Sample records for CATEPSINA (cathepsin)
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Asociación de catepsina D con factores pronósticos en melanoma maligno

Borges Garnica, Alfredo José; Ramos, Wilmer; González, Ricardo; Vegas, Ismael; Caleiras, Eduardo
2005-07-01

Resumen en español OBJETIVOS: Determinar la asociación de la catepsina D, como factor pronóstico inmunohistoquímico, para mejorar nuestro arsenal terapéutico. MÉTODOS: Se revisaron las historias clínicas de 23 pacientes con diagnóstico de melanoma, tratados en el Instituto de Oncología Dr. Miguel Pérez Carreño, en el lapso comprendido de enero de 1998 y diciembre de 2001, a los cuales, se les realizó la determinación de catepsina D en los bloques de parafina de las biopsias real (mas) izadas. RESULTADOS: El procedimiento de marcaje inmunohistoquímico de catepsina D se realizó en 23 pacientes según la técnica de revelado con aminoetilcarbazol. Se relacionaron los resultados con la presencia de factores pronósticos. Los pacientes con inmunomarcajes 41,17 % son Clark IV, 41,17 % Breslow > 3 mm, 70,58 % presentaron ulceración, 52,94 % eran estadio III. CONCLUSIONES: Se evidenció un paralelismo entre los factores histológicos y el inmunomarcaje con catepsina D, pero se debe determinar la evolución natural de aquellos pacientes en estadios iniciales para poder determinar su valor como factor pronóstico. Resumen en inglés SUMMARY OBJECTIVES: To determine the association of cathepsin D, like immunehistochemical prognosis factor, in order to improve our therapeutic arsenal. METHODS: We reviewed the clinical histories of 23 patients with diagnosis of malignant melanoma treated in the Instituto de Oncología Dr. Miguel Perez Carreño, in the lapse of January of 1998 and December of 2001, to which, the determination of cathepsin D was made in the paraffin blocks of the made biopsies RESULTS: Th (mas) e inmunehistochemical mark procedure with cathepsin D was made in 23 patients according to the revealed technique of aminoetilcarbazol. The results were related to the presence of factors prognoses. The patients with positive inmunemarked 41.17 % are Clark IV, 41,17 % Breslow > 3 mm, 70,58 % presented ulceration, 52,94 % were stage III. CONCLUSIONS: A parallelism between the histological factors and the inmunemarked with cathepsin D was demonstrated, but the natural evolution of those patients in initial stages is due to determine to be able to determine its value like factor prognosis.

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Significación pronóstica y utilidad clínica de la determinación sérica e inmunohistoquímica de catepsina B en cáncer colorrectal/ Pronostic significance and clinic utility of serum and inmunohistochemmical cathepsin B levels in colorectal cancer

Padilla, D.; Cubo, T.; Molina, J. M.; García, M.; Osa, G. de la; Palomino, T.; Pardo, R.; Martín, J.; Arévalo, E.; Hernández Calvo, J.
2003-10-01

Resumen en español Introducción: Aproximadamente un tercio de los enfermos con cáncer colorrectal sin metastatización ganglionar recidivan debido a la existencia de micrometástasis no detectadas con los métodos histológicos habituales. La expresión de ciertas enzimas implicadas en el proceso metastásico del cáncer colorrectal como la catepsina B, puede predecir el potencial metastásico y mala evolución de las neoplasias en etapas tempranas para considerar terapias más agresivas. (mas) Nuestro objetivo es establecer el valor pronóstico de la determinación sérica e inmunohistoquímica de catepsina B, con el fin de identificar los carcinomas colorrectales más agresivos Métodos: Estudio transversal y cohorte de 55 enfermos con cáncer colorrectal intervenidos quirúrgicamente en nuestro servicio de forma electiva entre 1998 y 2000. Utilizamos como grupo control, 23 enfermos intervenidos quirúrgicamente por apendicitis aguda. Se realizó determinación sérica preoperatoria de catepsina B (KRKA,dd Novo Slovenia; ng/ml) e inmunohistoquímica tras resección quirúrgica, (C-19, Santa Cruz Biotechnology). El resto de marcadores utilizados fueron CEA, (INMULIT 2000 CEA;5 ng/ml); CA 19,9, (INMULITE GI-M;37 UI/ml); p53, (Dako ).El análisis de supervivencia se realizó mediante los métodos de Cox y Kaplan-Meier, con el paquete estadístico SPSS 10.0 para Windows. Resultados: La edad media de los enfermos con cáncer colorrectal fue 68 años, 39-87. 29 fueron varones y 26 mujeres. El tamaño de los tumores fue 4,6 cm, 1-12. La localización más frecuente fue rectal, 32,2%, y la diferenciación histológica moderada, 49,1%. Los valores séricos e inmunohistoquímicos de los enfermos con apendicitis aguda fueron 5,74 ng/ml y 29,56% respectivamente. Los valores séricos preoperatorios en enfermos con cáncer colorrectal fueron: CEA; 46,04 ng/ml (0,21-7,32); CA 19,9; 110,52UI/ml, (2,5-1920), y catepsina B: 6,94 ng/ml (3,57-11,6). Los valores inmunohistoquímicos fueron p53: 44,36% (0-95); catepsina B tisular, 66,9%, (10-90). Los valores séricos e inmunohistoquímicos de catepsina B fueron significativamente superiores en enfermos con cáncer colorrectal respecto al grupo control, p=0,011 y p=0,000 respectivamente. Los valores preoperatorios séricos de catepsina B se relacionaron significativamente con una menor supervivencia del enfermo tanto en modelo univariante como multivariante, p=0,041; HR 1,281, 95%IC (1,010-1,624) y p= 0,022; HR 1,338, 95% IC (1,043-1,716). Conclusiones: La catepsina B puede ser considerado como marcador pronóstico independiente en cáncer colorrectal. Su determinación sérica preoperatoria, con valores por encima de 6,94 ng/ml, se relaciona con una menor supervivencia del enfermo. Resumen en inglés Background: Aproximately one third of node-negative colorectal cancer recur suggesting the presence of micrometastasis not detected by conventional histopathologic methods. We think that the role of enzymes like Cathepsin B play in the process of invasion and metastasis in colorectal cancer might identify at earlier stages patients with high risk of shorter survival and who need more aggressive treatment. Our porpuse is to evaluate the prognostic significance of preoperat (mas) ive serum and inmunohistochemical levels of cathepsin B to identify colorectal carcinomas with worse prognostic. Methods: Fifty five patients undergoing surgical treatment for colorectal cancer from 1998 to 2000. As a control group sera from 23 patients with acute appendicitis. Serum levels of cathepsin B were obtained preoperatively (KRKA, Novo Slovenia;ng/ml); cathepsin B inmunoreactivity was determinated after surgical treatment, (C-19, Santa Cruz Biotechnology). Serum levels of CEA (Inmulit 2000 CEA), and CA 19,9 (Inmulite Gi-Ma, Diagnostic Products Corporation, Los Angeles, CA), and p53 expression (Dako) were determinated in patients with colorectal cancer. Survival analysis was realized using Cox and Kaplan-Meier methods (SPSS 10.0 for Windows). Results: The mean age of patients with colorectal cancer was 68 years (range 39-87 years). 29 males and 26 females.Tumor size was 4.6 cms., range 1-12. Rectal localization, 32.2%. Moderately differentiated, 49.1%. The median serum and inmunohistochemical levels of cathepsin B were 5.74 ng/ml and 29.56% in patients with acute appendicitis respectively. Preoperative serum levels in patients with colorectal cancer were: CEA, 46.04 ng/ml (range 0.21-7.32 ); CA 19,9, 110.52 UI/ml, (range 2.5-1920); and Cathepsin B, 6.94 ng/ml, range 3.57-11.6). Inmunohistochemical results were: p53, 44.36%, (range 0-95); Cathepsin B, 66.9% (range 10-90). Serum and inmunhistochemical values were significantly increased in patients with colorectal cancer when compared with control group, p=0,011 and p=0,000. High serum levels of cathepsib B were significantly associated wiyh shorter survival of patients with colorectal cancer in univariate and multivariate methods, p=0.041;HR 1.281 95%CI (1.043-1.716) and p= 0.022; HR 1.338.955 CI (1.043-1.716). Conclusions: Cathepsin B can be used like an independent prognostic tumoral marker in colorectal cancer. Preoperative serum levels over 6.94 ng/ml, are associated with worse prognostic and shorter survival.

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Modelos animales: desarrollo de la línea de ratones congénicos BALB/c.Cg-Ctsl nkt

Maschi, Fabricio; Ayala, Miguel; Benavides, Fernando; Carbone, Cecilia
2008-12-01

Resumen en español En los últimos 40 años, el desarrollo de modelos murinos ha posibilitado realizar avances trascendentes en el estudio y terapéutica de muchas enfermedades humanas y animales. Por otro lado, el empleo de retrocruzas ha permitido crear animales congénicos, resultado de transferir una mutación a otro fondo genético (otra cepa de ratones). La mutación espontánea recesiva nackt (símbolo nkt) fue descubierta en el año 1981 y se caracteriza por ratones parcialmente inm (mas) unodeficientes (el desarrollo de los linfocitos T CD4 se encuentra alterado), que además presentan defectos en el crecimiento del pelo y prurito crónico. El gen afectado fue inicialmente localizado en el cromosoma 13 del ratón y luego identificado como un alelo nulo de la catepsina L (nomenclatura: Ctsl nkt). El objetivo de este trabajo fue desarrollar la línea congénica BALB/c-nkt, introduciendo esta mutación en la línea consanguínea BALB/c. Se recibió un grupo de ratones BALB/c;129S2 parcialmente congénicos (N3) para la mutación nackt, y se continuó con la producción de esta cepa congénica hasta la generación N10, utilizando retrocruzas seguidas de intercruza y selección de ratones mutantes. Esta cepa congénica completa (del inglés full congenic) en fondo BALB/c (denominada BALB/c.Cg-Ctsl nkt) incorporó una porción pequeña del cromosoma donante portando la mutación nackt. Esta cepa congénica, actualmente disponible en nuestro país, representa una importante herramienta para estudios de inmunología, como modelo animal en estudios de dermatología y un modelo knock-out espontáneo para el gen de la catepsina L. Resumen en inglés In the last 40 years, the development of murine models has made possible remarkable achievements in the study and the therapeutic of many human and animal diseases. On the other hand, the use of backcross programs has allowed the development of congenic strains of rodents, that is the introgression of a mutation onto a recipient genetic background. The spontaneous nackt mutation (nkt) is characterized by impaired CD4 T-cell development and generalized alopecia, due to abn (mas) ormal epidermal differentiation and hair follicle cycling. The introgression of this locus onto BALB/c, one of the most widely used mouse inbred strains, made possible the development of a new murine model. The objective of this work was to develop a full congenic BALB/c-nkt (nomenclature: BALB/c.Cg-Ctsl nkt) through repeated backcross-intercross rounds. The development of this congenic strain was continued until the N10 generation, where the introgressed segment of the donor chromosome carrying the mutation is supposed to be very small. This congenic strain, available in our country, represents an important tool for immunology and dermatological studies and represents a spontaneous knock-out animal model for the cathepsin L gene.

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Valor clínico-biológico de la concentración citosólica de ácido hialurónico en adenocarcinomas pulmonares CD44v6 positivos

Ruibal, A.; Sánchez Salmón, A.; Argibay, S.; Rodríguez, J.
2005-01-01

Resumen en español PROPÓSITO: El objetivo de este estudio ha sido analizar la influencia de la concentración citosólica de ácido hialurónico (AH) sobre las características clínico-biológicas de adenocarcinomas de pulmón CD44v6 positivos. MATERIAL Y MÉTODOS: El grupo estudio incluyó 34 muestras tumorales. Dosificamos las concentraciones citosólicas de AH, pS2, catepsina D, t-AP, NSE, cyfra 21.1, CA125 y fracción libre de la hormona gonadotrófica coriónica. También determinamo (mas) s las concentraciones de EGFR, proteína oncogénica erbB2, CD44s y CD44v5 en las membranas celulares. Se tuvo presente, asimismo, el estadio clínico, grado histológico, ploidía, índice de DNA y fase de síntesis celular (FS). RESULTADOS: En el grupo tumoral los valores del índice AH/CD44v6 oscilaron entre 8.5 y 5999 (mediana 107) y fueron superiores (p: 0.004) a los observados en 10 muestras de tejido pulmonar normal de los mismos pacientes. Los adenocarcinomas pulmonares AH/CD44v6 positivos (>107; mediana del grupo) mostraron mayores concentraciones de proteína oncogénica erbB2 (p:0.020) y superiores valores de FS (p: 0.009) e índice de DNA (p: 0.024). Asimismo, fueron más frecuentemente FS+ (>15 %) (p: 0.026). CONCLUSIONES: Los resultados obtenidos parecen resaltar la importancia de la concentración citosólica de AH en los adenocarcinomas pulmonares CD44v6 positivos, de tal modo que altos valores en el índice AH/CD44v6 se asocian con una mayor proliferación e indiferenciación celular, lo cual unido a mayores concentraciones de proteína oncogénica erbB2, sugiere un subgrupo de tumores con un posible diferente comportamiento. Sin embargo, dada el reducido número de enfermos incluídos, creemos que son necesarios más estudios para poder confirmar nuestros hallazgos. Resumen en inglés PURPOSE: To study the influence of the cytosol hyaluronic acid (HA) concentrations on the clinical and biological features of CD44v6-positive lung adenocarcinomas (LAs). MATERIAL AND METHODS: The study included 34 tissue samples. We determined the concentration of HA, p52, cathepsin D, t-PA, NSE, cyfra 21.1, CA125, and free beta subunit of human chorionic gonadotrophin in the cytosol, and of EGFR, erbB2 oncoprotein, CD44s and CD44v5 on the cell surface. Other parameters c (mas) onsidered were clinical stage, histological grade (HG), ploidy, DNA index, and S-phase cell fraction (SF) measured by flow cytometry. RESULTS: In the tumoral group the HA/CD44v6 index values varied from 8.5 to 5,999 (107, median for the entire group) and were significantly higher (p 0.004) than those observed in 10 samples of normal lung tissue obtained from the same patients. The HA/CD44v6-positive (>107) adenocarcinomas had higher concentrations of erbB2 oncoprotein (p: 0.02), and greater values of global SF (p: 0.009) and DNA index (p: 0.024). They were also more frequently SF+ (>15 %). CONCLUSIONS: The results stand out the importance of the cytosol concentration of hyalurinic acid in the CD44v6-positive lung adenocarcinomas, in such a way that high values of the HA/CD44v6 index are associated with a higher proliferation and cellular undifferentiation, which, joined to the higher concentration of erbB2 protein, suggest a subgroup of tumors with a possibly different (poorer ?) outcome. Nevertheless, given the limited number of studied patients, further studies are necessary to confirm our findings.

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Reducción de sodio en lomo y jamón curados. Efecto sobre la proteolisis y las características sensoriales

Toldrá Vilardell, Fidel; Aristoy Albert, María Concepción; Armenteros Cuesta, Mónica
2010-02-01

Digital.CSIC (Spain)

7

Nucleotide and predicted amino acid sequences of cloned human and mouse preprocathepsin B cDNAs

Chan, Shu Jin; San Segundo, Blanca; McCormick, Mary Beth; Steiner, Donald F.
1986-10-01

Digital.CSIC (Spain)

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Digestion of the inhibitor αAI by Hypothenemus Hampei aspartic proteinases/ Digestion de un inhibidor de αAI por aspartico proteinasas de Hypothenemus Hampei

VALENCIA, ARNUBIO; ARBOLEDA V, JORGE W
2005-12-01

Resumen en español Resumen. El fluido digestivo de las larvas de la broca dc cafe, Hypothenemus Hampei contiene aspartico proteasas. las cuales muestran una gran actividad a pH 3,0 y a una temperatura de 40°C. Mediante el uso de geles de isoelectroenfoque (IEF) fue posible observar dos bandas de actividad bien definidas en el tracto intestinal. La banda de mayor actividad que se encontrò muy cerca del anodo presento un pl de 5,2. La adicion de pepstatin A, a una concentracion de 0,1 uM (mas) causo una inhibicion del 70% de la actividad proteasa y de un 90% cuando la concentracion del inhibidor fue de 1 pM. La fuerte inhibicion de la actividad proteasa presente en el tracto intestinal de H. Hampei. despues de la adicion del pepstatin A, permilio identificar esta proteasa como del tipo aspartico. Otros resultados permitieron clasificar esta enzima como Cathepsin D, dado que cuando se empleo BSA como sustrato la enzima mostro solo un 20% del total de actividad con respecto a hemoglobina. La incubacion del inhibidor de α- amilasas (αAI ) de Phasenius vulgaris, con cantidades crecientes de esta enzima intestinal de la broca de cafe, mostro que la actividad biologica del inhibidor fue reducida significativamente debido a la actividad proteolitica. Este trabajo se constituye en la primera evidencia electroforetica de la proteolisis del αAI de P. vulgaris por proteasas endogenas dc H. Hampei. Resumen en inglés Summary. The digestive fluid of the coffee berry borer, Hypothenemus Hampei, larvae contains aspartic proteases, which show greatest activity at pH 3,0 and a temperature of 40ºC. By using isoelectric focusing gels, il was possible to observe two well-defined bands in the intestinal tract. The band of highest activity was found very close to the anodic side and showed a pl of 5,2. The addition of 0,1 uM of Pepstatin A caused a 70% inhibition of protease activity and a 90% (mas) inhibition when the concentration was 1 pM. The strong inhibition of the protease activity in the intestinal tract of H. Hampei after addition of Pepstatin A, allowed us to identify this protease as an asparlic-type protease. Other results permitted us to classify this protease as Cathespin D given that when BSA was used as a substrate the enzyme only showed 20% of the total activity with respect to hemoglobin. Incubation of the αAI inhibitor from Phaseolus vulgaris with increasing amounts of this intestinal enzyme from the coffee berry borer, showed that the biological activity of the inhibitor was significantly reduced due to the proteolytic activity. This work constitutes the first elcctrophoretic evidence of αAI proteolysis of P. vulgaris by endogenous proteases from H. Hampei.

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Derivation of Major Yolk Proteins from Parental Vitellogenins and Alternative Processing During Oocyte Maturation in Fundulus heteroclitus

LaFleur, Gary J.; Raldúa, Demetrio; Fabra, Mercedes; Carnevali, Oliana; Denslow, Nancy; Wallace, Robin A.; Cerdà, Joan
2005-01-01

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Cystatin D is a candidate tumor suppressor gene induced by vitamin D in human colon cancer cells

Alvarez-Díaz, Silvia; Valle, Noelia; García, José Miguel; Peña, Cristina; Freije, José M.P.; Quesada, Víctor; Astudillo, Aurora; Bonilla, Félix; López-Otín, Carlos; Muñoz Terol, Alberto
2009-08-01

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Changes in Cathepsin Gene Expression and Relative Enzymatic Activity During Gilthead Sea Bream Oogenesis

Carnevali, Oliana; Cionna, C.; Tosti, L.; Cerdà, Joan; Giocchini, G.
2007-05-30

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Blocking agents for ELISA quantification of cathepsin L in bovine and porcine muscle crude extracts

Sentandreu, Miguel Angel ; Aubry, Lorent ; Ouali, Ahmed ; Toldrá Vilardell, Fidel

Skimmed milk revealed to be the most efficient of the assayed blockers, as also observed by other authors. In the case of pork, this would be the only suitable blocking agent but avoiding the highest assayed muscle crude extract concentration. All the same attention must be paid, since some authors ...

DRIVER (Spanish)

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Blocking agents for ELISA quantification of cathepsin L in bovine and porcine muscle crude extracts

Sentandreu, Miguel Angel; Aubry, Lorent; Ouali, Ahmed; Toldrá Vilardell, Fidel
2004-08-08

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