin muerte (cumple con 2 “Erres”), es más corto (48 h vs 6 semanas) y por tanto, más económico. Se recomienda realizar los estudios correspondientes para introducirlo en los ensayos rutinarios de toxicidad específica y reversión a la toxicidad de la anatoxina diftérica purificada obtenida en el Instituto Finlay. Resumen en inglés The World Health Organization Requirements establish tests to determine both specific toxicity and reversion to toxicity of the purified diphtheria anatoxin as mandatory controls for the production process. The proposed method to evaluate the specific toxicity consists in the subcutaneous inoculation (subcutaneous method) of Guinea pigs with 1 mL of the product containing 500 Lf/mL; other suggested possible methods are those using cell-cultures and the intradermal inocula (mas) tion (intradermal method) of 20 Lf in Guinea pigs or rabbits. No specific method is proposed for the reversion to toxicity test; it only should be approved by the National Regulatory Authority and be sufficiently sensitive to detect small amounts of toxin. Due to the importance of those tests for supporting the safety of the product, both methods were evaluated, mainly in terms of their detection limits (by using known concentrations of a reference diphtheria toxin), but also related to the fulfilment of the ethical “3 Rs” principle (Replace,Reduction, Refinement) and the overall time required for the results. The intradermal method resulted more sensitive than the subcutaneous one (detection limit 0.0067 x 10-4 Lf/mL vs 4.17 x 10-4 Lf/mL), requires less animals (2 vs 5 per sample), its end-point is a local reaction (erythema) instead of death (meets 2 “Rs”) and it is shorter in time (48 h vs 6) weeks and therefore more economic. It is recommended to carry out the corresponding studies for its introduction in the routine specific toxicity and reversion to toxicity tests performed on the purified diphtheria anatoxin produced at Finlay Institute.

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Sincronización de Células de Tabaco (Nicotiana tabacum) NT-1/ Synchronization of tobacco cells (Nicotiana tabacum) NT-1

Ruiz, León F; Higareda, Ana E; Pardo, Marco A
2010-01-01

Resumen en español Se ha evaluado la capacidad sincronizante de afidicolina e hidroxiurea en cultivos de células de tabaco (Nicotiana tabacum) NT-1. Los cultivos sincronizados son poderosas herramientas en estudios moleculares y bioquímicos relacionados al ciclo celular y comúnmente se utilizan químicos para bloquear el ciclo celular. La línea celular de tabaco (Nicotiana tabacum) NT-1 proviene de la línea celular TBY-2, caracterizándose NT-1 por su menor velocidad de crecimiento y t (mas) amaño celular heterogéneo. Los resultados mostraron una sincronía del 30 % de NT-1 con afidicolina 5 mg/ml, similar a la obtenida con TBY-2. Se probaron diferentes concentraciones de hidroxiurea, obteniéndose niveles óptimos de sincronización de hasta 31 % con 0.75 mM. Se muestra también que es posible sincronizar cultivos NT-1 en porcentajes similares a cultivos TBY-2 con afidicolina e hidroxiurea. Para este propósito, se recomienda la hidroxiurea por ser químicamente más estable y económica Resumen en inglés The synchronizing capacity of aphidicolin and hydroxyurea on NT-1 cultures of tobacco cells (Nicotiana tabacum) NT-1. Synchronized cell cultures are a powerful tool in biochemistry and molecular studies related to cell cycle and commonly chemicals are used to block the biochemical cycle. The tobacco cell line NT-1 comes from cell line TBY-2, the former being characterized with a slower growth rate and heterogeneous cell size. Results show 30 % synchrony with 5 mg/ml aphid (mas) icolin, similar to that obtained with TBY-2. Different concentrations of hydroxyurea were tested, obtaining an optimal synchrony of 31 % at 0.75 mM of concentration. It is also shown that it is possible to synchronize NT-1 cultures in similar percentages to those obtained with TBY-2, with either aphidicolin or hydroxyurea. For this purpose, hydroxyurea is recommended because of its lower cost and chemical stability

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Avances en el diseño conceptual de fotobiorreactores para el cultivo de microalgas

Flores, Coral Contreras; Peña-Castro, Julián Mario; Flores-Cotera, Luis Bernardo; Cañizares-Villanueva, Rosa Olivia
2003-08-01

Resumen en portugués Durante a década passada se tem usado múltiplos desenhos de foto bio reatores para o cultivo de organismos foto autotróficos microscópicos como microalgas e cianobactérias. Os avanços no desenho destes sistemas tem permitido melhorar notavelmente a densidade celular, a produtividade e por isto a economia dos cultivos para distintos fins. Neste trabalho se revisam diferentes aspectos do desenho de foto bio reatores, tanto aqueles que implicam o aproveitamento adequad (mas) o da energia luminosa (ciclos luz-escuridão, trajetória da luz e geometria de foto bio reatores) como os baseados em conceitos fisiológicos (foto inibição por oxigênio, cultivos de alta densidade celular, ultra-alta densidade celular, heterotrofia e mixotrofia). Apresentam-se as principais aplicações dos diferentes desenhos, na produção de compostos de alto valor agregado e seu uso potencial na biotecnologia ambiental. Resumen en español Durante la década pasada se han usado múltiples diseños de fotobiorreactores para el cultivo de organismos fotoautotróficos microscópicos como microalgas y cianobacterias. Los avances en el diseño de estos sistemas han permitido mejorar notablemente la densidad celular, la productividad y por ende la economía de los cultivos para distintos fines. En este trabajo se revisan diferentes aspectos del diseño de fotobiorreactores, tanto aquellos que implican el aprovech (mas) amiento adecuado de la energía luminosa (ciclos luz-oscuridad, trayectoria de la luz y geometría de fotobiorreactores) como los basados en conceptos fisiológicos (fotoinhibición por oxígeno, cultivos de alta densidad celular, ultra alta densidad celular, heterotrofía y mixotrofía). Se presentan las principales aplicaciones de los diferentes diseños, en la producción de compuestos de alto valor agregado y su uso potencial en la biotecnología ambiental. Resumen en inglés During the last decade, many different photobioreactor types have been used for culturing autotrophic microorganisms like microalgae and cyanobacteria. Advances in reactor design allowed considerable improvements of cellular density, productivity and overall economy of cultures for diverse purposes. In this paper, several important photobioreactor design concepts are reviewed, including those involved with adequate use of light energy (light/dark cycles, light path and re (mas) actor geometry) as well as those based in physiological concepts (oxygen photoinhibition, high cell density cultures, ultra high density cultures, heterotrophy and mixotrophy). A brief account of the current applications of new photobioreactors in fine chemicals production and possible uses in environmental biotechnology is made.

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Efecto de la ticlopidina en los cambios morfológicos de cultivos endoteliales inducidos por la interacción endotoxina plaqueta

Martínez de Lima, Nina
2007-12-01

Resumen en español La endotoxina (lipopolisacárido) induce estados trombogénicos en el shock séptico. La agregación plaquetaria inducida por lipopolisacárido es inhibida por ticlopidina. Investigamos si ticlopidina podía modificar el efecto de la interacción lipopolisacárido - plaqueta sobre la morfología de cultivos endoteliales. Las células fueron aisladas de la microvasculatura dérmica de embriones de rata. Los cultivos fueron incubados con: lipopolisacárido; lipopolisacárid (mas) o + plasma rico en plaquetas; lipopolisacárido + plasma rico en plaquetas de ratas pretratadas con ticlopidina; lipopolisacárido + solución de ticlopidina; lipopolisacárido + plasma rico en plaquetas + solución de ticlopidina; solución de ticlopidina. Se evidenció daño celular con lipopolisacárido, que se acentuó en presencia de plasma rico en plaquetas, pero con plasma rico en plaquetas procedente de ratas pretratadas con ticlopidina, estas alteraciones no estuvieron presentes. En conclusión ticlopidina suprimió las alteraciones derivadas de la interacción lipopolisacárido - plaqueta sobre el endotelio por lo que podría tener un potencial terapéutico en el shock séptico Resumen en inglés induced by lipopolysaccharide is inhibited by ticlopidina. We investigated if ticlopidina could modify the effect of the lipopolysaccharide -platelets interaction, on endothelial cell morphology. The endothelial cells were isolated from rat embryos dermal microvasculature. The cultures were incubated with: lipopolysaccharide; lipopolysaccharide + platelet rich plasma; lipopolysaccharide + platelet rich plasma from rats treated with ticlopidina; lipopolysaccharide + ticlop (mas) idina solution; lipopolysaccharide + control platelet rich plasma + ticlopidina; ticlopidina solution. The results evidenced citoplasmatic alterations with lipopolysaccharide. This cellular damage was strengthen by platelet rich plasma; however, in the presence of platelet rich plasma from rats pretreated with ticlopidina, these changes did not become present. We concluded that ticlopidina suppresses some derived adverse effects of the lipopolysaccharide -platelet interaction on the endothelium, thus ticlopidina could have a therapeutic potential on septic shock

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Efecto tóxico del cadmio sobre microalgas aisladas del nororiente de venezuela

Romero, Yollys; Lodeiros, César; Esclapés, Mercedes; Marín, Nellys; Guevara, Miguel; Morales, Ever
2002-03-01

Resumen en portugués Foi avaliado o efeito tóxico do cadmio em duas espécies de microalgas, Chaetoceros sp. (A1) e Tetraselmis sp. (G1), isoladas no norte oriente da Venezuela. Um primeiro experimento consistiu em expor cultivos das microalgas, em fase logarítmica de crescimento, a diferentes concentrações de Cd (0; 0,01; 0,05; 0,1; 5; 10; 50 e 100 mg/l) durante 96h, para determinar o efeito tóxico mediante um reconto celular cada 12h. Em outro experimento se avaliou o efeito tóxico me (mas) diante à inoculação das microalgas em meios sem e com Cd a uma concentração subletal de 0,05mg/l durante 14 dias; neste caso, além do reconto celular se determinaram índices fisiológicos (volume celular, componentes bioquímicos e concentração de pigmentos) em três fases do crescimento dos cultivos. O primeiro experimento mostrou que os valores da dose letal ao 50% da população foram de 0,63 e 0,56mg/l para Tetraselmis sp. (G1) e Chaetoceros sp. (A1), respectivamente. No experimento de exposição ao Cd durante 14 dias, em ambas espécies se observou uma diminuição do crescimento e dos pigmentos, assim como um aumento do volume celular. Os componentes bioquímicos, em ambas espécies, se mantiveram, em geral, constantes em ambas espécies nas fases de crescimento, em contraste com seus respectivos controles, que mostraram um aumento progressivo. Foi evidenciado que Chaetoceros sp. (A1) foi a espécie mais afetada fisiologicamente, sendo a mais sensível ao contaminante. Os resultados obtidos permitem sugerir que o Cd tem um efeito negativo no fitoplancton, propondo-se o emprego das microalgas como espécies modelos para estudos ecotoxicológicos no norte oriente de Venezuela. Resumen en español Se evaluó el efecto tóxico del cadmio en dos especies de microalgas, Chaetoceros sp. (A1) y Tetraselmis sp. (G1), aisladas en el nororiente de Venezuela. Un primer experimento consistió en exponer cultivos de las microalgas, en fase logarítmica de crecimiento, a diferentes concentraciones de Cd (0; 0,01; 0,05; 0,1; 5; 10; 50 y 100mg/l) durante 96h, para determinar el efecto tóxico mediante un recuento celular cada 12h. En otro experimento se evaluó el efecto tóxico (mas) mediante la inoculación de las microalgas en medios sin y con Cd a una concentración subletal de 0,05mg/l durante 14 días; en este caso, además del recuento celular se determinaron índices fisiológicos (volumen celular, componentes bioquímicos y concentración de pigmentos) en tres fases del crecimiento de los cultivos. El primer experimento mostró que los valores de la dosis letal al 50% de la población fueron de 0,63 y 0,56mg/l para Tetraselmis sp. (G1) y Chaetoceros sp. (A1), respectivamente. En el biensayo de exposición al Cd durante 14 días, en ambas especies se observó una disminución del crecimiento y de los pigmentos, así como un aumento del volumen celular. Los componentes bioquímicos, en ambas especies, se mantuvieron, en general, constantes en las fases de crecimiento, en contraste con sus respectivos controles, que mostraron un aumento progresivo. Se evidenció que Chaetoceros sp. (A1) fue la especie más afectada fisiológicamente, siendo la más sensible al contaminante. Los resultados obtenidos permiten sugerir que el Cd tiene un efecto negativo en el fitoplancton, proponiéndose el empleo de las microalgas como especies modelos para estudios ecotoxicológicos en el nororiente de Venezuela. Resumen en inglés Lethal and sublethal effects of cadmium were studied on two species of microalgae, Chaetoceros sp. (A1) and Tetraselmis sp. (G1), isolated in the northeastern region of Venezuela. In a first experiment, microalgal cultures in logarithmic growth phase were exposed to different concentrations of Cd (0; 0.01; 0.05; 0.1; 5; 10; 50 and 100 mg/l) for 96 hours, determining the toxic effects through cell counts every 12 hours. In another experiment toxic effects were evaluated by (mas) microalgae inoculation in media with and without Cd in sublethal concentration of 0.05mg/l for 14 days; cell counts and physiological indicators (cellular volume, biochemical components and pigment concentration) were evaluated in three growth phases of the cultures. The lethal doses (50% of the cultivated population) were 0.63 and 0.56mg/L for Tetraselmis sp. (G1) and Chaetoceros sp. (A1), respectively. Sublethal Cd concentration produced in both algae a decrease in growth and in pigments, and an increase of cell volume. Biochemical components in both species generally remained constant during the growth phases, in contrast with their respective controls, which showed a progressive increase. The study showed that Chaetoceros sp. (A1) was the most affected species physiologically, being the most sensitive one to the contaminant. The results of the study allow us to suggest that Cd has a negative effect on phytoplankton, and to recommend microalgae as model species for ecotoxicological studies in northeastern Venezuela.

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Caracterización biológica de aislamientos de VIH-1 en pacientes con una evolución clínica rápida

Lobaina Barthelemy, Leonor; Dubed Echevarría, Marta; Vilarrubia Montes de Oca, Olga Lidia; Navea Leyva, Leonor; Díaz Torres, Héctor M.; Izquierdo Márquez, Maricela; Noa Romero, Enrique
1998-08-01

Resumen en español Se estudiaron las características biológicas de 11 cepas de VIH-1 aisladas de pacientes con rápida evolución clínica al sida. Los aislados virales se clasificaron según su cinética de replicación y tropimo celular, con estos criterios se observó que 8 de las cepas aisladas (72,7 %) resultaron de crecimiento rápido alto o lento bajo 3 y con tropismo preferencial a la estirpe linfocítica, como corresponde a los pacientes con sida, mientras 3 (27,3 %) tuvieron car (mas) acterísticas de lenta baja 1. La citopatogenicidad de las cepas se estudió en la línea celular MT4 y se observó que la mayoría (72,7 %) resultó inductora de sincicios (IS), por lo que se comprobó relación in vivo e in vitro de las propiedades biológicas, no ocurrió así en 3 de los cultivos (27,3 %) que se comportaron como no inductores de sincicios. Resumen en inglés The biological characteristics of 11 HIV-1 strains isolated from patients with a fast clinical evolution to AIDS were studied. The viral isolates were classified according to their replication kinetics and cell tropism. Taking into account these criteria, it was observed that 8 of the isolated strains (72,7 %) were of rapid high growth (RH) or slow low 3 (SL3) with preferential tropism to the lymphocytic stock, as it corresponds to AIDS patients. 3 (27,3 %) had characteri (mas) stics of slow low 1 (SL1). The cytopatogenecity of the strains was studied in the MT4 celular line, and it was observed that most of them (72,7 %) were syncytium-inducing strains (SI), which allowed to prove the in vivo and in vitro relation of the biological properties. It was not so in 3 of the cultures (27,3 %) that behaved as non-syncytium inducers.

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Sensibilidad a Citostáticos de Células de Tumores Cerebrales Humanos en Cultivo

Díaz, M; Moscoso, J; Salazar, P; Matus, P; Cubillos, S; Lima, L
2002-07-01

Resumen en español Los cultivos de gliomas malignos se han realizado con el objeto de conocer su biología, estudiar nuevas drogas antineoplásicas y determinar la sensibilidad diferencial a citostáticos. Catorce pacientes con diagnósticos clínico y radiológico sugestivos de tumor cerebral maligno fueron seleccionados de acuerdo a criterios específicos, lo que incluyó la evaluación según el esquema de Karnofsky, el cual determina el estado funcional independiente del paciente. Se re (mas) alizó la resección quirúrgica, se efectuó el estudio histopatológico y se tomó una muestra del tumor para cultivo en monocapas. La confluencia celular se alcanzó entre 15 y 45 días y los cultivos fueron expuestos a los citostáticos (1,3-bis(2-cloroetil)-1-nitrosouréa, cisplatino o vincristina por una hora. Se determinó la integridad de la membrana mediante la exclusión del colorante azul de Tripán. Se encontraron diferencias estadísticamente significativas entre las drogas utilizadas y entre los tumores, incluso con el mismo diagnóstico histopatológico, lo cual indica la existencia de resistencia diferencial de las células tumorales a los citostáticos utilizados. Este estudio constituye un ensayo que sustenta la realización de evaluaciones a largo plazo con el fin de emplear una quimioterapia específica en pacientes en los que probablemente se combine ésta con la radioterapia. Resumen en inglés Malignant glioma cell cultures have been done for studying the biology of the tumors, the efficiency of antineoplasic drugs, and for determining the differential sensitivity to cytostatics. Fourteen patients with clinical and radiological diagnostics of malignant brain tumor were selected according to specific criteria, including the evaluation by Karnofsky scale, which determines the functional independence of the patient. After surgical resection of tumors, histopatholo (mas) gical study was done and a sample was taken for monolayer cultures. Confluence was reached 15 to 45 days after plating and the cultures were exposed to (1,3-bis(2-chloroethyl)-1-nitrosourea, cisplatin or vincristine for one hour. Integrity of cell membranes was evaluated by the exclusion of Tripan blue. There were statistical significant differences between drugs and between the tumors, including those with the same histophatological diagnostic, indicating a differential resistance of the tumoral cells to the cytostatics used. The results of this study support the viability for further evaluations in order to suggest specific antineoplasic treatments probably in combination with radiotherapy for patients having malignant brain tumors.

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Estudio inmunocitoquímico y molecular de cultivo primario de tejido molar/ Immunocytochemical and molecular studies with primary cultures of molar tissue

Bernal, Yinth Andrea; Díaz, Luis Eduardo; Acosta, Jinneth; Crane, Cecilia; Carrasco-Rodríguez, Stella; Bermúdez, Antonio José; Sánchez-Gómez, Myriam
2006-12-01

Resumen en español Introducción. La enfermedad trofoblástica gestacional comprende un conjunto de patologías caracterizadas por crecimiento e invasión anómalos del trofoblasto. Las bases moleculares de esta patología son desconocidas, en parte por la dificultad para disponer de modelos biológicos adecuados. Se plantea que el sistema de factores de crecimiento similares a la insulina puede tener un papel fundamental en el desarrollo de la enfermedad. Objetivo. Caracterizar cultivos pr (mas) imarios de placentas de primer trimestre provenientes de pacientes con mola hidatidiforme completa y aborto espontáneo no molar mediante morfología, inmunocitoquímica y expresión diferencial de algunos genes del sistema de factores de crecimiento similares a la insulina. Materiales y métodos. Se empleó inmunocitoquímica para determinar células trofoblásticas y detección por transcripción reversa y reacción en cadena de la polimerasa de genes del sistema de factores de crecimiento similares a la insulina asociados al tipo celular. Resultados. La morfología evidenció heterogeneidad de los cultivos, incluidas células mesenquimales, trofoblásticas y de decidua. El contenido de células de trofoblasto con citoqueratina-7 (marcador específico) estuvo entre 16 y 37%. La expresión de genes corroboró la presencia de trofoblasto por medio del ARNm del factor II de crecimiento similar a la insulina, en tanto que los transcritos de la hormona de crecimiento variante evidenciaron la presencia de sincitiotrofoblasto. El factor I de crecimiento similar a la insulina y la proteína de unión tipo 1 se relacionaron con células mesenquimales y de decidua. Se observó una mayor expresión del factor II de crecimiento similar a la insulina en tejidos molares en comparación con aborto no molar. Conclusiones. Los resultados mostraron la utilidad de combinar tres metodologías, morfología, inmunocitoquímica y expresión de genes, como herramientas para la caracterización y seguimiento de cultivos placentarios a partir de muestras de tejidos anómalos complejos, facilitando así el diagnóstico. Resumen en inglés Introduction. Gestational trophoblastic disease includes a group of pathologies characterized by abnormal trophoblast growth and invasion. The molecular bases of the disease are largely unknown, due in part to the lack of appropriate biological models. The insulin-like growth factor (IGF) system plays a fundamental role in the growth and development of many tissues and is involved in the progression of several diseases. Objectives. Primary cell cultures derived from first (mas) trimester placenta were characterized from patients with complete hydatidiform mole and spontaneous non molar abortion by immunocytochemical and molecular methods. Materials and Methods. The immunocytochemical method used specific markers for trophoblastic cells, whereas RT-PCR was used to identify insulin-like growth factor gene expression. Results. Histochemical staining with hematoxilin-eosin revealed that the cultures contained heterogeneous cell types, including trophoblast and endometrial decidual cells. The ratio of trophoblast cells in the cultures varied between 16% and 37%, as detected by cytokeratine-7 as the specific trophoblast marker. Gene expression analysis corroborated the presence of trophoblasts by detecting insulin-like growth factor II mRNA, whereas GH-V transcripts were correlated with the presence of syncitiotrophoblasts. Insulin-like growth factor I and insulin-like growth factor binding protein 1 mRNAs were related to mesenchyimal and decidual cells, respectively. Higher insulin-like growth factor II expression levels were found in molar tissues in comparison with non-molar abortions. Conclusion. By combining three methodologies-morphology, immunocytochemistry and gene expression, characterization and follow-up of placenta cultures from abnormal tissues is found to facilitate diagnosis.

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Efectos de los campos magnéticos sobre el crecimiento de saccharomyces cerevisiae

Zapata M, José E; Moreno O, Germán; Márquez F, Edna J
2002-10-01

Resumen en portugués Cultivos de Saccharomyces cerevisiae foram submetidos ao efeito de campos magnéticos variáveis de alta frequência (até 100kHz) e baixas densidades de fluxo (até 620mG). Aplicou-se a metodologia estatística de superfícies de resposta para avaliar em que faixas das variáveis densidade de campo, frequência e tempo de aplicação, se obtinham efeitos significativos sobre a concentração celular (CB). Nos valores das variáveis preditos como significativos pelos mode (mas) los obtidos das superficies de resposta, fizeram-se comparações entre o crescimento do cultivo a diferentes densidades de fluxo, tempos de exposição ao campo e frequências, para avaliar o comportamento CB diante da modificação de uma só variável por vez. Utilizou-se o método da mínima diferença significativa (LSD) para comparar os resultados dos ensaios correspondentes a cada variável. Os resultados mostraram que se pode estimular o crescimento do cultivo tratado com campos magnéticos, quando se utilizam campos com densidades de fluxo de 20mG, frequências de 100kHz e tempos de aplicação de 30s. As percentagens de estimulação obtidas com este tratamento foram de 30% com respeito a um cultivo controle. Resumen en español Cultivos de Saccharomyces cerevisiae fueron sometidos al efecto de campos magnéticos variables de alta frecuencia (hasta 100kHz) y bajas densidades de flujo (hasta 620mG). Se aplicó la metodología estadística de superficies de respuesta para evaluar en qué rangos de las variables densidad de campo, frecuencia y tiempo de aplicación, se obtenían efectos significativos sobre la concentración celular (CB). En los valores de las variables predichos como significativos (mas) por los modelos obtenidos de las superficies de respuesta, se hicieron comparaciones entre el crecimiento del cultivo a diferentes densidades de flujo, tiempos de exposición al campo y frecuencias, para evaluar el comportamiento de la CB ante la modificación de una sola variable a la vez. Se utilizó el método de la mínima diferencia significativa (LSD) para comparar los resultados de los ensayos correspondientes a cada variable. Los resultados mostraron que se puede estimular el crecimiento del cultivo tratado con campos magnéticos, cuando se utilizan campos con densidades de flujo de 20mG, frecuencias de 100kHz y tiempos de aplicación de 30s. Los porcentajes de estimulación obtenidos con este tratamiento fueron del 30% con respecto a un cultivo control. Resumen en inglés Cultures of Saccharomyces cerevisiae were submitted to magnetic fields of high frequency (up to 100kHz) and low flux density (up to 620mG). Statistical designs of response surfaces were used to assess the ranges in which flux density, frequency and application time produce significant effects on cell concentration (CB). In the values of the variables predicted as significant by the models derived from this methodology, comparisons were performed among cell growths under d (mas) iverse flux densities, exposition to field durations and field frequencies in order to assess the CB behavior for one variable at a time. The least significant difference (LSD) method was used to compare test results corresponding to each variable. The results showed that it is possible to stimulate the culture growth under magnetic fields by applying flux densities of 20mG, frequencies of 100kHz and application times of 30s. The stimulation reached 30% with reference to a control culture.

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Acción inhibitoria de una cepa de Zymomonas mobilis mobilis aislada de caña de azúcar sobre Xanthomonas citri subsp. citri, agente causal de la cancrosis de los cítricos/ Inhibition of Xanthomonas citri subsp. citri, causal agent of citrus canker, by a strain of Zymomonas mobilis mobilis isolated from sugarcane

Romero, María E.; Ramallo, C. Jacqueline; Ploper, L. Daniel
2008-06-01

Resumen en español Zymomonas mobilis mobilis (Zm) produce factores antimicrobianos que actúan sobre un amplio espectro de microorganismos patógenos para el hombre, animales y plantas. Un problema importante a resolver en los tratamientos con antimicrobianos, es el desarrollo de resistencia a compuestos empleados actualmente, no siendo las bacterias fitopatógenas una excepción. En el presente trabajo se realizaron ensayos de antagonismo con células (pruebas de estrías cruzadas) y sobre (mas) nadantes concentrados (Sc) (por difusión en agar) preparados a partir de cultivos de Zm (aislada de jugo de caña de azúcar producido en Tucumán), frente a la bacteria causal de la cancrosis: Xanthomonas citri subsp. citri. Se evaluaron aislamientos de Xcc sensibles (Xc) y resistentes (Xcr) a compuestos a base de cobre. Los resultados obtenidos mostraron que la bacteria testigo fue inhibida totalmente por las células de Zm, ejerciendo un efecto bactericida. En los ensayos de difusión en el agar se observó que tanto Xc, como Xcr fueron sensibles al Sc de Zm. Se sabe, por estudios anteriores, que los metabolitos de Zymomonas tienen un efecto deletéreo en la membrana celular de E. coli AB1133, inhibiéndose la respiración de la bacteria inmediatamente de agregado Sc (60 UA). En el presente trabajo se observó el mismo efecto, inhibición total de la respiración en Xc, luego del agregado del Sc (60 UA). Por lo observado, se deduce que el blanco de acción de los metabolitos antimicrobianos de Sc en Xc, sería el mismo que el de E. coli AB1133. Con los resultados obtenidos se considera de interés encarar el estudio de los compuestos de Zm para ser empleados en el control de enfermedades que afectan los cultivos de valor económico de la región, como es el caso de la cancrosis, como así también profundizar acerca de la acción de dichos metabolitos en la membrana de Xanthomonas citri subsp. citri. Resumen en inglés Zymomonas mobilis mobilis (Zm) produces antimicrobial factors, which have an effect on a wide range of microorganisms pathogenic to man, animals, and plants. An important problem to solve with antimicrobial treatments is the development of resistance in these microorganisms, including phytopathogenic bacteria, to the currently used active ingredients. In this study, antagonism tests with cells (cross-streaking) and cell-free culture supernatants (CCS) (agar diffusion test (mas) ) from Zm cultures, isolated from sugarcane juice in Tucumán, were carried out, measuring activity against Xanthomonas citri subsp. citri (Xcc), the causal agent of citrus canker. Xcc isolates sensitive (Xc) and resistant (Xcr) to copper pesticides were included in these tests. Results showed that indicator bacteria were completely inhibited by cells of Zm, which had a bactericide effect. Both Xc and Xcr were sensitive to the CCS in the agar diffusion method. Previous studies had revealed the deleterious effects of metabolites from Zm on cell membranes of E. coli AB1133, inhibiting the respiration of the bacteria inmediately after CCS addition. On the basis of these results, the effects of CCS on Xcc respiration were studied, verifyng a similar response. This would indicate that the site of action of these antimicrobial compounds is also located at the cell membrane of the bacteria under study. Based on these results, additional studies are suggested to evaluate Zm-derived products on the control of diseases that affect economically important crops, such as citrus canker.

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ESTIMACIÓN DE VARIABLES DE OPERACIÓN DE UN BIORREACTOR CON CÉLULAS DE Azadirachta indica A. Juss/ ESTIMATION OF OPERATION VARIABLES OF A BIOREACTOR WITH Azadirachta indica A. Juss. CELLS

Muñoz Cruz, Walter; Vanegas Monterrosa, Oscar Alejandro; Guzmán Rosas, Andrés Alberto; Capataz Tafur, Jacqueline; Hoyos Sánchez, Rodrigo Alberto; Orozco Sánchez, Fernando
2006-12-01

Resumen en español Se estudiaron las variables de operación de un biorreactor de tanque agitado para el cultivo de células en suspensión de Azadirachta indica A. Juss. Se utilizó carboximetilcelulosa, CMC 0,7 % p/v, para estimar el coeficiente de transferencia de oxígeno, kLa, entre 120 - 400 rpm y entre 0,05 - 0,6 vvm, obteniéndose valores de 0,5 - 8,0 h-1. El kLa para suspensiones de A. indica en erlenmeyers fue de 0,6 - 1,2 h-1. Con los resultados anteriores se definieron las condi (mas) ciones de operación del biorreactor y se evaluó el crecimiento de células de A. indica a 200 rpm y 0,2 vvm de aire, alcanzando 9,2 g cel secas/l. El crecimiento celular no fue limitado por el suministro de oxígeno. Los tamaños de aglomerados celulares cultivados en erlenmeyers con bafles agitados magnéticamente y en biorreactor fueron similares, pero menores que los obtenidos en erlemeyers con agitación orbital. El presente estudio establece parámetros para la operación de biorreactores con A. indica y confirma que los medios con CMC pueden utilizarse para estimar variables operacionales en biorreactores. Resumen en inglés Operation variables of a stirred tank bioreactor were studied in order to culture cell suspension of Azadirachta indica A. Juss Carboximethylcelulose, CMC 0,7 % w/v, was used to estimate the coefficient of oxygen transfer, kLa, between 120 - 400 rpm and 0,05 - 0,6 vvm, obtaining values of 0,5 - 8,0 h-1. The kLa for suspension cultures of A. indica in erlenmeyers was 0,6 - 1,2 h-1. Based upon the previous results, the operation conditions of the bioreactor were defined and (mas) cell growth of A. indica was evaluated at 200 rpm and 0,2 vvm of air, reaching 9,2 g dry cell/l. Celular growth was not limited by dissolved oxygen. The sizes of cell agglomerates magnetically stirred in erlemeyers with bafles and in the bioreactor were similar, but smaller that those obtained in erlenmeyers with orbital agitation. The present study establishes parameters for operation of bioreactors with A. indica and confirms that CMC can be used to estimate operational variables in bioreactors.

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Desarrollo de un antígeno para diagnóstico del parvovirus de las ratas (virus Kilham) por la técnica de inhibición de la hemaglutinación/ Development of an antigen for the diagnosis of Kilham rat parvovirus by hemagglutination inhibition test

Ayala, M.A.; Laborde, J.; Milocco, S.; Carbone, C.; Cid de la Paz, V.; Galosi, C.M.
2004-03-01

Resumen en español Se desarrolló un antígeno (Ag) para el diagnóstico de la infección por parvovirus Kilham de las ratas (KRV) por la técnica de inhibición de la hemaglutinación (IHA). Para su elaboración se utilizaron cultivos primarios de fetos de ratas, infectados con KRV, los que fueron cosechados a diferentes tiempos posinfección, centrifugados y cada sedimento celular resuspendido en un volumen 100 veces menor al original. Cada muestra fue posteriomente sonicada, centrifugada (mas) y el sobrenadante (Ag) fue titulado por hemaglutinación (HA). El Ag elaborado a partir de células al 5to día posinfección ofreció el mejor título hemaglutinante. La especificidad del mismo fue confirmada por IHA con sueros específicos de referencia positivo y negativo a KRV y positivos a otros agentes infecciosos virales y bacterianos. Se analizaron 98 sueros por IHA y los resultados coincidieron con los obtenidos por un laboratorio de referencia. El Ag producido resultó específico, sensible, de fácil elaboración y de gran utilidad para el control de las colonias de ratas de producción y experimentación del país. Resumen en inglés An antigen of rat parvovirus (Kilham virus) was developed for the diagnosis of viral infection in rat colonies by using hemagglutination inhibition (HAI) test. Primary cell cultures from rat embryos were infected with Kilham rat virus. Infected cells obtained at different time post infection were scraped, centrifuged, concentrated one hundred times, sonicated and centrifuged again. The supernatants obtained were titrated by hemagglutination. The specificity was confirmed (mas) with positive and negative reference sera. Ninety eight serum samples were studied by using HAI test. The results coincided with those obtained in a reference laboratory. Kilham rat parvovirus antigen obtained from 5 days-infected-cells was specific, sensitive, easy to prepare, with a high yield and it is useful to detect this virus in experimental and production rat colonies.

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Optimización de iones de fierro para la eliminación de piocianina en la reacción de degradación de Tolueno, Benceno y Fenol por Pseudomonas aeruginosa/ Optimization of iron ions to eliminate pyocyanine in the degradation reaction of Toluene, Benzene and Phenol by Pseudomonas aeruginosa

Rangel-García, María de L.; Rodríguez-Martínez, Jesús; Garza-García, Yolanda; Martínez-Hernández, José L.
2010-03-01

Resumen en español Una amplia gama de substancias xenobióticas representan un serio problema como contaminantes ambientales por su toxicidad; entre ellos los compuestos aromáticos pueden ser biodegradados por microorganismos que los usan como fuente de carbono y energía. El género Pseudomonas destaca por sus múltiples aplicaciones biotecnológicas debido a su gran versatilidad metabólica; puede producir metabolitos útiles, transformaciones enzimáticas, biodegradación y biorremediac (mas) ión de suelos, y en aguas contaminadas con petróleo y plaguicidas. En esta investigación se usaron células de P. aeruginosa para degradar tolueno, benceno y fenol. La cepa fue cultivada en medio mineral sólido y se establecieron las concentraciones óptimas para el desarrollo de células viables: 0.31, 0.19 y 0.13 M para tolueno, benceno y fenol. Los ambientes con concentraciones limitadas de Fe(III) favorecen la producción de piocianina, pigmento que puede interferir en el método analítico de biodegradación de compuestos aromáticos. Este efecto fue eliminado aumentando la concentración de iones de fierro en el medio. Con base en lo anterior, se optimizó y estableció el medio de cultivo mineral con 0.04 g L-1 de FeSO4 en presencia de tolueno (0.03 M) y con esta concentración inicial la tasa de biodegradación fue 75 %. Las pruebas de degradación específicas para los compuestos aromáticos mostraron que la cepa de P. aeruginosa usada puede degradar tolueno, benceno y fenol. Las tasas de degradación fueron mayores para tolueno (58.4 %) y benceno (70.11 %) con concentraciones iniciales de 0.14 M y 0.16 M, y la degradación fue menor para fenol (24.65 %) con una concentración inicial 0.10 M. La capacidad degradadora de P. aeruginosa tuvo proporción directa con su crecimiento en presencia de los xenobióticos estudiados, mostrando una mayor cantidad de proteína celular en los cultivos con benceno (1.4982 mg mL-1), tolueno (0.8629 mg mL-1) y menor en los cultivos desarrollados en presencia de fenol (0.4431 mg mL-1); lo cual muestra que un deficiente desarrollo bacteriano (biomasa) influye en una subóptima biodegradación. Resumen en inglés A wide range of xenobiotic substances represent a serious problem as environmental pollutants because of their toxicity, among them are found aromatic compounds that can be biodegraded by microorganisms, which use them as their source of carbon and energy. The genus Pseudomonas is outstanding for its multiple biotechnological applications due to its remarkable metabolic versatility. It is capable of producing useful metabolites, enzymatic transformations, biodegradation a (mas) nd bioremediation in soil, as well as in water polluted with oil and pesticides. In this study, cells of P. aeruginosa were used to degrade toluene, benzene and phenol. The strain was cultivated in a solid mineral medium, and the following optimal concentrations were established for the development of viable cells: 0.31, 0.19, and 0.13 M for toluene, benzene and phenol. The environments with limited concentrations of Fe(III) favored the production of pyocyanine, a pigment that can interfere in the analytical method of aromatic compound biodegradation. This effect was eliminated by increasing the concentration of iron ions in the medium. On this basis, the mineral culture medium was optimized and established at 0.04 g L-1 FeSO4 in presence of toluene (0.03 M). With this initial concentration, a rate of biodegradation of 75 % was obtained. The specific degradation tests for the aromatic compounds showed that the P. aeruginosa strain used can degrade toluene, benzene and phenol. The rates of degradation were higher for toluene (58.4 °/o) and benzene (70.11 °/o) with the initial concentrations of 0.14 M and 0.16 M. Degradation was less for phenol (24.65 %) with an initial concentration of 0.10 M. The degrading capacity of P. aeruginosa was directly proportional to its growth in the presence of the xenobiotic substances studied. A larger amount of cell protein was exhibited in cultures with benzene (1.4982 mg mL-1) and toluene (0.8629 mg mL-1), and less in the cultures grown in presence of phenol (0.4431 mg mL-1), indicating that deficient bacterial development (biomass) can result in suboptimal biodegradation.

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CULTIVO DE CÉLULAS DE LINAJE OSTEOGÉNICO DE PERIOSTIO DE PORCINO PARA LA EVALUACIÓN DE UN BIOMATERIAL/ OSTEOGENIC CELL CULTURE FROM PORCIN PERIOSTEUM FOR BIOMATERIAL EVALUATION

DÍAZ, LINA M.; VILLAMIL, MARIEN; BERNAL, CLAUDIA L.; TORRES, MARTHA L.; K. THEVI, JAMUNA; ZAKARIA, FADZIL A.; MIKÁN, JOSÉ F.
2007-07-01

Resumen en español El objetivo del presente trabajo fue establecer un cultivo de células osteoprogenitoras de porcino para el estudio de la diferenciación de osteoblastos en un material híbrido de apatita carbonatada, CAp (patente en proceso No. PI 20042321 preparado en AMREC-SIRIM Berhad) y células autólogas, que en el futuro pueda ser empleado como un material para injertos óseos. A partir de la digestión enzimática de periostio de huesos de fetos porcinos se obtuvieron células q (mas) ue se cultivaron con y sin factores de diferenciación y para verificar formación de tejido osteogénico, se realizaron pruebas bioquímicas y moleculares. Se sembraron células sobre CAp de síntesis húmeda y seca y sobre Thermanox (Th) como control. Por microscopia electrónica de barrido (SEM) se determinó la adherencia y la disposición celular a los materiales utilizados, observándose adherencia y crecimiento celular en los tres soportes utilizados, sin diferencias significativas al comparar los tratamientos y controles. Para confirmar la presencia de calcio en la matriz extracelular se realizó difractometría de rayos X. Los resultados obtenidos indican que estos cultivos expresaron marcadores bioquímicos y moleculares de la línea osteogénica, lo que nos hace pensar que este es un modelo adecuado para estudiar la funcionalidad de un material híbrido de CAp sintética y células osteoprogenitoras autólogas derivadas de periostio. Resumen en inglés Culture and characterisation of porcine osteoprogenitor was established in order to study the differentiation of osteoblast in a hybrid material of carbonated apatite (CAp) (patent under process No PI 20042321) and autologous cells that can be used later as an advanced bone graft material. Osteoprogenitors were obtained from enzymatic digestion of fetal porcine periosteum, and were cultured with or without differentiation factors. Biochemical and molecular markers of oste (mas) ogenesis were obtained. Cells were culture onto CAp of wet and dry synthesis and onto Thermanox (Th) as control substrate. SEM analyses revealed the indistinct adherence and grow of cells cultured on the materials when compared with those cultured on the Th. X-ray diffraction analysis revealed the calcium content of the extra cellular matrix of the cultures. Positive alkaline phosphatase activities and other bone related biochemical and molecular markers were found in time course culture experiments. An animal model for the osteogenesis of periosteal cells was established which demonstrated its use in the evaluation of CAp, indicating that this model is useful to study the functionality of a hybrid material of synthetic CAp and autologous osteoprogenitor cells derived from periosteum.

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Biomass production of microalga Scenedesmus sp. with wastewater from fishery/ Producción de biomasa de la microalga Scenedesmus sp. utilizando aguas residuales de pescadería

Andrade R, Charity E; Vera B, Alexandra L; Cárdenas L, Carmen H; Morales A, Ever D
2009-08-01

Resumen en español Las microalgas representan una alternativa para el tratamiento de aguas residuales por su capacidad de remoción de nutrientes y alto valor comercial de la biomasa producida. Se evaluó el crecimiento, remoción de nutrientes y materia orgánica de la microalga Scenedesmus sp. en aguas residuales derivadas de restos de pescadería. Se utilizaron cultivos discontinuos en tanques a cielo abierto con 150L, aireación constante y en condiciones no controladas de fotoperiodo y (mas) temperatura. Se evaluó el crecimiento de la microalga mediante recuento celular, peso seco y contenido de pigmentos, realizando la recolección de la misma en fase estacionaria mediante sedimentación natural, y efectuando análisis fisicoquímicos a la biomasa secada al sol. La microalga creció en agua residual a cielo abierto, reportando eficiencias de remoción de 94,44% (23,80mg/L) para nitrógeno amoniacal, de 77,54% (7,04mg/L) para fosfatos y de 35,59% (26,09mg/L) para materia orgánica. La biomasa seca resultó ser un componente de alto contenido proteico (24,41%), fibroso (10,04%), con niveles de grasa (2,47%) y minerales (23,52%) adecuados para complementar la nutrición animal. Estos resultados demostraron que Scenedesmus puede ser utilizada para el tratamiento de aguas residuales con la producción de una biomasa de valor agregado. Resumen en inglés The microalgae represent an alternative for the treatment of wastewater for his capacity of removal of nutrients and high commercial value of produced biomass. There was evaluated the growth, removal of nutrients and organic matter of Microalgae Scenedesmus sp. in wastewater derived from remains of fish. Discontinuous cultures were in use in tanks to sky opened with 150L, constant aeration and in conditions no controlled of photoperiod and temperature. The growth of micro (mas) algae we evaluated by means of cell counting, dry weight and content of pigments, realizing the compilation of the same one in stationary phase by means of natural sedimentation, and effecting physicochemical analyses to the biomass dried to the sun. The microalgae grew in wastewater to opened sky, reporting efficiencies of removal of 94.44% (23.80 mg/L) for ammonia nitrogen, 77.54% (7.04 mg/L) for phosphates and 35.59 % (26.09 mg/L) for organic matter. The dry biomass recollected was a component of high contained protein (24,41%), fibrous (10,04%), with levels of fats (2,47%) and mineral (23,52%) adapted to complement the animal nutrition. These results showed that Scenedesmus can be used for the treatment of wastewater by production of a biomass of added value.

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Evaluación de proteínas relacionadas con la diferenciación de células madre hematopoyéticas CD34+ obtenidas de sangre de cordón umbilical/ Evaluation of proteins related to the differentiation of CD34+ hematopoietic stem cells from the umbilical cord

Flechas, Ivonne; Mera, Claudia; Vargas, Lina; Rodríguez Pardo, Viviana Marcela
2008-08-01

Resumen en español La sangre de cordón umbilical es una alternativa para el aislamiento y cultivo de células madre hematopoyéticas CD34+, útiles en terapias de reemplazo medular en el tratamiento de patologías neoplásicas y no neoplásicas. En este trabajo se evalúa la expresión de proteínas relacionadas con la diferenciación de células madre hematopoyéticas CD34+ en cultivo. Las muestras de sangre de cordón fueron recolectadas en bolsas con CPDA (Baxter®) y transportadas al L (mas) aboratorio de Hematología de la Facultad de Ciencias de la Pontificia Universidad Javeriana. El aislamiento de la células madre hematopoyéticas CD34+ se realizó mediante el uso del sistema Miltenyi biotec Microbeads® a partir de células mononucleares obtenidas por gradiente de densidad con Ficoll-Hypaque Amershan Biosciences®. Las células CD34+ se cultivaban en medio Stem Pro® suplementado con IL3, SCF y GM-CSF entre 5 y 11 días a 37 ºC y 5 % CO2. Se determinó la viabilidad celular, cambios morfológicos por microscopia invertida y la expresión de las proteínas CD34, CD33 y CD38, así como Bcl-2 y CD95 por medio de citometría de flujo. Se establecieron 6 (n=6) cultivos enriquecidos con células hematopoyéticas CD34+, con un promedio de viabilidad del 84,25 % y tiempo de cultivo entre 5 y 11 días. En la evaluación morfológica se observó la aparición de prolongaciones citoplasmáticas o seudópodos tipo magnupodia hasta el día 7 de cultivo. Se observó la co-expresión de los anfígenos CD34 y CD33, con un aumento a partir del día 7 de la proteína CD95. Las células madre hematopoyéticas CD34+ obtenidas de sangre de cordón umbilical presentan prolongaciones citoplasmáticas posiblemente relacionadas con interacciones célula a célula. En nuestro sistema de cultivo, las células madre hematopoyéticas obtenidas inician procesos de diferenciación mieloide que se relacionan indirectamente con la expresión de Bcl-2 y CD95. Resumen en inglés Blood from the umbilical cord is an alternative for the isolation and culture of CD34+ hematopoietic stem cells useful for bone marrow replacement therapy in the treatment of neoplastic and nonneoplastic pathologies. The expression of proteins related to the differentiation of CD34+ hematopoietic stem cells under culture was evaluated in this paper. The blood samples from the umbilical cord were collected in bags with CPDA (Baxter®) and transported to the Hematology Labo (mas) ratory of the Faculty of Sciences of the Pontificia Universidad Javeriana. The isolation of the CD34+ hematopoietic stem cells was carried out by using the Miltenyi biotec Microbeads® system starting from mononuclear cells obtained by density gradient with Ficoll-Hypaque Amershan Biosciences®. The CD34+ cells were cultured in Stem Pro® medium supplemented with IL3, SCF and GM-CSF between 5 and 11 days at 37º C and CO2 5 %. Cellular viability was defined. The morphological changes were determined by inverted microscopy, whereas the expression of the CD34, CD33 and CD38 proteins, and of BcI-2 and CD95 was identified by flow citometry. 6 cultures (n=6) enriched with CD34+ hematopoietic cells were established, with a viability average of 84.25 % and a culture time from 5 to 11 days. In the morphological evaluation, it was observed the appearance of cytoplasmatic prolongations or magnupodia-like pseudopodes until the seventh day of culture. The coexpression of the CD34 y CD33 antigens with an increase of CD95 protein from the seventh day on was observed. The CD34+ hematopoietic stem cells taken from the blood of the umbilical cord presented cytoplasmatic correlations that were possibly associated with cell to cell interactions. In our culture system, the obtained hematopoietic stem cells initiated processes of myeloid differentiation that were indirectly related to the expression of BcI-2 and CD95.

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Efecto de la concanavalina a en el cultivo del fitopatógeno ustilago maydis

Saavedra Hernández, Elsa; Pérez Santiago, Alma; Pérez Campos, Eduardo; Córdoba Alva, Félix
2003-05-01

Resumen en portugués O efeito da adição da lectina Concanavalina A ao cultivo do fungo Ustilago maydis é examinado para contribuir ao entendimento dos mecanismos de reconhecimento e infecção entre fungos e plantas. A cinética de crescimento do fungo em cultivo mostrou que a adição de Con A tem um discreto efeito ativador sobre os basidiósporos a partir das 9h de incubação. Por outra parte, a união de Con A aos basidiósporos causou diversas mudanças morfológicas, agregação, m� (mas) �ltiplas ramificações e uma incrementada capacidade de gemação. A união de Con A aos basidiósporos foi evidenciada utilizando um conjugado fluorescente da lectina (Alexa-flúor), observando-se maior intensidade de fluorescência nas pontas e zonas de gemação dos basidiósporos, o que sugere a distribuição heterogênea de estruturas sacarídeas (receptores) sobre a superfície da parede celular do fungo durante o crescimento. Os efeitos da adição de Con A no cultivo do fungo se inibem ao incubar previamente a lectina com a-manopiranosa. Resumen en español El efecto de la adición de la lectina Concanavalina A al cultivo del hongo Ustilago maydis es examinado para contribuir al entendimiento de los mecanismos de reconocimiento e infección entre hongos y plantas. La cinética de crecimiento del hongo en cultivo mostró que la adición de Con A tiene un discreto efecto activador sobre las basidiosporas a partir de las 9h de incubación. Por otra parte, la unión de Con A a las basidiosporas causó diversos cambios morfológi (mas) cos, agregación, múltiples ramificaciones y una incrementada capacidad de gemación. La unión de Con A a las basidiosporas fue evidenciada utilizando un conjugado fluorescente de la lectina (Alexa-flúor), observándose mayor intensidad de fluorescencia en las puntas y zonas de gemación de las basidiosporas, lo que sugiere la distribución heterógena de estructuras sacarídicas (receptores) sobre la superficie de la pared celular del hongo durante el crecimiento. Los efectos de la adición de Con A en el cultivo del hongo se inhiben al incubar previamente la lectina con a-manopiranosa. Resumen en inglés The effect of Concanavalin A on Ustilago maydis cultures was tested in order to gain understanding about plant-fungi infection mechanisms. Growth kinetics of U. maydis in culture indicates that Con A promoted discrete culture growth after 9h of incubation, as compared with fungi cultures devoid of the lectin. Binding of Con A to basidial cells induced morphological changes such as agglutination, branching, ramification and increased budding. The use of a fluorescent conju (mas) gate of the lectin (Alexa-fluor) revealed points of increased fluorescence on the basidial cell tips and budding zones, suggesting a heterogeneous distribution of receptors on the cell wall surface during growth. The addition of a-D-methyl mannopyranoside to these preparations occluded the specific fluorescence.

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Efecto citotóxico de la toxina shiga tipo 2 y su subunidad b en células epiteliales tubulares renales humanas en cultivo/ Cytotoxic effect of Shiga toxin type 2 and its B subunit on human renal tubular epithelial cell cultures

Pistone Creydt, Virginia; Nuñez, Pablo; Zotta, Elsa; Ibarra, Cristina
2005-04-01

Resumen en español Escherichia coli enterohemorrágica productora de toxina Shiga (Stx) causa diarrea acuosa, colitis hemorrágica y síndrome urémico hemolítico (SUH). En Argentina, el SUH es la principal causa de insuficiencia renal en niños. El objetivo de este trabajo fue estudiar la toxicidad de Stx tipo 2 (Stx2) y su subunidad B (Stx2B) en células epiteliales tubulares renales humanas (CERH), en presencia y ausencia de factores inflamatorios. Los efectos citotóxicos se evaluaron (mas) como alteración de la funcionalidad del epitelio; daños histológicos; viabilidad celular; síntesis de proteínas y apoptosis celular. Los resultados muestran que Stx2 regula el pasaje de agua a través de CERH a tiempos menores de 1h de incubación. A tiempos mayores, hasta 72 hs, el estudio de la morfología, la viabilidad, la síntesis de proteínas y la apoptosis demostró que las CERH fueron sensibles a la acción citotóxica de Stx2 y Stx2B de una manera dosis y tiempo dependiente. Estos efectos fueron potenciados por lipopolisacáridos bacterianos (LPS), IL-1b, y butirato. Resumen en inglés Shiga toxin (Stx)-producing E.coli causing watery diarrhea, hemorrhagic colitis and hemolytic-uremic syndrome (HUS). In Argentina, HUS is the most common cause of acute renal failure in children. The purpose of the present study was to examine the cytotoxicity of Stx type 2 (Stx2) and its B subunit (Stx2B) on human renal tubular epithelial cells (HRTEC), in the presence and absence of inflammatory factors. Cytotoxic effects were assessed in terms of functionality of the e (mas) pithelium, histological damage, cell viability, protein synthesis and cellular apoptosis. Results show that Stx2 regulates the passage of water through the HRTEC within an incubation period of 1h. Within longer periods, up to 72 hours, the study of morphology, viability, protein synthesis and apoptosis shows that HRTEC were sensitive to the cytotoxic action of Stx2 and Stx2B in a dose- and time-dependent manner. These effects were potentiated by lipopolysaccharides (LPS), IL-1b, and butirate.

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ESTUDIO INMUNOHISTOQUIMICO DE LOS CAMBIOS EN LA EXPRESION DE LA alfa-ACTININA DURANTE EL DESARROLLO CARDIACO DE POLLO/ IMMUNOHISTOCHEMICAL ANALYSIS OF THE CHANGES IN THE alpha-ACTININ EXPRESSION DURING CARDIAC CHICK DEVELOPMENT

Prados, J; Melguizo, C; Marchal, J. A; Velez, C; Alvarez, L; Aránega, A
1998-01-01

Resumen en español RESUMEN: El citoesqueleto de la célula muscular es una compleja red de proteínas cuyo patrón de expresión está directamente relacionado con el proceso de diferenciación celular. La alfa-actinina, una proteína que juega un papel decisivo en el proceso de contracción de la célula muscular, es esencial para la estructuración de los sarcómeros ya que actúa como punto de anclaje o centro de organización de la preformación de filamentos de actina. La modificación (mas) de su expresión a lo largo de la maduración de la célula muscular tiene importantes implicaciones morfofuncionales para los miocardiocitos. Nuestros resultados, basados en el análisis mediante inmunofluorescencia de secciones criostáticas de corazón de pollo y miocardiocitos en cultivo de diferentes estadios del desarrollo, demuestran que en estadios tempranos (18 de Hamburger y Hamilton) la alfa-actinina se expresa débilmente, localizándose fundamentalmente en la membrana celular de los miocardiocitos y presentando un patrón de marcaje difuso en el citoplasma. Su expresión aumenta a lo largo del desarrollo cardíaco, produciéndose un aumento en la intensidad de marcaje, en el estadio 29 de Hamburger y Hamilton, que fue mayor en el miocardio ventricular que en el auricular lo que coincide con un cambio en el patrón de distribución de la a-actinina, que se estructura a lo largo de las miofibrillas de los miocardiocitos de este estadio. En estadios más avanzados (36 de Hamburger y Hamilton) se produce un incremento en la expresión de alfa-actinina pero sin cambios en su localización. El patrón de marcaje de la alfa-actinina durante el desarrollo cardíaco demuestra su utilidad como marcador del grado de diferenciación muscular y la importancia del estadio 29 HH en la maduración morfofuncional de la célula miocardiocítica, así como la diferente expresión en miocardios atrial y ventricular durante este proceso Resumen en inglés SUMMARY: The cytoskeleton of muscle cell is a complex network of proteins which expression pattern is related with the differentiation process. The alpha-actinin, a protein which plays an important role in the muscular contraction, is essential to the sarcomeres conformation, serving as an anchoring point or center of organization for the preformation of actin filaments. The modulation of the alpha-actinin expression during the muscular cell maturation, has an important m (mas) orphofuntional implications to the myocardiocytes. Immunofluorescence studies on cryotome sectins of chick embryo hearts and myocardiocyte cultures showed that a-actinin expression was weak in early stages (Hamburger Hamilton stage 18), staining the cellular membrane of myocardiocytes. A diffuse label for citoplasmic compartment was observed in these stages. alpha-actinin expression increased during the chick cardiac development. We found in Hamburger Hamilton stage 29, an intense label for the ventricular myocardium coinciding with the presence of alpha-actinin along the myocardiocyte myofibrills. Analysis of the Hamburger Hamilton stage 36 showed an increase in the a-actinin expression but without changes in their immunolocalization. The expression pattern of a-actinin during the cardiac development indicated that this protein is a good marker to the degree of myogenic differentiation, the importance of the 29 HH stage to the morphofuntional maturation of myocardiocytes and, the differential expression on the atrial and ventricular myocardium

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Efecto de la Melatonina en la Proliferación Linfocitaria y la Producción de Interleucina 2 (IL-2) e Interleucina 1 Beta (IL-1b) en Esplenocitos de Ratones

Arias, Julia; Melean, Eddy; Valero, Nereida; Pons, Héctor; Chacín-Bonilla, Leonor; Larreal, Yraima; Bonilla, Ernesto
2003-03-01

Resumen en español La Melatonina (MLT) influye en la modulación del sistema inmunitario. Previos estudios describen incremento de la proliferación celular con aumento o disminución de citocinas; otros autores reportan efectos inhibitorios o ningún efecto en las funciones inmunitarias. Debido a esta controversia, y con el objeto de estudiar el mecanismo mediante el cual la MLT ejerce sus acciones, se planteó examinar su efecto en la proliferación de esplenocitos múridos ante un estím (mas) ulo mitogénico y cuantificar los niveles de IL-2 e IL-1b en ausencia o presencia de la Fitohemaglutinina (PHA) en sobrenadantes de cultivo de células esplénicas de ratones tratados o no con MLT. La respuesta linfoproliferativa se evaluó utilizando la incorporación de timidina marcada con tritio, en esplenocitos de ratones tratados con 500 µg de MLT/Kg de peso e in vitro con 5, 50 y 100 µg/mL de MLT. La detección de IL-2 e IL-1b se realizó con la técnica de ELISA. Se observó una elevación (p Resumen en inglés The influence of Melatonin (MLT) on the modulation of the immune system has been described. In previous studies an increment of cell proliferation and an increase or a decrease of cytokines have been reported. Other workers have found inhibitory effects or no effect in the immune functions. Because of this controversy, and for the purpose of studying the mechanism by which MLT performs its functions, we evaluated its effect on murine splenocytes´s proliferation after a m (mas) itogenic stimulation. and quantified the levels of IL-2 and IL-1 b in the absence or presence of Phitohemaglutinin (PHA) in supernatants of mice splenocytes cell culture treated or not with MLT. The lymphoproliferative response was assessed using tritiated thimidine in the splenocytes of mice treated with 500 µg of MLT/Kg b.w. and in cell cultures containing 5, 50 and 100 µg MLT/mL. The production of IL-2 and IL-1 b was detected by the ELISA test. An increase in the proliferation (p

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Colonización vaginoanorrectal por Streptococcus del grupo B en mujeres embarazadas con complicaciones ginecoobstétricas./ Rectovaginal colonization by group B Streptococcus in pregnant women with gyno-obstetrics complications.

Díaz de R., T.; Nieves, B.; Vegas, L.
2002-01-01

Resumen en español En el presente trabajo nos propusimos determinar los factores clínicos epidemiológicos y la frecuencia de colonización vaginoanorrectal por Streptococcus del grupo B (SGB) en mujeres embarazadas con complicaciones ginecoobstétricas que asistieron al Servicio de Emergencia Obstétrica del Instituto Autónomo Hospital Universitario de los Andes (IAHULA) durante el período abril-octubre de 2000. Se estudió a 60 mujeres embarazadas con complicaciones ginecoobstétricas, (mas) a quienes se les colectó muestra a partir de hisopados vaginoanorrectales y endocervicales, las cuales se cultivaron en agar sangre Columbia con ácido nalidíxico (15µg/ml) y gentamicina (8µg/ml). La identificación presuntiva se realizó mediante pruebas convencionales, y la identificación definitiva mediante la detección del antígeno especifico de pared celular de SGB (Slidex Strep B- Biomerieux). SGB se aisló en alta frecuencia (36,7%) del cultivo vaginoanorrectal proveniente de mujeres embarazadas con complicaciones ginecoobstétricas No se encontró asociación significativa entre la colonización por SGB y las características clínicas y epidemiológicas de las mujeres estudiadas. No obstante, dicho microorganismo se recuperó con mayor frecuencia de mujeres embarazadas con una edad promedio de 25,5 años, con bajo nivel educativo, que vivían con su pareja, no fumadoras y edad gestacional entre 35-36 semanas. Resumen en inglés The present work is an attempt to determine the clinical and epidemiological factors and the frequency of colonization by group B Streptococci (GBS) in pregnant women with gynecological and obstetric complications attended by the Emergency Obstetrics Service of the Instituto Autónomo Hospital Universitario de Los Andes (IAHULA) from April to October 2000. 60 women with gynecological and obstetric problems were included in the study and rectovaginal and endocervical swabs (mas) taken, were incubated in Columbia blood agar with nalidixic acid (15µg/ml) and gentamicin (8µg/ml). Standard tests gave an approximate identification, while definitive identification was based on the presence of GBS cell wall antigen (Slidex- Strepto B-BioMérieux). In the study period, GBS was isolated with a high degree of frequency (36.7%) in rectovaginal cultures from pregnant women with gynecological and obstetric complications. Nor was there any significant correlation between GBS colonization and the clinical and epidemiological features of the women in the study, although GBS was recovered with greater frequency from pregnant women with an average age of 25.5, low level of education, living with a partner, non-smoker and in the 35 - 36 week of pregnancy.

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Expresión de marcadores en células dendríticas de pacientes chagásicos crónicos estimuladas con la proteína KMP-11 y el péptido K1 de Trypanosoma cruzi/ Expression of markers on dendritic cells from chronic chagasic patients stimulated with the KMP-11 protein and the K1 peptide from Trypanosoma cruzi

Santander, Sandra Paola; Cuéllar, Adriana; Thomas, María del Carmen; Guzmán, Fanny; Gómez, Alberto; López, Manuel Carlos; Puerta, Concepción
2007-01-01

Resumen en español Introducción. La proteína de membrana 11 de kinetoplástidos, KMP-11, de Trypanosoma cruzi induce inmunidad humoral y celular en ratones capaz de conferir protección frente al reto con el parásito. Objetivo. Determinar la expresión de marcadores de maduración en las células dendríticas de pacientes chagásicos crónicos e individuos sanos, estimuladas con la proteína KMP-11 y su péptido amino terminal K1. Materiales y métodos. Monocitos de siete pacientes chag� (mas) �sicos y siete individuos sanos fueron diferenciados a células dendríticas y estimulados con la proteína KMP-11 y el péptido K1, determinándose por citometría de flujo y tras 7 días de cultivo, la expresión de los marcadores de superficie CD83, CD86 y HLA-DR y la producción de citocinas. Resultados. La proteína KMP-11 y el péptido K1 no indujeron la expresión del marcador de maduración CD83 en las células dendríticas de pacientes y controles. La exposición de células dendríticas de pacientes chagásicos de forma simultánea al péptido K1 y LPS mostró una disminución de la expresión de CD86 y CD83 con relación a la estimulación con LPS sólo, a diferencia de las células de controles sanos. También se evidenció una disminución en la producción de interleucina-12 en las células dendríticas de pacientes en relación a las de los controles. Conclusiones. La proteína KMP-11 no tiene un efecto significativo sobre la maduración de las células dendríticas, pero su péptido K1 en presencia de LPS induce una disminución en la expresión de CD86 y CD83 y en la producción de la interleucina-12 que podría modular la respuesta inmune in vivo y en particular la estimulación de los linfocitos T. Resumen en inglés Introduction. The kinetoplastid membrane protein 11, KMP-11, from Trypanosoma cruzi elicits humoral and cellular immunity in mice that protects them from infection against further parasite challenge. Objective. To characterize the expression of surface markers on dendritic cells from chronic chagasic patients and healthy individuals, in response to the KMP-11 protein from Trypanosoma cruzi and its N-terminal peptide K1. Materials and methods. Monocyte-derived dendritic ce (mas) lls from seven chronic chagasic patients and seven healthy individuals were stimulated with the KMP-11 protein and the K1 peptide. Seven days after culturing, the CD83, CD86, and HLA-DR membrane expression as well as the production of cytokines were evaluated by flow cytometry. Results. Neither KMP-11 protein nor K1 peptide elicited the expression of the maturation marker CD83 on dendritic cells of patients or healthy control individuals. Dendritic cells from chronic chagasic patients exposed to K1 and LPS at the same time presented a significant reduction in CD86 and CD83 membrane expression in contrast to the cells exposed to LPS alone, whereas dendritic cells from healthy individuals did not show this behavior. The secretion of interleukin-12 was decreased in the cultures of dendritic cells from chronic chagasic patients but not from healthy controls. Conclusions. KMP-11 protein does not affect the maturation of dendritic cells, but in the presence of LPS the K1 peptide leads to a decreased expression of CD86 and CD83 as well as interleukin-12 production, This phenomenon may be associated with an impaired T cell stimulation.

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Aislamiento y caracterización de cepas de Adenovirus que colonizan el tracto gastrointestinal de pacientes cubanos seropositivos al VIH/ Isolation and characterization of Adenovirus strains that invade the gastrointestinal tract of Cuban HIV-positive patients

González Muñoz, Grehete; Salgado Villavicencio, Armando; Pomier Suárez, Olga; Goyenechea Hernández, Ángel; González López, María E.; Acosta Herrera, Belsy; Rodríguez Sanchez, Hermis
2008-12-01

Resumen en español INTRODUCCIÓN: el tracto gastrointestinal es uno de los sistemas que se afecta con frecuencia en el paciente seropositivo al virus de la inmunodeficiencia humana (VIH), de manera que las alteraciones o enfermedades en este sitio representan una causa importante de morbilidad y mortalidad. El hallazgo de cepas de adenovirus, raramente aisladas en pacientes inmunocompetentes, ha sido asociado en ocasiones a la presencia de diarrea, lo cual refleja la importancia del estudio (mas) y la tipificación de estas cepas. OBJETIVOS: conocer la prevalencia de los Adenovirus en muestras de heces fecales de pacientes infectados con el VIH, con diarrea aguda o crónica, así como la caracterización de los agentes aislados, mediante la implementación de métodos rápidos y confiables. MÉTODOS: fueron analizadas 167 muestras de heces fecales de individuos seropositivos al VIH y 127 seronegativos como grupo control. La prevalencia fue investigada mediante el aislamiento en cultivo celular, se realizó además la tipificación de las cepas aisladas, mediante técnicas de biología molecular como la reacción en cadena de la polimerasa y la secuenciación nucleotídica. El análisis estadístico se efectuó mediante la prueba exacta de Fisher contenido en el paquete estadístico Epi Info (Versión 6.04). RESULTADOS: la prevalencia en los pacientes VIH+ fue de 15 %, mientras que en los VIH- fue de 4 %; la diferencia resultó estadísticamente significativa; 96 % de las cepas aisladas en los pacientes VIH+ correspondieron al subgénero D, asociadas en 62,5 % a cuadros diarreicos y estadios avanzados de la infección por VIH. CONCLUSIONES: los resultados sugieren la importancia de incluir a los adenovirus y su tipificación en el diagnóstico de rutina de los pacientes VIH+, lo cual sería de interés en el manejo clínico de la infección y aportaría datos claves en la vigilancia y el control de la transmisión de la infección hospitalaria y los análisis epidemiológicos. Resumen en inglés BACKGROUND: the gastrointestinal tract is one of the most frequently affected systems in HIV-positive patients, therefore, changes or diseases occurring in this site represent an important cause of morbidity and mortality. The finding of adenovirus strains, rarely isolated in immunocompetent patients, has been occasionally associated to diarrheas, which reflects the importance of study and typing of these strains. OBJECTIVES: to find out the prevalence of Adenovirus in fe (mas) ces samples from HIV patients having chronic or acute diarrheas, as well as the characterization of isolated agents through the application of reliable and quick methods. METHODS: one hundred and sixty seven fecal samples from HIV-positive patients and 127 from seronegative subjects as the control group were analyzed. Isolation in cell cultures determined the prevalence and molecular biology techniques as the polymerase chain reaction and nucleotide sequencing allowed typing of isolated strains. The statistical analysis was based on the Fisher´s exact test included in Epi Info (6.04) statistical software. RESULTS: the prevalence in HIV positive patients was 15 % whereas in the HIV-negative was 4 %. The difference was statistically significant; 96 % of isolated strains in HIV positive patients belonged to subgenus D, which are linked in 62.5 % of cases to acute diarrheal condition and advanced stages of HIV infection. CONCLUSIONS: the results indicated the importance of including adenovirus and their typing in the routine diagnosis of patients positive to HIV, all of which would be useful in the clinical management of infection and would contribute key data on surveillance and control of hospital infection transmission and the epidemiological analysis.

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v-erbA oncogene induces invasiveness and anchorage-independent growth in cultured glial cells by mechanisms involving platelet-derived growth factor

Llanos, Susana; Iglesias, Teresa; Riese, Hans H.; Garrido, Teresa; Caelles, Carme; Muñoz Terol, Alberto
1996-03-01

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Zinc sulphate improved microspore embryogenesis in barley

Echavarri, Begoña; Soriano, Mercedes; Cistué Solá, Luis; Vallés Brau, María Pilar; Castillo Alonso, Ana María
2008-06-01

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Uso de mascarilla laríngea para fibrobroncoscopía en lactantes durante ventilación mecánica/ USE OF LARYNGEAL MASK WHILE FLEXIBLE BRONCHOSCOPY IS PERFORMED IN INFANTS UNDER MECHANICAL VENTILATION

ALVAREZ G, CECILIA; RODRIGUEZ C, JOSÉ IGNACIO; RONCO M, RICARDO; CASTILLA M, ANDRÉS; CAMPOS N, EUGENIA; SÁNCHEZ D, IGNACIO
2002-04-01

Resumen en español La mascarilla laríngea (ML) se utiliza para el manejo de la vía aérea en adultos y niños bajo anestesia general con el objetivo de evitar la intubación traqueal y su uso se ha extendido para fibrobroncoscopía bajo anestesia general. Durante ventilación mecánica (VM) la fibrobroncoscopía (FB) se limita a tubos endotraqueales (TET) > 4,5 mm de diámetro ya que el fibrobroncoscopio con canal de succión más pequeño es de 3,5 mm. Nuestro objetivo fue evaluar la uti (mas) lidad de la ML para FB en niños sometidos a VM con TET Resumen en inglés Laryngeal mask (LM) has been used to manage airways during general anesthesia, in both children and adults, to avoid tracheal intubation. Lately its use has been extended to perform flexible bronchoscopy (FB). In an infant under mechanical ventilation (MV), most of FB require an endotracheal tube # 4.5 because the smallest instrument with a suction channel has a 3.5 mm diameter. Our objective was to evaluate the use of LM while performing FB in patients on MV. Patients we (mas) re sedated (atropine- midazolam and vecuronium), and monitored with transcutaneous oxygen saturation and cardiorespiratory monitor in an Intensive Care Unit setup. LM was introduced, and its position was verified by clinical auscultation. FB Olympus BF C-30, with 3.5 mm diameter was used. From December 1997 to October 1998 eleven procedures were done in 6 patients. Their mean age was 6.2 months (range: 0.5-33), weight 4.9 kg (2.7-10.5). MV parameters were FiO2 0.45 (0.4-1), MIP 28.4 cm H2O (20-60) and PEEP 5,18 cm H2O (3-8). In all patients we used LM # 1.0, with an internal diameter 5.25 mm. Indications for FB were: atelectasis (6), tracheobronchomalacia (2), hemoptisis (2) and subglotic stenosis (1). LM was introduced during the first attempt in 9 procedures, without complications. We maintained positive pressure ventilation without displacements of LM. After the FB, the patients were reintubated, with similar parameters compared to prior procedure. To sum up, we found that LM provides a safe artificial airway to ventilate patients who need FB during mechanical ventilation on small endotracheal tubes. This technique allows bronchial visualization, and aspiration and to perform bronchoalveolar lavage to carry out cell counting and cultures

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Técnicas diagnósticas de referencia para el análisis de marcadores de virulencia del virus pseudorrabia, cepa RC/79\: ensayos preliminares/ Referential diagnostic techniques to analyze virulence markers of pseudorabies virus RC/79 strain\: preliminary assays

SABINI, L.I.; CERIATTI, F.S.; BAGNIS, G.; ZANON, S.M.; MARTIN, V.; ROVERA, M.; RAMOS, B.A.
1997-01-01

Resumen en español En nuestro laboratorio hemos estandarizado los métodos de inmunoperoxidasa e inmunofluores-cencia indirecta para la detección del virus de la enfermedad de Aujeszky en cultivos de células Vero, utilizando como modelo la cepa viral RC/79. Hubo una fuerte correlación entre los resultados logrados por ambas técnicas, las que evidenciaron ser altamente específicas para la identificación del virus y permitieron una precisa localización de los antígenos virales en las (mas) células infectadas. La aparición de células multinucleadas o sincitios con marcada reacción en la región nuclear a las 16 horas p.i. indicó que la cepa RC/79 es fuertemente virulenta. Esta aseveración fue corroborada por los ensayos de infección experimental en conejos. El carácter virulento de la cepa se evidenció por un intenso prurito en la zona de inoculación, con la aparición de una lesión rezumante serosanguinolenta entre las 6 y 24 horas previas a la muerte. La misma aconteció en tiempo promedio, a las 62 y 120 horas p.i., dependiendo de la dosis viral inyectada. En todos los casos la tasa de mortalidad fue del 100%, aun trabajando con cantidades menores de virus (102 UFP), indicando ausencia de dosis-respuesta. Los métodos empleados fueron útiles como marcadores de virulencia para la cepa RC/79 y se constituyen en herramientas indispensables para el diagnóstico de la enfermedad de Aujeszky, disponibles en nuestro laboratorio y posibles de contemplar por las autoridades nacionales cuando establezcan un plan sanitario para esta patología Resumen en inglés The indirect immunoperoxidase and immunofluorescence methods were standardized for the detection of Aujeszky's disease virus in Vero cell cultures, using as a model the RC/79 strain virus." There was a strong correlation in the results obtained by both methods. The results proved to be highly specific for the identification of the virus and allowed a precise localization of the viral antigen in infected cells. The presence of syncytia with a strong reaction in the nuclea (mas) r region 16 hours p.i. indicated that RC/79 strain is strongly virulent. This conclusion was supported by the results obtained from experimental rabbit infection. The animals were inoculated with different doses of the virus (102-105 PFU). In all the cases the mortality rate was 100%, even when animals received minor doses of the virus, indicating no dose response. The mean death time was 62 and 120 hours p.i. for the different doses used. Between 6 and 24 hours prior to death, all rabbits presented an exudative lesion in the inoculation area and extensive pruritus. The methods employed were useful as virulence markers of the RC/79 strain virus and on the other hand, they constitute essential tools in the diagnosis of Aujeszky's disease virus

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Transplanted long-term cultured pre-BI cells expressing calpastatin are resistant to B cell receptor–induced apoptosis

Ruíz Vela, Antonio; Serrano Gómez, Fernando; González de la Peña, Manuel Angel; Abad, José Luis; Bernad, Antonio; Maki, Masatoshi; Martínez-Alonso, Carlos
2001-08-01

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60

Thyroid hormone-regulated expression of RC3/neurogranin in the immortalized hypothalamic cell line GT1-7

Morte Molina, Beatriz; Iñiguez, Miguel Angel; Lorenzo, Petra Isabel; Bernal Carrasco, Juan
1997-09-01

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61

The transcription factor early growth response factor-1 (EGR-1) promotes apoptosis of neuroblastoma cells

Pignatelli, Miguel; Luna Medina, Rosario de; Pérez-rendón, Arturo; Santos, Ángel; Pérez Castillo, Ana
2003-08-01

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The transcription factor Snail controls epithelial–mesenchymal transitions by repressing E-cadherin expression

Cano García, Amparo; Pérez Moreno, Mirna Alicia; Rodrigo Castro, María Isabel; Locascio, Annamaria; Blanco Fernández de Valderrama, María José; Barrio, Marta G. del; Portillo Pérez, Francisco; Nieto, M. Ángela
2000-02-01

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63

The life history and cell cycle of Kryptoperidinium foliaceum, a dinoflagellate with two Eukaryotic nuclei

Figueroa, Rosa Isabel; Bravo, Isabel; Fraga, Santiago; Garcés, Esther; Llaveria, Gisela
2009-05-01

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65

The contributions and limitations of microscopy in studying the mechanisms of pollen embryogenesis

Rodríguez García, María I.; Olmedilla, Adela; Alché Ramírez, Juan de Dios
2001-01-01

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66

The Influence of the Environment on Cajal--Retzius Cell Migration

Ceci, María Laura; López-Mascaraque, Laura; Carlos, Juan A. de
2010-01-01

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67

The Cdc14p phosphatase affects late cell-cycle events and morphogenesis in Candida albicans

Clemente-Blanco, Andrés; González-Novo, Alberto; Machín, Félix; Caballero-Lima, David; Aragón, Luis; Sánchez-Pérez, Miguel; Vázquez de Aldana, Carlos R.; Jiménez, Javier; Correa-Bordes, Jaime
2006-02-28

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68

Síndrome de restauración inmune asociado a tratamiento antirretroviral y criptococosis meníngea: Caso clínico/ Inflammatory reconstitution immune syndrome associated to antiretroviral therapy and meningeal cryptococcosis

Sáez M, David; Bahamondes M, Laura; Lam E, Gislaine; Arellano R, Luz; Lillo Z, Patricia
2006-10-01

Resumen en inglés The objective of high activity antiretroviral therapy (HAART) in patients with AIDS, is to obtain immune restoration. This means a reduction of the viral load and restitution of the CD4 cell count. A decreased rate of HIV replication improves both the number and function of CD4 cells. Nevertheless, this treatment sometimes results in the reappearance of previous symptoms from treated conditions due to opportunistic infections (ie: tuberculosis, criptococcosis, hepatitis, (mas) Pneumocystis jirovesi, toxoplasmosis, etc) or non infectious condition such as sarcoidosis, Graves disease or Kaposi sarcoma. This is known as Inflammatory Reconstitution Immune Syndrome (IRIS). We report a 37 year-old woman in stage C3-AIDS with a previous criptococcal meningitis. She was treated, achieving a marked improvement with treatment and subsequent suppressive therapy with fluconazole 200 mg/day. IRIS appeared after 8 months of ongoing antiretroviral therapy with immune restoration with the development of aseptic meningitis and intracranial hypertension. The opportunistic agent could not be identified by cultures. Additional laboratory tests excluded toxoplasmosis, tuberculosis, bacterial cerebral abscesses, syphilitic cerebral gummas, and lymphoma. Brain CT and magnetic resonance studies were compatible with brain vasculitis and leptomeningitis. The patient condition improved with general measures, such as a repeated lumbar punctures and non steroidal anti-inflammatory drugs. We conclude that this patient had an IRIS due to a Cryptococcus neoformans antigen

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69

Synergistic effect of methyljasmonate and cyclodextrin on stilbene biosynthesis pathway gene expression and resveratrol production in Monastrell grapevine cell cultures

Lijavetzky, Diego ; Almagro, Lorena ; Belchi-Navarro, Sarai ; Martínez-Zapater, José M. ; Bru, Roque ; Pedreño, Maria A.

8 pages, 3 figures, 1 table.-- PMID: 19102745 [PubMed].-- PMCID: PMC2628674. | Supplementary information (additional files 1, 2, 3) available at: http://www.biomedcentral.com/1756-0500/1/132/additional/ | [Background] Plant cell cultures have been shown as feasible systems for the production of seco...

DRIVER (Spanish)

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Synergistic effect of methyljasmonate and cyclodextrin on stilbene biosynthesis pathway gene expression and resveratrol production in Monastrell grapevine cell cultures

Lijavetzky, Diego; Almagro, Lorena; Belchi-Navarro, Sarai; Martínez-Zapater, José M.; Bru, Roque; Pedreño, Maria A.
2008-12-22

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Subcellular forms and biochemical events triggered in human cells by HCV polyprotein expression from a viral vector

Vandermeeren, Andrée M.; Elena Gómez, Carmen; Patiño, Cristina; Domingo-Gil, Elena; Guerra, Susana; González, José Manuel; Esteban, Mariano
2008-09-15

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73

Spontaneous VEGF production by cultured peritoneal mesothelial cells from patients on peritoneal dialysis

Selgas, Rafael; Peso, Gloria del; Bajo, M. Auxiliadora; Castro, M. Ángeles; Molina, Susana; Cirugeda, Antonio; Sánchez-Tomero, José A.; Castro, M. José; Álvarez, Vicente; Corbí, Ángel; Vara, Francisco
2000-01-01

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Splenic B lymphocyte programmed cell death is prevented by nitric oxide release through mechanisms involving sustained Bcl-2 levels

Genaro, Ana M.; Hortelano, Sonsoles; Álvarez, Alberto; Martínez-Alonso, Carlos; Boscá, Lisardo
1995-04-01

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Splenic B lymphocyte programmed cell death is prevented by nitric oxide release through mechanisms involving sustained Bcl-2 levels

Genaro, Ana M.; Hortelano, Sonsoles; Álvarez, Alberto M.; Martínez-Alonso, Carlos; Boscá, Lisardo
1995-04-01

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Spin-label EPR study in thylakoid membranes from a new herbicide-resistant D1 mutant from soybean cell cultures deficient in fatty acid desaturation.

Yruela Guerrero, Inmaculada ; Alfonso Lozano, Miguel ; García-Rubio, Inés ; Martínez Martínez, Jesús I.

The definitive version is available at: http://www.sciencedirect.com/science/journal/00052736 | Fatty acid desaturation effect on the lipid fluidity in thylakoid membranes isolated from the STR7 mutant was investigated by electron paramagnetic resonance (EPR) using spin label probes. The spectra of...

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77

Specificity of the dihydroceramide desaturase inhibitor N-[(1R,2S)-2-hydroxy-1-hydroxymethyl-2-(2-tridecyl-1-cyclopropenyl)ethyl]octanamide (GT11) in primary cultured cerebellar neurons

Triola Guillem, Gemma; Fabriàs, Gemma; Dragusin, Mihaela; Niederhausen, Lars; Broere, Roland; Llebaria Soldevilla, Amadeu; Van Echten-Deckert, Gerhild
2004-09-15

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Snail blocks the cell cycle and confers resistance to cell death

Vega, Sonia; Morales, Aixa V.; Ocaña, Oscar H.; Valdés, Francisco; Fabregat, Isabel; Nieto, M. Ángela
2004-01-01

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Snail and E47 repressors of E-cadherin induce distinct invasive and angiogenic properties in vivo

Peinado, Héctor; Marín, Faustino; Cubillo, Eva; Stark, Hans-Juergen; Norbert, Fusenig; Nieto, M. Ángela; Cano García, Amparo
2004-06-01

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Rho4 GTPase Is Involved in Secretion of Glucanases during Fission Yeast Cytokinesis

Santos Romero, Beatriz; Martín-Cuadrado, Ana Belén; Vázquez de Aldana, Carlos R.; Rey Iglesias, Francisco del; Pérez González, Pilar
2005-10-01

Digital.CSIC (Spain)

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Reversibly immortalised olfactory ensheathing glia and their use to promote neuronal regenaration

Moreno, María Teresa; Martín, María Jesús; Avila, Jesús; Wandosell Jurado, Francisco; Díaz-Nido, Javier; Lim, Filip; Pastrana, Erika
2005-02-10

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Rapid Effects of Retinoic Acid on CREB and ERK Phosphorylation in Neuronal Cells

Cañón, Estela; Cosgaya, José Miguel; Scsucova, Sona
2004-12-01

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Puesta en evidencia del virus diarrea viral bovina en bovinos clínicamente afectados/ Isolation of the bovine viral diarrhoea virus from tissue of clinically affected cattle

CELEDON, M.O; ROCO, L; QUINTEROS, G; SANTIBAÑEZ, M; BERRIOS, P
1997-01-01

Resumen en español Para conocer la presencia del virus diarrea viral bovina (VDVB) en animales sospechosos de estar cursando un cuadro clínico provocado por este virus, se trabajó con un total de 33 animales, correspondiendo a 23 fetos abortados, 2 mortinatos, un nonato, 3 vacas: una madre de mortinato, una madre de aborto y una muerta, 2 novillos muertos y 2 terneros muertos. Muestras de órganos se inocularon en cultivos primarios de pulmón fetal bovino (PFB) y en la línea MDBK. Desp (mas) ués del primer pasaje en células de PFB, se detectó la presencia de antígenos del VDVB por la prueba de inmunoperoxidasa indirecta (IPI). Todas las muestras con reacción positiva a IPI se inocularon por segunda y tercera vez en células de PFB, aplicándose la prueba de IPI en el tercer pasaje. Sobre un cuarto pasaje se aplicó la prueba de inmunofluorescencia direccta (IFD). Todas las muestras, positivas y negativas a IPI, se inocularon en 3 pasajes seriados en las células MDBK. En 23 de los 33 animales se aisló VDVB cepas no citopatogénicas (NCP), correspondiendo a 14 fetos abortados, un nonato, un mortinato, 3 vacas, 2 novillos y 2 terneros. En 6 fetos abortados, independiente de los infectados con el VDVB, se aisló el virus de la rinotraqueítis infecciosa bovina (RIB). Se concluye que la presencia del VDVB es de alta frecuencia en muestras clínicas de ganado bovino con patologías asociables al VDVB, desconociéndose el rol patógeno del virus en estos aislados Resumen en inglés Cattle infected with the bovine viral diarrhoea (BVD) virus can present a variety of clinical signs. This research studied the presence of BVD virus in cattle by virus isolation in primary cell cultures of bovine embryo lungs. Virus identification was done using the immunoperoxidase staining assay and the direct fluorescent antibody staining. As a result, 23 out of 33 animals were identified as positive to BVD virus: 14 foetal abortions, 2 stillbirths, 3 dams, 2 steers a (mas) nd 2 calves. No cytopathogenic isolates were found through three consecutive passages in cell cultures. The results suggest that the BVD virus is present in cattle with clinical signs, but the possible role of its pathogenesis was not studied

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88

Proteína C reactiva y procalcitonina como marcadores de infección bacteriana en niños con neutropenia febril posterior a trasplante alogénico de progenitores hematopoyéticos/ C reactive protein and procalcitonin levels for the diagnosis of invasive bacterial infections in allogenic hematopoietic stem cell transplantation recipients

Schmidt, Nadia; Palma, Julia; King, Alejandra; Santolaya, María Elena
2007-08-01

Resumen en inglés Background: The main causes of complications of allogenic hematopoietic stem cell transplantation are infections and graft versus host disease. Aim: To assess the predictive value of C reactive protein (CRP) and procalcitonin (PCT) in the diagnosis of invasive bacterial infections in children with febrüe neutropenia after an allogenic hematopoietic stem cell transplantation. Material and methods: Prospective follow up of patients aged 18 years or ¡ess, with febrile neut (mas) ropenia after an allogenic hematopoietic stem cell transplantation. In all patients, cultures from sterile sites, CRP and PCT determinations were done. CRP levels were also measured prior to transplantation and three times per week for 30 days after the procedure. An independent evaluator, blinded to the results of CRP and PCT, classified children as with or without invasive bacterial infection. Results: Thirty three patients aged 9±5 years (21 males) were studied. Eight had an invasive bacterial infection. Sensitivity, specificity, positive and negative predictive values of a CRP ³90 mg/L for the diagnosis of invasive bacterial infection were 25, 80, 29 and 77%, respectively. The figures for a PCT ³0.7 ng/ml were 43, 78, 38 and 82%, respectively. No differences in repeated CRP values measured during evolution, were observed. Conclusions: A CRP ³90 mg/L or a PCT ³0.7 ng/ml had a high specificity and negative predictive value but low sensitivity for the diagnosis of invasive bacterial infections in recipients of allogenic hematopoietic stem cell transplantation (Rev Méd Chile 2007; 135: 982-89)

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Programmed cell death in the developing inner ear is balanced by nerve growth factor and insulin-like growth factor I

Frago, Laura M.; Cañon, Susana; Rosa, Enrique J. de la; León, Yolanda; Varela-Nieto, Isabel
2003-02-01

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Producción y caracterización de un anticuerpo policlonal dirigido contra la fosfoproteína del virus de la rabia/ Production and characterization of a polyclonal antibody against rabies virus phosphoprotein

Castañeda, Nadia Yadira; Chaparro-Olaya, Jacqueline; Castellanos, Jaime E
2007-06-01

Resumen en español Introducción. La producción de una proteína viral recombinante facilita la aplicación de diversas metodologías bioquímicas en investigación básica de los virus con relevancia clínica. Además, la obtención de un anticuerpo policlonal dirigido contra la proteína P permite el estudio de su función y está soportado en la inexistencia de un anticuerpo comercial dirigido contra esa proteína. Objetivo. Producir y caracterizar un anticuerpo policlonal dirigido cont (mas) ra la proteína P recombinante del virus de la rabia expresada en Escherichia coli. Materiales y métodos. El gen P que codifica para la proteína P del virus de la rabia, fue amplificado por reacción en cadena de la polimerasa de transcriptasa reversa y clonado en el vector de expresión PinPointTM Xa-1 T (PROMEGA). La proteína recombinante P fue expresada en E. coli purificada por cromatografía de afinidad y usada para la producción del anticuerpo policlonal anti-P. El anticuerpo obtenido fue purificado y caracterizado por inmunocitoquímica con un sistema enzimático, inmunofluorescencia, Cell-ELISA fluorométrica y Western blotting. Resultados. La proteína recombinante se expresó eficientemente como una proteína de fusión biotinilada de aproximadamente 50 kd, que corresponde a la forma completa de la proteína P del virus de la rabia. El anticuerpo policlonal anti-P detectó con alta especificidad la proteína P en cultivos de neuronas sensoriales infectados con el virus de la rabia. Conclusión. La proteína P recombinante expresada en E. coli se constituyó en un antígeno específico para producir un anticuerpo policlonal que reconoce la proteína P nativa en células infectadas con el virus de la rabia. Resumen en inglés Introduction. The expression of recombinant viral proteins has been a useful tool to study molecular biology and pathogenesis of virus infections. Because commercial specific antibodies to rabies virus phosphoprotein (P) are currently unavailable, these antibodies must be generated de novo in order to study the role of P protein during the infectious process. Objective. A polyclonal antibody was produced and characterized for use against the phosphoprotein (P) of rabies v (mas) irus. The antibody was raised in rabbits with a recombinant viral phosphoprotein (P) produced in Escherichia coli. Materials and methods. Gene P coding for the viral phosphoprotein (P) was amplified by RT-PCR and cloned into the expression vector PinPointTM Xa-1 T. The recombinant protein P was expressed in Escherichia coli, purified by affinity chromatography and used to produce a polyclonal antibody anti-P. The antibody anti-P was purified and characterized by immunocytochemistry, immunofluorescence, fluorometric CELL-ELISA and Western blotting. Results. The recombinant viral phosphoprotein was successfully expressed as a 50 kd biotinylated fusion protein which corresponds to the whole protein P of rabies virus. The polyclonal antibody raised against this recombinant protein P was able to detect with high specificity, protein P in cultures of sensorial neurons infected with rabies virus. Conclusions. The P protein obtained from heterologous expression in Escherichia coli became a specific antigen that was used to produce a polyclonal antibody capable of detecting native P protein in rabies virus infected cells.

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Proatherogenic Effects of the Cholesterol Ozonolysis Products, Atheronal-A and Atheronal-B

Takeuchi, Cindy; Galvé, Roger; Nieva, Jorgé; Witter, Daniel P.; Wentworth, Anita D.; Troseth, Ryan P.; Ryan P, Richard A.; Wentworth, Paul Jr.
2006-05-17

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94

Photoinhibition and recovery in a herbicide-resistant mutant from Glycine max (L.) Merr. cell cultures deficient in fatty acid unsaturation

Alfonso Lozano, Miguel; Collados, Raquel; Yruela Guerrero, Inmaculada; Picorel Castaño, Rafael
2004-07-01

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Perkinsosis in molluscs: A review

Villalba, Antonio; Reece, Kimberly S.; Ordás, M. Camino; Casas, Sandra M.; Figueras, Antonio
2004-01-01

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PRODUCCION DE PIGMENTOS Y PROTEINAS DE LA CIANOBACTERIA ANABAENA PCC 7120 EN RELACION A LA CONCENTRACION DE NITROGENO E IRRADIANCIA/ PIGMENT AND PROTEIN PRODUCTION OF THE CYANOBACTERIUM ANABAENA PCC 7120 IN RELATION TO NITROGEN CONCENTRATION AND IRRADIANCE

Loreto, César; Rosales, Néstor; Bermúdez, José; Morales, Ever
2003-01-01

Resumen en español Algunas cianobacterias del género Anabaena son productoras de pigmentos de interés comercial. Este artículo documenta el efecto de la concentración de nutrientes en función del NaNO3 a 0, 1, 2, 4 y 8 mM y de la irradiancia a 78, 156 y 238 µmol m-2 s-1, sobre el contenido de proteínas y pigmentos de Anabaena PCC 7120 en cultivos discontinuos. El crecimiento de la cianobacteria fue poco afectado por la concentración de nitrato, sin diferencia significativa entre 1 y (mas) 8 mM (p Resumen en inglés Cyanobacteria of the genus Anabaena produce pigments of commercial value. The present work reports the effect of nitrogen nutrient concentration (0, 1, 2, 4, and 8 mM NaNO3) and irradiance (78, 156 and 238 µmol m-2 s-1 ) on growth, pigment and protein content in Anabaena PCC 7120 in batch cultures. Growth of the cyanobacterium was little affected by nitrate concentration, with no significant differences between 1 and 8 mM (p(mas) rise to the highest levels of phycocyanin (174 ± 2 µg ml-1), chlorophyll a (17.4 ± 1.2 µg ml-1), protein (563 ± 2 µg ml-1) and carotenoids (4.5 ± 0.3 µg ml-1). Although cell densities were highest (117 (± 11) x10(6) cell ml-1) at 78 µmol m-2 s-1, maximum levels of protein and pigments were achieved at 156 µmol m-2 s-1. The number of heterocystes per trichome decreased with increasing nutrient concentration. Biomass production of Anabaena PCC 7120 enriched with phycocyanin, chlorophyll a, and protein was enhanced in a saturating-nutrient medium and a irradiance between 78 and 156 µmol m-2 s-1

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Outdoor cultivation of lutein-rich cells of Muriellopsis sp. in open ponds

Blanco, Antonio M.; Moreno, José; Campo, José A. del; Rivas, Joaquín; Guerrero, Miguel G.
2006-01-01

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Optimización de cultivos de hepatocitos humanos para estudios de citotoxicidad/ Optimization of human hepatocyte cultures for citotoxicity studies

CABANÉ T, PATRICIO; DÍAZ J, JUAN CARLOS; ROJAS C, JORGE; MALUENDA G, FERNANDO; RENCORET P, GUILLERMO; SAUD L, KATHERINE; GODOY V, M. LORETO; IBACACHE A, DANIELA; LEDEZMA S, ALEJANDRA; CAVIEDES C, RAÚL; CAVIEDES F, PABLO
2007-04-01

Resumen en español Los cultivos de hepatocitos entregan un valioso acercamiento al estudio de las funciones metabólicas específicas del hígado, evaluación de citotoxicidad. No existen líneas humanas inmortales con función normal. La inmortalización de hepatocitos humanos con el método UCHT1(medio de cultivo condicionado por células tumorales de tiroides) permitirá prolongar la sobrevida y función de estos, siendo útil para evaluar funcionalidad y citotoxicidad. Objetivo: Optimiz (mas) ar el cultivo de hepatocitos humanos. Metodología: En cultivos primarios de hepatocitos humanos, se agregó medio UCHT1 cultivando en superficies de colágeno, polilisina, gelatina y matrigel. Como control positivo, se utilizó línea Gherschenson (GER) para evaluar curva de crecimiento y producción de Glucógeno (PAS). Se evaluó citotoxicidad (LIVE/DEAD) en hepatocitos GER expuestos a Metotrexato (10, 100 y 1000 mM) a 24, 48 y 72 hrs. Resultados: Se realizó 3 cultivos primarios. Fue efectiva la utilización de Polilisina y Colágeno. Duración 8 meses. No se ha realizado la curva de crecimiento, ni evaluación de funcionalidad en hepatocitos humanos. La línea GER tiene un crecimiento exponencial (tiempo duplicación: 36 hrs). Se observó producción de glucógeno en condiciones de diferenciación hasta 120 hrs. La citotoxicidad por Metotrexato tiene una curva dosis dependiente, significativa en todas las concentraciones (p Resumen en inglés Background: Hepatocyte cultures are a valuable tool to study specific metabolic liver functions and cytoxicity. Human hepatocyte cell lines with normal function do not exist. Immortalization of human hepatocytes with a rat thyroid cell line (UCHT1) allows long-term survival and function of these cells, becoming useful to evaluate functionality and cytotoxicity. Aim: To optimize long-term culture of human hepatocytes. Material and Methods: UCHT1 media was added to primary (mas) cultures of human hepatocytes, seeding in collagen, gelatin, matrigel and polilisine surfaces. Gherschenson cell line (GER) was used as a positive control to evaluate the growth curve and Glycogen production (PAS). Cytotoxicity was evaluated (LIVE/ DEAD) in GER hepatocytes exposed to Metotrexate (10, 100 and 1000 µM) 24, 48 and 72 hrs. Results: Three primary cultures were made. The use of Polilisine and Collagen was effective. Cultures were kept for 8 months. Growth curves or evaluation of functionality in human hepatocytes, were not carried out. GER cell line had an exponential growth (duplication time: 36 hrs). Production of glycogen in differentiation conditions was observed up to 120 hrs. Cytotoxicity by Metotrexate had a dose dependent curve with a 50% lethal dose calculated as 1000 µM at 24 hrs. Conclusions: A primary line of human hepatocytes was obtained. Polilisine and collagen optimized the establishment of primary cultures. PAS method allowed the evaluation of glycogen production (differentiation). Cytotoxicity demonstrated a dose dependent effect in experimental conditions

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100

Ole e 1, the Major Allergen from Olive (Olea europaea L.) Pollen, Increases its Expression and is Released to the Culture Medium during in vitro Germination

Alché Ramírez, Juan de Dios; M'rani-Alaoui, Mohamed; Castro López, Antonio Jesús; Rodríguez García, María I.
2004-01-01

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Neuroprotección de las células ganglionares de la retina/ Retinal ganglion cell neuroprotection in culture

García, M; Ruiz Ederra, J; Hernández Barbáchano, E; Urcola, JA; Bilbao, J; Araiz, J; Durán, JA; Vecino, E
2003-03-01

Resumen en español Objetivo: Estudiar la supervivencia de las células ganglionares de la retina (CGR) de cerdo en cultivo, analizando el posible efecto neuroprotector de las células de Müller de la retina (CMR) y del factor neurotrófico derivado del cerebro (BDNF). Métodos: Las retinas de cerdo adulto fueron disociadas y cultivadas en diferentes condiciones: 1) sobre sustrato de laminina/poli-D-lisina en medio de cultivo químicamente definido; 2) sobre sustrato de laminina/poli-D-lisi (mas) na en medio químicamente definido al que se añadió BDNF; 3) sobre monocapas de CMR en medio químicamente definido; 4) sobre sustrato de laminina/poli-D-lisina en medio condicionado procedente del sobrenadante de las CMR. Las CGR fueron identificadas mediante inmunocitoquímica, utilizando anticuerpos contra el neurofilamento de 68 kDa, y observadas con un microscopio de fluorescencia. Se analizó la supervivencia para cada condición de cultivo y se clasificaron las CGR en función de su tamaño y del número y longitud de las neuritas. Resultados: La supervivencia de las CGR aumentó cuando las células fueron cultivadas sobre monocapas confluentes de CMR o en medio condicionado. Estas condiciones produjeron un incremento en el área media de las células y un aumento en el número de neuritas emitidas por cada célula, así como en la longitud de las neuritas. Cuando el medio de cultivo se suplementó con BDNF no se obtuvo ningún efecto sobre la supervivencia de las CGR aunque aumentó el tamaño, y el número y longitud de sus neuritas. Conclusión: Nuestro trabajo demuestra que algún/os factor/es secretados por las células de Müller tienen un efecto neuroprotector sobre las CGR in vitro. El BDNF produce también un incremento en el área media de las células y favorece la formación de neuritas, sin embargo no aumenta la supervivencia. Resumen en inglés Purpose: To study the pig retinal ganglion cell (RGC) survival in culture, analysing the possible neuroprotective effect of retinal Müller glia (RMG) and brain-derived neurotrophic factor (BDNF). Methods: Adult pig retina were dissociated and cultured under different conditions: 1) on laminin/poly-D-lysine-coated coverslips in chemically defined medium (CDM); 2) on laminin/poly-D-lysine-coated coverslips in CMD supplemented with BDNF; 3) on confluent monolayer cultures o (mas) f RMG in CDM; 4) on laminin/poly-D-lysine substrate in conditioned medium obtained from RMG. RGCs were identified by immunocytochemistry using antibody against 68 kDa neurofilament and observed under an fluorescent microscope. RGCs were classified on the basis of the size, number and length of neurites, and their survival was assayed for each treatment. Results: Confluent RMG substrates and RMG conditioned medium significantly increased the survival of cultured pig RGC. Moreover these two conditions increased the mean area of RGCs and enhanced neurite growth and elongation. Addition of BDNF to culture medium did not modify survival but increased RGC size, neurite number and neurite length. Conclusions: These findings demonstrate that factor(s) secreted by RMG exert beneficial effects on adult RGC survival and neurite regeneration in vitro, and might constitute important agent(s) for RGC neuroprotection. BDNF also increases the mean area of RGCs and enhances neurite growth but it does not increase the survival of RGCs.

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103

Neural Induction in Whole Chick Embryo Cultures by FGF

Álvarez, Ignacio S.; Araujo, María; Nieto, M. Ángela
1998-07-01

Digital.CSIC (Spain)

104

Nerve growth factor and ceramides modulate cell death in the early developing inner ear

Frago, Laura M.; León, Yolanda; Rosa, Enrique J. de la; Gómez-Muñoz, Antonio; Varela-Nieto, Isabel
1998-03-01

Digital.CSIC (Spain)

105

Multiple virulence determinants of foot-and-mouth disease virus in cell culture

Baranowski, Eric; Sevilla, Noemí; Verdaguer, Nuria; Ruiz-Jarabo, Carmen M.; Beck, Ewald; Domingo, Esteban
1998-01-01

Digital.CSIC (Spain)

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Multicellular structures developing during maize microspore culture express endosperm and embryo-specific genes and show different embryogenic potentialities

Massonneau, Agnès; Coronado, María José; Audran, Arthur; Bagniewska, Agnieszka; Mòl, Rafal; Sánchez-Testillano, Pilar; Goralski, Grzegorz; Dumas, Christian; Risueño, María del Carmen; Matthys-Rochon, Elisabeth
2005-05-13

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Most human carcinomas of the exocrine pancreas contain mutant c-K-ras genes

Almoguera, Concepción; Shibata, D.; Forrester, K.; Martin, J.; Amheim, N.; Perucho, M.
1988-01-01

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Method for generating monoclonal antibodies that recognize progenitor cells

Silva González, Augusto; Del Valle Torres, Ignacio; García Benzaquen, Leyre
2009-11-12

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Leishmaniosis laríngea recidivante: un caso inusual en un paciente inmunocompetente tratado con corticoides/ Recidivant laryngeal leishmaniosis: an unusual case in an immunocompetent patient treated with corticosteroids

Casero, R.; Laconte, L.; Fraenza, L.; Iglesias, N.; Quinteros Greco, C.; Villablanca, ML.
2010-06-01

Resumen en español La leishmaniosis es una parasitosis de evolución crónica; en Argentina, sus agentes etiológicos principales pertenecen al complejo Leishmania (Viannia) braziliensis, habitualmente asociado a lesiones cutáneas y mucocutáneas. Informamos en este trabajo un caso de leishmaniosis laríngea en un hombre de 29 años procedente de Jujuy, quien a raíz de múltiples subdiagnósticos portaba esta parasitosis desde hacía 20 años. En el año 2008 este paciente consulta por di (mas) sfonía crónica y trastornos en las vías aéreas superiores, refiere que fue sometido a terapias con tuberculostáticos, antifúngicos y corticoides desde 2002. Diferentes biopsias y fibroscopías revelaron los siguientes diagnósticos: laringitis granulomatosa inespecífica, laringitis compatible con tuberculosis, laringitis compatible con histoplasmosis, linfoma Natural Killer extraganglionar a células pequeñas. Finalmente, estudios realizados en nuestro hospital demostraron la presencia de una laringe granulomatosa en toda su extensión, amastigotes intra y extracelulares de Leishmania spp., ausencia de formas compatibles con Micobacterias e Histoplasma, y laringitis crónica vinculable a Leishmania spp. El paciente realizó tratamiento con antimoniato de N-metil-glucamina y demostró una muy buena evolución clínica tras ser examinado 2 meses después. Si bien la leishmaniosis laríngea como lesión única no es la presentación prevalente de esta zoonosis, su estudio amerita especial atención en pacientes tratados con corticoides, pues esto evitará un diagnóstico tardío y las mayores consecuencias asociadas a la morbimortalidad propia de esta parasitosis. Resumen en inglés Leishmaniosis is a chronic parasitic disease, which in Argentina is mainly caused by protozoa belonging to the Leishmania (Viannia) braziliensis complex, leading to cutaneous and mucosal pathologies. We report a rare case of laryngeal leishmaniosis in a 29 year-old man from Jujuy province, Argentina, who had been misdiagnosed with other pathologies, carrying this infectious disease for about 20 years. During 2008, the patient was admitted with complaints of progressive ho (mas) arseness of the voice and dyspnea. He also reported having received tuberculostatics, antifungal and corticosteroids treatments since 2002. Different biopsies and direct laryngoscopic exams revealed inespecific granulomatous larynx, TBC-related laryngitis, laryngitis related to Histoplasma infection, extra-nodal Natural Killer-cell lymphoma. Finally, the patient was evaluated at the University Hospital and the final diagnosis was: granulomatous larynx, intra and extra-cytoplasmic Leishmania spp amastigotes, negative for TBC and Histoplasma cultures, and chronic laryngitis related to Leishmania infection, according to the laryngeal endoscopy, microbiological and histopathological exams, respectively. The patient received pentavalent antimonial treatment and his condition improved after 2 months of follow-up. Primary laryngeal leishmaniosis is rare and this localization does not belong to the most prevalent mucosal leishmaniosis. However, this parasitic disease warrants special concern, especially in patients who received prolonged corticosteroid treatments, in order to avoid a misdiagnosis of this disease.

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LA PROTEÍNA DE ESTRÉS, HEAT SHOCK COGNATE (HSC70) SE SOBREEXPRESA EN OSTEOBLASTOS SOMETIDOS A CENTRIFUGACIÓN/ OVEREXPRESESSION HEAT SHOCK COGNATE (HSC70) PROTEIN IN OSTEOBLASTS SUBMITED TO CENTRIFUGAL FORCES

Guerrero F, Carlos A; Martínez, Constanza; Sarmiento, Jairo; Cardozo, Carmen A
2006-07-01

Resumen en español Antecedentes. El osteoblasto tiene la capacidad de estimular la neoformación del tejido óseo, mediante la síntesis de proteínas tales como las proteínas morfogenéticas, factores de crecimiento y proteínas colágenas y no colágenas. A su vez, indirectamente controla los procesos de reabsorción sintetizando otra serie de proteínas estimuladoras de la actividad osteoclastogénica. Objetivo. El propósito de este trabajo de investigación fue analizar la expresión (mas) de la proteína de choque térmico HSC70 en un cultivo primario de osteoblastos, después de someterlo a una fuerza tensil mediante centrifugación, determinando el patrón de proteínas mediante análisis electroforético. Material y métodos. A partir de cráneos de ratones lactantes ICR se obtuvieron cultivos de células con características morfológicas tipo fibroblastoide, con prolongaciones alargadas y citoplasmas ligeramente cuboidales que sugiere un cultivo enriquecido de osteoblastos; los cuales fueron sometidos a centrifugación y se analizó por inmunocitoquímica, electroforesis y Western blot la expresión diferencial de la proteína HSC70. Resultados.La técnica de electroforesis SDS-PAGE unidimensional no permitió determinar diferencias en el patrón de corrido entre osteoblastos tratados respecto a los no tratados con la fuerza tensil. Sin embargo, la proteína HSC70 se sobre-expresa en osteoblastos sometidos a centrifugación analizada mediante la técnica de Western blot e inmuno­histoquímica. Conclusión.Aunque la electroforesis no determinó diferencias en el patrón de corrido, la proteína de estrés HSC70 se sobre-expresó en osteoblastos sometidos a centrifugación analizada mediante la técnica de Western blot e inmunocitoquímica, sugiriendo que es importante en este tipo de estrés. Resumen en inglés Background. Osteoblasts can stimulate new bone formation by protein synthesis, such as, bone morphogenetic proteins, growth factors and collagen and non-collagenous proteins. As well, they controls reabsortion processes, because they can synthesize proteins to promote osteoclastogenic activity, when necessary. Objetive. The objetive of this work was analyze the expression of the heat shock cognate protein HSC70 in a primary culture of murine osteoblasts, after putting und (mas) er a tensil force by centrifugation and determining the protein pattern by electrophoretic analysis. Materials and methods. From skulls of newborn mice ICR, cultures of cells were obtained with morphologic characteristics fibroblasts-like type, extended prolongations and cytoplasms slightly cuboidal and plump, it suggests an enriched culture of osteoblasts. Results. The technique of unidimensional electroforesis SDS-PAGE did not allow determine differences in the run pattern between osteoblasts treated with tensil force and control cells. Nevertheless, protein HSC70 overexpresion in osteoblasts was confirmed by Western blot and inmunocyto­chemistry on-are expressed. Conclusions. Electroforesis did not determine differences between control cell and cell submited to centrifugation. Stress protein HSC70 was expressed in osteoblasts submitted to centrifugación analyzed by Western's blot technology suggesting a important roll of this stres type.

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Keratinocyte growth factor induces angiogenesis and protects endothelial barrier function

Gillis, Paul; Savla, Ushma; Volpert, Olga V.; Jiménez Cuenca, Benilde; Waters, Christopher M.; Panos, Ralph J.; Bouck, Noël P.
1999-06-01

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Kainate receptor subunits expressed in single cultured hippocampal neurons: Molecular and functional variants by RNA editing

Ruano, Diego; Lambolez, Bertrand; Rossier, Jean; Paternain, Ana V.; Lerma Gómez, Juan
1995-05-01

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Involvement of the interleukin 2 pathway in the rearrangement and expression of both [alfa/beta] and [gamma/delta] T cell receptor genes in human T cell precursors

Toribio, María Luisa; Hera, Antonio de la; Borst, Jannie; Borst, Jannie; Marcos, Miguel A. R.; Márquez, Carlos; Alonso, José M.; Bárcena, Alicia; Martínez-Alonso, Carlos
1988-12-01

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Insulin-like growth factor-I stimulates neurogenesis in chick retina by regulating expression of the alpha 6 integrin subunit

Frade López, José María; Martí, Elisa; Bovolenta, Paola; Rodríguez Peña, Ángeles; Pérez-García, David; Rohrer, Hermann; Edgar, David; Rodríguez-Tébar, Alfredo
1996-08-01

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Influence of Prolactin on the Differentiation of Mouse B-Lymphoid Precursors

Morales, Patricia; Carretero, María Victoria; Gerónimo, Haydée; Copín, Sergio G.; Gaspar, María Luisa; Marcos, Miguel A. R.; Martín-Pérez, Jorge
1999-08-01

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Infección respiratoria aguda por adenovirus en niños hospitalizados de Santa Fe

Kusznierz, Gabriela F.; Cociglio, Raquel; Pierini, Judith; Malatini, María I.; Walker, Analía; Millán, Alejandra
2007-06-01

Resumen en español Introducción. Los adenovirus (Ads), son agentes etiológicos importantes de la infección respiratoria aguda (IRA). El Ad7 se asocia con las manifestaciones clínicas de mayor gravedad. Objetivos. Describir los aspectos clínicos y epidemiológicos de las IRA por Ads en niños hospitalizados en la Provincia de Santa Fe, durante el período 1998-2001. Población, material y métodos. Se evaluaron 31 historias clínicas de pacientes hospitalizados con diagnóstico de IRA e (mas) n hospitales de Santa Fe y se registraron datos demográficos, clínicos, radiológicos y de tratamiento. La infección por Ads se documentó mediante inmunofluorescencia indirecta. Los Ads se aislaron en células Hep-2, a partir de aspirados nasofaríngeos y se caracterizaron por PCR. Resultados. Se encontró un predominio de adenovirus subespecie B:1 (25/29), de los cuales 24 fueron Ad7. El Ad7 se asoció a neumonías mientras que Ads de las especies C (3/29) y D (1/29) encontrados en baja proporción se relacionaron con cuadros leves de bronquitis y catarro de vías aéreas superiores. Los niños menores de 1 año fueron el grupo más comunmente afectado. La estadía hospitalaria y el tratamiento con oxígeno fue mayor de 8 días en 17/ 31 y 14/22, respectivamente. Once niños desarrollaron neumonías graves, que requirieron cuidados intensivos y asistencia respiratoria (4/11). Dos casos desarrollaron miocarditis y uno hepatitis. La mortalidad fue del 9,7% (3/31) asociada a Ad7. Conclusión. Este estudio aporta un mejor conocimiento acerca de la clínica y los serotipos de los adenovirus causantes de IRA en niños, más prevalentes en una provincia del interior del país. La edad temprana de los niños, las estadías hospitalarias prolongadas y la gravedad del cuadro clínico hacen necesario implementar estrategias de control y prevención. Resumen en inglés Introduction. Adenovirus are (Ads) an important etiologic agent of acute respiratory infections (ARI). Ad7 has been associated with clinical manifestations of most considerable severity. Objective. The aim of this study was to describe the clinical and epidemiologic aspects of the ARI by Ads in hospitalized patients in Santa Fe, Argentina during 1998-2001. Population, material and methods. We conducted a retrospective study. Medical charts of 31 patients with ARI admitted (mas) in hospitals in Santa Fe were examined. Demographic information, as well as the radiographic and clinical outcome, were captured on special forms. Infections by Ads were documented by indirect immunonofluorescence. Ads were isolated in Hep2-cell cultures from nasopharyngeal aspirates. The molecular characterization was performed by PCR. Results. During the study period there was a predominance of subspecies B:1 (25/29), 24 was Ad7. The Ad7 was associated with pneumonia whereas the adenovirus species C(3/29) y D (1/29) were associated with mild bronchitis and upper respiratory tract catarrh. Children less than one year of age were the most common age-group affected. The duration of oxygen treatment and hospital stay was 8 days in the 14/22 y 17/31 of the children studied, respectively. Eleven of thirty-one children developed a severe pneumonia, requiring intensive care and mechanical respiratory assistance (4/11). Two cases developed miocarditis and hepatitis. Among all cases included the mortality was 9.7% (3/31) associated with Ad7. Conclusions. This study contributes to have better information on the clinical picture, and about the most common serotypes of adenovirus causing ARI in children in a province from Argentine. The early age of the infection onset, extended hospital stay and the severity of the infection, emphasize the need for implementation of both strategies of control and prevention.

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Induction of phenolic compounds in Hypericum perforatum L. cells by Colletotrichum gloeosporioides elicitation

Conceição, Luis F.R.; Ferreres, Federico; Tavares, Rui M.; Dias, Alberto C. P.
2006-01-01

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Induction of DNA synthesis by ligation of the CD53 tetraspanin antigen in primary cultures of rat mesangial cells

Yunta, M.; Rodríguez-Barbero, A.; Arévalo, Miguel; López-Novoa, José M.; Lazo, Pedro A.
2003-01-01

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Induced New Mutation of D1 Serine-268 in Soybean Photosynthetic Cell Cultures Produced Atrazine Resistance, Increased Stability of S2QB - and S3QB - States, and Increased Sensitivity to Light Stress

Alfonso Lozano, Miguel ; Pueyo, J. J. ; Gaddour, Kamel ; Etienne, A. L. ; Kirilovsky, D. ; Picorel Castaño, Rafael

We have isolated several herbicide-resistant cell lines from photosynthetic cell suspensions of soybean (Glycine max) that possessed different levels of herbicide resistance, photosystem II activity, and chlorophyll a/b ratio. We have further studied the STR7 mutant, which showed the highest level o...

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Incremento de óxido nítrico en el suero y sobrenadantes de cultivo de células mononucleares de pacientes con la enfermedad de Hansen en estado reaccional tipo II.

Rada, Elsa; Marzal, Miguel; Aranzazu, Nacarid; Convit, Jacinto
2003-06-01

Resumen en español El término "reacción" es usado en lepra para describir síntomas y signos de inflamación aguda. En la forma multibacilar de la enfermedad se producen reacciones tipo II, es decir, eritema nodoso lepromatoso (ENL). El óxido nítrico (ON) podría jugar un papel en la respuesta del huésped, donde la producción elevada de ON estaría involucrada en cuadros inflamatorios agudos. En este trabajo se evalúa la producción de ON en suero y en sobrenadantes de cultivos de c� (mas) �lulas mononucleares (CMN). El ON fue medido indirectamente por el método de Griess. En suero, el 52% de los pacientes con ENL (15/29) presentó niveles de nitritos/nitratos mayores de 30 µM; así, 8/15 presentaron una concentración de 36,38 ± 5,71 µM; 1/15 de 70,5 µM y 6/15 mayor de 100µM (205,97 ± 5 µM). En concordancia con estos resultados, se encontró que sólo los sobrenadantes de cultivos de células mononucleares de los pacientes con ENL colectados a las 120 horas de incubación presentaron niveles significativamente elevados de nitritos/nitratos (10 µM ± 6,53), en comparación con los sobrenadantes de los polos estables de la enfermedad, lepra lepromatosa y lepra tuberculoide, cuyos valores fueron 2,52 µM ± 1,18 y 2,69 µM ± 1,07, respectivamente. Los resultados muestran niveles relativamente incrementados de nitritos/nitratos en el grupo de pacientes con estado reaccional tipo II (ENL), lo cual sugiere la participación de la iNOS en este grupo. Resumen en inglés The word "reaction" is used in leprosy to describe signs and symptoms of acute inflammation. Type II reactions, including erythema nodosum leprosum (ENL) occur in the multibacillary forms of Hansen’s disease. Nitric oxide (NO) could play a role in the response of the host, where a high NO production would be involved in acute inflammatory processes. In this paper we evaluate NO production in serum and in the supernatants of mononuclear cell cultures (MNCC), measured indi (mas) rectly by Griess’ method. The results obtained in serum showed that 52% of patients with ENL (15/29) had a production over 30 µM, distributed as follows: 8/15 had a mean concentration of 36.38 ± ?5.71 µM; 1/15, 70.5 µM and 6/15 had a mean concentration greater than 100 µM (205.97 ± 5 µM). Forty eight percent presented nitrite and nitrate levels lower than 30 µM (18.93 ± 6.15). Only supernatants of mononuclear cell cultures from ENL patients collected at 120 hours of incubation presented NO production levels higher than 10 µM ± 6.53, as compared with the supernatants from the stable polar forms of the disease (lepromatous leprosy and tuberculoid leprosy), where values were 2.52 µM ± 1.18 and 2.69 µM ± 1.07, respectively. These preliminary results show a different metabolic activity in the group of patients with Type II reaction state (ENL).

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Inactivation of the polycomb group protein Ring1B unveils an antiproliferative role in hematopoietic cell expansion and cooperation with tumorigenesis associated with Ink4a deletion

Calés Bourdet, Carmela; Román-Trufero, Mónica; Pavón, Leticia; Serrano, Iván; Melgar, Teresa; Endoh, Mitsuhiro; Pérez, Claudia; Koseki, Haruhiko; Vidal, Miguel
2008-02-01

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Helicobacter pylori: Su importancia como problema de salud en la comunidad

González-Carbajal Pascual, Miguel; Hernández Garcés, Héctor
1998-12-01

Resumen en español El presente trabajo es una revisión de los anexos existentes entre el Helicobacter pylori y la gastritis crónica, la úlcera gastroduodenal, el cáncer gástrico, el linfoma de células B y algunos aspectos relacionados con la epidemiología y el tratamiento de esta infección. Se sugiere la posibilidad de que modelos de infección semejantes se asocien a otras enfermedades así como el hecho de que ésta, procedente de Europa, se haya introducido en América como consecuencia del encuentro de estas 2 culturas Resumen en inglés A review is made on the links existing between Helicobacter pylori and chronic gastritis, gastroduodenal ulcer, stomach cancer, and B-cell lymphoma, as well as on some aspects connected with the epidemiology and treatment of this infection. It is suggested the possibility that similar models of infection be associated to other diseases, and that this infection original from Europe had been introduced in America as a result of the encounter between these two cultures

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Glucocorticoid regulation of hepatic S-adenosylmethionine synthetase gene expression

Gil, Beatriz; Pajares, María A.; Mato, José M.; Álvarez, Luis
1997-03-01

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Fístula aorto pulmonar: endocarditis izquierda en paciente VIH y ADVP: Revisión de la literatura/ Aorto pulmonary fistula: left-sided infective endocarditis in HIV and intravenous drugs abuser patient: Review of literature

Obón Azuara, B.; Zalba Etayo, B.; Gutiérrez Cía, I.; Villanueva Anadón, B.
2007-11-01

Resumen en español La endocarditis infecciosa (EI) es una de las complicaciones más severas en la población adicta a drogas por vía parenteral (ADVP). La infección por el VIH incrementa el riesgo de aparición en los pacientes que además son ADVP. La EI en ambas poblaciones posee una especial tendencia a infectar las válvulas del hemicardio derecho, siendo infrecuente la afectación aórtica. Se expone el caso un paciente VIH y ADVP, que ingresa por síndrome febril, con Rx de tórax (mas) inicial normal y hemocultivos negativos. CD4 90 mm³. Imposible realizar ecocardiograma transesofágico (ETE), revelando el transtorácico (ETT) una insuficiencia aórtica moderada con función sistólica conservada. A pesar de antibioterpia de amplio espectro, antifúngico y tratamiento antirretroviral (TAR) presentó SDRA por lo que es intubado. Se realizó ETT apreciando una gran desestructuración aórtica y una fístula aorto-pulmonar secundaria a una EI izquierda. Posteriormente solo un hemocultivo fue positivo para S. aureus. Fue desestimado el tratamiento quirúrgico. El paciente falleció tras 3 semanas de evolución. Resumen en inglés Infective endocarditis (IE) is the most severe complication in intravenous drug abusers (IVDAs). HIV infection increases the risk of IE in IVDAs too. IE in both population are special tendency to infect the rigth-sided heart, but unusual infective aortic valve. We report a case of HIV and IVDA patient admitted in hospital due to fever syndrome, with X-ray test normal and the first blood cultures negatives. CD4 count cell 90 mm³. It was impossible doing a transesophageal (mas) echocardiography (TEE) and transtoracic echocardiogramma (TTE) only showed a moderate aortic insufficiency with conserved systolic function. Despite using antibiotics, antifungals and highly active antirretroviral therapy, he developed ARDS, and mechanical ventilation should be performed. At that moment, TEE showed an aorto pulmonary fistula due to left-sided IE. Further cultures was undergone and only one blood culture was positive to Staphylococcus aureus. Cardiac surgery was not indicated. The patient died 3 weeks later.

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Fascitis necrosante grave por Serratia marcescens: Reporte de un caso clínico/ Fatal necrotizing fasciitis due to Serratia marcescens

Campos G, Alejandro; Burgos L, Ana M; Fica C, Alberto; Victoriano R, Gonzalo; Sarmiento G, M. Carolina; Osorio V, Sandra
2007-08-01

Resumen en español Una paciente de 81 años con insuficiencia cardíaca crónica, fibrilación auricular y tratamiento anticoagulante, ingresó por un cuadro fulminante de dolor y celulitis en la extremidad inferior derecha de 24 horas de evolución. Sobre la zona existía una úlcera crónica de cinco meses de evolución, manejada con curaciones locales. Al ingreso, había una placa necrótica pero sin hipotensión o confusión mental. La paciente estaba febril y con taquicardia (126 por m (mas) in). La evaluación reveló ausencia de leucocitosis, trombosis venosa profunda en la misma pierna e infiltrados radiológicos pulmonares en el lóbulo inferior izquierdo. En las horas siguientes aumentó el dolor, apareció secreción purulenta por la úlcera y la paciente presentó confusión, hipotensión, falla respiratoria y luego shock. La paciente recibió ciprofloxacino endovenoso y clindamicina y fue intervenida a las 15 horas de ingreso, efectuándose una amputación supracondílea. El sondeo cardíaco demostró un gasto bajo (2,3 L/min) y una resistencia vascular sistémica (2888 din.s.cm"5) y presión capilar pulmonar elevada (17 cm H(2)0), cifras compatibles con un shock cardiogénico. Evolucionó en malas condiciones y falleció de falla orgánica múltiple a las 36 horas de ingreso. Los hemocultivos demostraron crecimiento de Serratia marcescens en dos frascos. No se efectuó una necropsia y los cultivos de la secreción de la úlcera fueron negativos Resumen en inglés An 81 year old female patient with chronic heart failure and atrial fibrillation receiving anticoagulant therapy, was admitted with progressive pain on her right leg for the past 24 hours, associated to local erythema, edema and warmth. The lesion evolved at the same site where she presented a chronic ulcer for the previous 5 months managed only with local care. At admission a necrotic plaque on the affected site was perceived; there was no hypotension or mental confusion (mas) but signs of a deep venous thrombosis on the involved leg were found. She was febrile (37.8°C) and with tachychardia (126 per minute). Laboratory evaluation revealed normal white blood cell count and a subtherapheutic anticoagulant INR value. A chest x-ray showed infiltrates on the left lower lung lobe. On the following hours the lesion evolved with increasing pain, haemorrhagic bullae and a purulent discharge through the ulcer, with the patient developing mental deterioration, hypotension, respiratory failure and shock. The patient received intravenous ciprofloxacin and clindamycin and was operated 15 hours after admission performing an over-the knee amputation. A cardiac catheterization demonstrated a low cardiac output (2.3 L/min), and both a high systemic vascular resistance (2888 din.s.cm"5) and pulmonary capillary wedge pressure (17 cm H(2)0), results compatible with cardiogenic shock. Evolution was progressively worse and she died of multiple organic failure 36 hours after admission. Two blood culture samples grew Serratia marcescens. No necropsy was performed and cultures taken from the leg remained negative

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Expression of a maize cell wall hydroxyproline-rich glycoprotein gene in early leaf and root vascular differentiation

Stiefel, Virginia; Ruiz-Ávila, Luis; Raz, Regina; Vallés, María Pilar; Gómez, Jordi; Pagès, Montserrat; Martínez-Izquierdo, José Antonio; Ludevid, M. Dolors; Langdale, Jane A.; Nelson, Timothy; Puigdomènech, Pere
1990-08-01

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Excess copper induces structural changes in cultured photosynthetic soybean cells

Bernal Ibáñez, María; Sánchez-Testillano, Pilar; Risueño, María del Carmen; Yruela Guerrero, Inmaculada
2006-11-01

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Evaluación de la producción de beta -amiloide por la mutación E280A en el gen de la presenilina 1/ Evaluation of amyloid-b by the E280A mutation in presenilin gene

Villegas, Andrés; Castañeda, Mónica M; Arias, Luis Fernando; Vieco, Beatriz; Lopera, Francisco; Bedoya, Gabriel
2007-09-01

Resumen en español Introducción. La mutación E280A en el gen de presenilina 1 se encuentra asociada al grupo familiar más grande del mundo con enfermedad de Alzheimer. La presenilina 1 es un componente esencial del complejo g-secretasa, responsable de la producción del péptido beta -amiloide, considerado clave en la fisiopatogenia de la enfermedad. Objetivo. Determinar si la mutación E280A en presenilina 1 incrementa la producción de b-amiloide, como reflejo de la ganancia de funció (mas) n gamma -secretasa. Materiales y métodos. Se evaluaron, por la tinción con rojo congo e inmunohistoquímica, depósitos sistémicos de b-amiloide en tejidos de cadáveres afectados, portadores de la mutación E280A en la presenilina 1 y cadáveres de no afectados. Se cuantificó por la técnica de ELISA el beta -amiloide de 40 y 42 aminoácidos en cultivos de células CHO que expresan la proteína precursora de amiloide, transfectadas con los cADN de presenilina 1 portando las mutaciones M146L, E280A, D E9 y L392V. Resultados. Se encontraron depósitos proteicos en todos los tejidos estudiados y escasos depósitos de beta -amiloide. No se encontró diferencia en la cantidad de depósitos, ni en su localización. No se observó incremento en la producción de beta -amiloide en las células transfectadas con los cADN de presenilina 1 con las mutaciones comparadas con los controles. Conclusiones. La mutación E280A en presenilina 1 no aumentó la producción de beta -amiloide en tejidos periféricos no neuronales o en el modelo in vitro, contrario a lo que sucede en una ganancia de función de gamma -secretasa. Resumen en inglés Introduction. The E280A mutation of the presenilin 1 gene has been found to be the most common associate in Alzheimer’s patients with a family history of this disease. Presenilin 1 is a critical component of the g-secretase complex and plays an essential role in the production of amyloid-beta peptide. This peptide has been strongly associated with the physiopathology of the disease. Objective. The E280A mutation in the presenilin 1 was investigated for increased producti (mas) on of amyloid-beta , as a response to gain in gamma-secretase function. Materials and methods. Levels of systemic amyloid-beta were measured with congo red staining and immuno-histochemistry of the tissues of affected cadavers, compared with non-affected cadavers. The 40 and 42 amino acid amyloid-beta levels were quantified by ELISA assay in CHO cell cultures. The amyloid precursor protein expressed by the cultures was detected by transfection with the cDNAs of presenilin 1 carrying the M146L, E280A, DE9 y L392V mutations. Results. Protein deposits were found in all tissues investigatged, but only a few with beta -amyloid deposition. No differences were observed in the amount or location of amyloid-beta between affected and unaffected cadavers. Not increase was noted in the production of amyloid-beta from the CHO cells transfected with cDNA from any of the mutations of presenilin 1. Conclusions. The E280A mutation in the presenilin 1 gene was not associated with the increased production of amyloid-beta in non-neuronal peripheral tissues, or in the in vitro model. This is in contrast to the expectation in a gamma-secretase gain of function.

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Etica científica y embriones congelados/ Scientific ethics and frozen embryos

Valenzuela, Carlos Y
2001-05-01

Resumen en inglés Background: Scientific Ethics is the theory and praxis of decisions. Philosophical Ethics is presented as the theory and praxis of the good. As the good differs among cultures, Philosophical Ethics is dependent on the endo-cultural good conception. The decision (included that one of adhesion or not to a world vision) depends on neuro-psychic specific factors: i) cognitive factors that include mostly the knowledge of the alternatives and their consequences and the ideologi (mas) cal or religious conception of good in relation to the alternatives; ii) affective factors that make alternatives pleasant, unpleasant or neutral, attractive, repulsive or neutral; iii) emotional factors that associate to alternatives anger, peace or neutrality, sadness, happiness or neutrality; iv) value factors that assign importance, triviality or neutrality to alternatives, or assign them significance, irrelevancy or neutrality. There are unspecific factors such as the psychic energy, desire or others. Mixed factors such as attitude, motivation, intention and others. Scientific Ethics deals with the mind as a materio-energetic process which is different from the soul, eggs and embryos of any species are full individuals of that species, because, they have initiated a copy of their genome that specify, give autonomy and define them as individuals. For Scientific Ethics to leave frozen embryos like that for ever, to defrost and get rid of them or to use their cells for science are synonymous of killing them. To defrost them to use their cells as stem cells for somatic cell therapy or to implant them into uteri to continue their development is to maintain alive their cells, but only the implantation allows their maintenance as individuals, thus, being the only compatible with the Christian ethics. The compatibility of these alternatives with other ethics is discussed (Rev Méd Chile 2001; 129: 561-8)

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Estudio ultraestructural de la fagocitosis de promastigotes y amastigotes de Leishmania mexicana porla línea de células dendríticas FSDC/ Phagocytosis of promastigotes and amastigotes of Leishmania mexicana by the FSDC dendritic cell line: Ultrastructural study

Sarmiento, Ladys; Ayala, Martha; Peña, Sandra; Rodríguez, Gerzaín; Fermín, Zelandia; Tapia, Felix J
2006-10-01

Resumen en español Introducción. Las células dendríticas están presentes en la mayoría de los tejidos, ellas capturan y presentan antígenos para activar a los linfocitos T. Objetivo. Se describe ultraestructuralmente la fagocitosis de Leishmania mexicana por la línea de células dendríticas FSDC, una línea de células de Langerhans obtenida de la epidermis fetal de ratón, e inmortalizada por la transducción retroviral del oncogen v-myc. Materiales y métodos. Se obtuvieron amasti (mas) gotes de la lesión de ratones Balb/c y promastigotes a partir del cultivo ( 24°C) de la lesión. Las FSDC se cultivaron con los parásitos en una proporción de 5 parásitos por célula, en medio IMDM, durante 24 horas. Los cultivos infectados y los controles se procesaron para microscopía electrónica de transmisión. Se hicieron cortes semifinos contrastados con azul de toluidina para evaluar porcentaje de fagocitosis y finos, contrastados con acetato de uranilo y citrato de plomo. Resultados. El 13,42% de las FSDC fagocitaron promastigotes; de ellas el 8% contenían un parásito y el restante 5,2% fagocitó dos o más. El 20% de las FSDC fagocitaron amastigotes; 10% contenían un parásito y 10% dos o más. Ultraestructuralmente se observaron promastigotes en contacto con las células por el flagelo o por el polo posterior. Los fagosomas que contenían promastigotes eran organelos estrechos con uno ó dos parásitos. Los que contenían amastigotes eran de gran tamaño (8 µm) con uno o varios parásitos, libres o adosados a la membrana del fagosoma por su polo posterior. Conclusión. La infección de las FSDC se caracterizó por una baja tasa de células infectadas al ser expuestas a promastigotes o amastigotes. La vacuola parasitofora presentó características similares a las de los macrófagos. En su mayoría las FSDC presentaban 1 a 3 parásitos por célula. Las observaciones plantean la necesidad de estudiar la relación entre capacidad de fagocitosis y función. Resumen en inglés Introduction. Dendritic cells, which capture and present antigen to activate unprimed T cell, are found in most tissues. Objective. This work describes the ultrastructure of Leishmania mexicana phagocytosis by the fetal skin dendritic cell (FSDC) line, a Langerhans cell line isolated from mouse fetal epidermis immortalized by retroviral transduction of the v-myc oncogene. Materials and methods. Leishmania amastigotes were obtained from mouse (BALB/c) lesion and promastigo (mas) tes from culture ( 24°C) of the lesion. FSDC cells were cultured with parasites (5 parasites per cell) using IMDM medium, during 24 hours. Control and infected cultures were processed for transmission electron microscopy. Semi-thin sections counterstained with toluidine blue to evaluate phagocytosis and thin sections counterstained with uranyl acetate and lead citrate were made. Results. 13.42% of the FSDC phagocytosed promastigotes; 8% contained a single parasite and 5.2% phagocytosed 2 or more. 20% of the FSDC phagocytosed amastigotes; 10% contained a single parasite and 10% phagocytosed 2 or more. Ultrastructurally, promastigotes in contact with FSDC by the flagellum or the posterior pole were observed. The parasitophorous vacuoles harbouring promastigotes were small organelles containing one or two parasites each. Parasitophorous vacuoles containing amastigotes were larger (8µm diameter) with one or several parasites free or attached to the vacuole at the posterior pole. Conclusion. The low rate of infected FSDC cells was characteristic and the parasitophorous vacuole showed similar characteristics to those observed in macrophages. The parasite density in the infected cells was 1 to 3 parasites per cell. These observations highlight the need to study the relationship between phagocytic capacity and function.

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Establecimiento de un protocolo de permeabilización con detergentes que incrementa la eficiencia en la producción de betacianinas en cultivos de células de Beta vulgaris L/ stablishment of a premeabilization protocol with detergents to increase betacianine production efficiency in a Beta vulgaris L. Cell cultures/ Estabelecimento de um protocolo de permeabilização com detergentes que incrementa a eficiência na produção de betacianinas em cultivos de células de Beta vulgaris L

Salcedo-Morales, Guadalupe; Trejo-Tapia, Gabriela; Martínez-Bonfil, Blanca P; De Jesús-Sánchez, Antonia; Arenas-Ocampo, Martha L; Jiménez-Aparicio, Antonio R
2009-09-01

Resumen en portugués Avaliou-se o efeito de quatro detergentes, Tween 20, 40 e 80, e Tritón X-100® como agentes químicos permeabilizantes para a liberação de betacianinas (BC) de células em suspensão de Beta vulgaris. Selecionou-se o agente químico permeabilizante com base na concentração de betacianinas liberadas e o tempo de contacto. O conteúdo de BC se estimou usando medição de cor por análise de imágens. Os resultados mostraram que a adição de Tritón X-100® 0,7mM duran (mas) te 10min era suficiente para liberar 36% de BC, com uma viabilidade de 60-70%, e permitindo além disso um novo ciclo de cultivo das células tratadas e a acumulação paulatina de betacianinas durante o segundo ciclo. Resumen en español Se evaluó el efecto de cuatro detergentes, Tween 20, 40 y 80, y Tritón X-100® como agentes químicos permeabilizantes para la liberación de betacianinas (BC) de células en suspensión de Beta vulgaris. Se seleccionó el agente químico permeabilizante con base en la concentración de betacianinas liberadas y el tiempo de contacto. El contenido de BC se estimó usando medición de color por análisis de imágenes. Los resultados mostraron que la adición de Tritón X- (mas) 100® 0,7mM durante 10min era suficiente para liberar el 36% de BC, con una viabilidad de 60-70%, y permitiendo además un nuevo ciclo de cultivo de las células tratadas y la acumulación paulatina de betacianinas durante el segundo ciclo. Resumen en inglés Red beet (Beta vulgaris L.) cell suspensions were permeabilized by means of four chemical detergent agents, Tween 20, 40 and 80, and Triton X-100®, to evaluate the recovery of betacianins (BC). The permeabilizating agent was selected as a function of the quantity of BC released and the contact time. Betacianin concentration was measured using digital color image analysis. The results showed that 36% of betacianins was released using Triton X-100® (0.7mM) during 10min; u (mas) sing these extraction conditions, the viability remained at 60-70%. This treatment allowed a second growing-cycle, as well as, an additional accumulation of betacianins.

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Erk5 participates in neuregulin signal transduction and is constitutively active in breast cancer cells overexpressing ErbB2

Esparís-Ogando, Azucena; Díaz-Rodríguez, Elena; Montero, Juan Carlos; Yuste, Laura; Crespo, Piero; Pandiella, Atanasio
2002-01-01

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Empleo de la terapia láser en la reparación ósea periapical

GARRIGÓ ANDREU, MARÍA I.; VALIENTE ZALDÍVAR, CAROLINA J
1997-06-01

Resumen en español El efecto bioestimulante de la radiación láser de baja potencia en el tejido óseo, se ha comprobado en cultivos de células y animales de experimentación. El objetivo de esta investigación fue evaluar dicho efecto en la reparación ósea periapical. Se atendieron 40 pacientes que presentaban procesos periapicales crónicos, a los que se les realizó tratamiento pulpo radicular y láser. Para la terapia láser, se útilizó la técnica puntual en el área lesionada y (mas) laserpuntura, con depósitos energéticos de 15 J/cm² y 7 J/cm², respectivamente. Los resultados obtenidos demuestran que existió aceleración en los procesos de reparación ósea periapical al utilizar la terapia láser, pues en el 67,5 % de los pacientes atendidos, la misma ocurrió en un período menor a 6 meses después de iniciado el tratamiento. Resumen en inglés The biostimulant effect of low energy laser radiation on the bone tissue has been tested in cell cultures and experimental animals. The objective of our investigation was to evaluate this effect on the periapical bone reparation. 40 patients received attention and underwent radicular, pulpar, and laser treatment. The acupuncture points technique in the injured area and the laserpuncture were used as part of the laser terapy with energetic depots of 15 J/cm² and 7 J/cm², (mas) respectively. The results show that the processes of periapical bone reparation were accelerated, since in 67.5 % of these patients it took place in less than 6 months.

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Effects of small-scale turbulence on the growth of two diatoms of different size in a phosphorus-limited medium

Peters, Francesc; Arin, Laura; Marrasé, Cèlia; Berdalet, Elisa; Sala, M. Montserrat
2006-03-03

Digital.CSIC (Spain)

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Effects of colchicine on anther and microspore culture of bread wheat (Triticum aestivum L.)

Soriano, Mercedes; Cistué Solá, Luis; Vallés Brau, María Pilar; Castillo Alonso, Ana María
2007-12-01

Digital.CSIC (Spain)

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Efectos de la hipotermia inducida en niños críticos/ Effects of induced hypothermia in critically ill children

Mencía, S.; Berroya, A.; López-Herce, J.; Botrán, M.; Urbano, J.; Carrillo, Á.
2010-09-01

Resumen en español Objetivo: Estudiar la eficacia de la hipotermia inducida (HI) en niños, su efecto sobre los parámetros hemodinámicos, hematológicos, bioquímicos y sus efectos secundarios. Diseño: Estudio observacional retrospectivo. Ámbito: Unidad de cuidados intensivos pediátricos. Pacientes: Pacientes que requirieron tratamiento con HI. Intervenciones: Ninguna. Variables recogidas: Previo al inicio de la HI y a las 4, 24, 48, 72 y 120h después, se recogieron las variables frec (mas) uencia cardíaca, presión arterial sistólica y diastólica, diuresis, dosis de inotrópicos, sedantes y relajantes musculares para el balance hídrico, hematocrito, leucocitos, porcentaje de granulocitos, plaquetas, glucemia, natremia, potasemia, proteína C reactiva, lactato y coagulopatía, úlceras, tiritona, infecciones y muerte. Resultados: Se estudió a 31 pacientes, con una edad media de 20 meses (DE: 39,8). El tiempo medio que permanecieron en HI fue de 3,97 días (rango: 1-11 días). Entre los efectos de la HI se observó un descenso significativo de la frecuencia cardíaca, sin cambios en el resto de las constantes (presión arterial sistólica, presión arterial diastólica y diuresis). Entre los parámetros analíticos destacaron la disminución progresiva del número de plaquetas y el aumento de la proteína C reactiva, ambos de forma significativa. El descenso en las cifras de hematocrito, la glucosa y el lactato no fueron significativos. Un 25,8% de los pacientes presentó cultivos positivos durante el empleo de la hipotermia y la localización más frecuente fue el broncoaspirado (65%). Conclusiones: La HI superficial puede ser útil en algunos niños críticamente enfermos y es en general bien tolerada y tiene escasos efectos secundarios, que se pueden controlar si se realiza una monitorización adecuada. Resumen en inglés Objective: To study the efficacy of induced hypothermia (IH) in children, its effect on hemodynamic, hematological, and biochemical parameters and its side effects. Design: Retrospective, observational study. Setting: Pediatric intensive care unit. Patients: Pediatric patients requiring induced hypothermia. Interventions: None. Data collected: The following variables were recorded prior to the initiation of IH and after 4, 24, 48, 72, and 120 hours: heart rate, systolic b (mas) lood pressure (SBP), diastolic blood pressure (DBP), diuresis, dose of inotropic, sedative, and muscle relaxant drugs, fluid balance, hematocrit, white cell count, white cell differential percentages, platelet count, blood levels of glucose, sodium, and potassium, C reactive protein, lactate, coagulation times, pressure ulcers, shivering, infections and death. Results: Thirty-one patients with a mean age of 20 months (SD: 39.8) were included in the study. The mean duration of IH was 3.97 days (range: 1 to 11 days). Among the IH effects, there was a significant fall in heart rate, with no changes in SBP, DBP, or diuresis. The blood tests revealed a progressive and significant fall in platelet count and an increase in C reactive protein levels. The fall in hematocrit and glucose and lactate levels was not significant. Positive cultures were detected in 25.8% of the patients during IH, most commonly from the bronchial aspirate (65%). Conclusions: Induced hypothermia can be useful in some critically ill children. Tolerance is generally good and there are usually few side effects, which can be controlled through appropriate monitoring.

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Efecto del lipopolisacárido en cultivos de células dendríticas humanas y su inhibición por la polimixina B/ Effect of lipopolysaccharides on human dentritic cell cultures and its inhibition by polymyxin B

Cuéllar, Adriana; Fonseca, Ángela; Gómez, Alberto
2004-12-01

Resumen en español Algunos estímulos de maduración utilizados en cultivos de células dendríticas, como las proteínas recombinantes obtenidas en sistemas bacterianos o los extractos proteicos de ectoparásitos, contienen lipopolisacáridos (LPS) y su presencia afecta el comportamiento de las células dendríticas en cultivo. En este trabajo se evaluó el efecto del LPS en un sistema de cultivo de células dendríticas humanas y la actividad de la polimixina B como inhibidor del efecto d (mas) el LPS. Para esto, los monocitos obtenidos a partir de sangre periférica humana se diferenciaron a células dendríticas con IL-4 y GM-CSF y como estímulo de maduración se utilizó LPS o PGE2/FNTá. La expresión de marcadores y la secreción de citocinas se evaluaron por citometría de flujo. Los resultados mostraron que la preexposición a endotoxina disminuyó la expresión de CD83, inhibió la secreción de IL-12p70, FNTá e IL-10 y disminuyó la secreción de IL-6 en células dendríticas. Además, la utilización de 10 mg/ml de polimixina B fue efectiva en la inhibición de la actividad de 1 mg/ml de LPS y la máxima concentración de polimixina B que no afectó la morfología de las células fue de 50 mg/ml. En conclusión, la polimixina B es efectiva para inhibir la actividad del LPS en los cultivos de células dendríticas. Resumen en inglés Dendritic cells have been described as effective antigen presenting cells. Human dentritic cells are highly susceptible to lipopolysaccharide (LPS) tolerance, consisting of a differential deactivation state in which some cellular functions are impaired. LPS tolerance can be experimentally induced in vitro, in which the presence of LPS strongly affects the behavior of cultured dendritic cells. Recombinant proteins obtained from bacterial systems or protein extracts of ecto (mas) parasites containing LPS can be used as stimuli to enhance maturation processes in these cells. The present study evaluated the effect of LPS in human dendritic cell cultures, and the activity of polymyxin B as an inhibitor of the LPS effect. Dendritic cells were obtained from peripheral blood monocytes in the presence of IL-4 and GM-CSF, followed by exposure with LPS and PGE2/TNFá. Surface markers and cytokine levels were evaluated by flow cytometry. The dendritic cells pre-exposed to single doses of endotoxin demonstrated a reduced capacity to mature, reduced CD83 expression, inhibited secretion of IL-12, TNFá, IL-10 and diminished secretion of IL-6. Furthermore, polymyxin B at 10 mg/ml inhibits LPS activity at 1 mg/ml. The maximum polymyxin B concentration with no effect on cellular morphology was 50 mg/ml. Consequently, polymyxin B was determined to be an effective LPS inhibitor in dendritic cell cultures.

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Ectopic expression of Cvh (Chicken Vasa homologue) mediates the reprogramming of chicken embryonic stem cells to a germ cell fate

Lavial, Fabrice; Acloque, Hervé; Bachelard, Élodie; Nieto, M. Ángela; Samarut, Jacques; Pain, Bertrand
2009-03-24

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Early telencephalic migration topographically converging in the olfactory cortex

García-Moreno, Fernando; López-Mascaraque, Laura; Carlos, Juan A. de
2008-06-01

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EVALUACIÓN DEL EFECTO MODULADOR DEL FACTOR DE CRECIMIENTO SIMILAR A LA INSULINA TIPO I (IGF-I) EN LINFOCITOS T DE BAZO DE RATAS SOMETIDAS A ESTRÉS NUTRICIONAL/ EVALUATION OF THE MODULATING EFFECT OF TYPE-I INSULIN-LIKE GROWTH FACTOR (IGF-I) IN RAT SPLEEN-T LYMPHOCYTES UNDER NUTRITIONAL STRESS/ AVALIACÁO DO EFEITO MODULADOR DO FACTOR DE CRESCIMENTO SIMILAR A INSULINA TIPO I (IGF-I) EM LINFÓCITOS T DE BAÇO DE RATOS SUBMETIDOS A STRESS NUTRICIONAL

Forero R, Francy L; Ortiz Q, Blanca L; Anzola V, Cecilia
2008-12-01

Resumen en portugués Neste trabalho foi estudado o papel de Factor de Crescimento Similar à Insulina Tipo I (IGF-I) como factor modulador do stress induzido por uma restrição proteica em linfócitos T de baço de rato. Encontrou- se que a restrição proteica diminui o peso corporal em 15%, o peso do baço dos animais em 32% e a população total de linfócitos T em 42%. Igualmente, se observou uma alteração nas percentagens das subpopulações T-CD4, T-CD8 e linfócitos B, e uma relaç� (mas) �o T-CD4/T-CD8 diminuída que sugere uma função imune afectada pela má nutrição. Foi encontrado que os cultivos de linfócitos provenientes do baço de rato em restrição proteica apresentam menor proliferação que os provenientes de ratos bem alimentados; dita proliferação incrementa ao adicionar IGF-I de maneira dependente da dose. Esta resposta depende, também, do conteúdo de proteína na dieta, observando- se uma maior e mais rápida resposta a IGF-I no grupo bem nutrido. A concavalina A incrementou, igualmente, a proliferação em ambos grupos de animais, e ao combiná-la com IGF-I apresentou-se um sinergismo na resposta. Nesta investigação também foi encontrado que a restrição proteica incrementa a apoptose dos linfócitos T e que a adição de IGF-I permite proteger estas células da apoptose dando suporte ao papel imunomodulador desta hormona em stress nutricional. Resumen en español En este trabajo se estudió el papel del factor de crecimiento similar a la insulina tipo I (IGF-I) como factormodulador del estrés inducido por una restricción proteica en la dieta, en linfocitos T de bazo de rata. Se encontró que la restricción proteica disminuye el peso corporal en un 15%, el peso del bazo en un 32% y la población total de linfocitos T en un 42%. Igualmente, se observó en la población restringida un incremento en los porcentajes de las subpoblac (mas) iones T-CD4, T-CD8 y linfocitos B, y una relación T-CD4/T-CD8 disminuida, lo que sugiere una función inmune afectada por la malnutrición. También se halló que los cultivos de linfocitos provenientes de bazo de ratas en restricción proteica presentanmenor proliferación que los provenientes de ratas bien alimentadas; dicha proliferación se incrementa al adicionar IGF-I de manera dependiente de la dosis. Esta respuesta depende, también, del contenido de proteína en la dieta, observándose una mayor y más pronta respuesta a IGF-I en el grupo bien nutrido. La concanavalina A incrementó, igualmente, la proliferación en ambos grupos de animales, y al combinarla con IGF-I se presentó un sinergismo en la respuesta. En este trabajo se encontró, también, que la restricción proteica incrementa la apoptosis de los linfocitos T, y que la adición de IGF-I logra proteger dichas células de la apoptosis soportando el papel inmunomodulador de esta hormona en estrés nutricional. Resumen en inglés In this work we studied the role of Insulin- like Growth Factor-I (IGF-I) as stress modulator in spleen T-lymphocytes from protein restricted rats. In protein restriction we found 15% lowered body weight, 32% lowered spleen weight and a reduction of 42% in total T-cell population. Also, increased percentages of T-CD4, T-CD8 and B cell populations and lowered T-CD4/T-CD8 ratio was observed, suggesting an impaired immune function due to malnutrition. Cultures of spleen T-ly (mas) mphocytes from protein restricted rats showed less proliferation than the ones from well fed rats, this proliferation was increased after the addition of IGF-I in a dose depending manner. This answer depends, also, from the protein content of the diet, since the well fed animals showed a higher and faster answer. Concanavaline A, also, increased proliferation in both groups of rats and when combined with IGF-I a synergistic answer was found. In this work we also found that protein restriction increased apoptosis of T-lymphocytes, and the addition of IGF-I helped in the recovery of those cells supporting the immunomodulator role of IGF-I in nutritional stress.

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Diterpenoid alkaloid derivatives as potential chemotherapeutic agents in American trypanosomiasis

González, Patricia; Marín, Clotilde; Rodríguez-González, Isabel; Illana, Antonio; Mateo, Héctor; Longoni, Silvia Stefánia; Rosales, María José; González-Coloma, Azucena; Reina, Matías; Sánchez Moreno, Manuel
2006-01-02

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Differential expression of genes in salivary glands of male Rhipicephalus (Boophilus) microplus in response to infection with Anaplasma marginale

Zivkovic, Zorica; Esteves, Eliane; Almazán, Consuelo; Daffre, Sirlei; Nijhof, Ard M.; Kocan, Katherine M.; Jongejan, Frans; Fuente García, José de la
2010-03-18

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Different marine heterotrophic nanoflagellates affect differentially the composition of enriched bacterial communities

Vázquez-Domínguez, Evaristo; Casamayor, Emilio O.; Català, P.; Lebaron, Phillipe
2005-04-01

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Detection of anti-heat shock protein 90 β (Hsp90β) antibodies in cerebrospinal fluid

Cid, Cristina; García-Villanueva, M.; Salinas, M.; Alcázar, A.
2007-01-10

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Descondensación de la heterocromatina en bovinos criollos portadores de la translocación Robertsoniana (rob1; 29). Acción del inductor 5-azacitidina-C/ Heterochromatin decondesation in Creole cattle carrier of Robertsonian franslocation (rob 1; 29). Action of 5-azacytidine-C

Artigas, Rody; Iriarte, Wanda; de Soto, Leticia; Iriarte, Andrés; Llambí, Silvia; de Bethencourt, Miguel; Postiglioni, Alicia
2008-01-01

Resumen en español La translocación Robertsoniana (rob1; 29) está ampliamente distribuida en razas comerciales y en reservas genéticas de bovinos Criollos americanos. Se ha descrito un enlentecimiento en el desarrollo de embriones portadores de esta aneuploidía, frente a embriones normales. La acción de la 5-aza-C, como agente desmetilante, permitiría descondensar la heterocromatina constitutiva o facultativa. En este trabajo se realiza inducción con el análogo de base 5-aza-C(10mM, (mas) 2 hrs) en cultivos linfocitarios de una hembra y un macho portadores de la rob1; 29, frente a bovinos Criollos normales. Se controla la acción desmetilante del inductor al identificar la despiralización del cromosoma X de replicación tardía en hembras y permitir el análisis de la despiralización de la cromatina en múltiples regiones de los autosomas (grandes, medianos, pequeños); de la rob1; 29 y del BTA1. Se discute la correlación existente entre regiones desmetiladas con la descondensación de la heterocromatina facultativa (condicional), relacionándola con la inestabilidad genómica, y la reprogramación epigenética. Resumen en inglés The Robertsonian translocation (rob1; 29) is widely spread in commercial breeds and specially in genetic reserve of American Creole cattle. It is also described a delay on embryo development in front of normal ones. The action of 5-aza-C, as an hypomethylated agent, could permitted to decondensate the constitutive or facultative heterochromatin. In this work we made induction with the 5-aza-C(10mM, 2 hrs) analogs, in lymphocyte cultures of female and male carriers and nor (mas) mal Creole cattle. The DNA hypometilation is found in the inactive X chromosome of late replication as it is incorporated during the last hours of cell culture. The decondensing effects of 5-aza-C analogs is observed in multiple regions of the autosomes chromatin, the rob1; 29 and the BTA1. A correlation between hypometilated regions and decondensed of facultative (conditional) heterochromatin is related with genomic instability, and epigenetic reprogramming.

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156

Deletion of H-Ras decreases renal fibrosis and myofibroblast activation following ureteral obstruction in mice

Grande, M. Teresa; Fuentes-Calvo, Isabel; Arévalo, Miguel; Heredia, Fabiana; Santos de Dios, Eugenio; Martínez-Salgado, Carlos; Rodríguez-Puyol, Diego; Nieto, M. Ángela; López-Novoa, José M.
2010-03-01

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157

Degradation of 16S rRNA and attributes of viability of viable but nonculturable probiotic bacteria

Lahtinen, Sampo; Ahokoski, H.; Reinikainen, Johanna P.; Gueimonde Fernández, Miguel; Nurmi, J.; Ouwehand, Arthur C.; Salminen, Seppo
2008-04-28

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158

Defective IL-10 production in severe phenotypes of Crohn’s disease

Correa, Ismael; Veny, Marisol; Esteller, Miriam; Pique, Josep M.; Yague, Jordi; Panes, Julian; Salas, Azucena
2009-02-23

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159

DIAGNÓSTICO MOLECULAR DE LA MARCHITEZ BACTERIANA/ MOLECULAR DIAGNOSTIC OF THE BACTERIAL WILT

Iglesia, Aleika; Alvarez, Elba; Martínez, Yamila; García, A
2008-08-01

Resumen en español La marchitez bacteriana causada por Ralstonia solanacearum, es una de las enfermedades más importante que afecta a una amplia gama de cultivos en las regiones tropicales y subtropicales. En Cuba esta enfermedad se encuentra bajo estrictas medidas de cuarentena, sin embargo el riesgo de entrada crece cada año debido a la importación de material vegetal procedente de zonas de altos niveles de infestación. En este trabajo se introduce y desarrolla el uso de la reacción (mas) en cadena de la polimerasa (PCR) para la detección y confirmación de R. solanacearum en materiales importados, así como en la vigilancia de la enfermedad en el sistema nacional de sanidad vegetal. La metodología utilizada facilitó la detección de R. solanacearum en cultivos de células hasta 10¹UFC/mL y en ADN totales. Se emplea en estos momentos en la evaluación de la semilla de papa que se importa cada año, lo cual permite fortalecer el sistema de prevención y vigilancia de la marchitez bacteriana en Cuba. Resumen en inglés Bacterial wilt, caused by Ralstonia solanacearum, is one of the most important bacterial plant diseases affecting crops in the tropical and subtropical regions at a wide range. In Cuba, this disease is under strict quarantine measures; however entrance risk grows every year due to the import of vegetal material coming from areas of high infestation levels. In this work, the use of the polymerase chain reaction (PCR) for the detection and confirmation of R. solanacearum in (mas) imported materials, as well as the surveillance of the disease in the national system of plant health are introduced and developed. The methodology used made easy the detection of R. solanacearum in cell cultures up to 10¹UFC/mL and in total DNAs . Nowadays, such methodology has been used in the evaluation of potato seeds imported every year which allows strengthening the prevention and surveillance systems of the bacterial wilt in Cuba.

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160

Cruzamientos interpoblacionales en Mytilus chilensis, un bivalvo de importancia comercial y sus efectos sobre el crecimiento en longitud de la valva durante la etapa larval/ Inter-population breeding in Mytilus chilensis, an economically important bivalve, and its effects on the shell length during the larval stage

Toro, JE; Alcapán, AC; Stead, RA
2008-01-01

Resumen en español Dos poblaciones naturales de Mytilus chilensis aisladas geográficamente fueron utilizadas para realizar los cruzamientos experimentales en el presente trabajo. En todos los cruzamientos, utilizando un diseño factorial con réplicas, ocurrió fertilización de las ovas, no detectándose diferencias significativas entre los cruzamientos intra e interpoblacionales en cuanto al porcentaje de ovas que desarrollaron larvas al día 4 (P > 0,05). Sin embargo, el porcentaje de l (mas) arvas anormales al día 4 fue significativamente mayor en los cruzamientos interpoblacionales (P Resumen en inglés Two geographically separated natural populations of Mytilus chilensis were utilized to carry out the experimental crosses on the present study. In every crossing, using the factorial design with replication, fertilization of eggs occurred without detection of significant differences among inter and intra-population crosses in relation to percentage of eggs developed into larvae at day 4 (P > 0.05). However, the percentage of abnormal larvae at day 4, was significantly hig (mas) her among inter-population crosses (P

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163

Comparative Antagonism of Kainate-activated Kainate and AMPA Receptors in Hippocampal Neurons

Paternain, Ana V.; Vicente, María de los Angeles; Nielsen, Elsebet Ø.; Lerma Gómez, Juan
1996-10-01

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164

Cinética de crecimiento y producción de proteasas de Pseudomonas fluorescens en leche cruda a temperaturas de refrigeración

Costa, M; Gómez, M.F; Molina, L.H; Romero, A
2001-12-01

Resumen en español El uso generalizado de la refrigeración de la leche cruda ha contribuido a mantener la calidad de ésta pero ha traído como consecuencia la selección de una flora psicrotrófica la cual durante su desarrollo produce enzimas termorresistentes responsables, en parte, del deterioro de productos de larga vida. Doda la condición de prolongada refrigeración de la leche antes del procesamiento, se planteó determinar las curvas de crecimiento bacteriano a temperaturas entre (mas) 2°C y 10°C y las cinéticas de producción de proteasas en leche cruda recién ordeñada, inoculadas con Pseudomonas fluorescens RV10, utilizando un fermentador modular, con mínima agitación bajo condiciones de pH y temperatura controlados. Los resultados muestran un desarrollo por me los 10(5) ufc/mL para los cultivos a 6°C, 8°C Y 10°C a las 30 h y con niveles de actividad proteásica superiores a 30 my M p-NA/2h, los que se incrementan fuertemente hasta niveles de 80 a 180 my M p-NA/2h después de las 50 h de cultivo. Sólo los cultivos a 2°C muestran un comportamiento estable con recuentos inferiores y sin incremento en la actividad enzimática. Una situación intermedia puede observarse en los cultivos a 4°C Resumen en inglés Growth kinetics and proteases production of Pseudomonas fluorescens in raw milk at refrigeration temperatures. The general use of refrigeration of raw milk has contributed to maintenance of its quality, but has induced the selection of a psychrotrophic bacteria which during its growth produces heat-resistant enzymes responsible, in part, for the deterioration of long-life products. Given the condition of the prolonged refrigeration of the milk before the process, it was n (mas) ecessary to determine the growth curves for bacteria at temperatures between 2°C and 10°C and the kinetics of production of proteasas in raw fresh milk, inoculated with Pseudomonas fluorescens RV I O, using an automatic fermentation system, with minimal agitation under conditions of controlled temperature and pH. The results show a development over 10(5) ufc/mL in the cultures at 6°, 8° and 10°C during the first 30 h and proteasic activities over 30 mu M p-NA/2h getting levels of de 80 - 180 mu M p-NA/2h over 50 h of cultivation. Only the cultures at 2°C appeared stable with inferior cell counts and without inducing enzymatic activity. At 4°C an intermediate situation occurs

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166

Characterization of Medicago truncatula cell suspension cultures producing valuable recombinant proteins

Cabral, Guadalupe ; Sofia Pires, Ana ; González-Melendi, Pablo ; Abranches, Rita

First paragraph (this article has no abstract) Nowadays, the use of plants for large-scale production of recombinant proteins is gaining wider acceptance because of their many practical, economic and safety advantages, compared with traditional microbial and animal production systems. | Peer reviewe...

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167

Characterization of Medicago truncatula cell suspension cultures producing valuable recombinant proteins

Cabral, Guadalupe; Sofia Pires, Ana; González-Melendi, Pablo; Abranches, Rita
2006-10-10

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169

Changes in photosynthetic electron transfer and state transitions in an herbicide-resistant D1 mutant from soybean cell cultures

Roncel Gil, Mercedes ; Yruela Guerrero, Inmaculada ; Kirilovsky, D. ; Guerrero, Fernando ; Alfonso Lozano, Miguel

The definitive version is available at: http://www.sciencedirect.com/science//journal/00052728 | Anomalies in photosynthetic activity of the soybean cell line STR7, carrying a single mutation (S268P) in the chloroplastic gene psbA that codes for the D1 protein of the photosystem II, have been examin...

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170

Changes in photosynthetic electron transfer and state transitions in an herbicide-resistant D1 mutant from soybean cell cultures

Roncel Gil, Mercedes; Yruela Guerrero, Inmaculada; Kirilovsky, D.; Guerrero, Fernando; Alfonso Lozano, Miguel; Picorel Castaño, Rafael; Ortega Rodríguez, Jose María
2007-06-01

Digital.CSIC (Spain)

171

Centrosome and spindle pole microtubules are main targets of a fluorescent taxoid inducing cell death

Abal, Miguel; Souto, André A.; Amat-Guerri, Francisco; Acuña Fernandez, Alberto Ulises; Andreu, José Manuel; Barasoain, Isabel
2001-04-12

Digital.CSIC (Spain)

172

Cell recognition by foot-and-mouth disease virus that lacks the RGD integrin-binding motif: blexibility in aphthovirus receptor usage

Baranowski, Eric; Ruiz-Jarabo, Carmen M.; Sevilla, Noemí; Andreu, David; Beck, Ewald; Domingo, Esteban
2000-01-01

Digital.CSIC (Spain)

174

Cell envelope changes in Bifidobacterium animalis ssp. lactis as a response to bile

Ruíz García, Lorena; Sánchez García, Borja; Ruas-Madiedo, Patricia; González de los Reyes-Gavilán, Clara; Margolles Barros, Abelardo
2007-07-25

Digital.CSIC (Spain)

175

Cell architecture during gametophytic and embryogenic microspore development in Brassica napus L.

Satpute, Gyanesh K.; Long, Hong; Seguí-Simarro, José M.; Risueño, María del Carmen; Sánchez-Testillano, Pilar
2005-12-01

Digital.CSIC (Spain)

177
178

Asymmetrical distribution of the transcriptionally competent NORs in mitosis

Kalmárová, Markéta; Kováčik, Lubomír; Popov, Alexey; Sánchez-Testillano, Pilar; Smirnov, Evgeny
2008-04-14

Digital.CSIC (Spain)

179

Assessment of the potential irritation and photoirritation of novel amino acid-based surfactants by in vitro methods as alternative to the animal tests

Benavides, Tomás; Martínez, Verónica; Mitjans, Montserrat; Infante, María Rosa; Morán, María del Carmen; Clapés Sabort, Pere; Clothier, Richard; Vinardell, M. Pilar
2004-05-21

Digital.CSIC (Spain)

180

Apoptosis in human thymocytes after treatment with glucocorticoids

Nieto, M. Ángela; González, A.; Gambón, F.; Díaz-Espada, F.; López-Rivas, Abelardo
1992-05-01

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181

Antioxidant activity of Haematococcus pluvialis cells grown in continuous culture as a function of their carotenoid and fatty acid content

Cerón García, María del Carmen; García-Malea López, María del Carmen; Rivas Florido, Joaquín; Ancien Fernández, Francisco Gabriel; Fernández Sevilla, José María; Río Sánchez, Mª Esperanza del; García Guerrero, Miguel; Molina Grima, Emilio
2006-01-01

Digital.CSIC (Spain)

182

Allosteric positive interaction of thymol with the GABA(A) receptor in primary cultures of mouse cortical neurons

García, Daniel A. ; Bujons Vilàs, Jordi ; Vale, Carmen ; Suñol, Cristina

11 pages, 8 figures, 2 tables. | Thymol is a naturally occurring phenolic monoterpene known for its anti-microbial and anti-oxidant properties. It is used in dental practice and in anaesthetic halothane preparations. Recent studies have reported enhanced GABAA receptor-operated chloride channel acti...

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183

Aislamiento y cultivo de protoplastos del patrón ciruelo ‘Mariana 2624’ (Prunus cerasifera Ehrh x P. munsoniana W. Wight & Hedrick)

Andreu Puyal, Pilar; Arbeloa Matute, Arancha; Terrén, N.; Marín Velázquez, Juan Antonio
2008-12-01

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184

Adult olfactory bulbs from primates provide reliable ensheathing glia for cell therapy

Rubio Rodríguez, María Paz; Muñoz-Quiles, Cintia; Ramón-Cueto, Almudena
2008-01-31

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185

Actividad molusquicida del Piquerol A aislado de Piqueria trinervia (compositae) sobre ocho especies de caracoles pulmonados/ The molluscicide activity of Piquerol A isolated from Piqueria trinervia (Compositae) against eight species of pulmonate snails

Cruz-Reys, Alejandro; Chavarin, Carolina; Arias, Martha P. Campos; Taboada, Javier; Jímenez E., Manuel
1989-03-01

Resumen en español De las partes aéreas de la planta Piqueria trinervia (Compositae) colectada en diveresas áereas de México, se aisló el Piquerol A. Este compuesto se probó como agente molusquicida contra ocho especies de caracoles pulmonados: Fossaria (Fossaria) humilis, F. (Bakerilymnae) sp., Pseudosuccinea columella, Stagnicola attenuata, de México; F. (B.) cubensis y Physacubensis, de Cuba; P. Columella y Biomphalaria glabrata, de Brasil; B glabrata, de Puerto Rico; S. elodes, de (mas) Estados Unidos. Se utilizaron tres concentraciones 50, 25 y 5 ppm para cada una de las especies y 2 períodos de exposición, 6 y 24 horas, a 20-22ºC. En 50 ppm, después de 6 horas, y 25 ppm, después de 24 horas los ejemplares de todas las especies murieron. En 5 ppm después de 24 horas, se observaron mortalidades de 60 a 100%. En ningún caso se observó recuperación después de la exposición por 24 horas. El piquerol A es un terpeno biodegradable que presenta otras actividades biológicas. No se han hecho pruebas de toxicidad en otros animales ni pruebas de campo. Sin embargo, es una substacia con alto potencial de uso como molusquicida en zonas de transmisión focal. Es la primera que en México se hacen estudios sistemáticos sobre molusquicidas de origen vegetal. Resumen en inglés In laboratory trials an aqueous solution of Piquerol A from Piqueria trinervia, collected in several regions of Mexico, showed a molluscicide action on the adults of eight different pulmonates snails species. Fossaria (Fossaria) humilis, F. (Bakerilymnaea) sp., Pseudosuccinea columella and Stagnicola attenuata from Mexico; F. (B.) cubensis and Physa cubensis from Cuba; P. columella and Biomphalaria glabrata from Brazil; B. glabrata from Puerto Rico; and S. elodes from USA (mas) . The solution was tested at 50, 25 and 5 ppm concentration, for two periods of 6 and 24 hours, at room temperature (20-22ºC). A 100% mortality was obtained for all species at 50 ppm concentration after 6 hours of exposure; the same percentage at 25 ppm after 24 hours; and 60 to 100% mortality at 5 ppm concentration during 24 hours of exposure. No recovery was observed among any of the treated snails. Piquerol A is a sesquiterpene with low stability in nature and has previously only been tested as an insecticide and as an inhibitor of metabolism in cell cultures; no field trails have been made on its toxicity to other aquatic fauna as yet, but it is believed Piquerol A could be an excellent molluscicide for use in areas where focal transmission of schistosomiasis and fascioliasis are taking place. This is the first time experiments on molluscicides have been carried out in Mexico.

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Acetylsalicylic acid induces programmed cell death in Arabidopsis cell cultures

García-Heredia, José M. ; Hervás, Manuel ; Rosa, Miguel A. de la ; Navarro, José A.

9 pages, 7 figures.-- PMID: 18335236 [PubMed].-- Printed version published Jun 2008. | Acetylsalicylic acid (ASA), a derivative from the plant hormone salicylic acid (SA), is a commonly used drug that has a dual role in animal organisms as an anti-inflammatory and anticancer agent. It acts as an inh...

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Acetylsalicylic acid induces programmed cell death in Arabidopsis cell cultures

García-Heredia, José M.; Hervás, Manuel; Rosa, Miguel A. de la; Navarro, José A.
2008-03-12

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188

A novel approach to enhancing cellular glutathione levels

Maher, Pamela; Lewerenz, Jan; Lozano, Carles; Torres, Josep Lluís
2008-08-12

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A Nanoconjugate Apaf-1 Inhibitor Protects Mesothelial Cells from Cytokine-Induced Injury

Santamaría, Beatriz; Benito-Martin, Alberto; Conrado Ucero, Alvaro; Stark Aroeira, Luiz; Reyero, Ana; Vicent, María J.; Orzáez, Mar; Celdrán, Angel; Esteban, Jaime; Selgas, Rafael; Ruíz-Ortega, Marta; López Cabrera, Manuel; Egido, Jesús; Pérez-Payá, Enrique; Ortiz, Alberto
2009-08-13

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190


2001-07-01

Resumen en inglés This piece presents the recommendations of the Advisory Committee on Immunization Practices of the United States of America concerning the use of aluminum hydroxide adsorbed cell-free anthrax vaccine (Anthrax Vaccine Adsorbed, or AVA) and the use of chemoprophylaxis against Bacillus anthracis in the United States. The recommended vaccination schedule consists of three subcutaneous injections, at 0, 2, and 4 weeks, and three booster vaccinations, at 6, 12, and 18 months. T (mas) o maintain immunity, an annual booster injection is recommended. Approximately 95% of vaccinees seroconvert, with a fourfold rise in anti-PA (protective antigen) IgG titers after three doses. Analysis of data from the United States' Vaccine Adverse Event Reporting System has documented no pattern of serious adverse events clearly associated with the vaccine, except injection-site reactions. Vaccination is contraindicated in the case of a previous history of anthrax infection or anaphylactic reaction following a previous dose of AVA or any of the vaccine components. In addition, vaccination should be postponed in the case of moderate or severe acute illness. Pregnant women should be vaccinated against anthrax only if the potential benefits of vaccination outweigh the potential risks to the fetus. Vaccination during breast-feeding is not medically contraindicated. Routine preexposure vaccination with AVA is indicated for persons engaged in: a) work involving production quantities or concentrations of B. anthracis cultures or b) activities with a high potential for aerosol production. For the military and other select populations or for groups for which a calculable risk can be assessed, preexposure vaccination may be indicated. Following confirmed or suspected exposure to B. anthracis, postexposure antibiotic prophylaxis should be administered with ciprofloxacin, ofloxacin, doxycycline, penicillin VK, or amoxicillin. If the vaccine is available, prophylaxis should continue for 4 weeks (until three doses of vaccine have been administered); otherwise, prophylaxis should continue for 30-60 days.

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191

Cultivo in vitro con colágeno y fibroblastos humanos de un equivalente de mucosa oral de espesor total/ In vitro culture with collagen and human fibroblasts of a full-thickness oral mucosa equivalent

González Mendez, S.; Junquera Gutiérrez, L.M.; Peña González, I.; García Díaz, V.; Gallego López, L.; García Pérez, E.; Meana Infiesta, A.
2009-04-01

Resumen en español Objetivos. El presente trabajo tiene por objetivo obtener, mediante cultivo in vitro, láminas de tejido oral en las que se pueda identificar las estructuras de una mucosa oral completa. La aplicación clínica del presente estudio permitiría, en determinados casos, la sustitución del empleo de injertos libres de piel o autólogos de mucosa oral por esta técnica. Material y Método. A partir de pequeñas biopsias de mucosa oral se hicieron cultivos primarios de querati (mas) nocitos. A partir de estos cultivos primarios se realizaron cultivos secundarios sobre una submucosa artificial constituida por colágeno y fibroblastos humanos. Se analizaron histológicamente sus características in vitro, y ulteriormente se procedió a la realización de injertos en ratones atímicos para conocer su comportamiento in vivo. Resultados. Los cultivos primarios fueron confluentes en un plazo mínimo de 10 días y máximo de 12 días, periodo similar al observado para la confluencia de los cultivos secundarios. El tiempo transcurrido desde la toma de la muestra hasta la obtención de una mucosa artificial completa osciló entre los 20 y los 22 días, mostrando las características histológicas de una mucosa normal. Tras 17 días de injerto en ratones inmunoincompetentes, sin ningún tipo de contingencia clínica, la caracterización histológica e inmunohistoquímica (citoqueratinas 13 y 19, colágeno IV y laminina) confirmó la similitud de la mucosa in vitro con la mucosa oral sana. Conclusión. Es posible mediante técnicas de cultivo in vitro la obtención de un equivalente de mucosa oral completa con colágeno y fibroblastos. Si bien esta mucosa muestra un importante grado de retracción, su manejo clínico es muy favorable. Resumen en inglés Objectives. The objective of this study was to obtain, by in vitro culture, sheets of oral tissue in which complete oral mucosa structures can be identified. Clinical application of the findings of this study will allow the replacement of free skin grafts or autologous oral mucosa grafts by this technique in certain cases. Material and Method. Primary keratinocyte cultures were prepared from small biopsy samples of oral mucosa. Secondary cultures were prepared from these (mas) primary cultures on an artificial submucosa constituted by collagen and human fibroblasts. The cell cultures were analyzed histologically in vitro and then used for graft implants in athymic mice to study their behavior in vivo. Results. The primary cultures were confluent within a minimum period of 10 days and maximum of 12 days, which is similar to the period that the secondary cultures required to reach confluence. The time from sampling to achieving a complete artificial mucosa ranged from 20 to 22 days. The artificial mucosa showed histologic characteristics of a normal mucosa. After 17 days of graft implantation in immunoincompetent mice without any clinical contingency, histologic and immunohistochemical characterization (cytokeratins 19 and 13, collagen IV, and laminin) confirmed the similarity of the mucosa in vitro to healthy oral mucosa. Conclusion. A complete oral mucosa equivalent can be prepared with collagen and fibroblasts using in vitro culture techniques. Although this mucosa shows considerable retraction, its clinical handling is very favorable.

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